Sucrose Ingestion Hızlı AMPA Reseptorların Qaçaqmalçılığını (2013)

J Neurosci. Müəllif əlyazması; PMC Oct 3, 2013 mövcuddur.
Son olaraq redaktə şəklində dərc olunub:
Yayımcının bu məqalənin son redaktə edilmiş versiyası pulsuz olaraq əldə edilə bilər J Neurosci
PMC-də digər məqalələrə baxın quote dərc edilmiş məqalə.

mücərrəd

Şəkər kimi təbii mükafatların sinaptik ötürülməsinə və davranışa təsir etdiyi mexanizmlər əsasən tədqiq edilməmişdir. Burada, saxaroza suqəbuledici ilə nüvənin accumbens synapses tənzimlənməsini araşdırırıq. Əvvəlki tədqiqatlar göstərmişdir ki, AMPA reseptorları dövriyyəsi sinaptik gücü tənzimləmək üçün əsas bir mexanizmdir və bu vitro, GluA1 alt hissəsini ehtiva edən AMPA reseptorlarının ticarəti ekstrasynaptik və sonra sinaptik reseptorların daşınması ilə əlaqəli iki addımlı bir mexanizmlə baş verir. Bildiririk ki, bir 25% saxaroza məhlulunun təkrarlanan gündəlik qəbulu, müvəqqəti olaraq yüksələn kortəbii lokomotiv və Ca daxil olması ilə gücləndirilmiş accumbens əsas sinapslarıdır.2+- GluA1 ehtiva edən, GluA2 olmayan AMPA reseptorları olan keçiricili AMPA reseptorları (CPARs). Elektrofizyolojik, biyokimyəvi və kəmiyyət elektron mikroskopiya işləri saxaroza təliminin (7 gün) sabit (> 24 saat) intraspinöz GluA1 populyasiyasını yaratdığını və bu siçovullarda tək bir sükroz stimulunun sürətlə (5 dəq), lakin müvəqqəti (<24 saat) yüksəldiyini aşkar etdi. Ekstrasinaptik sahələrdə GluA1. CPAR və dopamin D1 reseptorları tələb olunurdu in saxaroza yedikdən sonra yüksələn lokomotiv üçün vivo. Əhəmiyyətli olaraq, 7% saxaroza yeyilməsinə bənzər, kalorili olmayan bir tatlandırıcı, induksiya edilmiş sinaptik GluA3-nin xNUMX% həllinin gündəlik yandırılması barədə 1 günlük bir protokol. These tapıntıları əvvəllər təsvir edilən çox addımlı GluA1 alverini müəyyənləşdirir vitro, sinaptik ötürülmənin kəskin tənzimlənməsi mexanizmi kimi vivo ilə təbii bir orosensor mükafatı ilə. Ticarət, saxarozanın kalorili dəyərindən asılı olmayan bir kemosensor yol ilə stimullaşdırılır.

giriş

Saxaroza həddindən artıq istehlak əhəmiyyəti olan sağlamlıq problemidir (Hu və Malik, 2010), lakin saxaroza kimi təbii, orosensor mükafatların davranışa təsir etmək üçün sinaptik ötürülməsini tənzimləyən mexanizmlər məlum deyil. Beyin mükafat dövriyyəsinin ayrılmaz bir hissəsi olan nüvədəki sinaptik plastiklikSesack və Grace, 2010), mükafat öyrənmə də daxil olmaqla, həvəsli davranışın bir çox formasına kömək edir (Gün və Carelli, 2007), sosial stresə cavablar (LaPlant və digərləri, 2010və asılılıq patologiyaları (Luscher və Malenka, 2011). Təkrarlanan kokain ifrazatı accumbens və ventral tegramal bölgənin (VTA) neyronlarında sinaptik plastikliyə səbəb olur (Brebner et al., 2005; Grueter et al., 2010; Mameli və digərləri, 2009; Pascoli et al., 2012; Thomas və ark., 2001; Ungless və digərləri, 2001). Uzun müddət çəkilmə ilə müşayiət olunan kokainin özünü idarə etməsi zamanı, sinapslar Ca-nın birləşməsi ilə güclənir.2+Siqnal siqnalları kokain istiliyinin inkubasiyasını aparan GluA2 tərkibli AMPA tipli glutamat reseptorları (CPARs)Conrad və s., 2008; McCutcheon et al., 2011a). Kokainə bənzər, saxaroza kimi orozensor mükafatlar, möhkəmləndirilmiş dumbamin artırmaq (Smith, 2004), lakin oksensor mükafat induksiyası tədqiq edilməmişdir.

AMPA reseptorları (AMPARs) mərkəzi sinir sisteminin həyəcanverici ötürülməsinin ilkin vasitəçiləridir və onların ticarəti öyrənmə və yaddaş daxil olmaqla müxtəlif sinir proseslərinə töhfə verir (Nedelescu et al., 2010; Rumpel et al., 2005; Whitlock et al., 2006). AMPARs dörd fərqli alt hissədən ibarətdir, GluA1-4. GluA2 tərkibli AMPARs Ca edir2+Əsasən GluA2 homomerləri olan GluA1 olmayan reseptorlar (CPARs), Ca-nı keçirir;2+ və daxili düzəliş nümayiş etdirir. GluA1, cAMP-dan asılı olan protein kinazı (PKA) və cGMP-dən asılı olan protein kinaz II (cGKII) tərəfindən Ser 845 fosforlaşmasının iki addım yolu ilə fəaliyyətə bağlı sinaptik trafikə məruz qalır (plazma membranında ekstrasinaptik yerlərdə reseptor yığılmasına kömək edir (Esteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sun və digərləri, 2008; Sun və digərləri, 2005). Sinapsın yanal yayılmasından sonra SerCNUMX-ın PKC tərəfindən fosforlaşması sinapsın daxilindəki AMPAR-ları sabitləşdirir (Boehm et al., 2006), postsinaptik sıxlığa bağlanmışdır (Ehlers et al., 2007; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007). Ca2+/ Serod 567 və Ser 831-ın sakitodulinə bağlı protein kinazı II (CaMKII) fosforlaşması da sinaptik birləşmə və ekstrasinaptik hədəfə töhfə verir (Lu et al., 2010; Roche və digərləri, 1996) sırasıyla. Ancaq olub olmadığı bilinmir vivo ilə CPARların birləşdirilməsində təsvir olunan bu sürətli, çox addımlı mexanizmlərdən istifadə olunur vitro.

Saxaroza kimi bədxassəli mükafatların tənzimlənən sinapsları tənzimləyən mexanizmləri araşdırmaq üçün, qısa saxaroza yeyilməsinin paradiqmasını tətbiq etdik və accumbens neyronlarında sinaptik ötürülmədə ölçüldük. Dəfələrlə saxaroza qəbulunun CPARs daxil edilməsi ilə accumbens sinapsesini gücləndirdiyini və bir saxaroza öyrədilmiş heyvanda tək bir saxaroza stimulunun GluA1 trafikini ekstrasinaptik ərazilərə sürətlə aparmaq üçün kifayət etdiyini müşahidə edirik. Kalorili olmayan bir tatlandırıcı, saxaroza bənzər bir sinaptik ticarəti alver etdiyinə görə, insan alveri kalorili yollara deyil, orosensor cavabdır. Bundan əlavə, CPAR blokadası kortəbii lokomotor fəaliyyətin saxaroza səbəb olan yüksəkliklərinin qarşısını aldı vivo ilə, əlavə mükafatlandırma CPAR'ları təbii mükafatlara cavabların vacib tənzimləyicisi olaraq təyin etmək.

Material və metodlar

Mövzular və cərrahi prosedurlar

Mövzular, gəlişdə 150-300 qram ağırlığında olan Sprague-Dawley siçovulları (Taconic; davranış təcrübələri) və qadın E18 hamilə Sprague-Dawley siçovulları (Taconic; hüceyrə mədəniyyəti təcrübələri) idi. Siçovullar bir 2h / 12h yüngül qaranlıq dövrdə (12: 18-də işıqlar) davranış təcrübələri üçün qəfəs başına 00 yerləşdirilmiş və yemək və suya çıxmışdır ad libitum bütün dövrlərdə. Bütün eksperimental prosedurlar New York Universiteti Tibb İnstitusional Heyvanlara Qayğı və İstifadə Komitəsi tərəfindən təsdiqlənmiş və "Laboratoriya Heyvanlara Qayğı prinsipləri" (NIH nəşr sayı 85-23) uyğun olaraq həyata keçirilmişdir.

