Variasie in oksitosienreseptortensiteit in die Nucleus Accumbens het differensiële effekte op affiliatiewe gedrag in monogame en poligame volumes (2009)

J Neurosci. Skrywer manuskrip; Beskikbaar in PMC Oct 27, 2009.

Gepubliseer in finale geredigeerde vorm as:

PMCID: PMC2768419

NIHMSID: NIHMS93410

Die uitgewer se finale geredigeerde weergawe van hierdie artikel is gratis beskikbaar by J Neurosci

Sien ander artikels in PMC dat noem die gepubliseerde artikel.

Spring na:

Abstract

Oksitosienreseptore in die nucleus accumbens is geïmpliseer in die regulering van alloparentale gedrag en paarbindingsvorming in die sosiaal monogame prairie vole. Oksitosienreseptordigtheid in die nucleus accumbens is positief gekorreleer met alloparenting in jong en volwasse vroulike prairievols, en oksitosienreseptorantagonis wat in die nucleus accumbens toegedien word, blokkeer hierdie gedrag. Verder, prairie voles het hoër digthede van oksitosienreseptore in die akkumbene as nie-monogaam knaagdier spesies, en blokkering van akkumbal oksitosien reseptore verhoed paring-geïnduseerde vennoot voorkeur vorming. Hier het ons adeno-geassosieerde virale vektor geenoordrag gebruik om die funksionele verwantskap tussen akkumbale oksitosienreseptordigtheid en sosiale gedrag in prairie- en weivols te ondersoek. Volwasse vroulike prairievols wat oksitosienreseptor in die nucleus accumbens ooruitdruk, het versnelde vennootvoorkeurvorming getoon na saamwoon met 'n mannetjie, maar het nie verbeterde allo-ouerlike gedrag getoon nie. Vennootvoorkeur is egter nie gefasiliteer in nie-monogame weivols deur oksitosienreseptor in die nucleus accumbens in te voer nie. Hierdie data bevestig 'n rol vir oksitosienreseptor in die accumbens in die regulering van vennootvoorkeure in vroulike prairievols, en dui daarop dat oksitosienreseptoruitdrukking in die accumbens nie voldoende is om vennootvoorkeure in nie-monogaam spesies te bevorder nie. Hierdie data is die eerste om 'n direkte verband tussen oksitosienreseptordigtheid in die nucleus accumbens en variasie in sosiale aanhegtingsgedrag te demonstreer. Dus, individuele variasie in oksitosienreseptor-uitdrukking in die striatum kan bydra tot natuurlike diversiteit in sosiale gedrag.

sleutelwoorde: moeder, virus, voorkeur, neuropaptied, kognisie, outoradiografie

INLEIDING

Mikrotine knaagdiere vertoon 'n merkwaardige diversiteit in sosiale gedrag, wat wissel van hoogs geaffilieerde en sosiaal monogaam, tot relatief asosiale en promiskue paringstrategieë (Gruderadams en Getz, 1985). Die sosiaal monogame prairie vole (Microtus ochrogaster) vorm blywende sosiale gehegtheid, of paar bindings, aan 'n vennoot van teenoorgestelde geslag na saamwoon en paring, terwyl nie-monogamie weivols (Microtus pennsylvanicus) tipies nie. Volwasse seksueel naïewe vroulike prairievols toon aansienlike diversiteit in hul spontane koestergedrag, of allo-ouerlike gedrag, met ongeveer die helfte wat moederlike gedrag teenoor kleintjies toon, terwyl die res kleintjies ignoreer of aanval (Lonstein en De Vries, 1999; Bales en Carter, 2003; Olazabal en Young, 2005). Dus bied voles 'n uitstekende geleentheid om die neurobiologiese meganismes onderliggend aan sosiale aanhegting en allo-ouerlike sorg te ondersoek, sowel as die meganismes wat lei tot diversiteit in hierdie gedrag, beide oor spesies en tussen individue.

Die nonapeptied oksitosien (OT) is geïmpliseer in die regulering van beide vennoot voorkeur vorming en alloparentale gedrag in prairie voles. Infusie van 'n oksitosienreseptor (OTR) antagonis in die nucleus accumbens (NAcc), maar nie in die aangrensende caudate putamen blokkeer paring-geïnduseerde vennoot voorkeur vorming, 'n laboratorium proxy van paar binding vorming (Young et al., 2001). Soortgelyke infusies van OTR-antagonis in die NAcc blokkeer ook alloparentale gedrag by maagdelike wyfies (Olazabal en Young, 2006b). Aktivering van OTR's in die NAcc fasiliteer dus beide vennootvoorkeurvorming en allo-ouerlike gedrag in vroulike prairievols.

Variasie in OTR-digtheid in die NAcc is veronderstel om by te dra tot spesieverskille in sosiale organisasie en allo-ouerlike gedrag. Prairievols het hoë digthede van OTR in die NAcc, terwyl nie-monogaam weivols, muise en rotte nie (Insel en Shapiro, 1992; Olazabal en Young, 2006a). Prairie vols vertoon ook hoër vlakke van allo-ouerlike gedrag as weivols, muise of rotte (Olazabal en Young, 2006a). Parallel aan hierdie inter-spesie-verwantskap tussen OTR-digtheid in die NAcc en ouerlike gedrag, is OTR-digtheid in die NAcc positief gekorreleer met allo-ouerlike gedrag in beide jong en volwasse vroulike prairie voles (Olazabal en Young, 2006b, a). In hierdie studie het ons adeno-geassosieerde virale vektor (AAV) geenoordrag gebruik om die hipotese direk te toets dat variasie in NAcc OTR digtheid kan bydra tot variasie in sosiale gehegtheid en allo-ouerlike gedrag. Volwasse vroulike prairie voles is bilateraal in die NAcc geïnfuseer met 'n AAV wat kodeer vir die prairie vole OTR geen, wat gelei het tot 'n beduidende verhoging in OTR binding. Diere is toe getoets vir allo-ouergedrag en vennootvoorkeurvorming. Ons het toe die hipotese getoets dat OTR-uitdrukking in die NAcc voldoende was om vennootvoorkeurvorming te fasiliteer deur vroulike weivols met dieselfde vektor te infuseer. Ons het voorspel dat in vergelyking met kontroles, OTR-ooruitdrukking vroulike prairie voles sal verhoogde alloparentale gedrag en versnelde vennoot voorkeur vorming toon. Verder het ons voorspel dat wyfies wat OTR in die NAcc uitdruk, vennootvoorkeure teenoor manlike vennote sou ontwikkel.

