Ventral tegmental sahədə dopaminergik nöronların endogen opioid ilə bağlı nöroplastikliyi təbii və opiate mükafata (2014)

ŞƏRHLƏR: The DeltaFosB tədqiqatları biz tez-tez diqqət mərkəzindədirlər nüvəli akumbens (mükafat mərkəzi) və seksin met və kokain ilə eyni beyin mexanizmlərini gəzdiyini təsbit etdi. Eyni tədqiqatçı tərəfindən edilən əhəmiyyətli araşdırmadan (ΔFosB ilə əsas vasitəçi (2013) olan ümumi neyroloji mexanizmləri üzərində Təbii və Narkotik maddələri mükafatlandırma aktları):

Beləliklə, təbii və dərman mükafatları təkcə eyni sinir yoluna yaxınlaşmır, eyni molekulyar vasitəçilərə birləşir və ehtimal ki, Nüvə Akumbensindəki eyni neyronlarda təşviq fərqliliyinə və hər iki mükafatın “istəməsinə” təsir edir.

Alın: meth, kokain və cinsiyyətlər, mükafat mərkəzində eyni nüvəli hüceyrələrə (nüvəli akumbens) eyni şeylər edirlər, bəlkə başqa bir yerdə beyində başqa bir şey edə bilirlər. Bu, təbii mükafatların və dərmanların mexanizmlər və təsirlərdən fərqləndiyini söyləyən adi danışma nöqtəsini sökdü.

Bu yeni iş cinsi əlaqənin VTA-ya nə etdiyini araşdırdı. VTA, dopamin istehsal edən sinir hüceyrələrinin başladığı yerdir və nüvə hüceyrələri, frontal korteks və amigdalaya budaqlanır. Əsasən VTA, dopaminimizin çox hissəsinin mənbəyidir. Mükafat dövrəsinin bu 2 şəklinə baxın: Pic1, Pic2

Tədqiqatçılar cinsiyyətin (ürək) VTA-nın hüceyrə orqanlarını müvəqqəti olaraq (kişilərdə) azaldılmasına gətirib çıxardığını tapdılar. Hücre orqanları və dendritləri beynin boz məsələsi meydana gətirir. Bu, VTA-ya (heroindən bir dəfə istifadə etmir, amma kronik heroin istifadəsi deyil) eroin bağımlılığıdır. Qeyd edək ki, VTA hüceyrələrinin bu büzülməsi insan eroin bağımlılarında meydana gəlir.

Cinsi səbəb olan hüceyrə büzülməsi ən az 7 gün davam edir. 30 gündə cins tərəfindən göstərilən dəyişikliklər normala döndü, lakin tədqiqatçılar yalnız 1, 7 və 30 günlərini qiymətləndirdilər.

Eroin bağımlılığında hüceyrə cisimlərinin büzülməsi, nüvəli akumbenslərdə aşağı dopamin - ya da dediyimiz şeylə nəticələnir. desensisizasiya. Tədqiqatçılar (cinsdən sonra) cavablarını qiymətləndirmək üçün siçovullara morfin tətbiq etdilər, lakin heç bir şey olmadı. Ümumiyyətlə siçovullar morfini çox sevir, lakin burada müvəqqəti həssaslaşdılar. Bir sözlə, boşalma sonrası siçovulların mükafat dövrü, eroinin aşağı səviyyəsinə cavab vermədi. Tədqiqatçılar, "normal" bir siçovul reaksiyasına səbəb olmaq üçün daha yüksək dozalara ehtiyac olduğunu düşündülər.

Xülasə etsək - Cinsi (müvəqqəti olaraq) VTA-da eroin bağımlılığı ilə eyni şeyi edir: dopaminin sinir hüceyrələri cisimlərinin əmələ gəlməsi. Bu, mükafat mərkəzində dopaminin azalmasına və narkotik maddələrə daha az reaksiya verilməsinə gətirib çıxarır və siçovul beyinlərinin bərpası üçün ən azı 7 gün lazımdır.


 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pitchers KK1, Coppens CM2, Beloate LN3, Fuller J.2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Soyutma LM5.

mücərrəd

Təbii mükafat və istifadəsi dərmanları mesolimbik yolda birləşir və nüvə plastisitenin nüvə plastisitik mexanizmini nüvəli akumbenslərdə aktivləşdirir. Opiatların xroniki ifşa edilməsi morfin mükafat toleransını tənzimləyən ventral tegmental sahənin (VTA) dopaminergik nöronlarında plastisiyanı azaldır.

Burada VTA-da endogen opioidlərin bir-birinə uyğundurduqları sərbəst buraxılan VTA dopaminin hüceyrələrinin morfoloji dəyişmələrinə səbəb olan fərziyyələri test edirik. Bu, cinsi davranışların əmələgəlməsinə səbəb olan uzunmüddətli ifadəni tənzimləyir.

Birincisi, cinsi təcrübə VTA dopamin soma ölçüsünü 1 və 7 gündə azaldı, lakin sonuncu oturma sessiyasından 30 gün sonra. Bu təsir naloksonla bağlanmışdı Hər bir cütləşmə sessiyasından əvvəl; Beləliklə, VTA dopamin hüceyrəsinin plastisiyası endogen opioidlərin fəaliyyətindən asılı idi.

Öz növbəsində, VTA plastisitəsi dəyişdirilmiş opiat mükafatı ilə əlaqəli idi, çünki cinsi təcrübəli kişilər 0.5 mg / kq morfin üçün şərti yerin üstünlük təşkil etmədilər.

Sonradan, endogen opioid fəaliyyətinin, sistematik və ya intra-VTA-nın birləşmə təcrübəsi zamanı naloksonla müalicə olunan kişi siçovullarında cinsi mükafat və yaddaşın aralığına səbəb olub-olmadığı müəyyən edilib. Naloxone təkrarlanan cütləşmə sessiyaları üzərində cinsi davranışın başlanğıc təcrübəsindən asılı vəziyyətə gətirməməsini və ya çiftleşmə üçün şərti yer seçimini maneə törətməmişdir. Lakin, naloxon müalicəsi cinsi davranışların törətdiyi təcrübənin səbəb olduğu uzun müddətli ifadəsini və cütləşmə ilə əlaqəli şərtlərlə endirdikləri mesolimbik sahələrdə neyron aktivləşdirməsini azaldıb.

Birlikdə bu məlumatlar çiçəklənmə zamanı endogen opioidlərin morfin mükafatı və təbii mükafat davranışı üçün uzunmüddətli yaddaş üçün kritik görünən VTA dopamin nöronlarında nöral plastisitə səbəb göstərdiyini göstərir.

 

giriş

Təbii ödül davranışları mesocorticolimbic sistemi (Meisel və Mullins, 2006; Hoebel və digərləri, 2009; Frohmader və digərləri, 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young və digərləri, 2011; Blum və s., 2012). İstehlakçı dərmanları bu sistemdə neytral dəyişikliklərə səbəb olur, maddə asılılığının inkişafı və ifadə edilməsinə öz növbəsində kömək edir (Hyman və digərləri, 2006; Nestler, 2012). Əvvəllər, təbii mükafat davranışı, yəni kişi siçovullarında cinsi təcrübə ilə təcrübənin müəyyənləşdirildiyi, nüvəli şişkinlikdə (NAc) nöral plastisiyaya səbəb olur, o cümlədən artmış dendritik dayaq (Pitchers et al., 2010a) və deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Əlbəttə ki, bu cinsi əlaqəli plastisiyanlıq cinsi təcrübənin sonradan çiftleşməsinə təsiri üçün vacibdir və cinsi davranışın başlanmasına və səmərəliliyinə yardımçı göstərilməkdədir (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). Bundan əlavə, cinsi təcrübə psixostimulantlara cavab verir, o cümlədən lokomotor fəaliyyətin həssaslaşdırılması və mükafatlandırılması (Frohmader və digərləri, 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).

NAc ventral tegmental sahədə (VTA) dopaminergik nöronların bir aşağı hədəfidir. VTA dopamin nöronları çiftleşmə zamanı və cinsi mükafatın proqnozlaşdırılması ilə əlaqəli göstəricilərə məruz qaldıqdan sonra aktivləşdirilir (Balfour və digərləri, 2004; Frohmader və digərləri, 2010a), endogen opioid peptid (EOP) vasitəsilə μ-opioid reseptorlarında (MORs; Matthews və Alman, 1984; Johnson və Şimali, 1992; Klitenick və digərləri, 1992; Ikemoto et al., 1997; Balfour və digərləri, 2004). Beləliklə, cinsi davranışın proqnozlaşdırılmasına səbəb olan şərtlərlə əlaqəli pozğunluq EOP və VTA dopamin-hüceyrə aktivasiyasını seksual motivasiyaya kömək edənMitchell və Stewart, 1990; Van Furth və digərləri, 1995; Van Furth və Van Ree, 1996) və NAc-da dopamin salınması (Fiorino və digərləri, 1997).

Ekzogen opiyatlara təkrar məruz qalma VTA-nın morfoloji dəyişikliklərinə səbəb olur (Mazei-Robison və digərləri, 2011; Mazei-Robison və Nestler, 2012), VTA dopamin nöronlarının soma ölçüsünün azalması (Sklair-Tavron və digərləri, 1996; Spiga və digərləri, 2003; Chu və digərləri, 2007; Russo və digərləri, 2007; Mazei-Robison və digərləri, 2011), neyrofilament zülallarının səviyyəsinin azalması (Beitner-Johnson və digərləri, 1992), dopamin hüceyrələrinin artmış excitability, və axoplazmik nəqliyyat və dopamin çıxışı azalmışdır NAcBeitner-Johnson və digərləri, 1992; Mazei-Robison və digərləri, 2011). Bu VTA dopamin nöron dəyişiklikləri morfin mükafat tolerantlığına səbəb olur və bir aylıq dərman istifadəsi dövründə tükənən zaman keçicidir (Russo və digərləri, 2007). VTA dopamin nöronlarında plastisitin opiatların hərəkətlərinə bənzərsiz olub-olmadığını və ya təbii mükafatlandırıcı davranışlar zamanı EOP-nun azad edilməsindən də yaranmır.

Burada təbii mükafat təcrübəsi opiatlar səbəb olduğu nöroplastikliyə səbəb olur və buna görə də, opiatlar təbii mükafat davranışı və mükafat yaddaşında kritik bir plastisitmə mexanizminə uyğunlaşır. Kişi siçovullarında cinsi təcrübənin VTA dopamin nöronlarının soma ölçüsünü VTA-da EOP hərəkətindən asılı bir proses ilə azaldır-etmədiyini sınayırıq. Ayrıca, VTA dopamin nöronlarında EOP səbəbli dəyişikliklərin təbii mükafatlandırıcı davranışın möhkəmləndirilməsi və təbii mükafatla əlaqəli istəklərə uyğun təşəbbüs göstərilməsi ilə bağlı olub olmadığını araşdırır və morfin mükafatına qarşı tolerantlığa səbəb olur.

Material və metodlar

Heyvanlar

Yetkin kişi Sprague-Dawley siçovulları (200-225 g) Çarlz çayından əldə edilmiş və 12 h işıqlı / qaranlıq dövründə süni işıqlı otaqlarda cütlərdə yerləşdirilmişdir (10-da işıqlar: 00 AM, morfin tolerantlığı sınaqdan başqa , 5 da işıqlar sönür: 00 PM). Qida və su mövcud idi ad libitum davranış testində istisna olmaqla. Stimulus qadınlar ovariectomized və 5% 17-β-estradiol benzoat SILASTIC kapsulalar (1.98 mm daxili diametri, 0.5 sm uzunluğu, Dow-Corning) ilə subkutan implantasiya edilmişdir. Progesteronun enjeksiyonu (subkutan, 500 ml susam yağı içərisində 0.1 μg) 3-6 h testindən əvvəl cinsi qəbulediciyi inandırmaq üçün tətbiq edilmişdir. Bütün prosedurlar Qərb Ontario Universiteti və Miçiqan Universitetinin Animal Qulluq Komitələri tərəfindən təsdiqlənmişdir və heyvan sağlamlığı üzrə Kanada Şurasına və ümumdünya Səhiyyə Təşkilatlarına istinad edir.

VTA dopamin soma ölçüsünün dəyişməsi zamanı

Gündəlik çirkin iclaslar.

VTA-nın dopamin nöron soma ölçüsündə dəyişikliklərin gedişatını öyrənmək üçün cinsi təcrübəli və sadiq heyvanlar 1, 7 və ya 31 d (n = Qrupda 5-8) cütləşmə (təcrübəli) və ya işləməyin son günündən sonra (naif). Cinsi təcrübəli qruplar son oturma sessiyası zamanı cinsi davranış üçün uyğunlaşdırılmışdı, həmçinin beş iclasda (hər bir qrup üçün ortalama 5) boşalmaların ümumi sayıları və cinsi davranış hər hansı bir parametrində fərqlənmədi.

Birləşdirən iclaslar.