Saxaroza təlimi və lokomotor ölçmə

Siçovullar ev qəfəslərində 3 saat ərzində ardıcıl olaraq 2 test otağına daşındı. Dördüncü gün su və ya 25% sukroz olan butulkalar 5 min qəfəs qapağı vasitəsilə daxil edildi. Sonra qablar çəkildi. Bütün təcrübələr üçün, siçovulların işə başlamasından 1 gün ərzində 5 min giriş zamanı ən az 3 g saxaroza içməsi tələb olundu; əslində bütün siçovullar bu meyara uyğun gəldilər. Şüşə çıxarıldıqdan sonra, siçovullar heyvan otağına gətirilmədən əvvəl 30 dəqiqə ərzində test otağında qaldı. Qurban günündə, siçovullar huşsuz olaraq CO tərəfindən düzəldildi2, gilyotin tərəfindən dezapitasiya edildi və buz üzərində toxuma nümunələri toplandı. Lokomotor təcrübələr üçün siçovullar lokomotor ölçmə kameralarında (Accuscan, Columbus, OH) cəmi 35-də yerləşdirildi. Kamerada 15 dəqiqədən sonra, boncuk tıxacı olan bir şüşə kameranın yuxarısından keçərək sabitləndi. Şüşə 5-dəqiqədən sonra kameranın yuxarı hissəsindən çıxarıldı və siçovullar, şüşə çıxarıldıqdan sonra əlavə bir 15 dəqiqə ərzində otaqda qaldı. Bu prosedur 7 ardıcıl gün ərzində eyni şəkildə təkrarlandı. Keçirilən məsafə, heyvan qəfəsini (16 × 16 × 42 sm) öndən və soldan sağa keçirən 42 × 30 infraqırmızı işıq şüaları şəbəkəsi vasitəsi ilə heyvanların fəaliyyətini izləyən VersaMax Sistemi (Accuscan, Columbus, OH) ilə ölçüldü. . Saniyədə 100 dəfə sürətlə taranan şüa vəziyyəti haqqında məlumat diskdə saxlanıldı. Fəaliyyət bir 12 dəqiqəlik sessiyada 3 fərqli 35-min qablarda sm ilə ölçülən ambulator məsafəsi kimi ifadə edildi (son qutu 2-min idi)

Saxarin təhsili

GluA1-ın saxaroza yoluxdurma tacirliyini saxarin qəbulu təsiri ilə müqayisə etmək üçün 12 yetkin kişi siçovulları (250 g) 12 saatlıq işıq / qaranlıq dövrdə heyvan müəssisəsində yerləşdirildi. Bundan sonra bütün siçovullar test otağına gətirilərək, 2 saata buraxıldı və yenidən heyvan müəssisəsinə aparıldı. Bir 4-cu gündən (3 günlük yaşayışdan sonra), siçovullara su, saxaroza və ya saxarin olan giriş şüşələri verildi. 4 siçovullara, qapaqdan qəfəsə qəfəsə çıxan nizə ilə qəfəsin yuxarı hissəsində qalan suyu olan bir şüşə daxil olmaq imkanı verildi. Giriş müddəti 5 dəqiqə idi, sonra şüşə götürüldü və 15 dəqiqədən sonra siçovullar yenidən heyvan müəssisəsinə aparıldı. 4 siçovullara 25% saxaroza məhlulu və 4 siçovullara 3% sakarin həlli (Sweet'n Low) əldə edildi. İstehlak edilən mayenin həcmi ölçüldü. Bu prosedur 7 gün ərzində təkrarlandı. 7-cu gün içməli, dərhal şüşə çıxarıldıqdan sonra, siçovullar qurban verilmiş və accumbens nüvəsi yığılmış və GluA1 səviyyələri Qərb ləkəsi ilə sınanmışdır.

elektrofizyolojisi

Siçovullar yuxarıda göstərildiyi kimi aydın plastik qəfəslərdə tədris edilmiş və 7 günündə şüşə çıxarıldıqdan sonra ketamin (100 mq / kq ip) və ksilazin (10 mq / kq ip) ilə anesteziya edilmiş və soyuq salin ilə transcardally mükəmməlləşdirilmişdir (mEPSC təcrübələri) və ya dərhal dekapitasiya (rektifikasiya təcrübələri). Beyinlər tez bir zamanda süni serebrospinal maye içərisinə salındı ​​(ACSF) aşağıdakılardan (mM-də) ibarətdir: mEPSC təcrübələri üçün: NaCl (118), KCl (2.5), CaCl2 (3), MgCl2 (1), NaHCO3 (26), NaH2PO4 (1), D-qlükoza (10), osmolyarlığı 325 mOsm ilə tənzimlənir və 95% O ilə qazlanır2/ 5% CO2 (pH 7.4); rektifikasiya təcrübələri üçün: 75 saxaroza, 87 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 0.5 CaCl2, 7 MgCl2 6 H2O, 25 NaHCO3, 10% O ilə bükülmüş 95 dekstroz2 / 5% CO2 (pH 7.4). Nüvəli cərəyanları ehtiva edən koronal dilimlər (300μm qalınlığı) bir vibrotome (Leica, VT1200S) istifadə edərək buzlu soyuq ACSF-də kəsilmiş və ACSF-də (ACM-də, mM: 124 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH) suda saxlanılmışdır2PO4, 2.5 CaCl2, 1.5 MgSO4 7H2O, 26 NaHCO3və 10 dekstroz) <30 dəqiqə; sonra bərpa olunmasına imkan vermək üçün otaq istiliyində ən azı 1 saat dilim qabaq inkubatorda saxlayın. MEPSC təcrübələri üçün: daha sonra bir dilim 32 ° C-də bir TC324B sıra içi həll qızdırıcısı və idarəedicisi (Warner Instruments, CT) ilə bir neylon toru tərəfindən batırıldığı bir qeyd kamerasına köçürüldü. Kamera davamlı olaraq 2 ml / dəq sürətlə ACSF tərəfindən perfüze edilmişdir. Nüvə akumbens nüvə bölgəsindən orta tikanlı neyronlar, 5405x uzunluqda iş məsafəsində suya batırma məqsədi ilə təchiz edilmiş Olympus BX50WI dik mikroskopla infraqırmızı-diferensial müdaxilə kontrast video mikroskopu (Hamamatsu C40) istifadə edərək vizual rəhbərlik altında müəyyən edilmişdir. (MM-də): CsCl (4), HEPES (6), EGTA (145) və MgATP (10) -dən ibarət olan bir hüceyrədaxili pipet məhlulu ilə doldurulmuş yamaq elektrodları (0.5-5 MΩ). Osmolarite sükrozla 290 mOsm-ə, pH isə CsOH ilə 7.4-ə düzəldilmişdir. Miniatür həyəcan verici sinaptik cərəyanlar (mEPSC-lər), Axopatch 10B gücləndiricisi (Molekulyar Cihazlar, CA) istifadə edilən bikukullin (1μM) və tetrodotoksin (200μM) iştirakı ilə qeydə alınmış və Digidata 1322A (Molecular Devices, CA) tərəfindən rəqəmləşdirilmişdir. Düzəltmə təcrübələri üçün: dilimlər qeyd kamerasına köçürüldü və perfüze edildi (2.0-2.5 ml dəq.)-1) EPSC'ləri təcrid etmək üçün 33 μm pikrotoksin olan 35 – 50 ° C temperaturda oksigenli ACSF ilə. Somatik bir hüceyrəli qeydlər IR-DIC video mikroskopiyasından istifadə edərək Multiclamp 700B gücləndiricisi (Molekulyar Cihazlar) ilə gerilim sıxacındakı əsas bölgə orta spiny neyronlarından edildi. Yamaq damcıları (4-6 MΩ) hüceyrədaxili məhlulla doldurulmuşdur (mM: 125 Cs-glukonate, 2 CsCl, 5 TEA-Cl, 4 Mg-ATP, 0.3 GTP, 10 fosfocreatine, 10 XNXXE XTA, 0.5 HEPES, 3.5 HEPES, 314 HEPES, 2 HEPES, 10 HEPES, 10 Cs-gluconate; -0.01). Məlumatlar 1 kHz-də süzülür, 5 kHz-də rəqəmsaldır və Clampfit 150 (Molekulyar Cihazlar) ilə təhlil edildi. Kənardaxili stimullaşdırma (0.2-0.05 ms, 0.5-10 μA, 200 Hz) qeyd elektrodundan kiçik bir şüşə bipolyar elektrod 10-70 mm tətbiq edildi. Əsas qeyddən sonra ~ 50 dəqiqə sonra, Naspm (30 μM) olan bir həll 0 dəqiqə ərzində hamamda mükəmməlləşdirildi. EPSC amplitüdündəki dəyişikliklər dərman tətbiqindən əvvəl və sonra −20, −40, −60, XNUMX, + XNUMX, + XNUMX və + XNUMX mV potensiallarında tutuldu. Düzəltmə indeksi (ir) geri çevrilmə potensialındakı hər hansı bir dəyişikliyi düzəltməklə hesablanmış və aşağıdakı tənlikdən hesablanmışdır: ir = (I-70 / 70) / (I+ 40 / 40), harada I-70 və I+ 40 müvafiq olaraq −70 mV və + 40 mV-də qeyd olunan EPSC amplitüdləridir.

Subcellular fraksiya və Qərb ləkələnməsi

Yuxarıda təsvir olunduğu kimi, buz üstündə toplananlar toplanmışdı. Nüvəsi və qabığı ayrıca ayrıldıqda, dopamin β-hidroksilaza sinaptosoma fraksiyalarını sındıraraq, aksonların qabığa yerləşdirilmiş bir fermenti yox, nüvəsini təsdiqlədi (Sesack və Grace, 2010). Bütün hüceyrə, sinaptosom və PSD fraksiyaları əvvəlcədən təsvir olunduğu kimi hazırlanmışdır (Jordan et al., 2004). Sinaptosomal kürəciklər 200 μl 25 mM Tris ilə 1% Triton X-100 ilə birlikdə 4 ° C səviyyəsində 30-min üçün 13,800 ° g-də 15 × g-də 25 × g-də mərkəzləşdirilmiş və pellet PSD-lərində mikroentrifüjdə yerləşdirilmişdir. Xam PSD-lər olan pellet, 2% SDS ilə XNUMX mM Tris-də yenidən quruldu. Əvvəllər təsvir edildiyi kimi SDS-PAGE gelləri üzərində Qərb ləkəsi ilə fraksiyalar təhlil edildi (Jordan et al., 2004). Aşağıdakı antikorlar istifadə edildi: dopamin β-hidroksilaza (1: 1,000, Abcam), GluA1 (1: 1,000, Millipore), fosfor-ser 845 GluA1 (1: 1,000, Millipore), GluA2Xip (1NUMX): (1,000: 1, Sigma).