MATERIAAL EN METODES

diere

Prairie- en weivols is in dieselfde geslagsgroepe gehuisves met 2-3 vols/hok vanaf die tyd van speen op 21-23 dae oud. Behuising het bestaan ​​uit 'n geventileerde 36×18×19cm Plexiglas hok gevul met Bed-ocobbs Laboratorium Dier Beddegoed onder 'n 14:10 uur lig/donker siklus by 22°C met toegang tot kos (konyn LabDiet, Richmond, IN) en water ad libitum . Die prairievols is verkry uit ons laboratorium-teelkolonie wat oorspronklik afkomstig is van veld-gevange vols in Illinois. Weivols is afkomstig van vee wat verkry is van 'n broeikolonie by Florida State University. Proefpersone was 2-5 maande oue ongeskonde seksueel naïewe vroulike vols. Stimulusdiere was seksueel ervare volwasse mannetjies. Elke mannetjie het as 'n "maat" en 'n "vreemdeling" gedien tydens die maat-voorkeurtoets (sien hieronder). Rommelmaats is aan verskillende behandelingsgroepe ingedeel om te beheer vir wisselvalligheid binne werpsels en binne hokke. Alle prosedures is deur die Emory Universiteit se Institusionele Dieresorg- en Gebruikskomitee goedgekeur.

Adeno-geassosieerde virale vektore

Die OTR-koderingsvolgorde is geskep deur die eerste ekson van 'n prairie vole OTR genomiese kloon wat vir die eerste vyf transmembraandomeine kodeer (Genbank-toetredingsnommer) te splyt AF079980) en die 3'-punt van die OTR geamplifiseer vanaf prairie vole uterus cDNA. Die koderingsvolgorde is herraam deur gebruik te maak van PCR om die UTR's uit te skakel en nuwe flankerende beperkingsplekke te verskaf om kloning in die AAV vektorplasmied te fasiliteer. Die gemodifiseerde geen is dan in 'n AAV2 vektorplasmied gekloneer tussen 'n 0.6 kb sitomegalovirus (CMV) promotor en 'n SV40 DNA fragment wat die SV40 klein t intron en polyA sein bevat. Die AAV2-OTR is gekruisverpak in AAV9 deur 'n drievoudige plasmied transfeksie in AAV-293 selle (Stratagene, La Jolla, CA) deur gebruik te maak van 'n standaard kalsiumfosfaat presipitasie metode. Geen helpervirus is aangewend nie. 'n AAV2-eGFP plasmied is in parallel verpak in AAV9 as 'n negatiewe kontrole vektor. Kortliks, elke AAV vektorplasmied, 'n AAV2/9 rep/cap plasmied wat AAV2 replikase en AAV9 kapsiedfunksies verskaf, en 'n 3rd plasmied wat kodeer vir Adenovirus helper funksies, pHelper (Stratagene), is mede-transfekteer in 293 selle teen 'n molêre verhouding van 1:1:1. Selle is 48 uur na transfeksie geoes. Die selkorrels is dan weer in DMEM gesuspendeer, en die intrasellulêre virusdeeltjies is vrygestel deur drie opeenvolgende rondtes van vries-ontdooi, gevolg deur sentrifugering teen 13,000 10 rpm vir 80 minute op 'n tafelblad sentrifuge om deeltjies te verwyder. Die vektorvoorraad is by -7700 C gestoor en deur intydse PCR getiter met 'n ABI Prism 10 Sequence Detection System van Perkin-Elmer Applied Biosystems (Foster City, CA). Titers was in die orde van XNUMX12 DRP/ml. (DRP = Dnase-weerstandige deeltjies).

Virale Vektor Infusie

Stereotaksiese infusies is uitgevoer onder isofluraan-narkose in 'n Kopf stereotaks toegerus met 'n Ultra Micro Pump II (World Precision Instruments, Sarasota, FL) en 'n 26-maat Hamilton spuit. Wyfies is bilateraal in die dop van die NAcc ingespuit (prairie voles: AP +1.7mm, ML .9mm, DV -4.5mm, weide voles: AP +1.6mm, ML .9mm, DV -4.3mm) met 750nl van óf 'n AAV wat die vol oksitosienreseptor bevat (CMV-OTR, N=12), of 'n kontrole-eGFP-uitdrukkingsvektor (CMV-GFP, N=16). Virus is toegedien teen 'n tempo van 93.8nl/min. Die spuit is in plek gelaat vir 5 minute na infusie om verspreiding van vektor op die naaldbaan te minimaliseer. Sham geopereerde diere (N =9) is verdoof en hul kopvel is ingesny en geheg. Na die operasie is diere in groepe gehuisves tot tyd van maat voorkeurgedragstoetsing. Voorlopige studies het aangedui dat OTR uitdrukking op die plek van inspuiting stabiel was na 10 dae.

Allo-ouerlike gedragstoetsing

Een maand na inspuiting is die prairievols vir allo-ouerlike gedrag getoets. Toetsing het tussen 0800h en 1800h plaasgevind. Toetsdiere is in 'n groot skoon hok (45.5×24×20cm) geplaas en toegelaat om vir 15min te akklimatiseer. Twee kleintjies (2-5 dae oud) is aan die een kant van die hok geplaas. Die latensie om die kleintjies te nader, die aantal diere wat die kleintjies aangeval het, en die hoeveelheid tyd wat spandeer word om die kleintjies te versorg, te sweef en te haal, is aangeteken. 'n Latensie van 900 sekondes is toegeken aan diere wat nie die kleintjies genader het tydens die 15 minute toets vir die doel van statistiese analise nie. Toetsing is onmiddellik gestaak as die wyfie die kleintjies aangeval het. Diere is as allo-ouerlik gekategoriseer as hulle meer as 30 sekondes spandeer het om die kleintjies te lek sonder om aan te val. Gebaseer op die resultate van die eksperiment met prairievols, is weivols nie vir allo-ouerlike gedrag getoets nie.

