ΔFosB ilə əsas vasitəçi (2013) olan ümumi neyroloji mexanizmləri üzərində Təbii və Narkotik maddələri mükafatlandırma aktları

Bu iş, cinsi mükafatın DeltaFosB üzərindəki təsirlərini və DeltaFosB'un cinsi davranış və mükafat üzərindəki təsirlərini araşdırdı. Narkotik aludəçiliyi ilə ortaya çıxdığı bilinən standart molekulyar dəyişikliklərin cinsi əlaqədə olduğu ilə eyni olduğu təsbit edildi. Başqa sözlə, DeltaFosB cinsi stimullar üçün inkişaf etmişdir, lakin narkotiklər eyni mexanizmi qaçırır. Narkotik asılılıqlarının davranış asılılığından fərqli olması və davranış asılılığının sadəcə məcburiyyət olması (bu nə deməkdirsə) barədə mübahisələr sona çatır. Eyni sxemlər, eyni mexanizmlər, eyni hüceyrə dəyişiklikləri, eyni əlaqəli davranışlar - kiçik fərqlərlə.

J Neurosci. 2013 Feb 20;33(8):3434-3442.

FULL ÇALIŞMA

Küləklər KK, Vialou V, Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Soyutma LM.

mənbə

Anatomiya və Hüceyrə Biologiyası, Schulich Tibb və Stomatologiya Fakültəsi, Qərbi Ontario Universiteti, London, Ontario N6A 3K7, Kanada, Molekulyar və İnteqrativ Fiziologiya şöbəsi, Michigan Universiteti, Ann Arbor, Michigan 48109, Fishberg Neuroscience and Friedman Beyin İnstitutu, Mount Sinai Tibb Fakültəsi, New York, New York, 10029 və Nörobiyoloji və Anatomik Elmlər və Fiziologiya və Biyofizika şöbələri, Mississippi Tibb Mərkəzi Universiteti, Jackson, Mississippi 39216.

mücərrəd

İstifadəsi olan narkotiklər, təbii mükafat yolunda, xüsusilə nüvəsiz acumbens (NAc), nöroplastisiyaya səbəb olur və bununla da asılılıq davranışının inkişafına və ifadə edilməsinə səbəb olur. Son sübutlar təbii mükafatların NAc-da oxşar dəyişikliklərə səbəb ola biləcəyini göstərir və narkotiklərin təbii mükafatların paylaşılan plastisitmə mexanizmlərini aktivləşdirə biləcəyini və təbii və dərman mükafatlarının.

Bu çalışmada, kişi siçovullarında cinsi təcrübənin cinsi mükafatın az və ya uzun müddət itkisi ilə izlənildiyi zaman aşağı dozada (0.5 mg / kq) amfetamin üçün sensitised şərti yerin üstünlükləri ilə göstərilən amfetamin mükafatına səbəb olur. Üstəlik, inkişaf etmiş amfetamin mükafatının başlanğıcı, lakin uzunmüddətli ifadə deyil, NAc-də dendritik spinlərin keçid artımı ilə əlaqədardır. Sonrakı dövrdə seks təcrübəsi ilə əlaqəli inkişaf etmiş amfetamin mükafatında ΔFosB transkripsiya faktorunun kritik rolu və NAc neyronları üzərində dendritik spinlərdə artan artım dominant-mənfi bağlayıcı tərəfdaşın ΔJunD viral vektor köçürülməsi yolu ilə yaradılmışdır. Üstəlik, cinsi təcrübənin səbəb olduğu dərman mükafatının, ΔFosB'nin və spinogenezin NAc-də doğuşdan asılı dopamin D1 reseptor aktivasiyasından asılı olduğu göstərilmişdir. Cinsi davranış zamanı NAc-da D1 reseptorunun deyil, D2 reseptorunun farmakoloji blokadası ΔFosB induksiyasını azaldır və spinogenesis və həssaslaşdırılmış amfetamin mükafatını artırır.

Tbu nəticələr göstərir ki, narkotik maddə asılılığına qarşı zəifliyi nəzarət edən ümumi molekulyar və hüceyrəli plastisitmə mexanizmləri üzərində sui-istifadə və təbii mükafatlı davranışlar əmələ gəlir və bu artan zəiflik ΔFosB və onun aşağı axın transkripsiyası hədəfləri ilə vasitəçiliyini göstərir.

giriş

Təbii mükafat davranışları və dərman mükafatı, ümumi neyron yola, mesolimbik dopamin (DA) sisteminə çevrilir, burada nüvəli akumbens (NAc) mərkəzi rol oynayır (Kelley, 2004). İstehlakçı dərmanları narkotik maddənin narkotikdən asılılığa köçürülməsində önəmli rol oynayan mezolimbik sistemdə nöroplastikliyə səbəb olur (Hyman və digərləri, 2006; Kauer və Malenka, 2007; Kalivas, 2009; Chen et al., 2010; Koob və Volkow, 2010; Wolf, 2010a; Mameli və Luscher, 2011). Dərmanlar və təbii mükafatların mesolimbik sistemdə eyni nöronları aktivləşdirməməsi fərz edilirdi və buna görə də bu dərmanlar bu dövrəni qeyri-aktiv şəkildə aktivləşdirir və dəyişir (Cameron və Carelli, 2012). Bununla belə təbii və dərman mükafatlarının mesolimbik sistemə təsirini həm təbii mükafat, xüsusilə cinsi mükafat, və sui-istifadənin narkotik təsirləri (Frohmader və digərləri, 2010a; Pitchers et al., 2010a; Olsen, 2011).

Cinsi davranış son dərəcə mükafatlandırır (Tenk və digərləri, 2009),

  • və cinsi təcrübə amfetamin (Amph) -haqqında lokomotor fəaliyyəti üçün cross-sensitization daxil olmaqla, həssaslaşdırılmış narkotik ilə bağlı davranışlar səbəb olur (Bradley və Meisel, 2001; Pitchers et al., 2010a)
  • və Amph mükafatını artırdı (Pitchers et al., 2010a).
  • Bundan əlavə, cinsi təcrübə NAc-da nöral plastisiteyi psevdostimulyant təsir göstərməsinə bənzərinə səbəb olur, o cümlədən artmış dendritik bel yoğunluğu (Meisel və Mullins, 2006; Pitchers et al., 2010a),
  • dəyişən glutamat reseptorunun qaçaqmalçılığı və prefrontal korteksə cavab verən NAc qabıq nöronlarında sinaptik gücün azalması (Pitchers et al., 2012).
  • Nəhayət, cinsi təcrübədən qaçınma müddəti inkişaf etmiş Amph mükafatı, NAc spinogenesis (Pitchers et al., 2010a), və glutamat reseptorlarının qaçaqmalçılığı (Pitchers et al., 2012).

Bu tapıntılar təbii və dərman mükafat təcrübələrində nöral plastisitənin ümumi mexanizmlərini bölüşdürür və bu da öz növbəsində maddə asılılığına zəif təsir göstərir.

Mövcud işin məqsədi cinsi təcrübəyə səbəb olan plastisitə vasitəsi olan hüceyrə mexanizmlərini müəyyən etməkdir. Xüsusilə, transdüksiya faktorunun ΔFosB rolu araşdırıldı, çünki həm təbii, həm də təbii dərman mükafatlarının təsirinə məruz qalır (Nestler və digərləri, 2001; Werme və ark., 2002; Olausson et al., 2006; Wallace və digərləri, 2008; Hedges və digərləri, 2009; Pitchers et al., 2010b). Bundan əlavə, cinsi təcrübəyə səbəb olan nöral plastisitə üçün dopamin D1 reseptorlarının (D1R) rolu araşdırıldı, çünki NAc ΔFosB induksiyası və psixostimulyant idarədən sonra artmış bel yoğunluğu D1R-də olan nöronlarda ifadə edildi (Lee və digərləri, 2006; Kim və digərləri, 2009) və D1R aktivasiyasına asılı olaraq (Zhang et al., 2002).

Burada, ΔFosB, diOlistic etiketleme və cinsi təcrübənin qarşılıqlı həssaslaşdıran effektləri artırdıqları Amph mükafatının mükəmməl istifadəsi ilə bağlı hipotezi test etmək üçün ΔFosB, diOlistic etiketləmə və farmakoloji manipulyasiya üçün dominant-mənfi bir cəlb ortağının viral vektor vasitəsi ifadə vasitəsini istifadə etdik. NAc-da D1R-asılılığı ΔFosB və sonradan NAc spinal sıxlığının artması. Birlikdə, tapıntılar təbii və dərman mükafatlarının nöral plastisitənin ümumi mexanizmlərini paylaşdığını, ΔFosB ilə kritik bir vasitəçi olduğunu sübut edir.

Material və metodlar

Heyvanlar.

Geniş kişilər (225-250 g gəlişində) və qadın (210-220 g) Sprague Dawley siçovulları (Charles River Laboratories), eyni seks cütlərində temperatur və rütubət tənzimləməsində və 12 / 12 h qida və su ilə sərbəst mövcud olan yüngül / qaranlıq dövr. Çiftleşmə seansları üçün qadın tərəfdaşlar ovariectomized idi və sınaqdan əvvəl 5% estradiol benzoat (Sigma-Aldrich) və 500 μg progesteron (0.1 ml susam yağı Sigma-Aldrich) 4 h injectionları olan subkutan implantlar qəbul edildi. Bütün prosedurlar Qərb Ontario Universitetinin və Michigan Universitetinin Animal Qulluq və İstifadə Komitələri tərəfindən təsdiqlənmişdir və heyvanların sağlamlaşdırılması üzrə Canadian Şurasına və ümumdünya Səhiyyə Təşkilatlarına uyğun olaraq araşdırma aparmaqdadır.

Cinsi davranış.

Mating seansları ilk növbədə qaranlıq mərhələdə (qaranlıq dövrün başlanmasından sonra 2 və 6 h arasında), təmiz test kafeslərində (60 × 45 × 50 sm) baş verən qırmızı işıqlandırma zamanı baş verdi. Kişi sıçanları 4 və ya 5 gündəlik çiftleşmə seansları zamanı boşalmaya məcbur edildi. Daha əvvəl 5 paraqraf seçilmişdir, çünki bu paradiqmanın cinsi davranışın uzun müddətli asanlaşdırılmasınaPitchers et al., 2010b), Amph lokomotor fəaliyyətinə qarşı həssaslaşdırma (Pitchers et al., 2010a) və mükafat (Pitchers et al., 2010a). Ejakulyasiya hər bir çiftleşmə seansının son nöqtəsi olaraq seçilmişdir, çünki əvvəllər biz Amph lokomotor həssaslaşması üzrə cinsi təcrübənin təsirləri üçün vacib olduğunu göstərmişik (Pitchers et al., 2010a), heyvanlar boşanma göstərmədən qadınlarla yoldaşlıq etməyə icazə verildikdə baş vermədi. Cinsi davranış parametrləri (yəni, ilk növbədə gecikmə, intrasivasiya və boşalma, bağlama və intrudedənlərin sayı) əvvəllər təsvir olunduğu kimi qeydə alınmışdır (Pitchers et al., 2010b). Bütün təcrübələr üçün cinsi təcrübəli qruplar cinsi davranışlar üçün uyğunlaşdırılıb (hər bir cütləşmə sessiyasında boşalma üçün gecikmə və təxirə salınma ümumi sayda). Beşinci görüşdən sonra kişilər eyni cins tərəfdaşları ilə birlikdə qaldılar və 1, 7 və ya 28 d-lərdə seks çəkilişləri dövründə yoldaşlarına yol vermədilər. Cinsi cəhətdən sadiq qalan heyvanlar cinsi təcrübəli kişilər kimi eyni otaqlarda yerləşdirilib və yerləşdirildi. Bundan əlavə, sadəlövh nəzarət, 5 ardıcıl gün ərzində qəbuledici bir qadına girmədən təmiz test kafeslərinə bir saat müddətinə yerləşdirildi.