Elektron mikroskopiyası

Doku yığımı günündə (saxaroza təlimi günü 7), 3 test qruplarından olan siçanlar (Su, saxaroza / su, sukroz; 3 siçovullar / test qrupu) 15-dəq lokomotor ölçmə otaqlarına yerləşdirildi; 15 dəqiqədə kameranın üstü ilə bir şüşə təqdim edildi. Su qrupundakı siçovullar su qəbul etdilər, ucrose qrupundakı siçanlar 25% saxaroza, 25 gün ərzində 6% saxaroza istehlak edən Sucrose / Su qrupundakı siçovullar su aldılar. Siçovullar Nembutal (50 mq / kq ip) ilə dərin anesteziya etdilər və ilk 0.1-dəqiqəlik müddətdə 7.4% paraformaldehid və 4% glutaraldehid olan 0.1 M fosfat tamponu (pH 50) ilə transcardally mükəmməlləşdirildi. sonrakı 3-də bir 20 ml / dəq. Toxuma postembed immunogold (PEG) etiketlənməsi üçün hazırlandı və şəkillər əvvəlcədən təsvir olunduğu kimi çəkildi (Nedelescu et al., 2010). İmmunolabellər asimmetrik sinaptik qovşaqlarda PSD-yə nisbətən mövqelərinə görə “yarıq”, “PSD yaxınlığında” (PSD-dən 1 PSD eni daxilində), “PSD-də”, “İntrazinasiyalı” və ya “ekstrasinaptik membran” olaraq təsnif edildi. hər bir heyvan, 93 sinapsları, akkumulyatorların nüvəsindən nümunələr idi. Təsadüfi seçmə, ilk 93 təsadüfən rast gəlinən sinapsların hamısını analiz edərək, şəbəkəni sistematik şəkildə süpürdük, sonra eyni ante mortem müalicəsi alan üç heyvanın hər birindən eyni sayda sinapsları topladıq. İki növ kəmiyyətləmə aparıldı. Bunlardan biri belin diskret funksional sahələrində meydana gələn PEG hissəciklərinin sayını müəyyən etməklə GluR1-immunoreaktivlik səviyyəsini qiymətləndirmək idi. Digəri PSD-də etiketlənmiş sinapsların nisbətini istənilən sayda PEG hissəciyi ilə qiymətləndirmək idi. Yalnız 1 PEG hissəciyi ilə etiketlənmiş sinapslar, GluR1-PEG prosedurunun spesifikliyini nümayiş etdirən əvvəllər görülən işlərə əsaslanaraq etiketli hesab edildi.Nedelescu et al., 2010). GluR1-immunolabelinqin nisbətinə və səviyyəsinə olan müalicə effektləri planlaşdırılmış hoc müqayisələri (Fisher's LSD) ilə birtərəfli ANOVA tərəfindən təhlil edilmişdir. Təcrübə qərəzliliyini aradan qaldırmaq üçün məlumatlar üçlü görünməmişdir: bir eksperimentator saxaroza təhsili keçirdi və üç test qrupunda heyvanların uçotunu apardı, ikinci bir eksperimentator elektron mikrografları yaratdı və hər bir mikroqrafa yeni bir alfasayısal kod təyin etdi və kod möhürləndi. , və üç əlavə təcrübəçi mikrografları və miqdarda PEG hissəciklərini skan etdi. PEG miqdarı tamamlandıqdan sonra, eksperimenterlər hər bir mikroqrafın şəxsiyyətlərini aşkar etmək üçün toplaşdılar.

Cannula implantasiyası və intrakranial enjeksiyonlar

Naspm və APV-ni accumbens nüvəsinə çatdırmaq üçün intrakranial inyeksiya tətbiq edildi. Daha əvvəl təsvir edildiyi kimi cannula implantasiyası üçün (Carr və digərləri, 2010), siçovullar ketamin (100 mq / kq ip) və xylazin (10 mq / kq ip) ilə dərin bir anesteziya edildi və əməliyyatdan sonra analjezik benamin (1 mq / kq dərialtı) ilə vuruldu. Siçovullar stereotaksik olaraq iki 26 ölçülü bələdçi cannulae (PlasticsOne, Roanoke, VA) ilə ikitərəfli olaraq akkumulyasiya nüvəsində koordinatları olan: 1.6 mm qabaqdan; Sagittal tikəyə 2.9 mm yanal, ucları 8 ° orta xəttə, 5.6 mm ventral kəllə səthinə doğru. Cannulae diş akril tərəfindən yerində tutuldu və bir oklüzyon stil ilə qorunur. İntrakranial enjeksiyonlar üçün, Naspm və APV məhlulları, 30-mkl Hamilton şprislərinə 50-mkl Hamilton şprislərinə bir ucunda bağlanmış iki 25 sm uzunluğunda 31 mm genişlənmiş enjektör kanülünə əlavə edildi. implantasiya edilmiş bələdçilərdən kənarda. Şprislər bir 2.0 saniyə ərzində 2272 μl enjeksiyon həcmini çatdıran Harvard 0.5 mikrolitr şpris nasosunun əkiz sahiblərinə quraşdırıldı. Enjeksiyonlar tamamlandıqdan bir dəqiqə sonra enjektör kanalları bələdçilərdən çıxarıldı, stiletlər dəyişdirildi və heyvanlar saxaroza təhsili üçün lokomotor sınaq kameralarına yerləşdirildi. Heyvan qurbanlığından sonra kriogenik beyin bölmələri cannula lokalizasiyası üçün təhlil edildi; 100 heyvanlardan 2, kətanların düzgün yerləşdirilməməsi səbəbindən tədqiqatdan kənarlaşdırıldı.

Statistik təhlil

Fisher post hoc testlərinin izlədiyi birtərəfli ANOVA, elektron mikroskopiya, immunokitokimya və biotinilasiya təcrübələri üçün istifadə edilmişdir. Elektrofiziologiya üçün iki quşlu Tələbə t-testlərindən istifadə edildi. Saxaroza hiperaktivliyi təcrübələri üçün Fisher post hoc testlərindən sonra iki tərəfli ANOVA istifadə edildi.

NƏTİCƏLƏR

Bir saxaroza udma paradiqmasının xarakteristikası

Təbii, orosensor bir mükafatın sinaptik ötürülməsinə təsirini araşdırmaq üçün saxaroza qəbuletmə paradiqması tətbiq etdik (Şəkil 1A). Yetkin kişi siçovulları ardıcıl üç gün bir test otağına daşındı. Dördüncü gündə (məşqin ilk günü) siçovullar lokomotor ölçmə kamerasına yerləşdirildi. Otaqdakı 15 dəqiqəlik lokomotor fəaliyyətin ölçülməsindən sonra, suyu (Su heyvanları üçün) və ya 25% saxaroza məhlulu (Şəkər heyvanları üçün) olan şüşələr, kameranın qapağındakı deşiklər vasitəsilə ölçmə kameralarına daxil edildi. Şüşələr 5 dəqiqədən sonra çıxarıldı və heyvanların ev qəfəslərinə qaytarılmasından əvvəl lokomotor fəaliyyət əlavə bir 15 dəqiqə ölçüldü. Bu proseduru 7 ardıcıl gün ərzində təkrarladıq. Bəzi təcrübələrdə saxaroza təhsili bir 8-a qədər uzadılmışdırth gün. Yüksək ləzzətli bir həll yoluna qısa, qeyri-şərti giriş bizə saxaroza qəbulunun həm kəskin, həm də kumulyativ təsirlərini araşdırmağa imkan verdi, belə ki, heyvanlar təlimdən sonra üç gün ərzində giriş pəncərəsi içərisində etibarlı bir şəkildə saxaroza qəbul etdi. (Şəkil 1B). Bu təcrübi şərtlər, həzm dayandırıldıqdan dərhal sonra test qruplarını müqayisə etməyə imkan verdi. Tədqiqata daxil olma meyarımız siçovulların təlim başlandıqdan sonra üç gün ərzində giriş dövründə ən azı bir qram sukroz istehlak etməyə başlaması idi; bu meyar əsasında heç bir heyvan tədqiqdən xaric edilməmişdir.

Şəkil 1  

Təkrarlanan saxaroza qəbulu kortəbii lokomotivin keçici yüksəkliklərinə səbəb olur.

Təlimdən sonra üç gün ərzində saxaroza heyvanlarının su heyvanlarına nisbətən suda su həllini daha çox istehlak etdiyini müşahidə etdik (Şəkil 1B). Bundan əlavə, 1 - 6 təlim günlərində spontan lokomotivdə ciddi fərqlər müşahidə olunmadı (məlumat göstərilməmişdir), 7 günündə şüşə qaldırıldıqdan üç dəqiqə ərzində su heyvanları ilə müqayisədə saxaroza heyvanları arasında olan ümumi məsafənin əhəmiyyətli dərəcədə artdığını müşahidə etdik (Şəkil 1D) və bu fərq də 8 günündə (Şəkil 1E). Sınaq günlərindən hər hansı birində şüşə tətbiq edilməzdən üç dəqiqə əvvəl Su və Şəkər heyvanları arasında məsafədə ümumi məsafədə heç bir fərq müşahidə edilmədi (Şəkil 1C), yüksəlmiş lokomotivin lokomotor kameraya şərti cavab vermək əvəzinə, saxaroza öyrədilmiş siçovul üçün xüsusi saxaroza qəbuluna kəskin reaksiya olduğunu söylədi. Bu ehtimala uyğun olaraq, istehlak edilən saxaroza miqdarı ilə gedilən ümumi məsafə arasında əhəmiyyətli bir müsbət əlaqə mövcud idi (Şəkil 1F). 7 günlük təlimdən əvvəl və ya sonra Sukroza və Su qrupları arasında heyvan çəkilərində heç bir fərq yox idi (məlumatlar göstərilmir).