Cinsi qaranlıq kişilər iki eksperimental şəraitdən birinə təyin edildi: cinsi qaranlıq və ya cinsi təcrübəyə məruz qaldı. Cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanların, ejakulyasiya və ya 60 h-ə qədər olana qədər (birincisi gələn) qədər düzbucaqlı test kafeslərində (45 × 50 × 1 sm) qəbuledici qadınlar ilə ardıcıl günlərdə beş dəfə arvadına icazə verildi. Kafeslər 70% etanol həll ilə yaxşı təmizlənmiş və cütləşmə sessiyaları arasında təzə yataq əlavə edilmişdir. Qaranlıq mərhələdə (qaranlıqdan sonra 2-6 h) cinsi davranışlar edildi. Beş oturma seansından ən azı dörddə birində süzülən heyvanlar cinsi təcrübəli və təcrübələrə daxil edilmişdir. Bütün cütləşmə sessiyaları müşahidə olundu və cinsi davranış qeyd edildi. İnklüzyon gecikmələri (IL), boşalma gecikmələri (EL); bağırsaqların sayı (M), intensivləşmə (IM), gecikmə (ML; ilk dəfə intrasiyadan boşalmaya qədər)Agmo, 1997). Xeyirli heyvanlar 1 h üçün təmiz bir test kafesinə eyni salonda cinsi olaraq təcrübəli kişilərlə bərabər şəkildə, məsələn, uzaq qadın qoxularına məruz qaldıqları və təcrübəli kişilər kimi ətraf tənəzzül və ekoloji yenilik səviyyələri ilə yerləşdirildi.

İmmünofloresans etiketləri.

Heyvanlar, natrium pentobarbital (270 mg / kq, ip) istifadə edərək dərin anesteziyaya məruz qaldı və 50 ml 0.9% salin ilə intrasardial olaraq perfüze edildi, sonra 500 m sodyum fosfat tamponunda (PB) 4 ml 0.1% paraformaldehid izlədi. Meynlər 1 h üçün eyni fiksatifdə oda temperaturu (RT) üçün çıxarılmış və postfixed sonra 20 ° C saxlama üçün 0.01 m PB 0.1% sükroz və 4% sodyum azid batırılır. Coronal bölmələr donma mikrotomunda (H35R, Microm) 400 μm ilə kəsilmiş və 30 ° C səviyyəsində saxlanılan, dördüncü paralel seriyada, cryoprotectant həllində (30% sükroz, 0.1% etilen glikol, 20 m PB) toplanmışdır. Bütün inkübasyonlar RT-də incubations arasında incə təşviqat və xNUMX m PBS, pH 0.1 ilə çoxlu durulama ilə həyata keçirildi. Bölmə 7.35% H məruz qaldı2O2 endogen peroksidazları məhv etmək üçün 10 min, daha sonra inkubasiya həllində (PBS +: PBS 1% Triton X-0.4; Sigma-Aldrich) və 100% bovine serum albumin (Jackson Immuno Research Laboratories) içərisində 0.1 h üçün bloklandı. Daha sonra bölmələr bir siçan tirozin hidroksilaz (TH) -antibodyu (1: 20 000; Millipore). Birincil antikor inkübasyonundan sonra, bölümler 555 dəqiqə ərzində AlexaFluor 1-konjuge keçi anti-siçan antikoru (100: 30; Invitrogen, Eugene, OR) içində inkübe edilmişdir. Nəhayət, bölmələr 0.1 m PB ilə yuyulur, Superfrost Plus şüşə slaydlarında quraşdırılır, qurudulur və anti-fading agenti olan 1,4-diazabicyclo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Məlumatların təhlili: neyron soma ölçüsü.

VTA-da TH-immunoreaktiv (İR) nöronların təsvirləri üç rostraldə kaudal səviyyələrə (40 × böyümə) çəkildiBalfour və digərləri, 2004). Fərqli səviyyədə hüceyrələr arasında fərqlər yox idi. TH-IR nöronların soma ölçüsü ImageJ (Milli Sağlamlıq İnstitutları) istifadə edərək təhlil edilmişdir. Ətraf sahəsi, ətrafı və dairəviliyi tərəfindən təsvir edilən ölçüldü Sklair-Tavron et al. (1996). Heyvan başına ortalama 25 hüceyrələr (bütün 3 VTA səviyyələrini birləşdirdi) təhlil edildi və yalnız aydın görünən nüvəyə malik hüceyrələr daxil edildi. Hər bir heyvan üçün orta sahəsi, ətrafı və dairəviliyi hesablanmışdır. Statistik analiz üçün iki tərəfli ANOVA [faktorlar: cinsi təcrübə (cinsi təcrübəli və ya cinsi asılı) və vaxt (1, 7 və ya 31 d) istifadə edilmişdir. post hoc Holm-Sidak metodunu 0.05 əhəmiyyəti ilə müqayisə edir.

VTA qeyri-dopamin dəyişiklikləri

Biweekly cütləşmə sessiyaları.

TH-IR neyron soma ölçüsündə azalma üçün gündüz çiftleşme seanslarında cinsi təcrübənin tələb olunmadığını yoxlamaq üçün beş həftəlik birləşmə sessiyalarında eşitmiş heyvanların VTA dopamin nöronları təhlil edilmişdir. Qarışıq sessiyalar yuxarıda göstərildiyi kimi idi, lakin 2.5 həftəlik bir müddət ərzində. Son eşitmə və ya işləmədən sonra brains 7 d toplandı.

İmmünoperoksidaz etiketleme.

Bundan əlavə, immunoperoksidaz və xromogen deteksiyası ilə həssas boyama üsullarının istifadə olunmaması, TH-IR soma ölçüsünün dəyişməsinin görselləşdirilməsinə də imkan verəcəkdir. Perfüzyon və toxuma emalları yuxarıda təsvir edildi. 1% H ilə müalicə olunduqdan sonra2O2 və PBS +, bölmələr bir siçan poliklonal tirozin hidroksilaz (TH) -antibodyu (1: 20 000; Millipore). Birincil antikor inkübasyonundan sonra bölmələr biotin-konjuge keçi əleyhinə antioksidant IgG (1 h, 1: 500 in PBS +, Vector Laboratories), avidin-biotin-horseradish peroksidaz (1 h, ABC elit; 1: 1 000 PBS Və 3,3'-diaminobenzidin tetrahidroklorid (10 min, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich), hidrogen periks ilə (0.02%) nikel sulfatla (0.1 mində 0.015%) artmışdır. Bölmələr 0.1 m PB-də reaksiyanı ləğv etmək üçün hərtərəfli şəkildə yuyulur və kodlu Superfrost plus şüşə slaydlar (Fisher) üzərinə monte edilir və ddH-də 0.3% jelatinlə2O. Dehidrasyondan sonra bütün slaydlar DPX montajçı (dibutil ftalat xylene, Sigma-Aldrich) ilə örtülmüşdür.

Məlumatların təhlili: neyron soma ölçüsü.

TH-IR hüceyrələri yuxarıda göstərildiyi kimi sahə, perimetri və dairəsi üçün təhlil edildi. Bundan əlavə, VTA TH-IR hüceyrələrinin analizi üçün istifadə olunan eyni bölmələrdə substantia nigra (SN) olan TH-IR hüceyrələri analiz edildi. Nəhayət, VTA və SN TH-IR hüceyrələrini təhlil etdikdən sonra bölmələr kresil bənövşəyi istifadə edərək əks olundu və TH-IR olmayan hüceyrələr yuxarıda göstərilən üsullarla analiz edildi. Sadəlövh və təcrübəli qruplar arasındakı fərqlər iki tərəfli Tələbə istifadə edərək müqayisə edildi t 0.05-ın əhəmiyyəti olan testlər.

Naloksonun dopamin soma ölçülərinin azalmasına təsirləri

Dopamin nöron soma ölçüsündə seks təcrübəsi ilə bağlı dəyişikliklərdə MORs rol oynadığını müəyyən etmək üçün, MOR cinsi davranış zamanı bloklandı. Heyvanların yarısı cinsi təcrübəyə qovuşdu, digər yarısı isə cinsi cəhətdən sadiq qaldı. Cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanlara 5 ardıcıl gündə yoldaşlıq verildi. Cinsi cəhətdən təcrübəli və sadəlövh qruplar daxilində heyvanlar (təcrübəli) və ya əvvəldən istifadə edilməmişdən əvvəl heyvanlara xroniki olmayan MOR antagonisti naloxone (10 mg / kq, SIGMA-Aldrich, 0.9% salin ilə həll edilmiş) və ya salınan 30 dəqiqə ilə müalicə olunmuşdur (sadəlövh); cinsi cəhətdən naive naloxone (Naive NLX), cinsi təcrübəli salin (Exp Sal) və cinsi təcrübəli naloxone (Exp NLX; n = Qrup başına 5-8). Naloxone müalicəsi hər hansı bir cinsi davranış parametrinə statistik olaraq əhəmiyyətli təsir göstərməmişdir, hər hansı bir 5 d və naloxon və salin ilə müalicə olunan qruplar cinsi təcrübədə eyni olmuşdur. Bütün heyvanlar sonuncu çiftleşmə sessiyasından sonra intrakardial perfüzyon 7 d ilə öldürüldü. Dopamin soma ölçüsü üçün bölmə, immunohistokimya və məlumatların təhlili (ikitərəfli ANOVA, amillər: cinsi təcrübə və dərman müalicəsi) yuxarıda təsvir edildi.

Morfin şərtli yer seçimi

Eksperimental dizayn.

Əvvəllər, Russo et al. (2007) xroniki morfin morfin mükafatına tolerantlıq yaradır. Cinsi təcrübə və kronik morfin VTA-nın soma ölçüsündə dopamin nöronların ölçüsündə oxşar azalmaya səbəb olduğundan, cinsiyyətə bağlı morfoloji dəyişikliklərin funksional əhəmiyyəti morfin mükafatı üçün sınaqdan keçirildi. Cinsi cəhətdən təcrübəli və sadiq heyvanlar altı fərqli eksperimental qruplara bölündü (n (9, 13 və ya 0.5 mq / kq, ip) cinsi davranışlara (cinsi cəhətdən naif və ya təcrübəli) və morfin dozasına əsaslanan və morfin ilə bağlı şərtli yerin üstünlükləri (CPP) üçün sınaqdan keçirilmişdir.

Morfin-CPP.

Sonuncu çiftleşmə sessiyasından sonra 1 d-lə müntəzəm şərait yaradılıb və sonuncu çiftleşmə sessiyasında qruplar cinsi performans üçün uyğunlaşdırılıb. Istifadə olunan CPP paradiqması pretest, kondisioner günləri və sonradan testdən ibarət idi və aparat Tenk et al. (2009). Qısaca CPP aparatı (MED Associates) üç ayrı otaqdan ibarət idi. Hər seans arasında aparıcı, qoxu işarələrini minimuma endirmək üçün% 70 etanol məhlulu ilə hərtərəfli təmizləndi. Fərdi üstünlükləri müəyyən etmək üçün, heyvanlara bütün aparata 15 dəqiqə ərzində pulsuz giriş imkanı verildiyi bir ön sınaq keçirildi. Bir qrup olaraq, heyvanlar müəyyən bir otaq üçün əhəmiyyətli bir üstünlük göstərmədilər, lakin hər bir heyvanın kiçik bir ilkin seçimi var idi. Əvvəlcədən sınaq zamanı otaqlardan birinə (otaqların hər birində keçirdiyi vaxt arasındakı> 200 s fərq; heyvanların <5% -i) xeyli üstünlük verən siçovullar tədqiqatdan kənarlaşdırıldı. Kondisioner zamanı dərman qərəzsiz bir paradiqma istifadə edərək əvvəlcə üstünlük verilən və ya üstünlük verilməyən kameraya qoşuldu (Tzschentke, 2007) və heyvanlar 30 dəq üçün kameralarla məhdudlaşdırıldı. Heyvanlar, səhər saatlarında salin (ip) ilə enjekte edildi (9: 00 AM, 12: 00 PM) və salin-cütlənmiş kameraya (nəzarət) məhdudlaşdırıldı. Günortadan sonra (1: 00-4: 00 PM), heyvanlar morfin (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg və ya 10.0 mg / kq; 0.9% salin ildə həll edilən morfin sulfat, Johnson Matthey) morfin ilə əlaqələndirilmiş kameraya. Heyvanlar iki kondisioner gününə məruz qaldı. Növbəti gün (sonuncu gündən sonrakı 3 d) post-test, prosedurally pretest üçün eyni idi. Statistik analiz üçün, post-test zamanı morfin-cütləşdirilmiş kamerada keçirilən vaxtlar salin-cütləşdirilmiş kamerada keçirdiyi zaman hər bir dozada cinsi əxlaqsız və ya təcrübəli kişilər üçün testdən keçirildikdə, t test. p <0.05, statistik baxımdan əhəmiyyətli hesab edildi. Cinsi cəhətdən sadəlövh və təcrübəli heyvanların əlavə nəzarət qrupları mənfi nəzarət kimi xidmət etmək üçün həm qoşalaşmış, həm də cütləşdirilməmiş otaqlarda salin qəbul etmişdir. Hər iki qrup üçün də otaqlar arasında sərf olunan vaxt fərqi aşkar edilmədi.

