CRF-CRF1 receptorový systém v centrální a bazolaterální jádře Amygdaly různě zprostředkovává nadměrné stravování chutného jídla (2013)

Neuropsychopharmacology. 2013 Nov; 38 (12): 2456 – 2466.

Publikováno online 2013 Jul 10. Hotová online 2013 Jun 10. doi: 10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Attilio Iemolo,¹ Angelo Blasio,¹ Stephen A St Cyr,¹ Fanny Jiang,¹ Kenner C Rice,² Valentina Sabino,¹ a Pietro Cottone^1,^*

Abstraktní

Vysoce chutná jídla a dieta jsou hlavními faktory přispívajícími k rozvoji kompulzivního stravování při obezitě a poruchách příjmu potravy. Již dříve jsme prokázali, že přerušovaný přístup k chutnému jídlu má za následek faktor uvolňující kortikotropin-1 (CRF)₁) reverzibilní chování antagonistů receptoru, které zahrnuje nadměrný chutný příjem potravy, hypofágii pravidelného krmení a chování podobné úzkosti. Mozkové oblasti zprostředkující tyto účinky jsou však stále neznámé. Samci potkanů Wistar byli buď krmeni chow nepřetržitě po dobu 7 dní / týden (Čau čau skupina), nebo krmené krmením přerušovaně 5 dny / týden, následované sacharózou, chutnou stravou 2 dní / týden (Chow / Chutný skupina). Následky chronické střídání stravy způsobují mikroinfuzi CRF₁ antagonista receptoru R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v centrálním jádru amygdaly (CeA), bazolaterálním jádru amygdaly (BlA) nebo jádru lůžka stria terminalis (BNST) byl hodnocen při nadměrném příjmu o chutné stravě, hypofágii chess a chování podobném úzkosti. Dále bylo imunofarbení CRF hodnoceno v mozku krys s cyklem potravy. Intra-CeA R121919 zablokoval jak nadměrně chutný příjem potravy, tak i chování podobné úzkosti Chow / Chutný krysy, aniž by to mělo vliv na hypofágii. Naopak, intra-BlA R121919 snížil hypofágii chow v Chow / Chutný krysy, aniž by to ovlivnilo nadměrný chutný příjem potravy nebo chování podobné úzkosti. Léčba v rámci BNST neměla žádný účinek. Léčba nemění chování Čau čau krysy. Imunohistochemie odhalila zvýšený počet CRF-pozitivních buněk v CeA - ale ne v BlA nebo BNST - Chow / Chutný krysy během stažení a obnovení přístupu k chutné stravě ve srovnání s kontrolami. Tyto výsledky poskytují funkční důkaz, že CRF – CRF₁ Receptorový systém v CeA a BlA má odlišnou roli při zprostředkování maladaptivního chování vyplývajícího z chutného stravování.

Klíčová slova: faktor uvolňující kortikotropin, BNST, závislost, úzkost, hypofagie, krysa

ÚVOD

Vysoce chutná jídla (např. Potraviny bohaté na cukry a / nebo tuky) jsou považována za hlavní faktory přispívající ke vzniku kompulzivního stravování v určitých formách obezity a poruch příjmu potravy (Corwin, 2006; Yach et al, 2006). Existuje mnoho analogií mezi závislostí na drogách a nadměrným příjmem vysoce chutných potravin, včetně ztráty kontroly nad drogou / jídlem, neschopnosti ukončit užívání / přejídání navzdory negativním důsledkům, úzkosti a dysforii při pokusu zdržet se drogy / jídla (Parylak et al, 2011; Volkow a O'Brien, 2007). Tyto běžné příznaky byly navrženy tak, aby vznikly z dysfunkcí mozkových obvodů, které se překrývají v závislosti na drogách a nutkavém jídle.

Typ faktoru uvolňující kortikotropin typu 1 (CRF₁) antagonisté receptoru byly navrženy jako nové terapeutické cíle pro návykové poruchy kvůli jejich schopnosti snížit motivační účinky stažení (Logrip et al, 2011). CRF je kritickým mediátorem endokrinních, sympatických a behaviorálních reakcí na stres (Bakshi a Kalin, 2000; Údolí et al, 1981). CRF v paraventrikulárním jádru hypotalamu řídí reakci hypothalamicko-hypofýzy - nadledviny (HPA) na stres, zatímco behaviorální účinky CRF jsou HPA nezávislé a zprostředkované extrahypothalamickými oblastmi mozku (Koob a Heinrichs, 1999). Extrahypothalamický CRF – CRF₁ Receptorový systém je získáván v závislosti na všech známých drogách zneužívaných prostřednictvím cyklů intoxikace / odebírání a tato hyperaktivace je považována za běžný prvek, který podporuje nadměrný příjem léčiva negativně zesíleným mechanismem (tj. nutkavý příjem léčiva způsobený odstraněním stažení - indukovaný negativní emoční stav; Heilig a Koob, 2007; Koob, 2010; Shalev et al, 2010).

Ačkoli podobnosti mezi drogami zneužívání a jídlem byly široce studovány s ohledem na jejich pozitivní posilovací vlastnosti (tj. Nadměrný příjem potravy produkovaný získáním příjemného účinku; Oves et al, 2012; Blasio et al, 2013b; Corwin a Grigson, 2009; Cottone et al, 2012; Hagan et al, 2003), hypotéza, že nadměrný příjem potravy může mít za následek formu „samoléčby“ ke zmírnění negativního emočního stavu spojeného s vysazením z vysoce chutných potravin, je poměrně nedostatečná (Bale, 2005; Cottone et al, 2009a; Shalev et al, 2010).

Již dříve jsme prokázali, že stažení z chronického přerušovaného přístupu k vysoce chutným potravinám způsobuje nábor extrahypothalamického systému CRF a vznik CRF.₁ maladaptivní chování závislé na receptoru, které zahrnuje nadměrný příjem potravy při obnoveném přístupu k vysoce chutné stravě, hypofágii jinak přijatelné potravy pro chow a úzkostné chování během abstinence (Cottone et al, 2009a).

Přímý funkční důkaz o tom, která oblast mozku je však odpovědná za CRF₁ chybí adaptace chování závislá na receptoru vyvolaná chutným stravováním. Tato studie se proto zaměřila na určení, zda je místně specifický antagonismus CRF₁ receptory uvnitř centrálního jádra amygdaly (CeA), bazolaterálního jádra amygdaly (BlA) nebo lůžkového jádra stria terminis (BNST) byly schopny blokovat nadměrný příjem vysoce chutného jídla, hypofágie vyvolaná stahem chow a chování podobné úzkosti. Tato studie byla dále zaměřena na stanovení toho, zda byla exprese CRF v CeA, BlA a BNST zvýšena u potkanů s cyklem potravy ve srovnání s kontrolami, za použití imunohistochemie. Ačkoli jsme již dříve ukázali, že stažení z chutného jídla je spojeno se zvýšenou expresí CRF v CeA, v současné době není známo, jak jsou BlA a BNST ovlivňovány dietou.

