Onttrekking veroorsaak afsonderlike patrone van FosB / ΔFosB uitdrukking in uitgebeelde Switserse muise wat as vatbaar en bestand is teen etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitiwiteit (2014)

Pharmacol Biochem Behav. 2014 Feb; 117: 70-8. doi: 10.1016/j.pbb.2013.12.007. Epub 2013 16 Des.

De Pauli RF1, Coelhoso BK2, Tesone-Coelho C2, Linardi A3, Mello LE2, Silveira DX1, Santos-Junior JG4.

Abstract

Chroniese geneesmiddelblootstelling en geneesmiddelonttrekking veroorsaak ekspressiewe neuronale plastisiteit wat as beide funksionele en patologiese response beskou kan word. Dit is goed vasgestel dat neuronale plastisiteit in die limbiese sisteem 'n deurslaggewende rol speel in terugval sowel as in kompulsiewe kenmerke van dwelmverslawing. Alhoewel toenames in FosB/DeltaFosB-uitdrukking een van die belangrikste vorme van neuronale plastisiteit in dwelmverslawing uitmaak, is dit onduidelik of dit funksionele of patologiese plastisiteit verteenwoordig. Dit is van noemenswaardige belang die individuele verskille in die oorgang van ontspanningsgebruik na dwelmverslawing. Hierdie verskille is gerapporteer in studies wat die etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitiseringsparadigma behels. In die huidige studie het ons ondersoek of gesensitiseerde en nie-gesensitiseerde muise verskil in terme van FosB/DeltaFosB uitdrukking. Volwasse manlike uitgeteelde Switserse muise is daagliks vir 21 dae met etanol of sout behandel. Volgens die lokomotoriese aktiwiteit in die verkrygingsfase is hulle geklassifiseer as sensitief (EtOH_High) of nie-gesensitiseerd (EtOH_Low). Na 18 uur of 5 dae is hul breine verwerk vir FosB/DeltaFosB immunohistochemie. Op die 5de dag van onttrekking kon ons verhoogde FosB/DeltaFosB-uitdrukking waarneem in die EtOH_High-groep (in die motoriese korteks), in die EtOH_Low-groep (in die ventrale tegmentale area), en in beide groepe (in die striatum). Verskille was meer konsekwent in die EtOH_Low-groep. Daarom is gedragsveranderlikheid wat in die verkrygingsfase van etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering waargeneem is, gepaard gegaan met differensiële neuronale plastisiteit tydens onttrekkingsperiode. Verder blyk duidelike patrone van FosB/DeltaFosB-uitdrukking wat in gesensitiseerde en nie-gesensitiseerde muise opgespoor word, meer verband te hou met onttrekkingsperiode eerder as aan chroniese dwelmblootstelling. Laastens kan toenames in FosB/DeltaFosB-uitdrukking tydens onttrekkingsperiode beskou word as te wyte aan beide funksionele en patologiese plastisiteit.

 


Hooftrekke

  • DeltaFosB-uitdrukking is 'n belangrike vorm van neuronale plastisiteit in dwelmverslawing

  • Dit is egter onduidelik of dit funksionele of patologiese plastisiteit verteenwoordig.

  • Hier het ons verskille gevind in DeltaFosB onder sensitiewe en nie-gesensitiseerde muise.

  • Hierdie verskille hou meer verband met onttrekkingstydperk eerder as dwelmblootstelling.

  • Ons stel voor dat hierdie veranderinge beide funksionele en patologiese plastisiteit verteenwoordig.


Sleutelwoorde

  • FosB;
  • DeltaFosB;
  • Lokomotoriese sensitisering;
  • Onttrekkings;
  • Gedragsveranderlikheid;
  • Muise

1. Inleiding

Die uitdaging van huidige neurobiologiese navorsing in dwelmverslawing is om die neuronale plastisiteitsmeganismes te verstaan ​​wat die oorgang van ontspanningsgebruik na die verlies van gedragsbeheer oor dwelmsoektog en dwelmgebruik bemiddel. Een van die belangrikste teorieë van dwelmverslawing, genoem "die donker kant van verslawing", dui daarop dat daar 'n vordering is van impulsiwiteit (verwant aan positiewe versterking) na kompulsiwiteit (verwant aan negatiewe versterking). Hierdie progressie, in 'n ineengestorte siklus, bestaan ​​uit die volgende toestande: preokkupasie/afwagting, binge dronkenskap, en onttrekking/negatiewe affek (Koob en Le Moal, 2005, Koob en Le Moal, 2008 en Koob en Volkow, 2010). Vanaf hierdie scenario het dwelmverslawingstudies gefokus op die neurobiologiese meganismes wat verband hou met negatiewe emosionele toestande wat uit beide akute en uitgerekte onthouding ontstaan. Volgens die teorie van "die donker kant van verslawing", blyk dit dat daar langtermyn en aanhoudende plastisiteitsveranderinge in neurale stroombane voorkom wat daarop gemik is om beloning te beperk. Hierdie plastisiteitsveranderinge lei egter tot 'n negatiewe emosionele toestand wat na vore kom wanneer toegang tot die dwelm verhoed word. Hierdie meganisme verskaf 'n sterk motiveringsdryfkrag vir die vestiging van verslawing, sowel as vir die instandhouding daarvan (Koob en Le Moal, 2005 en Koob en Le Moal, 2008).

Lokomotoriese sensitisering is 'n nuttige diermodel gebaseer op die feit dat toenames op subjektiewe effekte van die middels tydens hul herhaalde blootstelling soortgelyk is aan toenames in die dwelm-geïnduseerde stimulante lokomotoriese effekte (Vanderschuren en Kalivas, 2000 en Vanderschuren en Pierce, 2010). Alhoewel lokomotoriese sensitisering nie verskeie gedrag naboots wat met dwelmverslawing verband hou nie, is die tydelike morfologiese en neurochemiese kenmerke daarvan parallel met dié wat die oorgang van ontspanningsgebruik na dwelmverslawing self lei (Robinson en Kolb, 1999, Vanderschuren en Kalivas, 2000 en Vanderschuren en Pierce, 2010). Tradisioneel bestaan ​​die lokomotoriese sensitiseringsprotokol uit drie fases: verkryging (herhaalde geneesmiddelblootstelling), onttrekkingsperiode en uitdaging ('n nuwe kontak met die geneesmiddel na die onttrekkingsperiode). Ongelukkig het die meeste van die studies wat die lokomotoriese sensitisering gebruik, slegs in die verkryging en uitdagingsfase gefokus, wat die onttrekkingsperiode oorvleuel.

