Příspěvky motivace Pavlovy motivace ke krmení s potenciálním přístupem (2018)

. 2018; 8: 2766.

Publikováno online 2018 Feb 9. dva:  10.1038/s41598-018-21046-0

PMCID: PMC5807356

Abstraktní

Signalizace dostupnosti chutného jídla získává schopnost potencionalizovat vyhledávání a konzumaci potravin. Současná studie použila kombinaci behaviorálních, farmakologických a analytických technik pro zjištění role Pavlovianovy motivační motivace v krmení potencovaném cue. Ukazujeme, že tága spárovaná s roztokem sacharózy (CS +) může přenést svou kontrolu nad krmením, aby stimulovala spotřebu sacharózy v nové nádobě, a že tento účinek závisí na aktivaci dopaminových receptorů D1, o kterých je známo, že modulují další formy stimulované tága chování, ale ne chutnost. Mikrostrukturální analýzy chování při lízání sacharózy odhalilo, že CS + mělo tendenci zvyšovat frekvenci, s jakou se krysy zapojily do aktivních záchvatů lízání, aniž by mělo spolehlivý účinek na dobu trvání těchto lízacích záchvatů, což bylo místo toho spojeno s chutností sacharózy. Dále jsme zjistili, že jednotlivé rozdíly v CS + vyvolané zvýšení frekvence záchvatů byly při testu spojeny s celkovým příjmem sacharózy, což podporuje názor, že tento proces souvisel s smysluplnou dysregulací stravovacího chování. Současná studie proto (1) prokazuje, že Pavlovianův motivační motivační proces závislý na dopaminu může zprostředkovat krmení potencované podnětem a (2) stanoví experimentální a analytický přístup k analýze tohoto aspektu chování.

Úvod

Environmentální podněty, které signalizují dostupnost chutných potravin, mohou vyvolat silné touhy po jídle- a podporovat stravování bez hladu, což je účinek pozorovaný u hlodavců, a lidem-. Tento vliv na chování, o kterém se předpokládá, že hraje důležitou roli při přejídání a obezitě-, lze studovat pomocí cue-potencovaného krmení (CPF). V typické studii CPF se hladová zvířata podrobují Pavlovianovu kondici sestávající z opakovaných párů mezi kondicionovaným stimulem (CS +; např. Zvukový tón) a malým množstvím chutného jídla nebo tekutiny, jako je roztok sacharózy, který konzumují z šálku. umístěné v pevné poloze v experimentální komoře. Dále je jim umožněn neomezený přístup k jejich údržbové žrádze, aby bylo zajištěno, že jsou před testováním plně nařízeny. Zvířata jsou poté vrácena do komory a ponechána volně konzumovat sacharózu z šálku, zatímco CS + je občas předkládán nekontrolovaným způsobem. Za těchto podmínek vykazují zvířata během testovacích relací s CS + výrazné zvýšení spotřeby potravy ve srovnání s relacemi s nepárovým stimulem (CS-).

I když taková zjištění naznačují, že vnější podněty mohou na podporu výživy působit nezávisle na fyziologickém hladu, psychologické procesy, na nichž je tento účinek založen, nejsou pevně stanoveny. Jednou z možností je, že narážky spojené s chutnou konzumací potravy získávají reflexivní nebo obvyklou kontrolu nad krmením (tj. Na základě podnětu-reakce). Pokud je to primární mechanismus zprostředkující CPF, pak by CS + měla stimulovat spotřebu vyvoláním specifického chování při krmení, které bylo zjištěno během Pavlovianova kondicionování. Tento učení reakce pohled je věrohodný, pokud je zdroj potravy fixován během školení a testování, jako ve výše popsaném příkladu. Ačkoli se tento scénář vztahuje na většinu demonstrací CPF, objevily se také zprávy, že narážky spojené s jídlem mohou vyvolat krmení v nových lokalitách-, což naznačuje, že mohou nepřímo řídit krmení. Jedním možným vysvětlením je, že takové narážky potencují krmení stejným Pavlovským motivačním motivačním procesem, který jim umožňuje vyvolat a oživit instrumentální chování při hledání potravy.,, Tento motivační pohled předpovídá, že CS + vyvolává nutkání hledat jídlo, což by také vedlo ke krmení, když bude jídlo snadno dostupné. Alternativně, za předpokladu, že signály pro chutné jídlo mohou zlepšit hedonické vyhodnocení chuťových podnětů-, je možné, že narážky potencují krmení zčásti tím, že učiní jídlo chutnějším. I když je tento hedonický pohled mechanicky odlišný od motivačního pohledu, tyto účty se vzájemně nevylučují a mohou vysvětlovat různé aspekty CPF,.

Jedním ze způsobů, jak rozlišit mezi motivačním a hedonickým účtem CPF, je zjistit, jak narážky spojené s jídlem ovlivňují mikrostrukturu krmení. Když je hlodavcům povoleno volně konzumovat roztok sacharózy nebo jiných chutných tekutin, zapojí se do lízání záchvatů různého trvání, které jsou odděleny obdobími nečinnosti. Zatímco průměrné trvání těchto lízacích záchvatů poskytuje spolehlivé a selektivní měřítko chutnosti tekutin,, věří se, že frekvence těchto záchvatů je řízena motivačními procesy-. Pokud tedy CS + stimuluje krmení zvýšením chutnosti sacharózy, pak by tato narážka měla prodloužit dobu, ale ne nutně frekvenci, lízání záchvatů. Naproti tomu motivační pohled předpovídá, že CS + by mělo vyvolat vyhledávání a konzumaci sacharózy, i když jsou zvířata zaujata jinými činnostmi, což vede k častějším, ale ne nutně delší, záchvatům lízání.

Současná studie zkoumala účinky dodávání CS + na mikrostrukturu lízání sacharózy pomocí dvou protokolů CPF, z nichž jeden byl vždy k dispozici na stejném místě (experiment 1), a ve kterém byl zdroj změněn během školení a testování (experimenty 2 a 3), což nám umožňuje vyhodnotit nepřímý vliv CS +. Náš přístup k posouzení tohoto nezávislého (zobecněného) vlivu cue na krmení nezávislých na reakci byl modelován po úkolu Pavlovian-to-instrumental transfer (PIT), který je široce používán ke studiu motivačního motivačního účinku odměn spárovaných na odměny chování hledající odměnu,,. Také jsme přijali Pavlovianovy kondicionační a testovací parametry, které se běžně používají ve studiích PIT, aby se usnadnilo srovnání s touto literaturou. Vzhledem k tomu, že aktivita dopaminového D1 receptoru je rozhodující pro expresi PIT a dalších měřítek motivovaného chování- ale je relativně nedůležité pro hedonické aspekty chování při krmení,,, jsme také posoudili vliv blokády receptoru D1 na cue-potencované olizování sacharózy (experiment 3) jako další sondu role motivace v tomto účinku. Nakonec jsme analyzovali mikrostrukturu dat o olizování sacharózy z těchto experimentů, abychom otestovali, zda byl CPF selektivně spojen se zvýšením buď frekvence, nebo trvání záchvatů olizování sacharózy, jak by bylo předpovídáno motivačním a hedonickým pohledem na CPF.

výsledky

Cue potencované krmení pomocí tága, které signalizuje zdroj potravy

V našem prvním experimentu jsme použili konvenční návrh CPF shodný s odezvou, ve kterém byly specifické reakce potřebné ke spotřebě sacharózy stejné ve všech fázích školení a testování. Hladové krysy dostaly 10 d Pavlovian kondicionování, aby vytvořily CS + jako narážku na dostupnost sacharosy v šálku s jídlem na jedné straně komory. K poslednímu dni kondicionování byly vstupy do pohárů (± mezi SEM mezi subjekty) významně vyšší během CS + (23.72 ± 2.79 za minutu) versus interval mezi zkouškami [18.27 ± 3.25 za minutu; párové vzorky t-test, t(15) = 3.13, p = 0.007]. Pohárové vstupy během CS− (8.60 ± 1.91 za minutu) se významně nelišily od intervalu mezi pokusy [10.69 ± 2.00 za minutu; spárované vzorky t-test, t(15) = −1.60, p = 0.130].

Potkanům pak byly podány dva testy CPF ve stavu potravy, aby se charakterizovaly účinky CS + na olizování sacharózy. V každém testu měly krysy volný přístup k roztoku 2% nebo 20% sacharózy, což nám umožnilo posoudit vliv chutnosti sacharózy na CPF. Postava 1a ukazuje celkový počet lizů pozorovaných během CS pokusů v závislosti na periodě CS, typu CS a koncentraci sacharózy. Data byla analyzována pomocí zobecněných modelů lineárních smíšených efektů (doplňková tabulka S1). Důležité je, že došlo k významné interakci CS Period × CS Type, t(116) = 12.70, p <0.001. Další analýza (kolaps napříč koncentrací) odhalila významný nárůst u studií s CS +, p <0.001, ale ne CS− studie, p = 0.118, což naznačuje, že CS + byl účinnější než CS− při zvyšování olizování sacharózy ve srovnání s hladinami před CS. Naše analýza také zjistila, že tato selektivita na tágo byla významně ovlivněna koncentrací sacharózy (3cestná interakce, p <0.001). Konkrétně, i když byl CS + vysoce účinný při zvyšování olizování sacharózy za podmínek 2% i 20%, ps <0.001, CS− významně neovlivnila míry lízání v 2% testu, p = 0.309, ale vyvolal mírný, ale významný nárůst v 20% testu, p = 0.039. Ačkoli tedy tágo spojené s jídlem bylo obecně účinnější při kontrole krmení, zdálo se, že nepárové tágo má podobný vliv, když bylo krysám umožněno při testu konzumovat vysoce chutný roztok sacharózy.

Obrázek 1 

Celkové chování při lízání. Výsledky experimentů 1 – 3 (a – c, respektive) posouzení dopadu tága se spárovaným sacharózou (CS +) a nepárového tága (CS-) na lízání sacharózy na (a) stejného potravinového šálku použitého při Pavlovianově kondicionování a ...

