Synapse. 2008 May;62(5):358-69.
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ.
mənbə
Psixiatriya Bölümü, Texas Southwestern Medical Center Universiteti, Dallas, Texas 75390-9070, ABŞ.
mücərrəd
Transkripsiya faktoru DeltaFosB kronik stimulaya cavab olaraq beynində birikir və davam edir. Bu sui-istifadəyə xroniki məruz qaldıqdan sonra bu birikim dorsal striatum (caudate / putamen) və nucleus accumbens də daxil olmaqla striatal bölgələrdə ən qərbli blot tərəfindən göstərilmişdir. Bu tədqiqatda kronik müalicə sonrası kemirgen beyin boyunca DeltaFosB'nin daha çox anatomik dəqiqliyi ilə təyin etmək üçün immunohistokimyadan istifadə etdik. Kokain, morfin və nikotinlə əlaqəli əvvəlki tədqiqatlara əlavə iki su əlavə etanol, etanol və Delta (9) -tetrahidrokannabinol (Delta (9) -sari, esrardakı aktiv maddə) aiddir. Burada dördüncü sui-istifadə, kokain, morfin, etanol və Delta (9) -THC-nin hər birinin kronik, lakin kəskin deyil ki, göstərir ki, çekirdek və kabuk alt bölgələrində fərqli nümunələr olsa da, DeltaFosB-ni nüvəli akumbenslərdə gücləndirir bu nüvənin müxtəlif dərmanları üçün aydın oldu. Dərmanlar həmçinin dorsal striatumda DeltaFosB induksiyası dərəcəsində fərqləndilər. Bundan əlavə, bütün dörd dərman kokain və etanol ilə müşahidə olunan ən böyük təsirləri olan Prefrontal korteksdə DeltaFosB-yə gətirib çıxardı və bütün dərmanlar amigdalada az miqdarda DeltaFosB-yə səbəb oldu. Bundan əlavə, bütün dərmanlar hipokampusda DeltaFosB-yə səbəb oldu və etanol istisna olmaqla, bu induksiyonun əksəriyyəti dentatda görüldü. DeltaFosB indüksiyasiyasının aşağı səviyyələri müəyyən bir dərman müalicəsinə cavab olaraq digər beyin bölgələrində görülmüşdür. Bu tapıntılar DeltaFosB nin nüvəli akumbensdə indüksiyasiyasının faktiki olaraq bütün sui-istifadələrin ümumi bir hərəkətidir və hər bir dərman DeltaFosB-nun beynə bölgəyə xüsusi bir şəkildə gətirdiyini göstərir.
GİRİŞ
Kokainə kəskin maruz qalma striatal bölgələrdə c-Fos və FosB transqeksiya faktorlarının (Graybiel və digərləri, 1990; Hope və s., 1992; Young və digərləri, 1991) müvəqqəti indüksiyasına səbəb olur, FosB'nin stabilize edilmiş izoformlarının yığılmasında, fosB geninin kəsilmiş bir parçası variantı (Hiroi və s., 1997; Hope və digərləri, 1994; Moratalla və s., 1996; Nye və s., 1995). İndeks olunduqdan sonra, ΔFosB bu bölgələrdə bir neçə həftə ərzində proteinin qeyri-adi sabitliyinə görə davam edir. Daha son araşdırmalar göstərir ki, ΔFosB stabilliyi tam uzunluqlu FosB və bütün digər Fos ailə proteinləri (Carle və s., 2007) C-termini və FF-nin fosforiliyindən N -terminus (Ulery və digərləri, 2006). Əksinə, kronik dərman administrasiyası fosB premRNA'nın spektrini ΔfosB mRNA'ya və ya mRNA sabitliyinə (Alibhai et al., 2007) çevirir, bu isə ΔFosB proteininin yığılmasının əmələ gələn əsas mexanizm olduğunu göstərir.
Artan sübutlar, striatal bölgələrdə, xüsusilə də ventral striatum və ya nüvəli akumbenslərdə ΔFosB induksiyası asılılığın vasitəçiliyində vacibdir. Bu bölgələrdə ΔFosB-in aşındırıcı bitransjenik siçanlarda və ya viral mediatlı gen köçürməsi vasitəsilə aşkara çıxarılması heyvanın kokain və morfinin lokomotor-aktivləşdirici və mükəmməl təsirlərinə həssaslığını artırır, ΔFosB-nin (Δc- Jun) əks təsirlərə malikdir (Kelz və digərləri, 1999; McClung və Nestler, 2003; Peakman və s., 2003; Zachariou və digərləri, 2006). ΔFosB ov ekspresyonu da kokain üçün təşviq motivasiyasını artıracaqdır (Colby və s., 2003). Bundan başqa, ΔFosB adolesan heyvanlarda kokain tərəfindən üstünlük təşkil edir və bu da onların bağımlılığına artan zəifliyə kömək edə bilər (Ehrlich və s., 2002).
Bu sübuta baxmayaraq, mühüm suallar qalır. Amfetamin, metamfetamin, morfin, nikotin və fensiklidin kimi bir sıra digər narkotik maddələrin xroniki şəkildə tətbiq olunmasına baxmayaraq striatal bölgələrdə ΔFosB'yi (Atkins və s., 1999; Ehrlich et al., 2002; McDaid et al. 2006b, Muller və Unterwald, 2005, Nye və s., 1995; Nye və Nestler, 1996, Pich və s. 1997; Zachariou et al., 2006), etanol və Δ9-tetrahidrokannabinol (Δ9-THC, esrardakı aktiv tərkib). İki əvvəlki tədqiqatlar göstərir ki, FosB kimi immunoreaktivlik etanolun çıxarılması zamanı hipokampusa və bəzi digər beyin sahələrinə səbəb olur, lakin bu immunoreaktivliyin ΔFosB və ya tam uzunluqlu FosB (Bachtell və s., 1999; Beckmann və s., 1997 ). Etanolun tədqiqi və (Δ9-THC xüsusilə vacibdir, çünki bu gün ABŞ-da ən çox istifadə olunan ən çox istifadə olunan narkotiklərdən ikisi (SAMHSA, 2005). Bundan əlavə, istifadənin stimulant və ya opiate dərmanlarının ΔFosB nüvə akumbens və dorsal striatumdan əlavə, prefrontal korteks, amigdala, ventral pallidum, ventral tegmental sahə və hipokampus (Liu və s., 2007; McDaid et al., 2006a, 2006b; Nye və digərləri, 1995, Perrotti və s., 2005), xroniki narkotik riskinə cavab olaraq beyində ΔFosB indüksiyasiyasının sistematik bir təsvir edilməməsi.
