Qrelin qida mükafatında rolu: ghrelin sükrozun özünü idarə etməsi və mesolimbik dopamin və asetilkolin reseptor geninin ifadəsi (2012)

PMCID: PMC3298643

Bu məqalə olmuşdur istinadən PMC-də digər məqalələr.

Get:

mücərrəd

Yemək qərarı qidanın ləzzəti kimi homeostatik olmayan amillərdən güclü şəkildə təsirlənir. Həqiqətən, yeməyin mükafatlandırıcı və motivasiya dəyəri homeostatik siqnalları aşaraq istehlakın artmasına və dolayısıyla piylənməyə səbəb ola bilər. Bağırsaqdan çıxarılan oreksigenik hormon olan Grelin, homeostatik qidalanmada mühüm rol oynayır. Bununla birlikdə, bu yaxınlarda, mezolimbik dopaminerjik mükafat yolunun güclü bir modulatoru olaraq ortaya çıxdı və qrelin qren mükafatında rolunu təklif etdi. Burada, qrelin və reseptorlarının, qrelin reseptoru (GHS-R1A) stimullaşdırılması və saxaroza proqressiv nisbətdə işləyən kondisioner üçün mühasirənin rolunu araşdıraraq təbii şəkər mükafatı üçün motivasiyanı gücləndirmək üçün vacib olub olmadığını müəyyənləşdirməyə çalışdıq, motivasiya sürücüsünü ölçmək üçün istifadə edilən bir prosedur. mükafat almaq. Periferik və mərkəzləşdirilmiş şəkildə tətbiq olunan qrelin operativ reaksiyanı və buna görə də sükroz üçün stimul motivasiyasını əhəmiyyətli dərəcədə artırdı. GHS-R1A antaqonisti JMV2959-dan istifadə edərək GHS-R1A siqnalının blokadasının saxaroza reaksiya göstəricisini əhəmiyyətli dərəcədə azaltdığını göstərdik. Kronik mərkəzi qrelin müalicəsinin, əsas mükafat nörotransmitter reseptorlarını, yəni dopamin və asetilkolin kodlayan genlərin ekspresiyasına təsirlərini qiymətləndirərək, grelin əsas mezolimbik mükafat düyünlərinə, ventral tegmental sahə (VTA) və nüvə akumbens (NAcc) üzərində təsirlərini araşdırdıq. Qrelin müalicəsi, VTA-da artan dopamin reseptoru D5 və asetilkolin reseptoru nAChRβ2 gen ekspresiyası və NAcc-də D1, D3, D5 və nAChRα3-un ekspresiyası ilə əlaqəli idi. Əldə etdiyimiz məlumatlar qrelinin sukroz üçün motivasiya və möhkəmləndirmədə əhəmiyyətli rol oynadığını və mezolimbik mükafat dövriyyəsində dopamin və asetilkolin kodlayan genlərin ifadəsinə təsirlərini göstərir. Bu tapıntılar, qrelin antaqonistlərinin obezliyin müalicəsi və şirin qidanın həddindən artıq istehlakının qarşısını almaq üçün terapevtik potensiala sahib olduqlarını göstərir.

Keywords: Asetilkolin, dopamin, qida motivasiyası, ghrelin, GHS-R1A, əməliyyat sistemi

GİRİŞ

Enerji balansının tənzimlənməsində dövran edən ghrelin hormonunun mühüm rol oynadığı yaxşı müəyyən edilmişdir (Kojima et al. 1999; Nogueiras, Tschöp & Zigman 2008). Əsasən mədə tərəfindən azad edilir (Dornonville de la Cour et al. 2001), grelin həm gəmiricilərdə, həm də insanda güclü oreksigen təsirini artırır (Wren et al. 2000, 2001) mərkəzi sinir sisteminin (CNS) reseptorunun stimullaşdırılması yolu iləSalomeet al. 2009a), böyümə hormonu ifrazat reseptoru (GHS-R1A) (Howard et al. 1996). Həqiqətən, ghrelin qidalanma və enerji homeostazında iştirak edən hipotalamik və beyin kök sxemlərini hədəf alır (Dickson, Leng & Robinson 1993; Bailey et al. 2000; Hewson və Dickson 2000; Faulconbridge et al. 2003, 2008). Bəslənmə davranışı, yalnız qida maddələrinin dəyişdirilməsinin zəruriliyi ilə əlaqələndirilmir (yəni homeostazın bərpası ehtiyacı); ləzzətli yüksək yağlı və / və ya şəkərli qidalar doyma vəziyyətinə baxmayaraq suqəbuledici təşviq edə bilər (Zheng et al. 2009). Şəkər kimi ləzzətli təbii möhkəmləndiricilərin həddindən artıq istehlakı mövcud piylənmə epidemiyasına səbəb olan əsas amildir. Mərkəzi Ghrelin siqnal sisteminin, evostatik olmayan şəkər istehlakı üçün vacib olub olmadığını müəyyən etmək qalır, bununla da kalorili, ləzzətli və təltif olunan şirin qidaların qəbulunu yatırmaq üçün potensial əhəmiyyətli bir terapevtik hədəf təmin edilir.

Son tapıntılardan ilhamlanaraq, Ghrelin, homeostatik olmayan / mükafatlandırıcı qidalanma ilə əlaqəli mesolimbik bölgələrlə qarşılıqlı təsir göstərir (Jerlhag et al. 2007), qrelin və onun reseptorunun qida motivasiyasında və saxaroza mükafatı üçün məqsədyönlü davranışda rolunu qiymətləndirməyə çalışdıq. Bu mezolimbik bölgələr uzun müddət narkotik asılılığı araşdırmalarının diqqət mərkəzində olmuşdur, çünki onlar əksər sui-istifadə üçün əsas hədəfdir (Engel 1977; Koob 1992). Ghrelin üçün hədəf mesolimbik yola ventral tegramal bölgədən (VTA) nüvənin böyüməsinə (NAcc) qədər olan dopamin proyeksiyası daxildir (Jerlhag et al. 2006, 2007), həm asılılıq kimyəvi dərmanlardan, həm də qida daxil olmaqla təbii qazancdan mükafat verən bir yol (Koob 1992). Maraqlıdır ki, GHS-R1A dopaminergik neyronlarda ifadə olunur (Abizaid et al. 2006), grelin VTA dopamin sisteminə mümkün birbaşa təsirlərini əhatə edir. Bu immunohistokimyəvi məlumatlar VTA-da qrelin təsirinin toplanan davranış və elektrofizyolojik dəlilləri ilə tamamlanır. Məsələn, grelin intra-VTA tətbiq edilməsi VTA dopamin neyronlarının aktivliyini artırır (Abizaid et al. 2006) və NAcc-ə dopamin buraxılmasını artırır (Jerlhag et al. 2007). Ghrelin ayrıca əhəmiyyətli bir mükafat yolu olan kolinerjik-dopaminerjik əlaqənin fəaliyyətini artırır. Doğrudan da, grelin dopamin üzərində təsirlərinin heç olmasa bir hissəsi xolinerjik sistem tərəfindən vasitəçilik kimi görünür (Jerlhag et al. 2007).

Yemək hazır olduqda ghrelinin güclü oreksigenik təsirə malik olduğu müəyyənləşdirilsə də, məlhəmənin orexigenik təsiri, xoş şirin yemək kimi təbii möhkəmləndiricilərin dəyişən motivasiya və gücləndirici aspektlərini əhatə etmək üçün genişləndirilə biləcəyinin hələ məlum deyil. səy / iş bir şirin bir müalicə əldə etməyə hazırdır). Asılılıq dərmanlarının motivasiya və mükafat effektivliyi özünü idarəetmə, operant kondisioner modelində qiymətləndirilə bilər. Operant kondisioneri, mükafat almağa yönəlmiş əldə edilmiş və könüllü davranışı qiymətləndirən əsaslandırılmış davranışın təhlili üçün əsas prosedurdur. Bir subyekt mükafat almaq üçün xərcləmək istədiyi iş həcmini ölçərək mükafat dəyərinin obyektiv ölçüsünü təklif edir (Hodos 1961). Mezolimbik bölgələr qidalanma da daxil olmaqla davranışın motivativ tərəfləri üçün çox vacibdir və aydındır ki, ghrelin müvafiq mesolimbik bölgələrdə neyronal fəaliyyətə təsir göstərir. Hələ göstərilməmiş şey, qrelinin yüksək şəkərli qidalar motivasiyasına birbaşa təsiri. Tədqiqatımızın əsas məqsədi, mərkəzi qrelin siqnal sisteminin yüksək şəkərli qida mükafatının hedonik / həvəsləndirici və ya müsbət gücləndirici xüsusiyyətində rol oynadığını və bu sistemin yatırıldığını, yeni bir seçici GHS-R1A antaqonisti JMV2959 istifadə edərək araşdırmaqdır.Salomeet al. 2009a), şirniyyat əldə etmə motivasiyasını yatıra bilər. GHS-R1A antaqonistləri hal-hazırda 2 şəkərli diabet xəstələrində terapevtik olaraq qiymətləndirilir, çünki grrelin siqnalının basdırılması qlükoza homeostazına faydalı təsir göstərir (günəş et al. 2006), şirin qidaların qəbulunun azaldılmasının da faydası olacaq. Bir neçə dəlil xətti, dopaminergik və xolinergik nörotransmisiyanın əsaslandırılmış mükafat davranışında mühüm rol oynadığını göstərir. Buna görə ghrelin'in mərkəzi mükafat dövranına təsirini daha da səciyyələndirmək üçün ghrelin müalicəsindən sonra əsas mükafat qovşaqlarında, VTA və NAcc'lərdə, dopamin və asetilkolin reseptoru gen ifadə dəyişikliklərindəki Ghrelin müalicəsinin təsirini qiymətləndirdik.

METODLARI

Heyvanlar

Yetkin kişi Sprague-Dawley siçovulları (200-250 g, Çarlz çayı, Almaniya) müntəzəm çow və su ilə bir 12 saatlıq yüngül / qaranlıq dövrdə yerləşirdi ad libitumbaşqa cür göstərildiyi hallar istisna olmaqla. Bütün heyvan prosedurları etik icazə ilə və Göteburq Universiteti İnstitusional Heyvanlara Qayğı və İstifadə Komitəsinin təlimatlarına uyğun olaraq həyata keçirilmişdir.

