Perinatale Westerse Dieet Verbruik lei tot 'n dieet Plasticiteit en GABAergiese Fenotipe Veranderinge binne Hypothalamus en Beloning Pathway vanaf geboorte tot seksuele volwassenheid in rat (2017)

. 2017; 8: 216.

Gepubliseer aanlyn 2017 Aug 29. doi:  10.3389 / fendo.2017.00216

PMCID: PMC5581815

Abstract

Perinatale moederverbruik van energiedigte kos verhoog die risiko van vetsug by kinders. Dit word geassosieer met 'n oorverbruik van smaaklike voedsel wat verbruik word vir sy hedoniese eienskap. Die onderliggende meganisme wat perinatale moederdieet en nageslagvoorkeur vir vet verbind, word steeds swak verstaan. In hierdie studie poog ons om die invloed van moederlike hoë-vet/hoë-suiker dieetvoeding [westerse dieet (WD)] tydens swangerskap en laktasie te bestudeer op die beloningsweë wat voeding in die rotnageslag beheer vanaf geboorte tot seksuele volwassenheid. Ons het 'n longitudinale opvolg van WD- en Kontrole-nageslag uitgevoer op drie kritieke tydperke (kinderjare, adolessensie en volwassenheid) en fokus op die ondersoek van die invloed van perinatale blootstelling aan smaaklike dieet op (i) vetvoorkeur, (ii) geenuitdrukkingprofiel , en (iii) neuroanatomiese/argitektoniese veranderinge van die mesolimbiese dopaminergiese netwerke. Ons het getoon dat WD-voeding beperk tot die perinatale periode 'n duidelike langdurige invloed op die organisasie van homeostatiese en hedoniese breinkringe het, maar nie op vetvoorkeur nie. Ons het 'n tydperk spesifieke evolusie van die voorkeur vir vet gedemonstreer wat ons met spesifieke brein molekulêre handtekeninge gekorreleer het. In nageslag van WD-gevoede moeders, het ons tydens die kinderjare die bestaan ​​van vetvoorkeur waargeneem wat verband hou met 'n hoër uitdrukking van sleutelgeen betrokke by die dopamien (DA) stelsels; op adolessensie, 'n hoë-vet voorkeur vir beide groepe, progressief verminder gedurende die 3 dae toets vir die WD groep en geassosieer met 'n verminderde uitdrukking van sleutel geen betrokke by die DA stelsels vir die WD groep wat 'n kompenserende meganisme kan voorstel om hulle te beskerm van verdere hoë-vet blootstelling; en uiteindelik by volwassenheid, 'n voorkeur vir vet wat identies was aan beheerrotte, maar geassosieer met diepgaande verandering in sleutelgene wat betrokke is by die γ-aminobottersuurnetwerk, serotonienreseptore en polisialsuur-NCAM-afhanklike hermodellering van die hipotalamus. In geheel toon hierdie data dat moederlike WD, beperk tot die perinatale tydperk, geen volgehoue ​​impak op energiehomeostase en vetvoorkeur later in die lewe het nie, alhoewel 'n sterk hermodellering van die hipotalamus-homeostatiese en beloningsweg betrokke by eetgedrag plaasgevind het. Verdere funksionele eksperimente sal nodig wees om die relevansie van hierdie stroombane-hermodellering te verstaan.

sleutelwoorde: beloning, DOHaD, voedselvoorkeure, voeding, γ-aminobottersuur, TaqMan lae-digtheid skikking

Inleiding

Vroeë lewe omgewing en gebeure word nou goed erken om by te dra tot gesondheid en siekte geneigdheid later in die lewe (-). Die konsep van metaboliese inprenting is voorgestel om te beskryf hoe veranderinge in die voedings- en hormonale omgewing gedurende die perinatale periode die nageslag kan vat vir vetsug en sy gepaardgaande patologieë later. 'n Belangrike kwessie van ons westelike lewenswyse is oorvoeding as gevolg van die verbruik van energiedigte voedsel. Inderdaad, individue wat aan moederlike inname van hierdie tipe voedsel blootgestel word, het 'n groter risiko om vetsug en metaboliese sindroom te ontwikkel (, ). Baie studies het getoon dat moederlike hoë-vet dieet (HFD) deur swangerskap en soog 'n langtermyn effek op die metabolisme van die nageslag het (-). Benewens weë wat betrokke is by metaboliese regulering, speel breinbeloningstelsels ook 'n belangrike rol in voedingsgedrag (, ). Mesolimbiese dopamien (DA) neurotransmissie, intensief bestudeer in die konteks van beloning en verslawing, word verander in dieet-geïnduseerde vetsug in beide mense (-) en diere (-). DA-projeksies ontwikkel, vir 'n groot deel, postnataal (), en daarom kan hul ontwikkeling deur vroeë dieet beïnvloed word. Oor die afgelope paar jaar het eksperimente op knaagdiere bewys dat moederlike HFD-inname hedoniese voeding in nageslag verbeter (, ). Alhoewel hierdie waarneming 'n paar veranderinge in die DA-stelselfunksie behels het (-), beperkte data is beskikbaar rakende die ontogenie en die hermodellering van die beloningspaaie gedurende die vroeë lewe (). Verder is nie gedokumenteer of en hoe die nie-DA-seindeel van die beloningstelsel soos die GABA (γ-aminobotersuur)-stelsel deur die perinatale voedingsstres beïnvloed kan word. Inderdaad, GABA neurone blyk 'n sleutelrol te speel in beloning en afkeer. Ventrale tegmentale area (VTA) GABA neurone ontvang soortgelyke patroon van insette van verskillende breinareas (), en onlangse optogenetiese-gebaseerde gedragstudies beklemtoon die hoofrol van VTA GABA in gekondisioneerde plekaversie () en in beloning volkome gedrag (). Nucleus accumbens (NAc) word hoofsaaklik gevorm deur die projeksie van die GABAergiese medium stekelrige neurone en dien as 'n limbiese-motoriese koppelvlak wat seine wat uit die limbiese sisteem spruit, integreer en dit in aksie verander via uitset na die ventrale pallidum (VP) en ander motoriese effektore (). En laastens, die hipotalamus wat gevorm word deur talle GABA-verbindings in LH () en boogvormige kern, integreer seine van honger en versadiging ().

Hierdie studie het ten doel om die invloed van moederlike Westerse dieet (WD) inname in die rotnageslag vanaf geboorte tot seksuele volwassenheid (i) op ​​vetvoorkeur (ii) op ​​geenuitdrukkingprofiel van die DA-stelsel, die GABAergiese stelsel en die plastisiteit van hipotalamus te identifiseer , en (iii) oor die neuroanatomiese/argitektoniese veranderinge van die mesolimbiese dopaminergiese netwerke vir dieselfde tydperk. Ons het dus op 'n longitudinale studie (van speen, P25, tot geslagsrypheid, P45 en volwassenheid, P95) die effek van maternale WD op liggaamsgewiggroei en vetweefselontwikkeling van nageslag wat gereeld na speen gehou word, beoordeel. Terselfdertyd het ons 'n vetvoorkeurtoets uitgevoer, gevolg deur 'n toegewyde transkriptomiese analise en daaropvolgende hoofkomponent-analise (PCA) van 'n seleksie van merkers vir voedselinname, keuse en motivering regulatoriese stelsels. Ons resultate het die onlangse resultate wat op voedingsprogrammering van die DA-stelsel gefokus het, aansienlik verryk.

Materiaal en metodes

Etiekverklaring

Alle eksperimente is uitgevoer in ooreenstemming met die riglyne van die plaaslike dierewelsynskomitee, die EU (direktief 2010/63/EU), die Institut National de la Recherche Agronomique (Parys, Frankryk), en die Franse veeartsenykundige departement (A44276). Die eksperimentele protokol is deur die institusionele etiese komitee goedgekeur en geregistreer onder verwysing APAFIS 8666. Alle voorsorgmaatreëls is getref om stres te verminder en die aantal diere wat in elke reeks eksperimente gebruik word.

Diere en dieet

Diere is in 'n 12 uur/12 uur lig/donker siklus in 'n 22 ± 2°C met kos en water onderhou ad libitum. Twee-en-dertig vroulike Sprague-Dawley-rotte (liggaamsgewig: 240–290 g) op dragtigheidsdag 1 (G1) is direk by Janvier (Le Genest Saint Isle, Frankryk) gekoop. Hulle is individueel gehuisves en óf 'n kontroledieet (CD) (5% beesvet en 0% sukrose) vir 16 van hulle óf 'n WD (21% beesvet en 30% sukrose) vir 16 van hulle gevoer tydens die dragtigheid en laktasieperiodes. (sien tabel Tabel 1:1: dieetsamestelling in persentasie kcal van ABdiet Woerden, Nederland). By geboorte is werpselgrootte aangepas na agt kleintjies per werpsel met 'n 1:1 mannetjie tot vroulike verhouding. Ons het 12 uit 16 moeders aangehou met 'n werpsel wat saamgestel is uit 4 mannetjies en 4 wyfies vir elke groep. Met speen (P21) is die nageslag gebore uit CD- en WD-moeders tot aan die einde van die eksperiment op standaard chow gehou (Figure (Figure1A,B).1A,B). Pup liggaamsgewig is aangeteken by geboorte en daarna elke dag om 10:00 vm. tot P21 (speen). Na speen en tot aan die einde van die eksperiment is rotte elke 3 dae geweeg. Ons bied slegs data oor manlike nageslag aan. Vroulike rotte is vir 'n ander studie gebruik (Figuur (Figure11).

