Nadměrná exprese DeltaFosB v Nucleus Accumbens zlepšuje sexuální odměnu u samičích křečků (2009)

KOMENTÁŘE: ΔFosB je chemická látka nezbytná pro vznik závislostí. Jak drogová, tak závislostní chování korelují s akumulací Delta FosB. Blok Delta FosB a závislost přestává. Zde je ukázáno, že sexuální zkušenost zvyšuje Delta FosB a vede k senzibilizaci centra odměn. Senzibilizace způsobuje vyšší uvolňování dopaminu, což činí aktivitu nebo léčivo přitažlivější. Sex je v podstatě procesem závislosti. Tato studie také geneticky zvýšila Delta FosB, což zvýšilo prospěšné aspekty sexu nad normální úrovně. Mohlo by používání internetového pornosu způsobit zvýšení Delta FosB nad a za normální úrovně? Vedlo by to ke závislosti a opětovnému propojení nervových drah? Vypadá to rozumně.

PLNÁ STUDIE: ΔFosB nadměrná exprese v jádru Accumbens zvyšuje sexuální odměnu u křečků sýrských žen

Genes Brain Behav. 2009 červen; 8 (4): 442 – 449. doi: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.

VL Hedges, 1 S. Chakravarty, 2 EJ Nestler, 2 a RL Meisel1

Abstraktní

Opakovaná aktivace mezolimbického dopaminového systému vede k přetrvávajícím změnám chování doprovázeným vzorem nervové plasticity v nucleus accumbens (NAc). Vzhledem k tomu, že akumulace transkripčního faktoru ΔFosB může být důležitou součástí této plasticity, je v našem výzkumu řešena otázka, zda je ΔFosB regulován sexuální zkušeností u žen. Ukázali jsme, že křečci ze Sýrie, kterým byl poskytnut sexuální zážitek, vykazují několik změn v chování, včetně zvýšené sexuální účinnosti u naivních mužských křečků, sexuální odměny a zvýšené citlivosti na psychomotorické stimulanty (např. Amfetamin).

Nedávno jsme prokázali, že sexuální zkušenost zvýšila hladiny ΔFosB v NAc samic křečků syrských. Cílem této studie bylo prozkoumat funkční důsledky této indukce stanovením, zda je konstitutivní nadměrná exprese ΔFosB. pomocí adeno-asociovaných virových (AAV) vektorů v NAc by mohlo napodobovat behaviorální účinky sexuální zkušenosti.

Zvířata s AAV-zprostředkovanou nadměrnou expresí AFosB v NAc vykazovaly důkaz o sexuální odměně v preferovaném místě. paradigma za podmínek, ve kterých kontrolní zvířata dostávající injekci AAV-zeleného fluorescenčního proteinu (GFP) do NAc ne. Testy sexuálního chování dále ukázaly, že muži spárovaní se samicemi AAV-AFOSB měli zvýšenou kopulační účinnost, měřeno poměrem kopců, které zahrnovaly intromisi ve srovnání s muži spářenými se samicemi AAV-GFP. Tyto výsledky podporují roli AFOSB při zprostředkování přirozeného motivovaného chování, v tomto případě sexuálního chování žen, a poskytují nový pohled na možné endogenní působení AFOS.

Úvod

Zkušenosti s drogami zneužívání, motivovaným chováním, chováním kola nebo instrumentálním učením vedou k aktivaci mezolimbického dopaminového systému a přetrvávajícím změnám v nucleus accumbens (NAc) (Becker et al., 2001, Di Chiara et al., 1998, Harris et al., 2007, Kumar et al., 2005, Meisel & Mullins, 2006, Nestler, 2008, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Pierce & Kumaresan, 2006, Vlk et al., 2004). Strukturální změny, zejména tvorba dendritických trnů, jsou důležitou součástí plasticity založené na zkušenosti (Allen et al., 2006, Závětří et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson & Kolb, 2004), které zůstane dlouho poté, co přestanou existovat behaviorální zkušenosti nebo podávání léků (McClung & Nestler, 2008, Meisel & Mullins, 2006, Vlk et al., 2004).

Transkripční faktor AFosB má molekulární vlastnosti, díky kterým je dobrým kandidátem zprostředkovat trvalé strukturální a behaviorální modifikace v důsledku behaviorálních nebo drogových zkušeností (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Colby et al., 2003, Doucet et al., 1996, Naděje et al., 1994, Kelz et al., 1999, McClung & Nestler, 2003, McClung et al., 2004, McDaid et al., 2006, Nakabeppu a Nathans, 1991, Nestler, 2008, Nye et al., 1995, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Wallace et al., 2008, Werme et al., 2002, Zachariou et al., 2006). FOSB je alternativní sestřihový produkt okamžitého raného genu fosB (Mumberg et al., 1991, Nakabeppu a Nathans, 1991) a na rozdíl od proteinu FosB plné délky má zkrácený AFosB neobvyklou stabilitu, která má za následek akumulaci proteinu po opakované stimulaci (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Naděje et al., 1994, Kelz et al., 1999, Perrotti et al., 2008, Zachariou et al., 2006). Ačkoli mechanismus, kterým fosGen B je alternativně sestřižený, zůstává neznámý, zkrácení proteinu spolu s fosforylací chrání protein před rychlou proteazomální degradací, což vede k vyšší úrovni transkripční aktivity ve srovnání s více přechodně žijícími členy rodiny FosB (Carle et al., 2007, Ulery & Nestler, 2007, Ulery et al., 2006). Předpokládá se, že akumulace AFOSB proteinu vytváří vzorce genové exprese, které mohou být základem účinků zkušenosti na dlouhodobou behaviorální a buněčnou plasticitu (McClung & Nestler, 2008).