Cərrahlıq

CNS-ni hədəf alan davranış təcrübələri üçün üçüncü mədəcik bələdçi kanülü (26 ölçülü; Plastics One, Roanoke, VA, ABŞ; koordinatlar: orta xəttdə, breqmadan 2 mm arxa və 5.5 mm ventral dura mater-a enjektorla yönəldilmişdir. ventral of dura) izofluran anesteziyası altında implantasiya edilmişdir. Cannulae, diş akril və zərgər vintləri ilə kəlləyə yapışdırıldı və əvvəllər göstərildiyi kimi bir obturator ilə bağlandı (Skibicka, Alhadeff & Grill 2009). Cannulanın üçüncü mədəcikdə yerləşdirilməsi əməliyyatdan bir həftə sonra 5-tio-D-qlükoza [210 mkg / nəqliyyat vasitəsinin 2 mkl (salin) içərisində mərkəzi enjeksiyona simpatoadrenal vasitəçilik qlikemik reaksiya ilə ölçüldü.Ritter, Slusser & Stone 1981). Bu yerləşdirmə yoxlama protokolunda mövzu daxil edilməsi üçün ən azı 100% təməl plazma qlükoza səviyyəsindən bir postinjection yüksəlməsi tələb olundu. Gen ifadəsi təcrübəsi üçün siçovullar anesteziya edildi (60 – 75 mq / kq Ketalar və 0.5 mq / kq Domitor ip; Pfizer, İsveç; Orion Co, Finlandiya) və xroniki intraserebroventrikulyar (ICV) bir top (Alzet Brain Infusion Kit II, DURECT Corp, Cupertino, CA, ABŞ) aşağıdakı koordinatlardan istifadə edərək yan mədəcikə daxil edildi: Xırdalanmadan 0.6 mm, orta xəttdən 1.4 mm, kəllədən 2.3 ventral. Cannula polietilen kateter vasitəsilə osmotik bir minipump ilə bağlandı (Alzet Mini-Osmotik Nasos Model 2002, Durect, Cupertino, axın sürəti, 0.5 gün ərzində 14 µl / saat) heyvanların arxasına subkutan olaraq yerləşdirildi.

Operant kondisioner modeli

Aparat

Səssiz, işıqsız işıqlandırılmış şkafda yerləşdirilən siçovullar üçün hazırlanmış səkkiz əməliyyat kondisioner otağında (30.5 × 24.1 × 21.0 sm; Medical-Associates, Georgia, VT, ABŞ) təcrübi kondisioner sınaqları keçirildi. Hər bir kamerada bir metal şəbəkə döşəməsi, onların üstündəki ağ işıq lampaları olan iki geri çəkilə bilən qol və 45 mq saxaroza pelletlərini (GlaxoSmithKline, Test Diet, Richmond, IN, ABŞ) qida qabına çatdıra bilən bir qida pellet dispenser var. Məlumatların toplanması və emalı MED-PC proqram təminatı (Medical-Associates, Georgia, VT, ABŞ) tərəfindən idarə olundu.

təlim

Operant kondisionerində istifadə olunan prosedur (la Fleur et al. 2007) və (Tracy et al. 2008). Siçovulların hamısı bir həftə ərzində ilkin bədən çəkisi tədricən 90% -ə endirildiyi mülayim bir qida məhdudlaşdırma paradiqmasına məruz qaldı. İKV-lənətlənmiş siçovullar üçün məşq əməliyyatdan bir həftə sonra başladı. Operant qutularına yerləşdirilmədən əvvəl, siçovullar ən azı iki dəfə evdə qəfəs mühitində saxaroza pelletlərinə məruz qaldılar. Sonra, siçovullar gündə iki seans ilə sabit bir nisbətdə FR1 cədvəli altında saxaroza pelletləri üçün təzyiq göstərməyi öyrəndi. FR1-də, aktiv qolu üzərində bir basaraq bir saxaroza pelletinin çatdırılması ilə nəticələndi. Bütün FR sessiyaları 30 dəqiqə davam etdi və ya siçovullar 100 qranulları qazananadək, hər hansı bir baş verərsə. Siçovulların əksəriyyəti 100-dan 10 seanslarına qədər bir sessiya meyarına görə 15 qranullarına nail oldular. Aktiv olmayan qoldakı təzyiqlər qeydə alındı, lakin proqramlaşdırılmış bir nəticə vermədi. FR1 cədvəl seanslarını FR3 və FR5 izlədi (yəni, hər bir pelletə üç və beş pres). Yenə də növbəti cədvələ keçmək üçün aktiv qolu sessiyasında minimum 100 cavab tələb olundu; Siçovulların çoxu bu səviyyəyə çatmaq üçün yalnız bir-iki FR3 və FR5 cədvəl (lər) tələb etdi. FR5 cədvəlində siçovul mükafat almağa hazırlaşdığı iş həcmini müəyyənləşdirmək üçün mükafat dəyəri hər bir sonrakı mükafat üçün tədricən artırıldığı müddətdə mütərəqqi nisbət (PR) cədvəli izlənildi. Cavab tələbi aşağıdakı tənliyə uyğun olaraq artdı: Cavab nisbəti = [5e (0.2 × infuziya nömrəsi)] - 5, aşağıdakı seriyalar vasitəsilə: 1, 2, 4, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40 , 50, 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268. Siçovul 328 dəqiqə ərzində bir mükafat qazana bilmədikdə PR sessiyası başa çatdı. Fasilə nöqtəsi sessiya bitməmişdən əvvəl son tamamlanmış nisbət kimi müəyyən edilmişdir. Üç ardıcıl seans üçün bir sessiyada qazanılmış qranulların sayı 60% -dən çox fərqlənmədikdə cavab sabit hesab edildi. Əksər hallarda cavab beş-yeddi seans ərzində sabitləşdi. PR sınağı bir seans / gündə həyata keçirildi. Sessiyalar orta hesabla 15 dəqiqə davam etdi, baxmayaraq ki, bütün sessiyaların bitməsinə icazə vermək üçün 75 dəqiqəyə qədər bütün siçovullar operant qutularında qaldı. Daha sonra siçovullar bir saatlıq pulsuz qidalanan çow suqəbuledici ölçülməsi üçün ev qəfəslərinə köçürüldü. Təlimin sonunda və sınaqdan əvvəl siçovullar birinə qaytarıldı ad libitum qidalanma cədvəli.

Eksperimental dizayn

Siçovulların hamısı intraperitoneal (IP) və ya ayrı bir qrup siçovullarda, üçüncü ventrikül (üçüncü İKV) enjeksiyonları yüngül dövrünün əvvəlində (ghrelin testləri üçün) və yüngül dövrdə gecikmiş Ghrelin antagonist təcrübələri üçün 20 dəqiqə əvvəl alındı. operant sınağı. Bütün şərtlər ən azı 48 saat ayrılmış və əks balans şəklində işləmişdir (hər siçovul ayrıca sınaq günlərində bütün şərtləri almışdı).

Təcrübə 1: siçovullarda saxaroza cavab verən PR əməliyyatçısına periferik və ya mərkəzi qrelin administrasiyasının təsiri

Bütün siçovullar üçün qolu basma cavabları iki şərtdən sonra araşdırıldı: salin və ya asilated siçan grelin ilə IP müalicəsi (Tocris, Bristol, Böyük Britaniya; 0.33 mq / kq bədən çəkisi 1 ml / kq). Siçovullarda bir qidalanma reaksiyasını artırmaq üçün seçilmiş IP ghrelin dozası əvvəllər göstərilmişdir (Wren et al. 2000) və həmçinin siçanlarda accumbal dopamin azad edilməsini və lokomotor fəaliyyətini stimullaşdırmaq (Jerlhag 2008). Operant sınağından sonra siçovulların çowa sərbəst daxil olmasına icazə verildi və bir saatlıq müddətdən sonra çow qəbulu ölçüldü. Sonrakı ayrı bir siçovul qrupunda, üç şəraitdən sonra hədəf CNS dərmanı göndərilməsindən sonra cavabları araşdırdıq: üçüncü mədəcik salinası ilə nəzarət vəziyyəti, 0.5 mkg və ya 1.0 μg asilated siçan grelin (Tocris) bir 1 µl həcmdə. Seçilən ghrelin dozaları əvvəlcədən qidalanma cavablarını göstərmişdir (Nakazato et al. 2001). Həm İKV, həm də IP grrelin araşdırmaları üçün doymuş vəziyyətdə (yəni qida qəbulu evostatik sürücülükdən daha çox, yeməyin təltifedici xüsusiyyətləri ilə idarə ediləcəyi zaman) sıxışdırıcı təcrübələr aparıldı. Ayrıca, hər iki tədqiqatda, operant testindən sonra siçovulların çowa sərbəst girməsinə icazə verildi və bir saatlıq müddətdən sonra çow qəbulu ölçüldü.

Təcrübə 2: periferik və ya mərkəzi müalicənin bir Ghrelin reseptoru (GHS-R1A) antaqonisti (JMV2959) ilə siçovullarda saxaroza mükafatlandırma stimullaşdırılmasına təsiri

PR əməliyyatçı reaksiyaları üç şərtdən sonra aşağıdakı kimi araşdırıldı: IP salinası ilə nəzarət vəziyyəti, 1 mq / kq və ya XMUMX mg / kq JMV3 (AEZS-2959, AeternaZentaris GmBH, Frankfurt, Almaniya). JMV123 dozaları əsas götürülərək seçildi Jerlhag et al. (2009) Və Egecioğlu et al. (2010) və əvvəlcədən şərtli yerə üstünlük vermə davranışının azaldığı göstərilən, ancaq lokomotor fəaliyyətə müstəqil təsir göstərməyən ilkin məlumatlar. Operant testinin ardından siçovullara çowa sərbəst giriş imkanı verildi. Birbaşa kəskin mərkəzi antaqonist hərəkətinin təsirini qiymətləndirmək üçün siçovulların ayrı bir qrupunda aşağıdakı üç şərtdən sonra operant davranış araşdırıldı: üçüncü ventrikül salin inyeksiya ilə idarəetmə vəziyyəti, 5 μg və ya 10 μg JMV2959 bir 1 µl həcmdə. Seçilən ICV dozaları JMV2959 dozasına əsaslanır Salomeet al. (2009a.)) 1 μg ghrelin tərəfindən idarə olunan ICV-nin oreksigenik hərəkətinin qarşısını aldığı. Əməliyyat müayinəsindən sonra siçovullara çow və çow suqəbuledici bir saatlıq müddətdən sonra, həmçinin ilk injectiondan sonra 24 saat sonra ölçüldü. GHS-R1A antaqonisti ilə edilən tədqiqatlar, Ghrelin ilə edilənlərdən fərqli olaraq (əvvəllər bax), endogen dövranlı grelin yüksək səviyyədə olmasını təmin etmək üçün enjeksiyonlardan əvvəl 16 saatlıq bir qida məhdudiyyətindən sonra siçovullarda aparılmışdır (Cummings et al. 2001).

