Kronik Farmakoloji, Duygusal ve Optogenetik Uyarıcılara (2013) Reaksiyona Karşı Striatal Ortamında Spin Nöron Subtiplerinde DeltaFosB İndüksiyonu

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, Nugent A, Finkel E, Chaudhury D, Chandra R, Riberio E, Rabkin J, Mouzon E, Cachope R, Cəsarətli JF, Han MH, Dietz DM, Self DW, Hurd YL, Vialou V, Nestler EJ.

mənbə

Maryland Tıp Fakültesi, Baltimore, Maryland 21201, Fishberg Nörobilim Bölümü ve Friedman Brain İnstitutu, Mount Sinai, New York, New York 10029, İskahn Tıp Fakültesi, Psikiyatri ve Farmakoloji ve Sistemleri Bölümleri, Anatomiya ve Nörobiyoloji Anabilim Dalı Nyu-York, Nyu-York, 10029, Psixiatriya Bölümü, Texas Southwestern Medical Center Universiteti, Dallas, Texas 75390, Farmakologiya və Toksikologiya şöbəsi və Addictions Tədqiqat İnstitutu, New York Dövlət Universiteti Buffalo, Nyu-York, Nyu-York, 14214 və Institut Milli Milli Təhsil Nazirliyi, U952, Mərkəzi Milli Müqəddəs Araşdırmalar Mərkəzi, Ünsiyyət Mixe de Recherche 7224, UPMC, Paris, 75005, Fransa.

mücərrəd

Transkripsiya amili, ΔFosB, striatumda istismar, antipsikotik dərman preparatları, təbii mükafatlar və stress kimi bir neçə kronik stimulla möhkəm və davamlı olaraq endirildi. Lakin, çox az iş iki striatal orta spiny nöron (MSN) alt tipində ΔFosB induksiyası dərəcəsini nəzərdən keçirmişdir. Dopamin qəbuledicisi 1 (D1) dopamin qəbuledicisi olan 2 (D2) dopamin qəbuledicisi olan ΔFosB indüksiyasını qiymətləndirmək üçün floresan məruzəçi BAC transgenik siçanlardan istifadə edirik və ventral striatum, nüvəli accumbens (NAc) qövsü və nüvəsində msnsləri zənginləşdirir və dorsal striatumda (dStr ) kokain, etanol, Δ (9) -tetrahidrokannabinol və opiatlar daxil olmaqla bir sıra narkotik maddələrə xroniki təsir göstərdikdən sonra; antipsikotik dərman, haloperidol; uşaq zənginləşdirilməsi; sukroz içməli; kalori məhdudiyyəti; serotonin selektiv geri alma inhibitoru antidepresan, fluoksetin; və sosial məğlubiyyət stress. Bizim tapıntılar göstərir ki, bir çox stimulun xroniki ifşa edilməsi ΔFosB'yi bütün üç striatal bölgədə bir MSN-alt tip seçici modeldə endirecektir. ΔFosB'nin striatumda elektron aracılı indüksiyonunun tədqiqi üçün sinqtik girişləri NAc-ə göndərən limbik beyin bölgələrində fəaliyyətini artırmaq üçün optogenetikadan istifadə edirik; bu bölgələrə ventral tegmental sahə və bir neçə glutamateriqik afferent bölgələr daxildir: medial prefrontal korteks, amigdala və ventral hipokampus. Bu optogenetik şərtlər NAc nüvəsində və qabığında MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasının çox fərqli nümunələrinə gətirib çıxarır. Birlikdə bu məlumatlar kronik stimullara cavab olaraq striatal MSN subtiplərində ΔFosB induksiya nümunələrini yaradır və striatumda ΔFosB induksiya mexanizmlərinin yeni səviyyəli mexanizmlərini təqdim edir.

giriş

İstifadəsi, antipsikotik dərmanları, stress və təbii mükafatların da daxil olduğu kronik stimullar ΔFosB-nin sabit tərkibinə səbəb olur. FosB gen, striatumda (məsələn, Hope və digərləri, 1994; Hiroi və Graybiel, 1996; Hiroi et al., 1997; Moratalla və digərləri, 1996; Perrotti və digərləri, 2004, 2008; Muller və Unterwald, 2005; McDaid et al., 2006; Teegarden və Bale, 2007; Wallace və digərləri, 2008; Solinas və digərləri, 2009; Vialou və digərləri, 2010, 2011; Kaplan və al., 2011). Bu birikim bu beyin bölgəsində ΔFosB tərəfindən bir çox genin ikitərəfli tənzimlənməsinə gətirib çıxarır (McClung və Nestler, 2003; Renthal və digərləri, 2008, 2009; Vialou və digərləri, 2010; Robison və Nestler, 2011). Striatum dopamin qəbuledicisi 95 (D1) və ya dopamin reseptoru 1 (D2) daxil olmaqla, bir çox genin zənginləşdirilməsi əsasında iki alt tipə bölünən GABAergic proyeksiyanın orta spiny nöronları (MSNs) əsasən (% 2%) ibarətdirGerfen, 1992; Graybiel, 2000; Lobo et al., 2006; Heiman et al., 2008) və fərqli nəticələri ilə fərqli subkortikal strukturlaraAlbin və al., 1989; Gerfen, 1992; Kalivas və digərləri, 1993; Graybiel, 2000; Nicola, 2007; Smith və digərləri, 2013). Bu yaxınlarda, ventral striatumda (nucleus accumbens [NAc]) və dorsal striatumda (dStr) motivasion və motorlu davranışlara vasitəçilik edən bu msn subtiplərinin ayrı-ayrı molekulyar və funksional rollarını əks etdirən hesabatlar varLobo və Nestler, 2011; Gittis və Kreitzer, 2012).

Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, ΔFosB əsasən D1-MSN-də kokain və ya kronik təkər kosmik kronik müalicə ilə təbii bir mükafat forması (Moratalla və digərləri, 1996; Werme və ark., 2002; Lee və digərləri, 2006), kronik məhdudlaşdırma stress isə MSN subtiplərində (ΔFosB)Perrotti və digərləri, 2004). Bundan başqa, hüceyrə tipinə xüsusi transjenik xəttlərdən və ya viral vasitəçilikdə olan gen köçürməsindən məcburi dəlillər D1-MSN-də ΔFosB induksiyası kokainə davranış və struktur plastisiyanı, morfinə, təkər qaçışına, yemək mükafatına və xroniki sosial məğlubiyyətə qarşı davamlı davranışlara cavab verdiyini göstərir stress, D2-MSN'lərdə ΔFosB induksiyası təkərlərin işləməsinə davranış reaksiyalarını tənzimləyirKelz və digərləri, 1999; Werme və ark., 2002; Colby və digərləri, 2003; Olausson et al., 2006; Zachariou et al., 2006; Vialou və digərləri, 2010; Grueter et al., 2013; Robison və digərləri, 2013).

D1-MSN və D2-MSNs-ə qarşı fərqli təsiri ilə bu kronik motivasion stimulları tənzimləmək üçün ΔFosB üçün mühüm rol oynadığını nəzərə alaraq, burada MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasının nümunələri üzrə bir neçə kronik stimul, bir antipsikotik dərman ilə xroniki müalicə, dəyişdirilmiş ekoloji və iştahı stimulları, xroniki sosial məğlub stress və antidepresan ilə xroniki müalicəyə xroniki məruz qalma. ΔFosB'nin bir neçə afinent limbik beyin bölgəsi tarafından ΔFosB indüksiyonunu kontrol eden devre mekanizmalarını anlamak için, dopaminerjik veya glutamaterjik afferent beyin bölgelerinde hücre gövdelerini tekrar tekrar etkinleştirmek ve MSN alt tiplerinde ortaya çıkan ΔFosB indüksiyonunu incelemek için optogenetik teknolojileri kullanıyoruz. Bizim nəticələr kronik stimullar tərəfindən striatal D1-MSN və D2-MSN'lərdə ΔFosB'nin induksiyasına yeni bir fikir verməkdədir və ilk dəfə ΔFosB-nin seçici MSN subtipləri içərisində və vasitəçiliyində indusiyasını nümayiş etdirir.

Material və metodlar

Heyvanlar.

D1-GFP or D2-GFP hemizygote siçanları (Gong et al., 2003) C57BL / 6 fonunda bir 12 h işıq qaranlıq dövrü ad libitum qida və su. Bütün tədqiqatlar Sinan dağında yerləşən Merilend Tibb Məktəbinin və İhahn Tibb Təşkilatının İnstitusional Heyvan Baxımı və İstifadə Komitələri tərəfindən hazırlanmış qaydalara uyğun olaraq aparılmışdır. Bütün təcrübələr üçün kişi siçanları (yaş 8 həftə) istifadə edilmişdir. Bütün siçanlar perfüzedildi və beyinlər işıq dövründə günortadan sonra toplandı. Hemizigot D1-GFP və D2-GFP bir C57BL / 6 və ya FVB / N fonunda olan siçanların davranışı, D1-MSN və D2-MSNlərin fizioloji və wildcards (MSN)Lobo et al., 2006; Chan və al., 2012; Nelson et al., 2012). Bundan başqa, bu işdə görülən ΔFosB induksiyasının ümumi nümunələri qeyri-hüceyrə tipli seçmə vasitələrlə (məsələn, Perrotti və digərləri, 2004, 2008).

Kokain müalicəsi.

D1-GFP (n = 4 başına müalicə) və D2-GFP (n = 4 hər müalicə üçün) siçanlar evdə qəfəsdə 7 gündəlik intraperitoneal kokain (20 mg / kq) və ya 0.9% salin qəbul etmişdir. 1 və ya 3 d kokain (20 mg / kq) enjeksiyonları üçün siçanlar 6 və ya 4 d 0.9% salin enjeksiyonlarını, sonra 1 və ya 3 d kokain enjeksiyonlarını əldə etmişlər. Bütün siçanlar son inyeksiyadan sonra 24 h həddinə çatdı. Bu kokain dozası əvvəlki araşdırmalara əsasən seçilmişdir (məsələn, Maze və ark., 2010).

Haloperidol müalicəsi.

D1-GFP (n = 3 və ya 4 hər müalicə üçün) və D2-GFP (n = 4 başına müalicə) siçanlar içməli suda haloperidol (2 mg / kq), pH 6.0 (Narayan və digərləri, 2007) və ya müntəzəm içməli su, pH 6.0, 3 həftə (21 d) üçün. Siçanlar 22 günündə perfüzedildi.

Morfin müalicəsi.

D2-GFP siçan (n = 4 və ya 5 hər müalicə) izofluranın qısa müddətdə anesteziyasına məruz qaldı və əvvəlcədən təsvir edilən 25 və günün 1 günündə morfin (3 mq) və ya şam peletlərinin subkütan implantlarını qəbul etdiMazei-Robison və digərləri, 2011). Siçanlar 5 günündə perfüzedildi.

Etanol müalicəsi.

D2-GFP siçan (n = 4 və ya 5 hər müalicə üçün) 10% etanol (EtOH) məruz qaldı, C57BL / 6-in içmək üçün göstərilən bir dozYoneyama və digərləri, 2008). Siçanlara 10% EtOH (şüşə A) və su (şüşə B) üçün iki şüşə seçim testi verildi. D2-GFP 10 d üçün şüşə hər şüşə (şüşə A və B) su aldı. EtOH şüşələrini alan bütün siçanlar EtOH üçün (100 × şüşə A həcmi / [şüşə A həcmi + şüşə B həcmi]) hesablandığı üçün üstünlük nümayiş etdirdi. 10 EtOH şüşəsini alan siçanlar, su ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox EtOH istehlak edərkən, hər iki şüşə su alan siçanlar sıvı istehlakında heç bir fərq göstərmədilər. 10 axşamı günü, bütün siçanlara normal içməli su verildi və 11 günündə perfüzedildi.