Sistemik naloksonun cinsi davranışın tecrübeye bağlı olaraq asanlaşdırılmasına təsirləri

Eksperimental dizayn.

Seksual təcrübə ən az 1 aylıq müddətdə saxlanılan cinsi davranışın asanlaşdırılmasına gətirib çıxarır (Pitchers et al., 2012). MOR'u seksual davranışın tecrübeye bağlı olaraq asanlaşdırılmasına təsirini təhlil etmək üçün cinsi təcrübəli heyvanlar ardıcıl beş arbede oturma əvvəlində ya naloxon ya da şoranınn = 12 hər biri) yuxarıda təsvir edildi. Sonuncu birləşmə sessiyasından bir həftə sonra, bütün heyvanların bir boşalma və ya 1 h qədər qədər birləşməyə icazə verildiyi bir yekun eşleme testi aparılıb. Final test günündə cütləşmədən əvvəl heç bir naloxon və ya şoran müalicə verilməmişdir. Çiftleşmənin parametrləri naloxonun çiftleşmənin (1 günündən günə 5) ya da bu asanlaşdırmanın saxlanmasının (gün 5 vs testi) iki tərəfli ANOVA [faktorlar: müalicə (salin və nalokson ) və gün (gün 1, gün 5 və ya test)] və Holm-Sidak metodu post hoc müqayisələr. Bütün statistik testlər üçün, p <0.05 statistik baxımdan əhəmiyyətli hesab edildi.

Əlavə nəzarət sınaqları

Test günündə sistemik nalokson.

Son çiftleşme test günündə dəyişmiş cinsi davranışın naloksonun olmaması ilə əlaqədar olmadığını göstərmək üçün cinsiyyət təcrübəsi qazandıqları zaman naloxonla əlaqələndirilmiş heyvanları qəbul edən heyvanlara naloxon ya da şirin salınma verildi. Xüsusilə, bütün heyvanlar 10 ardıcıl günlər ərzində bir boşalma üçün eşitmə əvvəl naloxone enjeksiyon (30 mg / kg, sc) 5 dəqiqə aldı. 7 d test günü, heyvanların təxminən yarısı naloxon enjeksiyonu (10 mg / kg, n = 7) və ya salin (n = 6) 30 dəqiqə bir qadın qəbul etməzdən əvvəl. Cinsi davranış müşahidə edildi və qeyd edildi. Çiftleşmənin parametrləri naloxonun çiftleşmənin (1 günündən günə 5) ya da bu asanlaşdırmanın saxlanmasının (gün 5 vs testi) iki tərəfli ANOVA [faktorlar: müalicə (salin və nalokson ) və gün (gün 1, gün 5 və ya test)] və Holm-Sidak metodu post hoc müqayisələr. Bütün statistik testlər üçün, p <% 5 statistik baxımdan əhəmiyyətli hesab edildi.

Naloksonun asanlaşdırılan cinsi davranışın qısa müddətli ifadəsinə təsiri.

Naloxonun (10 mg / kg, sc) müalicəsi zamanı çürümüş müalicənin təsiri sonuncu çiftleşmə test günü ərzində son sinifdə (salin, n = 5; nalokson, n = 4).

Sistemik naloksonun ön təftişi.

Sonuncu müalicədən sonra yalnız naloxonun müalicəsi təkrarlanan olub-olmadığını müəyyən etmək üçün cinsi cəhətdən azğın heyvanlar son naloxondan sonra bir neçə doğuşdan sonra 7 d sonra beş gündə naloxon (10 mg / kg, sc) və ya salin enjeksiyonları qəbul etmişdir və ya salin enjeksiyonu. Bu son test günü heyvanlar heç bir inyeksiya almadılar. Cinsi davranış yuxarıda təsvir olunduğu kimi müşahidə olundu və qeyd edildi. Çiftleşme parametreleri, eşleştirilmemiş qruplar arasında karşılaştırıldı t testlər. Bütün statistik testlər üçün, p <% 5 statistik baxımdan əhəmiyyətli hesab edildi.

Sistemik nalokson və cinsi mükafat.

Naloksonun asanlaşdırılan cinsi davranışın qorunması görüntüsünə təsir edən təsirinin bir səbəbi, naloksonun cinsi davranışın təltifedici təsirlərini blok etməsidir. Bu ehtimalı sınamaq üçün CPP paradiqması, cinsi davranış üçün əvvəlcədən cinsi təcrübəsi olmayan kişilərdə nalokson və ya salin inyeksiyasından dərhal sonra aparıldı. CPP proseduru, pretest, kondisioner günləri və testdən sonra da daxil olmaqla morfin-CPP üçün yuxarıda göstərilənə bənzəyirdi.

Cinsi davranış əvvəlcədən qeyri-münasib otaqla əlaqələndirildi. Müqayisəli şəkildə hər bir heyvan bir nalokson (n = 12) və ya salin (n = 11) 30 dəq. Çiftleşme seansının ortalama müddəti ~ 13 dəqiqə idi. Ejakulyasiyadan bir dəqiqə sonra heyvan 30 dəqiqə üçün eşli kameraya yerləşdirildi. Digər günlərdə heyvanlar ya naloxon ya da salin (bir-birinə eşitmədən əvvəl aldıqları) bir enjeksiyonu aldılar və 30 dəqiqə üçün eşlenmemiş kameraya yerləşdirildi. Daha sonra, pretest ilə eyni testdən keçirilmişdir. Obyekt seçimini təyin etmək üçün pretest və post-test zamanı cütləşdirilmiş kamerada keçirilən vaxtlar müqayisə olundu. Statistik təhlil üçün cütləşdirilmişdir t üstünlük və fərq skorlarını müqayisə etmək üçün testlər və cinsi davranış üçün əhəmiyyətli bir CPP meydana gəlmiş olub-olmadığını müəyyən etmək üçün pretest və post-test zamanı qoşalaşmış kamerada vaxt keçirilmişdir. p <0.05 əhəmiyyətli hesab edildi.

Daxili VTA naloxonun cinsi davranışın tecrübeye bağlı olaraq asanlaşdırılmasına təsirləri

Eksperimental dizayn.

VTA-da xüsusilə EOP fəaliyyətinin cinsi təcrübənin cinsi davranışa gətirib çıxardığı dəyişikliklərin təsirindən məsul olub-olmadığını müəyyənləşdirmək üçün heyvanlar beş gündəlik oturma sessiyasından əvvəl VTA-ya nalokson və ya şoranın lokal infüzyonuna məruz qaldı. Davranış paradiqması sistemik nalokson təcrübəsinə bənzər idi. Cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanların 5 ardıcıl günləri ərzində bir boşalma və ya 1 h qədər qədər uyğun olmasına icazə verildi. Qəbul edən qadınları təqdim etmədən on beş dəqiqə əvvəl, kişi sıçanları ya naloxonun ya da hemisferin ikincili infüzyonlarını (yarımkürə başına 10 μg / μl, 0.5 μl həcmi, 0.9% salin ilə həll olunmuş) və ya salin (yarımkürə başına 0.5 μl) qəbul etmişdir. 0.5 min intervalında 1 μl / min axınında ikitərəfli mikroinjectiyalar tətbiq edilərək, daha sonra əlavə 1 min enjeksiyon kanülü ilə diffuziya üçün yer ayrıldı. İnfeksiyalı kanül daha sonra kuklalı kanül və toz qapağı ilə əvəz edilmişdir. Çatışmanın son günü (test günü) bir həftə sonra, bütün heyvanlar naloxone və ya salin infüzyonu olmadan bir daha boşalma üçün mated. Şəkil 3A eksperimental dizaynı təsvir edir. Data analizi, sistemik naloxon sınaqda təsvir edildiyi kimi aparıldı.

Cannulasyon əməliyyatı.

Kişi sıçanları bir intraperitoneal injection (0.1 ml / kg) ketamine (0.87 mg / ml) və xylazine (0.13 mg / ml) ilə anesteziya və stereotaksik aparat (Kopf Instruments) yerləşdirilib. Bilateral 21-gauge guide cannula (Plastics One) kafa içərisində kiçik qazma delikleri vasitəsilə beyinə -4.8 mm AP-də, bregma'dan ± 0.75 mm ML-də və 7.8 mm-dən başlığa görə skullə endirildi. Paxinos və Watson (2013). Canlullar diş kissesinə yerləşdirilən üç vidaya uyğun diş akril ilə təmin edildi. Heyvanlara 2 həftəlik bərpa müddəti verildi və davranış testi zamanı istifadə edilən müalicə və müalicə prosedurlarına alışdığınız üçün gündəlik istifadə edildi.

Canlula yerləşdirmə yoxlaması.

Xərçənglərin yerləşdirilməsi TH-immunostaninq vasitəsilə VTA-nı dəqiq bir şəkildə hədəf aldıqlarını təsdiqləmək üçün araşdırıldı. Yalnız müvafiq yerləşdirməli heyvanlar analizlərə daxil edildi (son qrup ölçüləri: təcrübəli salin n = 8; təcrübəli naloxone n = 6). VTA kənarında intra-VTA naloxone enjeksiyonlarını qəbul edən üç əlavə heyvan bir "qaçırılan" enjeksiyon qrupunda bir araya toplandı. Buraxılmış qrup anatomik nəzarət və Mann-Whitney kimi xidmət etmək üçün ayrı-ayrılıqda təhlil edilmişdir U Nalokson və salin ilə müalicə olunan təcrübəli kişilərlə son sınaq günü davranışını müqayisə etmək üçün test istifadə edilmişdir.

Çiftleşme ilə əlaqəli kontekstli replika səbəbli PERK ifadəsi

Eksperimental dizayn.

VTA təcrübəsində MTA aktivasiyasına və VTA və NAc-də neyroelektivliyə səbəb olduğu müşahidə təcrübəsinin əldə etdiyi kişilərin qəfəsə məruz qalmasıBalfour və digərləri, 2004). Beləliklə, çiftleşmə mühiti cinsi mükafatın proqnozlaşdırılmasına şərait yaradır. Cari tədqiqat, cinsi təcrübədə MOR aktivliyinin sonradan şəraitə uyğun gələn nüvəli aktivləşdirmə üçün lazım olub olmadığını test etdi. Naloxone və ya salin sistemli olaraq (ip) eşleme arenasında yerləşdirilməzdən əvvəl 30 dəqiqə və çiftleşmə (təcrübəli) üçün qəbuledici bir qadının tətbiqi və ya qadının (neytral deyil) təqdim edilmədən istifadə qəfəsinə yerləşdirilməsindən ibarət olan nəzarət manipulyasiyasından əvvəl tətbiq edilmişdir Ətraf mühit, sadəlövh). Beləliklə, dörd təcrübəli qrup yaradılmışdır: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal ​​və Exp NLX. Sonuncu cütləşmə sessiyasından bir həftə sonra, hər bir qrupdakı heyvanların yarısı cütləşmə qəfəsinə məruz qalmışdır (Erkən kişilər: cinsi əlaqəli şərtlər) ya da qəfəslə işləyənlər (naiz qadınlar: qeyri-adi / neytral istəklər), digər yarısı isə hər hansı bir ipucu və yerinə ev kafeslərində qaldı (əsas PERK ifadəsini təyin etmək üçün). Bu eksperimental paradiqma 8 qrupları: Naive Sal-No Cue, Naive Sal + Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n Naive NLX-No Cue istisna olmaqla = 4, n = 3). Heyvanlar, təzyiqə məruz qaldıqdan sonra 10-15 dəqiqə süründürüldü. Nəzarət heyvanları ev kafeslərindən çıxarılmış və eyni zamanda perfüzedilmişdir.

İmmunohistokimya.

Bölmə və immunohistokimya yuxarıda göstərildiyi kimi aparılmışdır. Burada p42 və p44 MAP kinazlarına ERK1 və ERK2 (pink, 1: 4 000, Cell Signaling Technology) qarşı bir quş poliklonal antikoru istifadə etdik. Əsas antikor ədəbiyyatda geniş yayılmışdır (Roux və Blenis, 2004; Murphy və Blenis, 2006; Frohmader və digərləri, 2010b). Bundan başqa, əsas antikorun pozulması bütün immunoreaktivliyin qarşısını aldı və siçovul beyin toxumasının Western blot analizini uyğun molekulyar ağırlıqlarda iki bant aşkar etdi.

Məlumatların təhlili.

