Эндогенный Опіоіды-індукаваны нейропластичность дофаминергических нейронаў у вентральной вобласці покрыўкі ўплывае на натуральнае і опиатное ўзнагароджанне (2014)

КАМЭНТАРЫ: ,en даследаванні DeltaFosB мы часта цытуемы ўсё сканцэнтраваны на прылеглым ядры (цэнтр узнагарод) і выявіў, што сэкс у значнай ступені адключае тыя ж механізмы мозгу, што і метамфетамін і какаін. З этапнага даследавання гэтага ж даследчыка (Прыродныя і Закон аб агульных Neural Пластычнасць Механізмы Drug Узнагароды з ΔFosB як ключавы медыятар (2013)):

Такім чынам, прыродныя і лекавыя ўзнагароды не толькі збліжаюцца па адным і тым жа нервовым шляху, яны збліжаюцца на адных і тых жа малекулярных медыятарах, і, верагодна, у адных і тых жа нейронах у Nucleus Accumbens, каб паўплываць на вылучэнне стымулаў і "жаданне" абодвух тыпаў узнагарод.

Адымаць: метамфетамін, какаін, і сэкс ўсё робяць адны і тыя ж фундаментальныя рэчы, да таго ж нервовых клетак у цэнтры заахвочванняў (прылеглым ядры), што яны могуць зрабіць па-рознаму ў іншых частках мозгу. Гэта дэмантаваў звычайны пункт таго, хто гаворыць, што прыродныя ўзнагароды і прэпараты адрозніваюцца ў механізмах і эфектах.

У гэтым новым даследаванні было разгледжана, што сэкс робіць з ВТА. VTA - гэта месца, з якога пачынаюцца нервовыя клеткі, якія выпрацоўваюць дофамін, - і яны разгаліноўваюцца да назапашанага ядра, лобнай кары і міндалін. У асноўным VTA з'яўляецца крыніцай (крыніцай) большасці нашага дофаміна. Глядзіце гэтыя 2 выявы схемы ўзнагароджання: Pic1, Pic2

Даследнікі выявілі, што сэкс (клімакс) выклікае цела клетак у ВТА сціскацца часова (у мужчын). Клеткавыя цела і іх дендрытаў змяшчае шэрае рэчыва галаўнога мозгу. Гэта менавіта тое, што гераінавая залежнасць робіць да ВТУ (Не выкарыстоўвайце адзін раз гераіну, але хранічнае ўжыванне гераіну). Варта адзначыць, што гэтая ж ўсаджванне тэл ВТУ клетак адбываецца ў наркаманах гераіну чалавека.

Сэкс-індукаваныя клеткі ўсаджванне доўжыцца на працягу па меншай меры 7 дзён. Змены, выкліканыя сэксам нармалізаваліся ў 30 дзён, але даследчыкі толькі ацэньвалі дні 1, 7 і 30.

Усаджванне клеткавых целаў пры гераінавай залежнасці прыводзіць да зніжэння ўзроўню дофаміна ў ядро ​​назапашвання - альбо да таго, што мы называем дэсенсібілізацыі. Даследчыкі ўводзілі пацукам марфін, каб ацаніць іх рэакцыю (пасля сэксу), але нічога не адбылося. Звычайна пацукам вельмі падабаецца марфін, але тут іх часова дэсенсібілізавалі. Карацей кажучы, схема ўзнагароджання пацукоў пасля эякуляцыі не рэагавала на нізкі ўзровень гераіну. Даследчыкі меркавалі, што для атрымання "нармальнай" рэакцыі пацукоў спатрэбяцца больш высокія дозы.

Падводзячы вынік: Сэкс (часова) робіць тое ж самае ў VTA, што і прыхільнасць да гераіну: памяншэнне дофаміна, якія выпрацоўваюць целы нервовых клетак. Гэта прыводзіць да зніжэння ўзроўню дофаміна ў цэнтры ўзнагароджання і да меншай рэагавання на наркатычныя рэчывы - і для таго, каб мозг пацукоў аднавіўся, патрабуецца як мінімум 7 дзён.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36, DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

збаны KK1, Коппенс CM2, Beloate LN3, Фуллер Дж2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Леман М.Н.4, Coolen Л.М.5.

абстрактны

Натуральнае ўзнагароджанне і наркотыкі злоўжыванняў сыходзяцца на мезолимбическом шляхі і актываваць агульны механізм пластычнасці нейронаў у прылеглым ядры. Хранічнае ўздзеянне апіятаў індукуе пластычнасць ў дофаминергических нейронных вентральной вобласці покрыўкі (VTA), які рэгулюе талерантнасць ўзнагароджання марфіну.

Тут мы правяраем гіпотэзы, што спарванне-індуцыраванае вызваленне эндагенных апіоідаў ў ВТА выклікае марфалагічныя змены клетак допаміна ВТУ ў самцоў пацукоў, якія ў сваю чаргу, рэгулююць доўгатэрміновае выраз вопыту, выкліканага узмацненнем сэксуальнага паводзінаў.

Па-першае, сэксуальны вопыт знізіўся VTA памер допаміна сома 1 і 7 дзён, але не 30 дзён пасля апошняй сесіі спалучаныя. Гэты эфект быў блакаваны з налоксона перад кожнай спалучаныя сесіі; Такім чынам, ВТ клеткі допаміна пластычнасць залежыць ад дзеяння эндагенных апіоідаў.

У сваёй чаргі, VTA пластычнасць была звязана са змяненнем ўзнагароджання апіятаў, як сэксуальна дасведчаныя мужчыны не ўтвараюць кандыцыянер месца перавагі 0.5 мг / кг марфіну.

Далей, было ўстаноўлена, опосредует Ці эндагенныя Опіоідные дзеянні сексуальнага ўзнагароджання і памяць у самцоў пацукоў, якія атрымлівалі налоксона падчас шлюбнага досведу, альбо сістэмна, альбо ўнутры Вт. Налоксона не перашкодзіў першапачатковага вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў па паўтаральным спалучаныя сесій, або кандыцыянаванага месца перавагі ношкі. Аднак лячэнне налоксона саслабляецца доўгатэрміновай экспрэсія вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў і нейронавай актывацыі ў мезолимбических абласцях, выкліканых ў адказ-асацыяваныя рэплікамі умоўных.

У сукупнасці гэтыя дадзеныя сведчаць аб тым, што эндагенныя Опіоіды падчас спарвання індукуюць нейрональных пластычнасць у ПТВ нейронаў дофаміна, якія з'яўляюцца вырашальным значэннем для марфіну ўзнагароджання і доўгачасовай памяці для натуральнага паводзін ўзнагароджання.

 

Увядзенне

Прыродныя ўзнагароджвае паводзіны апасродкуецца мезокортиколимбической сістэмай (Майзель і Mullins, 2006; Hoebel і інш., 2009; Frohmader і інш., 2010a; Збаны і інш., 2010a; Young і інш., 2011; Блюм і інш., 2012). Прэпараты злоўжыванне выклікае нейронавыя змены ў гэтай сістэме, што, у сваю чаргу, спрыяюць развіццю і выразу таксікаманіі (Химэн і інш., 2006; Нестлер, 2012). Раней мы вызначылі, што вопыт з натуральным паводзінамі узнагародай, г.зн. сэксуальнага вопыту ў самцоў пацукоў, таксама прыводзіць да нейрональной пластычнасці ў прылеглым ядры (NAC), у тым ліку павелічэнню дендрітных шипиков (Збаны і інш., 2010a) І deltaFosB (Збаны і інш., 2013). У сваю чаргу, гэты сэкс-індукаваны пластычнасці з'яўляецца крытычным для ўздзеяння сэксуальнага вопыту на наступнае спарванне, праяўляецца як палёгку ініцыяцыі і выканання сэксуальнага паводзінаў (Збаны і інш., 2010b, 2012, 2013). Акрамя таго, вопыт сэксу змяняе адчувальнасць да псіхостімуляторов, у тым ліку сенсібілізацыі рухальнай актыўнасці і павышанага (узнагароджанняFrohmader і інш., 2010a; Збаны і інш., 2010a, 2013).

NAc адзін ўніз па плыні мішэні дофаминергических нейронаў у вентральной вобласці покрыўкі (VTA). нейроны допаміна ВТА актывуецца падчас спарвання і пасля ўздзеяння на ўмоўныя сігналы інтэлектуальных сэксуальнага ўзнагароджання (Бэлфур і інш., 2004; Frohmader і інш., 2010a), Праз эндагеннай Опіоідные пептыда (ПРН) -связывающий пры μ-опиатных рэцэптараў (сох; Matthews і нямецкі, 1984; Джонсан і Поўнач, 1992; Klitenick і інш., 1992; Икемото і інш., 1997; Бэлфур і інш., 2004). Такім чынам, ўздзеянне умоўных сігналаў прагназавання сэксуальнага паводзінаў выклікае вызваленне ПВЗА і актывацыю дофаміновых клетак ВТА, што палягчае сэксуальную матывацыю (Мітчэл і Сцюарт, 1990; ван Фюрт і інш., 1995; ван Фюрт і ван Ree, 1996) І вызваленне допаміна ў NAC (Fiorino і інш., 1997).

Пры частым уплыве экзагенных апіятаў выклікае марфалагічныя змены ў ВТА (Мазяў-Робінсан і інш., 2011; Мазяў-Робисона і Нестлер, 2012), Паменшаны памер самы нейронаў допаміна ВТУ (Sklair-Tavron і інш., 1996; Спига і інш., 2003; Чу і інш., 2007; Русо і інш., 2007; Мазяў-Робінсан і інш., 2011), Зніжэнне ўзроўню нейрофиламентов бялкоў (Beitner-Джонсан і інш., 1992), Падвышаная ўзбудлівасць клетак допаміна, а таксама зніжэнне аксонного транспарту і дофаміна выхаду да NAC (Beitner-Джонсан і інш., 1992; Мазяў-Робінсан і інш., 2011). Гэтыя змены VTA дофаміновых нейроны выклікаюць талерантнасць заахвочванняў марфіну і мінаюцца, паколькі яны рассейваюцца на працягу месяца ўстрымання наркотыкаў (Русо і інш., 2007). У цяперашні час незразумела, ці з'яўляецца пластычнасць нейронаў допаміна ВТА з'яўляецца унікальнай для дзеянняў апіятаў або калі яны таксама вырабляецца шляхам вызвалення ПВЗ падчас прыроднага карыснага паводзін.

Тут, мы правяраем гіпотэзу, што натуральны вопыт ўзнагароды выклікае нейропластичность падобнай выкліканым апіятаў, і, такім чынам, што апіяты сыходзяцца на механізме пластычнасці, што мае вырашальнае значэнне для натуральнага паводзін ўзнагароды і ўзнагароды памяці. Мы праверыць, зніжае Ці сэксуальны досвед у самцоў пацукоў памеру сомы нейронаў допаміна ВТА з дапамогай працэсу, у залежнасці ад EOP дзеянні ў ВТЕ. Акрамя таго, мы даследуем Ці EOP-індукаваных змены ў нейронных дофаміна ВТА звязаны з узмацненнем натуральнага насычанага паводзінаў і атрыбуцыі стымулявання выпукласці да сігналаў, звязаным з натуральнай узнагародай, у той час выклікаючы крос-талерантнасць да ўзнагароды марфіну.

Матэрыялы і метады

жывёлы

Дарослыя самцы Sprague-Dawley пацукоў (200-225 г) былі атрыманы з Charles River і размешчаны парамі ў штучна асветленых пакоях на 12 ч святло / цемра цыклу ва ўсіх эксперыментах (святло выключалі ў 10: 00 AM для эксперыменту допуску марфін, акрамя , святло выключалі ў 5: 00 PM). Ежа і вада былі даступныя ўволю за выключэннем тэставання паводзін. Стымул самкі овариэктомии і імплантавалі падскурна 5% 17-β-эстрадиола бензаат SILASTIC капсулы (1.98 мм ўнутраны дыяметр, даўжыня 0.5 см, індэкс Доу-Корнинг). Ін'екцыі прогестерона (падскурнай, 500 мкг у 0.1 мл кунжутное масла) ўводзілі 3-6 ч перад тэставаннем, каб выклікаць сэксуальную ўспрымальнасць. Усе працэдуры былі адобраны ў Універсітэце Заходняга Антарыё і Універсітэт Мічыган камітэтаў па догляду за жывёламі, і адпавядалі канадскіх савету па догляду за жывёламі і Нацыянальны інстытут здароўя кіруючых прынцыпаў, звязаныя з пазваночных жывёл у навуковых даследаваннях.

Часовы ход змены памеру допаміна сомы ВТА

Штодзённыя злучаныя сесіі.

Для вывучэння часовай ход змяненняў у дофаміна нейронаў памер сома ў ВТА, сэксуальна вопытныя і наіўныя жывёлы былі забітыя ў 1, 7 або 31 г (n = 5-8 на групу) пасля таго, як у апошні дзень ношкі (дасведчаны) або апрацоўкі (наіўны). У сэксе вопытных групы былі супастаўныя для сэксуальнага паводзінаў падчас заключнай сесіі спарвання, а таксама агульнай колькасці эякуляцый на працягу пяці сесій (у сярэднім 5 для кожнай групы) і не адрозніваліся па любым параметры сэксуальнага паводзінаў.

Спарванне сесіі.

