Endokrinoloji. 2013 Mar; 154 (3): 1225-1234.
2013 Jan 31 onlayn nəşr olundu. doi: 10.1210 / en.2012-2042
mücərrəd
Yetkinlik tipik sosyo-seksual davranışlar üçün sosial stimullara olan cavabların erkən inkişafı vacibdir. Təbii olaraq ortaya çıxan dəyişikliklər, qızıl hamster vaginal salınımlarına (VS), həssas bir sosial təzyiqə malik qadın Suriyalı hamster cavablarında, sosial mükafatdakı ergen dəyişikliyinin nöroendokrin mexanizmlərini araşdırmaq üçün yaxşı bir model sistemi təmin edir. Cinsi yetkinlik yaşına çatmayanlar, lakin yetkinlik yaşına çatmayanlar, kişilər VS-lə şərtli yerlərin üstünlüklərini (CPP) VS-ə təqdim edirlər. Müəlliflər bu seriyalı təcrübələrdə, testosteron və dopamin reseptorlarının aktivliyini VS-nin müsbət valentliyində olan ergenlik qazancına vasitəçilikdə araşdırdılar. 1-in eksperimenti göstərir ki, testosteronun dəyişdirilməsi gonadektomizə olunmuş böyüklər hamsters üçün CPP təşkil etməlidir. 2 eksperimenti göstərir ki, testosteron müalicəsi uşaq vərdişlərinin VS üçün CPP yaratması üçün kifayətdir və dopamin reseptor antagonisti haloperidol bu heyvanlarda VS-ə bir CPP meydana gəlməsini maneə törədir. 3 və 4 eksperimentləri göstərir ki, az dozda haloperidol ilə VS CPP pozulması VS cəlbedici xüsusiyyətləri azalması nəticəsində və haloperidol cəhənnəm xüsusiyyətləri ilə bağlı deyil. Birlikdə bu tədqiqatlar göstərir ki, uğurlu yetkin sosioseksual qarşılıqlı fəaliyyət üçün zəruri olan bir sosial təbrənin şərəfləndirici mükafatlandırıcı xüsusiyyətləri kişilər hamstersində dövr edən testosteronda pubertal artımın nəticəsidir. Bundan əlavə, bu sosial mükafat, dopamin reseptor antagonizmi ilə qarşısı alına bilər, hipotalamik və / və ya mesokortikolimbik dopaminerq dövrələrinin sosial mükafatın hormonal aktivləşdirilməsi üçün hədəf olduqlarını göstərir.
Müvəffəqiyyətli yetkinlik yaşına çatmış sosial qarşılıqlı əlaqələrdə və reproduktiv sağlamlığında sosial stimulların lazımi şəkildə şərh edilməsinin zəruriliyi nəzərə alınmaqla, inkişaf psixologiyası üçün əsas problem sosial informasiyanın işlənməsinin erkən inkişafının əsasını təşkil edən nöroendokrin mexanizmlərin müəyyənləşdirilməsidir. Kişi Suriyalı hamsters, cinsi davranışları qadın hamster vaginal sekresyonlarının (VS) nöral emalından asılı olduğundan, sosial təzahürlərin qavranılması və reaksiyaların inkişafında dəyişikliklərin öyrənilməsi üçün yararlı bir model təqdim edir1, 2) və doğuşdan sonra doğuşun ikinci ayı ərzində bu cinsin yetkinlik və yeniyetməsinə uyğun olan VS-yə olan endokrin, neyro və davranış reaksiyaları3, 4). Yetkinlik yaşına çatmamış kişi hamsteri VS-ə böyüklər üçün tipik cazibə göstərmir (5). Üstəlik, VS yalnız cinsi yetkinlik yaşına çatmayanların yetkinlik yaşına çatmasından sonra cinsi yetkinlik yaşına çatmayanlardan sonra şərtsiz bir mükafatdır.6, 7). Kişi cinsi davranış kimi VS'ye cəlb, yetişkinlərdə testosteronun aktivasiya təsirinə bağlıdır (8, 9) və VS-ə cəlb olunan uşaqlar testosteron müalicəsi ilə bağlana bilərlər (5). Bununla belə, VS-nin gücləndirici dəyəri ya testosterona ya da yetkinlik yaşına çatmayan və ya cavan hamstərə aid olub-olmadığı bilinmir.
Kemosensor stimullara və gəmiricilərə köçürülməyə əhəmiyyətli bir neyron cavab medial preoptic sahəsində (MPOA) dopamin və nüvəli accumbens (Acb) (10-20). Xüsusilə, dopamin cinsi mükafatın bir çox aspektində tətbiq edilmişdir. Məsələn, haloperidolun əsasən D2 dopamin reseptor antagonistinin sistemli tətbiqi (NIMH Psixoaktiv Narkotik Tədqiqat Proqramı, http://pdsp.med.unc.edu) cinsi səliqəli kişi siçovullarında əsas qadın vizual, eşitməli və chemosensory ipuçları üçün şərtsiz motivasiyanı azaldır və əvvəllər seksual davranışla əlaqəli kokuser cues üçün cəlbedici motivasiya (21, 22). Bundan əlavə, qadın hamsters cinsi davranış üçün CPP formalaşdırılması bir D2 reseptor antagonisti (23). Lakin digər tədqiqatlar göstərir ki, kişi siçovullarında və siçanlarda cinsi faydalar üçün CPP üçün dopamin reseptorlarının aktivasiyası tələb olunmur (24-26). Dopamin reseptorlarının aktivləşdirilməsinin CPP-nin kişi hamstersində VS üçün zəruri olub-olmadığı müəyyənləşdirilir. Lakin bilirik ki, gonad-müdafiəsiz uşaqlar və böyüklər hamsters arasında davranış fərqləri onların dopaminerjik cavabları ilə yansıtılır. Yetkin, lakin cavan olmayanlar hamsterlər MPOA-da VS-ə cavab olaraq dopamin azadlığında və metabolizmasında artım göstərirlər (18). Eynilə, yetkin, lakin yetkinlik yaşına çatmayan hamsterlər FOS-a Acb, ventral tegmental bölgədə VS və orta prefrontal korteks7). Beləliklə, yeniyetməlik dövründə dopaminergik funksiyanı əldə etmək VS mükafat və cazibə üçün lazım ola bilər.
