Striatale regulering van DeltaFosB, FosB en cFos tydens kokaïen selfadministrasie en onttrekking (2010)

J Neurochem. Skrywer manuskrip; Beskikbaar in PMC Oct 1, 2011.
Gepubliseer in finale geredigeerde vorm as:
Die uitgewery se finale geredigeerde weergawe van hierdie artikel is beskikbaar by J Neurochem
Sien ander artikels in PMC dat noem die gepubliseerde artikel.

Abstract

Chroniese dwelmblootstelling veroorsaak veranderinge in gene-ekspressieprofiele wat aanleiding gee tot die ontwikkeling van dwelmverslawing. Die huidige studie het die regulering van die Fos-familie van transkripsiefaktore, spesifiek cFos, FosB en ΔFosB, ondersoek in striatale subregio's tydens en na chroniese intraveneuse kokaïenadministrasie by selfbeheersende en toegewyde rotte. Ons het bevind dat cFos, FosB en ΔFosB streeks- en tydelike afsonderlike uitdrukkingspatrone vertoon, met groter akkumulasie van ΔFosB-proteïen in die nucleus accumbens (NAc) dop en kern na chroniese kokaïenadministrasie, terwyl ΔFosB toenames in die caudate-putamen (CPu) gebly het Soortgelyk aan akute of chroniese toediening. In teenstelling hiermee het toleransie ontwikkel tot kokaïen-geïnduceerde mRNA vir ΔFosB in alle 3 striatal subregio's met chroniese toediening. Verdraagsaamheid ontwikkel ook tot FosB-uitdrukking, veral in die NAc-skulp en CPu. Interessant genoeg was die verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduceerde cFos-induksie afhanklik van die vrywillige beheer van kokaïen inname in ventrale maar nie dorsale striatale streke nie, terwyl die regulering van FosB en ΔFosB soortgelyk was aan kokaïen-selfbeheersende en gesproke diere. Dus, ΔFosB-gemedieerde neuroadaptations in die SVE kan vroeër voorkom as wat voorheen gedink is met die aanvang van intraveneuse kokaïengebruik en kan saam met groter akkumulasie van ΔFosB in die NAc bydra tot verslawingverwante toenames in kokaïen-soekgedrag.

sleutelwoorde: kokaïen, selfadministrasie, onttrekking, striatum, Fos

Inleiding

Herhaalde blootstelling aan verslawende middels produseer neuroadaptations in breinbeloningspaaie wat gedink word aan beide die ontwikkeling van kompulsiewe dwelmopname en die volharding van drang en terugval tot dwelm-soekende gedrag by onttrekking. Baie van hierdie neuro-aanpassings is die gevolg van die induksie van transkripsiefaktore en die daaropvolgende regulering van geenuitdrukking, wat potensiële langdurige effekte op neuronale struktuur en funksie kan hê (Zhang et al. 2006). Die Fos-familie van transkripsiefaktore is van besondere belang, aangesien lede van hierdie familie differensiële induksiepatrone in striatale streke toon na beide akute en chroniese kokaïene blootstelling. Wanneer kokaïen akuut op 'n passiewe, nie-kontingente wyse toegedien word (dws deur intraperitoneale (IP) inspuiting) verhoog dit cFos en FosB mRNA en proteïen in beide die dorsale (caudate-putamen, CPu) en ventrale (nucleus accumbens, NAc) striatum (Graybiel et al. 1990; jong et al. 1991; Hoop et al. 1992), terwyl verdraagsaamheid teenoor hierdie reaksie plaasvind by chroniese passiewe toediening (Hoop et al. 1992, 1994; Alibhai et al. 2007). In teenstelling, striatale vlakke van ΔFosB (35-37 kDa), 'n stabiele afgeknotte splytingsvariant van die fosB geen, verhoog na chroniese maar nie akute passiewe kokaïen blootstelling (Hoop et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997). Hierdie stabiele ΔFosB isoforme kan heterodimeriseer met verskillende Jun familie proteïene as óf cFos of FosB (Chen et al. 1995), en kan ook self funksionele homodimers vorm (Jorissen et al. 1997), wat daarop dui dat die differensiële vorming van aktivator proteïen-1 (AP-1) komplekse na chroniese kokaïen gene-ekspression by AP-1-webwerwe kan verander op 'n manier wat onderskei is van geenuitdrukking wat veroorsaak word deur akute kokaïenblootstelling (Hoop, 1998; Kelz en Nestler, 2000). Differensiële veranderinge in gene-ekspressieprofiele kom ook voor, afhangend van die feit dat ΔFosB-verhogings korttermyn of langdurig is, en hierdie veranderinge kan lei tot differensiële uitdrukking van kokaïen-gemedieerde gedrag (McClung en Nestler, 2003). Chroniese blootstelling aan ander middels, insluitend amfetamien, morfien, Δ9-KV, nikotien, etanol en fenskliptien lei ook tot die ophoping van stabiele ΔFosB isoforme in striatale streke (McClung et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Verder dui onlangse bevindinge op 'n negatiewe interaksie tussen ΔFosB-akkumulasie en amfetamien-geïnduseerde cFos wat moontlik verdraagsaam kan wees vir cFos-induksie wat na blootstelling aan chroniese stimulante aangetref word (Renthal et al. 2008). Saam het hierdie bevindinge gelei tot die hipotese dat stabiele ΔFosB isoforme mag optree as 'n "molekulêre skakelaar" en die oorgang van aanvanklike dwelmgebruik na meer verslaafde biologiese toestande fasiliteer (Nestler et al. 2001; Nestler, 2008).

