Amigdala'nın mərkəzi və basolateral nüvələrindəki CRF-CRF1 Reseptor Sistemi fərqli olaraq aromatik qida (2013)

Neuropsychopharmacology. 2013 Noyabr; 38 (12): 2456-2466.

Onlayn 2013 Jul 10 nəşr olundu. Onlayn əvvəlcədən nəşr edilmiş 2013 Jun 10. doi: 10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Attilio Iemolo,¹ Angelo Blasio,¹ Stephen A St Cyr,¹ Fanny Jiang,¹ Kenner C Düyü,² Valentina Sabino,¹ və Pietro Cottone^1,^*

mücərrəd

Yüksək ləzzətli qidalar və pəhriz piylənmə və yemək pozğunluqlarında məcburi yeməyin inkişafına mühüm töhfə verən amillərdir. Əvvəllər kortikotropin sərbəst buraxan amil-1 (CRF) ilə ləzzətli qida məhsullarına fasiləsiz girişin olduğunu göstərdik.₁) reseptor antaqonisti, həddindən artıq ləzzətli yemək qəbulu, müntəzəm çowun hipofagiyası və narahatlıq kimi davranışları əhatə edir. Ancaq bu təsirləri vasitəçilik edən beyin sahələri hələ bilinmir. Kişi Wistar siçovulları ya 7 gün / həftə davamlı olaraq çow qidalanırdılar (Chow / Chow qrup) və ya ara-sıra 5 gün / həftə ard-arda bir saxaroza, ləzzətli 2 gün / həftə qidalanır (Chow / Palatable qrup). Xroniki pəhriz dəyişikliyindən sonra CRF mikroinfüzyonunun təsiri₁ reseptor antaqonisti R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / yan), amiqdala (CeA) mərkəzi nüvəsində, amigdala (BlA) bazolateral nüvəsi və ya stria terminalisin (BNST) yataq nüvəsi həddindən artıq qəbulda qiymətləndirilmişdir. ləzzətli pəhriz, chow hypophagia və narahatlıq kimi davranış. Bundan əlavə, pəhriz dövriyyəli siçovulların beynində CRF immunostaining qiymətləndirilib. Intra-CeA R121919 həm həddindən artıq ləzzətli yemək qəbulunu, həm də narahatlıq kimi davranışları maneə törədir Chow / Palatable siçovullar, chow hipofagiyasına təsir etmədən. Əksinə, intra-BlA R121919 içindəki çow hipofagiyasını azaltdı Chow / Palatable siçovullar, həddindən artıq ləzzətli yemək qəbuluna və ya narahatlığa bənzər bir davranışa təsir etmədən. BNST daxilində müalicə heç bir nəticə vermədi. Müalicələr davranışlarını dəyişdirmədi Chow / Chow siçovullar. Immunohistokimya, CeA-da CRF-pozitiv hüceyrələrin artdığını, lakin BlA və ya BNST-də deyil Chow / Palatable siçovullar, idarələr ilə müqayisədə həm çəkilmə, həm də ləzzətli bəslənməyə yenilənmə. Bu nəticələr CRF-CRF olduğuna dair funksional sübutlar verir₁ CeA və BlA-dakı reseptor sistemi ləzzətli pəhriz velosipedi nəticəsində yaranan zərərli davranışların vasitəçiliyində differensial rol oynayır.

Keywords: kortikotropin buraxan amil, BNST, asılılıq, narahatlıq, hipofagiya, siçovul

GİRİŞ

Yüksək ləzzətli qidaların (məsələn, şəkər və / və ya yağlarla zəngin olan qidalar), piylənmənin və yemək pozğunluğunun müəyyən formalarında məcburi yeməyin ortaya çıxmasında əsas töhfə verən amillər olduğuna inanılır (Corwin, 2006; Yach et al, 2006). Narkomaniya və yüksək dərəcədə ləzzətli qidaların həddindən artıq qəbul edilməsi, narkotik / qida üzərində nəzarəti itirmə, mənfi nəticələrə, sıxıntılara və dərman / yeməkdən imtina etməyə cəhd göstərərkən disoriya olmasına baxmayaraq istifadəni dayandırmaq iqtidarının olmaması arasında bir çox oxşarlıq mövcuddur (Parylak et al, 2011; Volkow və O'Brien, 2007). Bu ümumi simptomlar, narkotik asılılığı və məcburi yemək üst-üstə düşən beyin sxemlərinin disfunksiyasından irəli gəlmək təklif edilmişdir.

Kortikotropin buraxan amil növü 1 (CRF)₁) reseptor antaqonistləri, çəkilmənin motivativ təsirlərini azaltma qabiliyyətinə görə asılılıq pozğunluqları üçün yeni terapevtik hədəflər kimi təklif edilmişdir (Giriş et al, 2011). CRF, stresə qarşı endokrin, simpatik və davranış reaksiyalarının kritik vasitəçisidir (Bakshi və Kalin, 2000; dərə et al, 1981). Hipotalamusun paraventrikulyar nüvəsindəki CRF, hipotalamik-hipofiz-adrenal (HPA) stressə qarşı reaksiyasını idarə edir, halbuki CRF-in davranış təsirləri HPA-dan asılıdır və ekstrahipotalamik beyin bölgələri ilə vasitəçilik edir (Koob və Heinrichs, 1999). Ekstrahipotalamik CRF-CRF₁ reseptor sistemi, intoksikasiya / çəkilmə dövründən keçərək bütün məlum sui-istifadə dərmanlarından asılı olaraq işə qəbul edilir və bu hiperaktivasiya, mənfi gücləndirilmiş mexanizm (yəni çəkilmənin aradan qaldırılması nəticəsində yaranan məcburi dərman qəbulu) vasitəsilə həddindən artıq narkotik qəbul etməsini təşviq edən ümumi bir element hesab olunur. induksiya olunan mənfi emosional vəziyyət; Heilig və Koob, 2007; Koob, 2010; Şalev et al, 2010).

Sui-istifadə və qida maddələri arasındakı oxşarlıqlar müsbət möhkəmləndirici xüsusiyyətlərinə görə geniş öyrənilmişdir (yəni xoş effekt əldə etməklə həddindən artıq qida qəbulu; Yulaf et al, 2012; Blasio et al, 2013b; Corwin və Grigson, 2009; Cotone et al, 2012; Hagan et al, 2003), həddindən artıq qida qəbulunun yüksək dərəcədə dadlı qidalardan çəkilməklə əlaqəli mənfi emosional vəziyyəti aradan qaldırmaq üçün bir "öz-özünə dərman" verə biləcəyi fərziyyəsi nisbətən az araşdırılmışdır (Bale, 2005; Cotone et al, 2009a; Şalev et al, 2010).

Əvvəllər göstərdik ki, yüksək dərəcədə ləzzətli qidalara xroniki, aralıq daxil olmaqdan çıxmaq ekstrahipotalamik CRF sisteminin işə götürülməsinə və CRF-nin yaranmasına səbəb olur₁ reseptordan asılı olan zərərsiz davranışlar, bunlar arasında çox dadlı pəhrizə yenidən daxil olma, həddindən artıq qəbul edilən çow pəhrizinin hipofagiyası və abstinasiya zamanı narahatlıq kimi davranışlar (Cotone et al, 2009a).

Bununla birlikdə, beyin bölgəsinin CRF üçün cavabdeh olduğuna dair birbaşa funksional dəlil₁ Dadlı pəhriz velosipedi səbəb olan reseptordan asılı davranış uyğunlaşmaları yoxdur. Bu araşdırma, buna görə CRF-nin əraziyə xas antaqonizmin olub-olmadığını müəyyənləşdirməyə yönəldilmişdir₁ amigdala (CeA) mərkəzi nüvəsi daxilindəki reseptorlar, amigdala (BlA) bazolateral nüvəsi və ya stria terminalisin (BNST) yataq nüvəsi, çox ləzzətli yeməklərin həddindən artıq qəbulunu, müntəzəm olaraq çıxarılmış hipofagiyanın qarşısını ala bildilər. chow, və narahatlıq kimi davranış. Bundan əlavə, bu araşdırma immunohistokimyadan istifadə edərək, CeA, BlA və BNST-də pəhriz dövriyyəli siçovullarda nəzarət ilə müqayisədə artım olub olmadığını müəyyənləşdirmək məqsədi daşıyırdı. Əvvəllər göstərdik ki, ləzzətli qidadan çəkilmə CeA-da artan CRF ifadəsi ilə əlaqələndirilir, BlA və BNST-in pəhriz velosipedindən necə təsirləndiyi hələlik məlum deyil.

