Tracey J. Shors , Krishna Tobón , Gina DiFeo , Demetrius M. Durham & Han Yan M. Chang
Elmi Hesabatlar 6, Məqalə nömrəsi: 18960 (2016)
doi: 10.1038 / srep18960 ·
mücərrəd
Cinsi təcavüz yetkinlikdən gənc yetkinlik yaşına çatan qadınlar kimi öyrənmə ilə bağlı prosesləri poza bilər. Bu təcrübələri laboratoriya tədqiqatlarında modelləşdirmək üçün biz Seksual Conspecific Aggressive Response adlı STAR-ni hazırladıq. Yetkinlik dövründə bir gəmirici qadın 30-min üçün hər gün cinsi təcrübəli yetkin kişilərlə cütləşir. SCAR təcrübəsi zamanı kişi pinlərdən qaçarkən qadın anogenital bölgəsini izləyir.
Stress hormonu kortikosteron konsentrasiyaları təcrübə zamanı və sonra əhəmiyyətli dərəcədə yüksəlmişdir. Üstəlik, yetkinlik yaşına çatmayan erkən yaşlı kişilərə məruz qalan qadınlar birləşməli öyrənmə tapşırıqları ilə məşq zamanı yaxşı çıxış etməmişdir və maternal həssaslaşdırma zamanı ana davranışlarını ifadə etmək üçün yaxşı öyrənmirdilər. Yetkin kişilərə məruz qalan qadınların çoxu 17 gün ərzində nəslinə qayğı göstərməyi öyrənməmişdir. Nəhayət, ana davranışlarını ifadə etməyən qadınlar onların hipokampuslarında yeni yaranmış hüceyrələri daha az saxlayırdılar, halbuki ana davranışlarını ifadə edənlər daha çox hüceyrələri saxlayırdılar, əksəriyyəti həftə ərzində nöronlara fərqlənirdi. Birlikdə bu məlumatlar SCAR-ni cinsi təcavüz və cinsi yetkinlik dövründə qadınların beyin üçün travma potensial nəticələrini öyrənmək üçün faydalı laboratoriya modeli kimi dəstəkləyir.
giriş
Dünyadakı qadınların 30% -i ömür boyu fiziki və ya cinsi zorakılığa məruz qalırlar1və yeniyetmə qızlar ümumi əhalidən təcavüz qurbanı olmaq, tecavüz cəhdləri və ya cinsi hücumdan daha çox ehtimal olunur2. Hər dörd lisey qadınından təxminən biri cinsi təcavüz və zorakılığa məruz qalır, universitetdə isə ən çox birinci və ikinci siniflərdə olur3. Bundan başqa, psixi xəstəliyi olan şəxslər, xüsusilə yoxsul və evsizlər, küçələrdə yaşarkən cinsi təcavüzə və zorakılığa xüsusilə həssasdır4,5. Cinsi təcavüz və sui-istifadənin, yaşa qarşı ən stressli və travmatik həyatlardan biri olduğu zaman və ya harada olmasından asılı olmayaraq, çox vaxt mənfi təsir, narahatlıq, yetkinlikdə öyrənmə və depressiya yaranmasına kömək edir.6,7,8. Qadınlarda cinsi travma və psixi sağlamlıq pozuntuları arasındakı inkar edilə bilən bir əlaqəyə baxmayaraq, cinsi təcavüz və əlaqəli təcrübələrin qadın beyində necə dəyişdiyini çox az bilirik. Bunun səbəblərindən biri qadınlarda davranış və nöron funksiyası üzərində cinsi travmanın nəticələrini öyrənmək üçün müəyyən bir heyvan modelinin olmamasıdır.
Laboratoriya işlərində əksər stres modelləri, gənc qadınların real həyatda yaşadığı streslərin növləri və növlərini mütləq əks etdirməyən, dayanıqlı stressə, üzgüçülük stresinə və ya çirkin şoklara məruz qalır. Buna baxmayaraq, bu və bənzər modellərdən istifadə edərək, qadın gəmiricilərinin qadın kemirgenlərindən laboratoriya streslərinə qarşı çox fərqli cavab verdiyini göstərən çoxsaylı araşdırmalar dərc etdik.9. Məsələn, klassik şərtli anticipatory cavabın birləşməli öyrənilməsi, kişi kemiricilərində laboratoriya stresinə məruz qaldıqdan sonra, qadınlarda isə ciddi şəkildə pozulub10,11. Qadınlarda bu öyrənmə çatışmazlığına hipokampusda sinaptik yivlərin sıxlığında azalma müşayiət olundu. Stres nəticəsində qadınlarda öyrənmə çatışmazlığı bir çox beyin bölgəsində nöronal aktivliyə bağlıdır, hipokampus, amigdala və prefrontal korteksin prelimbik bölgəsi12,13.
Stress öyrənməsinin və laboratoriya heyvanlarında neyron funksiyasının təsirləri stresli həyat hadisələrini yaşayan qadınlarda baş verə biləcək dəyişiklikləri əks etdirir. Qadınların və qadınların bir çox növlərinin cinsi təcavüzə məruz qaldığı bir təcrübədir və qeyd etdiyimiz kimi, bu qadınlar qadınlarda baş verən qəzəbli təcrübə psixi sağlamlıq problemlərinin yaranmasına gətirib çıxara bilər, eləcə də öz qabiliyyətlərini öyrənməyə və konsentrələşdirməyə mane olan keçmişə dair düşüncələri və düşüncələri yayındırır. Zehni xəstəlik inkişaf etdirməyən qadınlar üçün belə cinsi travmatik təcrübə, ehtimal ki, öyrənmə və yaddaşa bağlı nöronal proseslərdə dəyişikliklər edərək həyatlarına davamlı təəssürat yaradır. Cinsi təcavüz əsnasında qadın beyində hərəkətə keçən zəruri və yetərli nöronal və davranış mexanizmlərini tam olaraq anlamaq üçün bir laboratoriya modeli hazırlamalıyıq. Bu ehtiyacları qarşılamaq üçün biz bundan sonra Cinsel Təcavüzkar Aqressiv Cavab (SCAR) kimi tanınan bir heyvan modelini hazırladık. SCAR modelində, biz qadınlara cinsi yetkinlikdən gənc yetkinlik yaşına keçdikcə diqqət yetirdik, çünki bu, qadınların cinsi təcavüzkar yetkin kişilərlə qarşılaşa biləcəyi müddətdir. Whəm də bu dövrü praktiki səbəblərdən seçmişdir; peyda olan qadın siçovulunun tamamilə kopulmasına və / və ya təkrarlanmasına qadir deyil, çünki vajinal kanal tamamilə açıq deyil və ya estrous dövrü tam inkişaf etmir. Buna görə də, yetkin bir kişi ilə qarşılıqlı əlaqə nəslini vermir. Yetkin bir kişi ilə bir roman görüşməsini təqlid etmək üçün bir peyğəmbər qadın Sprague Dawley sıçanı (postnatal gün 35), cinsi-təcrübəli yetkin kişi sıçanına 30-min üçün ev kafeslərindən fərqli bir kontekstdə məruz qaldı. Görüşlər təcavüz və qəbulla bağlı davranışları qiymətləndirmək üçün video qeyd edildi. Yetkin kişilər təcavüzə görə seçilmədilər, əksinə, müəyyən bir koloniyadan cinsi təcrübəli yetişdiricilər olublar. Təcrübələr əsnasında gənc qadın, iki dəfə fərqli yetkin kişilərə məruz qaldı.
Aşağıdakı təcrübələrdə, qarşılıqlı təsirlər zamanı meydana gələn davranışları və bu qarşılıqlı təsirlərin hesabatlarını təsvir edirik. Bu ilkin araşdırmalar üçün biz fizioloji stressin reaksiyasına diqqət yetirdik, çünki təcrübə qadın gəmirici üçün stresli olduğunu müəyyən etmək vacibdir. Stress hormonunun konsentrasiyaları, kortikosteron yüksəkliyi hipotalamik-hipofiz adrenal (HPA) ekssinin aktivləşdirilməsini, darbe növlərində əsas stress təzyiqini göstərir, çünki ölçülür. Daha sonra SCAR təcrübəsinin öyrənməyə təsirlərini araşdırdıq. Standart laboratoriya streslərinə məruz qalma, yuxarıda göstərildiyi kimi, adult qadınlarda bu cür təlimləri pozduğundan, klassik vəziyyətdə olan eyeblink cavabını seçmişik. Biz də bu vəzifəni seçdik, çünki bu cür təhsil eyni zamanda bir yetkin kişiyə məruz qalmaqla pozulur14. Buna görə də, SCAR təcrübəsi bu cavabı öyrənməyə mane olsaydı, kişilərlə sosial qarşılıqlı əlaqə daha tipik bir laboratoriya stressorasına (üzgüçülük stress, quyruq stimullaşdırılması) oxşar təsəvvürlərə səbəb olur və nəticədə yetkinlikdən yetkinlik yaşına çatdıqda təsir edə bilər . Əlavə bir təcrübə qrupunda, qadınlarda ana davranışının ifadə olunması ilə əlaqədar sosial qarşılıqlı təsirlərin nəticələri araşdırıldı. Maternal qayğı davranışlarının inkişafı və "öyrənilməsi", qadınların əldə etdiyi ən vacib funksiyaları deyil, əksəriyyəti bəziləridir. Yenə də hədəf, qadınlar üçün mənalı olan davranışlara birbaşa aid olan potensial nəticələri qiymətləndirmək idi, həm də növlərin əksəriyyətinin təsirinə məruz qaldı.