Təcrübə 3: VTA və NAcc-də dopamin- və asetilkolinlə əlaqəli genlərin ifadə edilməsində grrelin təsirli dəyişikliklər

Burada iki həftə ərzində xroniki ICV qrelin infuziyasının iki əsas mezolimbik mükafat yolu düyünləri olan VTA və NAcc-də dopaminerjik və xolinerjik ötürülmədə iştirak edən seçilmiş genlərin ifadəsinə təsirlərini müəyyən etdik. Seçilən dopaminlə əlaqəli genlər dopamin reseptorlarını (D1A, D2, D3, D5), katekol-O-metiltransferaz, tirozin hidroksilaz (yalnız VTA-da) və monoamin oksidaz A-nı kodlayan genlər idi. Asetilkolinlə əlaqəli genlər: nikotin reseptoru (α3 α6, β2, β3). Qiymətləndirməyi seçdiyimiz genlər əvvəllər Grelin təsirlərinə və / və ya mükafatlandırma / motivasiya davranışlarına təsir göstərmişlər (Kelley et al. 2002; Figlewicz et al. 2006; Jerlhag et al. 2006, 2007; Sibiliya et al. 2006; Dalley et al. 2007; Kuzmin et al. 2009; Küləktutmayan et al. 2009; Nimitvilai & Brodie 2010; Perello et al. 2010). Gen ifrazatına təsiri görmə şansını artırmaq üçün kəskin inyeksiyaya üstünlük verən xroniki bir grelin / salin infuziya protokolu istifadə edildi; üstəlik, ghrelin, uzun müddətli müddətdə mükafat sisteminin əhəmiyyətli bir tənzimləyicisidirsə, overeat və piylənməni təşviq edirsə, əsas mükafat mexanizmlərini dəyişdirmək üçün xroniki təsir göstərmələri çox vacibdir.

Dərman qəbulu və toxuma parçalanması

Kateter və osmotik nasos asetilləşdirilmiş insan grelin (Rose Pharma, Kopenhagen, Danimarka hədiyyə) məhlulu (8.3 μg / rat / gün) və ya salin vasitə məhlulu (0.9% NaCl) ilə dolduruldu; bu doza və müalicənin uzunluğu əvvəllər hipotalamusdakı gen ifadəsinə təsir göstərmişdir (Salomeet al. 2009b). Minipumpların implantasiyasından on dörd gün sonra siçovullar dekapitasiya yolu ilə öldürüldü. Beyinlər sürətlə çıxarıldı və VTA və NAcc beyin matrisindən istifadə edərək parçalandı (hər bölgənin sərhədləri əsas götürülərək təyin edildi Paxinos və Watson 1986), maye azotda dondurulur və mRNA ifadəsini daha sonra təyin etmək üçün –80 ° C-də saxlanılır.

RNT təcrid və mRNA ifadəsi

Fərdi beyin nümunələri Qiazolda (Qiagen, Hilden, Almaniya) TissueLyzer (Qiagen) istifadə edərək homogenləşdirildi. Ümumi RNA, hər ikisi də əlavə DNAse müalicəsi (Qiagen) ilə RNeasy Lipid Toxuma Mini Dəsti (Qiagen) və ya RNeasy Mikro Dəsti (Qiagen) istifadə edilərək çıxarıldı. RNT keyfiyyəti və miqdarı spektrofotometrik ölçmələr ilə qiymətləndirilmişdir (Nanodrop 1000, NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, ABŞ). CDNA sintezi üçün ümumi RNT təsadüfi hexamerlər (Tətbiqi Biosistemlər, Sundbyberg, İsveç) və Superscript III əks transkriptaz (Invitrogen Life Technologies, Paisley, UK) istifadə edərək istehsalçının təsvirinə əsasən transkripsiyaya çevrildi. RNaz vasitəçiliyi ilə parçalanmanın qarşısını almaq üçün rekombinant RNaseout Ribonukleaz İnhibitoru (Invitrogen) əlavə edilmişdir. Bütün cDNA-reaksiyalar üç nüsxədə işlənmişdir. Həqiqi vaxtda əks transkripsiya PCR TaqMan Xüsusi Array analizləri istifadə edilərək həyata keçirildi. On-line kataloqu (Tətbiqi Biosistemlər) arasından seçilmiş hədəf genləri üçün TaqMan probu və astar dəstləri ilə hazırlanmışdır. TaqMan Array platformalarındakı hər bir limana, nukleazsız su və 100 ul TaqMan Gene Expression Master Mix (Tətbiqi Biosistemlər) ilə birlikdə 50 ng ümumi RNT-yə uyğun cDNA yüklənmiş və son 100 µl həcminə çatmışdı. TaqMan Dizileri 7900HT sistemi istifadə edilərək TaqMan Array Upgrade (Tətbiqi Biosistemlər) ilə analiz edilmişdir. Termal velosiped şərtləri bunlardır: iki dəqiqə 50 ° C, 94.5 dəqiqə 10 ° C, ardından 40 saniyə 97 ° C 30 saniyə və 59.7 ° C bir dəqiqə.

Gen ifadəsinin dəyərləri ΔΔ əsasında hesablanmışdırCt metod (Livak və Schmittgen 2001), duzlu müalicə qrupu kalibrator təyin olundu. Qısaca, ΔCt eşik dövrünü təmsil edir (Ct) hədəf genin istinad mənbəyinə nisbəti və ΔΔCt təmsil edirCt grrelin müalicəsi qrupunun kalibratorun mənfi hissəsidir. Nisbi kəmiyyətlər nisbi kəmiyyət = 2 tənliyi istifadə edərək müəyyən edildi-DΔCt. Kalibrator nümunəsi üçün tənlik nisbi kəmiyyət = 2-dir-0, bu 1; buna görə də digər bütün nümunələr buna nisbətlə ifadə olunur. Glikeraldehid-3-fosfat dehidrogenaz istinad mənbəyi kimi istifadə edilmişdir.

Statistika

Bütün davranış parametrləri təqib olunan təhlil təhlil edilərək izlənildi post hoc Tukey testi və ya tuyğun olaraq testlər. Statistik analizlər Statistica proqramından (Tulsa, OK, ABŞ) istifadə edərək aparılmışdır. Xroniki mərkəzi qrelin müalicəsinin gen ifadəsinə təsirini təhlil etmək üçün t-test istifadə edildi, ilə Pthe istifadə edərək hesablanan dəyərlərCtdəyərlər. Fərqlər əhəmiyyətli hesab edildi P <0.05. Məlumat orta ± SEM olaraq ifadə edilir.

NƏTİCƏLƏR

Təcrübə 1: siçovullarda saxaroza cavab verən PR əməliyyatçısına periferik və ya mərkəzi qrelin administrasiyasının təsiri

