Efekto de ΔFosB sobreexpremi sur opioide kaj cannabinoide-ricevilo-amasigita signalo en la kerno accumbens (2011)

Neurofarmacologio. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

Sim-Selley LJ, Cassidy-parlamentano, Sparta A, Zachariou V, Nestler EJ, Selley DE.

fonto

Fako de Farmakologio kaj Toxikologio kaj Instituto por Drogoj kaj Alkohol-Studoj, Virginia Commonwealth University Lernejo de Medicino, Richmond, VA 23298, Usono.

abstrakta

La stabila transkriba faktoro ΔFosB estas induktita en la kerno accumbens (NAc) per kronika ekspozicio al pluraj medikamentoj de misuzo, kaj transgena esprimo de ΔFosB en la striato plibonigas la rekompencajn trajtojn de morfino kaj kakao.e. Tamen, la mekanisma bazo por ĉi tiuj observoj estas nekomplete komprenata. Ni uzis bitransgenian musan modelon kun induktebla esprimo de ΔFosB en dopamino Neŭronaj striataj strukturoj de D (1), kunhavantaj receptorojn kaj dinorfojn, por determini la efikon de esprimo de FosB sur signalo en opoziciaj kaj cannabinoidaj riceviloj en NAc. Rezultoj montris, ke la agado de G-proteina mediado de opioidaj mu kaj inhibicio de adenylyl-ciklaso estis plibonigitaj en la NAc de musoj kiuj esprimis ΔFosB. Simile, kappa opiadi inhibicio de adenylyl-ciklaso estis plibonigita en la ΔFosB-esprimantaj musoj. Kontraste, kanabinaj receptoroj-mediaciitaj signaloj ne diferencis inter musoj troeksprimante ΔFosB kaj kontrolaj musoj. TĈi tiuj trovoj sugestas, ke signaloj de opioidaj kaj cannabinoidaj riceviloj estas diferencialmente modulataj per esprimo de BFosB, kaj indikas, ke la esprimo de FosB povus produkti iujn el ĝiaj efikoj per plibonigita signalo mu kaj kappa opioid-ricevilo en la NAc.

Ŝlosilvortoj: G-proteino, adenililciklazo, striato

1. Enkonduko

Opioid receptoroj kaj cannabinoid CB₁ riceviloj (CB₁R) estas la neŭrobiologiaj celoj por du vaste uzataj drogoklasoj, kiuj inkluzivas morfinon, heroinajn kaj preskribitajn opiozojn kaj marianauanon ()⁹-tetrahidrocannabinol (THC)), respektive. La akraj efikoj de opiáceos kaj cannabinoides estas mediados por riceviloj kunigitaj de G-proteinoj kiuj aktivigas ĉefe G_{mi / o} proteinoj kaj produktas kontraŭfendajn respondojn kiel inhibicio de adenylyl-ciklaso (Childers, NENIU, Childers, et al., 1992, Howlett, et al., 2002). La motoraj, memoraj difektoj kaj psikoaktivaj efikoj de⁹-THC estas produktita de CB₁R (Huestis, et al., 2001, Zimmer, et al., 1999), kiuj estas vaste distribuitaj en la cerbo, kun altaj niveloj en la bazaj ganglioj, hipokampo kaj cerebelo (Herkenham, kaj aliaj, 1991). La analgeziaj kaj rekompencaj efikoj de plej multaj klinike gravaj kaj misuzitaj opio-drogoj estas mediaciitaj ĉefe de muopiciaj riceviloj (MOR) (MOR)Matthes, kaj aliaj, 1996), kiuj estas riĉigitaj en la likva sistemo kaj trunko de la cerbo (Mansour, kaj aliaj, 1994). La sistemo mesolímbico, formita de projekcioj dopaminérgicas de la areo ventral tegmental (VTA) al la kerno accumbens (NAc), ĝi havas gravan paperon en la efektoj gratificantes de la opiáceos kaj la cannabinoides.Bozarth kaj Wise, 1984, Vaccarino, kaj aliaj, 1985, Zangen, et al., 2006), same kiel aliaj drogoj de misuzo (Koob kaj Volkow, 2010). Plie, endogenaj opiodeoj kaj kanabinoidaj sistemoj estas implikitaj en la rekompencaj efikoj de multoblaj klasoj de psikozaj drogoj (Maldonado, kaj aliaj, 2006, Trigo, et al., 2010). Tiel, estas grave klarigi mekanismojn per kiuj opioidoj kaj CB₁R signalado estas reguligita en la NAc.