Vennootvoorkeurtoetsing (Prairie Vole)

Een maand na die allo-parentale gedragstoetsing, en twee maande na AAV-infusie, is vrouens 4 μg estradiolbenzoaat (EB; Fisher, Pittsburgh, PA) daagliks opgelos in 0.1ml sesamolie IP daagliks vir 3 dae voor paring gegee om seksuele te veroorsaak ontvanklikheid. 16 uur na die laaste EB-inspuiting is diere vir 28 uur in 'n skoon hok (17×12×6cm) met 'n seksueel ervare volwasse mannetjie geplaas en dan teruggekeer na groepbehuising. Paringsgedrag is aangeteken tydens die aanvanklike 6 uur saamwoon. Die vertraging tot eerste intromissie en die aantal parings in die eerste uur is aangeteken. 'n Latensie van 3600 sekondes is toegeken aan diere wat nie gedurende die 1 uur periode gepaar het vir die doel van statistiese analise nie. Die volgende oggend (14 uur na die saamwoon), is die diere getoets vir lewensmaatvoorkeur. In 'n maatvoorkeurtoets word die eksperimentele wyfie in 'n neutrale middelste kamer van 'n driekamerapparaat geplaas, waarin die maatmannetjie in een sykamer vasgemaak is en 'n nuwe "vreemde" mannetjie in die ander vasgemaak is (Williams et al., 1992). Die proefdier is vry om deur die kamers te beweeg en die tyd wat in die nabyheid van elke mannetjie spandeer word, word aangeteken deur gebruik te maak van 'n outomatiese straalbreekstelsel (Curtis en Wang, 2005b, a; Lim et al., 2007).

'n Dag later is die wyfies weer met dieselfde maat gepaar vir 'n bykomende 12 uur se saambly. Die wyfies is toe weer getoets vir 'n maatvoorkeur (18 uur totale kontaktyd). Hierdie tweefase-paradigma is gebruik om ons opsporing van 'n fasilitering van vennootvoorkeurtoets te maksimeer, aangesien daar variasie is in die drempeltyd wat nodig is om 'n vennootvoorkeur te vorm. Diere is as 'n maatvoorkeur beskou as hulle twee keer soveel tyd in die nabyheid met die maat spandeer as met die vreemdeling.

Vennootvoorkeurtoetsing (Meadow vole)

Tipies weivols van ons kolonie sal nie 'n paarbinding vorm na 24 uur se maat blootstelling nie. Daarom is maatvoorkeurtoetse vir hierdie eksperiment uitgevoer na 'n saamwoon van 24 en 'n bykomende 48 uur (totaal 72 uur). Alle ander behandelings- en toetsmetodes is dieselfde as hierbo.

Weefselversameling en verwerking

Na aanleiding van die gedragseksperimente is diere onthoof na diep narkose met isofluoraan. Die brein is dan versamel en op droë ys gevries. Die breine is deur die NAcc in 6-reekse by 20μm, op 'n kryostaat, op Fisher Frost-plus-skyfies gesny. Skyfies is by -80C gestoor totdat dit in outoradiografie gebruik is.

OTR outoradiografie

OTR reseptor outoradiografie is gebruik om OTR binding in AAV ingespuite diere te bepaal. Outoradiografie is uitgevoer soos voorheen beskryf met geringe wysigings (Insel et al., 1991; Wang en Young, 1997). Seksies is verwyder van -80C stoor, toegelaat om te lug, gedoop in 0.1% paraformaldehied in fosfaat-gebufferde soutoplossing (pH 7.4), en twee keer gespoel in 50 mM Tris buffer (pH 7.4) om endogene OT te verwyder. Vervolgens is die weefsel in 50 pM geïnkubeer 125I-OVTA (NEX 254050UC PerkinElmer, Waltham, MA) vir een uur. Ongebonde radioligand is verwyder deur vier wassings in 50mM Tris plus 2% MgCl2 (pH 7.4) en dan in dH gedoop20 en lug gedroog onder 'n stroom koel lug. Sodra dit droog is, is die skyfies vir 72 uur aan BioMax MR-film (Kodak, Rochester, NY) blootgestel. Twee CMV-OTR- en een CMV-GFP-diere is uitgesluit van die gedragsanalise as gevolg van inspuitingsmis.

GFP Immunohistochemie

'n Subset van die diere (N=5) wat met CMV-GFP ingespuit is, is transkardiaal geperfuseer met 50 ml PBS, gevolg deur 50 ml 4% paraformaldehied in 0.1 M fosfaatbuffer wat 2.5% akroleïen bevat (Polysciences, Warrington, PA). Onmiddellik na perfusie is die brein verwyder en by 4°C in 30% sukrose-oplossing gestoor totdat dit gesny is. Die breine is in 25μm koronale snitte gesny met 'n vriesende mikrotoom en vryswewend in kriobeskermende oplossing by -20°C gestoor tot immunohistochemiese verwerking.

'n 1:6-reeks deur die rostrocaudale as van elke brein is vir GFP verwerk. Kortliks, dele is uit die kriobeskermende oplossing verwyder, breedvoerig in kaliumfosfaat-gebufferde soutoplossing (pH 7.4) gespoel en dan vir 15 minute in 1% natriumboorhidried gereageer om oortollige aldehiede te verwyder. Seksies is dan geïnkubeer in primêre teenliggaampies gerig teen GFP in kaliumfosfaat-gebufferde soutoplossing (KPBS) wat 0.1% Triton-X bevat vir 1 uur by kamertemperatuur gevolg deur 48 uur by 4°C. Selle wat GFP bevat is geïdentifiseer deur 'n poliklonale konyn anti-GFP teenliggaam (Kat. No. A6455, Invitrogen, Carlsbad, CA) teen 'n konsentrasie van 1:100,000 te gebruik. Na primêre teenliggaam-inkubasie is die weefsel in KPBS gespoel, vir 1 uur in gebiotinileerde bok anti-konyn IgG (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) by 'n konsentrasie van 1:600 ​​geïnkubeer en in KPBS gespoel, gevolg deur 'n 1- uur inkubasie in avidien-biotienperoksidase kompleks (ABC Elite Kit PK-6100 Vector, Burlingame, CA) by 'n konsentrasie van 1:200. Na spoel in KPBS en Tris buffer (pH 7.2), is GFP gevisualiseer as 'n bruin reaksie produk deur gebruik te maak van 3,3'-diaminobenzidien wat 0.08% waterstofperoksied in Tris buffer bevat. Die reaksieproduk is na ongeveer 20 minute beëindig deur in Tris-buffer te spoel. Seksies is uit soutoplossing op skyfies met gelatien gemonteer, luggedroog, gedehidreer in 'n reeks gegradeerde alkohole, skoongemaak in Histoclear (National Diagnostics, Atlanta, GA), en bedek met Krystalon (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ).

