Funkční role N-terminální domény "FosB v reakci na stres a drogy zneužívání (2014)

Neurovědy. 2014 Okt 10. pii: S0306-4522(14)00856-2. doi: 10.1016/j.neuroscience.2014.10.002.

Ohnishi YN1, Ohnishi YH1, Vialou V2, Mouzon E2, LaPlant Q2, Nishi A3, Nestler EJ4.

Abstraktní

Předchozí práce se podílela na transkripčním faktoru ΔFosB, který působí v nucleus accumbens, při zprostředkování prospešných účinků drog zneužívání, jako je kokain, a při zprostředkování odolnosti vůči chronickému sociálnímu stresu. Transgenní a virové genové přenosové modely použité k vytvoření těchto FosB fenotypů však exprimují, kromě FosB, alternativní translační produkt AFosB mRNA, nazývaný A2AFosB, který postrádá N-koncový 78 aa přítomný v AFosB. Pro studium možného přínosu A2AFosB k těmto lékům a stresovým fenotypům jsme připravili virový vektor, který nadměrně exprimuje bodovou mutantní formu AFosB mRNA, která nemůže podstoupit alternativní translaci, a také vektor, který nadměrně exprimuje A2AFosB samostatně. Naše výsledky ukazují, že mutantní forma AFosB, když je nadměrně exprimována v jádru accumbens, reprodukuje zvýšení odměny a odolnosti pozorované u našich dřívějších modelů, bez účinků pozorovaných pro A2AFosB. Nadměrná exprese plného délky FosB, dalšího hlavního produktu genu FosB, také nemá žádný účinek. Tato zjištění potvrzují jedinečnou roli AFosB v nucleus accumbens při kontrole reakcí na drogy zneužívání a stresu.

ÚVOD

ΔFosB je kódován FosB gen a sdílí homologii s jinými transkripčními faktory rodiny Fos, které zahrnují c-Fos, FosB, Fra1 a Fra2. Všechny proteiny rodiny Fos jsou indukovány rychle a přechodně ve specifických oblastech mozku po akutním podání mnoha zneužívaných drog [viz ]. Tyto odezvy se nejvíce projevují v nucleus accumbens (NAc) a v dorzálním striatu, které jsou důležitými mediátory odměnujících a lokomotorických účinků drog. Všechny tyto proteiny rodiny Fos jsou však vysoce nestabilní a během několika hodin po podání léčiva se vracejí k bazálním hodnotám. Naproti tomu ΔFosB díky své neobvyklé stabilitě in vitro a in vivo (; Carle a kol., 2006; ), akumuluje se jedinečně ve stejných oblastech mozku po opakované expozici léku (; ; ). Novější studie prokázaly, že chronická expozice určitým formám stresu také vyvolává akumulaci AFosB v NAc a že k takové indukci dochází přednostně u zvířat, která jsou relativně odolná vůči škodlivým účinkům stresu (tj. Odolná zvířata) (; , ).

Ukázali jsme, že nadměrná exprese AFosB v NAc, buď u indukovatelných bitransgenních myší nebo lokálním virově zprostředkovaným genovým přenosem, zvyšuje citlivost zvířete na prospěšné a lokomotoricky aktivující účinky kokainu a dalších zneužívaných drog (; ; ; ; Robison a kol., 2013). Taková indukce také zvyšuje spotřebu a motivaci k přirozeným odměnám (; ; ; ; ; Pitchers a kol., 2009; ), zvyšuje odměnu za stimulaci mozku v intrakraniálních samostimulačních paradigmatech () a činí zvířata odolnějšími vůči několika formám chronického stresu (, ). Podobně i myši, u nichž konstitutivně chybí exprese FosB plné délky, ale vykazují zvýšenou expresi AFosB, vykazují sníženou citlivost na stres (). Společně tato zjištění podporují názor, že ΔFosB, působící v NAc, zvyšuje stav odměny, nálady a motivace zvířete.