Přenos krmení obohaceného tágem na nový zdroj potravin

Protože sacharóza byla během tréninku a testování v experimentu 1 k dispozici u stejného zdroje, není jasné, zda pozorovaný účinek CPF byl závislý na schopnosti CS + na (1). motivovat krysy hledat a konzumovat sacharózu nebo (2) přímo vyvolat konkrétní podmíněný reflexnebo zvyk. Experiment 2 se více soustředil na dřívější hypotézu testováním, zda CS + spojené s dodáním sacharózy do pohárku s jídlem může motivovat lízání sacharózy z hubice na opačné straně komory při testu, srovnatelné s behaviorálními jevy pozorovanými v PIT.

Krysy byly trénovány stejným postupem Pavlovianova kondicionování, jaký byl použit v experimentu 1, což mělo za následek chování předvídavého přibližování specifického pro poslední den Pavlovianova kondicionování. Přístupy s miskou s jídlem (± mezi SEM mezi subjekty) byly vyšší během CS + (18.71 ± 1.73 za minutu) vzhledem k intervalu mezi zkouškami [12.49 ± 0.98 za minutu; párové vzorky t-test, t(15) = 3.02, p = 0.009]. Nebyly zjištěny žádné významné rozdíly mezi CS− (9.41 ± 0.98 za minutu) a intervalem mezi pokusy [8.44 ± 0.88 za minutu; spárované vzorky t-test, t(15) = 0.98, p = 0.341].

Vzhledem k tomu, že účinky CS + na olizování sacharózy v experimentu 1 byly o něco patrnější, když byly krysy testovány s 2% sacharózou, naše počáteční testování se sacharózou bylo k dispozici u nového zdroje (hubice, s šálkem jídla zakrytým neprůhledným panelem - viz viz Metody) zaměřené na tento stav. V tomto testu se však lízání sacharózy významně nelišilo mezi CS + (lízání 328.1 ± 84.8) a obdobími před CS + [lízání 245.6 ± 45.9; párové vzorky t-test, t(15) = 1.07, p = 0.300]. K dalšímu odrazení od konkurenční reakce a posílení pití sacharózy z hubičky byly potkanům podán 5 dalších tréninkových tréninků, aby si z hubice olizovaly 20% sacharózu za nedostatku potravy v nepřítomnosti CS. Krysy byly poté plně nasyceny na domácí krmivo a byly jim podány dva testy CPF se sacharózou dostupnou na kovovém výtoku. Během testů měli krysy nepřetržitý přístup k 2% nebo 20% roztoku sacharózy v samostatných testech (u subjektů, vyvažováno v pořadí).

Obrázek 1b ukazuje, že během tohoto kola testování byla CS + účinná při propagaci pití sacharózy v novém místě, přestože toto narážení nebylo nikdy přímo spojeno s tímto chováním. Analýza modelu smíšených efektů (doplňková tabulka S2) zjistili významnou interakci typu CS × doba CS, t(120) = 15.16, p <0.001, což naznačuje, že CS + byl účinnější při zvyšování olizování sacharózy nad základní hladinu (CS vs. období před CS, p <0.001) než CS− (CS vs. období před CS, p = 0.097), jako v experimentu 1. Koncentrace sacharózy významně neovlivnila narážku tohoto účinku (3-cestná interakce, p = 0.319). Důležité je, že zatímco se zdálo, že lízání bylo během období před CSS zvýšené oproti obdobím před CS +, párové vzorky t- testy ukázaly, že tento rozdíl nebyl statisticky významný ve stavu 2%, t(15) = 1.66, p = 0.118, nebo ve 20% stavu, t(15) = 1.56, p = 0.139. To lze očekávat vzhledem ke struktuře pseudonáhodného pokusu používaného během tréninku a testování, která zabraňuje systematickým (inter-trial) efektům přenosu a vylučuje předvídání budoucího typu (nebo načasování) pokusu. Rovněž stojí za zmínku, že stejná zvířata vykazovala podobné specifické zvýšení CS + v lízání v experimentu 3, když jejich míra lízání pre-CS− a pre-CS + byla srovnatelnější (viz obr. 1c, vozidlo).

Závislost na dopaminových receptorech typu D1

Výsledky experimentu 2 naznačují, že CS + získalo schopnost potencovat spotřebu sacharosy tím, že spustilo stravovací chování, které s touto narážkou nebylo nikdy přímo spojeno, což je v souladu s motivačním účinkem podobným PIT. Vzhledem k důležitosti dopaminových receptorů typu D1 pro Pavlovianovu motivaci-Experiment 3 zkoumal, zda by blokační aktivita na těchto receptorech narušila expresi CPF. Stejným potkanům použitým v experimentu 2 byl po předběžné léčbě SCH-20 (23390 mg / kg), selektivním antagonistou D0.04 nebo vehikulem podán konečný pár testů CPF (1% sacharóza). Výsledky testu jsou uvedeny na Obr. 1c (také doplňková tabulka S3).

Analýza odhalila hlavní účinek léčby drogami, t(120) = -2.15, p = 0.034, přičemž SCH-23390 bylo olizování sacharózy obecně potlačeno. Důležité je, že jsme našli významnou interakci Lék × CS období × Typ CS, t(120) = -20.91, p <0.001, což naznačuje, že SCH-23390 specificky narušil expresi CPF. Další analýza skutečně odhalila, že zatímco CS + významně zvýšil lízání sacharózy nad úrovněmi před CS + v testu s vehikulem, p <0.001, v testu SCH-23390 nebyl žádný účinek CS +, p = 0.982. Podobně jako zobecnění narážky pozorované v experimentu 1, CS- vyvolalo okrajově významné zvýšení lízání sacharózy v obou lékových podmínkách, ps ≤ 0.049. Antagonismus dopaminového receptoru typu D1 prostřednictvím podávání SCH-23390 tak významně narušil CS + vyvolané krmení, v souladu s motivačním motivačním účtem CPF.

Mikrostrukturální analýza účinků sacharózových párů a koncentrace sacharózy na krmení

Výsledky experimentů 2 a 3 naznačují, že zde použitý nový protokol podobný PIT podporuje motivační motivační formu CPF, protože tága byla schopna motivovat chování při krmení na místě odděleném od zdroje potravy signalizovaného tága. Pro další testování tohoto účtu jsme zkoumali, zda excitační účinky CS + na pití sacharózy souvisejí se specifickou změnou v mikrostrukturální organizaci lízání. Jak je popsáno výše, zatímco doba trvání lízání se liší podle chuti tekutiny,, frekvence, se kterou se potkani účastní nových záchvatů lízání, je považována za odraz motivačního procesu-. Změnili jsme koncentraci sacharózy, abychom manipulovali s její chutností, jako v předchozích zprávách,. Ačkoli se vysoké a nízké koncentrace sacharózy také liší v kalorickém obsahu, rozsáhlý výzkum ukázal, že míra trvání záchvatu je citlivým a selektivním měřítkem vlivu orosenzorické odměny a je oddělitelná od následného zpracování kalorií.-. CS +, která indukuje motivační motivaci, by tedy měla zvýšit frekvenci záchvatů, zatímco CS +, které zvyšují příjem tím, že se sacharóza stane chutnější, by měla podporovat delší trvání záchvatů.

Pro zajištění dostatečné statistické síly, sbalili jsme data ve všech testovacích podmínkách bez léků popsaných výše (testy 2% a 20% pro experiment 1 a experiment 2 a stav vozidla pro experiment 3). Kombinovaná data jsou znázorněna na Obr. 2, vynesené samostatně jako celkové lízání (a), frekvence záchvatu (b) a doba trvání záchvatu (c). Postava 2d ukazuje rastrové grafy chování dvou reprezentativních lízání potkanů ​​během období před CS + a CS +, kdy byly při testu k dispozici 2% a 20% sacharóza. V souladu s motivačním výkladem CPF měly tyto krysy tendenci se více zapojovat do lízání sacharózy během CS + než v období před CS +. Oproti tomu doba trvání záchvatu byla obvykle delší, když krysy konzumovaly chutnější roztok 20% sacharózy než při konzumaci 2% sacharózy, což byl účinek, který byl patrný během období před CS + a CS +. Trvání záchvatu tedy nebylo silně ovlivněno tágem spárovaným se sacharózou. Ve skutečnosti, vzory viděné na Obr. 2d byly potvrzeny zobecněnými modely lineárních smíšených efektů kombinovaného souboru dat (viz obr. 2a – c a doplňkovou tabulku S4). Analýzy sekundárních smíšených efektů odhalily, že kategorický faktor „experimentu“ (1, 2, 3) významně nezmírnil interakce CS období × CS Typové interakce na frekvenci nebo trvání záchvatu, ps ≥ 0.293, což nám umožňuje kombinovat tato data pro následné analýzy. Je zajímavé, že schopnost CS + motivovat chování k lízání se projevila také ve výrazně rychlejší latenci k zahájení lízání- po nástupu CS + vs. CS- [generalizovaný lineární model smíšených efektů (distribuce odezvy = gama, linková funkce = log); t(306) = -2.71, p = 0.007], ačkoli hrubý rozdíl v latenci byl relativně mírný (CS +: 1.16 sekundy ± 0.47; CS−: 2.79 sekundy ± 0.79).

Obrázek 2 

Mikrostrukturální složky lízání. Sbalené údaje ze všech nrogových podmínek z experimentů 1 – 3, které hodnotí vliv tága spárované se sacharózou (CS +) a nepárového tága (CS-) na spotřebu sacharózy. Tato data představují ...

Zprostředkovatelská analýza efektu CS období

Na základě těchto zjištění jsme provedli statistickou mediační analýzu na kombinovaných datech (Obr. 2), aby se zjistilo, zda CS + vyvolané pití sacharózy bylo přednostně spojeno se změnami frekvence nebo délky záchvatu. Postava 3a ukazuje strukturu modelu vícenásobného zprostředkování pro tuto analýzu (CS Period). Celkový účinek byl významný (celkem; c) období CS o lízání, t(156) = 4.11, p <0.001, c = 5.22 [2.71, 7.73], v tom, že během CS + bylo více lízání než v období před CS +. Poté jsme testovali, zda CS + podobně ovlivňoval lízací mikrostrukturu, a zjistili jsme významné zvýšení frekvence záchvatu vyvolané narážkou (M2), t(156) = 3.27, p = 0.001, a2 = 0.70 [0.28; 1.12], ale ne doba trvání zápasu (M1), t(141) = 1.89, p = 0.061, a1 = 0.34 [-0.02; 0.69]. Na úrovni skupiny se tedy účinek CS + na frekvenci záchvatu podobal účinku na lízání obecněji, ale nikoli na dobu trvání záchvatu.