Tabel 1 

Dieetsamestelling in persentasie kcal van elke komponent van die moederlike diëte toegedien tydens swangerskap en laktasie en standaarddieet vir nageslag.
Figuur 1 

Eksperimentele ontwerp. (A) Skematiese diagram van die studie-ontwerp. Twee-en-dertig vroulike SPD-rotte op dragtigheidsdag 1 (G1) is óf 'n kontroledieet vir 16 van hulle óf 'n Westerse dieet vir die ander tydens dragtigheid en laktasieperiode gevoer. By speen, die nageslag ...

Gedrag (Twee-bottelkeusetoets)

Drie kritieke ontwikkelingsperiodes is bestudeer (P21 tot P25: jeugdige, P41 tot P45: adolessensie en P91 tot P95: jong volwassene). 24 reuntjies (n = 12 per groep) is ewekansig gekies en in 'n individuele hok geplaas om 'n twee-bottel keuse vrye toets uit te voer (Figure (Figure1A,B)1A,B) (-). Hierdie toets is gebruik om spesifiek die aantreklikheid teenoor vetsmaak te bestudeer deur dit te dissosieer van die soet smaak en soveel as moontlik van die metaboliese effek van kalorieë-inname. Inderdaad, 1% mielie-olie oplossing verbruik word geassosieer met 'n inname van slegs 0.09 kcal/ml. Na een dag se gewoonte aan die teenwoordigheid van twee bottels, is die toets oor 2 dae by P25 en oor 4 dae by P41 en P91 uitgevoer (Figuur (Figure1A) .1A). In besonderhede, met speen (P21), is 24 kleintjies individueel vir 2 dae gehuisves (Figuur (Figuur1A):1A): dag 1, gewenningsfase, dag 2, rotte is 'n vrye keuse van twee bottels gegee tussen 'n emulsie van 1% mielieolie in 0.3% xantangom (Sigma Aldrich, St. Quentin Fallavier, Frankryk) en xantangomoplossing ( 0.3%). By P41 en P91 is 24 kleintjies gebruik en twee-bottel vrye keuse is vir drie opeenvolgende dae voorgestel. Die verbruik van xantangomoplossing en smaakoplossing (mielieolie 1%) is daagliks om 11:00 vm. vir 3 dae aangeteken (P45 en P95). Die posisie van die twee bottels is daagliks omgekeer om posisievoorkeurvooroordeel te voorkom. Die vetvoorkeurtelling is bereken as die verhouding van "vetoplossing" volume verbruik tot die totale volume verbruik in 24 uur. Alle rotte is gedurende die gedragstoets onder standaard chow-dieet gehou.

Weefselversameling en bloedmonsters

Die dag na die laaste dag van die twee-bottel vrye keuse toets, die helfte van die rotte (n = 6 per groep) is vinnig doodgemaak tussen 09:00 en 12:00 vm. deur CO2 inaseming. Bloed is in buise met EDTA (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, Frankryk) versamel en teen 2,500 XNUMX gesentrifugeer g vir 15 min by 4°C. Plasma is by -20°C gevries. Organe en individuele retroperitoneale vetdepot is gedissekteer en geweeg. Die brein is vinnig verwyder en in 'n breinmatriks geplaas (WPI, Sarasota, FL, VSA rot 300–600 g). Eers is die hipotalamus gedissekteer [volgens Paxinos se atlas-koördinate: -1.0 tot -4.5 mm vanaf Bregma ()] dan, vir elke rot, is twee koronale snye van 2 mm dikte op die vlak van NAc en nog een op die vlak van die VTA verkry. Monsters van die regter en die linker NAc en die regter en die linker VTA (vier monsters in totaal per dier) is vinnig verkry met behulp van twee verskillende biopsie pons (Stiefel Laboratories, Nanterre, Frankryk) (deursnee van 4 mm vir die NAc en 3 mm vir die ventrale middelbrein). Die monsters is gevries in vloeibare stikstof gebreek en by -80°C gestoor vir die daaropvolgende bepaling van geenuitdrukking deur TaqMan laedigtheidskikking (TLDA).

Die ander rotte (n = 6 per groep) is diep verdoof met pentobarbital (150 mg/kg ip) en geperfuseer met 'n transkardiale fisiologiese soutperfusie gevolg deur yskoue 4% paraformaldehied in fosfaatbuffer (PB), pH 7.4. Die breine is vinnig verwyder, gedompel in dieselfde fiksasiemiddel vir 1 uur by 4°C, en uiteindelik gestoor in 25% PB sukrose vir 24-48 uur. Die breine is dan in isopentaan by -60°C gevries, en uiteindelik by -80°C gestoor tot gebruik. Die NAc, hipotalamus en VTA is in 20 µm seriële koronale snitte gesny met 'n kryostaat (Microm, Microtech, Francheville, Frankryk). Twee of drie reekse van 10 glasskyfies wat 4-6 afdelings bevat is vir elke breinarea uitgevoer. Vir elke glasskyfie is die reeksgedeeltes 200 µm gespasieer (Figuur (Figure66).

Figuur 6 

Kwantifisering van TH/NeuN-positiewe neurone in ventrale tegmentale area (VTA) en TH-digtheidvesels in nucleus accumbens (NAc) vanaf speen tot volwassenheid in nageslag van Westerse dieet (WD) of beheerdieet (CD) gevoer moeders. (A) Skema van Paxinos en Watson's ...

Biochemiese plasma-ontledings

EDTA-plasma wat op P25-, P45- en P95-rotte versamel is, is gebruik om plasmaglukose, NEFA (nie-veresterde vetsure), insulien en leptien te meet. Glukose en NEFA is gemeet met behulp van kolorimetriese ensiematiese reaksies met spesifieke stelle (glukose en NEFA PAP 150 stelle, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, Frankryk). Hormone is getoets met spesifieke ELISA-stelle volgens die vervaardiger se instruksies vir insulien en leptien (rat/muis-insulien-ELISA-stel, rot-leptien-ELISA-stel, Linco Research, St. Charles, MO, VSA).

immunohistochemie

Glasskyfies wat seriële VTA- en NAc-afdelings bevat, is eers vir 3–4 uur geblokkeer en dan oornag by 4°C geïnkubeer met 'n mengsel van die volgende teenliggaampies: muis anti-NeuN (1:500; IgM; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, VSA) en konyn-anti-TH (1:1,000 488; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, VSA). Na inkubasie met primêre teenliggaampies en daaropvolgende was met PB, is snitte in 'n mengsel van sekondêre teenliggaampies geïnkubeer: Alexa 568-gekonjugeerde donkie-anti-muis-IgM en Alexa 1-gekonjugeerde donkie-anti-konyn IgG (500:2; Invitrogen, ThermoFisherham Scientific, Waltham Scientific, Wales). , MA, VSA) vir XNUMX uur. Seksies is in superfrost plus goue skyfies gemonteer (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, VSA), luggedroog, en bedek met ProLong™ Gold antifade reagens (Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, VSA).

TH Neurone tel in VTA

Vir elke rot is TH-positiewe selle getel soos voorheen beskryf () op drie verskillende rostrocaudale vlakke van die VTA: op die vlak van die uitgang van die derde senuwee (afstand relatief tot Bregma: -5.3 mm), 200 µm rostraal en 200 µm caudaal na hierdie vlak (Figure (Figure6A).6A). Vir die linker- en regterkant is 'n gedigitaliseerde prentjie wat die hele VTA van die bykomende terminale kanaal mediaal tot by die laterale grens van die mesencephalon bevat, verkry met behulp van ×40 vergroting van 'n NanoZoomer-XR Digitale skyfieskandeerder C12000 (Hamamatsu, Japan). 'n Lyn is om die omtrek van die VTA vir elke afdeling getrek. Die grense is gekies deur die vorm van die selle te ondersoek en na die Paxinos- en Watson-atlas te verwys. 'n Dopaminergiese neuron is gedefinieer as 'n NeuN(+)/TH(+) immuunreaktiewe selliggaam met duidelik sigbare kern. Deur die NIH Image J-sagteware (selteller-inprop) te gebruik, is die NeuN(+)/TH(+)-selle getel deur twee verskillende persone met geen kennis van die dieregroepe nie. Splitsel-telfoute is reggestel deur die formule van Abercrombie (), waar N = n[t/(t + d)] (N = totale aantal selle; n = aantal selle getel; t = snit dikte; en d = sel deursnee), en hierdie korreksiefaktor was 0.65. Data word uitgedruk as gemiddelde [NeuN(+)/TH(+) in linker en regter VTA] ± SEM.

TH Veseldigtheid in NAc

Die TH-proteïeninhoud in die dopaminerge senuwee-terminale van die NAc is beraam deur anatomiese densitometriese analise van TH-immuno-gemerkte afdelings. Die TH-veseldigtheid is op drie arbitrêre vlakke langs die rostrocaudale as van die NAc gekwantifiseer (Bregma 2.20, 1.70 en 1.20 mm) (Figuur) (Figure6B) .6B). Kortliks, gedigitaliseerde prentjie wat die hele striatum en NAc uitmaak, verkry met behulp van ×40 vergroting van 'n NanoZoomer-XR Digitale skyfieskandeerder C12000 (Hamamatsu, Japan) verkry is. Vir 'n gegewe NAc is 'n lyn om die hele kern getrek om die gebied van optiese digtheid (OD) meting te definieer (Figuur (Figure6B) .6B). Die verkry waarde is genormaliseer met die OD waarde gemeet vanaf 'n sirkelvormige sone geteken op die corpus callosum ('n streek wat nie vir TH immunochemie gekleur is nie) van dieselfde seksie met behulp van NIH Image J sagteware. Data word uitgedruk as 'n gemiddelde van die OD-verhouding (OD-waarde in NAc/OD-waarde in corpus callosum van die drie afdelings) ± SEM.