Burada təbii şirin qida motivasiyasında və şəkərin gücləndirici xüsusiyyətlərində ghrelinin rolunu qiymətləndirmək üçün asılılıq tədqiqatında istifadə olunan bir paradiqma tətbiq edirik. Xüsusilə, periferik grelin administrasiyasının saxaroza mükafatlandırma effektivliyindəki rolunu müəyyən etmək üçün, vasitə və ya ghrelin İP enjeksiyonundan sonra siçovulların 20 dəqiqə ərzində mütərəqqi cavab cədvəlində saxaroza özünü idarə etməsini araşdırdıq. Kəskin periferik ghrelin enjeksiyonundan sonra siçovullarda operant davranışın bütün tədbirləri əhəmiyyətli dərəcədə artdı: aktiv qolu basmaq (P Bütün zaman nöqtələri üçün <0.05), qazanılan şəkər qranullarının sayı (P Bütün zaman nöqtələri üçün <0.005) və 120 dəqiqə fasilə nöqtəsi (P <0.005, vasitə və qrelin üçün 32.53 ± 3.4 və 41 ± 4.3; Şəkil 1a, b). Ədəbiyyat əsasən qrelin orexigenik təsiri üçün mərkəzi bir hərəkət sahəsini dəstəkləyir. Bununla birlikdə, GHS-R1A, CNS xaricində qida qəbuluna nəzarət ilə əlaqəli yerlərdə, məsələn, vagus sinirində də ifadə edilir; bu səbəbdən də, IP grelin-in müşahidə olunan təsirlərinin bir hissəsinin həmin periferik reseptorların vasitəçiliyi olduğu istisna edilə bilməz. Az miqdarda və dozada qrelin mərkəzi enjeksiyonu, yalnız CNS GHS-R1A-nı stimullaşdırır. Bu səbəbdən, qrelinin sükroz mükafatı effektivliyinə birbaşa CNS təsirini təyin etmək üçün, əməliyyatçı paradiqmadan 20 dəqiqə əvvəl də, vasitə və ya qrelin üçüncü mədəcik inyeksiyası ilə tətbiq olunduğu paralel bir araşdırma apardıq. Mərkəzi bir təsir hipotezi ilə uyğun olaraq, siçovullara kəskin ICV qrelin enjeksiyonu (həm 0.5 µg və həm də 1.0 µg dozalar) yuxarıda qeyd olunan bütün operant davranış tədbirlərini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı (Şəkil 2a, b). ICV ghrelin araşdırmasındakı aktiv qol cavablarının vaxt müddəti təsirin 10 və 30 dəqiqəlik nöqtələr zamanı yavaşca ortaya çıxmasına baxmayaraq 60 dəqiqəlik əhəmiyyətə çatdı [aktiv qol: 10 dəqiqə F(2, 24) = 0.94, P = 0.41, 30 dəqiqə F(2, 24) = 3.13, P = 0.06, 60 dəqiqə F(2, 24) = 5.86, P <0.01, 90 dəqiqə F(2, 24) = 6.42, P <0.01, 120 dəqiqə F(2, 24) = 6.03, P <0.01; qazanılmış mükafatlar: 10 dəqiqə F(2, 24) = 0.26, P = 0.78, 30 dəqiqə F(2, 24) = 2.76, P = 0.08, 60 dəqiqə F(2, 24) = 8.31, P <0.005, 90 dəqiqə F(2, 24) = 10.16, P <0.001, 120 dəqiqə F(2, 24) = 11.93, P <0.001; və qırılma nöqtəsi: F(2, 24) = 7.22, P <0.005 (nəqliyyat vasitəsi üçün 17.31 ± 1.53, 33.15 ± 5.52, 36 ± 6.95, sırasıyla 0.5 µg və 1.0 gg qrelin)]], bu marşrutla çatdırıldığında qrelin səbəb olduğu qidalanma gecikməsinin digər xəbərləri ilə uyğun bir vaxt kursu (Faulconbridge et al. 2003). Hər iki təcrübədə, hərəkətsiz qolda aktivlik az idi və fərqli müalicə qrupları arasında (vasitə və grelin üçün IP 4.1 ± 1.1, 4.1 ± 1.1, müvafiq olaraq; ICV 3.9 ± 1.1, 2.1 ± 0.7, 3.5 ± 1.6) əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmədi. vasitə, 0.5 mkg və 1.0 mkg grelin, müvafiq olaraq), müalicənin fəaliyyətdə qeyri-müəyyən məqsədyönlü olmayan dəyişikliklər yaratmadığını göstərir. Operant sınağından dərhal sonra siçovullar ev qəfəslərinə qaytarıldı və çovlara sərbəst giriş imkanı verildi; periferik olaraq verilməsindən asılı olmayaraq siçovullar grrelin ilə vurulmuşdur (P <0.05) və ya mərkəzdən [F(2, 24) = 12.64, P <0.001], nəqliyyat vasitəsi ilə müalicə olunan qruplarla müqayisədə ilk saat ərzində çay qəbulunu təxminən iki qat artırdı (Əncir 1c & 2c). Əvvəlki məlumatlara uyğun olaraq (Faulconbridge et al. 2003) kəskin mərkəzi ghrelin inyeksiyasının hiperfagik təsirinin əksəriyyəti inyeksiyadan sonra üç saat ərzində baş verdiyini göstərir və tədqiqatımızda çrel qəbuluna üç-24 saatdan sonra, hər iki dozalı grelin [17.4 ± 1.12, 18.42 ± 1.34, 19.12 ± 1.43 vasitə, 0.5 μg və 1.0 μg ghrelin, müvafiq olaraq F(2, 24) = 2.27, P = 0.13].

Şəkil 1 

Periferik ghrelin enjeksiyonu PR nisbəti ilə işləyən kondisioner modelində ləzzətli yemək əldə etmək motivasiyasını artırır. Aktiv qolu (a) və alınan 45 mq saxaroza mükafatlarının sayı (b) xeyli artır ...
Şəkil 2 

CNS (üçüncü ICV) ghrelin çatdırılma, PR nisbəti ilə işləyən kondisioner modelində saxarozanın mükafatlandırıcı dəyərini artırır. Aktiv qolu (a) və alınan 45 mq saxaroza mükafatlarının sayı (b) cavabların sayı üçüncü tərəfindən əhəmiyyətli dərəcədə artır ...

Təcrübə 2: periferik və ya mərkəzi müalicənin bir Ghrelin reseptoru (GHS-R1A) antaqonisti (JMV2959) ilə siçovullarda saxaroza mükafatlandırma təşviqinə təsiri

Sonra GHS-R1A-nın farmakoloji blokadasının saxaroza mükafat effektivliyinə təsirini araşdırdıq. Beləliklə, bir GHS və ya 20 mq / kq və ya 1 mq / kq JMV3, ya da 2959 mq / kq JMV1, IP-nin enjeksiyonundan sonra 2959 dəqiqəlik endogen dövriyyəli grelin XNUMX yüksək səviyyədə olmasını təmin etmək üçün mütərəqqi bir cavab cədvəlində saxaroza özünü idarəetmə, bir gecədə qida məhdudlaşdırılan siçovullarda araşdırıldı. -RXNUMXA antaqonistidir. JMVXNUMX periferik enjeksiyondan sonra siçovullarda operant davranış tədbirlərinin hamısı əhəmiyyətli dərəcədə azaldı F(2, 24) = 11.53 P <0.0005, 120 dəqiqə F(2, 24) = 11.27, P <0.001; qazanılan mükafatlar: beş dəqiqə F(2, 24) = 23.39 P <0.0005, 120 dəqiqə F(2, 24) = 9.26, P <0.001 və qırılma nöqtəsi 120: F(2, 24) = 5.98, P <0.01 (45.31 ± 6.45, vasitə üçün 42.08 ± 5.80, 30.0 ± 5.89, müvafiq olaraq 1 mg / kg və 3 mg / kg JMV2959)]. Post hoc analiz əsas təsirin 3 mq / kq dozada idarə olunduğunu göstərdi (Şəkil 3a, b). Saxaroza mükafat effektivliyində mərkəzi qrelin reseptorunun rolunu təyin etmək üçün, əməliyyat aparan ölçmələrdən əvvəl 2959 dəqiqə əvvəl nəqliyyat vasitəsi və ya JMV5 (10 mkg və ya 20 mkq) üçüncü ventrikülə aparıldığı oxşar bir araşdırma edildi. Yuxarıda göstərilən bütün operant davranış tədbirləri siçovullarda JMV2959 hər iki dozasının kəskin üçüncü ventrikül infuziyasından sonra əhəmiyyətli dərəcədə azalmışdır (Şəkil 4a, b). Müşahidə olunan təsir dərhal oldu post hoc analiz yalnız sınaq müddəti ərzində saxlanılan əməliyyat kamerasında 10 dəqiqəlik fəaliyyətdən sonra müalicə qrupları arasında əhəmiyyətli fərqləri aşkar etdi. (aktiv qol: 10 dəqiqə) F(2, 24) = 10.16, P <0.0005, 30 dəqiqə F(2, 24) = 11.48, P <0.0005, 60 dəqiqə F(2, 24) = 9.11, P <0.001, 90 dəqiqə F(2, 24) = 8.30, P <0.001, 120 dəqiqə F(2, 24) = 4.95, P <0.05; qazanılmış mükafatlar: 10 dəqiqə F(2, 24) = 21.23, P <0.0001, 30 dəqiqə F(2, 24) = 25.08, P <0.0001, 60 dəqiqə F(2, 24) = 19.24, P <0.0001, 90 dəqiqə F(2, 24) = 20.04, P <0.0001, 120 dəqiqə F(2, 24) = 5.44, P <0.01; və qırılma nöqtəsi: F(2, 24) = 3.78, P <0.05 (51.4 ± 8.58, nəqliyyat vasitəsi üçün 38.13 ± 5.07, 33.67 ± 5.21, 5 µg və 10 µg JMV2959)].

Şəkil 3 

Bir grrelin reseptor antaqonistinin periferik çatdırılması, JMV2959. PR nisbəti operant kondisioner modelində ləzzətli yemək əldə etmək motivasiyasını azaldır. Aktiv qolu (a) və alınan 45 mq saxaroza mükafatlarının sayı ...
Şəkil 4 

JMV1 ilə GHS-R2959A-nın mərkəzi blokadası PR nisbətində işləyən kondisioner modelində qida mükafatı əldə etmək motivasiyasını azaldır. Aktiv qolu (a) və alınan 45 mg saxaroza mükafatlarının sayı (b) əhəmiyyətli dərəcədə azalmışdır ...

Gözlənildiyi kimi (Hodos 1961; Zərgər et al. 1995), bütün müalicə qruplarında, həm İP, həm də ICV idarəetmə marşrutları daxilində, qida məhrumluğunun, sukroz üçün operant reaksiyasına təsiri aydın oldu (Əncir 3a & 4a) və doymuş vəziyyətdə müşahidə olunanlarla ziddiyyət təşkil edir (Əncir 1a & 2a). Aktiv olmayan qolda aktivlik az idi (İP 9.6 ± 3.0, 6.8 ± 2.2, 5.6 ± 1.9 və 1 mq / kq və ya 3 mq / kq JMV2959; ICV 6.4 ± 1.3, 4.6 ± 1.3, 4.4 ± 1.7 ± 5 ± 10 ± 2959 ± 2959 ± XNUMX ± XNUMX ± XNUMX ± XNUMX ± XNUMX - XNUMX ± mkg və XNUMX mkg JMVXNUMX, müvafiq olaraq) və periferik və ya mərkəzləşdirilmiş şəkildə idarə olunmağından asılı olmayaraq JMVXNUMX bu fəaliyyətə heç bir əhəmiyyətli təsir göstərməmişdir (bu fəaliyyət fərqli müalicə qrupları arasında əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənmirdi). ICV araşdırması üçün, operant sınağından dərhal sonra siçovullar ev qəfəslərinə qaytarıldı və çowa sərbəst giriş imkanı təmin edildi; Maraqlıdır ki, bir saatda da çow qəbuluna təsir göstərilmədi (Şəkil 4c) və ya 24 saatlıq vaxt nöqtəsi (məlumat göstərilmir). Bu, məhrumiyyətə səbəb olan qida motivasiyası üçün ghrelin siqnalının tələb olunduğunu, bir məhrumiyyət dövründə aktivləşdirilmiş digər lazımsız mexanizmlər səbəbindən 16 saatlıq qida məhrumiyyəti səbəb olduğu pulsuz qidalanma üçün vacib olmadığını göstərə bilər. Sərbəst qidalanma ölçmələrinin hamısı, preparatın 140 dəqiqəlik postinjeksiyonunda baş tutdu və buna görə təsirin olmaması, qismən narkotikin yuyulması ilə əlaqədar olduğunu istisna edə bilmərik.