Obrázek 3 

Zprostředkování CPF mikrostrukturálními charakteristikami lízání. (a) CS Period Model, který popisuje účinek CS period na celkové lízání s mediátory doby trvání a frekvence záchvatu. (b) Koncentrační model popisující účinek sacharózy ...

Pokud byl účinek CS + na olizování zprostředkován jeho účinkem na frekvenci záchvatů, měla by tato opatření korelovat (1) a (2) by účinek CS + na frekvenci záchvatů měl zohledňovat účinek CS + na celkovou míru lízání. Posouzení první predikce ukázalo, že bez ohledu na období CS, frekvence i doba trvání záchvatu byly významně korelovány s celkovými lizemi, ps <0.001, což není překvapivé vzhledem k tomu, že tato mikrostrukturální opatření nesou vnitřní vztah s celkovým olizováním. Naše hodnocení druhé predikce však bylo více odhalující. Zkonstruovali jsme model vícenásobné mediace, abychom prozkoumali, zda tato mikrostrukturální opatření vysvětlují rozptyl související s CS + v celkové míře lízání tím, že zahrnuje frekvenci záchvatu a dobu trvání záchvatu jako fixní efekty spolu s obdobím CS. Jinými slovy, zeptali jsme se, zda řízení rozptylu v těchto opatřeních lízání oslabilo efekt CS + ve srovnání s jeho silou v jednodušším (redukovaném) modelu popsaném výše. V souladu s zprostředkováním jsme zjistili, že toto přímé vliv období CS na olizuje (c') nebyl významný, t(139) = 0.90, p = 0.370, c'= 0.41 [−0.49, 1.30] při řízení frekvence a trvání záchvatu. Poté jsme odhadli vliv CS + na lízání prostřednictvím každého z těchto potenciálních mediátorů a zjistili jsme, že došlo k významnému nepřímému účinku frekvence záchvatů na lízání, a2b2 = 2.90 [1.18; 4.76], ale ne trvání zápasu, a1b1 = 1.71 [- 0.09; 3.35]. Tato data tedy naznačují, že zvýšení lízání vyvolané CS + je primárně způsobeno zvýšením frekvence záchvatu na rozdíl od prodloužení trvání záchvatu, což je v souladu spíše s motivačním než hedonickým vysvětlením CPF.

Zprostředkovatelská analýza účinku koncentrace sacharózy

Provedli jsme druhou mediační analýzu kombinovaných dat (Obr. 2), aby se potvrdilo, že chutnost sacharózy (koncentrace) souvisí se selektivním prodloužením trvání záchvatu (Obr. 3b, Koncentrace). Zjednodušený model (žádné pevné účinky na frekvenci nebo trvání záchvatu) zjistil, že celkový účinek koncentrace na celkové olizování nebyl významný, t(156) = 0.42, p = 0.678, c = 0.57 [−2.13, 3.27], což naznačuje, že celkové hladiny lízání sacharózy při testu silně nezávisí na koncentraci sacharózy. To lze očekávat, protože účinek chutnosti sacharózy na lízání je nejzřetelnější během počátečních 2–3 minut konzumace, ještě před prvním obdobím před CS v našich testovacích relacích. Koncentrace sacharózy však měla významný vliv na trvání záchvatu (M1), t(141) = 5.20, p <0.001, a1 = 0.88 [0.54; 1.21], přičemž 20% sacharóza podporuje delší záchvaty pití než 2% sacharóza. Je zajímavé, že koncentrace sacharózy měla významný potlačující účinek na frekvenci záchvatů (M2), t(156) = -3.84, p <0.001, a2 = −0.83 [−1.26, −0.40], tím, že potkani měli tendenci se zapojit do méně záchvatů, když pili chutnější řešení. Zvýšení doby trvání záchvatu související s koncentrací bylo tedy kompenzováno snížením frekvence záchvatu. V souladu s tím náš úplný model zprostředkování, který zahrnoval fixní efekty pro trvání a frekvenci záchvatu, neukázal žádný přímý účinek koncentrace na lízání, t(139) = 0.45, p = 0.650, c'= 0.23 [−0.76, 1.22]. Byly však významné nepřímé, ale opačné účinky frekvence záchvatů, a2b2 = −3.49 [−5.50, −1.58] a trvání zápasu, a1b1 = 4.46 [2.96; 5.95], na celkové chování při lízání.

Jednotlivé rozdíly ve vlivu periody CS a koncentrace na mikrostrukturu lízání

Mediační modely odhalily, že frekvence a trvání záchvatu hrají odlišné role při zprostředkování účinků koncentrace CS + a sacharózy na lízání na úrovni skupiny, ale neřeší, jak jsou tyto účinky vyjádřeny u jednotlivých potkanů, což může být důležité pro porozumění jednotlivcům zranitelnosti vůči přejídání. Vzhledem k výsledkům mediační analýzy jsme předpověděli, že jednotlivé krysy budou vykazovat čisté zvýšení frekvence záchvatů během CS + periody ve srovnání s výchozími hodnotami, ale nevykazují žádnou konzistentní nebo spolehlivou změnu trvání záchvatů. Dále se předpovídalo, že jednotlivé krysy vykazují delší, ale méně časté záchvaty lízání, když konzumují 20% sacharózu, ve srovnání s testem 2%. Obr. 3c ad ukazují individuální rozdíly v účincích období CS (CS + - pre-CS +) a koncentrace sacharózy (20% - 2%) na frekvenci záchvatu a dobu trvání (analýza kombinovaného souboru dat na obr. 2). CS + zvýšila frekvenci záchvatů u 67% potkanů ​​(Obr. 3c), přičemž zhruba stejný počet těchto potkanů ​​také vykazuje prodloužení trvání záchvatu (34%) nebo ne (33%). Chí-kvadrát test dobré kondice za předpokladu rovnoměrně distribuovaných datových bodů ve čtyřech kvadrantech odhalil významnou distribuční asymetrii, χ2(3) = 10.91, p = 0.012. Střední hodnota ΔFrekvence distribuce byla významně větší než 0, t(66) = 4.80, p <0.001, zatímco průměr ΔTrvání distribuce se významně nelišila od 0, t(66) = 1.80, p = 0.076. S ohledem na účinek koncentrace (obr. 3d), většina potkanů ​​(58%) vykazovala delší dobu a méně časté záchvaty s 20% proti 2% sacharózy a chi-kvadrát test dobré kondice potvrdil, že data nebyla rovnoměrně rozdělena do kvadrantů, χ2(3) = 31.85, p <0.001. Ve skutečnosti jsme zjistili, že průměr ΔFrekvence distribuce byla významně menší než 0, t(51) = -4.22, p <0.001, zatímco průměr ΔTrvání distribuce byla významně větší než 0, t(51) = 4.18, p <0.001.

Mikrostrukturní prediktory spotřeby sacharózy

Data na obr. 3c naznačují, že existuje značná variabilita účinku CS + na frekvenci záchvatů a že některé krysy byly na tento motivační vliv zvláště citlivé. Ačkoli je možné, že tyto krysy byly schopné řídit svůj celkový příjem sacharózy tím, že pily méně v nepřítomnosti CS +, další analýza kombinovaného souboru údajů (Obr. 2) potvrdili, že tato zvýšená frekvence záchvatů vyvolaná CS + byla spojena s přejídáním. Konkrétně jsme zjistili, že krysy, které vykazovaly pozitivní AFrekvence skóre během CS + pokusů (podskupiny Freq ↑, Dur ↓ a Freq ↑, Dur ↑ na Obr. 3C) konzumovali podstatně více sacharózy než krysy, které tak neučinily (podskupiny Freq ↓, Dur ↓ a Freq ↓, Dur ↑), t(63) = 2.27, p = 0.026 (obr. 4a). Tento vztah byl udržován, když ΔFrekvence byl považován za spojitou proměnnou, t(63) = 2.19, p = 0.032 (obr. 4b) a nezávisí na koncentraci sacharózy, koncentraci × ΔFrekvence, t(63) = 0.64, p = 0.528.

Obrázek 4 

Objem roztoku sacharózy (ml) spotřebovaný jako funkce CS + vyvolal změny frekvence a trvání záchvatu. (a) Tyto údaje představují spotřebu sacharosy jako funkci kategorické skupiny, stanovené CS + vyvolané zvýšení (↑) nebo snížení (↓) ...

Diskuse

Zjistili jsme, že dostupnost signalizační sacharózy je schopna potencovat příjem sacharózy u potkanů, bez ohledu na to, zda tato signalizace také signalizovala specifické akce potřebné k získání sacharózy (experiment 1) nebo ne (experimenty 2 a 3). Toto zjištění je obzvláště zajímavé, protože je nepravděpodobné, že bude záviset na provádění již existujících podmíněných reakcí na krmení (nebo návyků stimulace a odpovědi), a namísto toho naznačuje, že takové narážky získávají afektivní a / nebo motivační vlastnosti, které jim umožňují pružně přenášet jejich kontrolu nad krmením. Zdá se, že tato tendence environmentálních podnětů podporovat spotřebu potravin, i když nejsou k dispozici zavedené krmné postupy, poskytuje užitečný a selektivní zvířecí model Pavlovianova procesu, který podporuje chuť na jídlo vyvolanou cue a přejídání u lidí.-. I když existují dřívější zprávy, že podněty spojené s jídlem mohou podporovat krmení způsobem nezávislým na reakci-, většina experimentů CPF udržuje zdroj potravy fixovaný ve všech fázích školení a testování, a proto poskytuje pouze omezené informace o povaze psychologických procesů, na nichž je tento účinek založen. Současná studie poskytuje demonstraci zevšeobecněného excitačního vlivu potravinářských párů na chování při krmení pomocí postupu modelovaného po úkolu PIT, který se široce používá ke studiu obecného motivačního vlivu potravinářských párů na chování při hledání potravy. Například, stejně jako v PIT, lze současný úkol použít k posouzení tendence pro cue získat motivační vlastnosti, které zobecňují na nové místo. Půjčili jsme si také parametry školení a testování (např. Trvání tága, intervaly mezi zkouškami a harmonogram posilování), které se běžně používají pro PIT, což usnadňuje srovnání napříč studiemi. Tento přístup proto může poskytnout větší experimentální kontrolu pro budoucí zkoumání potenciálních rozdílů v psychologických a / nebo biologických procesech, které jsou základem Pavlovovy kontroly nad instrumentálním vs. konzumním chováním.