MATERIÁLY A METODY

Předměty

Samci krys Wistar (n= 140, z toho 33 krysy pro experimenty CeA, 46 krysy pro experimenty BlA, 39 krysy pro experimenty BNST a krysy 22 pro imunohistochemický experiment; Doplňková tabulka 1), vážící 180 – 230 ga 41 – 47 dny staré při příjezdu (Charles River, Wilmington, MA, USA), byly jednotlivě umístěny v plastových klecích (27 × 48 × 20 cm) na zpětném světle 12-h cyklus (zhasne v 1100 hodinách), v viváriu s povolenou vlhkostí (60%) a s regulovanou teplotou (22 ° C). Krysy ano podle libosti přístup ke krmivu na bázi kukuřice (Harlan Teklad LM-485 Dieta 7012; 65% kcal uhlohydrát, 13% tuk, 21% protein, metabolizovatelná energie 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, USA) a vodě, pokud není uvedeno jinak . Postupy použité v této studii se řídily Národními instituty zdravotnictví pro péči o zvířata a použití laboratorních zvířat (publikační číslo NIH 85-23, revidované 1996) a Zásadami laboratorní péče o zvířata a byly schváleny institucionálním institutem Boston University Medical Campus Institutional Výbor pro péči o zvířata a jejich použití.

Drogy

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropylpyrazolo [2,3-a] pyrimidin-7-amin, NBI 30775) byl syntetizován podle popisu v Chen et al (2004). R121919 je silný nepeptidový CRF s vysokou afinitou₁ antagonista receptoru (K_i= 2 – 5 nM), což ukazuje na 1000-krát slabší aktivitu v CRF₂ receptor, CRF-vazebný protein nebo 70 jiné typy receptorů (Grigoriadis et al, 2000). R121919 byl solubilizován za použití směsi 18: 1: 1 solný roztok: ethanol: cremophor.

Testy chování

Ad libitum přístup k alternativní stravě

Přístup k internetu podle libosti bylo provedeno chutné stravování, jak bylo popsáno výše (Cottone et al, 2008, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012). Stručně, po aklimatizaci byly krysy rozděleny do dvou skupin odpovídajících příjmu potravy, tělesné hmotnosti a účinnosti krmení předchozích 3 – 4 dnů. Jedna skupina byla poté vybavena podle libosti přístup ke stravovací stravě (Chow) po dobu 7 dní v týdnu (Čau čau(kontrolní skupina této studie), zatímco druhé skupině byl poskytnut volný přístup ke krmení po dobu 5 dní v týdnu, následované 2 dny podle libosti na vysoce chutnou dietu s vysokým obsahem sacharózy s čokoládovou příchutí (Chutný; Chow / Chutný skupina). Všechny testy chování byly prováděny na potkanech, kteří byli na dietě cyklovaní po dobu nejméně 7 týdnů. Dieta „chow“ byla výše popsaná potrava pro kukuřici od Harlana, zatímco chutná strava byla nutričně kompletní, čokoládově příchutí s vysokým obsahem sacharózy (50% kcal), strava na bázi AIN-76A, která je srovnatelná s makronutrienty proporce a hustota energie k dietě s chow (čokoládová příchuť 5TUL: 66.7% kcal sacharidů, 12.7% tuků, 20.6% bílkovin, metabolizovatelná energie 344 kcal / 100 g (Test Diet, Richmond, IN, USA) formulováno jako přesnost 45 mg potravinové pelety ke zvýšení jeho preference). Pro stručnost, prvních 5 dnů (pouze chow) a poslední 2 dny (chow nebo chutné podle experimentální skupiny) každého týdne jsou ve všech experimentech označovány jako C a P fáze. Chutná strava byla poskytována v krmítcích GPF20 'J'(Ancare, Bellmore, NY, USA). Diéty nebyly nikdy současně k dispozici.

Experimenty s příjmem potravy

Potkanům bylo poskytnuto předem zvážené jídlo v jejich domácích klecích při zahájení temného cyklu. Léčby byly prováděny u potkanů, které byly po obnovení přístupu k chutné stravě cyklicky krmeny po dobu nejméně 7 týdnů (C→P fáze), nebo na stravu pro chow (P→C fáze). R121919 byl mikroinfikován bilaterálně v rámci CeA, BlA nebo BNST (0, 0.5 a 1.5 μg / strana, 0.5 μl / strana, 30-min doba před ošetřením) za použití randomizovaných návrhů latinských čtverců.

Test světelného a tmavého pole

Krysy byly testovány po dobu 10 min ve světelně-tmavé obdélníkové krabici (50 × 100 × 35 cm), ve které byl averzní světelný prostor (50 × 70 × 35 cm) osvětlen světlem 60 lux. Temná strana (50 × 30 × 35 cm) měla neprůhledný kryt a ∼0 lux světla. Oba oddíly byly propojeny otevřenými dveřmi, které umožňovaly subjektům volně se pohybovat mezi nimi. Testování proběhlo po nejméně 7 týdnech střídání stravy, 5 – 9 h po přechodu z chutné stravy na stravu pro chow (P→C fáze); tento časový bod zajišťuje výskyt chování podobného úzkosti vyvolané stažením z chutného jídla v Chow / Chutný krysy (Cottone et al, 2009a, 2009b). Krysy byly před testováním drženy v tiché temné předsíni alespoň 2 h. Během habituace a testování byl přítomen bílý šum. V den testování byly krysy mikroinfikovány bilaterálně s R121919 v CeA, BlA nebo BNST (0, 0.5 a 1.5 μg / strana, 0.5 μl / strana) 30 min., Než byly umístěny do tmavého oddílu směřujícího ke dveřím a chování bylo zaznamenáno pro pozdější bodování. Ošetření byla prováděna za použití mezipředmětového designu. Čas strávený v otevřeném prostoru byl měřen jako index chování podobného úzkosti. Přístroj byl otřen čistou vodou a sušen po každém subjektu.