Statistiese analise

Data word aangebied as gemiddelde ± standaardfout van die gemiddelde (SEM). 'n Tweerigting RM ANOVA is uitgevoer met die gebruik van tyd spandeer met elke stimulusdier as die afhanklike veranderlike, die binne-subjekte-faktor was vennoot of vreemdeling, en behandelingsgroep as die tussen-subjektfaktor. Die Holm-Sidak Toets is gebruik vir post hoc paarsgewyse vergelykings wanneer 'n beduidende interaksie effek waargeneem is. Een manier ANOVAs is uitgevoer op allo-ouerlike en paringsgedrag vir prairie voles. Daardie gedrag wat nie aan die kriteria vir normaliteit voldoen het nie, is ontleed deur gebruik te maak van die Kruskal-Wallis One Way Analysis of Variance on Ranks. 'n Fisher's Exact Toets is gebruik om groepverskille in die proporsie diere wat allo-ouerlike gedrag toon, te bepaal. Meadow vole paring gedrag is ontleed met behulp van 'n t-toets en Mann-Whitney Rank Sum Toets toe die normaliteit toets misluk het.

RESULTATE

Allo-ouerlike gedrag in Prairie Voles

Die proporsie CMV-OTR ingespuite vroulike prairievols wat allo-ouerlike gedrag vertoon (3/9) het nie verskil van die kontrole (4/15) of skynvols (3/10) (p > 0.5); Figuur 1A). Twee CMV-OTR, vier CMV-GFP kontrole, en twee skynwyfies, wat as nie-alloparentaal gekategoriseer is, het die kleintjies aangeval. Die latensie om kleintjies te nader (Figuur 1B) en tyd spandeer aan lek/versorging het ook nie betekenisvol tussen die groepe verskil nie (H= 0.31, P > 0.8 vir latensie, H= 0.40, P > 0.8 vir versorging). Toe slegs die diere vergelyk is wat die kriteria van allo-ouerskap bereik het, was die latensie om kleintjies te nader vir CMV-OTR-wyfies (140.2±65.2 sekondes) nie anders as CMV-GFP (62.5±39.3 sekondes) of skyn (169.4±51.7 sekondes) ) wyfies (F(2,7)= 1.27, p > 0.3). Daar was ook geen verskil in die hoeveelheid tyd wat die alloparentale CMV-OTR-wyfies spandeer het om kleintjies te lek in vergelyking met die alloparentale CMV-GFP of skynwyfies nie (F(2,7)= 1.94, p > 0.2; Figuur 1C). Die totale hoeveelheid tyd wat elke groep spandeer het om die kleintjies te lek/versorg, sweef en dra was ook nie verskillend tussen die allo-parentale CMV-OTR (695.2±77.1 sekondes) CMV-GFP (387.5±132.7 sekondes) of skyn (503.8±82.8 sekondes) ) diere (F(2,7)= 1.98, p > 0.2).

Figuur 1  

Allo-parentale gedrag in skyn, CMV-GFP en CMV-OTR vroulike prairie voles. A) Daar was geen effek van behandeling op die verhouding van vroue in elke behandelingsgroep wat allo-ouerlike gedrag getoon het nie. Die donker stawe verteenwoordig die persentasie diere wat ...

Paringsgedrag in Prairie Voles

Paringsgedrag is nie beduidend beïnvloed deur die wyfies se vorige chirurgiese behandeling nie. Die latensie tot eerste intromissie was nie betekenisvol verskillend by mans wat met CMV-OTR-wyfies gepaar is in vergelyking met mans wat met CMV-GFP of skyn-wyfies gepaar is nie (H= 5.043, p = .08; Figuur 2A). Alhoewel die CMV-OTR-groep geneig was om gouer te paar as die ander groepe, het hulle nie meer gereeld gepaar nie. Die aantal parings in die eerste uur het nie verskil in pare wat CMV-OTR-wyfies bevat van pare wat CMV-GFP of skynwyfies bevat nie (F(2,31) = 0.46, p > 0.6; Figuur 2B).

Figuur 2  

Paring en lewensmaat voorkeurgedrag in skyn-, CMV-GFP en CMV-OTR vroulike prairie voles. Die latensie tot eerste intromissie (A) en die aantal parings (B) was nie betekenisvol verskillend tussen die groepe nie. C) Na 'n 6 uur saamwoonperiode, ...

Vennootvoorkeurgedrag in Prairie Voles

Na die 6 uur saamwoonperiode het nie een van die groepe 'n beduidende vennootvoorkeur getoon nie (Figuur 2C). Daar was geen hoofeffek van behandeling (F(2,31) = 0.56, p > 0.5) of tyd spandeer saam met die maat teenoor die vreemdeling (F(1,31)= 0.46, p > 0.5). Na 'n bykomende 12 uur se saamwoon was daar geen hoofeffek van behandeling (F(2,29) =.78, p = 0.5) of die hoeveelheid tyd wat saam met die maat spandeer word teenoor vreemdeling nie (F(1,29)= 3.71 , p = 0.06). Daar was egter 'n betekenisvolle interaksie-effek (F(2,29)=5.56, p = 0.009). Die post-hoc-toets het aan die lig gebring dat CMV-OTR-wyfies aansienlik meer tyd in die nabyheid van die maat spandeer het as aan die vreemdeling (p < 0.001; Figuur 2D). Die CMV-GFP en skynwyfies kon egter nie 'n maatvoorkeur toon na hierdie tydperk nie (p > 0.05; Figuur 2D). Daarbenewens het 80% van CMV-OTR ingespuite vols die kriteria bereik om 'n maatvoorkeur te hê, dws om twee keer soveel tyd saam met die maat as die vreemdeling deur te bring, vergeleke met slegs 31% van CMV-GFP wat ingespuit is en 44% van skyndiere (Figuur 2E,F).

OTR- en GFP-uitdrukking in die NAcc van Prairie Voles

Outoradiografie is gedoen om plasing van AAV-inspuiting te bepaal en om te verifieer dat die CMV-OTR vektor tot verhoogde OTR-binding gelei het in vergelyking met kontroles. Soos voorheen gerapporteer, was daar beduidende individuele variasie in OTR-binding in die NAcc van kontrole CMV-GFP prairie voles (Figuur 3A, B). Duidelike verhogings in OTR-binding is opgespoor in die NAcc van CMV-OTR ingespuite prairie voles (Figuur 3C). Daarbenewens is GFP immunohistochemie uitgevoer op breinseksies van CMV-GFP diere om die mate van uitdrukking in neurone van die NAcc te bepaal. Duidelike etikettering van selle met neuronale kenmerke is opgespoor, wat bevestig dat die CMV AAV vektore uitdrukking in neurone aangedryf het (Figuur 3E,F).

