Prefrontální kortikální obvod pro deprese a úzkostné chování zprostředkované cholecystokininem: Úloha ΔFosB (2014)

Abstraktní

Snížená neuronální aktivita mediální prefrontální kůry (mPFC) je u myší spojována se sociálními depresemi a úzkostí. Molekulární mechanismy, které jsou základem snížené aktivity mPFC a její proliferační role, však zůstávají neznámé. Ukazujeme, že indukce transkripčního faktoru FosB v mPFC, konkrétně v oblasti předimbické (PrL), zprostředkovává náchylnost ke stresu. Indukce ΔFosB v PrL se vyskytovala selektivně u vnímavých myší po chronickém společenském porážkovém stresu a nadměrná exprese ΔFosB v této oblasti, ale nikoli v nedaleké infralimbické oblasti (IL), zvýšila citlivost na stres. FosB tyto účinky vyvolával částečně indukcí cholecystokininového (CCK) -B receptoru: CCKB blokáda v mPFC indukuje rezistentní fenotyp, zatímco podávání CCK do mPFC napodobuje anxiogenní a depresivní účinky sociálního stresu. Dříve jsme zjistili, že optogenetická stimulace neuronů mPFC u vnímavých myší zvrátí několik behaviorálních abnormalit pozorovaných po chronickém společenském porážkovém stresu. Proto jsme předpokládali, že optogenetická stimulace kortikálních projekcí zachrání patologické účinky CCK v mPFC. Po infuzi CCK v mPFC jsme optogeneticky stimulovali projekce mPFC na bazolaterální amygdalu nebo nucleus accumbens, dvě subkortikální struktury zapojené do regulace nálady. Stimulace projekcí kortikamygdaly blokovala anxiogenní účinek CCK, ačkoli na jiné příznaky sociální porážky nebyl pozorován žádný účinek. Naopak stimulace projekcí kortikosteroidů zvrátila CCK-indukované sociální vyhýbání se a deficity preferencí sacharózy, ale nikoli anxiogenní účinky. Tyto výsledky společně ukazují, že deficity chování vyvolané sociálním stresem jsou částečně zprostředkovány molekulárními adaptacemi v mPFC zahrnujících ΔFosB a CCK prostřednictvím kortikálních projekcí do odlišného subkortikálního cíles.

Klíčová slova: accumbens, amygdala, úzkost, CCK, deprese, mPFC

Úvod

Několik anatomicky a funkčně propojených limbických mozkových oblastí, včetně mediálního prefrontálního kortexu (mPFC), hippocampu, amygdaly a nucleus accumbens (NAc), se podílí na zprostředkování klíčových symptomů deprese a úzkosti (; ; ; ; , ; ; ). Například nepřítomnost kortikální zpětné vazby na amygdalu je v korelaci s dysforickými emocemi a po úspěšné léčbě se vrací na normální úroveň. Antidepresivní účinky hluboké mozkové stimulace subgeniální cingulate cortex, oblast mPFC, jsou spojeny s obnovením kortikální i subkortikální mozkové aktivity na normální úroveň (; ). Podobně hluboká mozková stimulace NAc je antidepresivem a anxiolytikem a koreluje se změněným metabolismem v NAc, amygdale a mPFC (; ; ). Tato data podporují hypotézu neuronových sítí o poruchách nálad, při nichž antidepresivní ošetření, bez ohledu na mechanismy, normalizuje aktivitu jak v podaktivních kortikálních, tak nadměrně aktivních subkortikálních obvodech (; ; ; ; ; ).

Zvířecí modely zahrnující chronickou expozici fyzickému nebo psychickému stresu narušují strukturu a funkci neuronů v mPFC (), amygdala (), hippocampus () a NAc (; ). Chronický sociální porážkový stres, etologicky platný model deprese (), snižuje neuronální aktivitu mPFC, jak vyplývá ze snížené exprese Zif268 a c-Fos (; ). Optogenetická stimulace mPFC zvrátí tyto deficity a vykazuje antidepresivní účinky (), což potvrzuje význam mPFC v jevech souvisejících s náladou. Thlodavce mPFC, stejně jako u primátů, řídí emoční chování částečně prostřednictvím projekcí na bazolaterální amygdalu (BLA) a NAc (; ; ). Molekulární mechanismy, které zprostředkovávají tuto roli mPFC, však stále nejsou známy.

Tato studie se zaměřila zpočátku na ΔFosB, stabilní transkripční faktor, který je indukován v NAc chronickým sociálním porážkovým stresem, kde se staví proti citlivosti na stres (). Provedli jsme mozkové mapování indukce ΔFosB po porážkovém stresu a zjistili jsme, podobně jako v předchozích studiích (; ; ), robustní indukce v mPFC. Překvapivě jsme zjistili, že taková indukce AFosB v mPFC podporuje citlivost na stres. Identifikovali jsme cholecystokininový (CCK) -B receptor jako molekulární cíl ΔFosB v mPFC, kde CCKergická neurotransmise se podílí na anxiogenních i depresogenních účincích sociálního stresu (, ). Zjistili jsme, že aktivita CCK v mPFC je nezbytná a dostatečná pro úzkostné a depresivní účinky sociálního stresu. Navíc pomocí optogenetických přístupů demonstrujeme specifické působení CCK v mPFC subcircuits: CCK v mPFC-BLA projekcích zprostředkovává úzkostné symptomy, zatímco CCK v mPFC-NAc projekcích zprostředkovává depresivní symptomy.

Materiály a metody

Pokus 1: mozkové mapování indukce AFosB pomocí stresu ze společenské porážky.

Osm týdnů staré samce myší C57BL / 6J byly podrobeny chronickému sociálnímu porážkovému stresu po dobu 10 po sobě jdoucích dnů, jak bylo popsáno výše (; ; ) (viz Tabulka 1; Obr. 1A). Stručně řečeno, každá myš byla vystavena neznámé agresivní samčí chovatelské myši CD1 v důchodu po dobu 5 min. Za den. Po přímé interakci s agresorem CD1 (5 min.) Byla zvířata umístěna do sousedního oddílu stejné klece na další 24 h se senzorickým, ale nikoli fyzickým kontaktem. Kontrolní zvířata byla chována v ekvivalentních klecích, ale s členy stejného kmene. Testy sociální interakce byly provedeny 24 h po posledním dni porážky. Sociální vyhýbání se neznámé samci myší CD1 bylo hodnoceno podle publikovaných protokolů. Byl měřen čas strávený v „interakční zóně“ (chodba široká 8-cm obklopující klec). Segregace poražených myší na citlivé a odolné subpopulace byla provedena, jak bylo popsáno dříve (; ). Protože většina kontrolních myší tráví více času interakcí se sociálním cílem než s prázdným krytem cíle, používá se jako mezní hodnota poměr interakce 100 (stejný čas strávený v zóně interakce v přítomnosti vs. nepřítomnosti sociálního cíle): myši se skóre <100 jsou označeny jako „vnímavé“ a myši se skóre ≥ 100 jako „odolné“. Rozsáhlé behaviorální, biochemické a elektrofyziologické analýzy podporují platnost těchto odlišných citlivých a odolných subpopulací (; ; ).

Tabulka 1.  

Průměrné číslo (± SEM) FosB-imunoreaktivních jader na mm2 v mozkových oblastech kontroly, vnímavých a odolných myší 24 h po chronické (10 d) sociální porážce stresu
Obrázek 1.  

Indukce FOSB v mPFC podporuje náchylnost ke stresu. AReprezentativní mikrofotografie imunohistochemie AFosB v mPFC 24 h po poslední epizodě sociální porážky 10. B, K indukci AFos nedochází u GABAergic ...