Intrakraniální chirurgie, mikrosinfúzní postup a umístění kanyly

Intrakraniální operace

Potkanům byly stereotaxicky implantovány bilaterální intrakraniální kanyly, jak bylo popsáno dříve (Cottone et al, 2007; Iemolo et al, 2012; Sabino et al, 2007). Stručně, nerezové ocelové vodicí kanyly (24 gauge, Plastics One, Roanoke, VA, USA) byly oboustranně spuštěny 2.0 mm nad CeA, BlA nebo BNST. K lebce krysy kolem kanyly byly připevněny čtyři klenotnické šrouby z nerezové oceli. Byly naneseny pryskyřice vyplněné zubními výplněmi (Henry Schein, Melville, NY, USA) a akrylový cement, které vytvořily podstavec pevně ukotvující kanylu. Souřadnice kanyly z bregmy použité pro CeA byly: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (z lebky) s řezákovou tyčí nastavenou 5.0 mm nad interaurální linií, podle atlasu Pellegrino (1979). Souřadnice kanyly použité pro BlA byly: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (z lebky) s plochou lebkou, podle Paxinos a Watson (2007). Souřadnice kanyly použité pro BNST byly: AP −0.6, ML ± 3.5, DV −4.8 (z lebky) s plochou lebkou a úhlem sklonu 14 °. Průchod kanyly udržoval figurínový stylet z nerezové oceli (Plastics One). Po chirurgickém zákroku bylo potkanům ponecháno 7-denní zotavovací období, během kterého byly denně ošetřovány.

Postup mikroinfúze

Lék byl mikroinfikován do mozku potkanů, jak bylo popsáno výše (Blasio et al, 2013b; Dore et al, 2013). Pro intrakraniální mikroinfuzi byl fiktivní mandrén odstraněn z vodicí kanyly a byl nahrazen injektorem z nerezové oceli měřicího 31 vyčnívajícím 2 mm za špičku vodicí kanyly; injektor byl připojen pomocí PE 20 hadičky k mikroskopické stříkačce Hamilton (Hamilton, Reno, Nevada) poháněné mikroinjekční pumpou s více stříkačkami (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, USA). Mikrosinfekce byly prováděny v objemu 0.5 μl dodávaném během 2 min; injektory byly ponechány na místě pro 1 další minutu, aby se minimalizoval zpětný tok.

Umístění kanyly

Umístění kanyly bylo ověřeno na konci všech testů (viz Obrázek 1). Subjekty byly anestetizovány (isofluran, 2 – 3% v kyslíku) a transkardiálně perfundovány ledově chladným 4% paraformaldehydem (PFA) ve vodě (pH 7.4) a mikroinfikovány krezylovou fialkou (0.5 μl / strana). Mozky pak byly fixovány přes noc v 4% PFA a ekvilibrovány v 30% sacharóze v PFA. Koronální řezy 40 μm byly shromážděny pomocí kryostatu (Thermo Scientific HM-525) a umístění byla ověřena pod mikroskopem. Z analýzy bylo vyloučeno čtyřicet subjektů (14 pro CeA, 16 pro BlA a 10 pro BNST) z důvodu nesprávného umístění kanyly. Data z nesprávných umístění byla analyzována, aby pomohla interpretovat specifičnost efektů pro dané místo.

Obrázek 1

Kresba řezů mozku koronálních krys. Tečky představují místa vpichu do centrálního jádra amygdaly (CeA) (a), bazolaterálního jádra amygdaly (BlA) (b) a jádra lůžka stria terminalis (BNST) (c) zahrnutá do analýzy dat. ...

Imunohistochemie CRF

Behaviorální procedura, perfúze a imunohistochemie

Potkani (n= 22) byly dietovány v cyklech po dobu 7 týdnů, anestetizovány a perfundovány 2 – 4 h poté, co byly přepnuty z chutné stravy na strava pro strava (P→C fáze) nebo z potravy chow na chutnou stravu (C→P fáze). Krysy byly anestetizovány a poté transkardiálně perfundovány fyziologickým roztokem + 2% (hm./obj.) Dusitanem sodným (pH = 7.4) a následně 4% paraformaldehydem pufrovaným v Borax (pH = 9.5). Krysy se poté dekapitovaly a mozky se okamžitě shromáždily, umístily se do xXUMUM ml 20% PFA a skladovaly se v 4% sacharóze v roztoku 30% PFA při 4 ° C až do nasycení.

Pro vizualizaci CRF byly mozky rozřezány na 40 μm koronální řezy pomocí kryostatu a následně uloženy v kryoprotektantu při -20 ° C. Každá šestá sekce (240 μm od sebe) celého CeA, BlA a BNST byla vybrána systematickým náhodným způsobem a zpracována pro imunocytochemii. Volně plovoucí řezy byly promyty v pufrovaném fyziologickém roztoku fosforečnanu draselného (KPBS). Po počátečním promytí byly řezy inkubovány v 0.3% roztoku KPBS s peroxidem vodíku po dobu 30 minut, aby byly blokovány endogenní peroxidázy. Řezy byly poté znovu promyty a umístěny na 3 hodiny do blokovacího roztoku (0.25% normální kozí sérum, 100% Triton X0.1 a 2% hovězího sérového albuminu). Řezy byly poté přeneseny do primární protilátky (ředění 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) v blokujícím roztoku a inkubovány po dobu 72 hodin při 4 ° C. Po dalším promytí byly řezy inkubovány do sekundární protilátky (ředění 1: 1000, biotinylovaná anti-králičí (BA-1000) Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornie) v blokujícím roztoku po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Řezy byly promyty a poté inkubovány v roztoku avidin – biotin křenová peroxidáza ABC (Vector Laboratories) v blokujícím roztoku po dobu 1 hodiny. Řezy byly poté inkubovány za použití soupravy substrátu diaminobenzidinu (Vector Laboratories) podle pokynů výrobce a jakmile byla reakce dokončena, byly řezy opláchnuty v KPBS, namontovány na sklíčka a ponechány přes noc sušit. Následující den byla sklíčka dehydratována za použití odstupňovaných koncentrací alkoholu a krycí sklíčka za použití DPX mountantu (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Kvantifikace buněčných těl CRF +

Kvantifikace buněčných těl CRF + byla provedena v souladu s nestranným stereologickým přístupem. Série řezů byla analyzována pro každou barvicí dávku. Řezy byly analyzovány pomocí mikroskopu Olympus (Center Valley, PA, USA) BX-51 vybaveného živou videokamerou Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Kanada), tříosé motorizované jeviště MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, USA) a osobní počítačovou pracovní stanici. Všechny počty buněk byly provedeny na kódovaných sklíčkách zkoušejícím slepým vůči podmínkám léčby. Každá oblast byla nastíněna prakticky na digitalizovaném obrazu každé náhodně vybrané sekce pomocí modulu workflow optického frakcionátoru softwaru Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, USA). Všechny obrysy byly nakresleny při nízkém zvětšení za použití objektivu Olympus PlanApo N 2X s numerickou aperturou 0.08 a byly spočítány za použití objektivu Olympus UPlanFL N 40X s numerickou aperturou 0.75. Rámeček mřížky a rámec pro počítání byly nastaveny na 275 × 160 μm. Byla použita ochranná zóna 2 μm a výška disektoru 20 μm. Zmrazené sekce byly původně nařezány na nominální tloušťku 40 μm. Imunofarbení a montáž vede ke změně tloušťky řezu, která byla měřena na každém místě počítání. Software vypočítal průměrnou tloušťku řezu a použil se k odhadu celkového objemu oblasti vzorku a celkového počtu buněk CRF +.