Bu tədqiqatın məqsədi kosmik, morfin, etanol və Δ9-THC adlı dörd prototipik dərman preparatının xroniki tətbiqindən sonra beyin boyunca ΔFosB induksiyası üçün immunohistokimyəvi prosedurlardan istifadə etmək idi.
MATERİALLAR VƏ METODLAR
Heyvanlar
Bütün təcrübələr kişi Sprague Dawley sıçanları (Charles River, Kingston, 250-275 g) istifadə edərək aparılmışdır. Heyvanlar hər iki qəfəsdə yerləşdirilib, təcrübələrdən bir həftə əvvəl hayvan otaq şəraitinə alışdılar. Yeməyə və suya pulsuz giriş imkanı var idi. Ekspertlər Dallas Texas Southwestern Medical Center Universitetində İnstitusional Heyvan Xidməti və İstifadə Komitəsi tərəfindən nəzərdən keçirilmiş protokollara əsasən aparılmışdır.
Drug müalicəsi
Xroniki kokain
6 gündə 15% salin ildə həll edilən siçovullar (n = 0.9 qrupu) gündə iki dəfə kokain hidroxlorid (14 mg / kg ip, Narkotik istismar üzrə Milli İnstitutu, Bethesda, MD) qəbul etmişdir. Control siçovulları (hər qrupda n = 6) eyni xroniki prosedura əsasən 0.9% salinini yivli qəbul etmişdir. Bütün inyeksiya heyvanların ev kafeslərində verildi. Bu müalicə rejiminin möhkəm davranış və biyokimyəvi uyğunlaşmalar meydana gətirəcəyi göstərildi (bax Hope et al., 1994).
Kokain özünü idarə etmə
Heyvanlar (hər qrupda n = 6) bir 45 məxrəc sucroz pelleti üçün qolu basmaq üçün təlim keçmişdir. Bu təlimdən sonra heyvanlar əvvəllər təsvir edilən adətən libitum və pentobarbital anesteziya ilə cərrahi olaraq implantasiya olundular (Sutton və ark., 2000). Xroniki borular kateter (Silastik boru, Green Rubber, Woburn, MA). Kateter, kranioplastik sementə yerləşdirilən və Marlex cərrahi mesh (Bard, Cranston, RI) ilə təmin edilmiş bir 22 gauge cannula (Plastics One, Roanoke, VA) vasitəsilə arxadan çıxmaq üçün subkütan keçdi. Self-idarəetmə, heyvanın ev qəfəsindən fərqli olan və fərqli bir otaqda yerləşən, operativ test otaqlarında (Med Associates, St Alban, VT) aparılıb. Hər bir kamera bir Razel Model A pompası (Stamford, CT) və Teflon boru ilə bir maye döndərmə (Instech, Plymouth Meeting, PA) bağlı bir 10 ml şüşə şprisindən ibarət olan bir infüzyon pompa komplekti ilə təchiz edilmiş səs-küylü bir kabinə yerləşdirildi . Tygon borusu, heyvanın katet qurğusuna dönməyi bağladı və bir metal yayla əhatə edildi. Hər bir əməliyyat kamerasında iki qol (4 × 2 cm2, yerdən 2 sm məsafədə) yerləşir. Özünü idarə etmə təlimində, aktiv kolda bir 20 g qolu mətbuatı bir 0.5-nin infuziya aralığında bir kokain iv infüzyonu (0.1 ml infuziya başına 5 mg / kg) təslim etdi. İnfüzyonun ardından ev nişanı söndürülmüş və cavab verən heç bir proqramlaşdırılmış nəticələr çıxarılmayan bir 10 vaxtından sonra həyata keçirilmişdir. Ev işıqlarının işıqlandırılması, vaxtın bitmə müddətinin sona çatdığını göstərdi. Qeyri-aktiv qolu üzərində dayaq mətbuatı heç bir nəticə vermədi. 14 gündəlik 4-h test seanslarında (6 gün / həftə) qaranlıq dövründə heyvanlar öz-özünə tətbiq olunan kokain; Gündəlik gündəlik suyun miqdarı ~ 50 mg / kq idi. Bir qrup heyvandarlıq heyvanları özlərini idarə edən həmkarları narkotik qəbul etdikləri zaman yalnız eyni anda kokain infüzyonları almışlar. Şoranlı heyvanların bir qrupu salin infüzyonları üçün manivelere basmağa icazə verildi. Bu müalicə rejiminin möhkəm davranış və biyokimyəvi uyğunlaşmalar meydana gətirəcəyi göstərildi (bax Sutton və ark., 2000).
Xroniki morfin
Morphine peletler (hər biri 75 mq morfin bazası, Narkotik İstismar üzrə Milli İnstitut) gündəlik 5 gün (n = 6) üçün bir dəfə imp dizildi. Control sıçanları 5 ardıcıl gün üçün şam əməliyyatı keçirdi (n = 6). Bu müalicə rejiminin möhkəm davranış və biyokimyəvi uyğunlaşmalar meydana gətirəcəyi göstərilir (bax Nye və Nestler, 1996).