Сэксуальна наіўныя мужчыны былі аднесены ні да аднаго з двух эксперыментальных умоў: сэксуальна наіўных ці сэксуальнага вопыту. Сэксуальна дасведчаныя жывёлы дазволілі спарвацца пяць разоў на паслядоўныя дні з рэцэптыўна самкамі ў прастакутных выпрабавальныя клетках (60 × 45 × 50 см) да адлюстравання семявывяржэння або да 1 ч (у залежнасці ад таго прыйшоў першы). Клеткі былі старанна ачышчаны з 70% растворам этанолу і свежае пасцельная бялізна было дададзена паміж спалучаныя сесіямі. Сэксуальныя паводзіны праводзілі на працягу цёмнай фазы (2-6 ч пасля пачатку цемры). Толькі жывёлы, якія эякуляцыя на працягу па меншай меры чатыры з пяці шлюбных сесій былі палічаныя сэксуальна дасведчаныя і ўключаны ў эксперыментах. назіралася ўсе сеансы спарвання і сэксуальныя паводзіны было зафіксавана. Лік апор (M) intromissions (ІЧУ), усталюйце час затрымкі (ML, час ад увядзення самкі да першай мантавання), ўпуск затрымкі (IL, час ад увядзення самкі да першай интромиссии) і семявывяржэння латэнтнасці (EL; час ад першай интромиссии да эякуляцыі) было запісана (Agmo, 1997). Наіўныя жывёл змяшчалі ў чыстую клетку тэст для 1 ч адначасова з палавым вопытных мужчын спалучаныя ў тым самым пакоі, так што яны былі схільныя аддаленымі жаночых пахаў і аналагічныя ўзроўні турботы і экалагічнай навізны, як вопытных мужчын.

Иммунофлуоресценции маркіроўка.

Жывёлы былі глыбока анестэзуе з дапамогай пентобарбитала натрыю (270 мг / кг, внутрибрюшинно) і перфузии внутрисердечна з 50 мл 0.9% солевага раствора, з наступных 500 мл 4% параформальдегида ў фасфатных 0.1 м натрыю буфера (PB). Мазгі былі выдалены, і фіксавалі на працягу 1 ч пры пакаёвай тэмпературы (RT) у тым жа фіксатара, а затым апускалі ў 20% цукрозы і 0.01% азіду натрыю ў 0.1 м PB для захоўвання пры 4 ° С. Каранарныя зрэзы пры 35 мкм на замарожванні микротома (H400R, Microm) і былі сабраныя ў чатырох паралельных шэрагаў у растворы криопротектора (30% цукрозы, 30% этиленгликоль ў 0.1 м ПБ), а затым захоўвалі пры 20 ° C. Усе інкубацыі праводзілі пры пакаёвай тэмпературы пры асцярожным мяшанні і багатых паласканняў з 0.1 м PBS, рн 7.35, паміж инкубирования. Зрэзы ўздзеяння 1% H2O2 для 10 мін, каб знішчыць эндагенныя пероксидазы, затым блакавалі на працягу 1 ч у інкубацыйным растворы (PBS +: PBS, які змяшчае 0.4% Трытон Х-100; Sigma-Aldrich) і 0.1% бычыныя Сыроватачны альбумін (Jackson Immuno Research Laboratories). Затым зрэзы інкубаваць на працягу ночы пры пакаёвай тэмпературы на мышы тыразін гидроксилазы (ТН) -antibody (1: 20 000; Millipore). Пасля першаснай інкубацыі антыцелаў, зрэзы інкубаваць ў AlexaFluor 555-кан'югаванага антыцелы козы супраць мышы (1: 100; Invitrogen, Eugene, OR) на працягу 30 мін. Нарэшце, зрэзы прамывалі 0.1 м ПБ, устаноўленыя на прадметных шкле SuperFrost Plus, сушыў і пакрываў з gelvatol, якая змяшчае анты-выцвітання агента 1,4-диазабицикнул (2,2) октан (DABCO; 50 мг / мл, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Аналіз дадзеных: нейрон памер сома.

Выявы TH-иммунореактивного (ВК) нейронаў у ВТА былі ўзятыя ў 40-кратным павелічэнні ў тры ростральной каудальный узроўнях (Бэлфур і інш., 2004). Там не было выяўлена паміж клеткамі на розных узроўнях адрозненні. Памер сомы з TH-IR нейронаў аналізавалі з выкарыстаннем ImageJ (Нацыянальныя інстытуты здароўя). Сярэдняя плошча, перыметр, і круглявасць былі вымераныя, як апісана Sklair-Tavron і інш. (1996), Сярэднія клетак 25 на адно жывёльнага (у спалучэнні ўсіх узроўняў 3 ВТА) аналізавалі і толькі клетка з выразна бачнымі ядрамі былі ўключана. Для кожнага жывёльнага, сярэдняя плошча, перыметр і круглявасці былі разлічаны. Для статыстычнага аналізу двухбаковы дысперсійны аналіз быў выкарыстаны [фактары: сэксуальны вопыт (секс дасведчаным ці сэкс наіўнага) і час (1, 7 або 31 г)] з наступным Постфактум параўнання з выкарыстаннем метаду Holm-Sidak з узроўнем значнасці 0.05.

ВТА змены без допаміна

Biweekly злучаных сесіі.

Каб праверыць, ці патрабуецца сэксуальны вопыт падчас штодзённых сеансаў спарвання памяншаецца на працягу TH-IR памеру нейрона сома, былі прааналізаваныя ВТ дофаміна нейроны жывёл, якія павязаныя на працягу пяці раз у два тыдні сесій спалучаных. Спарванне сесіі былі, як апісана вышэй, але на працягу 2.5 тыдняў. Мазгі былі сабраныя 7 я пасля апошняга спарвання або апрацоўкі.

Иммунопероксидазная маркіроўка.

Акрамя таго, ён быў выпрабаваны Ці можна з дапамогай адчувальных метадаў афарбоўвання з иммунопероксидазным і хромогеном выяўленнем, таксама дазволіў бы для візуалізацыі змены памеру сомы TH-IR. Перфузии тканіны і апрацоўка была паводзіны, як апісана вышэй. Пасля апрацоўкі 1% H2O2 і PBS + зрэзы інкубаваць на працягу ночы пры пакаёвай тэмпературы на поликлональные мышы тыразін гидроксилазы (ТН) -antibody (1: 20 000; Millipore). Пасля першаснай інкубацыі антыцелаў, зрэзы інкубаваць з біятын-кан'югаванага казінага анты-трусінага IgG (1 ч, 1: 500 ў PBS +; Vector Laboratories), авидин-біятын-пероксидаза хрэна (1 ч, АВС элітным; 1: 1 000 ў PBS ; Vector Laboratories) і 3,3'-диаминобензидина тетрагидрохлорида (10 мін, 0.02%, даб, Sigma-Aldrich) узмацняецца з сульфатам нікеля ў (0.02% у 0.1 м ПБ) з перакісам вадароду (0.015%). Зрэзы старанна прамываюць у 0.1 м ПБ, каб скончыць рэакцыю, і ўсталяваны на закадаваныя SUPERFROST плюс шкле (Fisher) з 0.3% жэлаціну ў DDH2О. Пасля абязводжвання, усе слайды з DPX пакрывалі mountant (дибутилфталат ксілол; Sigma-Aldrich).

Аналіз дадзеных: нейрон памер сома.

TH-IR-клеткі былі прааналізаваны на плошчу, перыметр і кругасць, як апісана вышэй. Акрамя таго, былі прааналізаваны TH-IR-клеткі ў substantia nigra (SN), у тых жа раздзелах, якія выкарыстоўваліся для аналізу VTA TH-IR-клетак. Нарэшце, пасля аналізу VTA і SN TH-IR-клетак, разрэзы былі проціпаказаны з выкарыстаннем крезилово-фіялетавых, а не-TH-ІЧ-клетак былі прааналізаваны з выкарыстаннем тых жа метадаў, што апісаны вышэй. Адрозненні паміж наіўнымі і дасведчанымі групамі параўноўваюцца з выкарыстаннем двухбаковых студэнтаў t тэсты з узроўнем значнасці 0.05.

Эфекты налоксона па памяншэнні памеру вопыту індукаванага дофаміна сомы

Для таго, каб вызначыць, ці гуляе MORS ролю ў сексе вопыту індукаваных змяненняў у дофаміна нейронаў памеру самы, MOR, падчас сэксуальнага паводзінаў былі заблякаваныя. Палова жывёл набыла сэксуальны вопыт, у той час як іншая палова былі апрацаваны, але заставаліся сэксуальна наіўны. Сэксуальна дасведчаныя жывёлы дапускаюцца да спарвання на 5 дзён запар. У сэксуальна вопытных і наіўных груп, жывёл апрацоўвалі з неселективным MOR антаганіста налоксона (10 мг / кг, падскурна, Sigma-Aldrich, растворанага ў 0.9% фізіялагічнага раствора) або фізіялагічнага раствора 30 мін да ўвядзення самкі (вопытных) або перад апрацоўкай (наіўны); ствараючы тым самыя чатыры эксперыментальных груп: сэксуальна наіўны фізіялагічны раствор (Naive Sal), сэксуальна наіўнага налоксона (Naive Nlx), сэксуальны вопыт фізіялагічнага раствора (Exp Sal), і сэксуальна дасведчаныя налоксона (Exp Nlx; n = 5-8 на групу). Лячэнне налоксона не было статыстычна значных эфектаў на любы параметр сэксуальных паводзінаў, на любым з 5 д, і naloxone- і апрацаваных солевым растворам групы былі ідэнтычныя ў сэксуальным вопыце. Усе жывёлы былі забітыя праз внутрисердечной перфузия 7 й пасля апошняга спарвання сесіі. была праведзена для памеру допаміна самы, як апісана вышэй :; (пол вопыт і лячэнне наркатычнай фактары двухбаковай ANOVA) секционирований, імунагістахіміі і аналіз дадзеных.

Марфін кандыцыянера перавагі месца

Эксперыментальны дызайн.

Раней, Русо і інш. (2007) паказаў хранічны марфін індукуе талерантнасць да ўзнагароджання марфіну. Так як сэксуальны вопыт і хранічны марфін выклікаць падобныя памяншаецца ў памеры сомы дофаміновых нейронаў у VTA, функцыянальная значнасць палавых індукаваных марфалагічных змен былі пратэставаныя на ўзнагароджанне марфіну. Сэксуальна вопытныя і наіўныя жывёлы былі падзеленыя на шэсць розных эксперыментальных груп (n = 9-13 у кожнай групе) на аснове сэксуальнага паводзінаў (сэксуальна наіўных ці дасведчаны) і дозы марфіну (0.5, 5.0 або 10.0 мг / кг, внутрибрюшинно) і выпрабоўвалі на марфін-індукаваны кандыцыянаванага месца перавагі (CPP).

Марфін-CPP.

Кандыцыянаванне адбылося 1 д пасля апошняй сесіі спарванне і групы былі падабраныя для сэксуальнай актыўнасці падчас апошняй сесіі спалучаныя. Выкарыстоўваюцца СРР парадыгма складалася з папярэдніх выпрабаванняў, кандыцыянаванне дзён, і пост-тэст, і прылада было заснавана на Tenk і інш. (2009). Карацей кажучы, апарат CPP (MED Associates) складаўся з трох розных камер. Паміж кожнай сесіяй апарат старанна чысцілі 70% -ным растворам этанолу, каб мінімізаваць зацяжныя нюхальныя сігналы. Для вызначэння індывідуальных пераваг быў праведзены папярэдні тэст, падчас якога жывёлам быў прадастаўлены вольны доступ да ўсяго апарата на працягу 15 хвілін. Як група, жывёлы не праяўлялі значных пераваг да пэўнай камеры, але кожнае асобнае жывёла мела невялікія першапачатковыя перавагі. Пацукі, якія дэманстравалі значную перавагу адной з камер (розніца> 200 с паміж часам, праведзеным у кожнай з камер; <5% жывёл), падчас папярэдняга выпрабавання былі выключаны з даследавання. Падчас кандыцыянавання лекавы сродак спалучаўся альбо з першапачаткова пераважнай, альбо з непажаданай камерай, выкарыстоўваючы бесстароннюю парадыгму (Tzschentke, 2007) І жывёліны былі заключаны ў камеры для 30 мін. Жывёлы ўводзілі фізіялагічны раствор (ф) раніцай (9: 00 раніцы да 12: 00 PM) і прымеркаваны да фізрастворам пары камеры (кантроль). У другой палове дня (1: 00-4: 00 ПМ), жывёлам ўводзілі марфін (IP, 0.5 мг / кг, 5.0 мг / кг або 10.0 мг / кг; марфіну сульфату, растворанага ў 0.9% фізіялагічнага раствора, Джонсан Маці) і заключаны на марфін ў пары камеры. Жывёлы былі падвергнуты два дні кандыцыянавання. На наступны дзень (пасля таго, як 3 д апошняга дня ношкі) пост-тэст, працэдурна ідэнтычныя папярэднія выпрабаванні, быў праведзены. Для статыстычнага аналізу, час, праведзены ў марфін-парныя камеры падчас пост-тэсту параўноўвалі з часам, праведзенае ў солевом спаравацца камеры падчас пост-тэсту для сэксуальна наіўных або вопытных самцоў у межах кожнай дозы з выкарыстаннем парных t тэст. p <0.05 лічылася статыстычна значным. Дадатковыя кантрольныя групы сэксуальна наіўных і дасведчаных жывёл атрымлівалі фізіялагічны раствор як у парных, так і ў няпарных камерах, служачы адмоўным кантролем. Ні ў адной з груп не было выяўлена адрозненняў у часе знаходжання паміж камерамі.

Ўплыў сістэмнага налоксона на досвед індукаваных палягчэння сэксуальнага паводзінаў

Эксперыментальны дызайн.