ΔFosB ifadəsi.

390 ml 50% salin ilə dərin anesteziya (natrium pentobarbital, 0.9 mg / kq ip) və 500 ml xNUMX% paraformaldehid (Sigma-Aldrich) xNUMX m fosfat tamponda (PB) nöqtə və DR antagonist təcrübələri. Braunlar 4 h üçün eyni fiksatorda otaq temperaturunda qaldırıldı və sonra xNUMX ° C'de 0.1% saxaroza və 1% sodyum aziddə 4 m PB-də saxlanıldı. DR antagonist təcrübələrinə görə, beyin sagittal eksen boyunca çıxarılmış və yarıya endirilmişdir. Bir hissəsi PB-də saxlanılmış və DiOlistics üçün istifadə edilmiş, digəri isə ΔFosB üçün işlənmişdir. Coronal bölmələr (20 μm) cryoprotectant həllində (0.01% sükroz və 0.1% etilen glikolün 35 m PB-də) dörd paralel sıra ilə toplanmış və -400 ° C-də saxlanılan bir dondurma mikrotomu (Microm H30R) ilə kəsilmişdir. Free-floating bölmələr inkubasiya arasında xNUMX m PBS, pH 30 ilə geniş yuyulur və bütün addımlar otaq temperaturunda idi. Bölmə 0.1% H məruz qaldı2O2 (10 min) və inkubasiya həllini (1 h, 0.1% BSA, Fisher və 0.4% Triton X-100, Sigma-Aldrich) olan PBS. Daha sonra bölmələr daha əvvəl təsdiqlənmiş (pan-FosB dovşan poliklonal antikoru (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotexnology)Perrotti və digərləri, 2004, 2008; Pitchers et al., 2010b). Pan-FosB antikoru FosB və ΔFosB tərəfindən paylaşılan daxili bir bölgəyə qarşı qaldırıldı və əvvəllər bu işdə istifadə olunan nöqtələrdə stimFosB hüceyrələrini xüsusi olaraq təsəvvür etmək üçün xarakterizə edildi (stimuldan sonra> 1 d) (Perrotti və digərləri, 2004, 2008; Pitchers et al., 2010b). Daha sonra, bölmələr biotin konjuge keçi anti-quyon IgG (1 h, 1: 500 in PBS +; Vector Laboratories), avidin-biotin-horseradish peroksidaz (1 h; ABC elit; 1: 1000 in PBS; Vector Laboratories) 0.02% 3,3% 10'-diaminobenzidin tetrahidroklorid (0.02 min; Sigma-Aldrich) 0.1% nikel sülfat ilə hidrogen peroksid (0.015%) ilə PB. Bölmələr superfrost plus şüşə slaydlar (Fisher) üzərində quraşdırılmış və dibutil ftalat ksilenlə örtülmüşdür.

ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayıları əvvəlcədən təsvir edilən standart analiz sahələri (400 × 600 μm) daxilində NAc qabığında və əsasda hesablanmışdır (Pitchers et al., 2010b). Hər bir NAc subregionuna görə iki hissə sayıldı, heyvan başına ortalama. Zaman nöqtəsi sınaqda, ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayıları müvafiq vaxt nöqtəsində naif nəzarət qrupunun bir dəfə dəyişməsi kimi ifadə edildi və hər bir alt bölgə üçün təcrübəli və naif qruplar arasında müqayisə edilməyən hər bir fərdi vaxt nöqtəsində t əhəmiyyətli səviyyədə testlər p <0.05. ΔJunD-AAV və DR antaqonist təcrübələrində sırasıyla iki və ya bir tərəfli ANOVA və Holm-Sidak metodundan istifadə edilmişdir. Bundan əlavə, DR antaqonist təcrübəsindəki bütün heyvanlarda NFosB-IR hüceyrələri dərhal NAc ilə dorsal və lateral mədəciklə bitişik olan dorsal striatumda (analiz sahəsi: 200 × 600 μm) sayılmışdır. Bir tərəfli ANOVA və t qruplar arasında müqayisə etmək üçün testlər istifadə edilmişdir.

DiOlistics.

Zaman nöqtəsi və ΔJunD viral vektor təcrübəsi üçün siçovulların 50 ml salin (0.9%) ilə intrasardial olaraq perfınzedildikdən sonra 500 məbləğində 2 ml 0.1% paraformaldehidlə PB idi. 100 santimetrində 0.1% sodyum azid ilə xNUMX m PB-də saxlanan vibratome (Microm) və bölmələrdən istifadə edərək brains bölmə (0.01 μm koronal) bölünmüşdür. Lipofilik karbosiyanin boya DiI (4'-dioctadecyl-1.3'1,1'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate; Invitrogen) ilə volfram hissəciklərinin (3,3,3 μm diametri, Bio-Rad) örtülməsi daha əvvəl təsvir edilənForlano və Woolley, 2010). Di-kaplı volfram parçacıkları 160-180 psi-də 3.0 μm gözenek ölçüsü (BD Biosciences) olan bir filtre vasitəsilə Helios Gene Gun sistemi (Bio-Rad) istifadə edərək toxuma gətirilmiş və 0.1 məbləğində nöronal membranlar vasitəsilə yayılmağa imkan vermişdir. 24 h hündürlükdə 4 ° C səviyyəsində saxlanılır. Sonra, dilimlər 4% paraformaldehiddə 3 h üçün PB-da otaq temperaturu ilə PB-də yuyulurdu və anti-fadinq agenti olan 1,4-diazabicyclo (2,2) oktan olan jelvatol ilə çərçivəli qapalı otaqlarda (Bio-Rad) quraşdırıldı 50 mg / ml, Sigma-Aldrich) (Lennette, 1978).

DiI-etiketli nöronlar istifadə edilmişdir Zeiss LSM 510 m konfokal mikroskop (Carl Zeiss) və helium / neon 543 nm lazeridir. Hər bir heyvan üçün, hər bir NAc subregionunda və ya ΔJunD-AAV və DR antagonist eksperimentlərindəki qabıqda (yanal qarıncik və aralıq komissura daxil olmaqla yerlərə bağlı olaraq) 2-5 nöronları bir bölgənin bel damarı üçün ikinci dərəcəli dendritə maraq. Hər nöron üçün 2-4 dendritləri 40-100 μm ümumi dendritik uzunluğunu ölçmək üçün təhlil edilmişdir. Dendritik seqmentlər 40 × suya daldırma məqsədi istifadə edərək, 0.25 μm intervalında z-axis və bir 3D təsviri yenidən qurulmuşdur (Zeiss) və proqram tərəfindən təklif olunan adaptiv (kor) və nəzəri PSF parametrlərini istifadə edərək, deconvolution (Autoquant X, Media Cybernetics) tətbiq edilmişdir. Spin yoğunluğu, Imaris proqram paketinin Filament modülü (versiya 7.0, Bitplane) kullanılarak ölçülmüştür. Dendritik sümüklərin sayı 10 μm başına ifadə edilmiş, hər bir nöron üçün orta və sonra hər bir heyvan üçün. Statistik fərqlər cinsi cəhətdən naif və təcrübəli heyvanlar arasında hər zaman (faktorlar: cinsi təcrübə və NAc subregionu) və ΔJunD eksperimentində (faktorlar: cinsi təcrübə və viral vektor), və bir DR antagonist təcrübəsində ANOVA-dan. Holm-Sidak metodu ilə qrup müqayisələri əhəmiyyətli bir səviyyədə edildi p <0.05.

Kondisyonlu yer üstünlüyü.

CPP eksperimental dizaynı daha əvvəl təsvir edilən (Pitchers et al., 2010a(Amph; Sigma-Aldrich, serbest baz əsasında hesablanmış 0.5 mq / ml / kq sc) birləşməli kondensasiya sınaqları ilə qərəzsiz üç-bölmə aparatı (Med Associates) alternativ günlərdə eşitməmiş kamerada cütləşdirilmiş otaqda və şoranda və işıq fazının birinci yarısında həyata keçirilir. Nəzarət heyvanları hər iki otaqda şoranlaşmışdır.

Hər bir heyvan üçün CPP skorları testdən əvvəlki test zamanı cütlənmiş kamerada keçirilən vaxt (saniyədə) kimi qiymətləndirilmişdir. Zaman nöqtəsi eksperimentlərində qrupları müqayisə etmək üçün birtərəfli ANOVA və Holm-Sidak metodu istifadə edilmişdir. Boş deyil t testdə əhəmiyyəti olan test p <0.05, zaman nöqtəsi təcrübəsindəki hər zaman nöqtəsi içərisində və ΔJunD təcrübəsindəki hər viral vektor müalicəsi daxilində Naive-Sal və Naive Amph-ni müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. Zaman təcrübəsində, cinsi cəhətdən təcrübəli qrupları (Exp-Sal, 7 d Exp Amph və 28 d Exp Amph) müqayisə etmək üçün bir tərəfli ANOVA'lar və Holm-Sidak metodu istifadə edildi və cütləşdirilmədi. t test 2 naif qrupları müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. İki yönlü ANOVA və Holm-Sidak metodu, DR antagonist sınaqda bütün qrupları müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. İki zəmanətsiz t ANOVA analizinə imkan verən ΔJunD qruplarında data çox dəyişkən olduğu üçün Naive-Sal və Naive Amph qruplarının hər viral vektor müalicəsi şərti (GFP və ya ΔJunD) ilə müqayisə etmək üçün istifadə edilmişdir. Bütün əhəmiyyətli səviyyələr təyin edildi p <0.05.

Viral vektor təcrübələri.

Kişi siçovulları bir stereotaksik aparata (Kopf Alətləri) yerləşdirilən ketamin (87 mg / ml / kq ip) və xylazine (13 mg / ml / kg ip) ilə uyutulub, rekonstruksiyalı adeno-əlaqəli viral vektorların Yalnızca GFP (yaşıl floresan protein) və ya ΔJunD (ΔFosB-nin dominant-mənfi cədvəl tərəfdaşı) və GFP, NAc (koordinatlar: AP + 1.5, bregma'dan ML ± 1.2, kəllədən DV-7.6), 1.5 Hamilton şprisi (Harvard Apparatus) istifadə edərək, 7 min üzərində μl / yarımkürə. ΔJunD ΔFosB vasitəsi ilə transkripsiyanı ΔFosB ilə rəqabətlə heterodimerləşdirməklə azaldır və nəticədə hədəf genlərin promotor bölgələri daxilində ΔFosB-nin AP-1 bölgəsinə bağlanmasının qarşısını alırWinstanley et al., 2007; Pitchers et al., 2010b). ΔJunD ΔFosB'yə yüksək yaxınlığa bənzərsə də, ΔJunD-nin müşahidə edilən bəzi təsirlərinin digər AP-1 proteinlərinin antaqonizasiyası ilə vasitəçiliyi ola bilər. Lakin göründüyü kimi, ΔFosB sınaqdan keçmiş şəraitdə ifadə edilən dominant AP-1 proteinidir (Pitchers et al., 2010b). 3 və 4 həftəsi arasında heyvanlar 4 ardıcıl birləşmə iclaslarında cinsi təcrübə aldılar və ya 4 qrupları yaratmaq üçün sadiq qaldılar: cinsi cəhətdən naif GFP, cinsi təcrübəli GFP, cinsi əxlaqsız ΔJunD və cinsi təcrübəli ΔJunD. Cinsi təcrübə 4 ardıcıl gündəlik çiftleşmə sessiyasından ibarətdir. Heyvanlar CPP və diOlistics üçün test edilmişdir. Cərrahiyyə sahələrinin yoxlanılması daha əvvəl təsvir edildiyi kimi yerinə yetirilmişdir (Pitchers et al., 2010b). NAc bölmələri (koronal; 100 μm) GFP (1: 20,000, dovşan anti-GFP antikoru, Invitrogen) üçün immun işlənmişdir. Virusun yayılması, əsasən, NAc-nin qabığa bölməsi ilə məhdudlaşdırılıb, əsasa əlavə nüvəyə yayılır.