Saxaroza qəbulu CPAR birləşməsini təşviq edir

Saxaroza təlimi son məşq günündə lokomotivin keçici yüksəlməsinə səbəb oldu. Saxaroza yeyilməsinin bu nəticəsinin, mükafat davranışını tənzimləyən bir bölgə olan nüvənin accumbensindəki elektrofizyolojik dəyişikliklər ilə müşayiət olunduğunu müəyyən etmək üçün 7 günündə şüşə qaldırıldıqdan dərhal sonra nüvənin böyüdülmə hissəsini hazırladıq və accumbens nüvəsinin neyronlarından qeyd etdik (Şəkil 2A). Əsas subregion, mükafatlandırıcı stimullara lokomotor reaksiyalarda tətbiq edilmişdir (Sesack və Grace, 2010). Su heyvanları ilə müqayisədə sukroz heyvanlarının böyüdülmə nüvəsində həm amplituda, həm də spontan miniatür həyəcan verici postsinaptik cərəyanların (mEPSCs) tezliyinin daha yüksək olduğunu aşkar etdik (Şəkil 2B). Bu, təkrar sukroz istehlakının nüvənin accumbens nüvəsindəki sinaptik ötürülməsini müsbət tənzimlədiyini göstərdi. Saxarozadan sonra CPAR birləşməsinin potensiasiyada rol oynadığını müəyyən etmək üçün, müxtəlif membran potensiallarında EPSC-ləri ölçərək (accumbens core neurons) rektifikasiya indekslərini təyin etdik (Rəqəmlər 2C, 2D və 2E). CPARlar, endogen poliamin blokadası səbəbindən depolarizasiya edilmiş potensiallarda daxili olaraq düzəldilir. Su heyvanları ilə müqayisədə I / V münasibətlərində qeyri-xətti ilə göstərildiyi Sukroz heyvanlarının neyronlarından edilən qeydlərdə əhəmiyyətli rektifikasiyanı müşahidə etdik (Şəkil 2E), rektifikasiya indeksinin əhəmiyyətli dərəcədə artmasına əlavə olaraq (Şəkil 2F).

Şəkil 2  

Accumbens əsas sinapsları təkrar saxaroza yedikdən sonra güclənir.

CPAR səviyyəsinin yüksəlməsini başqa bir üsulla təsdiqləmək üçün, xüsusi CPAR blokerini, 1-Naftilasetil spermini (Naspm) banyoya daxil etdikdən sonra accumbens core neurons-dan qeyd etdik. Su Nəzminin Sucrose-dən olan neyronların qeydlərində EPSC amplitüdünün əhəmiyyətli dərəcədə azaldığını, lakin Su heyvanlarının olmadığını gördük (Rəqəmlər 3A-C). Bundan əlavə, Naspm müalicəsindən sonra, Sucrose heyvanlarının neyronlarında I / V əlaqələri, Şəkər heyvan sinapslarında CPARların inhibisyonunu əks etdirir, Su heyvanlarının neyronlarında Naspm müalicəsindən sonra I / V əlaqələrinə heç bir ciddi təsir müşahidə edilmədi (Rəqəmlər 3D). Bu nəticələr göstərir ki, təkrar suxari yeyilməsi CPAR-ların accumbens nüvəsinin sinapslarında yer almasına səbəb olur.

Şəkil 3  

Şəkər suyu qəbulu Ca2 + - keçə bilən AMPA reseptorlarının birləşməsinə səbəb olur.

Sucrose udma GluA1 alverini təşviq edir

CPARs, GluA2 AMPA reseptor alt hissəsinə sahib olmayan AMPA reseptorlardır. Beləliklə, CPAR-ların sinaptik birləşməsi GluA1 alt qrupunun sinaptik aktivliyə bağlı alverini əhatə edir (He və digərləri, 2009; Isaac et al., 2007; Liu və Zukin, 2007; Bitki et al., 2006). Saxaroza məşqindən sonra CPAR sinaptik birləşməsini təsdiqləmək üçün, saxaroza qəbulunun GluA1-ın sinaptik ifadəsinin artıb-artmadığını araşdırdıq. Siçovullara 7 ardıcıl gün ərzində yuxarıda təsvir olunduğu kimi saxaroza girmə imkanı verildi. 1, 3, 5 və 7 günlərində bütün hüceyrəni, sinaptosom və postsinaptik sıxlığı (PSD) fraksiyalarını üç beyin bölgəsindən ayırdıq: accumbens core (core), accumbens shell (shell) və somatosensory korteks (korteks). Bütün hüceyrə və PSD fraksiyalarını GluA1 və GluA2 ifadəsi üçün Qərb ləkəsi ilə təhlil etdik.

Müayinə olunan sınaq günlərində accumbens lizatların bütün hüceyrə fraksiyalarında GluA1 və ya GluA2-də dəyişiklik olmadığını, təkrar sukroz istehlakının bu zülalların ümumi səviyyəsini tənzimləmədiyini təklif etdik (Rəqəmlər 4A-C). Accumbens PSD fraksiyalarında, lakin GluA1, Xluum 7 günündə nüvədə əhəmiyyətli dərəcədə artdı, lakin GluA2 hər iki fraksiyada əhəmiyyətli dərəcədə dəyişmədi (Rəqəmlər 4D - 4F və məlumatlar göstərilmir). Əvvəlki sınaq günlərində accumbens əsas PSD fraksiyalarında GluA1-da ciddi artım müşahidə etmədik (Rəqəmlər 4D – F) və GluA1 və ya GluA2 test günlərinin heç birində korteks PSD fraksiyalarında dəyişmədi (məlumatlar göstərilmir). Xüsusilə GluA1-a nisbətən artan GluA2, yuxarıda göstərildiyi kimi, təkrar sukroz qəbul edildikdən sonra böyümüş əsas nüvəli PSD-lər artan rektifikasiyaya uyğundur.

Şəkil 4  

Saxaroza yeyildikdən sonra nüvələrarası birləşmələr nüvəsində GluA1 deyil, postsinaptik sıxlıq artır.

Fəaliyyətə bağlı GluA1 ticarəti, sinaptik plastikliyi təmin etdiyi göstərilmişdir vitro və həmçinin vivo ilə (Lu və Roche, 2011). GluA1 ticarəti üçün sürətli, çox addımlı bir mexanizm nümayiş etdirildi vitro (Serulle et al., 2007; Sun və digərləri, 2008; Sun və digərləri, 2005). Ancaq bu günə qədər bu çox addımlı mexanizmin GluA1 sinaptik yığılmasına verdiyi töhfə vivo ilə sınaqdan keçirilməyib. Saxaroza təliminin GluA1 alverini kəskin şəkildə multistep mexanizmi ilə hərəkətə gətirdiyini müəyyən etmək üçün, GluA1 nüvəsini saxaroza və suya öyrədilmiş heyvanların kəmiyyət elektron mikroskopiyası ilə akupenasiya etdik. Accumbens əsas toxuması siçovulların 3 test qruplarından saxaroza təliminin yeddinci günü yığılmışdı. Bunlar siçovullar idi: 1 gün ərzində 7 gün (Su), 2) 7 gün ərzində suxarisi istehlak etdi (Saxaroza) və 3) 6 gün ərzində saxaroza və gündə 7 (Su / Su) su istehlak etdi. Siçovullar 7-da qurban verildith gün, saxaroza və ya su istehlakından sonra 5 dəqiqə. Beləliklə, test qruplarından ikisini, saxaroza / su və saxaroza heyvanlarını bir-birinə və Su heyvanlarına müqayisə etmək, saxaroza təlimində olan siçovullarda saxaroza istehlakı nəticəsində yaranan postsynaptik dəyişikliklərin zaman səviyyəsini aşkar etdi. 1 fərqli postynaptik bölmələrdə postembed immunogold (PEG) etiketli GluA5 ölçdük: dendritik onurğa sitosolu (intrasinoz), ekstrasinaptik plazma membranı (membran), PSD, PSD yaxınlığında və sinaptik yarıq, PSD kimi qruplaşdırıldı. '(Şəkil 5A). Təcrübəçi qərəzliliyini aradan qaldırmaq üçün, elektron mikroqraf test qrupu şəxsiyyətləri üçlü kor idi.

Şəkil 5  

Elektron mikroskopiyası saxaroza yeyərək çox pilləli GluA1 alverinin induksiyasını aşkar edir.

Həm sukroz, həm də saxaroza / Su heyvanları Su heyvanlarına nisbətdə əhəmiyyətli dərəcədə yüksəldilmiş damardaxili GluA1 nümayiş etdirdi (Şəkil 5B və 5C). Bu, xroniki saxaroza istehlakının GluA1 tərkibli AMPA reseptorlarının sinaptik ərazilərə bitişik bir hüceyrədaxili bir hovuzu, sinaptik ticarəti üçün hazır ola bilən reseptorları artırdığını və ən əsası bu hüceyrədaxili hovuzun saxaroza son istehlakından sonra 24 saat davam edə biləcəyini göstərir. . Daha sonra kəskin bir sukroz stimulunun sürətli GluA1 alverinə səbəb ola biləcəyinin vacib sualı araşdırdıq. Ekstrasinaptik plazma membran GluA1, saxaroza heyvanlarında həm saxaroza / su və su heyvanlarına nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə artdığını müşahidə etdik (Rəqəmlər 5B və 5D). Bu müşahidə, tək bir sükroz stimulunun verdiyi təbii, orosensor bir mükafatın sürətlə (<5 dəq), lakin müvəqqəti olaraq (çürümə müddəti <24 h) GluA1 ehtiva edən AMPA reseptorlarının ekstrasinaptik populyasiyasını yüksəldə biləcəyini və reseptorların olduğu bir hovuz yaratdığını göstərir. sinaps trafik bilər.

Qeyd edək ki, vitro tədqiqatlar AMPA reseptorlarının sinaptik birləşməsinin 2 addımlarında baş verdiyini təklif etdi. Birincisi, glutamat və ya dopamin asılı Ser 845 fosforlaşması plazma membranında ekstrasinaptik yerlərdə reseptorların səviyyəsini yüksəldir (Esteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sun və digərləri, 2008; Sun və digərləri, 2005), ikincisində isə Ser 818 fosforlaşması sinaptik birləşməni təşviq edir (Boehm et al., 2006). Saxaroz heyvanlarını saxaroza / su və su heyvanları ilə müqayisə etdiyimiz elektron mikroskopumuz GluA1 alverinin ilk addımının müşahidə olunduğunu göstərir. vitro (Makino və Malinow, 2009), ekstrasinaptik membrana sürətli yoluxma da baş verir vivo ilə bir orosensory mükafat təmin sonra.

