izvor
Odeljenje za ćeliju i neurobiologiju, Medicinski fakultet Keck, Univerzitet Južne Kalifornije, Los Angeles, CA 90033, SAD.
sažetak
Zloupotreba anaboličko-androgenog steroida (AAS) je široko rasprostranjena. Štaviše, AAS pojačavaju, kao što pokazuje samoupravljanje kod glodavaca. Međutim, receptori koji prenose pojačavajuće efekte AAS-a su nejasni. AAS se može vezati za klasične nuklearne androgen receptore (AR) ili membranske receptore. Koristili smo dva pristupa za ispitivanje uloge nuklearnih AR u samoupravljanju AAS. Prvo smo testirali samo-administraciju androgena kod pacova sa mutacijom feminizacije testisa (Tfm), koja ometa vezivanje androgena. Ako su nuklearni AR neophodni za samoupravljanje AAS, mužjaci Tfm ne bi trebali samostalno davati androgene. Mužjaci Tfm i divlji tip (WT) littermates samostalno su davali nearomatizirajući androgeni dihidrotestosteron (DHT) ili intracerebroventrikularno sredstvo (ICV) u rasporedu fiksnog odnosa (FR) do FR5. I Tfm i WT pacovi su dobili preferenciju za aktivni nos u toku samo-administracije DHT-a (66.4 +/- 9.6 odgovori / 4 h za Tfm i 79.2 +/- 11.5 za WT odgovore / 4 h), a nos-pokes povećan kao Povećana je FR zahtjev. Preferirani rezultati su bili značajno niži kod samonadzora kod pacova (42.3 +/- 5.3 odgovori / 4 h za Tfm i 19.1 +/- 4.0 odgovora / 4 h za WT). Takođe smo testirali samo-davanje DHT konjugovanog na goveđi serum albumin (BSA) na C3 i C17, koji je ograničen na radnje na površini ćelije. Hamsterima je dozvoljeno da samostalno administriraju DHT, BSA i DHT-BSA konjugate za 15 dana na FR1. Hrčci su pokazali značajnu prednost za DHT (18.0 +/- 4.1 odgovora / 4 h) ili DHT-BSA konjugate (10.0 +/- 3.7 odgovori / 4 h i 21.0 +/- 7.2 odgovori / 4 h), ali ne i za BSA (2.5 + / -2.4 odgovori / 4 h). Uzeti zajedno, ovi podaci pokazuju da nuklearni AR nisu potrebni za samo-administraciju androgena. Osim toga, samo-administracija androgena može biti posredovana receptorom plazma membrane.
Copyright 2010 Elsevier doo Sva prava pridržana.
Anabolički-androgeni steroidi (AAS) su droga zloupotrebe. Ovi derivati testosterona (T) se koriste u sportske i estetske svrhe (Yesalis i dr., 1993). Nuspojave se kreću od hipogonadizma i ginekomastije do srčane i hepatičke disfunkcije (Leshner, 2000). Pored toga, akumuliraju se dokazi da zloupotreba AAS uzrokuje promjene u raspoloženju (Pope i Katz, 1994), agresija (Choi i Pope, 1994, Kouri i dr., 1995), i može proizvesti zavisnost (Brower et al., 1991, Brower, 2002). Uprkos rastućoj zabrinutosti, osnovni mehanizmi zloupotrebe AAS-a nisu dobro shvaćeni.
Kod ljudi se tvrdi da je iniciranje upotrebe AAS uglavnom motivisano anaboličkim efektima, ali neki zlostavljači na kraju razvijaju zavisnost (Brower, 2002). Dokazi iz istraživanja na životinjama podržavaju ovu hipotezu. AAS izaziva uslovljenu preferenciju mjesta (CPP) kod miševa (Arnedo i dr., 2000) i štakori (Packard i dr., 1997, Packard i dr., 1998, Frye et al., 2002). Osim toga, hrčci dobrovoljno konzumiraju AAS putem oralne (Drvo, 2002), intravenski (Wood i dr., 2004), i intracerebroventrikularne (ICV) samouprave (DiMeo i Wood, 2004, Triemstra i Wood, 2004, Wood i dr., 2004, DiMeo i Wood, 2006b).
Iako samouprava ICV-a sugeriše centralna mjesta djelovanja, specifični hormoni i receptori koji posreduju pojačanje AAS-a nisu jasni. Postojeći dokazi sugerišu da pojačavajući efekti T posreduju androgeni, a ne estrogeni nakon aromatizacije. Muški hrčci će sami davati dihidrotestosteron (DHT; DiMeo i Wood, 2006b) i drugi ne-aromatizirajući androgeni (Ballard i Wood, 2005). Osim toga, T-samoupravljanje je blokirano anti-androgenskim flutamidom (Peters i Wood, 2004). Sada se postavlja pitanje: kako se androgeni signal prenosi u mozgu?
Androgeni receptor (AR) je klasični nuklearni steroidni receptor koji funkcionira kao transkripcijski faktor. AR su retke u strukturama koje su povezane sa zloupotrebom droga, kao što su nucleus accumbens (Acb) i ventralna tegmentalna oblast (VTA; Simerly i dr., 1990, Wood i Newman, 1999). Takođe postoje dokazi za gonadalne steroide koji deluju preko receptora na površini ćelije (Mermelstein i dr., 1996, Zhu et al., 2003, Thomas et al., 2006, Vasudevan i Pfaff, 2007).
U ovoj studiji smo koristili dva pristupa za određivanje uloge klasičnog nuklearnog AR u armiranju androgena. Da bi se minimizirala moguća aktivacija estrogenskih receptora (ER), testirali smo DHT samoupravu. U prvom eksperimentu, pacovi sa mutacijom feminizacije testisa (Tfm) su testirani na ICV samoupravljanje DHT. Tfm je supstitucija jedne baze koja rezultira neispravnim AR-ovima s ograničenim vezanjem liganda (Yarbrough i dr., 1990). Muški Tfm pacovi pokazuju spoljašnji ženski fenotip zbog nedovoljne androgene stimulacije tokom razvoja (Zuloaga et al., 2008b). Ako su funkcionalne nuklearne AR neophodne za pojačanje AAS, Tfm pacovi ne smiju samostalno davati DHT. Umesto toga, Tfm pacovi su bili u stanju da steknu samoupravu DHT-a. U drugom eksperimentu, testirali smo ICV samoupravljanje membranski nepropusnih oblika DHT-a u hrčcima. Kada se DHT konjugira s albuminom goveđeg seruma (BSA), njegovo djelovanje je ograničeno na receptore na površini stanice. Ako su nuklearni AR potrebni za pojačanje androgena, hrčci ne bi trebali samostalno davati DHT konjugovani s BSA. Naprotiv, hrčci su pokazali jasnu sklonost DHT-u konjugovanom sa BSA. Zajedno, ove studije pokazuju da nuklearni AR nisu potrebni za samo-administraciju androgena. Umesto toga, pojačanje androgena može biti posredovano membranskim AR.