Dit is goed vasgestel dat herhaalde blootstelling aan dwelmmiddels (Perrotti et al., 2008) en chroniese stres (Perrotti et al., 2004) verhoog die uitdrukking van die transkripsiefaktor fosB/deltafosB in die kortikolimbiese sisteem. FosB/DeltaFosB-akkumulasie in hierdie streke is veronderstel om 'n sentrale rol te speel in die veerkragtigheid teen stres (Berton et al., 2007 en Vialou et al., 2010) en in die lonende effekte van kokaïen (Harris et al., 2007 en Muschamp et al., 2012), etanol (Kaste et al., 2009 en Li et al., 2010), en opioïede (Zachariou et al., 2006 en Solecki et al., 2008). Daarom is dit moontlik dat FosB/DeltaFosB sommige van die neuronale plastisiteitsgebeurtenisse moduleer wat verband hou met die etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering, sowel as die onttrekking wat die verkrygingsfase van lokomotoriese sensitisering volg.

Dit is opmerklik dat daar individuele verskille is waargeneem tydens die oorgang van ontspanningsgebruik na dwelmverslawing (Flagel et al., 2009, George en Koob, 2010 en Swendsen en Le Moal, 2011). Byvoorbeeld, DBA/2 J muise is meer geneig om te reageer as C57BL/6 J op etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering (Phillips et al., 1997 en Melón en Boehm, 2011a). By uitgeteelde Switserse muise is gedragsveranderlikheid met betrekking tot etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering eers beskryf deur Masur en dos Santos (1988). Van toe af het ander studies belangrike neurochemiese kenmerke getoon wat verband hou met gedragsveranderlikheid in die verkryging van etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering (Souza-Formigoni et al., 1999, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Quadros et al., 2002a en Quadros et al., 2002b). Hierdie studies het egter nie die impak van gedragsveranderlikheid tydens die onttrekkingsperiode na die verkrygingsfase van lokomotoriese sensitisering aangespreek nie. In 'n onlangse studie het ons laboratorium 'n beduidende verskil tussen gesensitiseerde en nie-gesensitiseerde uitgeteelde Switserse muise beskryf met betrekking tot die uitdrukking van cannabinoïde reseptor tipe 1 (CB1R) gedurende onttrekking. In daardie studie het sensitiewe (maar nie nie-gesensitiseerde muise nie) CB1R-uitdrukking in die prefrontale korteks, ventrale tegmentale area, amygdala, striatum en hippokampus verhoog (Coelhoso et al., 2013).

Gegewe die goed gevestigde gedragsveranderlikheid in uitgeteelde Switserse muise met betrekking tot etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering, en dat hierdie veranderlikheid gepaard gaan met duidelike neurochemiese kenmerke tydens daaropvolgende onttrekking, het die huidige studie die uitdrukking van FosB/DeltaFosB in gesensitiseerde en nie-gesensitiseerde muise aan die begin ondersoek (18 uur) en na 5 dae van onttrekking.

2. Materiaal en metodes

2.1. vakke

Manlike uitgeteelde Switserse Webster-muise (EPM-1 Colony, São Paulo, SP, Brasilië), oorspronklik afkomstig van die Albino Swiss Webster-lyn van die Sentrum vir die Ontwikkeling van Dieremodelle in Biologie en Geneeskunde by die Universidade Federal de São Paulo, is gebruik . Muise was 12 weke oud (30-40 g) aan die begin van die toets. Groepe van 10 muise is in hokke (40 × 34 × 17 cm) met houtspaanderbeddegoed gehuisves. Die temperatuur (20–22 °C) en humiditeit (50%) beheerde dierekolonie is gehandhaaf op 'n lig/donker siklus (12/12 uur), met ligte aan om 07:00 uur, met muis chow korrels en kraanwater advertensie libitum, behalwe tydens toetsing. Muise is in hierdie behuisingstoestande gehou vir ten minste 7 dae voor die aanvang van dwelmbehandeling en gedragstoetse. Dieresorg en eksperimentele prosedures is uitgevoer volgens protokolle wat goedgekeur is deur die Dieresorg- en Gebruik-etiekkomitee van die Universiteit (protokolnommer: 2043/09), volgens EU-richtlijn 2010/63/EU vir diere-eksperimente (http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2. Lokomotoriese sensitisering

Die protokol van lokomotoriese sensitisering was gebaseer op 'n vorige studie van ons eie laboratorium (Coelhoso et al., 2013). Aan die begin van die protokol is alle diere intraperitoneaal (ip) met soutoplossing ingespuit en onmiddellik getoets in 'n outomatiese aktiwiteitsboks (Insight, Brasilië) vir 15 minute om basale voortbeweging te vestig. Twee dae later is diere daagliks ingespuit met etanol (2 g/kg, 15% w/v in 0.9% NaCl, ip - EtOH-groep, N = 40) of soutoplossing (soortgelyke volume, ip, — Kontrolegroep, N = 12), gedurende 21 dae. Reg na die 1ste, die 7de, die 14de en die 21ste inspuitings is diere vir 15 min in die aktiwiteitshok geplaas. Die horisontale beweging in elke situasie is gemeet deur 'n gedragsanalisestelsel (Pan Lab, Spanje). Soos verwag ( Masur en dos Santos, 1988 en Coelhoso et al., 2013), stel gedragsveranderlikheid in die lokomotoriese aktiwiteit op die 21ste dag van verkryging ons in staat om die diere van EtOH-groep in 2 subgroepe te versprei: EtOH_High (geneem uit die boonste 30% van die verspreiding) en EtOH_Low (geneem uit die onderste 30% van die verspreiding). Slegs die 60% diere is dus by die ontleding ingesluit. Hierdie strategie is identies aan dié wat gebruik is in die studies wat individuele veranderlikheid binne die etanol-sensitiseringsparadigma ondersoek ( Masur en dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 en Coelhoso et al., 2013).

Na die klassifikasie wat die eksperimentele groepe gedefinieer het, het ons 2 onafhanklike eksperimente uitgevoer volgens die tydelike kriteria van onttrekkingsperiode: (i) diere wat aan die verkrygingsfase onderwerp is en na 18 uur van onttrekking geoffer is en (ii) diere wat aan die verkrygingsfase onderwerp is en geoffer is na 5 dae van onttrekking. Dus, hierdie studie het 3 eksperimentele groepe (Control, EtOH_High en EtOH_Low) bestaan ​​wat in 2 subgroepe verdeel is (18 uur en 5 dae van onttrekking) (N = 6 per subgroep). Die keuse van hierdie twee tydelike punte binne die onttrekkingsperiode was te wyte aan die kinetiese aspekte van FosB en DeltaFosB uitdrukking na 18 uur van onttrekking (soos verduidelik in die besprekingsafdeling), en na 5 dae van onttrekking, gebaseer op vorige studies van ons Lab wat sommige neurochemiese kenmerke met betrekking tot onttrekkingsperiode binne die lokomotoriese sensitiseringsparadigma ondersoek het ( Fallopa et al., 2012 en Escosteguy-Neto et al., 2012). Ten slotte, om korrelasies tussen lokomotoriese sensitisering en FosB/DeltaFosB uitdrukking uit te voer, het ons die telling van lokomotoriese sensitisering vir elke dier bereken deur die formule: telling = (Beweging in die 21ste dag − Voortbeweging in die 1ste dag) *100/Beweging in die 1ste dag.