Použili jsme ženské sexuální chování u sýrských křečků jako model plasticity v mozku na základě zkušeností (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). Výhodou práce se sexuálním chováním je schopnost kontrolovat úroveň zážitků zvířete tím, že má buď úplně sexuálně naivní zvířata nebo rozdílně vystavuje zvířata různým úrovním sexuálního zážitku. Již dříve jsme prokázali, že opakovaná sexuální zkušenost má za následek senzibilizaci mezolimbického dopaminového systému, která je obdobou zneužívání drog (Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Naděje et al., 1992, Kelz et al., 1999, Kohlert a Meisel, 1999, Pierce & Kalivas, 1995, Pierce a Kalivas, 1997a, Pierce a Kalivas, 1997b, Robinson & Kolb, 1999a). Například, stejně jako účinky drog, opakovaná sexuální zkušenost zvyšuje dendritické páteře ve středních ostnatých neuronech NAc (Závětří et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson et al., 2001, Robinson & Kolb, 1997, Robinson & Kolb, 1999a, Robinson & Kolb, 1999b, Robinson & Kolb, 2004). Dále jsme zjistili, že barvení AFosB / FosB je v NAc trvale opakováno po opakovaném sexuálním zážitku (Meisel & Mullins, 2006).

Vzhledem k tomu, že sexuální zkušenost může vést k dlouhodobé expresi členů rodiny FosB, bylo cílem této studie manipulovat expresi AFosB tak, aby napodobovaly behaviorální důsledky opakované sexuální zkušenosti. Po virově zprostředkované nadměrné expresi AFosB v NAc byly samice sýrských křečků testovány na zvýšenou preferenci kondicionovaného místa a také na zvýšenou kopulační účinnost s naivními křečci samci, což byly dva koncové body, u kterých se dříve ukázalo, že jsou ovlivněny opakovanými sexuálními zkušenostmi (Bradley et al., 2005b, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). WZde uvádějte, že neustálým nadměrným vylučováním ΔFosB v NAc u křečků žen, které dostávají minimální sexuální zkušenost, jsme schopni vyvolat změny chování podobné těm samicím s rozsáhlejšími sexuálními zkušenostmi.

Materiály a metody

Experimentální předměty

Samci a samice sýrských křečků byly dodány přibližně ve věku 60 dní od Charles River Breeding Laboratories, Inc. (Wilmington, MA). Samice byly umístěny jednotlivě do plastových klecí (délka 50.8 cm x šířka 40.6 cm x výška 20.3 cm), zatímco samci stimulačních zvířat byli skupinově umístěni ve stejných klecích v počtu tří nebo čtyř. Místnost pro zvířata byla udržována při kontrolované teplotě 22 ° C pomocí schématu světlo-tma 14: 10 hr (světla zhasnuta mezi 1: 30 a 11: 30 pm). Zvířata měla k dispozici jídlo a vodu podle libosti.

Všechny postupy použité v tomto experimentu byly v souladu s Národními instituty zdraví Pokyny pro péči a používání laboratorních zvířat a byly schváleny Výborem pro péči o zvířata a jejich používání.

Chirurgie

Samice křečků byly bilaterálně ovariektomizovány pod sodnou pentobarbitální anestézií (Nembutal; 8.5 mg na 100 gm tělesné hmotnosti, ip), byly podány doplňkové anestetika a poté byly podrobeny bilaterální stereotaxické operaci pro dodání virových vektorů. Během stereotaxické chirurgie byla hlava oholená a kůže a svaly staženy. Do lebky byla vyvrtána malá díra a injekční stříkačka 5 μL Hamilton byla snížena na úroveň NAc z bočního úhlu 2 °, aby byla zajištěna vůle laterálních mozkových komor. Injekční stříkačka byla udržována na místě po dobu 5 min před injekcemi a poté byl do NAc aplikován buď adeno-asociovaný virus (AAV) -GFP nebo AAV-AFOS (0.7 μL) po dobu 7 min, přičemž injekční stříkačka pak byla udržována na místě po dobu další 5 min. Tento postup byl opakován pro kontralaterální stranu mozku.

Virové vektory

AAV je charakterizována svou schopností účinně transfektovat neurony a udržovat specifickou expresi transgenu po dlouhou dobu (Chamberlin et al., 1998). Vektory AAV existují v různých sérotypech na základě charakterizace jejich kapsidového proteinového obalu. Tento experiment využil AAV2 (sérotyp 2) od Stratagene s titrem přes 10⁸/ μl exprimující zelený fluorescenční protein (AAV-GFP), jakož i AAV vektor, který měl konstrukty jak pro FosB, tak pro GFP (AAV-AFosB-GFP). Virové vektory byly injikovány do NAc alespoň 3 týdnů před testováním chování, aby se umožnila nadměrná exprese AFosB. Tyto vektory AAV zprostředkovávají expresi transgenu u potkanů a myší, která se stává maximální během 10 dnů po injekci, a poté přetrvává na této úrovni po dobu alespoň 6 měsíců (Winstanley a kol., 2007, Zachariou a kol., 2006). Důležité je, že vektory infikují pouze neurony a neprodukují žádnou toxicitu vyšší než samotné infuze vehikula. Podrobnosti o produkci a použití těchto vektorů jsou uvedeny v dřívějších publikacích (Winstanley a kol., 2007, Zachariou a kol., 2006).