Δ9-THC
Δ9-THC bir 1: 1: etanol, emulphor və saline 18 həlli ilə həll edilmişdir. Siçanlar gündəlik olaraq Δ9-THC, ya da 15 gün üçün vasitə ilə subkutan olaraq iki dəfə enjekte edilmişdir. Δ9-THC nin başlanğıc doza 10 mg / kq idi və doza hər üç gündə 160 mg / kq-nun yekun doza qədər artırıldı. Biz Δ9-THC üçün siçanlardan istifadə etdik, çünki bu müalicə rejiminin bu növdəki güclü davranış və biokimyəvi uyğunlaşma (Sim-Selley və Martin, 2002) meydana gətirdiyi göstərilir.
Etanol
Etanol (95% səhmdardan; Aaper, Shelbyville, KY) qidalanma ilə tamamlanmış maye pəhriz vasitəsi ilə tətbiq edilmişdir. Bu standart dietan etanol prosedurası 7 gün üçün laktalbumin / dekstroz əsaslı dietdə 17% (ağırlıq / həcm) (et / həcm) etanolun tətbiq edilməsini nəzərdə tutur, zamanı siçovulların ümumiyyətlə 8-12 g / kg / gündə etanol tüketir və 200 mg / dl (Criswell və Breese, 1993, Frye və s., 1981, Knapp və s., 1998) qədər qan etanol səviyyələrinə nail olmaq. Pəhriz qidalanma ilə tamamlandı (vitaminlər, minerallar və ICN Research Diets-dən əldə edilən digər qidalar və etanolla işlənmiş siçovulların və nəzarət siçovulların arasında kalorili olaraq balanslaşdırılmış (dekstroz ilə) konsentrasiyalarda idi. Əvvəllər etanol dietlə işlənmiş siçovulların ortalama qəbuluna bərabər olan pəhriz həcmi əvvəllər etanol məruz qalma dövründə (göstərilməyib) asanlıqla ağırlıq qazanmışdır.Bu müalicə rejiminin sağlam davranış və biokimyəvi uyğunlaşmalar meydana gətirəcəyi göstərilmişdir (bax Knapp və s., 1998).
İmmünohistokimya
24 ml 200 mM fosfat tamponlu salin (PBS) ilə xloral hidratla (Sigma, Sent-Luis, MO) dərin anesteziya verildi və 10 ml 400% paraformaldehid ilə PBS. Xainum 4% paraformaldehiddə 4 ° C səviyyəsində bir gecədə qaldırıldı və saxlanıldı. Ertəsi gün səhər saatlarında, beyinlər cryoprotection üçün 4 M PBS həllində bir 20% gliserolə köçürüldü. Coronal bölmələr (0.1 μm) dondurma mikrotomunda (Leica, Bannockburn, IL) kəsilmiş və sonra immunohistokimya üçün işlənmişdir. İki müxtəlif dovşan poliklonal antiserası istifadə edərək, ΔFosB və FosB immunoreaktiviteleri aşkar edilmişdir. FosB (aa 40-317) içində olmayan FosB C-termininə qarşı qaldırılan bir antiserum tam uzunluğu FosB'yi tanıyır, lakin ΔFosB (Perrotti və s., 334) deyil. Digər antiserum, bir "pan-FosB" antikoru daxili bir FosB bölgəsinə qarşı qaldırıldı və həm FosB, həm də FosB (sc-2004, Santa Cruz Biotexnologiya, Santa Cruz, CA) ni tanıyır.
FosB benzeri boyama avidin-biotin peroksidaz kompleksi üsulu ilə aşkar edilmişdir. Bu prosedur üçün beyin bölmələri ilk növbədə endogen peroksidazları məhv etmək üçün 0.3% H2O2 ilə müalicə olundular və 1-də 0.3-də xronometrik xronometriyədə xronometrik xronometriyədə Triton X-100 və 3% normal keçi serumlarında inkluzedildi. Doku bölmələri daha sonra 1% normal keçi serumu, 0.3% Triton X-100 və pan-FosB antikoru (1: 5000) içərisində oda temperaturu boyunca bir gün inkübe edilmişdir. 1.5-da 1 h üçün yerləşdirilən bölmələr yuyulurdu və 200-də 1.5 h üçün yerləşdirildi: 1 Elidin dəstindən avidin-biotin kompleksinin dilimasiyası (Vector Laboratories, Burlingame, CA). Peroksidaz aktivliyi diaminobenzidin (Vektor laboratoriyaları) ilə reaksiyaya girərək görüntülendi. FosB immunoreaktiv hüceyrələrin sayını hesablamaq üçün kodlu slaydlar istifadə edilmişdir. Kod, fərdi eksperimentin təhlili tamamlanana qədər sınıq edilməmişdir.
Fosb kimi immunoreaktivlik aşkar edildikdən sonra, indeksləşdirilmiş proteinin həqiqətən olub olmadığını müəyyən etmək üçün FosB-spesifik (C-terminus; 1: 500) antikor və pan-FosB antikoru (sc-48; 1: 200) ilə cüt floresan etiketləmə aparıldı ΔFosB. Yayınlanmış bir protokol istifadə edilmişdir (Perrotti və digərləri, 2005). Proteinlər CY2 və CY3 fluorofor-etiketli ikincil antikorlar (Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) istifadə edərək görüntülenmiştir. Protein ifadəsinin lokalizasiyası konfokal mikroskopda (Axiovert 100, 510, 488 və 543, Zeiss, Thornwood, NY META emissiya dalğaları ilə LSM 633) həyata keçirildi. Buradakı şəkillər bu sistemdə tutulmuş və Z-düzəldən bir 1 μm qalın hissəsini təmsil etmişdir.
Statistik təhlil
ΔFosB + hüceyrələrinin əhəmiyyətli dərəcədə induksiyası t-testlər və ya birtərəfli ANOVA-lardan sonra New hook-Keuls testi ilə post-hoc analiz olaraq qiymətləndirilmişdir. Bütün analizlər çoxsaylı müqayisə üçün düzəldilmişdir. Məlumat orta ± SEM olaraq ifadə edilir. Statistik əhəmiyyət P <0.05 olaraq təyin olundu.