2.3. Immunohistochemie

Na die onderskeie onttrekkingsperiode is diere diep verdoof met 'n skemerkelkie wat ketamien (75 mg/kg, ip) en xilasien (25 mg/kg, ip) bevat het. Na die verlies van korneale refleks, is hulle transkardiaal geperfuseer met 100 ml fosfaatbufferoplossing 0.1 M [fosfaatgebufferde soutoplossing (PBS)], gevolg deur 100 ml 4% paraformaldehied (PFA). Die breine is onmiddellik na perfusie verwyder, vir 24 uur in PFA gestoor en dan vir 30 uur in 'n 48% sukrose/PBS-oplossing gehou. Seriële koronale snitte (30 μm) is gesny met behulp van 'n vriesmikrotoom en binne 'n anti-vriesoplossing gehou om gebruik te word in die immunohistochemie prosedures deur vryswewende kleuring.

Vir immunohistochemie is 'n konvensionele tegniek van avidien-biotien-immunoperoksidase uitgevoer. Die breinafdelings van alle eksperimentele groepe is in dieselfde lopie ingesluit, wat voorbehandel is met waterstofperoksidase (3%) vir 15 min en dan met PBS gewas vir 30 min. Dan is alle afdelings gedurende 30 min in 'n PBS-BSA .5% blootgestel om niespesifieke reaksies te vermy. Daarna is snitte oornag geïnkubeer met die primêre teenliggaam konyn anti-FosB/DeltaFosB (1:3,000 32519; Sigma Aldrich, St Louis, MO, VSA. no.cat. AV30) in PBS-T oplossing (300 ml PBS, 100 μl Triton) X-2). Vervolgens is snitte vir 1 uur in 'n gebiotinileerde bok anti-konyn IgG sekondêre teenliggaam (600:90; Vector, Burlingame, CA, VSA) by kamertemperatuur geïnkubeer. Die afdelings is dan vir XNUMX minute behandel met avidin-biotien kompleks (Vectastain ABC Standard kit; Vector, Burlingame, CA, VSA) en onderwerp aan nikkel-versterkte diaminobenzidien reaksie. Tussen stappe is die gedeeltes in PBS gespoel en op 'n roteerder geroer. Seksies is op gelatienbedekte skyfies gemonteer, gedroog, gedehidreer en bedek.

Die volgende enkefaliese streke is ontleed: prefrontale korteks [anterior cingulate korteks (Cg1), prelimbiese korteks (PrL) en infralimbiese korteks (IL)], motoriese korteks [primêre (M1) en sekondêre (M2)], dorsale striatum [dorsomediale striatum ( DmS) en dorsolaterale striatum (DlS)], ventrale striatum [nucleus accumbens kern (Acbco) en dop (Acbsh), ventrale pallidum (VP)], hippokampus [piramidale laag van Cornus Ammong 1 en 3 (CA1 en CA3, onderskeidelik), korrellaag van dentate gyrus (DG)], amygdala [basolaterale kern (BlA), en sentrale kern (CeA)], ventromediale kern van hipotalamus (VMH) en ventrale tegmentale area [anterior (VTAA) en posterior (VTAP) gedeeltes] ( Sien Fig. 1). 'n Nikon Eclipse E200-mikroskoop wat aan 'n rekenaar gekoppel is, is gebruik om beelde van elke seksie met 'n × 20-vergroting vas te vang. Die beelde is gestoor as .tiff argiewe vir posterior analise van FosB/DeltaFosB immunoreaktiwiteit. Die immunoreaktiewe selle is getel met behulp van die ImageJ-sagteware (NIH Image, Bethesda, MD, VSA). Die breinstreke is op elke foto afgebaken volgens The Stereotaxic Mouse Brain Atlas (Franklin en Paxinos, 1997). Aangesien fotomikrografieë wat deur die mikroskoop geneem is 2.5 × 10 verteenwoordig3 μm2 in 'n 20 × vergroting, word die kwantifisering van FosB/DeltaFosB-gemerkte selle uitgedruk as die gemiddelde van immunokleurende selle per 2.5 × 103 μm2. Die waardes verkry in die EtOH-groepe is genormaliseer na die Kontrole waardes, en uitgedruk as %. (Beheer = 100%).

  •  
  • Fig. 1.  

    Skematiese voorstelling van die breinstreke wat gemonster is. Skematiese tekening van muise se brein koronale afdelings wat areas aandui wat gemonster is (aangepas uit Franklin en Paxinos, 1997). M1 = primêre motoriese korteks; M2 = sekondêre motoriese korteks, CG1 = anterior cingulate korteks, PrL = prelimbiese korteks, IL = infralimbiese korteks, Acbco = nucleus accumbens kern, Acbsh = nucleus accumbens shell, VP = ventrale pallidum DmS = dorsomediale striatum dorso, DlS = dorsomediale striatum dorso, DlS Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = korrellaag van dentate gyrus, BlA = basolaterale kern van amygdala, CeA = sentrale kern van amygdala, VmH = ventromediale hipotalamus kern, VTAA = anterior gedeelte van ventrale tegmentale area, VTAP = posterior gedeelte van ventrale tegmentale area.