Sexuální zkušenost

Všechny ovariektomizované křečky byly primárně aktivovány pro sexuální zážitky jednou týdně tak, že dvakrát denně podaly injekci estradiol benzoátu (10 μg v 0.1 ml bavlníkového oleje) přibližně 48 h a 24 h před testem sexuálního chování, po kterém následovala subkutánní injekce progesteronu (500 μg v 0.1 ml bavlníkového oleje) 4 – 6 hodinu před testem sexuálního chování. Samice, které získaly sexuální zkušenost, byly po injekci progesteronu po dobu 10 min. Relace 4 – 6 h prezentovány sexuálně zkušeným samcem křečka. Každý muž a žena byli během testů sexuální zkušenosti spárováni pouze jednou.

Předvolba podmíněného místa

V tomto experimentu bylo využito předpjaté paradigma preference podmíněného místa (Tzschentke, 1998). Náš preferovaný aparát pro předávání míst (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996) se skládá z jednoho bílého a jednoho šedého oddílu (60 × 45 × 38 cm) spojených jasným středním oddílem (37 × 22 × 38). Hlavní oddíly byly dále diferencovány podestýlkou z osiky (Harlan Laboratories, IN) v šedé komoře a podestou z kukuřice (Harlan Laboratories, IN) v bílé komoře. Samice křečků s ovariektomií byly hormonálně aktivovány před předběžným testem, před sexuálním kondicionováním a před testem. Během testu bylo zvíře umístěno do čiré centrální komory a mohlo se volně potulovat různými oddíly pro 10 min, aby se stanovila počáteční preference pro každý oddíl. Protože všechna zvířata vykazovala počáteční preference bílé komory, bylo provedeno kondicionování v šedé komoře. Hormonální priming byl opakován během 2 (skupiny 2 – 5) nebo 5 týdnů (skupina 1) kondicionování. Během kondicionování dostaly ženy sexuální zkušenost se samcem v šedém kompartmentu po dobu 10 min, s měřenými parametry kopulace u žen (latence lordózy a celková doba trvání lordózy). Jednu hodinu po testu sexuální zkušenosti byla samice umístěna sama do bílé komory na 10 min. Kontrolní skupina žen, které nedostaly sexuální zkušenost, byla aktivována hormonálně, ale umístěna samostatně do každé komory na 10 min. Po týdnech kondicionování 2 nebo 5 byla zvířata podrobena post-testu, ve kterém byla opět volná, aby mohla procházet komorami po dobu 10 min. Bez ohledu na skupinu byly všechny post-testy provedeny sedm týdnů po stereotaxické operaci, a proto byla všechna zvířata obětována se stejnou úrovní virové exprese. V tomto experimentu byly skupiny zvířat 5: Pozitivní kontrolní skupina zvířat obdržela bilaterální AAV-GFP a dvakrát týdně se párovala sexuální chování 5 se samcem (skupina 1, n = 8). Dvě negativní kontrolní skupiny nedostávaly žádné sexuální kondicionování po dobu 2 týdnů a dostávaly buď AAV-AFosB (skupina 2, n = 5) nebo AAV-GFP (skupina 3, n = 4). Nakonec byla zvířata, která obdržela pár týdnů sexuálního chování 2 se samcem s bilaterální injekcí buď AAV-AFosB (skupina 4, n = 7) nebo AAV-GFP (skupina 5, n = 7).

Naivní mužský experiment

Předchozí výzkum ukázal, že křečci se sexuální zkušeností mohou zlepšit kopulační účinnost interakcí se svými sexuálně naivními mužskými partnery (Bradley et al., 2005b). Tento test byl podán přibližně jeden týden po post-testu kondicionovaného preferenčního místa pro dvě skupiny zvířat, které dostaly 2 týdny sexuální kondicionování (skupiny 4 a 5). Samice byly hormonálně připraveny na sexuální zážitek, jak je popsáno. Během testu 10 min byl do domácí klece představen pohlavně naivní samec křečka a testovací relace byla pro pozdější analýzu videokazeta. Počet úchytů a intromisí (včetně ejakulace) mužem, jakož i podíl celkových přípojek, které zahrnovaly intromisi (míra zásahu), byly určeny z videokazety.

Imunohistochemie

U všech zvířat byla provedena imunobarvení, aby se ověřilo místo injekce viru i anatomický rozsah exprese proteinu. Samicím byla předávkována Sleepaway (0.2 ml ip, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) a intrakardiálně perfundováno 25 mM fosfátem pufrovaným fyziologickým roztokem (PBS) po dobu 2 min (přibližně 50 ml) následované 4% paraformaldehydem v 25 mM PBS pro 20 min (přibližně 500 ml). Mozky byly odstraněny a následně fixovány po dobu 2 h v 4% paraformaldehydu, pak byly umístěny do 10% roztoku sacharózy v PBS přes noc při 4 ° C. Zvířata, která obdržela pouze bilaterální AAV-GFP, měla sériové koronální řezy (40 μm) řezané ze zmrazené tkáně na 25 mM PBS plus 0.1% hovězí sérový albumin (BSA) (promývací pufr), poté se připevnily přímo na sklíčka a zakryly se, zatímco byly ještě vlhké, 5% n-propyl galakt v glycerinu. Zvířata, která obdržela bilaterální AAV-AFOSB, měla řezané sériové koronální řezy (40 μm) vyříznuté ze zmrazené tkáně a poté 3krát opláchly 10 min v promývacím pufru. AAV-AFosB zvířata byla analyzována pouze na expresi AFosB, a proto byla inkubována v AOSF / FosB primární protilátce (1: 10000, sc-48 Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA) v promývacím pufru plus 0.3% Triton-X 100 v pokojová teplota po dobu 24 h a poté přesunuta do 4 ° C po dobu 24 h. Tato koncentrace primární protilátky byla zvolena, protože vytváří pouze minimální endogenní barvení AFosB / FosB. Po inkubaci v primární protilátce byly řezy propláchnuty 3krát po dobu 10 min v promývacím pufru a poté inkubovány v biotinylované sekundární protilátce po dobu 45 min při pokojové teplotě (1: 200, Vector, Burlingame, CA). Řezy byly poté promývány 3krát 10 min v promývacím pufru před inkubací v konjugátu streptavidin Alexa Fluor 594 (1: 500, Molecular Probes, Eugene, OR). Po této inkubaci byly řezy promývány 3krát po dobu 10 min v promývacím pufru, poté připevněny na sklíčka a zakryty, zatímco jsou stále mokré, 5% n-propyl galaktem v glycerinu.