Metode i materijali
teme
Rats
Odrasli mužjaci Tfm pacova i divlji tip (WT) littermates su dobijeni iz kolonije na Michigan State University. Njihov genotip je verifikovan PCR-om, slično prethodno opisanim metodama (Fernandez i dr., 2003). Ukratko, hvataljke za uši su digestirane preko noći na 55 ° C u puferu za liziju koji sadrži proteinazu K, zatim toplotno inaktiviran na 95 ° 30 minuta. AR je pojačan koristeći prednji prajmer 5′-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 primer i obrnuti prajmer 5′-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3 ′, donoseći proizvod 135bp. Amplificirani uzorci su zatim digestirani sa Sau96I restrikcijskim enzimom (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) preko noći na 37 ° C i izvedeni na 3% agaroznom gelu. Samo je WT AR isječen s ovim restrikcijskim enzimom, ostavljajući dvije trake ispod 100bp, dok Tfm AR ostaje neprekinut. Tfm životinje su potvrđene i fenotipom, prisustvom bradavica, ženskim anogenitalnim rastojanjem i abdominalnim testisima. Tfm pacovi su prethodno korišćeni za demonstraciju ne-genomskih androgenih efekata u hipokampusu (MacLusky i dr., 2006). Na početku eksperimenta, WT pacovi su bili između 75 do 140 dan stari, a Tfm pacovi su bili između 75 do 138 dana stari.
Hamsters
Odrasli muški sirijski hrčci (130 - 150 g) su dobijeni od Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Životinje su držane pojedinačno u ciklusu obrnutog svjetla (14L: 10D) sa dostupnom hranom i vodom ad libitum. Sve eksperimentalne procedure su odobrene od strane institucionalnih odbora za brigu o životinjama i upotreba odgovarajućih institucija i sprovedene u skladu sa Vodič za njegu i upotrebu laboratorijskih životinja (NationalResearchCouncil, 1996).
hirurgija
Sve životinje su implantirane sa 22g vodičem od nerđajućeg čelika (Plastic One, Roanoke, VA) u lateralnu komoru [pacov: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 (Paxinos i Watson, 1998); hrčak: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 (Morin i Wood, 2001), mm od bregme], pod Na+ pentobarbitalna anestezija (pacov: 50 mg / kg, hrčak: 100mg / kg) kako je prethodno opisano (Wood i dr., 2004). Svi hirurški zahvati izvršeni su u aseptičnim uslovima prema Principi brige za laboratorijske životinje (NIH, 1985). Životinjama je dozvoljeno da se oporave najmanje nedelju dana nakon operacije pre testiranja.
droga
DHT, DHT-karboksimetil-oksim (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisukcinat (Hemis) i DHT-Hemis-BSA su dobijeni od Steraloids (Newport, RI). U DHT-CMO-BSA, DHT je konjugiran na BSA na poziciji C3 sa CMO kao linker. Slično tome, DHT je povezan sa BSA na poziciji C17 putem Hemis-a da bi formirao DHT-Hemis-BSA. Oba DHT-CMO-BSA (Gatson et al., 2006) i DHT-Hemis-BSA (Braun i Thomas, 2003) ranije su korišćeni za istraživanje mogućih efekata androgena na plazmatskoj membrani. DHT je rastvoren u vodenom rastvoru 13% β-ciklodekstrina (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) na 1μg / μl. Kao što je utvrđeno iz naše prethodne studije kod hrčaka, ova doza proizvodi snažan operantski odgovor tokom samo-administracije ICV-a (DiMeo i Wood, 2006b). Derivati DHT rastvoreni su u istom nosaču pri molarnoj ekvivalentnoj koncentraciji DHT (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-Hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) je rastvoren u istom nosaču na 7.45 μg / μl da bi se postigla molarna ekvivalentna koncentracija BSA kao u DHT-CMO-BSA i DHT-Hemis-BSA. Lijekovi koji sadrže BSA pripremani su svakodnevno neposredno prije upotrebe kako bi se izbjegla degradacija, a sve otopine su filtrirane kroz 0.22 μm filter. Prethodne studije su pokazale da se mali postotak steroida odvaja od BSA (Stevis i dr., 1999), a ta količina nije dovoljna da izazove značajne androgene efekte (Lieberherr i Grosse, 1994, Gatson et al., 2006). Isto tako, naša ranija studija je pokazala da se DHT primjenjuje samostalno na 1.0 μg / μl, ali ne na 0.1 μg / μl (DiMeo i Wood, 2006b). Stoga je malo vjerojatno da se slobodni DHT (> 10%) disocira od BSA u dovoljnoj količini da podrži samoupravljanje.
aparat
Životinjama je bilo dozvoljeno da samostalno administriraju otopinu lijeka ili vehikuluma 4 sati / dan, 5 dana / tjedan u operantnoj komori (Med Associates, St. Albans, VT) zatvorene u komoru za prigušivanje zvuka s prisilnom ventilacijom. Svaka komora je bila opremljena kućnim svjetlom, 2 rupama za provlačenje nosa i kompjuterski kontroliranom pumpom za špric spojenu s tekućim zakretanjem na ruci za ravnotežu. Rastvori iz staklene štrcaljke 100 μl isporučeni su životinji kroz Tygon cijevi spojene na okretni dio. Cijevi koje spajaju okretno i ICV kanila bile su zaštićene metalnom oprugom. Rastvor leka ili vehikulum je isporučen preko 28-ga unutrašnje kanile umetnute u vodeću kanilu neposredno pre ispitivanja. Svaka infuzija je dostavila 1 μl rastvora na 0.2 μl / s. Nos-rupice su se nalazile 6 cm od poda ispod kuće. Jedna od rupica za nos je označena kao aktivna rupa. Odgovor na ovu rupu je zabilježen kao aktivni nos (R: aktivni-ojačan) i izbrojen prema zahtjevima odgovora (FR1 do 5) za pokretanje infuzije. Jednom kada je infuzija aktivirana, svetlo kuće je ugasilo i aktivna rupa je osvetljena tokom infuzije 5-a da bi se pomoglo u diskriminaciji aktivne rupice za nos. Nos-poking u aktivnoj rupi tokom ovog vremenskog perioda 5-a je zabeležen, ali se nije računao na dodatno pojačanje (NR: aktivno-ne-ojačano). Odgovor na drugu rupu u nosu je zabeležen kao neaktivni nos (I), ali nije doveo do bilo kakve infuzije. Položaj aktivne rupe za otvaranje nosa prema prednjem ili zadnjem delu komore bio je uravnotežen da bi se kontrolisale bočne preferencije. Podatke je snimio WMPC softver (Med Associate) na Windows PC-u.