2.4. Statistiese analise

Aanvanklik is Shapiro–Wilk gebruik om die normaliteit van verspreiding van alle veranderlikes te verifieer. Die gedragsresultate is geanaliseer deur eenrigting ANOVA vir herhaalde meting met inagneming van die 5 periodes van lokomotoriese sensitisering: basaal, dag 1, dag 7, dag 14 en dag 21. Die histologiese resultate is geanaliseer deur tweerigting ANOVA, met inagneming van as faktore: periode van onttrekking (18 uur en 5 dae) en eksperimentele groep (Kontrol, EtOH_High en EtOH_Low). Die nieparametriese veranderlikes is in Z-tellings gestandaardiseer om die verspreiding van data te verminder, en is vervolgens toegepas in die tweerigting ANOVA, soos voorheen beskryf. Newman Keuls post-hoc is gebruik wanneer nodig. Laastens het ons moontlike korrelasies tussen FosB/DeltaFosB positiewe selle en die tellings van lokomotoriese sensitisering ondersoek. Hierdie korrelasies is slegs vir die kerne bereken waar statistiese verskille tussen eksperimentele groepe gevind is. Omdat hierdie verskille beperk is tot die 5 dae van onttrekking (Sien resultate-afdeling), verwys die FosB/DeltaFosB-waardes wat in hierdie korrelasies oorweeg word na hierdie spesifieke tydperk van onttrekking. Omdat hierdie verskille beperk is tot die 5 dae van onttrekking (Sien resultate-afdeling), verwys die FosB/DeltaFosB-waardes wat in hierdie korrelasie oorweeg word na hierdie spesifieke tyd van onttrekking. Die beduidendheidsvlak is op 5% gestel (p <0.05).

3. Resultate

3.1. Lokomotoriese sensitisering

ANOVA vir herhaalde maatreëls het beduidende verskille in die groepfaktor opgespoor [F(2,32) = 68.33, p < 0.001], in die tydperk van protokol [F(4,128) = 9.13, p < 0.001], en die interaksie tussen hulle [F(8,128) = 13.34, p < 0.001]. Daar was geen verskille in die basale beweging nie, en beide EtOH-groepe het soortgelyke toenames in voortbeweging gehad in die eerste dag van verkryging, in vergelyking met die Kontrolegroep (p < 0.01). EtOH_High (maar nie EtOH_Low nie) het egter 'n progressiewe toename in lokomotoriese aktiwiteit gedurende die verkrygingsfase (p < 0.01, met betrekking tot Beheer en EtOH_Lae groepe, in die laaste dag van verkryging; p < 0.01 in verhouding tot sy lokomotoriese aktiwiteit in die eerste dag van verkryging) ( Fig. 2). Hierdie data het die resultate van die oorspronklike studie ( Masur en dos Santos, 1988) en uit ons vorige verslag ( Coelhoso et al., 2013) rakende gedragsveranderlikheid in uitgeteelde Switserse muise wat aan etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering onderwerp is.

  • Etanol bevorder 'n geleidelike en robuuste toename van voortbeweging deur chroniese ...
  • Fig. 2.  

    Etanol bevorder 'n geleidelike en robuuste toename van voortbeweging deur chroniese behandeling in EtOH_High, maar nie in EtOH_Low-groep nie. Die data is uitgedruk as gemiddelde ± SEM N = 12 vir beheer, EtOH_Hoog en EtOH_Laag groepe. ⁎⁎P < 0.01 in verhouding tot Kontrolegroep, in dieselfde tydperk. ##P < 0.01 in verhouding tot EtOH_Lae groep, in dieselfde tydperk. ‡‡P < 0.01 in verhouding tot basale lokomotoriese aktiwiteit, binne dieselfde groep. ¥¥P < 0.01 in verhouding tot lokomotoriese aktiwiteit op die 1st dag van verkryging, binne dieselfde groep.

3.2. FosB/DeltaFosB uitdrukking

Die illustratiewe fotomikrografie van FosB/DeltaFosB immunoreaktiwiteit word uitgebeeld in Fig. 3 en die genormaliseerde waardes word in Fig. 4, Fig. 5, Fig. 6 en Fig. 7. Tweerigting ANOVA het beduidende verskille in die M1, M2, DmS, DlS, Acbco, Acbsh, VP en VTA opgespoor (vir nie-genormaliseerde waardes van FosB/DeltaFosB immunoreaktiwiteit en statistiese ontledings van alle strukture, sien Tabel Suppl1 en Tabel 1, onderskeidelik). In die strukture waar statistiese verskille waargeneem kon word, was daar vier verskillende patrone van FosB/DeltaFosB uitdrukking. In die eerste een, waargeneem in M1 en M2, was daar 'n toename in FosB/DeltaFosB uitdrukking in die vyfde dag van etanol onttrekking slegs in die EtOH_High groep (vergeleke met EtOH_High waardes op 18 uur van onttrekking, sowel as, met die Kontrole en EtOH_Lae groepe by 5 dae van onttrekking) (sien Fig. 4). In die tweede patroon, waargeneem in die VTAA, het FosB/DeltaFosB-uitdrukking slegs toegeneem na 5 dae van etanolonttrekking slegs in die EtOH_Low-groep (vergeleke met EtOH_Low-waardes op 18 uur van onttrekking, sowel as, met die Kontrolegroep by 5 dae van onttrekking ) (sien Fig. 5). In die derde patroon, waargeneem in die DmS, Acbco en Acbsh, het FosB/DeltaFosB-uitdrukking toegeneem na 5 dae van etanolonttrekking in beide EtOH_High en EtOH_Low-groepe (in vergelyking met hul onderskeie waardes by 18 uur van onttrekking), maar slegs EtOH_Low-groep verskil van die kontrolegroep (sien Fig. 6). Laastens, in die vierde patroon, waargeneem in DlS en VP, het FosB/DeltaFosB-uitdrukking toegeneem na 5 dae van etanolonttrekking in beide EtOH_High en EtOH_Low-groepe (in vergelyking met hul onderskeie waardes by 18 uur van onttrekking), hoewel hierdie toename statisties meer ekspressief was in EtOH_Low as in EtOH_High-groep, en slegs EtOH_Low-groep het verskil van die kontrolegroep (sien Fig. 7).

  • Illustratiewe fotomikrografie van FosB/DeltaFosB immunoreaktiwiteit by ×20 van ...
  • Fig. 3.  

    Illustratiewe fotomikrografie van FosB/DeltaFosB-immunoreaktiwiteit by × 20 van vergroting. DmS = dorsomediale striatum; DlS = dorsolaterale striatum; Acbco = nucleus accumbens kern; Acbsh = nucleus accumbens dop; VP = ventrale pallidum; VTAa = anterior gedeelte van ventrale tegmentale area.

  •  
  • Fig. 4.  

    Uitdrukking van FosB/DeltaFosB op 18 uur en 5 dae van onttrekkingsperiode in EtOH_High en EtOH_Low groepe in die M1 en M2. Die data is uitgedruk as gemiddelde ± SEM en verteenwoordig die genormaliseerde data volgens die waardes van Kontrolegroepe (stippellyn — beskou as 100%). Grys ​​stawe = 18 uur van etanol onttrekking; Swart stawe = 5 dae van etanol onttrekking. ** P < 0.01 in verhouding tot sy onderskeie kontrolegroep; ## P < 0.01, in verhouding tot sy onderskeie waarde op 18 uur van onttrekking. ‡‡ P < 0.01, in verhouding tot EtOH_Lae groep binne dieselfde tydperk. M1 = primêre motoriese korteks, M2 = sekondêre motoriese korteks.