Gene Expression deur TLDA en TaqMan

RNA is geïsoleer uit snap-bevrore NAc, VTA-verrykte monsters en hipotalamus, met behulp van die NucleoSpin RNA/proteïen kit (Macherey-Nagel, Hoerdt, Frankryk). Totale RNA is voorgelê aan DNase vertering volgens die vervaardiger se instruksies, die hoeveelheid is beraam deur die 260/280 nm UV absorpsie, en die kwaliteit is geassesseer met behulp van die Agilent 2100 Bioanalyzer System, die RNA integriteit nommer (RIN) is dan bereken. Monsters met 'n RIN onder 8 is weggegooi. Een mikrogram van totale RNA is omgekeerd getranskribeer in cDNA met behulp van 'n hoë kapasiteit RT kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, VSA) in 'n totale volume van 10 µl.

Soos voorheen beskryf (), is die TLDA 'n 384-put mikro-fluïdiese kaart waarop 384 gelyktydige intydse PCR's uitgevoer kan word (Applied Biosystems, Foster City, CA, VSA). Ons het 'n spesifiek ontwerpte TLDA gebruik wat gemaak is om verskillende geenfamilies te dek wat relevant is vir plastisiteit en regulering van voedselinname. Elke pasgemaakte kaart is gekonfigureer as 2 × 4-monster laailyne wat 2 × 48 reaksiekamers bevat (verwysing: 96a). 'n 92-gene stel (Tabel S1 in Aanvullende Materiaal) en vier huishoudelike gene (18S, Gapdh, Polr2a en Ppia) is bestudeer. Intydse PCR is uitgevoer met behulp van Life Technologies TaqMan-reagense en uitgevoer op ABI Prism 7900HT volgorde opsporingstelsel (Applied Biosystems, Foster City, CA, VSA). Rou fluoressensie data is ingesamel deur die PCR met behulp van die SDS 2.3 sagteware (Applied Biosystems, Foster City, CA, VSA), wat verder drempelsiklusse Ct gegenereer het met outomatiese bepaling van beide basislyn en drempel. Na filtering met behulp van ThermoFisher cloud App (ThermoFisher, VSA) om afwykende PCR-lopies te onderskei, was die toetse per monster n = 6 (n = 5 vir WD-groep by P25). Die data is dan ontleed met ThermoFisher Cloud App (ThermoFisher, VSA) vir relatiewe kwantifisering. Relatiewe kwantifisering van geenuitdrukking (RQ) is gebaseer op die vergelykende Ct-metode deur gebruik te maak van die vergelyking RQ = 2−ΔΔCt, waar ΔΔCt vir een geen-teiken sy eie Ct-variasie was, afgetrek van 'n kalibratormonster en genormaliseer met 'n endogene kontrole. Ons het presies die mees stabiele huishoudingsgeen bepaal deur gebruik te maak van geNorm-algoritme (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, VSA). Onder die vier huishoudelike gene is Gapdh gedefinieer as die endogene beheer vir NAc en hipotalamus, en Ppia vir VTA en dit was waar vir alle monsters van die drie tydperke wat ontleed is. Grafiese voorstelling van gene-uitdrukking is met die hand ontwerp om een ​​kleur toe te ken vir 'n 10% inkrement van geenuitdrukking relatief tot die CD-groep. Beduidende variasie, met behulp van nie-parametriese Wilcoxon-tekenrangtoets, is met 'n asterisk opgemerk.

Statistiese analise

Resultate word uitgedruk as gemiddelde ± SEM in tabelle en figure. Mann-Whitney nie-parametriese toets is gebruik vir die ontleding van Liggaamsgewig op verskillende tydpunte, vetvoorkeure en OD-verhouding verkry uit die immunohistochemie.

Om die belangrikheid van die 3 dae vetvoorkeure te bepaal, het ons 'n kolom statistieke analise vir elke dag uitgevoer. Vir elke groep is verbruik van vetoplossing en kontrole-oplossing getoets deur die nie-parametriese Wilcoxon se getekende-rang-toets te gebruik. Ons het die voorkeur gemiddelde waarde vergelyk met die hipotetiese waarde van 50% (rooi stippellyn). Beduidende variasie is opgemerk met 'n rooi asterisk. Ons het dieselfde toets vir die qPCR RQ-waarde-analise gebruik; ons het die gemiddelde RQ-waarde vergelyk met die hipotetiese waarde van 1. Beduidende variasie is met 'n asterisk opgemerk (Figuur (Figure44).

Figuur 4 

Relatiewe geenuitdrukking in nucleus accumbens (NAc), ventrale tegmentale area (VTA) en hipotalami van perinatale-westerse dieet gevoer rotte en perinatale beheer dieet gevoer rotte op drie tydperke. Gelyktydige kwantifisering van die uitdrukking van gene in ...

Vir die plasmamonsteranalise het ons 'n nie-parametriese Mann en Whitney toets uitgevoer. Die aantal TH-positiewe selle is ontleed met 'n tweerigting ANOVA en die p waarde is bereken. As gevolg van die veelheid van die geïmplementeerde toetse, 'n Bonferroni post hoc regstelling is slegs toegepas nadat hierdie toets gevolg is. Statistiese analise is uitgevoer met behulp van Prism 6.0 sagteware (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, VSA).

'n PCA sonder toesig is eers uitgevoer op 130 parameters (TLDA, gedrag en plasmadata) op verskillende tydstip vir elke breinbiopsiestoot (VTA, NAc en hipotalamus) om die algemene struktuur van die datastel te visualiseer (dws drie globale PCA per tydpunt). PCA kan gedefinieer word as die ortogonale projeksie van die data op 'n laer dimensionele lineêre ruimte, sodat die variansie van die geprojekteerde data in die subruimte gemaksimeer word. Ons het eers gene uitgefiltreer wat nie uitgedruk of effens uitgedruk word nie (Figuur (Figure5) .5). Waardes vir nageslag van CD gevoer moeders en van WD gevoer moeders het in verskillende kleure in individuele PCA plotte verskyn om te visualiseer of hierdie twee eksperimentele groepe goed geskei is deur die PCA komponente wat nie onder toesig is nie. Hierdie analise skei die groepe gene wat differensieel uitgedruk word tussen die twee groepe nageslag. Vervolgens is gefokusde PCA's op verskillende groepe mRNA-merkers gedoen: plastisiteit (seladhesie, sitoskelet, neurotrofiese faktor, sinaptogenese en transkripsieregulerende), DA-weg, GABAergiese weg, epigenetiese modulators (histon-deasetilase en histoon-asetieltransferase). Hierdie gefokusde PCA's laat 'n mens toe om gelyktydig die korrelasie tussen moederlike diëte en sommige merkers en korrelasies tussen spesifieke familie-gene te visualiseer. 'n Kwalitatiewe skaal is gebruik vir die ontleding van die PCA en gefokusde PCA: +++: baie goeie skeiding; ++: goeie skeiding met een rot aan die verkeerde kant van die PCA-skeiding; +: redelik goeie skeiding met twee rotte (een van elke groep) aan die verkeerde kant, −: geen duidelike skeiding nie.

Figuur 5 

Hoofkomponentanalise (PCA). Telling verspreidingsdiagram van PCA (A, B). (A) Global PCA van nucleus accumbens (NAc) monsters van P95 rotmannetjies. Swart driehoeke stem ooreen met nageslag van kontroledieet (CD) gevoer moeders en rooi driehoeke stem ooreen met nageslag ...

Results

Liggaamsgewig en groei

Maternale WD-inname tydens swangerskap (van G1 tot G21) het nie kleintjies se liggaamsgewig by geboorte beïnvloed nie (Figuur (Figure2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 g vs WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (syfers (Figure2A,B).2A,B). Liggaamsgewigtoename vanaf geboorte tot speen was 21% hoër in nageslag gebore uit WD-moeders as nageslag van CD-moeders met 'n liggaamsgewig aansienlik hoër by speen in nageslag gebore uit WD-moeders (36.19 ± 0.90 g vs 47.32 ± 1.48 g) p < 0.001) (Figuur (Figure2C) .2C). Vanaf speen tot die einde van die eksperiment (P95), is die rotte met standaard chow dieet gevoer en liggaamsgewig het hoër gebly vir die nageslag van WD-moeders as van CD-moeders nageslag. In besonderhede: tydens adolessensie (P39) (Figure (Figure2A,D),2A,D), CD: 176.8 ± 3.3 g vs WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016 en by P93 (jong volwassene) (Figure (Figure2A,E)2A,E) CD: 478 ± 9.9 g vs WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.

Figuur 2 

Evolusie van liggaamsgewigte van nageslag vanaf geboorte tot volwassenheid. (A) Liggaamsgewig dag 0 tot dag 100. Soogperiode in rooi en naspeense periodes (c) kinderjare, (d) adolessensie, en (e) jong volwassenes in grys. Op groeikurwe, manlike nageslag van beheerdieet ...

Hormone en metaboliese merkers in verskillende tydperke

Plasma leptien, insulien, glukose en NEFA konsentrasies is gemeet by P25, P45 en P95. Op alle ouderdomme was plasmaglukose-, NEFA- en leptienvlakke van WD-nageslag nie statisties verskillend van CD-nakomelinge nie (Tabel (Table2,2, n = 6 per groep). Ons het 'n beduidende toename in vetneerlegging (retroperitoneale vetmassaverhouding) op nageslag van WD-gevoede moeders slegs by P25 waargeneem (p = 0.0327, Mann en Whitney toets).

Tabel 2 

Retroperitoneale vetmassaverhouding en plasma dosis: glukose; insulien, NEFA en leptien.