Terwyl die meeste vorige studies herhaaldelike passiewe kokaïenbehandelings gebruik het om uitdrukking te gee aan Fos-familieproteïene, en daar is relatief min voorbeelde van hierdie regulasie wanneer kokaïen self binne enkele minute toegedien word vir intra-menslike gebruik (IV) vir menslike misbruikpatrone. Een studie het bevind dat cFos mRNA verhef is in die CPu na 'n enkele 30-min sessie van kokaïen selfadministrasie in muise (Kuzmin en Johansson, 1999), terwyl geen veranderinge in die SVE van rotte gevind is na of subkroniese ( 3 dae) of chroniese (6-12 weke) kokaïen selfadministrasie (Daunais et al. 1993, 1995). Na 'n tydperk van onttrekking, word kokaïen-gemedieerde toenames in cFos-proteïen in die NAc verminder in rotte met voorafgaande eskaleerde kokaïen inname (Ben-Shahar et al. 2004), terwyl verhoogde cFos vlakke regdeur die striatum gevind word na blootstelling aan kokaïenverwante leidrade (Neisewander et al. 2000; Kufahl et al. 2009). In teenstelling met cFos, is verhoogde proteïenvlakke van ΔFosB regdeur die striatum getoon ná chroniese kokaïen-selfadministrasie, en hierdie akkumulasie kan vir ten minste 1-dag tot onttrekking voortduur (Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Daar is egter geen verslae wat veranderings in die responsiwiteit van verskeie Fos-familieproteïene vergelyk met sodanige intraveneuse kokaïenadministrasie met óf akute of chroniese blootstelling nie. Gegewe die potensiële interaksies tussen ΔFosB en cFos, is die vermoë van differensiële AP-1 kompleksvorming om differensiële effekte op genexpressie teweeg te bring en die moontlike impak van hierdie verskille op kokaïen-gemedieerde gedrag, dit is ook belangrik om te bevestig dat die veranderinge in die uitdrukking van cFos, FosB en ΔFosB wat voorkom na nie-kontingente toediening word ook aangetref wanneer kokaïen vrywillig self toegedien word en om te bepaal hoe lank hierdie veranderinge kan voortduur nadat kokaïenadministrasie beëindig is. Daarom het ons in die huidige studie die effekte van chroniese IV kokaïenadministrasie vergelyk met die uitdrukking van ΔFosB, FosB en cFos in striatale subregio's tydens beide kokaïenadministrasie en onttrekking. Ons vergelyk regulasie wat met vrywillige selfadministrasie gevind word, met regulering in diere wat 'n identiese hoeveelheid en temporale patroon van kokaïen ontvang deur middel van nie-gevorderde yoked infusies na akute of chroniese blootstelling. Gegee dat FosB en ΔFosB spieëlvariante van dieselfde is fosB geen, ons vergelyk ook die regulering van mRNAs vir FosB en ΔFosB met regulering op proteïenvlak.

Eksperimentele Prosedures

Vakke en Chirurgie

Volwasse Sprague-Dawley-rotte wat aanvanklik ongeveer 250-300 g gewig het, is in 'n 12 h-ligte-donker siklus in temperatuur- en humiditeitsbeheerde omgewing gehuisves (lig op 7: 00 AM). Diere is gevoed met kos en water ad libitum te alle tye, met die uitsondering dat hulle by 85% van hul vryvoedingsgewig gehandhaaf word tydens hendel-pers-opleiding vir sukrose pellets (45 mg, BioServ). Hersenspersopleiding is uitgevoer in geventileerde operante kamers (Med Associates, Georgia, VT) tot aan verkrygingskriteria (100-pellets per sessie vir 3 opeenvolgende sessies) onder 'n 1 (FR1) versterkings skedule. Diere is dan gevoed ad libitum vir ten minste 24 h voor operasie. Vir operasie is rotte atropien (0.04 mg / kg, subkutane) toegedien om respirasie te gee en 'n chroniese inwonende kateter is in die regtervaatspes onder natriumpentobarbital (50 mg / kg, IP) narkose in ooreenstemming met voorheen gepubliseerde prosedures (Edwards et al. 2007a). Na operasie is rotte 'n inspuiting van penisillien (200,000 IE / kg, intramuskulêr) gegee om infeksie te voorkom, en kateters word daagliks gespoel met 0.2 ml hepariseerde (20 IE / ml) bakteriostatiese sout wat gentamisiensulfaat bevat (0.33 mg / ml). Alle eksperimentele prosedures is uitgevoer in ooreenstemming met die Nasionale Instituut vir Gesondheid Gids vir die versorging en gebruik van laboratoriumdiere, en is goedgekeur deur die UT Southwestern Medical Center Institusionele Diereversorgings- en -gebruikskomitee (IACUC).

Apparaat en selfadministrasieprosedures

Na 1 wk herstel van chirurgie, is diere verdeel in verskeie eksperimentele groepe / onttrekkingstyd (Fig. 1A), en teruggekeer na die operante toetskamers in daaglikse sessies soos voorheen beskryf (Edwards et al. 2007b). Rotte in die onbehandelde kontrolegroep was een keer gehuisves en daagliks hanteer in hul huishokke sonder blootstelling aan die selfadministrasie omgewing. Rotte in die kokaïen-selfadministrasie-groep (CSA) is toegelaat om vrywillig kokaïen (0.5 mg / kg / 50 μl infusie) selfstandig te administreer onder 'n 1 (FR1) skedule van versterking in die daaglikse 4 h sessies, 6 dae uitgevoer. / wk, vir 'n totaal van 18 dae. Elke aktiewe hefboompers het 'n 2.5 s-kokaïen-infusie geproduseer wat geassosieer was met die verligting van 'n liggie bo die aktiewe hefboom. Die huislig is uitgeblaas tydens kokaïen-infusies, en daar was 'n addisionele 12.5-tydsduur na die infusie waarin die huislig gebly het. Hendel wat tydens die infusie- en uithoudingsperiode reageer, is aangeteken, maar het geen gevolg gehad nie. 'N Bykomende inaktiewe hefboom was in die kamers teenwoordig, maar reageer op hierdie hefboom was sonder gevolg. Rotte in die chroniese juk (CY) -groep is gekoppel aan aktief selfadminerende rotte en het passiewe kokaïen-infusies in hoeveelhede en tydelike patrone identies aan hul selfadministrerende vennote ontvang. Rotte in die akute juk (AY) -groep is ook by rotte in die chroniese CSA-groep gepaar, maar het pasiënte met passiewe saline-infusies in plaas van kokaïen tot die laaste dag van selfadministrasie ontvang toe hulle vir die eerste keer 'n enkele sessie van passiewe kokaïen-infusies ontvang het. tyd. Laastens is die Saline SA-groep toegelaat om sout self te administreer om potensiële veranderinge in verband met chirurgie, toetsing of ander eksperimentele prosedures te identifiseer in vergelyking met onbehandelde kontrole. Vergelykings tussen AY en CY groepe is gebruik om veranderinge in die responsiwiteit van cFos, FosB, of ΔFosB met akute en chroniese kokaïene blootstelling te identifiseer, terwyl CSA en CY groepe vergelyk is ten einde veranderinge in cFos-, FosB- of ΔFosB-uitdrukking te identifiseer wat spesifiek verwant aan die lonende teenoor farmakologiese effekte van kokaïen. Weefsel van alle studiegroepe is onmiddellik na die finale 4 h-toetssessie versamel om kokaïengeïnduceerde regulering van cFos, FosB en ΔFosB te vergelyk, en die volharding van kokaïen-geïnduceerde veranderinge is vir sommige studiegroepe bepaal met weefsel wat 24 h of 3 versamel is. wk na die finale toets sessie. Kwantitatiewe Westerse Vlek- en RT-PCR prosedures is gebruik op disseksies van striatale subregio's om potensiële probleme met betrekking tot teenliggend kruis-reaktiwiteit te omseil en sensitiwiteit vir die opsporing van veranderinge te verbeter.

Figuur 1  

(A) Tydlyn wat kokaïenadministrasie en onttrekking (WD) regimens uitbeeld. Vaste lyne dui op intraveneuse toediening van kokaïen infusies (0.5 mg / kg / infusie) in chroniese kokaïen self-toedienende (CSA) en chroniese yoked (CY) diere vir 'n totaal ...