Bezprostředně po testu sociální interakce byly myši anestetizovány a perfundovány intrakardiálně 4% paraformaldehydem / PBS. Počty buněk pro AFos+ neurony v NAc byly provedeny tak, jak bylo popsáno dříve (). Mozky byly kryoprotekovány 30% sacharózou a koronální řezy (30 μm) byly nařezány na zmrazujícím mikrotomu a zpracovány pro imunohistochemii. Volně plovoucí řezy byly preinkubovány v blokovacím pufru obsahujícím 0.3% Triton a 3% normální kozí sérum. ΔFosB byl detekován pomocí králičích polyklonálních protilátek získaných proti N-terminální části proteinu (1 / 1000 Santa Cruz Biotechnology, katalogové číslo sc-48) ve stejném pufru, poté byl zpracován biotinylovanými kozími anti-králičími protilátkami IgG a avidin-biotinem metoda peroxidázy s DAB jako substrátem (Vector Laboratories). Inkubační doby diaminobenzidinu byly udržovány konstantní pro všechny podmínky (100). Plátky byly připevněny, dehydratovány a zakryty. FOSB-imunopozitivní buňky vykazovaly specifické hnědé zabarvení v jádru a byly kvantifikovány pozorovatelem slepým vůči podmínkám léčby pomocí mikroskopu (20 × zvětšení). Pro každou kvantifikaci byly na myš vybrány tři vybrané mozkové řezy zahrnující každou oblast mozku. Anatomická segregace každé oblasti mozku byla provedena porovnáním řezu s mozkovým atlasem myši Paxinos. Podmínky pro imunohistochemii byly optimalizovány tak, aby se hladiny pozadí snížily na minimum umožňující správnou identifikaci AfosB-pozitivních buněk. Průměrné hodnoty byly vypočteny pro každé zvíře a považovány za individuální pozorování pro statistickou analýzu. Ačkoli použitá protilátka rozpoznává jak FosB, tak FosB plné délky, pomocí Western blotu víme, že za studovaných podmínek je detekovatelná pouze AFosB (; ).

Pokus 2: identifikace ΔFosB neuronálního fenotypu indukovaného sociálním stresem v mPFC.

Pro zkoumání exprese ΔFosB v kortikálních GABAergických neuronech jsme použili tkáně z myší GAD2-tdTomato vystavených chronickému sociálnímu porážkovému stresu a obarvené na ΔFosB, jak je popsáno výše (viz výše) (viz výše) Obr. 1B). Myši byly generovány chovem knockinových myší GAD2-Cre (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; skladové číslo JAX 010802) () s (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; skladové číslo JAX 007908), které nesou tdTomato řízené floxed-stop (varianta RFP).

Pokus 3: behaviorální účinky nadměrné exprese AFosB v preimburické (PrL) a infralimbické (IL) kůře.

Sterotaxická chirurgie byla prováděna na dospělých samcích myší (8 týdny) za účelem injekce HSV-AFosB-GFP nebo HSV-GFP do PrL nebo IL oblastí mPFC. Stručně, myši byly anestetizovány za použití směsi ketaminu (10 mg / kg) a xylazinu (1 mg / kg) a pro dodání viru pro PrL byly použity následující stereotaxické souřadnice: 1.8 mm (přední / zadní), 0.65 mm (laterální) ), -2.2 mm (hřbetní / ventrální); a pro IL: 1.9 mm (přední / zadní), 0.75 mm (laterální), -2.8 mm (hřbetní / ventrální) v úhlu 10 ° od středové čáry (vzhledem k bregma). Celkově bylo 0.5 μl čištěného viru podáno bilaterálně během periody 5 min (0.1 μl / min) a následně 5 min. Odpočinku. Lokality virové injekce byly potvrzeny pomocí standardních histologických metod (viz Obr. 1C). Ačkoli není možné selektivně zacílit PrL versus IL u myší s dokonalou přesností, data v Obrázek 1C ilustrují, že je velmi možné převážně zacílit na jednu nebo druhou oblast. Tento přístup ve skutečnosti zdůvodňují odlišné behaviorální účinky získané z cílení na dvě oblasti (viz Výsledky). První skupina myší byla použita výhradně v experimentu submaximální sociální porážky (viz Obr. 1D). Tři dny po operaci byly myši podrobeny dvěma po sobě jdoucím porážkám ve stejný den a poté testovány na sociální interakci 24 h později. Tento postup submaximální porážky byl dříve ověřen, aby se po genetických manipulacích odhalily fenotypy prosusceptibility (; ).

Druhá šarže myší byla použita k testování chování podobného bazální úzkosti a depresi (viz Obr. 1E – J). Den po operaci byly myši navyklé roztokem 1% (hm./obj.) Sacharózy. Následující den si myši mohly vybrat mezi lahví s vodou a lahví s roztokem sacharózy 1%, přepínanou denně. Příjem roztoku sacharózy pro 24 h byl měřen během čtvrtého a pátého dne po chirurgickém zákroku a vyjádřen jako procento z celkového množství přijímané tekutiny. Myši byly testovány na otevřených polích (den 3), zvýšené plus bludiště (den 4), sociální interakce (den 5 ráno) a vynucené plavání (den 5 odpoledne) na základě publikovaných protokolů (). Zjistili jsme, že při tomto pořadí testování nejsou výsledky následných testů ovlivněny předchozími testy (). Aktivita myší v otevřeném poli byla zaznamenána po dobu 5 min pomocí videotrackingového systému (Ethovision) za podmínek červeného světla. Zvýšené plus bludiště se skládalo ze dvou přímých protínajících se drah umístěných 60 cm nad podlahou a rozdělených do dvou otevřených a dvou uzavřených ramen. Myši byly jednotlivě umístěny do středu bludiště a nechaly volně zkoumat každou ruku po dobu 5 min. V testech na otevřeném poli a zvýšeném plus bludišti byl čas, který byl stráven ve středu a v otevřených ramenech, použit jako inverzní index reakcí souvisejících s úzkostí. Byl prováděn jednodenní test nuceného plavání po dobu 5 min. Prodloužená doba imobility během testu nuceného plavání byla interpretována jako prodepresivní chování. Tento 1 denní test byl široce používán u myší a ověřen jako míra prediktivní platnosti v tom, že antidepresiva snižují dobu imobility.

Nakonec byla separátní skupině myší injikována intra-mOFC s HSV-AFOS a po submaximální porážce byla testována sociální interakce (viz viz Obr. 1K).

Vektory HSV byly získány od Rachael Neve (Massachusetts Institute of Technology). Požadované geny (AFB a GFP) jsou pod promotorem CMV. Tyto vektory byly rozsáhle ověřeny v předchozích publikacích (např. ).

Experiment 4: účinky chronického sociálního stresu na hladiny CCKB receptoru v mPFC.

V 24 h po testu sociální interakce byly mozky rychle odstraněny a sériově nařezány a mPFC byl rychle pitván a zmrazen na suchém ledu (viz viz Obr. 2A,B). Izolace RNA, qPCR a analýza dat byly provedeny tak, jak bylo popsáno dříve (; ). RNA byla izolována s TriZol reagentem (Invitrogen) a byla dále čištěna pomocí microeasy RNAeasy od QIAGEN. Bylo stanoveno, že všechny vzorky RNA mají hodnoty 260 / 280 a 260 / 230 ≥1.8. Reverzní transkripce byla provedena pomocí iScript (Bio-Rad). qPCR za použití SYBR Green (Quanta) byl proveden pomocí PCR systému Applied Biosystems 7900HT RT s následujícími parametry cyklu: 2 min při 95 ° C; 40 cykly 95 ° C pro 15 s, 59 ° C pro 30 s, a 72 ° C pro 33 s; a odstupňované zahřívání na 95 ° C, aby se vytvořily disociační křivky pro potvrzení jednotlivých produktů PCR. Data byla analyzována porovnáním Ct hodnoty léčebného stavu (vnímavé nebo odolné vs. kontrolní myši nebo HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) s AACt metoda (). Primery qPCR jsou následující: AFos, forward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT a reverzní, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, vpřed, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC a zpět, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, vpřed, AGCGCGATACATCCAGCAG a zpět, ACGATGGGTATTCGTAGTCCT; GAPDH, vpřed, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG a zpět, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Obrázek 2.  