Impak van perinatale WD op vetvoorkeur van speen tot volwassenheid

Om die impak van WD op vetvoorkeur te verken, het ons 'n twee-bottel keuse paradigma op drie verskillende tydpunte tydens groei gebruik. Hierdie toets is gebruik om spesifiek die voorkeur vir vetsmaak te bestudeer deur soveel as moontlik die metaboliese effek van die inname daarvan te vermy. Ons het gewys dat verskille in "ekstra" kalorie-inname uit die bottel (by P25, P45 en P95) nie statisties betekenisvol is nie tussen groepe (Figure S1A–C in aanvullende materiaal). Verder lei die verskil in verbruik van 1% mielieolie-oplossing tot 'n toename in kalorie met 1% vir WD-rotte by P25 (WD: 4.9% vs. CD: 3.9% van kalorieë wat ingeneem word) en 0.5% vir CD-rotte by P45 (WD: 2% teenoor CD: 2.5% van kalorieë wat ingeneem is) (syfers S1D–F in ​​aanvullende materiaal). Op P25 het kleintjies van CD-moeders geen voorkeur vir vet nie (44.87 ± 9.8%, p = 0.339); op die teenoorgestelde WD het rotte 'n voorkeur vir vet (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 na aanleiding van Wilcoxon getekende rangtoets, rooi asterisk). Verder is daar 'n statistiese verskil tussen die twee groepe met p = 0.0347 (Mann en Whitney toets, swart hash tag) (Figuur (Figure33A).

Figuur 3 

Ontwikkelingsevolusie van vetvoorkeur vanaf speen tot volwassenheid. (A) Eerste dag vetvoorkeur by P25, P45 en P95. Verskillende stelle diere is op elke tydstip gebruik (n = 6/groep/tydpunt). (B) Drie agtereenvolgende dae van vet ...

By P45 en P95 het die twee groepe 'n beduidende voorkeur vir vet, dit wil sê, aansienlik verskil van die teoretiese waarde van 50% (by P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 en WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; by P95, CD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 en WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 na aanleiding van Wilcoxon-tekenrangtoets, rooi asterisk) (Figuur (Figure3A) .3A). Die waardes vir die twee groepe was ononderskeibaar na een dag van smaakaanbieding (by P45 p = 0.7857 en by P95 p = 0.9171 Mann–Whitney-toets) (Figuur (Figure33A).

Om te weet hoe die rotte hul vetverbruik oor tyd reguleer, het ons die vetaanbieding vir drie opeenvolgende dae by P45 en P95 herhaal (Figure) (Figure3B,C).3B,C). Interessant genoeg het slegs mannetjies van WD-moeders by P45 progressief die voorkeur vir vetoplossing verloor (Figuur (Figure3B) 3B) (derde dag: 53.12 ± 8.36% p = 0.851 na aanleiding van Wilcoxon getekende rangtoets). Op P95 (volwasse ouderdom) het alle diere egter die vet verkies sonder evolusie gedurende die 3 dae toets (Figuur (Figure33C).

Samevattend, in hierdie model het ons in die vroeë stadium (kinderjare) 'n voorkeur vir vet waargeneem by rotte wat deur WD-moeders gevoer is met 'n progressiewe onbelangstelling oor tyd gedurende adolessensie. Ons het geen verskil tussen die twee groepe rotte in volwassenheid waargeneem nie.

Molekulêre handtekening van breinplastisiteit en GABA-kringe hermodellering in die hipotalamus en beloningspaaie

Om vas te stel of moederlike WD-inname tydens swangerskap en laktasie 'n impak op die hipotalamus en beloningsweë van die nageslag het, het ons die relatiewe uitdrukking van verskeie sleutelfaktore van breinplastisiteit, breinmodellering en merkers van neuronale stroombane gemeet by voedselinname en epigenetiese reguleerders. Ons het TLDA gebruik om hul oorvloed in verskillende breinareas (dws hipotalamus, VTA en NAc) te ontleed (tabel S1 in aanvullende materiaal) op die drie tydperke. Sifting is uitgevoer na die twee-bottel keuse toetse by P25, P45 en P95 (Figuur (Figure1) 1) op ses mannetjies gebore uit WD gevoer moeders en ses mannetjies gebore uit CD gevoer moeders.

By P25 in hipotalamus het vyf gene van dertien verskillende kategorieë 'n aansienlik laer mRNA-uitdrukkingsvlak vertoon hoofsaaklik in plastisiteitsmerkers en GABA-merkers wat wissel tussen -20% (Gfap) en -40% (Gabra5) in kleintjies van WD-gevoede moeders in vergelyking met rotte van CD gevoer damme. In beloningswegbiopsies (VTA en NAc) het twee gene 'n statistiese hoër mRNA-uitdrukkingsvlakke (D2R en Gabra1) vertoon, dws DA-sein- en GABA-reseptore en een geen 'n laer uitdrukking (Hcrtr2) (dws orexin 2-reseptor) in NAc , terwyl vier gene 'n aansienlik hoër mRNA-uitdrukkingsvlak (Map2, Gabara1, Hcrtr1 en Hcrtr2) (dws plastisiteitsmerkers, GABA-reseptore en serotoniergiese reseptore) in VTA vertoon het (Figuur (Figure44).

By P45 in hipotalamus het vyf gene van dertien verskillende kategorieë 'n laer mRNA uitdrukkingsvlak getoon wat wissel tussen -20% (Fos) en -50% (FosB) in kleintjies van WD gevoer moeders in vergelyking met rotte van CD gevoer moeders. By P45 in beloningswegbiopsies het vier gene 'n hoër mRNA-uitdrukkingsvlak (Gfap, Dat, Cck2r en Kat5) en twee gene 'n laer uitdrukking (Fos en FosB) in NAc vertoon, terwyl drie gene 'n laer mRNA-uitdrukkingsvlak vertoon het (Arc, FosB, en Th) en een geen 'n hoër vlak (Gabrg2) in VTA.

By P95 in hipotalamus het 20 gene van dertien verskillende kategorieë 'n hoër mRNA-uitdrukkingsvlak vertoon wat wissel tussen +20 en +40% (Syt4 tot Gjd2) en 3 gene het 'n laer mRNA-uitdrukking (FosB, D1r en Gabarb1) in kleintjies van WD vertoon gevoer moeders in vergelyking met rotte van CD gevoer moeders. By P95 in beloningswegbiopsies het 12 gene 'n hoër mRNA-uitdrukkingsvlak vertoon wat wissel tussen +20 en +40% (Syn1 tot Hcrt1) en 1 geen 'n laer uitdrukking (Th) in NAc, 6 gene het 'n hoër mRNA-uitdrukkingsvlak vertoon (Ncam1) , Gja1, Gjd2, Gabra5, Htr1a en Htr1b), en 6 gene het 'n laer mRNA uitdrukkingsvlak (Cntf, Igf1, Fos, Socs3, Gabrb2 en Hdac3) in VTA vertoon.

Ons het toe drie PCA sonder toesig uitgevoer wat ooreenstem met die drie breinbiopsies met behulp van al die gekwantifiseerde parameters (dws plasma dosis, gedragsdata en mRNA uitdrukking variasies). 'n Duidelike skeiding van die twee groepe is slegs by P95 vir NAc en VTA verkry (Tabel (Table33).

Tabel 3 

Hoofkomponentanalise (PCA) sintese: kwalitatiewe analise van PCA-groepskeiding vir globale PCA en gefokusde PCA.

Volgens die PCA-korrelasiekring en die TLDA-data (wat die meerderheid van die veranderlikes in hierdie PCA verteenwoordig), het ons die geenfamilies gedefinieer wat vir die segregasie verantwoordelik kan wees en 'n gefokusde PCA uitgevoer (Figure) (Figure 5A, B, 5A,B, byvoorbeeld). Die gefokusde PCA het aan die lig gebring dat by P25 DA merkers in NAc en plastisiteitsmerkers in hipotalamus die twee groepe nageslag kon skei (Tabel (Table33 vir opsomming). Geen sodanige diskriminasie is toe by P45 verkry nie. Dieselfde ontleding by P95 het egter aan die lig gebring dat die verskillende merkers van die GABA-stelsel in NAc en hipotalamus, plus die plastisiteitsmerkers (in hipotalamus, NAc en VTA) en epigenetiese reguleerders (slegs in NAc) bydra om die twee groepe diere te skei ( Figuur (Figure5; 5; tafel Table33).

Hierdie analise onthul die langdurige invloed van perinatale dieet op GABAergiese merkers sowel as plastisiteit en epigenetiese merkers in beide die homeostatiese en die beloningspad wat by voedingsgedrag betrokke is.

Immunohistochemie van TH-selle Bevestig transkripsie-analise

Omdat ons 'n mate van variasie in TH mRNA in NAc en VTA tydens die verskillende ontwikkelingsperiodes waargeneem het, het ons daarop gemik om hierdie resultate met TH-immunkleuring te korreleer. Die aantal TH/NeuN positiewe selle is ontleed in die VTA waar dopaminergiese selliggame geleë is en die OD van TH immunolabelering is gekwantifiseer in die senuwee-eindpunte geleë in die NAc. TH (+) selle was minder volop in die VTA van WD in vergelyking met CD rotte slegs by P45 (Figure (Figure6A,C,E;6A,C,E; Figuur S2A in aanvullende materiaal). Daar was geen betekenisvolle interaksie tussen seksievlak en die TH/NeuN-kwantifikasie tydens die drie periodes nie (P25 p = 0.9991, P45 p = 0.9026, en P95 p = 0.9170). Slegs by P45 is 'n statistiese verskil tussen die twee nageslaggroepe verkry (p = 0.0002) (Figuur (Figuur6E).6E). Daarbenewens het ons geen verskil in OD van TH-immuunkleuring in die NAc by P25 en P45 tussen die twee groepe waargeneem nie (OD-verhoudingwaardes by P25: 1.314 ± 0.022 in CD vs 1.351 ± 0.026 in WD, p = 0.2681; OD-verhoudingwaardes by P45: 1.589 ± 0.033 in CD vs 1.651 ± 0.027 in WD, p = 0.1542). 'n Beduidende afname in OD van TH-senuwee-eindpunte is egter gevind in NAc van WD-groep by P95 (OD-verhoudingwaardes by p95: 1.752 ± 0.041 in CD vs 1.550 ± 0.046 in WD, p = 0.0037) (syfers (Figure6B,D,F;6B,D,F; Figuur S2B in aanvullende materiaal).