Hlavní výzvou těchto studií je však to, že dalším produktem FosB gen, nazvaný A2AFosB, je také exprimován ve všech těchto genetických mutantních myších a virových vektorových systémech, přičemž zůstává ponechán otevřený možný příspěvek A2AFosB k pozorovaným behaviorálním fenotypům. A2AFosB je přeložen z alternativního startovacího kodonu umístěného v AFosB transkript mRNA (). Tento alternativní překlad vede k tvorbě A2AFosB, kterému chybí 78 N-terminál aaAFosB. V této studii jsme zkoumali roli A2AFosB ve zneužívání drog a stresových modelech jeho nadměrnou expresí, nebo AFos nebo FosB, s AAV (adeno-asociovaným virem) vektory; použili jsme mutantní formu ΔFosB mRNA, která nemůže podstoupit tento alternativní translační mechanismus. Naše výsledky potvrzují, že pro-odměny a pro-odolné akce pozorované v dřívějších studiích jsou skutečně zprostředkovány prostřednictvím osFosB a nikoli prostřednictvím dvou dalších protenproduktů FosB gen, FosB plné délky nebo A2AFosB.

METODY

Zvířata

Před experimentováním byly samci myší C9BL / 11J staré týdne 57 až 6 (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA) ustájeni po pěti v kleci v koloniální místnosti nastavené na konstantní teplotu (23 ° C) dne cyklus 12 hr / tm (cyklus se rozsvítí v 7 AM) s ad libitum přístupem k jídlu a vodě. Některé experimenty využívaly bitransgenní myši, u nichž nadměrná exprese AFosB je pod kontrolou systému regulace genů tetracyklinu, jak je popsáno (). Myši byly použity na doxycyklin (pro udržení vypnuté genové exprese) nebo na doxycyklin, který umožňuje expresi AFosB. Všechny protokoly byly schváleny Výborem pro ústavní péči o zvířata a jejich použití (IACUC) na hoře Sinaj.

Vektory AAV

Použili jsme sérotyp AAV2 pro zabalení AAV vektorů exprimujících kompletní FosB, AFosB nebo A2AFosB pod promotor lidského bezprostředního časného cytomegaloviru (CMV) s fluorescenčním proteinem Venuše kódovaným po intervenujícím IRES2 (interní ribozomální vstupní místo 2). Konstrukce AAV-AFOSB exprimovala mutantní formu AFosB mRNA, kde byl kodon představující Met79 mutován na Leu, aby se vyhladilo alternativní počáteční místo translace, které vytváří A2AFosB.

Virově zprostředkovaný přenos genů

Myši byly umístěny do malých zvířecích stereotaxických nástrojů pod anestézií ketaminem (100 mg / kg) a xylazinem (10 mg / kg) a exponovány jejich lebeční povrchy. Třicetimetrové jehly stříkačky byly bilaterálně spuštěny do NAc pro infuzi 0.5 μl AAV vektoru v úhlu 10 ° (přední / zadní + 1.6; střední / laterální + 1.5; hřbetní / ventrální - 4.4 mm). K infuzi došlo rychlostí 0.1 μl / min. Zvířata dostávající injekce AAV se nechala zotavit po dobu alespoň 24 po chirurgickém zákroku. Pro potvrzení exprese byly myši anestetizovány a perfundovány intrakardiálně pomocí 4% paraformaldehydu / PBS (fosfátem pufrovaný fyziologický roztok). Mozky byly kryokonzervovány 30% sacharózou a poté zmraženy a uloženy při -80 ° C až do použití. Koronální řezy (40 μm) byly nařezány na kryostatu a zpracovány ke skenování konfokální mikroskopií.

Testování chování

Myši byly studovány pomocí několika standardních behaviorálních testů podle publikovaných protokolů takto:

Chronické (10 dny) sociální porážkový stres bylo provedeno přesně podle popisu (; ). Stručně řečeno, jedna experimentální myš a jeden CD1 agresor byly sestaveny na 5 min v domácí kleci myši CD1. Poté byly odděleny plastovým děličem, který byl perforován, aby umožnil smyslový kontakt pro připomenutí dne. Každé ráno po dobu 10 byla experimentální myš přemístěna do klece jiné agresivní myši. Neporažené kontrolní myši podstoupily podobné expozice, ale u jiných myší C57BL / 6J. Testy na sociální interakce byly provedeny tak, jak bylo popsáno výše (; ). Stručně řečeno, testovaná myš byla umístěna do nové arény, která obsahovala malou klec na jedné straně. Pohyb (např. Ujetá vzdálenost, strávený čas v blízkosti této malé klece) byl zpočátku monitorován po dobu 150 s, když byla malá klec prázdná, následovalo další 150 s myší CD1 v této kleci. Informace o pohybu byly získány pomocí softwaru EthoVision 5.0 (Noldus).