Figuur 3  

Analise van OTR en GFP uitdrukking in CMV-OTR en CMV-GFP vroulike prairie voles. OTR-digtheid is bepaal met behulp van reseptor-outoradiografie. A, B) Daar was betekenisvolle variasie in die digtheid van OTR-binding in die NAcc van CMV-GFP-wyfies. Dit is in kontras ...

Paringsgedrag in Meadow Voles

Geen beduidende verskille in paringsgedrag is tussen die behandelingsgroepe in weivols waargeneem nie. Die latensie tot eerste intromissie was nie anders by mans wat met CMV-OTR (1245.1±1465.9 sekondes) wyfies gepaar is, in vergelyking met mans wat gepaar is om CMV-GFP (566.6±989.8 sekondes) vrouens te beheer (T= 128.0, p > 0.2). Die aantal parings in die eerste uur het ook nie verskil in pare wat CMV-OTR (6.8±5.1) wyfies bevat van pare wat CMV-GFP (9.5±4.4) wyfies bevat (t= 1.42, p > 0.1).

Vennootvoorkeur in Meadow Voles

Na 'n 24-uur saamwoonperiode het nie een van die groepe 'n beduidende vennootvoorkeur getoon nie (Figuur 4A). Daar was geen hoofeffek van behandeling (F(1,20) = 0.19, p > 0.6) of tyd spandeer saam met maat teenoor vreemdeling (F(1,20) = 0.09, p > 0.7). Na 'n bykomende 48 uur van saamwoon was daar weer geen beduidende hoofeffek van behandeling (F(1,19)=.65, p > 0.4) of tyd spandeer met enige vroulike (F(1,19) = 0.62, p> .4; Figuur 4B).

Figuur 4  

Maatvoorkeurgedrag van vroulike weivols na 'n 24 uur samewoning (A) en na 'n kulmulatiewe 72 uur samewoning (B). CMV-OTR en CMV-GFP ingespuitte wyfies het nie 'n maatvoorkeur getoon nie. Hulle het ewe veel tyd saam met die maat deurgebring ...

OTR-uitdrukking in die NAcc van Meadow Voles

CMV-GFP ingespuite weivols het min of geen OTR-binding in die NAcc (Figuur 5A). Daarenteen het CMV-OTR ingespuite weivols beduidende OTR-binding in die NAcc gehad, vergelykbaar met dié van die prairievols (Figuur 5B).

Figuur 5  

Reseptor-outoradiografie wat OTR-bindingsdigtheid in die NAcc van CMV-OTR (A) en CMV-GFP (B) weivols illustreer. Let daarop dat CMV-GFP vroulike weivols min of geen OTR-binding in die NAcc gehad het nie. OTR-binding in die NAcc was egter dramaties verhoog ...

BESPREKING

Spesieverskille in OTR-digtheid in die NAcc is geassosieer met spesieverskille in paringstrategie (sosiale monogamie vs poligamie) en allo-ouerlike gedrag, wat daarop dui dat variasie in OTR-reseptoruitdrukking onderliggend kan wees aan spesieverskille in sosiale organisasie en gedrag (Insel et al., 1991; Jong en Wang, 2004; Olazabal en Young, 2006b). Sosiaal monogame prairievols het hoër digthede van OTR in die NAcc as nie-monogaam wei- en bergvols, en farmakologiese blokkade van daardie reseptore verhoed paring-geïnduseerde vennootvoorkeurvorming (Young et al., 2001; Olazabal en Young, 2006b). Daar is ook beduidende individuele variasie in OTR-digtheid in die NAcc binne prairie voles (Figuur 3A, B). OTR-digtheid in hierdie streek is positief gekorreleer met individuele variasie in allo-ouerlike gedrag van volwasse seksueel naïewe vroulike prairie voles (Jong, 1999; Olazabal 2006) en OTR-antagonis-administrasie in die NAcc elimineer hierdie gedrag (Olazabal en Young, 2006a). Daarom het ons in hierdie studie probeer om die verband tussen reseptordigtheid in die NAcc en affiliatiewe gedrag in voles direk te toets deur AAV geenoordrag te gebruik.

Ons resultate toon dat, soos voorspel, vroulike prairievols met verhoogde vlakke van OTR in die NAcc versnelde vennootvoorkeurvorming vertoon in vergelyking met wyfies met laer OTR-digtheid (CMV-GFP of shams). CIn teenstelling met ons voorspelling, was daar geen verskil in allo-ouerlike gedrag tussen groepe nie, wat dui op differensiële meganismes waardeur akkumbale OTR vennootvoorkeurvorming en allo-ouerlike gedrag reguleer. Ons resultate ondersteun die hipotese dat individuele verskille in OTR uitdrukking bydra tot intra-spesie variasie in sommige aspekte van affiliatiewe gedrag. Toenemende OTR-uitdrukking in die NAcc was egter nie voldoende om vennootvoorkeurvorming in weivols te veroorsaak nie, selfs na 72 uur van saamwoon, wat daarop dui dat die spesieverskille in akkumbale OTR alleen nie voldoende is om die spesieverskille in die vermoë om vennoot te vorm te verduidelik nie. voorkeure. Dit is belangrik om daarop te let dat daar geen groepsverskille in paringsgedrag was in enige van die parameters wat ondersoek is nie. Daarom kan die verbeterde vennootvoorkeur in die eksperimentele prairie voles nie toegeskryf word aan verhoogde seksuele aktiwiteit gedurende die aanvanklike saamwoonperiode nie.

Volwasse vroulike prairievols toon merkwaardige individuele variasie in hul vertoon van allo-ouerlike sorg. Ongeveer 50% van seksueel naïewe wyfies sal spontaan haal, lek/versorg en oor die kleintjies wat aan hulle aangebied word (sweef)Lonstein en De Vries, 1999; Bales en Carter, 2003; Olazabal en Young, 2005). Daar is ook beduidende individuele variasie in OTR-digtheid in die NAcc onder prairie voles (Jong, 1999). Wyfies met hoër digthede van OTR in die NAcc is meer geneig om allo-ouerlike responsiwiteit te vertoon as diere met 'n laer OTR in hierdie area. Dit was dus verbasend dat die verhoging van OTR-digtheid in die NAcc van prairie voles nie allo-ouerlike gedrag verbeter het nie. Die feit dat hierdie diere wel versnelde vennootvoorkeurvorming getoon het, dui daarop dat die OTR afkomstig van die virale vektor transgeen funksioneel gekoppel was aan seintransduksie weë in die NAcc.