Statistická analýza

Studentské t- testy byly použity k analýze faktorů se dvěma úrovněmi. ANOVA byly provedeny pro analýzu faktorů s více než dvěma úrovněmi. Po významném omnibusovém účinku ANOVA (p<0.05), Fisherova LSD post hoc byly použity srovnávací testy. Dunnettův test byl použit ke stanovení, zda R121919 normalizoval příjem Chow / Chutný krysy ošetřené vehikulem Čau čau-fed úrovně. Použité softwarové / grafické balíčky byly Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, USA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, USA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, USA) a PASW Statistiky 18.0 (SPSS, Chicago, IL, USA).

VÝSLEDKY

Účinky mikroinfúze R121919 do CeA

Nadměrný příjem chutného jídla

Chcete-li zjistit, zda CRF₁ receptory v CeA zprostředkovávají nadměrný příjem chutného jídla u potkanů krmených dietou, mikroinfuzované místo specificky selektivní CRF₁ receptorový antagonista R121919 do této oblasti mozku a měřil příjem potravy na začátku roku 2006 P fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 2a, příjem chutných krmiv ošetřených vehikulem Chow / Chutný krysy byly dvojnásobně vyšší než u kontrolních zvířat Čau čau krysy. Antagonismus CeA CRF₁ receptory plně zablokovaly toto nadměrné stravování chutných potravin Chow / Chutný krysy, aniž by to ovlivnilo příjem potravy u kontrolních krys (Čau čau, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Chutný, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc srovnání odhalilo, že nejvyšší dávka R121919 (1.5 μg / strana) významně snížila chutný příjem potravy ve srovnání s vehikulem v Chow / Chutný krysy. Příjem Chow / Chutný krysy po mikroinfuzi 1.5 μg / vedlejší dávka se významně nelišily od příjmu léčeného vehikulem Čau čau krysy. Potvrzuje specifičnost účinků pro CRF₁ receptory v CeA, nebyl pozorován žádný účinek na příjem potravy u subjektů s nesprávně umístěnými kanyly (Chow / Chutný, F (2, 2) = 4.32, NS).

Obrázek 2

Účinky mikroinfúze selektivního faktoru uvolňujícího kortikotropin-1 (CRF₁) antagonista receptoru R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v centrálním jádru amygdaly (CeA) při nadměrném stravování chutného jídla, pravidelná hypofagie ...

Hypophagia pravidelného stravování strava

Chcete-li zjistit, zda CRF₁ receptory v CeA zprostředkovávají hypofágii potravy u krmení u potkanů s cyklem diety, mikroinfuzovali R121919 do této oblasti mozku a měřili příjem potravy na začátku C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 2b, příjem ošetřeného vozidla Chow / Chutný krysy byly ∼1 / 3 z příjmu léčeného vehikulem Čau čau krysy (hypofagie). Léčba R121919em neovlivnila hypofágii pravidelného krmení Chow / Chutný krysy (Chow / Chutný, F (2, 12) = 0.14, NS). Potvrzuji výsledky získané v roce 2006 P fáze, mikroinfúze R121919 v CeA neovlivňovala příjem chow u kontroly Čau čau krysy (Čau čau, F (2, 20) = 0.01, NS).

Akutní úzkostné chování vyvolané stahováním

Zjistit, zda CeA CRF₁ receptory zprostředkovávají negativní emoční stav vyvolaný odebíráním chutného jídla u cyklovaných potkanů, do této oblasti mozku jsme specificky vložili místo R121919 a změřili úzkostné chování pomocí testu světelného a tmavého boxu 5 h do C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 2c, krysy akutně ustoupily od chronického, přerušovaného přístupu k vysoce chutné stravě, vykazovaly výrazné zkrácení času stráveného ve světelné části světelně tmavé krabičky. Mikroinfúze 1.5 μg / strana R121919 v CeA, dávka, která účinně snížila nadměrné stravování chutného jídla, plně blokovala úzkostné chování zvýšením času stráveného ve světelné oblasti krabice v Chow / Chutný krysy, aniž by to ovlivnilo chování v Čau čau krysy (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Potvrzení specifičnosti účinků pro CRF₁ receptory v CeA, nebyl pozorován žádný účinek na příjem potravy u subjektů s nesprávně umístěnými kanyly (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Účinky mikroinfúze R121919 do BlA

Nadměrný příjem chutného jídla

Chcete-li zjistit, zda BlA CRF₁ receptory zprostředkovávají nadměrné stravování chutného jídla u potkanů s cyklem výživy, do této oblasti mozku jsme specificky vložili místo R121919, a změřili příjem potravy na začátku P fáze. Na rozdíl od toho, co bylo pozorováno po podání R1219191 do CeA, jak je ukázáno v Obrázek 3a bilaterální mikroinfúze selektivního CRF₁ Antagonista receptoru do BlA významně neovlivňoval chutný příjem potravy Chow / Chutný krysy (Chow / Chutný, F (2, 26) = 1.56, NS). Stejně tak pravidelná spotřeba chow v roce 2007 Čau čau krysy nebyly ovlivněny mikroinfuzí R121919 (Čau čau, F (2, 18) = 0.52, NS).

Obrázek 3

Účinky mikroinfúze selektivního faktoru uvolňujícího kortikotropin-1 (CRF₁) antagonista receptoru R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v bazolaterálním jádru amygdaly (BlA) při nadměrném stravování chutného jídla, pravidelná hypofagie ...

Hypophagia pravidelného stravování strava

Chcete-li zjistit, zda CRF₁ receptory v BlA zprostředkovávají hypofágii chow u cyklovaných potkanů, mikroinfuzovali R121919 do této oblasti mozku a měřili příjem potravy na začátku C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 3b, po mikroinfuzi CRF bylo pozorováno významné zvýšení pravidelného příjmu potravy₁ antagonista receptoru v BlA Chow / Chutný krysy (Chow / Chutný, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Ve skutečnosti nejvyšší dávka (1.5 μg) R121919 mikroinfundovaná v BlA během C fáze významně zvýšila spotřebu pravidelné krmné stravy o 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) procent ve srovnání s ošetřeným vehikulem Čau čau krysy. R121919 utlumil hypofagii vyvolanou abstinencí při nejvyšší injekční dávce, ale ne zcela blokoval. Potvrzuji údaje získané v P fáze, mikroinfúze R121919 neovlivňovala pravidelný příjem chow v Čau čau krysy (Čau čau, F (2, 20) = 0.25, NS). Potvrzuje specifičnost účinků pro CRF₁ receptorů v BlA, nebyl pozorován žádný účinek na příjem potravy u subjektů s nesprávně umístěnými kanyly (Chow / Chutný, F (2, 8) = 0.50, NS).