Δ (9) -tetrahidrokannabinol (Δ (9) -THC) müalicəsi.

D2-GFP (n 3 d (9% Tween ilə 10% salin) Δ (0.9) -THC (0.3 mg / kq) və ya intraperitoneal injectionları qəbul edən 7 dPerrotti və digərləri, 2008). Siçanlar son inyeksiyadan sonra 24 h səviyyəsində perfüzə edilmişdir.

Kokain özünü idarə etmə.

D2-GFP siçan (n 4 və ya 5) 20 ardıcıl test günləri üçün istifadə edilən 1 sükroz pelletlərinin bir satınalma meyarına standart prosedurlara uyğun çatana qədər (1 və ya 30 hər müalicə üçün) əvvəlcə 3 siqaroz pelletləri üçün sabit bir nisbətdə XNUMX (FRXNUMX)Larson və digərləri, 2010). Keçid dövründə tətbiq olunan kokain intravenöz administrasiyaya imkan verilməsi üçün penis mətbuatına öyrədilmiş siçanlar cərrahiyyə olaraq intravenöz jugulyar kateter ilə implantasiya edildi. Əməliyyatdan bir həftə sonra siçanlar bir FR2 gücləndirilməsi proqramında 1 h gündəlik seanslar zamanı özünü idarəetmə paradiqmasına təqdim edildi. Özünü idarəetmə avadanlıqları (Med Associates) aktiv leverə reaksiya (2.5 s) üzərində kokain (0.5 mg / kg / doğru manivela basma başına infuziya) ilə nəticələndi, beləliklə, effektiv qola cavab verildi heç bir proqramlaşdırılmış nəticə vermədi. Gündəlik 1 h sessiyalarında həftədə 2 d, 5 həftə üçün bir FR3 proqramında siçanların özünü idarə etdiyi kokain. D2-GFP ekvivalent vaxt ərzində 0.9% salin inyeksiya qəbul edən siçanlar nəzarət kimi istifadə edilmişdir. Siçanlar son kokain və ya salin idarəsindən sonra 24 h səviyyəsinə çatdırıldı.

Heroin özünü idarə etmə.

Eroin özünü idarə etmədən əvvəl, D2-GFP siçan (n = 4), yeddi 1 h gündəlik seanslarda şokolad topu (BioServ, Tüstüsiz Precision Pellets) üçün qolu basmaq üçün hazırlanmışdır. Lever mətbuatına öyrədilmiş siçanlar əməliyyat sonrası eritrosit intravenöz administrasiyaya imkan verilməsi üçün intravenöz juguler kateter ilə implantasiya edildi. Əməliyyatdan bir həftə sonra siçanlar 3 h gündəlik prosedurlar zamanı self-administering paradiqma ilə standart prosedurlara uyğun olaraq bir FR1 proqramı üzrə gücləndirilmişdirNavarro və digərləri, 2001). Özünü idarəetmə avadanlıqları (Med Associates) proqramı aktiv leverə cavab olaraq (5 s) heroin (30 μg / kg / injection, NIDA Dərman Təchizatı Proqramı) çatdırılması ilə nəticələndi, halbuki, qolu heç bir proqramlaşdırılmış nəticə vermədi. Heyvanlara 14 d üçün heroinin özünü idarə etdiyi prosedurlara giriş imkanı verildi. D2-GFP ekvivalent vaxt ərzində 0.9% salin inyeksiya qəbul edən siçanlar nəzarət kimi istifadə edilmişdir. Siçanlar son eroin və ya salin idarəsindən sonra 24 h səviyyəsində perfüzə edilmişdir.

Yetkinlik yaşına çatmayan ekoloji zənginləşdirmə.

D2-GFP (n = Qrupda 4) siçanlar siçovullardan adaptasiya edilmiş bir paradiqma istifadə edərək postnatal gündə 21 (P21) da zənginləşdirilmiş bir mühit və normal mənzil şəraitinə salınmışdırYaşıl et al., 2010). Zənginləşdirilmiş mühit siçan tunellərini, qübbə və təkərləri, tarama topları, kulpları (Bio Serv) və digər oyuncaqlar daxil olmaqla, zənginləşdirmə qurğuları ilə dolu olan zənginləşdirilmiş kobud yataqları (Andersons Laboratoriya yataqları) ilə daha böyük bir hamster qəfəsindən ibarət idi. Siçanlar 4 həftəsində P50-a qədər mənzil şəraitində qaldılar və daha sonra perfüzedilər.

Sucrose müalicəsi.

D2-GFP siçan (n = 4 və ya 5 başına müalicə) əvvəlki bir işə oxşar 10% sukroz üçün iki şüşə seçim testi verildi (Wallace və digərləri, 2008). Siçanlara 10% sukroz (şüşə A) və su (şüşə B) verildi D2-GFP 10 d üçün hər iki şüşə su idarələri götürdü. Sucrose şüşələrini alan bütün siçanlar, saqqız üçün seçim etdilər (100 × şüşə A həcmi / şüşə A həcmi + şüşə B həcmi). 10% sukroz şüşəsini alan siçanlar, su ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox sükroz istehlak edirdi, hər iki şüşə içində su alan siçanlar sıvı istehlakında heç bir fərq göstərmədilər. 10 axşamı günü, bütün siçanlara normal içməli su verildi və 11 günündə perfüzedildi.

Kalori məhdudlaşdırması.

D2-GFP siçan (n = 4 başına genotip), 60% -ni aldıqları bir kalori məhdudlaşdırma protokolundan keçdi ad libitum gündəlik kaloriVialou və digərləri, 2011) 10 üçün d. D2-GFP nəzarət siçanları çovaqa tam giriş əldə etdi. 10 axşamı günü, bütün siçanlar çənəyə tam giriş əldə etdilər və 11 günündə perfüzedildi.

İctimai məğlubluq stress.

D2-GFP siçan (n = Qrupda 4 və ya 5) 10 d daha əvvəl təsvir edilən sosial məğlubiyyət stressiBerton və digərləri, 2006; Krishnan et al., 2007). Siçanlar böyük bir hamster kafesində 1 min üçün təcavüzkar CD5 təqaüdçü breeders məruz qaldı. Siçanlar daha sonra sensorlu kontakt saxlamaq üçün perforasiya olunmuş bölücünün digər tərəfində eyni kafesdə 24 h üçün yerləşdirildi. Növbəti gün siçan eyni şərtlərdə və mənzil altında yeni bir CD1 siçanına məruz qaldı. Bu, hər gün yeni bir CD10 ilə 1 d üçün təkrarlanır. Nəzarət siçanları bənzər şərtlər altında məğlubiyyət stressi olmadan yerləşdirildi. Siçanlar 11 günü gündəmdə sosial qarşılıqlı əlaqələr üçün sınaqdan keçirildi. Siçanlar əvvəlcə başqa bir siçan təqdim etmədən (hədəfsiz) bir açıq sahə qutusunda yeni bir kamera ilə qarşılıqlı keçirdikləri zaman sınaqdan keçirildi və sonra sonradan kameranın arxasında olan yeni bir CD1 siçanı (hədəf)Berton və digərləri, 2006; Krishnan et al., 2007). Siçanlar daha əvvəl təsvir edilən parametrlərə əsasən həssas və ya möhkəm qruplara ayrıldı (Krishnan et al., 2007). Bu, yeni siçanla və qarşılıqlı nisbəti ilə keçirdiyi ümumi vaxt daxildir: (məqsədi ilə sərf edilən hədəf / vaxt sərf olunan vaxt) × 100. Bu tədbir həssas və möhkəm qrupları etibarlı şəkildə müəyyənləşdirir və digər davranış fərqləri ilə çox əlaqəli olur (Krishnan et al., 2007). Bütün siçanlar ictimai qarşılıqlı sınağından (24 h sonuncu sosial məğlubiyyət epizodundan sonra) sonra 48 h-ə perfüz edilmişdir.

Fluoksetin müalicəsi.

D2-GFP siçan (n = 3 və ya 4 qrupu) 14 gündəlik intraperitoneal fluoksetinin (20 mg / kq) və ya vasitənin (0.9% siklodekstrinli 10% salin)Berton və digərləri, 2006). Siçanlar son inyeksiyadan sonra 24 h səviyyəsində perfüzə edilmişdir.

Stereotaksik cərrahiyyə.

D2-GFP siçanlar kiçik bir heyvan stereotaksik alətinə yerləşdirilən ketamin (100 mg / kg) / xylazine (10 mg / kg) ilə anesteziyaya məruz qaldı və onların kəllə səthinə məruz qaldı. Otuz üç ölçülü şpris iğnesi 0.5-1 μl'ini birdəfəlik 0.1 μl, infraqırmızı olaraq ventral tegmental bölgəyə (VTA), orta prefrontal korteksə (mPFC), amigdala və ya ventral hipokampusa vHippo). AAV [adeno-əlaqəli virus] -Ssyn-CHR2 [kanalrhodopsin 2] -EYFP və ya AAV-hSyn-EYFP, VTA D2-GFP siçan (n = Qrupda 5) stereotaksik koordinatlarda (anterior posterior, -3.3 mm, lateral-medial, 0.5 mm, dorsal-ventral, -4.4 mm, 0 ° açısı). 26 mm uzunluğunda, VTA (anterior-posterior, -3.9 mm, lateral-medial, 3.3 mm, dorsal-ventral, -0.5 mm) üzərində implantasiya ilə ikitərəfli cannula (3.7-gauge) izlədiKoo və ark., 2012; Chaudhury və digərləri, 2013). AAV-CaMKII-CHR2-mCherry və ya AAV-CaMKII-mCherry mPFC (n = Qrup başına 4 və ya 5), amigdala (n = Qrup başına 3 və ya 4) və ya vHippo (n = Qrup başına 3 və ya 4) D2-GFP 105 μm kronik implantable optik liflərin (Sparta və s., 2011) implantasiyası ilə izlənilir. Coordinates aşağıdakı kimi idi: mPFC (infralimbic hədəfləndi, lakin biz prelimbic bölgələrə virus yayılması müşahidə: anterior-posterior, 1.7 mm, lateral-medial, 0.75 mm, dorsal-ventral, -2.5 mm, 15 ° açı) və optik lif (dorsal-ventral, -2.1 mm); amigdala (bazolateral amigdala hədəflənmişdi, amyqdalın mərkəzi nüvəsinə, ön posteriorə, 1.6 mm, lateral-medial, 3.1 mm, dorsal-ventral, 4.9 mm, 0 ° açısı) və optik lif (dorsal-ventral, -4.9 mm); vHippo (ventral subikulum hədəfləndi, lakin ventral hipokampusun digər bölgələrinə yayılması, ön-posterior, 3.9 mm, lateral-medial, 3.0 mm, dorsal-ventral, 5.0 mm, 0 ° açı) və optik fiber (dorsal-ventral, -4.6 mm).

Optogenetik şərtlər.