Ons veronderstel dat individuele variasie in OTR-aktivering in die NAcc tydens ontwikkeling 'n meer belangrike rol kan speel in die vervaardiging van intra-spesie variasie in allo-ouerlike gedrag. Die positiewe korrelasie in OTR-digtheid in die NAcc en allo-ouerlike gedrag is getoon in jong prairie voles sowel as volwassenes (Olazabal en Young, 2006b, a). Alloparentale gedrag in prairie voles blyk veral sensitief te wees vir versteurings tydens ontwikkeling. Byvoorbeeld, perinatale blootstelling aan OT verander alloparentale gedrag in vroulike prairie voles (Bales et al., 2007). Daarom kan individue met hoër digthede van OTR tydens ontwikkeling verhoogde OTR-sein in die NAcc ervaar, wat lei tot langdurige neurochemiese veranderinge wat die waarskynlikheid verhoog om allo-ouerlike gedrag te vertoon soos hulle volwassenes word. As hierdie hipotese korrek is, sou ons voorspel dat die verhoging van OTR-uitdrukking in die NAcc neonataal die frekwensie van allo-ouerlike gedrag sal verhoog.

Nog 'n verduideliking vir die mislukking om OTR-uitdrukking in die NAcc te verbeter om allo-ouerlike gedrag te verhoog, is dat variasie in OTR-uitdrukking in verskeie breinstreke nodig mag wees om die verwagte diversiteit in gedrag te produseer. Byvoorbeeld, OTR uitdrukking in die laterale septum is negatief gekorreleer met alloparentale gedrag (Olazabal en Young, 2006a). Laastens is dit ook moontlik dat variasie in hormoonblootstelling of sosiale ervaring OTR-digtheid in die NAcc beïnvloed, benewens die verandering van allo-ouerlike gedrag. Byvoorbeeld, die teenwoordigheid of afwesigheid van die vader tydens ontwikkeling of perinatale manipulasie van steroïedhormone kan die vertoning van allo-ouerlike responsiwiteit in vroulike prairievols beïnvloed (Roberts et al., 1996; Roberts et al., 1998; Lonstein en De Vries, 2000).

By manlike prairievols speel vasopressien 'n kritieke rol in die vertoon van vaderlike gedrag sowel as die vorming van maatvoorkeure, parallel met die rol van oksitosien by wyfies (Winslow et al., 1993; Wang et al., 1994). Plekspesifieke farmakologiese studies toon dat V1aR in die ventrale pallidum, 'n groot uitset van die NAcc, krities is vir paarbindingsvorming (Lim en Young, 2004). Verhoging van V1aR in die ventrale pallidum met behulp van virale vektor-gemedieerde geenoordrag versnel vennootvoorkeurvorming van manlike prairievols (Pitkow et al., 2001), 'n bevinding wat ooreenstem met die huidige studie. Alhoewel die ooruitdrukking van V1aR in die ventrale pallidum van manlike weivols nie voldoende was om vaderlike gedrag te veroorsaak nie, het dit wel vennootvoorkeur bevorder (Lim et al., 2004); daarenteen, in die huidige studie het ooruitdrukking van OTR in die NaCC nie vennootvoorkeurvorming in vroulike weivols gestimuleer nie.

Daar is verskeie moontlike verklarings vir die mislukking van wyfiewyfies met verhoogde OTR in die NAcc om vennootvoorkeure te vorm. Eerstens kan spesieverskille in OT-vrystelling binne die NAcc tydens paring verskil tussen vroulike prairievols en weivols. Alhoewel OTR-lokalisering tussen die spesies verskil, het beide prairievols en weivols OT-immunoreaktiewe vesels in die NAcc (Ross en Young, ongepubliseerde data). In vivo mikrodialise-eksperimente het getoon dat paring OT-vrystelling in die NAcc van vroulike prairievols stimuleer, maar parallelle studies is nie in weivols uitgevoer nie (CD Cole en Young, ongepubliseerde data). Dit is moontlik dat infusie van OT in CMV-OTR-behandelde diere die vorming van vennootvoorkeure in weivols sal fasiliteer. Daar moet egter op gelet word dat in rotte en skape, vaginocervikale stimulasie sentrale OT vrystelling verhoog (Kendrick et al., 1986; Sansone et al., 2002). Daarom is dit waarskynlik dat weivols alreeds 'n toename in akkumbale OT met paring ervaar. Nog 'n verduideliking vir die mislukking van NAcc OTR-uitdrukking om vennootvoorkeurvorming in wyfie-volsmuise te stimuleer, is dat spesieverskille in OTR-uitdrukking in ander breinstreke ook nodig is vir paarbinding. Byvoorbeeld, OTR-digtheid is ook hoër in die prefrontale korteks en laterale amigdala in prairie voles in vergelyking met nie-monogaam vole spesies (Insel et al., 1991; Young et al., 1996; Smeltzer et al., 2006). Daarom kan die verhoging van OTR-uitdrukking in verskeie terreine nodig wees vir die stimulering van paring-geïnduseerde maat-voorkeure in weivols. Laastens is dit moontlik dat veelvuldige neurochemiese verskille tussen die spesies verantwoordelik is vir spesieverskille in gedrag (bv. dopamien, kortikotropien vrystellende faktor)(Gingrich et al., 2000; Liu en Wang, 2003; Smeltzer et al., 2006; Lim et al., 2007).

Daar is verskeie belangrike voorbehoude van ons eksperimentele benadering wat bespreking regverdig. Eerstens het die CMV-OTR waarskynlik OTR-uitdrukking in alle seltipes in die ingespuite area verhoog, insluitend neuronale populasies wat normaalweg nie op OT reageer nie. Dit is egter moontlik dat die transgeniese OTR gelei het tot groter sein in neurone wat normaalweg endogene OTR uitdruk as gevolg van verhoogde sensitisering vir OT wat op daardie neurone vrygestel word, of die teenwoordigheid van die toepaslike stroomaf seinmolekules. Tweedens, die area van transgeen-uitdrukking wat deur virale vektorinfusie geproduseer word, is nie eenvormig uitgedruk oor die hele rostraal-kaudale of medio-laterale omvang van die NAcc nie. In die CMV-OTR-wyfies was OTR-uitdrukking konsekwent verhoog in die dop en aangrensende kernstreke van die NAcc. Daar moet egter op gelet word dat dop van die NAcc die meeste geïmpliseer is in die regulering van vennootvoorkeurvorming en OTR-digtheid in dieselfde streek is meer gekorreleer met allo-ouerlike gedrag as die kernstreek.