Centra demando en la kampo de drogmanio estis identigi proteinojn, kiuj peras la transiron de akraj al longperspektivaj efikoj de psikozaj drogoj. La faktoro de transskribo AP-1 BFosB estas aparte interesa ĉar estas stabila varianto produkto de la rilato detranĉita fosb geno, kiu akumuliĝas post ripetata ekspozicio al drogoj de misuzo aŭ naturaj rekompencoj (McClung, kaj aliaj, 2004, Nestler, 2008, Nestler, kaj aliaj, 1999). Ni trovis, ke BFosB estas induktita en la cerbo post ripetata ekspozicio al morfino, Δ⁹-THC, kokaino aŭ etano, kun ĉiu drogo produktanta unikan regionan padronon de ΔFosB-esprimo (Perrotti, kaj aliaj, 2008). Konsekvenca trovo tra drogoj estis ke ΔFosB estis tre induktita en la striato, kie ĉiuj kvar drogoj induktis ΔFosB en la NAc-kerno kaj ĉiuj krom⁹-THC signife esprimis esprimon en la NAcŝelo kaj caudate-putamen.

Farmakologiaj studoj montris, ke kunhavo de dopamino D₁ ricevilo (D₁R) antagonisto SCH 23390 blokis inFosB-indukton en la NAc kaj caudate-putamen post intermita kokaina aŭ morfina administrado, sugestante la eblan gravecon de D₁R-esprimantaj neŭronoj (Muller kaj Unterwald, 2005, Nye, kaj aliaj, 1995). La efiko de ΔFosB-indukto sur mediatmediitaj kondutoj estis esplorita per bitransenaj musoj, kiuj esprimas ΔFosB en specifaj neuronaj populacioj de la NAc kaj dorsa striato (Chen, kaj aliaj, 1998). Musoj, kiuj esprimas FosB en dinorfinoj / D₁R pozitivaj neŭronoj en la NAc kaj dorsa striato (linio 11A) montras ŝanĝitajn respondojn al medikamentoj de misuzo, notinde plibonigita sentiveco al la rekompencaj efikoj de kokaino aŭ morfino (Colby, kaj aliaj, 2003, Kelz, et al., 1999, Zachariou, et al., 2006). Ĉi tiuj ŝanĝoj okazis en foresto de ŝanĝoj en la niveloj de MOR aŭ diversaj G-proteina subunuo. Tamen, la niveloj de dinorfino mRNA estis reduktitaj en la NAc de ΔFosB esprimante musojn (Zachariou, et al., 2006), sugestante, ke unu celo de ΔFosB estas geno kodanta endogenan opioid peptidon. ΔFosB-indukto ankaŭ povus produkti kondutajn ŝanĝojn per regulado de ricevila signalado en la NAc, sed ĉi tiu ebleco ne estis esplorita. Tial, la nunaj studoj uzis la modelon bitransgenia muso por determini ĉu troega esprimo de ΔFosB en dinorfinas / D₁R enhavanta striaŭra neŭronoj ŝanĝas MOR-mediata G-proteina agado kaj MOR- kaj KOR-mediata adenylyl-cikaza inhibicio en la NAc. La efiko de FosB sur CB₁R-mediaciita G-proteina agado ankaŭ estis taksita ĉar Δ⁹-THC-administrado induktas ΔFosB en la NAc (Perrotti, kaj aliaj, 2008) kaj oni scias, ke la sistemo endocannabinoida reguligas cirkvitojn kun rekompenco de cerboj (Gardner, 2005, Maldonado, kaj aliaj, 2006), sed la efiko de ΔFosB sur la endocannabinoida sistemo ne estis esplorita.