Weefselversameling

Rotte is geoffer deur mikrogolfbestraling gemik op die kopstreek (5 kW, 1.5 s, Murimachi Kikai, Tokyo, Japan). Brein is vinnig gedissekteer en verkoel, en bilaterale weefselstompe (14-maat) van die nucleus accumbens (NAc) dop, NAc-kern en Caudate-putamen (CPu) is verkry uit 1.5 mm koronale snye gebaseer op koördinate verkry uit Paxinos en Watson (1998, geïllustreer in Figuur 1B). Weefselmonsters is gehomogeniseer deur sonikasie in lysisbuffer wat protease- en fosfatase-inhibeerders bevat. Homogenates word dan gekook vir 5 min, op ys geplaas, en daarna deur Lowry geassesseer om proteïen konsentrasies te bepaal. Homogenate is dan in 20 μg monsters geselekteer en by gebruik tot -80 ° C gestoor.

Westerse Blots

Weefselmonsters is op 12% polyakrylamiedgels gelaai vir skeiding deur elektroforese in Tris / Glycine / natriumdodecylsulfaat-gebufferde soutoplossing (TGS, Bio-Rad, Hercules, CA). Na skeiding is monsters oorgedra deur elektroforese (250 mA vir 18 h) na poliviniliedefluoriedmembrane (PVDF, Amersham, Piscataway, NJ) en daarna geblokkeer in 3% nie-vet-droë melk en 1 × Tris / Tween-gebufferde soutoplossing (TTBS; Bio -Rad, Hercules, CA) oornag by 4 ° C. Membraan is dan in 1: 1000-verdunning van primêre Fra-teenliggaam (vriendelik deur Dr. Michael Iadarola, National Institutes of Health, Bethesda, MD) geïnkubeer. Oornag by 3% MX / 1 × TTBS-oplossing. in 4 × TTBS (1-tye, 4 min elk), en geïnkubeer in 15 × TTBS wat 'n 1: 1-verdunning van bok-anti-konyn sekondêre antiliggaam bevat wat aan peperwortelperoksidase (Bio-Rad, Hercules, CA) gekoppel is vir 25000 h by kamer temperatuur. Membrane is weer gewas en ontwikkel dan met Pierce Super Signal West Dura (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL) chemiluminescent-gemedieerde opsporing op Hyperfilm (ECL plus; Amersham). Die lokalisering van cFos, FosB, en ΔFosB proteïenbande word geïllustreer in Figuur 1C. Ons het gekies om slegs die stabiele uitgedrukte vorms van ΔFosB (dws 35-37 kDa) in hierdie studie te ondersoek, aangesien dit die vorms is wat vermoedelik ophoop met chroniese dwelmgebruik en die neuroplastisiteit veroorsaak wat verslawing ondervind (Nestler et al. 2001). Scion Image (Frederick, MD) is gebruik om absolute immunoreaktiwiteit aan die bande te gee, en 'n skandeerder is gebruik om digitale beelde van die films te neem. Na opsporing is die membrane gestroop en herken vir β-tubulien (1: 200000, Cell Signaling, Danvers, MA). β-tubulienvlakke is gebruik as laaibeheer om vlakke van Fos-verwante proteïene te normaliseer.

RT-PCR

Kwantitatiewe RT-PCR (qRT-PCR) is gebruik om die veranderinge van FosB en ΔFosB mRNA onmiddellik en 24 h te bepaal na aanleiding van kokaïenadministrasie. Diere is genader deur vinnige ontbinding en NAc-kern, NAc-skulp, en CPu is geïsoleer soos beskryf (Graham et al. 2007; Bachtell et al. 2008). Individuele monsters is onmiddellik in RNA-STAT-60 (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswood, TX) gehomogeniseer en op droë ys gevries totdat mRNA volgens die vervaardiger se instruksies onttrek is. Kortliks is chloroform by elke monster gevoeg en die waterige laag is geïsoleer na sentrifugering. Totale mRNA is neergeslaan met isopropanol in die teenwoordigheid van lineêre akrielamied (Ambion, Austin, TX). Monsters is gesentrifugeer en die geëkstraheerde mRNA-korrels is met 70% etanol gewas en weer in DEPC-water gesuspendeer. Totale mRNA is DNAase behandel (Ambion, Foster City, CA) en omgekeerde getranskribeer na cDNA met ewekansige heksamers met behulp van Superscript III (Invitrogen, Carlsbad, CA). Inleierreekse wat gebruik is om FosB, ΔFosB en glyceraldehied-3-fosfaatdehidrogenase (GAPDH) te versterk, was 5'-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 'en 5'-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3', 5'-AGGCAGAGCTGGAGTCGGAG ′, En 3′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-5 ′ en 3′-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-5 ′, onderskeidelik. Siklusdrempels (cT) is bereken uit drieledige reaksies met behulp van die tweede afgeleide van die amplifikasiekurwe. FosB- en ΔFosB-cT-waardes is genormaliseer tot GAPDH cT-waardes (ΔcT), aangesien GAPDH nie deur kokaïen gereguleer is nie. Vouveranderings is bereken volgens die ΔΔcT-metode soos voorheen beskryf (Applied Biosystems-handleiding).

Statistiese analise

Die vlakke van elke proteïen is uitgedruk as persentasieverandering van onbehandelde kontroles vir elke breinstreek en tydstip, en studiegroepe is vergelyk deur eenrigting-variansie-analise (ANOVA), met die beduidingsvlak ingestel op p <0.05. Algehele effekte is gevolg deur post-hoc-vergelykings met Fishers LSD-toetse. Korrelasies tussen kokaïeninname en veranderinge in proteïenvlakke is beoordeel aan die hand van lineêre regressie.

Results

Diere in die CSA-groep wat vrywillig selfbeheerde kokaïen toegelaat het, het teen die derde week van SA (dae 13-18) stabiele patrone van kokaïen-selfadministrasie getoon. Oor die laaste week van SA was die gemiddelde daaglikse kokaïen inname in CSA rotte en hul CY vennote 46.9 (± 1.8) mg / kg / dag (reeks: 37-60 mg / kg / dag). Op die laaste toetsdag is CSA-rotte in die 0 h-onttrekking (WD) -groep self-toegedien 44.5 (± 2.5) mg / kg kokaïen (reeks 25.5-57.5 mg / kg) en 'n identiese hoeveelheid kokaïen is deur hul CY ontvang en AY vennote.