Палавыя Вынікі вопыту ў галіне палягчэння сэксуальнага паводзінаў, якое захоўваецца на працягу, прынамсі 1 месяца (Збаны і інш., 2012). Для аналізу ўплыву блакавання MOR на досвед індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў, сэксуальна дасведчаныя жывёлы атрымлівалі альбо налоксона або фізіялагічны раствор да пяці паслядоўных сесій спалучаных (n = 12 кожны), як апісана вышэй. Праз тыдзень пасля апошняй спалучаныя сесіі, заключны тэст спарвання праводзіліся на працягу якога ўсе жывёлы былі дапушчана не спарвацца да адной эякуляцыі або да 1 ч. Няма налоксона ці фізіялагічнага раствора лячэнне не прызначалі перад спарваннем на канчатковы дзень выпрабаванні. Параметры спарвання былі супастаўленыя, каб вызначыць, ці ўплывае налоксона альбо сэксуальнага вопыт індукаванага палягчэння спарвання (дзень 1 супраць дня 5) або зместу гэтага спрашчэння (дзень 5 супраць тэсту), выкарыстоўваючы двухбаковую ANOVA [фактары: лячэнне (фізіялагічны раствор у параўнанні з налоксона ) і дзень (дзень 1, дзень 5, або тэст)] і спосаб Holm-Сидака для Постфактум параўнання. Для ўсіх статыстычных тэстаў, p <0.05 лічылася статыстычна значным.

Дадатковыя кантрольныя эксперыменты

Сістэмнай налоксона на дзень тэставання.

Для таго, каб паказаць, што змененае сэксуальнае паводзіны на фінальным тэст спарвання дня не было з-за адсутнасць налоксона, мы ўводзілі альбо налоксона або фізіялагічны раствор на канчатковы тэст спарвання дня жывёл, якія получиут Спарванне спараных з налоксона у той час як яны атрымалі сэксуальны вопыт. У прыватнасці, усе жывёлы атрымлівалі ін'екцыі налоксона (10 мг / кг, падскурна) 30 мін да спарвання да аднаго семявывяржэння на працягу 5 дзён запар. На тэст дзень 7 d пазней, прыкладна палова жывёл атрымлівалі ін'екцыю налоксона (10 мг / кг, n = 7) або фізіялагічны раствор (n = 6) 30 мін да ўвядзення ўспрымальнай самкі. Сэксуальныя паводзіны назіралі і рэгістравалі. Параметры спарвання былі супастаўленыя, каб вызначыць, ці ўплывае налоксона альбо сэксуальнага вопыт індукаванага палягчэння спарвання (дзень 1 супраць дня 5) або зместу гэтага спрашчэння (дзень 5 супраць тэсту), выкарыстоўваючы двухбаковую ANOVA [фактары: лячэнне (фізіялагічны раствор у параўнанні з налоксона ) і дзень (дзень 1, дзень 5, або тэст)] і спосаб Holm-Сидака для Постфактум параўнання. Для ўсіх статыстычных тэстаў, p <5% лічылася статыстычна значным.

Ўплыў налоксона на кароткатэрміновым выразе палегчанага сэксуальнага паводзінаў.

Эфекты налоксона (10 мг / кг, падскурна) лячэнне падчас спарвання было пратэставаны на наступным сексуальных паводзінах падчас канчатковага выпрабавальнага спарвання дня, які быў праведзены толькі 1 д пасля апошняга спарвання (фізіялагічнага раствора, n = 5; налоксона, n = 4).

Сістэмнай налоксона папярэдняя апрацоўка.

Для таго, каб вызначыць, ці паўтараецца гэта лячэнне налоксона ў адзіночку выклікае пагаршэнне сэксуальнага паводзінаў 7 д пасля апошняй апрацоўкі, сэксуальна наіўныя жывёлы атрымлівала пяць штодзённых налоксона (10 мг / кг, падскурна) або солевыя ін'екцыі на паслядоўныя дні да спарвання тэсту 7 я пасля канчатковага налоксона або фізіялагічны раствор для ін'екцый. На гэтым заключны дзень выпрабаванні, жывёлы не атрымлівалі ніякай ін'екцыі. Сэксуальныя паводзіны назіралі і рэгістравалі, як апісана вышэй. параўноўвалі параметры спарвання паміж групамі з дапамогай няпарнага t тэсты. Для ўсіх статыстычных тэстаў, p <5% лічылася статыстычна значным.

Сістэмнай налоксона і ўзнагароджанне сэксу.

Адна з магчымасцей паслаблення эфекту ад налоксона на захаванне палягчанага сэксуальнага паводзін заключаецца ў тым, што налоксон блакуе карысныя наступствы сэксуальнага паводзінаў. Каб праверыць гэтую магчымасць, парадыгма СРЗ была праведзена на сэксуальнае паводзіны адразу пасля ўвядзення налоксону альбо солевага раствора ў мужчын, якія не мелі папярэдняга сэксуальнага вопыту. Працэдура CPP была падобная на апісаную вышэй для марфіну-CPP, уключаючы папярэдні тэст, дні кандыцыянавання і пасля тэсту.

Пол паводзіны ў пару з першапачаткова непредпочтительной камерай. У ураўнаважаным чынам, кожнае жывёла атрымлівала ін'екцыю налоксона (n = 12) або фізіялагічны раствор (n = 11) 30 мін да атрымання доступу да якая ўспрымае самкі. Сярэдняя працягласць спалучаныя сесіі была ~ 13 мін. Адна хвіліна наступныя эякуляцыю, жывёла змяшчалі ў камеру для парнага 30 мін. На другі дзень кандыцыянавання, жывёлы атрымлівалі ін'екцыю альбо налоксона ці фізіялагічнага раствора (у залежнасці ад таго яны атрымалі да спарвання), і змяшчалі ў камеру для няпарнага 30 мін. Далей, пасля тэст быў праведзены, ідэнтычны папярэдняй праверкі. Для вызначэння камеры перавагі, час, праведзеных у камеры падчас парнай параўноўвалі предтестовые і пост-тэст. Для статыстычнага аналізу, у пары t Тэсты былі выкарыстаныя для параўнання пераваг і рознасныя ацэнкі, і час у парнай камеры падчас папярэдняга выпрабавання і пост-тэст, каб вызначыць, ці была сфарміравана значная СРР для сэксуальных паводзінаў. p <0.05 лічылася значным.

Эфекты ўнутрысеткавага VTA налоксона на досвед індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў

Эксперыментальны дызайн.

Для таго, каб вызначыць, ці з'яўляецца ИАП дзеянне канкрэтна ў ВТА, быў адказным за эфекты сэксуальнага вопыту індукаваных змяненняў на сэксуальнае паводзіны, жывёлы падвяргаліся мясцовай інфузорыя налоксона ці фізіялагічнага раствора ў ВТА, перш чым пяць штодзённых сеансаў спалучаных. Паводніцкая парадыгма была падобная на сістэмны налоксона эксперымент. Сэксуальна дасведчаныя Жывёлам ня спарвацца на працягу 5 дзён запар да адной эякуляцыі або да 1 ч. Праз пятнаццаць хвілін перад увядзеннем ўспрымальнай самкі пацукоў мужчынскага полу атрымалі двухбаковыя настоі альбо налоксона (10 мкг / мкл на паўшар'е; 0.5 мкл аб'ёму, раствараюць у 0.9% фізіялагічнага раствора) або фізіялагічнага раствора (0.5 мкл на паўшар'е). Двухбаковыя микроинъекции ўводзілі з хуткасцю патоку 0.5 мкл / мін на працягу 1 хвіліннага інтэрвалу з наступным дадатковым 1 мін з канюлю ін'екцыйнай застаецца на месцы для дыфузіі. Ін'екцыі канюля затым замяняюць фіктыўную канюлю і пылаахоўны каўпачок. Праз адну тыдзень пасля таго, як у апошні дзень спарвання (дзень тэставання), усе жывёлы ў пары яшчэ раз да эякуляцыі без інфузорыя налоксона ці фізіялагічнага раствора. Малюнак 3A акрэслівае эксперыментальны дызайн. Аналіз дадзеных праводзілі, як апісана ў сістэмным налоксона эксперыменту.

Катэтарызацыя хірургія.

Самцоў пацукоў анестэзуе внутрибрюшинной ін'екцыі (0.1 мл / кг) кетамін (0.87 мг / мл) і ксилазин (0.13 мг / мл), і змяшчаюць у стереотаксической апарат (Kopf Instruments). Двухбаковы накіравальныя 21 калібра канюля (пластмасы One) была зніжана праз маленькія адтуліны свердзела ў чэрапе ў мозг па кірунку да ВТУ ў -4.8 мм AP, ± 0.75 мм ML Ад галавы і -7.8 мм DV з верхняй частцы чэрапа ў адпаведнасці з Paxinos і Уотсан (2013), Канюлі былі забяспечаны з зубнымі акрылавым, які прылеплены да трох шрубам, устаноўленых у чэрап. Жывёлы давалі аднаўленчы перыяд 2 тыдня, і былі апрацаваны штодня для прывыкання да працэдур апрацоўкі і нагнятальнай, якія выкарыстоўваюцца падчас тэставання паводзін.

Канюля размяшчэнне праверка.

Размяшчэнне канюлі было абследавана з дапамогай TH-імунны, каб пацвердзіць ВТ быў дакладна мэтанакіраваным. Толькі жывёлы з належнымі размяшчэнні былі ўключаныя ў аналізе (памерах апошняй групы: дасведчаны солевы раствор n = 8; дасведчаны налоксона n = 6). Тры дадатковыя жывёлы, якія атрымлівалі інтра-Vta налоксона ін'екцыі, накіраваную за межамі ВТА былі згрупаваны разам у «прапушчанай» ін'екцыі групы. Прапусціў групы аналізавалі паасобку, каб служыць у якасці анатамічных элементаў кіравання і Манна-Уітні U тэст быў выкарыстаны для параўнання паводзін на канчатковы дзень тэставання з налоксона і апрацаваных солевым растворам вопытных мужчын.

Спарванне-асацыяваная кантэкстная кі-індукаваныя экспрэсія Perk

Эксперыментальны дызайн.

Ўздзеянне клеткі, у якіх самцы набылі вопыт спарванне было паказана, каб выклікаць актывацыю MOR ў ВТА і нейронавай актыўнасці ў VTA і NAC (Бэлфур і інш., 2004). Такім чынам, серада спарвання служыць умоўным кіем Predictive сэксуальнай ўзнагароды. Цяперашні даследаванне праверыла, ці сапраўды патрабуецца актывацыя МОР падчас палавога вопыту для наступнай кандыцыянаванага кія-індукаваны актывацыі нервовай. Налоксона або фізіялагічны раствор ўводзіў сістэмна (внутрибрюшинно) 30 мін перад размяшчэннем у спалучаныя арэне і ўвядзеннем ўспрымальнай самкі для спарвання (дасведчанага), ці перад маніпуляцыяй кіравання складаліся размяшчэння ў апрацоўцы клеткі без прад'яўлення самкі (нейтральнага навакольнае асяроддзе; наіўная). Такім чынам, былі створаны чатыры эксперыментальных груп: Наіўныя Сала, Наіўнае Nlx, Exp Sal ​​і Exp Nlx. Праз тыдзень пасля заключнай сесіі спарвання, паловы жывёл у кожнай групе былі падвергнуты спалучаныя клетку (Exp мужчына: секс-асацыіраваны кандыцыянерам кіяў) або апрацоўка клеткі (наіўныя мужчыны: nonsalient / нейтральныя сігналы), у той час як іншая палова не падвяргаюцца ўздзеянню любыя сігналы, і замест таго, каб заставаліся ў хатніх клетках (для вызначэння базавай экспрэсіі Perk). Гэтая эксперыментальная парадыгма вытворчасць 8 групы: Наіўны Sal-No Cue, Наіўны Sal + CUE, Наіўны NLX-No Cue, Наіўны Nlx + CUE, Exp Sal-No Кью, Exp Sal ​​+ CUE, Exp NLX-No Кью, Exp NLX + Cue (n = 4 кожны, акрамя наіўнага NLX-Няма Кью, n = 3). Жывёлы перфузировались 10-15 мін пасля ўздзеяння кія. Кантрольныя жывёлы былі выдалены з іх клеткі і ўліваюць адначасова.

Immunohistochemistry.

Былі праведзены Секционирование і імунагістахіміі, як апісана вышэй. Тут мы выкарыстоўвалі трусам поликлональных антыцелаў супраць p42 і p44 МАР-киназ ERK1 і ERK2 (Пярко; 1: 4 000; Cell Signaling Technology). Першаснае антыцела было шырока ахарактарызаваны ў літаратуры (Roux і Blenis, 2004; Мэрфі і Blenis, 2006; Frohmader і інш., 2010b). Акрамя таго, пропуск першаснага антыцелы прадухіліць усе иммунореактивность і Вестэрн-блот-аналіз тканіны мозгу пацукоў паказалі дзве паласы ў адпаведных малекулярных вагаў.

Аналіз дадзеных.