2. Materialoj kaj metodoj

2.1. Reakciaj

[³⁵S] GTPγS (1250 Ci / mmol), [α-³²P] ATP (800 Ci / mmol) kaj [³H] cAMP (26.4 Ci / mmol) estis aĉetita de PerkinElmer (Shelton, CT). ATP, GTP, GDP, cAMP, bova serumalbumino, creatina fosfokasezo, papaverino, imidazolo kaj WIN-55212-2 estis aĉetitaj de Sigma Aldrich (Sankta Luiso, MO). GTPγS estis aĉetita de Roche Diagnostic Corporation (Ĉikago, IL). DAMGO estis disponigita de la Programo pri Drogaroj de la Nacia Instituto pri Droguzado (Rockville, MD). Ekono-1-scintila fluido estis akirita de Fisher Scientific (Norcross, GA). Fluida scintila fluo estis akirita de ICN (Costa Mesa, CA). Ĉiuj aliaj kemiaĵoj estis akiritaj de Sigma Aldrich aŭ Fisher Scientific.

2.2. Musoj

Viraj bitransenaj musoj derivitaj de NSE-tTA (linio A) × TetOp-BFosB (linio 11) estis generitaj kiel priskribite en Kelz et al. (Kelz, et al., 1999). Bitransgeniaj musoj estis elpensitaj kaj kreskigitaj sur doksiciclino (100 µg en trinkakvo) por subpremi transgene-esprimon. Ĉe 8-aĝa aĝo, doxycycline estis preterlasita de la akvo por ke la duono de la musoj permesu transgenan esprimon, dum ceteraj musoj estis konservitaj en doksiciclino por subpremi la transgenon. Cerboj estis kolektitaj 8 semajnojn poste, la tempo ĉe kiu transcriptaj efikoj de ΔFosB estas maksimumaj (McClung kaj Nestler, 2003). Dua transgena muslinio estis uzata en kiu Δc-Jun, reganta negativa antagonisto de c-Jun, estas esprimita en D₁R / dinorfinoj kaj D₂R / enkephalinaj ĉeloj de la striato, hipokampo kaj parietala kortekso (Peakman, et al., 2003). C-Jun kaj rilataj Jun familiaj proteinoj dimerize kun Fos-familiaj proteinoj kaj ligas al la AP-1-ejo de celaj genoj por reguligi transskribon. Tamen, tranĉo de la N-finajxo de c-Jun (Δc-Jun) faras la kompleksan transskriban neaktivan kaj kapablan malhelpi la DNA-ligadon de aktivaj AP-1-kompleksoj. Viraj bitransenaj musoj derivitaj de NSE-tTA (linio A) × TetOp-FLAG-Δc-Jun (linio E) estis generitaj kiel priskribite en Peakman et al. (Peakman, et al., 2003). Bitransgeniaj musoj estis elpensitaj kaj kreskigitaj sur doksiciclino (100 µg en trinkakvo) por subpremi transgene-esprimon. Pups estis forprenitaj ĉe 3 semajnoj, genotipigitaj, kaj apartigitaj en grupojn, kun duono konservitaj sur doxycycline-akva akvo kaj duono sur regula trinkakvo por indukti FLAG-c-Jun-esprimon. Cerboj estis kolektitaj 6 semajnojn poste, la tempo ĉe kiu maksimumaj niveloj de FLAG-Δc-Jun estis mezuritaj (Peakman, et al., 2003). Ĉiuj bestaj proceduroj estis faritaj laŭ la Nacia Gvidaj Institutoj pri Sano por la Prizorgo kaj Uzo de Laboratoriaj Bestoj.