Dit is die eerste studie om afdoende te demonstreer dat variasie in OTR uitdrukking in die brein kan bydra tot variasie in sosiale gedrag. OT is wyd geïmpliseer in die regulering van verskeie gedrag, insluitend sosiale inligting verwerking en geheue, maat keuse, moederlike koestering en gehegtheid (Dantzer et al., 1987; Kendrick, 2000; Ferguson et al., 2001; Kavaliers et al., 2003). Daar is nou duidelike bewyse dat OT ook menslike sosiale kognisie moduleer, insluitend interpersoonlike vertroue, oogblik, gesiggeheue en emosiepersepsie (Kosfeld et al., 2005; Domes et al., 2007; Guastella et al., 2008; Savaskan et al., 2008). OT-administrasie verhoog die behoud van sosiale kognisie in 'n stemintonasietaak in outistiese vakke (Hollander et al., 2007), en verskeie genetiese studies het beskeie assosiasies tussen nie-koderende polimorfismes van die OTR-geen en outismespektrumversteuring gerapporteer (Wu et al., 2005; Jacob et al., 2007; Lerer et al., 2007; Yrigollen et al., 2008). Daar is beperkte inligting oor die verspreiding van OTR, en niks is bekend oor individuele variasie in OTR-digtheid in die menslike brein nie. Ons resultate dui daarop dat variasie in OTR-digtheid in spesifieke breinstreke kan bydra tot individuele verskille in sosiale kognitiewe funksie by mense.

Bedankings

Die skrywers wil Lorra Mathews bedank vir haar uitstekende werk met die bestuur van ons wildsvoëlkolonie. Hierdie studie is ondersteun deur NIH-toekennings MH064692 aan LJY, RR00165 aan Yerkes Nasionale Primate Navorsingsentrum, en NSF STC IBN-9876754.