Cinsi mükafatdakı dopaminergik tutulma kemiricilərdə testosteron tərəfindən tənzimlənir. Castration 2-dan sonra 8-ə qədər cinsi davranışın azalmasına gətirib çıxarır ki, bu bazal dopamin səviyyələrində azalma və Acb və MPOA27). Bir preopulatör MPOA dopaminerjik cavabının olmaması və ya bir stimulus qadına qarşı olması, gonadektomiya və sonradan testosteron-əvəzləşdirmədən sonrakı dövrlərdə,11, 28). Bundan əlavə, cinsi davranış qismən uzun müddətli kastralı kişi sıçanlarında sistemik və daxili MPOA apomorfin, bir dopamin agonisti (29). Nəhayət, puberte zamanı testosteron konsentrasiyaları və dopamin dövriyyəsi dəyişir (30, 31). Buna görə, bu seriyalı tədqiqatlar, testosteronun dopaminergik mükafat dövrünə təsirləri vasitəsilə sosial mükafatı aktivləşdirdiyini, model sistem kimi böyüklər və gənc yetkin kişi hamstersində VS-ə VS-in formalaşdırılması ilə istifadə edərək hipotezini sınaqdan keçirdi.
Material və metodlar
Heyvanlar
Suriya hamsteri (Mesocricetus auratus) Harlan Laboratories-dən (Madison, Wisconsin) əldə edilmiş və işıq və rütubət nəzarəti altında olan bir vivariyada yerləşdirilmişdir: qaranlıq dövr 14 saat işıq: 10 saat qaranlıq və qida məhsullarına reklam libitumu (Teklad Rodent diet 8640; Harlan Laboratories) və su. Gəlişdən sonra (yaşlar üçün xüsusi təcrübələrə baxın), yetkinlik yaşına çatmayan kişilər, kişi zibil yoldaşları və bioloji anaları ilə birlikdə P18-də süddən ayrılana qədər yerləşdirildi. Süt əmizdirənlər və yetkin kişilər şəffaf polikarbonat qəfəslərdə (30.5 × 10.2 × 20.3 sm) tək-tək yerləşdiriliblər. Bütün kişilər tədqiqat zamanı cinsi baxımdan sadəlövh idilər və yalnız bir təcrübədə istifadə olunurdular. Təxminən 12 aylıq yaşda olan altmış yetkin qadın hamsteri oxşar şəraitdə ayrı vivariyada yerləşdirildi və VS mənbəyi kimi istifadə edildi. VS ifrazatı maksimum olduqda, hormonla əlaqəli estrus gününün eksperimental nəzarəti üçün hormon tətbiqindən bir neçə həftə əvvəl qadın hamstarlar ovariektomiya edildi. VS yığılmadan əvvəl yumşaq vajinal palpasiya yolu ilə 10 saat və 500 saat ərzində susam yağı içərisində 52 μg estradiol benzoat və 4 μg progesteron ilə dərialtı yolla enjekte edildi. Bütün təcrübələr qaranlıq mərhələyə 4 ilə 1 saat arasında <5 lüks qırmızı işıq altında aparıldı. Hamsterlər Milli Sağlamlıq İnstitutlarına uyğun olaraq müalicə edildi Laboratuvar Heyvanlarının Qulluq və İstifadəsi üzrə Kılavuzvə protokolları Michigan Dövlət Universiteti İnstitutu Heyvan Qulluq və İstifadə Komitəsi tərəfindən təsdiq edildi.
Cərrahiyyə və hormon implantasiyası
Gonadektomize (GDX) eksperimental qruplardakı hamsters isofluran anesteziyası ilə əməliyyat keçirdi. İki tərəfli boyunlu skrotal kəsiklər edildi və testatlar, ligata (böyüklər) və ya cauterization (yavrular) distal ilə kəsildi. GDX + 0 və GDX + T qrupları, həmçinin 2 boş və ya testosteron olan silisli kapsulalarla (bir 5 mm və bir 13 mm testosteron [Sigma-Aldrich, Sent-Luis, Missuri] ilə subkutan implantasiya olunmuşdur 4 silməkli yapışdırıcı, daxili diametri 1.98 mm, xarici diametri 3.18 mm). Bu kapsulalar dövr edən testosteronun yetkin fizioloji səviyyələrini (~ 2-7 ng / ml, Cədvəl 1). Mövzular cərrahiyyə zamanı və daha sonra 24 saat sonra ketoprofen analjezikinin subkutan enjeksiyasını aldılar.
Plazma testosteron tədbirləri
CPP testinin və ya son xəmir testinin tamamlanmasından bir saat sonra hamsterlər dozanın dozası plazma testosteronunun radioimmunoassayası üçün kardiyak ponksiyon vasitəsilə toplanmış bir natrium pentobarbital (150 mg / kg, intraperitoneal) dozası ilə ötanadan edilmişdir. Plazma testosteronun 50-μl nümunələrinin təkrarlanması, Coat-A-Count Total Testosteron Kiti (Diaqnostik Məhsullar, Los Angeles, Kaliforniya) istifadə edərək, bir sınaqdan keçirilmişdir. 0.08 və 7.9, 1 ng / ml və 2% 0.12 və 5.8 təcrübələrində ən az aşkarlanabilən konsentrasiya və dəyişmə intra-assay katsayısı 3 ng / ml və 4% idi. Beş (sınaq 2) və 2 (təcrübəsi 3) hamsteri onların testosteron kapsulalarını midexperimentlərindən təmizlədi və davranış və ya testosteron analizlərindən kənarlaşdırıldı. Final qrupu ölçüləri verilir Cədvəl 1.