MATERİALLAR VƏ METODLAR

Mövzu

Kişi Wistar sıçanları (n= 140, bunlardan CeA təcrübələri üçün 33 siçovullar, BlA təcrübələri üçün 46 siçovullar, BNST təcrübələri üçün 39 siçovullar və immunohistokimya təcrübəsi üçün 22 siçovullar; Əlavə Cədvəl 1) ağırlığında 180-230 g və 41-47 günlük gəlişdə (Çarlz çayı, Wilmington, MA, ABŞ), 27-saatlıq əks işıqda telli, plastik qəfəslərdə (48 × 20 × 12 sm) tək oturmuşdular dövrü (1100 saat ərzində işıqlar sönür), AAALAC tərəfindən təsdiqlənmiş rütubətdə ((60%) və temperaturla tənzimlənən (22 ° C) vivariumda). Siçovullar var idi ad libitum Qarğıdalı əsaslı çova (Harlan Teklad LM-485 Diyet 7012; 65% kkal karbohidrat, 13% yağ, 21% protein, metabolizə edilə bilən enerji 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, ABŞ) və suya, başqa bir şey göstərilmədiyi təqdirdə. . Bu işdə istifadə edilən prosedurlar, Laboratoriya Heyvanlarına Baxım və İstifadəyə dair Milli Səhiyyə İnstitutuna (NIH nəşr nömrəsi 85-23, düzəliş edilmiş 1996) və Laboratoriya Heyvanlara Qayğı prinsiplərinə uyğundur və Boston Universiteti Medical Campus Institutional tərəfindən təsdiq edilmişdir Heyvanlara qulluq və istifadə komitəsi.

Narkotiklərlə

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropil-pirazolo [2,3-a] pirimidin-7-amin, NBI 30775) deyildiyi kimi sintez edildi Chen et al (2004). R121919, güclü, peptid olmayan, yüksək yaxınlıq CRF-dir₁ reseptor antagonisti (K_i= 2-5 nM), bu CRF-də 1000-dən artıq qat zəif fəaliyyət göstərir₂ reseptor, CRF məcburi zülal və ya 70 digər reseptor növləri (Qriqoriadis et al, 2000). R121919 bir 18: 1: 1 salin qarışığı: etanol: kremofor istifadə edərək həll edildi.

Davranış testləri

Etibarlı ləzzətli pəhriz alternativliyi

Giriş ad libitum əvvəlcədən təsvir olunduğu kimi ləzzətli pəhriz dəyişməsi edildi (Cotone et al, 2008, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012). Qısaca, uyğunlaşmadan sonra, siçovullar əvvəlki 3 - 4 günlərdə qida qəbulu, bədən çəkisi və yem məhsuldarlığı üçün uyğun gələn iki qrupa ayrıldı. Bir qrup daha sonra təmin edildi ad libitum həftədə 7 gün ərzində bir chow pəhrizinə (Chow) daxil olmaq (Chow / Chow, bu araşdırmanın nəzarət qrupu) ikinci bir qrupun həftədə 5 gün, sonra da 2 gün üçün çowa pulsuz girişi təmin edildi ad libitum yüksək dərəcədə ləzzətli, şokoladlı ətirli, yüksək saxaroza bəslənməyə (Palatable; Chow / Palatable qrup). Bütün davranış testləri ən azı 7 həftə pəhriz dövrü olan siçovullarda aparıldı. 'Chow' pəhrizi yuxarıda təsvir olunan Harlan'dan qarğıdalı əsaslı çovdu, dadlı pəhriz isə qidalandırıcı, şokolad ətirli, yüksək sukroz (% 50 kcal), makronutrientlə müqayisə edilən AIN-76A əsaslı bir pəhriz idi. chow pəhrizinə nisbətlər və enerji sıxlığı (şokolad ətirli formula 5TUL:% 66.7 kkal karbohidrat,% 12.7 yağ,% 20.6 protein, metabolizə edilə bilən enerji 344 kcal / 100 g (Test Diet, Richmond, IN, ABŞ) üstünlüklərini artırmaq üçün qida qranulları). Qısalıq üçün hər həftənin ilk 45 günü (yalnız çov) və son 5 günü (təcrübə qrupuna görə çov və ya dadlıdır) bütün təcrübələrdə C və P fazalar. Dadlı pəhriz GPF20 'J'-qidalandırıcılarda (Ancare, Bellmore, NY, ABŞ) təmin edilmişdir. Pəhrizlər heç vaxt eyni vaxtda mövcud deyildi.

Qida qəbulu təcrübələri

Qaranlıq dövr başlanğıcında siçovullar ev qəfəslərində əvvəlcədən çəkilmiş qida ilə təmin edildi. Müalicələr, ən azı 7 həftə ərzində pəhriz dövriyyəsinə girən siçovullarda qəbul edildi.C→P faza) və ya çow pəhrizinə (P→C faza). R121919, CeA, BlA və ya BNST (0, 0.5 və 1.5 μg / tərəfi, 0.5 mkl / tərəfi, 30 dəqiqəlik müalicə vaxtı) daxilində ikitərəfli olaraq mikroinfused edilmişdir;

Açıq qaranlıq qutu sınağı

Siçovullar 10 dəqiqə ərzində işıqlı qaranlıq düzbucaqlı bir qutuda (50 × 100 × 35 sm) sınaqdan keçirildi, oradakı aversiv bölmə (50 × 70 × 35 sm) bir 60 lüks işıq ilə işıqlandırıldı. Qaranlıq tərəf (50 × 30 × 35 sm) qeyri-şəffaf örtük və ∼0 lüks işıq idi. İki bölmə, mövzuların ikisi arasında sərbəst hərəkət etməsinə imkan verən açıq bir qapı ilə bağlandı. Test, ən azı 7 həftəlik pəhriz dəyişikliyindən, 5-9 saat sonra xoş pəhrizdən çow pəhrizinə keçdikdən sonra baş verdi (P→C faza); bu zaman nöqtəsi, ləzzətli yeməkdən çəkilməklə yaranan narahatlıq kimi davranışın meydana gəlməsini təmin edir Chow / Palatable sıçanlar (Cotone et al, 2009a, 2009b). Siçovullar sınaqdan əvvəl ən azı 2 saat ərzində səssiz, qaranlıq bir qaranlıqda saxlanıldı. Ağ səs-küy, yaşayış və sınaq müddətində mövcud idi. Sınaq günündə, siçovullar CeA, BlA və ya BNST (121919, 0 və 0.5 mikro / tərəfi, 1.5 mkl / yan) 0.5 dəqiqə içərisində R30 ilə ikitərəfli olaraq mikroinfused edilmişdir. və davranış sonrakı qol üçün video qeyd edildi. Müalicələr bir mövzu arasındakı dizayn istifadə edərək verildi. Açıq bölmədə keçirdiyiniz vaxt narahatlığa bənzər bir davranış göstəricisi kimi ölçüldü. Aparat su ilə təmizləndi və hər mövzudan sonra quruduldu.