Blokáda receptoru CCKB má proresilienční a antidepresivní účinek. ASociální porážka snižuje hladiny CCKB receptoru v mPFC pouze u odolných myší (n = 8 – 10). *p <0.05 ve srovnání s kontrolou (jednosměrná ANOVA). **p <0.05 ...
Experiment 5: účinky ΔFosB na CCKB receptor a hladiny cFos.

Myším bylo injikováno intra-PrL s HSV-AFOS. V 72 h po operaci, na vrcholu virové nadměrné exprese, byla místa injekce vyříznuta pod fluorescenčním mikroskopem (viz Obr. 2C). Izolace RNA, qPCR a analýza dat byly provedeny, jak je popsáno výše. Primery qPCR jsou následující: c-fos, forward, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA a reverzní, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Experiment 6: účinky blokády AFosB na stresem indukované hladiny CCKB receptoru a odolnost.

Dospělé myši byly injikovány bilaterálně HSV-GFP nebo HSV-AJunD do PrL (viz Obr. 2D-F). AJunD je mutant JunD zkrácený na N-konci, který působí jako dominantně negativní antagonista AFosB. Myši byly podrobeny sociální porážce dvakrát denně pro 5 d. Tento urychlený protokol sociální porážky, zkrácený na čas shodný s obdobím maximální exprese HSV transgenu, byl dříve používán a ukázalo se, že vyvolává maximální úroveň sociálního vyhýbání se (). 24 hodin po poslední stresové epizodě byly myši dekapitovány bez anestézie, aby se zabránilo účinkům anestetik na hladinu neuronálních proteinů. Infikovaná tkáň byla odstraněna v inhibitorech proteázy obsahující PBS (Roche) a fosfatáze (Sigma-Aldrich) pomocí razníku o průměru 15 a okamžitě zmrazena na suchém ledu. Vzorky byly homogenizovány sonikací světlem v modifikovaném RIPA pufru: 10 mm Tris báze, 150 mm chlorid sodný, 1 mm EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% deoxycholát sodný, pH 7.4, a inhibitory proteázy a fosfatázy jako výše. Po přidání Laemmliho pufru byly proteiny odděleny na 4–15% polyakrylamaidových gradientových gelech (Criterion System; Bio-Rad) a Western blotování bylo provedeno pomocí systému Odyssey (Li-Cor) podle protokolů výrobce. Membrány byly blotovány CCKB receptorovou protilátkou (1/1000, Acris, katalogové číslo AP01421PU-N). Další skupině myší byl injikován AAV-AJunD nebo AAV-GFP v PrL a poté, 5 týdnů po chirurgickém zákroku, aby byla zajištěna maximální exprese transgenu, byly myši podrobeny submaximálnímu porážkovému protokolu. Byli testováni na sociální interakci 24 hodin po poslední porážce.

Experiment 7: účinky intra-mPFC CI-988, antagonisty CCKB, na sociální vyhýbání se sociálnímu stresu a anhedonii.

U citlivých myší byly implantovány bilaterální kanyly (kanyla 1.0 mm kanyly, 1.8 mm přední, injektor - 2.2 mm hřbetní / ventrální) mPFC (viz viz Obr. 2G,H). Týden po chirurgickém zákroku bylo 10 ng CI-988 infundováno přímo do mPFC se zaměřením primárně na PrL. Myši byly poté testovány na chování v sociální interakci. Pro zbývající 24 h byla změřena preference sacharózy. CI-988 (Tocris Bioscience) byl rozpuštěn ve fyziologickém roztoku, alikvotován a zmražen. Konečné zředění bylo připraveno v den experimentu. Další pokus byl proveden u vnímavých myší s CI-988 podaným intraperitoneálně (2 mg / kg) 30 min. Před testem sociální interakce.

Experiment 8: účinky agonisty CCKB na náchylnost k sociálnímu stresu a zvrácení optogenetickou stimulací mPFC projekcí na BLA nebo NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP nebo AAV-CaMKII-EYFP byly injikovány do pravého mPFC, opět zaměřeného primárně na PrL (viz. Obr. 3A – G). O pět týdnů později byla optická vlákna implantována do pravého NAc (1.4 přední / zadní, 2.6 laterální, -4.7 hřbetní / ventrální v úhlu 25 ° od středové čáry) nebo BLA (-1.6 přední / zadní, 3.1 laterální, -4.7 hřbetní / ventrální bez úhlu od středové čáry). Při stejném chirurgickém zákroku byly do mPFC implantovány bilaterální kanyly (viz výše). Kanyly a vlákna byly k lebce připevněny dentálním cementem. Myším bylo poté umožněno zotavení 1 před začátkem pokusů o chování. Myši byly podrobeny submaximální porážce, pak byly 24 h později testovány na sociální interakci, přímo následovaly zvýšené plus bludiště a na preferenci sacharózy pro zbývajících 24 h. V 30 min. Před testem sociální interakce bylo polovině myší infundováno CCK-8 (10 ng) do mPFC, zatímco druhá polovina dostala vehikulum (fyziologický roztok). Myši byly testovány ve dvojicích (myš ošetřená vehikulem a CCK-8, s AAV-GFP nebo AAV-ChR2). CCK-8 (Sigma) byl rozpuštěn ve fyziologickém roztoku, alikvotován a zmražen. Konečné zředění bylo připraveno v den experimentu.

Obrázek 3.  

Citlivost na stres vyvolaná CCK-8 závisí na konkrétních kortikálních projekcích. AV 24 h po submaximální sociální porážce a 30 min po infuzi CCK-8 byly promítací oblasti mPFC během testu sociální interakce stimulovány laserem. Infuze CCK-8 ...

Optické stimulace byly prováděny podle publikovaných protokolů (). Optická vlákna (Thor Laboratories) byla chronicky implantována a připojena pomocí adaptéru FC / PC k modré laserové diodě 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473 – 050-M). Ke generování pulzů modrého světla byl použit stimulátor (Agilent, #33220A). Během všech stimulací byly 40 ms výboje 100 Hz (9.9 ms šířka hrotu) modré světlo pulzy doručovány každých 3 s do terminálních oblastí v BLA nebo NAc pouze po dobu testu sociální interakce, aby se napodobil burst-like model kortikálních aktivita. Intenzita světla z optických vláken byla ověřena před každým použitím pomocí světelného senzoru (Thor Laboratories, S130A) a intenzita světla byla UM15 mW. Tento stimulační protokol, který byl dříve elektrofyziologicky ověřen (), nevyvolával záchvaty založené na behaviorálních pozorováních a nepřítomnosti exprese c-Fos mimo optogeneticky stimulované oblasti ().

Pokus 9: účinky agonisty CCKB na neuronální aktivitu mPFC, měřeno hladinami mRNA c-Fos.

Dospělé myši cílené na mPFC byly implantovány bilaterální kanyly (viz Obr. 3H). Po týdnu odpočinku byly myši podrobeny submaximální porážce a infuze CCK-8 24 h později. Razy mPFC byly odebrány 30 min po infuzi léčiva a vzorky byly připraveny pro analýzu mRNA, jak je popsáno výše.

Ustájení zvířat.