2.3. Preparado de Membranoj

Cerboj estis konservitaj ĉe −80 ° C ĝis la tago de la analizo. Antaŭ provado, ĉiu cerbo estis degelita, kaj la NAc estis dissekcita sur glacio. Ĉiu specimeno estis homogenigita en 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl₂1 mM EGTA, pH 7.4 (membrano-kuseneto) kun 20-batoj de vitra homogeniganto je 4 ° C. La homogenita estis centrifugita ĉe 48,000 × g je 4 ° C por 10 min, resuspendite en membran bufro, denove centrifugis ĉe 48,000 × g ĉe 4 ° C por 10-min kaj resuspendita en 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl₂0.2 mM EGTA, 100 mM NaCl, pH 7.4 (analizo-bufro). Proteinaj niveloj estis determinitaj per la metodo de Bradford (Bradford, NENIU) uzante bovan serumalbuminon (BSA) kiel la normo.

2.4. Stimulita Agonisto [³⁵S] Ligilo GTPγS

Membranoj estis antaŭ-kovataj por 10-minutoj ĉe 30 ° C kun adenozin-desinase (3-mU / ml) en analizo-bufro. Membranoj (5-10-µg-proteino) tiam estis kovataj por 2-hr ĉe 30 ° C en analizo-bufro enhavanta 0.1% (w / v) BSA, 0.1 nM [³⁵S] GTPγS, 30 µM PIB kaj adenozina desaminase (3 mU / ml) kun kaj sen taŭgaj koncentriĝoj de DAMGO aŭ WIN55,212-2. Nespecifa ligado estis mezurita per 20 µM GTPγS. La kovado finiĝis per filtrado tra filtriloj el vitra fibro GF / B, sekvitaj de 3-lavoj kun 3 ml malvarma glacio 50 mM Tris-HCl, pH 7.4. La radioaktiveco ligita estis difinita per likva spintofotometrilo post brilado post la nokta eltiro de la filtriloj en fluida skintila Ekono-1.

2.5. Analizo de Adenylyl Cyclase

Membranoj (5-25 µg proteino) estis antaŭkombinitaj kun adenozin-desasaza kiel priskribita supre, tiam kovataj por 15-min ĉe 30 ° C en ĉeesto aŭ foresto de 1µM-forskolino, kun aŭ sen DAMGO, U50,488H aŭ WIN55,212-2, en provanta bufro. 50 µM ATP, [α-³²P] ATP (1.5 µCi), 0.2 mM DTT, 0.1% (w / v) BSA, 50 µM cikla AMP, 50 µM GTP, 0.2 mM papaverino, 5 mM fosfocreatina, 20-unuoj / ml creatina fosfokasezo kaj adenosina desaminase. / ml) en fina volumo de 3 µl. En ĉi tiuj kondiĉoj, totala [α-³²P] cAMP rekuperita estis ĝenerale malpli ol 1% de la totala kvanto de aldonita [α-³²P] ATP en ĉiu specimeno. La reago finiĝis per bolado por 3 min kaj³²C) Cikla AMP estis izolita per la duala kolumno (Dowex kaj alumino) metodo de Salomon (Salomon, .uste). [³H] cAMP (10,000-dpm) estis aldonita al ĉiu tubo antaŭ kolumna kromatografio kiel interna normo. La radioaktiveco estis difinita per likva spintofotometrilo (efikeco de 45%) ³H) post kiam 4.5-ml de eluito estis solvita en 14.5-ml da Ecolite-scintila fluido.