ICV samoupravljanje
Rats
Samo-administracija DHT-a u Tfm i WT pacovima pratila je rastući fiksni odnos (FR) od FR1 do FR5. Štakori su prvobitno trenirani na FR1-u, gdje je svaki odgovor na aktivni nos bio pojačan. Nakon toga, broj odgovora potrebnih za dobijanje infuzije povećan je za jedan dan svakog 5 dana. Na FR5-u, pet odgovora na aktivnu rupu za nos je bilo potrebno za infuziju. Sve u svemu, pacovi su testirani na FR1 za 10 dana i FR2 do FR5 (5 dana svaki), za ukupno 30 dana. Štakori iz svakog genotipa su nasumično raspoređeni ili u DHT ili u vehikulum (Veh) grupe, i dozvoljeno im je da samostalno administriraju DHT ili βCD vozilo. Trideset šest pacova (nWT = 19, nTfm = 17) su korišteni u ovom eksperimentu.
Hamsters
Hrčak je testiran prema rasporedu FR1 za 15 dana. U prethodnim studijama, 15 dani ICV T samouprave su dovoljni da se dobije prednost za aktivni nos. Hrčci su nasumično raspoređeni u DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8) ), ili BSA (n = 9) grupe.
Analiza podataka
Rats
Dnevni preferencijalni rezultati za aktivni nos su određeni oduzimanjem neaktivnog nosa od zbroja aktivnih pojačanih i aktivnih nearmiranih nosova (R + NR-I). Prosečna preferencijalna ocena izračunata je za svaku životinju od poslednjih 5 dana FR1 i tokom FR2 do FR5. Pored toga, prosečan broj pojačanja po sesiji za svaku životinju na svakoj FR je upoređen.
Podaci su analizirani ANOVA-om na način 3, sa genotipom (WT ili Tfm), lijekom (DHT ili nosačem) i FR rasporedom (1 N 5) kao faktorima između subjekata. FR raspored je tretiran kao faktor, jer neke životinje nisu uspjele završiti cijeli 30 dana testiranja zbog začepljenja ICV vodiča. U tim slučajevima u analizu su uključeni samo podaci iz završenih rasporeda. Broj životinja uključenih u svaki uvjet prikazan je u Tabela 1. Trodelna ANOVA je praćena odgovarajućim ANOVA-ima nižeg reda za jednostavne efekte. Newman-Keuls test za post-hoc usporedbe parova korišten je kada je to bilo potrebno.
Tabela 1
Hamsters
Za analizu podataka korišćeni su pojedinačni načini R, NR i I. Preferirani skor za svaku životinju određen je oduzimanjem srednje neaktivnog nosa (I) iz srednjeg aktivnog nosa (R + NR-I). Srednja preferencija je analizirana sa jednim uzorkom t-Test protiv 0-a (tj. bez preferencija) za svaku grupu. Dodatno, broj primljenih pojačanja je bio prosječan za svaku životinju. Srednje pojačanje primljeno za svaku grupu lekova je upoređeno sa onim za BSA kontrole sa 2 nezavisnim uzorcima t-test. Životinje koje nisu završile minimum 5 sesija bile su isključene iz analize (1 svaka od DHT-Hemis i DHT-Hemis-BSA grupe).
Sve statističke analize su provedene koristeći SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Za sve analize, p <0.05 smatralo se statistički značajnim. Podaci su predstavljeni kao srednja vrijednost ± SEM po 4h sesiji.
Rezultati
WT i Tfm pacovi samo-daju DHT
Operant reaguje
Figs. 1 ilustrira srednju sklonost aktivnom bockanju nosa (R + RN - I) na svakom FR za DHT i Veh grupe. Pacovi koji su sami sebi davali DHT pokazali su veću sklonost aktivnom bockanju nosa (73.1 ± 7.6 odn. / 4h), u odnosu na kontrole u vozilu (29.8 ± 3.5 odn. / 4h; F1,145 = 31.77, p <0.001). Takođe je postojao glavni efekat FR rasporeda (F4,145 = 4.25, p <0.01), interakcija genotip-lijek (F1,145 = 5.27, p = 0.02), i interakciju prema rasporedu lijek-FR (F4,145 = 2.60, p = 0.02). Nije bilo glavnog efekta genotipa, a druge interakcije nisu bile značajne.
Post-hoc testovi su otkrili da su pacovi koji su sami davali DHT pokazali značajno veću prednost u odnosu na FR raspored (F4,73 = 4.18, p <0.01), povećavajući prednost sa FR1 (33.4 ± 4.4 odn. / 4h) na FR4 (110.8 ± 26.7 odn. / 4h) i FR5 (106.4 ± 18.9 odn. / 4h). U ovoj skupini nije primijećen efekat genotipa (genotip-FR raspored: F4,73 = 0.13, ns; genotip: F1,73 = 0.86, ns).
Nasuprot tome, pacovi koji su sami davali Veh nisu pokazali nikakve promene u odnosu na FR raspored (F4,72 = 0.31, ns), i nema interakcije s planom genotipa-FR (F4,72 = 0.12, ns). Za razliku od DHT, Tfm pacovi su pokazali veću prednost u odnosu na WT u ovoj grupi (42.3 ± 5.3 i 19.1 ± 4.0 resps / 4h, F;4,72 = 11.81, p <0.01).
Infuzije
Prosječan broj infuzija DHT-a i Veh-a primljenih na svakoj FR prikazan je u Sl. 2. Sveukupno, štakori su primili više infuzija kada im je dozvoljeno da samostalno administriraju DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) u odnosu na vozilo (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Takođe je postojao glavni efekat FR rasporeda (F1,145 = 3.32, p = 0.01) i interakciju genotipa i lijeka (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Sve ostale interakcije i glavni efekti nisu bili značajni.