Byly použity samci myší C57BL / 6J osm týdnů (The Jackson Laboratory). Všechny myši byly navyknuty do zařízení pro zvířata po alespoň 1 týden před experimentálními manipulacemi a byly udržovány při 23 ° C - 25 ° C v cyklu 12 h světlo / tma (světla svítila v 7: 00 AM) s podle libosti přístup k potravě a vodě. Pokusy byly prováděny v souladu s pokyny Společnosti pro neurovědu a Ústavního výboru pro péči o zvířata a jejich použití na lékařské fakultě Icahna v Mount Sinai.

Statistické analýzy.

Zobrazená data jsou vyjádřena jako průměr ± SEM (znázorněné jako sloupce chyb). Jednosměrné ANOVA byly použity k porovnání prostředků mezi kontrolními, vnímavými a odolnými myšmi v imunohistochemických, biochemických a behaviorálních analýzách. Jednosměrné ANOVA byly použity k porovnání prostředků mezi GFP-kontrolami a AFOSB nadměrnou expresí v PrL nebo IL v otevřeném poli, zvýšeným plus bludištěm, nuceným plaváním a preferenčními testy se sacharózou. Pro porovnání průměrů mezi GFP-kontrolami, AFOS-PrL a AFOS-IL v testu sociální interakce byly použity dvousměrné ANOVA. Ve všech behaviorálních experimentech byly použity dvousměrné ANOVA k porovnání účinků CCK-8 s optogenetickou stimulací nebo bez ní, jakož i vlivu nadměrné exprese AFosB nebo infúze CI-988 na sociální vyhýbání se. Pokud je to vhodné, post hoc analýzy byly prováděny pomocí Bonferroni post hoc test. Studentské t testy byly použity k porovnání prostředků pro účinek infuze CI-988 na preferenci sacharózy a testy nuceného plavání, a CCK-8 na c-Fos hladiny mRNA. Rozdíly mezi experimentálními podmínkami byly považovány za statisticky významné, když p ≤ 0.05.

výsledky

Mapování indukce ΔFosB mozkem pomocí chronického sociálního porážkového stresu

Nejprve jsme zkoumali indukci AFB imunohistochemií u kontrolních, vnímavých a odolných myší po průběhu chronického (10 d) sociálního porážkového stresu, se zaměřením na oblasti předního mozku a střední mozkové mozky, které se dříve účastnily stresových reakcí. Zvířata byla analyzována 24 h po poslední porážkové epizodě. Chronický sociální stres indukuje AFos v četných oblastech mozku s odlišnými vzory pozorovanými mezi odolnými a vnímavými myšmi. Jak je uvedeno v Tabulka 1 a Obrázek 1A, IL, BLA, dentate gyrus hippocampu, hřbetní striatu a jádro NAc vykazovaly preferenční aktivaci u odolných myší; takové výsledky v NAc jsou v souladu s publikovanými zjištěními (). V pozoruhodném kontrastu vykazovaly vnímavé myši větší indukci v PrL, laterálním septu a jádru postele stria terminalis. Několik oblastí mozku vykázalo srovnatelnou indukci AFOS u vnímavých a odolných myší; tyto zahrnovaly orbitofrontální kůru (OFC, další oblast PFC), NAc shell, dorzální raphé a periaqueducal grey (PAG).

Pro identifikaci neuronálního subtypu vykazujícího indukci AFosB v kortikálních oblastech byly myši GAD2-tdTomato vystaveny chronickému sociálnímu porážkovému stresu. Imunoreaktivita AFOSB u vnímavých myší byla nedetekovatelná v GABAergických neuronech (Obr. 1B), která potvrzuje dřívější nálezy specifické indukce AFosB v kortikálních pyramidálních neuronech po jiných formách chronického stresu (). U kontrolních myší bez kontroly základní hladiny ΔFosB v mozkových oblastech byly podobné těm, které byly hlášeny v předchozích studiích (, ) s mnohem vyšší bazální hladinou v NAc a dorzálním striatu ve srovnání s jakoukoli jinou oblastí, s jedinou výjimkou dentate gyrus, která vykazovala hladiny srovnatelné s hladinami ve striatálních regionech (Tabulka 1).

FOSB v mPFC podporuje náchylnost ke stresu

Abychom tyto nálezy sledovali, zaměřili jsme se na PrL, protože jsme dříve ukázali, že optogenetická aktivace této oblasti měla antidepresivní účinky v paradigmatu sociální porážky (). Abychom otestovali funkční důsledky indukce AFosB v této oblasti mozku, jsme virově nadměrně exprimovali AFosB v PrL kontrolních myší. (Obr. 1C) a podrobil je submaximálnímu průběhu sociálního porážkového stresu, který u normálních zvířat nevyvolává sociální vyhýbání se. Myši nadměrně exprimující AFosB v PrL byly více náchylné k sociální porážce než kontrolní myši s injekcí GFP v tom, že vykazovaly sociální vyhýbání se chování po submaximální sociální porážce (interakce, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, hlavní účinek viru, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.447, p <0.05) (Obr. 1D). Tyto myši také vykazovaly zvýšenou nehybnost v 1 den vynuceném testu plavání (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroniho post test t = 3.518, p <0.05) (Obr. 1E), účinek opačný než účinek antidepresiv. Na rozdíl od toho, nadměrná exprese ΔFosB v PrL nezměnila několik výchozích měření chování podobného úzkosti, preference sacharózy, sociální interakce nebo lokomotorické aktivity (Obr. 1F – J). Společně tato zjištění podporují hypotézu, že selektivní indukce AFosB v PrL vnímavých myší přispívá ke zranitelnosti vůči stresu a jeho škodlivým důsledkům. Naproti tomu nadměrná exprese ΔFosB v jiné oblasti mPFC, IL, neměla žádný vliv na výchozí emoční chování ani na reakce na sociální porážkový stres (Obr. 1D – J), vzhledem k tomu, že nadměrná exprese ΔFosB v mediální OFC směřovala k podpoře odolnosti vůči chronické sociální porážce, ačkoli tento účinek nedosáhl statistické významnosti (interakce, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, hlavní účinek doby interakce, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroniho post test t = 3.860, p <0.05 ve skupině GFP; t = 1.960, p <0.05 ve skupině AFosB; účinek viru, t = 2.447, p <0.05) (Obr. 1K).

FosB podporuje indukci CCKB v mPFC

Velké množství důkazů podporuje názor, že CCK, hojný neuropeptid v mozku, hraje zásadní roli v neurobiologických mechanismech stresu a úzkosti (). Zejména uvolňování CCK v mPFC během sociálního stresu u potkanů ​​je spojeno s chováním souvisejícím s úzkostí (). Přestože zapojení CCK do lidské deprese zůstává nejasné, nedávné důkazy poukazují na její roli v chování vyvolaném sociální porážkou u potkanů ​​(). Proto jsme předpokládali, že změny v hladinách CCK nebo jeho CCKB (také známých jako CCK2) v mPFC mohou přispívat k rozdílům mezi vnímavými a odolnými myšmi. V 48 h po poslední porážkové epizodě byly hladiny mRNA CCKB sníženy pouze v mPFC odolných myší (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroniho post test, t = 3.104, p <0.05 vs kontrola; t = 5.113, p <0.01 vs citlivý) (Obr. 2A). Nebyl pozorován žádný rozdíl v hladinách CCK mRNA u vnímavých nebo odolných myší (data nejsou uvedena). Pozorovali jsme nárůst ΔFosB Hladiny mRNA pouze u vnímavých myší shodné s výše uvedenými proteinovými daty (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroniho post test t = 3.336, p <0.05 vs citlivý; t test t(12) = 2.138, p <0.05 vs kontrola) (Obr. 2B). Protože ΔFosB reguluje transkripci mnoha genů (; ), zvážili jsme možnost, že by mohla regulovat expresi CCKB mRNA. Abychom tuto otázku vyřešili, nejprve jsme nadměrně exprimovali ΔFosB v PrL a zjistili jsme, že tato manipulace zvyšuje hladiny CCKB mRNA v této oblasti (t(12) = 2.012, p <0.05 vs GFP) (Obr. 2C). Zajímavé je, že jsme také zjistili pokles c-Fos hladiny mRNA po nadměrné expresi ΔFosB (t(11) = 3.382, p <0.01) (Obr. 2C). TTato zjištění dále naznačují, že indukce AFB v PrL vnímavých myší je aktivním mechanismem citlivosti tím, že brání potlačení CCKB pozorované u odolných myší.