Použili jsme standardní, nezaujatý podmíněné místo (CPP) postup (; Robison a kol., 2013). Stručně řečeno, zvířata byla předběžně testována po dobu 20 min ve fotoelektrickém monitorovaném tříkomorovém boxu s volným přístupem k environmentálně odlišným postranním komorám. Myši pak byly rozděleny do kontrolních a experimentálních skupin s rovnocenným skóre před testem. Po experimentální manipulaci se myši podrobily čtyřem 30 min tréninkovým sezením (střídání kokainu a salinického párování). V testovací den měly myši 20 min neomezeného přístupu do všech komor a CPP skóre se vypočítalo odečtením času stráveného v komoře spárované s kokainem mínus času stráveného v komoře spárované s fyziologickým roztokem. Lokomotorická aktivita indukovaná kokainem byla měřena pomocí přerušení fotobeamů v krabici CPP po dobu 30 min po každé testovací injekci.

Zvýšené plus bludiště testy byly prováděny s použitím černého plexiskla vybaveného bílými spodními povrchy pro zajištění kontrastu (). Myši byly umístěny do středu plusového bludiště a nechaly volně zkoumat bludiště pro 5 min za podmínek červeného světla. Pozice každé myši v čase v otevřených a zavřených ramenech byla sledována pomocí videotrackingového zařízení (Ethovision) a kamery namontované na strop.

Obecně, ambulantně pohybová aktivita během noční fáze byla hodnocena v domácích klecích pomocí mřížky s fotobuňkou (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA), která spočítala počet přestávek v ambulantním foto paprsku během periody 12 h ().

Western blotting

Vzorky NAc byly podrobeny westernovému přenosu, jak je popsáno (, ). Ukotvené zmrazené NAc byly homogenizovány v 100 μl pufru obsahujícího koktejly inhibitorů fosfatázy I a II (Sigma, St. Louis, MO, USA) a inhibitory proteázy (Roche, Basel, Švýcarsko) pomocí ultrazvukového procesoru (Cole Parmer, Vemon Hills, IL) , USA). Koncentrace proteinu byly stanoveny s použitím DC proteinového testu (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) a 10 – 30 μg proteinu byly naneseny na 12.5% nebo 4% –15% gradient Tris-HCl plyakrylamidové gely pro elektroforetickou frakcionaci (Bio -Rad). Po přenosu proteinů na nitrocelulózové filtry byly filtry inkubovány s anti-FosB protilátkou, která rozpoznává všechny FosB genové produkty, poté se sekundární protilátkou a nakonec kvantifikovány pomocí systému Odyssey (Li-Cor) podle protokolů výrobce.

Statistika

Byly použity ANOVA a t-testy studentů, korigované na více srovnání, s významností nastavenou na p <0.05.

VÝSLEDKY

Jak je uvedeno v Obrázek 1Ase FosB gen kóduje mRNA pro FosB plné délky a pro FosB. ΔFosB mRNA je generována z alternativní sestřihové události v Exonu 4 FosB primární přepis; to má za následek vytvoření předčasného stop kodonu a zkráceného AFosB proteinu, který postrádá C-koncový 101 aa přítomný v FosB. FosB a AFosB mRNA sdílí stejný ATG startovací kodon, umístěný směrem k 3 'konci Exonu 1. Je známo od původního klonování FosB produkty, které dvě mRNA také sdílejí alternativní místa začátku translace v Exonu 2, se nazývají ATX ATX NUMX, A1 a A2. Předchozí práce ukázaly, že minoritní proteinový produkt je generován z AFosB mRNA, ale ne FosB mRNA, prostřednictvím A2 ATG; tento protein se nazývá A2AFosB a postrádá 78 aa N-koncovou oblast AFosB (). Na rozdíl od toho se ATG A1 a A3 zdají být tiché, protože neexistuje žádný důkaz pro jejich použití v překladu FosB nebo ΔFosB přepisy.