NƏTİCƏLƏR
Beynində ΔFosB induksiyası
Müxtəlif növ narkotik istifadəsinə cavab olaraq beyində ΔFosB induksiyasının nümunələrini birbaşa müqayisə etmək üçün dörd prototipik dərman, kokain, morfin, etanol və Δ9-THC idarəsindəyik və son dərmana məruz qalmasından sonra ΔFosB ifadə 18-24 h . Xroniki dərmana məruz qalma davranış və biokimyəvi nümunələri çıxarmaq üçün ədəbiyyatda nümayiş etdirilən standart dərman müalicə rejimlərindən istifadə etdik ("Materiallar və metodlar" bölməsinə baxın). ΔFosB səviyyələri immünohistokimya ilə ölçüldü, dərman və mükafat və bağımlılığa səbəb olan midbrain və ön beyin bölgələrinə diqqət yetirildi. ΔFosB induksiyonunun bu gözəl xəritəsi ΔFosB və tam uzunluqlu FosB-ni tanıyan bir pan-FosB antikoru ilə həyata keçirilmişdir. Lakin, bilirik ki, hər bir dərman üçün immunoreaktivliyin tamamilə yalnız ΔFosB-yə bağlıdır, çünki tam uzunluqlu FosB üçün seçici antikor (bax Maddələr və metodlar bölməsi) müsbət hüceyrələri aşkar edib. Üstəlik, pan-FosB antikoru tərəfindən təsbit edilən bütün immunoreaktivlik fosb knockout siçanlarında itirildi, bu fosb gen məhsulları üçün bu antikorun spesifikliyini digər Fos ailə proteinlərindən fərqli olaraq təsdiqləyir. Bu nəzarətlər Şəkil 1-də kokain üçün göstərilmişdir, lakin bütün digər dərmanlar üçün də göstərilmişdir (göstərilməyib). Bu tapıntılar təəccüblü deyil, çünki bu tədqiqatda istifadə edilən 18-24 h vaxt nöqtəsində, son dərman vasitəsi ilə əmələ gələn tam uzunluğunda FosB-nin bütün vahidlərdən daha sabit olaraq ΔFosB-ni tərk etməsi gözlənilir, çünki bu, yalnız fosB genidir qalan məhsul (bax Chen və s., 1995; Hope et al., 1994).
Əncir 1
Kəskin və ya xroniki kokain və müalicə siçanı ilə müalicə olunan heyvanların nüvə hüceyrələri vasitəsilə anti-FosB (pan-FosB, Santa-Cruz) və ya anti-FosB (C-terminus) antikorundan istifadə edərək cüt etiketli floresan immunohistokimya. Pan-FosB antikor ləkələri (daha çox…)
Bu tədqiqatın ümumi nəticələrinin xülasəsi Cədvəl 1-də verilmişdir. Dörd dərmanın hər biri əhəmiyyətli dərəcədə hər bir dərman üçün görülən induksiya nümunələri ilə birlikdə beyində ΔFosB'yi əhəmiyyətli dərəcədə azalda tapmışdır.
Cədvəl I
Fövqəladə hallarda narkotik maddələri ilə ΔFosB'nin beynin indeksasiyası
Striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyası
ΔFosB'nin ən dramatik induksiyası dörd dərmanın proteini meydana gətirdiyi nüvəli accumbens və dorsal striatumda (caudate / putamen) görüldü (Şəkil 2-şəkil 4). Bu, Şəkil 5-da kəmiyyət olaraq göstərilir. ΔFosB induksiyası dərmanların əksəriyyəti üçün nüvədə görülən marjinal şəkildə daha çox induksiya ilə həm çekirdek akumbenslərinin əsas və qatı alt hissələrində görülmüşdür. Dərmanların əksəriyyəti üçün dorsal striatumda ΔFosB-nin sağlam induksiyası da müşahidə edilmişdir. Bir istisna Δ9-THC idi, bu, güclü tendensiyalara baxmayaraq, nüvədə acumbens qabığında və ya dorsal striatumda ΔFosB-ni əhəmiyyətli dərəcədə indiyə gətirməmişdir (bax: Şəkil 4; Maraqlıdır ki, etanol digər müalicələrlə müqayisədə, nüvəli akumbens nüvəsində ΔFosB ən böyük induksiyasını istehsal etmişdir.
Əncir 2
Siçovul nüvəsində ΔFosB induksiyası bir nəzarət siçanında (A) və ya etanol (B), morfin (C) və ya kokain (D) ilə xroniki müalicədən sonra. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyələri, pan-FosB antikor istifadə edərək immunohistokimya ilə analiz edilmişdir. (daha çox ...)
Əncir 4
Xroniki Δ9-THC müalicəsindən sonra siçan beynində ΔFosB induksiyası. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyələri, nəzarətdə olan bir pan-FosB antikoru (A, C, E) və xroniki Δ9-THC (B, D, F) heyvanlarından istifadə edərək immunohistokimya ilə analiz edildi. Qeyd (daha çox ...)