CPP testləri
Yer üstünlük kondisionerləri daha əvvəl təsvir edilən kimi meydana gəldi (6, 7) 1 orta bölmə və 2 xarici kompartmanlı aparatlarda (Med Associates, St Albans, Vermont). Bu xarici bölmələr ayrı-ayrı vizual, toxunma və koflin istəkləri ilə bölməyə xüsusi birliklər üçün nəzərdə tutulmuşdu. Heyvanlar CPP rejimi başlamazdan əvvəl işləmə və roman otaqları 2 d ilə əlaqələndirildi. CPP rejimi hər hamster üçün günün eyni vaxtı (± 10 h) meydana gələn bir pretest, 1 kondisioner oturumları və testi daxil etdi. Tələb olunan kohortların sayını azaltmaq və nəzarət heyvanlarının xəbərdarlıq qoxusuna təsirinin qarşısını almaq üçün nəzarət heyvanları qaranlıq mərhələ 8-da başlayan ayrı bir otaqda yerləşdirilib: 00 am və 9-da test: 00 am. Qarışıq mərhələ 2-da başlayan odalarda yerləşdirilib: 00 pm və 3-da test: 00 pm.
Hər bir hamsterin ilkin bölmə seçimini heç bir stimul olmadan təyin etmək üçün bir ön sınaq (orta hissədə 2 dəq, bütün bölmələrə 15 dəqiqəlik giriş) istifadə edildi. Hamsterin daha çox vaxt sərf etdiyi xarici bölmə əvvəlcə üstünlük verilən bölmə olaraq təyin olundu. [Əvvəlcə seçilməyən bölmədə vaxt / (əvvəlcə üstünlük verilən bölmədə vaxt + əvvəlcə üstünlük verilməyən bölmədə vaxt)] olaraq təyin olunan bir üstünlük hesabı və [əvvəlcə üstünlük verilən bölmədə vaxt - əvvəlcə vaxt üstünlük verilməyən bölmə] hər heyvan üçün hesablanmışdır (6). Hər bir hamstərə məlumatlı seçim etmək imkanına malik olmaq üçün ən azı 5 dəfə hər bir bölməyə daxil olmayan hamsterlər daha çox təlimdən kənarlaşdırıldı. Heyvanlar ilk qrup seçimləri və imtiyaz skorları və müxtəlif qruplardakı zibil təsvirləri üçün qrupları birləşdirmək üçün eksperimental və nəzarət qruplarına təyin edildi.
Pretestdən sonra, hamsterlər 10 stimulus və 30 stimulus-qoşalaşmış seansları alternativ olaraq yan səkkiz gündə gündə bir dəfə 1 sessiyasında 5 5 dəqiqəlik kondisioner oturumlarını aldılar. Xeyr-stimullaşdırıcı kondisioner oturma zamanı həm eksperimental, həm də nəzarət qrupları hamsteri onların başlanğıcda seçilmiş bölmələrinə yerləşdirilib, burada tək qaldılar. Təcili-cütləşdirilmiş kondisioner oturma zamanı, eksperimental qrupdakı hamsters stimul ilə başlanğıcda qeyri-təxirə salınmış bölmələrə yerləşdirildi. Nəzarət qruplarının hamsteri də əvvəlki kimi qeyri-təxirə salınmış bölmələrə yerləşdirilmiş, lakin stimul verilməmişdir. Bu qrup kondisiyalaşdırma zamanı habitiyaya aid olan testlərdən üstünlük və ya fərqi qiymətləndirmənin hər hansı bir dəyişiklikini müəyyənləşdirməyə xidmət etmişdir. CPP aparatı hər bir heyvan arasında 25% etanol və 75% etanol ilə hər bir kondisioner gününün sonunda təmizlənmişdir.
1 və 2 eksperimentlərində VS kondisioner oturumlarında stimul kimi istifadə edilmişdir. İstifadədən bir saat əvvəl, təxminən 500 μl VS, 30 qadınlardan toplanmış və hər bir kişi eyni stimulun məruz qalmasını təmin etmək üçün birlikdə qarışdırılmışdır. Təxminən 15 μl VS bir 2-ml Eppendorf tube, hər bir kişi üçün 1 boru qablaşdırılan su ilə nəmləndirilmiş pambıq duz üçün tətbiq edilmişdir. Testdən dərhal əvvəl, VS qrupu üçün VS-cütləşdirilmiş kondisioner oturumlarında başlanğıcda qeyri-təxirə salınmış bölmənin arxa divarının üst hissəsində olan kişi tünddən çıxarılıb. Boş Eppendorf boruları bütün kondisioner oturumlarında və VS qrupunda nəzarətsiz qruplar üçün istifadə olunmadı. VS-in uçucu olmayan komponentlərinə məruz qalmasını təmin etmək üçün qalan 200 μl VS 1.5 ml mineral yağı ilə qarışdırılıb və bu qarışıqdan təxminən 10 μl bir metal spatula ilə birbaşa VS qrupunda hamsters burununa tətbiq olunduqdan dərhal əvvəl Hamsterlər VS-qoşalaşmış bölmələrə yerləşdiriliblər. Təmiz yağı nəzarət qrupunda hamsters burunlarına bütün kondisioner oturumları və VS qrupunda stimullaşdırıcı kondisioner oturmaları üçün tətbiq olundu.
Son kondisioner seansından iyirmi dörd saat sonra hamsters pretest üçün istifadə edilən eyni prosedurdan sonra yerlərə üstünlük verildi. Pretestdə olduğu kimi heç bir xəbərdarlıq olmadı və hər heyvan üçün üstünlük və fərq skorları hesablandı.
1 eksperimenti: Böyüklər hamstərində VS-ə CPP meydana gəlməsi üçün testikulyar hormonlar lazımdırmı?