Pro další posílení těchto pozorování jsme nadměrně exprimovali Aunun, vazebného partnera AFosB, který postrádá svou transaktivační doménu, a tím působí jako dominantní negativní antagonista, a určoval jeho účinek na stresem indukovanou expresi CCKB. Potvrdili jsme, že chronický sociální porážkový stres zvýšil hladiny proteinů CCKB v PrL vnímavých myší (t test t(12) = 2.289, p <0.05 vs kontrola) (Obr. 2D,E). Navíc byla taková indukce zcela blokována nadměrnou expresí Aunun v této oblasti (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroni po testu t = 3.615, p <0.01) (Obr. 2D,E), podporující hypotézu, že AFosB zprostředkovává stresem indukovanou expresi CCKB. Kromě toho blokáda aktivity FosB v PrL prostřednictvím místní exprese Aunun také podporovala odolnost proti stresu (t test t(16) = 2.114, p = 0.05 vs. kontrola) (Obr. 2F). Mechanismus, který je příčinou downregulace CCKB u odolných myší, zůstává objasněn.

Role CCKB v odolnosti a náchylnosti ke stresu

Pro přímé testování úlohy regulace CCKB v PrL při zprostředkování citlivosti versus odolnosti jsme infuzi selektivního antagonisty receptoru CCKB CI-988 (10 ng) přímo do této mozkové oblasti vnímavých myší. CI-988 účinně antagonizuje CCKB receptory in vivo protože vykazuje nanomolární afinitu a vysokou selektivitu pro subtyp receptoru CCKB (). Blokáda aktivity CCKB výrazně zvýšila sociální interakci (Obr. 2G) (interakce, F(1,20) = 7.795, p <0.05; lék F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroni po testu t = 3.615, p <0.01). Infúze CI-988 také zvrátila deficit preferencí sacharózy pozorovaný u vnímavých myší (t(8) = 2.681, p <0.05) (Obr. 2H). Oba behaviorální výsledky ukazují, že blokáda působení CCK v PrL vykazuje silné antidepresivní účinky. Je zajímavé, že při intraperitoneálním podání byl CI-988 neúčinný při zvládání sociálního vyhýbání se (údaje nejsou uvedeny).

Abychom otestovali opak, že aktivace CCKB v PrL by mohla zprostředkovat sociální vyhýbání se a sníženou preferenci sacharózy vyvolanou chronickým sociálním porážkovým stresem, zkoumali jsme účinek lokální infuze CCK-8 (10 ng), převládající formy CCK v mozku , o chování souvisejících s depresí a úzkostí. Dávka léku byla vybrána na základě předchozích výsledků v literatuře (; ; ). Myši byly vystaveny submaximálnímu sociálnímu stresu 24 h před testováním chování (Obr. 3A). CCK-8, infundovaný 30 min před testováním, byl dostatečný k vyvolání sociálního vyhýbání se v testu sociální interakce a také ke snížení času stráveného v otevřených ramenech ve zvýšeném plus bludišti (SI: BLA, interakce, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; hlavní účinek drogy, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.957, p <0.05; NAc: interakce, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroni po testu t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, interakce, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroniho post test t = 2.509, p <0.05 účinek léku; t = 2.528, p Účinek viru <0.05; NAc, t test t(17) = 1.961; p <0.05 účinku léku ve skupině eYFP) (Obr. 3BÝT, vlevo, odjet). Nebyly pozorovány žádné rozdíly v preferenci sacharózy (Obr. 3F,G, vlevo, odjet). Konečně infuze CCK-8 neměla žádný vliv na chování (sociální interakce a zvýšené plus bludiště) naivních neošetřených myší v těchto testech (data nejsou uvedena). TTyto výsledky ukazují, že zvýšení FACB zprostředkované zvýšení CCKB aktivity v PrL vnímavých myší ve srovnání s odolnými myšmi přispívá k některým stresovým indukovaným deficitům chování vykazovaným těmito zvířaty.

Blokování náchylnosti ke stresu vyvolané CCK aktivací kortikálních projekcí na BLA versus NAc

Snížená neurální aktivita mPFC koreluje s depresí podobným chováním u myší, s optogenetickou stimulací neuronů mPFC vnímavých myší vyvolávajících antidepresivní účinky (). Proto jsme předpokládali, že CCK může působit v PrL inhibicí neuronální aktivity a tím způsobovat depresivní chování. V souladu s touto hypotézou jsme pozorovali pokles c-Fos Hladiny mRNA v PrL v reakci na CCK infuzi do této oblasti mozku (t(13) = 2.235, p <0.05) (Obr. 3H).

Dále jsme předpokládali, že optogenetická stimulace mPFC uplatňuje své antidepresivní účinky tím, že oponuje účinkům CCK na neuronální aktivitu. Při testování této hypotézy jsme zkoumali subkortikální struktury zprostředkující účinky CCK na anxiogenní a prodepresi. Pyramidální neurony mPFC se těžce promítají do NAc a BLA, což jsou dvě limbické struktury zapojené do behaviorálních reakcí na stres. Ukázalo se, že změněná aktivita obou oblastí mozku hraje zásadní roli při vyjadřování chování podobného úzkosti a depresi (; ). Proto jsme testovali, zda stimulace glutamatergických projekcí z PrL na NAc nebo na BLA by byla proti škodlivým účinkům CCK mikroinfúze na PrL (Obr. 3A). Do PrL jsme vstříkli AAV-CaMKII-ChR2-EYFP nebo AAV-CaMKII-EYFP jako kontrolu. Je známo, že promotor CaMKII cílí virovou expresi na glutamatergické pyramidové neurony v kortikálních oblastech. Pak jsme nechali dostatek času (6 týdnů), aby transgeny byly transportovány do nervových terminálů těchto pyramidálních neuronů v NAc a BLA (Obr. 3I). Myši dostaly submaximální sociální porážku; 24 h později jsme infúzi CCK-8 do PrL a 30 min poté, se měřila sociální interakce během optogenetické stimulace glutamatergických terminálů v NAc nebo BLA. Bezprostředně po testu sociální interakce byly myši vyhodnoceny ve zvýšeném plus bludišti, aby se vyhodnotilo chování související s úzkostí a poté na preferenci sacharózy k vyhodnocení anhedonia.

Optogenetická stimulace PrL glutamatergických projekcí na NAc plně zvrátila sociální vyhýbání se indukované intra-PrL CCK-8 (interakce, F(1,26) = 6.688, p <0.05, žádný účinek léčiva ve skupině ChR2) (Obr. 3C). Naproti tomu taková stimulace PrL na NAc neměla žádný účinek na chování podobné úzkosti měřené ve zvýšené plus bludiště (Obr. 3E); nicméně taková stimulace zvýšila preferenci sacharózy ve srovnání s nestimulovanými myšmi (interakce, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.998, p <0.05 stimulačního účinku u zvířat léčených CCK-8) (Obr. 3G).