2.6. Datumoj analitiko

Krom se alie indikite, datumoj estas raportitaj kiel meznombraj valoroj ± SE de 4-8 apartaj eksperimentoj, ĉiu el kiuj estis farita triplikate. Net-stimulita [³⁵S] GTPγS-ligado estas kalkulita kiel agonist-stimulita ligado minus bazala ligado. La neta aktiveco de adenylyl-ciklasa stimula perskolino estas difinita kiel forskolin-stimulita agado - baza agado (pmol / mg / min). Elcento de inhibicio de forskolin-adenylyl-ciklasa aktiveco estas difinita kiel (pura forskolin-stimulita agado en la foresto de agonisto - pura forkolin-stimulita agado en la ĉeesto de agonisto / reto forkolin-stimulita agado en la foresto de agonisto) × 100. Ĉiuj kurbit-fiksaj kaj statistikaj analizoj estis faritaj uzante Prism 4.0c (GraphPad Programaro, Inc., San Diego, CA). Koncentriĝo-efiko kurboj estis analizitaj per ripeta ne-lineara malprogreso por akiri EC₅₀ kaj E_maks valoroj. Statistika signifo de la datumoj de efiko de koncentriĝo estis difinita per dudirekta analizo de varianco (ANOVA), uzante agonistajn dozon kaj genrokon (for aŭ malŝalto) kiel ĉefaj faktoroj. Statistika signifo de kurbi-taŭgaj valoroj (E.)_maks aŭ EC₅₀) estis determinita per la ne-parigita du-vosta studenta t-testo, uzante la korektadon de Welch aŭ kvadratradikan transformon de la datenoj kie necese korekti por neegalaj variancoj (detektitaj per F-testo) en EC₅₀ valoroj.

3. Rezulto

3.1. Efiko de la esprimo de osFosB sur aktivado de G-proteina opciado kaj kanabinoida ricevilo

Determini ĉu MOR- aŭ CB₁La G-proteina mediata aktivigo ŝanĝiĝis per indukta transgena esprimo de ΔFosB en la NAc, agonist-stimulita [³⁵S] GTPγS-ligado estis ekzamenita en izolitaj membranoj preparitaj de ĉi tiu regiono de bitransenaj musoj kondiĉe esprimantaj (BFosB-a) aŭ ne esprimanta (ΔFosB-malŝalto) la ΔFosB-transgeno. La MOR-selektema enkephalino-analoga DAMGO kutimis aktivigi MOR kaj la cannabinoida aminoalkilindolo WIN55,212-2 estis uzata por aktivigi CB.₁R. Ĉi tiuj ligandoj estis antaŭe montritaj esti plenaj agonistoj ĉe MOR kaj CB₁R, respektiveBreivogel, kaj aliaj, 1998, Selley, kaj aliaj, 1997). Ne estis farebla ekzameni aktivecon G-mediata G-proteino ĉar la signalo estas tro malalta en cerbo de ronĝuloj (Childers, et al., 1998). Rezultoj montris koncentrigan stimuladon de G-proteina agado de kaj DAMGO kaj WIN55,122-2 en NAc de ΔFosB-malplena kaj ΔFosB ĉe musojfiguro 1). Por DAMGO-stimulita agado (Figuro 1A), dudirekta ANOVA de la koncentriĝo-efika datumo rivelis signifajn ĉefajn efikojn de ΔFosB-statuso (p <0.0001, F = 22.12, df = 1) kaj DAMGO-koncentriĝo (p <0.0001, F = 29.65, df = 5) sen signifa interago (p = 0.857, F = 0.387, df = 5). Nelinia regresa analizo de la koncentriĝo-efikaj kurboj malkaŝis signife pli grandan DAMGO E_maks valoro en ΔFosB sur musoj (E_maks = 73 ± 5.2% stimulo) rilate al ΔFosB ekstere de musoj (E_maks = 56 ± 4.1% stimulo; p <0.05 malsama ol ΔFosB ĉe musoj per studenta t-testo). DAMGO EC₅₀ valoroj ne diferencis inter musoj ΔFosB en kaj ΔFosB ekstere (302 ± 72 nM kontraŭ 212 ± 56 nM, respektive, p = 0.346).

Efiko de esprimo de BFosB sur agonist-stimulita [³⁵S] GTPγS ligante en la NAc. Membranoj de musoj esprimantaj BFosB (BFosB-en) aŭ de kontrolo (osFosB-malkompaktigita) estis analizitaj kiel priskribite en Metodoj uzantaj diversajn koncentriĝojn. ...

