Metamfetamin djeluje na subpopulacije neurona koji reguliraju seksualno ponašanje kod mužjaka štakora (2010)

Neuronauka. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

izvor

Odsjek za anatomiju i biologiju stanica, Schulich Škola za medicinu i stomatologiju, Univerzitet Zapadni Ontario, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

sažetak

Metamfetamin (Meth) je stimulant koji izaziva zavisnost. Zloupotreba meta se obično povezuje sa praksom seksualnog rizičnog ponašanja i povećanom prevalencijom virusa humane imunodeficijencije, a korisnici Meth-a navode pojačanu seksualnu želju, uzbuđenje i seksualno zadovoljstvo. Biološka osnova za ovu vezu između spolnog odnosa nije poznata. Sadašnja studija pokazuje da primena Metha kod mužjaka pacova aktivira neurone u regionima mozga mezolimbičkog sistema koji su uključeni u regulaciju seksualnog ponašanja. Konkretno, Meth i parenje ko-aktiviraju ćelije u jezgru i ljusci nucleus accumbens, bazolateralnoj amigdali i prednjem cingularnom korteksu. Ovi rezultati ilustruju da, za razliku od sadašnjeg uvjerenja, droge zlostavljanja mogu aktivirati iste ćelije kao prirodno pojačanje, odnosno seksualno ponašanje, a zauzvrat mogu utjecati na prinudno traženje ove prirodne nagrade.

Ključne riječi: nucleus accumbens, basolateralna amigdala, prefrontalni korteks, zloupotreba supstanci, reprodukcija, ovisnost

Motivacija i nagrada regulisani su mezolimbičkim sistemom, međusobno povezanom mrežom moždanih oblasti koju čine ventralna tegmentalna područja (VTA) nucleus accumbens (NAc), bazolateralna amigdala i medialni prefrontalni korteks (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas i Volkow, 2005). Postoji dovoljno dokaza da se mezolimbički sistem aktivira kao odgovor na obe supstance zlostavljanja (Di Chiara i Imperato, 1988, Chang i dr., 1997, Ranaldi i dr., 1999) i prirodno nagrađivanje ponašanja kao što je seksualno ponašanje (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Seksualno ponašanje muškaraca, a posebno ejakulacija, veoma je korisno i učvršćuje u modelima životinja (Pfaus i dr., 2001). Muški glodavci razvijaju uslovljenu preferenciju mjesta (CPP) do kopulacije (Agmo i Berenfeld, 1990, Martinez i Paredes, 2001, Tenk, 2008), i obavljat će operantske zadatke za pristup seksualno receptivnoj ženki (Everitt i dr., 1987, Everitt i Stacey, 1987). Droge zloupotrebe takođe nagrađuju i pojačavaju, a životinje će naučiti da samostalno administriraju supstance zlostavljanja, uključujući opijate, nikotin, alkohol i psihostimulanse (Wise, 1996, Pierce i Kumaresan, 2006, Feltenstein i See, 2008). Iako je poznato da i zloupotreba droga i seksualno ponašanje aktiviraju mezolimbičke oblasti mozga, trenutno je nejasno da li zloupotreba droga utiče na iste neurone koji posreduju u seksualnom ponašanju.

Elektrofiziološke studije su pokazale da hrana i kokain aktiviraju neurone u NAc. Međutim, dva pojačivača ne aktiviraju iste ćelije unutar NAc (Carelli et al., 2000, Carelli i Wondolowski, 2003). Štoviše, hrana i samouprava saharoze ne uzrokuju dugoročne promjene u elektrofiziološkim svojstvima kao što je izazvano kokainom (Chen et al., 2008). Nasuprot tome, zbirka dokaza sugeriše da seksualno ponašanje muškaraca i droge mogu zaista djelovati na iste mezolimbičke neurone. Psihostimulansi i opioidi menjaju izražavanje seksualnog ponašanja kod mužjaka pacova (Mitchell i Stewart, 1990, Fiorino i Phillips, 1999a, Fiorino i Phillips, 1999b). Nedavni podaci iz naše laboratorije pokazali su da seksualno iskustvo menja reakciju na psihostimulante, što je dokazano senzibilisanom lokomotornom reakcijom i senzibilisanom percepcijom na d-amfetamin kod seksualno iskusnih životinja (Pitchers et al., 2009). Sličan odgovor je prethodno primijećen kod ponovljenog izlaganja amfetaminu ili drugim drogama (Lett, 1989, Shippenberg i Heidbreder, 1995, Shippenberg i dr., 1996, Vanderschuren i Kalivas, 2000). Zajedno, ovi nalazi ukazuju na to da seksualno ponašanje i reakcije na droge zloupotrebljavaju isti neuroni u mezolimbičkom sistemu. Dakle, prvi cilj ove studije je istražiti neuronsku aktivaciju mezolimbičkog sistema putem seksualnog ponašanja i primjene lijeka u istoj životinji. Posebno smo testirali hipotezu da psihostimulans, metamfetamin (Meth), djeluje direktno na neurone koji normalno posreduju u seksualnom ponašanju.

Met je jedna od najzastupljenijih droga u svijetu (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) ii često se povezuje s promijenjenim seksualnim ponašanjem. Interesantno je da korisnici Meth-a navode pojačanu seksualnu želju i uzbuđenje, kao i pojačano seksualno zadovoljstvo (Semple i dr., 2002, Schilder et al., 2005). Štaviše, Zlostavljanje metama se obično povezuje sa seksualno kompulzivnim ponašanjem (Rawson i dr., 2002). Korisnici često prijavljuju da imaju brojne seksualne partnere i manje je vjerojatno da će koristiti zaštitu od drugih zloupotreba droga (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Nažalost, studije koje ukazuju na Meth kao prediktor seksualnog rizičnog ponašanja su ograničene jer se oslanjaju na nepotvrđene samoprocjene (Elifson et al., 2006). Stoga je za razumijevanje ove kompleksne veze između droge i seksa potrebna istraživanja o staničnoj osnovi Meth-induciranih promjena u seksualnom ponašanju u životinjskom modelu.

S obzirom na gore navedene dokaze koji ukazuju na to da droge zloupotrebe, a posebno Meth, mogu djelovati na neurone koji su normalno uključeni u posredovanje seksualnog ponašanja, cilj ove studije bio je istražiti neuronsku aktivaciju seksualnim ponašanjem i primjenom psihostimulanta Meth. Ova studija je implementirala neuroanatomsku tehniku, koristeći imunohistokemijsku vizualizaciju neposrednih ranih gena Fos i fosforilirane Map Kinase (pERK) kako bi detektirala istodobnu neuralnu aktivaciju seksualnim ponašanjem i Meth respektivno. Fos se izražava samo unutar jezgra ćelija, sa maksimalnim nivoom ekspresije 30 – 90 minuta nakon aktivacije neurona. Postoji dovoljno dokaza da seksualna aktivnost izaziva Fosovu ekspresiju u mozgu (Pfaus i Heeb, 1997, Veening i Coolen, 1998), uključujući mezokortikolimbički sistem (Robertson i dr., 1991, Balfour et al., 2004). Takođe postoje dokazi da lekovi koji izazivaju zloupotrebu izazivaju pERK ekspresiju unutar mezokortikolimbičkog sistema (Valjent i dr., 2000, Valjent i dr., 2004, Valjent i dr., 2005). Za razliku od ekspresije Fos, fosforilacija ERK je veoma dinamičan proces i javlja se samo 5-20 minuta nakon aktivacije neurona. Različiti vremenski profili Fos i PERK čine ih idealnim skupom markera za kasniju neuronsku aktivaciju pomoću dva različita stimulansa.