Velmi odlišný vzorec chování byl pozorován u optogenetické stimulace PrL glutamatergických projekcí na BLA. Taková stimulace nezabránila sociálnímu vyhýbání se vyvolanému intra-PrL CCK-8 infuzí (interakce, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; hlavní účinek drogy, F(1,22) = 11.75, p <0.05; žádný účinek ve stimulované skupině, t test t(12) = 2.054, p <0.05) (Obr. 3B). Stimulace BLA aferentů však vyvolala anxiolytický účinek, jak ukazuje zvýšený čas strávený v otevřených ramenech zvýšené plus bludiště (interakce, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroniho post test t = 2.528, p <0.05 virového účinku ve skupinách léčených CCK-8) (Obr. 3D). Stimulace glutamatergických projekcí na BLA neměla významný vliv na preferenci sacharózy (interakce, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Obr. 3F).

Diskuse

Výsledky této studie poskytují důkaz molekulárních adaptací vyskytujících se v PrL, které jsou základem citlivosti na sociální stres. Ukazujeme indukci AFosB v tomto subregionu mPFC po chronickém společenském porážkovém stresu, kde AFOSB nadměrná exprese podporuje citlivost na stres. Identifikovali jsme CCKB receptor jako jeden cílový gen regulovaný AFosB v PrL, zjevně indukující CCKB protein u vnímavých myší a zabraňující downregulaci exprese CCKB, která se vyskytuje selektivně u odolných myší. Dále jsme ukázali, že infúze agonisty CCK do PrL podporuje reakce chování na sociální stres, které se podobají depresím a úzkostným chováním, zatímco blokování aktivity receptoru CCKB v této oblasti vnímavých myší tyto účinky blokuje. Dále jsme použili optogenetické nástroje k identifikaci mikroobvodů zapojených do akcí CCK v PrL podobné proanxietě a prodepresi. Ačkoli glutamatergické projekce kortiko-NAc zprostředkovávají deficity odměny, o nichž svědčí sociální vyloučení a snížená preference sacharózy, tento mikroobvod neovlivňuje anxiogenní účinky CCK infundované do PrL. Naopak, kortikální projekce na BLA zprostředkovávají projev chování spojeného s úzkostí, ale nemají žádný vliv na sociální vyhýbání vyvolané sociálním stresem ani na deficit preferencí sacharózy. Tato data společně ukazují, že změny ve funkci PrL po chronickém společenském porážkovém stresu zprostředkovávají četné behaviorální deficity prostřednictvím specifických subkortikálních projekcí.

ΔFosB: mapování limbické stresové sítě a role v mPFC

Imunohistochemie ΔFosB identifikuje neurony ovlivněné chronickým stresem s rozlišením jednotlivých buněk a používá se pro mapování neuronálních obvodů regulovaných stresem (; ; ). Tuto metodiku jsme použili k prokázání, že chronický sociální porážkový stres indukuje ΔFosB v několika oblastech mozku s odlišnými vzory mezi odolnými a citlivými skupinami, přičemž některé oblasti vykazují indukci pouze u odolných myší, jiné pouze u vnímavých myší a ještě jiné za obou podmínek (Tabulka 1). Předchozí práce prokázaly, že indukce AFOS v NAc nebo ventrální PAG podporuje odolnost vůči chronickému stresu a přispívá k antidepresivním odpovědím (; ).

Indukce AFosB v PrL vnímavých myší ve spojení s předchozími zjištěními, že optogenetická stimulace této oblasti vykazuje antidepresivní účinky (), nás vyzvala ke studiu vlivu ΔFosB v této kortikální oblasti. Na rozdíl od zjištění v NAc a ventrálním PAG jsme zjistili, že AFOS v PrL podporuje náchylnost k chronickému sociálnímu porážkovému stresu a vyvolává prodepresi podobný účinek v testu nuceného plavání, aniž by to ovlivnilo chování podobné úzkosti nebo preferenci sacharózy. Na rozdíl od PrL jsme nezjistili žádný účinek nadměrné exprese AFosB v blízkém IL. Nedávná studie zjistila zvýšené hladiny ΔFosB v IL u odolných myší a zapojila tento podoblast do odolnosti vůči sociálnímu stresu (). Jsou tedy zapotřebí další studie k řešení rozdílných rolí pro tyto dvě podoblasti mPFC, u kterých bylo prokázáno, že vyvolávají opačné účinky v jiných doménách chování (; ; ). Již dříve jsme uvedli, že lidé trpící depresí vykazují nižší hladiny AFosB v postmortem NAc vyšetřeném (), wHereas vyšší hladiny ΔFosB byly prokázány u dorsolaterálního PFC (Brodmann oblast 46) u depresivních lidí (). Jiné kortikální regiony nebyly ve druhé studii zkoumány. V každém případě tato zjištění společně podporují regionálně specifické abnormality exprese AFB u lidské deprese, kde transkripční faktor vykazuje velmi odlišné účinky na zranitelnost stresem. V budoucích studiích by bylo zajímavé zkoumat vliv ΔFosB v mnoha dalších oblastech mozku, kde je indukován (Tabulka 1) o stresových reakcích.

Jedním z mechanismů, pomocí kterého může indukce AFB v PrL přispívat k depresivnímu chování, je potlačení aktivity PrL. ΔFosB bylo prokázáno, že potlačuje odpovědi glutamátu AMPA, a c-Fos exprese v NAc středně ostnatých neuronech (; ; ). Podobně jsme zjistili pokles c-Fos exprese po nadexpresi AFos v PrL. Indukce AFOS v PrL by tedy mohla být odpovědná za sníženou neuronální aktivitu pozorovanou v této oblasti po chronickém společenském porážkovém stresu. Očekává se, že takový snížený tón PrL nad jeho subkortikálními cíli, jako jsou BLA a NAc, zlepší výraz strachu a neschopnost uhasit emoční reakce na stres (, ). Navíc léze mPFC vyvolávají senzitizované stresové reakce a deficity v zániku strachu (; ; ; ), což naznačuje, že stresem indukovaná porucha mPFC, zprostředkovaná částečně indukcí ΔFosB, by mohla přispět k depresi a jiným poruchám spojeným se stresem ().

Role CCK ve zranitelnosti stresem

Poskytujeme důkaz, že CCKB receptor je cílem AFosB, takže indukce AFosB v PrL vnímavých myší je pouze jedním mechanismem, prostřednictvím kterého AFosB projevuje své prodepresi podobné účinky v této oblasti. Ačkoli specifické působení CCK v mPFC obvodech zůstávají nejasné, u hlodavců je CCK lokalizován v GABAergických interneuronech (). Má se za to, že potlačuje aktivitu kortikálních pyramidálních neuronů zvýšením lokálního uvolňování GABA a působením přímo na receptory CCKB exprimované pyramidovými neurony (; ; ; ). CCKergická neurotransmise by tedy mohla přispět ke snížení výše uvedené PrL aktivity.

CCK je anxiogenní látka se systémovým podáváním agonistů CCKB vyvolávající záchvaty paniky u zdravých dobrovolníků. Pacienti s predispozicí k záchvatům paniky se po expozici CCK stanou přecitlivělí (; ). Několik studií potvrdilo anxiogenní účinky CCK na hlodavce (). Uvolňování CCK v mPFC během stresového stresu u potkanů ​​je spojeno s chováním souvisejícím s úzkostí (); V této studii nebyly rozlišeny subregiony PrL a IL. V nedávné době systémová, chronická blokáda CCKB s CI-988em vyvolala antidepresivní účinky u potkanů ​​(). CI-988 normalizoval dobu imobility v testu nuceného plavání. Zabránilo také hyperaktivitě osy hypothalamicko-hypofýzy a nadledvinek, snížilo objem hippocampu a proliferaci buněk a snížilo preferenci sacharózy obvykle vyvolanou sociální porážkou. Zde potvrzujeme tyto výsledky tím, že vykazujeme antidepresivní účinek CI-988 infundovaného do PrL vnímavých myší, i když jediná systémová injekce tento účinek nenapodobovala.