Son bir asılı tədbir olaraq, biz hipokampusda SCAR təcrübəsinin neyrogenezə təsirinin potensial təsirini qiymətləndirdik. Hipokampus həyat boyu yeni neyronlar yaradır - hər gün minlərlə, yetkinlik dövründə təxminən iki dəfə çoxdur15. Bu yeni neyronların bir çoxu yeni bir öyrənmə təcrübəsi olmadığı təqdirdə bir neçə həftə ərzində yaranır16,17. Yeni neyronları canlı saxlamağa kömək edən tədqiqat növləri kəşfiyyat, kosmik naviqasiya öyrənmə və motor bacarıqlarını öyrənməyə daxildir17,18,19. Yetkinlik dövründə hüceyrə sağlığında öyrənmənin təsirləri yetkinlik yaşına çatmış olanlara bənzəyir, amma çox daha çox hüceyrə yaradılıb, beynin bütövlüyü üçün öyrənmə (və ya öyrənmə) nəticəsi xüsusilə dərindir. Hazırkı təcrübələrdə biz SCAR-in maternal davranışının təsiri üzərində təsirlərini hipokampusa yeni yaranmış hüceyrələrin sağlığını pozacaqlarını fərz etdik. Məqsəd, qadın beyində son nəticədə yetkin kişi ilə təkrarlanan qarşılaşmadan təsirlənmiş bir nəticənin ölçülməsi idi.
metodika
Onlayn üsullar
Kişi və qadın Sprague-Dawley siçovulları Rutgers Universitetində Psixologiya Departamentində yetişdirildi. Doğulduqdan iyirmi səkkiz gün sonra, heyvanlar yüngüldü və 2-3 kişilər və 2-4 qadınlar standart plastik shoebox üslub kafesləri (44.5 sm uzun 21.59 sm geniş 23.32 sm yüksək) ilə qoşunlarda yerləşdirildi. Qadında ana təhsilində tək qaldıq. Heyvanlara qida və suya icazə verildi ad libitum və 12-da saxlanılır: 12 hr yüngül-qaranlıq dövrü; işıq dövrü 7am-da başladı və 7pm-da başa çatdı. Bütün əməliyyat və eksperimental manipulyasiyalar gündəlik dövrünün işıq hissəsində həyata keçirilmişdir. Təcrübələr insan sağlamlığı və laboratoriya heyvanlarının istifadəsi və laboratoriyalı heyvanların istifadəsi və istifadəsi üzrə Təlimatla müəyyən edilmiş qaydalara və qaydalara tam uyğun şəkildə aparılmışdır. Rutgers Universiteti Heyvan Baxımı və Təsərrüfatı Komitəsi bütün prosedurları təsdiqlədi.
Təcrübə 1: Tərəzi zamanı hansı davranışlar ifadə olunur?
SCAR pozuqluqları peyvəndli qadın post-doğuş günü (PND) 35 olduğunda başladı, erkək yetiştiricileri isə təxminən 120-160 gün yaşda fərqləndilər. Bu yaş aralığındaki qadınlar 120-220-g arasında ağırlığa düşdükdə isə 400-700-g arasında çəki çəkən kişilər. Eksperimental manipulyasiya zamanı, 10-min üçün cinsi təcrübəli bir kişi sıçanı olan bir yetişkin qadın sıçanı (n = 30) yeni bir kafese yerləşdirildi. Eşleme zamanı davranışlar bir pubiscent qadın sıçanı (n = 10) və bir yetkin qadın sıçanı arasında oxşar birləşmə zamanı davranışlarla müqayisə edilmişdir. Fərdi fərdlərdən asılı olmayaraq bütün şərtlər eyni idi. Ekspozisiya hər gün səkkiz gün ard-arda baş verib. Çiçəkli qadın, hər gün bir-birinə qarışan iki yetkindən birinə məruz qaldı. Bütün qarşılıqlı videolar qeyd edildi və davranışlar iki müstəqil sınaqçı tərəfindən atıldı.
Çox az cinsi intromussiya meydana gəldi və buna görə də burada məlumatlar təqdim edilmir. 1) anogenital izləmə, 2) pinləri və 3) qaçışları kimi üç davranışı nəzərdən keçirdik və təhlil etdik. Anogenital bir izləmə hadisəsi zamanı kişi, qəfəsin ətrafında qaçarkən, qadının anogenital bölgəsini iyləyərkən izlədi. Kişinin burnu, qadının anogenital bölgəsinə davamlı bir müddət (> 1 saniyə) toxunduqda və ya az qala toxunduğunda, bu bir izləmə davranışı hesab etdik. Bir sancaq əsnasında, yetkin kişi, ümumiyyətlə üstündə oturaraq ya da arxasına çevirərək pəncələrindən istifadə edərək qadını təsirli bir şəkildə cilovlayardı. Qaçış davranışı əsnasında qadın arxa pəncələrində oturaraq qəfəsin üstünə uzandı, sanki qaçmağa çalışırdı. Bu üç davranış, 30 dəqiqəlik fasilələrlə 10 dəqiqəlik qarşılaşmada sayıldı. Qeyd edildiyi kimi, bu davranışlar, yetkin bir qadınla (qadın / qadın) cütləşdikdə, bir yetkin qadın tərəfindən göstərilən eyni davranışlarla müqayisə edildi.
Nəticələr 1 sınaq
İlk SCAR məruz qalması zamanı adolesan qadın (qadın / qadın) qrupu ilə əlaqələndirilmiş bir yetkin qadın sıçan tərəfindən ifadə edilən oxşar davranışlarla müqayisədə, yetkin kişi (erotik kişi / pubescent qadın, SCAR) tərəfindən ifadə olunan anogenital izləmə sayılarıt(18) = 6.07; p <0.001; Şəkil 1A). Yetkin qadınla ifadə edilən qaçış davranışlarının sayı, yetkin kişi ilə olan qarşılıqlı təsir zamanı sayda daha çox idit(18) = 6.94; p <0.001; Şəkil 1B). Pis nömrəli peyğəmbər qadın yetkin bir kişi ilə qarşılıqlı olduqda ədədlər daha böyükdürt(18) = 5.77, p <0.001; Şəkil 1C). Həmin davranışlar 8 zamanı təhlil edilmişdirth conspecific exposures gün ardışması. İlk məruz qaldıqda, anogenital izlər sayı artdı (t(18) = 10.51; p <0.001; Şəkil 1D), qaçış davranışları olduğu kimi (t(18) = 6.09; p <0.001; Şəkil 1E) və sancaqlar (t(18) = 5.57; p <0.001; Şəkil 1F). Bu davranışların sayı, ilk və səkkizinci təsirlər arasında dəyişmədi (p> 0.05). Bu nəticələr qeyd olunan davranışların iki özünəməxsusluq arasındakı davamlı sosial qarşılıqlı təsir ilə vərdiş etmədiyini göstərir.
Şəkil 1: SCAR pozuntularının davranış tədbirləri.
(A) Birinci SCAR məruz qalması zamanı anogenital sniffs sayı digər qadın (qadın / qadın) ilə qoşulan qadınlara nisbətən SCAR (böyüklər kişi / pubescent qadın) qrupunda əhəmiyyətli dərəcədə böyük idi. (B) İlk məruz qaldıqda qadın yetkin bir qadınla əlaqələndirildikdən sonra daha çox kişi ilə əlaqələndikdə daha çox sayıda qaçış davranışını etdi. (C) Yetkin kişi kişi də qadın yetkin qadından daha çox dəfə pillə vurdu. (D-F) Bu davranış nəticələri səkkizinci ifşa zamanı oxşar idi. SCAR qrupu daha çox anogenital qoxu aldı, daha çox qaçış davranışları və sancaqlar bir yetişkin adult bir qadınla eşleştirildiğinde ifadə edilən oxşar davranışlarla müqayisədə yayıldı.
Təcrübə 2: SCAR pozulması kortikosteronu artırırmı?
İkinci bir sınaqda, SCAR pozuqluğunun stres hormonu kortikosteron konsentrasiyalarına iki dəfə baxdıqları təsirlərini təhlil etdik. Birincisi, yetkin bir qadınla qarşılaşdıqdan sonra böyüklərdən birinə məruz qaldıqdan sonra pubnensal qadın 30-min daxilində sərbəst buraxılan kortikosteron miqdarını müqayisə etdik. Xəndək qadınlar 6-min üçün bir yetkin kişi damazlıq (n = 5) ya da bir yetkin qadın (n = 60, PND 120-30) məruz qaldı və tək məruzdan sonra magmatik qan 30-min sonra toplandı. Heyvanlara ölümcül bir pentobarbital intraperitoneal inyeksiya verildi və gövdə qan toplandı. Qan heparin borularına (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ) köçürülüb, 2500-RPM-də 20-min üçün santrifüj edilmiş və -20 ° C-də saxlanılır. Corticosterone immunoassay istehsalçının protokolu (Corticosterone EIA Kit, Arbor Assays, Ann Arbor, MI) əsasında həyata keçirilmişdir. Fərqli qruplarda bir peyğəmbər qadın 30-min (n = 8) üçün yetkin kişilərə məruz qalmış və ya 30-min (n = 7) üçün yeni bir qəfədə tək yerləşdirilmişdir. Yetkin kişilərə məruz qalan sürünən qadınların qanında kortikosteronun konsentrasiyası bir kemirgen üçün yumşaq stresli yeni kontekstə cavab olaraq azad olunan məbləğlə müqayisə olundu. Qarşılıqlı təsirlərin aradan qaldırılmasından iki saat sonra, qadınlara yuxarıdakı kimi öldürücü bir pentobarbital doza verildi və kortikosteron konsentrasiyalarının radioimmunoassay üçün qan toplandı.