D1R / D2R antagonistləri.

Kişi sıçanları bir intraperitoneal injection (0.1 ml / kg) ketamine (87 mg / ml) və xylazine (13 mg / ml) ilə anesteziya və stereotaksik aparat (Kopf Instruments) yerləşdirilib. İkitərəfli 21-gauge guide cannula (Plastics One) AP + 1.7-də NAc istiqamətində aşağı salındı, bregma'dan ML ± 1.2; -6.4 DV kəllədən və diş akril ilə təmin edilmiş, kəllə daxilində quraşdırılmış üç vintlə bərkidilmişdir. Heyvanlar gündəlik 2 həftəlik bərpa dövrü ərzində infuziya prosedurlarına alışdırmaq üçün işlənmişdir. RNQX antagonisti R (+) SCH-4 hidroklorür (Sigma-Aldrich), D1 reseptoru (D23390R) antagonisti S- (ikincisi, D2R antagonisti S- (ikincil mikroinjectionları) qəbul edən 2 gündəlik oturma sessiyalarının hər birinin başlamasından on beş dəqiqə əvvəl, -) Etikloprit hidroklorür (Sigma-Aldrich), 0.9 axınının həcmində steril salin (10% hər 1 μg hər yarımkürədə 0.9 μl, 1.0% salin ildə həll olunmuş) və ya salin (1.0 μl yarımkürədə) 1 min aralığında μl / min, 1 min enjeksiyon cannula ilə dərman diffuziyası üçün yerə qoyuldu. Bu enjeksiyonun həcmi həm özünü, həm də qabığını təzələyəcək, çünki 0.5 μl infuziyası qabıq və ya əsas bölmələrlə məhdudlaşdırılır (Laviolette və digərləri, 2008). Dozajlar əvvəlki tədqiqatlara əsaslanırdı ki, bu və ya aşağı dozalarda narkotik və ya təbii mükafat davranışınaLaviolette və digərləri, 2008; Roberts və digərləri, 2012). Nəzarət erkəkləri cinsi cəhətdən sadiq qaldılar, lakin boş test kafesinə yerləşdirilməzdən əvvəl, 4 gündəlik işləmə sessiyaları zamanı intra-NAc şoranını qəbul etdilər. Son birləşmə və ya iclasın keçirildikdən bir həftə sonra, kişilər Amph CPP, bel və ΔFosB analizi üçün test edilmişdir. Digər təcrübələrdəki kimi beş seansdan çox dörd seansdan istifadə təkrarlanan infuziya səbəb olan NAc-yə həddindən artıq ziyan aradan qaldırmaq üçün və onda bel və ΔFosB təhlili üçün imkan yaradır. Şübhəsiz ki, zərər görməmişdi və şoran selikli heyvanların NAc-də bel və ΔFosB analizi əvvəlki eksperimentlərdə qeyri-infüzyon qrupları kimi oxşar məlumatlar göstərmişdir. İki yönlü ANOVA və Holm-Sidak üsulu əhəmiyyətli olan p Cinsi davranışın asanlaşdırılmasını müəyyənləşdirmək üçün <0.05 istifadə edilmişdir.

Nəticələr

Təcrübəli induksiyalı ΔFosB upregulation uzunmüddətlidir

Birincisi, cinsi mükafatın (7 və ya 28 d) qısamüddətli və uzun müddətli müddətlərindən sonra, ΔFosB ifadəsində, NAc-də dendritik spinlər və Amph-CPP-də təcrübəli inaktiv dəyişikliklər arasındakı temporal əlaqəliliklər müəyyən edilmişdir. Əvvəllər 5 gündəlik çiftleşmə seanslarının cinsi təcrübəsi, mesolimbik sistemdə, xüsusilə də NAcWallace və digərləri, 2008; Pitchers et al., 2010b). Bu keçmiş tədqiqatlarda ΔFosB səviyyələri cinsi davranışdan sonra 1 d səviyyəsində ölçüldü və ΔFosB yığımının uzadılmış mükafat istifadəsindən sonra davam etdiyini bilməmişdir. Cinsi təcrübəli kişilər, 1, 7 və ya 28 d-lərini xNUMX gündəlik çiftleşmə seanslarının sonundan sonra perfüze etmişlər. Cinsi cəhənnəmə nəzarətlər, 5 gündəlik işləmə seanslarının finalından sonra eyni zamanda nöqtələdi. NAc kabuğunda və nüvəsində ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayıları bütün vaxtlarda cinsi əxlaqsız nəzarətdən yüksək idi (Əncir 1A, qabıq; 1 d, p = 0.022; 7 d, p = 0.015; Əncir 1B: əsas; 1 d, p = 0.024; 7 d, p <0.001; 28 d, p <0.001), 28 d abstinensiyadan sonra NAc qabığı xaricində (p = 0.280). Beləliklə, ΔFosB upregulation ən azı 28 d bir müddət üçün cinsi təcrübədən sonra abstinence ərzində davam edir.

Şəkil 1.     

Şəkil 1.     

Cinsi təcrübə ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayının dərhal və davamlı artmasına gətirib çıxardı. NAc qabığında ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayının dəyişməsi (A) və əsas (B) cinsi cəhətdən təcrübəli (qara) heyvanlarda cinsi qaranlıq (ağ) nəzarətlə müqayisədən = 4 hər qrup). Data qrupu ortalama ± SEMdir. *p <0.05, sadəlövh nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. Naive 1 d şəkillərinin nümayəndəsi (C), Exp 1 d (D), Exp 7 d (E) və Exp 28 d (F). Ac, Ön Komissiya. Ölçək barı, 100 μm.

Dendritik spinlərdə yaşanan təcrübədə cinsi artım keçiddir

Pitchers et al. (2010a) əvvəllər 7 d, lakin 1 d tərəfindən deyil cinsi təcrübənin mükafat çəkilməməsi ilə bağlı olan Golgi emprenye üsullarından istifadə edərək bildirdilər ki, NAc qabığında və əsas neyronlarda dendritik dallanma və dendritik spinlərin sayıPitchers et al., 2010a). Burada cinsi qarışıq və təcrübəli kişilərdə spinogenez sonuncu çiftleşmə sessiyasından sonra ya 7 d ya da 28 d olaraq nəzərdən keçirildi. DiOlistics etiketleme metodundan istifadə edən cari nəticələr 7 d cinsi istifadəsi dövrünün izlədiyi cinsi təcrübənin dendritik spinlerinF(1,8) = 9.616, p = 0.015; Əncir 2A-C). Xüsusilə, NAc qabığında və əsas hissəsində dendritik spinlərin sayı əhəmiyyətli dərəcədə artıbƏncir 2A: qabıq, p = 0.011; əsas, p = 0.044). Bununla belə, bu artmış öküz sıxlığı keçid idi və ya artıq NAc subregionunda 28 d-nin uzanan cinsi istifadəsi dövründən sonraƏncir 2B).

Şəkil 2.     

Şəkil 2.    

Cinsi təcrübə NAc-da dendritik sümüklərin sayının artmasına və həssas Amph mükafatına səbəb olmuşdur. A, B, NAc qabığında dendritik dayaqların sayı və 7 d (A) və ya 28 d (Cinsi cəhənnəmdə ağıllı və təcrübəli qara heyvanların DB; n = 4 və ya 5). Data qrupu ortalama ± SEMdir. #p <0.05, sadəlövh nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. C, Naive 7 d və Eks 7 d qruplarından nümayəndələrin dendritik seqmentləri bel yoğunluğunu ölçmək üçün istifadə edilmişdir. Ölçək barı, 3 μm. D, Test sonrası test zamanı qoşalaşmış otaqda (Amph və ya salin) sərf olunan məbləğ, cinsi cəhətdən naiz (ağ) və ya təcrübəli (qara) heyvanlar üçün testdən keçmə (CPP skoru) və ya yekun çiftleştildikdən və ya sonra 7 d Nəzarət seansı: Naive-Sal (istifadə edildikdən sonra 28 d; n = 8), Naif Amph (7 d istifadə edildikdən sonra; n = 9), Exp-Sal (heyvanların birgə qrupları ya 7 d və ya 28 d ilə uyğunlaşdıqdan sonra test edilmişdir; n = 7), 7 d Exp Amph (7 d eşitdikdən sonra; n = 9) və 28 d Exp Amph (28 d çiftleştikten sonra; n = 11). Sal qrupları, hər iki otaqla cütləşdi. *p <0.05, cinsi cəhətdən təcrübəli salin nəzarətləri ilə müqayisədə əhəmiyyətli fərq.

Təcrübəli səbəb olan cinsi amf mükafatı uzunmüddətlidir

Daha əvvəl göstərmişdik ki, 7-10 dəfəssizliyi ilə cinsi təcrübə izləmiş, amf mükafatını artırmışdır (Pitchers et al., 2010a). Xüsusilə, cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanlar amf (0.5 və ya 1.0 mq / kq) dozalarında cinsi əxlaqsız nəzarətdə CPP meydana gətirməyən əhəmiyyətli dərəcədə şərtli yer seçimi (CPP) meydana gətirdi. Cari araşdırma 7 d-dən sonra həm 28 d cinsi istifadəsi dövründən sonra cinsi təcrübəli heyvanlarda Amph mükafatını daha yaxşı nümayiş etdirərək əvvəlki nəticələri təsdiqlədi və genişləndirdi (Əncir 2D; F(2,24) = 4.971, p = 0.016). Xüsusilə, 7 və ya 28 d abstinence dövrü olan cinsi təcrübəli heyvanlar, hər iki kamerada salinanı olan cinsi cəhətdən mənfi tənzimlənmələrlə müqayisədə, post-test zamanı Amph-paired kamerada əhəmiyyətli dərəcədə daha çox vaxt keçirdilərƏncir 2D: Exp-Sal vs 7 d Exp AMPH, p = 0.032; vs 28 d Exp, AMPH, p = 0.021). Əvvəlki tapıntıları təsdiqləyərək, cinsi cəhətdən azğın heyvanlar, post-test zamanı Amph-paired kamerada daha çox vaxt sərf etməmiş və cinsi cəhətdən istifadəsi olmayan salin tərkib qrupundanƏncir 2D) (Pitchers et al., 2010a).

ΔFosB fəaliyyəti seks təcrübəsi ilə əlaqəli həssas Amph mükafatı üçün vacibdir

Nəticələr indiyə qədər cinsi təcrübənin NAc neyronlarda ΔFosB-nin uzunmüddətli yığılmasına səbəb olan amph mükafatına. Artan ΔFosB fəaliyyətinin inkişaf etmiş Amph mükafatı üçün kritik olub-olmadığını müəyyən etmək üçün ΔFosB-nin dominant-mənfi bir cəlb tərəfdaş olan ΔJunD, ΔFosB vasitəsi ilə transkripsiyanıWinstanley et al., 2007), NAc-da viral vektor vasitəsi ilə ötürülən gen ötürülməsi vasitəsiləƏncir 3A,B). Amph CPP testlərinin nəticələri göstərdi ki, NAc-da ΔJunD ifadəsini ifadə etməklə ΔFosB fəaliyyətinin azalması cinsi təcrübənin təsirini və 7 d cinsi mükafatın gücləndirilmiş Amph mükafatına təsirini qarşısını alıb. Cinsi cəhətdən təcrübəli ΔJunD heyvanları Amph üçün əhəmiyyətli bir CPP meydana gətirməmiş və cinsi cəhətdən qaranlıq ΔJunD heyvanlarından fərqlənmədi (Əncir 3B). Əksinə cinsi təcrübəli GFP nəzarət heyvanları cinsi cəhətdən naif GFP nəzarətləri ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə böyük bir CPP skoru ilə göstərilən Amph üçün CPP meydana gətirdi (Əncir 3B, p = 0.018).