PERK-immunoreaktiv (-IR) hüceyrələri bir sıra beyin bölgələrində bir kamera lucida rəsm borusunu Leica DMRD mikroskopu: NAc [özəyi (C) və qabıq (S); 400 × 600 μm; medial prefrontal korteks; mPFC; anterior cingulate sahəsi (ACA); prelimbic korteks (PL); infralimbik korteks (IL); 600 × 800 μm hər], caudate-putamen (CP; 800 × 800 μm) və bazolateral amigdala (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour və digərləri, 2004; Frohmader və digərləri, 2010b; Pitchers et al., 2010b). Beyin bölgəsinə görə iki hissə sayıldı və standart sahələrdə hüceyrələrin sayıları daha sonra mm başına ədəd sayıları hesablandı2. İki ədədi qrup vasitələrinin hesablanması üçün heyvan başına orta hesablanmışdır. Cinsi təcrübəli və ya sadəlövh qruplar daxilində qrup ortalamaları iki yollu ANOVA [faktorlar: narkotik maddə müalicəsi (NLX və ya Sal) və replika (replika və ya heç bir replika) post hoc Holm-Sidak və ya Mann-Whitney sum testlərini müvafiq hallarda əhəmiyyətli dərəcədə istifadə edərək müqayisə edir p <0.05. Cinsi təcrübəsi olan heyvanların NAc qabığında faktorların əhəmiyyətinə qarşı güclü bir tendensiya var idi və bu səbəbdən yalnız salin (Sal-No Cue) və salin replikası (Sal + Cue) qruplarını müqayisə etmək üçün cüt cüt müqayisələr aparıldı.

Şəkillər.

Digital şəkillər bir CCD kamera (Macrofire, Optronics) istifadə edərək tutuldu Leica sabit kamera parametrləri ilə mikroskop (DM5000B). Şəkillər Adobe Photoshop 9.0 proqramına daxil edilmişdir. Parlaqlıq və kontrastın tənzimlənməsi istisna olmaqla, təsvirlər heç bir şəkildə dəyişdirilməmişdir.

Nəticələr

VTA dopamin hüceyrələrində cins təcrübəsi ilə bağlı dəyişikliklər

Cinsi təcrübə VTA dopamin soma ölçüsündə azalma ilə nəticələndi (Əncir 1A-C). Cinsi təcrübə, VTA TH-IR hüceyrələrinin soma bölgəsini və ətrafını əhəmiyyətli dərəcədə azaltmışdır (sahə: F(1,31) = 23.068, p <0.001; ətraf, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Zamanın əsas əhəmiyyətli təsiri də var idi (sahə: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; perimetri, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) və təcrübə ilə vaxt arasındakı əhəmiyyətli qarşılıqlı əlaqə (sahəsi: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; perimetri, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Cütlük müqayisələri cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanlarda cinsi cəhətdən sadiq nəzarətlə müqayisədə, cinsi davranışın son günündən sonra TH-IR hüceyrələrinin ərazisi və perimetri xNUMX və 1 d əhəmiyyətli dərəcədə azaldığını göstərir [Əncir 1B, sahə: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, əhatə dairəsi: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. TH-IR nöronlarının soma ölçüsü son cütləşmə seansından sonra 31 d səviyyəsinə qayıtdıqdan sonra mükafat imtina müddətinin ardından cinsi davranışın təsiri yayıldı (Əncir 1B, sahə: p = 0.798; C, əhatə dairəsi: p = 0.785). Seks təcrübəsi ilə bağlı dəyişikliklər hər hansı bir zaman nöqtəsində dolğunluqda aşkar edilməmişdir (Əncir 1D). VTA dopamin soma ölçüsünün azaldılması gündə ikiqat oturma sessiyalarından asılı deyildir, çünki beş dəfə iki dəfə cütləşmə sessiyası zamanı azalan VTA dopamin soma ölçüsüƏncir 2A,B, E-H, sahə: p = 0.004; perimetri: p <0.001). Əksinə, cinsi təcrübə substantia nigra'daki TH-IR soma ölçüsünü təsir etmədi (Əncir 2C, I-J, sahə: p = 0.13; perimetri: p = 0.16) və yaxın VTA olmayan TH-IR nöronlarındaƏncir 2D, E-H, sahə: p = 0.46; perimetri: p = 0.45).

Şəkil 1. 

VTA dopamin nöronlarının endogen opioid ilə bağlı soma ölçüsü dəyişiklikləri. A, VTA dopamin neyronlarının təsvirləri, cinsi sadiq və təcrübəli heyvanlardan, sonuncu cütləşmə sessiyasından sonra soma ölçüsündə azalma göstərən 7 d. Ölçək barı, 5 μm. Cinsi təcrübənin (Exp, qara çubuqlar) bölgəni əhəmiyyətli dərəcədə azalmasına gətirib çıxardığını göstərirB; μm2) və perimetri (C; VMM dopamin hüceyrələrində, xNUMX d (Naive, Exp; n = 6) və 7 d (Naive, n = 5; Exp, n = 6), lakin 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) cinsi sadiq nəzarətlə müqayisədə (Naive, ağ çubuqlar) müqayisədə yekun birləşmədən sonra. 84 və ya 1 d hədsiz nəzarətlə müqayisədə, sahə təcrübəli kişilərdə 7% -ə endirildi. 91.6 və 90 d tənzimləmə ilə müqayisədə ətraf mühit təcrübəli qruplarda 1 və 7% -ə endirildi. Dairəviliyə heç bir təsir göstərilməyib (D). Bölgədə bu dopamin hüceyrəsinin plastisiyası (E) və perimetri (F) naloxone (NLX, n = 8), lakin salin deyil (Sal, n = 7) çiftleşmə zamanı müalicə, cinsi sadəlövh nəzarətlə müqayisədə yekun mating sessiyasından sonra 7 d (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Məlumatlar ortalama ± SEM; * eyni günün cinsi cəhətdən naif nəzarətləri ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərqləri göstərir (B, C) və ya salin ilə müalicə olunan seksual naif nəzarət və naloksonla müalicə olunan cinsi təcrübəli kişilərlə müqayisədəE, F).

Şəkil 2. 

Cinsi təcrübə əsas nigra dopamin nöronlarında və ya VTA nondopamin nöronlarında soma ölçüsünü azaltmadı. VTA TH-IR neyron soma sahəsi (A; μm2) və perimetri (B; μm) cinsi ağardıcı (təcrübəli) və təcrübəli (qara) heyvanlarda ardıcıl günlərdən daha çox həftədə iki dəfə çiftleşdirərək təcrübə qazanmışdır. Substantia nigra TH-IR soma sahəsi (C) və VTA olmayan TH-IR soma sahəsi (D) cinsi qaranlıq (ağ) və təcrübəli (qara) heyvanlarda. Məlumatlar ortalama ± SEM; * Cinsi sədaqətli nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərqlər göstərir. VTA-da TH-IR (qəhvəyi) nöronlarını cinsi sadiq (E) və təcrübəli (F) kişilər. G, H, Neyronun yuxarıdakı böyütmə şəkli ilə göstərilən ox EF müvafiq olaraq. Nissl-leytenli nöronlar bu şəkillərdə mavi rəngdə göstərilir. SN-də TH-IR neyronlarını cinsi sadiq göstərən nümayəndələr şəkilləri (I) və təcrübəli (J) kişilər. Ölçək barları: E-J, 20 μm.

VTA dopamin nöronların cinsi təcrübənin səbəb olduğu soma ölçülərinin azalması opioid reseptor aktivasiyasından asılıdır

Cinsi təcrübənin səbəb olduğu VTA dopamin nöron soma ölçüsünün azaldılması hər bir çiftleşmə seansından əvvəl verilmiş selektiv olmayan MOR antagonisti naloksonu tərəfindən məhdudlaşdırıldı. Çiftleşmə seanslarından əvvəl Naloxone müalicəsi sahəyə əhəmiyyətli təsir göstərmişdir (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) və perimetr üzərində əhəmiyyətli təsirF(1,22) = 2.892, p = 0.052). Təcrübə ilə nalokson müalicəsi arasındakı əhəmiyyətli qarşılıqlı sahəsi (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) və perimetri (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Pairwise müqayisələri, salin ilə müalicə olunmuş heyvanlarda cinsi təcrübənin salınmış cinsi əxlaqsız kişilərlə müqayisədə sonuncu mating sessiyasından sonra VTA dopamin nöronlarının 7 d sahəsi və perimetrini əhəmiyyətli dərəcədə azaltdığını göstərdi (Əncir 1E, sahə: p = 0.018; F, əhatə dairəsi: p = 0.007). Əksinə, cinsi cəhətdən təcrübəli naloksonla müalicə olunan heyvanlar naloksonla müalicə olunan sadəlövh kişilərdən fərqlənmədi (Əncir 1E, sahə: p = 0.483; F, əhatə dairəsi: p = 0.330). Bundan əlavə, təcrübəli naloxone heyvanları ilə müqayisədə təcrübəli şoran heyvanların soma ölçüsü əhəmiyyətli dərəcədə azalıb (Əncir 1E, sahə: p = 0.002; F, əhatə dairəsi: p = 0.002). Naloksonun bu təsiri cinsi təcrübə üçün xüsusi idi, çünki nalokson müalicəsi yalnız salin ilə müalicə olunmuş nəzarətlə müqayisədə cinsi cəhətdən naive naloxonla müalicə edilən kişilərdə TH-IR hüceyrə soma ölçüsünə təsir etməmişdir (Əncir 1E,F). Bundan başqa, naloksonun tecrübeye bağlı soma ölçülərinin azaldılmasına təsiri naloxonun cinsi davranışa təsiri ilə əlaqədardır, çünki naloxon və salin ilə müalicə olunan kişilər arasında cütləşmə davranışı əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmir, çünki boşalmadan sonra çiftleşmə başlamaq üçün daha uzun müddətdir naloxonla müalicə edilən kişilərdə ilk və beşinci doğuş zamanıp = 0.03 və p = 0.004, sırasıyla). Həm salin, həm də naloksonla müalicə olunan kişilər hər beş qoşa oturma sessiyası zamanı boşalmağa yollanırlar.

Seksual təcrübə - morfin mükafat toleransına səbəb oldu

VTA dopamin soma ölçüsündə VTA-nın təsiriylə cinsi təcrübənin təsirləri ekzogen opiatlar üçün bildirilənlərə bənzərdir (Sklair-Tavron və digərləri, 1996; Russo və digərləri, 2007). Buna görə də, təbii mükafat səbəbli VTA dopamin hüceyrə plastisitinin opiat morfinə mükafat verdiyini test etdirmişdir. Həqiqətən, cinsi təcrübə xroniki opiatların təsirinə oxşar morfin mükafat tolerantlığına səbəb oldu (Russo və digərləri, 2007). Cinsi təcrübəli kişilər 0.5 mg / kq morfin dozası üçün CPP inkişaf etdirmədi; cinsi qarışıqlı kişilər, bu dozada CPP meydana gətirmişdir, çünki morfin-cütləşdirilmiş kamerada daha çox vaxt sərf etməklə, test sonrası salınmış şöbəyə nisbətənƏncir 3; p = 0.039). Hər iki cinsi cəhətdən naif və təcrübəli qruplar, daha yüksək dozda morfin olan salin-cütləşdirilmiş bölmə ilə müqayisədə morfin eşli kamerada əhəmiyyətli dərəcədə daha çox vaxt sərf etmişdir: 5.0 mg / kg (Əncir 3; Hörmətli: p = 0.029; Exp: p = 0.012) və 10.0 mg / kg (Əncir 3; Hörmətli: p <0.001; Bitmə tarixi: p = 0.002).

Şəkil 3. 

Cinsi təcrübənin morfin mükafatına təsiri. Salamura və ya morfinli (Mor, 0.5, 5 və ya 10 mg / kg bodyweight) otaqlarda cinsi əxlaqsızlıqdan sonrakı testlər zamanı (Naive, n = 10-13) və ya təcrübəli (Exp, n = 9-13) kişilər. Ortalama ± SEM kimi təqdim edilən məlumatlar; * eyni heyvanlar içərisində Sal-eşli kameraya nisbətən əhəmiyyətli fərqlər göstərir. NS, əhəmiyyətli deyil.