Bu təcrübə yetkin hamstersdə VS-ə CPP-nin nümayişi üçün dövranan testikulyar hormonların tələb olunmadığını test etdi. Bu laboratoriyada pilot tədqiqatlar göstərir ki, gonadektomiyadan sonra kondisionerin 1 wk başladığı zaman kişi hamsters VS üçün bir CPP meydana gətirdi32), testikulyar hormonların proqressiv effektiv effektləri kəskin şəkildə yuyulmur, buna görə də kişi kemirgenlərdən gonadektomiyadan bir neçə həftə sonra baş verən cinsi davranışın tədricən azalması33). Buna görə də, bu sınaqda, Kondisionerin başlamazdan əvvəl GDX 10 wk olmuş hamsterləri öyrənirik. Bütün böyüklər postnatal günü P56-63-da laboratoriyaya gəldilər, lakin həmin qruplar eyni zamanda sınaqdan keçirilə bilərdi. No-stimulus nəzarət heyvanları gonad-müdafiəsiz qalmış və P64-71-da pretested. GDX + 0 qrupundakı Hamsters P57-64-da GDX idi, 10 wk üçün unmanipulated qaldılar və sonra P127-134-da pretest əvvəl P1-134, 141 wk boş kapsül ilə implantasiya edildi. GDX + T qrupu P57-64-də P1-64-də pretest əvvəl P71-XNUMX, testosteron kapsulaları verilmiş və əhəmiyyətli CPP göstərmək üçün müsbət nəzarət kimi xidmət göstərmişdir. Bu tənzimləmə, müxtəlif gənc yetkin yaşlarda heyvanların kondisyonu və test edilməsini tələb etdi, lakin gənc yaşlarda bu dəyişkən üçün nəzarət edən əvvəlki təcrübələrdə testosterona davranış və ya neyron cavablarda yaşa bağlı fərqləri heç görməmişik (34). Bundan əlavə, GDX + 0 qrupunda olanlara oxşar GDX / testosteron müalicə olunmuş kişi hamsteri etibarlı şəkildə VS (35). Buna görə, laboratoriyada 10 həftələrində qeyri-stimullaşdırıcı nəzarət və GDX + T qruplarının saxlanmasının lazımsız olduğunu və bununla bağlı xərcləri haqlı hesab edə bilmədik.
2 təcrübəsi: Testosteron və dopamin reseptorlarının aktivləşdirilməsi bir CPP üçün balaca hamsterlərdə VS üçün vacibdirmi?
Bu təcrübə, dopaminin testosteron ilə asanlaşdırılan CPP-də cinsi kişi hamstersində VS-ə cəlb olunmasını test etdi. Bütün heyvanlar P12-da gəldi, P20-da pretested və 3 kohortlarında işlədilər. Gonad-sağlam hamsters qeyri-stimulus nəzarət kimi istifadə edilmişdir, digər qruplar GDX idi və testdən əvvəl 13 həftə əvvəl P1, boş və ya testosteron kapsül verilmişdir. GDX + 0 qrupu aşağı səviyyəli testosteron olan uşaqlar (gonad-toxunmamış heyvanlarda olduğu kimi) VP-ə bir CPP göstərməyəcəyini təsdiq etmək üçün daxil edilmişdir. Bir GDX + T qrupu, testosteron müalicəsinin CPP'yi VS'ye səbəb ola biləcəyini təyin etmək üçün daxil edildi. Qalan qruplar, bütün GDX + T idi və VS-dən əvvəl halqa və ya no-stimulus tənzimləmə seanslarından əvvəl haloperidol (0.05, 0.15 və 0.45 mg / kq) və ya propilen glikol vasitəsi 30 dəqiqə intraperitoneal injections verildi. Haloperidol güclü bir D2 antagonistidir, lakin D1, adrenerjik və sigma reseptorlarını daha az effektiv şəkildə əlaqələndirə bilər (NIMH Psixoaktiv Narkotik Tədqiqat Proqramı, http://pdsp.med.unc.edu/). No-stimulus, GDX + 0 və GDX + T nəzarət qrupları həm kondisioner seanslarından əvvəl propilen glikol vasitə enjeksiyonlarını 30 dəqiqə aldı.
3 təcrübəsi: Dopamin reseptor antagonizmi yalnız balaca hamsterlarda yer üstünlüklərini dəyişirmi?
Bu təcrübə, 2-da sınaq halında istifadə edilən haloperidol dozalarının testosteronla müalicə edilən hamstersdə istənilən intruziv xüsusiyyətlərə malik olub-olmadığını müəyyənləşdirmək üçün nəzərdə tutulmuşdur ki, bu da onlar üçün kondisiyalaşdırılmış yerlərin təhqir edilməsinə səbəb olur (CPA). Əgər onlar etdikləri halda, 2-da sınaqdan keçmək üçün CPP-nin qarşısının alınması haloperidol şəraitində ətraf mühitin qarşısını almaqla bağlı ola bilər. P11 və ya P12-ə gələn bütün heyvanlar, P13-da P20-da GDX + T idi və 2 günündə vurduqları 1 kohortlarında işlədilər. Bənzər bir kondisioner paradiqması təsvir edilmiş kimi istifadə edilmişdir, lakin haloperidol ilkin seçimləri azaltmaq cəhdi ilə başlanğıcda üstünlük verilmiş palatada verilmiş və heç bir VS istifadə edilməmişdir. Haloperidolun fizioloji təsiri göstəriciləri olaraq kondisasiya seansları zamanı lokomotor hərəkət (infraqırmızı şüa fasilələrində dəyişikliklər sayı) və fecal boli çıxışı da ölçüldü.
Əlavə cəlb testi
4 təcrübəsi: Dopamin reseptor antagonizmi cavan xəndəklərdə VS-ə cəlb etməyi təsir edirmi?
Bu təcrübə haloperidolin VS-nin cəlbedici xüsusiyyətlərini azaldıb müəyyənləşdirdi. Buradakı kifayət qədər kəşfiyyat sayəsində pretestdən sonra (və hər hansı bir haloperidol məruz qalmasından əvvəl) sınaqdan çıxarılan heyvanlar istifadə edilmişdir; Beləliklə, P3-11-ə gələn bu kişilər P12-da GDX və testosteronla müalicə olunmuş və P13-5-da 28 gün ərzində test edilmişdir. VS təsvir olunduğu kimi ilk sınaqdan əvvəl 32 gündə stimul qadınlardan toplanmışdır; ~ 1 qadınlardan VS 14 μl mineral yağı ilə birlikdə 100 Eppendorf tüpündən 1-ə qarışdırıldı. 5 tüpünün hər gün sınaqdan başlamadan 4 dəqiqə əriyənə qədər borular 1 ° C-də saxlanılır. Bir metal spatula testdən dərhal əvvəl təxminən 30 μl təmiz mineral yağ və ya VS qarışığı bir şüşə slayd, 15 hamster başına yaymaq üçün istifadə edilmişdir. Təmiz və VS smeared slayd şüşə akvariumun (1 × 5 × 51 sm) qarşı tərəfində divarın təxminən 26 sm-ə qədər bantlanmışdır (36, 37). Qoxunun yeri qruplar və heyvanlar arasında bərabər idi.