Nəticələr 2 sınaq
Stress təcrübəsi stressli bir təcrübə zamanı adrenal bezlərdən sərbəst buraxılan stress hormonu kortikosteronun yüksək konsentrasiyalarında göstərildiyi kimi, qadın üçün stresli idi. Yeniyetmənin qadın 30-dəki konsentrasiyaları ilk dəfə böyük bir kişiyə məruz qaldıqdan sonra yeni bir şəraitdə yetkin qadınla yerləşdirildikdən sonra sərbəst buraxılan konsentrasiyalarla müqayisədə yüksəlmişdir (t(13) = 2.59; p <0.05; Şəkil 2A). Ayrı bir sınaqda, 30-min üçün yetkin kişilərə məruz qalan peyvəndli qadınlarda kortikosteron konsentrasiyaları, iki saat sonra, 30-min üçün yeni kontekstdə tək qalan və cavan qayığa dönmüş bir peyvəndli qadındakı konsentrasiyalara nisbətən yüksəlmişdir (t(9) = 3.07, p <0.05; Şəkil 2B). Bu məlumatlar əks sekslə sosial qarşılıqlı əlaqənin eyni cins ilə qarşılıqlı və stressizdir, ən azından, palıd qadın gəmirici halında yeni məzmunda tək qalmaqdan daha stresslidir.
Şəkil 2: SCAR stress hormonlarını artırır və öyrənməni pozur.
(A) Kortikosteron konsentrasiyaları, yetkin qadınla əlaqələndirilmiş peyvəndli qadınlarda konsentrasiyalara nisbətən, erkən yaşlı kişilərə məruz qaldıqdan sonra otuz dəqiqə ərzində pubescent qadınlarda əhəmiyyətli dərəcədə yüksəlmişdir. (B) İki saat sonra yeni meymunda yerləşdirilən peyvəndli qadınlarda konsentrasiyaları ilə müqayisədə, yetkinlik yaşına çatmayan kişilərlə əlaqələndirilmiş konsentrasiyalar yüksəlmişdir. (C) Klassik olaraq şərtlənən eyeblink cavabını öyrənmək, yetkin kişilərə məruz qalan qadınlarda qiymətləndirilmişdir. Yetkinlik yaşına çatmayan kişilərə (SCAR) məruz qalmayan qadınlarla müqayisədə, qadınlarda izləmə kremi zamanı performans azalmışdır. Noktalı xətt, şərti cavabın uğurla öyrənilməsinin ölçüsü olaraq yaradılan 60% öyrənmə meyarını göstərir.
Təcrübə 3: SCAR peyvəndli qadınlarda birləşməli öyrənməni pozurmu?
Üçüncü bir sınaqda biz SCAR-ın təsirlərini təsadüfi prosedurdan istifadə edərək klassik vəziyyətdə olan eyeblink cavabını öyrənməyə təsəvvür etdik. Göz kapağından elektromiyografi (EMG) fəaliyyəti, kas vasitəsilə eyeblink aktivliyini qiymətləndirmək üçün istifadə edilmişdir. Elektrodlar göz qapaqları ətrafında implantasiya edilmiş, şərtsiz bir stimul (ABŞ). Əməliyyat zamanı kemirgenlər bir izofluran inhalantı ilə tamamlanmış olan natrium pentobarbital (35mq / kg) ilə peyvənd edildi. İki cüt elektrod (izolyasiya edilmiş paslanmayan polad tel 0.005 in) bir baş mərhələsinə əlavə edildi və yuxarı göz qapaqlarından (orbicularis occuli muscle) implantasiya edildi. Tel ətrafındakı izolyasiya əzələ ilə əlaqə qurmaq üçün hər bir elektrotun bir hissəsindən çıxarıldı. Baş mərhələdə dörd vida ilə yerləşdirilib diş akril ilə təmin edildi. Əməliyyatdan sonra siçovulların anesteziyadan qurtarana qədər isti və gözləmə altında saxlanıldı. Sıçanlar, 32mg / kg dozada əməliyyatdan sonra ağızdan verilmiş və təlimdən əvvəl ən az 112 gün bərpa etməyə imkan verdikdən sonra uşaqlar üçün Acetaminophen (kons. 2mg / ml) verilmişdir.
PND 35-da, hər gün 6-min üçün bir cinsi təcrübəli kişilərə məruz qalmış və ya 30-min üçün kafedə tək başına yerləşdirilən (n = 6) qadın peyvəndi sıçanı (n = 30) məruz qalmışdır. Beşinci SCAR pozuntusundan sonra, yuxarıda təsvir edildiyi kimi, eyeblink elektrod əməliyyatı həyata keçirildi. İki gün bərpa etdikdən sonra qadınlar hər gün bir yetkin kişiyə (SCAR) məruz qaldılar və ya kişi olmadan bir kafesdə tək qaldılar (No SCAR). Səkkizinci gündə hər bir qadın 30-min üçün kişiyə məruz qaldı və sonra SCAR məruz qaldı və kondisioner otağına köçürdü. Elektrodlar qeyd avadanlıqlarına qoşuldu və bir saatlıq təlim cihazına uyğunlaşdırıldı. Növbəti gün, hər bir qadın əvvəllər olduğu kimi yetkinlik yaşına çatmayan kişilərə məruz qaldı və sonra 200 sınaqdan keçmə prosesi ilə məşq etdi. Bu prosedur dördüncü gündür, təlimlərin ümumi 800 sınaqları üçün təkrar edilmişdir.
Heyvanın beyaz səs-küylü bir stimul (CS) və periorbital qapaq stimullaşdırılması şərti stimulus (US) arasında temporal əlaqələri öyrənmək üçün təlim zamanı təlim bir kondisioner proseduru istifadə edilmişdir. Ağ səs 80 ms xətti ilə 250 ms izlənmə aralığından ayrılmış və 500 mA üçün 0.5 mA-da göz qapağının stimullaşdırılması ilə bitən 100 ds üçün 10 db-də təslim edilmişdir. EMG-nin fəaliyyəti hər bir sınaqda (ABŞ istisna olmaqla) adaptiv eyeblink cavablarının (iz aralığında meydana gələn) faizi qiymətləndirmək və təhlil etmək üçün qeydə alınıb. CS-ə cavab olaraq Eyeblinks, əsas EMG-dən cavab verən qüvvə və müddətdə əhəmiyyətli dəyişikliklər kimi qiymətləndirilmişdir. EMG fəaliyyətinin 0.3-ms, 500-mV-dən çox olduğu və əsas prestimul EMG cavabından ən azı üç standart sapma (SD) olduğu təqdirdə, bir eyeblink sayıldı. 200-ms izleme intervalı zamanı və ABŞ-dan əvvəl baş verən cavablar şərti cavablar (CR) hesab edilmişdir. Qeyd edildiyi kimi, bütün sıçanlar 4 ardıcıl gün üçün hər gün 60 sınaqdan keçirildi. Ən azı XNUMX% -dən cəmlənən heyvanlar dörd gün ərzində hər bir iclasda cavab verməklə cavablandırılmışdır.
Nəticələr 3 sınaq
Təkrarlanan tədbirlər ANOVA, səkkiz ədəd 100 sınaqdan asılı tədbirlər nəticəsində yerinə yetirilmişdir. Gözlənildiyi kimi, təlimin əsas təsiri çox əhəmiyyətli idi [F (7,70) = 7.89, p <0.001], CR sayının bloklar üzərində artdığını və bu səbəblə öyrənmə meydana gəldiyini ifadə etdi. İlk 100 sınaq zamanı, öyrənmənin əksəriyyəti baş verdikdə, yetkin kişiyə məruz qalan nahiyəli qadınlar, yetkin kişiyə məruz qalmayan qadınlara nisbətən daha az CR yaydı [F (4,40) = 3.28; p <0.05]. Yetkin kişiyə (SCAR) məruz qalan qadınlar, dörd gün ərzində 100 sınaq blokları arasında daha az CR yayırdılar [F (1,10 = 5.78; p <0.05; Şəkil 2C). Bu nəticələr, hər iki qrupun da öyrəndiyini, ancaq yetkin kişiyə məruz qalan qadınların daha az vaxtında təyin olunmuş CR-lər yaratdığını göstərir (yəni iz aralığında). CR-lərin faizi son gündə nə artdı (p = 0.11), bu da öyrənmədə bir yayladan xəbər verir; hələ yetkin kişiyə məruz qalan qadınlar və məruz qalmayan qadınlar arasında performanslar fərqli olaraq qaldı (p <0.001). Kondisioner məlumatları,% 60 cavab verən təsadüfi bir öyrənmə meyarı istifadə edilərək daha da təhlil edildi. Bu kriteriya nöqtə xətti kimi göstərilir Şəkil 2C 60% şərtli cavabı göstərmək üçün. Kontrol qrupundakı bütün qadınlar (No SCAR; 6 / 6) 60% 800 testi ilə cavab verən bir öyrənmə meyarına çatdı, SCAR qrupunda yalnız 50% qadınlar (3 / 6) etdi.
4 eksperimenti: SCAR maternal həssaslığını pozurmu?