  • Uitdrukking van FosB/DeltaFosB teen 18 uur en 5 dae van onttrekkingstydperk in EtOH_High ...
  • Fig. 5.  

    Uitdrukking van FosB/DeltaFosB op 18 uur en 5 dae van onttrekkingsperiode in EtOH_High en EtOH_Low groepe in die VTA. Die data is uitgedruk as gemiddelde ± SEM en verteenwoordig die genormaliseerde data volgens die waardes van Kontrolegroepe (stippellyn — beskou as 100%). Grys ​​stawe = 18 uur van etanol onttrekking; Swart stawe = 5 dae van etanol onttrekking. ** P < 0.01 in verhouding tot sy onderskeie kontrolegroep; ## P < 0.01, in verhouding tot sy onderskeie waarde op 18 uur van onttrekking. VTA = ventrale tegmentale area.

  • Uitdrukking van FosB/DeltaFosB teen 18 uur en 5 dae van onttrekkingstydperk in EtOH_High ...
  • Fig. 6.  

    Uitdrukking van FosB/DeltaFosB op 18 uur en 5 dae van onttrekkingsperiode in EtOH_High en EtOH_Low-groepe in die Acbco, Acbsh en DmS. Die data is uitgedruk as gemiddelde ± SEM en verteenwoordig die genormaliseerde data volgens die waardes van Kontrolegroepe (stippellyn — beskou as 100%). Grys ​​stawe = 18 uur van etanol onttrekking; Swart stawe = 5 dae van etanol onttrekking. * P < 0.05 ** P < 0.01, in verhouding tot sy onderskeie Kontrolegroep; ## P < 0.01, in verhouding tot sy onderskeie waarde op 18 uur van onttrekking. Acbco = nucleus accumbens kern, Acbsh = nucleus accumbens dop, DmS = dorsomediale striatum.

  • Uitdrukking van FosB/DeltaFosB teen 18 uur en 5 dae van onttrekkingstydperk in EtOH_High ...
  • Fig. 7.  

    Uitdrukking van FosB/DeltaFosB op 18 uur en 5 dae van onttrekkingsperiode in EtOH_High en EtOH_Low groepe in die VP en DlS. Die data is uitgedruk as gemiddelde ± SEM en verteenwoordig die genormaliseerde data volgens die waardes van Kontrolegroepe (stippellyn — beskou as 100%). Grys ​​stawe = 18 uur van etanol onttrekking; Swart stawe = 5 dae van etanol onttrekking. ** P < 0.01 in verhouding tot sy onderskeie kontrolegroep; # P < 0.05 ## P < 0.01, in verhouding tot sy onderskeie waarde op 18 uur van onttrekking. ‡‡ P < 0.01, in verhouding tot EtOH_Lae groep binne dieselfde tydperk. VP = ventrale pallidum, DlS = dorsolaterale striatum.

  • Tabel 1. 

    Statistiese parameters verkry in die tweerigting ANOVA met betrekking tot die analise van FosB/DeltaFosB uitdrukking.

  • kernPeriode faktorBehandeling faktorPeriode*Behandeling
    M1F(1,30) = 5.61, P = 0.025F(2,30) = 3.21, P = 0.055F(2,30) = 2.61, P = 0.089
    M2F(1,30) = 4.72, P = 0.038F(2,30) = 1.53, P = 0.233F(2,30) = 3.45, P = 0.045
    CG1F(1,30) = 11.08 P = 0.002F(2,30) = 0.95, P = 0.398F(2,30) = 3.31, P = 0.050
    PrLF(1,30) = 8.53, P = 0.007F(2,30) = 1.72, P = 0.197F(2,30) = 2.74, P = 0.081
    ILF(1,30) = 3.77, P = 0.062F(2,30) = 1.91, P = 0.167F(2,30) = 0.98, P = 0.389
    AcbcoF(1,30) = 22.23 P <0.001F(2,30) = 2.63, P = 0.089F(2,30) = 5.68, P = 0.008
    AcbshF(1,30) = 50.44 P <0.001F(2,30) = 4.27, P = 0.023F(2,30) = 13.18, P <0.000
    VPF(1,30) = 38.01 P <0.001F(2,30) = 5.07, P = 0.013F(2,30) = 10.93, P <0.000
    DmSF(1,30) = 28.89 P <0.001F(2,30) = 3.75, P = 0.035F(2,30) = 7.71, P = 0.002
    DlSF(1,30) = 13.58 P = 0.001F(2,30) = 5.41, P = 0.011F(2,30) = 4.72, P = 0.017
    CA1F(1,30) = 4.81, P = 0.036F(2,30) = 7.37, P = 0.002F(2,30) = 1.62, P = 0.215
    CA3F(1,30) = 14.92 P = 0.001F(2,30) = 2.46, P = 0.102F(2,30) = 3.81, P = 0.034
    DGF(1,30) = 0.59, P = 0.447F(2,30) = 1.49, P = 0.241F(2,30) = 0.24, P = 0.785
    BlAF(1,30) = 6.47, P = 0.016F(2,30) = 0.12, P = 0.884F(2,30) = 1.71, P = 0.199
    CEAF(1,30) = 2.55, P = 0.121F(2,30) = 0.22, P = 0.801F(2,30) = 0.71, P = 0.501
    VmHF(1,30) = 6.51, P = 0.016F(2,30) = 0.71, P = 0.503F(2,30) = 1.75, P = 0.192
    VTAAF(1,30) = 9.64, P = 0.004F(2,30) = 3.76, P = 0.035F(2,30) = 2.65, P = 0.087
    VTAPF(1,30) = 6.05, P = 0.021F(2,30) = 1.79, P = 0.184F(2,30) = 1.64, P = 0.211
  • M1 = primêre motoriese korteks; M2 = sekondêre motoriese korteks, CG1 = anterior cingulate korteks, PrL = prelimbiese korteks, IL = infralimbiese korteks, Acbco = nucleus accumbens kern, Acbsh = nucleus accumbens shell, VP = ventrale pallidum DmS = dorsomediale striatum dorso, DlS = dorsomediale striatum dorso, DlS Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = korrellaag van dentate gyrus, BlA = basolaterale kern van amygdala, CeA = sentrale kern van amygdala, VmH = ventromediale hipotalamus kern, VTAA = anterior gedeelte van ventrale tegmentale area; VTAP = posterior gedeelte van sentrale tegmentale area.