1 və 5 günlərində heyvanlar testdən əvvəl intraperitoneal propilen glikol vasitəsi 30 dəqiqə ilə enjekte edildi. 2-də 4 günlərində heyvanlar 0.05, 0.15 və ya 0.45 mg / kq haloperidollə müqayisəli qaydada enjekte edilmişdir. Heyvanlar testdən əvvəl dərhal koloniya otağında qaldılar. Test başlamaq üçün hamsterlər akvariumun ortasına yerləşdirilib və davranışları canlı qaldı və video 5 dəqiqə üçün qeydə alınıb. Test başa çatdıqdan sonra hamsters koloniya otağına qaytarıldı, slaydlar silindi və akvarium 75% etanol ilə təmizləndi. Hamster hər slaydı araşdırdıqda uzunluğu, slayddan 0.5 santimetrdən az burunlu, VS borusunun yerləşdiyi yerə bir scorer kor tərəfindən video yazmağından ölçülmüşdür. Hər bir heyvan üçün bir cazibə hesabı (yağ slayd ilə VS slide - vaxt ilə vaxt) hesablanmışdır.
Statistik təhlil
Bütün nəzarət və eksperimental qrupların oxşar başlanğıc üstünlükləri və fərq skorlarına sahib olduğunu təsdiq etmək üçün birtərəfli ANOVA istifadə edilmişdir. 1-in 3-ə eksperimentlərdə CPP və ya EBM-in stimulunun stimullaşdırılmasının olub-olmadığını qiymətləndirmək üçün əvvəlcədən bildirildiyi kimi, üstünlük və fərq skorlarında dəyişikliklər təhlil edilmişdir7). Tercih və fərq skorlarındakı dəyişikliklər, hər hamster üçün test tədbirlərindən ön sınaq tədbirlərinin çıxarılaraq təyin olundu. Nəzarət heyvanlarında, şərtsiz dəyişiklik üçün bir standart təmin etmək üçün üstünlük skoru və fərq skoru üçün ortalama dəyişiklik ölçüləri təyin edildi. Tercih və fərq skorlarında nəzarət dəyişikliyi tədbirləri, daha sonra hər bir şərtsiz dəyişikliyi düzəltmək üçün hər bir təcrübə heyvanının ballarından çıxarıldı. Buna görə nəzarət tədbirləri rəqəmlərlə göstərilmir. Üstünlük və fərq skorlarındakı düzəliş edilmiş dəyişikliklər daha sonra 1 nümunədə istifadə edilmişdir t hər bir qrup daxilində testlər, təsadüfi seçimdən əhəmiyyətli fərqləri qiymətləndirmək üçün dəyəri sıfıra nisbətən müqayisə edir. Bu statistik prosedurlar, cütləşdirilmiş istifadə edilən əvvəlki tədqiqatlara bənzərdir t bir qrup içərisində üstünlük və fərq skorlarının dəyişməsini müəyyənləşdirən testlər (6, 38-43). Bundan əlavə, nəzarət heyvanlarında müşahidə edilən şərtsiz dəyişikliklər üçün düzəlişlər yanlış müsbət nəticələrin şansını azaldır, çünki xarici kameralar üçün hər hansı bir başlanğıc üstünlükləri həmin otaqlara təkrar ekvivalent pozuntulardan sonra6, 7). Hər iki üstünlük və fərq skorundaki əhəmiyyətli dəyişikliklər CPP-nin qurulduğu qənaətinə gəldi. Haloperidolun 3-da, cütlənmiş nümunələrdə fizioloji dəyişənlərə təsirlərini qiymətləndirmək t hər bir haloperidol doz qrupu daxilində haloperidol və nəqliyyat vasitəsi ilə əlaqəli otaqlarda hərəkəti və göbək çürüməsini müqayisə etmək üçün testlər istifadə edilmişdir.
Dopamin reseptor antagonisti haloperidolin 4-da sınaqdan keçməmiş cəlb etməsinə təsir göstərməməsi üçün haloperidolun təsirinin cəlb skoruna təsirini yoxlamaq üçün təkrarlanan tədbirlər ANOVA istifadə edilmişdir. t test təqibləri və Bonferroni düzəlişləri. Bundan əlavə, 1-nümunə t testlər hər doza qrupunun seçiminin və fərq skorlarının şansdan sırasıyla yarı və ya sıfırdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndiyini təyin etmək üçün istifadə edilmişdir. Testlərin ilk və son günündə vasitə enjeksiyonlarından alınan tədbirlər fərqlənmədi və heyvan başına ortalama olaraq qiymətləndirildi. Dərmanın xətt keçidlərinin sayına təsirini təyin etmək və dərmanın lokomotor fəaliyyətə təsirini göstərmək üçün ANOVA təkrar tədbirlərindən istifadə edilmişdir. Bütün təhlillərdə, P <.05 əhəmiyyətli hesab edildi və bütün statistik analizlər SPSS proqramı ilə edildi (PASW Statistics 20; SPSS, An IBM Company, Chicago, Illinois).
Nəticələr
1 eksperimenti: Böyüklər hamstərində VS-ə CPP meydana gəlməsi üçün testikulyar hormonlar lazımdırmı?
Uzun müddətli GDX böyüklər hamsteri VS üçün CPP meydana gətirə bilmədi (Şəkil 1). GDX + 0 qrupunun üstünlük və ya fərq skorunda heç bir dəyişiklik VS ilə kondisionerin nəticəsi olaraq qəbul edildi, 1-nümunəsi t testlər nə üstünlük düzəliş dəyişikliyi göstərdi (t(9) = -1.98, NS) və ya fərq (t(9) = 1.19, NS) skorları sıfırdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi. Əksinə, GDX + T qrupu 1 yolunda VS-ə CPP göstərdi t imtahanlarda düzəliş edilən dəyişikliklər (t(9) = 4.06, P <.01) və fərq (t(9) = -4.23, P <.01) puanları sıfırdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi. Qruplar ilk seçim ballarında fərqlənmədilər (F(2,29) = 2.17, NS) və ya fərq hesabı (F(2,29) = 1.95, NS). Buna görə, VS ilə bağlı CPP üçün son testikulyar hormonların məruz qalması lazımdır.