Təcrübə 3: VTA və NAcc-də dopamin- və asetilkolinlə əlaqəli genlərin ifadə edilməsində grrelin təsirli dəyişikliklər

Bu araşdırmada, dopamin və asetilkolinlə əlaqəli genlərin əsas mezolimbik düyünlərdə, VTA və NAccdə ghrelin tərəfindən dəyişdirilməsini, xroniki mərkəzi qrelin müalicəsinin təsirli seçilmiş dopamin reseptorlarının və fermentlərinin ifadəsinə təsirini araşdıraraq araşdırdıq. dopamin istehsalında və maddələr mübadiləsində, hipotalamusda gen ifadəsində ghrelin ilə əlaqəli dəyişikliklər yaratmaq üçün qurulmuş bir paradiqmada (Salomeet al. 2009b). VTA dopamin reseptorunda D5 və nikotinik asetilkolin reseptoru (nAChRβ2), salin ilə müalicə olunan qruplarla müqayisədə, grelinlə müalicə olunan siçovullarda artan mRNA ifadəsinə malikdir (Şəkil 5a). NAcc-də, duzlu müalicə qrupu ilə müqayisədə grelinlə müalicə olunan siçovullarda D1A, D3 və D5 kodlayan genlərin mRNA ifadəsinin azalması müşahidə edildi ((qaraciyərlərdə nikotinik asetilkolin reseptoru nAChRα3).Şəkil 5b).

Şəkil 5 

Xroniki ICV ghrelin və ya vasitə müalicəsindən sonra VTA (a) və NAcc (b) dopamin və asetilkolinlə əlaqəli gen ifadəsi. Məlumatlar şoran müalicəyə nisbətən qat dəyişikliyinin orta səviyyəsini təmsil edir. D1, dopamin D1 reseptoru; D2 dopamin D2 reseptoru; D3, dopamin ...

MÜZAKİRƏ

Burada, saxaroza mükafatlandırıcı həvəsləndirmə və gücləndirici xüsusiyyətlərinin modulyasiyasında mərkəzi qrelin siqnal sisteminin rolunu aşkar edirik və əsas mesolimbik mükafat qovşaqlarında dopaminergik və xolinergik reseptorların gen ifadəsinə təsir göstərir. Nəticələr göstərir ki, hemrelinin həm mərkəzi, həm də periferik çatdırılması, bir heyvanın saxaroza mükafatını almaq üçün etməyə hazır olduğu iş həcmini xeyli artırır. Bundan əlavə, ghrelin reseptorunun sistemli və ya mərkəzi blokadası saxaroza cavab verən əməliyyatçını sıxışdırır. Beləliklə, endogen grelin siqnalının saxaroza mükafatı üçün həvəsləndirici motivasiya üçün əhəmiyyət kəsb etdiyini ehtimal edə bilərik. Əldə etdiyimiz tapıntılar mərkəzi qhrelin siqnal sisteminin mühüm rolunun qida da daxil olmaqla mükafatların həvəsləndirici dəyərinin artırılması barədə fərziyyəsinə uyğundur. Yemək məhdudiyyətinin saxarozanın mükafatlandırıcı dəyərini artırdığını nəzərə alsaq (Hodos 1961; Zərgər et al. 1995) və qısamüddətli qida məhdudlaşdırılması zamanı ghrelin səviyyəsinin yüksəldildiyi (Gualillo et al. 2002), mümkündür ki, qida məhdudlaşdırılması / məhrum olması halında, qrrelin qida / qida motivasiyasının mükafatlandırıcı dəyərini artıran təsir edən amillərdən biridir. Həqiqətən, periferik ghrelin məruz qalması operant davranışını qidadan məhrum siçovullarda müşahidə olunan səviyyələrə bənzər səviyyəyə qaldırdı və əksinə, ghrelin siqnalının blokadası əməliyyatçı davranışını məhrum olmayan siçovullarda qeyd olunan səviyyələrə endirdi.

Artıq aydın görünür ki, problemli şəkildə artan qida qəbulu, hedonik və motivasion aspektləri əhatə edən qida mükafatlarının mərkəzi mexanizmlərinin disregulyasiyasını əks etdirir. Pulsuz qidalanma və mükafatlandırılmış qidalanma, diferensial idarəedici neyroanatomik substratları olan iki ayrıla bilən fenomen kimi görünür (Salamone et al. 1991), qidalanma davranışında iştirak edən agentlərin rolunu qiymətləndirərkən həm araşdırmaq vacibdir. Ghrelin'in güclü oreksigenik təsirləri, əsasən qidalandırıcılıqdakı mükafata əsaslanan qidalanma ilə rolunu ayırmaq çətin olacağı sərbəst qidalanma giriş modellərində tədqiq edilmişdir. Bu işdə, GHS-R1A ligandlarının, asılılıq yaradan narkotik maddələrin istənilməsini və motivasiyasını göstərmək üçün digər kontekstlərdə istifadə edilmiş bir eksperimental modeldən istifadə edərək, sükroz mükafatı motivasiyasına müdaxilə etdiyini gördük. Motivli davranışdakı artım həm kimyəvi maddə asılılığı, həm də kalori məhdudlaşdırması üçün ümumi bir şeydir və ehtimal ki, üst-üstə düşən neyrobioloji mexanizmləri əhatə edir. Bu işdə, eyni heyvanlarda normal çovaq yeməyinin sərbəst qidalanmasında qrelin səbəb olduğu bir artım aşkar etdik, bu da operant kamerada qida üçün xeyli çox iş sərf etdi. Bu səbəbdən, pulsuz qidalanma modellərindəki qrelin təsiri barədə əvvəlki məlumatlarla birlikdə alınan məlumatlar (Wren et al. 2000), ghrelin'in həm pulsuz qidalanma, həm də qidalanma motivasiyasını modulyasiya edə biləcəyini göstərir.

Ghrelin reseptoru GHS-R1A, enerji balansı və mükafatlandırma ilə əlaqəli əsas hipotalamik, hindbrain və mesolimbik bölgələrdə mövcud olduğunu nəzərə alaraq (Zigman et al. 2006) və GHS-R1A ligandlarının mərkəzi ventrikulyar enjeksiyonu, bu CNS bölgələrinə geniş yayılma imkanı əldə edildiyi üçün burada göstərilən ghrelinin saxaroza mükafatlandırma effekti üçün bir neçə müvafiq neyroanatomik substrat ola bilər. Grelin VTA dopamin neyronlarını aktivləşdirdiyindən güman olunur ki, ghrelin birbaşa əsas mezolimbik sahələrə təsir göstərir (Abizaid et al. 2006) və grrelinin VTA-ya birbaşa aparılması, accumbal dopamin azad edilməsini artırır (Jerlhag et al. 2007). Buna uyğun olaraq, əvvəllər VTA ghrelinin sərbəst seçilmiş qidalanma paradiqmalarında təltif / ləzzətli qida istehlakının artmasına təsir göstərdiyini, həmçinin VTA-nın zədələnməsinin ləzzətli yeməyin kəşfiyyat davranışını bildirdik (Egecioğlu et al. 2010). NAcc, həmçinin qida qəbulunun motivasion aspektlərini modelləşdirməkdə Ghrelin üçün birbaşa hədəf ola bilər; birbaşa bu bölgəyə enjekte edildikdə, ghrelin bir qidalanma reaksiyasına səbəb olur (Naleid et al. 2005), bu sahədə GHS-R1A-nın gəmiricilərdə olması digər müstəntiqlər tərəfindən açıqlanmasa da (Zigman et al. 2006) və buna görə də əlavə aydınlaşdırma tələb olunur.

Ardıcıl olaraq, əsaslandırılmış davranışlarda vacib rolu ilə, dopamin sistemindəki bir neçə gen mərkəzi qrelin müalicəsi ilə dəyişdirilmişdir. Bu məlumatlar dofamin reseptoru ifadəsinin tənzimlənməsinin grelinin mükafatla əlaqəli funksiyaya və siqnala təsir göstərdiyi uzunmüddətli bir mexanizm olma ehtimalını artırır. Dopamin reseptorlarının qiymətləndirilməsi yalnız NAcc kimi buraxma yerində deyil, həm də VTA-da dendritik dopamin azad olması səbəbindən vacibdir (Cragg & Greenfield 1997), ehtimal ki, mükafatlandırılmış davranışlara təsir göstərmək üçün yerli olaraq hərəkət edir. Burada, Grelin müalicəsindən sonra VTA-da artan D5 ifadəsini tapdıq. Dopamin D5 reseptorları dopaminergik VTA neyronlarının hüceyrə orqanlarında mövcuddur (Ciliax et al. 2000) və onların fəaliyyəti, bir müddət desensitizasiya müddətindən sonra VTA dopamin neyron fəaliyyətini bərpa etmək üçün tələb olunur (Nimitvilai & Brodie 2010). NAcc-də D1 ifadəsinin azaldığını qeyd etdik. Əslində, bu reseptorun azaldılmış ifadəsi bu yaxınlarda NAcc-də piylənməyə meylli, lakin yüksək yağlı pəhrizdə piylənməyə davamlı siçovulların NAcc-də piylənmə və həddindən artıq istehlakda potensial rolunu göstərmişdir (Alsio et al. 2010). Ayrıca, D3 kodlayan genlərin ifadəsi, həm siçovullarda, həm də insan narkotik istifadəçilərində D2 / D3 reseptorlarının azalmasının mövcudluğunu nəzərə alaraq xüsusi maraq tapması ilə Ghrelin tərəfindən azaldılmışdır (artan impulsivlik ilə əlaqələndirilir)Dalley et al. 2007; Küləktutmayan et al. 2009). Maraqlıdır ki, dopamin sintezində və ya istehsalında iştirak edən fermentlərdə ciddi dəyişiklik görmədik.