EKSPERIMENTALNI POSTUPCI

teme

Odrasli mužjaci pacova Sprague Dawley (210-225 g) dobijeni od Charles River Laboratories (Montreal, QC, Kanada) su smješteni po dva u kavezu u standardnim kavezima od pleksiglasa (kućni kavezi). Prostorija za životinje je održavana na 12 / 12 h obrnutom ciklusu svjetla (svjetla su isključena u 10.00 h). Hrana i voda su bili dostupni ad libitum. Sva ispitivanja su obavljena u prvoj polovini tamne faze pod slabim crvenim osvjetljenjem. Ženke stimulusa koje se koriste za seksualno ponašanje bile su bilateralno ovariektomirane pod dubokom anestezijom (13 mg / kg ketamina i 87 mg / kg ksilazina) i primile su subkutani implantat koji sadrži 5% estradiol benzoat (EB) i 95% holesterol. Seksualna receptivnost je izazvana subkutanom (sc) primenom 500 μg progesterona u 0.1 ml sezamovom ulju 4 h prije testiranja. Sve procedure su odobrene od strane Komiteta za brigu o životinjama na Univerzitetu Zapadnog Ontarija i usaglašene su sa smjernicama kanadskog Vijeća za brigu o životinjama.

Experimental Designs

Eksperimenti 1 i 2: Muškim pacovima (n = 37) bilo je dozvoljeno da se pare sa receptivnom ženkom na jednu ejakulaciju (E) ili za 30 min, koja je ikada bila prva u čistim test kavezima (60 × 45 × 50 cm) tokom pet puta - sedmično predtestiranje parenja, da bi se steklo seksualno iskustvo. Tokom poslednje dve sesije, zabeleženi su svi standardni parametri za seksualni učinak, uključujući: latenciju montiranja (ML; vreme od uvođenja ženke do prvog uspona), latenciju intromisije (IL; vreme od uvođenja ženke do prvog penjanja). vaginalna penetracija), latencija ejakulacije (EL; vrijeme od prve intromicije do ejakulacije), interval nakon ejakulacije (PEI; vrijeme od ejakulacije do prvog naknadnog unošenja), broj nosača (M), i broj intromisija (IM) (Agmo, 1997). Svi muškarci su primali 1 ml / kg dnevne injekcije 0.9% NaCl (fiziološka otopina; sc) 3 uzastopnih dana prije dana testa, za navikavanje na rukovanje i injekcije. Dan prije dana testiranja, svi muškarci su bili pojedinačno smješteni. Kod iskusnih muškaraca, Fos može biti induciran uslovljenim kontekstualnim znakovima koji su povezani sa prethodnim seksualnim iskustvom (Balfour i dr., 2004). Stoga su sve manipulacije parenja i kontrole tokom završnih testova provedene u kućnom kavezu (izbjegavanje prediktivnih uvjetovanih signala) kako bi se spriječila kondicionirana inducirana aktivacija kod nepromijenjenih kontrolnih mužjaka. Mužjaci su raspoređeni u osam eksperimentalnih grupa koje se nisu razlikovale u bilo kojoj mjeri seksualnog učinka tokom posljednje dvije sjednice parenja (podaci nisu prikazani). Tokom završnog testa, mužjacima je bilo dozvoljeno da se pare u kavezu dok nisu pokazali ejakulaciju (seks) ili nisu primili ženskog partnera (bez seksa). Svi parjeni mužjaci su perfundirani 60 minuta nakon početka parenja kako bi se omogućila analiza Fos-ekspresije izazvane parenjem. Mužjaci su primili injekciju 4 mg / kg Meth ili 1 ml / kg fiziološke otopine (sc) (n = 4 svaki), bilo 10 (eksperiment 1) ili 15 (eksperiment 2) min prije perfuzije, za analizu fosforilacije izazvane lijekom MAP kinaze. Doziranje i vrijeme prije perfuzije temelje se na prethodnim izvješćima (Choe et al., 2002, Choe i Wang, 2002, Chen i Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa i drugi, 2006). Kontrolne grupe su uključivale muškarce koji se nisu parili, ali su primili Meth 10 (n = 7) ili 15 (n = 5) min pre žrtvovanja, ili fiziološke injekcije 10 (n = 5) ili 15 (n = 4) min pre žrtvovanja . Nakon žrtvovanja, mozgovi su obrađeni za imunohistokemiju.

Eksperiment 3: Pošto je u eksperimentu 1 i 2 korišćena visoka doza Meth, izvršen je dodatni neuroanatomski eksperiment da bi se ispitalo da li seksualno ponašanje i manja doza Meth indukuju zavisne obrasce preklapanja neuronske aktivacije. Ova studija je provedena na identičan način kao eksperimenti 1 i 2. Međutim, na finalnom testu, parjene i nepokrivene grupe (n = 6 svaka) primile su 1 mg / kg Meth (sc) 15 min pre žrtvovanja.

Eksperiment 4: Da bismo testirali da li je neuronska aktivacija uzrokovana polom i Meth specifična za Meth, ovaj eksperiment je istraživao da li se slični obrasci preklapanja neuronske aktivacije mogu vidjeti sa psihostimulantom d-amfetaminom (Amph). Ovaj eksperiment je izveden na identičan način kao eksperimenti 1 i 2. Međutim, na finalnom testu, mužjacima je davana ili Amph (5 mg / kg) ili fiziološka otopina (1 mg / kg) (sc) 15 min prije žrtvovanja (n = 5 svaki). Kontrolne nesmrtne mužjake su primale slanu otopinu ili Amph 15 minuta prije žrtvovanja. Pregled eksperimentalnih grupa korišćenih u eksperimentima 1 – 4 dat je u Tabela 1.

Tabela 1      

Pregled eksperimentalnih grupa uključenih u eksperimente 1 – 4.

Priprema tkiva

Životinje su anestezirane pentobarbitalom (270 mg / kg; ip) i perfundirane transkardijalno sa 5 ml slanog rastvora, a zatim 500 ml 4% paraformaldehida u fosfatnom puferu 0.1 M (PB). Mozgovi su uklonjeni i fiksirani za 1 h na sobnoj temperaturi u istom fiksativu, zatim uronjeni u 20% saharozu i 0.01% natrijum azid u 0.1 M PB i pohranjeni na 4 ° C. Koronalne sekcije (35 μm) su izrezane na mikrotome zamrzavanja (H400R, Micron, Njemačka), sakupljene u četiri paralelne serije u otopini krioprotektora (30% saharoza i 30% etilen glikol u 0.1 M PB) i pohranjeni na 20 ° C obrada.

Immunohistochemistry

Sve inkubacije su izvršene na sobnoj temperaturi uz lagano miješanje. Slobodne plutajuće sekcije su oprane sa 0.1 M fosfatnim puferom (PBS) između inkubacija. Sekcije su inkubirane u 1% H2O2 za 10 min, zatim blokiran u inkubacijskom rastvoru (PBS koji sadrži 0.1% goveđi serum albumin i 0.4% Triton X-100) za 1 h.

pERK / Fos

Tkivo je inkubirano preko noći sa zečjim poliklonskim antitelom protiv p42 i p44 map kinaza ERK1 i ERK2 (pERK; 1: 400 eksperiment 1 i 19 lot 1; Cell Signaling Cat # 4.000;), 2 h inkubacija sa biotiniliranim magarećim anti-zečjim IgG (3: 21; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) i avidin-hren peroksidaza kompleksom (ABC Elite; 9101: 1; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Tada je tkivo inkubirano za 1 min sa biotiniliranim tiramidom (BT; 500: 1 u PBS + 1000% H2O2; Kit za pojačanje signala tiramida, NEN Life Sciences, Boston, MA) i za 30 min sa konjugiranim strepavidinom Alexa 488 (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Zatim, tkivo je inkubirano preko noći sa zečjim poliklonskim antitelom protiv c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), nakon čega slijedi 30 min inkubacija sa kozjim anti-zečjim Alexa 555 (1: 200, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Nakon bojenja, sekcije su temeljito isprane u 0.1 M PB, postavljene na staklene pločice sa 0.3% želatinom u ddH20 i pokriven vodenim medijumom za ugradnju (Gelvatol) koji sadrži anti-fading sredstvo 1,4-diazabiciklo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imunohistokemijske kontrole uključivale su izostavljanje jednog ili oba primarna antitela, što je rezultiralo odsustvom obeležavanja u odgovarajućoj talasnoj dužini.