Perk-иммунореактивный (-ИК) клеткі падлічвалі ў шэрагу абласцей галаўнога мозгу з дапамогай камеры Lucida малюнак трубкі, прымацаваныя да Leica DMRD мікраскоп: NAc [ядро (З) і абалонкі (S); 400 × 600 мкм; медыяльнай префронтальной кара галаўнога мозг; MPFC; вобласць пярэдняй часткі пасавай звіліны (АС); прелимбальной кары галаўнога мозгу (ЛП); infralimbic кары галаўнога мозгу (ІЛ); 600 × 800 мкм кожнага], хвастатая-шкарлупіна (CP; 800 × 800 мкм), і базолатеральное міндалепадобных цела (BLA; 900 × 1200 мкм; Бэлфур і інш., 2004; Frohmader і інш., 2010b; Збаны і інш., 2010b). Дзве секцыі былі падлічаны ў вобласці мозгу і лік клетак у стандартных абласцях аналізаў былі затым разлічваюць як колькасць клетак на мм2, Два адлікі былі усярэдненыя на адно жывёла для разліку групавых сродкаў. Група ў сярэднім у межах сэксуальна вопытных або наіўных груп параўноўвалі з дапамогай двухбаковай ANOVA [фактары: медыкаментознае лячэнне (Nlx або SAL) і кі (кі ці не кі)], а затым Постфактум параўнання з выкарыстаннем тэстаў сум Holm-Сидаке або Манна-Уітні, дзе адпаведныя з узроўнем значнасці p <0.05. У абалонцы NAc у сэксуальных жывёл назіралася моцная тэндэнцыя да значнасці фактараў, і, такім чынам, былі праведзены парныя параўнанні для параўнання толькі груп фізіялагічнага раствора (Sal-No Cue) і фізраствора (Sal + Cue).

Малюнка.

Лічбавыя выявы былі атрыманы з дапамогай ПЗС-камеры (Macrofire, Optronics), прымацаванай да Leica мікраскоп (DM5000B) з наладамі фіксаваных камер. Выявы былі імпартаваныя ў праграмнае забеспячэнне Adobe Photoshop 9.0. Малюнкі не былі зьменены якім-небудзь чынам для рэгулявання яркасці і кантраснасці, за выключэннем.

Вынікі

Пол вопыт індукаваных змены ў клетках допаміна ВТА

Палавой вопыт прывёў да зніжэння памеру ВТА допаміна сомы (Мал. 1А-С). Палавой вопыт значна памяншаецца плошча і перыметр сомы ВТА TH-IR клетак (плошча: F(1,31) = 23.068, p <0.001; перыметр, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Быў таксама галоўны значны ўплыў часу (плошча: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; перыметр, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) і значнае ўзаемадзеянне паміж вопытам і часу (плошча: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; перыметр, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Парныя параўнання паказалі, што плошча і перыметр TH-IR клетак былі значна зніжаны 1 і 7 д пасля таго, як у апошні дзень сэксуальных паводзін у сэксуальна вопытных жывёл у параўнанні з сэксуальна наіўных кантролю [Мал. 1B, Плошча: p = 0.002 (1 г), p <0.001 (7 дзён); C, Перыметр: p = 0.009 (1 г), p <0.001 (7 дзён)]. Эфект сэксуальнага паводзін рассейваўся, калі за ім надыходзіў перыяд ўстрымання ад узнагарод, калі памер сомы TH-IR нейронаў вяртаўся да зыходнага ўзроўню 31 д пасля апошняга сеансу спарванняМал. 1B, Плошча: p = 0.798; C, Перыметр: p = 0.785). Пол вопыт індукаваных змены не былі выяўленыя ў круглявасці на любым з часовых кропак (Мал. 1D). ВТ допаміна сома памяншэнне памеру не залежыць ад штодзённых сеансаў спарвання, як вопыт спарвання на працягу пяці раз у два тыдні сесій сопрягаемых таксама вырабіў памер паменшаны ВТ допаміна сома (Мал. 2A,B, Е-Н, Плошча: p = 0.004; перыметр: p <0.001). Наадварот, сэксуальны вопыт не ўплывае на памер TH-IR сомы ў чорнай субстанцыі (Мал. 2C, I-J, Плошча: p = 0.13; перыметр: p = 0.16), ні зменены памер сомы ў бліжэйшых ВТА ня-TH-IR нейронаў (Мал. 2D, Е-Н, Плошча: p = 0.46; перыметр: p = 0.45).

Малюнак 1. 

Эндагенныя Опіоідные індукаваных змены памеру сомы нейронаў допаміна ВТУ. A, Характэрныя ладу нейронаў допаміна ВТА ад сэксуальна наіўных і вопытных жывёл, якія паказваюць памяншэнне памераў сомы 7 я пасля заключнай сесіі спарвання. Шкала бар, 5 мкм. Колькасныя дадзеныя, якія паказваюць, што сэксуальны вопыт (Exp чорныя палосы) выклікалі значнае памяншэнне плошчы (B; у мкм2) І перыметр (C; у мкм) клеткі допаміна ВТА, 1 г (наіўнай, Exp; n = 6) і 7 д (Наіўныя, n = 5; вопыт, n = 6), але не 31 д (наіўны, n = 6; вопыт, n = 8) пасля канчатковага спарвання, у параўнанні з сэксуальна наіўным кантролем (наіўнымі, белымі палосамі). Плошча была зніжана да 84% у дасведчаных мужчын у параўнанні з кантрольным пры наіўных 1 або 7 в. Перыметр быў скарочаны да 91.6 і 90% у вопытных групах па параўнанні з кантролем на 1 і 7 г адпаведна. Там не было ніякага эфекту на круглявасці (D). Гэтая клетка допаміна пластычнасць ў вобласці (E) І перыметр (F) Перашкодзілі налоксона (NLX, n = 8), але не фізіялагічны раствор (Sal, n = 7) лячэнне падчас спарвання, 7 д пасля заключнай сесіі спарвання ў параўнанні з сэксуальна наіўным кантролем (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM; * Паказвае на значную розніцу ў параўнанні з сэксуальна наіўных штурвалам ў той жа дзень (B, C) Або ў параўнанні з фізіялагічным растворам апрацоўваюць сэксуальна наіўных кантролю і налоксона апрацаваных сэксуальна вопытных мужчын (E, F).

Малюнак 2. 

Палавой досвед не памяншаўся памер сома ў чорнай субстанцыі нейронаў допаміна або nondopamine нейронаў VTA. ВТ TH-ВК вобласць нейрон сомы (A; у мкм2) І перыметр (B; у мкм) у сэксуальна наіўным (белым) і вопытных (чорных) жывёл, назапашаных вопыт скрыжавання два разы на тыдзень, а не на працягу наступных дзён. Чорная субстанцыя TH-ВК вобласць сомы (C) І ВТ ня-TH-ВК вобласць сомы (D) Сэксуальна наіўных (белы) і вопытныя (чорныя) жывёлы. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM; * Паказвае на значную розніцу ў параўнанні з сэксуальна наіўных кантролю. Тыповыя выявы, якія паказваюць TH-ВК (карычневы) нейроны ў ВТЕ сэксуальна наіўнага (E), І дасведчаны (F) Мужчыны. G, H, Больш высокае павелічэнне выява нейрона паказана стрэлкай у E і F адпаведна. Нисслит афарбаваныя нейроны паказаны сіні колер у гэтых малюнках. Тыповыя выявы, якія паказваюць TH-IR нейронаў у SN сэксуальна наіўным (I) І вопытных (J) Мужчыны. Маштабныя бары: E-J, 20 мкм.

Пол памяншэнне вопыту індукаванага памеру сомы нейронаў допаміна ВТ залежыць ад актывацыі рэцэптара Опіоідные

Памяншэнне ВТ допаміна нейроны памеру сома, выкліканае сэксуальным вопыт было блакаваны неселективным антаганіст MOR налоксона, уведзены перад кожнай спалучаныя сэсіяй. Лячэнне налоксона перад спарваннем сесій аказалі значны ўплыў на вобласці (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) і адхіляліся ў бок значнага эфекту па перыметры (F(1,22) = 2.892, p = 0.052). Значнае ўзаемадзеянне паміж вопытам і лячэннем налоксона было знойдзена для зоны (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) і перыметр (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Парныя параўнання паказалі, што сэксуальны вопыт у апрацаваным солевом растворы жывёл значна памяншаецца плошча і перыметр ВТ дофаміновых нейронаў 7 я пасля апошняй сесіі спалучаныя ў параўнанні з апрацаваным солевым растворам сэксуальна наіўных мужчынамі (Мал. 1E, Плошча: p = 0.018; F, Перыметр: p = 0.007). У адрозненні ад гэтага, сэксуальна вопытных налоксона апрацаваных жывёл не адрозніваліся ад налоксона апрацаванага наіўных мужчын (Мал. 1E, Плошча: p = 0.483; F, Перыметр: p = 0.330). Акрамя таго, памер самы вопытных засоленых жывёл быў значна зменшыўся ў параўнанні з вопытнымі жывёламі налоксона (Мал. 1E, Плошча: p = 0.002; F, Перыметр: p = 0.002). Гэты эфект налоксона быў спецыфічным для сэксуальнага вопыту, так як лячэнне налоксона сам па сабе не ўплывае на TH-IR памеру вочка сомы ў сэксуальна наіўных налоксона апрацаваных мужчын у параўнанні з апрацаваным солевым растворам кантролю (Мал. 1E,F). Больш за тое, гэты эфект налоксона па памяншэнні памеру сомы вопыту індукаваных не з-за ўздзеянне налоксона на сексуальных паводзінах, як і паводзіны спарвання істотна не адрознівалася паміж naloxone- і апрацаваным солевым растворам самцамі, на працягу больш доўгага часу, каб ініцыяваць спарванне пасля эякуляцыі, за выключэннем (пасля інтэрвалу эякуляцыі) у налоксона апрацаваных самцоў падчас першай і пятай сесіі спалучаныя (p = 0.03 і p = 0.004, адпаведна). Абодва saline- і налоксона апрацаваныя самцы спарваліся да эякуляцыі падчас кожнага з пяці шлюбных сесій.

Палавая вопыт індукаваны талерантнасць ўзнагароды марфіну

Наступствы сэксуальнага вопыту па VTA памеру допаміна сомы па дзеянні ПВЗ ў ВТА аналагічныя тым, якія паведамілі на экзагенныя апіяты (Sklair-Tavron і інш., 1996; Русо і інш., 2007). Такім чынам, было выпрабаванае, ці ўплывае натуральная ўзнагарода індукаваных клетак ВТА допаміна пластычнасць ўзнагароды за опиатный марфін. Сапраўды, сэксуальны вопыт выклікаў талерантнасць ўзнагароды марфіну, падобную на наступствы хранічных апіятаў (Русо і інш., 2007). Сэксуальна дасведчаныя мужчыны не ўдалося распрацаваць CPP для 0.5 мг / кг дозы марфіну; у той час, сэксуальна наіўныя мужчыны зрабілі ўтвараюць CPP для гэтай дозы, як паказана праводзіць большую колькасць часу ў марфін ў пары камеры ў параўнанні з камерай фізіялагічнага раствора ў пары падчас паста-тэсту (Мал. 3; p = 0.039). Абодва сэксуальна наіўныя і вопытныя групы правялі значна большую колькасць часу ў марфін ў пары камеры ў параўнанні з фізіялагічным растворам ў пары камеры з больш высокімі дозамі марфіну: 5.0 мг / кг (Мал. 3; наіўны: p = 0.029; досвед: p = 0.012) і 10.0 мг / кг (Мал. 3; наіўны: p <0.001; Вопыт: p = 0.002).

Малюнак 3. 

Наступствы сэксуальнага вопыту на ўзнагароду марфін. Часы, праведзеныя ў saline- (Sal) або morphine- ў пары (Мор; 0.5, 5 або 10 мг / кг вагі цела) камеры падчас пост-тэсту ў сэксуальна наіўным (Наіўныя, n = 10-13) або дасведчаны (Вопыт, n = 9-13) мужчын. Дадзеныя прадстаўлены як сярэдняе ± SEM; * Паказвае на значнае адрозненне ў параўнанні з Sal-парнага камеры ў тых жа жывёл. NS, не мае істотнага значэння.

Пол вопыт індукаванага палёгку паводзін спарвання залежыць ад актывацыі рэцэптара Опіоідные

Атрыманыя вынікі да гэтага часу паказваюць, што ИАП дзейнічаючы ў ВТЕ падчас 5 штодня кароткія злучаныя сеансаў выклікаюць пластычнасць нейронаў допаміна ВТА, які падобны на наступствы хранічнага марфіну або гераін самакіравання (Русо і інш., 2007; Мазяў-Робінсан і інш., 2011). Мы выказалі здагадку, што VTA зніжэнне допаміна сома памер мае вырашальнае значэнне для навучання і ўзнагароды спецыяльна для сэкс-вопыт-індукаваны палягчэння сэксуальнага паводзінаў з пункту гледжання матывацыі і прадукцыйнасці. Гэтая гіпотэза была праверана шляхам блакавання Mor з дапамогай налоксона падчас спарвання і вывучэння ўплыву на палягчэнні сэксуальных паводзінаў, выкліканае сэксуальным вопытам на працягу пяці штодзённых сопрягаемых сесій. Дадзеныя прадстаўлены ў Малюнак 4 для першых і пятае сесій у адказ толькі, паколькі гэта дадзеныя, якія лепш за ўсё ілюструюць вопыт індукаванага палягчэння шлюбных паводзінаў. Акрамя таго, доўгатэрміновыя эфекты лячэння налоксона падчас сеансаў сопрягаемых выпрабаваныя на змесце вопыту індукаванага палягчэння паводзін спарвання, падчас фінальнага тэсту спалучаныя 1 тыдні пазней. Малюнак 4A паказвае эксперыментальную канструкцыю. Быў значны асноўны эфект спалучаныя сесіі па ўсіх параметрах сэксуальнага паводзінаў (мантавання латэнтнасці: F(2,55) = 11.286, p <0.001; затрымка ўвядзення: F(2,55) = 8.767, p <0.001; Затрымка эякуляцыі: F(2,55) = 10.368, p <0.001) і лячэнне налоксонам на латэнтных этапах (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) і ўпуск (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Парнае параўнанне паказала, што лячэнне налоксона ўплывае на сэксуальнае паводзіны падчас першай сесіі спарвання, таму што налоксона жывёлы мелі значна больш працяглыя затрымкі ў першай мантыроўкі (p = 0.002) і ўпуск (p = 0.002) у параўнанні з солевым кіраваннем на першы дзень ношкі. Гэты эфект налоксона на пачатковым сексуальных паводзінах быў аціх сэксуальным вопыт і не назіраецца ў любым з наступных сесій спалучаных (Табліца 1). Акрамя таго, увядзенне налоксона перад кожным з пяці шлюбных сесій не перашкодзіла першапачатковае палёгку сэксуальнага паводзінаў з сэксуальным вопытам. У адпаведнасці з ўзмацняюць эфектамі сэксуальнага вопыту, апрацаваных солевым растворам самцы экспануюцца зменшыліся латэнтнасці для мантавання (Мал. 4B; p = 0.032) ўпуск (Мал. 4C; p = 0.033) і семявывяржэння (Мал. 4D; p <0.001) падчас пятага шлюбнага сеансу ў параўнанні з першым шлюбным сеансам, які паказваў на палягчэнне сэксуальных паводзін. Сапраўды гэтак жа ў мужчын, якія атрымлівалі лячэнне налоксонам, выяўляліся значна меншыя затрымкі ў мантажы (Мал. 4B; p <0.001), інтрамісія (Мал. 4C; p <0.001), і эякуляцыя (Мал. 4D; p = 0.017) на пятым у параўнанні з першым днём. Акрамя таго, налоксона апрацаваных самцы не адрозніваюцца ад салёнага кантролю ў любым з затрымак падчас пятай сесіі спарвання.