Yetkin bakirə qadınlar yenidoğan ağciyərlərinin təsirinə cavab olaraq zamanla maternal davranışlarını ifadə edə bilərlər14,20 maternal həssaslıq kimi tanınan bir proses vasitəsilə. Eyni davranışlar, qadının yetkinlik yaşına çatmamış qadınları tərəfindən göstərildiyi kimi göstərildi Şəkil 3A. SCAR pozuntularının ana həssaslaşdırma səviyyəsini azaldırmadığını müəyyən etmək üçün hər peyvəndi virgin qadın sıçanı (n = 8) PND21-dən başlayaraq ardıcıl günlər üçün xNUMX ardıcıl gün üçün (SCAR) məruz qalmışdır. Bir nəzarət olaraq, bir peyvənzər qadın qrupu (n = 35) eyni cədvəl üzrə boş kafesdə tək yerləşdirilib. SCAR pozuntularının beşinci günündə, PND8, yenidoğulmuş postnatal pups (PND 39-1) 10-h üçün peyda olan qadınların ev qəfəsinə yerləşdirildi. Quşlar qeyri-eksperimental bəndlərdən doğulub və buna görə hər bir 24 saata qidalanma və qayğı üçün öz orijinal barajlarına qayıdıb, 24-h hədlərini laktasiya bəndləri ilə xərcləyir. Yenidoğan pup sağlamlığı ədalətli idi; körpələr öz orijinal barajı ilə laqeyd qaldılarsa, işdən çıxarıldılar. Maternal davranış müşahidələri üçün ev qəfəsinin qarşı tərəfində qəfəslər yerləşdirilib, yerləşdirildikdən sonra ilk 24 dəqiqə ərzində ana davranışlar müşahidə olundu və qeyd edildi. Qeydə alınan davranışlar 10 idi) yalama / kedicikler, 1) ya bir və ya iki pups və 2) qruplarının alınması. Maternal davranışların tam əksəriyyəti iki gün ardıcıl olaraq ifadə edildikdən sonra, qadın maternal həssaslaşdırma olduğunu ifadə etdi.
Şəkil 3: SCAR maternal davranışı və həssaslığı pozur.
(A) Yetkinlik yaşına çatmayan kişilərin ergenlik dövründə (SCAR) məruz qaldıqları nikahlı qadınlar 17 gün ərzində ana davranışlarını ifadə etmək üçün daha az ehtimal olunurdular. Bu qadınlardan yalnız üçü (3 / 8) ana davranışlarını ifadə edərkən, yetkin kişilərə məruz qalmamış bütün bakirə qadınlar (8 / 8) idi. (B) 3 potensial ümumi hesabı üçün hər gün maternal davranışların sayıları (yalama, alma və pup qruplaşdırma) edilmişdir. Yetkinlik yaşına çatmayan kişilərə (SCAR) məruz qalan qadınlar bu davranışların daha az olduğunu, qadınların yetkinlik yaşına çatmamış kişilərə (SCAR) məruz qalmadığından daha çox ifadə etdilər.
Nəticələr 4 sınaq
Aşağıdakı ana davranışları təhlil edildi: yalama, yavruların alınması və qruplaşdırılması. Potensial ümumi 3 bal üçün ana davranışlarının sayı hər gün hesablanmışdır. Kuklalara və SCAR vəziyyətinə məruz qalma günləri arasında dəyişkənliyin təkrar ölçülən təhlili, ana davranışında əhəmiyyətli bir artım olduğunu göstərmişdir [F (16) = 8.39; p <0.05; Şəkil 3B] və SCAR ifşaları ilə qarşılıqlı təsir [F (1,16) = 2.18; p <0.01]. Qrup davranışları arasındakı əhəmiyyətli fərqlər, yavru maruz qaldıqdan sonra yeddi gün ərzində ortaya çıxdı (p <0.05). SCAR qadınlarının əksəriyyəti üç ana davranışını ifadə etmədi, kişilərə məruz qalmayan qadınlar (8/8) ümumiyyətlə 5-7 gün ərzində ana davranışlarını ifadə etdilər (XNUMX/XNUMX)Şəkil 3A).
5 sınağı. SCAR hipokampusda yeni yaranan hüceyrələri pozurmu?
Birincisi, bir SCAR məruz qalmasının ilk iki saatı içində diş həkərində proliferasiya edən hüceyrələrin sayına SCAR pozuntularının potensial təsirini qiymətləndirdik. Qadınlar bir 5-min SCAR məruz qalmasından dərhal əvvəl 2-bromo-200-deoksiuridin (BrdU; 30 mg / kq) bir intraperitoneal enjeksiyonla enjekte edildi və BrdU enjeksiyasından (n = 2) sonra 5 saat qurban verdi. Cell ədədləri BrdU ilə enjekte edilmiş və iki saat sonra qurtulmuş bir qrupla müqayisə edildi (n = 6). İkincisi, bir həftə ərzində böyüklər kişilərə məruz qaldıqdan sonra, SCD pozğunluqlarının BrdU ilə etiketlənmiş hüceyrələrin sayına potensial təsirini qiymətləndirdik. Bunu etmək üçün PND8-dan (n = 35) başlayan 7 ardıcıl günlər üçün hər gün peyvəndli bir qrup qadın yetkin kişilərə məruz qaldı. 6 əvvəli BrdU ilə enjekte edildith məruz qalma (PND 40) və enjeksiyadan bir həftə sonra qurban verildi. Bir qrup qadın PND 4-da bir BrdU enjeksiyonu verildikdən sonra bir həftə sonra qurbanı olan ev kafeslərində (n = 40) tək qaldılar. SCAR-ın hüceyrə sağlığına təsirini araşdırmaq üçün BrdU ilə bir qrup heyvan bir dəfə enjekte edildi və bir BrdU enjeksiyasından (No SCAR; n = 7) iyirmi bir gün sonra qurban verildi. BrdU ilə etiketlənmiş hüceyrələrin sayı, BrdU ilə enjekte edilmiş və sonra 5-min üçün hər gün 30 gün üçün PND21-dən başlayaraq, hər gün üçün məruz qalmış bir qrupdakı nömrələrlə müqayisə edildi (SCAR; n = 35).
İmmünohistokimya BrdU etiketli hüceyrələrin sayını təhlil etmək üçün aparılmışdır. Heyvanlar 100 M fosfat tamponunda 4% paraformaldehid ilə transcardially perfused olan natrium pentobarbital (0.1 mg / kq, Butler Schein, İndianapolis, IN, ABŞ) ilə dərindən anesteziya edilmişdir. 4-4-h üçün 24% paraformaldehiddə 48-40-h üçün toxumanın strukturunu qorumaq üçün, fosfat tamponlu salin (PBS) köçürülməzdən əvvəl brains çıxarılmış və post-sabit edilmişdir. Bir yarımkürədə dentat girusun bütün rostral-caudal dərəcəsi vasitəsilə XNUMXμm koronal bölmələr kəsmək üçün bir vibratome istifadə edilmişdir. Bu, laboratoriyamızın standart praktikasıdır, çünki sol və sağ dentat girus arasında yayılmanın heç bir yarımçıq fərqi yoxdur21,22. Hər on ikincilik dilim superfrost şüşə slaydına (Fisher Scientific, Suwane, GA, ABŞ) monte edilmiş və quruya qurudulmuşdur. Bir dəfə quru, toxum daha əvvəl təsvir edilmiş BrdU-nun daxil olduğu hüceyrələri görselleştirmek üçün standart peroksidaz metodları istifadə edərək ləkələnmişdir22. Toxuma, 0.1 M PBS ilə yuyulur, 6.0-min üçün tripsində inkubasiya edilir və 0.1N HCl-də 10-min üçün PBS ilə durulayır ilə tənzimlənir. Doku, birincil siçan anti-BrdU (2: 30, Becton-Dickinson, Franklin Lakes, NJ, ABŞ) və 1% Tween-200 (Vector Laboratories, Burlingame, CA, ABŞ) bir gecədə inkübe edilmişdir. Ertesi gün, doku 0.5-min üçün biotinile edilmiş anti-fare antikorunda (20: 1, Vector Laboratories) yıkandı ve inkübe edildi ve 200 üçün avidin-biotin-horseradish peroksidaz (60: 1, Vectastain ABC Kit, Vector Laboratories) -min. Doku dörd dəqiqə boyunca diaminobenzidin (DAB SigmaFrost tabletləri, Sigma Aldrich) yerləşdirilib, yuyundu, 100% cresyl bənövşəyi ilə qarışdırılıb, qurudulmuş, təmizləndi və örtüklü Perm yapışqanlı (Fisher Scientific) ilə örtülüb.
Hər slaydı kodlaşdıraraq, kəmiyyət mikroskopik analiz eksperimental vəziyyətə görə kor olunurdu. BrdU-pozitiv hüceyrələrin ümumi sayının qiymətləndirilməsi təsnif edilmiş qeyri-obyektiv stereoloji protokolu ilə müəyyən edilmişdir23,24. Nikon Eclipse 1000 i işıq mikroskopunda 80X-da əl ilə hər bir dilimdə (granül hüceyrə qatarı və hilus) dentat girusda BrdU pozitiv hüceyrələrin sayı sayılmışdır. Hipokampusun rostral kaudal boyu boyunca on dilim slaydlarda toplanmış və sayı hər iki yarımkürədə dentat girusda BrdU pozitiv hüceyrələrin ümumi sayını qiymətləndirmək üçün 24 ilə çarpılmışdır.