İntrakranial əməliyyatlar, Microinfusion proseduru və Cannula yerləşdirilməsi

İntrakranial əməliyyatlar

Siçovullar, əvvəllər göstərildiyi kimi stereotaksik olaraq ikitərəfli, kəllədaxili cannulalarla implantasiya edildi (Cotone et al, 2007; Iemolo et al, 2012; Sabino et al, 2007). Qısaca paslanmayan polad, bələdçi kanüller (24 ölçülü, Plastics One, Roanoke, VA, ABŞ) ikiqat olaraq CeA, BlA və ya BNST-dən 2.0 mm yuxarıya endirildi. Dörd paslanmayan polad zərgər vintləri kanülün ətrafındakı siçovulun kəllə sümüyünə bərkidildi. Dental bərpaedici dolu qatran (Henry Schein, Melville, NY, ABŞ) və akril sement tətbiq olundu, kanülü möhkəm dəmirləyən bir postament meydana gətirdi. CeA üçün istifadə olunan breqmadan alınan kanula koordinatları bunlardır: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (kəllədən), kəsik çubuğu interaural xəttin üstündə 5.0 mm, atlasa uyğun olaraq. Pellegrino (1979.)). BlA üçün istifadə olunan kanül koordinatları bunlardır: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (kəllədan) düz kəllə ilə Paxinos və Watson (2007). BNST üçün istifadə olunan kanül koordinatları bunlardır: AP −0.6, ML ± 3.5, DV −4.8 (kəllədən) düz kəllə və 14 ° əyilmiş açı ilə. Paslanmayan poladdan hazırlanan dummy stil (Plastics One) cannulanın patentliyini qorudu. Əməliyyatdan sonra siçovullara 7 günlük bir bərpa müddəti icazə verildi, bu müddət ərzində gündəlik işlədilər.

Mikroinfüzyon proseduru

Dərman əvvəllər təsvir edildiyi kimi siçovulların beynində mikroinfused edilmişdir (Blasio et al, 2013b; Dore et al, 2013). İntrakranial mikroinfuziya üçün, dummy stylet bələdçi cannulasından çıxarıldı və bələdçi kanülünün ucundan kənarda 31 mm ölçülü paslanmayan polad enjektörlə əvəz edildi; enjektor PE 2 borusu ilə bir çox şprisli mikroinfüzyon nasosunun (KD Elmi / Bioloji Alətləri, Holliston, MA, ABŞ) idarə etdiyi bir Hamilton mikrosirinqinə (Hamilton, Reno, Nevada) bağlandı. Mikroinfuziyalar 20 min həcmdə çatdırılmış 0.5 μl həcmdə aparıldı; enjektorlar geri axını minimuma endirmək üçün 2 əlavə dəqiqə üçün yerində qaldı.

Cannula yerləşdirilməsi

Cannula yerləşdirilməsi bütün testlərin sonunda yoxlandı (bax.) Şəkil 1). Mövzular anesteziya edildi (izofluran, 2 –3% oksigen) və transcardally perfreded buzlu soyuq 4% paraformaldehid (PFA) suda (pH 7.4) və Cresyl bənövşəyi (0.5 mkl / tərəfində) ilə mikroinfused edilmişdir. Bundan sonra beyinlər 4% PFA-da bir gecədə sabitləndi və PFA-da 30% saxaroza bərabərləşdirildi. 40 μm-in koronal bölmələri bir cryostat (Thermo Scientific HM-525) istifadə edərək toplanmış və yerləşdirmələr mikroskop altında yoxlanılmışdır. Qırx subyektlər (CeA üçün 14, BlA üçün 16 və BNST üçün 10) kanalların düzgün yerləşdirilməməsi səbəbindən təhlildən kənarlaşdırıldı. Səhv yerləşdirmələrin məlumatları, təsirlərin saytın spesifikliyini şərh etmək üçün təhlil edilmişdir.

Şəkil 1

Koronal siçovulların beyin dilimlərinin çəkilməsi. Nöqtələr məlumat analizinə daxil olan amigdala (CeA) (a), amigdalanın bazolateral nüvəsi (BlA) (b) və stria terminalisin (BNST) (c) yataq nüvəsindəki enjeksiyon sahələrini təmsil edir. ...

CRF İmmunohistokimyası

Davranış qaydası, perfuziyalar və immunohistokimya

Sıçanlar (n= 22), xNUMX həftə boyunca dəyişdirilmiş, keyidilmiş və mükəmməlləşdirilmiş 7-2 saat pəhrizdən ya da pəhrizdən çow pəhrizinə keçdikdən sonra (P→C faza) və ya çow pəhrizindən ləzzətli diyetə (C→P faza). Siçovullar əvvəlcədən anesteziya edildi, sonra transcardally mükəmməl salin + 2% (w / v) sodyum nitrit (pH = 7.4) ilə, sonra 4% paraformaldehid ilə Boraxda (pH = 9.5) tamponlandı. Daha sonra siçovullar dekapitasiya edildi və beyinlər dərhal toplanaraq ∼20 ml 4% PFA-ya yerləşdirildi və 30% saxaroza 4% PFA həllində 4 ° C-də doymuşa qədər saxlanıldı.

CRF vizualizasiyası üçün beyinlər bir kriostat istifadə edərək 40 mikron koronal hissəyə bölündü və daha sonra -20 ° C-də bir kriyoprotektorda saxlanıldı. Bütün CeA, BlA və BNST-nin hər altıncı hissəsi (aralarında 240 μm) sistematik təsadüfi bir şəkildə seçilmiş və immunositokimya üçün işlənmişdir. Sərbəst üzən hissələr kalium fosfat tampon salinində (KPBS) yuyulurdu. İlkin yuyulmadan sonra bölmələr endogen peroksidazların qarşısını almaq üçün 0.3 dəqiqə ərzində% 30 hidrogen peroksid KPBS həllində inkubasiya aldılar. Sonra bölmələr yenidən yuyuldu və 3 saat bloklayıcı məhlula (% 0.25 normal keçi serumu,% 100 Triton X0.1 və% 2 iribuynuzlu serum albumin) qoyuldu. Bölmələr daha sonra bloklayıcı məhlulda birincil antikora (1: 100 seyreltmə, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) köçürüldü və 72 ° C-də 4 saat inkübe edildi. Əlavə bir yuyulmadan sonra bölmələr otaq temperaturunda 1 saat blokaj məhlulunda ikincil antikora (1000: 1000 seyreltmə, biotinillənmiş dovşan (BA-2) Vector Laboratories, Burlingame, California) daxil edildi. Bölmələr yuyulur və sonra avidin-biotin horseradish peroxidase ABC həllində (Vector Laboratories) 1 saat blokaj məhlulu ilə inkübe edilir. Bölmələr daha sonra istehsalçının göstərişlərinə əsasən bir diaminobenzidin substrat dəsti (Vektor Laboratoriyaları) istifadə edərək inkübe edildi və reaksiya tamamlandıqdan sonra bölmələr KPBS-də yuyuldu, slaydlara quraşdırıldı və bir gecədə qurumağa icazə verildi. Ertəsi gün slaydlar dərəcə alkoqol konsentrasiyaları istifadə edilərək susuzlaşdırıldı və DPX montajı (Elektron Mikroskopiya Elmləri, Hatfield, PA, ABŞ) istifadə edildi.

CRF + hüceyrə orqanlarının miqdarı

CRF + hüceyrə orqanlarının miqdarı qərəzsiz stereoloji yanaşmaya uyğun aparıldı. Hər bir boyanma dəsti üçün bölmələr seriyası təhlil edildi. Bölmələr, Rotiga 51R canlı video kamerası (QImaging, Surrey, BC, Kanada), üç oxlu MAC2000 XYZ motorlu mərhələ (Ludl Electronics, Hawthorne,) ilə təchiz olunmuş Olympus (Center Valley, PA, ABŞ) BX-6000 mikroskopundan istifadə edərək təhlil edildi. NY, ABŞ) və fərdi kompüter iş stansiyası. Bütün hücrə sayımları, müalicə şərtlərini görməyən bir müstəntiq tərəfindən kodlaşdırılmış slaydlarda edildi. Stereo Tədqiqatçı proqramının (MicroBrightField, Williston, VT, ABŞ) optik fraqmentator iş modulundan istifadə edərək təsadüfi seçilmiş hər bölmənin rəqəmsal təsviri üzərində hər bölgə təsvir edilmişdir. Bütün konturlar bir ədədi diyaframı 2 ilə bir Olympus PlanApo N 0.08X obyektindən istifadə edərək aşağı böyüdülmə ilə çəkildi və ədədi aperturası 40 ilə Olympus UPlanFL N 0.75X obyektindən istifadə edərək hesablandı. Şəbəkə çərçivəsi və sayma çərçivəsi 275 × 160 μm səviyyəsinə qoyuldu. 2 μm və 20 μm bir dissektor hündürlüyü istifadə edildi. Dondurulmuş hissələr əvvəlcə 40 μm nominal qalınlığında kəsilmişdir. Immunostaining və montaj nəticəsində hər sayma yerində ölçülən hissənin qalınlığı yaranır. Orta bir hissə qalınlığı proqram tərəfindən hesablanmış və nümunə bölgəsinin ümumi həcmini və CRF + hüceyrələrin ümumi sayını qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir.