2 eksperimenti: Uşaqlıq hamstersində CPP üçün VS üçün testosteron və dopamin reseptorlarının aktivasiyası lazımdırmı?
Testosteron gənc yetkinlik yaşına çatmış hamstersdə VS üçün CPP təşviq etmək üçün kifayət idi (Şəkil 2). Vasitə enjeksiyonunun qəbul etdiyi GDX + T VS qrupu 1 yolunda VS-ə CPP göstərdi t imtahanlarda düzəliş edilən dəyişikliklərin (t(5) = 3.11, P <.05) və fərq (t(5) = -2.77, P <.05) puanları sıfırdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi. GDX + 0 VS qrupu, şərtləndirmə nəticəsində nə üstünlük, nə də fərq skorunda əhəmiyyətli dərəcədə düzəldilmiş bir dəyişiklik göstərmədi (t(6) = 0.09 [NS] və t(6) = -1.74 [NS]), süni hormon oxşar konsentrasiyaları ilə gonad-müalicəvi uşaqlarda görülən replikasiya effektləri7). Əlavə olaraq, dopamin reseptor antagonizmi T-müalicə olunan gənc yetkin hamstersdə VS üçün CPP-ni blok etdi (Şəkil 2). 3-, 0.05- və 0.15-mg / kg GDX + T VS qrupları, 0.45 dozlarında, haloperidol ilə CPP-yi blok etdi, üstünlük skorlarında düzəliş dəyişiklikləri göstərilməyib (t(7) = 0.35 [NS], t(6) = 0.52 [NS] və t(7) = -0.10 [NS]) və ya fərq skorları (t(7) = -0.44 [NS], t(6) = -0.18 [NS], və t(7) = 0.31 [NS]), kondisionerlə sıfırdan fərqlənmişdir. Qruplar ilk seçim qiymətində fərqlənmədi (F(5,47) = 0.27, NS) və ya fərq hesabı (F(5,47) = 0.26, NS).
3 təcrübəsi: Dopamin reseptor antagonizmi yalnız balaca hamsterlarda yer üstünlüklərini dəyişirmi?
Haloperidolun aşağı 2 dozası ehtiyatlı deyildir (Şəkil 3). 0.05 ya da 0.15 mg / kq qrupu, 1 yolu kimi, haloperidol üçün bir EBM göstərməmişdir t testlər nə üstünlük düzəliş dəyişikliyi göstərdi (t(7) = -0.23 [NS] və t(8) = 0.55 [NS]), nə fərq (t(7) = -0.02 [NS] və t(9) = -0.54 [NS]) skorları sıfırdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqləndi. Haloperidolun ən yüksək dozuna bir EBM aşkar edilmişdir. Bir yol t testlər üstünlük hesabında düzəliş edilən dəyişikliyin sıfırdan fərqli olduğunu göstərdi (t(7) = 2.55, P <.05), lakin fərq skorunda düzəldilmiş dəyişiklik olmadı (t(7) = -1.88, NS). Qruplar ilk seçim qiymətində fərqlənmədi (F(3,32) = 0.01, NS) və ya fərq hesabı (F(3,32) = 0.14, NS). Haloperidol, lokomotor aktivliyə və fecal boli sayına (Şəkil 4). Bağlanan nümunələr t testlər 0.00-, 0.05-, 0.15- və ya 0.45-mg / kg dozalarda haloperidolun hərəkətindən təsirlənmədiyini göstərdit(8) = -0.26 [NS], t(8) = 0.28, [NS], t(8) = 0.26 [NS] və t(8) = Sırasıyla 1.21 [NS]). Fekal boli çıxışı 0.45-mg / kq dozada artmışdır (t(8) = -2.67, P <.05), lakin 0.00-, 0.05- və ya 0.15-mg / kg dozalarda deyil (t(8) = -1.10 [NS], t(8) = -0.59 [NS], və t(8) = -1.74 [NS]).
4 təcrübəsi: Dopamin reseptor antagonizmi cavan xəndəklərdə VS-ə cəlb etməyi təsir edirmi?
Dopamin reseptor antagonizmi VS-yə cəzanı bir dozada asılı şəkildə təsir etmişdir (Şəkil 5). Təkrarlanan tədbirlərin təhlili nəticəsində Dozun əhəmiyyətli təsiri Greenhouse-Geisser düzəldilməsi ilə cazibə skorunda, F(1.42,11.38) = 9.802, P <.01, təqibdə belə t testlər, avtomobil skorları 0.05-, 0.15- və 0.45-mg / kq dozalarındant(8) = -4.74, -3.46 və -3.80, hamısı P <.01, müvafiq olaraq). Bununla birlikdə, slaydlar arasındakı şans seçiminə (sıfır) fərq skorlarını müqayisə edən 1 nümunə t testləri, VS-yə cazibənin avtomobil qrupunda olduğu kimi 0.15-mq / kq qrupunda hələ də pozulmadığını göstərir: 0.00- və 0.15- mg / kg doza cazibə skorları şansdan əhəmiyyətli dərəcədə fərqlidir (t(8) = 4.22, P <.01 və t(8) = 2.81, P 05- və 0.05-mq / kq doza skorları şansdan fərqli deyildi (müvafiq olaraq <.0.45).t(8) = 1.72 və -0.11, hər ikisi NS). Dəyişmənin heç bir təsiri təkrarlanan tədbirlər nəticəsində ANOVA (F(3,24) = 0.11, NS), məlumat göstərilmir. Beləliklə, haloperidol bəzi dozalarda VS-ə cəlb etməyi əhəmiyyətli dərəcədə azaltmışdır.
Fizioloji tədbirlər
Fiziologiyada tədbirlər görülür Cədvəl 1 hər iki yaşda dövranan testosteronun artmasında testosteron kapsulların effektivliyini təsdiq edir. Eyni yaş qrupları bədən çəkisində fərqlənmədi.