Maternal "öyrənmə" ölümündən yeni neyronları və / və ya SCAR onların sağ qalmasına mane olub olmadığını qiymətləndirmək üçün, yetkin kişi (n = 7) ya da yox (No SCAR; n = 7) əvvəlki sınaq BrdU ilə bir dəfə enjekte edilmiş və hüceyrə nömrələri pups (SCAR, n = 5, No SCAR, n = 7) məruz qalmamış əlavə qruplar ilə müqayisə edilmişdir. Qeyd edildiyi kimi, bir həftə sonra, yeni hüceyrələrin çoxu proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümünə məruz qaldıqca, nəsillərlə maternal həssaslaşma başlamışdır. Qadınlar hər axşam nəsildən keçirildilər və 4 Eksperimentində təsvir olunduğu kimi, onların ana davranışları qeydə alındı və təhlil edildi. BrdU enjeksiyasından üç həftə sonra dördüncü qadın qrupuna ölümcül dozda natrium pentobarbital verildi və beyin immunohistokimya və mikroskopik analizlər üçün hazırlandı. BrdU enjeksiyonlarının təbiətinə görə, bu qruplardakı heyvanların sayı 4 Eksperimentində təqdim edilən məlumatlardan daha kiçik idi. Bundan əlavə, biz dorsal və ventral hipokampus arasında hüceyrə nömrələrində potensial fərqləri təhlil etdik. Bunu etmək üçün, ventral bölgədəki hüceyrələrin etiketli hüceyrələri, interaural koordinatlara görə dorsal olanlarla müqayisə olundu. Dorsal hipokampus rostral hipokampusdan (interaureal 3.70 mmdən 6.88 mm-ə) olan dilimlər ilə əlaqələndirilmişdir, ventral isə kaudal hipokampusdan (interaureal 2.28 mmdən 3.70 mm-ə qədər) dilimlər ilə əlaqələndirilmişdir25.
Nəticələr 5 sınaq
BrdU etiketli hüceyrələrin sayı, yetkin kişiyə məruz qalan və 2 saat və ya 1 həftə sonra qurban verilən qadınlar arasında fərqlənmədi (p> 0.05; Şəkil 4A, B). Bu tədbirlərdən heç birində (0.05 saat, 2 həftə, 1 həftə) dorsal və ventral hipokampi arasında hər hansı bir fərq müşahidə etmədik (p> 3). Ayrıca, yalnız yetkin kişiyə məruz qalma sağ qalan BrdU etiketli hüceyrələrin sayını əhəmiyyətli dərəcədə təsir etməmişdir (p = 0.94; Şəkil 4C və Şəkil 5A). Lakin maternal həssaslaşdırma zamanı qızartılara məruz qalan qadınlarda BrdU-etiketli hüceyrələrin sayı artmışdır (F(1,25) = 10.03; p <0.005; Şəkil 5A). Bu məlumatlar, yavruların qəfəsdəki varlığının hipokampusun dentat girusundakı yeni yaradılan nöronların sağ qalmasını artırmaq üçün kifayət edə biləcəyini göstərir. Pupa ilə SCAR ifşası arasındakı qarşılıqlı təsir təxminən əhəmiyyətli idi [F (1,22) = 3.66; p = 0.068). Planlaşdırılmış müqayisələr göstərir ki, yetkin kişiyə məruz qalmayan, lakin bala məruz qalan dişilərdə, dentat girus qranul hüceyrə qatında BrdU etiketli hüceyrələr itlərə və ya yetkin kişilərə məruz qalmayan qadınlara nisbətən daha çoxdur (p = 0.002). Bunun əksinə olaraq, yetkin kişiyə məruz qalan və yavrulara məruz qalan qadınlarda, itlərə məruz qalmayanlardan daha çox BrdU etiketli hüceyrə yox idi (p = 0.41). 3 həftədə hipokampusta qalan hüceyrələrin sayı ilə yavruların iştirakı ilə ifadə edilən ana davranışlarının sayı arasında əhəmiyyətli bir əlaqə var idi (r = 0.55; p <0.05). Sensitizasiya zamanı ana davranışını ifadə etmək ehtimalı daha az olan qadınlar yeni hüceyrələrin daha az hissəsini saxladılar. Buna görə də, yara izinin hipokampustakı yeni hüceyrələrin sağ qalmasına potensial təsiri, mütləq SCAR təcrübəsinin stresinin vasitəçiliyi ilə deyil, yeni yaradılan hüceyrələrin sağ qalma qabiliyyətini artırdığı görünən ana davranışının öyrənilməsini azaltmasıdır. . Bu məlumatlar iki səbəbə görə yenidir: birincisi, nəsillərə məruz qalmanın hipokampustakı yeni yaradılan hüceyrələrin sağ qalmasını artırmaq üçün kifayət edə biləcəyini göstərir. İkincisi, məlumatlar SCAR təcrübəsinin ana həkimi olmağı öyrənmə çatışmazlığı ilə qadın hipokampusunda yeni yaranan hüceyrələrin sağ qalmasını azaldığını göstərir.
Şəkil 4: SCAR hipokampusda yeni yaranan hüceyrələrin yayılmasını azaltmadı.
(A) SCAR pozuntuları iki saat sonra yeni yaranan (BrdU etiketli) hüceyrələrin sayını dəyişdirməmişdir. (B) BrdU etiketli hüceyrələrin sayı BrdU enjeksiyasından bir həftə sonra artıb, lakin SCAR pozuqluqları hüceyrələrin sayını dəyişdirməmişdir. (C) Üç həftə sonra, BrdU-etiketli hüceyrələrin çoxu artıq mövcud olmadı və buna görə də, ehtimal ki, öldü. (D,E400X və 1000X-dakı BrdU-etiketli hüceyrələrin nümayəndəsi fotomikrograflar, bir dəfəyə meylli dişin dentat girusunda (granül hüceyrə qatında).
Şəkil 5: Dentate girusda yeni yaranmış hüceyrələrin sağ qalması ilə bağlı maternal həssaslaşdırma və qarınların saxlanması.
(A) BrdU ilə enjekte edilmiş və maternal həssaslaşdırma prosesinə məruz qalan narkomanlar BrdU-etiketli hüceyrələrin daha çoxunu cücərtilərə məruz qalmayan peyvənd edilmiş qadınlardan daha çox saxlayırdılar. (B) Yetkin kişilərə məruz qalmış qadınlar ana davranışlarını ifadə etmək üçün daha az ehtimalı olan və daha az BrdU-etiketli hüceyrələri qoruyurdular. Bu hüceyrələrin böyük əksəriyyəti nöronlara çatdıqdan sonra, bu məlumatlar ananın olmasını öyrənmək qadın hipokampusunda yeni yaranan neyronların sağ qalmasına müsbət aiddir.
Müzakirə
Cinsi təcavüz və şiddət Amerika Birləşmiş Ştatları da daxil olmaqla bir çox mədəniyyətdə qadınlar və kişilər üçün problemdir. Təcrübə yetkinlik yaşı və erkən yetkinlik yaşına çatmamış gənc qadınlar üçün xüsusilə geniş yayılmışdır. Lakin, cinsi təcavüz insanlarla məhdudlaşmır və cinsi davranış və sürünənlərdən gəmiriciyə qədər qeyri-humanist primatlara qədər olan növlərdə kəşfiyyat zamanı ortaya çıxa bilər26,27,28,29,30,31,32. Cinsi kəşfiyyat dövründə təcavüz, xüsusilə də fiziki təcavüz, kişiyə reproduktiv məqsədlər üçün qadına girmə imkanı verdiyini fərz etmişdir27,33,34. Bir çox tədqiqatlar kişilər arasında təcavüzkar davranışları nəzərdən keçirir, bəziləri isə kişi və qadın arasında təcavüzü araşdırır, lakin əksər hallarda kişilərin reaksiyasına diqqət yetirirlər. Çox az laboratoriya modelləri cinsi təcavüzə qadınların cəlb edilməsinə, xüsusən də ergenlik dövründə və erkən yetkinlik dövründə baş verənlərə xüsusi diqqət yetirir.35,36,37,38,39. Bu ehtiyacı qarşılamaq üçün, biz bir gənc qadın yetkinlik yaşına çatmayana qədər cinsi təcrübəli yetkin kişilərə bir dəfə dəfələrlə məruz qalmış bir SCAR adlı cinsi təcavüz üçün laboratoriya modeli hazırladık. Etkileşim əsnasında, böyüklər kişilər agresif olaraq yaxınlaşır, pinləri aşağı çəkir və vaginal kanal tamamilə açıq olmasa da, peydaçi qadın siçovulunu qurmağa çalışır (Əncir 1). Qeydə alınan ən tutarlı davranış, anogenital izleme idi ki, yetkin kişi anogenital bölgəni qəfəsdən qaçmağa çalışan qadın dartları kimi aparır. Etkileşim əsnasında yetkin kişi çox vaxt qadınları aşağı bağlayırdı, lakin o qədər kiçik və çevik olduğundan qaça bildi. Hər hansı bir intromyse varsa və bu səbəblə qarşılıqlı əlaqələrə səbəb olmadıqca az idi. Bu, ehtimal ki, peydaçi qadın xilas ola bilər, çünki onun vaginal kanalları tam açıq deyildir və o, ovulating deyil. Maraqlıdır ki, təcavüzə bağlı davranışların sayı (pin və anogenital izləmə) səkkiz gün keçdikdən sonra da gündüzlərdən asılı olmayaraq, intensivliyini qoruyub saxlamışdı və cavan qadın cinsi yetkinliyə çatırdı.