Statistik təhlili

Tələbələr t-testikliklər iki səviyyəli amilləri təhlil etmək üçün istifadə edildi. İki səviyyədən çox olan amilləri analiz etmək üçün ANOVA aparıldı. ANOVA'ların əhəmiyyətli omnibus təsirindən sonra (p<0.05), Fisher's LSD post hoc müqayisə testlərindən istifadə edilmişdir. Dunnett testi, R121919 qəbulunun normallaşdığını təyin etmək üçün istifadə edilmişdir Chow / Palatable vasitə ilə müalicə olunan siçovullar Chow / Chow-fed səviyyələri. İstifadə olunan proqram / qrafik paketlər Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, ABŞ), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, ABŞ), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, ABŞ) və PASW idi Statistika 18.0 (SPSS, Çikaqo, IL, ABŞ).

NƏTİCƏLƏR

R121919 mikroinfuziyasının CeA-ya təsiri

Ləzzətli yeməyin həddindən artıq qəbulu

CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ CeA-dakı reseptorlar, pəhriz dövriyyəli siçovullarda ləzzətli qidaların həddindən artıq miqdarda qəbul edilməsini vasitəçilik edir, biz xüsusi seçilmiş CRF saytını mikroinfused edirik₁ reseptor antaqonisti R121919 bu beyin bölgəsinə daxil olmuş və əvvəlində qida qəbulunu ölçmüşdür P faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 2a, vasitə ilə müalicə olunan ləzzətli pəhriz qidası Chow / Palatable siçovullar çow bəslənmiş nəzarətdən iki qat yüksək idi Chow / Chow siçovullar. CeA CRF-nin antaqonizmi₁ reseptorlar içindəki ləzzətli yeməklərin həddindən artıq yeyilməsini tamamilə maneə törətdilər Chow / Palatable siçovullar, nəzarət siçovullarında qida qəbuluna təsir etmədən (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc Müqayisə göstərdi ki, R121919 (1.5 mkq / yan) ən yüksək doza nəqliyyat vasitəsi ilə müqayisədə dadlı qida qəbulunu xeyli azaldıb Chow / Palatable siçovullar. Qəbul Chow / Palatable 1.5 μg / yan dozanın mikroinfuziyasından sonra siçovulların vasitə ilə işlədilən suqəbuledici baxımından əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi. Chow / Chow siçovullar. CRF üçün təsirlərin spesifikliyini təsdiqləyir₁ CeA-dakı reseptorlar, yerləşmiş kətanları olan subyektlərin qida qəbulunda heç bir təsir göstərməmişdirChow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Şəkil 2

Selektiv kortikotropin buraxan amil-1 (CRF) mikroinfuziyasının təsiri₁) Amiqdalanın (CeA) mərkəzi nüvəsində ləzzətli yeməklərin həddindən artıq çox olması, hipofagiya ilə əlaqəli reseptor antaqonisti R121919 (0, 0.5, 1.5 mkg / yan) ...

Daimi çow pəhrizinin hipofagiyası

CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ CeA-dakı reseptorlar pəhriz dövriyyəli siçovullarda çow pəhrizinin hipofagiyasını vasitəçilik edir, R121919-ı bu beyin bölgəsinə mikroinfuzlaşdırdıq və əvvəlində qida qəbulunu ölçdük. C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 2b, vasitə ilə müalicə suqəbuledici Chow / Palatable siçovulların vasitə ilə müalicə alma ∼1 / 3 idi Chow / Chow siçovullar (hipofagiya). R121919 müalicəsi içindəki müntəzəm çowun hipofagiyasına təsir göstərmədi Chow / Palatable sıçanlar (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Alınan nəticələrin təsdiqlənməsi P mərhələ, CeA-dakı R121919 mikroinfüzyonu nəzarətdəki çow qəbuluna təsir etmədi Chow / Chow sıçanlar (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Kəskin çəkilməyə səbəb olan narahatlıq kimi bir davranış

CeA CRF olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorları, dövriyyəli siçovullarda ləzzətli qidanı çıxarmaqla yaranan mənfi emosional vəziyyətə vasitəçilik edir, biz mikroinfused saytı bu RNNUMX bu beyin bölgəsinə daxil etdik və işıqlı qaranlıq qutu testi 121919 h istifadə edərək narahatlığa bənzər davranışı ölçdük. C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 2c, yüksək dərəcədə ləzzətli pəhrizdən xroniki, ara-sıra çıxarılan siçovullar, işıq-qaranlıq qutunun işıq bölməsində sərf olunan vaxtın azalmasını göstərdi. CeA-dakı R1.5-nin 121919 mkg / tərəfinin mikroinfüzyonu, ləzzətli yeməklərin həddindən artıq yeyilməsini effektiv şəkildə azaltan doza, qutunun işıqlı hissəsinə sərf olunan vaxtı artıraraq narahatlıq kimi davranışları tamamilə blokladı. Chow / Palatable siçovullar, davranışa təsir etmədən Chow / Chow siçovullar (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). CRF üçün effektlərin spesifikliyini təsdiqləmək₁ CeA-dakı reseptorlar, yerləşmiş cannulae olan subyektlərin qida qəbulunda heç bir təsir müşahidə edilməmişdir (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Blaxa R121919 mikroinfüzyonunun təsiri

Ləzzətli yeməyin həddindən artıq qəbulu

BlA CRF olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorlar pəhriz dövriyyəli siçovullarda ləzzətli yeməklərin həddindən artıq miqdarda yeyilməsində vasitəçilik edir, biz mikroinfused saytı xüsusi olaraq R121919 bu beyin bölgəsinə daxil etdik və əvvəlində yemək qəbulunu ölçdük. P faza. R1219191 tətbiq edildikdən sonra CeA'ya daxil edildiyi kimi, CeA'ya göstərildiyi kimi Şəkil 3a seçici CRF-nin ikitərəfli mikroinfuziyası₁ BlA-ya daxil olan reseptor antaqonisti, qida qəbulunu əhəmiyyətli dərəcədə təsir etməmişdir Chow / Palatable sıçanlar (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Eynilə, müntəzəm çow istehlakı Chow / Chow siçovullara R121919 mikroinfuziyası təsir etməyib (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Şəkil 3

Selektiv kortikotropin buraxan amil-1 (CRF) mikroinfuziyasının təsiri₁) Amiqdalanın (BlA) bazol nüvəsində ləzzətli yeməyin həddindən artıq çox olması, hipofagiya reseptor antaqonisti (121919, 0, 0.5 mkg / tərəf) ...