Současná studie zjistila, že aktivace receptorů dopaminu D1 je kritická pro expresi této formy CPF nezávislé na odpovědi, což pomáhá podporovat motivační interpretační interpretaci vzhledem k významu signalizace dopaminu obecně a aktivaci receptoru D1 konkrétně při expresi Pavlovianova na instrumentální převod,-,,. Daný důkaz, že dopamin je relativně nedůležité pro zpracování hedonických vlastností potravinových podnětů,,se zdá nepravděpodobné, že by antagonista D1 měl svůj účinek tím, že narušil schopnost CS + měnit chuťovou schopnost sacharózy při testu. Tato motivační interpretace je podporována také naší analýzou mikrostrukturálních lízání, která zjistila, že narážky se zvýšily krmením primárně vyvoláním více záchvatů lízání, než prodloužením doby trvání těchto záchvatů. Místo toho se doba trvání zápasu lišila podle chutnosti sacharózy, jak bylo dobře prokázáno,,,. Je zajímavé, že naše statistická mediační analýza odhalila, že ačkoli krysy zapojené do delších záchvatů při olizování 20% vs. 2% sacharózy, vykazovaly také kompenzační pokles frekvence záchvatů. Zdá se tedy, že tato manipulace chutnosti ovlivňuje způsob, jakým krysy určovaly příjem sacharózy, aniž by to ovlivnilo jejich celkovou úroveň krmení. Na rozdíl od toho nebyl žádný takový kompenzační účinek patrný během pokusů s CS +, což by podle všeho odpovídalo čistému zvýšení lizovacího chování pozorovaného při pokusech s tímto narážkou. Kromě toho potkani vykazující zvýšení frekvence záchvatů během CS + pokusů také vykazovali zvýšené hladiny celkového příjmu sacharózy. Taková zjištění naznačují, že signály spárované s jídlem (1) mohou narušit chování při krmení a (2) jsou při řízení přejídání účinnější než manipulace s chutností sacharózy, alespoň za podmínek zde testovaných.

Současné výsledky také objasnily roli dopaminu v regulaci chování při krmení v nepřítomnosti explicitních podnětů spojených s jídlem. Předchozí studie ukázaly, že systémové podávání antagonisty dopaminu D1 SCH23390 potlačuje uncued spotřeba sacharózy snížením frekvence záchvatu bez změny délky trvání záchvatu,, který je podobný vzoru lízání vykazovaného u myší s nedostatkem dopaminu. Ačkoli psychologické mechanismy kontrolující frekvenci záchvatů nejsou v takových situacích jasné, bylo navrženo, že kontextové a / nebo interoceptivní narážky, které se spojily s krmením, získávají schopnost tajně motivovat nové záchvaty při hledání a konzumaci potravin,. Naše výsledky poskytují určitou podporu pro věrohodnost této interpretace tím, že demonstrují, že nové záchvaty lízání mohou být vyvolány explicitními narážkami spárovanými s jídlem a že tento účinek také závisí na aktivaci dopaminového receptoru D1.

Jak je uvedeno jinde,, v minulosti došlo k relativně malému výzkumu úlohy dopaminu v CPF. Jedna časná studie však zjistila, že podávání nespecifického antagonisty dopaminového receptoru a-flupenthixolu oslabilo CS + vyvolané hledání potravy, ale zůstala nedotčena schopnost tága zvýšit spotřebu potravy, což se zdá být v rozporu s naším zjištěním, že antagonismus D1 narušuje lízání sacharózy vyvolané narážkou. Mezi oběma studiemi existuje řada procedurálních rozdílů, které by mohly vysvětlit tento zjevný rozpor. Může se například stát, že naše selektivní manipulace s dopaminovým přenosem D1 je účinnější při narušení vlivu CS + na příjem potravy. Dále v této předchozí studiibyly krysy zbavené potravy vyškoleny a testovány ve svých domácích klecích za použití jedinečného postupu Pavlovianova kondicionování, ve kterém bylo použito narážky na signalizaci relací krmení, které byly přerušovány po celý den. Později se ukázalo, že tato narážka je účinná při podpoře krmení, i když byly krysy testovány v nedeprivovaném stavu. Povaha a rozsah tohoto školení a skutečnost, že požadované reakce na krmení se během fáze školení a testování nezměnily, naznačují, že tento protokol CPF mohl povzbudit použití obvyklé (stimulační reakce) reakce na krmení během testování. Vzhledem k tomu, že přetrénování může způsobit, že je jídlo vyvolané podnětem necitlivé na manipulaci s dopaminovou signalizací, je možné, že tato potenciálně založená forma CPF je méně závislá na dopaminu než zde popsaná motivační forma.

Ačkoli ještě zbývá hodně určit o úloze dopaminu v CPF, je známo, že tento jev chování závisí na ghrelinu- a hormon koncentrující melanin neuropeptidové systémy, které se zásadně podílejí na regulaci obou stravovacích návyků a dopaminovou signalizaci-. Zajímavé je, že ghrelinové stimulační účinky závisí na schopnosti tohoto hormonu modulovat mezolimbickou dopaminovou signalizaci-. Například tendence k ghrelinu zlepšit vyhledávání a spotřebu potravin bez ovlivnění chuti k jídlu (trvání lízání záchvatů) může být inhibována současným podáváním antagonisty dopaminového receptoru D1 SCH-23390. Na základě těchto zjištění by se dalo očekávat, že podobná interakce mezi ghrelinem a dopaminem může podnítit motivační vliv podnětů spojených s jídlem nad krmením.

Zatímco současná zjištění ukazují, že podněty spárované s jídlem mohou stimulovat přejídání motivováním nových záchvatů krmení, je pravděpodobné, že takové podněty ovlivní krmení prostřednictvím jiných procesů. V našem přístupu přenosu kontroly je implicitně uznáno, že podněty ke krmení mohou vyvolat příjem přímým vyvoláním specifického chování při krmení. Kromě toho, ačkoliv CS + v současné studii spolehlivě nezměnily dobu trvání záchvatu, nedávná studie využívající konvenčnější protokol CPF s pevným zdrojem potravy našla důkazy, že krmení narážek může prodloužit lízání záchvatů. V souladu s tím existují předchozí zprávy, že narážky spojené s chutným jídlem mohou zvýšit expresi chutných orofaciálních reakcí na chuťové podněty-, další míra chuťové hedoniky nebo „líbení“. Je tedy pravděpodobné, že potravinové podněty mohou podnítit krmení několika cestami, způsobením chutě, vyvoláním specifických reakcí na krmení a / nebo zlepšením chuti jídla.. Tyto procesy mohou být základem odlišných zranitelností při přejídání s potenciometrem, což možná vysvětluje individuální rozdíly v náchylnosti k tomuto účinku,,. Současná zjištění ukazují účinný přístup k selektivní analýze motivační složky CPF u potkanů.

Metody

Předměty a přístroje

Dospělí samci krys Long Evans (N = 32 krys celkem; n = 16 pro experiment 1 a n = 16 pro experimenty 2 a 3), vážící 370–400 g po příjezdu, byli párem chováni v průhledných plastových klecích při teplotě a vlhkosti - řízené vivárium. Krysy podle libosti přístup k vodě v jejich domácích klecích po celou dobu experimentu. Krysy byly umístěny do plánu omezení potravin během určitých fází experimentu, jak je uvedeno níže. Chov a experimentální postupy byly schváleny Ústavním výborem pro péči o zvířata a jejich používání u zvířat Ircine (IACUC) a byly v souladu s příručkou Národní rady pro výzkum v oblasti péče a používání laboratorních zvířat.

Behaviorální postupy byly prováděny ve stejných komorách (ENV-007, Med Associates, St Albans, VT, USA), umístěných ve zvukově a světelně utlumených kabinách. Sacharózový roztok by mohl být dodáván injekční stříkačkou do zapuštěného plastového kelímku, který byl centrálně umístěn v jedné koncové stěně každé komory, 2.5 cm nad podlahou mřížky z nerezové oceli. Detektor fotobeamů umístěný u vstupu do potravinového kontejneru byl použit pro monitorování vstupů do hlavy spojených se spotřebou sacharosy, jakož i pro reakce s podmíněným přístupem během Pavloviánských kondičních relací. V určitých testovacích sezeních (experimenty 2 a 3) lze roztok sacharosy získat vylizováním gravitačně napájené kovové výtokové hubice, která byla umístěna ~ 0.5 cm do otvoru 1.3 cm umístěného na čelní stěně naproti misce s jídlem. Jednotlivé lizy z pohárku s jídlem a kovového výtoku byly průběžně zaznamenávány během testovacích relací pomocí kontaktního lickéhoeterového zařízení (ENV-250B, Med Associates, St Albans, VT, USA). Bílý neprůhledný panel z plexiskla byl umístěn před čelní stěnu, ve které je umístěn pohár na jídlo během všech sezení, kdy bylo možné získat sacharózu z kovového výtoku. Osvětlení domácnosti (3 W, 24 V) poskytovalo osvětlení a ventilátor zajišťoval větrání a hluk v pozadí.