Mikroskopická analýza

Sklíčka byla analyzována světelným mikroskopem Leica DM4000B s fluorescenční schopností připojenou k digitální kameře Leica DFC500. Digitální obrazy pravého i levého místa injekce každé sekce byly sériově analyzovány fluorescenční mikroskopií, aby se lokalizovalo umístění injekce v NAc. Řezy z každého zvířete byly analyzovány, aby se zjistilo rozšíření virální exprese rostrální až kaudální a také anatomické umístění největšího průměru exprese. Dále, v těchto sekcích byl počet FosB obarvených buněk počítán v ImageJ z uložených digitálních obrazů. Protože naším cílem bylo jednoduše získat přibližný počet buněk, nebyly použity stereologické metody.

výsledky

Časový průběh virové zprostředkované nadměrné exprese AFosB v NAc samic křečků syrských

Samostatná skupina zvířat byla původně použita k nalezení časového průběhu nadměrné exprese AFOSB zprostředkované virem u samic křečka. Analýza exprese AFosB v 3 (n = 5), 6 (n = 6) a 9 (n = 2) týdnů časových bodů odhalila, že 3 týdny po stereotaxické operaci vedly k nadměrné expresi AFosB, která byla udržována prostřednictvím 6 a 9 týdny po stereotaxické operaci. Exprese viru byla většinou jaderná, ale byla také nalezena v cytoplazmě a dokonce i v dendritech některých buněk s nadměrnou expresí. Ze třinácti zvířat, která zahrnovala experiment s časovým průběhem, měla čtyři zvířata rostrální virové injekce jádra NAc, z nichž jedno se rozšířilo do jádra postele stria terminalis (BNST). Zbývajících devět zvířat mělo umístění kaudální injekce, sedm v kaudálním jádru a dvě v kaudální skořápce NAc. Pouze jedna z injekcí kaudální skořápky prošla kaudálně do BNST, zatímco šest injekcí do kaudálního jádra přešlo kaudálně do BNST. Bylo zjištěno, že průměrné největší průměry virové exprese pro každý časový bod byly 0.9 mm, 1.2 mm a 1.0 mm pro 3, 6 a 9 týdně. Tyto průměrné průměry byly podrobeny analýze rozptylu a nebylo zjištěno, že by byly významně odlišné. Proto v následujících behaviorálních experimentech začalo behaviorální testování kolem 3 týdnů po stereotaxické operaci a zvířata byla utracena kolem 9 týdnů po stereotaxické operaci, aby bylo zajištěno, že virová exprese byla udržována na konzistentní úrovni.

Imunohistologická analýza virových injekcí AAV-ΔFosB a AAV-GFP

Řezy mozku od každého zvířete použité v behaviorálních experimentech byly sériově analyzovány v koronální rovině pro anatomické umístění virové injekce. Celkem 12 zvířat byla analyzována na jejich bilaterální expresi AFosB podle počtu buněk a umístění injekce, která byla stanovena sledováním zbytkových stop jehly. Přestože umístění injekce bylo analyzováno v koronální sekci (Obrázek 1), exprese proteinu se prodloužila v rostrálně-kaudální elipse z místa injekce a také se rozšířila v dorzálně ventrální elipse z místa injekce. Z pěti zvířat analyzovaných ze skupiny 2 bylo 70.5% nadměrných buněk v NAc (medián = buňky 16,864, dolní kvartil = buňky 7,551, horní kvartil = buňky 20,002, mezikvartilní rozmezí = 12,451). Sedm zvířat analyzovaných ze skupiny 4 vykázalo 65.6% virovou nadměrnou expresi v NAc (medián = 9,972 buňky, dolní kvartil = 5,683 buňky, horní kvartil = 11,213 buňky, mezikvartilní rozmezí = 5530.). Tyto počty buněk představují spíše nadměrnou expresi viru než endogenní barvení v důsledku účelného ředění primární protilátky.

Hladiny exprese proteinu zprostředkované AAV-GFP nebo AAV-AFosB 12 wks po injekci. Top. Nadměrná exprese GFP byla většinou jaderná, ale bylo také zjištěno, že se šíří do cytoplazmy a dendritů buněk. Dno. Napodobená exprese proteinu FosB ...

Z bilaterálních injekčních míst 24 bylo dvanáct v rostrálním jádru NAc, z nichž šest mělo virovou expresi, která se kaudálně rozšířila do BNST. Zbývajících dvanáct míst vpichu byl v kaudální NAc. Jedna z dvanácti injekcí byla v kaudální skořápce a kaudálně se rozšířila do BNST. Posledních jedenáct injekčních míst bylo vše v kaudálním jádru NAc, z nichž osm se kaudálně rozšířilo do BNST. Všechny injekce byly soustředěny kolem přední komise, s výjimkou jedné injekce do kaudální skořápky NAc, která byla o něco mediálnější než přední komisura (Obrázek 2). Všechna zvířata vykazovala vhodnou nadměrnou expresi GFP nebo AFOSB, a proto byla použita v následné behaviorální analýze. Žádná zvířata nebyla ze studie vyloučena kvůli špatnému umístění anatomické injekce. Dále, protože všechny injekce byly zaměřeny na akumbální jádro a pouze jedna injekce zahrnovala skořepinu, nebyla na místech injekce provedena žádná statistická analýza.