Bespreking

In hierdie studie het ons veronderstel dat moederlike perinatale oorvoeding die program van ontwikkeling van beloningspaaie wat betrokke is by energiehomeostase, voedselkeuse en voedselinname van die nageslag sal beïnvloed. Ons het die impak van moederlike WD-inname vanaf geboorte tot speen op GABA-, serotonien- en DA-bane van spesifieke breinareas (VTA, NAc en hipotalamus) in die nageslag, van kinderjare tot volwassenheid, breedvoerig ondersoek. Ons resultate dui daarop dat die gebruik van 'n dieet, ryk aan vet en soet, streng beperk tot die perinatale tydperk 'n impak het op vroeë vetvoorkeur (kinderjare) in die nageslag wat gekorreleer is met verandering in geenuitdrukkingsprofiel en neuroanatomiese/argitektoniese veranderinge van die mesolimbiese dopaminergiese netwerke. Toe die nageslag egter onder chow-dieet gehou is, het ons in adolessente WD-gevoede rotte 'n progressiewe verlies aan aantreklikheid teenoor vet waargeneem wat gekorreleer was met 'n verminderde uitdrukking van gene van die DA-stelsel en 'n effense vermindering van TH-positiewe neurone in die VTA . Later in die lewe was vetvoorkeur nie verskillend tussen groepe nie, alhoewel 'n belangrike plastisiteit van die GABAergiese netwerke en van die energie-homeostase-netwerk van die hipotalamus geïdentifiseer is in rotte van WD-gevoede moeders (Figuur (Figure77).

Figuur 7 

Grafiese abstrak. NAc, nucleus accumbens; VTA, ventrale tegmentale area.

Die eerste impak van perinatale-WD-inname wat ons in hierdie studie waargeneem het, is 'n verhoogde liggaamsgewig van die nageslag tydens speen, maar geen verskil by geboorte nie. Trouens, diere van die WD-groep neem 21% meer gewig aan as CD aan die einde van die suigperiode. Vorige studies het teenstrydige resultate gelewer met betrekking tot verandering in geboortegewig vir nageslag van WD-gevoede moeders: 'n hoër liggaamsgewig (, ), 'n laer liggaamsgewig (, , ) of geen verskil (, ). Ons data is in lyn met 'n onlangse meta-regressie-analise () uitgevoer op 171 eksperimentele publikasies wat tot die gevolgtrekking gekom het dat moederlike HFD-blootstelling nie nageslag se geboortegewig beïnvloed nie, maar 'n verhoogde liggaamsgewig aan die einde van die laktasieperiode geïnduseer het. Die hoër liggaamsgewig van die WD-nakomelinge weerspieël waarskynlik 'n verandering in melksamestelling en/of melkproduksie wat in vorige publikasies geïllustreer is (, ). In ooreenstemming met hul hoër liggaamsgewig, was die retroperitoneale vetverhouding van die WD-nageslag aansienlik hoër as dié van die CD-nakomelinge aan die einde van die soogperiode (P25, Tabel Tabel 2), 2), wat ook ooreenstem met vorige studies (, ). Die hoër adipositeit het egter nie by P45 en P95 voortgeduur nie, en ander metaboliese parameters soos insulien, NEFA en glukoseplasma was nie verskillend tussen groepe nie. Ons resultate het getoon dat sonder 'n duidelike moederlike vetsug tydens swangerskap en laktasie, die dieet op sigself nie voldoende is om blywende metaboliese effekte in die nageslag te veroorsaak nie (, , ).

Daar is gerapporteer dat perinatale HFD-inname positief korreleer met nageslag se voorkeur vir smaaklike kos (). In ons studie het ons 'n longitudinale studie uitgevoer wat daarop gemik is om vetvoorkeur te toets op nageslag wat op gereelde chow gespeen word.

Impak van perinatale WD op kinderjare (na speen)

Knaagdiere se hondjies eet vaste kos 19–20 dae na geboorte () wanneer hul serebrale beloningspaaie nog nie volwasse is nie (). Dit was dus baie interessant om hul baie vroeë voorkeur vir vet te bestudeer en hierdie vroeë voorkeur met breintranskriptiese analise te korreleer. Net na speen het ons 'n voorkeur vir vet in WD-nakomelinge waargeneem wat nie by CD-rotte bewys is nie. Dit is in ooreenstemming met ander verslae wat 'n verband toon tussen perinatale wanvoeding en smaaklike voedselvoorkeur en 'n lae voorkeur vir vet op vroeë ouderdom vir kontrolerotte ().

Die globale PCA het nie toegelaat dat die groep kleintjies gediskrimineer word ten opsigte van moederlike dieet op daardie ouderdom nie. Toe 'n geteikende PCA, beperk tot DA-merkers, egter uitgevoer is, het ons 'n goeie segregasie van die groepe verkry. Inderdaad, daar is 'n merkbare toename in die uitdrukking van die D2-reseptor-mRNA's in die NAc in WD-hondjies. Hierdie postsinaptiese D2-ooruitdrukking in die NAc kan deels betrokke wees by 'n hoër motivering vir vet (). Min ander transkripsies word in WD-hondjies gewysig in vergelyking met CD-hondjies, soos 'n toename van alfa 1 GABAA-subeenheid in NAc en VTA en 'n afname van alfa 5 GABAA-subeenheid in die hipotalamus wat 'n herorganisasie van GABAA-reseptore in hierdie kerne voorstel.

Impak van perinatale WD op adolessensie

By P45 het ons 'n soortgelyke hoë-vet voorkeur vir beide groepe op die eerste dag van aanbieding waargeneem, maar interessant genoeg het die WD-rotte progressief hul belangstelling vir vet verloor na herhaalde aanbieding. Die adolessensie is 'n kritieke tydperk van neurogedragsherorganisasie wat nodig is vir lewenslange kognitiewe prosessering (), en verskeie studies het 'n duidelike kwesbaarheid getoon vir nadelige kognitiewe effek van 'n vetdieet (-). Hierdie resultaat is in oënskynlike teenstrydigheid met vorige werk van die groep Muhlhausler (, ) waarin jong rotte (6 weke) 'n duidelike voorkeur vir gemorskos getoon het. In hul publikasies was die eksperimentele paradigma egter anders aangesien die rotte vrye toegang gehad het tot beide standaard chow en gemorskos vanaf speen tot die offer (6 weke).

Gelyktydig het ons 'n toename van Dat mRNA in die NAc en 'n afname van Th mRNA in die VTA gemeet wat bevestig is deur die immunohistochemie wat 'n verminderde TH (+) selle getal in die VTA van WD rotte getoon het. Na 'n verhoogde transkriptomiese aktiwiteit vir die DA-stelsel tydens speen, kan die verminderde aktiwiteit by P45 die lae belangstelling vir die smaaklike kos wat in ons WD-rotte waargeneem word, verklaar. Daar moet ook op gelet word dat die sistematiese afname van Fos- en FosB-mRNA-uitdrukking in die verskillende kerne wat ons ontleed het, 'n teken kan wees van 'n verminderde serebrale aktiwiteit na blootstelling aan moederlike WD.

Adolessente WD-rotte het 'n vinniger onbelangstelling vir vet getoon wat teenoor hul vroeëre gedrag is. Die gebruik van 'n "normale" dieet tydens die kinderjare blyk hulle te "beskerm" teen 'n oordrewe vetvoorkeur tydens adolessensie. Inteendeel wanneer rotte vrye toegang tot gemorskos het na speen, soos in Verw. (, ), toon hulle op adolessensie 'n sterk voorkeur vir vet. Hierdie resultaat dui daarop dat 3 weke chow-dieet na speen die kringe kon herprogrammeer het en die adolessente nageslag minder sensitief kon maak vir 'n akute vetuitdaging.