Daimi çow pəhrizinin hipofagiyası

CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ BlA-dakı reseptorlar, dövriyyəli siçovullarda çowun hipofagiyasını vasitəçilik edir, R121919-ı bu beyin bölgəsinə mikroinfused edib, əvvəlcə ərzaq qəbulunu ölçdük. C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 3b, CRF-nin mikroinfuziyasından sonra müntəzəm çow qəbulunun əhəmiyyətli dərəcədə artması müşahidə edilmişdir₁ BlA-da reseptor antaqonisti Chow / Palatable sıçanlar (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Həqiqətən, ən yüksək doza (1.5 μg) R121919 mikro-infeksiyası zamanı BlA-ya daxil olur C faza, müntəzəm çow pəhrizinin istehlakını nəqliyyat vasitəsi ilə müqayisədə 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) faiz artırdı Chow / Chow siçovullar. R121919 enjekte edilmiş, lakin ən yüksək dozada enjeksiyon səbəb olan hipofagiyanı tamamilə bloklamadı. Alınan məlumatları təsdiqləyir P faza, R121919 mikroinfuziyası normal çow qəbuluna təsir etmədi Chow / Chow sıçanlar (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). CRF üçün təsirlərin spesifikliyini təsdiqləyir₁ BlA-dakı reseptorlar, yerləşmiş kətan olan subyektlərin qida qəbulunda heç bir təsiri müşahidə olunmadı (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Kəskin çəkilməyə səbəb olan narahatlıq kimi bir davranış

BlA CRF olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorları, dövriyyəli siçovullarda ləzzətli qidanı kəskin şəkildə xaric etməklə yaranan mənfi emosional vəziyyətə vasitəçilik edir, biz mikroinfused saytı xüsusi olaraq bu beyin bölgəsinə R121919 daxil etdik və narahatlıq kimi davranış 5 h səviyyəsini ölçdük C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 3c, ləzzətli yemək alındı Chow / Palatable siçovullarla müqayisədə işıq bölməsində daha az vaxt keçirdi Chow / Chow siçovullar (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). BlA-ya mikroinfeksiya olunmuş R121919, işıq zonasında keçirdiyi vaxtı əhəmiyyətli dərəcədə təsir etməmişdir (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

R121919 mikroinfüzyonunun BNST-ə təsiri

Ləzzətli yeməyin həddindən artıq qəbulu

BNST CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorlar pəhriz dövriyyəli siçovullarda ləzzətli yeməklərin həddindən artıq yeyilməsində vasitəçilik edir, R121919 bu beyin bölgəsinə xüsusi mikroinfused olub və qida qəbulu əvvəlində ölçülüb P faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 4b, seçici CRF-nin ikitərəfli mikroinfuziyası₁ BNST-dəki reseptor antaqonisti, qida qəbuluna təsir göstərmədi Chow / Palatable sıçanlar (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Eynilə, müntəzəm çow istehlakı Chow / Chow siçovullara R121919 mikroinfuziyası təsir etməyib (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Şəkil 4

Selektiv kortikotropin buraxan amil-1 (CRF) mikroinfuziyasının təsiri₁) stria terminalisin yataq nüvəsində (BNST) reseptiv antaqonist R121919 (0, 0.5, 1.5 mkg / tərəf), ləzzətli yeməklərin həddindən artıq çox yeyilməsi, hipofagiya ...

Daimi çow pəhrizinin hipofagiyası

BNST CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorları, dövriyyəli siçovullarda çow pəhrizinin hipofagiyasını vasitəçilik edir, R121919-ı bu beyin bölgəsinə mikroinfused edib, əvvəlcə ərzaq qəbulunu ölçdük C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 4a, R121919 mikroinfuziyası müntəzəm çow qəbuluna təsir göstərmədi Chow / Chow sıçanlar (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Eynilə, R121919 müalicəsi içindəki müntəzəm çowun hipofagiyasına təsir göstərmədi Chow / Palatable sıçanlar (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Kəskin çəkilməyə səbəb olan narahatlıq kimi bir davranış

BNST CRF-nin olub olmadığını müəyyən etmək₁ reseptorları, dövriyyəli siçovullarda ləzzətli qidanı kəskin şəkildə xaric etməklə yaranan mənfi emosional vəziyyətə vasitəçilik edir, biz mikroinfused saytı bu beyin bölgəsinə xüsusi olaraq R121919 daxil etmişik və 5 saat keçdikdən sonra narahatlıq kimi davranış ölçmüşük. P→C faza. Göstərildiyi kimi Şəkil 4c, ləzzətli yemək alındı Chow / Palatable siçovullar nəzarətlə müqayisədə işıq bölməsində daha az vaxt keçirdi Chow / Chow siçovullar (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). BNST-yə 121919 μg / yan dozada ikitərəfli şəkildə mikroinfeksiya olunmuş R1.5, işıq zonasında sərf olunan vaxtı əhəmiyyətli dərəcədə təsir etməmişdir (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF İmmunohistokimyası

Şəkil 5 içərisində CeA, BlA və BNST-də CRF + hüceyrələrin mikrograflarını göstərir Chow / Chow və Chow / Palatable siçovulların ardınca ad libitum ləzzətli pəhriz alternativ proseduru. CeA'nın CRF immunoreaktivliyinin təhlili arasında əhəmiyyətli bir fərq olduğu ortaya çıxdı Chow / Palatable və Chow / Chow Həm siçovullar, həm də C və P faza (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) və ya BNST (F (2, 19) = 1.16, NS) -də qruplar arasında statistik olaraq əhəmiyyətli bir fərq müşahidə edilmədi.

Şəkil 5

Amigdala (CeA) (a-d), amigdala (BlA) (e-h) və bazia nüvə nüvəsindəki kortikotropin sərbəst buraxan amilin (CRF) immunoreaktivliyinin nümayəndəli mikroqrafları (BNST) ) (i-l) ...

MÜZAKİRƏ

Bu araşdırma, pəhriz dəyişikliyi rejimində siçovullarda yüksək dərəcədə ləzzətli qidaların həddindən artıq miqdarda qəbul edilməsinə cavabdeh olan beyin sahəsini funksional olaraq təyin etmək üçün hazırlanmışdır. Əldə etdiyimiz tapıntılar CeA-nın yüksək ləzzətli yeməklərin həddindən artıq yeyilməsində vasitəçilik etməsində böyük rol oynadığını sübut edir. Bundan əlavə, CeA-dan fərqli olaraq BlA-dakı CRF sisteminin qida mükafatlarının böyüklüyündə azalma zamanı baş verən devalvasiya prosesində rolu olduğunu nümayiş etdiririk.

Əvvəllər göstərdik ki, şəkərli, yüksək dərəcədə ləzzətli bir diyetə təkrar girmə və kəskin şəkildə çəkilmə xoşagəlməz qidaların həddindən artıq çox miqdarda yeyilməsinə, eləcə də müntəzəm çow pəhrizinin kəskin çəkilmədən asılı hipofagiyaya səbəb olur (Blasio et al, 2013a; Cotone et al, 2009a, 2009b). Burada müşahidə olunan həddindən artıq yemək, ekstrahipotalamik CRF-CRF yolu ilə yüksək dərəcədə ləzzətli qidalardan kəskin çəkilmənin təkrar epizodları nəticəsində yaranan mənfi emosional vəziyyətin səbəb olduğu ehtimal edilir.₁ asılılıq pozğunluqlarının altında yatan 'alovlanma' kimi bir prosesi xatırladan reseptor sistem vasitəçiliyi mexanizmi (Breese et al, 2005; Cotone et al, 2009a; Koob, 2008; Parylak et al, 2011).

Bu araşdırmanın nəticələri CRF olduğunu göstərir₁ CeA və BlA reseptorları qidalanma uyğunlaşmaları və xroniki pəhriz dövriyyəli siçovulların narahatlıq kimi davranışlarını fərqləndirirlər. Seçici CRF rəhbərliyi₁ CeA daxilindəki reseptor antaqonisti həm həddindən artıq yemək, həm də narahatlıq kimi davranışa mane oldu Chow / Palatable siçovullar, qəbul edilməyən müntəzəm pəhrizin hipofagiyasına təsir etmədən. Maraqlısı budur ki, R121919-ı BlA-ya daxil etmək, daha az iştahaaçan çow pəhrizinin hipofagiyasını (yəni müntəzəm çow qəbulunu artırdı) artırdı. Chow / Palatable siçovullar, həddindən artıq yemək və ya narahatlıq kimi davranışa təsir etmədən. BNST-də mikroinfused olunduqda, R121919 ölçülən dəyişənlərin heç birinə təsir göstərmədi Chow / Palatable siçovullar (çox ləzzətli pəhrizin həddindən artıq yeyilməsi, müntəzəm çow pəhrizinin qəbulu və kəskin çəkilmədən yaranan narahatlıq kimi davranış). Müşahidə olunan farmakoloji effektlər seçici idi Chow / Palatable siçovullar, çünki R121919, CeA, BlA və ya BNST daxilində mikroinfused Chow / Chow idarə siçovulları, təsir göstərmədi. Buna görə CRF-CRF₁ CeA və BlA reseptor sistemi, xroniki ləzzətli pəhriz velosipedi nəticəsində yaranan davranış nəticələrini fərqli olaraq vasitəçilik edir. Digər tərəfdən, CRF-CRF₁ BNST-nin reseptor sistemi ləzzətli pəhriz dəyişikliyi ilə yaranan davranış uyğunlaşmalarında iştirak etmir.