Üçün vivo ilə VNA nöronal atəşin optik nəzarətində, bir 200 μm əsas optik fiber yamaq kordu kanülün bağlanması üçün dəyişdirilmişdir. Elyaf kanüllə təmin edildikdə, lifin ucu xanundan kənarda ~ 0.5 mm uzanır (Lobo et al., 2010; Chaudhury və digərləri, 2013). Üçün vivo ilə mPFC, amigdala və vHippo neyron atəşinin optik nəzarətində, 62.5 μm split fiber yamaq kordonu implantasiya edilə bilən başlıqlı montaj liflərinə (Sparta və s., 2011) əlavə edildi. Optik liflər bir FC / PC adapteri vasitəsilə bir 473 nm mavi lazer dioduna (Crystal Lasers, BCL-473-050-M) əlavə edilmiş və bir stimulator vasitəsilə (Agilent, 33220A) işıq impulsları yaranmışdır. VTA üçün, mavi işıq (473 nm) fasik paxlalar, 20 ms üçün 40 Hz (Chaudhury və digərləri, 2013), 10 d gündə 5 min çatdırıldı. d. 473 d üçün mPFC, amigdala və vHippo, mavi işıq (20 nm), 30 s üçün 10 Hz, 5 d üçün gündə 24 min çatdırıldı. İşıq çatdırılması ev qəfəsində baş verdi və bütün siçanlar son işıqlandırmadan sonra XNUMX səldilər.

In vitro patch-clamp elektrofizyoloji.

Bütün hüceyrə qeydləri, VTA dopamin nöronlarından və ya yuxarıda göstərilən viruslarla vurulmuş siçanlardan kəskin beyin dilimində mPFC glutamateriqik nöronlardan əldə edilmişdir. Siçanlar üzərində səs kəsilməsi səsləri ilə yox idi vivo ilə stimullaşdırma, lakin 1 d dilim stimullaşdırılması (1 d) və ya 4 d ilə vivo ilə stimullaşdırılması və 1 d dilim stimullaşdırılması (5 d). Stressin azaldılması və sağlam dilim əldə etmək üçün siçanlar elektrofizyoloji sahəsinə gətirildikdən dərhal anesteziyaya alındı ​​və xNUMX-40 s üçün xNUMX mm NaCl, 60 mm KCl, 128 mm NaH2PO4, 10 mm d-qlükoza, 24 mm NaHCO3, 2 mm CaCl2, və 2 mm MgCl2 (95% O ilə oxygenləşdirilmişdir2 və 5% CO2, pH 7.4, 295-305 mOsm). MPFC və ya VTA ehtiva edən kəskin beyin dilimləri, NaCl'i 254 səkkiz səkkiz ilə tamamilə əvəz edərək və 95% O ilə doymuş olaraq əldə edilmiş soyuq sükroz-aCSF-də bir mikrosli (Ted Pella)2 və 5% CO2. Dilimlər 1 ° C'de bir CSF ilə tutma otağında saxlanılır. Patch pipettes (37-3 MΩ), bütün hüceyrəli cərəyan üçün aşağıdakileri ehtiva daxili həlli ilə doldurulmuşdur: 5 mm potasyum gluconate, 115 mm KCl, 20 mm MgCl2, 10 mm fosfokreatin, 10 mm HEPES, 2 mm maqnezium ATP və 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). 34 ° C (axın dərəcəsi = 2.5 ml / dəq) olan bir CSF istifadə edərək bütün hüceyrə qeydləri edildi. Mavi işıq qatarları (MPFC və ya 20 Hz üçün 20 Hz, VTA üçün 40 ms) bir FC / PC adaptoru vasitəsilə bir 473 nm mavi lazer dioduna (OEM) bağlanmış və 200 vasitəsilə mPFC və VTA dilimlərinə çatdırılmış bir stimulyator tərəfindən yaradılıb μm optik lif. Cari siqnal sınaqları Multiclamp 700B gücləndiricisi istifadə edərək həyata keçirilmişdir və məlumatların əldə edilməsi pClamp 10 (Molecular Devices) -də həyata keçirilmişdir. Eksperimentlər zamanı səth müqavimətinin monitorinqi aparılıb və membran axınları və gərginliklər 3 kHz-də (Bessel filter) süzülüb.

İmmunohistokimya.

Siçanlar xloral hidrat ilə anesteziyaya alındı ​​və 0.1 m PBS ilə perfuslaşdırılmışdı və sonra PBS-də 4% paraformaldehid. Braun gecə saatlarında 4% paraformaldehiddə saxlanıldı və ondan sonra 30% sukrozda sitrofil saxlandı. Braunlar 35% sodyum azidlə PBS-də 0.1 μm-də bir kriostat (Leica) üzərində bölünmüşdür. İmmünohistokimya üçün bölmə 3% normal eşşəkli serumda 0.01% Triton-X ilə PBS-də 1 h üçün oda temperaturudakı çalkalayıcıda məhdudlaşdırıldı. Bölmələr daha sonra oda temperaturu boyunca çalkalayıcıda gecə blokunda ilkin antikorlarda inkübat edilmişdir. Aşağıdakılardan istifadə olunan antikorlar: dovşan anti-FosB (1: 2000, kataloq # sc-48, Santa Cruz Biotexnologiya), siçan əleyhinə anti-NeuN (1: 1000, kataloq #MAB377, Millipore), toyuq anti-GFP (1: 5000 , kataloq # 10-20, Aves) və dovşan anti-CREB (cAMP cavab elementi bağlayıcı protein; 1: 1000, kataloq # 06-863, Millipore). Ertəsi gün, seksiyalar PBS-də yuyulurdu: ikincil antikorlarda 1 h inkubasiya: eşşəkabənzər anti-rabbit Cy3, eşşəkabənzər antioksidik Cy5 və eşşək yırtıcı DyLight-488 və ya Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). MCherry və tirosin hidroksilaz immunohistokimyası üçün əvvəllər təsvir edilənLobo et al., 2010; Mazei-Robison və digərləri, 2011). Bölmələr PBS-də yuyulurdu, slaydlara quraşdırıldı və lentə atıldı.

Görüntüləmə və mobil hesablama.

Immunofluoresans bir Zeiss Axioscope ya da Olympus Bx61 konfokal mikroskopunda görüntülendi. Cell counting ImageJ proqramı ilə həyata keçirildi. NAc (nüvə və qabıq) və dorsal striatumdan olan bregma 1.42-1.1 nümunələri 2 və ya 3 beyin bölmələrindən / heyvanlardan götürülmüşdür (bax Əncir 1A). 400 μm × 500 μm şəkillərlə siçan başına beyin bölgəsi sayına görə ümumi 250-250 hüceyrələr sayıldı. Hüceyrələr əvvəlki bir araşdırmaya bənzər ImageJ proqramı ilə sayıldılar (Lobo et al., 2010). Təxminən 400-500 ümumi NeuN hüceyrələri siçan başına beyin bölgəsi sayıldı, sonra GFP sayı+, GFP+: ΔFosB+, GFP-və GFP-: ΔFosB+ hər bölgədə hüceyrələr sayıldı. Məlumatlar aşağıdakı kimi qiymətləndirilmişdir: (GFP+: ΔFosB+ nöronlar × 100%) / (ümumi GFP+ nöronlar) və (GFP-: ΔFosB+ nöronlar × 100%) / (ümumi GFP- nöronlar). Statistik analizlər GraphPad Prism proqramından istifadə edilmişdir. Bonferroni post testlərindən sonra iki tərəfli ANOVA'lar bütün hüceyrə sayma təhlilləri üçün istifadə edildi.

Şəkil 1.  

Xroniki kokain, Striatal bölgələrdə D1-MSN'lərdə ΔFosB'yi seçici şəkildə indükləyir. A, Bregma + 1.42-dan + 1.10-a qədər olan striatal bölmələr hüceyrə sayılması üçün istifadə edilmişdir. A D2-GFP Striatal bölmədə tədqiq olunan üç striatal bölgə nümayiş etdirilir: NAc nüvəsi, ...

Nəticələr

ΔFosB müxtəlif hallarda D1-MSN və D2-MSN-də kokainlə qarşı haloperidol

Öncelikle MSN alt tiplerinde ΔFosB induksiyasını inceledik D1-GFP və D2-GFP əvvəlcədən D1-MSN'lərdə ΔFosB proteinini indükləyən göstərilən kronik kokain şərtlərini istifadə edən siçanlarMoratalla və digərləri, 1996). D1-GFP və D2-GFP D1 və ya D2 reseptor geninin altında inkişaf etmiş yaşıl fluoresan proteini ifadə edən BAC transgenik siçanlar (Əncir 1A), 20 d üçün intraperitoneal kokain (7 mg / kq) və ya salin alındı ​​və beynin sonunca enjeksiyasından (24 h) sonra toplandıƏncir 1B). Sonra neuN, GFP və ya FosB'ye qarşı antikorları istifadə edərək, beyin hissələrində immunohistokimiya və NAc nüvəsi, NAc qabığı və dStrƏncir 1A,C). Anti-FosB antikoru, tam uzunluqlu FosB və ΔFosB kimi tanıyarkən, Western blotting və ya immunohistokimyayı istifadə edərək çoxsaylı araşdırmalar ΔFosB, 24 h çəkilmə zamanı nöqtəsində iştirak edən yeganə təsbit edilən növdür (məsələn, Perrotti və digərləri, 2008). Buna görə biz yalnız ΔFosB aşkarlanmasını təmin etmək üçün bu işdə bütün şərtlərdən sonra beyin toplamaq üçün 24 h və ya daha uzun vaxt nöqtəsini istifadə etdik. Striatal MSN'lerin striatumdakı bütün nöronların% 95% -ni təşkil etdiyindən, GFP-ni müəyyən etmək üçün NeuN immunolabeling istifadə etdik- qarşılıqlı MSN alt tipində zəngin olan nöronlar (yəni, D2-MSN'lərdə D1-GFP Siçanlar və D1-MSN'lərdə D2-GFP siçan). Biz bunu tapdıq D1-GFP kokainlə müalicə olunan siçanlarda GFP-də ΔFosB'nin əhəmiyyətli bir induksiyası göstərilir+/ NeuN+ NAc əsasında, NAc qabığında və dStrdə nöronlar (D1-MSNs), GFP-/ NeuN+ hüceyrələr (D2-MSNs) bütün striatal bölgələrdə ΔFosB'nin əhəmiyyətli indüksiyasını göstərməmişdir (Əncir 1D): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü F(1,12) = 16.41, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü F(1,12) = 12.41, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.001; dStr: narkotik × hüceyrə növü F(1,12) = 12.07, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01. Bu tapıntılara uyğun olaraq, müşahidə etdik D2-GFP fareler, GFP-də ΔFosB'nin əhəmiyyətli indüksiyasındadır+/ NeuN+ nöronlar (D2-MSNs) deyil, GFP-də ΔFosB-nin əhəmiyyətli bir induksiyası-/ NeuN+ (D1-MSN) kokain müalicəsindən sonra bütün striatal bölgələrdəƏncir 1D): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü F(1,12) = 15.76, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.0001; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,12) = 20.33, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; dStr: dərman × hüceyrə növü: F(1,12) = 35.96, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.001. 1, 3 və ya 7 d kokain (20 mq / kq, ip) enjeksiyonlarından sonra MSN-lərdə ΔFosB induksiyasının kinetikasını araşdırdıq. Bütün striatal bölgələrdə salin müalicəsi ilə müqayisədə 1 və ya 3 d kokain müalicəsi ilə D7-MSN-lərdə əhəmiyyətli dərəcədə ΔFosB induksiyası müşahidə etdik (Əncir 1F): dStr-dən nümayəndələrin diapazonu; İki yollu ANOVA, hüceyrə növü × gün F(2,13) = 17.87, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01, p <0.001. Bu, əvvəllər Qərbin ləkələnməsi ilə görülən striatumdakı ΔFosB yığılmasının vaxt gedişi ilə uyğundur (Hope və digərləri, 1994) və ΔFosB-nin yalnız D1-MSN-lərində kokain pozulma prosesinin gedişində selektiv induksiyasını təsdiqləyir.