Kromě akutních účinků CCK v PrL jsme identifikovali snížené hladiny CCKB mRNA u odolných myší, což by mohla být molekulární adaptace, která je základem odolnosti. Opravdu, změny v CCKergickém tónu, konkrétně hladiny CCKB, představují důležitý mechanismus pro vyjádření úzkosti. Transgenní myši nadměrně exprimující CCKB v předním mozku vykazují zvýšené reakce na úzkost a strach (). Naše zjištění změněných hladin CCKB mezi odolnými a vnímavými myšmi by mohlo přispět k fenotypovým rozdílům v úzkosti a depresivním chování. Zde demonstrujeme PrL jako kritický anatomický substrát pro anxiogenní a prodepresivní účinky CCK v kontextu sociálního stresu. Přesto je do behaviorálních akcí CCK zapojeno několik dalších oblastí mozku, včetně BLA, hipokampu, NAc a PAG (; ; ; ; ). Také jsme zjistili zvýšení hladin proteinů CCKB, ale ne hladin mRNA, v mPFC vnímavých zvířat. Tato zjištění zdůrazňují, že ačkoli hladiny mRNA často korelují s hladinami proteinů, není tomu tak nutně ().

Naše optogenetické experimenty ukazují, že zvyšující se aktivita glutamatergických projekcí z PrL na NAc nebo na BLA antagonizuje účinky CCK v PrL. Jsou nutné další studie, aby se zjistilo, že tento účinek optogenetické stimulace je zprostředkován stejnými PrL neurony, které jsou kontrolovány CCK. Je zajímavé, že naše data odhalují odlišné role těchto dvou mikroobvodů při zprostředkování různých domén abnormalit chování. Projekce cortico-NAc řídí anhedonii a odměnu; skutečnost, že reguluje sociální vyhýbání se, potvrzuje, že tento příznak je spíše odrazem snížené motivace a odměny za sociální chování a nikoli zvýšené sociální úzkosti. Tento závěr je v souladu s neschopností benzodiazepinů opravit tuto abnormalitu () a nedávnou demonstrací, že stimulace NAc mPFC zvyšuje odměnu a motivaci za zneužívání drog (). Naproti tomu projekce kortiko-BLA kontroluje příznaky související s úzkostí, což odpovídá velké literatuře u hlodavců a lidí (viz výše).

Závěrem lze říci, Výsledky předkládané studie identifikují vzor limbických mozkových oblastí zapojených do vnímavých a odolných zvířat a prokazují změny v PrL, které podporují citlivost. Tyto změny zahrnují indukci AFosB a jeho indukci receptoru CCKB. Naproti tomu blokáda účinků CCK v PrL podporuje antidepresivní a anxiolytické účinky. Rovněž stanovujeme subkortikální cíle těchto kortikálních pyramidálních neuronů, které tyto akce zprostředkovávají, s kortiko-NAc obvodem nezbytným pro chování související s depresí a kortiko-BLA obvodem nezbytným pro chování související s úzkostí. Zatímco klinické studie antagonistů CCKB u pacientů s depresí u 1990 nepřinesly slibné výsledky, současná zjištění naznačují hodnotu revize terapeutického potenciálu těchto látek v podskupinách pacientů vystavených vysoké úrovni stresu.

Poznámky pod čarou

 

Tuto práci podpořili National Institute of Mental Health (EJN) a Brain & Behavior Research Foundation National Alliance for Research on Schizophrenia and Depression Young Investigator Award to VV

 

 

Autoři neuvádějí žádné konkurenční finanční zájmy.

 