Verwysings

  1. Bales KL, Carter CS. Geslagsverskille en ontwikkelingseffekte van oksitosien op aggressie en sosiale gedrag in prairie voles (Microtus ochrogaster) Horm Behav. 2003; 44: 178-184. [PubMed]
  2. Bales KL, van Westerhuyzen JA, Lewis-Reese AD, Grotte ND, Lanter JA, Carter CS. Oksitosien het dosisafhanklike ontwikkelingseffekte op paarbinding en allo-ouerlike sorg in vroulike prairievols. Horm Gedrag. 2007;52:274–279. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  3. Curtis JT, Wang Z. Ventrale tegmentale area betrokkenheid by paarbinding in manlike prairie voles. Fisiol Gedrag. 2005a;86:338–346. [PubMed]
  4. Curtis JT, Wang Z. Glukokortikoïedreseptorbetrokkenheid by paarbinding in vroulike prairievols: die effekte van akute blokkade en interaksies met sentrale dopamienbeloningstelsels. Neurowetenskap. 2005b;134:369–376. [PubMed]
  5. Dantzer R, Bluthe RM, Koob GF, Le Moal M. Modulasie van sosiale geheue in manlike rotte deur neurohypofyse peptiede. Psigofarmakologie (Berl) 1987;91:363–368. [PubMed]
  6. Domes G, Heinrichs M, Michel A, Berger C, Herpertz SC. Oksitosien verbeter "koplees" by mense. Biol Psigiatrie. 2007;61:731–733. [PubMed]
  7. Ferguson JN, Aldag JM, Insel TR, Young LJ. Oksitosien in die mediale amigdala is noodsaaklik vir sosiale herkenning in die muis. J Neurosci. 2001;21:8278–8285. [PubMed]
  8. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamien D2-reseptore in die nucleus accumbens is belangrik vir sosiale aanhegting in vroulike prairie voles (Microtus ochrogaster) Behav Neurosci. 2000; 114: 173-183. [PubMed]
  9. Gruderadams S, Getz LL. Vergelyking van die paringstelsel en vaderlike gedrag in Microtus ochrogaster en Microtus pennsylvanicus. Tydskrif vir Mammalogie. 1985;66:165–167.
  10. Guastella AJ, Mitchell PB, Dadds MR. Oksitosien verhoog die blik op die oogstreek van menslike gesigte. Biol Psigiatrie. 2008;63:3–5. [PubMed]
  11. Hollander E, Bartz J, Chaplin W, Phillips A, Sumner J, Soorya L, Anagnostou E, Wasserman S. Oksitosien verhoog die behoud van sosiale kognisie in outisme. Biol Psigiatrie. 2007;61:498–503. [PubMed]
  12. Insel TR, Shapiro LE. Oksitosien reseptor verspreiding weerspieël sosiale organisasie in monogame en poligame volumes. Proc Natl Acad Sci VSA A. 1992; 89: 5981-5985. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  13. Insel TR, Gelhard R, Shapiro LE. Die vergelykende verspreiding van voorbreinreseptore vir neurohipofiseale peptiede in monogame en poligame muise. Neurowetenskap. 1991;43:623–630. [PubMed]
  14. Jacob S, Brune CW, Carter CS, Leventhal BL, Lord C, Cook EH., Jr Vereniging van die oksitosienreseptorgeen (OXTR) in Kaukasiese kinders en adolessente met outisme. Neurosci Lett. 2007;417:6–9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  15. Kavaliers M, Colwell DD, Choleris E, Agmo A, Muglia LJ, Ogawa S, Pfaff DW. Verswakte diskriminasie van en afkeer van geparasiteerde manlike reuke deur vroulike oksitosien-uitklopmuise. Gene se breingedrag. 2003;2:220–230. [PubMed]
  16. Kendrick KM. Oksitosien, moederskap en binding. Exp Physiol. 2000;85(Spes. No):111S–124S. [PubMed]
  17. Kendrick KM, Keverne EB, Baldwin BA, Sharman DF. Serebrospinale vloeistofvlakke van asetielcholienesterase, monoamiene en oksitosien tydens kraam, bevalling, vaginocervikale stimulasie, lamskeiding en soog by skape. Neuro-endokrinologie. 1986;44:149–156. [PubMed]
  18. Kosfeld M, Heinrichs M, Zak PJ, Fischbacher U, Fehr E. Oksitosien verhoog vertroue in mense. Aard. 2005;435:673–676. [PubMed]
  19. Lerer E, Levi S, Salomon S, Darvasi A, Yirmiya N, Ebstein RP. Assosiasie tussen die oksitosienreseptor (OXTR) geen en outisme: Verwantskap met Vineland Adaptive Behaviour Scales en kognisie. Mol Psigiatrie. 2007 [PubMed]
  20. Lim MM, Young LJ. Vasopressin-afhanklike neurale stroombane onderliggend aan koppeling van koppelings in die monogame prairie vole. Neuroscience. 2004; 125: 35-45. [PubMed]
  21. Lim MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Verbeterde vennootvoorkeur in 'n promiskue spesie deur die uitdrukking van 'n enkele geen te manipuleer. Aard. 2004;429:754–757. [PubMed]
  22. Lim MM, Liu Y, Ryabinin AE, Bai Y, Wang Z, Young LJ. CRF-reseptore in die nucleus accumbens moduleer vennootvoorkeur in prairie voles. Horm Gedrag. 2007;51:508–515. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitosien en dopamien wisselwerking om die bindingsvorming in vroulike prairie voles te reguleer. Neuroscience. 2003; 121: 537-544. [PubMed]
  24. Lonstein JS, De Vries GJ. Geslagsverskille in die ouerlike gedrag van volwasse maagdelike prairie voles: onafhanklikheid van gonadale hormone en vasopressien. J Neuroendocrinol. 1999;11:441–449. [PubMed]
  25. Lonstein JS, De Vries GJ. Invloed van gonadale hormone op die ontwikkeling van ouerlike gedrag in volwasse maagdelike prairie voles (Microtus ochrogaster) Behav Brain Res. 2000; 114: 79-87. [PubMed]
  26. Olazabal DE, Young LJ. Veranderlikheid in "spontane" moederlike gedrag word geassosieer met angsagtige gedrag en affiliasie by naïewe jeugdige en volwasse vroulike prairievols (Microtus ochrogaster) Dev Psigobiol. 2005;47:166–178. [PubMed]
  27. Olazabal DE, Young LJ. Spesies en individuele verskille in jeugdige vroulike alloouerlike sorg word geassosieer met oksitosienreseptordigtheid in die striatum en die laterale septum. Horm Gedrag. 2006a;49:681–687. [PubMed]
  28. Olazabal DE, Young LJ. Oksitosienreseptore in die nucleus accumbens fasiliteer "spontane" moederlike gedrag in volwasse vroulike prairie voles. Neurowetenskap. 2006b;141:559–568. [PubMed]
  29. Paxinos G, Watson C. Die rotbrein in stereotaksiese koördinate. vierde uitgawe Akademiese Pers; San Diego, Kalifornië: 1998.
  30. Pitkow LJ, Sharer CA, Ren X, Insel TR, Terwilliger EF, Young LJ. Fasilitering van affiliasie en paarbindingsvorming deur vasopressienreseptor geenoordrag na die ventrale voorbrein van 'n monogame volvoël. J Neurosci. 2001;21:7392–7396. [PubMed]
  31. Roberts RL, Zullo A, Gustafson EA, Carter CS. Perinatale steroïedbehandelings verander allo-parentale en affiliatiewe gedrag in prairie voles. Horm Gedrag. 1996;30:576–582. [PubMed]
  32. Roberts RL, Williams JR, Wang AK, Carter CS. Samewerkende teling en monogamie in prairie voles: Invloede van die vader en geografiese variasie. Diergedrag. 1998;55:1131–1140. [PubMed]
  33. Sansone GR, Gerdes CA, Steinman JL, Winslow JT, Ottenweller JE, Komisaruk BR, Insel TR. Vaginocervikale stimulasie stel oksitosien vry in die rugmurg by rotte. Neuro-endokrinologie. 2002;75:306–315. [PubMed]
  34. Savaskan E, Ehrhardt R, Schulz A, Walter M, Schachinger H. Na-leer intranasale oksitosien moduleer menslike geheue vir gesigsidentiteit. Psigoneuro-endokrinologie. 2008;33:368–374. [PubMed]
  35. Smeltzer MD, Curtis JT, Aragona BJ, Wang Z. Dopamien-, oksitosien- en vasopressienreseptorbinding in die mediale prefrontale korteks van monogame en promiskue voles. Neurosci Lett. 2006;394:146–151. [PubMed]
  36. Wang Z, Jong LJ. Ontogenie van oksitosien- en vasopressienreseptorbinding in die laterale septum in prairie- en bergvols. Brein Res Dev Brein Res. 1997;104:191–195. [PubMed]
  37. Wang Z, Ferris CF, De Vries GJ. Rol van septale vasopressien-innervering in vaderlike gedrag in prairie voles (Microtus ochrogaster) Proc Natl Acad Sci US A. 1994;91:400–404. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  38. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Ontwikkeling van vennootvoorkeure in vroulike prairie voles (Microtus ochrogaster): die rol van sosiale en seksuele ervaring. Horm Behav. 1992; 26: 339-349. [PubMed]
  39. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. 'n Rol vir sentrale vasopressien in paarbinding in monogame prairie voles. Aard. 1993;365:545–548. [PubMed]
  40. Wu S, Jia M, Ruan Y, Liu J, Guo Y, Shuang M, Gong X, Zhang Y, Yang X, Zhang D. Positiewe assosiasie van die oksitosienreseptorgeen (OXTR) met outisme in die Chinese Han-bevolking. Biol Psigiatrie. 2005;58:74–77. [PubMed]
  41. Jong LJ. Frank A. Beach-toekenning. Oksitosien- en vasopressienreseptore en spesie-tipiese sosiale gedrag. Horm Gedrag. 1999;36:212–221. [PubMed]
  42. Young LJ, Wang Z. Die neurobiologie van paarbinding. Nat Neurosci. 2004;7:1048–1054. [PubMed]
  43. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Sellulêre meganismes van sosiale gehegtheid. Horm Gedrag. 2001;40:133–138. [PubMed]
  44. Young LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Spesieverskille in sentrale oksitosienreseptor-geenuitdrukking: vergelykende analise van promotorvolgordes. J Neuroendocrinol. 1996;8:777–783. [PubMed]
  45. Yrigollen CM, Han SS, Kochetkova A, Babitz T, Chang JT, Volkmar FR, Leckman JF, Grigorenko EL. Gene wat affiliatiewe gedrag beheer as kandidaatgene vir outisme. Biol Psigiatrie. 2008;63:911–916. [PMC gratis artikel] [PubMed]