Əncir 5
Xroniki morfin, Δ9-THC, etanol və kokain müalicələrindən sonra striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyasının miqdarı. Çubuq qrafiklər nəzarət heyvanlarında və xroniki morfinə məruz qalan heyvanlarda ΔFosB + hüceyrələrinin orta sayını göstərir (daha çox…)
ΔFosB-nun iltihab əleyhinə məcburi dərmana məruz qalması
Striatal bölgələrdə ΔFosB'nin dramatik induksiyasını nəzərə alaraq, biz bu bölgələrdə protein hazırlamaq üçün bir preparatın qabiliyyətinin istəkli və məcburi dərmanlara məruz qalma funksiyası kimi fərqləndiyini müəyyənləşdirməyə maraqlıyıq. Bu suala cavab vermək üçün 14 gün üçün özünü idarə edən kokain qrupunun bir qrupunu araşdırdıq və bu heyvanlarda ΔFosB induksiyasını kokain və ya yalnız salin almış olanları qəbul edənlərə müqayisə etdik. Şəkil 6-də göstərildiyi kimi, öz-özünə tətbiq olunan kokain, özünü idarə olunan və ya çəkilməyən tətbiq olunan narkotiklə müqayisədə bərabər dərəcədə indüksiyaya malik olan nüvəli accumbens (hər iki çekirdek və kabuk alt bölgələri) və dorsal striatumda ΔFosB'yi möhkəmləndirmişdir. Bu iki heyvan qrupunda görülən ΔFosB induksiyasının dərəcəsi, ehtimal ki, özünü idarəetmə təcrübəsində çox miqdarda kokain sayəsində (gündəlik dozalar: 5 mg / kg iv və 50 mg / kq ip).
Əncir 6
Xroniki kokainin öz-özünə tətbiqindən sonra striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyasının miqdarı. Çubuq qrafiklər, nəzarət heyvanlarında və kokain müalicəsinə məruz qalan heyvanlarda ortada ΔFosB + hüceyrələrinin sayını və daha çoxunu göstərir (daha çox…)
Digər beyin bölgələrində ΔFosB induksiyası
Striatal kompleksin xaricində, bir sıra digər beyin sahələrində ΔFosB-yə səbəb olan sui-istifadə dərmanlarının xroniki tətbiqi (Cədvəl I). Cədvəl I-də göstərilən məlumatların yarımkəmiyyət olduğunu və striatal bölgələr üçün yerinə yetirildiyi kimi ΔFosB induksiyasının dəqiq kəmiyyətini təmsil etmədiyini vurğulamalıyıq (Şəkil 5 və Şəkil 6). Buna baxmayaraq, bu qeyri-striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyasından əminik: ΔFosB, bazal şərtlərdə bu bölgələrdə praktik olaraq müəyyən edilə bilməz, belə ki, xroniki dərmanlara məruz qaldıqdan sonra ΔFosB-nin ardıcıl aşkarlanması statistik cəhətdən əhəmiyyətlidir (P <0.05 x -2).
Bütün dərman vasitələrində möhkəm induksiya prefrontal korteksdə, morfin və etanol ilə ən çox qatdakı ən güclü təsiri (Şəkil 4 və 7) yaradır. Dörd dərmanların hamısı stari terminalis (BNST) yatağı nüvəsində, ön komissarın posterior uzaq hissəsinin interaktiyal nüvəsində (IPAC) və amigdala kompleksi boyunca (Şəkil 8) aşağı ΔFosB induksiyasına səbəb olmuşdur. Xüsusi dərmanlara xüsusi əlavə təsirlər də müşahidə edildi. Kokain və etanol deyil, morfin və ya 9-THC, orta septuma aşağı səviyyədə ΔFosB səviyyəsinə gətirib çıxardı, medial septumda indüksiya görülməmişdir. Bütün dərmanlar hipokampusda ΔFosB-yə səbəb oldu və etanol istisna olmaqla, bu indüksiyonun əksəriyyəti dentat girusunda (Cədvəl I və Şəkil 9) görüldü. Bunun əvəzinə etanol dentat girusunda çox az ΔFosB meydana gətirdi və bunun əvəzinə CA3-CA1 alt sahələrində yüksək səviyyədə protein əmələ gətirdi. Kokain, morfin və etanol, lakin Δ9-THC, periaqueduktal bozda ΔFosB-in aşağı səviyyədə indüksiyasına gətirib çıxardı, lakin yalnız substansiya nigrasında heç bir induksiya görülməmiş ventral tegmental sahədə yalnız kokain səbəb olur ΔFosB (bax: Cədvəl 1 ).
Əncir 7
Prefrontal korteksdə bir nəzarət siçanında (A) və ya etanol (B), morfin (C) və ya kokain (D) ilə xroniki müalicədən sonra ΔFosB induksiyası. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyələri, pan-FosB antikor istifadə edərək immunohistokimya ilə analiz edilmişdir. Etiketləmə (daha çox…)
Əncir 8
Xroniki etanol (B), morfin (C) və ya kokain (D) müalicələri verilən siçovullarda və ya nəzarət siçovulunun amigdalasının bazal lateral və mərkəzi medial nüvələrində ΔFosB induksiyası. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyəsi immunohistokimya tərəfindən analiz edilmişdir (davamı…)
Əncir 9
Xroniki etanol (B), morfin (C) və ya kokain (D) müalicəsi verilən siçovullarda və ya nəzarət siçovulunun hipokampusunda ΔFosB induksiyası. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyələri, pan-FosB antikor istifadə edərək immunohistokimya ilə analiz edilmişdir. Etiketləmə (daha çox…)
MÜZAKİRƏ
Çoxsaylı araşdırmalar göstərir ki, kokain, amfetamin, metamfetamin, morfin, nikotin və feniksididin də daxil olmaqla bir neçə növ narkotik maddənin xroniki tətbiqi nüvəli accumbens və dorsal striatumda transkripsiya faktoru, ΔFosB (istinadlar üçün Giriş bölməsinə baxın, McClung və s., 2004, Nestler və s., 2001). Striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyası, təkərli davranış kimi təbii mükafatların kronik istehlakından sonra da müşahidə edilmişdir (Werme və ark., 2002). Bundan əlavə, prefrontal korteks, amigdala, ventral pallidum, ventral tegmental sahə və hipokampus (Liu et al., 2007; McDaid və digərləri, 2006a, 2006b; Nye və s., 1996; Perrotti və s., 2005), bu narkotik maddənin bəzilarına cavab olaraq, heç bir zaman beyində ΔFosB dərmanının indüksiyasını sistematik bir şəkildə xəritələşdirməmişdir. Bundan əlavə, çox sui-istifadənin istintaqına baxmayaraq, ən çox sui-istifadə olunan maddələrdən, etanoldan və Δ9-THC-dən ΔFosB-in istifadəsi qabiliyyətinə görə araşdırılmamışdır. Bu tədqiqatın məqsədi kokain, morfin, etanol və Δ9-THC adlı dörd prototipik narkotik maddələrin xroniki tətbiqinə cavab olaraq, beyində ΔFosB'nin ilkin Xəritəçəkmə aparmaqdır.