Şəkil 3.    

NAc-da ΔFosB aktivliyini sıxışdıraraq, həssaslaşdırılmış AMPH mükafatını və cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanlarda NAc spinlərinin sayını artırdı. AKiçik (sol), orta (orta) və böyük (sağ) enjeksiyon sahələrini əks etdirən, nüvə accumbenslərinə yönəldilmiş rekombinant adeno-əlaqəli viral-ΔJunD inyeksiyasını alan üç heyvanda GFP ifadəinin təsvirləri. ac, anterior komissura; LV, lateral ventrikül. Ölçək barı, 250 μm. BVirusun yayılmasının ən görkəmli yerləri və nümunələrinin şematik təsvirləri. Bütün heyvanlarda QFP qabığında aşkar edilmiş, lakin nüvəyə yayılmışdır. C, Amf-paired kamerada keçirdikləri vaxtda GFP nəzarət vektorunun (Naif, Neyt, Neyt, Naive, Alyus) bir injection qəbul edən cinsi cəhənnəm (ağ) və təcrübəli (qara) heyvanlar üçün pretest (CPP skoru) n = 9; Exp, n = 10) və ya ΔJunD vektor (Naive, n = 9; Exp, n = 9). DCinsi təcrübəli GFP və ΔJunD dən dendritik seqmentlərin nümayəndəsi şəkilləri bel yoğunluğunu ölçmək üçün istifadə edilmişdir. Ölçək barı, 3 μm. E, Ya da GFP nəzarət vektorunun və ya ÆJunD vektorunun enjeksiyasına məruz qalan cinsi cəhənnəm (ağ) və təcrübəli (qara) heyvanların NAc-dendritik spinlərin sayı. Data qrupu ortalama ± SEMdir. *p <0.05, sadəlövh nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. #p <0.05, GFP təcrübəli nəzarətdən əhəmiyyətli fərq.

ΔJunD overexpresyonunun zərif təsirləri cinsi təcrübənin əldə edilməsi zamanı cinsi davranışın pozulmasının nəticəsidir. NAc-da ΔJunD ifadəsi daha əvvəl cinsi təcrübədən sonra cinsi davranışların asanlaşdırılmasını maneə törətmişdir (Pitchers et al., 2010b). Həqiqətən, bu, mövcud sınaqda təsdiqləndi. GFP-nin nəzarət heyvanları montaj, intromilasiya və boşalma üçün daha qısa gecikmələr nümayiş etdirdi və çiftleşmə testlərinin dördüncü gün ardıcıl günündə daha az bağlama və intromissiyaCədvəl 1). Bunun əvəzinə, ΔJunD-peyvənd edilmiş heyvanlar dördüncü gündə birinciyə nisbətlə uyğunlaşmaq üçün dördüncü gündə montaj və ya intromilasiya və ya daha az sayıda takozlar üçün əhəmiyyətli dərəcədə daha qısa gecikmələr göstərməmişdir. Beləliklə, NAc daxilində ΔJunD infusions cinsi təcrübə təsirlərini zəiflədi. Lakin, GFP nəzarəti ilə ΔJunD-infüzyon qrupları arasında çiftleşmə testlərindən hər hansı birində çiftleşmə parametrlərində heç bir əhəmiyyətli fərq yox idi və ΔJunD infuziyalarının Amf CPP-nin cinsi təcrübəyə bağlı duyarlılığına təsiri, fərdi birləşmə təcrübəsi (Cədvəl 1).

Bu cədvəldə baxın:     

Cədvəl 1.    

NAF infüzyonları olan GFP- ya da ΔJunD-ifadə viral vektorları olan qruplarda cinsi təcrübənin əldə edilməsi zamanı cinsi davranış parametrləria

ΔFosB, NAc dendritik spinlərində seks təcrübəsi səbəbli artım üçün vacibdir

NAc neyronlarının cinsi təcrübədən sonra artmış omuz sıxlığına və 7 d seks mükafatından imtina üçün ΔFosB aktivliyi də tələb olundu (Əncir 3C,D). CPP üçün yuxarıda təsvir edilən heyvanların NAc'sında omurgaların analizi üçün iki yollu ANOVA həm cinsi təcrübəninF(1,34) = 31.768, p <0.001) və viral vektor müalicəsi (F(1,34) = 14.969, p = 0.001), həmçinin qarşılıqlı təsir (F(1,34) = 10.651, p = 0.005). Xüsusilə cinsi təcrübəyə malik GFP nəzarət heyvanları cinsi cəhətdən naif GFP nəzarətlərinə nisbətən daha çox NAc haşiyələrinə malik idi (Əncir 3D: p Əvvəlki tapdığımızı təsdiqləyən <0.001) (Pitchers et al., 2010a). Əksinə, cinsi cəhətdən təcrübəli ΔJunD heyvanları cinsi qaranlıq ΔJunD qruplarından fərqlənmədi və cinsi təcrübəli GFP nəzarət heyvanları ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə aşağı idi (Əncir 3D: p <0.001). Beləliklə, NAc-dakı ΔJunD ifadəsi cinsi təcrübənin təsirlərini və NAc spinogenezindəki abstinensiyanı mükafatlandırdı.

D1R antagonist blokları seks təcrübəsi ilə bağlı ΔFosB upregulation

Cinsi təcrübəyə səbəb olan ΔFosB upregulation və sensitləşdirilmiş Amph CPP üçün D1R və ya D2R aktivləşməsi NAc-da cütləşmə zamanı lazım olduqda, heyvanlar hər bir 1-dən əvvəl NAc 2 min əvvəl D15R və ya D4R antagonistinin (ya da salin) yerli infuziyalarını qəbul ediblər gündəlik ardıcıl cütləşmə sessiyaları. Mühüm olaraq, NAc-da D1R ya da D2R antagonist infüzyonları hər hansı bir çiftleşme iclaslarında cinsi davranışın başlamasına və ya ifadə edilməsinə təsir göstərmişdir (Əncir 4D-F). Eyni şəkildə, D1R və ya D2R antagonizmi bütün qruplar cinsi davranışların asanlaşdırılmasını nümayiş etdirdiyinə görə cinsi təcrübənin çiftleşmə prosesində təsirli təsirlərini qarşısını almadı4 günündə 1 gününə nisbətən daha az boşalma gecikmələrindənƏncir 4F) (F(1,40) = 37.113, p <0.001; Sal, p = 0.004; D1R Ant, p = 0.007; D2R Ant, p <0.001).

Şəkil 4.    

NAc-yə daxil olan dopamin reseptor antagonistləri cinsi davranışa təsir göstərməmişdir. Coronal NAc bölmələri (A, + 2.2; B, + 1.7; C, + Bnma + 1.2) bütün heyvanlar üçün intra-NAc enjeksiyon yerlərini göstərməkdədir. Canlullar ikitərəfli idi, lakin bütün heyvanların (Naive-Sal, ağ, n = 7; Exp-Saline; Tünd Boz, n = 9; Exp D1R Ant, açıq boz, n = 9; Exp D2R Ant, qara, n = 8). ac, anterior komissura; LV, lateral ventrikül; CPu, caudate-putamen. Gecikmə (D), intrasiya gecikməsindən (E) və boşalma gecikmə (F) bütün cinsi təcrübəli qruplar üçün (Salin, ağ, D1R Ant, boz, D2R Ant, qara). Məlumatlar ortalama ± SEM deməkdir. *p <0.05, müalicə daxilində 1 ilə 4-cü gün arasında əhəmiyyətli fərq.

Son NAc infuziyası və çiftleşmə və ya işləmə sessiyasından sonra NAc 7 d-də ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayının analizi həm NAc qabığında (F(3,29) = 18.070, p <0.001) və əsas (F(3,29) = 10.017, p <0.001). Birincisi, fizioloji cəhətdən nəzarət altında olan cinsi təcrübə, cinsi baxımdan sadəlövh nəzarətlə müqayisədə ΔFosB-nin əhəmiyyətli dərəcədə tənzimlənməsinə səbəb oldu (Əncir 5A, qabıq p <0.001; Əncir 5B: əsas, p Yuxarıdakı nəticələri təsdiqləyən <0.001). D1R antagonizmi, lakin D2R deyil, ΔFosB-nin bu tənzimlənməsinin qarşısını alır və ya zəiflədir. NAc qabığında, cinsi cəhətdən təcrübəli kişilərlə müalicə olunan D1R antaqonisti, cinsi baxımdan sadəlövh idarələrlə müqayisədə ΔFosB-IR hüceyrələrində artım göstərmədi (Əncir 5A: p = 0.110) və ΔFosB ifadəsi cinsi təcrübəli şoran kişilərlə müqayisədəƏncir 5A: p = 0.002). NAc nüvəsində D1R antagonizmi qismən bir təsirə malik idi: ΔFosB D1R antagonisti ilə müalicə edilən kişilərdə sadəlövh şoranla müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır (Əncir 5B: p = 0.031), lakin bu upregulyasiya cinsi təcrübəli şoran salınmış kişilərlə müqayisədəƏncir 5B: p = 0.012). D2R antagonist müalicəsi ΔFosB induksiyasını təsir etməmişdir, çünki D2R antagonistini qəbul edən cinsi təcrübəli kişilər sadəlövl şoran nəzarətlə müqayisədə daha çox ΔFosB-IR hüceyrələrə malikdirlər (Əncir 5A: qabıq, p <0.001; Əncir 5B: əsas, p <0.001) və D1R antaqonistlə müalicə olunan kişilər (Əncir 5A: qabıq, p <0.001; Əncir 5B: əsas, p = 0.013) və cinsi təcrübəli şoran kişilərdən fərqlənməmişdir.

Şəkil 5.     

Şəkil 5.     

NAc'ta D1R'yı maneə törətmək cinsi cəhətdən təcrübəli heyvanların NAc-da ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayı artımını azaldır. NAc qabığında ΔFosB-IR hüceyrələrinin sayının dəyişməsi (A) və əsas (B) cinsi cəhətdən təcrübəli (qara) heyvanlarda cinsi qaranlıq (ağ) nəzarətlə müqayisədə (Naive-Sal, n = 6; Exp-Saline, n = 7; Exp D1R Ant, n = 9; Exp D2R Ant, n = 8). Data qrupu ortalama ± SEMdir. *p <0.05, sadəlövh nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. #p <0.05, salin və D2R Ant təcrübəli heyvanlarla müqayisədə əhəmiyyətli fərq. Naivel Salın şəkillərinin nümayəndəsi (C), Exp Sal ​​(D), Exp D1R Ant (E) və Exp D2R Ant (F). Ac, Ön Komissiya. Ölçək barı, 100 μm.