Малюнак 4. 

Эндагенныя опіоіды гуляюць вырашальную ролю ў вопыце індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў. A, Эксперыментальны дызайн. B-DПараметры сэксуальнага паводзінаў у мужчын, якія атрымлівалі фізіялагічны раствор (Sal, белыя палос, n = 11) або налоксона (NLX; чорныя палосы, n = 12) з сістэмным увядзеннем. Прыведзеныя дадзеныя з'яўляюцца затрымкі для мантавання (B; секунды), ўпуск (C; секунд), і (семявывяржэнняD; сек) у дні 1 і 5 пяці паслядоўных дзён спарвання. Акрамя таго, дадзеныя прадстаўлены для канчатковага тэсту спалучаныя, 7 я пасля пятай сесіі спарвання. Дадзеныя прадстаўлены ў выглядзе сярэдняга значэння ± SEM; + Паказвае на значную розніцу паміж дзён 1 і 5 на працягу лячэння; * Паказвае на істотную розніцу паміж тэставымі і дня 5 ў лячэнні; # Паказвае на істотную розніцу паміж налоксона і солевых груп на працягу дня.

Паглядзець гэтую табліцу: 

Табліца 1. 

ўвядзенне налоксона да спарвання павялічылася латэнтнасьць для мантажу і ўпуск толькі на першы дзень ношкі

У адрозненні ад гэтага, лячэнне налоксона падчас палавой сесіі вопыту зрабіла парушыць ўтрыманне вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў на канчатковы тэст спарвання дня. Дзень выпрабавання праводзілі 7 й пасля заключнай сесіі спарвання пры адсутнасці ін'екцыі налоксона. Солевыя апрацаваныя самцы кіравання адлюстровываюцца чаканым вопытам індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў. У прыватнасці, латэнтнасьць мантаваць, ўпуск, і эякуляцыя не адрознівалася паміж пятай сэсіяй спалучаныя і заключным днём выпрабаванняў (Мал. 4Б-Д). У той час як налоксона апрацаваных самцы паказалі значнае павелічэнне латэнтнасці мантавання (Мал. 4B; p = 0.033), ўпуск (Мал. 4C; p = 0.036) і семявывяржэння (Мал. 4D; p = 0.049) на дзень тэставання ў параўнанні з пятай сесіі спарвання. Акрамя таго, былі знойдзеныя на дзень выпрабаванняў налоксона жывёл, значна больш павольна, чым апрацаваных солевым растворам мужчын, як паказана на больш працяглыя затрымкі для мантавання (Мал. 4B; p = 0.017) і ўпуск (Мал. 4C; p = 0.043). Такім чынам, лячэнне налоксона блакавала абслугоўванне, але не пачатковае, развіццё вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў. Гэтыя дадзеныя паказваюць на важную ролю для ЭОП-індукаваны VTA допаміна нейронаў пластычнасцю на доўгатэрміновае выраз ўзмацнення натуральнага паводзін узнагародай.

Некалькі дадатковыя кантрольныя эксперыменты былі праведзены, каб вызначыць, што эфекты апіоідаў блакады рэцэптараў на страты доўгатэрміновага ўзмацнення сэксуальных паводзінаў адбыліся не залежаць ад адсутнасці ўвядзення налоксона на канчатковае выпрабаванне спарвання дня (Мал. 5A,B), Былі спецыфічнымі да страты доўгатэрміновай перспектыве, але не кароткатэрміновае ўтрыманне палягчэння спарвання (Мал. 5E,F), Не былі выкліканыя уздзеяннем штодзённай налоксона ў адзіночку (Мал. 5C,D), І не былі выкліканыя стратай сэксуальнага ўзнагароджання ў налоксона апрацаваных самцоў (Мал. 5G,H). Па-першае, каб паказаць, што змененае сэксуальнае паводзіны на цесцю канчатковага спалучаныя не з-за адсутнасці налоксона, альбо налоксона або фізіялагічны раствор ўводзілі на заключным спалучаныя дзень выпрабаванняў на жывёл, якія атрымлівалі Спарванне ў пары з налоксона у той час як яны атрымалі сэксуальны досвед (Мал. 5A). Быў значны асноўны эфект спарвання дня на латэнтнасьць мантавання (Мал. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) і ўпуск (Табліца 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Там не было асноўнага эфекту спалучаныя дня затрымкі эякуляцыі (Табліца 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Аналагічна апісанаму вышэй, лячэнне налоксона падчас спарвання не ўплывае на палёгку сэксуальнага паводзінаў на працягу першых пяці сесій сэксуальнага вопыту. Абодва груп (saline- і налоксона апрацаваных груп, як вызначана шляхам апрацоўкай атрыманай у ходзе выпрабаванні канчатковага спалучаныя; абодва атрымалі налоксона падчас спарвання) прадэманстравалі палегчана сэксуальнае паводзіны ў дзень у параўнанні з 5 дня 1 і паказалі значна больш кароткія затрымкі спачатку змантаваць (Мал. 5B; солевы раствор: p = 0.033; налоксона: p = 0.014) і ўпуск (Табліца 2; солевы раствор: p = 0.034; налоксона: p = 0.026). Жывёлы, якія атрымлівалі альбо налоксона або фізіялагічны раствор на фінальным тэст спарвання дзень было больш доўгія затрымкі для мантавання (Мал. 5B; солевы раствор: p = 0.018; налоксона: p = 0.029) і ўпуск (Табліца 2; солевы раствор: p = 0.019; налоксона: p = 0.020) у параўнанні з пятым днём вопыту спарвання. Такім чынам, увядзенне налоксона або фізіялагічны раствора на дзень выпрабаванні непасрэдна перад спарваннем не ўплывае на эфект лячэння налоксона падчас сэксуальных сесій вопыту і паслаблення доўгатэрміновага палягчэння сэксуальнага паводзінаў было ідэнтычна таго, што паказана на жывёл, якія не атрымлівалі якія-небудзь ін'екцыі на фінальным тэст спарвання дня (Мал. 4).

Малюнак 5. 

Эндагенныя опіоіды маюць важнае значэнне ў доўгатэрміновай экспрэсіі вопыту індукаваных палягчэння сэксуальнага паводзінаў. A, Эксперыментальны дызайн для эксперыменту з эфектам лячэння NLX на дзень выпрабаванняў. B, Маунт затрымка па днях 1 і 5 пяці паслядоўных дзён спарвання і канчатковае выпрабаванне спарвання дня (тэст) пасля фізіялагічнага раствора (шэрага) або налоксона (чорная) ін'екцыі. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM. * Паказвае на істотную розніцу паміж дзённым і 1 дзень 5 на працягу лячэння. # Ўказу на істотную розніцу паміж тэставым днём і Днём 5 на працягу лячэння. C, Эксперыментальны дызайн для эксперыменту, каб праверыць эфект налоксона толькі папярэдняй апрацоўкі без сэксуальнага вопыту на шлюбныя паводзіны. D, Маунт затрымка на фінальным тэст спарвання дня, 7 дзён пасля 5 дзён фізіялагічнага раствора або ін'екцыі налоксона ў адсутнасці спарвання. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM. E, Эксперыментальны дызайн для эксперыменту, каб праверыць, ці ўплывае лячэнне налоксона кароткачасовы паказ палегчанай сэксуальнага паводзінаў у сэксуальна вопытных жывёл. F, Гара затрымка на дзень 1 дзень і 5 з пяці паслядоўных дзён спарвання і канчатковага выпрабавальнага спарвання дня, 1 дня за дзень 5 ў прысутнасці солевага раствора (шэрая) або налоксона (чорная) ін'екцыя. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM. * Паказвае на істотную розніцу паміж дзённым і 1 дзень 5 на працягу лячэння. G, Эксперыментальны дызайн для эксперыменту, каб праверыць заблякаваны Ці лячэнне налоксона на карысныя эфекты сэксуальнага паводзінаў. H, Час, праведзенае ў спалучаныя парнага камеры (у секундах), на працягу папярэдняга цеста (белы) і пост-тэст (чорны) для жывёл, якія атрымліваюць альбо налоксона або фізіялагічны раствор да спарвання. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM; * Паказвае на значную розніцу ў параўнанні з папярэдняй праверкі.

Паглядзець гэтую табліцу: 

Табліца 2. 

Дадзеныя, паказаныя на латэнтных интромиссии і эякуляцыі (секунды) ад кантрольных эксперыментаў, праведзеных, каб вызначыць, што эфекты блакады MOR на стратах доўгатэрміновага ўзмацнення сэксуальных паводзінаў адбыліся не залежаць ад адсутнасці ўвядзення налоксона на канчатковы тэст спарвання дня

Для таго, каб вызначыць, ці было гэта налоксона лячэння, калі ў пару з сэксуальным вопытам і не паўтараюцца, каб налоксона сам па сабе, што выклікала пагаршэнне сэксуальнага паводзінаў 7 д пасля апошняй апрацоўкі, сэксуальна наіўныя жывёлы атрымлівала альбо пяць штодзённыя ін'екцыі налоксона або засоленыя ін'екцый да канчатковага тэсту спарвання 7 d пазней (Мал. 5C). Ніякіх істотных адрозненняў не было выяўлена якога-небудзь параметру спарвання паміж солевым растворам і налоксона папярэдне апрацаванай групы (Мал. 5D; мацаванне затрымкі; ўпуск латэнтнасьць: фізіялагічны раствор 139.7 ± 40.3 супраць налоксона 121.83 ± 42.55; эякуляцыя затрымка: солевы 887.9 ± 70.0 супраць налоксона 1050.8 ± 327.31). Гэтыя вынікі указуют на тое, што толькі налоксона не з'яўляецца дастатковым, каб змяніць наступнае сэксуальнае паводзіны, падобнае на адсутнасць эфектаў налоксона ў адзіночку на VTA допаміна нейронаў пластычнасці.

Мы мяркуем, што лячэнне налоксона падчас набыцця сэксуальнага вопыту парушае доўгатэрміновае выраз палавога вопыту індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў. Каб праверыць гэта далей, эфекты лячэння налоксона падчас спарвання былі пратэставаныя на наступнае сэксуальнае паводзіны падчас канчатковага выпрабаванні спарвання, якое было праведзена толькі 1 д пасля апошняга спарвання (эксперыментальны дызайн; Мал. 5E). Быў значны асноўны эфект спалучаныя дня на гары (Мал. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) і затрымкі ўвядзення (Табліца 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Асноўнага ўплыву дня на затрымку эякуляцыі не было (Табліца 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Аналагічна апісанаму вышэй, усе мужчыны (нягледзячы на ​​засоленых або налоксона лячэння) паказаў палёгку сэксуальнага паводзінаў на працягу пяці сесій сэксуальнага вопыту, названых значна меншай латэнтнасці для мантажу (Мал. 5F; солевы раствор: p = 0.002; налоксона: p = 0.018) і ўпуск (Табліца 2; солевы раствор: p = 0.006; налоксона: p = 0.009) у дзень 5 у параўнанні з днём 1. Аналагічным чынам, палягчаецца сэксуальныя паводзіны было прадэманстравана на тэст дзень у параўнанні з днём 1, пазначаным значна больш кароткімі латэнтнымі для мантавання (Мал. 5F; солевы раствор: p = 0.001; налоксона: p = 0.020) і ўпуск (Табліца 2; солевы раствор: p = 0.004; налоксона: p = 0.009). Што яшчэ больш важна, лячэнне налоксона падчас спарвання не аказвае істотны ўплыў на вопыт сэксу індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў пры выпрабаванні 1 д пасля сэксуальнага вопыту, незалежна ад лячэння налоксона на гэта апошнім тэсту-спарвання дзень.