Asetilkolin sisteminin dərman və qida mükafatları üçün vacib rolu yaxşı sənədləşdirilmişdir; burada, Ghrelin müalicəsinin, bir neçə asetilkolin nikotinik reseptor alt qruplarını kodlayan genlərin ifadəsindəki dəyişikliklərlə əlaqəli olduğunu, grelinin mükafat funksiyasını dəyişdirə biləcəyi başqa bir yol təqdim etdiyini göstəririk. Ghrelin, VTA dopamin sisteminə xolinergik proyeksiya ilə daxil olan spirtli mükafat üçün vacib olan laterodorsal tegnal zonasında (LDTg) xolinergik neyronları təsiriylə dolayı yolla VTA dopaminergik neyronları tənzimləyə bilər. Əslində, əvvəllər göstərdik ki, siçanlarda LDTg-ə ikitərəfli grrelin vurması, xolinergik asılı şəkildə dopamin buraxmasını stimullaşdırır (Jerlhag et al. 2007, 2008) və pulsuz bir seçim (spirt / su) içmə paradiqmasında spirt istehlakını artırır (Jerlhag et al. 2009). Həqiqətən, son tədqiqatlar qida mükafatında xolinergik-dopaminerik mükafat əlaqəsini tətbiq etmişdir (Dickson et al. 2010). Başqa bir maraqlı ehtimal ki, ghrelin xolinergik reseptorların tənzimlənməsi ilə VTA-da xolinergik siqnalları gücləndirə bilər. Doğrudan da, indiki gen ifadə məlumatlarımız, GTA-ya baxılan siçovullarda VTA nAChRβ2 mRNA səviyyəsinin artırıldığı üçün bu mexanizmi dəstəkləyir.

Digər tərəfdən NAcc xolinergik neyronların və NAccdəki asetilkolinin funksiyası, artan mükafat yönümlü davranışda asetilkolinin rolunu ifadə edən bəzi məlumatlarla daha mübahisəli olmuşdur (Pratt və Kelley 2005; Pratt & Blackstone 2009) lakin NAcc-dəki Ach-ın qidalanmanı maneə törətdiyini və doyma mexanizmində rol oynayacağını göstərən digərləri (sükan et al. 2003; Hoebel et al. 2007). Həqiqətən, qrelin müalicəsi nikotinik reseptor alt birləşmələrindən birinin - nAChRα3-un azalmış ifadəsi ilə əlaqəli olduğundan nəticələrimiz sonuncuyla uyğun gəlir. Qeyd etmək vacibdir ki, gen ekspresyon tədqiqatları, grelin potensial aşağı hədəflərini göstərmək baxımından çox qiymətlidir, ancaq orexigen / mükafat yönümlü cavabın ifadəsi üçün lazım olan əlaqə növünü (tənzimləmə və ya aşağı tənzimləmə) təklif edir, lakin onu müəyyənləşdirmir. birbaşa kompensasiyaedici dəyişikliklərdən ayırmaq çətin olardı. Buna görə də, gen ekspresyon çalışmalarımız bir əlaqəni göstərir və gələcəkdə genetik və farmakoloji tədqiqatları üçün bu genlərin Grelin sərbəst və mükafatlandırılmış bəslənmədə təsirlərindəki rolunu təyin edən bir platforma təmin edir.

Hipotalamik və beyin sisteminin bölgələri homeostatik qidalanmaya çox kömək edərsə də, Ghrelin səbəb olduğu qida mükafatı motivasiyasında hipotalamik və / və ya beyin sistemi afferent sistemlərinin dolayı rolunu istisna edə bilmərik. Həqiqətən, VTA və NAcc daxil olmaqla, yanal hipotalamusdan mezolimbik mükafat dövrə qədər olan orexinergik neyronların layihəsi (Toshinai et al. 2003; Harris et al. 2005; Perello et al. 2010). GHS-R1A ligandları üçün başqa bir hədəf olan arcuate nüvəsinin Y (NPY) / AgRP neyronları (Dickson & Luckman 1997; Keen-Rhinehart & Bartness 2007a,b), əhəmiyyətli bir rol oynaya bilər. NPY, chow və sukrozun mükafat effektivliyini artırdığı göstərilmişdir (Brown, Fletcher & Coscina 1998), halbuki AgRP yalnız yüksək yağlı qidaların mükafat effektivliyini artırır (Tracy et al. 2008). Ghrelin həm saxaroza mükafatında (indiki araşdırmada), həm də yüksək yağ mükafatında rol oynadığı görünür (Perello et al. 2010); lakin, Grelin bu təsiri üçün NPY / AgRP neyronlarının nisbi əhəmiyyəti açıqlanmaqda qalır. Xülasə, ghrelin qidalanma komponentləri arasında yayılmış qida motivasiya xüsusiyyətlərinə malikdir və qidalanma təşviq etmək üçün əlaqələndirilmiş davranış reaksiyasını sinxronlaşdırmaq üçün bir çox beyin sahəsinə təsir göstərir.

Ghrelin beynə nəql edilməsi məhdud olsa da (Banklar et al. 2002), periferik ghrelin hipokampus kimi ərazilərə daxil olmaq və hədəf almaq üçün görünürDiano et al. 2006) və VTA (Jerlhag 2008). Vagus sinirinin grelin mərkəzi təsirləri üçün dolayı yol kimi əlaqəli olması barədə bəzi mübahisələr davam etsə də (Dornonville de la Cour et al. 2005; tarix et al. 2002; Arnold et al. 2006), CNS içərisində birbaşa bir hərəkətin olması, ehtimal ki, periferik grelin qida qəbuluna təsiri, glrelin antaqonistlərinin VTA daxilində administrasiyası tərəfindən dayandırıla bilər (Abizaid et al. 2006). Ghrelin beyində istehsal olunur (Cowley et al. 2003) bunun necə tənzimləndiyini və beyin mənşəli ghrelinin qida qəbulu və yemək motivasiyası üçün vacib bir mərkəzləşdirilmiş bir siqnal təmin edib etməməsi hələ müəyyən edilməlidir. Ghrelin reseptoru GHS-R1A-nın tərkib hissəsidir (yəni, grelin ligandı olmadıqda fəaliyyət göstərir) (Holst et al. 2003), dövriyyətsiz qrelin, yeməyin mükafatlandırılması üçün həvəsləndirici motivasiya üçün fizioloji cəhətdən bağırsaq-beyin siqnalını verə biləcəyinə dair sual yaranır. Saxaroza mükafatlandırma işinə bənzər təsir göstərən bu tədqiqatın nəticələri, GHS-R1A ligandlarının mərkəzi və periferik idarəsi vasitəsi ilə əldə edilə bilər, həm mərkəzi, həm də periferik sərbəst buraxılan grelin qida motivasiyasına təsir göstərə bilər.

Nəticə olaraq, yeni məlumatlarımız, qrelin siqnalının sukroz mükafatı əldə etmə motivasiyası və mezolimbik mükafat yolunda dopaminerjik və kolinerjik gen ifadəsinə təsiri üçün vacib olduğuna dair yeni dəlillər təqdim edir. Tapıntılarımız, normal iştahaaçan davranışda və yemək pozğunluqları və obezitenin patofizyolojisinde şəkər kimi təbii mükafatların təşviq dəyərinin təyin edilməsində endogen qrelin rolu ilə bağlı vacib suallara ilham verir. Dopamin və asetilkolin sistemindəki molekulyar dəyişikliklərin qrelin mükafata təsiri ilə əlaqəli olması üçün əhəmiyyətli işlər qalsa da, məlumatlarımız potensial olaraq qrelin mükafat davranışına təsir göstərdiyi yeni bir mexanizmi göstərir. Mükafat proseslərindəki qrelin rolunu anlamaq, yemək pozğunluqları və kimyəvi maddə asılılığının üst-üstə düşən nörobiyolojisini anlamaq üçün vacibdir və bu xəstəliklərin etiyolojisini anlamaq və yeni müalicələrin inkişafı üçün potensial bir yol təqdim edir. Nəhayət, GHS-R1A antaqonistlərindən istifadə edərək dadlı şirin qidaların problemli aşırı yeməsini yatırma ehtimalı, bu cür birləşmələrin qan qlükoza nəzarəti üçün ortaya çıxan faydalı təsirləri ilə klinik və terapevtik əhəmiyyətə malik ola bilər (günəş et al. 2006) 2 şəkərli diabet xəstələrində (Esler et al. 2007).

Minnətdarlıq

İsveç Tibb Tədqiqat Şurası tərəfindən dəstəklənən tədqiqatlar (VR 2006-5663; 2009-S266), Avropa Birliyi 7th Çərçivəsi (FP7-HEALTH-2009-241592; FP7-KBBE-2009-3-245009X), ALF GöF. İsveç İnstitutu və İsveç Strateji Araşdırmalar Fondu Sahlgrenska Ürək-Damar və Metabolik Tədqiqatlar Mərkəzinə (A7601-305). Deniel Perrissouda (AeternaZentaris, GmBH, Almaniya) GHS-R188A antaqonisti JMV1 və Anders Friberg'i təqdim etməkdə kömək etdiyinə görə təşəkkür edirik.

Müəlliflərin qatqısı

KPS bütün davranış araşdırmalarını təşəbbüs etdi, tərtib etdi, icra etdi və təhlil etdi. CH bütün gen ifadələrini araşdırdı və analiz etdi. EE, tədqiqatın başlamasına öz töhfəsini verdi. SLD baş müəllif idi və bütün tədqiqatlara nəzarət və maliyyə dəstəyi verdi. Əlyazma KPS və SLD tərəfindən hazırlanmışdır, bütün müəlliflər son mətnə ​​öz töhfələrini vermişlər.