Akutní úzkostné chování vyvolané stahováním

Chcete-li zjistit, zda BlA CRF₁ receptory zprostředkovávají negativní emoční stav vyvolaný akutním odebíráním chutného jídla u cyklovaných potkanů, do této oblasti mozku jsme specificky vložili místo R121919 a změřili úzkostné chování 5 h do C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 3c, chutné jídlo stažené Chow / Chutný krysy strávily méně času ve světelné komoře ve srovnání s Čau čau krysy (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, mikroinfundovaný do BlA, významně neovlivnil čas strávený ve světelné oblasti (DÁVKA: F (1, 39) = 0.01, NS).

Účinky mikroinfúze R121919 do BNST

Nadměrný příjem chutného jídla

Chcete-li zjistit, zda BNST CRF₁ receptory zprostředkovávají nadměrné stravování chutného jídla u potkanů krmených dietou, R121919 byl místně specificky mikroinfikován do této oblasti mozku a příjem potravy byl měřen na začátku P fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 4b, bilaterální mikroinfúze selektivního CRF₁ Antagonista receptoru do BNST neovlivnil významně chutný příjem potravy v roce 2006 Chow / Chutný krysy (Chow / Chutný, F (2, 18) = 0.33, NS). Stejně tak pravidelná spotřeba chow v roce 2007 Čau čau krysy nebyly ovlivněny mikroinfuzí R121919 (Čau čau, F (2, 20) = 1.03, NS).

Obrázek 4

Účinky mikroinfúze selektivního faktoru uvolňujícího kortikotropin-1 (CRF₁) antagonista receptoru R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v jádru postele stria terminalis (BNST) při nadměrném stravování chutného jídla, hypofagie ...

Hypophagia pravidelného stravování strava

Chcete-li zjistit, zda BNST CRF₁ receptory zprostředkovávají hypofágii potravy pro krmení u cyklovaných potkanů, do této oblasti mozku jsme mikroinfikovali R121919 a změřili příjem potravy na začátku C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 4aMikroinfúze R121919 neovlivňovala pravidelný příjem chow v roce 2005 Čau čau krysy (Čau čau, F (2, 14) = 0.03, NS). Podobně léčba R121919em neovlivnila hypofágii pravidelného krmení Chow / Chutný krysy (Chow / Chutný, F (2, 20) = 0.27, NS).

Akutní úzkostné chování vyvolané stahováním

Chcete-li zjistit, zda BNST CRF₁ receptory zprostředkovávají negativní emoční stav vyvolaný akutním odebíráním chutného jídla u cyklovaných potkanů, do této oblasti mozku jsme konkrétně aplikovali mikroinfúzní místo R121919 a měřili úzkostné chování 5 h po přechodu od P→C fáze. Jak je uvedeno v Obrázek 4c, chutné jídlo stažené Chow / Chutný krysy strávily méně času ve světelné komoře ve srovnání s kontrolou Čau čau krysy (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, oboustranně mikroinfundovaný v dávce 1.5 μg / stranu do BNST významně neovlivnil čas strávený ve světlé oblasti (DÁVKA: F (1, 33) = 0.47, NS).

Imunohistochemie CRF

Obrázek 5 ilustruje reprezentativní mikrofotografie CRF + buněk v CeA, BlA a BNST v Čau čau a Chow / Chutný krysy, po podle libosti chutný postup střídání stravy. Analýza CRF imunoreaktivity CeA odhalila, že mezi nimi je významný rozdíl Chow / Chutný a Čau čau krysy během obou C a P fáze (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Nebyly pozorovány žádné statisticky významné rozdíly mezi skupinami ani u BlA (F (2, 17) = 1.13, NS), ani u BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Obrázek 5

Reprezentativní mikrofotografie imunoreaktivity faktoru uvolňujícího kortikotropin (CRF) v centrálním jádru amygdaly (CeA) (a – d), bazolaterálním jádru amygdaly (BlA) (e – h) a jádru lůžka stria terminalis (BNST) ) (i – l) ...

DISKUSE

Tato studie byla navržena tak, aby funkčně identifikovala místo mozku odpovědné za nadměrný příjem vysoce chutné potravy u potkanů v režimu střídavého stravování zprostředkovaného CRF. Naše zjištění prokazují hlavní roli CeA při zprostředkování nadměrného příjmu vysoce chutného jídla. Kromě toho demonstrujeme, že systém CRF v BlA, odlišně od CeA, hraje roli v procesu devalvace, ke kterému dochází při snižování velikosti odměny za jídlo.

Již dříve jsme prokázali, že opakované cykly přístupu a akutního stažení ze sladké, vysoce chutné stravy vedou k nadměrnému jídlu chutného jídla ak akutní hypofágii závislé na stažení běžného krmiva a chování podobného úzkosti (Blasio et al, 2013a; Cottone et al, 2009a, 2009b). Zde se předpokládá, že nadměrné stravování je vedeno negativním emočním stavem vyvolaným opakovanými epizodami akutního stažení z vysoce chutných potravin prostřednictvím extrahypotalamického CRF – CRF.₁ mechanismus zprostředkovaný receptorovým systémem, který se podobá procesu podobnému „vznícení“, který je základem návykových poruch (Breese et al, 2005; Cottone et al, 2009a; Koob, 2008; Parylak et al, 2011).

Výsledky této studie ukazují, že CRF₁ Receptory CeA a BlA odlišně zprostředkovávají adaptace na krmení a chování podobné potkanům s chronickou stravou. Podávání selektivního CRF₁ antagonista receptoru v CeA blokoval jak nadměrné stravování, tak chování podobné úzkosti Chow / Chutný krysy, aniž by to ovlivnilo hypofágii nedostatečně přijímané, pravidelné stravy. Zajímavé je, že podávání R121919u do BlA zmírnilo hypofágii méně chutné stravy u chow (tj. Zvýšený pravidelný příjem chow) u Chow / Chutný krysy, aniž by to ovlivnilo nadměrné stravování nebo chování podobné úzkosti. Při mikroinfuzi v BNST neovlivnil R121919 žádnou z proměnných měřených v Chow / Chutný krysy (nadměrné stravování vysoce chutné stravy, příjem pravidelné krmné stravy a akutní stažení vyvolané úzkostné chování). Pozorované farmakologické účinky byly selektivní Chow / Chutný krysy, protože R121919, mikroinfundované uvnitř CeA, BlA nebo BNST Čau čau kontrolní krysy nevykazovaly žádný účinek. Proto CRF – CRF₁ Zdá se, že receptorový systém CeA a BlA odlišně zprostředkovává behaviorální výsledky vyplývající z chronického chutného stravování. Na druhé straně CRF – CRF₁ Receptorový systém BNST se nezdá být zapojen do behaviorálních adaptací vyvolaných chutnou změnou stravy.