Müzakirə
Bu tədqiqatlar göstərir ki, növə aid xüsusi chemosensor stimulusun təlimi kimi testosteron asılıdır və dopamin reseptorlarının aktivləşdirilməsini nəzərdə tutur. Xüsusilə, uzunmüddətli GDX yetkin kişi hamsters VS üçün bir CPP yaratmadığını tapdıq, lakin yetkinlik yaşına çatmamışların testosteron müalicəsi onlara CPP yaratmaq üçün kifayətdir. Bundan əlavə, ilk növbədə D2 reseptor antagonisti haloperidol testosteron ilə müalicə olunan juvenil hamstərlərdə VS-ə CPP ifadəsinin qarşısını aldı. Bu nəticələrdən əldə etdik ki, adolesan uşaqların sosial informasiyanın işlənməsinin olgunlaşması testosteron dövründə olan pubertal artımın nəticəsidir ki, hələ dopaminergik sxemlərdə müəyyənləşdirilməmiş təsirlər nəticəsində qadın kemosensor stimulları və bu stimullarla əlaqəli ətraf mühitin mükafatlandırılması kimi nəticələrə gətirib çıxarır.
Testosteron və sosial mükafat
Yetkinlik yaşıdakı VS mükafatında testosteronun zəruriliyi və yetkinlik yaşına çatmamış heyvanlarda VS mükafatını testosteron qabiliyyətini nəzərə alaraq nəzərə alsaq ki, VS üçün böyüklər kimi mükafatlandırıcı cavablar normallaşma testosteronundakı pubertal artımdan və 1 VS mükafatı üçün heç bir digər hormona asılı və ya müstəqil yetkinlik inkişafı prosesi zəruri deyildir. Həqiqətən, yetkinlik dövründə testosteronun təşkilati təsirləri VS mükafatı üçün tələb olunmur, çünki yetkinlik dövründə gonadal hormonlardan məhrum olan və yetkinlik dövründə testosteron ilə müalicə edilən heyvanlar VS-yə güclü CPP35). VS CPP'teki testosteronın aktivasyon etkileri, hem yetişkinlerde hem de yetişkinlerde VS'ye cazibe çalışmalarında görülenleri ve ergenlik döneminde normalde artan cinsel davranış davranışlarını yansıtmaktadır5, 9, 44). Testosteronun VS mükafatına cavab verməsini asanlaşdıran mexanizm xüsusi olaraq müəyyən edilməməsinə baxmayaraq, D2 reseptor aktivasiyası vasitəsilə dopaminergik səsi təbliğ edir.
Dopamin və sosial mükafat
Bizim tədqiqatımız, əsasən D2 reseptor antagonisti haloperidolün CPP-ni VS-yə maneə törədildiyi üçün, VS-nin mükəmməl təfsirində D2 reseptorunun aktivləşdirilməsində rol oynadığını göstərir. Bu mühasirə VS-nin cəlbedici və mükafatlandırıcı xüsusiyyətlərinin azalması ilə bağlıdır, çünki şərtsiz cəlb testi. Bu təsirlər nəzəriyyə baxımından olfaktiv qabiliyyətlərdə haloperidol ilə bağlı azalmaya səbəb ola bilər (baxmayaraq ki,45), Daha əvvəl D2 reseptorunun aktivləşdirilməsi, qızılgül həssaslığı və ayrı-seçkiliyin46-48). Bundan əlavə, pilot tədqiqatlarda, ən yüksək haloperidol doza qədər məruz qalan hamster hələ də qida xərçəngi istəklərini49). Bununla yanaşı, CPP-nin blokadası haloperidol ilə əlaqəli CPP bölməsindən çəkinməyə səbəb olan haloperidolun aversiv xüsusiyyətlərinə aid edilməmişdir, çünki 3 2-in aşağı haloperidol, 0.05 və 0.15 mg / kq dozalarının istifadəsi olmadığını göstərmişdir. Bundan əlavə, haloperidol hərəkətə təsir etmədi və yalnız ən yüksək dozada fecal boli çıxmasına təsir etdi. Fecal boli çıxışı klassik olaraq narahatlıq və nifrət göstəricisi olaraq istifadə edilmişdir (50), bu nəticələr, ən yüksək haloperidol doza qədər bir EBM meydana gəlməsinə paraleldir, baxmayaraq ki, bir xəbərdarlıq D2 reseptorunun aktivasiyası enterik sinir sistemində bağırsaq hərəkətliliyini inhibə edir (51). Birlikdə qəbul edilən haloperidolün VS-nin duysal aşkarlanmasına müdaxilə etməsi və ya bu işdə istifadə edilən aşağı dozalarda özünün içində olduğu ehtimal edilmir; Buna görə də, D2 reseptorunun aktivləşdirilməsi VS-nin mükafatlandırılması kimi qəbul edilməsini tələb edir.
Dopamin daha əvvəl cinsi davranışın bir çox aspektində, əvvəlcədən təyin olunan və ya iştahlı davranışlar (52), copulatory və ya istehlakçı davranışlar (53) və cinsi qarşılıqlı əlaqələndirici cavabları (23). Bundan əlavə, D2 reseptorlarında dopaminergik təsir sosioloji stimulların ətraf mühitə və digər istəklər ilə birləşməsi üçün çox vacibdir. Dişi siçovullarda qeyri-spesifik dopamin antagonist blokunun sistemli aşağı dozası şərtləri54) və kokulu eyni cinsi tərəfdaş ilə birlikdə yaşamaq zamanı bir D2 agonisti kişi sıçanlarında oxşar kokulu erkəklər üçün eyni cinsi tərəfdaşlıq üstünlüyünü yaradır55). Monogamous prairie voles də D2 sistemli inyeksiya kimi, lakin D2 deyil, reseptor agonist və antagonist deyil, kişi cərgələrdə ortaq seçim asanlaşdırmaq və pozmaq (məsələn sırasıyla stimul və ya şəxslər ilə cinsi mükafat əlaqə birləşdirmək üçün D1 reseptorunun əhəmiyyətini dəstəkləyir (müvafiq olaraq,56). Cari tədqiqat CXSUMX reseptorunun aktivliyini cinsi iran heyvanlarında qeyd edilməmiş sosial sövqlərə cavab verməkdə dəstəkləyən rol oynayır və cinsi iran siçovullarında başlıca qadınların görmə, eşitmə və xizəksöndürmə qabiliyyətlərini azaltmaqda haloperidolun təsirlərini paralelləşdirir (57).