Yuxarıda göstərilən elektrofizyolojik və biokimyəvi nəticələrə uyğun olaraq, PEG EM, saxaroza qəbulunun GluA1 ticarəti GluA1 reseptorunun sinapsa ikinci addım atdığını sübut etdi, çünki PSD-də GluA1-immunoreaktivliyin səviyyəsi su siçovulları ilə müqayisədə saxaroza nisbətən daha yüksək idi. Su siçovullarına nisbətən saxaroza / suda GluA1-ın artmasına meyl var idi (Rəqəmlər 5B və 5E). Şəkər / Su heyvanlarının artması ya GluA1-ın sürətli birləşməsi ilə ~ 24 saatlıq sinaptik yarım ömrü, ya da GluA1-ın sürətli birləşməsi və oxşar bir müddət ərzində sinaptik GluA1 / 2 ilə əvəz olunmasıdır. PSD-də GluA1 ifadə edən sinapsların nisbəti Su siçovullarına nisbətən saxaroza siçovullarında da xeyli çox idi (Şəkil 5F), GluA1-in əvvəllər GluA1-dən məhrum olan sinapslara satılmasını təklif edir. Bu, həmçinin saxaroza siçovullarında müşahidə olunan mEPSC amplitüdündəki artımın sinaptik GluA1 artımından qaynaqlandığını və mEPSC tezliyindəki artımın GluA1-in əvvəllər səssiz olan akumbens sinapslarına cəlb olunmasından qaynaqlana biləcəyini, baxmayaraq ki, glutamat sərbəst buraxılma potensialının ləğvi mümkün deyildir. Sükroz qəbulunun sinaptogenezə səbəb olub olmadığını müəyyən etmək üçün üç test qrupunun hər birində sinaps sayını ölçdük; üç test qrupu arasında heç bir fərq yox idi (məlumatlar göstərilməyib). Təkrarlanan saxaroza qəbulunun GluA24-in stabil (> 1 saat) intraspinöz hovuzunu qaldırdığı və saxaroza öyrədilmiş (6 gün) siçovulun tək bir sükroz stimulunun GluA5-i ekstrasinaptik plazma membranında sürətlə (1 dəq) qaldırması üçün kifayət etdiyi qənaətinə gəlirik. intraspinous hovuzdan reseptorların çəkilməsi. Bu ekstrasinaptik reseptorların bir hissəsinin PSD-yə stabil şəkildə daxil edildiyini, müşahidə edilən rektifikasiya indeksinə və PSD GluA1 dəyişikliyinə səbəb olduğunu, ekstrasinaptik hovuzun stimullaşdırmadan 24 saat sonra başlanğıc səviyyəsinə qayıtmasından əvvəl təklif edirik. Bu nəticələr, təbii bir mükafatın kəskin şəkildə təlim keçmiş bir heyvanda sürətli GluA1 alverinə səbəb ola biləcəyini göstərir.

Saxaroza yedikdən sonra yüksəlmiş lokomotiv üçün CPAR fəaliyyəti tələb olunur

Orta spiny neyronlar həm dopaminergik, həm də glutamatergik girişləri alır (Calabresi, et al., 1992). Saxaroza öyrədilmiş siçovullarda saxaroza yedikdən sonra müşahidə etdiyimiz yüksəlmiş spontan lokomotivdə glutamat siqnalının iştirakını qiymətləndirmək üçün, siçovulların accumbens nüvəsinə cannulalar implantasiya etdik və yuxarıda göstərildiyi kimi lokomotor ölçmə kameralarında heyvanlar yetişdirdik. Saxaroza təlimi günündə 8, lokomotor test otağına yerləşdirilmədən əvvəl Naspm-i nüvəyə vurduq. Enjeksiyon, saxaroza heyvanlarının getdiyi ümumi məsafəni azaltdı və şüşə qaldırıldıqdan dərhal sonra görüldüyü saxaroza və su heyvanları arasındakı fərqi aradan qaldırdı (Şəkil 6A). Heyvanlarla rəftar nəticəsində yaranan stresin saxaroza reaksiyasına təsir etmədiyini yoxlamaq üçün, ertəsi gün (şəlalə təliminin 9 günü) nüvəyə duz vurduq; Şüşə qaldırıldıqdan dərhal sonra saxaroza heyvanlarında yenidən əhəmiyyətli hiperaktivlik müşahidə edildi (Şəkil 6B). Bu, Naspm-in saxaroza səbəb olan lokomotor yüksəlişin qarşısını aldığını göstərir. NMDAR antaqonistinin, APV'nin sonrakı günlərdə nüvəyə enjeksiyonu, saxaroza və su heyvanları arasındakı fərqi də aradan qaldırdı (Şəkil 6C), NMDARların saxaroza yedikdən sonra spontan lokomotivin yüksəlməsi üçün də tələb olunduğunu nümayiş etdirir. Test kamerasına şərti bir cavabın hiperaktivlik induksiyasında rol oynadığını müəyyən etmək üçün heyvanlar 35 min şüşə daxil edilmədən otaqda yerləşdirildi; Şəkər və Su heyvanları arasında məsafədə heç bir fərq müşahidə edilmədi (Şəkil 6D). Naspm və APV saxaroza istehlakına təsir etmədi (Şəkil 6E), əsas CPARs və NMDAR-ların saxarozanın güclü alınması üçün lazım olmadığını nümayiş etdirir. Canulular olan heyvanlar, qurban kəsildikdən sonra qiymətləndirildiyi kimi (accumens nüvəsinə (2 heyvan xaricində 15) yerləşdirilmədi (Şəkil 6F), tədqiqata daxil edilməmişdir. Nəticə olaraq, bu məlumatlar birlikdə saxaroza tükənmiş bir siçovul tərəfindən istehlakın 1 dəqiqə ərzində GluA5-ın sinaptik ticarəti təşviq etdiyini və bu ticarəti idarə edən siqnal mexanizmlərinin blokadası saxarozadan sonra spontan lokomotor fəaliyyətin yüksəlməsinin qarşısını aldığını göstərir.

Şəkil 6  

Saxaroza yedikdən sonra yüksələn kortəbii lokomotiv CPARs və NMDAR tələb edir.

Saxaroza siqnal vermək üçün iki yol nəzərdə tutula bilər. Biri, ciddi bir kimosensor və ya orozensor yol, saxaroza şirin dad reseptoru ilə bağlanaraq, heteromerik G protein ilə bağlanmış reseptorlar kompleksinə, T1R2 / T2R3 (Kitagawa et al., 2001; Max et al., 2001; Nelson et al., 2001; Sainz et al., 2001). Kalori ilə zəngin olan qida maddələri, beyin fəaliyyətini dadından asılı olmayaraq metabolik yollarla tənzimləyə bilər, baxmayaraq ki mexanizmlər yaxşı başa düşülmür (de Araujo et al., 2008). Saxaroza səbəb olan GluA1 ticarəti yolunun bu iki alternativini ayırd etmək üçün, 4 dəqiqə ərzində su, 5% saxaroza məhlulu olan şüşələrə giriş verilən üç qrup siçovul (25 siçovul / qrup) ilə təlim protokolunu təkrarladıq. , və ya 3% saxarin (Şirin və Aşağı). Şüşələr çıxarıldı və siçovullar təlim qəfəsində 15 dəqiqə daha qaldı. Təlim 7 gün ərzində təkrarlandı. Saxaroza və saxarin test qrupları tərəfindən istehlak olunan mayenin həcmi bir-birindən əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi və hər ikisi də şirin maddələrin mükafatına uyğun su qrupu tərəfindən istehlakdan daha yüksək idi (Şəkil 7A). 7-cu gün içməli, şüşə çıxarıldıqdan dərhal sonra siçovullar qurban verilmiş, hər bir test qrupu üçün yığılmış nüvələr toxumu toplanmış və toplanmış, PSD fraksiyası təcrid olunmuş və Qərb ləkəsi ilə sınanan GluA1 səviyyələri (Şəkil 7B). Əvvəllər olduğu kimi, sukroz istehlak edən heyvanlar PSD fraksiyasında su qrupuna nisbətən yüksəlmiş GluA1 göstərdilər (Şəkil 7C). Əhəmiyyətli olaraq, GluA1, saxarini istehlak edən heyvanların PSD hissəsində də yüksəlmişdir. GluA1 artımının sinaptik fraksiya ilə spesifik olmasını irəli sürən, suyun, saxaroza və saxarin heyvanlarının toplanmış nüvələrindən bütün hüceyrə fraksiyalarında GluA1 səviyyələrində ciddi bir fərq olmadı.Şəkil 7D). Saxarin, saxaroza bənzər eyni heteromerik G protein ilə birləşdirilmiş dad reseptor kompleksini stimullaşdırır (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001), lakin kalorili dəyəri yoxdur, belə bir nəticəyə gəlirik ki, şirin dad reseptorunun stimullaşdırılması nüvə accumbens əsas sinapslarında GluA1 səviyyəsini qaldıran siqnal başlatmaq üçün kifayətdir.

Şəkil 7  

Saxarin təhsili saxaroza təhsili oxşar Sinaptik GluA1 artımına səbəb olur.