Naše behaviorální a farmakologické nálezy byly podpořeny pozorováním, že imunoreaktivita CRF v rámci CeA of Chow / Chutný krysy byly ve srovnání s Čau čau kontrolní krysy během stažení z a po obnovení přístupu k vysoce chutné stravě (Cottone et al, 2009a). Je zajímavé, že v BlA nebo BNST nebyl pozorován žádný významný rozdíl v imunoreaktivitě CRF mezi skupinami. Zvýšená imunoreaktivita CRF pozorovaná v CeA Chow / Chutný krysy odpovídají našemu předchozímu zjištění, že akutní stažení z chutné stravy je spojeno se zvýšeným uvolňováním CRF v CeA (Cottone et al, 2009a). Na rozdíl od toho, co bylo uvedeno dříve, však obnovení přístupu k chutné stravě nezpůsobilo návrat exprese CRF v CeA na kontrolní úrovně. Rozdíl mezi výsledky získanými zde a předchozím pozorováním může souviset s různým časovým bodem sběru mozku a různým anatomickým rozlišením technik přijatých k měření exprese CRF. Pozorované zvýšení exprese CRF v CeA během stažení a po obnovení přístupu k chutné stravě je nicméně v souladu se selektivními účinky blokády úzkostného chování (během stažení) a nadměrného stravování (obnovení přístupu) u Chow / Chutný krysy. Zjevná nekonzistence mezi těmito dvěma studiemi může být tedy interpretována kolektivně takto: během akutního chutného stažení potravy vzrůstá exprese CRF v CeA u krys krmených dietou ve srovnání s kontrolami a je odpovědná za vznik negativního účinku. Exprese CeA CRF zůstává změněna až do prvních hodin vysoce chutného přístupu, což způsobuje nadměrné stravování. Po nadměrné chutné stravě se však CRF vrací zpět na kontrolní úrovně (Cottone et al, 2009a).

Ukázané behaviorální, farmakologické a molekulární výsledky podporují hypotézu, že CRF – CRF₁ Receptorový systém v CeA hraje důležitou roli při zprostředkování negativního afektivního stavu a nadměrného příjmu chutného jídla u potkanů s cyklem výživy, podobně jako to, co bylo značně prokázáno pro závislost na alkoholu a drogách (Koob, 2010). Ve skutečnosti krysy závislé na ethanolu vykazují zvýšené extracelulární uvolňování CRF v CeA během vysazení a podávání antagonisty receptoru CRF do CeA je schopno blokovat samovolné podávání eskalovaného ethanolu během vysazení (Děsit se čeho et al, 2006; Merlo Pich et al, 1995). Analogicky zvířata závislá na opiátech vykazují zvýšenou expresi CRF v CeA během stažení (Květen et al, 2003) a blokáda receptorů CRF v CeA, ale ne BNST, snižuje behaviorální známky stažení (Heinrichs et al, 1995; McNally a Akil, 2002). Klíčová role pro CRF – CRF₁ Systém v CeA byl také prokázán v závislosti na nikotinu. Odběr nikotinu vysráženého mecamylaminem je skutečně spojen s hyperaktivací CRF – CRF₁ receptorový systém v CeA (George et al, 2007) a intra-CeA, ale ne uvnitř-BlA, mikroinfúze CRF₁ antagonista receptoru snižuje zvýšení závislosti na odběru nikotinu v prahu odměny mozku (Bruijnzeel et al, 2012). U potkanů závislých na kanabinoidech je srážený odběr spojen s výrazným zvýšením koncentrace extracelulárního CRF v CeA (Rodriguez de Fonseca et al, 1997). Celkově tento důkaz silně podporuje hypotézu, že CRF – CRF₁ Receptorový systém v CeA je klíčovým mediátorem akutního abstinenčního negativního účinku, spolu s nadměrným příjmem léku a alkoholu během závislosti. Naše výsledky rozšiřují tuto znalost na nadměrné stravování vysoce chutných potravin, což naznačuje, že dochází k analogickým neuroadaptacím.

Výsledky této studie ukazují, že chutná hypofágie závislá na odběru potravin u méně chutné stravy u strava je oslabena mikroinfuzí v BlA selektivního CRF.₁ antagonista receptoru, zatímco nadměrné stravování a chování podobné úzkosti nebyly léčbou intra-BlA ovlivněny. Rozdílné zapojení BlA CRF – CRF₁ Receptorový systém ve výsledcích diety-cyklování naznačuje, že hypofagie chow může představovat behaviorální proces nezávislý na chování podobném úzkosti. Tato zjištění jsou spíše v souladu s hypotézou, že BlA zprostředkovává smyslové a motivační aspekty motivačně významných událostí. Opravdu existuje značný důkaz, že BlA je kriticky důležitá při zprostředkování devalvačních procesů a averzivních reakcí na snižování odměn (tj. Crespiho efekt, postupný negativní kontrast, devalvace odměn atd.); Hatfield et al, 1996; Salinas et al, 1996; Wellmane et al, 2005), a proto může hypofágie vyplývající z přechodu z vysoce chutné stravy na méně chutnou stravu pro chow představovat spíše hedonální devalvační proces než mechanismus závislý na energetické homeostáze (tj. nezávislý na předchozím příjmu energie nebo přírůstku tělesné hmotnosti) ; Cottone et al, 2008, 2009b). Blokáda CRF₁ Receptory v BlA jsou proto hypotetizovány, aby se snížila hypofágie chow (tj. aby se zvýšil příjem chow) oslabením procesu devalvace, ke kterému dochází při přechodu z vysoce chutného jídla na méně chutný chow. Pro tento kontext je také zřejmá zjevná nekonzistence mezi molekulárními a behaviorálními / farmakologickými výsledky získanými v BlA. Přestože CRF₁ Antagonista receptoru byl schopen redukovat velikost hypofágie čau, když byl injikován do BlA, nebyly pozorovány žádné významné rozdíly v imunoreaktivitě CRF v této oblasti při porovnání kontrolních potkanů a kontrolních skupin s dietou. Tento zjevný nesoulad lze vysvětlit s ohledem na to, že procesy devalvace závislé na BlA u alternativních odměn se vyskytují fyziologicky a mají důležitý vývojový význam při výběru potravin, které poskytují nejvyšší hodnotu odměny / energie (Murray et al, 2011). Jako takové lze argumentovat, že zprostředkování těchto procesů v BlA nevyžaduje neuroadaptace v systému CRF (podobné těm pozorovaným v CeA). Na podporu této hypotézy, zatímco nadměrné stravování vyžaduje vývoj chronického stravování, dochází k hypofágii méně preferovaného alternativního krmení po prvním přechodu z vysoce chutné stravy zpět na pravidelné krmení (Cottone et al, 2008). Kromě toho je důležité zdůraznit, že na základě výsledků získaných injekcí antagonisty receptoru CRF1 do BlA a CeA, CRF₁ Zde pozorovaná hypofagie závislá na receptoru se zdá být odlišným behaviorálním procesem než anhedonie pozorovaná při vysazení léku. Bylo však prokázáno, že akutní stažení z přerušovaného přístupu k chutnému jídlu vyvolává další hypohedonické reakce, jako je zvýšená nehybnost v testu nuceného plavání a snížená odpověď v progresivním poměru poměru zesílení (Cottone et al, 2008; Iemolo et al, 2012).