Om te bevestig dat veranderinge in FosB/DeltaFosB-uitdrukking te wyte was aan onttrekking, en nie aan etanolblootstelling nie, het ons korrelasies uitgevoer tussen die telling van lokomotoriese sensitisering en die FosB/DeltaFosB immuungemerkte selle op die 5de dag van onttrekking in die kerne hierbo genoem (M1, M2, Acbco, Acbsh, DmS, DlS, VP, VTAA). Soos verwag, was daar geen beduidende korrelasies vir enige van hierdie kerne nie (M1 - r2 = 0.027862, p = 0.987156; M2 — r2 = 0.048538, p = 0.196646; Acbco - r2 = 0.001920, p = 0.799669; Acbsh — r2 = 0.006743, p = 0.633991; DmS — r2 = 0.015880, p = 0.463960; DlS — r2 = 0.023991, p = 0.914182; VP - r2 = 0.002210, p = 0.785443; VTAA — r2 = 0.001482, p = 0.823630).

4. bespreking

Die resultate wat in die huidige studie waargeneem is, dui daarop dat die verhoogde uitdrukking van FosB/DeltaFosB waargeneem in die etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitiseringsparadigma waarskynlik verband hou met onttrekking eerder as met chroniese geneesmiddelblootstelling. Die gedragsveranderlikheid in die ontwikkeling lokomotoriese sensitisering het egter gepaard gegaan met duidelike patrone van FosB/DeltaFosB uitdrukking tydens onttrekking. Die rol van motoriese korteks, ventrale tegmentale area en striatum in die verkryging en uitdrukking van lokomotoriese sensitiseringsparadigma is goed gevestig (Vanderschuren en Pierce, 2010). Verder is deregulering van mesolimbiese pad een van die sentrale neurobiologiese kenmerke van onttrekkingsperiode, tesame met die opkoms van verlengde amigdala (Koob en Le Moal, 2005 en Koob en Le Moal, 2008). Slegs min studies het egter die onttrekkingsperiode van die lokomotoriese sensitiseringsparadigma ondersoek. Ons resultate het interessante veranderinge in FosB/DeltaFosB-uitdrukking in die motoriese korteks, ventrale tegmentale area en striatum binne hierdie tydperk teëgekom.

FosB cDNA kodeer die uitdrukking van 33, 35 en 37 kDa proteïene. Akute stimuliblootstelling lei sterk 33- en diskrete 35- en 37-kDa Fos-proteïeninduksie. As gevolg hiervan, onder akute aktivering, is die oorheersende FosB-uitdrukking verwant aan 33 kDa (McClung et al., 2004 en Nestler, 2008). Daar is nog 'n merkwaardige verskil tussen hierdie proteïene: slegs 35–37 kDa proteïene is hoogs stabiele isovorme. As gevolg van hierdie hoë stabiliteit, versamel hierdie afgekapte vorms van FosB, ook genoem DeltaFosB, in die brein en word hoogs uitgedruk in reaksie op chroniese stimuli, soos psigotropiese geneesmiddelbehandelings, chroniese elektrokonvulsiewe aanvalle en stres (Kelz en Nestler, 2000, Nestler et al., 2001 en McClung et al., 2004). As gevolg hiervan is DeltaFosB beskou as 'n volgehoue ​​molekulêre oorskakeling om vorme van langdurige neurale en gedragsplastisiteit te bemiddel. Interessant genoeg, 'n elegante studie wat muislyne gebruik wat FosB en DeltaFosB differensieel uitdruk, het getoon dat FosB noodsaaklik is vir die verbetering van stresverdraagsaamheid en ook die korrelasie tussen psigostimulant-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering en akkumulasie van DeltaFosB in die striatum neutraliseer (Ohnishi et al., 2011). Daarom kan beide proteïene belangrike rolle speel in die eksperimentele protokol wat in die huidige studie gebruik word. Dit is opmerklik dat die FosB-teenliggaampie wat gebruik word beide FosB en DeltaFosB herken. Aangesien FosB binne 6 uur na 'n akute stimulus tot basislynvlakke verminder (Nestler et al., 2001) en DeltaFosB ophoop na herhaalde stimuli-blootstellings, het ons besluit om die diere 18 uur na die verkrygingsfase op te offer, om moontlike vooroordele van etanolbehandeling oor FosB-uitdrukking te vermy. Nietemin, om tegnies presies te wees, sal ons in die huidige studie verwys as FosB/DeltaFosB uitdrukking. Dit is belangrik om daarop te let dat hierdie strategie in ander studies gebruik is, insluitend dié wat dieselfde primêre teenliggaampie gebruik het wat hier beskryf word (Conversi et al., 2008, Li et al., 2010, Flak et al., 2012 en García-Pérez et al., 2012). As gevolg hiervan, behalwe hierdie eksperimentele beperkings, sal ons ons resultate bespreek met inagneming van die rol van DeltaFosB in neuronale plastisiteit.

Dit is goed vasgestel dat chroniese geneesmiddelblootstelling FosB/DeltaFosB-uitdrukking in verskeie streke van die brein verhoog (Nestler et al., 2001 en Perrotti et al., 2008). Vreemd genoeg, in die huidige studie het nóg etanol-gesensitiseerde nóg etanol-nie-gesensitiseerde muise verskil van chroniese sout-behandelde muise met betrekking tot FosB/DeltaFosB-uitdrukking 18 uur na verkrygingsfase. Verder was daar geen beduidende korrelasies tussen FosB/DeltaFosB uitdrukking en die tellings van lokomotoriese sensitisering nie. Hierdie divergensie kan, ten minste gedeeltelik, verklaar word deur die verskille wat in die eksperimentele protokol gevind is. Byvoorbeeld, met inagneming van die etanolblootstelling, is in twee studies die twee bottels vrye keuse paradigma gebruik in 15 intermitterende drinksessies (Li et al., 2010) of volledige vloeibare dieet wat outomaties gedurende 17 dae toegedien word (waar diere etanol verbruik teen dosisse wat wissel van 8 tot 12 g/kg/dag) (Perrotti et al., 2008). In 'n ander studie, hoewel die skrywers na chroniese behandeling verwys, het die protokol bestaan ​​uit slegs 4 etanolblootstellings (Ryabinin en Wang, 1998). So, protokolle wat elders gebruik word, is heeltemal verskillend van die een wat hier gebruik word, wat bestaan ​​het uit 21 dae se behandeling waar daaglikse etanol-inspuitings deur 'n eksperimenteerder toegedien is. Ten spyte van hierdie verskille, is daar verskeie studies wat intraperitoneale inspuitings behels wat toenames in FosB/DeltaFosB-uitdrukking rapporteer na protokolle van lokomotoriese sensitisering wat deur psigostimulante veroorsaak word (Brenhouse en Stellar, 2006, Conversi et al., 2008 en Vialou et al., 2012) en opioïede (Kaplan et al., 2011). Die protokolle van lokomotoriese sensitisering in daardie studies behels egter baie minder as 21 geneesmiddelblootstellings, en in sommige van hulle is geneesmiddel op 'n intermitterende manier toegedien. In teenstelling hiermee het ons protokol dieselfde behandeling gebruik wat in vorige studies beskryf is wat 21 daaglikse etanol-inspuitings behels het (Masur en dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011 en Abrahão et al., 2012). Daar is bewyse dat alhoewel chroniese kokaïentoediening akkumulasie van DeltaFosB-uitdrukking in die nucleus accumbens bevorder, dit ook verdraagsaamheid vir DeltaFosB-mRNA-induksie in beide ventrale en dorsale striatum bevorder (Larson et al., 2010). Daarom het ons veronderstel dat die gebrek aan verskille in ons eksperimentele groepe in die verkrygingsfase te wyte kan wees aan 'n verdraagsaamheid rakende FosB/DeltaFosB-induksie, aangesien daar in die huidige protokol 'n groter tydperk van verkrygingsfase was in vergelyking met periodes wat vir psigostimulante en opioïede gebruik word. in ander studies.