Pavlovian podmíněnost

Krysy byly zařazeny do plánu omezování potravy, aby udržovaly své tělesné hmotnosti na přibližně 85% své hmotnosti krmení bez krmení před tím, než podstoupily 2 d školení v časopise, ve kterém dostaly 60 dodávky 20% roztoku sacharózy (0.1 ml) v každém denní relace (1 h). Krysy poté dostaly 10 d Pavlovianova kondicionování. Každá denní relace kondicionování sestávala ze série prezentací 6 zvukové stopy 2-min (CS +; buď 80-dB bílý šum nebo clicker 10-Hz), přičemž zkoušky byly odděleny proměnným intervalem 3-min (rozsah 2 – 4) . Během každé zkoušky CS + byly alikvoty 0.1 ml (dodané přes 2 s) 20% roztoku sacharózy (w / v) dodány do potravinového kelímku podle náhodného časového plánu 30-s, což vedlo k průměrně čtyřem dodávkám sacharózy na pokus . V poslední den kondicionování byly potkanům rovněž podány druhé sezení, ve kterém byla alternativní narážka (CS-; alternativní zvukový stimul) prezentována stejným způsobem jako CS +, ale nebyla spárována s roztokem sacharózy. Předvídavé chování bylo měřeno porovnáním rychlosti přiblížení pohárku (přerušení fotobeamu) v období mezi počátkem CS a prvním dodáním sacharózy (aby se zabránilo detekci nepodmíněného chování při krmení), což bylo v kontrastu s rychlostí přiblížení pohárku během mezistupně. zkušební interval. Všechny krysy pak dostaly 5 dní podle libosti přístup k jejich výživné stravě po posledním sezení Pavlovianova kondicionování před dalším testováním.

Zkouška na krmení potenciometrem na tágu

experiment 1

Tento experiment hodnotil dopad CS + na spotřebu roztoku sacharózy ze stejného pohárku s jídlem používaného během tréninku, takže podmíněná reakce na tuto narážku (tj. Přístup na pohár) byla slučitelná s chováním potřebným k získání sacharózy při testu. Po znovuzískání váhy ztracené během Pavlovianova kondicionování dostali krysy pár testů CPF, které byly odděleny 48 h, během nichž zůstaly krysy ve svých domovních klecích nerušeně. Během každé CPF relace (86 min. V celkové délce) byl 2% nebo 20% roztok sacharózy nepřetržitě k dispozici v potravinovém kelímku doplňováním tohoto kelímku s 0.1 ml sacharózy, kdykoli krysa překročila fotobeam (přístup k pohárku). Aby se však zabránilo přeplnění kalíšku, dodala se sacharóza pouze tehdy, pokud od posledního dodání sacharózy uplynulo alespoň 4 a pokud potkan provedl během intervalu alespoň pět lizů. V průběhu této relace byly všechny zvukové stimuly 2-min neúmyslně prezentovány 4 krát v pseudonáhodném pořadí (ABBABAAB), odděleny pevným intervalem 8-min. První pokus začal 8 min. Po zahájení relace, aby se umožnilo navození sytosti před hodnocením behaviorálního vlivu narážek. Zkušební řád byl vyvážen Pavlovianskými podmínkami výcviku, takže první prezentovanou CS byla CS + pro polovinu předmětů a CS- pro zbývající polovinu předmětů. Pořadí testů koncentrace sacharosy bylo také vyváženo, přičemž polovina každé podmínky dostala nejprve 2% test a 20% druhý test, a polovina dostávala opačné uspořádání (tj. Všechna zvířata obdržela obě koncentrace v samostatných testech).

experiment 2

V tomto experimentu jsme zkoumali účinek CS + na spotřebu sacharosového roztoku z jiného zdroje, než je kalíšek používaný během Pavlovianova kondicionování, takže podmíněná reakce na toto narážení byla neslučitelná s chováním potřebným ke spotřebě sacharózy při testu. První test, který jsme provedli, zahrnoval pouze stav 2% sacharózy. Poté, co potkanům umožnili znovu získat hmotnost ztracenou během Pavlovianova kondicionování, dostali dvě denní sezení (doba trvání 86 min), ve které měli neomezený přístup k roztoku 2% sacharózy z kovového výtoku (gravitačně napájeného z láhve) umístěného do malé díry v čelní stěna naproti pohárku s jídlem. Bílý panel z plexiskla byl umístěn před stěnu, ve které byl umístěn pohár s jídlem během sezení s přístupem k hubici (včetně následných testů CPF), aby se zvířata odradila od hledání sacharózy v tomto místě. Tato sezení byla navržena tak, aby potkanům poskytla zážitek při pití sacharózy z nového zdroje v nepřítomnosti zvukových signálů. Následující den krysy dostaly jednu testovací relaci CPF, jak je popsáno v experimentu 1, s tou výjimkou, že 2% sacharóza byla nepřetržitě k dispozici na kovové hubici, nikoli na kalíšku.

Protože v tomto prvním testu bylo málo důkazů o CPF, pravděpodobně kvůli konkurenci mezi reakcemi mezi CS + evokovaným pohárkem s jídlem a přístupem k hubicím, dali jsme krysám další trénink hubic (v nepřítomnosti CS +), abychom posílili hledání sacharózy na hubici a odrazovali přístup k pohárku s jídlem, když byla hubice k dispozici (protože byla zakryta panelem). Krysy byly proto umístěny zpět do plánu omezování potravy (stejné jako během fáze Pavlovianova kondicionování) před tím, než byly dány 5 d dalším tréninkům hubic, přičemž každá z těchto relací sestávala z 10 min přístupu k 20% roztoku sacharózy. Potkanům bylo poté dáno 4 d podle libosti přístup k domácímu krmivu, který jim umožní znovu získat hubnutí ztracené během této fáze. Dále byly krysy akutně zbaveny potravy (20 h) před obdržením pavloviánských rekvalifikačních sezení s CS + a CS-, jako během posledního dne počátečního tréninku (tj. S 20% sacharózou dodanou do šálku jídla během CS + pokusů). Během těchto a všech následných Pavlovianových rekvalifikačních relací byl hubeň odstraněn z komory. Potkanům pak bylo podáno ~ 20 h podle libosti přístup do domácí chow před provedením dvou testů CPF pomocí kovového výtoku, které byly totožné s prvním testem, s tou výjimkou, že krysám byl umožněn přístup k 2% nebo 20% ve dvou samostatných testech (jako v experimentu 1).

experiment 3

Po nalezení podstatnějších důkazů CPF během posledního kola testování s hubicí byly krysy z experimentu 2 podrobeny dodatečnému testování, aby se vyhodnotila závislost tohoto účinku na dopaminové signalizaci na dopaminových receptorech D1. Krysy byly nejprve podrobeny 10minutové relaci rekvalifikace hubice, ve které jim byl poskytnut přístup k 20% roztoku sacharózy. Protože se krysy rychle vrátily k normální tělesné hmotnosti, když se vrátily do podle libosti domácí chow po akutní deprivaci potravin 20-h, použili jsme tento postup, abychom zajistili, že krysy budou mít hlad během této rekvalifikační relace hub a během následné Pavlovianovy rekvalifikace (CS + a CS ‑ relace, jako dříve), která byla provedena den před každou z dva závěrečné testy CPF. Krysy dostaly alespoň 20 h podle libosti domácí chow přístup před každou testovací relací. Během tohoto posledního kola testování CPF měly krysy nepřetržitý přístup k 20% sacharóze z hubice během obou testovacích relací. Patnáct minut před každým testem byla krysám podána ip injekce (1 ml / kg) sterilního fyziologického roztoku nebo SCH-23390 (selektivní antagonista dopaminového receptoru D1) s použitím dávky (0.04 mg / kg), o které je známo, že je dostatečná pro potlačení spotřeby sacharózy.,,. Krysy byly testovány v obou podmínkách léčiva, vyvažujíc tak pořadí testů.

Analýza dat

Primárním závislým měřítkem byly individuální lizy, které byly během všech relací CPF zaznamenávány s rozlišením 10 ms pomocí kontaktního lického měřiče. Velmi zřídka jsme detekovali artefakty v našich měřeních likometrem, které byly způsobeny trvalým kontaktem mezi krysou (tlapkou nebo ústy) a sacharózou (nebo kovovým výtokem). Tyto artefakty měly podobu vysokofrekvenčních odpovědí lickometru (> 20 Hz). Vzhledem k tomu, že krysy vykazují maximální rychlost lízání <10 Hz, vyloučili jsme všechny potenciální lízavé reakce vyskytující se v 0.05 s od posledního (ne artefaktního) lízání, což odpovídá mezní frekvenci 20-Hz. Relace, ve kterých bylo vyloučeno alespoň 20% lízavých odpovědí vzhledem k tomuto kritériu, byly zcela odstraněny z analýzy (relace 1 od krysy 1 v experimentu 1).

Lízání chování

Pro každou relaci jsme určili celkový počet lízání napříč typy období (Pre-CS +, CS +, Pre-CS−, CS-). Protože naše primární závislá míra (celkový počet lizů) je proměnná počítání, byla tato data analyzována pomocí zobecněných modelů lineárních smíšených efektů s Poissonovou odpovědí a funkcí log link -. Tento statistický přístup umožňuje odhad parametrů jako funkci podmínky (fixní efekty) a individuální (náhodné účinky). V experimentech 1 a 2 struktura fixních efektů zahrnovala celkový intercept, třícestnou interakci mezi CS periodou (Pre, CS) × CS typem (CS−, CS +) × Koncentrací (2%, 20%) a všemi hlavní účinky a interakce nižšího řádu. U experimentu 3 byl za koncentraci experimentu nahrazen Drug (vehikulum, SCH), aby se přizpůsobila změně experimentálního designu. Všechny tyto proměnné byly proměnné uvnitř subjektu, považovány za kategoriální prediktory a kódované efekty. Výběr modelu s náhodnými efekty zahrnoval určení modelu, který minimalizoval informační kritérium Akaike , a zároveň zajistit, aby počet datových bodů na parametr neklesl pod 10 ,. Na základě těchto kritérií byla nejlepší struktura náhodných efektů napříč experimenty zahrnuta vedlejšími nekorelovanými intercepty upravenými pro období CS, typ CS a koncentraci (nebo lék).. Všechny statistické analýzy byly provedeny v MATLABu (The Math Works; Natick, MA). Úroveň alfa pro všechny testy byla 0.05. Protože všechny prediktory byly kategorické, velikost efektu představovala nestandardizovaný regresní koeficient , nahlášeno jako b in-text a v tabulkách výstupů modelu. Post hoc analýzy interakcí byly prováděny pomocí post hoc F- testy jednoduchých efektů v rámci omnibusové analýzy pomocí coefTest funkce v MATLABu.