Anatomická lokalizace umístění virových injekcí experimentálních zvířat. Kruhy představují umístění AAV-GFP a čtverce představují umístění AAV-OSFosB. a. Umístění injekcí AAV-GFP pro zvířata se sexuální kondicí 5 s wks (skupina 1). ...

Nadměrná exprese AOS vektoru AAV v NAc samic křečků ze Sýrie vede ke zvýšené sexuální odměně

K posouzení, zda nadměrná exprese ΔFosB v NAc měla vliv na sexuální odměnu, jsme použili paradigma preferenčního místa. V tomto testu zvířata podstoupila buď 0, 2 nebo 5 týdny sexuální kondice. Během pohlavního kondicionování byla u každého křečka samice zaznamenána latence a trvání lordózy. Ani latence lordózy (Skupina 1: 553 s ± 7 s, Skupina 4: 552 s ± 7 s, Skupina 5: 561 s ± 7 s,) ani doba trvání lordózy (Skupina 1: 485 s ± 15 s, Skupina 4: 522 ± 10 s, skupina 5: 522 s ± 12 s) během pohlavního kondicionování se během testování významně lišilo mezi skupinami bez ohledu na virovou injekci. Proto ani nadměrná exprese GFP ani AFosB neměla žádný vliv na vnímavé chování žen.

Každá skupina z preferovaného postupu kondicionovaného místa byla analyzována individuálně opakovaným měřením t-testu mezi množstvím času stráveného v klimatizačním oddělení (šedá kompartment) během předběžného testu a následného testu. Statistická analýza nebyla mezi skupinami rozšířena. Předchozí výzkum ukázal, že k odhalení významných změn v preferencích na místě postačuje pět podmíněných sexuálních zkušeností (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Pozitivní kontrolní skupina sestávající ze samic nadexprimujících GFP v NAc, kterým bylo poskytnuto pět sexuálních zkušeností s kondicionováním, strávila podstatně více času během následného testu v šedé komoře ve spojení se sexuální zkušeností ve srovnání s výkonem před kondicionací, t (8 ) = −3.13, P<0.05. Jak se očekávalo, zvířata, která nedostala žádné podmíněné sexuální zážitky, významně nezměnila dobu v žádné komoře bez ohledu na virovou injekci. Ženy s nadměrnou expresí GFP, které dostaly 2 kondicionální sexuální zkušenosti, neprokázaly kondicionování místa, zatímco ženy, které dostaly dvě kondicionující sexuální zkušenosti s nadměrnou expresí ΔFosB, strávily během tohoto post testu významně více času v komoře spárované se sexuálními zkušenostmi, t (7) = −2.48, P <0.05 (Obrázek 3).

Upřednostňované místo po virové injekci. Tento graf ukazuje průměrný (± SEM) počet sekund během testu před kondicionováním (Pre) a testu po kondicionování (Post), který každá skupina křečků strávila v šedé komoře. ...

AAV vektorová nadměrná exprese ΔFosB v NAc samičích křečků zlepšuje jejich kopulační účinnost s naivními samci

Jeden týden po post-testu preferovaného místa byly ženy s 2 týdny sexuálních kondičních testů (skupiny 4 a 5) podrobeny naivnímu testu sexuálního chování u mužů. V tomto testu samice AAV-ΔFosB s předešlými testy sexuální zkušenosti s 2em významně zlepšily jejich kopulační účinnost více než samice AAV-GFP s dřívějšími sexuálními zkušenostmi s 2 (Obrázek 4). Míra úspěšnosti (podíl celkových přírůstků, které zahrnovaly intromisi) sexuálně naivních mužů, kteří byli spárováni s ženami AAV-ΔFosB, byla významně vyšší než míra úspěšnosti naivních mužů spárovaných s ženami AAV-GFP, t (14) = 4.089 p <0.005.

Kopulační účinnost naivní partnerů křečků samců. Tento graf ukazuje průměrnou (± SEM) míru zásahu (podíl celkových výstupů, které zahrnovaly intromisi) naivních samců křečků, kteří byli spárováni buď s AAV-GFP samicemi ...

Diskuse

Předchozí experimenty, které využívaly AAV vektory k nadměrné expresi AFosB, byly provedeny v systémech krysích nebo myších modelů (Wallace et al., 2008, Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Imunohistochemickým barvením jsme ověřili vzorce virové exprese v mozku křečka. Tato analýza prokázala účinnou expresi AFosB, která se objevila jakmile 3 týdny po intrakraniální injekci a zůstala zvýšená po dobu 9 týdnů v naší analýze časového průběhu a až 12 týdnů v experimentech chování.

V našem modelu sexuálních zkušeností vedou opakované kopulační interakce k samci k senzibilizaci uvolňování dopaminu v NAc (Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997), který má zesílené důsledky v paradigmatu preferovaného místam (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Tato dopaminová senzibilizace, stejně jako schopnost křečků samic regulovat úspěšnou intromisi nastupujícím mužem v důsledku opakovaných sexuálních setkání, ukazuje asociativní odpověď (Bradley et al., 2005b). Ukázali jsme, že toto zesílené sexuální chování může být zvýšeno nadměrnou expresí ΔFosB v NAc v kontextu podprahové sexuální zkušenosti, analogické ke zvýšení instrumentálních odpovědí na kokain, morfin nebo konzumaci potravy po podobné nadexpresi ΔFosB (Colby et al., 2003, Olausson et al., 2006, Zachariou et al., 2006). Toto posílení sexuálních interakcí s mužem po sexuálním zážitku bylo zrcadleno získáním preferovaného místa. Ját je rozumné považovat AFosB za působící jako transkripční spojku, která zprostředkuje jak dlouhodobé modifikace chování, tak základní neuronální plasticitu v důsledku aktivace downstream cílů AFosB.