Prosječni dnevni unos DHT-a u svim rasporedima FR bio je sličan kod Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) i WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h) štakora. U obe grupe, unos leka je ostao konstantan kako se FR raspored povećavao (F4,73 = 0.54, ns). Tokom FR1, Tfm i WT mužjaka su samostalno dali DHT na 24.5 ± 2.3 μg / 4h i 37.3 ± 6.7 μg / 4h. Pod rasporedom FR5, DHT samo-administracija je prosečno 18.3 ± 4.5 μg / 4h za Tfm i 23.9 ± 5.9 μg / 4h za WT pacove. Ova grupa nije pokazala razlike zasnovane na rasporedu genotipova ili genotipa-FR (F1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, redom).
Nasuprot tome, u oba Tfm i WT pacova, broj infuzija vozila je značajno opao kako je zahtjev za FR povećan (F)4,72 = 4.73, p <0.01). Pomalo iznenađujuće, Tfm pacovi su sami sebi davali približno dvostruko više vozila (20.7 ± 2.4 μl / 4h) od WT pacova (10.7 ± 1.4 μl / 4h, F1,72 = 7.77, p <0.01). Kod Tfm pacova na FR1, broj infuzija u vozilu (39.9 ± 13.2 μl / 4h) premašio je broj infuzija DHT (24.5 ± 2.3 μl / 4h). Međutim, do kraja eksperimenta, samoupravljanje vozilom opalo je na 10.3 ± 2.4 μl / 4h. Isto tako, WT pacovi su samoprimili vozilo od 18.6 ± 4.1 μl / 4h u FR1, koje je opalo na 6.6 ± 1.8 μl / 4h u FR5.
Srednja telesna težina na početku svakog FR plana i broj životinja u svakom od stanja prikazan je u Tabela 1. WT pacovi su bili značajno teži od pacova Tfm (F1,174 = 144.62, p <0.001), a sve su se skupine vremenom udebljale (F5,174 = 5.59, p <0.001). Nije bilo utjecaja stanja lijeka (DHT naspram Veh) na tjelesnu težinu (F1, 174 = 0.31, ns), ili bilo koju interakciju. Unos DHT-a prilagođen tjelesnoj težini bio je sličan u oba genotipa na oba FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg) i FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).
Sirijski hrčak samoprimjenjuje DHT konjugiran s BSA
Operant reaguje
Hamsteri koji su sami dali DHT i DHT konjugovani sa BSA, ali ne samo BSA. Slika 3a pokazuje srednju sklonost (aktivno - neaktivno bockanje u nosu) za DHT, BSA, DHT-CMO-BSA i DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. U skladu s našim prethodnim studijama, hrčci su razvili sklonost aktivnom bockanju nosom za vrijeme DHT samouprave (t7 = 4.34, p <0.01), ali nije pokazao preferenciju kada se samupravlja BSA (t8 = 1.03, ns). Isto tako, hrčci su pokazali sklonost prema aktivnom nosu sa oba DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) i DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Sa DHT vezanim samo za linkere, hrčci koji su sami upravljali DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), ali nije pokazao značajnu sklonost kada se samupravlja DHT-Hemisom (t10 = 1.87, p = 0.09). Sa DHT-Hemisom, odgovori na aktivni nos (40.5 ± 10.3 resp. / 4h) bili su slični onima za DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), ali ovi muškarci su takođe pokazali povećane reakcije na neaktivni nos -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) u poređenju sa onima za DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
Infuzije
Broj primljenih infuzija za svaku grupu je prikazan u Slika 3b. Hrčci su primili značajno više DHT-a nego BSA infuzije (t15 = 3.04, p = 0.01). Slično tome, hrčci su primili više infuzija kada im je bilo dozvoljeno da sami daju DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) ili DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) u odnosu na BSA. Broj infuzija koje su primljene za DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) i DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) grupe bile su slične onima koje su primijenile DHT, DHT-Hemis-BSA i DHT- CMO. Ipak, hrčci nisu primili znatno više DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) ili DHT-Hemist18 = 1.91, p = 0.07) u odnosu na BSA.
predozirati
Jedanaest 55 hrčaka je umrlo prije završetka svih 15 testova. Prethodno su opisane smrti zbog predoziranja androgenom tokom samo-administracije testosterona (Peters i Wood, 2005). U ovoj studiji, 2 muškaraca 8-a (25%) umro je tokom samo-davanja DHT-a, slično kao kod 24% prijavljenih za predoziranje testosteronom (Peters i Wood, 2005). Samoprimjena DHT-CMO i DHT-Hemis bila je povezana s najvećim gubicima (svaki 3 8 po grupi, 38%), dok je bilo nekoliko smrtnih slučajeva među hrčcima koji su sami davali BSA (1 od 9, 11%) ili DHT -Hemis-BSA (0 od 8). Kao i kod predoziranja testosteronom, nijedan od hrčaka u ovoj studiji nije umro za vrijeme samouprave. Umesto toga, hrčci su umrli nekoliko sati kasnije u kućnim kavezima, sa teškom lokomotornom i respiratornom depresijom.
Predoziranje testosteronom je usko povezano sa unosom testosterona, posebno maksimalnim unosom po sesiji (Peters i Wood, 2005). Sl. 4 upoređuje preferencijalne rezultate, broj primljenih pojačanja i maksimalni unos za hrčke koji su završili sve 15 testne sesije, kao i oni koji nisu. Obe grupe su pokazale značajnu sklonost prema aktivnom nosup <0.05). Međutim, preferencija je bila značajno veća kod hrčaka koji su umrli za vrijeme samo-primjene (25.7 ± 5.2 odn. / 4h) u odnosu na one koji su preživjeli (9.5 ± 2.0 o. / 4h, t53 = 3.42, p <0.01). Hrčci koji nisu uspjeli završiti 15 sesija dobili su više nego dvostruko više infuzija po sesiji (31.2 ± 5.0 inf / 4h) od onih koji su završili sve sesije (14.8 ± 1.1 inf / 4h, t53 = 5.05, p <0.001). Nadalje, za hrčke koji su umrli tokom studije, maksimalni unos po sesiji bio je značajno veći (77.0 ± 9.8 inf / 4h) nego za muškarce koji su preživjeli (36.1 ± 2.9 inf / 4h, t53 = 5.41, p <0.001).
rasprava
Samo-administracija androgena može biti posredovana membranskim, ali ne i nuklearnim androgen receptorima
Trenutna studija pokazuje da klasični nuklearni AR nisu suštinski važni za samo-administraciju androgena. I Tfm i WT pacovi su razvili sklonost prema aktivnom nosu tokom samo-administracije DHT-a. Štaviše, bili su u mogućnosti da odgovore na rastući FR raspored povećavajući aktivni nos, tako održavajući stabilan nivo unosa droge bez obzira na raspored FR. Nasuprot tome, pacovi koji su primili vozilo nisu uspjeli odgovoriti na promjene u FR rasporedu. Njihovi aktivni nosovi nisu značajno porasli u odgovoru na promene u FR rasporedu, i dobili su manje infuzija kako se zahtev za odgovorom povećavao. Budući da je vezivanje liganda za „klasični“ nuklearni androgeni receptor kompromitovano u Tfm mutantima, to potvrđuje našu hipotezu da je androgeno pojačanje posredovano preko alternativnih puteva.