Impak van perinatale WD op volwassenes

Volwasse rotte het nie meer 'n verskil in voorkeur vir vet getoon nie, selfs na herhaalde vetaanbieding soos reeds beskryf (, ). Gelyktydig het ons 'n afname in Th mRNA en proteïen in die NAc waargeneem, en 'n neiging vir 'n verminderde uitdrukking van Dat mRNA in die VTA. Naef en medewerker () het reeds 'n lae aktiwiteit van die DA-stelsel gerapporteer by volwasse rotte wat in die perinatale periode met 'n HFD gevoer is, met 'n afgestompde DA-reaksie op amfetamien gemeet met mikrodialise en 'n verhoogde motivering vir vetbeloning (sien tabel wat onlangse qPCR-data op hierdie model opgesom het, Tafel S2 in aanvullende materiaal). Een beperking van TH-kwantifikasie (mRNA en immunohistochemie) in NAc kom van die feit dat NAc-selle ook Th-mRNA en proteïen kan uitdruk en dan die DA-veselkwantifisering kan beïnvloed (, ). Die gebruik van TH-immuunkleuring in NAc het egter hoofsaaklik die digte aksonterminale geopenbaar wat van middelbrein DA-neurone (VTA en SNc) kom. Gewoonlik kon die TH-uitdrukkingsneurone in die striatum en NAc slegs in diere met baie DA-beserings onderskei word () en kan dus skaars waarneembaar wees in ons immuno-afdelings. In hierdie studie het ons ook 'n sterk toename in mu-opioïedreseptor in NAc waargeneem wanneer ander groepe, met verskillende modelle, 'n afname in uitdrukking in die ventrale striatum van rot getoon het wat vroeg aan HFD blootgestel is (tydens laktasie en swangerskap) (, ) of geen verandering (). Hierdie modifikasies, gemeet slegs op die mRNA-vlak, kan 'n effense hipo-aktiwiteit van die DA-kringe weerspieël wat met 'n hoër opioïed sensitiwiteit geassosieer word () wat waarskynlik nie voldoende is om 'n impak te hê op die gedragstoets wat ons uitgevoer het nie. Hierdie aannames moet met behulp van funksionele benaderings bevestig word. In 'n onlangse artikel, met 'n soortgelyke model, kon Romani-Perez et al., nie 'n beduidende toename in motivering in operante kondisioneringsbokse vir HFD-nakomelinge waarneem nie, maar het 'n korter latensie waargeneem om 'n doelhok te bereik in 'n aanloopbaantoetsparadigma (). Ten spyte van die afwesigheid van langdurige vetvoorkeur in ons eksperimentele toestande, het ons gevind dat perinatale moederlike WD-inname 'n langdurige effek op ander serebrale stroombane het, meestal bemiddel deur GABA-hermodellering in NAc en Hipotalamus. NAc word beskou as 'n "sensoriese sentinel" vir volkome gedrag (). Onlangse studies het getoon dat voedselinname onderdruk is deur inhibisie van GABA-vrystellende LH neurone (). O'Connor et al. het getoon dat NAc D1R neurone (GABAergiese projekterende neurone) LH VGAT neurone selektief inhibeer om voedselinname te stop (). Hierdie eksperimente onthul 'n GABA-kring (NAc/hipotalamus) wat verantwoordelik kan wees vir die beheer van gedragsreaksie. Hierdie ventrale striatum-hipothalamiese sisteem komplementeer 'n ander stroombaan wat die bed nucleus stria terminalis behels GABA-vrystellende VGAT projekterende neuron na die glutamaat vrystellende Vglut LH neurone en direkte inhibisie van LH vglut2 ontlok voeding (). Nog 'n belangrike komponent van die eetlusregulerende kring wat NAc-dop behels, is 'n GABA-vrystellende inhiberende projeksie na die VP (). Hierdie data beklemtoon die deurslaggewende rol van GABA-sein in die wisselwerking tussen hipotalamus en NAc om voeding te bevorder. In ons studie kon ons nie die populasie neurone wat by die GABA-hermodellering betrokke was, onderskei en hoe hierdie wysigings die netwerke kon verander nie. Die sentrale rol van GABA-kringe verdien egter meer belangstelling. Dit sal veral baie interessant wees om verdere funksionele eksperimente van hierdie GABA-stroombane uit te voer deur elektrofisiologiese benaderings te gebruik (). Ons het ook 'n globale opregulering van mRNA-transkripsie vir 5HT1a- en 5HT1b-reseptore in die drie kerne wat bestudeer is, waargeneem. Die meerderheid serotonienvesels wat uitsteek, kom van die dorsale raphe nucleus (DRN) en mediaan raphe nucleus (MRN). Onlangse data van in vivo opnames en beeldstudies het 'n positiewe rol van 5HT in beloning getoon (). 5HT-vesels van DRN is betrokke by impulsiwiteitsbeheer (). Verhoging 5HT1a in VTA en NAc kan 'n kompenserende meganisme wees wat impulsiwiteit kan beheer. In hipotalamus dui farmakologiese studies daarop dat 5HT1a-reseptorsubtipes voedingsgedrag wat deur serotonienstimulasie veroorsaak word, kan onderdruk (, ). Verhoogde 5HT1a- en b-reseptore in hipotalamus kan die voedingsonderdrukkende werking van serotonien versterk en kan dus 'n kompenserende meganisme vorm. Hierdie aannames moet geverifieer word deur behoorlike funksionele eksperimente uit te voer.

Hierdie netwerkveranderinge word geassosieer met modifikasies van plastisiteitsmerkers as Ncam mRNA. In die hipotalamus van volwasse rotte het ons 'n toename in Ncam1- en St8sia4-transkripsies waargeneem wat dui op en toename in polisiaalsuur (PSA) sein. PSA is 'n sel-oppervlak glikaan wat sel-tot-sel interaksies moduleer. Polisialilering van sel adhesie proteïene is betrokke by verskeie sinaptiese plastisiteit-afhanklike prosesse in die sentrale senuweestelsel en is na berig word benodig vir die adaptiewe sinaptiese plastisiteit van voedingskringe tydens akute positiewe energiebalans (, ). Daarbenewens kan ander reguleerders van selinteraksie en sinaptogenese betrokke wees by hierdie hipotalamus-plastisiteit.

Ten slotte (Figuur (Figure7), 7), moederlike WD-inname het 'n langdurige invloed op die organisasie van die homeostatiese en hedoniese stroombane wat eetgedrag in die nageslag reguleer. Deur die ontleding van drie kritieke tydperke, was ons in staat om 'n duidelike evolusie vir vetvoorkeur te toon wat gekorreleer is met spesifieke brein molekulêre handtekeninge. Gedurende die kinderjare kan die voorkeur vir vet gekorreleer word met 'n hoër aktiwiteit van die DA-stelsel. Adolessensie, gekenmerk deur 'n inversie van vetvoorkeur, is geassosieer met laer uitdrukking van DA-stelselmerkers wat 'n kompenserende meganisme voorstel. 'n Baie interessante punt om in kennis te stel, is dat, in hierdie model, 'n gebalanseerde dieet na speen adolessente rotte kan beskerm teen nadelige voedingsgewoontes deur hul begeerte na vet te verminder. Alhoewel die twee groepe in volwassenheid 'n soortgelyke hoë voorkeur vir vet het, het rotte van WD-gevoede moeders 'n diepgaande hermodellering van die GABA-kringe getoon. Wat is die gevolge van hierdie blywende plastisiteit? Sal 'n oordrewe obesogeniese dieetinname tydens adolessensie hierdie afgestompte beloningstelsel heraktiveer? Sulke vrae kan relevant wees in die voedingsopvolging van pasgeborenes en kinders wat in verwesterde lande opgestaan ​​het.

Etiekverklaring

Alle eksperimente is uitgevoer in ooreenstemming met die riglyne van die plaaslike dierewelsynskomitee, die EU (direktief 2010/63/EU), die Institut National de la Recherche Agronomique (Parys, Frankryk), en die Franse veeartsenykundige departement (A44276). Die eksperimentele protokol is deur die institusionele etiese komitee goedgekeur en geregistreer onder verwysing APAFIS 8666. Alle voorsorgmaatreëls is getref om stres te verminder en die aantal diere wat in elke reeks eksperimente gebruik word.

Skrywer Bydraes

JP en PB het eksperiment uitgevoer en aan die bespreking en skryfwerk deelgeneem. TM het die PCA uitgevoer en aan bespreking en skryfwerk deelgeneem. SN het bygedra tot die ontwerp van die eksperiment en aan bespreking deelgeneem. PP het bygedra tot die ontwerp van die eksperiment, aan die besprekings deelgeneem en die manuskrip geskryf. VP het die eksperimente ontwerp en uitgevoer, die data ontleed en die manuskrip geskryf.

Konflik van belangstelling

Die skrywers verklaar dat die navorsing gedoen is in die afwesigheid van enige kommersiële of finansiële verhoudings wat as 'n potensiële botsing van belange beskou kan word.

Erkennings

Die skrywers wil graag erkenning gee aan Guillaume Poupeau en Blandine Castellano vir die versorging van die diere deur die hele studie, Anthony Pagniez vir sy hulp met mRNA-ekstraksie en TLDA, Isabelle Grit vir haar hulp met plasmamonsters-analise, en Alexandre Benani en Marie-Chantal Canivenc vir hul nuttige bespreking en TLDA-ontwerp.

voetnote

 

Befondsing. Hierdie navorsing is ondersteun deur die streek des pays de la Loire-toekenning PARIMAD (VP), LCL-stigtingstoekenning (VP en PP), SanteDige-stigting (VP) en INRA Metaprogram DIDIT (SN, VP, PP).

 

 

Aanvullende materiaal

Die aanvullende materiaal vir hierdie artikel kan aanlyn gevind word by http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.

Figuur S1

Totale energie-inname van mielieolie-bevattende bottel. (A) Kalorieë-inname uit die mielie-oliebottel vir 24 uur teen P25 by kleintjies van moeders wat met Westerse dieet (WD) gevoer is en kleintjies van kontrole-dieet (CD) gevoer moeders. (B) Kalorieë-inname uit die mielie-oliebottel vir 24 uur by P45 (die derde dag van botteltoets). (C) Kalorieë-inname uit die mielieoliebottel vir 24 uur teen P95 (die derde dag van botteltoets). Vir panele (A-C), data word uitgedruk as gemiddelde ± SEM, geen statistiese verskil (p > 0.05) is waargeneem, na aanleiding van Mann en Whitney nie-parametriese toets, op alle ouderdomme. (D) Persentasie kalorieë-inname uit die mielie-oliebottel vergelyk met die totale kalorieë-inname (mielie-oliebottel + standaard chow-dieet) vir 24 uur by P25 in WD-hondjies en CD-hondjies. (E) Persentasie kalorieë-inname uit die mielie-oliebottel vergelyk met die totale kalorieë-inname (mielie-oliebottel + standaard chow-dieet) vir 24 uur by P45 (die derde dag van botteltoets) in WD-hondjies en CD-hondjies. (F) Persentasie kalorieë-inname uit die mielie-oliebottel vergelyk met die totale kalorieë-inname (mielie-oliebottel + standaard chow-dieet) vir 24 uur by P95 (die derde dag van botteltoets) in WD-hondjies en CD-hondjies. Vir panele (D, E), data word uitgedruk in persentasie van totale kalorie-inname geen statistiese verskil (p > 0.05) is waargeneem, na aanleiding van chi-kwadraat met Yates se regstelling, op alle ouderdomme.