Analiza podataka

Seksualno ponašanje

Za sva četiri eksperimenta, standardni parametri za seksualni učinak su zabilježeni kao što je gore opisano i analizirani pomoću analize varijance (ANOVA). Analiza podataka o seksualnom ponašanju tokom završnog dana testa nije otkrila značajne razlike između grupa u bilo kojem od parametara seksualne izvedbe.

PERK / Fos Cell Counts

Jedinstvene i dvostruko označene ćelije za Fos i pERK izbrojane su na kaudalnim nivoima NAc jezgre i subregiona ljuske, bazolateralne amigdale (BLA), posterodorsalne medijske amigdale (MEApd), centralne amigdale (CeA), medijalnog preoptičkog jezgra (MPN), posteromedijalnog i posterolateralno jezgro strie terminalis (BNSTpm i BNSTpl), i prednje cingulirane (ACA), prelimbične (PL) i infralimbičke (IL) podregije mPFC. Slike su snimljene pomoću hladne CCD kamere (Microfire, Optronics) priključene na Leica mikroskop (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Njemačka) i Neurolucida softvera (MicroBrightfield Inc) sa fiksnim postavkama kamere za sve subjekte (koristeći 10x ciljeve). Koristeći softver neurolucida, oblasti analize su definisane na osnovu orijentira (Swanson, 1998) jedinstveno za svaku regiju mozga (vidi Slika 1). Standardna područja analize korištena su u svim područjima osim NAc jezgre i ljuske. U potonjim oblastima, pERK i Fos izraz nisu bili homogeni i pojavili su se u uzorcima nalik na patch. Prema tome, čitavo jezgro i ljuska su prikazani na osnovu orijentira (lateralna komora, prednja strana i ostrva Calleja). Područja analize nisu se razlikovala između eksperimentalnih grupa i bila su 1.3 mm2 u NAc jezgru i ljusci. Standardne oblasti analize za preostale oblasti bile su: 1.6 mm2 u BLA, 2.5 i 2.25 mm2 u MEApd i CeA, 1.0 mm2 u MPN, 1.25 mm2 u subregijama BNST i mPFC, i 3.15 mm2 u VTA. Dve sekcije su brojane bilateralno za svaku oblast mozga po životinji, a broj pojedinačnih i dvostruko obeleženih ćelija za pERK i Fos, kao i procenti pERK ćelija koje su eksprimirale Fos marker su izračunate. Za eksperimente 1, 2 i 4, prosečne vrednosti grupa su upoređene korišćenjem dvosmerne ANOVA (faktori: parenje i lek) i Fisherov LSD za post hoc poređenja na nivou značajnosti 0.05-a. Za eksperiment 3, prosečne vrednosti grupa su upoređene korišćenjem nesparenih t-testova na nivou značajnosti 0.05-a.

Slika 1      

Shematski crteži i slike koje ilustruju područja analize mozga. Navedene oblasti analize bile su zasnovane na orijentirima jedinstvenim za svaku moždanu regiju, nisu se razlikovali između eksperimentalnih grupa i bili su 1.25 mm2 u mPFC podregijama (a), 1.3 mm2 u ...

Slike

Digitalne slike za Slika 3 su snimljene pomoću CCD kamere (DFC 340FX, Leica) pričvršćene na Leica mikroskop (DM500B) i uvezene su u Adobe Photoshop 9.0 softver (Adobe Systems, San Jose, CA). Slike nisu izmenjene ni na koji način osim za podešavanje osvetljenja.

Slika 3      

Reprezentativne slike NAc sekcija imunološki obojene za Fos (crvene; a, d, g, j) i pERK (zelene; b, e, h, k) životinja svake eksperimentalne grupe: Ne Spol + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i), i Sex + Meth (j, k, l). Desni paneli su ...

REZULTATI

Neuralna aktivacija limbičkog sistema seksualnim ponašanjem i administracijom meta

Eksperiment 1: Analiza pojedinačnih i dvostruko obeleženih ćelija za FES i Met-indukovani pERK kod mužjaka koji su primili Meth 10 minuta prije žrtvovanja otkrili su Fos u MPN, BNSTpm, NAc jezgru i ljusci, BLA, VTA, i sve podregije mPFC, u skladu sa prethodnim studijama koje pokazuju ekspresiju Fos-a indukovanu parenjem u ovim područjima (Baum i Everitt, 1992, Pfaus i Heeb, 1997, Veening i Coolen, 1998, Hull i dr., 1999). Meth administracija 10 minuta prije žrtvovanja induciranog pERK-a u NAc jezgru i ljusci, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl i regijama mPFC, u skladu s aktivacijskim obrascima induciranim drugim psihostimulansima (Valjent i dr., 2000, Valjent i dr., 2004, Valjent i dr., 2005).

Štaviše, primijećena su tri obrasca ko-ekspresije neuronske aktivacije seksualnim ponašanjem i Meth: Prvo, područja mozga su identificirana gdje su seks i droge aktivirali ne-preklapajuće neuronske populacije (Tabela 2). Konkretno, u CeA, MEApd, BNSTpl i mPFC, značajan porast i pERK-a izazvanog lijekom (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) i Fos-a izazvanog spolom (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; p <1,16). Međutim, u ovim regijama nije došlo do značajnog povećanja dvostruko obilježenih neurona u parenih muškaraca liječenih Methom. Jedini izuzetak bio je MEApd, gdje je pronađen efekt parenja na broj dvostruko obilježenih ćelija (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Međutim, nije bilo ukupnog učinka liječenja lijekovima, a dvostruko obilježavanje u skupinama liječenim metom nije bilo značajno veće nego u skupinama liječenim fiziološkom otopinom, pa lijek nije izazvao (Tabela 2). Drugo, identifikovana su područja mozga gde je neuronska aktivacija bila indukovana samo parenjemTabela 3). Konkretno, MPN, BNSTpm i VTA su aktivirani samo parenjem i sadržavali su značajna povećanja u Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001) indukovanog parenjem, ali ne i Met-indukovani pERK.

Tabela 2      

Pregled FES i Met-indukovanog pERK-a izazvanog parenjem u područjima mozga gdje seks i droge aktiviraju nepreklapajuće neuronske populacije.
Tabela 3      

Pregled ekspresije pERK-a indukovanog parenjem Fos i Meth u područjima mozga gdje je neuralna aktivacija izazvana samo parenjem.

Konačno, pronađena su područja mozga gdje su seks i droge aktivirali preklapajuće populacije neurona (Slika 2 i I3) .3). U jezgri i ljusci NAc, BLA i ACA zabilježeni su ukupni efekti parenja (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) i liječenja lijekovima (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), kao i interakcija između ova dva faktora (F (1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04- <0.001; nema značajne interakcije u ACA) na broju ćelija koje izražavaju oba pare-inducirani Fos i MET-inducirani pERK. Post hoc analiza otkrila je da je broj dvostruko obilježenih neurona bio značajno veći u muškaraca kojima je ubrizgan met-injektiran u odnosu na muškarce koji nisu tretirani Meth-om (p = 0.027- <0.001) ili u parnim muškarcima tretiranim fiziološkim rastvorom (p = 0.001- <0.001) (Slika 2 i I3) .3). Kada su podaci izraženi kao procenti neurona aktiviranih lijekom, 39.2 ± 5.3% u NAc jezgri, 39.2 ± 5.8% u NAc ljusci, 40.9 ± 6.3% u BLA i 50.0 ± 5.3% ACA neurona su aktivirani i parenje i Meth.

Slika 2      

Ekspresija FOS-a i Met-induciranog pERK-a indukovanog spolom u neuronima NAc, BLA i ACA 10 min nakon primjene 4 mg / kg Meth. Srednje vrijednosti ± sem od Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) i dvostruke (c, f, i, l) označene stanice u NAc jezgri (a, ...