Çiftleşmə davranışının cinsi təcrübənin səbəb olduğu asanlıqla opioid reseptor aktivasiyasına bağlıdır

Hal-hazırda tapıntılar göstərir ki, 5 gündəlik qısametrajlı sessiyalar zamanı VTA-da fəaliyyət göstərən EOP kronik morfin və ya heroinin özünü idarə etməsinə təsir edən VTA dopamin nöronlarının plastisiyasına səbəb olur (Russo və digərləri, 2007; Mazei-Robison və digərləri, 2011). VTA dopamin soma ölçüsünün azaldılması, mükafat öyrənmə və xüsusilə cinsi təcrübənin motivasiya və performans baxımından cinsi davranışının asanlaşdırılmasına səbəb olması üçün vacibdir. Bu hipotez beş gündə ikiqat oturma sessiyası zamanı cinsi təcrübəyə səbəb olan cinsi davranışların asanlaşdırılmasına təsirlərin araşdırılması və araşdırılması zamanı naloksonu istifadə edərək MOR-u maneə törətmişdir. Məlumat verilmişdir Şəkil 4 yalnız ilk və beşinci çiftleşme seansları üçün, çünki bunlar, çiftleşme davranışının tecrübeye bağlı olaraq asanlaşdırılmasını yaxşı göstərən məlumatlardır. Bundan əlavə, çiftleşmə seansları zamanı nalokson müalicəsinin uzunmüddətli təsirləri, sonuncu çirkinlik testində 1 həftə sonra, çiftleşmə davranışının təyini ilə bağlı səbəblərin asanlaşdırılmasına nəzarət edilir. Şəkil 4A eksperimental dizaynı göstərir. Cinsi davranışın bütün parametrlərinə cütləşmə sessiyasının əhəmiyyətli bir əsas təsiri var idi (gecikmə gecikdirmə: F(2,55) = 11.286, p <0.001; intromission gecikmə: F(2,55) = 8.767, p <0.001; boşalma gecikməsi: F(2,55) = 10.368, p <0.001) və montaj üçün gecikmələrdə nalokson müalicəsi (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) və intromissiya (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Paralel müqayisə naloxone müalicəsinin ilk çiftleşmə sessiyasında cinsi davranışlara təsir göstərdiyini göstərdi, çünki naloxone heyvanları ilk bağlamap = 0.002) və intromissiya (p = 0.002) çılpaqlığın ilk günündə şoran nəzarət ilə müqayisədə. Bu naloxonun başlanğıc cinsi davranışına təsiri cinsi təcrübəyə görə azaldı və sonrakı cütləşmə sessiyalarının heç birində müşahidə olunmadı (Cədvəl 1). Üstəlik, naloxon administrasiyası hər beş cığır sessiyasından əvvəl cinsi davranışların ilkin asanlaşdırılmasını cinsi təcrübələrlə qarşısını almadı. Cinsi təcrübənin möhkəmləndirici təsirləri ilə əlaqəli olaraq, şoranlaşmış müalicə olunan kişilər,Əncir 4B; p = 0.032) intromission (Əncir 4C; p = 0.033) və ejakulyasiya (Əncir 4D; p <0.001) beşinci cütləşmə seansı zamanı cinsi davranışın asanlaşdırıldığını göstərən ilk cütləşmə seansı ilə müqayisədə. Eynilə, naloksonla müalicə olunan kişilər montaj üçün əhəmiyyətli dərəcədə qısa gecikmələr göstərdilər (Əncir 4B; p <0.001), müdaxilə (Əncir 4C; p <0.001) və boşalma (Əncir 4D; p = 0.017) ilk günlə müqayisədə beşinci yerdədir. Bundan əlavə, naloxonla müalicə olunan kişilər beşinci çiftleşmə sessiyası zamanı latentlərin heç birində şoran nəzarətindən fərqlənmədilər.

Şəkil 4. 

Endogen opioidlər cinsi davranışın tecrübesiyasına səbəb olan asanlaşdırılmasında mühüm rol oynayır. AEksperimental dizayn. B-DSalin ilə müalicə olunan kişilər üçün seksual davranış parametrləri (Sal, ağ bar, n = 11) və ya nalokson (NLX; qara çubuqlar, n = 12) sistemli administrasiyası ilə. Göstərilən məlumatlar gecikmə üçün gecikdirilir (B; saniyələr), intromisyon (C; saniyələr) və boşalma (D; saniyələr) 1 və 5 günləri ilə beş ardıcıllıqla birləşmə günüdür. Bundan əlavə, beşinci çiftleşmə sessiyasından sonra yekun çiftleşmə testi, 7 d üçün məlumatlar göstərilir. Məlumat orta ± SEM kimi təqdim olunur; + 1 və 5 günləri arasında müalicə müddətində əhəmiyyətli fərqlər olduğunu göstərir; * müalicə zamanı test gününün və günün 5 arasında əhəmiyyətli bir fərq olduğunu göstərir; Gün ərzində nalokson və şoran qrupları arasında əhəmiyyətli bir fərq olduğunu göstərir.

Cədvəl 1. 

Çiftleşmeden əvvəl Naloxone administrasiyası, çiftleşmenin ilk gününde montaj ve intromisyonu artırdı

Əksinə, cinsi təcrübə sessiyası zamanı naloxon müalicəsi son çiftleşme test günündə cinsi davranışların törədildiyi tövsiyələrin asanlaşdırılmasını pozdu. Naloxon enjeksiyonu olmadığı təqdirdə, test günü sonuncu çiftleşmə sessiyasından sonra 7 d keçirildi. Salin ilə müalicə olunan nəzarətli kişilər, cinsi davranışın gözlənilən tecrübesiyasına səbəb olmuş sadələşdirilməsini nümayiş etdirdi. Xüsusilə, bağlama, intromilasiya və boşalmanın gecikmələri beşinci çiftleşmə sessiyası və final test günü arasında fərqlənmədi (Əncir 4B-D). Halbuki naloksonla müalicə olunan kişilər gecikmələrə (Əncir 4B; p = 0.033), intromisyon (Əncir 4C; p = 0.036) və ejakulyasiya (Əncir 4D; p = 0.049) test günündə beşinci cütləşmə sessiyasına nisbətən. Bundan başqa, test günündə naloxon heyvanlarının salin ilə müalicə edilən kişilərə nisbətən daha yavaş olduğu,Əncir 4B; p = 0.017) və intromissiya (Əncir 4C; p = 0.043). Beləliklə, naloxon müalicəsi saxlanmanın qarşısını aldı, lakin cinsi davranışların tövsiyə olunmasını asanlaşdıran ilkin deyil. Bu tapıntılar təbii mükafat davranışının möhkəmləndirilməsinin uzunmüddətli ifadəsinə EOP-in səbəbli VTA dopamin neyron plastisiyasında kritik rol oynayır.

Opioid reseptorunun blokadasının cinsi davranışın uzunmüddətli möhkəmləndirilməsinin itkisinə təsirinin sonuncu çiftleşmə test günündə nalokson administrasiyasının olmamasından asılı olduğunu müəyyən etmək üçün bir neçə əlavə nəzarət sınaqları aparılıb (Əncir 5A,B), çiftleşmənin asanlaşdırılmasının uzunmüddətli, lakin qısamüddətli olmaması üçün xüsusi idi (Əncir 5E,F), tək başına naloksona məruz qalmasındanƏncir 5C,D) və naloksonla müalicə olunan kişilərdə cinsi mükafat itkisi ilə nəticələnməmişdir (Əncir 5G,H). Birincisi, naloxonun yoxluğuna görə dəyişməmiş cinsi davranışın olmadığını göstərmək üçün nalokson və ya salin son sinif test günündə cinsi təcrübəyə (nalokson əldə edərkən naloxonla əlaqələnmiş çiftleşmələri qəbul edən heyvanlara verildi)Əncir 5A). Latınalara uyğunlaşmaq üçün birləşmə gününün əhəmiyyətli bir əsas təsiri var idi (Əncir 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) və intromissiya (Cədvəl 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Çiçəklənmə gününün gecikmədən boşalmasına heç bir təsir göstərilməyib (Cədvəl 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Yuxarıda təsvir edilən kimi, çiftleşmə zamanı nalokson müalicəsi ilk beş cinsi təcrübə iclaslarında cinsi davranışın asanlaşdırılmasına təsir göstərməmişdir. Həm qruplar (salınmış və naloksonla müalicə edilən qruplar, həm də çiftleşmə zamanı nalokson qəbul edildikdə) son 5 gününə nisbətən gündüz 1-də seksual davranışı sadə göstərdi və ilk montaj üçünƏncir 5B; salin: p = 0.033; naloxone: p = 0.014) və intromissiya (Cədvəl 2; salin: p = 0.034; naloxone: p = 0.026). Nalokson və ya şirin salınan heyvanlar sonuncu çatışma test günündə daha uzun gecikmələrəƏncir 5B; salin: p = 0.018; naloxone: p = 0.029) və intromissiya (Cədvəl 2; salin: p = 0.019; naloxone: p = 0.020) təcrübə qazanma təcrübəsinin beşinci gününə nisbətən. Buna görə də, naloxon və ya salınmanın sınaqdan keçmə günündə dərhal cinsi təcrübə seansları zamanı nalokson müalicəsinin təsiri təsir göstərməməsi və cinsi davranışın uzunmüddətli asanlaşdırılmasının zəifləməsi hər hansı bir enjeksiyon qəbul etməyən heyvanlarda göstərilənlə eyni idi son çiftleşmə test günü (Əncir 4).

Şəkil 5. 

Endogen opioidlər cinsi davranışların törətdiyi təcrübənin səbəb olduğu uzunmüddətli ifadəsində əhəmiyyətlidir. ASınaq günündə NLX müalicəsinin təsirinə dair eksperimental dizayn. B(Gri) və ya nalokson (qara) enjeksiyonunu izlədikdən sonra 5 gün ardıcıl gündən sonrakı test gününün (Test) 1 və 5 gecikmələrində gecikmə. Məlumatlar ortalama ± SEM deməkdir. * 1 gün və 5 günü müalicə müddətində əhəmiyyətli bir fərq göstərir. # Müalicə zamanı Test günü və Gündüz 5 arasında əhəmiyyətli bir fərq olduğunu göstərir. CNaloksonun əvvəlcədən müalicəsinin təsirini cütləşmə davranışında cinsi təcrübədən yox saymaq üçün sınaqdan keçirmək üçün eksperimental dizayn. D, Son çiftleşme test günündə gecikməyin, 7 günlərindən sonra çay doğulmasından sonra ya salin və ya nalokson enjeksiyasından sonra. Məlumatlar ortalama ± SEM deməkdir. ENalokson müalicəsinin cinsi təcrübəli heyvanlarda asanlıqla cinsi davranışların qısa müddətli görünüşünə təsir göstərməyəcəyini test etmək üçün eksperimental dizayn. F1 gündə 5 günü və 1 günü gündüz 5 və gündə bir dəfə çirkin test günü, 1 gündə bir dəfə salamura (gri) və ya nalokson (qara) enjeksiyonunun mövcud olduğu gündədir. Məlumatlar ortalama ± SEM deməkdir. * 5 gün və XNUMX günü müalicə müddətində əhəmiyyətli bir fərq göstərir. G, Naloxon müalicəsinin cinsi davranışın təsirli təsirlərini maneə törətməməsini yoxlamaq üçün sınaq üçün eksperimental dizayn. H, Çarpışmadan əvvəl naloxone və ya salin almış heyvanlar üçün pretest (ağ) və post-test (qara) zamanı eşleşmiş odada eşitmə zamanı sərf edilən vaxt (saniyə). Məlumatlar ortalama ± SEM; * Pretest ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq göstərir.

Cədvəl 2. 

Göstərilən məlumatlar MOR blokadasının cinsi davranışın uzunmüddətli möhkəmləndirilməsinin itkisinə təsirinin sonuncu çiftleşmə test günündə nalokson administrasiyasının olmamasından asılı olduğunu müəyyən etmək məqsədilə aparılan nəzarət sınaqlarından intromisyon və boşalmaya (saniyə) gecikdirir

Cinsi təcrübəyə qoşulduqda və naloksona təkrarlanmayan naloxon müalicəsinin son müalicədən sonra 7 d pozğunluğuna səbəb olan olub olmadığını müəyyən etmək üçün, cinsi sadiq heyvanlar ya sonuncu çiftleşmə testindən əvvəl beş gündə bir naloxon və ya salin enjeksiyonu qəbul ediblər. 7 d sonra (Əncir 5C). Şoran və naloksonla müalicə olunan qruplar arasında hər hansı bir çirkin parametr üçün heç bir əhəmiyyət kəsb etməmişdir (Əncir 5D; qurulma gecikmə; intromisyon gecikmələri: salınan 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; boşalma gecikmə: salin 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Bu nəticələr göstərir ki, yalnız nalokson, sonrakı cinsi davranışı dəyişdirmək üçün kifayət deyil, naloxonun yalnız VTA dopamin nöron plastisiyasına təsirinin olmaması kimi.

Biz cinsi təcrübənin əldə edilməsi zamanı nalokson müalicəsinin cinsi təcrübənin cinsi davranışının asanlaşdırılmasına səbəb olan uzunmüddətli ifadəini pozduğunu fərz etmirik. Bunun daha da sınanması üçün çiftleşmə zamanı nalokson müalicəsinin təsiri sonuncu çiftleşməsindən sonra yalnız 1 d-də aparılan yekun çiftleşmə testində sonrakı cinsi davranışla sınaqdan keçirilmişdir (eksperimental dizayn; Əncir 5E). Çatdırılma gününün monte edilməsində əhəmiyyətli bir əsas təsiri olmuşdur (Əncir 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) və müdaxilə gecikmələri (Cədvəl 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Boşalma gecikməsinə günün əhəmiyyətli bir əsas təsiri yox idi (Cədvəl 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Yuxarıda təsvir edilən kimi, bütün kişilər (salin və ya nalokson müalicələrinə baxmayaraq) cinsi davranışların asanlaşdırılmasını beş cinsi təcrübə sessiyası zamanı göstərdi ki,Əncir 5F; salin: p = 0.002; naloxone: p = 0.018) və intromissiya (Cədvəl 2; salin: p = 0.006; naloxone: p = 0.009) gündə 5 ilə müqayisədə 1. Eynilə, sınağın günündə 1 gününə nisbətən daha az qısa gecikmələrlə (Əncir 5F; salin: p = 0.001; naloxone: p = 0.020) və intromissiya (Cədvəl 2; salin: p = 0.004; naloxone: p = 0.009). Daha da önemlisi, çiftleşmə zamanı naloxon müalicəsi cinsi təcrübənin cinsi təcrübəyə təsir göstərməsinə təsir göstərməmiş, cinsi təcrübədən sonra 1 d sınaqdan keçirilmişdir.