Obrázek 1 

Úrovně výrazu FosB genové produkty

Obrázek 1B ilustruje indukci FosB genové produkty v NAc po opakovaném podávání kokainu, u zvířat byla 2 hodina po poslední dávce kokainu vyšetřena. V tomto časovém okamžiku oba proteiny AFosB a FosB vykazují významnou indukci kokainem bez konzistentní indukce A2AFosB. Všimněte si, že indukce AFOSB a FosB je odlišná od vzorce pozorovaného za 24 h nebo více po poslední dávce léku, když je indukován pouze AFOSB díky jedinečné stabilitě AFOSB proteinu (; ; ). Na rozdíl od nedostatečné indukce A2AFosB opakovaným podáváním kokainu však bitransgenní myší systém, který jsme použili k nadměrné expresi AOSOS, a proto studoval jeho behaviorální důsledky (; ; ) vede k signifikantní, i když nižší hladině, nadměrné exprese A2AFosB kromě AFosB (Obrázek 1C). Podobná úroveň indukce A2AFosB je vidět u našich virových vektorů, které nadměrně exprimují divoký typ AFosB (viz Obrázek 2). Tato pozorování zvyšují možnost, že některá z předpokládaných účinků AFOS uváděných dříve by mohla být částečně zprostředkována prostřednictvím 2AFosB.

Obrázek 2

Selektivní vyjádření FosB genové produkty s vektory AAV v buňkách Neuro2A

Abychom rozlišili rozdílné role AFosB proti A2AFosB, vytvořili jsme AAV vektor, který nadměrně exprimuje samotný A2AFosB, a také nový vektor, který nadměrně exprimuje mutantní formu AFosB mRNA (mΔFosB mRNA), která nemůže být podrobena alternativní translaci za vzniku A2AFosB. Oba vektory také exprimují Venuši jako marker exprese. Účinky těchto dvou vektorů jsme porovnali s ostatními, které jako kontrolu exprimují FosB plus Venuše nebo Venuše samotné. Schopnost těchto nových AAV vektorů selektivně nadměrně exprimovat jejich kódované transgeny je znázorněna na obrázku Obrázek 2.

Dále vyzkoušejte účinek každého z nich FosB genový produkt, působící v NAc. při komplexním chování jsme každou z těchto AAV vstříkli do této oblasti mozku bilaterálně oddělených skupin myší a o 3 týdny později, když je exprese transgenu maximální (Obrázek 3A), provedl baterii testů. Nejprve jsme vyhodnotili schopnost FosB genové produkty, které mají vliv na propružný fenotyp uváděný dříve pro ΔFosB v paradigmatu sociální porážky (, ), Viz Obrázek 3A, kontrolní myši exprimující samotnou Venuši vykazovaly očekávané snížení chování v sociální interakci, což je dobře zavedený marker vnímavosti (; ). Nadměrná exprese mAFosB úplně obrátila tento fenotyp, na rozdíl od A2AFosB a FosB, které neměly žádný účinek.

Obrázek 3 

Účinek FosB genové produkty v NAc o behaviorálních reakcích na kokain nebo sociální stres

Testovat relativní přínos každého z nich FosB genového produktu k prospěšným účinkům kokainu, jsme nadměrně exprimovali A2AFosB samotný, mAFosB nebo FosB bilaterálně v NAc a studovali zvířata v paradigmatu preferovaného místa. Jak je uvedeno v Obrázek 3B, bilaterální nadměrná exprese mAFosB v NAc zvyšuje místo kondicionování účinků prahové dávky kokainu, který nevyvolával významné místo preference u kontrolních zvířat exprimujících Venuši. Naproti tomu nadměrná exprese A2AFosB nebo FosB neměla žádný vliv na kondicionování kokainového místa. Protože jsme použili prahovou dávku kokainu, která u kontrolních zvířat nevyvolávala významné místo, nemůžeme vyloučit možnost, že FosB nebo A2AFosB mohou snižovat prospěšné účinky kokainu.