Нарэшце, мы выпрабавалі магчымасць таго, што паслабленне ўздзеяння налоксона на працяглы выраз палягчанага сэксуальнага паводзін звязана з блакавальным уздзеяннем налоксона на карысныя ўласцівасці сэксуальнага паводзін. Аднак налоксон, уведзены непасрэдна перад спарваннем, не змяніў фарміраванне СРР для спарвання (Мал. 5G), Мяркуючы, што лячэнне налоксона не змяняў сэксуальнае ўзнагароджанне. Абодва saline- і налоксона апрацаваных груп утворыцца значнае CPP за сэксуальнае паводзіны, як паказана за кошт значнага павелічэння часу знаходжання ў камеры полу ў пары (Мал. 5H; солевы раствор: p = 0.038; налоксона: p = 0.002) падчас пост-тэсту па параўнанні з папярэдняй праверкі. Таму, налоксона не аказвае сваё згубнае ўздзеянне на падтрыманне палегчанага сэксуальных паводзінаў, блакуючы ўзнагароджанне, звязанае з сэксуальнымі паводзінамі.

Палёгку сэксуальнага паводзінаў залежыць ад ПРН дзеянні ў ВТА

Для таго, каб пацвердзіць, што EOP акт канкрэтна ў ВТА, каб выклікаць доўгатэрміновае палёгку сэксуальных паводзінаў, эксперыментальны дызайн выкладзены ў Малюнак 3A быў паўтораны з інтра-ВТУ налоксона інфузорыя, а не сістэмных ін'екцый. Вынікі былі ідэнтычныя сістэмнае ўвядзенне апісана вышэй. Быў значны асноўны эфект спарвання дня па ўсіх параметрах сэксуальнага паводзінаў (Мал. 6A, Усталяваць час чакання: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, Упускаючы латэнтнасці: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, Эякуляцыя затрымка: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) і ўнутры ВТ лячэнне налоксона на латэнтнасьць мантавання (F(1,33) = 7.345, p = 0.011) і ўпуск (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Intra-ВТ налоксона не перашкаджаў першапачатковага вопыт індукаванага палягчэння сэксуальнага паводзінаў падчас 5 д спарвання, як налоксона апрацаваных самцы паказалі, паменшыўся затрымкі для мантавання (Мал. 6A; p = 0.001), ўпуск (Мал. 6B; p <0.001), і эякуляцыя (Мал. 6C; p = 0.001) у дзень 5 у параўнанні з днём 1. Налоксона апрацаваных самцы не адрозніваюцца ад апрацаванага солевага раствора мужчын на пяты дзень ношкі ў любым з затрымак. Intra-ВТ лячэнне налоксона, як сістэмнае ўвядзенне, выкліканыя значна павялічылася мацаванне (Мал. 6A; p <0.001) і затрымкі ўвядзення (Мал. 6B; p <0.001) у першы дзень спарвання ў параўнанні з самцамі, якія атрымлівалі фізіялагічны раствор, чаго не назіралася падчас наступных сеансаў спарвання (падчас якіх самцы, якія атрымлівалі налоксон і солевы раствор, не адрозніваліся). Адным нечаканым назіраннем было тое, што ў гэтым эксперыменце ў мужчын, якія атрымлівалі солевы раствор, не было выяўлена статыстычна значнага палягчэння затрымкі мантажу альбо інтрамісіі (як было паказана ва ўсіх апісаных вышэй эксперыментах), і толькі на пяць дзён кароткая затрымка эякуляцыі была параўнальна з першай суткай. (фізраствор: p = 0.001).

Малюнак 6. 

Эндагенныя опіоіды ў ВТА опосредует вопыт індукаваных палёгку сэксуальнага паводзінаў і яе доўгатэрміновай эксплуатацыі. Сэксуальныя параметры паводзінаў для мужчын, якія атрымлівалі фізіялагічны раствор (Sal, белыя палосы, n = 8) або NLX (чорныя палосы, n = 6) з інтра-VTA ўвядзення. Прыведзеныя дадзеныя з'яўляюцца затрымкі для мантавання (A), Упускаючы (B), І эякуляцыя (C) Па днях 1 і 5 пяці паслядоўных дзён ношкі. Акрамя таго, дадзеныя прыведзены для канчатковага тэставага спарвання дня, 7 д наступнага дня 5 пры адсутнасці фізіялагічнага раствора або ін'екцыі налоксона. Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM; + Паказвае на значную розніцу паміж дзён 1 і 5 на працягу лячэння; * Паказвае на істотную розніцу паміж тэставымі і дня 5 ў лячэнні; # Паказвае на істотную розніцу паміж налоксона і Сал групамі на працягу дня. Схематычныя чарцяжы корональные секцый ВТУ (H, -4.60; I, -5.00; J, -5.25 Ад галавы) з указаннем месца ін'екцый ўнутры Vta для ўсіх жывёл у эксперыменце 5 (фізіялагічны раствор, белыя; налоксона, чорныя; Прапушчаныя, шэры), з дапамогай чарцяжоў шаблону з Swanson Brain Maps (Swanson, 2004). Канюлі былі двухбаковымі, але ін'екцыі сайты прадстаўленыя ў аднабаковым парадку для прастаты выкладу. пт, retroflexus пучка; ML, медыяльнай лемниск; SN, чорная субстанцыя.

Intra-VTA лячэнне naxolone блакавалі ўтрыманне палегчанага сэксуальнага паводзінаў назіраецца ў сэксуальна вопытных мужчын, падобных эфектаў сістэмнага налоксона. У прыватнасці, у заключны дзень выпрабаванняў налоксона апрацаванымі мужчыны мелі больш доўгія затрымкі для мантавання (Мал. 6A; p = 0.011), ўпуск (Мал. 6B; p = 0.010) і семявывяржэння (Мал. 6C; p = 0.015) у параўнанні з іх пятай сэсіяй спалучаныя і параўноўвалі з апрацаваным солевым растворам самцамі на заключным дзень выпрабаванняў (Мал. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). У адрозненні ад гэтага, апрацаваных солевага раствора жывёлы не адрозніваліся ў затрымках для мантавання і интромиссии паміж канчатковым тэставым днём і днём 5 ношкі. Гэтыя эфекты былі спецыфічныя для дастаўкі налоксона ў ВТ, а мужчыны з катэтэрызацыі сайтамі паблізу, але не арыентаваныя на ВТ (Мал. 6D; n = 3) адлюстроўваецца доўгатэрміновае палёгку сэксуальнага паводзінаў аналагічна апрацаванага солевага раствора кантролю (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 і істотна адрозніваюцца ў параўнанні з інтра-ВТ налоксона жывёламі на фінальны тэст спарвання дня (оды, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

Дзеянне ИАП патрабуецца для сэкс-асацыяванай ўмоўнай кія-індукаваны актывацыі нервовай

На падставе атрыманых дадзеных да гэтага часу, мы выказалі здагадку, што актывацыя ЭОПА ў ВТЕ падчас вопыту спарвання і наступнага VTA памяншэння памеру допаміна сомы маюць вырашальнае значэнне для атрыбуцыі стымулявання выпукласці да спалучаныя ўзнагароджання асацыяваных раздражняльнікаў і, такім чынам, падтрыманне палегчылі сэксуальнае паводзіны. Каб праверыць гэтую гіпотэзу, былі даследаваны эфекты блакавання Опіоідные рэцэптараў падчас спарвання вопыту на нейронавай актыўнасці, выкліканай наступным уздзеяннем умоўных кантэкстных сігналаў прагназавання сэксуальнага ўзнагароджання (сэкс-асацыіраваных сігналаў кантэкстных). Сэксуальна наіўныя жывёлы таксама былі схільныя сігналы навакольнага асяроддзя, але яны не былі звязаныя з папярэднім вопытам спарвання, такім чынам, былі нейтральныя сігналы. Нарэшце, базавыя ўзроўні Пярко былі вызначаныя ў сэксуальна вопытных і наіўных груп кантролю, якія засталіся ў хатніх клетках і не падвяргаюцца ўздзеянню якіх-небудзь падказак (-Не Cue). Пацвярджэнне і пашырэнне папярэдніх даследаванняў (Бэлфур і інш., 2004), Уздзеянне кантэкстных падказак, звязаных з папярэднім узнагародай сэкс значна павялічылася Пярко выраз у сэксуальна вопытных мужчын у NAC (Мал. 7) І MPFC (Мал. 8А-С), Але не выклікае актывацыю нейронаў у BLA (Мал. 8D) Ці CPU (дадзеныя не паказаныя). Былі асноўныя эфекты ўздзеяння кія ў ядры NAC (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), АС (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), і ЛП (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), а таксама лячэнне налоксона ў ў ядры NAC (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), АС (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), і ЛП (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Было значнае ўзаемадзеянне ў ядры NAC (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), АС (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), ЛП (F(1,12) = 8.235, p = 0.014) і IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Па-першае, спарванне асацыіраваных экспазіцыі Кью значна павялічыўся Пярко ў салёных апрацаваных сэксуальна вопытных жывёл (Exp Sal ​​+ CUE) у параўнанні з кантрольнай групай, якія не падвяргаліся ўздзеянню якіх-небудзь падказак і узятых з хатняй клеткі (Exp Sal-No Cue) у ядры NAC (Мал. 7A; p <0.001) і субрэгіёны mPFC ACA (Мал. 8A; p = 0.001), ЛП (Мал. 8B; p = 0.003) і IL (Мал. 8C; p = 0.029). У супрацьлегласці гэтаму, у фізіялагічным растворы, апрацаваны сэксуальна наіўныя жывёлы, ўздзеянне кантэкстуальную сігналаў, якія не былі звязаныя з сэксуальнай узнагародай, ня індукуе Perk ні ў адным з участкаў галаўнога мозгу (Наіўны Sal + CUE у параўнанні з наіўным Sal-Няма Cue; Мал. 7, 8), Дэманструючы, што індукцыя Perk з'яўляецца спецыфічным для ўздзеяння сэксуальнага вопыту-асацыіраваных сігналаў. Акрамя таго, сэксуальны вопыт у адзіночку не змяняе базавы Пярко выраз у любой з абласцей мозгу, так як не было ніякіх адрозненняў паміж групамі, якія былі ўзятыя з дома клеткі, няхай гэта будзе сэксуальна наіўных або вопыт, і якія атрымлівалі фізіялагічныя раствор ці налоксона.

Малюнак 7. 

Эндогенный Опіоіды дзеянне патрабуецца для нейронавай актывацыі ў NAc індукаванага сэксу-асацыяваныя рэплікамі умоўных. Колькасці Perk ВК клетак на мм2 у прылеглым ядры (ядроA) І абалонкі (B) Сэксуальна наіўных (белы) і вопытных (Exp, чорны) жывёл, якія былі папярэдне апрацаваную з сістэмным NLX або фізіялагічным растворам (Sal) падчас шлюбных сесій (Exp сабакам) або апрацоўкі сесій (Наіўныя мужчыны). Групы былі альбо падвяргаюцца кантэкстныя рэплікамі (CUE), якія былі ношкі-звязаныя сігналы ў Exp мужчын і нейтральныя сігналы ў наіўных жывёл, або ўзятыя з хатніх клетак (Няма Кью, з указаннем на адсутнасць Cue-пазнакі). Дадзеныя прадстаўлены ў выглядзе сярэдняга значэння ± SEM; * Паказвае на значную розніцу ў параўнанні з фізіялагічным растворам папярэдняй апрацоўцы не кіем, на якія рабіліся ўздзеяння кантролю (Naive Sal-No Cue і Exp Sal-No Cue); # Паказвае на значнае адрозненне ў параўнанні з Sal-апрацаванай Cue-Exp ўздзеянню групы (Exp Sal ​​+ CUE). Тыповыя малюнка Perk-IR клетак на мм2 у ядры NAc сэксуальна вопытных мужчын з Sal (C, D) Ці NLX (E, F), Якія былі альбо ўзятыя з хатняй клеткі (Няма Cue, C, E), або падвяргаюцца ўздзеянню спалучаныя-асацыяванага кантэкстнай сігналы (Cue; D, F). N = 4 кожная група, акрамя наіўнага NLX (Няма Cue), n = 3. пераменны ток, Пярэдняя спайка. Шкала бар, 100 мкм.

Малюнак 8. 

Эфекты налоксона на спарванне кія індукаваны экспрэсіі PERK ў іншых мэтавых рэгіёнах ВТА. Колькасці Perk ВК клетак на мм2 сэксуальна наіўны (белыя) і дасведчаны (Exp, чорны) жывёлы, якія былі папярэдне апрацаванымі з сістэмнай NLX ці фізіялагічнага растворам (Sal) падчас шлюбных сесій і былі схільныя кантэкстнага рэплікі (CUE) або клетку (не рэплік) у ПМА (A), ЛП (B), IL (C), І Л (D). Дадзеныя ўяўляюць сабой сярэдняе ± SEM; * Паказвае на значную розніцу ў параўнанні з фізіялагічным растворам папярэдняй апрацоўцы не кіем, на якія рабіліся ўздзеяння кантролю (Naive Sal-No Cue і Exp Sal-No Cue); # Паказвае на значнае адрозненне ў параўнанні з Sal-апрацаваных кі зведалі ўздзеянне палавым шляхам наіўных кіравання (Наіўныя Sal + CUE).

У пацвярджэнне нашай гіпотэзы, лячэнне налоксона падчас палавога вопыту значна саслабляецца Пярко індукцыі па падлозе, звязаныя рэплікам умоўных. ня Пярко выраз у гэтым налоксона апрацаваных кія падвергнутага ўздзеяння вопытных мужчын (Exp NLX + CUE) не адрознівалася ад зыходнага выразы Пярко ў любым з сэксуальна наіўных або вопытных кантрольных груп, узятых з хатніх клетак (Naive Sal-Няма Cue або Наіўны NLX- няма Cue). Акрамя таго, PERK выраз у налоксона апрацоўцы кі зведалі ўздзеянне вопытных самцоў (ЭКСПА NLX + CUE) была дакладна ніжэй у параўнанні з апрацаваных солевым растворам кі зведалі ўздзеянне вопытных жывёл (ЭКСПА Sal + CUE) у ядры NAC (Мал. 7A; p = 0.002) і MPFC подобластей (Мал. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

У абалонцы NAc, двухбаковы ANOVA аналіз не даюць статыстычна значныя эфекты фактараў ўздзеяння кі і лячэнне налоксона. Тым не менш, попарное параўнанне паказала, што ўздзеянне кі было выклікаць PERK ў солевы апрацаваным сэксуальна доследнай групе (ЭКСПА SAL + CUE) у параўнанні з не-кіем падвяргаецца Saline наіўных кантрольнай групы (Мал. 7B; ня Наіўны SAL-Няма Кью: p = 0.0163).