D1R və ya D2R antagonistlərinin dorsal striatuma potensial yayılması üçün nəzarət etmək üçün ΔFosB ifadəsi dərhal dorsal NAc və yanal qaraciyərə bitişik bir sahədə təhlil edilmişdir, çünki psorostimulyatorlar və opiatlar tərəfindən dorsal striatumda ΔFosB induksiyası D1R fəaliyyəti (Zhang et al., 2002; Muller və Unterwald, 2005). Cinsi təcrübə şorakətlənmiş kişilərdə dorsal striatumdakı ΔFosB-ir hüceyrələrinin sayını artırdı (Naive-Sal: 35.6 ± 4.8 vs Exp-Sal: 82.9 ± 5.1; p Əvvəlki hesabatımızı təsdiqləyən <0.001) (Pitchers et al., 2010b). Bundan başqa, DcNUMXR ya da D1R antagonist infüzyonları NAc'ta dorsal striatumda (Exp-D2R: 1 ± 82.75 ir hüceyrələri, Exp-D2.64R: 2 ± 83.9 ir hüceyrələri; p <Naif-Sal nəzarətləri ilə müqayisədə 0.001). Bu tapıntılar antaqonist infuziyalarının yayılmasının ilk növbədə NAc ilə məhdudlaşdığını göstərir.

NAc blokunda D1R antagonisti həssaslaşdırılmış Amph mükafatına malikdir

Çiftleşmə zamanı NAX-da D1R məhdudlaşdırma seks təcrübəsi ilə bağlı təkmilləşdirilmiş Amph mükafatını, son NAc infuziyasından sonra 7 d və çiftleşmə testi (F(3,29) = 2.956, p = 0.049). Çiftleşmə seansları zamanı NAc-da salınan cinsi təcrübəli heyvanlar Amph-paired kamerada cinsi qaranlıq kişilərlə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox vaxt sərf etmişdirlər (Əncir 6A, p = 0.025), yuxarıdakı nəticələri təsdiqləyin. Əksinə, çiftleşmə zamanı intra-NAc D1R antagonistini qəbul edən cinsi təcrübəli heyvanlar Amph üçün CPP meydana gətirməmişdir. Onlar cinsi əxlaqsız nəzarətdən fərqlənmədilər və Amph-paired kamerada salin (Əncir 6A: p = 0.049) və ya D2R antagonisti (Əncir 6A: p = 0.038) cinsi təcrübəli kişilərin istifadəsi. D2R antagonist infuziyası NAc D2R antagonist infüzyonları ilə cinsi təcrübəli heyvanlar kimi inkişaf etmiş Amph mükafatını təsir etmədi, sadəlövh şoranlaşmalarla müqayisədə əhəmiyyətli bir Amph-CPP meydana gətirdi (Əncir 6A: p = 0.040) və D1R antagonisti təcrübəli heyvanlar (Əncir 6A: p = 0.038) və cinsi təcrübəli şoran kişilərdən fərqlənməmişdir.

Şəkil 6.     

Şəkil 6.     

NAc'ta D1 reseptorlarını maneə törətmək cinsi təcrübəli heyvanlarda həssas Amph mükafatını və artan dendritik dayanıqları ləğv edir. A, Amf-paired kamerada keçirdiyi sınaqdan keçirdikdən sonra cinsi cəhətdən naif (ağ, n = 6) və şorun qəbul edən təcrübəli (qara) heyvanlarn = 7), D1R antagonisti (n = 9) və ya D2R antagonisti (n = 8). Data qrupu ortalama ± SEMdir. *p <0.05, sadəlövh fizioloji nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. #p <0.05, D1R Ant təcrübəli heyvanlardan əhəmiyyətli fərq. B, Cinsi qarışıqlıq üçün dendritik spinlərin (10 μm başına) sayı (ağ, n = 7) və şorun qəbul edən təcrübəli (qara) heyvanlarn = 8), D1R antagonisti (n = 8) və ya D2R antagonisti (n = 8). Data qrupu ortalama ± SEMdir. *p <0.05, sadəlövh fizioloji nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli fərq. #p <0.05, təcrübəli salin nəzarətindən əhəmiyyətli fərq.

D1R antagonist müalicəsi seks təcrübəsi ilə bağlı NAc spinogenezini blok etdirir

Bu eyni heyvanların NAc'sindəki spinal sıxlığının təhlili göstərir ki, cinsi təcrübədən sonra artan NAc omurma sıxlığı və cinsi mükafat qazandıqdan sonra 1 d üçün çiftleşmə zamanı D7R aktivasiyası tələb olunduƏncir 6B; F(3,26) = 41.558, p <0.001). Xüsusilə, cinsi cəhətdən təcrübəli salin nəzarətləri və D2R antagonist heyvanları, cinsi olaraq sadəlövh fizioloji nəzarət ilə müqayisədə xeyli sayda onurğa sütununa sahib idi (Əncir 6B: p Əvvəlki tapıntılarımızı təsdiqləyən <0.001) (Pitchers et al., 2010a) və yuxarıda təsvir olunan GFP nəzarət viral vektorlu tapıntılar. Əksinə, cinsi cəhətdən təcrübəli D1R antagonistləri ilə ifraz olunan heyvanlar cinsi cəhətdən istifadəsinə salin təzyiqli maddələrdən fərqlənmədi (Əncir 6B). D2R antagonist infüzyonunun qismən bir təsiri var idi, çünki D2R infuzion heyvanlar cinsi təcrübədə şoran nəzarətdənƏncir 6B: p = 0.02), lakin cinsi cəhətdən istifadəsinə verilmiş şoran nəzarət və D1R ilə müalicə olunan təcrübəli kişilərəp <0.001; Əncir 6B). Beləliklə, cütləşmə zamanı NAc-da D1R blokadası cinsi təcrübənin təsirlərini maneə törətdi və NAc spinogenezdə mükafatlandırılmırdı.

Müzakirə

Mövcud tədqiqatda, təbii mükafatın qaçırılma dövrü təqib edildiyi zaman təbii və dərman mükafatı arasında qarşılıqlı həssaslıq göstərdik. Xüsusilə, cinsi davranışla təcrübəni, sonra 7 və ya 28 d əleyhdarlığını göstərdik, Amph mükafatını artırdıq. Bu tapıntılar dərman istəklərinin inkubasiya edilməsində sui-istifadədən dərhal istifadə etmə dövrünün müəyyən edilmiş rolu ilə oxşarlıqlara malikdir (Lu et al., 2005; Thomas və ark., 2008; Wolf, 2010b, 2012; Xue və digərləri, 2012). Bundan əlavə, NAc-da təbii mükafatlandırılmış ΔFosB, təbii mükafatın qaçınılmazlığının psikostimulyant mükafata qarşı potensial olaraq NAc-də spinogenez vasitəsilə mükafatın əldən düşməsi müddətində cross-sensitizing təsirləri üçün vacibdir. Cinsi təcrübədən sonra NAc-da ΔFosB yığılmasının uzun müddət davam edən və cütləşmə zamanı NAc D1R aktivliyinə bağlı olduğunu göstərdik. Öz növbəsində, NAc-da bu D1R-vasitəçilik ΔFosB upregulation Amph üçün artmış mükafat və NAc artmış bel ürəkliyi üçün vacibdir, baxmayaraq ki, cinsi təcrübə bu nəticələr cinsi mükafatdan uzaq bir müddət bağlıdır (Pitchers et al., 2010a). Nəhayət, NAc spinogenezinin həssaslaşdırılmış Amph mükafatının qısa müddətli ifadəsinin ilkin inkişafına kömək edə biləcəyini göstərmişik, lakin NAc-də artım müşahidə olunmuşdu və 7 d-dən sonra müşahidə olunduğundan, artmış dərman mükafatlarının davamlı ifadəsi üçün vacib deyildir. 28 d, abstinence dövrü deyil.

Dopaminin cinsi davranış da daxil olmaqla, təbii mükafat davranışı zamanı NAc-da sərbəst buraxıldığı bilinməkdədir. Qəbul edən bir qadın tətbiq edildikdən sonra NAc-da ekstraselular dopamin artdıqca çiftleşmə zamanı yüksəlmişdir (Fiorino və digərləri, 1997). Cari araşdırma göstərir ki, dopamin qəbuledici antagonistləri çiftleşmə zamanı NAc-yə daxil edilərkən cinsi davranışın başlanmasına ya da icrasına təsir göstərmir, bu da dopaminin mükafat davranışının ifadə edilməsində iştirak etmədiyi anlayışına uyğun gəlir. cinsi əlaqəli tapşırıqların stimullaşdırılmasının vacibliyinə görə (Berridge və Robinson, 1998). Həqiqətən, cinsi mükafatın öngörülmesi, mesolimbik dopamin mükafat sistemi içərisində neyronların aktivləşdirilməsinə səbəb olur, bunlar ventral tegmental sahədə dopaminergik hüceyrələr və onların hədəfi, NAc (Balfour və digərləri, 2004). Təkrarlanan cinsi davranış NAc-da ΔFosB əmələ gətirir ki, bu da cinsi davranışın tecrübesiyasına səbəb olan möhkəmləndirilməsinə vasitəçilik edir (Pitchers et al., 2010b). Cari nəticələr göstərir ki, çiftleştirilmiş indikatorlu ΔFosB upregulyasiyası, həqiqətən, çiftleşmə zamanı NAc-da D1R aktivliyindən asılıdır. Bu tapıntı təkrarlanan psikostimülan tətbiqin davamlı olaraq artdığını göstərən əvvəlki tədqiqatlarla uyğundur. D1R ifadə edən NAc orta spiny nöronlarda ΔFosB (Lee və digərləri, 2006; Kim və digərləri, 2009) və belə ΔFosB upregulation D1R aktivliyindən asılıdır (Zhang et al., 2002). Ayrıca D1R-də ΔFosB-nin aşırı ekspresyonu ilə striatumdakı nöronların ifadə edilməsi ilə əvvəlcədən uyuşturucuya məruz qalmaması halında normallaşmış bir dərman təcrübəsi olan hayvanlarda müşahidə olunan həssas dərman reaksiyaları istehsal edilə bilər (Kelz və digərləri, 1999). Thəm də təbii və dərman mükafatlarının mükafat davranışlarını həssaslaşdırmaq üçün bir D1R-bağlı mexanizm vasitəsilə NAc-da ΔFosB artır.

Bundan əlavə, mövcud tapıntılar ΔFosB təbii mükafat təcrübəsi və psixostimulyar mükafat arasında qarşılıqlı həssaslaşmanın kritik vasitəçisi olduğunu göstərir. Qeyd edildiyi kimi, NAc-da ΔFosB aktivliyi əvvəlcədən kəskin və ya təkrarlanan administrasiyadan sonra kokainə lokomotor aktivliyini həssaslaşdırır, çünki NAc-da ΔFosB aşırı ekspresyonu həssaslaşmış dərman reaksiyalarına aiddirKelz və digərləri, 1999), kokain və morfin CPP həssaslığını artırır (Kelz və digərləri, 1999; Zachariou et al., 2006) və aşağı dozada kokainin özünü idarə etməsinə səbəb olur (Colby və digərləri, 2003). Cari tədqiqat göstərir ki, Amp mükafatının cinsi təcrübəyə əsaslanan cinsi təcrübəyə səbəb olan eşitmə zamanı NAX-da D1R və ya ΔFosB fəaliyyətinin blokadası.

Cari tədqiqat göstərdi ki, Amph mükafatının və NAc spinogenezinin həssaslaşdırılması üçün cinsi mükafatdan çəkinmə müddəti tələb olunur. Bu abstinensiya dövründə ΔFosB spinogenezi başlatmaq və sinaptik qüvvəni dəyişmək üçün aşağı gen gen ifadəsini dəyişdirərək nöron funksiyasına təsir göstərdiyini fərz edirik. Həqiqətən, cütləşmə zamanı NAc-da ΔFosB induksiyasını maneə törətməsi, mükafatın qalmasından sonra aşkar edilmiş NAc-da artımın artmasına səbəb olmuşdu. Bundan əlavə, hər bir çiftleşmə sessiyasından əvvəl NAX-da bir D1R antagonistinin infuziyası ΔFosB-də və sonrakı artmış omurluq sıxlığında seks təcrübəsinin səbəb olduğu artımı qarşısını almışdır.