Müzakirə

Bir dəfə təkrarlanan saxaroza istehlakı olan bir orosensor mükafat, əvvəllər təsvir edilmiş çox pilləli alver mexanizmi vasitəsi ilə GluA1 sinaptik birləşməni kəskin şəkildə aça biləcəyini göstərdik. vitro. 6-7 gün ərzində təkrarlanan saxaroza istehlakı CPAR-lərin daxil edilməsi yolu ilə elektrofizyolojik olaraq sinapsları gücləndirir. Bu təsir, nüvənin PSD-də GluA1 deyil, GluA2 yığılması ilə müşayiət olundu və bölgədə və zamanla spesifik idi, belə ki təlimdə 7 nüvəsində əvvəl heç bir dəyişiklik müşahidə olunmadı və accumbens qabığında və ya tərkibində dəyişiklik müşahidə olunmadı. somatosensory korteks. Elektron mikroskopik analiz, təkrar sukroz qəbulunun nisbətən sabit qalxdığını göstərdi (t.)1/2 > 24 saat) intraspinöz GluA1 ehtiva edən reseptorların populyasiyası. Saxaroza da sürətlə (5 dəq) və müvəqqəti olaraq (t1/2 <24 saat) sükrozla öyrədilmiş heyvanlarda ekstrasinaptik sahələrdə GluA1 ehtiva edən reseptorların səviyyəsinin yüksəlməsi, sinapsın yan tərəfinə yayılmaq qabiliyyəti olan AMPAR populyasiyasını artırmışdır. Sinaptik GluA1, həm PSD fraksiyası ilə təmsil olunduğu, həm də PEG-EM tərəfindən təsbit edildiyi kimi, Sukrozda Su heyvanlarına nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır. Bu nəticələrdən təklif edirik ki, iki addımlıq ekstrasinaptik ekzositoz mexanizmi, daha sonra AMPAR sinaptik taxılması üçün sinaptik dövriyyə vitro (Boehm et al., 2006; Makino və Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sun və digərləri, 2005) sürətlə başlanıla bilər vivo ilə təbii, orosensor bir mükafat ilə.

Sinaptik GluA1 səviyyələrində dəyişikliklər yalnız 7 məşğələlərindən sonra müşahidə edildi, bu da potensiasiya üçün bir neçə gün davam edən prosesin tələb olunduğunu təklif etdi. Biokimyəvi təcrübələrdə vivo ilə, 1, 1 və 3 saxaroza təlimi günlərində accumbens əsas PSD GluA5 səviyyələrində ciddi artım müşahidə etmədik; yalnız 7 günlük saxaroza təlimindən sonra PSD-də GluA1 əhəmiyyətli dərəcədə yüksəldi. Elektron mikroskopiya təcrübələrində 6 gün ərzində saxaroza tərbiyəsi almış, lakin 24 saatda bir saxaroza stimullaşdırması almamış saxaroza / su heyvanlarının artan PSD GluA1-a meyl göstərdiyini müşahidə etdik. Bu heyvanlar, Su heyvanları ilə müqayisədə yüksəldilmiş daxildə GluA1 nümayiş etdirdilər, lakin ekstrasinaptik membran GluA1-da dəyişiklik müşahidə olunmadı. Bu nəticələrdən üç nəticə çıxarırıq. Birincisi, GluA1 tərkibli AMPA reseptorları ardıcıl saxaroza stimullaşdırıcıları ilə daxilə toplanır. Əvvəlki tədqiqatlar, saxaroza qəbulunun accumbensdə dopamin buraxmasına səbəb olduğunu göstərdi (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada və digərləri, 2005) və D1R'ların yerli GluA1 tərcüməsini dendritlərdə sürə biləcəyini (Smith və digərləri, 2005), saxaroza qəbul edildikdən sonra dopamin sərbəst buraxılması, yerli GluA1 sintezini tətil edə bilər ki, bu da daxildə GluA1 yığılmasına səbəb olur. Alternativ olaraq daxildə artım GluA1'nın distal yerlərdən alverini əks etdirə bilər. Ehtimal olunur ki, bu yüksək səviyyəli damar hovuzundan ekzotsitotik ticarəti plazma membranında ekstrasinaptik hovuza töhfə verir. İkincisi, saxaroza / su və ya su heyvanlarında deyil, ekstrasinaptik membran GluA1-da artımın müşahidəsi ekstrasinaptik reseptorların ya sinapsın ikinci pilləsinə keçdiyini və ya saxaroza istehlak etdikdən sonra 24 saat ərzində endotsitləşdiyini göstərir. ekstrasynaptik hovuz keçici. Üçüncüsü, Şəkərli heyvan PSD GluA1-ın Su heyvanları ilə müqayisədə yüksəlməsi, lakin Şəkər / Su heyvanları deyil, eyni zamanda hər bir sukroz stimulundan sonra reseptorların sürətlə satılan reseptorların hovuzundan ekstrasinaptik plazma membranına sinaps daxilində hərəkət etdiyini irəli sürür. GluA1 trafikinin birbaşa damardaxili hovuzdan sinapsa keçdiyini istisna edə bilmərik. GluA1-in ekstrasynaptically daxil edildiyini göstərən tədqiqatlar verildiyi halda belə bir yol çətin görünür. (Boehm et al., 2006; Makino və Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sun və digərləri, 2005). Bu tapıntılar GluA1 ticarəti üçün vaxt kursunun (<5 dəq) və müşahidə olunan yolun ilk nümayişini təmsil edir. vitro də müşahidə olunur vivo ilə. Bundan əlavə, əldə etdiyimiz nəticələr təkrar təltifetmə stimullarının insan alverinə qadir olan daxili reseptorların hovuzunu artıraraq sinapsın potensialı üçün potensialını dəyişdirdiyini göstərir.

Saxarin GluA1 tükənməsini saxaroza bənzər şəkildə apardığı üçün saxarozanın kalorili tərkibi tələb olunmur. Sakrarin, saxaroza kimi eyni şirin dad reseptorunu, T1R2 / T2R3-ı stimullaşdırır. (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001), sbu reseptorun çox böyük aktivləşdirilməsi, ehtimal ki, GluA1-ın MSN sinapslarına daxil olmasına səbəb olur. Saxaroza, VTA neyronlarından meydana gələn dopamin ifrazını yüksəldir (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada və digərləri, 2005) lGluA1 səthi ticarəti ilə məşğul olmaq. Beləliklə, şirin dad reseptorunu VTA ilə əlaqələndirən yol, burada öyrənilən plastiklik üçün mərkəzi ola bilər.

Şəkər yeyəndən sonra sürətlə GluA1 alverinin spontan lokomotivin tənzimlənməsində rol oynadığı ehtimal olunur. Həqiqətən, saxaroza öyrədilmiş heyvanlarda CPARların qarşısını alması, saxaroza yedikdən dərhal sonra kortəbii lokomotor fəaliyyətin yüksəlməsinin qarşısını aldı. Ardıcıl günlərdə ölçülən saxaroza istehlakından sonra siçovulların gəzdiyi ümumi məsafə yalnız təlimin yeddinci günündə saxaroza istehlakından dərhal sonra 3 min müddət ərzində əhəmiyyətli dərəcədə yüksəldi. Saxarozdan dərhal sonra artan fəaliyyət 3 təlim günündən başlayaraq müşahidə edildi, lakin 7 gününə qədər əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi. Bu dəfə fəaliyyət kursu GluA1-in accumbens core dendrite-də toplanması vaxtı ilə əlaqədardır. Artan lokomotiv CPAR-ın böyüdülmə nüvəsindəki MSN sinapslarına keçməsinin funksional bir nəticəsi idi, çünki nüvəyə Naspm enjeksiyonu aktivliyin artmasına mane olur. Bir NMDA reseptor inhibitoru tərəfindən yüksələn lokomotivin qarşısının alınması, NMDA reseptorları, eləcə də CPARs vasitəsilə glutamat siqnalının lokomotor fəaliyyətini artırmaq üçün lazım olduğunu göstərdi. Sukoza yeyilmə, accumbens nüvəsinin orosensor mükafatı ilə əlaqəli motor cavablarının orkestrasiyasında iştirak etdiyini, lakin istehlakın özü olmadığını göstərən əvvəlki araşdırmalara uyğun olaraq, glutamat siqnalının blokadasından təsirlənməmişdir (Smith, 2004). Gündəlik yeməyini fərqli bir mühitdə bəsləyən heyvanlarda şərtli hiperaktivliyin inkişafı üçün hiperlokomoziyanın inkişafı üçün oxşar vaxt kursu bildirilmişdir (Matthews və digərləri, 1996). Hazırkı cavab, kontekst və saxaroza cütləşməsindən irəli gələn şərtlənmiş hiperaktivlik olsaydı, müşahidə olunmayan saxaroza verilməsindən əvvəl olardı. Mövzuların kəşfiyyatçı bir oyanış nümayiş etdirmələri mümkündür. Saxaroza yedikdən sonra yüksəlmiş lokomotivin motor həssaslığı və ya digər davranış formasına qarşı kəşf etmə olub olmadığını ayırmaq üçün əlavə təcrübələr lazımdır. Hər halda, kortəbii lokomotivin yüksəlməsi glutamat siqnalını tələb edir və nəticədə ən azı qismən CPAR-ların accumbens nüvəsinə daxil olmasından qaynaqlanır.

Saxaroza qəbul edildikdən sonra artan lokomotor aktivlik, yığılan əsas sinapsların müşahidə olunan potensiasiyası ilə nəticələnə bilər, çünki birbaşa bazal ganglia yolundan artan çıxış motor talamusunun disinhibasiyası yolu ilə lokomotivliyi təşviq edir (Sesack və Grace, 2010). To, çox güman ki, D1R-lərini ifadə edən birbaşa neyron hüceyrələrində yaşayır. D1R fəaliyyətində möhkəm dopamin sərbəst buraxılmasından sonra bu neyronların sinapslarına GluA1 tərkibli AMPAR-ların gətirilməsinə səbəb olarsa, birbaşa yol neyronlarının sinapslarının potensiallaşdırılması baş verəcəkdir. Yaranan potensiasiya, motor talamusunu dezinfeksiya edən və motor korteks fəaliyyətini təşviq edən birbaşa neyronların bazal ganglia çıxış nüvələrinə inhibe proqnozlarında aktivliyi artıracaqdır (Gerfen və Surmeier, 2011; Kravitz və digərləri, 2010; Sesack və Grace, 2010). Bir neçə dəfə saxaroza qəbul edildikdən sonra müşahidə olunan sinaptik potensiasiya birbaşa birbaşa yol neyronlarında baş verir, çünki D1 reseptoru ilə hərəkət edən dopamin GluA1 S845 fosforlaşmasına səbəb ola bilər və səthi ticarəti aparır.