Kontraste al rezultoj akiritaj kun la MOR agonisto DAMGO, neniu -FosB-dependaj statusaj diferencoj en G-proteina aktivigo estis observitaj kun la cannabinoid-agonisto WIN55,212-2 (Figuro 1B). Dudirekta ANOVA de la WIN55,212-2-koncentriĝaj efikoj montris signifan ĉefan efikon de WIN55,212-2-koncentriĝo (p <0.0001, F = 112.4, df = 7), sed ne de ΔFosB-statuso (p = 0.172 , F = 1.90, df = 1) kaj ne estis interago (p = 0.930, F = 0.346, df = 7). Simile, estis neniu efiko de ΔFosB-statuso sur WIN55,212-2 E_maks valoroj (103 ± 6% kontraŭ 108 ± 8% stimulo en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive, p = 0.813 per Student-t-testo) aŭ EC₅₀ valoroj (103 ± 20 nM kontraŭ 170 ± 23 nM en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive, p = 0.123).

Surbaze de la formo de la kurboj kaj la fakto ke niaj antaŭaj studoj montris bifásico WIN55,212-2-koncentr-efikajn kurbojn en cerbo.Breivogel, kaj aliaj, 1999, Breivogel, kaj aliaj, 1998), la WIN55,212-2-kurboj ankaŭ estis analizitaj uzante du-ejan modelon. Analizo de la averaĝaj datumoj montris malgrandan plibonigon de boneco de kapablo uzante la du-ejan modelon (R.)² = 0.933 kaj 0.914, sumo de kvadratoj = 3644 kaj 5463 en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive) kompare al la unu-loko modelo (R² = 0.891 kaj 0.879, sumo de kvadratoj = 6561 kaj 6628 en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive). Tamen, neniuj signifaj diferencoj estis trovitaj inter ΔFosB en kaj ekstere musoj en aŭ la E_maks aŭ EC₅₀ valoroj de la alta aŭ malalta potenco ejoj (Suplementa Tablo 1), kvankam estis tendenco al pli malalta EC₅₀ valoro ĉe la alta potenca ejo en musoj kun ΔFosB sur (EC₅₀alta = 28.0 ± 10.6 nM) kompare kun tiuj kun ΔFosB for (EC₅₀alta = 71.5 ± 20.2 nM; p = 0.094). Plie, ne estis efiko de onFosB-statuso sur baza³⁵S] GTPγS ligante en NAc-membranoj (253 ± 14 kontraŭ 226 ± 14 fmol / mg en ΔFosB en kaj ekstere musojn, respektive, p = 0.188). Ĉi tiuj datumoj indikas ke indukta transgena esprimo de ΔFosB en la NAc de musoj pliigis MOR-mediata G-proteina aktivigo sen signife influas CB.₁R-mediaciita aŭ baza baza G-proteina agado.

3.2. Efiko de ΔFosB sur opioidaj kaj kanabinoidaj receptoraj inhibitoj de adenyilciklazo

Taksi la efikon de induktebla transgena esprimo de ΔFosB pri modulado de malantaŭa efektila aktivado de MOR kaj CB₁R, inhibicio de 1 µM forskolin-stimulita adenylyl cyclase-aktiveco estis ekzamenita en NAc-membranoj. Krom MOR- kaj CB₁R-mediata inhibicio de adenylyl-ciklasa agado, efikoj de KOR-agado ankaŭ estis ekzamenitaj uzante la KOR-elekteman plenan agoniston U50,488 (Zhu, et al., 1997), ĉar antaŭaj rezultoj montris ke dinorfino mRNA estis celo de ΔFosB en la bitransgenika modelo (Zachariou, et al., 2006). Rezultoj montris, ke DAMGO, U50,488 kaj WIN55,212-2 ĉiu produktis koncentriĝon-dependan inhibon de agado de adenylyl-ciklaso en ambaŭ osFosB-for kaj ΔFosB sur musoj (figuro 2). Duvoja ANOVA de datumoj de efiko koncentriĝo DAMGO (Figuro 2A) rivelis signifajn ĉefajn efikojn de ΔFosB-statuso (p = 0.0012, F = 11.34, df = 1) kaj DAMGO-koncentriĝo (p <0.0001, F = 29.61, df = 6), sed neniu signifa interago (p = 0.441, F = 0.986 , df = 6). Nelinia regresa analizo de DAMGO-koncentr-efikaj kurboj rivelis signife pli malaltan DAMGO-EC₅₀ valoro en ΔFosB ĉe musoj (101 ± 11 nM) kompare kun ΔFosB de musoj (510 ± 182 nM, p <0.05 per studenta t-testo). Tamen ne estis signifa diferenco en DAMGO E_maks valoroj (20.9 ± 1.26% kontraŭ 19.8 ± 1.27% inhibicio en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive, p = 0.534).