Mikrostrukturální analýza lízání

Jednotliví olizování byla klasifikována jako začátek nebo pokračování lízání. Bout byl vymezen jako několik po sobě jdoucích lizů, ve kterých interlickové intervaly (ILI) nepřekročily 1 s. Když uplynuly alespoň 1y od posledního lízání, další lízání bylo označeno jako začátek nového zápasu. Frekvence a trvání záchvatu byly vypočteny nejprve rozdělením relací do období před CS a CS, jak bylo provedeno pro celkové olizování ve výše uvedených analýzách. V těchto obdobích bylo každé lízání, které předcházelo období alespoň 1ů, označeno jako zápas. Doba trvání každého zápasu byla vypočtena jako časový interval mezi prvním a posledním lízáním v tomto zápase. Jednotlivé lizy, které se vyskytují izolovaně, se nepočítaly jako součást zápasu. Chcete-li maximalizovat velikost vzorku pro následné mediační analýzy, údaje o frekvenci záchvatu a době trvání záchvatu byly sbírány napříč experimenty pro vyhodnocení obecných účinků periody CS, typu CS a koncentrace na tato mikrostrukturální opatření. Data ze stavu SCH-23390 v experimentu 3 nebyla do těchto analýz zahrnuta.

Tato data byla analyzována pomocí zobecněných modelů lineárních smíšených efektů obsahujících strukturu pevných účinků období CS × × typ CS × koncentrace (a všechny interakce a hlavní účinky nižších řádů) a strukturu náhodných účinků vedlejších nekorelovaných intercepcí upravených pro období CS , Typ CS a koncentrace. Stejně jako v analýze celkového lizovacího chování byla z analýzy odstraněna jedna relace pro jednu krysu z experimentu 1. Frekvenční analýza záchvatů využívala Poissonovo odezvy odpovědi s funkcí logového spojení kvůli počtu-typové povahy frekvenčních dat. Analýza trvání záchvatu použila distribuci odezvy gama s funkcí logaritmu, protože trvání záchvatu je kontinuální míra ohraničená mezi 0 a + ∞. Pro srovnání byla stejná analýza provedena na celkových lizích, které se zhroutily napříč experimenty, ve kterých analýza předpokládala distribuci Poissonovy reakce s funkcí logaritmu jako v jednotlivých experimentech s celkovou analýzou lízání. Aby se zajistilo, že kritická interakce CS období × typ CS nezávisí na tom, ve kterém experimentu byla každá krysa, byly provedeny druhé série modelů na frekvenci záchvatu a trvání záchvatu, identické s právě popsanou analýzou, ale s dalším prediktorem s pevným účinkem experimentu × období CS × typ CS. Experiment byl kategorický faktor. A konečně, jako potvrzující míra motivovaného lízání-jsme analyzovali latenci k prvnímu lízání po nástupu CS pomocí generalizovaného modelu lineárních smíšených efektů s distribucí odezvy gama a funkcí log link (n = 310). Tento model zahrnoval strukturu pevných efektů typu CS × koncentrace (a všechny interakce a hlavní efekty nižšího řádu) a strukturu náhodných efektů zachycených vedlejšími subjekty upravenou pro typ CS, koncentraci a typ CS × koncentraci.

Zprostředkovatelská analýza frekvence záchvatu a doby trvání záchvatu

Dva vícenásobné modely zprostředkování,, byly provedeny za účelem stanovení, zda účinky (nebo jejich absence) CS periody (Pre, CS) a koncentrace (2%, 20%) na CPF byly významně zprostředkovány frekvencí záchvatů a / nebo dobou trvání záchvatů. V modelu CS Period je proměnná X bylo období CS (Pre, CS), výsledná proměnná Y byl celkový počet lízání v tomto období a mediátory byli záchvatová frekvence (M1) a doba trvání zápasu (M2). V modelu koncentrace je proměnná X byla koncentrace sacharózy. Protože cue-evokované lízání bylo primárně evidentní pro CS + pokusy (viz výsledky), byly analyzovány pouze CS + pokusy. Pro každou krysu a pro každou testovací relaci byl stanoven průměrný počet lizů a záchvatů a průměrné trvání každého záchvatu pro období před CS + a CS +. Tyto analýzy zahrnovaly všechny krysy z experimentů 1 a 2 (krysy 16 na experiment × experimenty 2 × koncentrace 2 CS periody = datové body 2) a údaje o stavu vehikula z experimentů 128 (krysy 3 x 16 CS periody = datové body 2) . Stejně jako v analýze celkového chování při lízání byla z analýzy odstraněna jedna relace pro jednu krysu z experimentu 32, čímž zůstalo celkem datových bodů 1. Zřídka krysy neklízly během období před CS + nebo CS + během relace (158 / 9; 158%). V těchto případech byl průměrný počet lizů a záchvatů kódován jako „9.5“ a hodnota průměrného trvání záchvatu byla ponechána jako prázdná buňka. Když byly spuštěny stejné modely za předpokladu odstranění v seznamu (tj. Odstranění řádků, v nichž doba trvání byla prázdná buňka), držely se podobné vzory. Protože tyto analýzy zahrnují obecné lineární modely (tj. Jednoduchou nebo vícenásobnou lineární regresi), byla frekvence kmitání a celková lízaná data transformována na druhou odmocninu a data trvání boutu byla log-transformována, aby byla korigována na pozitivní skeessess. Význam nepřímého účinku byl určen 0% percentilním bootstrappingem s iteracemi 95. Regresní koeficienty jsou uváděny ve shodě s tradičními zprávami o zprostředkované analýze (např. c'= přímý účinek X on Y),.

Jednotlivé rozdíly v cue-evokovaných změnách frekvence a délky záchvatu

Výše uvedené analýzy nám umožnily posoudit účinek CS + na olizující mikrostrukturu na úrovni skupiny. Také jsme charakterizovali individuální rozdíly ve vyjádření tohoto účinku. U každé krysy byla vypočtena dvě rozdílová skóre pro měření frekvence a trvání záchvatu. Jako paralela k modelu období CS byla frekvence záchvatu během období před CS + odečtena od hodnoty frekvence záchvatu během období CS + (tj. CS + - před CS +); u modelu koncentrace byla frekvence záchvatu během testu 2% sacharózy odečtena od odpovídající hodnoty během testu 20% (tj. 20% –2%). Tyto výpočty vytvořily opatření popisující změnu frekvence záchvatu (ΔFrekvence). Stejné výpočty byly provedeny po dobu trvání záchvatu (tj. ΔTrvání). Pro každý pár datových bodů Pre-CS + / CS + a 2% / 20% byly tedy určeny změny frekvence a délky trvání záchvatu. Prostředky těchto distribucí byly porovnány s 0em prostřednictvím jednoho vzorku t-test (α = 0.05) pro vyhodnocení distribučních posunů od žádné obecné změny. Každý z těchto datových bodů byl roztříděn podle zvýšení a / nebo snížení frekvence a trvání záchvatu a reprezentován dvojrozměrným rozptylovým grafem (např. Zvýšení frekvence záchvatů / zkrácení doby trvání při nástupu CS +), což umožnilo určit poměr dat body v každém kvadrantu 2 × 2 (frekvence záchvatu / trvání × zvýšení / snížení). Datové body, ve kterých bylo rozdílové skóre rovné nule, byly kategorizovány jako pokles (tj. Nikoli nárůst). Chi-kvadrát (χ2) testy vhodnosti pro období CS a údaje o koncentraci určovaly, zda rozdělení těchto datových bodů bylo odlišné od rovnoměrně distribuovaných dat napříč těmito čtyřmi kategoriemi (a = 0.05). Pro určení, zda bylo přibližně stejné rozdělení těchto datových bodů ve čtyřech kvadrantech pro každý experiment, byly provedeny jednoduché korelační analýzy pro období CS a údaje o koncentraci, aby se vyhodnotil vztah mezi počtem datových bodů v každém kvadrantu v každém experimentu a odpovídající očekávaný počet datových bodů, odhadnutý podle celkových proporcí v každém kvadrantu.

Mikrostrukturní prediktory spotřeby sacharózy

Byla provedena konečná řada zobecněných analýz lineárních smíšených efektů, aby se určilo, zda celkový objem roztoku sacharózy spotřebovaný během celých testovacích relací byl předpovězen změnou frekvence a trvání záchvatu potkana od období před CS + do CS +. Analýzy zahrnovaly data ze všech nemedicinských podmínek (tj. Testy 2% a 20% sacharózy pro experimenty 1 a 2 a stav vehikula z experimentu 3). Analýzy předpokládaly distribuci odezvy gama s funkcí log link. První analýza regresovala celkový spotřebovaný roztok sacharózy (ml) na hlavní účinky a interakce mezi kategorizačními seskupeními 2 × 2 zvýšení / snížení frekvence / trvání záchvatu, jak je popsáno výše. Druhá analýza snížila celkovou spotřebu sacharózy na hlavní účinky a interakci mezi kontinuální hodnotou AFrekvence a koncentraci sacharózy.

Dostupnost dat

Datové soubory analyzované během současných experimentů jsou k dispozici od příslušného autora na přiměřenou žádost.

Elektronický doplňkový materiál

Poděkování

Tento výzkum byl podporován granty NIH AG045380, DK098709, DA029035 a MH106972 společnosti SBO. Poskytovatelé financí neměli žádnou roli při návrhu studie, sběru a analýze dat, rozhodnutí o zveřejnění nebo přípravě rukopisu.

Autorské příspěvky

SBO tyto experimenty vymyslel a navrhl; BH a ATL provedly experimenty; ATM a SBO analyzovaly data. Všichni autoři napsali článek a recenzovali rukopis.

Poznámky

Konkurenční zájmy

Autoři neprohlašují žádné konkurenční zájmy.

Poznámky pod čarou

Elektronický doplňkový materiál

Doplňující informace doprovází tento dokument na 10.1038 / s41598-018-21046-0.

Poznámka vydavatele: Springer Nature zůstává neutrální, pokud jde o jurisdikční nároky v publikovaných mapách a institucionálních vztazích.

Informace o přispěvatele

Andrew T. Marshall, E-mail: ude.icu@1aahsram.