Davranış və farmakoloji kəşflərimiz CeA'nın içərisində CRF immunoreaktivliyinin müşahidə ilə dəstəkləndi Chow / Palatable siçovullarla müqayisədə xeyli artdı Chow / Chow nəzarət siçovulları, yüksək ləzzətli pəhrizdən çıxmaq və yenilənən izləmə zamanı (Cotone et al, 2009a). Maraqlıdır ki, BlA və ya BNST daxilində qruplar arasında CRF immunoreaktivliyində ciddi fərq müşahidə edilməmişdir. CeA-da artan CRF immunoreaktivliyi Chow / Palatable siçovulların ləzzətli pəhrizdən kəskin çəkilməsinin CeA-da CRF-nin artması ilə əlaqəli olduğunu aşkar etdiyimiz əvvəlki məlumatlara uyğundur (Cotone et al, 2009a). Ancaq əvvəlcədən göstərilənlərə zidd olaraq, ləzzətli pəhrizə çıxışın yenilənməsi CeA-dakı CRF ifadəsinin səviyyələrə nəzarət etməsinə səbəb olmamışdır. Burada əldə edilən nəticələr ilə əvvəlki müşahidə arasındakı uyğunsuzluq beyin toplanmasının fərqli vaxt nöqtəsi və CRF ifadəsini ölçmək üçün qəbul edilən texnikaların fərqli anatomik həlli ilə əlaqəli ola bilər. Bununla birlikdə, CeA'nın çəkilmə zamanı və ləzzətli pəhrizə yenidən daxil olma zamanı müşahidə edilən artım, narahatlıq kimi davranışın blokada edilməsinin (çəkilmə zamanı) və həddindən artıq yemək (yenilənmiş giriş) ilə uyğundur. Chow / Palatable siçovullar. İki araşdırma arasındakı aydın uyğunsuzluğu kollektiv olaraq aşağıdakı kimi izah etmək olar: kəskin ləzzətli qida qəbulu zamanı nəzarət ilə müqayisədə pəhriz dövriyyəli siçovulların CeA-da artması və mənfi təsirin yaranmasına cavabdehdir. CeA CRF ifadəsi, həddindən artıq yeməyə səbəb olan yüksək dərəcədə əlverişli ilk saatlara qədər dəyişir. Həddindən artıq xoş qida istehlakından sonra CRF yenidən nəzarət səviyyəsinə qayıdır (Cotone et al, 2009a).

Göstərilən davranış, farmakoloji və molekulyar nəticələr CRF-CRF ilə bağlı fərziyyəni dəstəkləyir₁ CeA-dakı reseptor sistemi, alkoqol və narkotik asılılığının geniş şəkildə nümayiş olunduğu kimi, mənfi təsirli vəziyyətin və pəhriz dövriyyəli siçovullarda ləzzətli qidanın həddindən artıq qəbul edilməsində vasitəçilik etməkdə mühüm rol oynayır (Koob, 2010). Həqiqətən, etanoldan asılı siçovullar çəkilmə zamanı CeA-da CRF-in hüceyrədənkənar sərbəst buraxılmasını nümayiş etdirir və bir CRF reseptor antaqonistinin CeA-ya daxil olması çəkilmə zamanı artan etanolun özünü idarə etməsinə mane ola bilər (Funk et al, 2006; Merlo Pich et al, 1995). Analoji olaraq, tiryəkdən asılı heyvanlar çəkilmə zamanı CeA-da CRF ifadəsinin artdığını göstərir (May et al, 2003) və CeA-da CRF reseptorlarının blokadası, lakin BNST deyil, çəkilmənin davranış əlamətlərini azaldır (Heinrichs et al, 1995; McNally və Akil, 2002). CRF-CRF üçün əsas rol₁ CeA'dakı sistem, nikotin asılılığında da nümayiş olundu. Həqiqətən, mekamylamine ilə çökmüş nikotin çıxarılması CRF-CRF-in hiperaktivasiyası ilə əlaqələndirilir₁ CeA-da reseptor sistemi (George et al, 2007) və daxili CeA, lakin daxili BlA deyil, bir CRF mikroinfuziyası₁ reseptor antaqonist, beyin mükafat həddində nikotinin çəkilməsindən asılı olan yüksəklikləri azaldır (Bruijnzeel et al, 2012). Kannabinoiddən asılı siçovullarda çöküntü götürülməsi CeA-dakı hüceyrədaxili CRF konsentrasiyasında nəzərə çarpan bir yüksəlmə ilə əlaqələndirilir (Rodriguez de Fonseca et al, 1997). Ümumilikdə bu dəlil CRF-CRF ilə bağlı fərziyyəni qətiyyətlə dəstəkləyir₁ CeA-dakı reseptor sistemi, asılılıq zamanı həddindən artıq narkotik və alkoqol qəbulu ilə birlikdə kəskin çəkilməyə səbəb olan mənfi təsirin əsas vasitəçisidir. Nəticələrimiz bu bilikləri bənzər neyrodaptasiya baş verdiyini irəli sürərək, çox ləzzətli yeməklərin həddindən artıq çox yeməsinə qədər genişləndirir.

Bu tədqiqatın nəticələri göstərir ki, daha az iştahaaçan çörək pəhrizinin ləzzətli qida qəbulundan asılı hipofagiya, seçilmiş CRF-nin BlA-sında mikroinfuziya ilə aktivləşir.₁ reseptor antaqonisti, həddindən artıq yemək və narahatlıq kimi davranış, daxili BlA dərman müalicəsindən təsirlənməmişdir. BlA CRF-CRF-nin differensial iştirakı₁ Pəhriz-velosiped sürməsinin nəticələrindəki reseptor sistemi, chow hipofagiyasının narahatlıq kimi bir davranışdan asılı olmayan bir davranış prosesini təmsil edə biləcəyini göstərir. Əksinə, bu tapıntılar BlA-nın həssas hadisələrin həssas və həvəsləndirici cəhətlərini vasitəçilik etdiyi fərziyyəsinə uyğundur. Həqiqətən, BlA devalvasiya proseslərinin və mükafatların azaldılmasına yönəlmiş reaksiyaların (məsələn, Crespi effekti, ardıcıl mənfi kontrast, mükafat devalvasiyası və s.) Vasitəçilik etməkdə çox vacib olduğuna dair bir çox dəlil mövcuddur HATFIELD et al, 1996; Tuzla et al, 1996; Wellman et al, 2005) və buna görə də yüksək ləzzətli pəhrizdən az iştahaaçan çow pəhrizinə keçid nəticəsində yaranan hipofagiya, enerjili homeostazadan asılı bir mexanizm deyil, yəni hedonik bir devalvasiya prosesini təmsil edə bilər (yəni əvvəlki enerji qəbulundan və ya bədən çəkisi artımından asılı olmayaraq). ; Cotone et al, 2008, 2009b). CRF blokadası₁ BlA daxilindəki reseptorlar, buna görə də yüksək dərəcədə ləzzətli yeməkdən az iştahaaçan çaya keçərkən meydana gələn devalvasiya prosesini pozaraq çow hipofagiyasını azaltmaq üçün (yəni çow suqəbuledici artırmaq üçün) fərz edilir. Bu kontekstə də aiddir, həmçinin BlA-da əldə olunan molekulyar və davranış / farmakoloji nəticələr arasındakı aydın uyğunsuzluq. CRF olsa da₁ reseptor antaqonisti BlA daxilində vurulduqda çow hipofagiyasının həcmini azaltmağı bacardı, nəzarət və pəhriz dövriyyəli siçovulları müqayisə edərkən bu sahədə CRF immunoreaktivliyində ciddi fərqlər müşahidə edilmədi. Bu aydın uyğunsuzluğu alternativ mükafatların BlA-dan asılı devalvasiya proseslərinin fizioloji cəhətdən baş verdiyini və ən yüksək mükafat / enerji dəyərini verən qidaların seçilməsində mühüm bir təkamül əhəmiyyətinə sahib olduğunu nəzərə alaraq izah edilə bilər (Murray et al, 2011). Beləliklə, BlA-dakı bu proseslərin vasitəçiliyinin CRF sistemindəki (CeA-da müşahidə olunanlara bənzər) neyrodaptasiya tələb etmədiyi mübahisəlidir. Bu fərziyyəni dəstəkləmək üçün, həddindən artıq yemək xroniki diyet velosipedinin inkişaf etməsini tələb edərkən, ən az seçilmiş alternativ çovun hipofagiyası, çox dadlı pəhrizdən müntəzəm çowa ilk keçiddən sonra baş verir (Cotone et al, 2008). Bundan əlavə, CRF1 reseptor antaqonistini BlA və CeA, CRF'yə vurmaqla əldə edilən nəticələrə əsasən vurğulamaq lazımdır.₁ Burada müşahidə olunan reseptordan asılı hipofagiya, dərman qəbulunda görülən anhedoniyadan fərqli bir davranış prosesi olduğu ortaya çıxdı. Buna baxmayaraq, ləzzətli qidaya fasiləsiz daxil olmaqdan kəskin çəkilmə, məcburi üzmə testində hərəkətsizliyin artması və mütərəqqi nisbət cədvəlində cavab vermə azalması kimi digər hipohedonik reaksiyalara səbəb oldu.Cotone et al, 2008; Iemolo et al, 2012).