Studies wat uitklop- en transgeniese muise gebruik het, het getoon dat FosB-mutante muise verbeterde gedragsreaksie op kokaïen het, soos stimulante lokomotoriese effekte en gekondisioneerde plekvoorkeur. Verder is die uitdrukking van beide basale en kokaïen-induseerbare DeltaFosB afwesig in hierdie mutante muise (Hiroi et al., 1997). In teenstelling hiermee toon transgeniese muise met induseerbare ooruitdrukking van DeltaFosB verhoogde sensitiwiteit vir die lonende effekte van kokaïen en morfien (Muschamp et al., 2012). Hierdie resultate het direkte bewys gelewer van noue korrelasie tussen DeltaFosB en die beloningsproses. Benewens herhaalde geneesmiddelblootstelling, verhoog chroniese stres ook DeltaFosB-uitdrukking in kortikolimbiese stroombane (Perrotti et al., 2004). Interessant genoeg is transgeniese muise wat DeltaFosB ooruitdruk minder sensitief vir die pro-depressiewe effekte van kappa-opioïede agonis, wat bekend is om disforie en stresagtige effekte by knaagdiere te veroorsaak (Muschamp et al., 2012). Dus, benewens die beloningsproses, speel DeltaFosB ook 'n deurslaggewende rol in die emosionele aspekte van die verskynsels. In hierdie scenario kan onttrekking ook FosB/DeltaFosB-uitdrukking veroorsaak, aangesien stres 'n sleutelkomponent van geneesmiddelonttrekking is. Hierdie perspektief is in ooreenstemming met ons resultate, want daar was geen korrelasies tussen FosB/DeltaFosB uitdrukking en die tellings van sensitisering nie, en verder is die toename in FosB/DeltaFosB uitdrukking slegs op die vyfde dag van onttrekking waargeneem.

Interessant genoeg, in sommige strukture is FosB/DeltaFosB-verhogings in beide EtOH_High en EtOH_Low-groep gesien, hoewel meer ekspressief in die voormalige groep, wat daarop dui dat hierdie verhogings verskillende funksionele gevolge kan hê, volgens hul intensiteit. Hierdie hipotese kan verklaar word deur verskeie afsonderlike funksionele rolle van FosB/DeltaFosB. Byvoorbeeld, rotte wat chronies aan kokaïen blootgestel is, het DeltaFosB-uitdrukking in die nucleus accumbens verhoog tydens die onttrekkingsperiode, 'n effek wat positief gekorreleer is met kokaïenvoorkeur, maar negatief met nuwigheidsvoorkeur. Verder verhoog stres tydens onttrekking die gedragsreaksie op psigostimulante deur DeltaFosB uitdrukking in kortikolimbiese neurone te verhoog (Nikulina et al., 2012). Dus, DeltaFosB kan die wanregulering van hedoniese verwerking voorspel wat plaasvind tydens uitgerekte onttrekking (Marttila et al., 2007). Aan die ander kant hou beide veerkragtigheid teen stres en antidepressante reaksies verband met hoër DeltaFosB uitdrukking in striatum (Vialou et al., 2010). Daarom spekuleer ons dat verhoogde FosB/DeltaFosB op striatum in die EtOH_High die lonende effekte van etanol kon verbeter het, wat 'n hoër vatbaarheid vir daaropvolgende geneesmiddelblootstellings verleen het. Aan die ander kant, kon 'n meer intense toename in FosB/DeltaFosB gesien in die EtOH_Low-groep die sensitiwiteit vir beide disforie en stres-effekte verminder het, die negatiewe versterkingseffekte van daaropvolgende geneesmiddelblootstelling verminder het en, as gevolg daarvan, 'n hoër weerstand in hierdie groep. Interessant genoeg het hierdie paradoks 'n neurochemiese basis gehad. Byvoorbeeld, transgeniese muise wat FosB in medium ruggraat GABAergiese neurone van nucleus accumbens ooruitdruk, het verhoogde vlakke van beide mu- en kappa-opioïde reseptore gehad (Sim-Selley et al., 2011), en daardie reseptore verhoog en inhibeer onderskeidelik mesolimbiese toon (Manzanares et al., 1991 en Devine et al., 1993). Verder kan die seltipe uitdrukking ook die funksionele gevolge van die verhoogde FosB/DeltaFosB drasties verander. In 'n elegante studie met muise wat DeltaFosB ooruitdruk in D1- of D2-uitdrukking neurone in die nucleus accumbens het aan die lig gebring dat DeltaFosB in die D1- (maar nie in die D2-) neurone gedragsreaksies op kokaïen verhoog (Grueter et al., 2013).