Sean B. Ostlund, E-mail: ude.icu@dnultsos.

Reference

1. Fedoroff I, Polivy J, Herman CP. Specifičnost zdrženlivých versus neomezených odpovědí jedlíků na potravinové podněty: obecná touha po jídle nebo touha po jídle s cuedem? Chuť. 2003; 41: 7 – 13. doi: 10.1016 / S0195-6663 (03) 00026-6. [PubMed] [Cross Ref]
2. Pelchat ML, Schaefer S. Dietní monotónnost a chuť k jídlu u mladých a starších dospělých. Physiol Behav. 2000; 68: 353 – 359. doi: 10.1016 / S0031-9384 (99) 00190-0. [PubMed] [Cross Ref]
3. Jansen A. Učební model přejídání: narážka na reaktivitu a narážka. Behav Res Ther. 1998; 36: 257 – 272. doi: 10.1016 / S0005-7967 (98) 00055-2. [PubMed] [Cross Ref]
4. Weingarten HP. Zahájení jídla řízené naučenými narážkami: základní vlastnosti chování. Chuť. 1984; 5: 147 – 158. doi: 10.1016 / S0195-6663 (84) 80035-5. [PubMed] [Cross Ref]
5. Petrovich GD, Ross CA, Gallagher M, Holland PC. Naučené kontextové narážky potencují jíst u potkanů. Physiol Behav. 2007; 90: 362 – 367. doi: 10.1016 / j.physbeh.2006.09.031. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
6. Birch LL, McPhee L, Sullivan S, Johnson S. Podmíněná iniciace jídla u malých dětí. Chuť. 1989; 13: 105 – 113. doi: 10.1016 / 0195-6663 (89) 90108-6. [PubMed] [Cross Ref]
7. Fedoroff IC, Polivy J, Herman CP. Vliv předběžné expozice na stravovací návyky na stravovací chování omezených a neomezených jedlíků. Chuť. 1997; 28: 33 – 47. doi: 10.1006 / appe.1996.0057. [PubMed] [Cross Ref]
8. Halford JC, Gillespie J, Brown V, Pontin EE, Dovey TM. Vliv televizních reklam na potraviny na spotřebu potravin u dětí. Chuť. 2004; 42: 221 – 225. doi: 10.1016 / j.appet.2003.11.006. [PubMed] [Cross Ref]
9. Cornell CE, Rodin J, Weingarten H. Stimulus-indukované stravování, když nasycené. Physiol Behav. 1989; 45: 695 – 704. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90281-3. [PubMed] [Cross Ref]
10. Johnson AW. Jíst mimo metabolickou potřebu: jak vlivy prostředí ovlivňují stravovací chování. Trendy Neurosci. 2013; 36: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.tins.2013.01.002. [PubMed] [Cross Ref]
11. Kenny PJ. Mechanismy odměňování v obezitě: nové poznatky a budoucí směry. Neuron. 2011; 69: 664 – 679. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.02.016. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
12. Petrovich GD. Přední mozkové sítě a kontrola krmení pomocí naučených environmentálních podnětů. Physiol Behav. 2013; 121: 10 – 18. doi: 10.1016 / j.physbeh.2013.03.024. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
13. Boswell RG, Kober H. Reaktivita a touha po jídle předpovídá stravování a přírůstek hmotnosti: metaanalytický přehled. Obes Rev. 2016; 17: 159 – 177. doi: 10.1111 / obr.12354. [PubMed] [Cross Ref]
14. Holland PC, Gallagher M. Dvojitá disociace účinků lézí bazolaterálního a centrálního amygdaly na podmíněné stimulačně stimulované krmení a Pavlovianův instrumentální přenos. Eur J Neurosci. 2003; 17: 1680 – 1694. doi: 10.1046 / j.1460-9568.2003.02585.x. [PubMed] [Cross Ref]
15. Holland PC, Petrovich GD, Gallagher M. Účinky lézí amygdaly na kondicionované stimulované stravování potkanů. Physiol Behav. 2002; 76: 117 – 129. doi: 10.1016 / S0031-9384 (02) 00688-1. [PubMed] [Cross Ref]
16. Reppucci CJ, Petrovich GD. Naučené krmivo stimuluje perzistentní krmení u nasátých krys. Chuť. 2012; 59: 437 – 447. doi: 10.1016 / j.appet.2012.06.007. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
17. Rescorla RA, Solomon RL. Dvoustupňová teorie učení: Vztahy mezi Pavlovianovým podmíněním a instrumentálním učením. Psychol Rev. 1967; 74: 151 – 182. doi: 10.1037 / h0024475. [PubMed] [Cross Ref]
18. Dickinson A, Smith J, Mirenowicz J. Disociace Pavlovianova a instrumentálního motivačního učení pod dopaminovými antagonisty. Behav Neurosci. 2000; 114: 468 – 483. doi: 10.1037 / 0735-7044.114.3.468. [PubMed] [Cross Ref]
19. Delamater AR, LoLordo VM, Berridge KC. Řízení chutnosti tekutin pomocí externě vnímavých Pavloviánských signálů. J Exp Psychol Anim Behav Process. 1986; 12: 143 – 152. doi: 10.1037 / 0097-7403.12.2.143. [PubMed] [Cross Ref]
20. Holland PC, Lasseter H, Agarwal I. Množství tréninku a reakce vyvolaná chutí reagující na devalvaci posilovače. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2008; 34: 119 – 132. doi: 10.1037 / 0097-7403.34.1.119. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
21. Kerfoot EC, Agarwal I, Lee HJ, Holland PC. Řízení chuťových a averzivních reakcí chuti a reaktivity pomocí sluchového podmíněného podnětu v devalvačním úkolu: FOS a behaviorální analýza. Naučte se Mem. 2007; 14: 581 – 589. doi: 10.1101 / lm.627007. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
22. Holland PC, Petrovich GD. Analýza nervových systémů o potenciaci krmení podmíněnými stimuly. Physiol Behav. 2005; 86: 747 – 761. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.08.062. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
23. Davis JD, Smith GP. Analýza mikrostruktury rytmických pohybů jazyka potkanů ​​přijímajících roztoky maltózy a sacharózy. Behav Neurosci. 1992; 106: 217 – 228. doi: 10.1037 / 0735-7044.106.1.217. [PubMed] [Cross Ref]
24. Higgs S, Cooper SJ. Důkaz včasné opioidní modulace lízacích odpovědí na sacharózu a intralipid: mikrostrukturální analýza u potkanů. Psychofarmakologie (Berl) 1998; 139: 342 – 355. doi: 10.1007 / s002130050725. [PubMed] [Cross Ref]
25. D'Aquila PS. Dopamin na D2-podobných receptorech „restartuje“ dopaminovou D1-zprostředkovanou behaviorální aktivaci u krys lízajících sacharózu. Neurofarmakologie. 2010; 58: 1085 – 1096. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.017. [PubMed] [Cross Ref]
26. Ostlund SB, Kosheleff A, Maidment NT, Murphy NP. Snížená spotřeba sladkých tekutin u mu opioidních receptorových knockout myší: mikrostrukturální analýza chování při olizování. Psychofarmakologie (Berl) 2013; 229: 105 – 113. doi: 10.1007 / s00213-013-3077-x. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
27. Mendez IA, Ostlund SB, Maidment NT, Murphy NP. Zapojení endogenních enkefalinů a beta-endorfinu do výživy a obezity vyvolané stravou. Neuropsychofarmakologie. 2015; 40: 2103 – 2112. doi: 10.1038 / npp.2015.67. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
28. Galistu A, D'Aquila PS. Vliv antagonisty receptoru dopaminu D1 SCH 23390 na mikrostrukturu požitého chování u vody zbavených krys lízajících vodu a roztoky NaCl. Physiol Behav. 2012; 105: 230 – 233. doi: 10.1016 / j.physbeh.2011.08.006. [PubMed] [Cross Ref]
29. Ostlund SB, Maidment NT. Blokáda dopaminových receptorů zmírňuje obecné motivační účinky neúmyslně poskytnutých odměn a odměn spárovaných bez ohledu na jejich schopnost ovlivnit výběr akce. Neuropsychofarmakologie. 2012; 37: 508 – 519. doi: 10.1038 / npp.2011.217. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
30. Wassum KM, Ostlund SB, Balleine BW, Maidment NT. Diferenční závislost Pavlovianovy motivační motivace a instrumentálního motivačního procesu učení na dopaminové signalizaci. Naučte se Mem. 2011; 18: 475 – 483. doi: 10.1101 / lm.2229311. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
31. Laurent V, Bertran-Gonzalez J, Chieng BC, Balleine BW deltaopioidní a dopaminergní procesy v shellu accumbens modulují cholinergní kontrolu prediktivního učení a výběru. J Neurosci. 2014; 34: 1358 – 1369. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4592-13.2014. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
32. Receptory Lex A, Hauber W. Dopamin D1 a D2 v jádru připouštějí Pavlovianův instrumentální přenos jádrem a skořepinou. Naučte se Mem. 2008; 15: 483 – 491. doi: 10.1101 / lm.978708. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
33. Yun IA, Nicola SM, Fields HL. Kontrastní účinky injekce antagonisty receptoru dopaminu a glutamátu v nucleus accumbens naznačují nervový mechanismus, na kterém je založeno cílené chování vyvolané narážkou. Eur J Neurosci. 2004; 20: 249 – 263. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2004.03476.x. [PubMed] [Cross Ref]
34. Liao RM, Ko MC. Chronické účinky haloperidolu a SCH23390u na chování operátora a lízání u potkanů. Chin J Physiol. 1995; 38: 65 – 73. [PubMed]
35. Davis JD. Mikrostruktura požití. ANYAS. 1989; 575: 106 – 121. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1989.tb53236.x. [PubMed] [Cross Ref]
36. Breslin PAS, Davis JD, Rosenak R. Saccharin zvyšuje účinnost glukózy při stimulaci požití u potkanů, ale má malý vliv na negativní zpětnou vazbu. Fyziologie a chování. 1996; 60: 411–416. doi: 10.1016 / S0031-9384 (96) 80012-6. [PubMed] [Cross Ref]