Buna baxmayaraq qeyd etmək yerinə düşər Chow / Palatable siçovullar xroniki olaraq diyetə çevrilmişdir, burada göstərilən davranış və neyrokimyəvi dəyişikliklər xroniki deyil, xoşagəlməz pəhrizdən çəkilmə zamanı baş verir. Bu aspekti vurğulamaq xüsusilə asılılıq tədqiqatında kəskin davranış, farmakoloji və neyrokimyəvi nəticələrdəki dərin fərqlərdir. vs uzadılmış bitərəflik müşahidə edildi (Heilig et al, 2010; Koob və Le Moal, 2008). Gələcək tədqiqatlar uzun çəkilən çəkilmənin diyet velosipedinin nəticələrinə necə təsir göstərəcəyini müəyyən etmək üçün dəyərli olacaqdır.

Müvafiq bir müzakirə nöqtəsi, bu heyvan modeli kontekstində müşahidə etdiyimiz həddindən artıq dadlı qida qəbulu davranışının 'məcburi' sayıla biləcəyidir. Klinika öncəsi bağımlılıq tədqiqatında, 'kompulsif' termini mənfi affektiv vəziyyətin təsiri altında olan və dərmana girişin yenilənməsi ilə azad edilən, çəkilmə zamanı həddindən artıq dərman qəbulunu təsvir etmək üçün geniş istifadə edilmişdir (Ahmed və Koob, 2005; Koob və Le Moal, 2005). 'Məcburi' termininin bu qəbulu kompulsiv pozğunluqların kompulsif davranış etməzdən əvvəl narahatlıq və stres ilə xarakterizə edildiyi və kompulsif davranışı həyata keçirərək stresdən qurtulduğu konseptual çərçivəyə əsaslanır (Koob, 2009; Koob və Volkow, 2010). Burada istifadə olunan heyvan modeli kontekstində həddindən artıq yemək davranışı, dadlı pəhrizə fasilələrlə çıxışı olan siçovulların dadlı qidadan çəkilmə zamanı mənfi bir emosional vəziyyət göstərdiyinə dair əvvəllər dərc olunmuş dəlillər verilərək 'məcburi' davranışın bir forması kimi yozula bilər. girişin yenilənməsi ilə rahatlanan narahatlıq kimi və depresif davranışlarla (Cotone et al, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012).

Xülasə, bu araşdırmanın nəticələri CRF-CRF-nin kritik funksional sübutlarını təmin edir₁ CeA və BlA reseptor sisteminin ləzzətli qidaya ara girməsi nəticəsində yaranan zərərli davranışların vasitəçiliyində differensial rol vardır. CeA-da CRF-CRF₁ reseptor sistemi ləzzətli qidanın həddindən artıq yeyilməsinin və çəkilmədən asılı olan mənfi təsirin əsas vasitəçisidir, BLA-da isə subyektlərin mükafat azaldılması ilə yaranan xoşagəlməz cavablara vasitəçilik edir.

MALİYYƏ VƏ TƏKLİFLƏR

Müəlliflər heç bir maraq doğurmur.

Minnətdarlıq

Texniki yardım üçün Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak, texniki və redaksiya köməyi üçün Tamara Zericə təşəkkür edirik. CRF immunohistokimyası ilə əlaqədar faydalı təkliflər üçün Elena F Crawford'a da təşəkkür edirik. Bu nəşr Milli Narkomaniya İnstitutu (NIDA), Milli Ruh Sağlamlığı İnstitutu (NIMH) və Milli Alkoqol və Alkoqolizm İnstitutu (DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 və AA016731) qrant nömrələri sayəsində mümkün olmuşdur. Peter Paul Karyera İnkişafı Professorluğu (PC) və Boston Universitetinin Lisans Tədqiqat İmkanları Proqramı (UROP) tərəfindən. Bu tədqiqat Milli Narkotik İstismarı İnstitutunun NIH İntramural Tədqiqat Proqramları və Milli Alkoqol Bağımlılığı və Alkoqolizm İnstitutu, NIH, DHHS tərəfindən də dəstəklənmişdir. İçindəkilər yalnız müəlliflərin məsuliyyətindədir və mütləq Milli Səhiyyə İnstitutlarının rəsmi fikirlərini təmsil etmir.

Dəyişikliklər

Əlavə məlumat Neuropsychopharmacology veb səhifəsindəki kağızı müşayiət edir (http://www.nature.com/npp)