Neočekivano zapažanje je da je seksualno ponašanje uticalo na pERK izazvan Methom. Iako je Meth značajno indukovao nivo PERK-a u grupama koje su bile parjene i ne-metirane, u NAc, BLA i ACA, obilježavanje pERK-om bilo je značajno niže kod mužjaka koji su injektirani Meth-om u poređenju sa mužjacima koji su injektirani Meth-om. (Slika 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Ovaj nalaz može dodatno podržati hipotezu da pol i droga djeluju na iste neurone, ali također može ukazivati ​​na promjene uzrokovane parenjem u unosu ili metabolizmu lijeka koje opet uzrokuju promijenjene neuronske odgovore na Meth. Da bi se istražilo da li seksualno ponašanje uzrokuje drugačiji vremenski obrazac aktivacije lijekom, sekcije NAc, BLA i ACA su obojene za muškarce žrtvovane u kasnijem vremenskom trenutku (15 min) nakon primjene lijeka (eksperiment 2).

Eksperiment 2: Analiza pojedinačnih i dvostruko označenih ćelija potvrdila je gore opisane nalaze da je seksualno ponašanje i naknadno izlaganje Meth 15 minuta prije žrtvovanja dovelo do značajnog povećanja Fos i PERK imunološkog obilježavanja u NAc jezgri i ljusci, BLA i ACA. Osim toga, značajna ko-ekspresija pERK-a indukovanih parenjem i FS i Meth-a ponovo je pronađena u ovim područjima (Slika 4; efekt parenja: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; učinak lijeka: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). Broj dvostruko obilježenih neurona u parenih muškaraca kojima je ubrizgan met-met je značajno veći u odnosu na muškarce koji nisu liječeni Meth-om (p <0.001) ili uparenim fiziološkim rastvorom (p <0.001). Kada su podaci izraženi kao procenti neurona aktiviranih lijekovima, 47.2 ± 5.4% (NAc jezgra), 42.7 ± 7.6% (NAc ljuska), 36.7 ± 3.7% (BLA) i 59.5 ± 5.1% (ACA) aktiviranih neurona parenjem je aktivirao i Meth. Štoviše, pERK izazvan lijekovima nije se razlikovao između parenih i nepariranih životinja (Slika 4b, e, h, k), u svim područjima, osim za ACA (p <0.001). Ovi podaci ukazuju da seksualno ponašanje doista uzrokuje promjenu vremenskog obrasca indukcije pERK od strane Metha.

Slika 4      

Ekspresija FOS-a i Met-induciranog pERK-a indukovanog spolom u neuronima NAc, BLA i ACA 15 min nakon primjene 4 mg / kg Meth. Srednje vrijednosti ± sem od Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) i dvostruke (c, f, i, l) označene stanice u NAc jezgri (a, ...

Neuralna aktivacija nakon seksualnog ponašanja i 1 mg / kg Meth

Do sada su rezultati pokazali da seksualno ponašanje i 4 mg / kg Meth aktiviraju preklapajuće populacije neurona u NAc jezgru i ljusci, BLA i ACA. To istražiti uticaj doziranja leka na ovo preklapanje u aktivaciji, uzorci neuralne aktivacije su takođe proučavani korišćenjem manje doze Meth. NAc jezgra i ljuska, BLA i ACA su analizirane za aktivaciju indukovanu polom i Meth. Zaista, seksualno ponašanje i kasnije izlaganje Methu rezultiralo je značajnim povećanjem Fos i PERK imunološkog obilježavanja u NAc jezgru i subregijama ljuske, BLA, kao i neuronima u ACA regiji mPFC (Slika 5). Zanimljivo, niža doza Metha rezultirala je sličnim brojem pERK obilježenih neurona kao što je indukovano 4 mg / kg Meth u četiri analizirana područja mozga. Još važnije, NAc jezgra i ljuska, BLA i ACA su pokazali značajan porast broja duplo označenih ćelija (Slika 5c, f, i, l) u odnosu na muškarce kojima nije ubrizgan metam (p = 0.003- <0.001). Kada su podaci izraženi u procentima droga aktiviranih neurona, 21.1 ± 0.9% i 20.4 ± 1.8% u jezgri i ljusci NAc, 41.9 ± 3.9% u BLA i 49.8 ± 0.8% ACA neurona aktivirano je spolom i Meth.

Slika 5      

Ekspresija FOS-a i Met-induciranog pERK-a indukovanog spolom u neuronima NAc, BLA i ACA 15 min nakon primjene 1 mg / kg Meth. Srednje vrijednosti ± sem od Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) i dvostruke (c, f, i, l) označene stanice u NAc jezgri (a, ...

Neuralna aktivacija nakon seksualnog ponašanja i davanja d-amfetamina

Da bi se testiralo da li su gore navedeni rezultati specifični za Meth, sproveden je dodatni eksperiment za proučavanje neuralne aktivacije izazvane parenjem i Amph. Analiza pojedinačnih i dvostruko označenih ćelija za pERK i Fos pokazala je da je seksualno ponašanje i kasnije izlaganje Amph rezultiralo značajnim povećanjem Fos i PERK imunološkog obilježavanja u NAc jezgri i ljusci i BLASlika 6; efekt parenja: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; učinak lijeka: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047- <0.001). Štaviše, broj dvostruko obilježenih neurona bio je značajno veći kod muškaraca koji su liječeni Amph-om u odnosu na muškarce koji nisu liječeni Amph-om (p = 0.009- <0.001) ili u parnim muškarcima liječenim fiziološkim rastvorom (p = 0.015- <0.001) (Slika 6c, f, i). Kada su podaci izraženi kao procenti neurona aktiviranih lekom, 25.7 ± 2.8% i 18.0 ± 3.2% u NAc jezgru i ljusci, odnosno 31.4 ± 2.0% BLA neurona su aktivirani i kod parenja i kod Amph. ACA regija mPFC-a je pokazala značajne nivoe Fos-a indukovanog parenjem (Slika 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Međutim, za razliku od Metha, Amph nije rezultirao značajnim povećanjem nivoa pERK-a izazvanih lijekovima u ACA (Slika 6k) ili brojem dvostruko označenih neurona u ACA (Slika 6l) kada se uporede sa mužjacima koji su injektirani fiziološkim rastvorom.

Slika 6      

Ekspresija FOS-a i Amph-induciranog pERK-a indukovanog spolom u NAc, BLA i ACA neuronima 15 min nakon primjene 5 mg / kg Amph. Srednje vrijednosti ± sem od Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) i dvostruke (c, f, i, l) označene stanice u NAc jezgri (a, ...

DISKUSIJA

Ova studija pokazuje na staničnom nivou preklapanje između neuronske aktivacije prirodnim pojačavajućim seksualnim ponašanjem i psihostimulantom Meth. Prema tome, ovi podaci pokazuju da lekovi ne deluju samo na istim regionima mozga koji regulišu prirodnu nagradu, već, zapravo, lekovi aktiviraju iste ćelije uključene u regulaciju prirodne nagrade. Naime, ovdje je pokazano da seksualno ponašanje i Meth ko-aktiviraju populaciju neurona u NAc jezgri i ljusci, BLA i ACA regiji mPFC-a, identificirajući potencijalna mjesta gdje Meth može utjecati na seksualno ponašanje.

Trenutni nalaz da seksualno ponašanje i administracija Metha aktiviraju preklapajuće populacije neurona u NAc, BLA i ACA je u suprotnosti sa nalazima drugih studija koje pokazuju da različite populacije NAc neurona kodiraju lijek i prirodnu nagradu.

Konkretno, elektrofiziološke studije koje su upoređivale neuronsku aktivaciju tokom samo-primjene prirodnih nagrada (hrana i voda) i intravenski kokain pokazale su da je kokainska samouprava aktivirala diferencijalnu, ne-preklapajuću populaciju neurona koji generalno nisu reagovali tokom operantne reakcije na vodu i pojačanje hrane (92%). Samo 8% pratećih neurona pokazalo je aktivaciju i kokainom i prirodnom nagradom (Carelli et al., 2000).