Nəhayət, naloksonun asanlaşdırılan cinsi davranışın uzunmüddətli ifadəsinə təsir edən təsirinin naloksonun cinsi davranışın təltif xüsusiyyətlərinə maneə törətmə təsiri ilə əlaqəli olduğunu sınadıq. Lakin, çiftleşmədən dərhal əvvəl tətbiq olunan nalokson çiftleşmə üçün CPP meydana gəlməsini dəyişdirmədi (Əncir 5Gnaloxon müalicəsi cinsi mükafatını dəyişdirməməyi təklif edir. Həm salin, həm də naloksonla müalicə olunan qruplar cinsi davranış üçün əhəmiyyətli bir CPP meydana gətirdilər, çünki cinsi əlaqəli bölmələrdəƏncir 5H; salin: p = 0.038; naloxone: p = 0.002) pretest ilə müqayisədə son test zamanı. Buna görə də, naloxone cinsi davranışla əlaqədar mükafatı maneə törətməklə asanlaşdırılan cinsi davranışın saxlanmasına zərər verə bilməz.

Cinsi davranışın asanlaşdırılması VTA-nın EOP fəaliyyətindən asılıdır

ETA-nın xüsusilə VTA-da cinsi davranışın uzunmüddətli asanlaşdırılmasına səbəb olmağı təsdiq etmək üçün, Şəkil 3A Sistemik inyeksiya deyil, intra-VTA naloxon infüzyonları ilə təkrarlanırdı. Nəticələr yuxarıda təsvir olunan sistemli idarəetməyə eyni idi. Seks davranışının bütün parametrlərinə uyğunlaşma gününün əhəmiyyətli bir əsas təsiri olmuşdur (Əncir 6A, gecikməni bağlayın: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, intrasiya gecikdirməsi: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, boşalma gecikmə: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) və gecikdirmə zamanı intra-VTA naloxon müalicəsiF(1,33) = 7.345, p = 0.011) və intromissiya (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Intra-VTA naloxone, naloxonla müalicə olunan kişilərin bağlama üçün aşağı gecikmələri göstərdiyinə görə, 5 d çiftleştməsində cinsi davranışın başlanğıc təcrübə ilə bağlı sadələşdirilməsini maneə törətməmişdirƏncir 6A; p = 0.001), intromisyon (Əncir 6B; p <0.001) və boşalma (Əncir 6C; p = 0.001) gündə 5 ilə müqayisədə 1. Naloksonla müalicə olunan kişilər, gecikmələrin hər hansı birində çiftleşmenin beşinci günündə şoranla müalicə edilən kişilərdən fərqlənmədi. Intra-VTA naloxon müalicəsi, sistemik tətbiq kimi, əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır.Əncir 6A; p <0.001) və müdaxilə gecikmələri (Əncir 6B; p <0.001) ilk cütləşmə günündə, sonrakı cütləşmə seanslarında müşahidə olunmayan (nalokson və fizioloji müalicə olunmuş kişilərin fərqlənmədiyi) fizioloji müalicə olunmuş kişilərlə müqayisədə. Gözlənilməz bir müşahidədən biri bu təcrübədə şoranla müalicə olunmuş kişilərin montaj və ya girmə gecikmələrinin statistik cəhətdən əhəmiyyətli dərəcədə asanlaşdırılmaması (yuxarıda göstərilən bütün təcrübələrdə göstərildiyi kimi) və yalnız boşalma gecikməsinin ilk günlə müqayisədə beşinci gündə qısaldılması idi. (salin: p = 0.001).

Şəkil 6. 

VTA içərisindəki endogen opioidlər cinsi davranışların təyini və onun uzunmüddətli saxlanılmasını tecrübəyə səbəb göstərmişdir. Salin ilə müalicə olunan kişilər üçün seksual davranış parametrləri (Sal, ağ bar, n = 8) və ya NLX (qara bar, n = 6) intra-VTA administrasiyası ilə. Göstərilən məlumatlar gecikmə üçün gecikdirilir (A), intromisyon (B) və boşalma (C) 1 və 5 günlərində beş ardıcıl gündən çiftleşme. Əlavə olaraq, şirin və ya nalokson enjeksiyonunun yoxluğunda 7 günündən sonrakı çiftleşme test günü, 5 d üçün məlumatlar göstərilir. Məlumatlar ortalama ± SEM; + 1 və 5 günləri arasında müalicə müddətində əhəmiyyətli fərqlər olduğunu göstərir; * müalicə zamanı test gününün və günün 5 arasında əhəmiyyətli bir fərq olduğunu göstərir; Nalokson və Sal qrupları arasında gün içərisində əhəmiyyətli bir fərq var. 4.60 (salin, ağ, naloxone, qara; qaçırılmış, boz), bütün heyvanlar üçün intra-VTA enjeksiyon yerlərini göstərən coronal VTA seksiyalarının şematik təsvirləri (H, 5.00; I, 5.25; Swanson Brain Maps-dən şablon təsvirləri istifadə edərəkSwanson, 2004). Canlullar ikitərəfli idi, amma injection saytlar təqdimatın asanlığı üçün birtərəfli şəkildə təmsil olunur. fr, Fasciculus retroflexus; ML, Medial lemniscus; SN, əsasən nigra.

Intra-VTA naxolon müalicəsi sistemik naloksonun təsirinə bənzər cinsi təcrübəli kişilərdə müşahidə edilən asanlaşdırılan cinsi davranışın saxlanmasını maneə törədirdi. Xüsusilə, son test günündə naloxonla müalicə olunan kişilərin daha çox gecikməƏncir 6A; p = 0.011), intromisyon (Əncir 6B; p = 0.010) və boşalma (Əncir 6C; p = 0.015) beşinci mating sessiyasına nisbətən müqayisədə və son test günündə salin ilə müalicə olunan kişilərlə müqayisədəƏncir 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Əksinə, salin ilə müalicə olunan heyvanlar latentlərdə son test günü və günündən 5 arasında cütləşmə və intromissiya üçün fərqlənmədi. Bu təsirlər naloksonun VTA-a çatdırılmasına xüsusi idi, çünki yaxınlıqdakı cannula sahələri olan kişilər olduğu kimi, VTA-nıƏncir 6D; n = 3) son dəfə çiftleşmə test günü (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 və intra-VTA naloxone heyvanları ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə müxtəlif) IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

Seks ilə əlaqəli kəllə nüvəli neyron aktivasiya üçün EOP hərəkəti tələb olunur

Bu günə qədər əldə edilən nəticələrə əsaslanaraq, biz VTA-da cütləşmə təcrübəsi və sonrakı VTA dopamin soma ölçülərinin azaldılması zamanı EOP aktivasiyasını stimullaşdırma ehtimalı ilə mükafatla əlaqəli stimulların uyğunlaşdırılmasına və nəticədə cinsi davranışların asanlaşdırılmasına kömək etmək üçün vacib hesab etdik. Bu hipotezi test etmək üçün cinsi mükafatın (cinsi əlaqəli kontekstli istəkləri) öngördüğü koşullu kontekst işaretlerinin sonrakı maruz kalmasıyla ortaya çıxan nöral aktivitedeki eşleme deneyimi esnasında opioid reseptörlerinin engellenmesi etkileri incelenmiştir. Cinsi cəhənnəmdə olan heyvanlar da ətraf mühitə aid istəklərə məruz qalıblar, lakin bunlar əvvəlki çiçəklənmə təcrübəsi ilə əlaqələndirilməmişdi, buna görə də neytral istəklər idi. Nəhayət, cinsi təcrübəli və sadiq nəzarət qrupları ev qəfəslərində qalmış və hər hansı bir aidiyyəti olmayan (-No Cue) məruz qalmadığı üçün əsas PERK səviyyələri müəyyən edilmişdir. Əvvəlki tapıntıları təsdiq və genişləndirmək (Balfour və digərləri, 2004), əvvəlki cinsi mükafatla əlaqəli kontekstli istəklərə məruz qalma NAc-da cinsi təcrübəli kişilərdə PERK ifadəsini əhəmiyyətli dərəcədə artırdıƏncir 7) və mPFC (Əncir 8A-C), lakin BLA-da nöron aktivliyinə səbəb olmadıƏncir 8D) və ya CPU (data göstərilməyib). NAc nüvəsində replika məruzunun əsas təsirləri (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038) və PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041) və NAc nüvəsində nalokson müalicəsi (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002) və PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). NAc nüvəsində əhəmiyyətli təsir göstərmişdir (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014) və IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Birincisi, cütləşmə ilə əlaqəli Cue məruz qalması, istifadəyə məruz qalmayan və NAc nüvəsində ev qəfəsindən (Exp Sal-No Cue) götürülməyən idarələrlə müqayisədə salin ilə müalicə olunmuş cinsi təcrübəli heyvanların (Exp Sal ​​+ Cue)Əncir 7A; p <0.001) və mPFC alt bölgələri ACA (Əncir 8A; p = 0.001), PL (Əncir 8B; p = 0.003) və IL (Əncir 8C; p = 0.029). Əksinə, şoranla müalicə edilən cinsi əxlaqsız heyvanlarda, cinsi mükafatla əlaqəli olmayan kontekstli istəklərə məruz qalma, heç bir beyin ərazisində Peyk gətirməmişdir (Naive Sal + Cue Naive Sal-No Cue ilə müqayisədə; İncir. 7, 8), PERK'in indüksiyasiyasının cinsi təcrübəyə aid olan ipuçlarının təsiri ilə bağlı olduğunu göstərir. Üstəlik cinsi təcrübə, təkcə cinsi təcrübəyə, beyin bölgələrindən heç birində başlanğıc PERK ifadəsini dəyişdirməmişdir, çünki ev qəfəslərindən alınmış qruplar arasında, cinsi qarışıqlıq və ya təcrübə olub, salin və ya naloksonla müalicə olunmuşdur.

Şəkil 7. 

Cinsi əlaqəli şərtlərlə təyin olunan NAc-da neyrotə aktivasiya üçün endogen opioid fəaliyyət tələb olunur. Mm-dən PERK-IR hüceyrələrinin sayı2 nüvəli akumbens nüvəsində (A) və kabuk (B) cütləşmə iclaslarında (Exp erkəklər) və ya iclaslarda (Naive kişilər) sistemli NLX və ya Salin (Sal) ilə əvvəlcədən hazırlanmış cinsi qaranlıq (ağ) və təcrübəli (Exp) qara heyvanlarda. Qruplar, Exp kişilərdə cütləşmə ilə əlaqəli eşantiklər və Naif heyvanlarında neytral istəklər olan və ya ev kafeslərindən (Cue-etiketin olmaması ilə göstərilən No Cue) götürülmüş kontekstual göstərişlərə (Cue) məruz qalıblar. Məlumat orta ± SEM kimi təqdim olunur; * salin-pretreated no cue-exposed nəzarət ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq göstərir (Naive Sal-No Cue və Exp Sal-No Cue); # Sal ilə müalicə edilən Cue-exposed Exp qrupu (Exp Sal ​​+ Cue) ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq göstərir. Perk-IR hüceyrələrinin mm-ə bərabər təsvirləri2 Sal ilə cinsi təcrübəli kişilərin NAc nüvəsindəC, D) və ya NLX (E, F) ev qəfəsindən alındı ​​(No Cue, C, E) və ya çiftleşme bağlı kontekstli ipuçlarına məruz qaldı (Cue; D, F). N Naive NLX (No Cue) xaricində hər bir qrup = 4, n = 3. Ac, Ön Komissiya. Ölçək barı, 100 μm.

Şəkil 8. 

Naloxonun digər VTA hədəf bölgələrində replika səbəbli PERK ifadəsini eşitmə təsirləri. Mm-dən PERK-IR hüceyrələrinin sayı2 cütləşmə iclaslarında sistemli NLX və ya salin (Sal) ilə əvvəlcədən hazırlanmış və ACA-da (Cue) və ya ev qəfəsinə (heç bir ipucu) məruz qalmış cinsi qaranlıq (ağ) və təcrübəli (Exp)A), PL (B), IL (C) və BLA (D). Məlumatlar ortalama ± SEM; * salin-pretreated no cue-exposed nəzarət ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq göstərir (Naive Sal-No Cue və Exp Sal-No Cue); # Sal ilə müalicə olunan cue-məruz seksual naif nəzarət (Naive Sal + Cue) ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq göstərir.