Differensiële regulering van ΔFosB proteïen in striatale subregioene na akute of chroniese kokaïen

Differensiële regulering van ΔFosB proteïen is gevind in striatale subregions onmiddellik na 4 h van intraveneuse kokaïenadministrasie (0 h WD). In die NAc-dop het slegs chroniese kokaïen beduidende toenames in CSA- en CY-groepe (45-61%) in vergelyking met onbehandelde kontrole (Fig. 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005). In die NAc-kern is beduidende toenames in ΔFosB (41%) gevind ná akute blootstelling in die AY-groep (Fig. 2B, F4,60 = 17.04, p <0.001), en selfs groter stygings (89-95%) is gevind na chroniese kokaïen. In teenstelling met groter ophoping van ΔFosB in die NAc met chroniese kokaïentoediening, het die CPu soortgelyke toenames in ΔFosB (86-102%) getoon in beide akute en chroniese kokaïengroepe (Fig. 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001). Daar was geen verskil in ΔFosB-toenames tussen CSA- en CY-groepe in enige striatale substreek nie, wat daarop dui dat regulering verband hou met blootstelling aan kokaïen, ongeag die vrywillige kokaïenverbruik. Regulering van ΔFosB het minstens 24 uur aangehou na chroniese kokaïen in die NAc-dop (F2,32 = 5.19, p = 0.02), NAc-kern (F4,60 = 4.53, p = 0.02), en CPu (F2,34 = 12.13, p <0.001), maar na 3 weke na die basislyn teruggekeer het. Soortgelyke toenames in ΔFosB is gevind toe kokaïengroepe met die Saline SA-groep vergelyk is, behalwe dat kleiner toenames in die NAc-dop van AY-diere betekenis gekry het in vergelyking met Saline SA, maar nie met onbehandelde kontroles nie. Daar was egter geen beduidende regulering van ΔFosB by diere wat tydens die opleiding self toegediende sout was in vergelyking met onbehandelde kontroles nie, wat daarop dui dat die regulering van ΔFosB te wyte was aan kokaïen en nie as gevolg van die chirurgiese of toetsprosedures nie.

Figuur 2  

Regulering van ΔFosB dadelik na kokaïenadministrasie en by 24 h en 3 weke WD. Vlakke van ΔFosB (35-37 kDa) word uitgedruk as die gemiddelde ± SEM persent verander van onbehandelde tuisbeheerkontroles (Beheer). Weefsel uit sout ...

Verdraagsaamheid teen regulering van FosB proteïen na chroniese kokaïen

In teenstelling met regulering van ΔFosB, het 'n enkele blootstelling aan 4 h van IV kokaïenadministrasie wesenlik groter stygings in FosB-proteïen in alle 3-striatale subregio's veroorsaak, maar aansienlike verdraagsaamheid in hierdie respons het ontwikkel ná chroniese kokaïenadministrasie. In die NAc-dop het FosB (260%) onmiddellik na 4 h verhoog vir akute kokaïenadministrasie in AY-diere, maar hierdie verhogings is verminder (na 142-146%) na chroniese toediening in beide CY- en CSA-groepe (Fig. 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001). Soortgelyke toenames in FosB (295%) is gevind in die CPu van AY-diere wat ook verminder is (tot 135-159%) na chroniese toediening van kokaïen in CY- en CSA-groepe (Fig. 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001). In die NAc-kern het akute kokaïentoediening minder aansienlike toenames in FosB (164%) by AY-diere opgelewer in vergelyking met die ander breinstreke; hierdie toenames was egter steeds groter as dié wat geproduseer is na chroniese toediening (109-112-%) in CY- en CSA-groepe (Fig. 3B, F4,57 = 20.23, p <0.001). Soos gevind met ΔFosB, is die regulering van FosB na chroniese kokaïen nie gemoduleer deur vrywillige beheer van kokaïeninname nie. In teenstelling met ΔFosB kon toenames in FosB-proteïene egter nie na 24 uur in beide die NAc-dop en die kern voortduur nie, hoewel die residuele toenames (38-52%) in die CPu aangehou het (F2,32 = 3.590, p <0.05). FosB-vlakke is nie beïnvloed deur chirurgiese of toetsprosedures by soutopnemende diere nie.

Figuur 3  

Regulering van FosB onmiddellik na kokaïenadministrasie en by 24 h en 3 weke WD. Proteïenvlakke van FosB (46-50 kDa) word uitgedruk as die gemiddelde ± SEM persent verandering van onbehandelde tuisbeheerkontroles (sien Figuur 2 legende vir afkortings) ...

Vermindering van beide ΔFosB- en FosB-mRNA-induksie ná chroniese kokaïen

Akute blootstelling aan 4 h van intraveneuse kokaïenadministrasie het soortgelyke toenames (11-16 vou) in ΔFosB mRNA in die NAc-skulp geproduseer (F3,19 = 15.82, p <0.001), NAc kern (F3,19 = 13.275, p <0.001, en CPu (F3,11 = 5.78, p = 0.03) in vergelyking met Saline SA kontroles (0 h WD, Fig. 4A). Hierdie respons is egter sterk onderdruk in CY- en CSA-groepe ná chroniese kokaïenadministrasie in die NAc-dop (3-4-vou), NAc-kern (4-vou) en CPu (3-vou). Ten spyte van die feit dat akute IV-kokaïenadministrasie groter stygings in FosB-proteïen vergeleke met ΔFosB veroorsaak het, het akute kokaïenadministrasie relatief laer stygings in mRNA vir FosB (4-9-vou) veroorsaak as vir ΔFosB (11-16 vou) in alle 3 striatal subregions (Fig. 4B). Hierdie reaksie is feitlik afgeskaf ná chroniese kokaïen in die NAc-dop (F3,19 = 26.22, p <0.001) en CPu (F3,11 = 4.24, p <0.05), hoewel klein maar beduidende toenames (tweevoudig) in CY- en CSA-groepe in die NAc-kern gebly het (F3,19 = 11.10, p <0.001). Die kokaïen-geïnduseerde toenames in beide ΔFosB en FosB in AY-diere is nie na 24 uur WD behou in vergelyking met dieselfde Saline SA kontrolegroep nie. Verdere analise van die verhouding van FosB tot ΔFosB mRNA-vlakke op die 0 uur WD-tydpunt het getoon dat die toediening van kokaïen die relatiewe hoeveelheid FosB tot ΔFosB mRNA in die NAc-dop aansienlik verminder het (F3,19 = 4.79, p = 0.02), NAc-kern (F3,19 = 4.49, p = 0.02), en CPu (F3,11 = 5.59, p = 0.03) as gevolg van groter vorming van die ΔFosB isoform, en ongeag substansieel verdraagsaamheid teenoor die kokaïen-geïnduceerde respons in beide mRNAs na chroniese toediening (Fig. 4C). Daar was geen beduidende verskil in hierdie verhoudings of kokaïen self-toegedien is of passief toegedien is deur 'n yoked infusie nie, en die relatiewe verhoudings van FosB: ΔFosB het in al drie breinstreke normaalweg teruggekeer na die 24h WD-tydspunt (data nie getoon nie).

Figuur 4  

Regulering van mRNA vir FosB en ΔFosB onmiddellik na kokaïenadministrasie en by 24 h WD. Kwantitatiewe RT-PCR van transkripsies vir ΔFosB (A), FosB (B) en die verhouding FosB / ΔFosB transkripsies (C) word uitgedruk as die gemiddelde ± ...