Nasuprot tome, većina (65%) ćelija u NAc pokazala je aktivaciju različitim prirodnim nagradama (hrana i voda), čak i ako je jedan pojačivač bio ukusniji (saharoza) (Roop i dr., 2002).

Nekoliko faktora je možda doprinijelo neusklađenosti sa trenutnim rezultatima. Prvo, korišteni su različiti tehnički pristupi za istraživanje neuronske aktivnosti. Ova studija je koristila neuroanatomsku metodu za detekciju paralelne neuronske aktivacije pomoću dva različita stimulusa koristeći dvostruku fluorescentnu imunocitokemiju za Fos i PERK, omogućavajući istraživanje aktivacije pojedinačnih ćelija na velikim rasponima moždanih područja. Nasuprot tome, studije koje je proveo Carelli i saradnici koristile su elektrofiziološke snimke ograničene na NAc ponašanja životinja kako bi se utvrdilo da li samouprava lijekova za zlostavljanje aktivira isti neuronski sklop koji se koristi prirodnim nagradama.

Drugo, trenutna studija je istraživala različitu prirodnu nagradu, tj. Seksualno ponašanje u odnosu na prethodne studije, koje su koristile hranu i vodu u ograničenim pacovima (Carelli, 2000). Hrana i voda mogu imati manju vrijednost od parenja. Seksualno ponašanje je veoma korisno i pacovi lako formiraju CPP na kopulaciju (Agmo i Berenfeld, 1990, Martinez i Paredes, 2001, Tenk, 2008). Iako, pacovi sa ograničenom ishranom stvaraju CPP za vodu (Agmo i dr., 1993, Perks i Clifton, 1997) i hranu (Perks i Clifton, 1997), diet neograničenim štakorima po mogućnosti konzumiraju i oblikuju CPP za ukusnije namirnice (Jarosz i dr., 2006, Jarosz i dr., 2007).

Treće, naše studije su uključivale različite droge zloupotrebe u poređenju sa prethodnim studijama, koristeći metamfetamin i amfetamin umjesto kokaina. Sadašnji rezultati pokazuju da je specifično Meth, au manjoj mjeri i amfetamin, rezultirao aktivacijom neurona koji su također aktivirani seksualnim ponašanjem. Iskustvo sa lekovima je takođe moglo da utiče na naše nalaze. Trenutne studije koristile su životinje koje su bile seksualno iskusne, ali nisu bile lekovite. Nasuprot tome, elektrofiziološke studije Carelli-a i saradnika koristile su “dobro obučene” životinje koje su ponovo dobijale kokain.

Stoga je moguće da je Meth-inducirana aktivacija neurona aktivirana seksualnim ponašanjem izmijenjena u štakorima sa iskustvom u lijekovima. Međutim, preliminarne studije iz naše laboratorije ukazuju na to da je malo verovatno da će iskustvo droge biti glavni faktor kao što je seksualno ponašanje i Meth tretman kod muškaraca koji su hronično lečeni Meth ko-aktivirali slične procente neurona aktiviranih lekom kao što je prijavljeno u trenutnoj studiji (20.3 ± 2.5% u NAc jezgri i 27.8 ± 1.3% u NAc ljusci; Frohmader i Coolen, neobjavljena zapažanja).

Na kraju, trenutna studija je istraživala “direktnu” aktivnost lijekova koji koriste pasivnu administraciju. Stoga, trenutna analiza ne otkriva informacije u vezi neuronskih kola uključenih u potragu za drogom ili znakove koji se odnose na nagradu za lijek, već otkriva neuralnu aktivnost uzrokovanu farmakološkim djelovanjem lijeka. U prethodnim elektrofiziološkim studijama, neuronska aktivnost NAc koja se javlja u sekundama nakon pojačanog odgovora nije rezultat farmakološkog djelovanja kokaina, već u velikoj mjeri ovisi o asocijativnim faktorima unutar paradigme samouprave (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Konkretno, na neuronsku aktivnost NAc utiču prezentacije podražaja koje su nezavisne od odgovora i koje se odnose na intravensku isporuku kokaina, kao i instrumentalne nepredviđene situacije (tj. Pritiska poluge) svojstvene ovoj paradigmi ponašanja (Carelli, 2000, Carelli i Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli i Wightman, 2004). Ukratko, naša otkrića ko-aktivacije prirodnom i ljekovitom nagradom mogu biti specifična za aktiviranje seksualnim ponašanjem i pasivno davanje Meth i Amph.

Meth i seks su aktivirali preklapajuće populacije neurona u NAc jezgri i ljusci na dozno-zavisni način. Ko-aktivirani neuroni u NAc mogu posredovati potencijalne efekte Metha na motivaciju i nagrađivanje svojstava seksualnog ponašanja, jer lezije NAc-a narušavaju seksualno ponašanje (Liu i dr., 1998, Kippin et al., 2004). Pored toga, ovi neuroni su potencijalno lokus za doza ovisne učinke lijekova na parenje, jer je niža Meth doza (1 mg / kg) smanjila broj dvostruko označenih stanica sa 50% u usporedbi s višom dozom Meth (4 mg / kg). Iako ova studija ne identifikuje hemijski fenotip ko-aktiviranih neurona, prethodne studije su pokazale da pERK i Fos ekspresija izazvana lijekom u NAc zavisi i od dopaminskih (DA) i od glutamatnih receptora (Valjent i dr., 2000, Ferguson i dr., 2003, Valjent i dr., 2005, Sun et al., 2008). Iako nije jasno da li je neuronska aktivacija u NAc zavisna od ovih receptora, to je dokazano na drugim regijama mozga, posebno u medijalnom preoptičkom području (Lumley i Hull, 1999, Dominguez i dr., 2007). TMet, može djelovati na neurone koji se također aktiviraju tijekom seksualnog ponašanja aktiviranjem dopaminskih i glutamatnih receptora. Uloga NAc glutamata u seksualnom ponašanju je trenutno nejasna, ali je dobro utvrđeno da DA igra ključnu ulogu u motivaciji za seksualno ponašanje. (Hull i dr., 2002, Hull i dr., 2004, Pfaus, 2009). Istraživanja mikrodijalize prijavila su povećanje izlijevanja NAc DA tokom faze apetita i konzumacije muškog seksualnog ponašanja (Fiorino i Phillips, 1999a, Lorrain i dr., 1999) i mezolimbički efluks je povezan sa olakšavanjem inicijacije i održavanja seksualnog ponašanja pacova (Pfaus i Everitt, 1995). Nadalje, DA manipulativne studije pokazuju DA antagoniste u NAc inhibiraju seksualno ponašanje, dok agonisti olakšavaju inicijaciju seksualnog ponašanja.r (Everitt i dr., 1989, Pfaus i Phillips, 1989). Prema tome, Meth može uticati na motivaciju za seksualno ponašanje putem aktivacije DA receptora.

Za razliku od NAc, broj duplo označenih ćelija u BLA i ACA ostao je relativno nepromijenjen bez obzira na Meth dozu. BLA je kritična za diskretno asocijativno učenje i snažno je uključena u uslovljeno jačanje i vrednovanje nagrađivanja tokom instrumentalnog odgovora (Everitt i dr., 1999, Cardinal et al., 2002, Vidi, 2002). Štakori koji su bili oštećeni BLA prikazali su smanjenu polugu pritiska za uslovljene stimulanse uparene sa hranom (Everitt i dr., 1989) ili seksualno pojačanje (Everitt i dr., 1989, Everitt, 1990). Nasuprot tome, ova manipulacija ne utiče na fazu konzumacije hrane i seksualnog ponašanja (Cardinal et al., 2002). BLA takođe igra ključnu ulogu u pamćenju uslovljenih stimulansa povezanih sa stimulansima droge (Grace i Rosenkranz, 2002, Laviolette i Grace, 2006). Lezije ili farmakološke inaktivacije BLA blokiraju akviziciju (Whitelaw et al., 1996) i izraz (Grim i See, 2000) uvjetovan povratak kokaina, ali ne utječe na proces primjene lijekova. Nadalje, Amph infundiran direktno u BLA dovodi do pojačanog vraćanja leka u prisustvu uslovljenih znakova (Vidi et al., 2003). Zbog toga je moguće da transmisija DA sa pojačanim psihostimulansom u BLA rezultira pojačanom emocionalnom istaknutošću i traženjem (Ledford i dr., 2003) seksualne nagrade, doprinoseći na taj način pojačanom seksualnom nagonu i želji prijavljenoj od strane Meth zlostavljača (Semple i dr., 2002, Green i Halkitis, 2006).