Daha sonra haloperidolun xroniki pozuntusundan sonra MSN subtiplərində immunohistokimya ilə ΔFosB induksiyasını tədqiq etdik (Əncir 2). Əvvəlki işin dolayı yolla xroniki haloperidolun ΔFosB'yi D2-MSNs-də (Hiroi və Graybiel, 1996; Atkins və al., 1999), baxmayaraq ki, bu, birbaşa yoxlanılmamışdır. D1-GFP və D2-GFP siçanlar içməli suda haloperidol (2 mg / kq), pH 6.0, halbuki D1-GFP və D2-GFP 6.0 d (21 həftə) üçün pH 3, müntəzəm içməli su aldı və beyin gündə 22 (Əncir 2A). Kokain kimi olduğu kimi, bu zaman nöqtəsində striatumdakı bütün FosB kimi immunoreaktivliyin tam uzunluğu FosB deyil, ΔFosB təmsil edirAtkins və al., 1999). Biz bunu tapdıq D1-GFP haloperidol qəbul edən fareler, GFP-də ΔFosB'nin əhəmiyyətli indüksiyasını göstərməmişdir+/ NeuN+ NAc əsasında, NAc qabıqda və ya dStrdə nöronlar (D1-MSNs); Lakin, GFP-də ΔFosB-də əhəmiyyətli bir artım müşahidə edildi-/ NeuN+ bütün striatal bölgələrdə nöronlar (D2-MSN)Əncir 2B,C): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü: F(1,10) = 23.29, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: dərman: dərman × hüceyrə növü: F(1,10) = 30.14, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; dStr: dərman × hüceyrə növü: F(1,10) = 37.63, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.0001. Bu araşdırma ilə təsdiqləndi D2-GFP fareler: GFP-də ΔFosB'nin əhəmiyyətli induksiyasını müşahidə etdik+/ NeuN+ bütün üç striatal bölgədə nöronlar (D2-MSN), lakin GFP-də ΔFosB-də əhəmiyyətli dəyişiklik yoxdur-/ NeuN+ Haloperidol müalicəsindən sonra (D1-MSN)Əncir 2B,C): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü: F(1,12) = 24.30, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.05; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,12) = 26.07, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.001; dStr: dərman × hüceyrə növü: F(1,12) = 21.36, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01. Nəzərə alsaq ki, hər ikisində dəfələrlə kokain ifşası ilə D1-MSN-lərdə oxşar bir ΔFosB induksiyası nümunəsi müşahidə etdik D1-GFP (GFP+/ NeuN+) Və D2-GFP (GFP-/ NeuN+) siçanlar və D2-MSN-də təkrar haloperidol tərəfindən D1-GFP (GFP-/ NeuN+) Və D2-GFP (GFP+/ NeuN+) siçan, qalan təcrübələrimiz istifadə edildi D2-GFP D1-MSN'lərdə ΔFosB induksiyasını araşdırmaq üçün siçanlar (GFP-/ NeuN+) və D2-MSNs (GFP+/ NeuN+) digər xroniki stimullardan sonra.

Şəkil 2.  

Xroniki haloperidol seçici olaraq Striatal bölgələrdə D2-MSN'lərdə ΔFosB'yi tədqiq edir. A, Haloperidol (21 mg / kq, içməli suda) və ya suyun 2 d müalicəsinin vaxt xətti. BNAc qabığının immunohistokimyası D1-GFP və D2-GFP haloperidoldan sonra siçanlar ...

Nəzarət kimi, biz aşkar etdikləri digər transkripsiyaya aid faktorlar ümumiləşdiriləcəyini müəyyən etmək üçün kokain və haloperidol şəraitlərində CREB ifadəsinin səviyyələrini araşdırdıq (Əncir 3). Kontrol və dərmanla müalicə olunan siçanlar arasında CREB ifadəsində heç bir fərq müşahidə edilməmişdir. Bundan əlavə, D2-MSN və D1-MSN arasında CREB səviyyələrində heç bir fərq gözləmədik (Əncir 3B,C).

Şəkil 3.  

Xroniki kokain və ya haloperidol MSN subtiplərində CREB əmələ gətirmir. ACREB və GFP üçün striatumda immunostaining D2-GFP kronik kokain və ya xroniki haloperidoldanƏncir 1 və Və22 dərman müalicəsi üçün əfsanələr). Ölçək barı, 50 μm. ...

MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasını istifadəsi ilə bağlı ayrı-ayrı nümunələri

Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, istismarın digər dərmanları striatal subregionsdə ΔFosB'yi gücləndirə bilərPerrotti və digərləri, 2008), opioatlar, EtOH və ya Δ (9) -THC-ə xroniki məruz qaldıqdan sonra MSN subtiplərində ΔFosB-ni müayinə etdik. Kronik morfin pozuntularının striatal bölgələrdəki xüsusi MSN alt tiplərində ΔFosB-in istifadəsi olub-olmadığını ilk dəfə araşdırdıq. D2-GFP 25 və 1 günlərində bir sümük və ya morfin (3 mq) pelletin iki subkutan implantını qəbul etdi və beyin gündə 5 (Əncir 4A) ΔFosB, lakin FosB deyil,Zachariou et al., 2006). Kokain əksinə fərqli olaraq, MSN subtipləri NAc nüvəsində NAc qabığında ΔFosB-də əhəmiyyətli (və təxminən müqayisə edilə bilən) bir artım nümayiş etdirdi və morfin qrupundakı dStr, sham nəzarətində müqayisədə, heç bir diferensial hüceyrə subfunksiyalı ΔFosB'nin bütün striatal bölgələr (Əncir 4A): iki tərəfli ANOVA; NAc nüvəsi: dərman F(1,14) = 75.01, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); NAc qabığı: dərman F(1,14) = 62.87, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: dərman F(1,14) = 60.11, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Şəkil 4.  

İstifadəsi olan narkotiklər striatal bölgələrdə MSN subtiplərində ΔFosB həvəsləndirir. A, Xroniki morfin müalicəsi (25 və 1 günlərində 3 mg qranullar) D2-GFP siçanlar NAc əsasında, NAc qabığında və MSN dstr-də MSN alt tiplərində ΔFosB'nin əhəmiyyətli indüksiyasına səbəb olur ...

Bundan sonra EtOH-a xroniki ifşa etdikdən sonra MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasının nümunəsini tədqiq etdik. D2-GFP siçanlara 10% EtOH (şüşə A) və su (şüşə B) üçün iki şüşə seçim imtahanı verildi. D2-GFP hər iki şüşə (A və B şüşə), 10 d və beyin üçün gündə 11 (Əncir 4B). 10% EtOH şüşəsini alan siçanlar su ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə daha çox EtOH istehlak edərkən, hər iki şüşə içində su alan siçanlar maye istehlakında heç bir fərq göstərmədilər (Əncir 4B): şüşə A üçün üstünlük su qrupu: 50.00 ± 4.551%, EtOH qrupu: 84.44 ± 8.511%; Tələbələr t test, p <0.05. Xroniki EtOH tətbiqi, D1-MSN-lərdə dəyişiklik olmadan NAc nüvəsi, NAc qabığı və dStr-də D2-MSN-lərdə seçici olaraq ΔFosB induksiyası ilə nəticələndi (Əncir 4B): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü: F(1,14) = 24.58, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.05; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,14) = 36.51, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01; dStr: dərman × hüceyrə növü: F(1,14) = 29.03, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01.

D2-GFP siçanlar 9 d üçün gündə iki dəfə Δ (10) -THC (7 mg / kq, ip) ilə müalicə olundu və beynin sonuncu enjeksiyasından sonra 24 h toplandı. Kokain və EtOH şərtlərinə bənzər olaraq, xroniki Δ (1) -THC qəbul edən siçanların bütün striatal bölgələrində D9-MSN'lərdə seçici olaraq ΔFosB-də əhəmiyyətli bir artım gözlədikƏncir 3E): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü F(1,8) = 26.37, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,8) = 44.49, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.001; dStr: narkotik × hüceyrə növü F(1,8) = 29.30, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01.

Sonradan MSN subpiplərində ΔFosB induksiyasının kokain və ya opiatların tədqiqatçısının idarəsi ilə müşahidə olunan nümunəsi siçanların özünü idarə etdiyi süni paradiqmalarda olub-olmadığını araşdırdıq. Birincisi, D2-GFP 0.5 həftəsində 1 gün üçün FR2 proqramında kainatın (3 mg / kq / infuziya) özünü idarə etmək üçün hazırlanmış siçanlar 24 həftə və beynin son infuziya (XNUMX)Əncir 4D), FosB, lakin FosB deyil,Larson və digərləri, 2010). Siçanlar aktiv və qeyri-aktiv qolu basaraqƏncir 4D; Tələbələr t test, p <0.01). Kokainin gündəlik gündəlik dozası venadan 19.1 mq / kq təşkil etmişdir (Əncir 4D), yuxarıda istifadə edilən 20 mg / kg intraperitoneal dozaƏncir 1). Kontaktsiz kokainin ifşa edilməsi kimi (Əncir 1), biz kokain özünü idarəetmə ΔFosB yalnız bir strainer bölgələrdə D1-MSN ildə əhəmiyyətli bir induksiya səbəb şorin məruzƏncir 4D): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: narkotik × hüceyrə növü F(1,14) = 21.75, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,14) = 26.52, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.01; dStr: narkotik × hüceyrə növü F(1,14) = 33.68, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.001. Eynilə, qeyri-kontinant opiat (morfin) məruz qalmasına bənzər (Əncir 4A), biz tapdıq D2-GFP 30 həftələrində FR1 proqramında 3 gündə özünü idarə edən heroin (infuziya başına 2 μq / kq) olan siçanlar, son narkotik dərhal sonra 24 h müayinə etdi, həm də D2-MSN və D1-MSN-larda əhəmiyyətli ΔFosB induksiyasını bütün striatal bölgələr (Əncir 4E): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: dərman F(1,12) = 68.88, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); NAc qabığı: dərman F(1,12) = 80.08, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: dərman F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Eroin üçün gündəlik gündəlik doza 0.459 mq / kq idi və siçanlar aktiv və passiv qola qarşı basaraq xeyli çox vaxt sərf etdilər (Tələbə t test, p <0.05) (Əncir 4E).

Ətraf mühitin zənginləşdirilməsi və iştahı stimulları D1-MSN və D2-MSN-də ΔFosB

Əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, təbii mükafatlar striatal rayonlarda ΔFosBWerme və ark., 2002; Teegarden və Bale, 2007; Wallace və digərləri, 2008; Solinas və digərləri, 2009; Vialou və digərləri, 2011), D1-MSNs üçün selektiv işlədilən indüksiya ilə (Werme və ark., 2002), digər təbii mükafatların hücresel spesifikliyini nümayiş etdirdiklərini araşdırdıq. Biz ilk olaraq bir uşaq zənginləşdirmə paradiqmasını istifadə etdik D2-GFP 3 həftəlik müddət üçün siçovuldan (4 həftə) zəngin bir mühitdə siçanlar yerləşdirildi (Əncir 5A). Bu yanaşma əvvəldən ΔFosB siçan NAc və dStr (Solinas və digərləri, 2009; Lehmann və Herkenham, 2011). Normal yaşayış şərtləri ilə müqayisədə, zənginləşdirilmiş mühit bütün striatal bölgələrdə ΔFosB-ni əhəmiyyətli dərəcədə artırdı, lakin D1-MSN və D2-MSN-lərdə (Əncir 5A): İki yönlü ANOVA, NAc nüvəsi: mühit F(1,12) = 89.13, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc qabığı: mühit F(1,12) = 80.50, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: mühit F(1,12) = 56.42, p <0.01, Bonferroni sonrası test: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Şəkil 5.  

Ətraf mühitin zənginləşdirilməsi və iştahı stimulları həm MSN subtiplərində ΔFosB həvəsləndirir. A, D2-GFP 21 həftələrində P4-dən başlayan zəngin bir mühitdə yerləşdirilən siçanlar, bütün striatal boyunca MSN subtipərlərində ΔFosB indüksiyasını nümayiş etdirir ...

Xroniki qidalandırıcı stimulundan sonra MSN subtiplərində ΔFosB ifadəsini araşdırdıq. Əvvəllər siçovul NAc-da ΔFosB'yi inandırmaq üçün nümayiş etdirilən kronik sukrozlu içmənin təsirlərini test etdikWallace və digərləri, 2008). D2-GFP siçanlara 10% sukroz (şüşə A) və su (şüşə B) üçün iki şüşə seçim testi verildi. D2-GFP 10 d və beyinlər üçün hər iki şüşə (şüşə A və B) içərisində alınan nəzarət günləri 11 (Əncir 5B). 10% sukroz qəbul edən siçanlar daha çox sükroz istehlak edirdi, ikisi də şüşə içərisində su alan siçanlar maye istehlakında heç bir fərq göstərmədilər (Əncir 5B): A şüşə üçün üstünlük, su: 50.00 ± 4.749%, saxaroza: 89.66 ± 4.473%; Tələbələr t test, p <0.001. Kronik saxaroza istehlakının NAc nüvəsi, NAc qabığı və dStr-də ΔFosB-yə səbəb olduğunu və bunun hər iki MSN alt tipində (Əncir 5B): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: müalicə F(1,12) = 76.15 p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc qabığı: müalicə F(1,12) = 63.35, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: müalicə F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Nəhayət, kaloriya məhdudiyyətindən sonra MSN alt tiplərində ΔFosB ifadəsini araşdırdıq, çünki lokomotor fəaliyyəti və motivasion dövləti artıran bu vəziyyət daha əvvəl siçan NAc (ΔFosB səviyyələrini artırmaq üçün göstərilmişdir)Vialou və digərləri, 2011). D2-GFP siçanlar bir kaloriya ilə məhdudlaşdıran protokoldan keçdilər və 60% -ni aldılar ad libitum gündə 10 d və beyin üçün gündəlik kalori gündəlik 11 (Əncir 5C). Kaloriyi məhdudlaşdırmaq əvvəlcədən göstərildiyi kimi NAc nüvəsi və NAc qabığında ΔFosB səviyyəsini artırdı (Vialou və digərləri, 2011) və dStr-də ΔFosB səviyyələrini artırdı. Lakin, D1-MSN və D2-MSNs-ə qarşı fərqli induksiya müşahidə edilməmişdir (Əncir 5C): İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: müalicə F(1,12) = 67.94 p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc qabığı: müalicə F(1,12) = 67.84, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: müalicə F(1,12) = 82.70, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Xroniki sosial məğlub stress və antidepresan müalicə MSN subtiplərində ΔFosB'nin diferensial induksiyasına səbəb olur

Əvvəllər göstərdik ki, ΔFosB xroniki sosial məğlubiyyət stressindən sonra siçanlarda NAc səviyyəsində artır (Vialou və digərləri, 2010). Bu induksiya həm həssas siçanlarda (stressin zərərli nümunələri göstərən), həm də möhkəm olan siçanlarda (bu zərərli təsirlərin əksəriyyətindən qaçanlar) müşahidə olmasına baxmayaraq, ΔFosB induksiyası möhkəm alt qrupda daha çox idi və birbaşa göstərildi bir möhkəmlik vəziyyətinə vasitəçilik etmək. Bu işdə, bu iki fenotipik qrupda ΔFosB induksiyası üçün təəccüblü hücresel spesifiklik tapdıq. D2-GFP siçanlar 10 d sosial məğlubiyyət stressinə məruz qalmış və sosial qarşılıqlı təsir tədbirlərinə əsaslanan həssas və möhkəm əhaliyə ayrılmışlar (Əncir 6A), digər davranış semptomları ilə yüksək əlaqə saxlayanKrishnan et al., 2007). İctimai məğlubiyyət stressindən sonra həssas davranışları inkişaf edən siçanlar, D2-MSN-də D1-MSN-də ΔFosB-nin əhəmiyyətli bir induksiyasını nümayiş etdirdi və D1-MSN'lərdə heç bir induksiya göstərmədən nəzarət və səth siçanlarla müqayisədə dStr idi. Ziddiyyətli kontrastda, D2-MSN-lərdə DXNUMX-MSN-lərdə heç bir induksiya göstərilmədən, möhkəm və nəzarət siçanlarla müqayisədə, bütün striatal bölgələrdəki möhkəm siçanlar DXNUMX-MSN-də əhəmiyyətli ΔFosB indüksiyasını nümayiş etdirdiƏncir 6A; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: qrup x hüceyrə növü F(1,20) = 20.11, p <0.05, Bonferroni sonrası test: D2-MSN / həssasdır p <0.05, D1-MSN / davamlıdır p <0.05; NAc qabığı: qrup × hüceyrə növü F(1,20) = 27.79, p <0.01, Bonferroni sonrası test: D2-MSN / həssasdır p <0.001, D1-MSN / davamlıdır p <0.01; dStr: qrup × hüceyrə növü F(1,20) = 19.76, p <0.01, Bonferroni sonrası test: D2-MSN / həssasdır p <0.05, D1-MSN / davamlıdır p <0.01).

Şəkil 6.  

Xroniki sosial məğlubiyyət stressi və kronik fluoksetin, Striatumdakı fərqli MSN alt tiplərində ΔFosB induksiyasına səbəb olur. A, D2-GFP 10 d sosial məğlubiyyət stress nümayişinə həssas olan D2-MSN'lərdə bütün striatallarda ΔFosB induksiyası ...

SSRI antidepresan, fluoksetinlə xroniki müalicə, xroniki sosial məğlubiyyət stressindən sonra həssas siçanların sergilediği depressiya kimi davranışlarını əks etdirir (Berton və digərləri, 2006). Bundan əlavə, bu cür müalicə həssas NAc-də nəzarət siçanlarında ΔFosB əmələ gətirir və fluoksetinin faydalı davranış təsiri üçün belə induksiyanın tələb olunduğunu göstərdik (Vialou və digərləri, 2010). Xroniki fluoksetin administrasiyasından sonra ΔFosB indüksiyasındakı hüceyrə spesifikliyini araşdırdıq. D2-GFP 20 d üçün fluoksetin (14 mg / kq, ip) alındı ​​və beyin gündə 15 (Əncir 6B). D1-MSN'lərdə ΔFosB'nin əhəmiyyətli bir induksiyasını müşahidə etdik, lakin D2-MSN-lərdə, fluoksetinlə işlənmiş siçanlarda vasitə nəzarətlərinəƏncir 6B; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: dərman hüceyrə növü F(1,10) = 14.59, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: narkotik × hüceyrə növü: F(1,10) = 26.14, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; dStr: narkotik × hüceyrə növü F(1,10) = 8.19, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.001).

NAc afferent beyin bölgələrində in vivo optogenetik manipulyasiya striatal bölgələrdə və MSN alt tiplərində ΔFosB induksiyasının fərqli nümunələrinə səbəb olur

NAc-yə dopaminergik və glutamateriq efferent girişlərin nəzərə alınması nəzərə alınaraq, depressiya kimi davranışları axtaran və dəyişən mükafatıTsai et al., 2009; Covington və digərləri, 2010; Adamantidis et al., 2011; Witten et al., 2011; Britt və s., 2012; Lammel və digərləri, 2012; Stuber və al., 2012; Chaudhury və digərləri, 2013; Kumar və al., 2013; Tye və digərləri, 2013), bir neçə əsas afferent beyin bölgəsinin fəaliyyətini manipulyasiya etdikdən sonra, Striatal MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasını tədqiq etdik. Biz bir neçə bölgənin hər birində viral olaraq ChR2 ifadə etdik və daha əvvəl təsvir etdiyimiz kimi onları mavi işıq (473 nm) ilə aktivləşdirdik.Gradinaru et al., 2010; Yizhar et al., 2011). Son tədqiqatlar göstərir ki, VTA-da ChR2-in hüceyrə-selektiv ifrazından sonra mavi işıq ilə fasik stimullaşdırma VTA dopamin nöronlarının seçici CHR2 fasik stimullaşdırılması ilə eyni davranış fenotipinə gətirib çıxardıChaudhury və digərləri, 2013), VRA-da AAV-hsyn-ChR2-EYFP istifadə edərək ChR2-ni ifadə etdik D2-GFP siçan; nəzarət siçanlarına AAV-hsyn-EYFP ilə enjekte edilmişdir. VTA bölmələri tirozin hidroksilaz və GFP ilə birlikdə ChR2-EYFP ifadəiniƏncir 7C). D2-GFP VTA'da tək başına CHR2-EFYP və ya EYFP ifadə edən siçanlar 5 d-dən əvvəl təsvir edilən VTA-nın 10 min mavi yüngül faza stimullaşdırılması qəbul etmişdirKoo və ark., 2012; Chaudhury və digərləri, 2013) (Əncir 7A) və beyinlərin son stimulundan sonra 24 h toplandı. 2 d stimulyasiyasından sonra VRa dopamin nöronlarını aktivləşdirmək üçün ChR5-in qabiliyyətinin desensitizasiyası yox idi (Əncir 7B). Biz ChR2-EYFP'yi ifadə edən VTA nöronlarının təkrarlanan fasik stimullaşdırılması NAc əsasında həm MSN subtiplərində ΔFosB, həm də NAc kabuğunda D1-MSN'lərdə (Əncir 7C; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: optogenetik stimul F(1,16) = 51.97, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.001; (hər ikisi MSN alt növü) NAc qabığı: optogenetik stimul × hüceyrə növü: F(1,16) = 13.82, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01). EYFP nəzarətləri ilə müqayisədə VTA-nı ifadə edən ChR2-EYFP-ə mavi işıq fazik stimullaşdırmadan sonra dStr-də ΔFosB induksiyasını müşahidə etmədik. Optik stimulyasiya üçün VTA dopamin nöronlarını seçici olaraq hədəf seçmədiyimiz üçün bu nəticələr ehtiyatla şərh edilməlidir və son tədqiqatlar VTA-da nondopaminerjik proyeksiya nöronlarını və VTA-nın əhəmiyyətli dərəcədə heterojenliyini nümayiş etdirdi, bu da atəşdən asılı olaraq fərqli davranış reaksiyalarına səbəb ola bilər. təsirlənmiş neyronların parametrləri və alt populyasiyaları (Tsai et al., 2009; Lammel və digərləri, 2011, 2012; Witten et al., 2011; Kim və digərləri, 2012, 2013; Tan və digərləri, 2012; Van Zessen və digərləri, 2012; Stamatakis və Stuber, 2012; Chaudhury və digərləri, 2013; Tye və digərləri, 2013).

Şəkil 7.  

NAc'yi innerve eden beyin bölgelerinin optogenetik aktivasyonu, MSN alt tiplerinde ve striatal bölgelerde ΔFosB indüksiyonunun farklı desenlerine neden olur. A, Bütün şərtlər üçün optogenetik stimullaşdırma paradiqması. Braun 24 d optogenetikdən sonra 5 h yığdı ...

Bundan sonra, CHR2-mCherry ifadəsini ifadə etmək üçün AAV-CaMKII-ChR2-mCherry və AAV-CaMKII-mCherry vektorlarından istifadə etmişik, ya da mCherry'yi tək nəzarət olaraq, mPFC, amigdala və ya vHippo D2-GFP siçan (Əncir 7D-F). CaMKII-ChR2 virusunun vasitəçiliyi ilə CHR2 və mCherry ifadəsi əvvəlcədən, glutamateriqik nöronları (Gradinaru et al., 2009; Warden və digərləri, 2012). 2 d üçün 20 Hz mavi işıq üçün bu bölgələrdə ChR10 ifadə edən hüceyrələri aktivləşdirdik və 5 d üçün gündə bir dəfə xNUMX h toplandı və son stimullaşdırma (Əncir 7A). Bu stimullaşdırma nümunəsi əsasən müşahidə olunan ikiqat spiking səbəbiylə ~ 27-33 Hz atəş etdi. 2 d stimullaşdırılması ilə birlikdə ChR5-in aşkar bir desensitizasiyası meydana gəlmədi; Ancaq 1-dan 5 d (32-33 Hz) stimullaşdırılması üçün atəşdə bir qədər artım müşahidə olundu. Biz mPFC nöronlarının optogenetik aktivliyini NAc nüvəsində D1-MSN'lərdə ΔFosB induksiyasına gətirib çıxardıq, ΔFosB induksiyası NAc qabığında hər iki MSN alt tipində meydana gəldi (Əncir 7D; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: optogenetik stimulator × hüceyrə növü F(1,14) = 10.31, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: optogenetik stimullar F(1,14) = 57.17, p <0.001, Bonferroni sonrası test: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). MPFC aktivasiyasından sonra dStr-də ΔFosB səviyyələrində dəyişiklik müşahidə edilmədi. Əksinə, amigdala nöronlarının optogenetik aktivasiyası, NAc nüvəsindəki hər iki MSN alt tipində və seçici olaraq NAc qabığındakı D1-MSN-lərdə ΔFosB əmələ gətirdi, heç bir dəyişiklik baş vermədən dStr (Əncir 7E; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: optogenetik stimul F(1,10) = 78.92, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc qabığı: optogenetik stimul × hüceyrə növü: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, Bonferroni sonrası test: p <0.0001). Nəhayət, vHippo nöronlarının optogenetik aktivasiyası, həm NAc nüvəsində, həm də NAc qabığında yalnız D1-MSN-lərdə əhəmiyyətli dərəcədə ΔFosB induksiyasına səbəb oldu, yenə də dStr-də heç bir dəyişiklik müşahidə olunmadı (Əncir 7F; İki yollu ANOVA, NAc nüvəsi: optogenetik stimulator × hüceyrə növü F(1,10) = 18.30, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01; NAc qabığı: optogenetik stimul × hüceyrə növü: F(1,10) = 22.69, p <0.05, Bonferroni sonrası test: p <0.01).

Müzakirə

Bu iş bir neçə kronik stimulundan sonra striatal bölgələrdə D1-MSN və D2-MSN-lərdə ΔFosB induksiyasınıCədvəl 1). İlk olaraq istifadə etmək mümkünlüyünü müəyyənləşdiririk D1-GFP və D2-GFP Xroniki kokain və D1-MSN'lərdə xroniki haloperidoldan sonra D2-MSN'lərdə selektiv ΔFosB induksiyasını nümayiş etdirəcək. Kokain tapıntıları əvvəlki işlər ilə uyğun gəlir (Moratalla və digərləri, 1996; Lee və digərləri, 2006) və D1-MSN-də ΔFosB üçün kokain mükafatını təşviq etməkdə müəyyən rolu (Kelz və digərləri, 1999; Colby və digərləri, 2003; Grueter et al., 2013). Daha əvvəl tədqiqatçı və özünü idarə edən kokain ΔFosB'yi NAc (Winstanley et al., 2007; Perrotti və digərləri, 2008) və ən əhəmiyyətlisi buradakı hər üç striatal bölgədə D1-MSN'lərdə seçilmiş ΔFosB'yi hər iki kokain modulunun gətirdiklərini göstəririk. Bizim tapıntılar əvvəlki tədqiqatlarla uyğundur ki, aktiv kokain digər dərhal erkən genləri və bir neçə intraselluler siqnal zülallarının fosforilyasiyasını yalnız D1-MSN'lərdə (Bateup və ark., 2008; Bertran-Gonzalez və digərləri, 2008). Eyni şəkildə, xroniki haloperidoldan sonra ΔFosB indüksiyonunun əks tərzi D2 kimi reseptor agonistləri tərəfindən bu induksiyanın blokadasınaAtkins və al., 1999) və kəskin haloperidolun dərhal erkən genlərin selektiv induksiyası və D2-MSN-lərdə bir neçə siqnal zülalının fosforillənməsi ilə (Bateup və ark., 2008; Bertran-Gonzalez və digərləri, 2008).

Cədvəl 1.  

Kronik farmakoloji, emosional və optogenetik xəbərdarlıqlardan sonra striatal MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasıa

Kokain kimi olduğu kimi, iki sui-istifadə etiketi, EtOH və Δ (9) -THC-nin xroniki məruz qaldığı, bütün striatal bölgələrdəki D1-MSN-lərdə ΔFosB-ni seçicidir. Biz əvvəllər etox NAc əsasında, NAc qabığında və dStrdə ΔFosB'yi indükləyirdik, lakin Δ (9) -THC digər bölgələrdə göründüyü bir tendensiya ilə NAc nüvəsində ΔFosB'yi əhəmiyyətli dərəcədə yüksəltdiPerrotti və digərləri, 2008). Eyni şəkildə burada D9-MSNs-də NAc əsasında ΔFosB ən böyük Δ (1) -THC indüksiyası müşahidə olunur; digər striatal bölgələrdə induksiyanı nümayiş etdirmək bacarığı, ehtimal olunan istifadə edilən hüceyrə-spesifik analizlə bağlıdır. Maraqlıdır ki, kronik morfin və eroin özünü idarə etmə, digər sui-istifadələrdən fərqli olaraq, MSN subtiplərində ΔFosB-ni bütün striatal bölgələrə nisbətən müqayisə dərəcəsinə gətirdi. Son tədqiqat göstərir ki, kəskin morfin D1-MSN-də c-Fos əmələ gətirir, kronik morfindən sonra nalokson-çöküntülənmə çıxarılması isə D2-MSN-də c-Fos'uEnoksson və digərləri, 2012). Çalışmamızda opiate çekilmesinin əlamətlərini müşahidə etməmiş olsaq da, tədqiq edilən zaman nöqtəsində morfin və ya eroin idarəsi ilə daha zərif çıxarılması burada görülən D2-MSN'lərdə ΔFosB induksiyası üçün məsuliyyət daşıyır. Daha əvvəl D1-MSN'lərdə ΔFosB, lakin D2-MSNs deyil, morfin (Zachariou et al., 2006). İndi D2-MSN-də ΔFosB induksiyası opiatın çəkilməsinin gözlənilməz təsirlərinə kömək olma ehtimalını test etmək maraqlı olardı. Eyni şəkildə, dərmanların çəkilməsinin potensial töhfəsi və bütün preparatlarla görülən ΔFosB induksiyasına ehtiram tədqiq olunmalıdır.

Əvvəlki araşdırmalar göstərir ki, inkişaf zamanı ekoloji zənginləşdirmə NAc və dStr (ΔFosB)Solinas və digərləri, 2009; Lehmann və Herkenham, 2011). Bizim məlumatlar bu yığımın bütün striatal bölgələrdə D1-MSN və D2-MSN-larda bərabər şəkildə olduğunu göstərir. Zənginləşdirmə paradiqması daha əvvəl kokainə təltif və lokomotor reaksiya verməkdənSolinas və digərləri, 2009); lakin bu davranış fenotipi, ehtimal ki, D1-MSN-də ΔFosB induksiyası yalnız D2-MSN-də belə induksiya heç bir aydınlaşdırıcı təsirə malik deyil,Kelz və digərləri, 1999; Colby və digərləri, 2003; Grueter et al., 2013). Xroniki sukrozun istehlakı əvvəlcədən NAc-da ΔFosB'yi artırmaq üçün göstərilmişdir və ya D1-MSN'lərdə ya da hər iki subtipte, ΔFosB-nin aşırı ekspresyonu, NAc-da sukroz istehlakını artırırOlausson et al., 2006; Wallace və digərləri, 2008). Burada sucrose içdikdən sonra NAc və dStr-də MSN alt tiplərində müqayisə edilən ΔFosB induksiyasını müşahidə etdik. Nəhayət, əvvəllər NAc-da ΔFosB induksiyasının yüksək yağ qidası və enerji istehlakının azaldılması üçün gücləndirilmiş motivasiya vasitəsi ilə kaloriya məhdudlaşdırmasına müəyyən adaptiv cavab verdiyini göstərdik.Vialou və digərləri, 2011). Ümumiyyətlə, bu nəticələr göstərir ki, NAc və dStr-də ΔFosB yığımı bir neçə təbii mükafata cavab olaraq həm D1-MSN və D2-MSN-də olur. D1-MSN'lərdə ΔFosB, D1-MSN-lərdə ΔFosB-nin aşırı ekspresyonu D2-Werme və ark., 2002). Bununla birlikdə təkər koşusu fərqli motor yollarını aktivləşdirə bilər, bu da onun ΔFosB induksiyasından fərqli olaraq məsuliyyət daşıyır. Hər halda, digər təbii mükafatlarla nəticələr kokain, EtOH və Δ (9) -THC kimi daha güclü dərman mükafatlarına nisbətən striatumda fərqli şəkildə nəzarət etdiklərini göstərir. Bu təbii mükafat şərtləri daxilində hər iki MSN alt tipində ΔFosB induksiyası, bir qida mükafatına görə fəaliyyət təşəbbüsünün həm MSN subtiplərini (Cui və digərləri, 2013).

Xroniki sosial məğlubiyyət stress stresses və möhkəm siçanların NAc qabığında ΔFosB, lakin NAc nüvəsində yalnız möhkəm siçanlarda (Vialou və digərləri, 2010). Bundan əlavə, D1-MSN-də ΔFosB overspresyonu xroniki sosial məğlubiyyət stressindən sonra möhkəmliyə kömək edir. Fluoxetine ilə xroniki müalicə də stress sadəlövh siçanlarda NAc-də və sindromlu xroniki sosial məğlubiyyət stressindən sonra həssas siçanlarda ΔFosB yığılmasına gətirib çıxarır və ΔFosB aşırı təzyiqi son şəraitdə antidepressant kimi davranışlara cavab vermək üçün göstərilmişdir (Vialou və digərləri, 2010). Nəhayət, əvvəlki bir tədqiqat xroniki məhdudlaşdırma stressindən sonra həm MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasını nümayiş etdirdi (Perrotti və digərləri, 2004). D1-MSN'lərdə möhkəm və fluoksetinlə işlənmiş siçanlardakı D2-MSN-lərdə selektiv şəkildə göstərilən, lakin selektiv səthlərdə olan D1-MSN-lərdə selektiv şəkildə göstərilən ΔFosB induksiyasını göstərdiyimiz bu işin nəticəsi bu əvvəlki tapıntıları nəzərə alaraq və D2- MSN, DXNUMX-MSN'lərdə ΔFosB həssaslığa vasitəçilik edə bilər, amma MSNlər möhkəmlik və antidepresan hərəkətlərə vasitəçilik edirlər. Bu hipotezi sınamaq üçün daha çox işə ehtiyac var.

Optogenetics istifadə edərək son iş dopaminergik və glutamateriqik afferentlərin NAc-ə mükafat və stress reaksiyalarının modullaşdırılmasında potensial rolu olduğunu göstərir (Nəticələrə baxın). D1-MSN və D2-MSN-də ΔFosB induksiyasını NAc afferent bölgələrindən təkrar aktivləşdirildikdən sonra araşdırmaq üçün bu optogenetik vasitələrdən istifadə edirik. VTA nöronların fasik stimullaşdırılması və ya amygdala əsasən glutamateriqik nöronların aktivləşdirilməsi NAc kabuğunda D1-MSN-də ΔFosB və NAc nüvəsində hər iki MSN alt tipində induksiya tapdı. Əksinə, mPFC nöronların aktivasiyası, NAc qabığında D1-MSN-də artmış səviyyədə, lakin NAc kabuğunda hər iki MSN alt tipində induksiya ilə ΔFosB induksiyasının tərs nümunəsidir. Nəhayət, vHippo nöronların optogenetik aktivasiyası ΔFosB yığılmasına yalnız NAc nüvəsində və kabuğunda D1-MSNsdə səbəb olur. VHipponun tapıntıları D2-MSN-lərlə müqayisədə D1-MSN-ə hipokampal girişlərin çox zəif olduğunu göstərən son tədqiqatlarla uyğun gəlir (MacAskill və digərləri, 2012) və bu məlumatlar kokainlə əlaqəli lokomozanı (Britt və s., 2012). Bundan başqa, D1-MSN-də bütün girişlərlə əsasən D1-MSN-də ΔFosB induksiyasını nümayiş etdirmək DXNUMX-MSN-də ΔFosB-nin sui-istifadəyə qarşı verdikləri cavabları artıran və VTA dopamin nöronlarının və ya mPFC-nin optogenetik stimullaşdırılması, amigdala və ya NAc-də vHippo terminalları mükafatlandırmaq (Kelz və digərləri, 1999; Zachariou et al., 2006; Tsai et al., 2009; Witten et al., 2011; Britt və s., 2012; Grueter et al., 2013).

Nəhayət, müsbət və ya mənfi stimullarla fərqli şəkildə aktivləşdirilən bu iki MSN alt tipində seçmə nöronal ansambllar var. Bu, D2-MSN-də müəyyən ödüllendirme şəraitində (opiates və təbii mükafatlar), habelə çirkin (sosial məğlubiyyət) şəraitdə ΔFosB induksiyasını müşahidə edə bilər. Striatum həm MSN, həm də dorsal və ventral striatumda patch və matrix bölmələr daxil olmaqla MSN subtipərlərinin çox heterogenGerfen, 1992; Watabe-Uchida və digərləri, 2012). Əlavə, əvvəlki tədqiqatlar psixotimulantlar tərəfindən striatal nöronal ansamblların çox kiçik bir hissəsinin aktivləşdirilməsini göstərir və FosB bu aktivləşdirilmiş nöronlarda gen (Guez-Barber və digərləri, 2011; Liu və digərləri, 2013), bu aktivləşdirilmiş nöronların D1-MSN və ya D2-MSNs olub-olmaması məlum deyil. Tərəzi və təhrikedici davranışlara vasitəçilik etməkdə əsasən qarşılıqlı olaraq ΔFosB funksiyası eyni zamanda məlum deyildir. D1-MSN-də ΔFosB oversekspresiyası həm yadroda, həm də qabıqda səssiz sinapslar artırdı, lakin D2-MSN-də ifadə yalnız sümüyündəki səssiz sinapsları azaldıbGrueter et al., 2013). Bundan əlavə, nüvəyə qarşı olan ΔFosB induksiyası, ehtimal ki, kabukda ΔFosB'nin kokainlə əlaqəli CaMKIIα stabilizasiyasını aşkar edərkən, lakin qabaqda daha çox ΔFosB yığılmasına gətirib çıxaran əsas deyil,Robison və digərləri, 2013). Nümunəvi mərmər, aktiv nöronal ansambllar və ya patch və matrix bölmələrə qarşı MSN subtiplərini seçici hədəfləyən gələcək tədqiqatlar bu heterojen bölgələrdə ΔFosB-nin davranış rolunu müəyyənləşdirməyə kömək edəcəkdir.

Ümumiyyətlə, NAc-da ΔFosB'nin bu dövrə bağlı vasitə tipli selektiv induksiya nümunələri, stimullaşdırıcı və stresli stimulların fərqli olaraq bu stimulların xüsusiyyətlərini kodlaşdırmaq üçün müxtəlif NAc afferentsləri ilə məşğul olduğunu göstərir. Bizim nəticələr yalnız kronik stimullar tərəfindən striatal MSN subtiplərində ΔFosB induksiyasına dair hərtərəfli fikir verməklə yanaşı, NAc funksiyasını təsir etməkdə xüsusi neyron dövrlərin uzunmüddətli təsirlərini anlamaq üçün molekulyar marker kimi ΔFosB istifadə edilməsində faydalılığı da göstərir.

Dəyişikliklər

Müəlliflər rəqib maliyyə maraqlarını bəyan etməyiblər.

References

  1. Adamantidis AR, Tsai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber GD, Budygin EA, Touriño C, Bonci A, Deisseroth K, de Lecea L. Ödüllendirme davranışının çox fazalarının dopaminerjik modülasyonunun optogenetik sorgulaması. J Neurosci. 2011; 31: 10829-10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  2. Albin RL, Young AB, Penney JB. Bazal qanqlalı xəstəliklərin funksional anatomiyası. Trends Neurosci. 1989; 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Çaprazlıq]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Hiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Tipik və atipik antipsikotik dərmanların təkrar tətbiqi ilə δFosB-nin bölgəyə xas induksiyası. Sinaps. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Çaprazlıq]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. DARPP-32 fosforilasyonunun hüceyrə tipinə xüsusi tənzimlənməsi, psixostimulyant və antipsikotik preparatlar tərəfindən. Nat Neurosci. 2008; 11: 932-939. doi: 10.1038 / nn.2153. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Mezolimbik dopamin yolunda BDNF-nin əsas məğlubiyyət stressində rolu. Elm. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Çaprazlıq]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Kokain və haloperidolə cavab olaraq dopamin D1 və D2 reseptorlarını ifadə edən striatal neyronlarda siqnal aktivləşdirmə nümunələrinə qarşı. J Neurosci. 2008; 28: 5671-5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Çaprazlıq]
  7. Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Sinaptik və çoxlu glutamaterjik girişlərin nüvəli akumbenslərə davranış profili. Neuron. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  8. Çan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard P, Surmeier DJ. Drd2-eGFP BAC transgenik siçanlarda striatal fenotipin sintetik spesifik tənzimlənməsi. J Neurosci. 2012; 32: 9124-9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  9. Mözon E, Lobo MK, L. Moyon E, L. Mobson, M.M., Moyon E, Lobo MK, M.D., Neve RL, Friedman JM, Russo SJ, Deisseroth K, et al. Midbrain dopamin nöronlarının nəzarəti ilə depressiya ilə əlaqəli davranışların sürətli tənzimlənməsi. Təbiət. 2013; 493: 532-536. doi: 10.1038 / nature11713. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB kokain üçün təşviq artırır. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Medial prefrontal korteksin optogenetik stimullaşdırılması antidepressant təsiri. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Hərəkətin başlanması zamanı striatal birbaşa və dolayı yolların bərabər aktivləşdirilməsi. Təbiət. 2013; 494: 238-242. doi: 10.1038 / nature11846. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonzalez J, Christie MJ. D2- və D1-reseptorlarının orta spiny nöronları ifadə edən nüvəli accumbenslər, müvafiq olaraq, morfin çıxarılması və kəskin morfin ilə seçicilər tərəfindən aktivləşdirilir. Neurofarmakologiya. 2012; 62: 2463-2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Çaprazlıq]
  14. Gerfen CR. Neostriatal mozaika: bazal gangliiyada çoxsaylı bölmə təşkilatı. Annu Rev Neurosci. 1992; 15: 285-320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Çaprazlıq]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Striatal mikrosirküri və hərəkət bozukluğu. Trends Neurosci. 2012; 35: 557-564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  16. Gong S, Zheng C, Doughty ML, Losos K, Didkovsky N, Schambra UB, Novak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N. Bakterial süni xromosomlara əsaslanan mərkəzi sinir sisteminin gen ifadəsi. Təbiət. 2003; 425: 917-925. doi: 10.1038 / nature02033. [PubMed] [Çaprazlıq]
  17. Gradinaru V, Mogri M, Thompson KR, Henderson JM, Deisseroth K. Parkinson neyron dövrəsinin optik dekonstruksiyası. Elm. 2009; 324: 354-359. doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [Çaprazlıq]
  18. Gradinaru V, Zhang F, Ramakrishnan C, Mattis J, Prakash R, Diester I, Goshen I, Thompson KR, Deisseroth K. Optogenetiklərin diversifikasiyası və genişləndirilməsi üçün molekulyar və hücresel yanaşmalar. Cell. 2010; 141: 154-165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Çaprazlıq]
  19. Graybiel AM. Bazal qanqliyalar. Curr Biol. 2000; 10: R509-R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Çaprazlıq]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Ətraf mühitin zənginləşməsi nüvəli accumbensdə aşağı siklik adenozin monofosfat reaksiyası elementinin bağlanması (CRE) fəaliyyəti ilə vasitəçilik edən bir davranış fenotipini yaradır. Biol Psixiatriya. 2010; 67: 28-35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB, nüvə adapterlərinin birbaşa və indirekt yolak funksiyasını fərqli olaraq modullaşdırır. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2013; 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS seçmə şəkildə aktivləşdirilmiş yetkin striatal neyronlarda kokainlə əlaqəli gen tənzimlənməsini müəyyənləşdirir. J Neurosci. 2011; 31: 4251-4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  23. Cenk hüceyrə növlərinin molekulyar xarakteristikası üçün translational profilaktik yanaşma Heiman M, Schaefer A, Gong S, Peterson JD, Day M, Ramsey KE, Suarez-Farinas M, Schwarz C, Stephan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. . Cell. 2008; 135: 738-748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Atipik və tipik nöroleptik müalicələr striatumda fərqli transkripsiya faktoru ifadə proqramlarını vadar edir. J Comp Neurol. 1996; 374: 70-83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Çaprazlıq]
  25. Hiroi N, Brown JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB mutant siçanları: Fos ilə əlaqəli zülalların xroniki kokain induksiyasının itirilməsi və kokainin psixomotor və faydalı təsirlərinə qarşı həssaslığın artması. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94: 10397–10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  26. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Xroniki kokain və digər xroniki müalicələrlə beyində dəyişmiş fos kimi zülallardan ibarət uzunmüddətli AP-1 kompleksinin indeksasiyası. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Çaprazlıq]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick MA. GABA və enkefalin proqnozu, nüvəli akumbens və ventral pallidumdan ventral tegmental sahəyə qədər. Neuroscience. 1993; 57: 1047-1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Çaprazlıq]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, Fan W, Gənc AJ, Guy MD. Opiate həssaslaşdırma prefrontal kortikal, striatal və amigdala beyin bölgələrində FosB / ΔFosB ifadə edir. PLoS One. 2011; 6: e23574. doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Transkripsiya faktoru olan ΔFosB beynində kokain həssaslığını nəzarət edir. Təbiət. 1999; 401: 272-276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Çaprazlıq]
  30. Kim KM, Baratta MV, Yang A, Lee D, Boyden ES, Fiorillo CD. Dopamin nöronların təbii mükafatla müvəqqəti aktivləşdirilməsinin optogenetik taklitməsi operativ gücləndirilməsi üçün kifayətdir. PLoS One. 2012; 7: e33612. doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Song J, Song YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, Song IS, Shin G, Al-Hasani R, Kim S, Tan MP, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA və digərləri. Kabel optogenetika tətbiqləri ilə enjektiv, hücresel miqyaslı optoelektronika. Elm. 2013; 340: 211-216. doi: 10.1126 / science.1232437. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF morfin hərəkətinin mənfi modulatorudur. Elm. 2012; 338: 124-128. doi: 10.1126 / science.1222265. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  33. Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS, et al. Beyin mükafat bölgələrində ictimai məğlubiyyətə və həssaslığa əsaslanan molekulyar adaptasiyalar. Cell. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Çaprazlıq]
  34. Qumar S, Qara SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Affektiv şəbəkələrin kortikal nəzarət. J Neurosci. 2013; 33: 1116-1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Dopamin nöron sinapslarının proksionaya xüsusi modulyasiyası, təcavüzkar və mükafatlandırıcı stimullarla. Neuron. 2011; 70: 855-862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Ventral tegmental sahədə mükafat və nifrətə girişə xüsusi nəzarət. Təbiət. 2012; 491: 212-217. doi: 10.1038 / nature11527. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edwards S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Kokain özünü idarə etmə və çəkilmə zamanı ΔFosB, FosB və cFos-nun striatal tənzimlənməsi. J Neurochem. 2010; 115: 112-122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  38. D1 və D2 dopamin retseptorları içərisində nüvə akumbensində orta kəllə neyronları olan kokain-dendritik orqanik formasiyanın meydana gəlməsi ilə Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2006; 103: 3399-3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Ətraf mühitin zənginləşməsi bir infralimbik korteksə bağlı neuroanatomik yolla sosial məğlubiyyətə stress təzyiqini təmin edir. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Şaham Y, Hope BT. Metamfetamin-aktivləşdirilmiş Fos-ifadə nöronların molekulyar dəyişikliklərin floresan-aktivləşdirilmiş hüceyrə sıralaması (FACS) J Neurochem istifadə edərək, tək sıçan dorsal striatumdan təyin edilməsi. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Advance online yayım. İyul 29, 2013 alındı. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. BDNF siqnalının hüceyrə tipli xüsusi itkisi kokain mükafatının optogenetik nəzarətini təqlid edir. Elm. 2010; 330: 385-390. doi: 10.1126 / science.1188472. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Narkomaniyaya qarşı striatal balanslaşdırma hərəkətləri: birbaşa və indirekt yolun orta spiny nöronların ayrı-ayrı rolları. Ön Nöroanat. 2011; 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Gri M, Geschwind DH, Yang XW. Uşaq və yetkin siçan beyinlərində striatal proyeksiya nöron subtiplərinin FACS-array profilləri. Nat Neurosci. 2006; 9: 443-452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Çaprazlıq]
  44. MacAskill AF, Little JP, Cassel JM, Carter AG. Subcelluluq keçid əsasən nüvəli akumbenslərdə yola xüsusi sinyal verməkdədir. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624-1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  45. Xəzər Universitetinin rektoru Yaqub Eyvazovun sözlərinə görə, bu gündən etibarən, Nestler EJ. Kokain ilə bağlı plastisitədə histon metiltransferaza G3a'nın əsas rolu. Elm. 9; 2010: 327-213. doi: 216 / science.10.1126. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  46. , Mazei-Robison MS, Koo JW, Friedman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, Siuta MA, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Neve RL, Worley PF, Snyder SH, Hurd YL, Cheer JF, Han MH, Russo SJ, və s. Ventral tegmental sahədə dopamin nöronlarında morfin səbəbli adaptasiyalarda mTOR sinyalizasiya və nöronal aktivliyin rolu. Neuron. 2011; 72: 977-990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  47. McClung CA, Nestler EJ. CREB və ΔFosB tərəfindən gen ifadə və kokain mükafatının tənzimlənməsi. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Çaprazlıq]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Metamfetamin səbəbli həssaslaşdırma, memeli beyin limbik dövrü boyunca pCREB və ΔFosB'yi dəyişir. Mol Pharmacol. 2006; 70: 2064-2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Çaprazlıq]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. D1-sinif dopamin reseptorları striatumda kokainlə bağlı foslarla əlaqəli proteinlərin davamlı ifadəsini təsir göstərir. Neuroreport. 1996; 8: 1-5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Çaprazlıq]
  50. Muller DL, Unterwald EM. D1 dopamin reseptorları intervalant morfin tətbiqindən sonra sümük striatumda δFosB induksiyasını modullaşdırır. J Pharmacol Exp Ther. 2005; 314: 148-154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Çaprazlıq]
  51. Narayan S, Kass KE, Thomas EA. Xroniki haloperidol müalicəsi beynin beynindəki miyelin / oligodendrocyte ilə əlaqəli genlərin ifadəsində azalma ilə nəticələnir. J Neurosci Res. 2007; 85: 757-765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Çaprazlıq]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Opioid və kannabinoid reseptorları arasında funksional qarşılıqlı narkotik self-administrasiyası. J Neurosci. 2001; 21: 5344-5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Yabani tipli və hemizigot Drd1a və Drd2 BAC transgenik siçanlarda striatal-bağımlı davranışların müqayisəsi. J Neurosci. 2012; 32: 9119-9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  54. Nicola SM. Nüvəli, bazal ganglion hərəkət seçmə dövrünün bir hissəsi kimi acumbens edir. Psixofarmakologiya. 2007; 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Çaprazlıq]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. Nucleus accumbens-də ΔFosB qidalandırılmış instrumental davranış və motivasiyanı tənzimləyir. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Çaprazlıq]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Xroniki stressdən sonra mükafatla əlaqəli beyin strukturlarında βFOSB induksiyası. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Çaprazlıq]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-nun istifadəsi ilə narkotik maddələri ilə beynin induksiyası. Sinapse. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. ΔFosB kronik amfetamin pozuntusundan sonra c-fos geninin epigenetik desensitizasiyasına vasitəçilik edir. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  59. Xanu G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Kokain tərəfindən xromatinin tənzimlənməsinin genomun geniş analizi, sirtuinlər üçün yeni rol oynayır. Neuron. 2009; 62: 335-348. doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  60. Robison AJ, Nestler EJ. Bağımlılığın transkripsiyonel və epigenetik mexanizmləri. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623-637. doi: 10.1038 / nrn3111. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Kronik kokainə qarşı davranış və struktur cavablar, nüvəsindəki acumbens qabığında ΔFosB və kalsium / calmodulin-asılı protein kinaz II-ni əhatə edən bir feedforward döngə tələb edir. J Neurosci. 2013; 33: 4295-4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  62. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S, Kalivas PW. D1 və D2 accumbens proqnoz nöronlarında kokainə səbəb olan adaptasiya (birbaşa və dolayı yollarla mütləq eşitməməli bir dichotomy) Curr Opin Neurobiol. 2013; 23: 546-552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Həyatın erkən mərhələlərində ətraf zənginliyi kokainin davranış, nörokimyəvi və molekulyar təsirlərini azaldır. Nöropsikofarmakologiya. 2009; 34: 1102-1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Çaprazlıq]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, Van Zessen R, Stuber GD. Neyron dövrlərin uzunmüddətli optogenetik manipulyasiyası üçün implantasiya olunan optik liflərin tikintisi. Nat Protoc. 2012; 7: 12-23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Çaprazlıq]
  65. Stamatakis AM, Stuber GD. Ventral midbrainə lateral habenula girişlərinin aktivləşdirilməsi davranışdan yayınmağı təmin edir. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105-1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonci A. mükafat axtaran neyron dövrlərin optogenetik modulyasiyası. Biol Psixiatriya. 2012; 71: 1061-1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  67. VTA sürücüsündən kondensasiya edilən yerdən xilas olmaq üçün Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, Deisseroth K, Tye KM, Lüscher C. GABA nöronları. Neuron. 2012; 73: 1173-1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Çaprazlıq]
  68. Teegarden SL, Bale TL. Pəhriz üstünlüyündə azalma, diaqnostikaya və qidalanma riskinə səbəb olur. Biol Psixiatriya. 2007; 61: 1021-1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Çaprazlıq]
  69. Dopaminergik nöronlarda atəş açan Tsai HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Phasic davranışçı kondisioner üçün kifayətdir. Elm. 2009; 324: 1080-1084. doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [Çaprazlıq]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, Warden MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adhikari A, Thompson KR, Andalman AS, Günaydin LA, Witten IB, Deisseroth K. Dopamin nöronları neyron kodlaşdırma və depressiyaya bağlı davranış. Təbiət. 2013; 493: 537-541. doi: 10.1038 / nature11740. [PubMed] [Çaprazlıq]
  71. Van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. VTA GABA nöronların aktivləşdirilməsi mükafat istehlakını pozur. Neuron. 2012; 73: 1184-1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. Beyin mükafat sxemlərində ΔFosB stress və antidepresan cavablara qarşı dayanıqlığa vasitəçilik edir. Nat Neurosci. 2010; 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Kaloriya məhdudlaşdırılması səbəbli metabolik dəyişikliklərdə ΔFosB üçün rol . Biol Psixiatriya. 2011; 70: 204-207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iñiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzmán CA. DeltaFosB nüvəsindəki təbii mükafatla əlaqəli davranışlara təsir göstərir. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  75. Behçet K., davranış probleminə cavab verən prefrontal korteks-beyin sintezi nöron proqnozu. Mütəxəssisi MR, Selimbeyoğlu A, Mirzabekov JJ, Lo M, Thompson KR, Kim SY, Adhikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. Təbiət. 2012; 492: 428-432. doi: 10.1038 / nature11617. [PubMed] [Çaprazlıq]
  76. Watabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Midbrain dopamin nöronlarına birbaşa girişlərin bütün beyin mapping. Neuron. 2012; 74: 858-873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Çaprazlıq]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB təkər qaçışını tənzimləyir. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Orbitofrontal korteksdə ΔFosB induksiyası kokain səbəbindəki kognitif disfunksiyaya tolerantlıq yaradır. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Çaprazlıq]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. Recombinase sürücüsü sıçan xətləri: texnika və dopaminin vasitəçiliyi gücləndirilməsi üçün optogenetik tətbiq olunur. Neuron. 2011; 72: 721-733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Neyron sistemlərdə optogenetik. Neuron. 2011; 71: 9-34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Çaprazlıq]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. 22-da inbred siçan suşlarında könüllü etanol istehlakı. Alkol. 2008; 42: 149-160. doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB üçün morfin hərəkətində nüvəli akumbens üçün mühüm rol. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Çaprazlıq]