References

  • Abizaid A, Liu ZW, Andrews ZB, Shanabrough M, Borok E, Elsworth JD, Roth RH, Sleeman MW, Picciotto MR, Tschop MH, Gao XB, Horvath TL. Grelin iştahanı təşviq edərkən midbrain dopamin nöronlarının sinaptik və sinoptik giriş təşkilini modullaşdırır. J Clin Invest. 2006; 116: 3229-3239. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Alsio J, Olszewski PK, Norback AH, Gunnarsson ZE, Levine A.Ş., Pickering C, Schioth HB. Dopamin D1 reseptor gen ifadəsi, uzun müddətli yeməkli yeməklərə məruz qaldıqda, nüvənin akumbensində azalır və sıçanlarda dietə səbəb olan obezite fenotipinə görə fərqlənir. Neuroscience. 2010; 171: 779-787. [PubMed]
  • Arnold M, Mura A, Langhans W, Geary N. Gut vagal afferents, siçovul içərisinə yeridilən Ghrelin'in yemək-stimullaşdırıcı təsiri üçün lazım deyildir. J Neurosci. 2006; 26: 11052 –11060. [PubMed]
  • Bailey ART, Von Englehardt N, Leng G, Smith RG, Dickson SL. Arcuate nüvəsi və beyin sisteminin böyümə hormonu sekretoqunun aktivləşdirilməsi qeyri-noradrenergik bir yol ilə baş verir. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 191 –197. [PubMed]
  • Banklar WA, Tschop M, Robinson SM, Heiman ML. Qan-beyin baryeri üzərindəki ghrelin daşınmasının genişliyi və istiqaməti özünəməxsus ibtidai quruluşu ilə müəyyən edilir. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 302: 822 –827. [PubMed]
  • Qəhvəyi CM, Fletcher PJ, Coscina DV. Saxaroza cavab verən neyropeptid Y-təsirli əməliyyatçı, dopamin ilə vasitəçilik edilmir. Peptidlər. 1998; 19: 1667 –1673. [PubMed]
  • Ciliax BJ, Nash N, Heilman C, Sunahara R, Hartney A, Tiberi M, Rye DB, Caron MG, Niznik HB, Levey AI. Sıçan və maymun beyinində Dopamin D (5) reseptor immunolokalizasiyası. Sinapse. 2000; 37: 125-145. [PubMed]
  • Cowley MA, Smith RG, Diano S, Tschop M, Pronchuk N, Grove KL, Strasburger CJ, Bidlingmaier M, Esterman M, Heiman ML, Garcia-Segura LM, Nillni EA, Mendez P, Low MJ, Sotonyi P, Friedman JM, Liu HY, Pinto S, Colmers WF, Konus RD, Horvath TL. CNS-dəki grrelinin paylanması və təsir mexanizmi, enerji homeostazını tənzimləyən yeni bir hipotalamik dövrə nümayiş etdirir. Neyron. 2003; 37: 649 –661. [PubMed]
  • Cragg SJ, Greenfield SA. Somatodendritik və akson terminalı dipamin azadlığının əhəmiyyətli nigrada, ventral tegmental sahə və striatumdakı diferensial autoreseptor nəzarət. J Neurosci. 1997; 17: 5738-5746. [PubMed]
  • Cummings DE, Purnell JQ, Frayo RS, Schmidova K, Wisse BE, Weigle DS. Plazma qhrelin səviyyəsinin əvvəlcədən yüksəlməsi insanlarda yeməyin başlamasında rol oynayır. Diabet. 2001; 50: 1714 –1719. [PubMed]
  • Dalley JW, Fryer TD, Brichard L, Robinson ES, Theobald DE, Laane K, Pena Y, Murphy ER, Shah Y, Probst K, Abakumova I, Aigbirhio FI, Richards HK, Hong Y, Baron JC, Everitt BJ, Robbins TW . D2 / 3 reseptorları olan nüvə xassələri impulsivliyi və kokain möhkəmləndirilməsini proqnozlaşdırır. Elm. 2007; 315: 1267 –1270. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Tarix Y, Murakami N, Toshinai K, Matsukura S, Niijima A, Matsuo H, Kangawa K, Nakazato M. Siçovullarda mədəciyin afferent vagal sinirinin rolu. Qastroenterologiya. 2002; 123: 1120 –1128. [PubMed]
  • Diano S, Farr SA, Benoit SC, McNay EC, da Silva I, Horvath B, Gaskin FS, Nonaka N, Jaeger LB, Banks WA, Morley JE, Pinto S, Sherwin RS, Xu L, Yamada KA, Sleeman MW, Tschop MH, Horvath TL. Ghrelin, hipokampal onurğa sinapsının sıxlığını və yaddaş fəaliyyətini nəzarət edir. Təbiət nevrologiyası. 2006; 9: 381 –388. [PubMed]
  • Dickson SL, Hrabovszky E, Hansson C, Jerlhag E, Alvarez-Crespo M, Skibicka KP, Molnar CS, Liposits Z, Engel JA, Egecioglu E. Mərkəzi nikotin asetilkolin reseptoru siqnalını gəmiricilərdə qəbuledici təsir göstərir. Nevrologiya. 2010; 171: 1180 –1186. [PubMed]
  • Dickson SL, Leng G, Robinson ICAF. Böyümə hormonu sərbəst buraxan peptidin sistemli tətbiqi hipotalamik arcuate neyronları aktivləşdirir. Nevrologiya. 1993; 53: 303 –306. [PubMed]
  • Dickson SL, Luckman SM. N-nöropeptid Y və böyümə hormonu (GH) - sərbəst buraxan amil neyronlarının GH sekretoqu, GH azad edən peptid-6 sistemli enjeksiyonundan sonra sükan arc nüvəsindəki c-fos mesajı ribonuklein turşusunun induksiyası. Endokrinoloji. 1997; 138: 771 –777. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Björkqvist M, Sandvik AK, Bakke I, Zhao CM, Chen D, Håkanson R. Siçovul mədəsindəki a-bənzər hüceyrələr qrelin ehtiva edir və gastrin nəzarəti altında fəaliyyət göstərmir. Regul Pept. 2001; 99: 141 –150. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Lindqvist A, Egecioglu E, Tung YCL, Surve V, Ohlsson C, Jansson JO, Erlanson-Albertsson C, Dickson SL, Hakanson R. Ghrelin müalicəsi gastrectomised siçanlarda çəki artımının və bədən yağının azalmasını bərpa edir. Bağırsaq. 2005; 54: 907 –913. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Egecioglu E, Jerlhag E, Skibicka S, Salomé N, Haage D, Bohlooly YM, Andersson D, Bjursell M, Perrissoud D, Engel JA, Dickson SL. Ghrelin, gəmiricilərdə ləzzətli qidaların qəbulunu artırır. Addict Biol. 2010; 15: 304 –311. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Engel JA. Alkogolizmin öyrənilməsindəki son irəliləyişlər (Exercpta Medica Beynəlxalq Konqres seriyası) Amsterdam: Excerta Medica; 1977. Asılılıq yaradan dərmanlar tərəfindən təsir edilən avropoforiyanın neyrokimyəvi tərəfləri; s. 16 - 22.
  • Esler WP, Rudolph J, Claus TH, Tang WF, Barucci N, Brown SE, Bullock W, Daly M, DeCarr L, Li YX, Milardo L, Molstad D, Zhu J, Gardell SJ, Livingston JN, Sweet LJ. Kiçik molekullu ghrelin reseptor antaqonistləri qlükoza dözümlülüyünü yaxşılaşdırır, iştahı yatırır və kilo verməyə kömək edir. Endokrinoloji. 2007; 148: 5175 –5185. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Cummings DE, Kaplan JM, Grill HJ. Beyin sisteminin ghrelin administrasiyasının hiperfagik təsiri. Diabet. 2003; 52: 2260 –2265. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Grill HJ, Kaplan JM, Daniels D. Carelal beyin beyin sisteminin tədarükü hipotalamusun arcuate və ya paraventriküler nüvələrində deyil, tənha yolun nüvəsində fos ifadəsini meydana gətirir. Beyin Res. 2008; 1218: 151 –157. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. İntraventriküler insulin və leptin siçovulların saqqorda özünü idarə etməsini azaldır. Fiziol Behav. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
  • Gualillo O, Caminos JE, Nogueiras R, Seoane LM, Arvat E, Ghigo E, Casanueva FF, Dieguez C. Normal velosipedli qadın siçovullarında və hamiləlikdə qida məhdudiyyətinin təsiri. Obes Res. 2002; 10: 682 –687. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Xarici mükafat axtarışında lateral hipotalamik orexin nöronların rolu. Təbiət. 2005; 437: 556-559. [PubMed]
  • Helm KA, Rada P, Hoebel BG. Hipotalamusda serotonin ilə birləşən xolesistokinin asetilkolini artırarkən acumbens dopamin sərbəstliyini məhdudlaşdırır: mümkün bir doyma mexanizmi. Brain Res. 2003; 963: 290-297. [PubMed]
  • Hewson AK, Dickson SL. Ghrelinin sistemli tətbiqi oruc və bəslənən siçovulların hipotalamik arcuate nüvəsində Fos və Egr-1 zülallarını meydana gətirir. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 1047 –1049. [PubMed]
  • Hodos W. Progressive nisbəti mükafat gücü bir tədbir kimi. Elm. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
  • Hoebel BG, Avena NM, Rada P. Akumbens dopamin-asetilkolin balansında yanaşma və qaçma. Curr Opin Pharmacol. 2007; 7: 617-627. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Holst B, Cygankiewicz A, Jensen TH, Ankersen M, Schwartz TW. Ghrelin reseptorunun yüksək tərkibli siqnalları - güclü tərs agonistin müəyyən edilməsi. Mol Endokrinol. 2003; 17: 2201 –2210. [PubMed]
  • Howard AD, Feighner SD, Cully DF, Arena JP, Liberator PA, Rosenblum CI, Hamelin M, Hreniuk DL, Palyha OC, Anderson J, Paress PS, Diaz C, Chou M, Liu KK, McKee KK, Pong SS, Chaung LY , Elbrecht A, Dashkevicz M, Heavens R, Rigby M, Sirinathsinghji DJS, Dean DC, Melillo DG, Patchett AA, Nargund R, Griffin PR, DeMartino JA, Gupta SK, Schaeffer JM, Smith RG, VanderPloeg LHT. Böyümə hormonunun salınmasında fəaliyyət göstərən hipofiz və hipotalamusdakı bir reseptor. Elm. 1996; 273: 974 –977. [PubMed]