U ACA, neuronska aktivacija seks-aktiviranih neurona bila je nezavisna od doze i specifična za Meth, jer nije uočena kod Amph. Iako Meth i Amph imaju slična strukturna i farmakološka svojstva, Meth je moćniji psihostimulant od Amph-a sa dugotrajnim efektima (NIDA, 2006). Studije Goodwin i sur. pokazali su da Meth generira veći efluks DA i djelotvornije inhibira klirens lokalno primijenjenog DA u NAc pacova nego u Amph. Ove karakteristike mogu doprinijeti ovisnosti o Methu u usporedbi s Amph (Goodwin i dr., 2009i možda razlike u neuralnoj aktivaciji koje su uočene između dva lijeka. Međutim, nije jasno da li su različiti obrasci rezultata rezultat razlika u efikasnosti između lijekova ili problema potencije koji se odnose na upotrijebljene doze i potrebno je dalje istraživanje.

Ko-aktivacija Methom i polom nije uočena u drugim podregijama mPFC (IL i PL). Kod štakora, ACA je opsežno proučavana pomoću zadataka apetita, podržavajući ulogu u asocijacijama stimulans-pojačivač (Everitt i dr., 1999, Vidi, 2002, Cardinal et al., 2003). Postoji dovoljno dokaza da je mPFC uključen u žudnju za narkoticima i povratak u potragu za drogom i ponašanje kod uzimanja droge kod ljudi i pacova. (Grant i dr., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin i See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas i Volkow, 2005). IU skladu s tim, predloženo je da disfunkcionalnost mPFC-a uzrokovana ponovljenom izloženošću lijekovima može biti odgovorna za smanjenu kontrolu impulsa i povećano ponašanje usmjereno na lijekove, kao što se primjećuje kod mnogih ovisnika (Jentsch i Taylor, 1999). Nedavni podaci iz naše laboratorije pokazali su da lezije mPFC-a dovode do nastavka traženja seksualnog ponašanja kada je to povezano sa averzivnim stimulusom. (Davis i dr., 2003). Iako ova studija nije istraživala ACA, ona podržava hipotezu da mPFC (i ACA specifično) posreduju efekte Metha na gubitak inhibitorne kontrole nad seksualnim ponašanjem kao što su prijavili Meth zlostavljači (Salo i dr., 2007).

Zaključno, ove studije čine ključni prvi korak ka boljem razumijevanju načina na koji droge djeluju na neuronske puteve koji normalno posreduju prirodne nagrade. Štaviše, ovi rezultati ilustruju da, za razliku od sadašnjeg uvjerenja da droge zlostavljanja ne aktiviraju iste stanice u mezolimbičkom sistemu kao prirodnu nagradu, Meth, iu manjoj mjeri Amph, aktivira iste stanice kao seksualno ponašanje. Zauzvrat, ove ko-aktivirane neuralne populacije mogu utjecati na traženje prirodne nagrade nakon izlaganja lijeku. Konačno, rezultati ove studije mogu značajno doprinijeti našem razumijevanju osnove ovisnosti općenito. Poređenja sličnosti i razlika, kao i promene u neuralnoj aktivaciji mezolimbičkog sistema izazvane seksualnim ponašanjem u odnosu na droge zloupotrebe mogu dovesti do boljeg razumevanja zloupotrebe supstanci i povezanih promena u prirodnoj nagradi.

priznanja

Ovo istraživanje je podržano grantovima Nacionalnog instituta za zdravlje R01 DA014591 i kanadskim institutima za istraživanje zdravlja RN 014705 za LMC.

SKRAĆENICE

  • ABC
  • kompleks avidin-biotin – peroksidaza hrena
  • ACA
  • anterior cingulate area
  • Amph
  • d-amfetamin
  • BLA
  • basolateral amygdala
  • BNSTpl
  • posterolateralni nukleus strie terminalis
  • BNSTpm
  • posteromedijalno ležište jezgre stria terminalis
  • BT
  • biotinilirani tiramid
  • CeA
  • cental amygdala
  • CPP
  • preferencijalno mjesto
  • E
  • ejakulacija
  • EL
  • latencija ejakulacije
  • IF
  • infralimbičko područje
  • IL
  • latencija intromisije
  • IM
  • intromission
  • M
  • montiranje
  • MAP Kinaza
  • protein kinaza aktivirana mitogenom
  • MEApd
  • posterodorsalna medijska amigdala
  • Meth
  • metamfetamin
  • ML
  • mount latency
  • mPFC
  • medijalni prefrontalni korteks
  • MPN
  • medijska preoptična jezgra
  • NAc
  • nucleus Accumbens
  • PB
  • fosfatni pufer
  • PBS
  • fosfatni pufer
  • PEI
  • post ejakulacijski interval
  • pERK
  • fosforilirana MAP kinaza
  • PL
  • prelimbijsko područje
  • VTA
  • ventralna tegmentalna oblast

Fusnote

Izjava izdavača: Ovo je PDF fajl neregistrovanog rukopisa koji je prihvaćen za objavljivanje. Kao uslugu našim klijentima pružamo ovu ranu verziju rukopisa. Rukopis će biti podvrgnut kopiranju, slaganju i pregledu rezultirajućeg dokaza prije nego što bude objavljen u konačnom obliku. Imajte na umu da se tokom proizvodnog procesa mogu otkriti greške koje mogu uticati na sadržaj, a sve pravne izjave koje se odnose na časopis pripadaju.