Figuur S2

Verteenwoordigende mikrofoto's van TH immunokleuring in nucleus accumbens (NAc) en ventrale tegmentale area (VTA) op drie verskillende tydpunte. (A) Mikrofoto van TH/NeuN-immuunkleuring op die vlak van die VTA, -5.30 mm vanaf Bregma. Rooi etikette is vir NeuN, en groen een vir TH. Die wit pyl wys die uitgang van die derde senuwee. (B) Mikrofoto van TH immunokleuring op die vlak van die NAc, +1.70 mm vanaf Bregma. Groen etikettering is vir TH. Die wit pyl wys die anterior kommissuur.

Tabel S1

TaqMan lae-digtheid skikking geen lys met die ooreenstemmende lewe tegnologie inventaris kodes.

Tabel S2

Opsomming van gepubliseerde data oor dopamienweg-transkripsies-uitdrukking. Die rooi karakters stem ooreen met kinderjare, die bloues met adolessensie en die swartes met volwassenes. =: stem ooreen met 'n soortgelyke transkripsie-uitdrukking tussen groepe, +: stem ooreen met 'n hoër transkripsie-uitdrukking in kleintjies van 'n hoë-kalorie dieet [gemorskos, westerse dieet (WD), of hoë-vet dieet (HFD)] gevoer moeders, en -: stem ooreen met 'n laer transkripsie-uitdrukking in kleintjies van hoë-kalorie-dieet (gemorskos, WD of HFD) gevoer moeders.