Hazırkı eksperimentlər qrupunun hədəflərindən biri SCAR-nun qadınlarda stressin real modelini yaratmaqdan ibarət idi. Heyvan laboratoriyasından öyrənirik ki, stressli həyat təcrübəsi nöronal və davranış nəticələrinə çox zərərli təsir göstərir. Çox heyvan modelləri, müasir cəmiyyətdə yaşayan insanlar tərəfindən qarşılanmayan streslərə (yəni məhdudlaşdıran stres, sürpriz şoklar və ya üzmək stressi) güvənir, daha az gənc qadınların yaşadığı stressorları əks etdirirlər. Kişi ilə qarşılaşmanın stresli və potensial cəhətdən təhlükəli olduğunu təsdiq etmək üçün biz inkişaf etmiş kortikosteron konsentrasiyalarını ölçmüşdük. Orta konsentrasiyalar, bir yetişkin qadın (hər biri ilə əlaqələndirilmiş olan bir peyğəmbər qadınlar qrupundakı orta konsentrasiyalara nisbətən əhəmiyyətli dərəcədə yüksəlmişdirŞəkil 2A). Fərqli bir sınaqda, biz həmin dövrdə eyni miqdarda yeni kontekstə yerləşdirilən bir qrup qadınla müqayisədə qarşılıqlı kortikosteron konsentrasiyasının yüksək səviyyədə olduğunu müəyyən etdik (Şəkil 2B). Bu nəticələrə əsaslanaraq, yetkin kişi ilə qarşılıqlı əlaqənin nəticəsi qadın üçün daha stresli bir təcrübədir və başqa bir qadınla əlaqə yaratmaqdan və ya yeni kontekstə məruz qalmadan daha stresslidir. Buna görə də, SCAR təcrübəsi yenilikdən daha stresslidir. Həmçinin, yuxarıda göstərildiyi kimi, davranışlar seanslardan asılı olmayaraq səkkiz gün sonra qalmışdı. Bu zaman nöqtəsində kortikosteron konsentrasiyalarını ölçmədik, amma davranışlar dəyişməzsə, kortikosteron konsentrasiyalarının yüksək qalması ehtimal olunur. Minimal olaraq, bu məlumatlar SCAR təcrübəsinin bir neçə saat ərzində HPA-nın qətiyyətlə aktivləşdirilməsi üçün kifayət qədər stres olduğunu göstərir.
Sosial qarşılıqlı təsir və təcavüzün öyrənilməsi uzun bir tarixə malikdir, lakin əksər tədqiqatlar kişi / kişi təcavüzünə yönəldilir. Bir model bizimlə bənzərdir və gənclərin sosial sədaqətinə bənzəyir. Bu tədqiqatlarda peyvənd kişi və ya qadın kemirgenlər 10-min qarşılaşmaları üçün yetkin kişilərə yerləşdirilir. Ümumiyyətlə, onların tapıntıları qadın beyin qarşılaşmasına cavabında daha çox həssas və daha az seçici olduğunu göstərdi39,40. Xüsusilə aktivləşdirilmiş olan beyin bölgələri arasında amigdalanın bazolateral nüvəsi, stria terminalının yataq nüvəsi və hipotalamus daxildir. Cooke və həmkarları həm də qarşılaşmalardan sonra hər iki cinsdə depressiya və narahatlıqla əlaqəli davranışları araşdırdılar. Qadınlar xüsusilə zəif üzmə testi zamanı yüksək artı labirentin qapalı qolunda və daha çox çarəsizlik davranışına sərf olunan daha çox vaxtdan təsirləndilər. Buradakı davranışları ölçməmişik, lakin adi kişilərə gündəlik məruz qaldıqdan sonra peyda olan qadınlarda oxşar dəyişikliklər gözlədik. Depresif davranış tədbirləri əvəzinə, burada, öyrənmə ilə bağlı olan proseslərə diqqət yetirdik. Və göstərildiyi kimi Şəkil 2C, ergenlik dövründə təcavüzkar kişiyə təkrarlanan məruz qalma, qadının vaxtında ayrılmış iki xəbərdarlığı birləşdirmək üçün öyrənmə qabiliyyətini pozduğunu, yəni izləmə kondisionerində. Biz də SCAR-in öyrənmə ilə bağlı ana davranışlarına təsirini qiymətləndirdik (Əncir 4). Gənc qadın kemirgenlər yenə də bakirə olsa da, övladlarına qayğı göstərməyi öyrənirlər. Maternal həssaslaşmanın bu prosesi maternal davranış və qadın beyinində dəyişiklikləri qiymətləndirmək üçün tez-tez heyvan modellərində istifadə olunur. Təcavüzkar və cinsi təcrübəli kişilərə məruz qalma, təbii şəraitdə sağ qalan övladların sayını məhdudlaşdıran kompleks maternal davranışların inkişafı və ifadə edilməsini pozdu.
Çəpli beyin xüsusilə plastik və stresli həyat təcrübələrinə həssasdır15,41. Hipokampus, yetkinlik dövründə yetkinlikdən çox gündə minlərlə hüceyrə meydana gətirir15. Buna baxmayaraq, hüceyrə istehsalı çox vaxt stressli təcrübə ilə azalır. SCAR təcrübəsi hipokampusda hüceyrələrin yayılmasının azaldıb-azaldılmadığını müəyyən etmək üçün əvvəlcədən olduğu kimi peyvənzər qadınların qrupları əvvəllər olduğu kimi yetkin kişilərə də ya da məruz qaldıqdan sonra BrdU (bir mitosis markeri) ilə enjekte edilmiş və iki həftə, bir həftə və ya üç həftə sonra qurban verilmişdir . Bu prosedur bizi yeni yaranmış hüceyrələrin yaşamasına qarşı ÇQDK-nin (erkən yaşlı kişilərə məruz qalma) proliferasiya təsirlərini qiymətləndirməyə imkan verdi. Bu vaxt nöqtələrinin hər birində mövcud olan BrdU etiketli hüceyrələrin ortalama sayıları, böyüklər kişilərə məruz qalan qadınlar arasında olmadı və SCAR təcrübəsi, hüceyrələrin yayılmasının azalması ilə neyrogenezi azaltmadığını göstərdiƏncir 4). Qeyd edildiyi kimi, yetkinlik yaşayan heyvanlar yetkin heyvanlara nisbətən daha çox yeni yaranan neyronlar istehsal edir15. Buna baxmayaraq, SCAR təcrübəsinin 2-h və ya ilkin enjeksiyadan bir həftə sonra BrdU etiketli hüceyrələrin sayına heç bir təsiri olmadı. Əksinə, fərq ilk iltihabdan üç həftə sonra baş vermişdir və yalnız ana həssaslaşdırma təcrübəsinəŞəkil 5A). Ona görə də, indiki nəticələr hüceyrələrin istehsalı ilə müqayisədə maternal davranışın baş verdiyi zaman artıq mövcud olan yeni hüceyrələrin sağlığında bir dəyişiklik olduğunu göstərir, de Yeni.
Hər gün minlərlə anadan olmasına baxmayaraq, yeni hüceyrələrin yarısı və ya daha çoxu yaranandan bir neçə həftə ərzində ölür21. Göstərildiyi kimi Əncir 4Bir həftə ərzində yaranan yeni hipokampal hüceyrələrin yarısından çoxu artıq bir neçə həftə ərzində mövcud olmadı. Bir sıra laboratoriya tədqiqatlarında, yeni hüceyrələrin sərbəst öyrənmə, övladlıq dövründə yaranan hüceyrələr də daxil olmaqla, ölümdən qurtulacağını müəyyən etdik.15,16. Heyvanların hüceyrə sağlığını araşdırdıq, izahlı kondisionerlə öyrədilmiş heyvanlarda. Bununla belə, SCAR qadınlarında ölümdən yeni neyronların xilas edilməsi üçün təlimlər gözləməyəcəyik, çünki SCAR qadınları şərti cavabları öyrənmirdilər42,43,44. Mövcud məlumatlar göstərir ki, nəsl ilə gündəlik qarşılıqlı əlaqələr yeni yaranan hüceyrələrin bir çoxu peyvəndli qadınlarda ölməsinin qarşısını almaq üçün yetərli ola bilər və daha sonra da bu gənc qadınlarda normal olaraq meydana gələn hüceyrə ölümü qarşısını ala biləcəyini göstərir. Bundan əlavə, yeni yaranan hüceyrələr tam ana davranışlarını ifadə edən öyrənilən qadının içində qalma ehtimalı daha çox idi. Beləliklə, qadın hipokampusun diş həkimi girovunda yeni yaranan hüceyrələr analıq təcrübələrinə cavab verir və buna görə də, onlar nəslin tanınması və qayğı ilə bağlı öyrənilməsində mühüm rol oynaya bilərlər. Bu məlumatlar əvvəlki hesabatla uyğundur ki, ata hipokampi olan yeni neyronların öz nəslinə qarşı qarşılıqlı münasibətlərə cavab verən və nəsil tanınması ilə məşğul ola bilən yeni neyronların45.