reference

  1. Agmo A. Seksualno ponašanje mužjaka. Brain Res Brain Res Protoc. 1997: 1: 203 – 209. [\ TPubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Jačanje svojstava ejakulacije kod mužjaka štakora: uloga opioida i dopamina. Behav Neurosci. 1990: 104: 177 – 182. [\ TPubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padova M, Velazquez G. Nagrada i pojačanje proizvedeno vodom za piće: Uloga opioida i podtipova dopaminskih receptora. Pharmacol Biochem Behav. 1993;PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksualno ponašanje i spolni aspekti životne sredine aktiviraju mezolimbički sistem kod mužjaka pacova. Neuropsychopharmacology. 2004: 29: 718 – 730. [\ TPubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Povećana ekspresija c-fos u medijalnom preoptičkom području nakon parenja kod mužjaka pacova: Uloga aferentnih ulaza iz medijalne amigdale i središnjeg segmentnog polja srednjeg mozga. Neuroscience. 1992: 50: 627 – 646. [\ TPubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Uloga prefrontalnog korteksa u vraćanju kokaina u stres i kokain u potrazi za kokainom kod pacova. Psihofarmakologija (Berl) 2003; 168: 66 – 74. [\ TPubMed]
  7. Cardinal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emocije i motivacija: uloga amigdale, ventralnog striatuma i prefrontalnog korteksa. Neuroznanost i bio-bihevioralni pregledi. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Uloga prednjeg cingularnog korteksa u kontroli ponašanja Pavlovih uvjetovanih stimulusa kod pacova. Behavioral Neuroscience. 2003: 117: 566 – 587. [\ TPubMed]
  9. Carelli RM. Aktivacija akumbensovog okidanja ćelija stimulansima povezanim sa isporukom kokaina tokom samouprave. Synapse. 2000: 35: 238 – 242. [\ TPubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens puca iz ćelija tokom ciljno usmjerenog ponašanja kokaina naspram 'prirodnog' pojačanja. Fiziologija i ponašanje. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektivna aktivacija neurona akumbensa podražajima povezanim sa kokainom tokom višestrukog rasporeda vode / kokaina. Brain Research. 2001: 907: 156 – 161. [\ TPubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Dokazi da odvojeni neuronski krugovi u nucleus accumbens kodiraju kokain protiv “prirodne” (vode i hrane) nagrade. J Neurosci. 2000: 20: 4255 – 4266. [\ TPubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funkcionalna mikrocirkuriranje u akumbensu koji leži u osnovi ovisnosti o drogama: uvidi iz signalizacije u realnom vremenu tokom ponašanja. Current Opinion in Neurobiology. 2004: 14: 763 – 768. [\ TPubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektivno kodiranje kokaina naspram prirodnih nagrada od strane neurona nucleus accumbens nije povezano sa kroničnom izloženošću lijekovima. J Neurosci. 2003: 23: 11214 – 11223. [\ TPubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronski odgovori u prefrontalnom korteksu i nukleusu akumbensa tokom samo-davanja heroina u slobodno pokretnih štakora. Brain Res. 1997: 754: 12 – 20. [\ TPubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain, ali ne i prirodna nagrada Samoupravljanje i pasivna infuzija kokaina stvara trajni LTP u VTA. Neuron. 2008: 59: 288 – 297. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Poboljšana Cdk5 aktivnost i p35 translokacija u Ventral Striatum akutnih i hroničnih metamfetamina tretiranih pacova. Neuropsychopharmacology. 2004: 30: 538 – 549. [\ TPubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbička aktivacija tokom kokainske žudnje izazvane cueom. Am J Psychiatry. 1999: 156: 11 – 18. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamin povećava fosforilaciju ekstracelularnih signalno-reguliranih kinaza i faktora transkripcije u striatumu štakora preko metabotropnih glutamatnih receptora grupe I. Neuropsychopharmacology. 2002: 27: 565 – 575. [\ TPubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reguliše fosforilaciju izazvanu amfetaminom ERK1 / 2 u striatnim neuronima. Neuroreport. 2002: 13: 1013 – 1016. [\ TPubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Društvo za bihevioralnu neuroendokrinologiju. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoni i ponašanje; 2003. Lezije medijalnog prefrontalnog korteksa ne ometaju seksualno ponašanje kod mužjaka pacova; str. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Lijekovi koje ljudi zloupotrebljavaju preferencijalno povećavaju koncentracije sinaptičkog dopamina u mezolimbičkom sistemu slobodno pokretnih štakora. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274 – 5278. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Parenje aktivira NMDA receptore u medijalnom predoptičkom području muških pacova. Behavioral Neuroscience. 2007: 121: 1023 – 1031. [\ TPubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Prediktori seksualnog rizika kod novih korisnika droga. Časopis za istraživanje seksa. 2006: 43: 318 – 327. [\ TPubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Pharmacotherapy of Methamphetamine Addiction: Update. Zloupotreba supstanci. 2008: 29: 31 – 49. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Seksualna motivacija: neuronska i bihevioralna analiza mehanizama koji leže u osnovi apetitnih i kopulatornih odgovora muških pacova. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217 – 232. [\ TPubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interakcije između amigdale i ventralnog striatuma u asocijacijama stimulusa i nagrađivanja: Studije koje koriste raspored seksualnog pojačanja drugog reda. Neuroscience. 1989: 30: 63 – 75. [\ TPubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studije o instrumentalnom ponašanju kod seksualnog pojačanja kod mužjaka štakora (Rattus norvegicus): I. Kontrola kratkim vizualnim stimulusima uparenim sa receptivnom ženkom. J Comp Psihol. 1987: 101: 395 – 406. [\ TPubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Asocijativni procesi u zavisnosti i nagradi Uloga amigdala-ventralnog stratalnog podsistema. Anali Njujorške akademije nauka. 1999: 877: 412 – 438. [\ TPubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studije instrumentalnog ponašanja kod seksualnog pojačanja kod mužjaka štakora (Rattus norvegicus): II. Efekti preoptičkih lezija, kastracija i testosteron. J Comp Psihol. 1987: 101: 407 – 419. [\ TPubMed]
  31. Feltenstein MW, vidi RE. Neurocirkuitri zavisnosti: pregled. Br J Pharmacol. 2008: 154: 261 – 274. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Ekspresija c-fos mRNA izazvane amfetaminom u kaudat-putamenu: efekti antagonista DA i NMDA receptora variraju kao funkcija neuronskog fenotipa i okolinskog konteksta. Journal of Neurochemistry. 2003: 86: 33 – 44. [\ TPubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dinamičke promene u izlučivanju jezgre nukleusa akumbensa tokom Coolidge efekta kod mužjaka pacova. J Neurosci. 1997: 17: 4849 – 4855. [\ TPubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Olakšavanje seksualnog ponašanja i poboljšanog dopaminskog efluksa u nuklearnim akumulacijama muških pacova nakon D-amfetamin-izazvane senzibilizacije ponašanja. J Neurosci. 1999a: 19: 456 – 463. [\ TPubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Olakšavanje seksualnog ponašanja kod mužjaka pacova nakon d-amfetamin-indukovane senzibilizacije ponašanja. Psychopharmacology. 1999b: 142: 200 – 208. [\ TPubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin i metamfetamin diferencijalno utiču na dopaminske transportere u vitro i in vivo. J Biol Chem. 2009: 284: 2978 – 2989. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulacija uslovnih odgovora neurona bazolateralne amigdale. Fiziologija i ponašanje. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktiviranje memorijskih krugova tokom žestoke kokainske žudnje. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040 – 12045. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  39. Zelena AI, Halkitis PN. Kristalni metamfetamin i seksualna društvenost u urbanoj homoseksualnoj supkulturi: izborni afinitet. Kultura, zdravlje i seksualnost. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, vidi RE. Disocijacija primarnih i sekundarnih limbičkih jezgara u životinjskom modelu relapsa. Neuropsychopharmacology. 2000: 22: 473 – 479. [\ TPubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interakcije hormon-neurotransmitera u kontroli seksualnog ponašanja. Istraživanje bihevioralnog mozga. 1999: 105: 105 – 116. [\ TPubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Muško seksualno ponašanje. U: Pfaff DW, et al., Urednici. Hormoni Mozak i ponašanje. San Diego, CA: Elsevier Science (SAD); 2002. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamin i serotonin: utjecaji na muško seksualno ponašanje. Fiziologija i ponašanje. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efekti pojedinačne i ponovljene primjene metamfetamina ili morfina na ekspresiju gena neuroglikana C u mozgu štakora. International Journal of Neuropsychopharmacology. 2006: 9: 407 – 415. [\ TPubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Kondicionirane preferencije mjesta (CPP) za visokokalorične “snack food” u sojevima pacova genetski sklonih protiv otpornosti na gojaznost uzrokovanu dijetom: Rezistencija na blokadu naltreksona. Farmakologija Biohemija i ponašanje. 2007: 86: 699 – 704. [\ TPubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Uticaj opioidnog antagonizma na uslovljene preferencije mjesta za užinu. Farmakologija Biohemija i ponašanje. 2006: 83: 257 – 264. [\ TPubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivnost koja je rezultat frontostriatalne disfunkcije u zloupotrebi droga: implikacije za kontrolu ponašanja stimulusa povezanog sa nagradom. Psihofarmakologija (Berl) 1999; 146: 373 – 390. [\ TPubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Neuralna osnova zavisnosti: patologija motivacije i izbora. Am J Psychiatry. 2005: 162: 1403 – 1413. [\ TPubMed]