ΔFosB, transkripsiyonel aktivator və ya repressor kimi hərəkət edə bilən bir transkripsiya amilidir və bu da bir çox hədəf geninin ifadəsini təsir göstərə bilər və bu da NAc-da spinal sıxlığı və sinaptik gücünü təsir edə bilər. (Nestler, 2008). Daha dəqiq desək, ΔFosB cyclic-dependent kinase-5-ni aktivləşdirir (Bibb və digərləri, 2001; Kumar və al., 2005), nüvə faktoru κ B (NF-κB) (Russo və digərləri, 2009b), və glutamat AMPA reseptorunun GluA2 alt birliyi (Vialou və digərləri, 2010) və rdərhal erkən gen c-fosun transkripsiyasını təcəssüm etdirir (Pitchers et al., 2010b) və histon metiltransferaz G9 (Maze və ark., 2010). Cyclic-asılı kinaz-5, sitoskeletal proteinlərin və nevritin böyüməsini tənzimləyir (Taylor et al., 2007). Bundan başqa, NF-κB aktivləşdirilməsi NAc-də dendritik spinlərin sayını artırır, NF-κB inhibisyonu bazal dendritik dayanıqları azaldır və spinalarda kokain meydana gətirdiyi artımı azaldır (Russo və digərləri, 2009b). Beləliklə, cinsi mükafat NAc-da ΔFosB'yi artırır ki, bu da bir çox hədəflər vasitəsilə NAc spinal sıxlığını dəyişdirə bilər (yəni dövrəyə bağlı kinaz-5, NF-κB) və ümumi nəticənin hipotez tərəfindən Russo et al. (2009a) təkrar kokain hərəkətləri üçün.

Mövcud tədqiqatda gözlənilməz bir müşahidə, NAc-da artmış omurluq sıxlığı keçid idi və artıq cinsi təcrübədən sonra 28 d-də aşkar edilmişdir. Beləliklə, artmış omurluq sıxlığı, inkişaf etmiş Amph mükafatının başlaması ilə əlaqədardır və həssaslaşdırılmış Amph cavablarının ilkin inkişafına və ya qısa müddətli ifadəinə kömək edə bilər. Ancaq uzun müddət davam edən abstinence dövründən sonra həssas Amph mükafatının davamlılığı üçün artmış bel möhkəmliyi tələb olunmadı. Əvvəllər göstərdik ki, cinsi təcrübə NAc-da NMDA retseptorları alt-şöbəsinin NR-7-in qısa müddətli (28, lakin 1 deyil, son günlərdən sonra) artmasına gətirib çıxarmışdır ki, bu da uzunmüddətli mükafatların qaçırılmasından sonra başlanğıc səviyyələrinə dönmüşdür (Pitchers et al., 2012). Bu artmış NMDA reseptor ifadəsi cinsi təcrübəli inandırıcı səssiz sinapsların göstəricisi hesab olunurdu (Huang et al., 2009; Brown və ark., 2011; Pitchers et al., 2012), cinsi təcrübənin səbəb olduğu bel ürək böyüməsinin inkişaf etmiş NMDA reseptor fəaliyyətinə bağlı olma ehtimalı olduğunu düşünür (Hamilton və digərləri, 2012).

Nəticədə, mövcud tədqiqat təbii mükafat (cinsiyyət) və mükafat istifadəsi dövründən asılılığı ilə dərman mükafatının qarşılıqlı həssaslığını vurğulayır. Üstəlik, bu davranış plastisiyası NAc-da D1R aktivasiyası vasitəsilə ΔFosB tərəfindən vasitəçiliyin. Buna görə məlumat verilir ki, mükafat təcrübəsindən sonra təbii mükafat itkisi fərdlərin narkotik asılılığının inkişafına qarşı həssas olmasını təmin edə bilər və bu artan zəifliyin bir vasitəçisi ΔFosB və onun aşağı axın transkripsiyası hədəfləridir.

Dəyişikliklər

  • Oktyabr 16, 2012.
  • Revizyon dekabr 12, 2012 aldı.
  • Dekabr 23 qəbul edildi, 2012.

  • Bu iş Kanada Sağlamlıq İnstitutu (LMC), Ruh Sağlamlığı Milli İnstitutu (EJN) və Kanada Doğal Elmlər və Mühəndislik Araşdırma Şurası (KKP və LMC) tərəfindən dəstəklənmişdir. Doktor Catherine Woolley (Northwestern University) diolistik etiketleme texnikasına kömək etmək üçün təşəkkür edirik.

  • Müəlliflər rəqib maliyyə maraqlarını bəyan etməyiblər.

  • Yazışmalar Dr Lique M. Coolen, Mississippi Tibb Mərkəzinin Fizika və Biofizika Bölümü, 2500 North Dövlət Caddesi, Jackson, MS 39216 ünvanına göndərilməlidir. [e-poçt qorunur]

References

  1. â † μ
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Soyutma LM

    (2004) Cinsi davranış və cinsi əlaqəli ətraf mühitə aid olanlar kişi sümüklərində mesolimbik sistemini aktivləşdirir. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  2. â † μ
    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dopaminin mükafatdakı rolu nədir: hedonik təsir, mükafat öyrənilməsi və ya təşviq zəifliyi? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  3. â † μ
    1. Bibb JA,
    2. Chen J,
    3. Taylor JR,
    4. Svenningsson P,
    5. Nishi A,
    6. Snyder GL,
    7. Yan Z,
    8. Sagawa ZK,
    9. Ouimet CC,
    10. Nairn AC,
    11. Nestler EJ,
    12. Greengard P

    (2001) Kronik məruz qalmanın kokainə təsirləri nöronal protein Cdk5 tərəfindən tənzimlənir. təbiət 410: 376-380.

  4. â † μ
    1. Bradley KC,
    2. Meisel RL

    (2001) C-Fosun çekirdek accumbens və amfetamin stimulyasiya edilmiş lokomotor fəaliyyətində cinsi davranış indüksiyası qadın Suriya hamsters əvvəl cinsi təcrübə ilə sensitized olunur. J Neurosci 21: 2123-2130.

  5. â † μ
    1. Brown TE,
    2. Lee BR,
    3. Mu P,
    4. Ferguson D,
    5. Dietz D,
    6. Ohnishi YN,
    7. Lin Y,
    8. Suska A,
    9. Ishikawa M,
    10. Huang YH,
    11. Shen H,
    12. Kalivas PW,
    13. Sorg BA,
    14. Zukin RS,
    15. Nestler EJ,
    16. Dong Y,
    17. Schlüter OM

    (2011) Kokainə səbəb olan lokomotor həssaslaşdırma üçün səssiz bir sinaps-based mexanizm. J Neurosci 31: 8163-8174.

  6. â † μ
    1. Cameron CM,
    2. Carelli RM

    (2012) Kokain çəkilişi kokain və sakaroza istiqamətli məqsədli davranışlar əsnasında nüvəni ayıran dinamika dəyişir. Eur J Neurosci 35: 940-951.

  7. â † μ
    1. Chen BT,
    2. Hopf FW,
    3. Bonci A

    (2010) Mesolimbik sistemdə sinaptik plastisitə: maddə istifadəsi üçün terapevtik təsiri. Ann NY Acad Sci 1187: 129-139.

  8. â † μ
    1. Colby CR,
    2. Whisler K,
    3. Steffen C,
    4. Nestler EJ,
    5. Self DW

    (2003) ΔFosB'nin striatal hüceyrə tipli xüsusi aşırı ekspresyonu, kokain üçün təşviq artırır. J Neurosci 23: 2488-2493.

  9. â † μ
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Siçanlardakı Coolidge effekti zamanı nüvə akumbens dopamin effluxunda dinamik dəyişikliklər. J Neurosci 17: 4849-4855.

  10. â † μ
    1. Forlano PM,
    2. Woolley CS

    (2010) Nüvə accumbensində pre-və postsynaptic cinsi fərqlərinin kəmiyyət analizi. J Comp Neurol 518: 1330-1348.

  11. â † μ
    1. Frohmader KS,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. Soyutma LM

    (2010a) Qarışıq zövqləri: dərmanların insanlarda və heyvan modellərində cinsi davranışlara təsirlərinin nəzərdən keçirilməsi. Horm Behav 58: 149-162.

  12. â † μ
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Wise RA,
    4. Lehman MN,
    5. Soyutma LM

    (2010b) Metamfetamin kişi siçovulların cinsi davranışını tənzimləyən neyronların subpopulyasiyalarında fəaliyyət göstərir. Nevrologiyada 166: 771-784.

  13. â † μ
    1. Hamilton AM,
    2. Oh WC,
    3. Vega-Ramirez H,
    4. Stein IS,
    5. Hell JW,
    6. Patrick GN,
    7. Zito K

    (2012) Yeni dendritik spinlerin fəaliyyətə bağlı böyüməsi proteazom tərəfindən tənzimlənir. Neyron 74: 1023-1030.

  14. â † μ
    1. Hedges VL,
    2. Chakravarty S,
    3. Nestler EJ,
    4. Meisel RL

    (2009) Δ FosB ovuc həssaslığında həssas qadınlar, qadın Suriyalı hamsters cinsi mükafatını artırır. Genlər Brain Behav 8: 442-449.

  15. â † μ
    1. Huang YH,
    2. Lin Y,
    3. Mu P,
    4. Lee BR,
    5. Brown TE,
    6. Wayman G,
    7. Marie H,
    8. Liu W,
    9. Yan Z,
    10. Sorg BA,
    11. Schlüter OM,
    12. Zukin RS,
    13. Dong Y

    (2009) In vivo kokain təcrübəsi səssiz sinaps yaradır. Neyron 63: 40-47.

  16. â † μ
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Bağımlılığın neyron mexanizmləri: mükafatla əlaqəli öyrənmə və yaddaşın rolu. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  17. â † μ
    1. Kalivas PW

    (2009) Bağımlılığın glutamat homeostaz hipotezi. Nat Rev Neurosci 10: 561-572.

  18. â † μ
    1. Kauer JA,
    2. Malenka RC

    (2007) Sinaptik plastisitə və asılılıq. Nat Rev Neurosci 8: 844-858.

  19. â † μ
    1. Kelley AE

    (2004) Yaddaş və asılılıq: paylaşılan neyron dövriyyəsi və molekulyar mexanizmlər. Neyron 44: 161-179.

  20. â † μ
    1. Kelz MB,
    2. Chen J,
    3. Carlezon WA Jr.,
    4. Whisler K,
    5. Gilden L,
    6. Beckmann AM,
    7. Steffen C,
    8. Zhang YJ,
    9. Marotti L,
    10. Self DW,
    11. Tkatch T,
    12. Baranauskas G,
    13. Surmeier DJ,
    14. Neve RL,
    15. Duman RS,
    16. Picciotto MR,
    17. Nestler EJ

    (1999) Beyində transkripsiya amili olan ΔFosB ifadəsi kokain həssaslığını nəzarət edir. təbiət 401: 272-276.

  21. â † μ
    1. Kim Y,
    2. Teylan MA,
    3. Baron M,
    4. Sands A,
    5. Nairn AC,
    6. Greengard P

    (2009) Metilfenidatla bağlı dendritik omurum formalaşması və nüvəli akumbensdə ΔFosB ifadəsi. Proc Natl Acad Sci ABŞ 106: 2915-2920.

  22. â † μ
    1. Koob GF,
    2. Volkow ND

    (2010) Narkomaniya asılılığı. Neuropsychopharmacology 35: 217-238.