Versterking-verwante verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduceerde cFos in die NAc

In teenstelling met die regulering van FosB-geneprodukte wat 'n farmakologiese respons op kokaïen verteenwoordig het, ongeag passiewe of volstellende toediening, is regulering van cFos in NAc-subregio's sterk beïnvloed deur die konteks van kokaïen-selfadministrasie in vergelyking met diere wat kokaïen ontvang deur passiewe yoked infusies. Kokaïenblootstelling het cFos proteïenvlakke (109-126%) verhoog in beide die NAc-skulp en die kern met óf akute of kroniese toediening in AY- en CY-groepe (Fig. 5A-B). Wanneer kokaïen-infusies egter op 'n reaksie-kontingente wyse in self-administrerende diere gelewer is, is hierdie reaksie verminder (tot 55%) in die NAc-dop (F4,60 = 9.14, p <0.001), en kon nie cFos in die NAc-kern aansienlik verhoog nie (F4,57 = 5.92, p <0.001). In die CPu het verdraagsaamheid teen kokaïen-geïnduseerde cFos ontwikkel met chroniese passiewe of vrywillige kokaïentoediening (Fig. 5C), en cFos-induksie in AY-diere (164%) is in beide CY- en CSA-groepe (tot 45-57%) verminder (F4,67 = 13.29, p <0.001), soortgelyk aan die ontwikkeling van verdraagsaamheid by die induksie van FosB-proteïene in al drie striatale substreke. Versterkingsverwante verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduseerde cFos het dus spesifiek in mesolimbiese streke van die striatum voorgekom. In al drie striatale streke is toenames in cFos nie by soutopnemende diere gevind nie en kon dit nie na 3 uur WD voortduur nie.

Figuur 5  

Regulering van cFos onmiddellik na kokaïenadministrasie en by 24 h WD. Proteïenvlakke van cFos (52-58 kDa) in beheermaatjies (Beheer, Saline SA), by rotte wat passiewe yoked kokaïen acuut (AY) of chronies (CY) ontvang het, en by rotte wat ondergaan het ...

Verhouding tussen kokaïen inname, cFos en ΔFosB in striatum subregions

Aangesien die hoeveelheid kokaïen-selfadministrasie oor individuele diere en hul toegewyde vennote verskil, het ons die hoeveelheid kokaïen inname vergelyk met die induksie van cFos-, FosB- en ΔFosB-proteïenvlakke deur verskeie lineêre regressie-ontledings (sien Aanvullende Tabel 1 vir die resultate van alle moontlike korrelasies). Daar was beduidende korrelasies tussen kokaïen inname en cFos vlakke by rotte wat akute kokaïen toediening deur passiewe infusies ontvang het, en hierdie verhoudings verskil in dorsale en ventrale striatale subregio's. In die NAc-kern was induksie van cFos onmiddellik na 4 h van akute IV kokaïenadministrasie sterk en negatief gekorreleer met kokaïeninname, terwyl 'n soortgelyke maar onbeduidende verhouding in die NAc-dop gevind is (Fig 6). In teenstelling hiermee is die induksie van cFos positief gekorreleer met kokaïen inname in die CPu. Daar was geen beduidende korrelasies tussen kokaïen inname (of aktief of passief) en proteïenvlakke van FosB of ΔFosB in enige striatale substreek. Daar was egter 'n sterk positiewe korrelasie tussen vlakke van cFos en ΔFosB in die NAc-skulp 24 h ná kokaïen, maar slegs in diere wat kokaïen deur volgehoue ​​selfadministrasie ontvang het (Fig 7), en ondanks die feit dat algehele cFos-vlakke nie by 24 h WD verander is nie. Soortgelyke tendense (p <0.07) vir positiewe korrelasies tussen cFos- en ΔFosB-proteïenvlakke is onmiddellik na 4 uur kokaïen-selfadministrasie in die NAc-kern gevind, en in die CPu van diere wat kokaïen vir die eerste keer ontvang het (AY-groep).

Figuur 6  

Streek-spesifieke korrelasie tussen kokaïen inname en cFos immunoreaktiwiteit na akute kokaïen (AY). Die persentasie toename in cFos immunoreaktiwiteit is negatief gekorreleer met kokaïen inname in die finale sessie in die NAc kern (A) en positief gekorreleer ...
Figuur 7  

Beduidende korrelasie tussen cFos en ΔFosB in die NAc-dop in self-administrerende diere. Die persentasie toename in cFos immunoreaktiwiteit is positief gekorreleer met ΔFosB immunoreaktiwiteit na 24 h WD in kokaïen self-toediening ...

Bespreking

In die huidige studie het ons ondersoek ingestel na die effekte van akute en chroniese intraveneuse blootstelling aan kokaïene of chroniese selfadministrasie op regulering van ΔFosB-, FosB- en cFos-vlakke in die NAc-skulp, NAc-kern en CPu striatal subregio's. Vorige studies het konsekwent bevind dat ΔFosB slegs na herhaalde blootstelling verhoog word, en nie na akute kokaïenadministrasie deur passiewe IP kokaïen inspuitings te gebruik nie (Hoop et al. 1994, Nye et al. 1995; Chen et al. 1995). Net so het ons gevind dat chroniese IV kokaïenblootstelling ΔFosB in alle striatale subregions ondersoek het, ongeag of dit op 'n vrywillige of passiewe wyse toegedien is. 'N Groot verskil van vorige studies is egter dat akute kokaïenadministrasie ΔFosB proteïenvlakke in beide NAc-kern en CPu toegeneem het, en benaderde betekenis in die NAc-dop (p <0.1). Een moontlike verklaring vir hierdie verskil kan die dosis en / of die duur van die blootstelling aan kokaïen wees, aangesien rotte in die AY-groep verskeie IV-kokaïen-infusies ontvang het gedurende die enkele 4 uur sessie, wat gelei het tot totale inname van kokaïen wat wissel van 25.5 tot 57.5 ​​mg / kg individuele diere, wat dosisse van 10-20 mg / kg oorskry, wat gewoonlik met 'n enkele bolus-IP-inspuiting gebruik word (Hoop et al. 1994; Lee et al. 2006). Daarbenewens is kokaïen toegedien via 'n meer direkte IV toedieningsroete wat hoër spierbreinvlakke van kokaïen en dopamien lewer wat gedurende die sessie voortduur, terwyl hierdie effekte gewoonlik binne 'n uur na IP-inspuiting verdwyn (Bradberry, 2002). Die vermoë van ΔFosB om te akkumuleer na 'n enkele akute blootstelling aan kokaïen is dus moontlik afhanklik van beide die sterkte en duur van die kokaïenstimulus wat in die huidige studie gebruik word. In elk geval kan die bevinding dat ΔFosB na 'n enkele blootstelling aan kokaïen ophoop, aandui dat ΔFosB sy effekte vinniger kan uitoefen as wat voorheen gedink is, moontlik as gevolg van 'n aanvanklike selfadministrasie.