Vzhledem k tomu, že zvýšení ΔFosB způsobuje tyto účinky, je třeba zvážit základní mechanismy. Existuje jen velmi málo identifikovaných molekulárních důsledků, které vyplývají z akumulace AFos. MStudie mikročipů u myší nadměrně exprimujících ΔFosB ukázaly zvýšení serinové / threoninové cyklin dependentní kinázy-5 (Cdk5), jaderného faktoru kappa B (NF-kB), GluR2 podjednotky glutamátového receptoru a dynorfinu (Ang et al., 2001, Bibb, 2003). Není jasné, jak tyto molekulární události mohou ovlivnit plasticitu a tvorbu dendritické páteře, ačkoli Cdk5 má známou roli při zvyšování hustoty dendritické páteře (Bibb, 2003, Cheung et al., 2006, Kumar et al., 2005, Norrholm et al., 2003) a GluR2 podjednotky nebo NF-kB byly zapojeny do synaptické (Ang et al., 2001, Nestler, 2001, Peakman et al., 2003). V budoucích studiích se plánujeme soustředit na tyto a další potenciální downstream transkripční cíle AFOSB, abychom určili, jak jejich aktivita kolísá s akumulací AFOS po opakovaném sexuálním chování.

Existuje velká literatura postulující odlišné role, které prostředí a jádro NAc hrají v motivovaném chování (Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Perrotti et al., 2008, Pierce & Kalivas, 1995). Předchozí výzkum v naší laboratoři důsledně identifikoval buněčné účinky sexuální zkušenosti na jádro accumbens (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993), které tvoří základ našeho zaměření na jádro NAc v této studii. Naše analýza anatomického rozsahu nadměrné exprese AFosB ukázala, že ačkoli injekce byly skutečně zaměřeny na kaudální jádro NAc, exprese FosB se často kaudálně šířila do rostrální BNST. Ačkoli kaudální NAc a rostrální BNST jsou určitě anatomicky odlišná jádra, nemusí být nutně funkčně odlišná, protože obě oblasti modulují mnoho mechanických prvků, které jsou klíčem k motivačním procesům (např. Koob a kol., 2004). V našich mikrodialyzačních studiích křečků žen (Kohlert et al., 1997), zaznamenali jsme neschopnost rozlišit umístění brálních BNST sondy od umístění v kaudální NAc z hlediska bazálních hladin dopaminu, odezev dopaminu na sexuální interakce s muži nebo vzorce dopaminergní aferentní inervace. Tyto výsledky spíše než vnímání šíření infekce do BNST jako metodologicky problematické, podporují myšlenku funkčního kontinua mezi NAc a BNST.

Ačkoli jsme ukázali, že nadměrná exprese AFosB u křečků žen je dostatečný pro vyvolání preferovaného místa před sexuální odpovědí a pro posílení kopulačních interakcí s muži zůstává neznámé, zda je také exprese FosB nezbytný za tyto behaviorální důsledky sexuální zkušenosti. Nedávné studie využívaly virus AAV-Aunun, který snižuje transkripci zprostředkovanou AFosB kompetitivně heterodimerizací s FosB před navázáním oblasti AP-1 na geny (Winstanley et al., 2007). Doufáme, že pomocí AAV-Δunun k potlačení transkripce zprostředkované ΔFosB bude třeba zjistit, zda je ΔFosB požadován pro behaviorální plasticitu, kterou jsme pozorovali po zkušenostech se sexuálním chováním, což doplní výsledky zde uvedené studie. Pokud akumulace AFosB a její následná aktivace downstream cílů způsobují jak behaviorální, tak buněčnou plasticitu, pak by mělo být potlačení AFosB tyto účinky zrušeno.

Poděkování

Rádi bychom poděkovali Amandě Mullins, Melissa McCurley a Chelsea Baker za jejich pomoc při testování chování, kondici a zpracování tkání. Tuto práci podpořili NIH granty DA13680 (RLM) a MH51399 (EJN).