Nakonec jsme vyhodnotili základní chování a zkoumali jsme pohybovou aktivitu v domácí kleci zvířat a také chování podobné úzkosti ve zvýšené plus bludiště. Nadměrná exprese FosB, mAFosB ani A2AFosB v NAc měla účinek na lokomotorickou aktivitu, ačkoli FosB a A2AFosB - ale ne mAFosB - způsobily malé, ale významné snížení chování podobného úzkosti ve zvýšené plus bludiště (Obrázek 3D, E). Tato data naznačují, že FosB genová exprese neznatelně nemění chování za normálních podmínek.

DISKUSE

Výsledky této studie potvrzují, že fenotyp hlášený dříve pro AFosB je skutečně zprostředkován prostřednictvím AFosB a ne pomocí 2AFosB, alternativně přeloženého produktu AFosB mRNA, která postrádá N-konec FOSB. I když naše dříve používané nástroje k nadměrné expresi ΔFosB také vedou ke generování nízkých hladin Δ2AFosB, zde ukazujeme, že nadměrná exprese v NAc mutované formy ΔFosB mRNA, která nemůže generovat A2AFosB v důsledku mutace zapojeného alternativního startovacího kodonu, rekapituluje zvýšení odměny za kokain a odolnosti vůči stresu ze společenské porážky, které bylo dříve oznámeno pro ΔFosB (; ). Navíc nadměrná exprese A2AFosB sama o sobě nemá žádný vliv na kokain ani na stresové reakce. Také poprvé ukazujeme, že nadměrná exprese FosB v plné délce v NAc rovněž nemá žádný vliv na behaviorální reakce na kokain nebo stres.

I když tyto výsledky nevylučují možnost, že A2AFosB, jako minoritní proteinový produkt FosB gen, může uplatňovat funkční účinky v jiných oblastech mozku nebo v periferních tkáních, naše zjištění nicméně potvrzují jedinečný přínos ΔFosB, působícího v NAc systému odměňování, při podpoře odměňování kokainu a odolnosti vůči stresu.

Highlights

  • ΔFosB mRNA vede k AOSF a k menší alternativně translatované A2AFosB.
  • Nadměrná exprese samotného AFosB potvrzuje jeho fenotyp pro-odměnu a odolnost.
  • Naproti tomu Δ2AFosB nemá žádný vliv na odměnu za kokain nebo zranitelnost stresem.
  • Plná délka FosB, kódovaná FosB mRNA také neovlivňuje odměnu nebo odolnost.

Poděkování

Tato práce byla podpořena granty od Národního institutu duševního zdraví a Národního institutu pro zneužívání drog a nadace Ishibashi a Japonské společnosti pro podporu vědy (čísla JSPS KAKENHI: 24591735).

Poznámky pod čarou

Zřeknutí se odpovědnosti vydavatele: Jedná se o soubor PDF s neupraveným rukopisem, který byl přijat k publikaci. Jako službu pro naše zákazníky poskytujeme tuto ranní verzi rukopisu. Rukopis podstoupí kopírování, sázení a přezkoumání výsledného důkazu před jeho zveřejněním ve své konečné podobě. Vezměte prosím na vědomí, že během výrobního procesu mohou být objeveny chyby, které by mohly ovlivnit obsah, a veškeré právní odmítnutí týkající se časopisu.