Efiko de esprimo BFosB sur inhibicio de adenylyl-ciklasa agado en la NAc. Membranoj de musoj esprimantaj BFosB (BFosB-en) aŭ kontrolo (osFosB-malkompaktigita) estis analizitaj kiel priskribite en Metodoj en ĉeesto de 1 µM ...

La inhibicio de adenylyl ciclasa per mediado de KOR ankaŭ diferencis kiel funkcio de induktebla transgena esprimo de ΔFosB (Figuro 2B). Dudirekta ANOVA de U50,488-koncentriĝaj efikoj montris signifajn ĉefajn efikojn de ΔFosB-statuso (p = 0.0006, F = 14.53, df = 1) kaj U50,488-koncentriĝo (p <0.0001, F = 26.48, df = 3) , sen signifa interago (p = 0.833, F = 0.289, df = 3). Nelinia regresa analizo de koncentriĝo-efikaj kurboj malkaŝis pli grandan U50,488 E_maks valoro en ΔFosB ĉe musoj (18.3 ± 1.14% -inhibicio) kompare al ΔFosB de musoj (12.5 ± 2.03% -inhibicio; p <0.05 malsama ol onFosB-on per studenta t-testo), sen signifa diferenco en U50,488 EC₅₀ valoroj (310 ± 172 nM kontraŭ 225 ± 48 nM en ΔFosB en kaj ekster musoj, respektive, p = 0.324).

Kontraste al efikoj observitaj kun MOR kaj KOR, ne estis signifa efiko de esprimo transgena ΔFosB induktebla je inhibicio de adenylyl-ciklase de la cannabinoid-agonisto WIN55212-2 (Figuro 2C). Dudirektaj ANOVA de WIN55,212-2-koncentriĝaj efikoj montris signifan efikon de drogokoncentriĝo (p <0.0001, F = 23.6, df = 2), sed ne de ΔFosB-statuso (p = 0.735, F = 0.118, df = 1) nek estis signifa interago (p = 0.714, F = 0.343, df = 2). Plue, estis neniu efiko de ΔFosB-statuso sur baza aŭ forskolin-stimulita adenilil-ciklasa agado en la foresto de iu agonisto. Baza adenililciklasa agado estis 491 ± 35 pmol / mg / min en ΔFosB ĉe musoj kompare al 546 ± 44 en ΔFosB de musoj (p = 0.346 per studenta t-testo). Same, agado de adenililciklazo en ĉeesto de 1 µM forskolino estis 2244 ± 163 pmol / mg / min en ΔFosB ĉe musoj kontraŭ 2372 ± 138 pmol / mg / min en ΔFosB ĉe musoj (p = 0.555).