  • Jerlhag E. Ghrelin'nin sistemli tətbiqi şərtli yerə üstünlük verir və accumbal dopamin stimullaşdırır. Addict Biol. 2008; 13: 358 –363. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Andersson M, Svensson L, Engel JA. Ghrelin, siçanlarda mərkəzi xolinergik sistemlər vasitəsi ilə lokomotor fəaliyyətini və adkambal dopamin daşmasını stimullaşdırır: beynin mükafatlandırılmasında iştirakının nəticələri. Addict Biol. 2006; 11: 45 –54. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Douhan A, Svensson L, Engel JA. Grelin tegramal bölgələrə daxil olması lokomotor fəaliyyətini stimullaşdırır və nüvənin böyüdülməsində dopamin hüceyrədənkənar konsentrasiyasını artırır. Addict Biol. 2007; 12: 6 –16. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Svensson L, Engel JA. Alfa-konotoksin MII-ə həssas nikotinik asetilkolin reseptorları, nüvənin böyüdülməsində grelin təsirli lokomotor stimullaşdırılması və dopamin daşmasının vasitəçiliyində iştirak edirlər. Eur Neuropsychopharmacol. 2008; 18: 508 –518. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Landgren S, Salomé N, Heilig M, Moechars D, Datta R, Perrissoud D, Dickson SL, Engel JA. Alkoqol mükafatı üçün mərkəzi qrelin siqnalının tələb edilməsi. Proc Natl Acad Sci ABŞ A. 2009; 106: 11318-11323. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Jewett DC, Cleary J, Levine A.Ş., Schaal DW, Thompson T. Nöropeptid Y, insulin, 2-deoksiglukozun və ərzaq məhviyyətinin ərzaq məhrumiyyətinə təsiri. Psixofarmakologiya. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. MTII qida qəbulu və qida qəbulunda artım azaldır. Horm Behav. 2007a; 52: 612-620. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. NPY Y1 reseptoru qidalanma, qida yığımı və qida qəbulunda artan qarışıqlıq və orucun təsirində iştirak edir. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2007b; 292: R1728 –1737. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Kelley AE, Bakshi VP, Haber SN, Steininger TL, Will MJ, Zhang M. Opioid ventral striatum içərisində dad hedonics modülasyonu. Fiziol Behav. 2002; 76: 365-377. [PubMed]
  • Kojima M, Hosoda H, Date Y, Nakazato M, Matsuo H, Kangawa K. Ghrelin, mədədən böyüdücü hormon ifraz edən peptiddir. Təbiət. 1999; 402: 656 –660. [PubMed]
  • Koob GF. Sui-istifadə dərmanları - anatomiya, farmakologiya və mükafat yollarının funksiyası. Trendlər Pharmacol Sci. 1992; 13: 177 –184. [PubMed]
  • Kuzmin A, Jerlhag E, Liljequist S, Engel J. Subunit selektiv nAC reseptorlarının operant etanol özünü idarəetmə və relaps kimi etanol içkili davranışa təsiri. Psixofarmakologiya. 2009; 203: 99 –108. [PubMed]
  • la Fleur SE, Vanderschuren LJ, Luijendijk MC, Kloeze BM, Tiesjema B, Adan RA. Qida ilə əlaqəli davranış və diyetə bağlı piylənmə arasında qarşılıqlı əlaqə. Int J Obes. 2007; 31: 1286 –1294. [PubMed]
  • Lee B, London ED, Poldrack RA, Farahi J, Nacca A, Monterosso JR, Mumford JA, Bokarius AV, Dahlbom M, Mukherjee J, Bilder RM, Brody AL, Mandelkern MA. Striatal dopamin d2 / d3 reseptorunun mövcudluğu metamfetamin asılılığında azalır və impulsivliyə bağlıdır. J Neurosci. 2009; 29: 14734 –14740. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Livak KJ, Schmittgen TD. Real vaxt kəmiyyət PCR və 2 (-delta delta C (T)) metodundan istifadə edərək nisbi gen ifadə məlumatlarının təhlili. Metodlar. 2001; 25: 402 –408. [PubMed]
  • Nakazato M, Murakami N, Date Y, Kojima M, Matsuo H, Kangawa K, Matsukura S. Qidalanmanın mərkəzi tənzimlənməsində qrelin rolu. Təbiət. 2001; 409: 194 –198. [PubMed]
  • Naleid AM, Grace MK, Cummings DE, Levine AS. Ghrelin, ventral tegramal bölgə və nüvənin böyüdülməsi arasındakı mesolimbik mükafat yolunda qidalanmanı təşviq edir. Peptidlər. 2005; 26: 2274 –2279. [PubMed]
  • Nimitvilai S, Brodie MS. Ventral tegramal bölgənin dopaminergik neyronlarının uzun müddət davam edən dopamin inhibisiyasının ləğvi. J Pharmacol Exp Ther. 2010; 333: 555 –563. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Nogueiras R, Tschöp MH, Zigman JM. Enerji mübadiləsinin mərkəzi sinir sisteminin tənzimlənməsi - leptinə qarşı qrelin. Ann NY Acad Sci. 2008; 1126: 14 –19. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. Stereotaksik koordinatlardakı Rat Beyin. New York: Akademik Mətbuat, New York; 1986.
  • Perello M, Sakata I, Birnbaum S, Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA, Woloszyn J, Yanagisawa M, Lutter M, Zigman JM. Ghrelin, yüksək yağlı pəhrizin tələffüz dəyərini bir orexinə bağlı bir şəkildə artırır. Biol Psixiatriya. 2010; 67: 880 –886. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Pratt WE, Blackstone K. Nucleus asetilkolin və qida qəbulunu artırır: muskarinin tonunun azalması qidalanma azaldır, lakin qidalanma deyil. Behav Brain Res. 2009; 198: 252 –257. [PubMed]
  • Pratt BİZ, Kelley AE. Striatal muscarinic reseptor antagonizmi 24-saatlıq qida qəbulunu azaldır, preproenkefalin gen ifadəsinin azalması ilə əlaqədardır. Eur J Neurosci. 2005; 22: 3229 –3240. [PubMed]
  • Ritter RC, Slusser PG, Stone S. Qlükuretseptorları qidalanma və qan-qlükoza - hindbraindəki yerini tənzimləyir. Elm. 1981; 213: 451 –453. [PubMed]
  • Salamone JD, Steinpreis RE, McCullough LD, Smith P, Grebel D, Mahan K. Haloperidol və nucleus accumbens dopamine tükənməsi qidalanma üçün qolu basdırmaqla yanaşı, yeni ərzaq seçim prosedurunda pulsuz ərzaq istehlakını artırır. Psixofarmakologiya. 1991; 104: 515-521. [PubMed]
  • Salomé N, Haage D, Perrissoud D, Moulin A, Demange L, Egecioglu E, Fehrentz JA, Martinez J, Dickson SL. Siçovullarda roman grelin reseptorunun (GHS-R1A) antaqonistlərinin anoreksigenik və elektrofizyolojik hərəkətləri. Eur J Pharmacol. 2009a; 612: 167-173. [PubMed]
  • Salomé N, Hansson C, Taube M, Gustafsson-Ericson L, Egecioglu E, Karlsson-Lindahl L, Fehrentz JA, Martinez J, Perrissoud D, Dickson SL. Grelin siçovullarda xroniki piylənmə pro-təsiri altında yatan mərkəzi mexanizm haqqında: güclü bir grelin reseptor antaqonistindən istifadə edilən araşdırmalardan yeni məlumatlar. J Neuroendocrinol. 2009b; 21: 777-785. [PubMed]
  • Sibilia V, Lattuada N, Rapetti D, Pagani F, Vincenza D, Bulgarelli I, Locatelli V, Guidobono F, Netti C. Ghrelin siçovullarda iltihab ağrısını inhibə edir: opioid sisteminin iştirakı. Neyrofarmakologiya. 2006; 51: 497 –505. [PubMed]
  • Skibicka KP, Alhadeff AL, Grill HJ. Hindbrain kokain və amfetaminlə tənzimlənən transkript, GLP-1 reseptorları ilə vasitəçilik edilmiş hipotermi təşviq edir. J Neurosci. 2009; 29: 6973 –6981. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Sun Y, Asnicar M, Saha PK, Chan L, Smith RG. Grelin ablasiyası diabetli, lakin ob / ob siçanlarının fenotipini yaxşılaşdırır. Hüceyrə Metab. 2006; 3: 379 –386. [PubMed]
  • Toshinai K, Date Y, Murakami N, Shimada M, Mondal MS, Shimbara T, Guan JL, Wang QP, Funahashi H, Sakurai T, Shioda S, Matsukura S, Kangawa K, Nakazato M. Ghrelin-dən alınan qida qəbulu vasitəçilik edilir orexin yolu. Endokrinoloji. 2003; 144: 1506 –1512. [PubMed]
  • Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Benoit SC. Yağ üçün melanokortin antaqonisti AgRP, lakin (83-132) iştahaaçan reaksiya verən karbohidratı artırır. Farmakol Biokim Behav. 2008; 89: 263 –271. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Wren AM, Seal LJ, Cohen MA, Brynes AE, Frost GS, Murphy KG, Dhillo WS, Ghatei MA, Bloom SR. Ghrelin iştahı artırır və insanlarda qida qəbulunu artırır. J Clin Endokrinol Metab. 2001; 86: 5992 –5995. [PubMed]
  • Wren AM, Kiçik CJ, Ward HL, Murphy KG, Dakin CL, Taheri S, Kennedy AR, Roberts GH, Morgan DGA, Ghatei MA, Bloom SR. Yeni hipotalamik peptid ghrelin qida qəbulunu və böyümə hormonu ifrazını stimullaşdırır. Endokrinoloji. 2000; 141: 4325 –4328. [PubMed]
  • Zheng H, Lenard NR, Shin AC, Berthoud HR. Müasir dünyada iştaha nəzarət və enerji balansının tənzimlənməsi: mükafatlandırılmış beyin əvəzedici siqnalları ləğv edir. Int J Obes. 2009; 33 (Ehtiyat. 2): S8 - S13. [PMC pulsuz məqalə] [PubMed]
  • Zigman JM, Jones JE, Lee CE, Saper CB, Elmquist JK. Siçovul və siçan beynində ghrelin reseptoru mRNA-nın ifadəsi. J Comp Neurol. 2006; 494: 528 –548. [PubMed]