Reference

  1. Byli LE, Hedges VL, Vialou V, Nestler EJ, Meisel RL. Exprese Delta JunD v nucleus accumbens zabraňuje sexuální odměně u křečků ženského pohlaví. Genes Brain Behav. 2013; 12: 666 – 672. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  2. Berton O, McClung CA, DiLeone RJ, Krishnan V, Russo S, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Základní role BDNF v mezolimbické dopaminové dráze při společenském porážkovém stresu. Věda. 2006; 311: 864 – 868. [PubMed]
  3. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Absence konzervované C-terminální degronové domény přispívá k jedinečné stabilitě AFosB. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009 – 3019. [PubMed]
  4. Chen JS, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Chronické antigeny související s Fos: stabilní varianty deltaFosB indukované v mozku chronickou léčbou. J Neurosci. 1997; 17: 4933 – 4941. [PubMed]
  5. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB zvyšuje motivaci kokainu. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  6. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. FOSB diferencovaně moduluje funkci přímé a nepřímé dráhy jádra accumbens. Proc Natl Acad Sci USA. 2013; 110: 1923 – 1927. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  7. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Nadměrná exprese FosB v jádru accumbens zvyšuje sexuální odměnu u křečků syrských žen. Genes Brain Behav. 2009; 8: 442 – 449. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  8. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. Mutantní myši FosB: Ztráta chronické kokainové indukce proteinů souvisejících s Fos a zvýšená citlivost na psychomotorický účinek kokainu a prospěšné účinky. Proc Natl Acad Sci USA. 1997; 94: 10397 – 10402. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  9. Naděje BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukce dlouhotrvajícího AP-1 komplexu složeného ze změněných proteinů typu Fos v mozku chronickým kokainem a dalšími chronickými léčebnými postupy. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Exprese transkripčního faktoru FosB v mozku řídí citlivost na kokain. Příroda. 1999; 401: 272 – 276. [PubMed]
  11. Monteggia LM, Luikart B, Barrot M, Theobald D, Malkovska I, Nef S, Parada LF, Nestler EJ. Podmíněné knockouty BDNF ukazují genderové rozdíly v chování souvisejícím s depresí. Biol Psychiatry. 2007; 61: 187 – 197. [PubMed]
  12. Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA., JrFosB zvyšuje prospěšné účinky kokainu a zároveň snižují propresivní účinky kapa-opioidního agonisty U50488. Biol Psychiatry. 2012; 71: 44 – 50. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  13. Nestler EJ. Transkripční mechanismy závislosti: role deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008; 363: 3245 – 3255. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  14. Ohnishi YN, Ohnishi YH, Hokama M, Nomaru H, Yamazaki K, Tominaga Y, Sakumi K, Nestler EJ, Nakabeppu Y. FosB Je nezbytný pro zvýšení tolerance stresu a antagonizuje lokomotorickou senzibilizaci pomocí FosB. Biol Psychiatry. 2011; 70: 487 – 495. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  15. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery P, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukce AFosB v mozkových oblastech souvisejících s odměnou po chronickém stresu. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. [PubMed]
  16. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Odlišné vzorce indukce AFosB v mozku drogami zneužívání. Synapse. 2008; 62: 358 – 369. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  17. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. FOSB v nucleus accumbens je rozhodující pro posílení účinků sexuální odměny. Genes Brain Behav. 2010; 9: 831 – 840. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  18. Džbány KK, Vialou V, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. Sexuální zkušenost zvyšuje amfetaminovou odměnu a jádro accumbens spinogenezi prostřednictvím aktivity dopaminového D1 receptoru a indukcí deltaFosB. J Neurosci. 2013; 33: 3434 – 3442. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  19. Roybal K, Theobold D, DiNieri JA, Graham A, Russo S, Krishnan V, Chakravarty S, Peevey J, Oehrlein N, Birnbaum S, Vitaterna MH, Orsulak P, Takahashi JS, Nestler EJ, Carlezon WA, Jr, McClung CA. Mánské chování vyvolané přerušením hodin. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 6406 – 6411. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  20. Teegarden SL, Bale TL. Snížení stravovacích preferencí vede ke zvýšené emocionalitě a riziku relapsu stravy. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1021 – 1029. [PubMed]
  21. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulace stability FosB fosforylací. J Neurosci. 2006; 26: 5131 – 5142. [PubMed]
  22. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylace AFOS zprostředkovává jeho stabilitu in vivo. Neurovědy. 2009; 158: 369 – 372. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  23. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, III, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, III, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren B, Krishnan V, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, Nestler EJ. FOSB v mozkových odměňovacích obvodech zprostředkovává odolnost vůči stresovým a antidepresivním reakcím. Nature Neurosci. 2010a; 13: 745 – 752. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  24. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ. Faktor sérové ​​odpovědi podporuje odolnost vůči chronickému sociálnímu stresu indukcí ΔFosB. J Neurosci. 2010b; 30: 14585 – 14592. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  25. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham D, Green TA, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños CA. Vliv ΔFosB v jádru na přirozené chování související s odměnou. J Neurosci. 2008; 28: 10272 – 10277. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  26. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB reguluje chod motocyklů. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  27. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. ΔFosB: Zásadní úloha ΔFosB v jádru accumbens při morfinovém působení. Nature Neurosci. 2006; 9: 205 – 211. [PubMed]