Je pozoruhodné zmínit, že ačkoli Chow / Chutný krysy byly chronicky stravovány cyklicky, zde se projevují behaviorální a neurochemické změny během akutního, nikoli chronického stažení z chutné stravy. Zdůraznění tohoto aspektu je zvláště důležité, protože ve výzkumu závislostí jsou hluboké rozdíly v behaviorálních, farmakologických a neurochemických důsledcích akutních vs byla pozorována protahovaná abstinence (Heilig et al, 2010; Koob a Le Moal, 2008). Budoucí studie budou cenné, aby určily, jak může prodloužené stažení ovlivnit výsledky cyklování stravy.

Relevantním bodem diskuse je, zda lze nadměrné chutné chování při příjmu potravy, které pozorujeme v kontextu tohoto zvířecího modelu, považovat za „kompulzivní“. V preklinickém výzkumu závislostí byl termín „kompulzivní“ široce používán k popisu nadměrného příjmu léku během abstinence, který je způsoben negativním afektivním stavem a ulevuje se mu po obnovení přístupu k léku (Ahmed a Koob, 2005; Koob a Le Moal, 2005). Toto přijetí pojmu „kompulzivní“ je založeno na koncepčním rámci, v němž jsou kompulzivní poruchy charakterizovány úzkostí a stresem před spácháním kompulzivního chování, a zmírněním stresu provedením kompulzivního chování (Koob, 2009; Koob a Volkow, 2010). V kontextu zde použitého zvířecího modelu lze nadměrné stravovací chování interpretovat jako formu „kompulzivního“ chování vzhledem k dříve publikovaným důkazům, že krysy s přerušovaným přístupem k chutné stravě vykazují negativní emoční stav během chutného odnětí potravy, charakterizované úzkostným a depresivním chováním, které se ulevilo při obnovení přístupu (Cottone et al, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012).

Shrnuto, výsledky této studie poskytují kritické funkční důkazy, že CRF – CRF₁ Receptorový systém CeA a BlA má odlišnou roli při zprostředkování maladaptivního chování vyplývajícího z přerušovaného přístupu k chutnému jídlu. V CeA CRF – CRF₁ Receptorový systém je klíčovým mediátorem nadměrného požívání chutných potravin a negativního vlivu závislého na stažení, zatímco v BlA zprostředkovává averzivní reakce subjektů vyvolané snížením odměny.

FINANCOVÁNÍ A ZVEŘEJNĚNÍ

Autoři neuvádějí žádný střet zájmů.

Poděkování

Děkujeme Duncanu Momaneyovi, Aditi R. Narayanovi, Jině Kwakové za technickou pomoc a Tamarě Zericové za technickou a redakční pomoc. Děkujeme také Eleně F Crawfordové za užitečné návrhy týkající se imunohistochemie CRF. Tato publikace byla umožněna čísly grantů DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 a AA016731, od Národního ústavu pro zneužívání drog (NIDA), Národního ústavu pro duševní zdraví (NIMH) a Národního ústavu pro zneužívání alkoholu a alkoholismus ( NIAAA), Peter Paul Career Development Professorship (PC) a Boston University's Undergraduate Research Opportunities Program (UROP). Tento výzkum byl podpořen také NIH programy intramurálního výzkumu Národního ústavu pro zneužívání drog a Národním ústavem pro zneužívání alkoholu a alkoholismus, NIH, DHHS. Za jeho obsah odpovídají výhradně autoři a nemusí nutně představovat oficiální názory National Institutes of Health.

Poznámky pod čarou

Doplňující informace doprovází článek na webu Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