Malo je vjerovatno da će neočekivano visoka reakcija vozila od strane Tfm štakora biti posljedica samog vozila. Uočili smo slične pojave u odvojenoj grupi Tfm pacova koji nisu primali infuzije (podaci nisu prikazani). Umesto toga, ona može biti povezana sa feminiziranim osobinama ponašanja u muškaraca Tfm. Povećani poklopci nosa od Tfm pacova mogu biti analogni višim eksploratornim padovima glave u ženki pacova (Brown i Nemes, 2008). Alternativno, poznato je da pacovi i miševi Tfm pokazuju pojačano ponašanje slično anksioznosti (Zuloaga et al., 2006, Zuloaga et al., 2008a). Možda sedativni / anksiolitički efekti DHT-a (Agren i dr., 1999, Arnedo i dr., 2000, Frye i Seliga, 2001, Berbos i dr., 2002, Peters i Wood, 2005) ukinulo ponašanje slično anksioznosti kada su Tfm pacovi samostalno dali DHT.
Osim toga, samoprimjena DHT-BSA konjugata kod muških hrčaka pruža dokaze da androgeni mogu djelovati na neuronskoj membrani plazme da bi pojačali djelovanje. Hamsteri su pokazali značajnu prednost za oba DHT-BSA konjugata. Doze koje su samostalno primenjene su u skladu sa našim prethodnim studijama o T, DHT i često zloupotrebljavanim steroidima (Ballard i Wood, 2005, DiMeo i Wood, 2006b). Nasuprot tome, hrčci nisu pokazali preferenciju samo za BSA. Podaci o mortalitetu i unosu droge pokazuju da DHT i njegovi derivati mogu biti smrtonosni, proširujući naše prethodne podatke o predoziranju T (Peters i Wood, 2005).
Sadašnja studija otkriva specifičan obrazac operantnog odgovora. Hrčak nije više volio aktivni nos, dok je samoupravljačko vozilo, kao što je prethodno pokazano (Johnson i Wood, 2001, Drvo, 2002, DiMeo i Wood, 2004, Triemstra i Wood, 2004, Wood i dr., 2004, Ballard i Wood, 2005, DiMeo i Wood, 2006b). Kod pacova, međutim, postojala je jasna sklonost aktivnom nosu bez obzira na primljeni lijek. Primijetili smo sličan trend u našoj prethodnoj studiji o IV samoprimjeni T kod štakora, iako to nije bilo statistički značajno (Wood i dr., 2004). Na osnovu takvih specifičnih bihevioralnih razlika u samoupravljanju, mora se voditi računa kada se porede podaci o ponašanju pacova i hrčaka.
Postoji nekoliko upozorenja koje treba razmotriti u tumačenju trenutne studije. Prvo, nuklearni AR sa značajno oštećenim vezanjem liganda su još uvek prisutni u Tfm pacovima (Yarbrough i dr., 1990), za razliku od Tfm miševa (He et al., 1991). Moguće je da su ovi mutirani nuklearni AR dovoljni za posredovanje efekata androgena u supra-fiziološkim dozama. Drugo, DHT-BSA konjugati se mogu degradirati in vivo, što je rezultiralo besplatnim DHT-om. Iako se to nije činilo značajnim pitanjem in vitro (Lieberherr i Grosse, 1994, Gatson et al., 2006), stepen i vremenski tok degradacije DHT-BSA in vivo u mozgu trenutno nije poznato. Konačno, DHT-BSA konjugati ne mogu značajno prodrijeti u tkivo mozga. DHT-BSA je značajno veći od DHT-a, tako da su efekti DHT-BSA koji su uočeni u trenutnoj studiji vjerovatno posredovani na lokacijama u blizini ventrikula.
Uprkos ovim upozorenjima, ova dva različita pristupa proizvela su konzistentne rezultate koji snažno protive neophodnosti nuklearnog AR u pojačanju androgena. Osim toga, samoprimjena konjugata BSA ukazuje da androgeni mogu djelovati na plazmatsku membranu u androgenskom pojačanju. Prema našim saznanjima, sadašnja studija pruža prvo in vivo dokazi za bihevioralno relevantne efekte androgena na membrani plazme.
Androgeni vrše brze nuklearne AR-nezavisne efekte na nagradu
Nekoliko drugih studija o nagrađivanju androgena pokazalo je rezultate koji su u skladu sa ne-genomskim ili efektima plazma membrane. CPP se razvija unutar 30 min sistemske T injekcije (Alexander i dr., 1994), vremenski tok koji je u skladu sa akutnim ne-genomskim efektima T. CPP može se indukovati i intra-Acb infuzijama T ili njegovog metabolita (Packard i dr., 1997, Frye et al., 2002), iako Acb ima nekoliko genomskih AR. Štaviše, VTA izražava Fos kao odgovor na ICV T-infuziju (Dimeo i drvo, 2006a), uprkos nedostatku značajnog klasičnog AR izraza. Trenutna studija ne daje informacije o mjestu djelovanja u mozgu. Ipak, to ukazuje da relativni nedostatak nuklearnog AR nije dovoljan razlog da se isključe strukture kao što su Acb i VTA sa potencijalnih lokacija koje mogu posredovati androgenim efektima.
Učinci steroida u dorzalnom i ventralnom striatumu na plazma membranu nisu ograničeni samo na androgene. Poznato je da progestini indukuju CPP, moguće preko receptora gama-aminobutirne kiseline (GABA) u Acb (Frye, 2007). Estrogeni takođe vrše brze, posredovane receptorske efekte u dorzalnom striatumu (Mermelstein i dr., 1996, Becker i Rudick, 1999). Receptor povezan s membranom već je izoliran za progestine (Zhu et al., 2003), i dokazi se akumuliraju za receptore na površini ćelija za estrogene (pregledano u Vasudevan i Pfaff, 2007) i androgeni (pregledano u Thomas et al., 2006). Dok estrogeni takođe pojačavaju (DiMeo i Wood, 2006b), pojačani efekti T su izgleda pretežno androgeni. Hamsteri se samostalno daju bez aromatizirajućih androgena, kao što su drostanolon i DHT (Ballard i Wood, 2005, DiMeo i Wood, 2006b). Pored toga, anti-androgenski flutamid može blokirati samoregulaciju T (Peters i Wood, 2004). Iako ovo može izgledati kao da je u suprotnosti sa ulogom membranske AR koja je prijavljena u ovoj studiji, objavljeno je da flutamid takođe blokira aktivaciju membrane AR (kao što je to slučaj u ovoj studiji)Braun i Thomas, 2003, Braun i Thomas, 2004).