Абмеркаванне

Дадзенае даследаванне паказвае, што ИАП дзейнічаючы ў ВТЕ падчас сэксуальнага паводзінаў, натуральнае паводзіны ўзнагароды, выклікала трывалае, але кароткачасовае зніжэнне памеру сомы дофаміновых клетак ВТА. Памяншэнне памераў сомы не назіралася у ПТВ нейронаў ня-допаміна, ні ў дофаміновых нейронаў у суседняй чорнай субстанцыі, мяркуючы, гэта змяненне было спецыфічным для дофаміновых клетак ВТУ. Гэта допаміна пластычнасць ВТ з'яўляецца аналагічна індукаваным хранічным уздзеяннем апіятаў (Sklair-Tavron і інш., 1996; Русо і інш., 2007; Мазяў-Робінсан і інш., 2011) І выклікаў аналагічную талерантнасць да экзагенных апіатаў (марфін) ўзнагароджання. Мы паказалі, што VTA допаміна пластычнасць мае вырашальнае значэнне для доўгатэрміновага (тэхнічнага абслугоўвання), але не кароткатэрміновае (развіццё), ўзмацнення сэксуальных паводзінаў і ўзнагароды звязана кія-індукаваны актыўнасці нейронаў (Пярко) у ПТВ мэтавых рэгіёнах: НСС і MPFC. Гэтыя дадзеныя сведчаць аб ролі допаміна пластычнасці ВТА ў доўгатэрміновай экспрэсіі стымулявання выпукласці прыроднага ўзнагароджання прагназуюць сігналаў або ўзнагароджанне памяці.

Было добра вядома, што вынікі сэксуальнага вопыту ў палягчэнні наступнага сэксуальнага паводзінаў, у тым ліку больш хуткага пачатку да пачатку спарвання і павышэння прадукцыйнасці (Бэлфур і інш., 2004; Збаны і інш., 2010a,b, 2012). Гэта спрашчэнне або ўмацаванне сэксуальнага паводзінаў захоўваецца на працягу па меншай меры 28 г пасля спарвання (Збаны і інш., 2012). Акрамя таго, было паказаны, што сэксуальныя паводзіны і кандыцыянуюць сігналы прагназавання ўзнагароджання сэксу прычыны MOR інтэрналізацыі ў ВТЕ і выклікае актывацыю нейронаў на працягу мезолимбической сістэмы, у тым ліку ў ВТЕ (допаміна і nondopamine нейронаў), NAc, ПФ і BLA (Бэлфур і інш., 2004, 2006). Добра вядома, VTA дофаміна нейроны гуляюць важную ролю ў навучанні і прысваенні стымулюючай выпукласці ўзнагароджання асацыіраваных раздражняльнікаў (Берридж і Робінсан, 1998; Берридж і інш., 2009; Flagel і інш., 2011) І маюць вырашальнае значэнне для прагназавання ўзнагароджання (Schultz, 2010). Бягучыя вынікі пашыраюць на нашых ведах, дэманструючы, што ўзнагароджанне індукаваных VTA нейропластичность мае вырашальнае значэнне для выканання гэтых функцый, і залежыць ад актывацыі MOR па ПВЗ ў ВТА. У цяперашні час невядома, які ЭОП з'яўляецца MOR лиганда, які дзейнічае ў ВТЕ падчас мужчынскага сэксуальнага паводзінаў. Хоць абодва β эндарфіну і энкефалина ўдзельнічаюць у матывацыі стымулявання для харчовых падмацаванняў (Хейворд і інш., 2002), Гэта яшчэ трэба будзе ўсталяваць для мужчынскага сэксуальнага паводзінаў. Раней мы паказалі, што бэта-эндарфіну нейроны ня актывуюцца падчас спарвання, і не існуе павялічваецца ў мРНК РОМС; Такім чынам, мяркуючы, што бэта эндарфін не можа быць крытычным ИАП, які дзейнічае ў ВТА падчас спарвання (Дэвіс і інш., 2007). Гэта дофаміна пластычнасць VTA мае важнае значэнне для нейронавай актыўнасці ў MPFC, NAc і ВТЕ пасля ўздзеяння сэксуальных ўзнагароджання прагназавання экалагічных рэплік. Акрамя таго, ВТ допаміна пластычнасць мае вырашальнае значэнне для доўгатэрміновай экспрэсіі падвышанай ініцыяцыі і выканання сэксуальных паводзінаў. У супрацьлегласць гэтаму, ВТА нейропластичность выклікана сэксуальнага досведу не патрабуецца для гедонической адказу як пол ўзнагароджання (вызначаецца СРР) і кароткачасовага палягчэння сэксуальнай матывацыі і прадукцыйнасці (падчас сэксуальнага вопыту ці 1 д пазней) засталіся некранутымі, нягледзячы на ​​MOR блакады падчас спарвання (Mehrara і Baum, 1990). Замест гэтага, дадзеныя сведчаць аб тым, што ВТА ​​допаміна нейропластичность опосредует больш працяглы тэрмін (7 й пасля апошняга вопыту полу; Збаны і інш., 2012) Выраз «хоча» ўзнагарода сэксу і ўзрослыя на глебу адказы на зваротныя рэплікі (Мілер і Baum, 1987; Берридж і Робінсан, 1998).

У сэксе вопытныя жывёлы прадэманстравалі перакрыжаванае талерантнасць да ўзнагароджання марфіну, падобную да ўздзеяння колы бегу ў мышэй, іншае натуральнае паводзіны карыснага, эфект блакуецца з лячэннем налоксона (Lett і інш., 2001, 2002), І вызначана, што залежыць ад ВТА клетак допаміна пластычнасці (бягучыя высновы). Падобна прыродных заахвочванняў, неаднаразовае ўздзеянне апіятаў марфіну або гераіну прыводзіць да кароткачасовага скарачэнні памеру VTA допаміна сомы (Sklair-Tavron і інш., 1996; Спига і інш., 2003; Русо і інш., 2007; Мазяў-Робінсан і інш., 2011). Акрамя таго, ўздзеянне апіятаў з кароткімі перыядамі абстыненцыі выклікае талерантнасць ўзнагароджання, а замяшана больш высокімі дозамі прэпарата часу, неабходным для адукацыі ўзнагароджання асацыяцыі (Shippenberg і інш., 1987; Русо і інш., 2007), І выклікае самакіравальныя жывёла нагнятаць спажыванне наркотыкаў (Ахмед і інш., 2000; Уокер і інш., 2003). Такім чынам, EOP і снатворныя прэпараты дзейнічаюць на агульных нервовых субстратах для індукцыі талерантнасці ўзнагароджання падчас ранняга вываду, якія маглі б адлюстроўваць кампенсаторных механізм гомеастатычнага процідзейнічаць стымуляцыі шляхам шматразовага апрамяненнем (Кооб і Le Moal, 2005). У адрозненне ад гэтага, пры працяглым ўстрыманні опиатных наркотыкаў, талерантнасць аднаўляецца да адчувальнасці да ўзнагароджання уласцівасцях да прэпарата (Харыс і Aston-Джонс, 2003; Aston-Джонс і Харыс, 2004; Харыс і Gewirtz, 2004). Цікава, што сэксуальны вопыт з наступным сэкс абстынентнага перыяду 7-28 г было ўстаноўлена, прычынай крыжаванай сенсібілізацыі за ўзнагароджанне псіхостімуляторов (Збаны і інш., 2010a), Які залежыць ад спалучаныя-індукаваны экспрэсіі deltaFosB і актывацыі 1 дофаміновых рэцэптараў у NAC (Збаны і інш., 2013). Такім чынам, сэксуальны вопыт ўзнагароды выклікае адначасовую талерантнасць ўзнагароджанне апіятаў і психостимулирующее ўзнагароджанне алергію, хоць больш працяглы перыяд сэксу ўстрымання на талерантнасці ўзнагароджання марфін яшчэ трэба будзе праверыць. Мы пастуляваць, што гэтыя супрацьлеглыя эфекты на узнагародзе лекавага сродку можа быць апасродкаваны рознымі формамі пластычнасці нейронаў у розных галінах мезолимбической сістэмы: ВТА ИАП дзеянні і допаміна пластычнасць апасродкаванай талерантнасць ўзнагароды опиатной (бягучае даследаванне), тады як экспрэсія NAc deltaFosB кантралюе психостимулирующую сенсібілізацыю (Збаны і інш., 2013). Абодва гэтыя падзеі могуць спрыяць эскалацыі ўзяццем наркотыкаў (Ахмед і Кооб, 1998, 1999; Ахмед і інш., 2000, 2002, 2003; Уокер і інш., 2003).

Малекулярныя механізмы, з дапамогай якіх ЭОП ўплываюць на дофаміновых нейроны VTA падчас натуральнае паводзіны ўзнагароджанне застаецца невядомым. Шлях IRS2-Akt-mTORC2 з'яўляецца галоўным медыятарам памяншэння памераў сомы ў ВТЕ, выкліканы паўторным марфінам (Яворскі і інш., 2005; Русо і інш., 2007; Мазяў-Робінсан і інш., 2011). Паўторнае ўвядзенне марфіну індукаваныя змены ў памеры дофаміновых нейронаў у ВТА можна прадухіліць з дапамогай інтра-ВТУ інфузорыя мозгу нейротрофического фактару (BDNF; Sklair-Tavron і Нестлер, 1995). BDNF актывуе гэты шлях праз сігналізацыю (TrkBРусо і інш., 2007), Рэцэптар киназы з высокай аффинностью да BDNF і частка шляху IRS2-Akt (Seroogy і Гал, 1993; Ньюмэн і Seroogy, 1999), А таксама экспрессируется на допаміна і ГАМК нейронаў у ВТА. Падаўленне розных кампанентаў IRS2-Akt шляху з выкарыстаннем віруснага вектару пераносу ген тэхналогія імітуе эфекты хранічнага ўздзеяння апіятаў. Акрамя таго, эфекты апіятаў ўздзеяння могуць быць выратаваны шляхам аднаўлення гэтага сігнальнага шляху (Русо і інш., 2007) І залішняя экспрэсія кампаненты mTORC2 прадухіляе марфін-індукаваны VTA зніжэнне допаміна (сомуМазяў-Робінсан і інш., 2011). Такім чынам, папярэдняя праца вывучэння ўплыву хранічных апіятаў па памеры ВТА допаміна сомы паказвае, што марфін-індукаванага падаўленне шляху IRS2-Akt-MTOR з'яўляецца адначасова неабходным і дастатковым для гэтага эфекту (Мазяў-Робисона і Нестлер, 2012). Такім чынам, павабна выказаць здагадку, што эфекты сэксуальнага вопыту на дофаміна нейропластичности ВТА аналагічным чынам апасродкуецца BDNF і шляхам IRS2-Akt-mTORC2.

У заключэнне, дадзенае даследаванне паказала, што VTA Нейропластичность абумоўлена вопытам з натуральным паводзінамі ўзнагароджання, у прыватнасці, шляхам шматразовага мужчынскага сэксуальнага паводзінаў. У прыватнасці, ИАП дзейнічае ў ВТЕ, каб паменшыць памер допаміна сома, які гіпатэтычны быць звязаны з падвышанай нервовай узбудлівасцю і меншым выхадам допаміна, што прыводзіць да сістэмы hypodopaminergic, і змяняе мезолимбические сістэмы, што функцыянуюць у адказ на сігналы, якія з'яўляюцца прадказаннем сэксуальнага ўзнагароджання. Акрамя таго, ВТА нейропластичность мае вырашальнае значэнне для матывацыі стымулявання і ўзнагароджанне памяці, але не для гедонического ўздзеяння сэксуальнага паводзінаў. І, нарэшце, ВТ нейропластичность, выкліканы натуральным паводзінамі ўзнагароды за якім варта кароткім перыяд абстынентнага ўзнагарода ўзнагароджання ўплыву апіятаў і, такім чынам, можа паўплываць на ўразлівасць да развіцця наркаманіі.

зноскі

  • Паступіла ў студзені 12, 2014.
  • Рэдакцыя атрымала мая 17, 2014.
  • Прымаецца мая 20, 2014.

  • Гэта даследаванне было падтрымана грантамі ад Канадскага інстытута даследаванняў у галіне аховы здароўя ў БМО і натуральных навук і навукова-даследчы савета Інжынернага да ККПУ

  • Аўтары заяўляюць няма канкуруючых фінансавых інтарэсаў.