  49. Kelley AE. Memorija i ovisnost: zajednička neuronska kola i molekularni mehanizmi. Neuron. 2004: 44: 161 – 179. [\ TPubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Suprotne uloge nukleusa akumbensa i prednje bočne hipotalamičke oblasti u kontroli seksualnog ponašanja kod mužjaka štakora. European Journal of Neuroscience. 2004: 19: 698 – 704. [\ TPubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Kanabinoidi potenciraju emocionalnu plastičnost učenja u neuronima medijalnog prefrontalnog korteksa kroz basolateralne amigdalne ulaze. J Neurosci. 2006: 26: 6458 – 6468. [\ TPubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, vidi RE. Pojačana ponovna uspostava ponašanja koje traži kokain nakon infuzije D-amfetamina u bazolateralnu amigdalu. Neuropsychopharmacology. 2003: 28: 1721 – 1729. [\ TPubMed]
  53. Lett BT. Ponovljene izloženosti se intenziviraju, a ne umanjuju efekte nagrađivanja amfetamina, morfina i kokaina. Psihofarmakologija (Berl) 1989; 98: 357 – 362. [\ TPubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Seksualno ponašanje kod mužjaka pacova nakon radiofrekventnih ili dopaminskih oštećenja u nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998: 60: 585 – 592. [\ TPubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Lateralni hipotalamični serotonin inhibira nukleusne akne Dopamin: implikacije za seksualnu sretnost. J Neurosci. 1999: 19: 7648 – 7652. [\ TPubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efekti antagonista D1-a i seksualnog iskustva na kopulaciono-indukovanu Fos-imunoreaktivnost u medijalnom preoptičkom jezgru. Brain Research. 1999: 829: 55 – 68. [\ TPubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Samo pačenje samopoštovanjem nagrađuje se kod štakora oba pola. Horm Behav. 2001: 40: 510 – 517. [\ TPubMed]
  58. McLaughlin J, vidi RE. Selektivna inaktivacija dorsomedijalnog prefrontalnog korteksa i bazolateralne amigdale slabi uslovno povratno uspostavljanje pojave potlačenog kokaina u štakora. Psihofarmakologija (Berl) 2003; 168: 57 – 65. [\ TPubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Olakšavanje seksualnog ponašanja kod mužjaka štakora u prisustvu stimulansa prethodno uparenih sa sistemskim injekcijama morfijuma. Farmakologija Biohemija i ponašanje. 1990: 35: 367 – 372. [\ TPubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regulacija nagrađivanja metamfetamina putem izvanstanične signalno-regulirane kinaze 1 / 2 / ets-like gen-1 signalizirajući put putem aktivacije dopamin NIDA ( Serija izveštaja o istraživanju: Zloupotreba metamfetamina i dodavanje 2006 NIH Broj publikacije 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Revalorizacija ojačala i uslovljena prednost mjesta. Fiziologija i ponašanje. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Putovi seksualne želje. Časopis seksualne medicine. 2009: 6: 1506 – 1533. [\ TPubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psihofarmakologija seksualnog ponašanja. U: Bloom FE, Kupfer DJ, urednici. Psihofarmakologija: četvrta generacija napretka. New York: Raven; 1995. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implikacije neposredne-rane indukcije gena u mozgu nakon seksualne stimulacije ženskih i muških glodavaca. Brain Research Bulletin. 1997: 44: 397 – 407. [\ TPubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicioniranje i seksualno ponašanje: pregled. Horm Behav. 2001: 40: 291 – 321. [\ TPubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Diferencijalni efekti antagonista dopaminskih receptora na seksualno ponašanje mužjaka pacova. Psychopharmacology. 1989: 98: 363 – 368. [\ TPubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Mezolimbični dopaminski sistem: Konačni zajednički put za pojačavanje učinka zloupotrebe droga? Neuroznanost i bio-bihevioralni pregledi. 2006; 30: 215-238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Seksualno iskustvo izaziva funkcionalnu i strukturalnu plastičnost mezolimbičkog sistema. Biological Psychiatry. 2009 U štampi.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Fluktuacije dopamina u nukleusu akumbensa tokom održavanja, izumiranja i ponovnog uspostavljanja intravenske D-amfetaminske samouprave. J Neurosci. 1999: 19: 4102 – 4109. [\ TPubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Droge i seksualni efekti: uloga vrste droge i spol. Časopis o tretmanu zloupotrebe supstanci. 2002: 22: 103 – 108. [\ TPubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Seksualno ponašanje povećava izražaj c-fos u prednjem mozgu muškog štakora. Brain Res. 1991: 564: 352 – 357. [\ TPubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Aktivnost u toku višestrukog rasporeda za pojačanje vode i saharoze kod štakora. Synapse. 2002: 43: 223 – 226. [\ TPubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Kontrola pažnje i nivoi metabolita u metamfetaminu. Biological Psychiatry. 2007: 61: 1272 – 1280. [\ TPubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Kristalni metamfetamin i ekstazi razlikuju se u odnosu na nesiguran seks među mladim gej muškarcima. Kanadski dnevnik javnog zdravlja. 2005: 96: 340 – 343. [\ TPubMed]
  75. Vidi RE. Neuralni supstrati uvjetovanog povratka na ponašanje u potrazi za drogom. Farmakologija Biohemija i ponašanje. 2002: 71: 517 – 529. [\ TPubMed]
  76. Vidi RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse i Amigdala. Anali Njujorške akademije nauka. 2003: 985: 294 – 307. [\ TPubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivacije povezane sa upotrebom metamfetamina među HIV-om muškaraca koji imaju seks sa muškarcima. Časopis o tretmanu zloupotrebe supstanci. 2002: 22: 149 – 156. [\ TPubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Model povratka droge: povijest, metodologija i glavni nalazi. Psihofarmakologija (Berl) 2003; 168: 3 – 20. [\ TPubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Senzibilizacija na uslovne efekte kokaina: farmakološke i vremenske karakteristike. J Pharmacol Exp Ther. 1995: 273: 808 – 815. [\ TPubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Senzibilizacija za uvjetovane efekte nagrađivanja morfija: farmakologija i vremenske karakteristike. Eur J Pharmacol. 1996: 299: 33 – 39. [\ TPubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Prediktori rizika od seksualnog rizika od HIV-a u uzorku zajednice injekcija muškaraca i žena koje koriste droge. AIDS i ponašanje. 2003: 7: 383 – 393. [\ TPubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Upotreba metamfetamina i ponašanje seksualnog rizika u američkim srednjoškolcima: Nalazi iz Nacionalnog istraživanja o rizicima. Prevention Science. 2007: 8: 103 – 113. [\ TPubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efekti dopaminskih i NMDA receptora na ekspresiju Fos-a izazvanu kokainom u striatumu Fischer štakora. Brain Research. 2008: 1243: 1 – 9. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  84. Swanson LW, urednik. Karte mozga: struktura mozga pacova. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksualna nagrada kod mužjaka pacova: Efekti seksualnog iskustva na uslovljenu preferenciju mjesta povezanu s ejakulacijama i intromisijama. Horm Behav. 2008 [PMC besplatan članak] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Stranice C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Uključivanje ekstracelularne signalno-regulirane kaskade kinaze za svojstva koja nagrađuju kokain. J Neurosci. 2000: 20: 8701 – 8709. [\ TPubMed]
  87. Valjent E, Stranice C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Lekovi koji izazivaju zavisnost i ne izazivaju zavisnost izazivaju jasne i specifične obrasce aktivacije ERK u mozgu miša. Eur J Neurosci. 2004: 19: 1826 – 1836. [\ TPubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulacija kaskade protein fosfataze omogućava konvergentne signale dopamina i glutamata da aktiviraju ERK u striatumu. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491 – 496. [\ TPMC besplatan članak] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Promene u dopaminergičkom i glutamatergičnom prenosu u indukciji i izražavanju senzibilizacije ponašanja: kritički pregled predkliničkih studija. Psihofarmakologija (Berl) 2000; 151: 99 – 120. [\ TPubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neuralna aktivacija nakon seksualnog ponašanja u muškom i ženskom mozgu štakora. Istraživanje bihevioralnog mozga. 1998: 92: 181 – 193. [\ TPubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Eksitotoksične lezije bazolateralne amigdale narušavaju akviziciju ponašanja koje traži kokain prema rasporedu pojačanja drugog reda. Psychopharmacology. 1996: 127: 213 – 224. [\ TPubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologija ovisnosti. Current Opinion in Neurobiology. 1996: 6: 243 – 251. [\ TPubMed]