Bizim tədqiqatımızın əsas nəticələri etanol və Δ9-THC, digər sui-istifadə kimi narkotiklərdir, ΔFosB-nin yüksək səviyyəli striatal kompleksi içərisində geniş yayılmasına səbəb olur. Bu nəticələr daha sonra bu bölgələrdə ΔFosB induksiyasını qurmaqda olan bütün narkotik maddələrin ümumi, (McClung və s., 2004). Striatal kompleks daxilində induksiya nümunəsi müxtəlif dərmanlar üçün bir qədər fərqləndi. Nüvə accumbens nüvəsində bütün güclü səbəb olan ΔFosB, nüvə accumbens qabığında və dorsal striatumda Δ9-THC-də əhəmiyyətli dərəcədə indükləmiş ΔFosB istisna olmaqla, bütün dərmanlar istisna olmaqla, Δ9-THC üçün də oxşar təsirlər meydana gətirməli idi bu sonuncu bölgələr. Nüvə acumbens nüvəsi və qabığı əhəmiyyətli beyin mükafat bölgələridir və bu, sui-istifadələrin dərman vasitələrinin mükafatlandırıcı hərəkətlərinə kritik vasitəçilər olaraq göstərilmişdir. Eyni şəkildə, dorsal striatum narkotik istifadəsinin kompulsif və ya vərdiş təbiətinə aiddir (Vanderschuren və s., 2005). Həqiqətən, bu bölgələrdə ΔFosB'nin indüksiyası kokain və morfinə mükafatlandırıcı cavabları artıracaq və təkər axan davranış və ərzaq alışı kimi təbii mükafatlara cavabların artmasına gətirib çıxardı (Colby və s., 2003; Kelz və digərləri, 1999; Olausson et al., 2006; Peakman et al., 2003; Werme et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Bu bölgələrdə ΔFosB indüksiyasiyasının digər bədxassəli sui-istifadələrin təsirli təsirlərinə qarşı fərdin həssaslığında oxşar funksional adaptasiya olunmasına vasitəçilik etmək üçün əlavə iş aparılması lazımdır.
Striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyası preparatın istifadəsinin bir funksiyası deyil. Beləliklə, biz göstərirdik ki, kokainin özünü idarəsi dərmanın bərabər, iltihab edilən inyeksiya qəbul etdiyi heyvanlarda görüldüyü kimi, nüvəsiz acumbens və dorsal striatumda eyni dərəcədə ΔFosB səviyyəsinə gətirib çıxardı. Bu nəticələr göstərir ki, striatumda ΔFosB induksiyası dərmana məruz qalma ilə bağlı heyvan nəzarətindən asılı olmayaraq, istifadənin dərman vasitələrinin farmakoloji təsirini əks etdirir. Qarşılaşmanın təəccüblü təzahürü olaraq yaxınlarda kokainin özünü idarə etməsi, orbitofrontal korteksdə ΔFosB səviyyəsinin bir neçə dəfə yüksək səviyyədə birləşməsinə gətirib çıxarmışdır (Winstanley et al., 2007). Bu təsir, orbitofrontal korteks üçün xüsusi idi, çünki bu iki müalicə şəraitində prefrontal korteksdə ΔFosB indüksiyonunun ekvivalent səviyyəsi görüldü. Beləliklə, ΔFosB induksiyası striatal bölgələrdə dərman preparatlarının istifadəsi üzrə voliyent nəzarət ilə əlaqəli olmasa da, müəyyən yüksək kortikal mərkəzlərdə belə motivasion amillərdən təsirlənir.
Bundan əlavə, bütün dörd dərman vasitələrində ΔFosB ümumiyyətlə daha az dərəcədə olsa da striatal kompleksin xaricində bir çox beyin bölgələrində təkan verən yarımvari məlumatlar təqdim edirik. Digər beyin sahələrində prefrontal korteks, amigdala, IPAC, BNST və hipokampus. Prefrontal korteks və hipokampusda ΔFosB-nin dərman preparatlarının istifadəsi narkotik maddənin bilişsel performansa təsirinin bəzi təsirləri ilə bağlı ola bilər, baxmayaraq ki, bu, doğrudan da araşdırılmalıdır. Amigdala, IPAC və BNST hamısı fərdi cəlbedici stimullara cavab verən tənzimləmələrə aiddir. Bu, bu bölgələrdə ΔFosB induksiyasını xroniki olaraq bir narkotik maddənin tətbiqindən sonra, mükafatın kənarında emosional davranışın narkotik tənzimləməsinə vasitəçilik edir. Gələcək araşdırmalarda bu imkanları araşdırmaq maraqlı olacaq.
Burada araşdırılan dörd dərman istifadəsi də narkotikə xüsusi təsirlər yaradıb. Kokain daha əvvəl bildirildiyi kimi, ventral tegmental sahədə ΔFosB'yi nadir hala gətirdi (Perrotti və digərləri, 2005). Eyni şəkildə, kokain və etanol yan septumda ΔFosB'nin aşağı səviyyələrinə xüsusi olaraq səbəb olmuşdur. Δ9-THC, daha əvvəl də qeyd edildiyi kimi, nüvənin akumbens qabığında və dorsal striatumda digər istifadəsi olan narkotiklərlə müqayisədə ΔFosB induksiyasını daha az dramatik təsirə malik idi. Δ9-THC həm də bu preparatın xroniki məruz qalmasında, digərlərinin əksinə olaraq, periaqueduktal bozda ΔFosB səviyyəsinin aşağı səviyyəsinə səbəb olmadı. Hipokampusun və septumun bilik funksiyasında rolu nəzərə alındıqda və bu bölgələrin rolu və stress vəziyyətlərində bir heyvanın reaksiyasını tənzimləyən periaqueduktal grinin rolu nəzərə alındıqda, bu bölgələrdə ΔFosB-nin regiona və dərmana xüsusi induksiyası beyin üzərində narkotik əməliyyatı.