Interessant genoeg verskil die hoeveelheid ΔFosB-akkumulasie tussen dorsale en ventrale striatale streke gedurende die kroniese kokaïenadministrasie. In die NAc-kern was die hoeveelheid ΔFosB wat onmiddellik na die finale dag van chroniese toediening gevind is (0 h WD) meer as dubbel die hoeveelheid wat gevind is na akute toediening, en kleiner ΔFosB-verhogings in die NAc-skulp bereik slegs betekenisvol na chroniese toediening , ongeag of kokaïen self geadministreer is of ontvang is deur passiewe yoked infusie. Verhogings met chroniese kokaïenadministrasie weerspieël waarskynlik die akkumulasie van hoogs stabiele ΔFosB-proteïen, aangesien hulle vir ten minste 24 uur na die laaste blootstelling voortduur. In teenstelling hiermee het groot toenames in die hoeveelheid ΔFosB in die SVE nie met akute of chroniese blootstelling verskil nie, wat moontlik 'n plafon wat deur akute blootstelling in hierdie breinstreek geproduseer word, weerspieël. Selfs in die SVE het die ophoping van ΔFosB-proteïen waarskynlik bygedra tot volgehoue ​​ΔFosB-vlakke na chroniese blootstelling, aangesien substansiële toleransie ontwikkel het tot kokaïen-geïnduceerde mRNA vir ΔFosB in alle 3 breinstreke met chroniese toediening.

Akute toediening van IV-kokaïen het ook die FosB-proteïenvlakke van volle lengte verhoog, met groter toenames in die CPu- en NAc-skulp as die NAc-kern. MRNA vir FosB is egter geïnduseer deur amper 10 keer in die NAc-dop en minder as 5 keer in die CPu- en NAc-kern. Aansienlike verdraagsaamheid ontwikkel tot die vermoë van kokaïen om beide mRNA en proteïene vir FosB met chroniese toediening te veroorsaak, hoewel 'n laer induksie van FosB-proteïen gebly het en moontlik met ΔFosB vir AP-1-bindingsvennote kan meeding. Die relatiewe verhouding van FosB / ΔFosB mRNA is ook verminder deur akute kokaïentoediening as gevolg van relatief groter induksie van ΔFosB, in ooreenstemming met vorige verslae met amfetamien (Alibhai et al. 2007). In teenstelling met vorige bevindings met herhaalde amfetamienbehandelings, bly die afname in die relatiewe verhouding van FosB / ΔFosB mRNA deur akute kokaïen ná chroniese toediening, wat die relatief hoër residuele induksie van ΔFosB as FosB weerspieël.

Die feit dat ΔFosB-vlakke toeneem na selfs akute kokaïen deur patrone en duur van toediening te gebruik, is meer tipies van menslike intraveneuse dwelmgebruik. Belangrike implikasies vir die verslawing proses. Dus, ΔFosB kan bydra tot AP-1 bindende aktiwiteit met aanvanklike kokaïen gebruik indien voldoende dosisse self toegedien is. ΔFosB sal egter kompeteer met beide FosB en cFos vir AP-1 bindende aktiwiteit, wat lei tot stroomafwaartse genexpressie en neuroplastisiteit wat verskillend is van chroniese toediening wanneer ΔFosB verhef word met aansienlik verminderde cFos en FosB. Daarom kan ΔFosB groter effekte hê ná chroniese kokaïenadministrasie as gevolg van beide groter akkumulasie in die ventrale striatum en verminderde mededinging vir AP-1 bindingsvennote in beide dorsale en ventrale striatum. Aangesien straling-spesifieke oor-uitdrukking van ΔFosB die motivering vir kokaïen verhoog (Colby et al. 2003), kan so 'n vinnige ophoping van ΔFosB met aanvanklike kokaïenblootstelling kokaïen gebruik in baie vroeë stadiums van die verslawing proses voortduur. Daarbenewens sal so 'n prominente en wydverspreide ΔFosB-uitdrukking dwarsdeur die striatum met akute blootstelling AP-1 bindende aktiwiteit verander op 'n manier wat die vorming van kompulsiewe gewoontes kan fasiliteer deur vroeë verbintenis van dorsale striatale stroombane (Belin en Everitt, 2008).

Met inagneming van die stabiliteit van die ΔFosB isoforms, het ΔFosB vlakke aansienlik verhoogde 24 uur na die laaste kokaïenadministrasie sessie, in ooreenstemming met vorige studies met chroniese intraveneuse kokaïenadministrasie (Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Ander studies met die gebruik van passiewe eksperimente-administrasie van IP-kokaïen inspuitings het bevind dat ΔFosB-akkumulasie kan voortduur vir 1-2 weke van onttrekking (Hoop et al. 1994; Brenhouse en Stellar, 2006; Lee et al. 2006), hoewel ons drie weke na beëindiging van die toediening van kokaïne geen bewyse vir hierdie veranderinge gevind het nie. Saam dui hierdie studies daarop dat die ophoping van ΔFosB relatief kort onttrekkingsperiodes (<3 weke) kan voortduur, en direk kan bydra tot die voortdurende gebruik van kokaïen, maar nie direk kan bydra tot 'n groter neiging tot terugval by langdurige onttrekking nie. ΔFosB-immunoreaktiwiteit is egter opgespoor in D3-reseptorbevattende striatale neurone na 1 dae onttrekking aan herhaalde kokaïen by muise (Lee et al. 2006). Sulke selspesifieke steekproefneming kan meer sensitief wees vir residuele ΔFosB-akkumulasie as die hele weefselanalise wat in die huidige studie gebruik word, of dalk verander ΔFosB veranderinge net langer in muise as by rotte. Dit is ook moontlik dat ΔFosB 'n kaskade van transkriptionele gebeure veroorsaak wat lei tot langdurige morfologiese veranderinge soos dendritiese ruggraatvorming in D1-bevattende striatale neurone (Lee et al. 2006; Maze et al. 2010). In hierdie verband word verskeie ΔFosB teikens, insluitende Cdk5 en NFκB, verhoog na chroniese kokaïen, en hierdie faktore kan kernkragbane verander deur veranderinge in neuronale struktuur en / of funksie (Ang et al. 2001; Benavides en Bibb, 2004; Nestler, 2008). Dit is dus moontlik dat volgehoue ​​ΔFosB-akkumulasie tydens onttrekking nie nodig is vir die langdurige impak daarvan op toekomstige dwelmopname of -gedrag nie, maar kan eerder 'n molekulêre skakelaar voorstel wat veelvuldige sellulêre prosesse uitoefen wat die oorgang na meer fasiliteer verslaafde biologiese toestande (Nestler et al. 2001).