Verwysings

1. Barker DJ. Die fetale oorsprong van siektes van ouderdom. Eur J Clin Nutr (1992) 46(Suppl 3):S3–9. [PubMed]
2. Desai M, Gayle D, Han G, Ross MG. Geprogrammeerde hiperfagie as gevolg van verminderde anoreksigeniese meganismes in intrauteriene groei-beperkte nageslag. Reprod Sci Thousand Oaks Calif (2007) 14:329–37.10.1177/1933719107303983 [PubMed] [Kruisverwysing]
3. Goran MI, Dumke K, Bouret SG, Kayser B, Walker RW, Blumberg B. Die obesogeniese effek van hoë fruktose blootstelling tydens vroeë ontwikkeling. Nat Rev Endocrinol (2013) 9:494–500.10.1038/nrendo.2013.108 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
4. Levin BE. Metaboliese inprenting: kritieke impak van die perinatale omgewing op die regulering van energiehomeostase. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci (2006) 361:1107–21.10.1098/rstb.2006.1851 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
5. Olson CM, Strawderman MS, Dennison BA. Maternale gewigstoename tydens swangerskap en kind gewig op ouderdom 3 jaar. Matern Child Health J (2009) 13:839.10.1007/s10995-008-0413-6 [PubMed] [Kruisverwysing]
6. Chen H, Simar D, Morris MJ. Hipothalamiese neuro-endokriene stroombane word geprogrammeer deur moederlike vetsug: interaksie met postnatale voedingsomgewing. PLoS One (2009) 4:e6259.10.1371/journal.pone.0006259 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
7. Muhlhausler BS, Adam CL, Findlay PA, Duffield JA, McMillen IC. Verhoogde moedervoeding verander die ontwikkeling van die eetlusregulerende netwerk in die brein. FASEB J (2006) 20:1257–9.10.1096/fj.05-5241fje [PubMed] [Kruisverwysing]
8. Samuelsson AM, Matthews PA, Argenton M, Christie MR, McConnell JM, Jansen EHJM, et al. Dieet-geïnduseerde vetsug by vroulike muise lei tot hiperfagie van nageslag, vet, hipertensie en insulienweerstandigheid. Hipertensie (2008) 51:383–92.10.1161/HIPERTENSIONAHA.107.101477 [PubMed] [Kruisverwysing]
9. Kenny PJ. Algemene sellulêre en molekulêre meganismes in vetsug en dwelmverslawing. Nat Rev Neurosci (2011) 12:638–51.10.1038/nrn3105 [PubMed] [Kruisverwysing]
10. Denis RGP, Joly-Amado A, Webber E, Langlet F, Schaeffer M, Padilla SL, et al. Smaaklikheid kan voeding onafhanklik van AgRP-neurone aandryf. Cell Metab (2015) 22:646–57.10.1016/j.cmet.2015.07.011 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
11. Stice E, Spoor S, Bohon C, Small DM. Verwantskap tussen vetsug en afgestomp striatale reaksie op voedsel word gemodereer deur TaqIA A1 alleel. Science (2008) 322:449–52.10.1126/science.1161550 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
12. Frank GK, Reynolds JR, Shott ME, Jappe L, Yang TT, Tregellas JR, et al. Anorexia nervosa en vetsug word geassosieer met teenoorgestelde breinbeloningsreaksie. Neuropsychopharmacology (2012) 37:2031–46.10.1038/npp.2012.51 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
13. Green E, Jacobson A, Haase L, Murphy C. Verminderde nucleus accumbens en caudate nucleus aktivering tot 'n aangename smaak word geassosieer met vetsug by ouer volwassenes. Brain Res (2011) 1386:109–17.10.1016/j.brainres.2011.02.071 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
14. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, Clegg DJ, et al. Blootstelling aan verhoogde vlakke van dieetvet verswak psigostimulerende beloning en mesolimbiese dopamienomset by die rot. Behav Neurosci (2008) 122:1257–63.10.1037/a0013111 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
15. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, Pothos EN. Tekorte van mesolimbiese dopamien-neurotransmissie in dieetvetsug van rotte. Neuroscience (2009) 159:1193–9.10.1016/j.neuroscience.2009.02.007 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
16. Rivera HM, Kievit P, Kirigiti MA, Bauman LA, Baquero K, Blundell P, et al. Maternale hoë-vet dieet en vetsug beïnvloed smaaklike voedselinname en dopamiensein in nie-menslike primaatnageslag. Obesity (2015) 23:2157–64.10.1002/oby.21306 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
17. Gugusheff JR, Ong ZY, Muhlhausler BS. Die vroeë oorsprong van voedselvoorkeure: fokus op die kritieke vensters van ontwikkeling. FASEB J (2015) 29:365–73.10.1096/fj.14-255976 [PubMed] [Kruisverwysing]
18. Bayol SA, Farrington SJ, Stickland NC. 'n Moederlike "gemorskos"-dieet tydens swangerskap en laktasie bevorder 'n verergerde smaak vir "gemorskos" en 'n groter geneigdheid tot vetsug by rotnageslag. Br J Nutr (2007) 98:843–51.10.1017/S0007114507812037 [PubMed] [Kruisverwysing]
19. Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Maternale hoë-vet dieet verander metilering en geenuitdrukking van dopamien en opioïedverwante gene. Endokrinologie (2010) 151:4756–64.10.1210/af.2010-0505 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
20. Naef L, Moquin L, Dal Bo G, Giros B, Gratton A, Walker CD. Maternale hoë-vet-inname verander presinaptiese regulering van dopamien in die nucleus accumbens en verhoog motivering vir vetbelonings in die nageslag. Neuroscience (2011) 176:225–36.10.1016/j.neuroscience.2010.12.037 [PubMed] [Kruisverwysing]
21. Ong ZY, Muhlhausler BS. Maternale "gemorskos" voeding van rotdamme verander voedselkeuses en ontwikkeling van die mesolimbiese beloningsweg in die nageslag. FASEB J (2011) 25:2167–79.10.1096/fj.10-178392 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
22. Romaní-Pérez M, Lépinay AL, Alonso L, Rincel M, Xia L, Fanet H, et al. Impak van perinatale blootstelling aan hoë-vet dieet en stres op reaksies op voedingsuitdagings, voedselgemotiveerde gedrag en mesolimbiese dopamienfunksie. Int J Obes (Lond) (2017) 41(4):502–9.10.1038/ijo.2016.236 [PubMed] [Kruisverwysing]
23. Beier KT, Steinberg EE, DeLoach KE, Xie S, Miyamichi K, Schwarz L, et al. Kring argitektuur van VTA dopamien neurone geopenbaar deur sistematiese inset-uitset kartering. Cell (2015) 162:622–34.10.1016/j.cell.2015.07.015 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
24. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, et al. GABA-neurone van die VTA-dryf-gekondisioneerde plekaversie. Neuron (2012) 73:1173–83.10.1016/j.neuron.2012.02.015 [PubMed] [Kruisverwysing]
25. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Aktivering van VTA GABA neurone ontwrig beloningsverbruik. Neuron (2012) 73:1184–94.10.1016/j.neuron.2012.02.016 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
26. Hu H. Beloning en afkeer. Annu Rev Neurosci (2016) 39:297–324.10.1146/annurev-neuro-070815-014106 [PubMed] [Kruisverwysing]
27. Stanley BG, Urstadt KR, Charles JR, Kee T. Glutamaat en GABA in laterale hipotalamusmeganismes wat voedselinname beheer. Physiol Behav (2011) 104:40–6.10.1016/j.physbeh.2011.04.046 [PubMed] [Kruisverwysing]
28. Ancel D, Bernard A, Subramaniam S, Hirasawa A, Tsujimoto G, Hashimoto T, et al. Die orale lipiedsensor GPR120 is nie onontbeerlik vir die orosensoriese opsporing van dieetlipiede in muise nie. J Lipid Res (2015) 56:369–78.10.1194/jlr.M055202 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
29. Ackroff K, Lucas F, Sclafani A. Geurvoorkeurkondisionering as 'n funksie van vetbron. Physiol Behav (2005) 85:448–60.10.1016/j.physbeh.2005.05.006 [PubMed] [Kruisverwysing]
30. Camandola S, Mattson-LP. Tolagtige reseptor 4 bemiddel vet-, suiker- en umami-smaakvoorkeur en voedselinname en liggaamsgewigregulering. Obesity (2017) 25:1237–45.10.1002/oby.21871 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
31. Coupé B, Amarger V, Grit I, Benani A, Parnet P. Voedingsprogrammering beïnvloed hipotalamus-organisasie en vroeë reaksie op leptien. Endokrinologie (2010) 151:702–13.10.1210/af.2009-0893 [PubMed] [Kruisverwysing]
32. Paillé V, Brachet P, Damier P. Rol van nigrale letsel in die ontstaan ​​van dyskinesie in 'n rotmodel van Parkinson se siekte. Neuroreport (2004) 15:561–4.10.1097/00001756-200403010-00035 [PubMed] [Kruisverwysing]
33. Benani A, Hryhorczuk C, Gouazé A, Fioramonti X, Brenachot X, Guissard C, et al. Voedselinname-aanpassing by dieetvet behels PSA-afhanklike herbedrading van die boogvormige melanokortienstelsel in muise. J Neurosci (2012) 32:11970–9.10.1523/JNEUROSCI.0624-12.2012 [PubMed] [Kruisverwysing]
34. Kirk SL, Samuelsson AM, Argenton M, Dhonye H, Kalamatianos T, Poston L, et al. Maternale vetsug wat deur dieet by rotte veroorsaak word, beïnvloed permanent sentrale prosesse wat voedselinname in nageslag reguleer. PLoS One (2009) 4:e5870.10.1371/journal.pone.0005870 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
35. Ong ZY, Muhlhausler BS. Die inname van 'n lae-vet dieet van speen tot volwassenheid keer die programmering van voedselvoorkeure in manlike, maar nie in vroulike, nageslag van "gemorskos"-gevoede rotdamme om. Acta Physiol Oxf Engl (2014) 210:127–41.10.1111/apha.12132 [PubMed] [Kruisverwysing]
36. Ribaroff GA, Wastnedge E, Drake AJ, Sharpe RM, Chambers TJG. Dieremodelle van moederlike hoë vet dieetblootstelling en effekte op metabolisme by nageslag: 'n meta-regressie-analise. Obes Rev (2017) 18(6):673–86.10.1111/obr.12524 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
37. Bautista CJ, Montaño S, Ramirez V, Morales A, Nathanielsz PW, Bobadilla NA, et al. Veranderinge in melksamestelling by vetsugtige rotte wat 'n hoë-vet dieet eet. Br J Nutr (2015) 115:538–46.10.1017/S0007114515004547 [PubMed] [Kruisverwysing]
38. Rolls BA, Gurr MI, Van Duijvenvoorde PM, Rolls BJ, Rowe EA. Laktasie by maer en vetsugtige rotte: effek van kafeteriavoeding en dieetvetsug op melksamestelling. Physiol Behav (1986) 38:185–90.10.1016/0031-9384(86)90153-8 [PubMed] [Kruisverwysing]
39. White CL, Purpera MN, Morrison CD. Maternale vetsug is nodig vir die programmering van effek van hoë-vet dieet op nageslag. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (2009) 296:R1464.10.1152/ajpregu.91015.2008 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
40. Sun B, Purcell RH, Terrillion CE, Yan J, Moran TH, Tamashiro KLK. Maternale hoë-vet dieet tydens swangerskap of soog beïnvloed differensieel nageslag leptien sensitiwiteit en vetsug. Diabetes (2012) 61:2833–41.10.2337/db11-0957 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
41. Berthoud HR. Metaboliese en hedoniese dryfkragte in die neurale beheer van eetlus: wie is die baas? Curr Opin Neurobiol (2011) 21:888–96.10.1016/j.conb.2011.09.004 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
42. Henning SJ, Chang SS, Gisel EG. Ontogenie van voedingskontroles by suig- en speenrotte. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (1979) 237:R187–91. [PubMed]
43. Leibowitz SF, Lucas DJ, Leibowitz KL, Jhanwar YS. Ontwikkelingspatrone van makronutriëntinname by vroulike en manlike rotte vanaf speen tot volwassenheid. Physiol Behav (1991) 50:1167–74.10.1016/0031-9384(91)90578-C [PubMed] [Kruisverwysing]
44. Trifilieff P, Feng B, Urizar E, Winiger V, Ward RD, Taylor KM, et al. Die verhoging van dopamien D2 reseptor uitdrukking in die volwasse nucleus accumbens verhoog motivering. Mol Psychiatry (2013) 18:1025–33.10.1038/mp.2013.57 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
45. Spear LP. Die adolessente brein en ouderdomsverwante gedragsmanifestasies. Neurosci Biobehav Rev (2000) 24:417–63.10.1016/S0149-7634(00)00014-2 [PubMed] [Kruisverwysing]
46. ​​Vendruscolo LF, Gueye AB, Darnaudéry M, Ahmed SH, Cador M. Suikeroorverbruik tydens adolessensie verander selektief motivering en beloningsfunksie in volwasse rotte. PLoS One (2010) 5:e9296.10.1371/journal.pone.0009296 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
47. Boitard C, Parkes SL, Cavaroc A, Tantot F, Castanon N, Layé S, et al. Die oorskakeling van adolessente hoë-vet dieet na volwasse beheer dieet herstel neurokognitiewe veranderinge. Front Behav Neurosci (2016) 10:225.10.3389/fnbeh.2016.00225 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
48. Naneix F, Darlot F, Coutureau E, Cador M. Langdurige tekorte in hedoniese en nucleus accumbens reaktiwiteit tot soet belonings deur suiker oorverbruik tydens adolessensie. Eur J Neurosci (2016) 43:671–80.10.1111/ejn.13149 [PubMed] [Kruisverwysing]
49. Baker H, Kobayashi K, Okano H, Saino-Saito S. Kortikale en striatale uitdrukking van tyrosienhidroksilase mRNA in neonatale en volwasse muise. Cell Mol Neurobiol (2003) 23:507–18.10.1023/A:1025015928129 [PubMed] [Kruisverwysing]
50. Jaber M, Dumartin B, Sagné C, Haycock JW, Roubert C, Giros B, et al. Differensiële regulering van tyrosienhidroksilase in die basale ganglia van muise wat nie die dopamienvervoerder het nie. Eur J Neurosci (1999) 11:3499–511.10.1046/j.1460-9568.1999.00764.x [PubMed] [Kruisverwysing]
51. Klietz M, Keber U, Carlsson T, Chiu WH, Höglinger GU, Weihe E, et al. l-DOPA-geïnduseerde dyskinesie word geassosieer met 'n gebrekkige numeriese afregulering van striatale tyrosienhidroksilase mRNA-uitdrukkingsneurone. Neuroscience (2016) 331:120–33.10.1016/j.neuroscience.2016.06.017 [PubMed] [Kruisverwysing]
52. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Will MJ. Kortikostriatale-hipothalamiese stroombane en voedselmotivering: integrasie van energie, aksie en beloning. Physiol Behav (2005) 86:773–95.10.1016/j.physbeh.2005.08.066 [PubMed] [Kruisverwysing]
53. Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J, et al. Visualisering van hipotalamus-netwerkdinamika vir aptytwekkende en volmaakte gedrag. Cell (2015) 160:516–27.10.1016/j.cell.2014.12.026 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
54. O'Connor EC, Kremer Y, Lefort S, Harada M, Pascoli V, Rohner C, et al. Akkumbale D1R-neurone wat na laterale hipotalamus uitsteek, magtig voeding. Neuron (2015) 88:553–64.10.1016/j.neuron.2015.09.038 [PubMed] [Kruisverwysing]
55. Jennings JH, Rizzi G, Stamatakis AM, Ung RL, Stuber GD. Die inhiberende kringargitektuur van die laterale hipotalamus orkestreer voeding. Science (2013) 341:1517–21.10.1126/science.1241812 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
56. Stratford TR, Wirtshafter D. Laterale hipotalamus-betrokkenheid by voeding wat uit die ventrale pallidum ontlok word. Eur J Neurosci (2013) 37:648–53.10.1111/ejn.12077 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]
57. Paille V, Fino E, Du K, Morera-Herreras T, Perez S, Kotaleski JH, et al. GABAergiese stroombane beheer piektyd-afhanklike plastisiteit. J Neurosci (2013) 33:9353–63.10.1523/JNEUROSCI.5796-12.2013 [PubMed] [Kruisverwysing]
58. Fonseca MS, Murakami M, Mainen ZF. Aktivering van dorsale raphe serotonergiese neurone bevorder wag, maar is nie versterkend nie. Curr Biol (2015) 25:306–15.10.1016/j.cub.2014.12.002 [PubMed] [Kruisverwysing]
59. Doya K. Metaalleer en neuromodulasie. Neurale Netw (2002) 15:495–506.10.1016/S0893-6080(02)00044-8 [PubMed] [Kruisverwysing]
60. Leibowitz SF, Alexander JT. Hipotalamus serotonien in beheer van eetgedrag, maaltydgrootte en liggaamsgewig. Biol Psychiatry (1998) 44:851–64.10.1016/S0006-3223(98)00186-3 [PubMed] [Kruisverwysing]
61. Voigt JP, Fink H. Serotonien wat voeding en versadiging beheer. Behav Brain Res (2015) 277:14–31.10.1016/j.bbr.2014.08.065 [PubMed] [Kruisverwysing]
62. Brenachot X, Rigault C, Nédélec E, Laderrière A, Khanam T, Gouazé A, et al. Die histoon-asetieltransferase MOF aktiveer hipotalamus-polisialilering om dieet-geïnduseerde vetsug by muise te voorkom. Mol Metab (2014) 3:619–29.10.1016/j.molmet.2014.05.006 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruisverwysing]