Biol Psixiatriya. 2008 Dek 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Jul 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
mənbə
Pensilvaniya Universiteti, Philadelphia, PA 19104-6046, ABŞ, Animal Biologiya Bölümü.
mücərrəd
ƏMƏK FƏALİYYƏTİ:
Mükafat həssaslığı, narkotik maddə istismarı ilə yanaşı overeatlama ilə bağlı davranışlar üçün də predispozan bir faktordur. Bununla yanaşı həssaslığı mükəmməlləşdirən əsas mexanizmlər məlum deyil. Dopaminin siqnalizasiyasında bir tənzimləmə, stimul verənlərin sistemin normallaşdırılması üçün hərəkət edə biləcəyi yüksək mükafat həssaslığının əsas səbəbi ola biləcəyini fərz etdik.
METHODS:
Delta FosB-overexpressing siçanın artan mükafat həssaslığının genetik siçan modelini istifadə edərək, doyurucu yüksək yağlı pəhrizlərə cavab olaraq mükafat yollarının dəyişməsini araşdırmaq üçün istifadə etdik. Bu siçanlarda mükəmməl siqnalizasiya işarələri həm əsasən, həm də 6 həftələrində doyurucu diyetə məruz qaldıqdan sonra araşdırıldı. Siçanlar mükafatlandırıcı stimulların aradan qaldırılması üçün bu modelin zəifliyini qiymətləndirmək üçün yüksək yağlı pəhriz çəkilməsindən sonra davranış testində araşdırıldı.
NƏTİCƏLƏR:
Bizim nəticələr nüvə accumbens və striatal bölgələrdə Delta FosB-nin aşırı ekspedisiyası nəticəsində ortaya çıxan çekirdek accumbens-hypothalamic-ventral tegmental sahə dövrü boyunca dəyişdirilmiş mükafat yolunun aktivliyini nümayiş etdirir.. Fosforlanmış siklik adenozin monofosfat (cAMP) reaksiyası elementli bağlayıcı protein səviyyələri (pCREB), beyindən nörotrofik amil (BDNF), dopamin və dopamin siqnalının azaldığını düşündükləri, Delta FosB siçanlarında nüvəli accumbensdə 32 kDa (DARPP-32) molekulyar kütləsi ilə dopamin və siklik adenozin monofosfat tənzimlənən fosfoprotein azaldılıb. Altı həftə yüksək yağlı pəhriz ifrazı, bu fərqləri tamamilə yaxşılaşdıraraq, doyurucu bir pəhrizin potensial tədarük potensialını ortaya qoydu. Delta FosB siçanlar həmçinin yüksək yağ çıxarıldıqdan sonra lokomotor fəaliyyəti və narahatlıqla əlaqədar cavablar 24 saatında əhəmiyyətli bir artım göstərdi.
NƏTİCƏLƏR:
Bu nəticələr Delta FosB və dopamin siqnalizasiyası ilə bağlı tənzimlənən dəyişikliklərə əsaslanan həssaslıq yaradır və doymuş diyetlərlə normallaşdırıla bilən və obezitenin bəzi formalarında predisposed fenotip ola bilər.
giriş
İştahı və doyumluğu nəzarət edən neyron sistemlərinin artan biliyinə baxmayaraq, obezitenin nisbəti ABŞ-da artmağa davam edir. Cari narkotik müalicələrinin məhdud təsirləri vardır və davranış dəyişiklikləri minimum uzun müddətli uyğunluqdan (1) çəkilir. Kalorili-sıx, istehlaklı qidaların istifadəsi stressin və beyində mükafat yollarının dəyişməsi ilə bağlıdır və belə qidaların mükəmməl xüsusiyyətləri enerji balansı sinyallerini (2-4) aşa bilər. Yağda olan yeməklər təbii mükafatlar kimi fəaliyyət göstərir, beyin mərkəzlərinin istismar məqsədilə istifadəyə uyğundur və beləliklə özünü idarəetmə paradiqmalarında (5-8) istifadə olunur. Beləliklə, overeat və narkotik istifadəsi üçün davranışlar və motivasiya ümumi əsas mexanizmləri paylaşır, potensial olaraq hər iki şərt üçün müalicənin yeni imkanlarını açır.
Doyurucu qidalar və beyində mükafat və stress təşkil edən yollar arasında əlaqəni öyrənərkən, əvvəlcədən müəyyən edilmiş yüksək mükafatlı molekulyar və biyokimyəvi markerləri müəyyənləşdirdik və yeməkli yüksək yağlı pəhrizdən (HF) çəkildikdən sonra stres artdıq. İstifadənin dərmanlarına bənzər şəkildə, bizim işlərimizdə doyurucu bir pəhrizə məruz qalma, mərkəzi beyin mükafat strukturu (9, 10), nüvəli accumbens (NAc), Transkripsiya faktoru ΔFosB səviyyəsinin artmasına gətirib çıxardı.. ΔFosB'yi aşırı eksprese eden fareler, bir yemek mükafatı (11) üçün artan instrumental cavab vererek onlara mükafat hassaslığının rolunu və mükafat sisteminin uzun müddətli tənzimlənməsini, doyurucu bir pəhriz üçün molekulyar və biyokimyəvi reaksiyalarda qiymətləndirmək üçün dəyərli vasitədir.
Bu işdə, biz ΔFosB-overexpressing siçanlardan faydalandık və bu, DH-dietə uyğun olaraq NAc-hipotalamus-ventral tegmental bölgəsində (VTA) nöroxirusiyada mükafat markalarında uzunmüddətli dəyişikliklərin araşdırılması üçün istifadə olundu. Bu mükafat həssas siçanlarda əvvəlki araşdırmalara əsaslanaraq, biz mükafat həssaslığında ΔFosB-induced dəyişikliklərin NAc geribildiriminin nəticəsi olan VTA-dan gələn dopamin siqnalında bir tənzimləmə aparmasını ehtiva etdiyini fərz etdik. Bundan əlavə, enerji təzyiqli bir HF pəhrizinin təbii mükafatına məruz qalmasının bu siçanlarda dopaminergik sistemin normallaşdırılmasına səbəb olacağını fərz etdik ki, bu HF dietindən çəkilmə stressinə şişirdilmiş bir cavab verər. Mükəmməl bir pəhrizdən faydalanan bir maddə kimi faydalanmanın yeganə cəhəti bizə hipotalamal girişləri bir fenotipdə mükafatlandırmaq üçün imkan verir ki, bu da müalicəyə davamlı şişmanlığa meylli bir əhalinin proqnozlaşdırılması ola bilər. Bu hipotezi araşdırmaq üçün HF pozlamasından sonra NAc və tirosin hidroksilazında və peyvənddə olan dopamin nəqlində pCREB, BDNF və DARPP-32 də daxil olmaqla dopamin neyrotransmission markerlərini öyrəndik. Biz də dopaminin çıxışına təsirli olan enerji balansının xüsusi göstəricilərini, o cümlədən, LTA-nın leptin və orexin reseptorlarını və lateral hipotalamusa daxil olan orexin ifadəsini araşdırdıq.
Material və metodlar
Heyvanlar
NAc və dorsal striatumda dynorphin-pozitiv nöronlarda ΔFosB'yi təsirli şəkildə aşırı eksprese edən kişi bitransgen siçanları (Kelz və ark., 1999) Texas Southwestern Tibb Mərkəzi Universitetində qarışıq bir fonda (ICR: C57Bl6 / SJL) yaradılıb və Pensilvaniya Universitetində test edilmişdir. Bütün siçanlar, Pennsylvania Universitetinə gəlişədikdən sonra doxycyclin (içməli suda 100 μg / ml) üzərində saxlanılırdı. Aşırı ekspresyonu teşvik etmek için doksisiklin çıkarıldı (n = 23) (12). Nəzarət siçanları (n = 26) dərmanı qəbul etməyə davam etdi. Siçanlar diet qruplarına doksisilin çıxarılmasından sonra səkkiz həftə vaxt verildikdən sonra maksimum səviyyələrə (13) çatdıqları göstərilir. Siçanlar bir 12: 12 işıq-qaranlıq dövrü (0700-da işıqlar) üzərində qida və su ilə təmin olunan ad libitumda saxlanılırdı. Bütün tədqiqatlar Pensilvaniya İnstitutu Animal Care və İstifadə Komitəsi tərəfindən təsdiq edilmiş təcrübi protokollara əsasən həyata keçirilmişdir və bütün prosedurlar institusional qaydalara uyğun olaraq aparılmışdır.
Diyetə məruz qalma
Siçanlar ev chow (n = 16) üzərində saxlanılıb və altı həftə ərzində HF (n = 16-17) üzərində yerləşdirilib. House chow (Purina Lab Diet, St Louis, MO) 4.00% protein, 28% yağ və 12% karbohidratdan ibarət olan 60 kcal / g içərisindədir. HF diet (Research Diets, New Brunswick, NJ) 4.73% protein, 20% yağ və 45% karbohidratdan ibarət olan 35 kcal / g içərisindədir.
Biokimya və gen ifadəsi
Siçanlar altı həftəlik pəhriz ifrazından sonra təhlil edilmişdir. Braun kəllədən və dondurulmuş bütün quru buz və ya NAc dissected (təxminən 0.5 - 1.75 - 3.5 dərinliyi ilə bregma dən 5.5 mm) və ya maye azot dondurulmuş olan bütün çıxarıldı. Toxum testinədək -80 ° C-də saxlanılır.
Biokimyəvi analizlər
Qərb ləkələri üçün metodlar əlavə materiallarda təsvir edilmişdir. Kullanılan antikorlar aşağıdakı idi: Cdk5, CREB ve BDNF (1: 500, Santa Cruz Biotexnology, Santa Cruz, CA) ve fosfo-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Cell Signaling Technology, Danvers, MA).
Reseptor autoradioqrafiyası
Autoradioqrafiya üçün ətraflı metodlar əlavə materiallarda təsvir edilmişdir. Kullanılan Ligandlar 2 nM H3 - SCH 23390 ve 5 nM H3 - spiperon (PerkinElmer, Boston, MA) idi.
Yerdə hibridləşdirmə
Dokuların işlənməsi və hibridizasiyası daha əvvəl təsvir edilən (14) həyata keçirildi. DARPP-32 proqnozu P. Greengard (Rockefeller Universiteti) və J. Elmquist (Texas Southwestern Medical Center Universiteti) tərəfindən orexin proqnozu tərəfindən xeyirlə təmin edilmişdir. 32 gün üçün DARPP-3 üçün sınaqdan keçirilmiş slaydlar filmə çəkildi və 4 gün üçün filmin formasında hazırlanmış slaydlar çəkildi. Film şəkillərinin miqdarı daha əvvəl açıqlandığı kimi aparılmışdır (10).
QRT-PCR
RNA VTA'dan təcrid olunmuş və TaqMan gen ifadəsi testləri (Applied Biosystems, Foster City, CA) istifadə edərək qiymətləndirilmiş fərdi genlərin ifadəsi olmuşdur. Ətraflı metodlar və statistik analizlər əlavə materiallarda tapıla bilər.
Davranış təhlili
Mükafat həssaslığının pəhrizlə bağlı davranış dəyişikliklərinə təsirlərini araşdırmaq üçün siçanların bir alt hissəsi dörd həftəlik məruzdan sonra HF-dən çıxarılmış və ev chowa qaytarılmışdır (n = 9 nəzarət, n = 8 ΔFosB). Geri çəkilməsindən təqribən iyirmi dörd saat sonra, siçan əvvəllər nəşr olunan dietarxarma paradiqması (10) uyğun olaraq açıq sahədə testə məruz qaldı. Qısası, siçan açıq sahədə aparatın mərkəzinə yerləşdirilib və beş dəqiqəlik monitorinqi aparıb. Ümumi xəttlər, fecal boli, mərkəzdə vaxt və mərkəzə keçidlər ölçülür.
Statistika
Qərb ləkələri xaricindəki bütün məlumatlar iki tərəfli ANOVA istifadə edilərək analiz edildi, ardından doksisiklin müalicəsi (ΔFosB ifadəsi) və müstəqil dəyişənlər olaraq pəhriz vəziyyəti ilə Fişerin PLSD testi. RT-PCR analizləri üçün əlaqəli gen qrupları daxilində çoxsaylı müqayisələrin düzəldilməsi üçün azaldılmış P dəyərindən istifadə edilmişdir (əlavə materiallara bax). Qərb ləkələri, eyni ləkədəki optik sıxlığı müqayisə edərək, müstəqil bir dəyişən olaraq doksisiklin müalicəsi ilə bir tələbənin t testindən istifadə edərək analiz edildi. Bütün məlumatlar orta ± SEM olaraq təqdim olunur.
Nəticələr
Bazal biokimyəvi fərqlər
ΔFosB həddindən artıq ifadə edən siçanlardakı inkişaf etmiş mükafat həssaslığının əsasını təşkil edən molekulyar yolları aydınlaşdırmaq üçün NAc-da bir neçə əsas siqnal molekulunun səviyyəsi araşdırıldı. Doksisiklin üzərində saxlanılan littermate nəzarət heyvanlarına nisbətən ΔFosB siçanlarının NAc-da Cdk5 səviyyələrinin artması tendensiyası var idi (F = 5.1, P = 0.08; Şəkil 1A). ΔFosB siçanları pCREB səviyyələrini (F = 7.4, P <0.05; Şəkil 1B) və ümumi CREB səviyyələrini (F = 5.4, P = 0.05; Şəkil 1C) əhəmiyyətli dərəcədə aşağı saldı. BDNF-də əhəmiyyətli bir azalma ΔFosB siçanlarının NAc-da da müşahidə edilmişdir (F = 10.6, P <0.05; Şəkil 1D).
Şəkil 1
ΔFosB'yi aşırı süzən siçanlar NAc-da dopamin siqnalının azaldılmış biyokimyəvi göstəricilərini nümayiş etdirdi
Yüksək yağlı pəhrizdə qidalanma və bədən çəkisi
Daha sonra rewardFosB həddindən artıq təsir göstərən siçanlardakı siqnal molekullarındakı dəyişikliklərə təbii olaraq faydalı bir HF pəhrizinin təsirlərini araşdırdıq. HouseFosB siçanları ilə evdə və ya HF-də qida qəbulunda nəzarət arasında heç bir fərq yox idi. Bununla birlikdə, FFosB siçanlarına xas olan HF-yə məruz qaldıqda bədən çəkisinə normallaşdırılmış kalori qəbulunda ümumi azalma baş verdi (F = 11.2, P <0.01; Şəkil 2A). Altı həftəlik diyetə məruz qaldıqdan sonra, HF qəbul edən siçanların çəkisi pəhrizdə olanlardan (F = 17.2, P <0.001) və ΔFosB siçanlarının ümumi çəkisi idarədən daha az idi (F = 5.6, P <0.05; Şek. 2B). Bu təsir chow pəhrizindəki qruplar arasındakı fərqlərə xas idi (P <0.05).
Şəkil 2
ΔFosB siçanlarını həddindən artıq sürətləndirərək, ya çay və ya yüksək yağ (HF) pəhrizində qida qəbulunda heç bir fərq göstərməmişdir
Yüksək yağlı pəhrizdə biokimyəvi fərqlər
NAc sinyalizasyonunda bazal fərqliliklərin HF dietası ilə necə dəyişə biləcəyini müəyyən etmək üçün, altı həftəlik HF qəbul edən heyvanlarda başlanğıcda tədqiq olunan eyni siqnal zülalları araşdırıldı. Cdk5 səviyyələrində əhəmiyyətli fərqlər yox idi (Şəkil 3A). PCREB və total CREB səviyyələri altı həftədən sonra fərqlənmədi (Şəkil 3B, C). BFNF səviyyələri ≥FosB siçanlarında altı həftə HF pozuntusundan sonra (F = 6.5, P = 0.05, Şəkil 3D) əhəmiyyətli dərəcədə yüksəlmişdir.
Şəkil 3
ΔFosB'nin aşırı ekspress siçanlarının NAc-də müşahidə olunan yüksək yağlı (HF) diet təkmilləşdirilmiş sinyalizasiya fərqləri
Dopamin reseptoru autoradioqrafiyası
NAc-da dopamin siqnalında ΔFosB ilə induksiya edilmiş dəyişikliklərin dopamin reseptorlarının ifadəsindəki dəyişikliklərlə əlaqəli olub olmadığını qiymətləndirmək üçün reseptor otoradioqrafiyasından istifadə etdik (Şəkil 4A). Yüksək yağ pəhrizinin D1 dopamin reseptorlarının bağlanmasının sıxlığını (P = 0.14) bir qədər artırdığı ortaya çıxdı və bu fərq ΔFosB siçanlarında daha çox idi (Şəkil 4B). HF (P = 1) sonrasında D0.06 bağlanma sahəsindəki artım meyli də var idi və sonrakı testlər bunun thisFosB siçanlarında əhəmiyyətli olduğunu göstərdi (P <0.05; Şəkil 4C). D1 reseptorlarından fərqli olaraq, D2 reseptorlarının bağlanma sıxlığında (nəzarət çuxu = 97.6 ± 6.9, nəzarət HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB çovq = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) və ya bağlanma sahəsində (nəzarət çuxu = 47.3 ± 3.4, nəzarət HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) NAc-də müşahidə edilmişdir.
Şəkil 4
Yüksək yağlı pəhriz (HF), D1 dopamin qəbuledici bağlamada dəyişikliklərə və ΔFosB'yi aşırı eksprese eden siçanların çekirdek accumbens'lerinde (NAc) DARPP-32 ifadəsinə gətirib çıxardı
NAc-da DARPP-32 ifadəsi
Yerdə hibridləşdirmə NAc-da DARPP-32-nin ifadə səviyyələrini təyin etmək üçün istifadə edilmişdir (Şəkil 4D). Yüksək yağlı pəhriz bu beyin bölgəsindəki DARPP-32 ifadəsini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı (F = 5.1, P <0.05) və pəhriz ilə ΔFosB ifadəsi (F = 8.9, P <0.05) arasında əhəmiyyətli bir qarşılıqlı əlaqə var, ΔFosB siçanları daha çox göstərdi pəhrizlə əlaqəli dəyişiklik (şəkil 4E). İdarəetmə və ΔFosB siçanları arasında DARPP-32 ifadəsindəki bazal fərq post-hoc testi (P <0.01), həmçinin HF-dəki ΔFosB siçanlarında DARPP-32 ifadəsində əhəmiyyətli artım (P <0.01) ilə aşkar edilmişdir.
VTA-da gen ifadəsi
QRT-PCR, əvvəllər mükafat tənzimlənməsində iştirak edən bir neçə əsas geni hədəf alan VTA-dakı gen ekspresiyasındakı dəyişiklikləri qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir. Bütün nümunələr β-aktin normallaşdırıldı. Β-aktin ifadəsinin müalicə yolu ilə dəyişdirilməməsini təmin etmək üçün, act-aktini ikinci daxili nəzarət GAPDH ilə müqayisə etmək üçün ayrıca bir sınaq keçirildi. Β-aktin ifadəsində (differencesCT dəyərləri, β-aktin - GAPDH: nəzarət chow = 2.29 ± 0.21, nəzarət HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Tirozin hidroksilazın ekspresiyası üçün ΔFosB ifadəsi ilə pəhriz müalicəsi arasında qarşılıqlı əlaqə meyli müşahidə edilmişdir (F = 3.6, P <0.06; Şəkil 5A). Altı həftəlik HF-yə məruz qalmanın nəzarət siçanlarında tirozin hidroksilaz ekspresyonunu azaltdığı və ΔFosB siçanlarındakı ifadəsini artırdığı ortaya çıxdı. Dopamin daşıyıcısının ifadəsi üçün ΔFosB ekspresiyası ilə diyetə məruz qalma arasında əhəmiyyətli bir qarşılıqlı təsir müşahidə edildi (F = 6.7, P <0.03; Şəkil 5B). Tirozin hidroksilaza bənzər şəkildə, HF-yə məruz qalma, nəzarət siçanlarında dopamin daşıyıcısının ekspresyonunu azaldır və ΔFosB siçanlarındakı ifadəni əhəmiyyətli dərəcədə artırır (P <0.05). İdarəetmə ilə BFosB siçanları arasındakı dopamin daşıyıcısı ifadəsindəki bazal fərq əhəmiyyətə çatmadı (P = 0.16), lakin 6 həftəlik HF-dən sonra, ΔFosB siçanları nəzarətlə müqayisədə dopamin daşıyıcısının səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı (P <0.05).
Şəkil 5
Yüksək yağlı pəhriz (HF) pozulması və ΔFosB ifadəsi VTA-da bir sıra əsas molekulların ifadə edilməsində dəyişikliklərə gətirib çıxardı
VTA-da TrkB səviyyələrini azaltmaq üçün artmış ΔFosB ifadəsinin təsirini göstərən bir meyl var idi (F = 5.7, P <0.04; Şəkil 5C). Κ-opioid reseptor ekspresyonu üzərində heç bir əsas təsiri olmasa da, ΔFosB siçanlarında ekspresiyanın azalması tendensiyası var idi (P = 0.08; Şəkil 5D). VTA-da leptin reseptorunun ifadəsi də müəyyən edilmişdir. Diyetə məruz qalmanın əhəmiyyətli bir təsiri tapıldı (F = 6.1, P <0.03), HF həm TAFosB-də, həm də nəzarət siçanlarında VTA-dakı leptin reseptor səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə azaldır (Şəkil 5E). VTA-da oreksin reseptoru 1-in ifadəsi də araşdırılmışdır. Pəhrizin oreksin reseptorunun (F = 9.0, P <0.02) ekspressionı üzərində əhəmiyyətli dərəcədə təsiri olub, HF-yə məruz qalan siçanlar VTA-da daha yüksək səviyyələri ifadə edir (şəkil 5F). BrainFosB siçanlarının bu beyin bölgəsindəki orexin reseptoru 1-in daha yüksək səviyyələrini ifadə etməsi tendensiyası da mövcud idi (P <0.05).
Yanal hipotalamada oksidinin ifadəsi
VTA-nın orexinerjik innervasiyasının mənşəyi olan lateral hipotalamusdakı orexin səviyyələrini yerində hibridləşdirmə yolu ilə ölçdük (Şəkil 6A). FFosB ifadəsi ilə orexin ekspresyonuna diyetə məruz qalma (F = 9.1, P <0.01) arasında HF nəzarət siçanlarındakı orexin səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə artıraraq (P <0.05) və ΔFosB siçanlarındakı ifadəni azaltmaqla əhəmiyyətli bir qarşılıqlı əlaqə var idi (şəkil 6B). Bazal vəziyyətdə orexin ekspresyonunda əhəmiyyətli bir fərq olmasa da, 6 wk HF-dən sonra, ΔFosB siçanları orexin səviyyələrini nəzarətlə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə azaldığını ifadə etdi (P <0.05).
Şəkil 6
Yüksək yağ (HF) pəhrizində orexin ifadəsində nəzarətdə fərqli təsirlər (Ctrl) və ΔFosB aşırı ekspress siçanlar
Behavioral analizlər
Pəhriz dəyişikliyinə görə həyəcan və duyğusallıqdakı dəyişiklikləri qiymətləndirmək üçün siçanlar HF pəhrizindən imtina etdikdən 24 saat sonra açıq sahə testinə məruz qaldılar (10). Uyğunluq ölçüsü olaraq təyin olunan ümumi xətt xaçları ΔFosB ifadəsi (F = 6.6, P <0.05) və pəhriz (F = 4.6, P <0.05; Şəkil 7A) tərəfindən əhəmiyyətli dərəcədə təsirlənmişdir. ΔFosB siçanları yeni mühitdə kontrillə müqayisədə daha aktiv idi və sonrakı testlər HF-dən çıxarılan siçanların çovmaya məruz qalanlara nisbətən daha aktiv olduğunu göstərdi (P <0.05). Nəcis boli narahatlığa bənzər bir davranışın ölçüsü olaraq qəbul edildi (10). ΔFosB ifadəsinin (F = 10.2, P <0.01) əsas təsiri var idi, ΔFosB-ifrat dərəcədə siçanların yeni mühitdə, xüsusən ev çuxurunda və HF çəkilmə qruplarında daha çox nəcis boli istehsal etməsi ilə (Şəkil 7B). ΔHF pəhrizində saxlanılan FosB siçanları, çovda saxlanılanlardan və testdən 24 saat əvvəl geri çəkilənlərdən daha az nəcis boli meydana gətirdi. İdarəetmə siçanlarının pəhrizdən təsirlənmədiyi göründü. Açıq sahənin mərkəzində sərf olunan vaxtda ΔFosB ifadəsi və ya pəhrizin əhəmiyyətli təsiri olmamışdır (nəzarət çuxu = 14.5 ± 3.1 saniyə, nəzarət HF = 18.0 ± 3.2 saniyə, nəzarət W / D = 15.4 ± 1.9 saniyə, ΔFosB çovğun = 16.9 ± 2.4 saniyə, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 saniyə, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 saniyə).
Şəkil 7
ΔFosB üzərində ifraz edilən siçanlar yüksək yağlı pəhriz (HF) çəkilməsinin təsirlərinə daha həssasdırlar
Müzakirə
Şişmanlıq müalicəsində aşınma və kilo almasına qarşı həssaslığı təsir edən amillərin müəyyən edilməsi üçün kritik bir ehtiyac vardır. Beyin mükafat yolları, doyurucu qidalar və diyet dəyişiklikləri (6, 10, 15, 16) üçün motivasiya və cavab üçün mühüm rol oynayır. Hipotalamus-VTA-NAc dövrü vasitəsilə mükəmməl siqnalın birbaşa təsir edə biləcəyi orexigenic və anorexiqenik siqnallar kimi, mükafat mərkəzlərində enerji zəngin xeyli diyetlərə cavab verən genlərin təsiri obezitə müalicəsində (17, 18) yeni terapevtik hədəflər təmin edə bilər. Buna görə də, mükafat dəyişikliyinə (13, 19, 20) dəyişikliklərə həssaslıq modeli olaraq ΔFosB-overshəssaslayan siçanlarda HF dietinə cavab olaraq hipotalamus-VTA-NAc dövrü boyunca mükafat və enerji balansı siqnalının biokimyəvi və molekulyar markerlərini müayinə etdik. , diet çəkilməsindən sonra davranış həssaslığı. Biz ΔFosB siçanlarında dopamin siqnalının bazal dysregülasyonunun enerji balansı siqnallarının və dopamin sisteminin kəsişməsini əhatə edən HF dietinin təsirli təsirləri ilə normallaşdırılacağını fərz etdik.
NAc'ta dopamin sinyalizasyonunda bir disregülasyonu gösteren belirteçleri incelemek üçün D1 reseptör seviyelerini ve aşağı akımlı efektleri inceledik. D1 reseptor bağlamasında əhəmiyyətli fərqlər olmadığı halda, ΔFosB farelerindəki bağlama sahəsini artırmaq üçün HF məruz qalması üçün bir meyl var idi. Bu ΔFosB'nin dərman vasitəsi ilə indüksiyası və təbii mükafatların əsasən D1 reseptorlarını ifadə edən orta spiny nöronların dynorphin-müsbət alt tipində üstünlük təşkil etdiyi görünür (9, 21). Downstream dopamin siqnal hədəfinin pCREB səviyyələri bu beyin bölgəsində (1, 22) azalmış D23 reseptor aktivasiyasını dəstəkləyən ΔFosB siçanlarında əhəmiyyətli dərəcədə azaldılmışdır. Maraqlıdır ki, biz ΔFosB siçanlarında total CREB səviyyələrində əhəmiyyətli bir azalma aşkar etdik, bu da pCREB (24) -nın uzun müddətli azalması ilə nəticələnə bilən geribildirimə bağlı ola biləcək dopamin siqnal transdüksiyasını daha da azaldıb. BDNF ifadəsi pCREB tərəfindən tənzimlənir, D1 aktivləşdirmə ilə yüksəldilir və NAc (25, 26) mükafat ilə əlaqəli nöroplastisitenin mühüm vasitəçisidir. Buna görə, ΔFosB siçanlarının NAc-də BDNF proteinində əhəmiyyətli dərəcədə azalma aşkar edilmişdir.
NAc içərisində bütün orta sümük nöronları DARPP-32 (27) ifadə edir. Onun çoxsaylı downstream təsiri mükafat yolları (28) bu həyati bir oyunçu edir və narkotik bağımlılığı və dopamin sistemini əhatə edən digər bozukluklarda təsir affektiv bozuklukları və şizofreniya (27, 29). ΔFosB siçanlarının NAc-də DARPP-32 ifadəsində dərin bazal azalma aşkar edilmişdir. DARPP-32 ifadəsi BDNF tərəfindən tənzimlənir və bu səbəbdən azaldılmış ifadə ΔFosB siçanlarında (27, 29, 30) aşkar edilən BDNF səviyyələrində azalma ilə əlaqəli ola bilər. DARPP-32-in fosforilyasiya vəziyyətində hətta orta dəyişikliklər NAc (27) daxilində intraselluler siqnallarda əhəmiyyətli dəyişikliklərə səbəb ola bilər. Əvvəlki tədqiqatlar daha geniş striatal qiymətləndirmə (32) keçirildikdə doksisiklindən bir 12-wk çıxarılmasının ardından ΔFosB farelerində DARPP-31 proteinində dəyişiklik olmadığını bildirmişdir. ΔFosB-nin DARPP-32-a təsirləri zaman və regiona xüsusi ola bilər.
Biz ΔFosB siçanlarının NAc'sindəki dopamin siqnallarının göstəricilərində kəskin azalmalar, ehtimal ki, ΔFosB bu neyronlar içərisində aşındırılmamış olsa da, VTA dopamin proyeksiyası nöronlarında dəyişikliklərə məruz qalmışdır. Buna görə də, tirozin hidroksilaz və dopamin nəqletici də daxil olmaqla, VTA-da dopamin ilə əlaqəli genlərin ifadəsini araşdırdıq. Tirosin hidroksilazın və dopamin nəqlinin səviyyələri dopamin çıxışı ilə pozitivdir. ΔFosB siçanlarının azalmış tirosin hidroksilaza və dopamin daşıyıcıda əhəmiyyətli bir azalma nümayiş etdirmək üçün bir tendensiya var idi, bu da NAc-də dopamin siqnalının disregoziyası ilə. ΔFosB siçanlarının VTA'sında dopamin ilə əlaqəli genlərdə bu əsas azalmalar ehtimal edilir ki, uzun müddətli ΔFosB overexpressiya zamanı NAc-dən dəyişən geribildirimi əks etdirirbiz VTA (32) NAc geribildirim mümkün bir mexanizmi kimi, BDNF reseptor, TrkB ifadə ifadə. Tirosin hidroksilaz və dopamin nəqlçiyə bənzər olaraq, TrkB ifadəsi də çox müqayisə üçün düzəldildikdə əhəmiyyətə çatmayan ΔFosB farelerində əsaslı şəkildə azalma meyli göstərdi. BDNF-TrkB kompleksi retrogradely nəql edilə bilər və yerli gen ifadəsini təsirləndirmək və hüceyrə artımı və saxlanılması (33) üçün VTA çərçivəsində fəaliyyət göstərə bilər. Bundan əlavə, NAc daxilində presinaptik TrkB BDNF aktivasiyası birbaşa dopamin sindromu (32) stimullaşdırmaqla, bu siçanlarda dopamin siqnallarının əsasını azaldır.
Κ-opioid reseptorlarının dynorphin aktivasiyası dopamin siqnalını tənzimləyir və NAc VTA-a geribildirim təmin edən başqa bir mexanizmdir (34). VTA'da κ-opioid reseptor ifadəinin ΔFosB siçanlarında azalma meyli olduğunu təsbit etdik. ΔFosB aşırı təzyiqi NAc (20) dynorphin ifadəsini azaltmaq üçün göstərildiyi kimi, ΔFosB siçanlar ehtimal ki, xalis VTA κ-opioid aktivasiyası. Dinorfin siqnalının normal olaraq dopamin neyronları üzərində bir inhibitor təsir göstərməsinə baxmayaraq [35], sui-istifadə dərmanlarının genişləndirilmiş öz-özünə tətbiq olunmasını göstərən siçovullar, NAc-da azaldılmış dinorfin səviyyələrini göstərir və mükafat həssaslığını artırmaqda əsasən azalmış dinorfin siqnalının roluna işarə edir. , 36). Dinorfin - κ-opioid sisteminin nizamsızlığı, dopamin yollarının normallaşmasında opioid siqnalının kritik bir tarazlığını dəstəkləyərək, narkotik maddə istifadəsi və davamlılığı ilə əlaqələndirilmişdir. (38).
Enerji yoğun HF dietinin mükafatlandırma qabiliyyətinə əsaslanaraq, biz ΔFosB siçanlarında dopamin və opioid mükafatlarının pozulmasına dair bir tənzimləmə bu siçanları belə bir pəhriz üçün mükəmməl mükafat reaksiyalarına məcbur edər və hipotalamusun -VTA-NAc dövrü. Altı həftəlik pəhriz məruzəsi zamanı ΔFosB və nəzarət siçanları arasındakı qida alışında heç bir fərq müşahidə olunmayaraq, ΔFosB siçanlarında bürokimyəvi və molekulyar marka mükəmməl sinyallerdə olan dəyişikliklər tükənmiş kalorilərin fərqliliyinə görə yox idi. HF (32, 29-39) üzrə ΔFosB siçanlarında artan dopamin çıxışı səbəbindən, pCREB, total CREB, BDNF, DARPP-41 və Δ-opioid reseptor səviyyələri arasında ΔFosB və nəzarət siçanları arasındakı əsas fərqlər zəiflədilər. .
Hər iki tirosin hidroksilazın və VTA-nın dopamin nəqlinin müayinəsi HF-dən sonra ΔFosB və nəzarət siçanlarının təəccüblü əks reaksiyalarını ortaya qoydu. Control mice tyrosine hydroxylase və dopamine transporter ifadəsində bir azalma göstərərkən, ΔFosB siçanı həm də bu dopamin ilə əlaqəli genlərin hər ikisinin artdığını nümayiş etdirdi. Maraqlıdır ki, tirozin hidroksilaz ifadəsi kronik kokain və ya metamfetamin administrasiyası (42-44) tərəfindən VTA-da dəyişir və ΔFosB siçanlarının HF-nin təbii mükafatını nəzarət siçanlarından daha dəqiq müəyyən edə bilər.
VTA-ya potensial hipotalamik girişin enerji balansını əks etdirən siqnalların ötürülməsinin necə olacağını araşdırmaq üçün, leptin reseptorunun və orexin reseptoru-1 ifadəsi də araşdırıldı. Sirkulyasiya edən leptin səviyyələri HF ilə artır, leptin də VTA-da dopamin siqnalını dəyişdirə bilər (18, 45). VTA leptin reseptor ifadəsi HF-də eyni ağırlıq və pəhriz qəbuluna uyğun olaraq, həm ΔFosB, həm də nəzarət siçanlarında HF ilə oxşar olaraq azalmışdır. Yüksək yağ həmçinin ΔFosB və nəzarət siçanlarının VTA-da orexin reseptoru-1 ifadəsini də artırdı. Orexin VTA-nın dopamin nöronlarını aktivləşdirir, VTA plastisitəsini inkişaf etdirir və NAc (46-48) dopamin səviyyələrini artırır. Yüksək yağlı pəhriz müşahidələrimizə uyğun olaraq (49, 50) uyğun olaraq farelerde orexin ifadəsini artırmaq üçün göstərilmişdir. Beləliklə, orexin reseptorunun ifadəsinin artması və VTA-da leptin siqnalının dəyişməsi həm ΔFosB, həm də nəzarət siçanlarında pəhriz mükafatını stimullaşdıra bilər, enerji balansı siqnallarının ötürülməsi yolları və birbaşa mükafata bağlananlar arasındakı ayrışmayı dəstəkləyə bilər.
Ödül çekilmesinin stres verici etkilerini incelemek üçün siçanlar HF'nin çıkarılmasından sonra 24 saatte bir açıq sahədə test edildi. ΔFosB siçanları bütün digər nəzarət və pəhriz qrupları ilə müqayisədə yeni açıq arenada yüksək arousal aktivliyi və fecal boli istehsalı göstərən üstünlükli pəhriz çıxarılması kəskin təsiri ilə daha həssas idi. ΔFosB siçanlar həmçinin bu testdə mükafat və stress həssaslığını göstərən maraqlı bir davranış nümunəsini nümayiş etdirdi, HF dieti əvvəlcə çobaya nisbətən fecal boli istehsalını azaldıb və geri çəkilmə bu narahatlıqla əlaqədar reaksiyanı daha da artırdı. Bu açıq sahədə fəaliyyətdə müşahidə edilən artım, orexin ifadəsində dəyişikliklərlə əlaqələndirilməmişdir, bu, stressin səbəbli arousal ilə əlaqəsini nəzərdə tutur ki, bu da orexin vasitəçiliyində olan sinyalizmə dəyişikliklərin təsiri deyil. Ümumiyyətlə, bu məlumatlar ΔFosB siçanlarının yüksək mükafat həssaslığına görə tercih edilen bəslənmənin kəskin təsirlərinə qarşı daha həssas olacağına dair hipotezimizi dəstəkləyir.
NAc-da ΔFosB-nin uzun müddətli ov ekspresyonu necə davranış və mükafat sinyalinin bu cür dəyişmələrə gətirib çıxarır?? VTK-nın təsadüfən aşkarlanması modelini təklif etdik, burada NAc və hipotalamusdan gələn rəylər mükafat vəziyyətinə dair siqnallarla mükafat yollarının düzəldilməsi və piylənmə meylinin şişmanlığa (Şəkil 8) uyğunluğu dəstəkləyən dopamin sisteminin tənzimlənməsini təyin etmək üçün verilir. HF məruz qaldıqda həm enerji balansını, həm də mükafat vəziyyətini əks etdirən bir çox giriş VTA-ya yaxınlaşır. Leptin və orexin siqnallarının artması və NAc-dən lateral hipotalamusa qədər dəyişikliklər bu orexiqenik siqnalların ΔFosB siçanlarında (17, 18, 45, 47, 51-53) HF-ə necə cavab verdiyini təsir göstərə bilər. BDNF-də yüksək yağlı pəhriz ilə bağlı yüksəkliklər VTA-ya mükafat geribildirimini təmin edə, dopamin ilə əlaqəli gen ifadəsində dəyişiklikləri daha da artırır.
Şəkil 8
Yüksək yağ (HF) pəhriz ΔFosB siçanında tənzimlənmiş mükafat sinyallerini normallaşdırır
Bu nəticələr mükafat həssaslığının molekulyar markerlərini müəyyənləşdirir və dopamin sisteminin uzunmüddətli tənzimlənməsinin fərdi bir xəstəliyə və obeziteye meylli ola biləcəyini göstərir. Bundan əlavə, bu məlumatlar mükəmməl sistemdə mərkəzləşə bilən şişmanlıq və digər pozğunluqların müalicəsində və qarşısının alınmasında potensial yeni terapevtik hədəfləri müəyyənləşdirmək üçün mühüm bir addımdır. Gələcəkdə bu sistemin HF dietinin aradan qaldırılmasına necə cavab verdiyini araşdırmaq, həmçinin mükafat və yüksək yağlı pəhriz ifrazına qarşı həssaslıqla bağlı hər hansı bir cinsi fərqliliyi araşdırmaq vacibdir.
Əlavə material
Supp. Metodlar
Görmək üçün bura vurun. (61K, doc)
Minnətdarlıq
Müəlliflər Cathy Steffenə heyvandarlıq və köçürmə ilə əlaqədar kömək üçün təşəkkür edirlər. Bu iş Pensilvaniya Diabet Mərkəzinin (DK019525) Universiteti və Milli Ruh Sağlamlığı İnstitutunun (R01 MH51399 və P50 MH66172) və Narkotik İstismar üzrə Milli İnstitutu (R01 DA07359) tərəfindən qrantla dəstəkləndi.
Dəyişikliklər
Maliyyə Açıklamaları: Bütün müəlliflər biyomedikal maliyyə maraqlarına və ya potensial münaqişələrə malik olmadığını bəyan edirlər.
References
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Həyat tərzi modifikasiyası və şişmanlıq üçün farmakoterapiya təsadüfi sınaq. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111-20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Obezitede nikotin mükafatını azaldır: insan və siçan arasında qarşılıqlı müqayisə. Psixofarmakologiya (Berl) 2005
3. Franken İH, Muris P. mükafat həssaslığı fərdi fərqlər sağlam qadınlarda qida fərqi və nisbi bədən çəkisi ilə bağlıdır. İştaha. 2005; 45 (2): 198-201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. Təbii mükafatların neyrokimyası: asılılıq verən dərmanlara aiddir. J Neurosci. 2002; 22 (9): 3306-11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Kronik yüksək dopaminli siçanlar bir yemək mükafatı üçün öyrənmədən, gücləndirilmiş motivasiya nümayiş etdirirlər. Nöropsikofarmakologiya. 2006; 31 (7): 1362-70. [PubMed]
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham, qarğıdalı yağını qidalandırır, sıçanda acumbens dopamini artırır. Am J Fiziol Regul Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236-9. [PubMed]
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. Doyurucu bir yemək ilə yemək, beyinin mükafat ilə əlaqəli sahələrində qidalandırıcı fəaliyyətə və c-Fos ifadəsinə səbəb olur. Neuroscience. 2005; 133 (1): 293-303. [PubMed]
8. Schroeder BE, Binzak JM, Kelley AE. Nikotin-ya da şokoladla əlaqəli kontekstilə əlaqələrə məruz qaldıqdan sonra prefrontal kortikal aktivliyin ümumi bir profilidir. Neuroscience. 2001; 105 (3): 535-45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: asılılıq üçün davamlı bir molekulyar keçid. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2001; 98 (20): 11042-6. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Pəhriz üstünlüyündə azalma, diaqnostikaya və qidalanma riskinə səbəb olur. Biol Psixiatriya. 2007; 61 (9): 1021-9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. Nucleus Accumbens-də dFosB Food-reinforced Instrumental Behavior and Motivation tənzimləyir. Neuroscience jurnalı. 2006; 26 (36): 9196-9204. [PubMed]
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Beyində induksiyalı, hədəf gen ifadəsi olan transgenik heyvanlar. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3): 495-503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Beşte deltaFosB transkripsiyon faktorunun ifadəsi kokain həssaslığını nəzarət edir. Təbiət. 1999; 401 (6750): 272-6. [PubMed]
14. Bale TL, Dorsa DM. Ventromedial hipotalamusda estrogenin oksitosin reseptor peyğəmbərinin ribonükleik turşusu ifrazına cinsi fərqləri və təsirləri. Endokrinoloji. 1995; 136 (1): 27-32. [PubMed]
15. Avena NM, Uzun KA, Hoebel BG. Şəkərə bağlı siçovulların şəkər məhrumiyyətindən sonra şəkər üçün cavabdehliyi artır. Fiziol Behav. 2005; 84 (3): 359-62. [PubMed]
16. MJ, Franzblau EB, Kelley AE olacaq. Nucleus accumbens mu-opioids, yayılmış beyin şəbəkəsinin aktivasiyası vasitəsilə yüksək yağlı bir pəhriz qəbulunu tənzimləyir. J Neurosci. 2003; 23 (7): 2882-8. [PubMed]
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Ventral tegmental sahədə sinxronlaşdırma işi, nüvə akumbenslərinin opioid stimulyasiyasına səbəb olan yüksək yağ iştahı üçün tələb olunur. J Neurosci. 2007; 27 (41): 11075-82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Midbrain dopamin nöronlarında Leptin reseptoru siqnalları qidalanma tənzimləyir. Neuron. 2006; 51 (6): 801-10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosB'nin striatal hüceyrə tipli xüsusi ov ekspresyonu kokain üçün təşviq artırır. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2488-93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB üçün morfin hərəkətində nüvəli akumbens üçün mühüm rol. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205-11. [PubMed]
21. D1 və D2 dopamin retseptorları içərisində nüvə akumbensində orta kəllə neyronları olan kokain-dendritik orqanik formasiyanın meydana gəlməsi ilə Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2006; 103 (9): 3399-404. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Maddə asılılığının genetik analizi: cAMP reaksiya elementinin bağlanma proteininin rolu. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104-10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Narkomaniyanın molekulyar mexanizmləri. Neurofarmakologiya. 2004; 47 1: 24-32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. CREB Braində Binding və Fəaliyyət: Elektrokonvulsif Nöbetle Bölgesel Özgüllük ve İndüksiyon. Biol Psixiatriya. 2007
25. Qumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Kromatin remodeling, striatumda kokainə səbəb olan plastisitənin əsas mexanizmidir. Neuron. 2005; 48 (2): 303-14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Self DW. Kokain istifadə ilə nüvəli akumbenslərdə dinamik BDNF fəaliyyəti özünü idarə etmə və relapsını artırır. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029-37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32, bir çox narkotik istifadəsinin hərəkətlərinə vasitəçilik edir. Aaps J. 2005; 7 (2): E353-60. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Sümüklərdəki gen ifadəsi fərqlilikləri metamfetamin həssaslığı üçün fərqlənir. Mamm Genomu. 2005; 16 (5): 291-305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT və CDK5 / p35 in vitro orta ölçülü spiny nöronlarda DARPP-32'in beyin törəməsi nörotrofik amil induksiyasına vasitəçilik edir. J Biol Chem. 2007; 282 (10): 7352-9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Cdk5-in narkotik maddə istismarı və plastisiysində rolu. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335-44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Teylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Kronik kronik maruziyetin təsiri nöronal protein Cdk5 tərəfindən tənzimlənir. Təbiət. 2001; 410 (6826): 376-80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins Trk və p75Lntr reseptorları vasitəsilə siçan mesencephalic nöronlardan dopaminin sərbəstliyini stimullaşdırır. J Biol Chem. 1996; 271 (35): 21100-7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Mezolimbik dopamin yolunda BDNF-nin əsas məğlubiyyət stressində rolu. Elm. 2006; 311 (5762): 864-8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr Depresyonda mesolimbik dopamin ödül devresi. Biol Psixiatriya. 2006; 59 (12): 1151-9. [PubMed]
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Somatodendritik dopamin inhibitor postsinaptik cərəyanların Kappa opioid inhibisyonu. J Neurophysiol. 2007; 97 (1): 883-91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Fischer və Lewis siçovullarında beynin dynorphin və enkephalin sistemləri: morfin toleransının və çəkilmənin təsirləri. Brain Res. 1995; 683 (1): 25-35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Prodynorphin və proenkephalin sistemlərində spirt-üstünlük (AA) və alkoqoldan qaçınmaq (ANA) sıçanları arasında fərqlər. Alcohol Clin Exp Res. 1994; 18 (5): 1272-9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Kokain, dopamin və endogen opioid sistemi. J. Addict Dis. 1996; 15 (4): 73-96. [PubMed]
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. CREB-in bir çox üzləri. Trends Neurosci. 2005; 28 (8): 436-45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamin D1 reseptorları SerxNUMX-NR897-da NMDA reseptorunun fosforilasyonu ilə CREB fosforilasiyasına vasitəçilik edirlər. J Neurochem. 1; 2003 (87): 4-922. [PubMed]
41. Self DW. Mezolimbik dopamin sistemində neyrokontinasiyalarla dərman alma və davranış davranışlarının tənzimlənməsi. Neurofarmakologiya. 2004; 47 1: 242-55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfin və kokain, dopaminerjik beyin mükafat bölgələrində tirosin hidroksilaza ümumi xroniki hərəkətlər göstərir. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344-7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Şaham Y, Ümid BT. Sıçanlarda kokainin özünü idarə etməsindən məcburi istifadənin ilk 90 günündə akumbens və ventral tegmental sahədə molekulyar nörodezmlər. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604-13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Şaham Y, Morales M. Sıçanın mesolimbik və nigrostriatal dopamin yollarında tirosin hidroksilaz və dopamin nəqli səviyyələrində metamfetamin özünü idarəetmənin təsiri. Psixofarmakologiya (Berl) 2006; 185 (4): 505-13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Mançon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Mezoaccumbens dopamin yolunun leptin tənzimlənməsi. Neuron. 2006; 51 (6): 811-22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, İkegami D, Kürahashi K, Suzuki T. Ekstrasellüler dopamin səviyyəsinin orexin səbəbli yüksəlişində protein kinaz C'nin təsiri və onun təsiri. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537-45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Mezolimbik dopamin yolağının aktivləşdirilməsində orexinergik sistemlərin birbaşa iştirakı və morfin ilə əlaqəli davranışlar. J Neurosci. 2006; 26 (2): 398-405. [PubMed]
48. VTA-da Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A kainatın sinaptik plastisiyalılığı və davranış həssaslığının induksiyası üçün vacibdir. Neuron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Oreksin-A və neuropeptid Y-də dəyişikliklər açılmış və yüksək yağlı pəhriz qidalandırılmış siçovulların hipotalamusunda ifadə edilir. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295-302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Qida qəbulunu tənzimləyən peptidlər: hipertrigliseridemiya halları zamanı orexin geninin ifadəsi artır. Am J Fiziol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454-65. [PubMed]
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Qidalanma əmsalını tənzimləyən peptidlər: iştahsızlıq gətirən akumbens manipulyasiyası hipotalamik orexin nöronları aktivləşdirir və POMC nöronlarını inhibə edir. Am J Fiziol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436-44. [PubMed]
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. GECAA reseptor vasitəsi ilə nükleus akumbens qabığının inhibisyonu ilə orexin / hypocretin ehtiva hipotalamik nöronların subpopulyasiyasının aktivləşdirilməsi, lakin yeni bir mühitə məruz qalmamaqla deyil. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376-86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Xarici mükafat axtarışında lateral hipotalamik orexin nöronların rolu. Təbiət. 2005; 437 (7058): 556-9. [PubMed]
;