Reference

Allen PB, Zachariou V, Svenningsson P, Lepore AC, Centonze D, Costa C, Rossi S, Bender G, Chen G, Feng J, Snyder GL, Bernardi G, Nestler EJ, Yan Z, Calabresi P, Greengard P. Významné role pro spinofilin a neurabin v plasticitě zprostředkované dopaminem. Neurovědy. 2006;140: 897-911. [PubMed]
Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Indukce jaderného faktoru-kappaB v nucleus accumbens chronickým podáním kokainu. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Becker JB, Rudick CN, Jenkins WJ. Role dopaminu v jádru accumbens a striatum během sexuálního chování u samic potkanů. J Neurosci. 2001;21: 3236-3241. [PubMed]
Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Indukce deltaFosB v periaqueductal grey stresem podporuje aktivní zvládání reakcí. Neuron. 2007;55: 289-300. [PubMed]
Bibb JA. Role Cdk5 v neuronální signalizaci, plasticitě a zneužívání drog. Neurosignály. 2003;12: 191-199. [PubMed]
Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, Mermelstein PG. Změny v genové expresi v jádru accumbens a striatum po sexuální zkušenosti. Genes Brain Behav. 2005a;4: 31-44. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopaminové léze u samicích křečků (Mesocricetus auratus) zrušují senzibilizované účinky sexuálních zkušeností na kopulační interakce s muži. Behav Neurosci. 2005b;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. Indukce sexuálního chování c-Fos v jádře accumbens a amfetaminem stimulovaná lokomotorická aktivita jsou senzibilizovány předchozími sexuálními zkušenostmi u samičích křečků. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Bradley KC, Mullins AJ, Meisel RL, Watts VJ. Sexuální zkušenost mění produkci cyklického AMP zprostředkovanou D1 v jádru accumbens ženských sýrských křečků. Synapse. 2004;53: 20-27. [PubMed]
Brenhouse HC, Stellar JR. Exprese c-Fos a deltaFosB se odlišně mění v odlišných podoblastech jádra accumbens shell u potkanů senzibilizovaných na kokain. Neurovědy. 2006;137: 773-780. [PubMed]
Cadoni C, Di Chiara G. Reciproční změny v citlivosti na dopamin v jádru accumbens shell a v jádru a v dorzálním caudate-putamenu u potkanů senzibilizovaných na morfin. Neurovědy. 1999;90: 447-455. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomálně závislý a nezávislý mechanismus pro destabilizaci FosB: identifikace FosB degron domén a důsledky pro stabilitu DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chamberlin NL, Du B, de Lacalle S, Saper CB. Rekombinantní adeno-asociovaný virový vektor: použití pro expresi transgenu a sledování anterográdního traktu v CNS. Brain Res. 1998;793: 169-175. [PubMed]
Chen J, Kelz MB, Naděje BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Chronické Fos-příbuzné antigeny: stabilní varianty deltaFosB indukované v mozku chronickými léčebnými postupy. J Neurosci. 1997;17: 4933-4941. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulace proteinů typu delta FosB a FosB pomocí elektrokonvulzivního záchvatu a kokainu. Mol Pharmacol. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Cheung ZH, Fu AK, Ip NY. Synaptické role Cdk5: implikace ve vyšších kognitivních funkcích a neurodegenerativních onemocněních. Neuron. 2006;50: 13-18. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Nadměrná exprese DeltaFosB specifického pro typ buňky zvyšuje motivaci kokainu. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Di Chiara G, Tanda G, Cadoni C, Acquas E, Bassareo V, Carboni E. Homologie a rozdíly v působení drog zneužívání a konvenční posilovač (jídlo) na přenos dopaminu: interpretační rámec mechanismu drogové závislosti. Adv Pharmacol. 1998;42: 983-987. [PubMed]
Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS. Chronické změny v dopaminergní neurotransmise způsobují trvalé zvýšení proteinů podobných deltaFosB jak ve striatu hlodavců, tak u primátů. Eur J Neurosci. 1996;8: 365-381. [PubMed]
Harris GC, Hummel M, Wimmer M, Mague SD, Aston-Jones G. Nadmořská výška FosB v jádru accumbens během nucené kokainové abstinence koreluje s rozdílnými změnami ve funkci odměny. Neurovědy. 2007;147: 583-591. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Naděje B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulace okamžité časné exprese genu a vazba AP-1 v krysím jádře accumbens chronickým kokainem. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Naděje BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukce dlouhotrvajícího AP-1 komplexu složeného ze změněných proteinů typu Fos v mozku chronickým kokainem a dalšími chronickými léčebnými postupy. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Exprese transkripčního faktoru deltaFosB v mozku řídí citlivost na kokain. Příroda. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Kohlert JG, Meisel RL. Sexuální zkušenost senzibilizuje jádro accumbens spojené s párením dopaminových odpovědí ženských křečků. Behav Brain Res. 1999;99: 45-52. [PubMed]
Kohlert JG, Rowe RK, Meisel RL. Intromissivní stimulace u samců zvyšuje uvolňování extracelulárního dopaminu z neuronů identifikovaných fluoro-zlatem uvnitř středního mozku ženských křečků. Horm Behav. 1997;32: 143-154. [PubMed]
Koob GF, Ahmed SH, Boutrel B, Chen SA, Kenny PJ, Markou A, O'Dell LE, Parsons LH, Sanna PP. Neurobiologické mechanismy při přechodu z užívání drog na drogovou závislost. Neurovědy a Biobehaviorální recenze. 2004;27: 739-749. [PubMed]
Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatinová remodelace je klíčovým mechanismem, který je základem plasticity vyvolané kokainem ve striatu. Neuron. 2005;48: 303-314. [PubMed]
Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokainem indukovaná tvorba dendritických páteř u středně ostrých neuronů obsahujících dopaminový receptor D1 a D2 v jádrech accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103: 3399-3404. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Li Y, Kolb B, Robinson TE. Umístění trvalých změn vyvolaných amfetaminem v hustotě dendritických páteří na středních ostnatých neuronech v nucleus accumbens a caudate-putamen. Neuropsychopharmacology. 2003;28: 1082-1085. [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulace genové exprese a odměny kokainu CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Neuroplasticita zprostředkovaná změnou genové exprese. Neuropsychopharmacology. 2008;33: 3-17. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulární přepínač pro dlouhodobou adaptaci v mozku. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
McDaid J, Graham MP, Napier TC. Metamfetaminem indukovaná senzibilizace odlišně mění pCREB a DeltaFosB v celém limbickém okruhu mozku savce. Mol Pharmacol. 2006;70: 2064-2074. [PubMed]
Meisel RL, Camp DM, Robinson TE. Mikrodialyzační studie ventrálního striatálního dopaminu během sexuálního chování u sýrských křečků. Behav Brain Res. 1993;55: 151-157. [PubMed]
Meisel RL, Joppa MA. Podmínka preferovaných míst pro křečci po agresivních nebo sexuálních setkáních. Physiol Behav. 1994;56: 1115-1118. [PubMed]
Meisel RL, Joppa MA, Rowe RK. Antagonisté dopaminového receptoru zmírňují preferované místo po sexuálním chování u křečků ze Sýrie. Eur J Pharmacol. 1996;309: 21-24. [PubMed]
Meisel RL, Mullins AJ. Sexuální zkušenost u ženských hlodavců: buněčné mechanismy a funkční důsledky. Brain Res. 2006;1126: 56-65. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Mermelstein PG, Becker JB. Zvýšený extracelulární dopamin v jádru accumbens a striatum samice krysy během stimulovaného kopulačního chování. Behav Neurosci. 1995;109: 354-365. [PubMed]
Mumberg D, Lucibello FC, Schuermann M, Muller R. Alternativní sestřih fosB transkriptů vede k odlišně exprimovaným mRNA kódujícím funkčně antagonistické proteiny. Genes Dev. 1991;5: 1212-1223. [PubMed]
Nakabeppu Y, Nathans D. V přírodě se vyskytující zkrácená forma FosB, která inhibuje transkripční aktivitu Fos / Jun. Buňka. 1991;64: 751-759. [PubMed]
Nestler EJ. Molekulární základ dlouhodobé plasticity, která je základem závislosti. Nat Rev Neurosci. 2001;2: 119-128. [PubMed]
Nestler EJ. Transkripční mechanismy závislosti: role deltaFosB. Philos Trans R Soc. London B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Kokain-indukovaná proliferace dendritických trnů v nucleus accumbens je závislá na aktivitě cyklin-dependentní kinázy-5. Neurovědy. 2003;116: 19-22. [PubMed]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologické studie regulace chronické indukce antigenu FOS souvisejícího s kokainem v striatu a nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Oades RD, Halliday GM. Ventrální tegmentální systém (A10): neurobiologie. 1. Anatomie a konektivita. Brain Res. 1987;434(2): 117-165. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB v nucleus accumbens reguluje instrumentální chování a motivaci. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducibilní exprese dominantního negativního mutantu c-Jun u transgenních myší specifickou pro oblast mozku snižuje citlivost na kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Rozlišující vzory indukce DeltaFosB v mozku drogami zneužívání. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Pfaus JG, Damsma G, Wenkstern D, Fibiger HC. Sexuální aktivita zvyšuje přenos dopaminu v nucleus accumbens a striatum samic potkanů. Brain Res. 1995;693: 21-30. [PubMed]
Pierce RC, Kalivas PW. Amfetamin produkuje senzitizované zvýšení lokomoce a extracelulárního dopaminu přednostně v jádru accumbens shell potkanů, kterým byl podáván opakovaný kokain. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1019-1029. [PubMed]
Pierce RC, Kalivas PW. Model obvodů vyjádření behaviorální senzitizace na psychostimulanty podobné amfetaminu. Brain Res Brain Res Rev. 1997a;25: 192-216. [PubMed]
Pierce RC, Kalivas PW. Opakovaný kokain modifikuje mechanismus, kterým amfetamin uvolňuje dopamin. J Neurosci. 1997b;17: 3254-3261. [PubMed]
Pierce RC, Kumaresan V. Mezolimbický dopaminový systém: konečná společná cesta pro posílení účinku drog zneužívání? Neurosci Biobehav Rev. 2006;30: 215-238. [PubMed]
Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Kokainová samospráva mění morfologii dendritů a dendritických trnů v nucleus accumbens a neocortex. Synapse. 2001;39: 257-266. [PubMed]
Robinson TE, Kolb B. Perzistentní strukturní modifikace v nucleus accumbens a neuronech prefrontálního kortexu produkovaných předchozími zkušenostmi s amfetaminem. J Neurosci. 1997;17: 8491-8497. [PubMed]
Robinson TE, Kolb B. Změny v morfologii dendritů a dendritických trnů v nucleus accumbens a prefrontální kůře po opakované léčbě amfetaminem nebo kokainem. Eur J Neurosci. 1999a;11: 1598-1604. [PubMed]
Robinson TE, Kolb B. Morfin mění strukturu neuronů v nucleus accumbens a neokortex krys. Synapse. 1999b;33: 160-162. [PubMed]
Robinson TE, Kolb B. Strukturální plasticita spojená s expozicí zneužívání drog. Neurofarmakologie. 2004;47(Suppl 1): 33-46. [PubMed]
Tzschentke TM. Měření odměny s paradigmem preferencí podmíněného místa: komplexní přehled účinku léků, nedávný pokrok a nové problémy. Prog Neurobiol. 1998;56: 613-672. [PubMed]
Ulery PG, Nestler EJ. Regulace transkripční aktivity DeltaFosB fosforylací Ser27. Eur J Neurosci. 2007;25: 224-230. [PubMed]
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulace stability DeltaFosB fosforylací. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Vliv DeltaFosB v nucleus accumbens na přírodní odměňování. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reguluje běh kola. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukce DeltaFosB v orbitofronální kůře zprostředkovává toleranci k kokainem indukované kognitivní dysfunkci. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Wolf ME, Sun X, Mangiavacchi S, Chao SZ. Psychomotorické stimulátory a plasticita neuronů. Neurofarmakologie. 2004;47(Suppl 1): 61-79. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Podstatná role DeltaFosB v nucleus accumbens při morfinovém působení. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]