  • Перапіска павінны быць адрасаваныя да доктара Lique М. Coolen, Універсітэт Місісіпі медыцынскі цэнтр, Аддзел фізіялогіі і біяфізікі, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [электронная пошта абаронена]

Спасылкі

  1. ↵
    1. Agmo

    (1997) Мужчына пацук сэксуальнае паводзіны. Brain Res Brain Res Protoc 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Кооб GF

    (1998) Пераход ад умеранага да празмернага спажывання наркотыкаў: змяненне геданістычнай уставкой. навука 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Кооб GF

    (1999) Даўгавечнасць павелічэння уставкой для какаіну самакіравання пасля эскалацыі ў пацукоў. Психофармакология 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Уокер JR,
    3. Кооб GF

    (2000) ўстойлівае павышэнне матывацыі прымаць гераін ў пацукоў з гісторыяй эскалацыі наркотыкаў. Нейропсихофармакологии 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Kenny PJ,
    3. Кооб GF,
    4. Markou

    (2002) Нейробиологические доказы геданістычнай аллостазии, звязаныя з эскалацыяй выкарыстання какаіну. нат Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Lin D,
    3. Кооб GF,
    4. Парсанс LH

    (2003) Абвастрэнне какаіну самакіравання не залежыць ад змененага какаіну індукаванага прылеглага ядра узроўняў допаміна. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Джонс G,
    2. Harris GC

    (2004) Мазгавыя субстраты для павелічэння наркотыкаў шукае на працягу доўгага высновы. Neuropharmacology 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Бальфур ME,
    2. Ю.Л.,
    3. Coolen Л.М.

    (2004) сэксуальныя паводзіны і палавыя-асацыяванага экалагічныя сігналы актывацыя мезолимбическом сістэмы ў самцоў пацукоў. Нейропсихофармакологии 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Бальфур ME,
    2. Brown JL,
    3. Ю.Л.,
    4. Coolen Л.М.

    (2006) Патэнцыйны ўклад эфферент ад медыяльнай префронтальной кары галаўнога мозгу да нервовай актывацыі пасля палавога паводзінаў у самцоў пацукоў. Неўралогія 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Джонсана Д,
    2. Guitart X,
    3. Нестлер EJ

    (1992) нейрофиламенты вавёркі і мезолимбическая сістэма дофаміна: агульнае становішча хранічнага марфіну і хранічны какаінам у вентральной вобласці покрыўкі пацукі. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Берридж KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Якая роля допаміна ў узнагародзе: геданічным ўздзеянне, навучанне ўзнагароджання або стымул выпукласць? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Берридж KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Рэжучы кампаненты ўзнагароды: «смак», «жадаючы», і навучанне. Curr ОПИН Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Blum K,
    2. Вернер Т,
    3. Carnes S,
    4. Carnes P,
    5. Bowirrat A,
    6. Джардана Дж,
    7. Оскар-Берман М,
    8. Gold M

    (2012) Пол, наркотыкі і рок-н-рол: агульная мезолимбическая гіпотэза актывацыі у залежнасці ад палімарфізму гена ўзнагароджання. J псіхатропныя прэпараты 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Чу М.М.,
    2. Цзо YF,
    3. Мэн L,
    4. Ці DY,
    5. Хан JS,
    6. Цуй CL

    (2007) Перыферыйныя электрастымуляцыя адмяніла памяншэнне памеру клетак і павелічэнне ўзроўню BDNF ў вентральной вобласці покрыўкі пры хранічных пацуках, апрацаванага марфіну. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Дэвіс Б. А.,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden К.А.,
    5. Coolen Л.М.

    (2007) Актывацыя РОМС нейронаў падчас агульнай узрушанасці, але не сэксуальнае паводзіны ў самцоў пацукоў. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Дынамічныя змены ў прылеглым ядры адтоку дофаміна пры дзеянні Кулидж ў самцоў пацукоў. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel С.Б.,
    2. Кларк JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Акерс CA,
    8. Клінтан С.М.,
    9. Філіпс ПЭ,
    10. Akil H

    (2011) Выбарчае ролю допаміна ў навучанні стымулу ўзнагароджанне. Прырода 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Збаны KK,
    3. Бальфур ME,
    4. Coolen Л.М.

    (2010a) Змешванне задавальненняў: агляд ўздзеяння наркотыкаў на сексуальных паводзінах у людзей і жывёлы мадэляў. Horm Behav 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke Дж,
    3. Wise Р.А.,
    4. Леман М.Н.,
    5. Coolen Л.М.

    (2010b) метамфетамін дзейнічае на субпапуляцый нейронаў, якія рэгулююць сэксуальнае паводзіны ў самцоў пацукоў. Неўралогія 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Павышаны спалох пры выхадзе з вострага марфіну: мадэль опиатной абстыненцыі і трывогі. Психофармакология 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Харыс GC,
    2. Aston-Джонс G

    (2003) Altered матывацыя і навучання наступнага опиатных вываду: доказы працяглай дизрегуляции апрацоўкі ўзнагароджання. Нейропсихофармакологии 28: 865-871.

  22. ↵
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. нізкі MJ

    (2002) дэфіцыт Selective ўзнагарода ў мышэй, пазбаўленых бэта-эндарфіну і энкефалина. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG,
    2. Avena Н.М.,
    3. Bocarsly ME,
    4. Рада P

    (2009) Натуральная залежнасць: паводніцкая і ланцуг мадэль, заснаваная на цукровай наркаманіі ў пацукоў. J Med Наркаман 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Хайман SE,
    2. Malenka RC,
    3. Нестлер EJ

    (2006) нейронавыя механізмы наркаманіі: роля навучання ўзнагароджанні, звязаныя і памяці. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Икемото S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) ГАМК (А) блакада рэцэптараў у пярэдняй вентральной вобласці покрыўкі павялічвае пазаклеткавую ўзроўні дофаміна ў прылеглым ядры пацукоў. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Яворскі Дж,
    2. Спенглер S,
    3. Seeburg DP,
    4. Hoogenraad CC,
    5. Sheng M

    (2005) Кантроль галінавання дендрытаў мішэнню фосфоинозитид-3'-киназа-Akt-рапамицина млекакормячых шляху. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Johnson SW,
    2. Паўночна-РА

    (1992) апіятаў ўзбуджаюць дофаміновых нейроны гиперполяризацией мясцовых интернейронов. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Klitenick М.А.,
    2. Dewitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Рэгуляванне somatodendritic вызвалення допаміна ў вентральной вобласці покрыўкі апіоідаў і гака: натуральны микродиализ даследаванне, праведзены ў. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Кооб GF,
    2. Le Moal M

    (2005) Пластычнасць ўзнагароды neurocircuitry і «цёмная бок» наркаманія. нат Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette Д.А.

    (1978) Удасканаленыя мантажную сераду для иммунофлуоресцентной мікраскапіі. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT,
    2. Грант В.Л.,
    3. да MT

    (2001) налоксона згасае ўмоўнае перавагу месцы, індуцыраванае кола ходу ў пацукоў. фізіялогія Behav 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT,
    2. Грант В.Л.,
    3. Да MT,
    4. Flynn G

    (2002) Папярэдні досвед з колавым бегам вырабляе крос-талерантнасць да карыснага эфекту марфіну. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Мэттьюз РТ,
    2. нямецкі DC

    (1984) электрафізіялагічныя доказы для распачынання пацукі вентральной покрыўкі нейронаў вобласці дофаміна з дапамогай марфіну. Неўралогія 11: 617-625.

  34. ↵
    1. Мазяў-Робисона М.С.,
    2. Koo JW,
    3. Фрыдман А. К.,
    4. Lansink CS,
    5. Робисона AJ,
    6. Vinish M,
    7. Крышнаіт У,
    8. Кім S,
    9. Siuta М.А.,
    10. Галіі A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Харват MC,
    14. Neve RL,
    15. Уорли PF,
    16. Snyder SH,
    17. Херд Ю.Л.,
    18. Cheer JF,
    19. Хан MH,
    20. Russo SJ,
    21. і іншыя

    (2011) Роля для сігналізацыі MTOR і нейрональной актыўнасці ў марфін-індукаваны адаптацыі ў вентральных нейронаў допаміна зоны покрыўкі. Нейрон 72: 977-990.

  35. ↵
    1. Мазяў-Робисона М.С.,
    2. Нестлер EJ

    (2012) Опиатная-індукаваны малекулярнай і клетачнай пластычнасць вентральной вобласці покрыўкі і локуса нейронаў катехоламінов блакітнае пляма. Cold Spring Харб Perspect Med 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) налоксона парушае экспрэсію, але не набыццё на самца пацукоў кандыцыянаванага адказ месца пераважнай для палавой палявання самкі. Психофармакология 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Майзель RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Палавы вопыт у самак грызуноў: клеткавых механізмаў і функцыянальных наступстваў. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Мілер Р.Л.,
    2. Baum MJ

    (1987) налоксона перашкаджае спарванне і ўмоўнае месца перавагі эстрального самка ў самца пацукоў неўзабаве пасля кастрацыі. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. Мітчэл JB,
    2. Сцюарт Дж

    (1990) палёгку сэксуальнага паводзінаў у пацука-самца, звязаная з інтра-ВТ ін'екцыямі апіятаў. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Мэрфі LO,
    2. Blenis J

    Спецыфічнасць сігналу (2006) МАРК: у патрэбным месцы ў патрэбны час. Trends Biochem Sci 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Нестлер EJ

    (2012) Транскрипциональные механізмы наркаманіі. Clin Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Уотсан C

    (2013) Пацук мозгу ў стереотаксической каардынатах (Academic, Boston), Ed 7.

  • ↵
    1. Збаны KK,
    2. Бальфур ME,
    3. Леман М.Н.,
    4. Richtand Н.М.,
    5. Ю.Л.,
    6. Coolen Л.М.

    (2010a) Нейропластичность ў мезолимбическом сістэме, выкліканай натуральнай узнагародай і наступнага ўзнагароджання абстыненцыі. Biol Psychiatry 67: 872-879.

  • ↵
    1. Збаны KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou У,
    4. Музон E,
    5. Нестлер EJ,
    6. Леман М.Н.,
    7. Coolen Л.М.

    (2010b) DeltaFosB ў прылеглым ядры мае вырашальнае значэнне для ўзмацнення эфектаў сэксуальнага ўзнагароджання. Гены Brain Behav 9: 831-840.

  • ↵
    1. Збаны KK,
    2. Schmid S,
    3. Дзі Себастьяно АР,
    4. Ван X,
    5. Laviolette СР,
    6. Леман М.Н.,
    7. Coolen Л.М.

    (2012) Вопыт Натуральнага ўзнагароджання змяняе размеркаванне рэцэптара АМРЫ і NMDA і функцыю ў прылеглым ядры. PLoS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Збаны KK,
    2. Vialou У,
    3. Нестлер EJ,
    4. Laviolette СР,
    5. Леман М.Н.,
    6. Coolen Л.М.

    (2013) Прыродны і ўзнагарода наркотыкаў дзейнічаюць на агульных нервовых механізмах пластычнасці з DeltaFosB ў якасці ключавога пасярэдніка. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ЭРК і p38 МАРК-актываванай протеинкиназы: сямейства протеинкиназ з рознымі біялагічнымі функцыямі. Microbiol Mol Biol Rev 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. Боланос CA,
    3. Тэабалда DE,
    4. DeCarolis Н.А.,
    5. Renthal W,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NE,
    9. Wiley MD,
    10. Само DW,
    11. Расэл DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Нестлер EJ

    (2007) IRS2-Akt шляху ў сярэднім мозгу нейроны дофаміна рэгулюе паводніцкія і клеткавыя адказы на апіяты. нат Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010) Шматкратныя функцыі дофаміновых нейронаў. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB,
    2. Gall CM

    (1993) Выраз нейротрофинов з дапамогай дофаминергических нейронаў сярэдняга мозгу. Exp Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Кубік R,
    3. Herz

    (1987) Матывацыйны ўласцівасці апіоідаў: доказы таго, што актывацыя дэльта-рэцэптараў, опосредует працэсы армавання. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron л,
    2. Нестлер EJ

    (1995) Супрацьлеглыя эфекты марфіну і нейротрофины, NT-3, NT-4 і BDNF, на блакітнавата месца нейронаў ў прабірцы. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron л,
    2. Шы WX,
    3. Lane SB,
    4. Харыс HW,
    5. Bunney BS,
    6. Нестлер EJ

    (1996) Хранічны марфін выклікае бачныя змены ў марфалогіі мезолимбических нейронаў допаміна. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. Serra GP,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M,
    5. Diana M

    (2003) Марфін адмены індукаваных анамалій ў ВТА: конфокальной лазернай сканавальны мікраскапіі. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) карты мозгу: будова мозгу пацукі (Academic, Сан-Дыега), Эд 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Уілсан Н,
    3. Чжан Q,
    4. Збаны KK,
    5. Coolen Л.М.

    (2009) Сэксуальнае ўзнагароджанне ў самцоў пацукоў: уплыў сэксуальнага вопыту на месцы умоўных пераваг, звязаныя з эякуляцыяй і intromissions. Horm Behav 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Вымяраючы ўзнагароду з кандыцыянаваным месцам перавагі (CPP) парадыгма: абнаўленне за апошняе дзесяцігоддзе. наркаман Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. ван Фюрт WR,
    2. ван Ree JM

    (1996) Сэксуальная матывацыя: удзел эндагенных апіоідаў ў вентральной вобласці покрыўкі. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. ван Фюрт WR,
    2. Wolterink G,
    3. ван Ree JM

    (1995) Правілы мужчынскага сэксуальнага паводзінаў: удзел апіоідаў мозгу і дофаміна. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Уокер JR,
    2. Chen SA,
    3. Моффит Н,
    4. Inturrisi CE,
    5. Кооб GF

    (2003) Хранічнае Опіоідные ўздзеянне выклікае павелічэнне гераіну самакіравання ў пацукоў. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. Маладыя KA,
    2. Gobrogge KL,
    3. Лю Y,
    4. ван Z

    (2011) нейробиологии пары пріклеіванія: ідэі з сацыяльна манагамная грызуна. пярэдняя Neuroendocrinol 32: 53-69.

    •