Doplňkový materiál

Doplňující informace

Klikněte zde pro další datový soubor.^{(129K, pdf)}

Reference

Ahmed SH, Koob GF. Přechod na drogovou závislost: model negativního zesílení založený na alostatickém snížení funkce odměny. Psychofarmakologie (Berl) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Zvířecí modely bingeingu cukru a tuku: vztah k závislosti na potravě a zvýšení tělesné hmotnosti. Methods Mol Biol. 2012; 829: 351 – 365. [PubMed]
Bakshi VP, Kalin NH. Hormon uvolňující kortikotropin a zvířecí modely úzkosti: interakce gen-prostředí. Biol Psychiatry. 2000; 48: 1175 – 1198. [PubMed]
Bale TL. Citlivost na stres: dysregulace cest CRF a vývoj onemocnění. Horm Behav. 2005; 48: 1 – 10. [PubMed]
Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant vyvolává úzkost u potkanů odebraných z chutného jídla: role centrálního amygdaly Neuropsychofarmakologie: 10.1038 / npp.2013.153 [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioidní systém v mediální prefrontální kůře zprostředkovává stravování podobné návykovým návykům Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Koncepční rámec etiologie alkoholismu: hypotéza „rozněcování“ / stresu. Psychopharmacology (Berl) 2005; 178: 367–380. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M., et al. Blokáda receptorů CRF1 v centrálním jádru amygdaly zmírňuje dysforii spojenou s abstinencí nikotinu u potkanů. Pharmacol Biochem Behav. 2012; 101: 62 – 68. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Návrh 2,5-dimethyl-3- (6-dimethyl-4-methylpyridin-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] pyrimidin (NBI 30775 / R121919) a vztahy mezi strukturou a aktivitou řady silných a orálně aktivní antagonisté receptoru faktoru uvolňujícího kortikotropin. J Med Chem. 2004; 47: 4787 – 4798. [PubMed]
Corwin RL. Bingeing krysy: model přerušovaného nadměrného chování. Chuť. 2006; 46: 11 – 15. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Corwin RL, Grigson PS. Přehled sympozia - závislost na jídle: fakt nebo fikce. J Nutr. 2009; 139: 617 – 619. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Krmná mikrostruktura u stravou indukované obezity citlivé vůči rezistentním potkanům: centrální účinky urokortinu 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, et al. Nábor systému CRF zprostředkovává temnou stránku kompulzivního stravování. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016 – 20020. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Přerušovaný přístup k preferované potravě snižuje posilovací účinnost krmiva u potkanů. Am J Physiol Regul Integr Comp Compioliol. 2008; 295: R1066 – R1076. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Konzumativní, úzkostné a metabolické adaptace u samic potkanů se střídavým přístupem k preferované potravě. Psychoneuroendokrinologie. 2009b; 34: 38 – 49. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Antagonismus sigma-1 receptorů blokuje kompulzivní stravování. Neuropsychofarmakologie. 2012; 37: 2593 – 2604. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF zprostředkovává anxiogenní a anti-obohacující, ale nikoli anorektické účinky PACAP Neuropsychofarmakologiedoi: 10.1038 / npp.2013.113 [PMC bezplatný článek] [PubMed] [Cross Ref]
Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Faktor uvolňující kortikotropin v centrálním jádru amygdaly zprostředkuje zvýšené samo-podání ethanolu u odebraných potkanů závislých na ethanolu. J Neurosci. 2006; 26: 11324 – 11332. [PubMed]
George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH, et al. Aktivace systému CRF-CRF1 zprostředkovává zvýšení vyvolané odebíráním nikotinu u potkanů závislých na nikotinu. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198 – 17203. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, et al. In vitro charakterizace R121919: nový nepeptidový antagonista receptoru faktoru 1 (CRF1) uvolňujícího kortikotropin pro potenciální léčbu depresí a poruch souvisejících s úzkostí. Společnost pro neurovědy. 2000; Abstrakt 807: 4 – 9.
Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Role chutného jídla a hladu jako spouštěcích faktorů ve zvířecím modelu stresově vyvolaného přejídání. Int J Eat Disord. 2003; 34: 183 – 197. [PubMed]
Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Neurotoxické léze basolaterálního, ale nikoli centrálního amygdaly interferují s Pavlovianovými účinky druhého řádu a devalvací zesilovače. J Neurosci. 1996; 16: 5256 – 5265. [PubMed]
Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Akutní stažení, vleklá abstinence a negativní vliv na alkoholismus: jsou spojeny. Addict Biol. 2010; 15: 169 – 184. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Heilig M, Koob GF. Klíčovou roli faktoru uvolňujícího kortikotropin v závislosti na alkoholu. Trendy Neurosci. 2007; 30: 399 – 406. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Potlačení faktoru uvolňujícího kortikotropin v amygdale zmírňuje averzivní důsledky stažení morfinu. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74 – 80. [PubMed]
Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, et al. Vyřazení z chronického přerušovaného přístupu k vysoce chutnému jídlu vyvolává u kompulzivních stravovacích potkanů depresivní chování. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593 – 602. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Koob GF. Role mozkových stresových systémů ve závislosti. Neuron. 2008; 59: 11 – 34. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Koob GF. Neurobiologické substráty pro temnou stránku kompulzivity ve závislosti. Neurofarmakologie. 2009; 56 (doplněk 1: 18 – 31. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Koob GF. Role CRF a peptidů souvisejících s CRF na temné straně závislosti. Brain Res. 2010; 1314: 3 – 14. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Koob GF, Heinrichs SC. Role faktoru uvolňujícího kortikotropin a urokortinu v behaviorálních reakcích na stresory. Brain Res. 1999; 848: 141 – 152. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. Plasticity neurocircuitry odměny a „temná strana“ drogové závislosti. Nat Neurosci. 2005; 8: 1442 – 1444. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. Recenze. Neurobiologické mechanismy pro motivační procesy soupeře ve závislosti. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113 – 3123. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry of addiction. Neuropsychofarmakologie. 2010; 35: 217 – 238. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Úloha faktoru uvolňujícího kortikotropin v závislosti na drogách: potenciál farmakologické intervence. CNS Drugs. 2011; 25: 271 – 287. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Vliv Maj, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morfin a kokain na biosyntézu CRF v centrálním jádru krysy amygdaly. Neuropeptidy. 2003; 37: 105 – 110. [PubMed]
McNally GP, Akil H. Role hormonu uvolňujícího kortikotropin v amygdale a jádru postele stria terminalis v behaviorálních, modulačních bolestech a endokrinních důsledcích stažení opiátů. Neurovědy. 2002; 112: 605 – 617. [PubMed]
Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M., Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF, et al. Zvýšení hladin imunoreaktivity podobného faktoru uvolňujícímu kortikotropin v amygdale probuzených potkanů během zátěžového stresu a odběru ethanolu, měřeno mikrodialýzou. J Neurosci. 1995; 15: 5439 – 5447. [PubMed]
Murray E, Wise S, Rhodos S. 2011Co mohou různé mozky dělat s odměnou In Gottfried JA (eds) .Neurobiologie senzace a odměny, kapitola 4 CRC Press: Boca Raton, FL, USA [PubMed]
Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Temná stránka závislosti na jídle. Physiol Behav. 2011; 104: 149 – 156. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Paxinos G, Watson C. 2007The Brain Rat in Stereotaxic Coordinates6th edn.Academic Press
Pellegrino A. Stereotaxický atlas mozku krysy. Plenum: New York; 1979.
Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Aktivace faktoru uvolňujícího kortikotropin v limbickém systému během vysazení kanabinoidů. Věda. 1997; 276: 2050 – 2054. [PubMed]
Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Methoxymetopon, vysoce účinný mu opioidní agonista, bifázicky ovlivňuje příjem ethanolu u potkanů preferujících alkohol na Sardinii. Psychofarmakologie (Berl) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
Salinas JA, rodič MB, McGaugh JL. Léze kyseliny ibotenové basolaterálního komplexu amygdaly nebo centrálního jádra odlišně ovlivňují odpověď na snížení odměny. Brain Res. 1996; 742: 283 – 293. [PubMed]
Shalev U, Erb S, Shaham Y. Role CRF a dalších neuropeptidů při stresem navozené obnově vyhledávání drog. Brain Res. 2010; 1314: 15 – 28. [PMC bezplatný článek] [PubMed]
Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Charakterizace hypothalamického peptidu ovčích zbytků 41, který stimuluje sekreci kortikotropinu a beta-endorfinu. Věda. 1981; 213: 1394 – 1397. [PubMed]
Volkow ND, O'Brien CP. Problémy pro DSM-V: měla by být obezita zahrnuta jako porucha mozku. Jsem J. Psychiatrie. 2007; 164: 708–710. [PubMed]
Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA zprostředkovaná inhibice bazolaterálního amygdaly blokuje devalvaci odměny u makaků. J Neurosci. 2005; 25: 4577 – 4586. [PubMed]
Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Epidemiologické a ekonomické důsledky globálních epidemií obezity a cukrovky. Nat Med. 2006; 12: 62 – 66. [PubMed]