Xülasə, striatal beyin mükafat bölgələrində ΔFosB induksiyası sui-istifadəyə qarşı birgə xroniki adaptasiya kimi geniş şəkildə nümayiş etdirildi. Burada iki əlavə və geniş istismar edilən dərman, etanol və Δ9-THC də bu beyin bölgələrində ΔFosB. Xroniki narkotik təsirinə cavab olaraq ΔFosB indüksiyasiyasının müxtəlif dərəcələrini göstərən bilişsel funksiya və stress reaksiyalarına aid olan bir neçə beyin sahəsini də müəyyən edirik. Striatal bölgələrdə ΔFosB induksiyası kimi bu cavabların bəziləri burada tədqiq edilən istifadənin bütün dərmanlarında yaygındır, digər beyin bölgələrindəki cavablar daha çox narkotik maddələrə aiddir. Bu tapıntılar indi digər beyin sahələrində ΔFosB induksiyasının rolunu xarakterizə etmək üçün gələcək tədqiqatları yönləndirəcəkdir. Onlar da ΔFosB antagonistlərinin potensial faydasını narkotik maddə asılılığı sindromu üçün ortaq müalicə kimi təyin etməyə kömək edir.
Əncir 3
Siçovul kaudat putameninə bir nəzarət siçanında (A) və ya etanol (B), morfin (C) və ya kokain (D) ilə xroniki müalicədən sonra ΔFosB induksiyası. FosB kimi immunoreaktivliyin səviyyələri, pan-FosB antikoru istifadə edərək immunohistokimya ilə analiz edilmişdir. (daha çox ...)
Minnətdarlıq
Müqavilənin qrant sponsoru: Narkotik istismarı üzrə Milli İnstitut.
REFERANSLAR
1. Alibhai IN, Green TA, Nestler EJ. FosB və ΔfosB mRNA ifadəsinin tənzimlənməsi: In vivo və in vitro tədqiqatlar. Brain Res. 2007; 11: 4322-4333.
2. Atkins JB, Atkins J, Carlezon WA, Chlan J, Nye HE, Nestler EJ. Tipik və atipik antipsikotik dərmanların təkrarlanması ilə ΔFosB-yə bölgəyə xüsusi induksiya. Sinapse. 1999; 33: 118-128. [PubMed]
3. Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Alkoqol içmə, beyin bölgəsini meydana gətirir - indüklədilən transkripsiyon faktorlarının ifadəsində selektiv dəyişikliklər. Brain Res. 1999; 847: 157-165. [PubMed]
4. Beckmann AM, Matsumoto I, Wilce PA. AP-1 və Egr DNT-bağlama fəaliyyəti etanol çıxarılması zamanı siçovul beyində artır. J Neurochem. 1997; 69: 306-314. [PubMed]
5. Carle TL, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. FosB sabitləşməsinin proteasomlara asılı və müstəqil mexanizmləri: FosB dəhmonlarının təyin edilməsi və ΔFosB sabitliyinə təsirlər. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
6. Chen JS, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Electroconvulsive manipulyasiya (ECS) və kokain müalicəsi ilə ΔFosB və FosB kimi zülalların tənzimlənməsi. Mol Pharmacol. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
7. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB kokain üçün təşviq artırır. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
8. Criswell HE, Breese GR. Etanol və flumazenilin kronik etanol müalicəsindən çəkilmə zamanı xidmət qutusundan qaçınma cəlbinin alınmasına oxşar təsiri. Br J Pharmacol. 1993; 110: 753-760. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
9. Ehrlich ME, Sommer J, Canas E, Unterwald EM. Periadolen siçanlarda kokain və amfetaminə qarşı ΔFosB upregulyasiyası artmışdır. J Neurosci. 2002; 22: 9155-9159. [PubMed]
10. Frye GD, Chapin RE, Vogel RA, Mailman RB, Kilts CD, Mueller RA, Breese GR. Akut və xroniki 1,3-butanediol müalicəsinin mərkəzi sinir sisteminə təsirləri: etanol ilə müqayisə. J Pharmacol Exp Ther. 1981; 216: 306-314. [PubMed]
11. Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamin və kokain, strio-bəzi-matris bölmələrdə c-fos geninin dərmana xüsusi aktivləşdirilməsini və striatumun limbik bölmələrini səbəb olur. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 1990; 87: 6912-6916. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
12. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB mutant siçanlar: Fos ilə əlaqəli proteinlərin kronik kokain induksiyasının itkisi və kokainin psixomotor və mükafatlandırıcı təsirlərinə həssaslıq artır. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 1997; 94: 10397-10402. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
13. Hope BT, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Xroniki kokain tərəfindən sıçan nüvəsindəki accumbenslərdə dərhal erkən gen ifadə və AP-1 bağlanmasının tənzimlənməsi. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 1992; 89: 5764-5768. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
14. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Xroniki kokain və digər xroniki müalicələrlə beyindəki dəyişmiş Fos kimi zülallardan ibarət uzunmüddətli AP-1 kompleksinin indeksasiyası. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
15. Kelz MB, Chen JS, Carlezon WA, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ . Transkripsiya faktoru olan ΔFosB beynində kokain həssaslığını nəzarət edir. Təbiət. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
16. Knapp DJ, Duncan GE, Crews FT, Breese GR. Etanolun çıxarılması zamanı Fos kimi zülalların və ultrasəs vokalizasiyalarının indulasiyası: çəkilmə ilə bağlı narahatlıq üçün daha çox sübut. Alcohol Clin Exp Res. 1998; 22: 481-493. [PubMed]
17. Liu HF, Zhou WH, Zhu HQ, Lai MJ, Chen WS. M (5) musqarinik reseptor antisens oligonükleotidinin VTA'ya mikroinjectionu NAc-da FosB ifadəsini və heroin sensitləşdirilmiş siçovulların hipokampusunu inhibə edir. Neurosci Bull. 2007; 23: 1-8. [PubMed]