  23. â † μ
    1. Kumar A,
    2. Choi KH,
    3. Renthal W,
    4. Tsankova NM,
    5. Theobald DE,
    6. Truong HT,
    7. Russo SJ,
    8. Laplant Q,
    9. Sasaki TS,
    10. Whistler KN,
    11. Neve RL,
    12. Self DW,
    13. Nestler EJ

    (2005) Chromatin remodeling, striatumda kokainlə əmələ gələn plastisiyanı əsas götürən əsas mexanizmdir. Neyron 48: 303-314.

  24. â † μ
    1. Laviolette SR,
    2. Lauzon NM,
    3. Bishop SF,
    4. Sun N,
    5. Tan H

    (2008) D1 tipli D2 kimi reseptorlarla Dopamin siqnalları, nüvəyə qarşı accumbens nüvəsindəki kabuka fərqli olaraq nikotin mükafat həssaslığını modullaşdırır. J Neurosci 28: 8025-8033.

  25. â † μ
    1. Lee KW,
    2. Kim Y,
    3. Kim AM,
    4. Helmin K,
    5. Nairn AC,
    6. Greengard P

    (2006) D1 və D2 dopamin reseptorları içərisində nüvə akumbensində orta lifli neyronların tərkibində kokain-dendritik bel yarması. Proc Natl Acad Sci ABŞ 103: 3399-3404.

  26. â † μ
    1. Lennette DA

    (1978) İmmünofloresans mikroskopi üçün təkmilləşdirilmiş montaj vasitələri. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  27. â † μ
    1. Lu L,
    2. Ümid edirəm BT,
    3. Dempsey J,
    4. Liu SY,
    5. Bossert JM,
    6. Şaham Y

    (2005) Mərkəzi amygdala ERK sinyal yolları kokainin özlemini inkubasiya üçün vacibdir. Nat Neurosci 8: 212-219.

  28. â † μ
    1. Mameli M,
    2. Lüscher C

    (2011) Synaptic plastisite və bağımlılık: öyrənmə mexanizmləri qaçırdı. Neurofarmakoloji 61: 1052-1059.

  29. â † μ
    1. Maze I,
    2. Covington HE 3rd.,
    3. Dietz DM,
    4. LaPlant Q,
    5. Renthal W,
    6. Russo SJ,
    7. Mexanik M,
    8. Mouzon E,
    9. Neve RL,
    10. Haggarty SJ,
    11. Ren Y,
    12. Sampath SC,
    13. Hurd YL,
    14. Greengard P,
    15. Taraxovski A,
    16. Schaefer A,
    17. Nestler EJ

    (2010) Kokainlə bağlı plastisitədə histon metiltransferazın G9a-nın əhəmiyyətli rolu. Elm 327: 213-216.

    1. McCutcheon JE,
    2. Wang X,
    3. Tseng KY,
    4. Wolf ME,
    5. Marinelli M

    (2011) Kalsiyum keçən AMPA reseptorları kokain özünü idarə etmədən uzaqdan çıxarıldıqdan sonra, lakin eksperimental idarəedici kokaindən sonra nüvəli akumbens sinapslarında mövcuddur. J Neurosci 31: 5737-5743.

  31. â † μ
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Qadın kemirgenlərindəki cinsi təcrübə: hücresel mexanizmlər və funksional nəticələr. Brain Res 1126: 56-65.

  32. â † μ
    1. Muller DL,
    2. Unterwald EM

    (2005) D1 dopamin reseptorları aralıq morfin tətbiqindən sonra sümük striatumda ΔFosB indüksiyasını modullaşdırır. J Pharmacol Exp Ther 314: 148-154.

  33. â † μ
    1. Nestler EJ

    (2008) Bağımsızlığın transkripsiyon mexanizmləri: ΔFosB'nin rolu. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245-3255.

  34. â † μ
    1. Nestler EJ,
    2. Barrot M,
    3. Self DW

    (2001) ΔFosB: asılılıq üçün davamlı bir molekulyar keçid. Proc Natl Acad Sci ABŞ 98: 11042-11046.

  35. â † μ
    1. Olausson P,
    2. Jentsch JD,
    3. Tronson N,
    4. Neve RL,
    5. Nestler EJ,
    6. Taylor JR

    (2006) ΔFosB, nüvəli akumbenslərdə qidalandırılmış instrumental davranış və motivasiyanı tənzimləyir. J Neurosci 26: 9196-9204.

  36. â † μ
    1. Olsen CM

    (2011) Təbii mükafatlar, nöroplastisizlik və qeyri-narkotik asılılıqları. Neurofarmakoloji 61: 1109-1122.

  37. â † μ
    1. Perrotti LI,
    2. Hadeishi Y,
    3. Ulery PG,
    4. Barrot M,
    5. Monteggia L,
    6. Duman RS,
    7. Nestler EJ

    (2004) Xroniki stressdən sonra mükafatla əlaqəli beyin strukturlarında ΔFosB induksiyası. J Neurosci 24: 10594-10602.

  38. â † μ
    1. Perrotti LI,
    2. Weaver RR,
    3. Robison B,
    4. Renthal W,
    5. Maze I,
    6. Yazdani S,
    7. Elmore RG,
    8. Knapp DJ,
    9. Selley DE,
    10. Martin BR,
    11. Sim-Selley L,
    12. Bachtell RK,
    13. Self DW,
    14. Nestler EJ

    (2008) İstifadəsi olan narkotik vasitələrlə beynində beynin induksiyası. Synapse 62: 358-369.

  39. â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Soyutma LM

    (2010a) Mezolimbik sistemdə neyroplastiklik təbii mükafat və sonradan mükafatın qaçılmaz olmasıdır. Biol Psixiatriya 67: 872-879.

  40. â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Soyutma LM

    (2010b) Nucleus accumbensdə ΔFosB cinsi mükafatların təsirlərini gücləndirmək üçün vacibdir. Genlər Brain Behav 9: 831-840.

  41. â † μ
    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Wang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Soyutma LM

    (2012) Təbii mükafat təcrübəsi AMPA və NMDA reseptorlarının paylanması və funksiyasını dəyişir. PLoS One 7: e34700.

  42. â † μ
    1. Roberts MD,
    2. Gilpin L,
    3. Parker KE,
    4. Childs TE,
    5. MJ,
    6. Booth FW

    (2012) Dopamin D1 reseptor modulasiyası nüvəli accumbensdə yüksək məsafələrə çatdırmaq üçün yetişdirilmiş siçovulların könüllü təkərlərini azaldır. Fiziol Behav 105: 661-668.

  43. â † μ
    1. Russo SJ,
    2. Mazei-Robison MS,
    3. Ables JL,
    4. Nestler EJ

    (2009a) Neyrotrofik amillər və asılılıqda struktur plastisitə. Neurofarmakoloji 56 (Əlavə 1): 73-82.

  44. â † μ
    1. Russo SJ,
    2. Wilkinson MB,
    3. Mazei-Robison MS,
    4. Dietz DM,
    5. Maze I,
    6. Krishnan V,
    7. Renthal W,
    8. Graham A,
    9. Birnbaum SG,
    10. Green TA,
    11. Robison B,
    12. Lesselyong A,
    13. Perrotti LI,
    14. Bolaños CA,
    15. Kumar A,
    16. Clark MS,
    17. Neumaier JF,
    18. Neve RL,
    19. Bhakar AL,
    20. Barker PA,
    21. et al.

    (2009b) Nüvə faktoru κB sinyallığı nöronal morfologiya və kokain mükafatını tənzimləyir. J Neurosci 29: 3529-3537.

  45. â † μ
    1. Taylor JR,
    2. Lynch WJ,
    3. Sanchez H,
    4. Olausson P,
    5. Nestler EJ,
    6. Bibb JA

    (2007) Cdk5-in nüvəli accumbens-də inhibisyonu kokainin lokomotor-aktivləşdirici və təşviq motivasiya təsirlərini artırır. Proc Natl Acad Sci ABŞ 104: 4147-4152.

  46. â † μ
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pitchers KK,
    5. Soyutma LM

    (2009) Kişi siçovullarında cinsi mükafat: cinsi təcrübənin boşalma və intromissiyalarla əlaqəli şərtlərə uyğun təsirləri. Horm Behav 55: 93-97.

  47. â † μ
    1. Thomas MJ,
    2. Kalivas PW,
    3. Şaham Y

    (2008) Mesolimbik dopamin sistemində və kokain asılılığında nöroplastiklik. Br J Pharmacol 154: 327-342.

  48. â † μ
    1. Vialou V,
    2. Robison AJ,
    3. Laplant QC,
    4. Covington HE 3rd.,
    5. Dietz DM,
    6. Ohnishi YN,
    7. Mouzon E,
    8. Rush AJ 3rd.,
    9. Watts EL,
    10. Wallace DL,
    11. Iñiguez SD,
    12. Ohnishi YH,
    13. Steiner MA,
    14. Warren BL,
    15. Krishnan V,
    16. Bolaños CA,
    17. Neve RL,
    18. Ghose S,
    19. Berton O,
    20. Tamminga CA,
    21. et al.

    (2010) Beyin mükafat sxemlərində ΔFosB stress və antidepresan cavablara qarşı dayanıqlıq təmin edir. Nat Neurosci 13: 745-752.

  49. â † μ
    1. Wallace DL,
    2. Vialou V,
    3. Rios L,
    4. Carle-Florence TL,
    5. Chakravarty S,
    6. Kumar A,
    7. Graham DL,
    8. Green TA,
    9. Kirk A,
    10. Iñiguez SD,
    11. Perrotti LI,
    12. Barrot M,
    13. DiLeone RJ,
    14. Nestler EJ,
    15. Bolaños-Guzmán CA

    (2008) ΔFosB nüvəsindəki təbii mükafatla əlaqəli davranışlara təsir göstərir. J Neurosci 28: 10272-10277.

  50. â † μ
    1. Werme M,
    2. Messer C,
    3. Olson L,
    4. Gilden L,
    5. Thoren P,
    6. Nestler EJ,
    7. Brené S

    (2002) Δ FosB təkərlərin qaçışını tənzimləyir. J Neurosci 22: 8133-8138.

  51. â † μ
    1. Winstanley CA,
    2. LaPlant Q,
    3. Theobald DE,
    4. Green TA,
    5. Bachtell RK,
    6. Perrotti LI,
    7. DiLeone RJ,
    8. Russo SJ,
    9. Garth WJ,
    10. Self DW,
    11. Nestler EJ

    (2007) Orbitofrontal korteksdə ΔFosB induksiyası kokain səbəbindəki kognitif disfunksiyaya tolerantlıq yaradır. J Neurosci 27: 10497-10507.

  52. â † μ
    1. Wolf ME

    (2010a) Bermuda üçbucağı kokainlə əlaqəli neyrodukontiyalar. Trends Neurosci 33: 391-398.

  53. â † μ
    1. Wolf ME

    (2010b) DPamin və kokain tərəfindən nüvə adapterlərində AMPA reseptorlarının qaçaqmalçılığının tənzimlənməsi. Neurotox Res 18: 393-409.

  54. â † μ
    1. Wolf ME

    (2012) Neuroscience: kokain davranış təsirləri tərsinə çevrildi. təbiət 481: 36-37.

  55. â † μ
    1. Xue YX,
    2. Luo YX,
    3. Wu P,
    4. Shi HS,
    5. Xue LF,
    6. Chen C,
    7. Zhu WL,
    8. Ding ZB,
    9. Bao YP,
    10. Shi J,
    11. Epstein DH,
    12. Şaham Y,
    13. Lu L

    (2012) Uyuşturucu özlemini və nüksünü qarşısını almaq üçün yaddaş çıxarma-tükənmə proseduru. Elm 336: 241-245.