Əlavə material

Əlavə məlumat

Əlavə məlumat faylı üçün bura vurun.^{(129K, pdf)}

References

Əhməd SH, Koob GF. Narkomanlığa keçid: mükafat funksiyasının allostatik bir azalmasına əsaslanan mənfi bir möhkəmləndirici model. Psixofarmakologiya (Berl) 2005; 180: 473-490. [PubMed]
Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Şəkər və yağ bingeing heyvan modelləri: qida asılılığı və bədən çəkisinin artması ilə əlaqəsi. Met Biol. 2012; 829: 351 –365. [PubMed]
Bakshi VP, Kalin NH. Kortikotropin sərbəst buraxan hormon və həyəcan təbiliği heyvan modelləri: gen-mühitin qarşılıqlı əlaqəsi. Biol Psixiatriya. 2000; 48: 1175 –1198. [PubMed]
Bale TL. Stressə həssaslıq: CRF yollarının disregulyasiyası və xəstəliyin inkişafı. Horm Behav. 2005; 48: 1 –10. [PubMed]
Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant, ləzzətli qidadan çıxarılan siçovullarda narahatlıq yaradır: mərkəzi amiqdala neyropsikofarmakologiya rolu: 10.1038 / npp.2013.153 [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
Medial prefrontal korteksdə Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioid sistemi, Binge kimi yemək Addict Bioldoi vasitəçilik edir: 10.1111 / adb.12033 [PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Alkoqolizmin etiologiyası üçün konseptual çərçivə: bir 'alovlanma' / stres hipotezi. Psikofarmakoloji (Berl) 2005; 178: 367-380. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M və s. Amigdala'nın mərkəzi nüvəsindəki CRF1 reseptorlarının blokadası siçovullarda nikotinin alınması ilə əlaqəli disforiyanı aktivləşdirir. Farmakol Biokim Behav. 2012; 101: 62 –68. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR və s. 2,5-dimetil-3- (6-dimetil-4-metilpiridin-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] pi rimidin (NBI 30775 / R121919) və strukturu-potensial əlaqələri və dizaynı aktiv kortikotropin buraxan amil reseptor antaqonistləri. J Med Chem. 2004; 47: 4787 –4798. [PubMed]
Corwin RL. Bingeing siçovulları: aralıqlı həddindən artıq davranışın bir modeli. İştah. 2006; 46: 11 –15. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Corwin RL, Grigson PS. Simpoziuma baxış - qida asılılığı: fakt və ya uydurma. J Nutr. 2009; 139: 617 –619. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Pəhriz ilə əlaqəli obezite həssas olan siçovullara qarşı mikrostrukturu qidalandırmaq: urokortinin 2 mərkəzi təsirləri. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB və s. CRF sistemi işəgötürmə, məcburi yeməyin qaranlıq tərəfini vasitə edir. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 2009a; 106: 20016-20020. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Üstünlük verilmiş qidaya fasiləsiz daxil olmaq siçovullarda çowun gücləndirici təsirini azaldır. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066-R1076. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Dişi siçovulların üstünlük verdiyi yeməklərə alternativ çıxışı olan istehlakçı, narahatlıq və metabolik uyğunlaşma. Psikoneuroendokrinologiya. 2009b; 34: 38-49. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Sigma-1 reseptorlarının antaqonizmi, kompulsif yemək yeməyi blok edir. Neyropsikofarmakologiya. 2012; 37: 2593 –2604. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V.PMC pulsuz məqalə] [PubMed] [Çaprazlıq]
Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Amigdalanın mərkəzi nüvəsi içərisində kortikotropin salıcı amil geri çəkilən, etanolla bağlı siçovulların etanolun özünü idarə etməsinə vasitəçilik edir. J Neurosci. 2006; 26: 11324-11332. [PubMed]
George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH və s. CRF-CRF1 sisteminin aktivləşdirilməsi, nikotindən asılı siçovullarda nikotinin özünü idarə etməsində artım səbəb olur. Proc Natl Acad Sci ABŞ. 2007; 104: 17198 –17203. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H və s. In vitro R121919'nın xarakteristikası: yeni bir peptid olmayan kortikotropin buraxan amil1 (CRF1) reseptor antaqonisti, depressiya və narahatlıqla əlaqəli xəstəliklərin potensial müalicəsi üçün. Neuroscience Cəmiyyəti. 2000; Abstract 807: 4-9.
Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Zövqlü yemək və aclığın stresə səbəb olan binge yeməyin heyvan modelində tetikedici amil kimi rolu. Int J Yemək Razılığı. 2003; 34: 183 –197. [PubMed]
Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Bazolateral nörotoksik lezyonlar, lakin mərkəzi deyil, amigdala Pavlovian ikinci dərəcəli kondisioner və möhkəmləndirici devalvasiya təsirlərinə müdaxilə edir. J Neurosci. 1996; 16: 5256 –5265. [PubMed]
Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Kəskin çəkilmə, uzanan abstensiya və alkoqolizmdə mənfi təsir: bunlar əlaqəlidir Addict Biol. 2010; 15: 169 –184. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Heilig M, Koob GF. Alkoqoldan asılılıqda kortikotropin buraxan amil üçün əsas rol. Trend Nevroşlar. 2007; 30: 399 –406. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Amigdala kortikotropin salıcı faktorun basdırılması, morfin çıxarılmasının ehtiyatlı nəticələrini azaldır. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74-80. [PubMed]
Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L və s. Xroniki, fasiləsiz olaraq yüksək dərəcədə ləzzətli bir qidaya girmək məcburi yemək siçovullarında depresif xarakterli davranışa səbəb olur. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593 –602. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Koob GF. Bağımlılıkta beyin stress sistemi üçün bir rol. Neuron. 2008; 59: 11-34. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Koob GF. Asılılıqda kompulsivliyin qaranlıq tərəfi üçün neyrobioloji substratlar. Neyrofarmakologiya. 2009; 56 (Ehtiyat 1: 18 – 31. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Koob GF. Adrenalin qaranlıq tərəfində CRF və CRF ilə əlaqəli peptidlərin rolu. Brain Res. 2010; 1314: 3-14. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Koob GF, Heinrichs SC. Stresslərə qarşı davranış reaksiyalarında kortikotropin sərbəst buraxan amil və urokortin rolu. Beyin Res. 1999; 848: 141 –152. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. mükafat neyrokimyası və narkomaniyanın 'qaranlıq tərəfi' mükəmməlliyi. Nat Neurosci. 2005; 8: 1442-1444. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. Qiymətləndirmə. Bağımlılıkta rəqib motivasion proseslər üçün neyrobioloji mexanizmlər. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113-3123. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Koob GF, Volkow ND. Narkomaniya asılılığı. Nöropsikofarmakologiya. 2010; 35: 217-238. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Narkomaniyada kortikotropini sərbəst buraxan amilin rolu: farmakoloji müdaxilə üçün potensial. CNS dərmanları. 2011; 25: 271 –287. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morigin və amigdalanın siçovul mərkəzi nüvəsində CRF biosintezinə kokain təsiri. Neuropeptidlər. 2003; 37: 105-110. [PubMed]
McNally GP, Akil H., opiatın çəkilməsinin davranış, ağrı modulyatoru və endokrin nəticələrindəki stria terminalisin amigdala və yataq nüvəsindəki kortikotropin buraxan hormonun rolu. Nevrologiya. 2002; 112: 605 –617. [PubMed]
Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF və s. Mikrodializ ilə ölçülən məhdudlaşdırıcı stress və etanolun alınması zamanı oyaq siçovulların amiqdalasında hüceyrədənkənar kortikotropin buraxan amil kimi immunoreaktivlik səviyyəsinin artması. J Neurosci. 1995; 15: 5439 –5447. [PubMed]
Murray E, Wise S, Rodos S. 2011 Fərqli beyinlər mükafatla nə edə bilər In Gottfried JA (eds) .Həssaslıq və mükafatlandırma nevrobiologiyası, Fəsil 4 CRC Press: Boca Raton, FL, ABŞ [PubMed]
Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Qida bağımlılığının qaranlıq tərəfi. Fiziol Behav. 2011; 104: 149-156. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Paxinos G, Watson C. Stereotaksik koordinatlarındakı 2007The Rat Brain6th edn.Aademic Press
Pellegrino A. Siçovul Beyinin Stereotaksik Atlası. Plenum: Nyu York; 1979.
Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Kannabinoid çəkilməsində limbik sistemdə kortikotropin salıcı faktorun aktivləşdirilməsi. Elm. 1997; 276: 2050-2054. [PubMed]
Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Metoxymetopon, yüksək dərəcədə güclü bir opioid agonisti, Sardiniya spirtinə üstünlük verən siçovullarda etanol qəbuluna bifazatik təsir göstərir. Psixofarmakologiya (Berl) 2007; 192: 537-546. [PubMed]
Salinas JA, Valent MB, McGaugh JL. Amigdala bazolateral kompleksinin və ya mərkəzi nüvənin iboten turşusu lezyonları mükafat azalmalarına reaksiya dərəcəsini fərqli şəkildə təsir edir. Beyin Res. 1996; 742: 283 –293. [PubMed]
Şalev U, Erb S, Şaham Y. Narkotik vasitələrin istintaqının stresə səbəb olduğu vəziyyətdə CRF və digər nöropeptidlərin rolu. Brain Res. 2010; 1314: 15-28. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Kortikotropin və beta-endorfinin ifrazını stimullaşdıran bir 41 qalıq yumurtalıq hipotalamik peptidin xüsusiyyətləri. Elm. 1981; 213: 1394 –1397. [PubMed]
Volkow ND, O'Brien CP. DSM-V ilə əlaqəli məsələlər: obezlik beyin narahatlığı olaraq daxil edilməlidir. Am J Psixiatriya. 2007; 164: 708-710. [PubMed]
Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA vasitəçiliyində bazolateral amigdala bloklarının mükafat devalvasiyasını maneə törədir. J Neurosci. 2005; 25: 4577 –4586. [PubMed]
Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Obezitenin və diabetin qlobal epidemiyalarının epidemioloji və iqtisadi nəticələri. Nat Med. 2006; 12: 62-66. [PubMed]