Hipotezimizi dəstəkləyərkən, cinsi təcrübə zamanı naloxon müalicəsi cinsi əlaqəli şərtləri ilə PERK indüksiyasını əhəmiyyətli dərəcədə azaltdı. Bu naloksonla müalicə edilən şişkinliyə məruz qalan təcrübəli kişilərdə (Exp NLX + Cue) ana qəfəslərdən alınan cinsi cəhətdən naif və təcrübəli nəzarət qruplarından heç birində (Naive Sal-No Cue və ya Naive NLX- No Cue). Bundan başqa, Naloksonla müalicə olunan replika məruz qalan təcrübəli kişilərdə (Exp NLX + Cue) PERK ifadəsi, NAc nüvəsində salin ilə müalicə olunan şüşələrə məruz qalan təcrübəli heyvanlara (Exp Sal ​​+ Cue) nisbətən daha az idiƏncir 7A; p = 0.002) və mPFC subregions (Əncir 8AACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

NAc qabığında iki tərəfli ANOVA analizi faktiki pozğunluq və naloxon müalicəsinin təsir göstəricilərinin statistika cəhətdən əhəmiyyətli təsirini verməmişdir. Lakin, bir cüt müqayisədə göstəricinin məruz qalması salinanın müalicə olunduğu cinsi təcrübəli qrupda (Exp SAL + Cue) peri əmələ gətirdiyini göstərir.Əncir 7B; Naive SAL-No Cue: p = 0.0163).

Müzakirə

Mövcud tədqiqat göstərir ki, cinsi davranış zamanı VTA-da hərəkət edən EOP, təbii mükafat davranışı, VTA dopamin hüceyrələrinin soma ölçüsündə sağlam, lakin müvəqqəti azalma yaradır. Soma ölçüsündə azalma VTA qeyri-dopamin nöronlarında, yaxud yaxınlıqdakı əsas nigra dopamin nöronlarında müşahidə olunmayıb və bu dəyişiklik VTA dopamin hüceyrələrinə xüsusi təsir göstərirdi. Bu VTA dopamin plastisiyası kronik opiata məruz qalması səbəbindən bənzər görünür (Sklair-Tavron və digərləri, 1996; Russo və digərləri, 2007; Mazei-Robison və digərləri, 2011) və ekzogen opiat (morfin) mükafatına bənzər bir tolerantlıq gətirdi. VTA dopamin plastisitinin VTA hədəf bölgələrində uzunmüddətli (baxım), lakin qısa müddətli (inkişaf), cinsi davranışın möhkəmləndirilməsi və mükafatla əlaqəli replika səbəbli neyrot fəaliyyəti (PERK) üçün vacibdir: NAc və mPFC. Bu tapıntılar təbii mükafatın proqnozlaşdırma tövsiyələrini və ya mükafat yaddaşını stimullaşdırmanın uzunmüddətli ifadəsində VTA dopamin plastisitesinin rolunun göstəricisidir.

Cinsi təcrübənin sonradan cinsi davranışının asanlaşdırılmasına gətirib çıxarması, o cümlədən çiftleşmə və artımın başlamasına daha tez başlanılmasıBalfour və digərləri, 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Cinsi davranışın bu asanlaşdırması və ya möhkəmləndirilməsi ən azı 28 d uyğunlaşmaqdan sonra saxlanılır (Pitchers et al., 2012). Bundan əlavə, cinsi davranışların və cinsi mükafatların prediktif göstəricilərinin VTA-da MOR daxiliizasiyasına gətirib çıxarması və VTA (dopamin və nondopamin nöronları), NAc, PFC və BLA (həm də VTA) daxilində mezolimbik sistemdə neyronal aktivliyə səbəb olduğunu göstərilmişdirBalfour və digərləri, 2004, 2006). Yaxşı qurulmuşdur VTA dopamin nöronları mükafatla əlaqəli stimulların təşviq tələblərinin öyrənilməsində və atılmasında kritik rol oynayır (Berridge və Robinson, 1998; Berridge və digərləri, 2009; Flagel və digərləri, 2011) və mükafat proqnozu üçün vacibdir (Schultz, 2010). Mövcud bulgular, mükafatla bağlı VTA nöroplastisitesinin bu funksiyalar üçün vacib olduğunu göstərir və VTA-da EOP tərəfindən MOR aktivliyindən asılı olaraq mövcud biliklərimizdən genişlənir. Hal hazırda unknown olan EOP, kişi cinsi davranış zamanı VTA'da hərəkət edən MOR liganddır. Hər iki β endorfin və enkefalin də qidalandırıcılar üçün təşviq motivasiyasındaHayward və s., 2002), bu kişi cinsi davranış üçün qurulmaqdadır. Əvvəllər göstərdik ki, β-endorfin nöronları çiftleşmə zamanı aktivləşdirilmir, nə də POMC mRNA-da artım yoxdur; beləliklə, β endorfin çiftleşmə zamanı VTA-da fəaliyyət göstərən kritik EOP ola bilməzDavis və digərləri, 2007). Bu VTA dopamin plastisitesi, cinsi mükafata məruz qaldıqdan sonra, ətraf mühitin istifadəsini proqnozlaşdırmaqla, mPFC, NAc və VTA-da neytral fəaliyyət üçün vacibdir. Bundan əlavə, VTA dopamin plastisiyası cinsi davranışın artması və başlamasının uzun müddətli ifadəsi üçün vacibdir. Əksinə, cinsi təcrübədən yaranan VTA neuroplastisiyası cinsi mükafat (CPP tərəfindən təyin edilmiş) və cinsi motivasiya və performansın (cinsi təcrübə zamanı və ya 1 d sonra) qısa müddətli asanlaşdırma kimi hedonik cavab üçün tələb olunmadıMehrara və Baum, 1990). Bunun əvəzinə, məlumatlar VTA dopamin nöroplastisitesinin uzun müddətə (son seks təcrübəsindən sonra 7 d; Pitchers et al., 2012) cinsi mükafatın "istəyən" ifadəsi və çiftleşme ipuçlarını artıran motivasiya cavablarıMiller və Baum, 1987; Berridge və Robinson, 1998).

Cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanlar, siçanlarda çalışan təkərlərin təsiri, təbii bir mükafatlandırıcı davranış kimi, nalokson müalicəsi ilə bloke edilən bir təsirə bənzər morfin mükafatına qarşı tolerantlıq nümayiş etdirdiLett və ark., 2001, 2002) və VTA dopamin hüceyrəsinin plastisiyasına (cari tapıntılar) asılı olmağı qərara aldı. Təbii mükafatlara bənzər şəkildə, opiates morfin və ya heroinin təkrar məruz qalması VTA dopamin soma ölçüsünün müvəqqəti azalmasına gətirib çıxarır (Sklair-Tavron və digərləri, 1996; Spiga və digərləri, 2003; Russo və digərləri, 2007; Mazei-Robison və digərləri, 2011). Bundan əlavə, qısa müddətdə istifadəsi olan opiate məruz qalma mükafat tolerantlığına səbəb olur, çünki mükafat dərnəklərinin formalaşdırılması üçün tələb olunan daha yüksək dozada dərman preparatlarıShippenberg et al., 1987; Russo və digərləri, 2007) və özünü idarə edən heyvanları dərman qəbuledilməsini artırmağa səbəb olur (Ahmed və digərləri, 2000; Walker və digərləri, 2003). Beləliklə, EOP və opiatlar erkən çəkilmə zamanı mükafat tolerantlığını artırmaq üçün ümumi neyro substratlar üzərində hərəkət edir və təkrarlanan ifşa ilə stimullaşmaya qarşı kompensasiya edici homeostatik mexanizmi əks etdirir (Koob və Le Moal, 2005). Əksinə, uzunmüddətli opiate dərman qaçırma zamanı tolerantlıq dərman üçün mükəmməl xüsusiyyətlərə həssaslığa çevrilir (Harris və Aston-Jones, 2003; Aston-Jones və Harris, 2004; Harris və Gewirtz, 2004). Maraqlıdır ki, 7-28 d-nin cinsi istifadəsi dövründən sonra cinsi təcrübə psixostimulyar mükafat üçün cross-sensitizasiyaya səbəb olubPitchers et al., 2010a), NAc-də cütləşmə səbəbli deltaFosB ifadə və dopamin reseptoru 1 aktivasiyasından asılı olanPitchers et al., 2013). Beləliklə, cinsi mükafat təcrübəsi eyni vaxtda opiate mükafat tolerantlığına və psixostimulant mükafat həssaslığına səbəb olur, baxmayaraq ki, morfin mükafat tolerantlığına qarşı daha çox cinsi istifadənin müddəti test edilməyəcəkdir. Dərman mükafatına qarşı bu əks təsirlərin mesolimbik sistemin müxtəlif sahələrində fərqli nöral plastisitik formalar vasitəsi ola bilər: VTA EOP əməliyyatı və dopamin plastisiyası opiate mükafat toleransına vasitəçilik edir (indiki iş), NAc deltaFosB ifadəsi psixostimulyar həssaslığı nəzarət edir (Pitchers et al., 2013). Bu hadisələrin hər ikisi də narkotik qəbulunun artmasına səbəb ola bilər (Ahmed və Koob, 1998, 1999; Ahmed və digərləri, 2000, 2002, 2003; Walker və digərləri, 2003).

EOP'nin təbii mükafat davranışları zamanı VTA dopamin nöronlarına təsir edən molekulyar mexanizmlər hələ də bilinmir. IRS2-Akt-mTORC2 yolu təkrarlanan morfin səbəb olan VTA-nın azalmış soma ölçüsünün əsas vasitəçisiJaworski və digərləri, 2005; Russo və digərləri, 2007; Mazei-Robison və digərləri, 2011). VTA-nın dopamin nöronlarının ölçüsündə təkrarlanan morfin idarəsindəki dəyişikliklər beyin köçürən nörotrofik amilin intra-VTA infuziyası (BDNF; Sklair-Tavron və Nestler, 1995). BDNF TrkB siqnalları vasitəsilə bu yolu aktivləşdirir (Russo və digərləri, 2007), BDNF üçün yüksək yaxınlıq və IRS2-Akt yolunun bir hissəsi olan bir reseptor kinaz (Seroogy və Gall, 1993; Numan və Seroogy, 1999) və VTA-da dopamin və GABA nöronları ifadə edilmişdir. Virus vektor gen transfer texnologiyasından istifadə edərək IRS2-Akt yolunun müxtəlif komponentlərinin aşağı tənzimlənməsi kronik opiata məruz qalma təsirlərini təqlid edir. Bundan əlavə, opiat pozuntularının təsiri bu siqnal yolunu bərpa etməklə xilas ola bilər (Russo və digərləri, 2007) və mTORC2 komponentinin ov ekspresyonu morfinə səbəb olan VTA dopamin soma azaldılmasını (Mazei-Robison və digərləri, 2011). Buna görə, kronik opiatların VTA dopamin soma ölçüsünə təsirlərini tədqiq edən əvvəlki işlər göstərir ki, IRS2-Akt-mTOR yolunun morfin səbəbli aşağı tənzimlənməsi həm də bu təsir üçün kifayət və zəruri (Mazei-Robison və Nestler, 2012). Beləliklə, cinsi təcrübənin VTA dopamin nöroplastisiyasındakı təsiri BDNF və IRS2-Akt-mTORC2 yolu ilə eyni vasitəçilik etdiyini fərz etmək cəlbedicidir.

Nəticədə, mövcud tədqiqat göstərir ki, VTA nöroplastikliyi təbii mükafatlandırıcı davranış təcrübəsi, xüsusən də təkrarlanan kişilərin cinsi davranışları ilə nəticələnir. Xüsusilə, EOP, hipodopaminergik sistem ilə nəticələnən nöral excitability və daha az dopamin çıxışı ilə əlaqəli olması ilə bağlı hipotezi olan dopamin soma ölçüsünü azaltmaq üçün VTA-da hərəkət edir və cinsi mükafat öngörüsüne aid öhdəliklərə cavab olaraq mesolimbik sistemini dəyişir. Bundan əlavə, VTA nöroplastisiyası təşviq motivasiyası və mükafat yaddaşı üçün vacibdir, lakin cinsi davranışın hedonik təsiri üçün deyil. Nəhayət, təbii mükafat davranışına səbəb olan VTA neuroplastikası, qısa bir müddətdə mükafat çəkilməməsi opiate mükafata təsir edir və bu səbəblə narkotik asılılığının inkişaf etdirilməsinə zəif təsir edə bilər.

Dəyişikliklər

  • Yanvar 12, 2014 qəbul edildi.
  • Revizyon May 17, 2014 olaraq qəbul edildi.
  • Xəbəri qəbul May 20, 2014.
  • Bu tədqiqat Kanadanın Sağlamlıq Araşdırmaları İnstitutunun LMC və Təbiət Elmləri və Mühəndislik Tədqiqat Şurasına köçürülməsi ilə dəstəklənmişdir.

  • Müəlliflər rəqib maliyyə maraqlarını bəyan etməyiblər.

  • Yazışmalar Dr Lique M. Coolen, Mississippi Tibb Mərkəzi Universiteti, Fizyoloji və Biofizika Bölümü, 2500 Şimali Dövlət Caddesi, Jackson, MS 39216-4505 ünvanına göndərilməlidir. [e-poçt qorunur]

References

  1. â † μ
    1. Agmo A

    (1997) Kişi siçovul cinsi davranış. Brain Res Brain Res Protoc 1: 203-209.