18. McClung CA, Nestler EJ. CREB və ΔFosB tərəfindən gen ifadə və kokain mükafatının tənzimlənməsi. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. [PubMed]
19. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: Beyində uzunmüddətli uyğunlaşma üçün molekulyar bir keçid. Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
20. McDaid J, Dallimore JE, Mackie AR, Napier TC. Morfin-sensitləşdirilmiş siçovullarda uyğun və pallidal pCREB və ΔFosB-də dəyişikliklər: Ventral palliddə reseptor-uyarılmış elektrofizyoloji tədbirləri ilə korrelyasiya. Nöropsikofarmakologiya. 2006a; 31: 1212-1226. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
21. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Metamfetamin səbəbli həssaslaşdırma, memeli beyin limbik dövründə pCREB və Δ-FosB'yi dəyişir. Mol Pharmacol. 2006b; 70: 2064-2074. [PubMed]
22. Moratalla R, Elibol R, Vallejo M, Graybiel AM. Xroniki kokain müalicəsi və çəkilmə zamanı striatumda induksiyalı Fos-Jun proteinlərinin ifadəsində şəbəkə səviyyəsində dəyişikliklər. Neuron. 1996; 17: 147-156. [PubMed]
23. Muller DL, Unterwald EM. D1 dopamin reseptorları aralıq morfin tətbiqindən sonra sümük striatumda ΔFosB indüksiyasını modullaşdırır. J Pharmacol Exp Ther. 2005; 314: 148-154. [PubMed]
24. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: Asılılıq üçün davamlı bir molekulyar keçid. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 2001; 98: 11042-11046. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
25. Nye HE, Nestler EJ. Xroniki morfin administrasiyası ilə siçovul beyinində xroniki Fos ilə əlaqəli antigenlərin indeksasiyası. Mol Pharmacol. 1996; 49: 636-645. [PubMed]
26. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Kristal Fra (Fos ilə əlaqəli antigen) kokain tərəfindən striatum və nüvəli akumbenslərdə induksiya ilə farmakoloji tədqiqatlar. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
27. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve R, Nestler EJ, Taylor FR. Nucleus accumbens-də ΔFosB qidalandırılmış instrumental davranış və motivasiyanı tənzimləyir. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. [PubMed]
28. Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Fond JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. C-Jun'un transgenik siçanlarda dominant mənfi mutantının beyin bölgəsinə spesifik ifadəsi kokainə qarşı həssaslığı azaldır. Brain Res. 2003; 970: 73-86. [PubMed]
29. Perrotti LI, Hadeishi Y, Barrot M, Duman RS, Nestler EJ. Xroniki stressdən sonra mükafatla əlaqəli beyin strukturlarında ΔFosB induksiyası. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
30. Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace D, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. ΔFosB, psychostimulant müalicədən sonra ventral tegmental bölgənin posterior quyruğunda bir GABAerqik hüceyrə populyasiyasında birikir. Eur J Neurosci. 2005; 21: 2817-2824. [PubMed]
31. Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, Hooft van Huijsduijnen R, Chiamulera C. Nikotin və kokainin asılılıq xüsusiyyətləri üçün ümumi neyron substratları. Elm. 1997; 275: 83-86. [PubMed]
32. SAMHSA. O. o. A. Tədqiqatlar, Alkoqol və Narkotik Məlumat üzrə Milli Təmizlik Mərkəzi. Rockville, MD: NSDUH Series H-28; 2005. 2004-in narkotiklərin istifadəsi və sağlamlığı üzrə milli sorğusundan nəticə: Milli nəticələr.
33. Sim-Selley LJ, Martin BR. R - (+) - [2,3-dihidro-5-metil-3 - [(morfolinil) metil] pirolo [1,2, 3-de] -1,4-b enzoksazinil] - (1-naftalenil) metanon mesylate (WIN55,212-2) və ya delta (9) -tetrahidrokannabinolün sintezi üzrə kannabinoid reseptor adaptasiyasına əsaslanır. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 303: 36-44. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
34. Sutton MA, Karanian DA, Self DW. Sıçanlarda qəsd içində olduqda kokain axtarış davranışına meylli olan faktorlar. Nöropsikofarmakologiya. 2000; 22: 626-641. [PubMed]
35. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Fosforlaşması ilə ΔFosB sabitliyinin tənzimlənməsi. J Neurosci. 2006; 26: 5131-5142. [PubMed]
36. Vanderschuren LJ, Di Ciano P, Everitt BJ. Dorsal striatumun kuka nəzarətli kokain axtarışında iştirakı. J Neurosci. 2005; 25: 8665-8670. [PubMed]
37. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB təkər qaçışını tənzimləyir. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
38. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DEH, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone FJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Orbitofrontal korteksdə ΔFosB induksiyası kokain səbəbindəki kognitif disfunksiyaya tolerantlıq yaradır. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. [PubMed]
39. Gənc ST, Porrino LJ, Iadarola MJ. Kokain, dopaminergik D1 reseptorları vasitəsilə striatal c-fos-immunoreaktiv zülalları yaradır. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 1991; 88: 1291-1295. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
40. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. ΔFosB: morfin hərəkətində nüvəli akumbensdə ΔFosB üçün mühüm rol. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. [PubMed]
;