Tsy huidige studie het bevind dat kokaïen-gemedieerde ΔFosB-akkumulasie nie beïnvloed word deur die vrywillige beheer van kokaïeninname in self-administrerende diere wat ooreenstem met vorige studies met behulp van immunohistochemiese prosedures en veelvuldige dwelmmiddels (Perotti et al. 2008; Pich et al. 1997). Dit dui daarop dat kokaïengeïnduceerde toenames in ΔFosB en FosB waarskynlik verband hou met die farmakologiese respons op kokaïen of ander stroomafwaartse gebeurtenisse van mono-aminergiese reseptor sein. In teenstelling met ΔFosB, ons het bevind dat die ontwikkeling van verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduceerde cFos wesenlik beïnvloed is deur die vrywillige beheer oor kokaïen inname in die NAc, maar nie in die CPu nie. Dus, verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduceerde cFos in die NAc, het nie plaasgevind in diere wat kokaïen passief ontvang het deur chroniese yoked infusie in vergelyking met akute yoked infusie. Hierdie bevindings verskil aansienlik van talle verslae van verdraagsaamheid teenoor psigostimulerende-geïnduceerde cFos in die NAc wanneer dwelms deur passiewe IP-inspuiting gegee word (Hoop et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997; Alibhai et al. 2007). Aangesien die verdraagsaamheid teenoor cFos by kokaïen-selfadminerende diere parallelle is met verskeie studies met herhaalde IP-inspuitings, kan die gebrek aan verdraagsaamheid met chroniese intraveneuse toegediende toediening verband hou met die spanning wat geassosieer word met veelvuldige en onvoorspelbare ingeënt kokaïen inspuitings (Goeders 1997). Die verlies aan verdraagsaamheid in ventrale eerder as dorsale striatum sal in ooreenstemming wees met 'n selektiewe effek op limbiese stroombane wat betrokke is by motivering en emosionele response. Daarbenewens, terwyl die verdraagsaamheid tot induksie van cFos plaasgevind het in diere wat self kokaïen toegedien het, het daar onmiddellik ná hul finale selfadministrasie sessie 'n aansienlike ~50% toename in cFos-proteïen in die NAc-dop gebly, en 'n tendens (p <0.1) vir cFos-verhogings het ook in die kern plaasgevind. Redes vir hierdie teenstrydigheid weerspieël waarskynlik die verskille tussen IP-inspuiting en veelvuldige IV-infusies gedurende 'n periode van 4 uur soos hierbo bespreek. Die oorblywende induksie van cFos in die NAc na chroniese kokaïen-selfadministrasie is 'n nuwe bevinding wat die heroorweging van sy rol in die verslawingproses dwing, waardeur AP-1-komplekse wat cFos, ΔFosB en FosB bevat, almal tot 'n mate na chroniese blootstelling sal bestaan. .

Gegee onlangse bewyse dat cFos direk reguleer word deur ΔFosB-akkumulasie in dorsale striatum (Renthal et al. 2008), is dit interessant dat kokaïen-geïnduceerde cFos in die CPu parallel is met toenames in ΔFosB met akute kokaïenblootstelling. Een moontlikheid is dat die akkumulasie van ΔFosB met akute toediening te laat in die 4 h-sessie plaasvind om cFos-induksie te beïnvloed, terwyl die teenwoordigheid 24 h ná kokaïen by chronies behandelde diere die induksie van cFos met gevolglike kokaïenblootstelling belemmer. Hierdie idee is in ooreenstemming met 'n tendens (p = 0.067) vir 'n matige positiewe korrelasie tussen cFos en ΔFosB vlakke in die SVE met akute kokaïenadministrasie (0 h WD). Hierdie konsep is ook in ooreenstemming met die sterk positiewe korrelasie tussen cFos-induksie en kokaïen inname in die SVE van akute grappige diere. Hierdie bevindinge dui daarop dat, ooreenkomstig ΔFosB, die cFos-respons die dosis kokaïen wat ontvang is, weerspieël. In die NAc kan die groter ophoping van ΔFosB met chroniese yoked kokaïenadministrasie egter nie die gebrek aan verdraagsaamheid in die cFos-respons in hierdie diere voorstel nie. Verder, hoewel die verdraagsaamheid teenoor cFos-induksie duidelik was in selfadminerende diere, ondersteun die sterk positiewe korrelasie tussen residuele cFos en ΔFosB vlakke in die NAc dop na 24 h onttrekking nie 'n negatiewe interaksie tussen cFos en ΔFosB in die ventrale striatum. Nog 'n verskil van die CPu-data is dat cFos in die NAc-kern negatief eerder as positief gekorreleer is met kokaïeninname onmiddellik ná akute kokaïenadministrasie, wat 'n binne-sessie-tachifhylaxis kan weerspieël wat voorkom met die hoër dosisblootstelling in die ventrale striatum.

Algehele, die bevindinge van die huidige studie dui aan dat cFos, FosB, en ΔFosB verskillende streekspatrone van uitdrukking ondergaan na akute en chroniese intraveneuse kokaïenadministrasie. Hierdie uitdrukkingspatrone is uniek afhanklik van beide die duur en hoeveelheid geneesmiddelblootstelling, en die verdraagsaamheid teenoor kokaïen-geïnduceerde cFos is hoogs afhanklik van selfstandige kokaïenadministrasie. Die resultate toon ook dat ΔFosB kan akkumuleer met beide akute en chroniese kokaïenadministrasie deur intraveneuse inspuiting, en ondersteun die idee dat ΔFosB-akkumulasie belangrik kan wees in vroeë prosesse wat verhoogde kokaïen-soekgedrag bevorder en bydra tot die ontwikkeling van kokaïenverslawing. Uiteindelik sal dit belangrik wees om te begryp hoe ΔFosB indirekte invloed kan hê op volgehoue ​​dwelmmisbruik by onttrekking deur middel van relatief korttermyn invloede op geenuitdrukking tydens kokaïengebruik en vroeë onttrekkingsperiodes. Pogings om die verskillende stroomafwaartse teikens en hul effekte op neuronale morfologie en / of funksie te identifiseer, sal uiteindelik die rol van ΔFosB en ander Fos-verwante antigene in die uitdrukking van verslawende gedrag verduidelik.

Aanvullende materiaal

Ondersteun Tabel S1

Aanvullende tabel 1. Algehele korrelasie-resultate vir lineêre regressie-analises. Die linker drie panele bevat korrelasies tussen kokaïeninname en vlakke van cFos (boonste paneel), FosB (middelste paneel) of ΔFosB (onderste paneel). Die regter drie panele bevat korrelasies tussen cFos en ΔFosB (boonste paneel), cFos en FosB (middelste paneel), en FosB en ΔFosB (onderste paneel). Die relatiewe breinstreke en WD-tydpunte word vir elke individuele analise getoon, tesame met die ooreenstemmende r- en p-waardes. * p <0.05, T0.1> p> 0.05.

Erkennings

Die skrywers verklaar geen belangebotsings rakende hierdie werk nie. Hierdie werk is ondersteun deur NIH-toekennings DA 10460 en DA 08227, en deur die Wesley Gilliland Professorskap in Biomediese Navorsing.