Nəslinə qayğı göstərməyi öyrənərkən qadın beyin dəyişir46,47. Girişdə qeyd edildiyi kimi, kəskin stresli hadisəyə məruz qalma, yetkin qadın sıçanında klassik kondisioner zamanı birləşmə öyrənilməsini basdırır. Bununla belə, stress doğurdan (hamiləlik vasitəsilə) və ya maternal həssaslaşdırma prosesindən keçən qadınlarda öyrənmənin qarşısını almadı14. Üstəlik, bu təsirlər qadınların həyatında bir nöqtədə ana olmaq üçün öyrəndiyi öyrənmənin bu cür təzyiqini basdırmadığı dərəcədə nisbətən qalıcıdır.48 Son bir çalışmada, oxytocin administrasiyası sistematik olaraq və ya eşitməli korteksdə yerli olaraq maternal davranışını ifadə etməyən analar tərəfindən siçovul qişasının alınmasını artırdığını bildirdi49. Bu məlumatlara əsaslanaraq SCAR-yə məruz qalan peyvəndli qadınların, əgər onlar oksitosin ICV verildiyi təqdirdə ana davranışlarını ifadə etməyi öyrənə bilərlər50 və ya ana həssaslaşdırma zamanı eşitmə korteksində yerli olaraq49. Beləliklə, maternal davranışlarda artım hipokampusun diş ağrısı içərisində yeni meydana çıxan nöronların sağkalımını oksitosinə məruz qalmadan analoji müalicə olunmuş qadınlarla müqayisədə artırmalıdır. Birlikdə bu müxtəlif tədqiqatlar neyrogenezi valideynlərin gənclərə qayğı göstərməyi və öyrənməyi bacaran bir potensial mexanizm kimi göstərir. Buna görə də, SCAR modeli cinsi təcavüzə qadın cavabını öyrənmək üçün deyil, həmçinin hipokampada neyrogenez ilə birlikdə maternal davranışın inkişafı və onun potensial qarşılıqlı təsirini öyrənmək üçün faydalı ola bilər.
Nəticə
Dünyada qadınların 30% -dən çoxu cinsi təcavüz və ya ömür boyu hücuma məruz qalır və bu təcrübələrin bir çoxu yetkinlik dövründə və gənc yetkinlik dövründə baş verir.51,52. Cinsi təcavüz və travma qadınlarda depressiya və bilişsel pozğunluq halında dramatik artımlarla əlaqəli olur53. Bundan əlavə, şiddətli uşaqlıq dövründə cinsi və / və ya fiziki istifadəyə məruz qalan qadınlar amigdala və hipokampal həcmdə azalma ilə yanaşı, öyrənmə çatışmazlığı ilə də bağlı olan TSSB-dən əziyyət çəkirlər54. Bundan əlavə, TSSB'dən əziyyət çəkən anaların uşaqları, onların zəif inkişaf proqnozuna kömək edən travmatik təcrübə üçün daha çox risklidir55. İnsanlarda bu və digər tədqiqatlara baxmayaraq, biliklərimizə görə, qadınlarda cinsi təcavüz və travmanın təsirlərini qiymətləndirmək üçün müəyyən heyvan modeli yoxdur. Burada bildirilmiş olan işlər SCAR'ı qadınlarda ergen cinsi travmanın faydalı bir modeli olaraq təqdim edir. Bu, cinsi travma və təcavüzə məruz qalan qadınlarda depressiya və digər ruhi pozğunluqlarının artımını nəzərə alan beyin mexanizmləri haqqında çox az şey bilirik, çünki bu, vacib bir töhfədir və biz, ola biləcək tədqiqatlar növləri ilə məhdudlaşırıq keçirilmişdir. Burada təqdim olunan məlumatlar göstərir ki, SCAR-a məruz qalma qadın beyində plastisiyaya gətirib çıxaran nəticələrə səbəb olan ana davranışın öyrənilməsini və inkişafını əhəmiyyətli dərəcədə azaldır. Biz SCAR modeli və ondan yaranan məlumatların cinsi zorakılıq və travma yaşadıqları qızlar və gənc qadınlar üçün klinik müdaxilələrin inkişaf etdirilməsi üçün istifadə oluna biləcəyini,r56,57.
Əlavə məlumat
Bu məqaləni necə istinad etmək olar?Şor, TJ et al. Cinsi Təcavüzkar Aqressiv Cavab (SCAR): Qadın Beyində Maternal Learning və Plastisiteyi pozan Cinsi Travma Modeli. Sci. Rep. 6, 18960; doi: 10.1038 / srep18960 (2016).
References
- 1.
Dünya Sağlamlıq Təşkilatı (ÜST), qadınlara qarşı şiddətin qlobal və regional qiymətləndirmələri: intim ortaq şiddətin yaygınlığı və sağlamlıq təsirləri və qeyri-cinsi cinsi şiddət. http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/85239/1/9789241564625_eng.pdf?ua=1 (2013).
2.
Finkelhor, D., Turner, HA, Shattuck, A. & Hamby, SL Uşaq və gənclərin milli nümunəsindəki zorakılıq, cinayət və sui-istifadə halları: bir yeniləmə. Jama Pediatrics 167, 614 (2013).
· 3.
Cantor, D., Fisher, W., Chibnaill, S., Townsend. R., Lee, H., Bruce, C. & Thomas, G. AAU şəhərciyində cinsi təcavüz və cinsi istismara dair iqlim anketinə dair hesabat. http://sexualassaulttaskforce.harvard.edu/files/taskforce/files/final_report_harvard_9.21.15. (2015).
4.
Briere, J. & Jordan, CE Qadınlara qarşı zorakılıq mürəkkəbliyi və qiymətləndirmə və müalicə üçün nəticələrə səbəb olur. Kişilerarası zorakılıq Journal 19, 1252-1276 (2004).
· 5.
Shors, TJ, Olson, RL, Bates, ME, Selby, EA & Alderman, BL Psixi və Fiziki (MAP) Təhsili: insanlarda sağlamlığı artıran bir nörogenez-ruhlandırmış müdaxilə. Neurobiol. Məlumat əldə edin. Mem. 115, 3-9 (2014).
· 6.
Jordan, CE, Campbell, R. & Follingstad, D. Şiddət və qadınların ruhi sağlamlığı: Fiziki, cinsi və psixoloji təcavüzün təsiri. Ann. Rev. Clin. Psychol. 6, 607-628 (2010).
· 7.
Heim, C., Shugart, M., Craighead, WE & Nemeroff, CB Uşaq istismarının və laqeydliyinin neyrobioloji və psixiatrik nəticələri. Dev. Psychobiol. 52, 671-690 (2010).
· 8.
Kessler, RC Qadınların epidemiologiyası və depressiya. J. təsir. Bozukluk. 74, 5-13 (2003).
· 9.
Dalla, C. & Shors, TJ Klassik və operant kondisionerlərin öyrənmə proseslərində cinsi fərqlər. Fiziol. Behav. 97, 229-38 (2009).
· 10.
Wood, GE & Shors, TJ Stres, kişilərdə klassik klinisiyanı asanlaşdırır, lakin yumurtalıq hormonlarının aktiv təsirləri ilə qadınlarda klassik kondisionerə zərbə verir. Proc. Natl. Acad. Sci. ABŞ 95, 4066-4071 (1998).
· 11.
Shors, TJ Stressli təcrübə və ömür boyu öyrənmə. Psixologiya üzrə illik baxış, 57, 55-85, (2006).
· 12.
Maeng, LY & Shors, TJ Stressli qadın beyin: medial prefrontal korteksin prelimbic, lakin infralimbic bölgəsində neyronal aktivlik kəskin stressdən sonra öyrənməni basdırır. Cəbhə. Neyron Circuits 7, 198 (2013).
· 13.
Bangasser, DA & Shors, TJ Stress və öyrənmə arasında kəsişmə nöqtəsində kritik beyindəki devreler. Neurosci. Biobehav. Rev. 34, 1223-1233 (2010).
· 14.
Leuner, B. & Shors, TJ Analıq zamanı öyrənmə: Stressə qarşı müqavimət. Horm. Behav. 50, 38-51 (2006).
· 15.
Curlik, DM, Difeo, G. & Shors, TJ Yetkinlik yaşına hazırlıq: Minlərlə yeni hüceyrə yetkinlik dövründə hipokampusda doğulur və ən çox sadə öyrənmə ilə yaşayır. Cəbhə. Neurosci. 8, 70 (2014).
· 16.
Shors, TJ Yetkin beyin yeni neyronları yaradır və sadə öyrənmə onları canlı saxlayır. Curr. Dir. Psychol. Sci. 23, 311-318 (2014).
· 17.
Leuner, B. et al. Hipokampusun yaddaş üçün tələb olunduğu vaxtdan kənar yeni neyronların sağ qalmasını artırır. J. Neurosci. 24, 7477-7481 (2004).
· 18.
Sisti, HM, Glass, AL & Shors, TJ Neyrogenez və spacing təsiri: zamanla öyrənmə yaddaşın və yeni neyronların sağ qalmasını artırır. Məlumat əldə edin. Mem. 14, 368-75 (2007).
· 19.
Curlik, DM, Maeng, LY, Agarwal, PR & Shors, TJ Fiziki bacarıq təhsili yetkin hippocampusda yeni hüceyrələrin qalan sayını artırır. PLoS One 8, e55850 (2013).
· 20.
Seip, KM & Morrell, JI İpəklərə məruz qalma bakirə qadın sıçanlarda ana motivasiya gücünə təsir göstərir. Fiziol. Behav. 95, 599-608 (2008).
· 21.
Gould, E., Beylin, A, Tanapat, P., Reeves, A & Shors, TJ Hipokampal formasiyanın inkişafında böyüklər neyrogenezi artırır. Nat. Neurosci. 2, 260-265 (1999).
· 22.
Anderson, ML, Sisti, HM, Curlik, DM & Shors, TJ Birlikdə olan öyrənmə kritik dövrdə yetkin nevrogenezi artırır. Avro. J. Neurosci. 33, 175-81 (2011).
· 23.
Dalla, C., Bangasser, DA, Edgecomb, C. & Shors, TJ Neyrogenez və öyrənmə: əldə və asimptotik performans, hipokampusda neçə yeni hüceyrənin sağ qalacağını təxmin edir. Neurobiol. Məlumat əldə edin. Mem. 88, 143-8 (2007).