Amigdala, MPOA və Acb daxil olmaqla, bir çox dopamin həssas beyin bölgəsinin VS-ə qarşı davranış reaksiyalarına7, 18), çox hərəkətli fəaliyyət sahələrində dopamin reseptorlarını antaqonizə etmək üçün sistemli müdaxilə edilmişdir. Dopaminin fəaliyyət göstərdiyi yer (s) bu işdən müəyyən edilə bilməməsinə baxmayaraq, bir neçə ehtimal namizəd var. Dopamin agonistləri və antaqonistləri MPOA-ya daxil olmaq üçün kişi və qadın sıçanlarında müvafiq olaraq cinsi davranışların performansını asanlaşdırır və azaltır (58-61). Bundan əlavə, MPOA gözlənilməz cinsi davranışlara və qadın seçimlərinə də aiddir (62, 63). Mezolimbik sistem, ümumi motor qabiliyyətləri istisna olmaqla, copulatör davranışlarının performansına cəlb edilmir (63, 64). Lakin, Acb-də dopaminergik hərəkət motor effektindən asılı olmayan qadın istəklərinə cavab olaraq artan lokomotor fəaliyyəti və ereksiyalar kimi anticipatory cinsi davranışa cəlb edilə bilər62, 65). Bundan əlavə, Acb cüt bağlama və mate-cue assosiasiyası üçün vacibdir,66, 67). Beləliklə, MPOA, Acb və ya hər iki bölgədə dopamin hərəkətləri CPP üçün vacib ola bilər.
Dopaminergik sistemlərin testosteron modulasiyası
Əvvəlki tədqiqatlar dopaminin tərkibindəki puberte bağlı dəyişiklikləri, daşıyıcıları, reseptorları və Acb (68-73). Bu dəyişikliklərin testosterondakı pubertal yüksəlişdən asılı olmayaraq istisna edilməməsi istisna edilməklə, başlanğıc aşqarlanmanın erkən nümunəsi və D1 və D2 reseptorlarının sıçanın Acb içərisində sonradan budalanması gonadal hormonların olması və ya olmamasından asılıdır74). MPOA dopaminin inkişafında dəyişikliklər qadın kemirgenlərdə yaxşı öyrənilmişdir (baxmayaraq ki,75), erkek MPOA'da dopaminerjik tonda ergen değişiklikleri haqqında daha az bilinmektedir. Lakin, böyüklər MPOA hormon həssaslığı yaxşı qurulmuşdur. Bir neçə tədqiqat göstərir ki, uzunmüddətli (2-8 wk) gonadektomiya MPOA-da bir neçə miqyaslı dopaminergik tonun ölçülməsinə gətirib çıxarır, bununla birlikdə toxuma məzmunu və amfetamin səbəbli dopamin sindromu, qalanlarda isə sıçanlarda ekstrasellüler dopaminin azalması27, 76-79). Vacibdir ki, erkən kişi siçovullarında qadın stimuluna MPOA dopaminerjik cavablar eyni şəkildə testosteron11, 28). Ventral striatumda kastrasyonun təsirləri MPOA-dan daha az tutarlı olsa da, 28 d gonadektomiya, adətən, Acb toxumasında dopamin və DOPAC konsentrasiyalarını azaldır27, 80, 81). Beləliklə, adolesan dövrdə gedən testosteronun normativ artımının VS-ə, MPOA, Acb-də və ya hər ikisinə cavab olaraq dopaminergik sərbəstliyə səbəb olması, beləliklə VS mükafatını təşviq etmək məqsədəuyğudur. Lakin, bu işlərin bir çoxu yetkin heyvanlarda keçirilmişdir və beyin inkişafında bu hipotezi təsdiqləmək üçün daha çox işə ehtiyac var, çünki cavan heyvanlarda testosteronun təsiri böyüklərdən fərqli ola bilər (34).
Birlikdə aparılan bu tədqiqatlar, testosteron və dopaminin, şərtsiz bir sosial stimulun reaksiyasını ödüllendirmekte əhəmiyyətini göstərir. Həm testosteron, həm də dopamin sistemləri yeniyetməlik dövründə yetişir, VS-nin mükəmməl keyfiyyəti əldə edilir. Qeyd etmək lazımdır ki, dopaminerqik dövrəyə girən gənc heyvanlarda CPP-yə VS-ə vasitəçilik etmək funksional ola bilər, lakin VS mükafatına görə bəzi digər sinir sisteminin testosteron-asılı aktivasiyası da vacibdir. Buna baxmayaraq, dəstəkləyən sübutlar nəzərə alınmaqla ən açıq-aydın izah, genç heyvanlarda testosteron müalicəsi, pubertal testosteronda normativ yüksəlişi təqlid edir və VS mükafatına icazə verən dopaminergik sistemə təsir edir.
Minnətdarlıq
Müəlliflər, Jane Venier, Andrew Kneynsberg, Elaine Sinclair, Susie Sonnenschein, Joshua Paasewe, Jennifer Lampen və Shannon O'Connell’i CPP-yə kömək etdikləri üçün minnətdarlıqla qəbul edirlər. Bundan əlavə, müəlliflər Kayla De Lorme və Maggie Mohr'dan eksperimental dizayn və yazı haqqında faydalı rəyləri qiymətləndirirlər.
Bu iş Sağlamlıq Milli R01-MH068764 (CS), T32-MH070343 (MB) və T32-NS44928 (MB) Milli İnstitutu tərəfindən dəstəklənmişdir.
Açıqlama Xülasəsi: Müəlliflər açıqlamağa imkan vermirlər.
Dəyişikliklər
Kısaltmalar:
- Acb
- nüvə akumbens
- CPA
- şərti yerdən qaçınmaq
- CPP
- şərti yerin üstünlükləri
- GDX
- gonadektomize edilmişdir
- MPOA
- medial preoptic sahəsi
- VS
- vaginal sekresyonlar.
References