Bir sıra tədqiqatlar kokain ilə təkrar stimullaşdırmanın təsirini, mükafat sisteminin fəaliyyətinə dərin təsir göstərən və nəticədə kokainə qarşı yüksək motor reaksiyası, dərman istəyi və relapsına səbəb olan bir kokain həssaslığına səbəb olan bir araşdırma etdi. (Kalivas və digərləri, 1998). 5-10 gün ərzində kokainlə təkrar IP injeksiyası, çəkilmə nəticəsində 14 gün ərzində yerüstü GluA2 tərkibli AMPA reseptorlarında tədricən artımla nəticələndi (Boudreau və digərləri, 2007; Kourrich və digərləri, 2007). Bununla yanaşı, 45 günlük özünü idarəetmə sistemindən sonra 10 gün çəkilməsində, MSN siçovullarında rektifikasiya indeksində böyük artım müşahidə edildi (McCutcheon et al., 2011b) CPARs artımını göstərir. Beləliklə, CPAR ticarəti, həm hazırkı işdə həm də saxaroza yeyilməsindən sonra və çox fərqli müalicə şəraitində olmasına baxmayaraq kokainin özünü idarə etməsindən sonra müşahidə edilmişdir.. Kokainin özünü idarə etməsinin və ya inyeksiyasının dərhal nəticələri məlum deyildir (məsələn, 5 dəqiqəlik postda), kokainin hərəkəti birbaşa mövcud sukroz işinə bənzədilə bilməz. Eyni zamanda, CPARların saxaroza təhsili dayandırıldıqdan sonra MSN-nin saxaroza öyrədilmiş heyvanların sinapslarında qalması və ya uzun müddət çəkildikdən sonra belə heyvanların saxaroza həssaslığı göstərməməsi məlum deyil.

Mükafatlandırıcı stimulların accumbens plastikliyini və davranışının tənzimlənməsinin asılılıq, hiperfagiya, patoloji qumar və digər davranış pozğunluqlarını həll etmək üçün vacib olduğunu anlamaq (Basar və s., 2010; Berridge, 2009; Luscher və Malenka, 2011). Şəkərin həddindən artıq istehlakı piylənmə epidemiyasına kömək edir (Hu və Malik, 2010) və narkotik istifadəsinə oxşar olmasına baxmayaraq (Avena və digərləri, 2008), onun mexanizmi geniş araşdırılmamışdır. Mövcud tapıntılar, gələcək tədqiqatların mükafatla əlaqəli patologiyalara qarşı çıxmaq üçün yeni imkanlar təmin edən mürəkkəb davranışın tənzimlənməsini həll edə biləcəyi mükafat mənşəli plastikliyin əsas elementlərini müəyyənləşdirir.

Minnətdarlıq

H. Girma, L. Lee və Drs daxil olmaqla texniki yardım və faydalı müzakirələr üçün keçmiş və indiki Ziff Laboratoriyası üzvlərinə təşəkkür edirik. B. Fernholz, B. Jordan, W. Lu, G. Rameau, S. Restituito & Y. Serulle. Bu iş Milli Ruh Sağlamlığı Predoktor Təqaüd F31MH76617-01 və NIH Təlim Qrantı 5T32DC000063 tərəfindən Nyu-York Universitetinin Nevrologiya Tədris Proqramına (DST), Milli Sinir Bozuklukları və Strok İnstitutundan (EBZ) RR01NS061920, 1R21MH091445 tərəfindən dəstəklənmişdir. Milli Ruh Sağlamlığı İnstitutu və Qadın Sağlamlığı üzrə Tədqiqatlar Ofisi, Klarman Ailə Fondu, Yemək Bozuklukları Araşdırmasında Qrant Proqramı, NYU-nun Tədqiqat Çağırış Fondu və P01EY30 (CA), Milli Narkotik İstehlakı İnstitutu DA13079 qrant və NARSAD-dan Müstəqil bir Müstəntiq Mükafatı (KDC), Milli Sağırlıq və Digər Rabitə Bozuklukları İnstitutu, RCF-yə DC003956 və New York Universiteti Langone Tibb Mərkəzindən Bağımlılığa Mükəmməllik Mərkəzində bir toxum hədiyyə etdi.

Dəyişikliklər

Maraqlar toqquşması: Müəlliflər rəqabətli maliyyə maraqları olmadığını bəyan edirlər.