Svojstva membranskih receptora androgena
Povijesno gledano, učinci steroida, uključujući androgene, smatrani su transduciranim procesima posredovanim nuklearnim receptorima. Međutim, izveštaji o brzim androgenim efektima, koji su verovatno posredovani receptorom povezanim sa membranom, dostupni su već nekoliko decenija. Na primer, u medijalnom predoptičkom području, androgeni mogu da promene pečenje neurona u roku od nekoliko sekundi (Yamada, 1979) do minuta (Pfaff i Pfaffmann, 1969). Nadalje, Orsini i kolege (Orsini, 1985, Orsini i dr., 1985) pokazali su brzu modifikaciju frekvencije pečenja neurona od strane androgena u lateralnom hipotalamusu (LHA). Ovaj efekat androgena u LHA može biti od posebnog značaja za ovu studiju, pošto je poznato da je LHA uključena u shemu nagrađivanja (Olds i Milner, 1954) i LHA oreksin / hipokretin je regulisan gonadnim steroidima (Muschamp i dr., 2007).
Tipovi stanica sa mogućim membranskim membranama uključuju glijal (Gatson et al., 2006), gonada (Braun i Thomas, 2003, Braun i Thomas, 2004) i imunih ćelija (Benten et al., 1999, Guo et al., 2002), miociti (Estrada i dr., 2003), i osteoblasti (Lieberherr i Grosse, 1994). Iako molekularni identitet tek treba da se odredi, kandidati za membranu AR uključuju membranske receptore sa poznatim steroidnim veznim mestima, kao što je GABA-A (pregledano u Lambert et al., 2003) i NR2 podjedinice receptora N-metil-D-asparaginske kiseline (Malayev i dr., 2002). Alternativno, Thomas i njegovi kolege (2004) su izvestili o novom receptoru vezanom za G-protein kao membranu AR. Pored toga, efekti androgena koji nisu povezani sa specifičnim receptorima ne mogu se isključiti u trenutnoj studiji.
skorašnji in vitro studije ukazuju da postoji više membrana na membrani, ili više od jednog veznog mesta na jednom receptoru, kao što je predloženo za membranski progesteronski receptor (Ramirez i dr., 1996). U mnogim tipovima ćelija, membrana AR izgleda da je membranski receptor vezan za Gq / o (Lieberherr i Grosse, 1994, Benten et al., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Estrada i dr., 2003). Međutim, karakteristike vezivanja steroida i osetljivost na anti-androgene pretpostavljene membrane AR značajno variraju u zavisnosti od tipa ćelije. Na primer, anti-androgeni mogu da blokiraju efekte DHT-a na ćelije jajnika (\ tBraun i Thomas, 2003, Braun i Thomas, 2004), dok nisu efikasni u drugim tipovima ćelija (Lieberherr i Grosse, 1994, Benten et al., 2004, Gatson et al., 2006), ili čak mogu imati efekte slične agonistima u hipokampalnim ćelijama (Pike, 2001, Nguyen et al., 2007) i nekoliko staničnih linija raka (Peterziel et al., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou i dr., 2000, Papakonstanti i dr., 2003). Nadalje, za različite organe u ribi su zabilježene različite karakteristike T-vezivanja (Braun i Thomas, 2004).
Naše iskustvo sa često zloupotrebljenim AAS ukazuje na to da velike modifikacije na A-prstenu (kod C2 i / ili C3) i na C17 imaju tendenciju da interferiraju sa samoupravljanjem (Ballard i Wood, 2005). Na primer, stanozolol, koji ima veliku modifikaciju na C2 i C3, kao i metilnu grupu vezanu za C17, se ne daje samostalno. U trenutnoj studiji, hrčci su samostalno uzimali i BSA konjugovane na C3 (DHT-CMO-BSA) i C17 (DHT-Hemis-BSA). Potrebna su daljnja istraživanja kako bi se razjasnile karakteristike samorodnih androgena.
Klinički značaj
AAS, posebno T, su daleko najčešći agensi za povećanje performansi koje koriste sportisti, što čini skoro polovinu pozitivnih doping testova (Svjetska antidoping agencija, 2006). S obzirom na tako široko rasprostranjenu upotrebu, AAS zloupotreba ima široke zdravstvene posljedice. Srčane i jetrene nuspojave zloupotrebe AAS-a su dobro uspostavljene (Leshner, 2000). Smatra se da su ovi i anabolički efekti AAS posredovani nuklearnim AR. Međutim, mogući učinci androgena koji su nezavisni od nuklearnog AR-a ukazuju na to da se uticaj AAS-a može proširiti i izvan struktura s nuklearnim AR-ekspresijom.
Što se tiče sličnosti sa drugim drogama, AAS proizvodi različite efekte i ima različite mehanizme delovanja od stimulansa. Za razliku od stimulansa (Graybiel et al., 1990), AAS inducira c-Fos aktivaciju samo u VTA, a ne u Acb (Dimeo i drvo, 2006a). Osim toga, AAS prigušuje oslobađanje Acb DA izazvanog stimulansom (Birgner i drugi, 2006), i akutno inhibiraju oslobađanje DA (Triemstra i dr., 2008). U ponašanju, AAS ne inducira karakteristiku stimulacije lokomotorne aktivacije (Peters i Wood, 2005).
Umjesto toga, reakcije ponašanja na akutnu AAS slične su reakcijama opioida ili benzodiazepina, što može dovesti do aditivnih efekata kada se uzmu zajedno. Akutna izloženost AAS-u smanjuje autonomne funkcije, uključujući respiraciju i tjelesnu temperaturu (Peters i Wood, 2005). AAS-inducirana autonomna depresija podsjeća na simptome predoziranja opioidima i blokirana je opijatnim antagonistom naltreksona (Peters i Wood, 2005). Nadalje, nandrolon, najčešće korišćena AAS, pojačava hipotermičke efekte morfina i pogoršava simptome apstinencije morfina sa naloksonom (Celerier et al., 2003). Osim toga, dobro je utvrđeno da su akutni AAS sedativni / anksiolitički (Agren i dr., 1999, Arnedo i dr., 2000, Frye i Seliga, 2001, Berbos i dr., 2002, Peters i Wood, 2005), moguće posredovan njihovim direktnim efektima na GABA-A receptore (Masonis i McCarthy, 1995, Masonis i McCarthy, 1996). Povećana potrošnja etanola kod štakora hronično tretiranih AAS-om može također biti odraz promijenjene GABAergičke funkcije (Johansson et al., 2000).