Reference

  • Akirav I, Maroun M. Role středního prefrontálního obvodu mozkové kůry a amygdaly ve stresových účincích na vymírání strachu. Neural Plast. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Barbas H, Blatt GJ. Topograficky specifické projekce hippocampu se zaměřují na funkčně odlišné prefrontální oblasti u opice makak. Hippocampus. 1995; 5: 511 – 533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Cross Ref]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Zvýšené kortikální extracelulární hladiny materiálu podobného cholecystokininu v modelu předvídání sociální porážky u potkanů. J Neurosci. 2001; 21: 262 – 269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Opakované behaviorální a biologické změny vyvolané sociální porážkou u potkanů: postižení cholecystokininu. Mol Psychiatry. 2008; 13: 1079 – 1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Cross Ref]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Asymetrie v behaviorálních reakcích na cholecystokinin mikroinjekovaný do jádra accumbens potkanů ​​a amygdaly. Neurofarmakologie. 1994; 33: 995 – 1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, působící na receptory GABAA i GABAB, inhibuje uvolňování materiálu podobného cholecystokininu z míchy potkana in vitro. Brain Res. 1992; 590: 255 – 262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Podstatná role BDNF v mezolimbické cestě dopaminu v sociálním stresu. Věda. 2006; 311: 864-868. dva: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Indukce 5FosB v periaqueductal grey stresem podporuje aktivní zvládání reakcí. Neuron. 2007; 55: 289 – 300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Nucleus accumbens hluboká mozková stimulace snižuje hodnocení deprese a úzkosti v depresi rezistentní na léčbu. Biol Psychiatry. 2010; 67: 110 – 116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Zvýšená citlivost na tetrapeptid cholecystokininu u panické poruchy: klinické a behaviorální nálezy. Arch Gen Psychiatry. 1991; 48: 603 – 610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Poškozuje mozek stres? Biol Psychiatry. 1999; 45: 797 – 805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Traumatický stres: účinky na mozek. Dialogy Clin Neurosci. 2006; 8: 445 – 461. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Bremner JD. Neuroimaging u posttraumatických stresových poruch a dalších stresových poruch. Neuroimaging Clin North Am. 2007; 17: 523 – 538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Synaptický a behaviorální profil více glutamatergických vstupů do nucleus accumbens. Neuron. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Prelimbické a infralimbické neurony signalizují odlišné aspekty chutného instrumentálního chování. PLoS One. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / journal.pone.0057575. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Zvýšený cholecystokinergní tonus představuje důležitý molekulární / neuronální mechanismus pro expresi úzkosti u myši. Proc Natl Acad Sci USA A. 2006; 103: 3881 – 3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Prelimbická signalizace BDNF a TrkB reguluje konsolidaci chutného a averzivního emočního učení. Transl Psychiatry. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kináza reguluje sociální porážku vyvolanou synaptickou a behaviorální plasticitu. J Neurosci. 2011; 31: 314 – 321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Krátký stres ze společenské porážky: dlouhodobé účinky na užívání kokainu během exprese binge a zif268 mRNA v amygdale a prefrontální kůře. Neuropsychofarmakologie. 2005; 30: 310 – 321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Antidepresivní účinek optogenetické stimulace mediální prefrontální kůry. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. dva: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, CA Tamminga, Nestler EJ. Role represivní methylace histonu v kokainem vyvolané zranitelnosti vůči stresu. Neuron. 2011; 71: 656 – 670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • de Montigny C. Cholecystokinin tetrapeptid indukuje záchvaty podobné panice u zdravých dobrovolníků: předběžná zjištění. Arch Gen Psychiatry. 1989; 46: 511 – 517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Cross Ref]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. Opačné účinky cholecystokinin oktapeptidu (CCK-8) a tetrapeptidu (CCK-4) po injekci do kaudální části jádra accumbens nebo do její rostrální části a mozkových komor. Neurochem Int. 1987; 10: 473 – 479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Role mediálního prefrontálního kortexu (cingulate gyrus) v regulaci hypothalamicko-hypofýzně-nadledvinek na stres. J Neurosci. 1993; 13: 3839 – 3847. [PubMed]
  • Drevety WC. Neuroimaging a neuropatologické studie deprese: důsledky pro kognitivně-emoční rysy poruch nálady. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240 – 249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Změněné zpracování emočních interferencí v mozkových obvodech s afektivní a kognitivní kontrolou při velké depresi. Biol Psychiatry. 2008; 63: 377 – 384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Antidepresivní léčba normalizuje hypoaktivitu v dorsolaterální prefrontální kůře během zpracování emoční interference při velké depresi. J ovlivňuje disord. 2009; 112: 206 – 211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Psychobiologie a molekulární genetika odolnosti. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446 – 457. doi: 10.1038 / nrn2649. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. Kortikální zdroje CRF, NKB a CCK a jejich účinky na pyramidální buňky v neokortexu. Cereb Cortex. 2006; 16: 1440 – 1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Neuropsychologická bezpečnost jádra připouští hlubokou mozkovou stimulaci pro velkou depresi: účinky 12-měsíční stimulace. World J Biol Psychiatry. 2011; 12: 516 – 527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB diferenciálně moduluje funkci přímých a nepřímých cest jádra accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110: 1923-1928. dva: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Korelace mezi hojností proteinů a mRNA v kvasnicích. Mol Cell Biol. 1999; 19: 1720 – 1730. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Mediální prefrontální kůra krysy: důkaz dorso ventrálního rozlišení na základě funkčních a anatomických charakteristik. Neurosci Biobehav Rev. 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Cross Ref]
  • Holson RR. Mesiální prefrontální kortikální léze a plachost u potkanů: I. Reaktivita na averzní podněty. Physiol Behav. 1986; 37: 221 – 230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Neurální koreláty anhedonie u velké depresivní poruchy. Biol Psychiatry. 2005; 58: 843 – 853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Deprese rezistentní na léčbu: pokroky v somatických terapiích. Ann Clin Psychiatry. 2007; 19: 279 – 287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Změny v regionálním metabolismu glukózy v mozku měřené pozitronovou emisní tomografií po paroxetinové léčbě velké deprese. Am J Psychiatry. 2001; 158: 899 – 905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS a kol. Molekulární adaptace založená na náchylnosti a odolnosti vůči sociální porážce v oblastech odměňování mozku. Buňka. 2007; 131: 391-404. dva: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Nestler EJ. Molekulární neurobiologie deprese. Příroda. 2008; 455: 894 – 902. doi: 10.1038 / nature07455. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Obohacení životního prostředí přináší odolnost vůči stresu k sociální porážce neuroalatomickou cestou závislou na infračerveném kortexu. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. dva: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Brain, sítě, deprese a další. Eur Neuropsychopharmacol. 2013; 23: 55 – 62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Cross Ref]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D, Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Hluboká stimulace mozku pro depresi rezistentní k léčbě. Neuron. 2005; 45: 651 – 660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bloky I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Podstatná role histon-methyltransferázy G9a v plasticitě indukované kokainem. Věda. 2010; 327: 213-216. dva: 10.1126 / science.1179438. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulace genové exprese a kokainové odměny pomocí CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  • Milad MR, Quirk GJ. Neurony v mediální prefrontální paměti kůry signalizují strach vyhynutí. Příroda. 2002; 420: 70 – 74. doi: 10.1038 / nature01138. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J., Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Bilaterální epidurální prefrontální kortikální stimulace pro depresi rezistentní na léčbu. Biol Psychiatry. 2010; 67: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Dlouhotrvající změna mezocorticolimbických struktur po opakovaném společenském porážkovém stresu u potkanů: časový průběh mu-opioidního receptoru mRNA a FosB / DeltaFosB imunoreaktivita. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 – 2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Roques BP. Receptor CCK-B: chemie, molekulární biologie, biochemie a farmakologie. Prog Neurobiol. 1999; 58: 349 – 379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Mezinárodní farmaceutická unie: XXI. Struktura, distribuce a funkce receptorů cholecystokininu. Pharmacol Rev. 1999; 51: 745 – 781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 zvyšuje K (+) - evokoval [3H] kyselina gama-aminomáselná se uvolňuje v plátcích z různých oblastí mozku. Eur J Pharmacol. 1993; 250: 423 – 430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukce δFosB v mozkových strukturách souvisejících s odměnou po chronickém stresu. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. dva: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Rozlišující vzory indukce DeltaFosB v mozku drogami zneužívání. Synapse. 2008; 62: 358-369. dva: 10.1002 / syn.20500. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Opakovaný stres vyvolává ztrátu dendritické páteře v mediální prefrontální kůře krysy. Cereb Cortex. 2006; 16: 313 – 320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Cross Ref]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB zprostředkovává epigenetickou desenzibilizaci genu c-fos po chronické expozici amfetaminu. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Cholecystokinin a GABA interakce v dorzálním hippocampu potkanů ​​při zvýšeném plus-bludišti testu úzkosti. Physiol Behav. 2005; 84: 775 – 782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Cross Ref]
  • Richard JM, Berridge KC. Prefrontální kůra moduluje touhu a strach generovaný narušením glutamátu v jádru. Biol Psychiatry. 2013; 73: 360 – 370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Podtypy receptorů cholecystokininu: role v modulaci chování souvisejících se úzkostí a odměnou ve zvířecích modelech. J Psychiatry Neurosci. 2003; 28: 171 – 181. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Hluboká stimulace mozku k odměňování obvodů zmírňuje anedonii v refrakterní velké depresi. Neuropsychofarmakologie. 2008; 33: 368 – 377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Disociovatelné role prelimbických a infralimbických kortikalů, ventrálního hippocampu a basolaterálního amygdaly ve výrazu a zániku podmíněného strachu. Neuropsychofarmakologie. 2011; 36: 529 – 538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Silva MG, Boyle MA, Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Behaviorální účinky velkých a malých lézí krysí střední čelní kůry. Exp Brain Res. 1986; 65: 176 – 181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Různé populace GABAergických neuronů ve vizuální kůře a hippocampu kočky obsahují imunoreaktivní materiál somatostatin nebo cholecystokinin. J Neurosci. 1984; 4: 2590 – 2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Antidepresiva přijímají nové neurony pro zlepšení regulace stresové reakce. Mol Psychiatry. 2011; 16: 1177 – 1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. Zdroj řídících linií Cre pro genetické cílení GABAergických neuronů v mozkové kůře. Neuron. 2011; 71: 995 – 1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. Aktivace modelu exprese genu závislého na DeltaFOSB v dorsolaterální prefrontální kůře pacientů s velkou depresivní poruchou. J ovlivňuje disord. 2011; 133: 174 – 178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. Trvalá regulace hipokampálního chromatinu v myším modelu deprese a antidepresivního působení. Nat Neurosci. 2006; 9: 519 – 525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala obvody zprostředkovávající reverzibilní a obousměrné řízení úzkosti. Příroda. 2011; 471: 358 – 362. doi: 10.1038 / nature09820. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. DeltaFosB v mozkových odměňovacích obvodech zprostředkovává odolnost vůči stresovým a antidepresivním reakcím. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 – 752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Funkční heterogenita v cingulate cortex: přední exekutivní a zadní hodnotící regiony. Cereb Cortex. 1992; 2: 435 – 443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Léčba a odolnost imipraminu vykazují v depresních modelech podobnou regulaci chromatinu v jádru myší accumbens. J Neurosci. 2009; 29: 7820 – 7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukce DeltaFosB v orbitofrontální kůře zprostředkovává toleranci kognitivní dysfunkci vyvolané kokainem. J Neurosci. 2007; 27: 10497 – 10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Uvolňování cholecystokininu z mozkové kůry potkana in vivo: role systémů GABA a glutamátového receptoru. Brain Res. 1987; 406: 207 – 214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr Systémové a intradorsální periaquedukční šedé injekce cholecystokininem sulfátovaného oktapeptidu (CCK-8) vyvolávají paniku podobnou reakci u potkanů ​​podrobených zvýšené T-bludišti. Peptidy. 2004; 25: 1935 – 1941. doi: 10.1016 / j.peptides.2004.06.016. [PubMed] [Cross Ref]