References

  1. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Şəkər asılılığı üçün sübutlar: fasiləsiz, həddindən artıq şəkər qəbulunun davranış və nörokimyəvi təsirləri. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20-39. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  2. Basar K, Sesia T, Groenewegen H, Steinbusch HW, Visser-Vandewalle V, Temel Y. Nucleus accumbens və impulsivlik. Prog Neurobiol. 2010; 92: 533 –557. [PubMed]
  3. Berridge KC. Yemək mükafatlarını 'bəyənmək' və 'istəmək': beyin substratları və yemək pozğunluqlarındakı rollar. Fiziologiya və davranış. 2009; 97: 537-550. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  4. Boehm J, Kang MG, Johnson RC, Esteban J, Huganir RL, Malinow R. LTP zamanı AMPA reseptorlarının sinaptik birləşməsi GluR1-də bir PKC fosforlaşması saytı tərəfindən idarə olunur. Neyron. 2006; 51: 213 –225. [PubMed]
  5. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Siçovul nüvəsindəki hüceyrə səthi AMPA reseptorları kokainin alınması zamanı artır, lakin mitogen-aktivləşdirilmiş protein kinazlarının dəyişdirilməsi ilə əlaqəli kokain problemindən sonra daxili hala gəlir. J Neurosci. 2007; 27: 10621 –10635. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  6. Brebner K, Wong TP, Liu L, Liu Y, Campsall P, Grey S, Fhelps L, Phillips AG, Wang YT. Nüleus, uzun müddətli depressiya və davranış həssaslığının ifadəsini artırır. Elm. 2005; 310: 1340 –1343. [PubMed]
  7. Cacciapaglia F, Saddoris MP, Wightman RM, Carelli RM. Nüvədəki diferensial dopamin sərbəst buraxılması dinamikası, saxaroza qarşı yönəlmiş davranışın fərqli cəhətlərini izləyir. Neyrofarmakologiya 2012 [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  8. Calabresi P, Maj R, Pisani A, Mercuri NB, Bernardi G. Striatumdakı uzun müddətli sinaptik depresiya: fizioloji və farmakoloji xarakteristikası. J Neurosci. 1992; 12: 4224 –4233. [PubMed]
  9. Carr KD, Chau LS, Cabeza de Vaca S, Gustafson K, Stouffer M, Tukey DS, Restituito S, Ziff EB. D-1 dopamin reseptor stimullaşdırılmasının nüvədəki akkumulyasiya qabığında AMPA reseptor alt GluR1 alt qrupu, qida məhdudlaşdıran siçovullarda dərman mükafatı dərəcəsini artırdı. Nevrologiya. 2010; 165: 1074 –1086. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  10. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, Şaham Y, Marinelli M, Wolf ME. GluR2-un olmayan AMPA reseptorlarının meydana gəlməsi kokainin özlemini inkübasyona vasitəçilik edir. Təbiət. 2008; 454: 118-121. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  11. Gündüz JJ, Carelli RM. Nüvə akumbens və Pavlovyanın mükafatlandırılması. Neuroscientist. 2007; 13: 148-159. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  12. de Araujo IE, Oliveira-Maia AJ, Sotnikova TD, Gainetdinov RR, Caron MG, Nicolelis MA, Simon SA. Dad reseptoru siqnalının olmaması halında yemək mükafatı. Neyron. 2008; 57: 930 –941. [PubMed]
  13. Ehlers MD, Heine M, Banks L, Lee MC, Choquet D. GluR1 AMPA reseptorlarının daxilolma xüsusi sinaptik fəaliyyəti ilə diffuzion tutulması. Neyron. 2007; 54: 447 –460. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  14. Esteban JA, Shi SH, Wilson C, Nuriya M, Huganir RL, Malinow R. AMPA reseptor alt qruplarının fosforlaşması, plastikliyin əsasını təşkil edən sinaptik ticarəti idarə edir. Nat Neurosci. 2003; 6: 136 –143. [PubMed]
  15. Gerfen CR, Surmeier DJ. Dopamin tərəfindən striatal proyeksiya sistemlərinin modulyasiyası. Nevroşünaslığın illik müayinəsi. 2011; 34: 441 –466. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  16. Grueter BA, Brasnjo G, Malenka RC. Postsynaptic TRPV1, nüvənin böyüdülməsində hüceyrə tipinə aid uzun müddətli depressiyanı tetikler. Təbiət nevrologiyası. 2010; 13: 1519 –1525. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  17. O K, L L, Cummings LW, Goldman J, Huganir RL, Lee HK. GluR2-S1 fosforlaşması ilə perisynaptik yerlərdə Ca845 + -zərilməyən AMPA reseptorlarının sabitləşməsi. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2009; 106: 20033-20038. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  18. Hu FB, Malik VS. Şəkər şəkərli içkilər və piylənmə riski və tip 2 diabet: epidemioloji dəlil. Fiziologiya və davranış. 2010; 100: 47-54. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  19. Isaac JT, Ashby MC, McBain CJ. GPAR2 alt hissəsinin AMPA reseptor funksiyasında və sinaptik plastisitdə rolu. Neyron. 2007; 54: 859 –871. [PubMed]
  20. Jordan BA, Fernholz BD, Boussac M, Xu C, Grigorean G, Ziff EB, Neubert TA. Yeni kemirici postsinaptik sıxlıq zülallarının müəyyən edilməsi və yoxlanılması. Mol hüceyrə proteomikası. 2004; 3: 857 –871. [PubMed]
  21. Kalivas PW, Pierce RC, Cornish J, Sorg BA. Kokainə bağlılıqda həssaslıq və relapsda həssaslıq rolu. J Farmakol. 1998; 12: 49 –53. [PubMed]
  22. Kitagawa M, Kusakabe Y, Miura H, Ninomiya Y, Hino A. Şirin dadı üçün bir namizəd reseptor geninin molekulyar genetik identifikasiyası. Biokimyəvi və biofiziki tədqiqat əlaqələri. 2001; 283: 236 –242. [PubMed]
  23. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Kokain təcrübəsi, nüvələrin böyüdülməsində iki istiqamətli sinaptik plastikliyi idarə edir. J Neurosci. 2007; 27: 7921 –7928. [PubMed]
  24. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PR, Kay K, Thwin MT, Deisseroth K, Kreitzer AC. Bazal ganglia dövranının optogenetik nəzarəti ilə parkinsoniyalı motor davranışlarının tənzimlənməsi. Təbiət. 2010; 466: 622 –626. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  25. LaPlant Q, Vialou V, Covington HE, 3rd, Dumitriu D, Feng J, Warren BL, Maze I, Dietz DM, Watts EL, Iniguez SD və s. Dnmt3a, nüvələrin böyüdülməsində emosional davranışı və onurğa plastisiyasını tənzimləyir. Nat Neurosci. 2010; 13: 1137 –1143. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  26. Liu SJ, Zukin RS. Ca2 + - Sinaptik plastisitdə və neyron ölümündə keçirici AMPA reseptorları. Neyroşəbəkələrdə meyllər. 2007; 30: 126 –134. [PubMed]
  27. Lu W, Isozaki K, Roche KW, Nicoll RA. AMPA reseptorlarının sinaptik hədəflənməsi GluA1 ilk hüceyrəarası döngədəki bir CaMKII saytı tərəfindən tənzimlənir. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2010; 107: 22266-22271. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  28. Lu W, Roche KW. AMPA reseptorlarının dövriyyəsi və fəaliyyətinin posttranslational tənzimlənməsi. Neyrobiologiya 2011-da cari rəy [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  29. Luscher C, Malenka RC. Bağımlılıkda dərman vasitəsi ilə ortaya çıxan sinaptik plastiklik: molekulyar dəyişikliklərdən dövrənin yenidən qurulmasına qədər. Neyron. 2011; 69: 650 –663. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  30. Makino H, Malinow R. AMPA reseptorlarının LTP zamanı sinapslara daxil edilməsi: yanal hərəkət və ekzositoz rolu. Neyron. 2009; 64: 381 –390. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  31. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, Spanagel R, Luscher C. Kokainin yaratdığı sinaptik plastiklik: VTA-dakı əzmkarlıq NAcdakı uyğunlaşmanı tetikler. Nat Neurosci. 2009; 12: 1036 –1041. [PubMed]
  32. Masuda K, Koizumi A, Nakajima K, Tanaka T, Abe K, Misaka T, Ishiguro M. İnsan şirin dad reseptoru və az molekulyar ağırlıqlı şirin birləşmələr arasındakı bağlama rejimlərinin xarakteristikası. PloS biri. 2012; 7: e35380. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  33. Matthews K, Wilkinson LS, Robbins TW. Yenidoğulmuş siçovulların təkrar ana ayrılması yetkin yaşda ilkin və şərtli stimullara davranış reaksiyalarını pozur. Fiziol Behav. 1996; 59: 99 –107. [PubMed]
  34. Max M, Shanker YG, Huang L, Rong M, Liu Z, Campagne F, Weinstein H, Damak S, Margolskee RF. Yeni namizəd zövq reseptorunu kodlayan Tas1r3, Sac'ın şirin reaksiya lokaliyasına allergikdir. Təbiət genetikası. 2001; 28: 58 –63. [PubMed]
  35. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF. Saxarin-proqnozlaşdırıcı sözlər, saxarin-proqnozlaşdırıcı işarələrdən daha çox phasic dopamin sərbəst buraxılmasına səbəb olur. Sinaps. 2012; 66: 346 –351. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  36. McCutcheon JE, Wang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Kalsium keçirici AMPA reseptorları, kokainin özünü idarə etməsindən uzun müddət çəkildikdən sonra nüvələrin böyüməsi sinapslarında mövcuddur, lakin təcrübə aparan kokain deyil. Jurnal Neyrocience: Neuroscience Cəmiyyətinin rəsmi jurnalı. 2011a; 31: 5737-5743. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  37. McCutcheon JE, Loweth JA, Ford KA, Marinelli M, Wolf ME, Tseng KY. I qrup mGluR aktivləşməsi bir protein kinazı C-dən asılı olan bir mexanizm vasitəsi ilə nüvələrdəki kalsium keçirici AMPA reseptorlarının kokainlə əlaqəli toplanmasını bərpa edir. J Neurosci. 2011b; 31: 14536-14541. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  38. Nedelescu H, Kelso CM, Lazaro-Munoz G, Purpura M, Cain CK, Ledoux JE, Aoki C. Endogen GluR1 tərkibli AMPA reseptorları qorxu yaddaşının formalaşmasının erkən mərhələsində lateral amiqdala asimmetrik sinapslara çevrilir: elektron mikroskopik immunosit öyrənmək. Müqayisəli nevrologiya jurnalı. 2010; 518: 4723 –4739. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  39. Nelson G, Hoon MA, Chandrashekar J, Zhang Y, Ryba NJ, Zuker CS. Məməlilərin şirin dad reseptorları. Hüceyrə. 2001; 106: 381 –390. [PubMed]
  40. Oh MC, Derkach VA, Guire ES, Soderling TR. GluR1 serin 845 fosforlaşması ilə tənzimlənən ekstrasinaptik membran ticarəti, uzun müddətli potensiasiya üçün AMPA reseptorlarıdır. J Biol Chem. 2006; 281: 752 –758. [PubMed]
  41. Paskoli V, Turiault M, Luscher C. Kokainin hərəkətə gətirdiyi sinaptik potensiasiya dərman təsirli adaptiv davranışları bərpa edir. Təbiət. 2012; 481: 71 –75. [PubMed]
  42. Bitki K, Pelkey ​​KA, Bortolotto ZA, Morita D, Terashima A, McBain CJ, Collingridge GL, Isaac JT. Hippokampal uzunmüddətli potensiasiya zamanı yerli GluR2 əskik AMPA reseptorlarının keçici birləşməsi. Nat Neurosci. 2006; 9: 602 –604. [PubMed]
  43. Rada P, Avena NM, Hoebel BG. Gündəlik şəkər üzərində bükülmə dəfələrlə accumbens qabığında dopamin buraxır. Nevrologiya. 2005; 134: 737 –744. [PubMed]
  44. Roche KW, O'Brien RJ, Mammen AL, Bernhardt J, Huganir RL. AMPA reseptoru GluR1 alt bölməsində çoxlu fosforlaşma sahələrinin xarakteristikası. Neyron. 1996; 16: 1179 –1188. [PubMed]
  45. Rumpel S, LeDoux J, Zador A, Malinow R. Assosiativ bir öyrənmə formasına əsaslanan postsinaptik reseptor alveri. Elm. 2005; 308: 83 –88. [PubMed]
  46. Sainz E, Korley JN, Battey JF, Sullivan SL. T1R ailəsinin putativ dad reseptorlarının yeni bir üzvünün müəyyənləşdirilməsi. Neyrokimya jurnalı. 2001; 77: 896 –903. [PubMed]
  47. Serulle Y, Zhang S, Ninan I, Puzzo D, McCarthy M, Xatri L, Arancio O, Ziff EB. Bir GluR1-cGKII qarşılıqlı təsiri AMPA reseptorlarının alverini tənzimləyir. Neyron. 2007; 56: 670 –688. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  48. Sesack SR, Grace AA. Cortico-Basal Ganglia mükafat şəbəkəsi: mikrosxem. Neyropsikofarmakologiya: Amerika Neuropsychopharmacology Kollecinin rəsmi dərcidir. 2010; 35: 27 –47. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  49. Smith GP. Accumbens dopamin, saxaroza ilə orosensor stimullaşdırılmasının təltif təsirini vasitə edir. İştah. 2004; 43: 11 –13. [PubMed]
  50. Smith WB, Starck SR, Roberts RW, Schuman EM. Yerli protein sintezinin dopaminergik stimullaşdırılması hipokampal nöronlarda GluR1 və sinaptik ötürülmənin səth ifadəini artırır. Neuron. 2005; 45: 765-779. [PubMed]
  51. Günəş X, Milovanovic M, Zhao Y, Wolf ME. Kəskin və xroniki dopamin reseptorlarının stimullaşdırılması, prefrontal korteks neyronları ilə kulturalaşdırılmış nüvələrdə olan AMPA reseptorlarının hərəkətini modullaşdırır. Jurnal Neyrocience: Neuroscience Cəmiyyətinin rəsmi jurnalı. 2008; 28: 4216 –4230. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  52. Sun X, Zhao Y, Wolf ME. Dopamin reseptorunun stimullaşdırılması prefrontal korteks neyronlarında AMPA reseptoruna sinaptik girişi modulyasiya edir. J Neurosci. 2005; 25: 7342 –7351. [PubMed]
  53. Thomas MJ, Beurrier C, Bonci A, Malenka RC. Nüvəli akumbenslərdə uzun müddətli depressiya: kokainə davranışçı bir həssaslaşmanın neyrot korreti. Nat Neurosci. 2001; 4: 1217-1223. [PubMed]
  54. Ungless MA, Whistler JL, Malenka RC, Bonci A. in vivo halında tək kokain ifrazı dopamin neyronlarında uzun müddətli potensiasiyaya səbəb olur. Təbiət. 2001; 411: 583 –587. [PubMed]
  55. Whitlock JR, Heynen AJ, Shuler MG, Bear MF. Hipokampusda uzun müddətli potensiasiyanı öyrənir. Elm. 2006; 313: 1093-1097. [PubMed]