Naši nalazi o predoziranju izazivaju dodatni zdravstveni problem. Trenutno, klasifikacija AAS kao kontrolnih supstanci zasniva se na njihovim anaboličkim svojstvima (Zakon o kontrolisanim supstancama, 1991). Međutim, trenutna studija pokazuje da anabolička efikasnost AAS ne mora nužno odgovarati njihovim pojačavajućim osobinama i rizicima predoziranja. Pored DHT-BSA konjugata, DHT-CMO koji se koristi u ovoj studiji nije kontrolisana supstanca, iako su njegova pojačavajuća svojstva i mortalitet od predoziranja prilično slični DHT i T (Peters i Wood, 2005). Uzorak predoziranja sličio je i onom koji je ranije prijavljen za T (Peters i Wood, 2005), gdje je visok unos rezultirao mortalitetom 24 na 48 sati kasnije. U svetlu ovih nalaza, kriterijumi koji se koriste za zakazivanje steroida kao kontrolisane supstance mogu da zahtevaju reviziju da bi se uzela u obzir odgovornost i toksičnost zloupotrebe, pored svoje anaboličke moći.
Rezultati ove studije ukazuju da nuklearni AR, jedini AR izolovan do sada, nije neophodan za pojačanje androgena. Umjesto toga, rezultati upućuju na to da se pojačanje androgena pretvara u plazmatsku membranu. Stoga su potrebne daljnje istrage identiteta pretpostavljene membrane AR, njihovih funkcionalnih karakteristika i anatomske raspodjele kako bi se razjasnio osnovni mehanizam zlouporabe AAS-a i njegove kliničke implikacije.
Fusnote
Izjava izdavača: Ovo je PDF fajl neregistrovanog rukopisa koji je prihvaćen za objavljivanje. Kao uslugu našim klijentima pružamo ovu ranu verziju rukopisa. Rukopis će biti podvrgnut kopiranju, slaganju i pregledu rezultirajućeg dokaza prije nego što bude objavljen u konačnom obliku. Imajte na umu da se tokom proizvodnog procesa mogu otkriti greške koje mogu uticati na sadržaj, a sve pravne izjave koje se odnose na časopis pripadaju.
reference
- Agren G, Tiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Bihevioralni anksiolitički efekti niskih doza anaboličkog androgenog steroidnog tretmana kod pacova. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteron ima nagrađivana afektivna svojstva kod mužjaka štakora: implikacije za biološku osnovu seksualne motivacije. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Nagrađivanje svojstava testosterona kod intaktnih muških miševa: pilot studija. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikularna samoprimena najčešće zlostavljanih anaboličkih androgenih steroida kod muških hrčaka (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolon, oksimetolon i stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Brzi efekti estrogena ili progesterona na amfetamin-indukovano povećanje dopamina dopunskog strimaja pojačani su primarnim estrogenom: istraživanjem mikrodijalize. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Brzi efekti androgena u makrofagima. Steroidi. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Signalizacija testosterona kroz internalizabilne površinske receptore u makrofagima bez androgenih receptora. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akutni bihevioralni efekti anaboličkih steroida: anksioznost, stereotipija i lokomotorna aktivnost. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Promijenili su ekstracelularne razine DOPAC i HVA u ljusci nukleusa štakora štakora kao odgovor na subhroničnu primjenu nandrolona i kasniji izazov amfetamina. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgeni inhibiraju sintezu estradiola-17beta u jajnicima atrične krokodila (Micropogonias undulatus) nongenomskim mehanizmom iniciranim na površini stanice. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. Biokemijska karakterizacija membranskog androgenog receptora u jajniku atlantske lopovice (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Brower KJ. Zlostavljanje i zavisnost od anaboličkog steroida. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Mladi JP, Hill EM. Simptomi i korelacije anaboličke androgene steroidne zavisnosti. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Smeđe GR, Nemes C. Istraživačko ponašanje pacova u aparatu za ukrcavanje: da li je glava-potapanje validna mjera neofilije? Behav procesi. 2008;78: 442-448. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Učinci nandrolona na akutne odgovore morfina, toleranciju i ovisnost kod miševa. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, Pope HG., Jr. Nasilje prema ženama i nedozvoljena upotreba androgenog anaboličkog steroida. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Naslov 21, Poglavlje 13 - Prevencija i kontrola zloupotrebe droga Zakon o kontrolisanim supstancama. 1991
- DiMeo AN, Drvo RI. Cirkulirajući androgeni povećavaju osjetljivost na samoprimjenu testosterona kod muških hrčaka. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Drvo RI. ICV testosteron izaziva Fos u mozgu muškog sirijskog hrčka. Psihoneuroendokrinologija. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Drvo RI. Samoprimjena estrogena i dihidrotestosterona kod muških hrčaka. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteron stimulira intracelularno oslobađanje kalcija i mitogen-aktivirane proteinske kinaze preko receptora vezanog za G protein u stanicama skeletnih mišića. Endokrinologija. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Regulacija down transformacije beta receptora faktora rasta od androgena u stanicama raka jajnika. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekularna metoda za klasifikaciju genotipova dobivenih u koloniji za razmnožavanje od feminiziranih testisa (Tfm). Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Progestini utiču na motivaciju, nagrađivanje, kondicioniranje, stres i / ili odgovor na droge. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Nukleus accumbens kao mjesto djelovanja za nagrađivanje svojstava testosterona i njegovih 5alpha-reduciranih metabolita. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seliga AM. Testosteron povećava analgeziju, anksiolizu i kognitivne performanse muških pacova. Kognitivna, afektivna i bihevioralna neuroznanost. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosterone diferencijalno moduliraju protein-kinazu aktiviranu mitogenom i putevima fosfoinozitidne 3-kinaze / Akt kroz nuklearni i novi membranski androgeni receptor u C6 ćelijama. Endokrinologija. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamin i kokain izazivaju aktivaciju c-fos gena specifičnom za lijek u odjeljcima striosome matriksa i limbičkim podjelama striatuma. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Signalizacija nongenomskog kalcijum testosterona. Genotropno djelovanje u makrofagima bez androgenih receptora. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- He WW, Kumar MV, Tindall DJ. Mutacija promene okvira u genu androgenog receptora dovodi do potpune neosetljivosti na androgene u mišiće-feminizovanom testisu. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabolički androgeni steroidi utiču na unos alkohola, defanzivno ponašanje i opioidne peptide u mozgu kod štakora. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Oralna samoprimena testosterona kod mužjaka hrčaka. Neuroendokrinologija. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, Papa HG, Jr, Oliva PS. Povećana agresivna reakcija kod muških volontera nakon primjene postepeno povećavajućih doza testosterona cypionata. Alkohol zavisi od droge. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidna modulacija GABAA receptora. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA serija izvještaja o istraživanju).Anabolic Steroid Abuse. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgeni povećavaju intracelularnu koncentraciju kalcija i formiranje inozitola 1,4,5-trisfosfata i diacilglicerola preko G-proteina osetljivog na pertusis-toksin. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgeni efekti na hipokampalni CA1 broj sinapsi kralježnice zadržani su u Tfm mužjacima štakora s defektnim androgen receptorima. Endokrinologija. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibicija odgovora NMDA pomoću pregnenolon sulfata otkriva selektivnu modulaciju receptora NMDA od strane sulfita steroidima. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Direktni efekti anaboličkih / androgenih steroida, stanozolola i 17 alfa-methyltestosterone, na vezivanje benzodiazepina. receptor gama-aminobutirne kiseline (a). Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Efekti androgenog / anaboličkog steroidnog stanozolola na funkciju GABAA receptora: GABA-stimulisani 36Cl-priliv i [35S] TBPS vezivanje. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol smanjuje kalcijeve struje u neostriatnim neuronima štakora preko membranskog receptora. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Morin LP, Wood RI. Stereotaksijski atlas mozga zlatnog hrčka. Academic Press; San Dijego: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Uloga hipokretina (oreksina) u seksualnom ponašanju kod muškaraca. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Savjet NR, urednik. NationalResearchCouncil. Vodič za njegu i upotrebu laboratorijskih životinja. National Research Council; Washington, DC: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid i ciproteron acetat ispoljavaju agonističke efekte: indukciju neuroprotekcije zavisne od androgenog receptora. Endokrinologija. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Princip nege laboratorijskih životinja. Nacionalni institut za zdravlje; Bethesda, Merilend: 1985.
- Olds J, Milner PM. Pozitivno pojačanje proizvedeno električnom stimulacijom septalne zone i drugih područja mozga štakora. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Direktni efekti androgena na neuronsku aktivnost lateralnog hipotalamusa kod mužjaka pacova: II. Studija izbacivanja pritiska. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Direktni efekti androgena na lateralnu hipotalamičku neuronsku aktivnost kod mužjaka štakora: I. Mikroiontoforetska studija. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Nagrađivanje afektivnih svojstava intra-nucleus accumbens injekcija testosterona. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Ekspresija testosterono uvjetovane preferencije mjesta je blokirana perifernom ili intra-accumbens injekcijom alfa-flupentiksola. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. Brz, nongenomski, signalni put reguliše reorganizaciju aktina izazvanu aktivacijom membranskih receptora testosterona. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Mozak pacova: u sterotaksičnim koordinatama. 4th. Academic Press; New York: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Anaboličko-androgena steroidna zavisnost uključuje androgene i opioidne receptore. Zbornik radova 34th Godišnjeg sastanka Društva za neuronauku; San Dijego, Kalifornija. 2004.
- Peters KD, Wood RI. Zavisnost od androgena kod hrčaka: predoziranje, tolerancija i potencijalni opioidergični mehanizmi. Neuronauka. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Brza signalizacija androgenih receptora u ćelijama raka prostate. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Olfaktorni i hormonalni utjecaji na bazalni prednji mozak štakora. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. Testosteron slabi beta-amiloidnu toksičnost u kultivisanim hipokampalnim neuronima. Brain Research. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Papa HG, Jr., Katz DL. Psihijatrijski i medicinski efekti anaboličko-androgenog steroida. Kontrolisana studija sportista 160. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membranski receptori za estrogen, progesteron i testosteron u mozgu pacova: fantazija ili stvarnost. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Simerly RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribucija stanica koje sadrže mRNA androgena i estrogena u mozgu pacova: Studija hibridizacije in situ. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Diferencijalni efekti estradiola i estradiol-BSA konjugata. Endokrinologija. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, estrogen i androgeni G-protein spojeni receptori u riblje gonade. Steroidi. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosteron i nucleus accumbens dopamin u sirijskom hrčku. Psihoneuroendokrinologija. 2008;33: 386-394. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Samostalna primjena testosterona u ženskih hrčaka. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Membrane pokrenute akcije estrogena u neuroendokrinologiji: principi nastajanja. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Wood RI. Oralna samoprimena testosterona kod muških hrčaka: doza-odgovor, dobrovoljna vježba i individualne razlike. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Ojačanje testosterona: intravenska i intracerebroventrikularna samoprimena kod mužjaka pacova i hrčaka. Psihofarmakologija (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Androgen receptor imunoreaktivnost u muškom i ženskom mozgu sirijskog hrčka. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Nepovoljni analitički nalazi prijavljeni od strane akreditiranih laboratorija. Svjetska antidoping agencija; Montreal, Kanada: 2006.
- Yamada Y. Efekti testosterona na aktivnost jedinki u hipotalamusu i septumu štakora. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, francuski FS, Wilson EM. Mutacija jedne baze u genu androgenog receptora uzrokuje neosjetljivost androgena u feminiziranom pacovu testisa. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anaboličko-androgeni steroidi u SAD-u. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgen stimuliše mitogen-aktiviranu proteinsku kinazu u ljudskim ćelijama raka dojke. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, CD sa rižom, Pang Y, Pace M, Thomas P. Kloniranje, ekspresija i karakterizacija membranskog receptora progestina i dokaz da je posrednik u meiotičkom sazrevanju oocita riba. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Zuloaga DG, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Miševi sa mutacijom feminizacije testisa pokazuju ulogu androgenih receptora u regulaciji ponašanja vezanog za anksioznost i hipotalamičko-hipofizno-adrenalne osi. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Uloga androgenih receptora u maskulinizaciji mozga i ponašanju: ono što smo naučili iz mutacije feminizacije testisa. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC besplatan članak] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. Pacovi sa mutacijom feminizacije testisa (TFM) pokazuju povećane pokazatelje anksioznosti. Zbornik radova 36th Godišnjeg sastanka Društva za neuronauku; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.
;