  56. â † μ
    1. Zachariou V,
    2. Bolanos CA,
    3. Selley DE,
    4. Theobald D,
    5. Cassidy MP,
    6. Kelz MB,
    7. Shaw-Lutchman T,
    8. Berton O,
    9. Sim-Selley LJ,
    10. Dileone RJ,
    11. Kumar A,
    12. Nestler EJ

    (2006) morfin hərəkətində nüvəli akumbensdə ΔFosB üçün mühüm rol oynayır. Nat Neurosci 9: 205-211.

  57. â † μ
    1. Zhang D,
    2. Zhang L,
    3. Lou DW,
    4. Nakabeppu Y,
    5. Zhang J,
    6. Xu M

    (2002) Dopamin D1 reseptoru kokainlə əlaqəli gen ifadəsi üçün kritik vasitədir. J Neurochem 82: 1453-1464.

Bu məqaləyə istinadən məqalələr

  • Aplysia-da mükəmməl sinaptik plastisitənin yeni formasının mükəmməlləşdirilməsi, yaddaşına və memeli beyində onların funksiyalarının pozulmasına gətirib çıxara bilər. Learning & Memory, 18 Sentyabr 2013, 20 (10): 580-591

TAM TƏDQİQ - MÜZAKİRƏ BÖLMƏSİ:

Mövcud tədqiqatda, təbii mükafatın qaçırılma dövrü təqib edildiyi zaman təbii və dərman mükafatı arasında qarşılıqlı həssaslıq göstərdik. Xüsusilə, cinsi davranışla yaşanan təcrübəni, 7 və ya 28 d-lərdən imtina etdiklərini göstərdik, amph mükafatını artırdı.

Bu tapıntılar dərman istəklərinin inkubasiya edilməsində sui-istifadədən dərmanlardan uzaq durmağın kritik rolu ilə bənzərliklərə malikdir (Lu və digərləri, 2005; Thomas və digərləri, 2008, Wolf, 2010b, 2012, Xue və s., 2012). NAc-da FosB, təbii mükafatın səbəbi, təbii mükafatdan çəkinmənin psixostimulyant mükafata qarşı potensial olaraq NAc-də spinogenez vasitəsilə mükafatın əldən düşməsi dövründə qarşılıqlı həssaslaşmanın təsirləri üçün vacibdir.

Cinsi təcrübədən sonra NAc-da FosB yığılması uzun sürən və çiftleşmə zamanı NAc D1R aktivliyinə bağlıdır.. Öz növbəsində, bu D1R vasitəsi ilə NAc-da FosB upregulation Amph üçün artmış mükafat və NAc-da artmış omurluq sıxlığı üçün vacibdir, baxmayaraq ki, cinsi təcrübənin bu nəticələri cinsi mükafatdan uzaq durma müddətinə (Pitchers və s., 2010a). Nəhayət, NAc spinogenezinin həssaslaşdırılmış Amph mükafatının qısa müddətli ifadəsinin ilkin inkişafına kömək edə biləcəyini göstərmişik, lakin NAc-də artım müşahidə olunmuşdu və 7 d-dən sonra müşahidə olunduğundan, artmış dərman mükafatlarının davamlı ifadəsi üçün vacib deyildir. 28 d, abstinence dövrü deyil.

Dopaminin cinsi davranış da daxil olmaqla, təbii mükafat davranışı zamanı NAc-da sərbəst buraxıldığı bilinməkdədir. Qəbul edən bir qadın tətbiq edildikdən sonra NAc-da ekstrasellüler dopamin artdıqca çiftleşmə zamanı yüksəlmişdir (Fiorino və s., 1997). Cari araşdırma göstərir ki, dopamin qəbuledici antagonistləri çiftleşmə zamanı NAc-yə daxil edilərkən cinsi davranışın başlanmasına ya da icrasına təsir göstərmir, bu da dopaminin mükafat davranışının ifadə edilməsində iştirak etmədiyi anlayışına uyğun gəlir. cinsi əlaqəli tapşırıqların stimullaşdırılmasının vacibliyinə görə (Berridge və Robinson, 1998). Həqiqətən, cinsi mükafatın öngörülmesi, mesolimbik dopamin mükafat sistemi içərisində nöronların aktivləşdirilməsinə səbəb olur, bunlar ventral tegmental sahədə dopaminergik hüceyrələr və onların hədəfi, NAc (Balfour və s., 2004).

Təkrarlanan cinsi davranış indeksləşdirir NAc-da FosB, bu da cinsi davranışların tecrübeye bağlı gücləndirilməsinə vasitəçilik edir (Pitchers et al., 2010b). Cari nəticələr göstərir ki, çiftleşmeyle bağlıdır? FosB upregulyasiyası həqiqətən çiftleşmə zamanı NAc-da D1R aktivliyindən asılıdır. Bu tapıntı təkrarlanan psixotraktiv idarəetmənin davamlı şəkildə artdığını göstərən əvvəlki tədqiqatlara uyğun gəlirmi? D1R ifadə edən NAc orta spiny nöronlarda FosB (Lee və s., 2006; Kim və s., 2009) və bu kimi? FosB upregulation D1R aktivasiyasından asılıdır (Zhang et al., 2002). Bundan əlavə, D1R-də striatumdakı nörosu ifadə edən FosB-nin (Kelz və digərləri, 1999) ekspresyonu ilə əvvəlcədən uyuşturucuya məruz qalmaması halında normal olaraq dərman təcrübəli heyvanlarda müşahidə olunan həssas dərman reaksiyaları istehsal edilə bilər. Beləliklə, həm təbii, həm də dərman mükafatları artmaqdadır. FosB, mükafat davranışlarını həssaslaşdırmaq üçün D1R-bağımlı mexanizm vasitəsilə NAc-də artır.

Bundan əlavə, mövcud tapıntılar göstərir ki, FosB təbii mükafat təcrübəsi və psixostimulyar mükafat arasında qarşılıqlı həssaslaşmanın kritik vasitəçisidir. Qeyd edildiyi kimi, NAc-da FosB aktivliyi daha əvvəl həssas dərman cavablarında təsirlənmişdir, çünki NAc-da FosB aşırı ekspresyonu əvvəlcədən kəskin ya da təkrarlanan administrasiyadan sonra kokainə lokomotor aktivliyini həssaslaşdırır (Kelz və s., 1999), kokainə həssaslıq artırır və morfin CPP (Kelz və digərləri, 1999, Zachariou və s., 2006) və aşağı dozada kokainin özünü idarə etməsinə səbəb olur (Colby və s., 2003). Cari araşdırma bunu göstərir D1R və ya FossB fəaliyyətinin blokadası NAc-də cütləşmə siqnalları zamanı Amph mükafatına həssaslaşdırma. Ttəbii, təbii və dərman mükafatlarını eyni sinir yolu ilə birləşdirməklə deyil, eyni molekulyar vasitəçiləri də birləşdirirlər (Nestler və s., 2001; Wallace və s., 2008; Hedges və s., 2009; Pitchers et al., 2010b), və ehtimal ki, NAc-da eyni nöronlarda (Frohmader və digərləri, 2010b), təşviq zəmanətinə və hər iki növ mükafatın "istəklərinə" təsir etmək (Berridge və Robinson, 1998).

Cari tədqiqat göstərdi ki, Amph mükafatının və NAc spinogenezinin həssaslaşdırılması üçün cinsi mükafatdan çəkinmə müddəti tələb olunur. Bu fərziyyə dövründə FosB spinogenezi başlatmaq və sinaptik qüvvəni dəyişmək üçün aşağıdan gələn gen ifadəsini dəyişdirərək nöron funksiyasına təsir göstərir. Həqiqətən, NAc'ta FosB'nin indüksiyonu engellenmesi, mükafatın devamsızlığı sonrasında NAc'de artan omurga sıxlığının engellenmesini engelledi. Bundan başqa, iHər bir çiftleşmə sessiyasından əvvəl D1R antagonistinin NAc-yə daxil olması seks təcrübəsinin səbəb olduğu artımın qarşısını alıb? FosB və sonrakı artmış omurluq sıxlığı. FosB, Nc (Nestler, 2008) -nın əzələ yoğunluğunu ve sinaptik gücünü etkileyebilecek bir çox hedef genin ifadesini etkileyecek transkripsiyonel bir aktivatör ya da repressor olaraq hareket edebilen bir transkripsiyon faktörüdür. Daha spesifik olaraq, FosB cyclic-dependent kinase-5 (Bibb et al., 2001; Kumar və s., 2005), nüvə amilini aktivləşdirir? Glutamat AMPA reseptorunun (Vialou və s., 2009) GluA2 alt birliyini (CFF-B) (Russo et al., 2010b) və dərhal erkən gen c-fosun transkripsiyasını (Pitchers et al. 2010b) və histon metiltransferaz G9 (Maze və s., 2010). Cyclicdependent kinase-5, sitoskeletal proteinlərin və nevritin yüksəlməsini tənzimləyir (Taylor və s., 2007). Bundan əlavə, NF-B-nin aktivləşdirilməsi NAc-də dendritik sümüklərin sayını artırır, NF-B inhibisyonu isə bazal dendritik dayanıqları azaldıb və spinlərdə kokain meydana gətirdiyi artımı (Russo və s., 2009b) məhdudlaşdırır. Beləliklə, cinsi mükafat artırırsa NAc-da FosB, birdən çox hədəf ilə NAc spinal sıxlığını dəyişə bilər (yəni, siklik-asılı kinaz-5, NF-? B) aümumi nəticənin dərman mükafatına həssas olduğu vurğulanırRusso və b. (2009a) təkrar kokain hərəkətləri üçün

Mövcud tədqiqatda gözlənilməz bir müşahidə, NAc-da artmış omurluq sıxlığı keçid idi və artıq cinsi təcrübədən sonra 28 d-də aşkar edilmişdir. Beləliklə, artmış omurluq sıxlığı, inkişaf etmiş Amph mükafatının başlaması ilə əlaqədardır və həssaslaşdırılmış Amph cavablarının ilkin inkişafına və ya qısa müddətli ifadəinə kömək edə bilər. Lakin, iuzun ömür sürdükdən sonra həssaslaşdırılmış Amph mükafatının davamlılığı üçün spinal zəifliyi artmışdır. Əvvəllər göstərdik ki, cinsi təcrübə NAc-da NMDA retseptorları alt-şöbəsinin NR-7-in qısa müddətli (28, lakin 1 deyil, son günlərdən sonra) artmasına gətirib çıxarmışdır ki, bu da uzunmüddətli mükafatların qaçırılmasından sonra başlanğıc səviyyələrinə dönmüşdür (Pitchers et al., 2012). Bu artmış NMDA reseptor ifadəsi cinsi təcrübəli inandırıcı səssiz sinapsların (Huang et al., 2009; Brown et al., 2011; Pitchers et al., 2012) göstəricisidir və cinsi təcrübənin səbəb olduğu ehtimalı ilə bağlıdır bel ürəyin böyüməsi inkişaf etmiş NMDA reseptor aktivliyindən asılıdır (Hamilton və s., 2012).

Nəticədə, hazırkı tədqiqat təbii mükafat (cinsiyyət) və mükafatın istifadəsi dövründən asılılığa görə dərman mükafatının kəskinləşdirilməsini vurğulayır. Bundan əlavə, bu davranış plastisiyası NAc-də D1R aktivasiyası vasitəsilə FosB tərəfindən vasitəçilik edilmişdir. Buna görə məlumatlar, mükafat təcrübəsindən sonra təbii mükafatın itkisinə səbəb ola bilər ki, fərdlər narkotik asılılığının inkişafına həssasdır və bu artan zəifliyin bir vasitəçisi FosB və onun aşağı axın transkripsiyası hədəfləridir.