37. Davis JD, Smith GP, Singh B, McCann DL. Dopad nepodmíněné a podmíněné negativní zpětné vazby odvozené od sacharózy na mikrostrukturu chování při požití. Fyziologie a chování. 2001; 72: 392–402. doi: 10.1016 / S0031-9384 (00) 00442-X. [PubMed] [Cross Ref]
38. Asin KE, Davis JD, Bednarz L. Diferenciální účinky serotonergních a katecholaminergních léků na požití. Psychofarmakologie. 1992; 109: 415 – 421. doi: 10.1007 / BF02247717. [PubMed] [Cross Ref]
39. Fritz MS, Mackinnon DP. Požadovaná velikost vzorku pro detekci zprostředkovaného efektu. Psychol Sci. 2007; 18: 233 – 239. doi: 10.1111 / j.1467-9280.2007.01882.x. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
40. Allison J, Castellan NJ. Časové charakteristiky výživného pití u potkanů ​​a lidí. Žurnál srovnávací a fyziologické psychologie. 1970; 70: 116 – 125. doi: 10.1037 / h0028402. [Cross Ref]
41. Bolles RC. Připravenost k jídlu a pití: účinek podmínek deprivace. Žurnál srovnávací a fyziologické psychologie. 1962; 55: 230 – 234. doi: 10.1037 / h0048338. [PubMed] [Cross Ref]
42. Davis JD, Perez MC. Mikrostrukturální změny vyvolané deprivací potravin a chutností při požití. Am J Physiol Regul Integr Comp Compioliol. 1993; 264: R97 – R103. doi: 10.1152 / ajpregu.1993.264.1.R97. [PubMed] [Cross Ref]
43. Hayes, zprostředkování AF, moderování a analýza podmíněných procesů: přístup založený na regresi. (The Guilford Press, 2013).
44. Smith GP. John Davis a význam lízání. Chuť. 2001; 36: 84 – 92. doi: 10.1006 / appe.2000.0371. [PubMed] [Cross Ref]
45. Aitken TJ, Greenfield VY, Wassum KM. Nucleus accumbens signalizace jádra dopaminu sleduje potřebnou motivační hodnotu podnětů spojených s potravinami. J Neurochem. 2016; 136: 1026 – 1036. doi: 10.1111 / jnc.13494. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
46. Wassum KM, Ostlund SB, Loewinger GC, Maidment NT. Fázické mezolimbické uvolňování dopaminu sleduje hledání odměn během vyjádření Pavlovian-instrumentální přenos. Biol Psychiatry. 2013; 73: 747 – 755. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.12.005. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
47. Cannon CM, Palmiter RD. Odměna bez dopaminu. J Neurosci. 2003; 23: 10827 – 10831. [PubMed]
48. Weingarten HP, Martin GM. Mechanismy iniciace podmíněného jídla. Physiol Behav. 1989; 45: 735 – 740. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90287-4. [PubMed] [Cross Ref]
49. Choi WY, Balsam PD, Horvitz JC. Rozšířené návykové školení omezuje dopaminovou zprostředkování projevů chutné odpovědi. J Neurosci. 2005; 25: 6729 – 6733. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1498-05.2005. [PubMed] [Cross Ref]
50. Dailey MJ, Moran TH, Holland PC, Johnson AW. Antagonismus ghrelinu mění chuťovou reakci na naučené narážky spojené s jídlem. Behav Brain Res. 2016; 303: 191 – 200. doi: 10.1016 / j.bbr.2016.01.040. [PubMed] [Cross Ref]
51. Walker AK, Ibia IE, Zigman JM. Přerušení krmení potencovaného krmením u myší s blokovanou signalizací ghrelinu. Physiol Behav. 2012; 108: 34 – 43. doi: 10.1016 / j.physbeh.2012.10.003. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
52. Kanoski SE, Fortin SM, Ricks KM, Grill HJ. Ghrelinová signalizace ve ventrálním hippocampu stimuluje naučené a motivační aspekty výživy pomocí signalizace PI3K-Akt. Biol Psychiatry. 2013; 73: 915 – 923. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.07.002. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
53. Sherwood A, Holland PC, Adamantidis A, Johnson AW. Delece melaninového koncentračního hormonového receptoru-1 narušuje přejídání v přítomnosti potravinových podnětů. Physiol Behav. 2015; 152: 402 – 407. doi: 10.1016 / j.physbeh.2015.05.037. [PubMed] [Cross Ref]
54. Domingos AI, a kol. Hypotalamické neurony koncentrující hormonální neurony sdělují nutriční hodnotu cukru. eLife. 2013; 2: e01462. doi: 10.7554 / eLife.01462. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
55. Smith DG, et al. Superolitivita mezolimbického dopaminu u myší s deficitem receptoru hormonu 1 s koncentrací melaninu. Žurnál neurověd. 2005; 25: 914 – 922. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4079-04.2005. [PubMed] [Cross Ref]
56. Liu S, Borgland SL. Regulace mezolimbického dopaminového okruhu krmením peptidů. Neurovědy. 2015; 289: 19 – 42. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2014.12.046. [PubMed] [Cross Ref]
57. Kužel JJ, Roitman JD, Roitman MF. Ghrelin reguluje fázové dopaminové a nucleus accumbens signalizace vyvolané potravními prediktivními stimuly. J Neurochem. 2015; 133: 844 – 856. doi: 10.1111 / jnc.13080. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
58. Kužel JJ, McCutcheon JE, Roitman MF. Ghrelin funguje jako rozhraní mezi fyziologickým stavem a fázovou dopaminovou signalizací. J Neurosci. 2014; 34: 4905 – 4913. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4404-13.2014. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
59. Abizaid A, et al. Ghrelin moduluje aktivitu a organizaci synaptických vstupů neuronů dopaminu midbrain a současně podporuje chuť k jídlu. J Clin Invest. 2006; 116: 3229 – 3239. doi: 10.1172 / JCI29867. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
60. Overduin J, Figlewicz DP, Bennett-Jay J, Kittleson S, Cummings DE. Ghrelin zvyšuje motivaci k jídlu, ale nemění chutnost jídla. Am J Physiol Regul Integr Comp Compioliol. 2012; 303: R259 – 269. doi: 10.1152 / ajpregu.00488.2011. [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
61. Ferriday D, Brunstrom JM. „Prostě si nemůžu pomoct“: účinky vystavení jídlu u obézních a štíhlých jedinců. Int J Obes (Lond) 2011; 35: 142 – 149. doi: 10.1038 / ijo.2010.117. [PubMed] [Cross Ref]
62. Tetley A, Brunstrom J, Griffiths P. Individuální rozdíly v reaktivitě potravin. Role BMI a každodenní výběr velikosti porcí. Chuť. 2009; 52: 614 – 620. doi: 10.1016 / j.appet.2009.02.005. [PubMed] [Cross Ref]
63. Schneider LH, Greenberg D, Smith GP. Porovnání účinků selektivních antagonistů receptorů D1 a D2 na krmení sacharózou a pitím vody. Ann Ny Acad Sci. 1988; 537: 534 – 537. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1988.tb42151.x. [Cross Ref]
64. Weijnen JAWM, Wouters J, van Hest JMHH. Interakce mezi olizováním a polykáním u potkana. Mozek, chování a evoluce. 1984; 25: 117 – 127. doi: 10.1159 / 000118857. [PubMed] [Cross Ref]
65. Boisgontier MP, Cheval B. Přechod od anovy ke smíšenému modelu. Neurovědy a biobehaviorální recenze. 2016; 68: 1004–1005. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2016.05.034. [PubMed] [Cross Ref]
66. Bolker BM, et al. Zobecněné lineární smíšené modely: praktický průvodce pro ekologii a evoluci. Trendy v ekologii a evoluci. 2008; 24: 127–135. doi: 10.1016 / j.tree.2008.10.008. [PubMed] [Cross Ref]
67. Coxe S, West SG, Aiken LS. Analýza počtů dat: Jemný úvod do Poissonovy regrese a jejích alternativ. Žurnál hodnocení osobnosti. 2009; 91: 121 – 136. doi: 10.1080 / 00223890802634175. [PubMed] [Cross Ref]
68. Pinheiro, J. & Bates, D. Modely smíšených efektů v S a S-Plus. (Springer, 2000).
69. Burnham, KP & Anderson, DR Výběr a odvození modelu: Praktický informační teoretický přístup. (Springer, 1998).
70. Babyak MA. To, co vidíte, nemusí být to, co získáte: Krátký netechnický úvod k přeplnění modelů regresního typu. Psychosomatická medicína. 2004; 66: 411 – 421. [PubMed]
71. Peduzzi P, Concato J, Kemper E, Holford TR, Feinstein AR. Simulační studie počtu událostí na proměnnou v logistické regresní analýze. Žurnál klinické epidemiologie. 1996; 49: 1373 – 1379. doi: 10.1016 / S0895-4356 (96) 00236-3. [PubMed] [Cross Ref]
72. Bates D, Kliegl R, Vasishth S, Baayen H. Parsimonious smíšené modely. ar Xiv předtisk arXiv. 2015; 1506: 04967.
73. Baguley T. Standardizovaná nebo jednoduchá velikost efektu: co by mělo být hlášeno? British Journal of Psychology. 2009; 100: 603 – 617. doi: 10.1348 / 000712608X377117. [PubMed] [Cross Ref]
74. Spector AC, Klumpp PA, Kaplan JM. Analytické problémy při hodnocení deprivace potravin a účinků koncentrace sacharózy na mikrostrukturu lízání u potkanů. Behaviorální neurovědy. 1998; 112: 678 – 694. doi: 10.1037 / 0735-7044.112.3.678. [PubMed] [Cross Ref]
75. Hayes AF. Beyond Baron and Kenny: Statistická analýza zprostředkování v novém tisíciletí. Komunikační monografie. 2009; 76: 408 – 420. doi: 10.1080 / 03637750903310360. [Cross Ref]
76. Kazatel KJ, Hayes AF. Postupy SPSS a SAS pro odhad nepřímých účinků v jednoduchých mediačních modelech. Metody, přístroje a počítače pro výzkum chování. 2004; 36: 717–731. doi: 10.3758 / BF03206553. [PubMed] [Cross Ref]