· 24.
West, MJ, Slomianka, L. & Gundersen, HJ Optik fraksiyanın istifadə etdiyi siçovul hipokampusunun alt hissələrində ümumi nöron sayının qeyri-dəqiq stereoloji qiymətləndirilməsi. Anat. Töv. 231, 482-97 (1991).
· 25.
Banasr, M., Soumier, A., Hery, M., Mocaër, E. & Daszuta, A. Yeni bir antidepresan olan Agomelatine, hipokampal nörogenezdə regional dəyişikliklər yaradır. Biol. Psixiatriya 59, 1087-96 (2006).
· 26.
Blanchard, DC & Blanchard, RJ Heyvan təcavüzü tədqiqatına insan təcavüzü haqqında nə deyə bilərsiniz? Horm. Behav. 44, 171-7 (2003).
· 27.
Geary Boal, J., Hylton, RA, Gonzalez, SA & Hanlon, RT Crowding'in Cuttlefish'in Sosial Davranışına Etkisi (Sepia officinalis). Contemp. Top. Laboratoriya. Anim. Sci. 38, 49-55 (1999).
· 28.
Gobrogge, KL & Wang, ZW Volesdə təcavüz genetikası. Adv. Genet. 75, 121-50 (2011).
· 29.
Parga, JA & Henry, AR Çiftleşmə zamanı kişi təcavüzü: qadın dominant primatda cinsi zorakılığa sübut? Am. J. Primatol. 70, 1187-90 (2008).
· 30.
Stockley, P. & Campbell, A. Qadın rəqabət və təcavüz: disiplinler arası perspektivlər. Philos. Trans. R. Soc. B 368, 20130073 (2013).
· 31.
Wood, W. & Eagly, AH Qadınların və kişilərin davranışının xaç mədəni təhlili: cinsi fərqlərin mənşəyinə təsirlər. Psychol. Bull. 128, 699-727 (2002).
· 32.
Yang, CF & Shah, NM Beyində cinsi təmsil edən bir modul, bir anda. Neyron 82, 261-78 (2014).
· 33.
Darvin, C. Türlərin mənşəyi və İnsanın mənşəyi. (Yeni Amerika Kitabxanası, 1871).
34.
Lindenfors, P. & Tullberg, BS Təcavüzün təkamül aspektləri cinsi seçilmənin əhəmiyyətidir. Adv. Genet. 75, 7-22 (2011).
· 35.
Darden, SK & Watts, L. Kişi cinsi təcavüz, digər qadınlara istiqamətli qadın sosial davranışını dəyişdirir. Biol. Lett. 8, 186-8 (2012).
· 36.
Romeo, RD, Richardson, HN & Sisk, CL Erkən beyin və cinsi davranışların olgunlaşması və inkişafı: Davranış potensialının yenidən qurulması. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 381-91 (2002).
· 37.
Sullivan, RM Tərbiyəçi və təhqiramiz baxıcılara qoşulma nörobiyolojisi. Hastings Hüquq J. 63, 1553-1570 (2012).
· 38.
Wade, J. Kərtənkələlərdə hormonlar, beyin və motivasiya davranışları arasındakı əlaqələr. Horm. Behav. 59, 637-44 (2011).
· 39.
Weathington, JM, Arnold, AR & Cooke, BM Yetkinlik yaşına çatmayan siçovulların seksual səylərinə görə cinsi narahatlıq və depressiya kimi davranışları yaradır. Horm. Behav. 61, 91-9 (2012).
· 40.
Weathington, JM, Puhy, C., Hamki, A., Strahan, JA & Cooke, BM Yetkinlik yaşına çatmayanlara sosial sədaqətə cavab olaraq, sinir fəaliyyəti cinsi cəhətdən dimorphic naxışlar. Behav. Brain Res. 256, 464-471 (2013).
· 41.
Romeo, RD və McEwen, BS Stress və adolesan beyin. Ann. NY Acad. Sci. 1094, 202-214 (2006).
· 42.
Curlik, DM & Shors, TJ Beyninizi öyrətmək: Zehni və fiziki (MAP) təlim hipokampusda neyrogenez prosesi ilə biliyi artırırmı? Neurofarmakoloji 64, 506-514 (2013).
· 43.
Waddell, J. & Shors, TJ Nörogenez, öyrənmə və birləşmə qüvvəsi. Avro. J. Neurosci. 27, 3020-8 (2008).
· 44.
Dalla, C., Papachristos, EB, Whetstone, AS & Shors, TJ Qadın sıçanları, kişi siçovullarına nisbətlə iz xatirələrini daha yaxşı öyrənir və nəticədə hipokampi həddində yeni nöronların daha çox hissəsini saxlayır. Proc. Natl. Acad. Sci. ABŞ 106, 2927-2932 (2009).
· 45.
Mak, GK & Weiss, S. Yeni yaranan CNS nöronları vasitəsi ilə yetkin nəslinin paternal tanınması. Nat. Neurosci. 13, 753-8 (2010).
· 46.
Kim, P. et al. İnsan maternal beyin plastisiyası: Erkən postpartum dövrdə beyin anatomiyasında boyundakal dəyişikliklər. Behav. Neurosci. 124, 695-700 (2010).
· 47.
Dulac, C., O'Connell, LA & Wu, Z. Ana və ata davranışlarının sinir nəzarəti. Elm 345, 765-70 (2014).
· 48.
Maeng, LY & Shors, TJ Bir dəfə ana, hər zaman bir ana: Maternal təcrübəsi qadınların stresin öyrənməyə mənfi təsirlərindən qoruyur. Behav. Neurosci. 126, 137-141 (2012).
· 49.
Marlin, BJ, Mitre, M., D'amour, JA, Chao, MV & Froemke, RC Oxytosin, kortik inhibisyonu dengeleyerek maternal davranışa imkan verir. təbiət 520, 499-504 (2015).
· 50.
de Jong, TR, Beiderbeck, DI & Neumann, ID Qadına şiddətlənən qadın təcavüzünün ölçülməsi (FIT): oksitosin, estrous dövrü və anksiyete təsiri. PLoS One 9, e91701 (2014).
· 51.
García-Moreno, C., Heise, L., Jansen, H., Ellsberg, M. & Watts, C. Qadınlara qarşı zorakılıq. Elm,310(5752): 1282-1283 (2005).
· 52.
Tjaden, P. & Thoennes, N. Milli İnstitut İnstitutu xəstəliyə nəzarət və qadınlara qarşı zorakılığın qarşısının alınması, yayılması və nəticələri ilə nəticələnir: Qadınlara qarşı milli zorakılığın nəticələri. Natl. Inst. Ədliyyə Mərkəzləri Xəstəlikləri İdarəsi Prev. (1998) doi: NCJ 172837.
53.
Chen, LP et al. Psixiatrik pozğunluqların cinsi sui-istifadə və ömürlük diaqnozu: sistematik təhlil və meta-analiz. Mayo Clin. Proc. 85, 618-29 (2010).
· 54.
Weniger, G., Lange, C., Sachsse, U. & Irle, E. Dissosiyativ xəstəliklərlə uşaqlıqdan sui-istifadə hallarının böyüklərdən sağ qalanlarında Amigdala və hipokampal həcm və idrak. Acta Psychiatr. Scand. 118, 281-90 (2008).
· 55.
Chemtob, CM, Gudiño, OG & Laraque, D. Pediatrik ilköğretimde maternal travma sonrası stres bozukluğu ve depresyonu: uşaqların kötü muamelesi ve travmatik olaylara maruz kalma sıklığı. JAMA Pediatr. 167, 1011-8 (2013).
· 56.
Shors, TJ Beyində cinsi fərqlər haqqında yaddaş şeridindən aşağı gəzinti. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. Mətbuat (2016).
· 57.
Alderman, BL, Olson, RL, Fırça, CJ & Shors, TJ Psixi və fiziki (MAP) Təhsili: Meditasyon və aerobik məşqləri birləşdirərək, sinxronlaşmış beyin fəaliyyətini artırarkən depressiya və bulanıklığı azaldır. Translational Psychiatry, Mətbuat (2016).
Təşəkkürlər
Davranış Brain Sağlamlığı Vəqfi və Şizofreniya və Depressiya Araşdırmaları üzrə Milli Alyansın (NARSAD) TJS-ə və INSPIRE mükafatına (NIH: IRACDA Nyu-Cersi / New York Araşdırmalar və Təhsil üzrə Elmi Tərəfdaşlıq üçün Nyu-York) KT və Dorty və David Cooper Təqaüdləri HC və DD.
Author məlumat
Bağlantılar
1. Davranış və Sistemlər Nörobilim, Psixologiya Bölümü, Əməkdaşlıq Nöroloji Mərkəzi, Rutgers Universiteti.
o Tracey J. Shors
o, Krishna Tobόn
o, Gina DiFeo
o, Demetrius M. Durham
o & Han Yan M. Chang
Haqları
TJS, eksperimentləri hazırladı, nəzarət etdi və əsas əlyazma mətni yazdı. KT, GD, DD və HC dizaynları, aparılan eksperimentlər və məlumatları analiz etməyə kömək etdi. XN rəqəmləri 1-5 hazırladı. Bütün müəlliflər əlyazmaları nəzərdən keçirmişlər.
Rəqabət maraqları
Müəlliflər rəqib maliyyə maraqlarını bəyan etməyiblər.
Müəllif yazıçısı
Yazışmalar Tracey J. Shors.
;