Vreemd genoeg, met betrekking tot die motoriese korteks, was daar 'n toename in FosB/DeltaFosB uitdrukking slegs in EtOH_High groep, en dit was beperk tot die 5de dag van onttrekking. Die gebrek aan toename na 18 uur van onttrekking kan verklaar word deur 'n moontlike toleransiemeganisme in die FosB/DeltaFosB uitdrukking in hierdie streek na chroniese etanolblootstelling. Verder dui ons resultate daarop dat daar aktiewe neurochemiese veranderinge in die motoriese korteks tydens onttrekkingsperiode is, ten spyte van die feit dat die diere nie gedurende hierdie tydperk gemanipuleer is nie. Dit is interessant, want hierdie plastisiteit kan 'n rol speel, ten minste gedeeltelik, in die handhawing van lokomotoriese sensitisering. Alhoewel die volgehoue ​​hiperbeweging na 'n paar dae van onttrekking nie hier bestudeer is nie, is daar verskeie studies, insluitend voriges van ons Lab, wat toon dat sensitiewe muise (maar nie nie-gesensitiseer nie) voortbeweging verbeter het wanneer hulle met etanol uitgedaag is na 'n gegewe onttrekkingsperiode (Masur en dos Santos, 1988, Souza-Formigoni et al., 1999, Quadros et al., 2002a, Quadros et al., 2002b, Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012, Fallopa et al., 2012 en Coelhoso et al., 2013).

Ten slotte is dit opmerklik dat slegs die EtOH_Low-groep 'n verhoogde FosB/DeltaFosB-uitdrukking in die anterior (maar nie posterior) gedeelte van die ventrale tegmentale area getoon het. Hierdie gedeeltes het duidelike projeksies en neurochemiese profiele, en hul deelname aan die beloningsproses hang af van verskeie faktore (Ikemoto, 2007). Rotte se selftoediening van etanol hou byvoorbeeld verband met die posterior, maar nie met die ventrale gedeelte van die ventrale tegmentale area nie (Rodd-Henricks et al., 2000 en Rodd et al., 2004). Verder speel die endokannabinoïde stelsel, sowel as GABA-A, dopaminerge D1-D3 en serotoniergiese 5HT3 reseptore, 'n belangrike rol in etanol soek gedrag (Linsenbardt en Boehm, 2009, Rodd et al., 2010, Melón en Boehm, 2011b en Hauser et al., 2011). GABA-B in die anterior gedeelte van ventrale tegmentale area is egter belangrik in terme van die lonende (Moore en Boehm, 2009) en stimulante lokomotoriese effekte (Boehm et al., 2002) van etanol. Verder is cholinergiese nikotienreseptore in die anterior gedeelte betrokke by die verhoogde akkumbale dopamienvlakke wat deur etanol (Ericson et al., 2008). Daarom, ongeag die duidelike profiel van hierdie gedeeltes, is dit moontlik dat veranderinge wat in die EtOH_Low-groep in die anterior gedeeltes gesien word, verband hou met die beloningsproses. Chroniese kokaïen, maar nie chroniese morfien of chroniese stresblootstelling nie, verhoog DeltaFosB in ventrale tegmentale area, spesifiek in 'n gamma-aminobottersuur (GABA) selpopulasie (Perrotti et al., 2005). Hierdie feit kan die normale vlakke van FosB/DeltaFosB deur onttrekking wat in die ventrale tegmentale area van EtOH_High-muise voorkom, verklaar, ongeag die vermeende hoë stres-ervaring in hierdie tydperk. Verder bevestig hierdie data, ten minste gedeeltelik, die hipotese dat die toename van FosB/DeltaFosB-uitdrukking gedurende onttrekking in EtOH_Low as 'n aanpasbare reaksie gekarakteriseer kan word.

Individuele verskille wat tydens die oorgang van ontspanningsgebruik na dwelmverslawing waargeneem is, is merkwaardig (Flagel et al., 2009, George en Koob, 2010 en Swendsen en Le Moal, 2011). As gevolg hiervan is dit noodsaaklik om die neurobiologiese kenmerke wat verband hou met individuele veranderlikheid te bestudeer. Gedragsensitisering is 'n diermodel wat algemeen gebruik word om die neurobiologiese kenmerke van dwelmverslawing te ondersoek. Die basis van hierdie model is dat die subjektiewe effekte van die middels toeneem met hul herhaalde blootstelling. Sodra dit verkry is, is lokomotoriese sensitiwiteit langdurig en staan ​​dit in direkte temporele verband met morfologiese en neurochemiese veranderinge in die mesolimbiese pad en verskeie enkefaliese kerne wat verband hou met emosionaliteit en motoriese gedrag (Robinson en Kolb, 1999 en Vanderschuren en Pierce, 2010). ’n Pionierstudie uitgevoer deur Masur en dos Santos (1988) gedemonstreer dat daar 'n groot gedragsveranderlikheid in uitgeteelde Switserse muise is met betrekking tot etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering. Van toe af het ander studies 'n belangrike korrelasie tussen neurochemiese kenmerke en gedragsveranderlikheid getoon, hoofsaaklik dié wat verband hou met die dopaminerge (Abrahão et al., 2011, Abrahão et al., 2012 en Souza-Formigoni et al., 1999) en die glutamatergiese stelsels (Quadros et al., 2002a en Quadros et al., 2002b). Verder het 'n vorige studie van ons laboratorium met behulp van die etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitiseringsparadigma getoon dat sensitiewe (maar nie nie-gesensitiseerde) muise 'n merkwaardige toename op cannabinoïde reseptor tipe 1 (CB1R) gedurende die onttrekkingsperiode (Coelhoso et al., 2013). Hier het ons verskillende patrone van FosB/DeltaFosB uitdrukking tydens onttrekking tussen EtOH_High en EtOH_Low groepe geïdentifiseer.

Om op te som, gedragsveranderlikheid wat in die verkrygingsfase van etanol-geïnduseerde lokomotoriese sensitisering waargeneem word, gaan gepaard met duidelike neuronale plastisiteit tydens onttrekkingsperiode. Interessant genoeg dui ons resultate daarop dat verskillende patrone van FosB/DeltaFosB-uitdrukking wat in gesensitiseerde en nie-gesensitiseerde muise opgespoor word, meer verwant is aan onttrekkingsperiode eerder as aan die chroniese geneesmiddelblootstelling, waarskynlik as gevolg van die verdraagsaamheid van dwelm-geïnduseerde FosB/DeltaFosB-transkripsie.

Die volgende is die aanvullende data wat verband hou met hierdie artikel.

Erkennings

RFP en CCC het meestergenootskap van onderskeidelik CAPES en FAPESP ontvang. CTC, LEM, DXS en JGSJ word toegestaan ​​deur FAPESP en CNPq.

Verwysings

  •  
  • Ooreenstemmende skrywer by: Rua Cesário Mota Jr, 61, 12 andar, São Paulo, SP 01221-020, Brasilië. Tel./faks: + 55 11 33312008.
  • 1
  • Hierdie outeurs het eweneens aan die huidige studie deelgeneem.

Kopiereg © 2013 Elsevier Inc.