Afkortings gebruik

  • CPU
  • stert-putamen
  • NAC
  • kern accumbens
  • AY
  • akute juk
  • CY
  • chroniese juk
  • CSA
  • kokaïen self-administrasie
  • WD
  • ontrekking
  • IV
  • binneaarse
  • IP
  • intraperitoneale.

Verwysings

  • Alibhai IN, Groen TA, Potashkin JA, Nestler EJ. Regulering van fosB en ΔfosB mRNA uitdrukking: In vivo en in vitro studies. Brein Res. 2007; 1143: 22-33. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induksie van kernfaktor-κB in kernklemme deur chroniese kokaïenadministrasie. J Neurochem. 2001; 79: 221-224. [PubMed]
  • Bachtell RK, Choi KH, Simmons DL, Falcon E, Monteggia LM, Neve LN, Self DW. Rol van GluR1-uitdrukking in kern veroorsaak neurone in kokaïensensitiasie en kokaïen-soekende gedrag. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2229-2240. [PubMed]
  • Belin D, Everitt BJ. Kokaïen soek gewoontes hang af van dopamien-afhanklike seriële verbindings wat die ventrale met die dorsale striatum verbind. Neuron. 2008; 57: 432-441. [PubMed]
  • Benavides DR, Bibb JA. Rol van Cdk5 in dwelmmisbruik en plastisiteit. Ann NY Acad Sci VSA. 2004; 1025: 335-344. [PubMed]
  • Ben-Shahar O, Ahmed SH, Koob GF, Ettenberg A. Die oorgang van beheerde tot kompulsiewe dwelmgebruik word geassosieer met 'n verlies van sensitiwiteit. Brein Res. 2004; 995: 46-54. [PubMed]
  • Bradberry CW. Dinamika van ekstrasellulêre dopamien in die akute en chroniese dade van kokaïen. Neurowetenskaplike. 2002; 8: 315-322. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos en ΔFosB word differensieel verander in afsonderlike subregio's van die nucleus accumbens-dop in kokaïen-sensitiewe rotte. Behav Neurosci. 2006; 137: 773-780. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hoop BT, Nestler EJ. Regulering van ΔFosB- en FosB-agtige proteïene deur elektrokonvulsiewe aanval en kokaïenbehandelings. Mol Pharmacol. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hoop BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Chroniese Fos-verwante antigene: stabiele variante van ΔFosB geïnduceer in die brein deur chroniese behandelings. J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatale seltipe-spesifieke ooruitdrukking van ΔFosB verhoog aansporing vir kokaïen. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW. Addiction-verwante veranderings in D1 en D2 dopamienreseptor gedragsresponse na chroniese kokaïen-selfadministrasie. Neuropsychopharm. 2007a; 32: 354-366. [PubMed]
  • Edwards S, Graham DL, Bachtell RK, Self DW. Streek-spesifieke toleransie vir kokaïen-gereguleerde cAMP-afhanklike proteïen fosforilering na chroniese selfadministrasie. Eur J Neurosci. 2007b; 25: 2201-2213. [PubMed]
  • Goeders NE. 'N neuro-endokriene rol in kokaïen versterking. Psychoneuroendocrinol. 1997; 22: 237-259. [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamien en kokaïen induceer dwelmspesifieke aktivering van die c-fos-geen in striosoommatriks-kompartemente en limbiese onderverdelings van die striatum. Proc Natl Acad Sci VSA. 1990; 87: 6912-6916. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, DiLeone RJ, Rios M, Self DW. Dinamiese BDNF-aktiwiteit in kernklemme met kokaïengebruik verhoog selfadministrasie en terugval. Nat Neurosci. 2007; 10: 1029-1037. [PubMed]
  • Hoop B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulering van onmiddellike vroeë gene-ekspressie en AP-1 binding in die ratkern as gevolg van chroniese kokaïen. Proc Natl Acad Sci VSA. 1992; 89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hoop BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induksie van 'n langdurige AP-1-kompleks saamgestel uit veranderde Fos-agente proteïene in die brein deur chroniese kokaïen en ander chroniese behandelings. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hoop BT. Kokaïen en die AP-1 transkripsiefaktor kompleks. Ann NY Acad Sci. 1998; 844: 1-6. [PubMed]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Dimerisering en DNA-bindende eienskappe van die transkripsiefaktor ΔFosB. Biochemie. 2007; 46: 8360-8372. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, et al. Uitdrukking van die transkripsiefaktor ΔFosB in die brein beheer sensitiwiteit vir kokaïen. Aard. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL. c-Fos-uitdrukking wat verband hou met die herinstelling van kokaïen-soekgedrag deur reaksie-kontingent-gekondisioneerde aanwysers. Sinaps. 2009; 63: 823-835. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Lee K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaïen-geïnduceerde dendritiese ruggraatvorming in D1- en D2-dopamienreseptor-bevattende medium-stekel-neurone in kernklemme. Proc Natl Acad Sci VSA. 2006; 103: 3399-3404. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Maze I, Covington H, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Meganiese M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Noodsaaklike rol van die histoonmetieltransferase G9a in kokaïen-geïnduseerde plastisiteit. Wetenskap. 2010; 327: 213-216. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: 'n molekulêre skakelaar vir langtermyn aanpassing in die brein. Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LTL, Palmer A, Marshall JF. Fos proteïen ekspressie en kokaïen-soek gedrag by rotte na blootstelling aan 'n kokaïen self-administrasie omgewing. J Neurosci. 2000; 20: 798-805. [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: 'n volgehoue ​​molekulêre skakelaar vir verslawing. Proc Natl Acad Sci VSA. 2001; 98: 11042-11046. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nestler EJ. Transkripsionele meganismes van verslawing: rol van ΔFosB. Phil Trans R Sos B. 2008; 363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nye HE, Hoop BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiese studies van die regulering van chroniese FOS-verwante antigeen-induksie deur kokaïen in die striatum- en nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induksie van ΔFosB in beloningsverwante breinstrukture na chroniese stres. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, et al. Duidelike patrone van ΔFosB induksie in brein deur dwelmmiddels. Sinaps. 2008; 62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson GC. Die rot brein in stereotaksiese koördinate. 4th. New York: Academic Press; 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Algemene neurale substraten vir die verslawende eienskappe van nikotien en kokaïen. Wetenskap. 1997; 275: 83-86. [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, et al. ΔFosB bemiddel epigenetiese desensibilisering van die c-FOS geen na chroniese amfetamien blootstelling. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, et al. Die invloed van DeltaFosB in die kern word toegepas op natuurlike beloningsverwante gedrag. 2008; 28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Young ST, Porrino LJ, Iadarola MJ. Kokaïen veroorsaak stralatiese c-Fos-immunoreaktiewe proteïene via dopaminerge D1 reseptore. Proc Natl Acad Sci VSA. 1991; 88: 1291-1295. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos fasiliteer die verkryging en uitsterwing van kokaïen-geïnduseerde aanhoudende veranderinge. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]