  2. â † μ
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1998) Orta həddindən artıq həddindən artıq dərman qəbuluna keçid: hedonic set nöqtəsində dəyişiklik. Elm 282: 298-300.

  3. â † μ
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1999) Sıçanlarda artımdan sonra kokain özünü idarə etmək üçün müəyyən nöqtədə uzunmüddətli artım. Psychopharmacology 146: 303-312.

  4. â † μ
    1. Ahmed SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Uyuşturucu tırmanış tarixi ilə sıçanlarda eroin almaq motivasiyasında davamlı artım. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. â † μ
    1. Ahmed SH,
    2. Kenny PJ,
    3. Koob GF,
    4. Markou A

    (2002) Yüksələn kokain istifadə ilə əlaqəli hedonik allostaz üçün nörobioloji sübutlar. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. â † μ
    1. Ahmed SH,
    2. Lin D,
    3. Koob GF,
    4. Parsons LH

    (2003) Kokainin özünü idarəedilməsinin yüksəlməsi kokain-nüvəli dəyişmiş kokainin dopamin səviyyəsinə bağlı deyil. J Neurochem 86: 102-113.

  7. â † μ
    1. Aston-Jones G,
    2. Harris GC

    (2004) Uzunmüddətli çəkilmə zamanı narkotik maddənin artırılması üçün Brain substratlar. Neurofarmakoloji 47: 167-179.

  8. â † μ
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Soyutma LM

    (2004) Cinsi davranış və cinsi əlaqəli ətraf mühitə aid olanlar kişi sümüklərində mesolimbik sistemini aktivləşdirir. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. â † μ
    1. Balfour ME,
    2. Brown JL,
    3. Yu L,
    4. Soyutma LM

    (2006) Medial prefrontal korteksdən efferentlərin kişi siçanında cinsi davranışdan sonra sinir aktivasiyasına potensial töhfələri. Nevrologiyada 137: 1259-1276.

  10. â † μ
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Neurofilament zülalları və mesolimbik dopamin sistemi: siçovul ventral tegmental sahəsində kronik morfin və kronik kokain tərəfindən ümumi tənzimləmə. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. â † μ
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dopaminin mükafatdakı rolu nədir: hedonik təsir, mükafat öyrənilməsi və ya təşviq zəifliyi? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. â † μ
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) mükafatın komponentləri: "lik", "istək" və öyrənmə. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. â † μ
    1. Blum K,
    2. Werner T,
    3. Carnes S,
    4. Carnes P,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. Oscar-Berman M,
    8. Gold M

    (2012) Sex, narkotik və rock 'n' roll: mükafat gen polimorfizmlərinin funksiyası kimi ümumi mesolimbik aktivasiyasını fərz edir. Psixoaktiv dərmanlar 44: 38-55.

  14. â † μ
    1. Chu NN,
    2. Zuo YF,
    3. Meng L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Ətraf elektrik stimullaşdırılması xroniki morfin müalicə olunan siçovulların ventral tegmental sahəsində hüceyrə ölçüsü azaldılması və BDNF səviyyəsini artırdı. Brain Res 1182: 90-98.

  15. â † μ
    1. Davis BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden KA,
    5. Soyutma LM

    (2007) Pomatik neyronların ümumi pozuntu zamanı aktivləşdirilməsi, lakin kişi siçovullarında cinsi davranış deyil. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. â † μ
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Siçanlardakı Coolidge effekti zamanı nüvə akumbens dopamin effluxunda dinamik dəyişikliklər. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. â † μ
    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Akers CA,
    8. Clinton SM,
    9. Phillips PE,
    10. Akil H

    (2011) Dopaminin stimul-mükafat öyrənməsində seçmə rolu. təbiət 469: 53-57.

  18. â † μ
    1. Frohmader KS,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. Soyutma LM

    (2010a) Qarışıq zövqləri: dərmanların insanlarda və heyvan modellərində cinsi davranışlara təsirlərinin nəzərdən keçirilməsi. Horm Behav 58: 149-162.

  19. â † μ
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Wise RA,
    4. Lehman MN,
    5. Soyutma LM

    (2010b) Metamfetamin kişi siçovulların cinsi davranışını tənzimləyən neyronların subpopulyasiyalarında fəaliyyət göstərir. Nevrologiyada 166: 771-784.

  20. â † μ
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Kəskin morfindən çəkilmə zamanı yüksəlmiş şişkinlik: opiate çəkilmə və narahatlıq modeli. Psychopharmacology 171: 140-147.

  21. â † μ
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Opiate çəkilməsindən sonra dəyişikli motivasiya və öyrənmə: mükafat emalının uzun müddətli tənzimlənməsi üçün sübutlar. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. â † μ
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. Aşağı MJ

    (2002) Beta-endorphin və enkefalin çatışmır siçanlarda seçici mükafat kəsiri. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. â † μ
    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Rada P.

    (2009) Təbii asılılıq: siçovulların şəkər asılılığına əsaslanan davranış və circuit model. J. Addict Med 3: 33-41.

  24. â † μ
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Bağımlılığın neyron mexanizmləri: mükafatla əlaqəli öyrənmə və yaddaşın rolu. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. â † μ
    1. İkemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) Anterior ventral tegmental sahədə QABA (A) reseptor blokası siçovulların nüvəli akumbensində dopaminin ekstrasellüler səviyyəsini artırır. J Neurochem 69: 137-143.

  26. â † μ
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. Seeburg DP,
    4. Hoogenraad CC,
    5. Sheng M

    (2005) Rapamisin yolunun fosfoinositid-3'-kinaz-Akt-memeli hədəfi ilə dendritik müalicənin idarə edilməsi. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. â † μ
    1. Johnson SW,
    2. Şimali Rəhbər

    (1992) Opioidlər yerli internöronların hiperpolarizasiyası ilə dopamin nöronları cəlb edirlər. J Neurosci 12: 483-488.

  28. â † μ
    1. Klitenick MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Opioidlər və GABA tərəfindən ventral tegmental sahədə somatodendritik dopamin sindromunun tənzimlənməsi: bir in vivo mikrodializ tədqiqatı. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. â † μ
    1. Koob GF,
    2. Le Moal M

    (2005) mükafat neyrokimyası və narkomaniyanın "qaranlıq tərəfi" plastisitesi. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. â † μ
    1. Lennette DA

    (1978) İmmünofloresans mikroskopi üçün təkmilləşdirilmiş montaj vasitələri. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  31. â † μ
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT

    (2001) Naloxone sıçanlarda çalışan təkər tərəfindən səbəb olan kondisyonlu yerin seçimini sarsıdır. Fiziol Behav 72: 355-358.

  32. â † μ
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT,
    4. Flynn G

    (2002) Təkərli işləmənin əvvəlki təcrübəsi morfinin mükəmməl təsirinə qarşı tolerantlıq yaradır. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. â † μ
    1. Matthews RT,
    2. Alman DC

    (1984) Sıçanlarda ventral tegmental sahə dopamin nöronların morfin ilə stimullaşdırılması üçün elektrofizyolojik sübutlar. Nevrologiyada 11: 617-625.

  34. â † μ
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Vinish M,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Hurd YL,
    18. Cəsur JF,
    19. Han MH,
    20. Russo SJ,
    21. et al.

    (2011) Ventral tegmental bölgədə dopamin nöronlarında morfin səbəbli adaptasiyalarda mTOR siqnalizasiyası və nöronal aktivliyin rolu. Neyron 72: 977-990.

  35. â † μ
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Ventral tegmental sahə və lokus coeruleus katekolamin nöronlarının opiate-inedici molekulyar və hüceyrəvi plastisiyası. Cold Spring Harb Perspect Med 2: a012070.

  36. â † μ
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Naloxone ifadəsi pozulur, amma qadın sümükləri tərəfindən bir qaynaşan qadın üçün kondisyonlu yer üstünlük müdaxiləsi deyil. Psychopharmacology 101: 118-125.

  37. â † μ
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Qadın kemirgenlərindəki cinsi təcrübə: hücresel mexanizmlər və funksional nəticələr. Brain Res 1126: 56-65.

  38. â † μ
    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Naloxone, kastrasyondan sonra kişi sıçanlarında estrous bir qadın üçün cütləşmə və kondisyonlu yer üstünlüyünü maneə törədir. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. â † μ
    1. Mitchell JB,
    2. Stewart J.

    (1990) Opiatların intra-VTA enjeksiyonu ilə əlaqəli olan kişi sıçanında cinsi davranışların asanlaşdırılması. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. â † μ
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    (2006) MAPK siqnal spesifikliyi: doğru zamanda doğru yer. Trends Biochem Sci 31: 268-275.

  41. â † μ
    1. Nestler EJ

    (2012) Narkotik asılılığının transkripsiya mexanizmləri. Klinik Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. â † μ
  • â † μ
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (2013) Stereotaksik koordinatlarda olan siçovul beyin (Akademik, Boston), Ed 7.

  • â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Soyutma LM

    (2010a) Mezolimbik sistemdə neyroplastiklik təbii mükafat və sonradan mükafatın qaçılmaz olmasıdır. Biol Psixiatriya 67: 872-879.

  • â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Soyutma LM

    (2010b) DeltaFosB, cinsi mükafatın təsirlərini gücləndirmək üçün, çekirdek akumbensində vacibdir. Genlər Brain Behav 9: 831-840.

  • â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Wang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Soyutma LM

    (2012) Təbii mükafat təcrübəsi AMPA və NMDA reseptorlarının paylanması və funksiyasını dəyişir. PLoS One 7: e34700.

  • â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. Soyutma LM

    (2013) Təbii və dərman mükafatları, əsas vasitəçi olaraq DeltaFosB ilə ümumi neyron plastisitmə mexanizmləri üzərində hərəkət edir. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • â † μ
    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ERK və p38 MAPK-aktivləşdirilmiş protein kinazları: müxtəlif bioloji funksiyaları olan protein kinazları ailəsi. Mikrobiol Mol Biol Rev 68: 320-344.

  • â † μ
    1. Russo SJ,
    2. Bolanos CA,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. Renthal W,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NE,
    9. Wiley MD,
    10. Self DW,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) Midbrain dopamin nöronlarında IRS2-Akt yolları opiatlara qarşı davranış və hücum reaksiyalarını tənzimləyir. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • â † μ
    1. Schultz W

    (2010) Dopamin nöronlarının bir çox funksiyası. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • â † μ
    1. Seroogy KB,
    2. Gall CM

    (1993) Neyrotropin midbrain dopaminergik neyronların ifadəsi. Exp Neurol 124: 119-128.

  • â † μ
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A

    (1987) Opioidlərin motivasiya xüsusiyyətləri: Delta reseptorlarının aktivləşdirilməsinin möhkəmləndirici proseslərə vasitəçilik etdiyini sübut edir. Brain Res 436: 234-239.

  • â † μ
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) in vitro locus coeruleus neyronları üzərində morfin və nörotrofinlərin, NT-3, NT-4 və BDNF-nin təsirlərinə qarşı. Brain Res 702: 117-125.

  • â † μ
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Lane SB,
    4. Harris HW,
    5. Bunney BS,
    6. Nestler EJ

    (1996) Kronik morfin mesolimbik dopamin nöronlarının morfologiyasında görünən dəyişikliklər yaradır. Proc Natl Acad Sci ABŞ 93: 11202-11207.

  • â † μ
    1. Spiga S,
    2. Serra GP,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M,
    5. Diana M

    (2003) VTA-da morfin çıxarılması ilə bağlı anormalliklər: konfokal lazer tarama mikroskopiyası. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • â † μ
    1. Swanson LW

    (2004) Brain xəritələri: siçovul beyin strukturu (Akademik, San Diego), Ed 3.

  • â † μ
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pitchers KK,
    5. Soyutma LM

    (2009) Kişi siçovullarında cinsi mükafat: cinsi təcrübənin boşalma və intromissiyalarla əlaqəli şərtlərə uyğun təsirləri. Horm Behav 55: 93-97.

  • â † μ
    1. Tzschentke TM

    (2007) Kədərli yer üstünlüyü (CPP) paradiqması ilə mükafatlandırılması: son onillik yeniləməsi. Addict Biol 12: 227-462.

  • â † μ
    1. van Furth WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Cinsi motivasiya: ventral tegmental sahədə endogen opioidlərin iştirakı. Brain Res 729: 20-28.

  • â † μ
    1. van Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Erkən cinsi davranış tənzimlənməsi: beyin opioidlərinin və dopaminlərin iştirakı. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • â † μ
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. İnturrisi CE,
    5. Koob GF

    (2003) Xroniki opioid ifşa siçovulların içərisində artan heroin özünü idarə edir. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • â † μ
    1. Gənc KA,
    2. Gobrogge KL,
    3. Liu Y,
    4. Wang Z

    (2011) cüt birləşmənin nörobiyolojisi: sosial cəhətdən monoqamlı gəmiçidən anlayır. Ön nöroendokrinol 32: 53-69.

  •