3.3. Efiko de ΔcJun pri opioidaj kaj cannabinoid-receptoraj-mediaciitaj inhibicioj de adenyilciklazo

Ĉar induktebla transgena esprimo de ΔFosB plibonigis inhibician signalan transdukton de MOR kaj KOR al adenylyl-ciklaso en la NAc, ĝi estis de intereso determini ĉu reganta negativa inhibitoro de osFosB-mediaciita transskribo modifus opioidan ricevilan signaladon laŭ kontraŭa maniero. Por trakti ĉi tiun demandon, inhibicio de forskolin-stimulita adenylyl cyclase-agado de DAMGO kaj U50,488 estis ekzamenita en membranoj preparitaj de la NAc de bitransenaj musoj kondiĉe esprimante uncJun. La rezultoj montris neniun signifan efikon de oncJun-esprimo sur inhibicio de adenylyl-cikaza aktiveco de MOR aŭ KOR (figuro 3). Dudirektaj ANOVA de DAMGO-koncentr-efikaj kurboj montris signifan ĉefan efikon de DAMGO-koncentriĝo (p <0.0001, F = 20.26, df = 6), sed ne de ΔcJun-statuso (p = 0.840, F = 0.041, df = 1) kaj ne estis signifa interago (p = 0.982, F = 0.176, df = 6). Simile, ne estis signifa diferenco en E_maks aŭ EC₅₀ valoroj inter musoj kun ΔcJun sur (E.)_maks = 23.6 ± 2.6%; EC₅₀ = 304 ± 43 nM) aŭ ΔcJun for (E.)_maks = 26.1 ± 2.5%, p = 0.508; EC₅₀ = 611 ± 176 nM, p = 0.129). Similaj rezultoj estis viditaj kun U50,488, tia ke dudirekta ANOVA de la koncentriĝo-efikaj kurboj montris signifan efikon de koncentriĝo (p <0.0001, F = 11.94, df = 6), sed ne de ΔcJun-statuso (p = 0.127 , F = 2.391, df = 1) kaj ne estis signifa interago (p = 0.978, F = 0.190, df = 6). Same ne estis signifaj diferencoj en E_maks aŭ EC₅₀ valoroj inter musoj kun ΔcJun sur (E.)_maks = 14.8 ± 2.9%; EC₅₀ = 211 ± 81 nM) aŭ malŝaltita (E_maks = 16.7 ± 1.8%, p = 0.597; EC₅₀ = 360 ± 151 nM, p = 0.411).

Efiko de ΔcJun-esprimo sur inhibicio de adenylyl-ciklasa agado en la NAc. Membranoj de musoj esprimantaj -cJun ()cJun) aŭ kontrolo (ΔcJun ekstere) estis kovataj antaŭ DAMGO (A), U50,488H (B) aŭ WIN55,212-2 ...

ExpressioncJun-esprimo ankaŭ ne grave influis inhibicion de adenililciklazo en la NAc de la kanabinoida agonisto. Dudirekta ANOVA de la WIN55,212-2-koncentraj efikoj-kurboj montris signifan ĉefan efikon de WIN55,212-2-koncentriĝo (p <0.0001, F = 15.53, df = 6), sed ne de gentipo (p = 0.066, F = 3.472, df = 1) kaj ne estis signifa interago (p = 0.973, F = 0.208, df = 6). Same ne estis signifaj diferencoj en WIN55,212-2 E_maks valoroj (13.0 ± 2.3% kaj 13.6 ± 0.9% inhibicio en ΔcJun sur kontraŭ de musoj, respektive, p = 0.821) kaj aŭ EC₅₀ valoroj (208 ± 120 nM kaj 417 ± 130 nM en ΔcJun sur kontraŭ de musoj, respektive, p = 0.270). Tiel, kvankam estis iomete tendenco al malpliiĝo de potenco de WIN55,212-2 en musoj esprimantaj JcJun, la transgeno ne signife ŝanĝis kannabinonid inhibicion de adenylyl-ciklaso. Plie, ne estis efiko de oncJun statuso sur basal aŭ forskolin-stimulita adenylyl ciclasa aktiveco. Baza adenylyl-ciklasa agado estis 1095 ± 71 pmol / mg / min kaj 1007 ± 77 pmol / mg / min (p = 0.403) en musoj kun ΔcJun enŝaltita aŭ malŝaltita, respektive. La aktiveco de adenyililciklazo stimulita de 1 µM forskolino estis 4185 ± 293 pmol / mg / min kontraŭ 4032 ± 273 pmol / mg / min (p = 0.706) en musoj kun ΔcJun en aŭ malŝalto, respektive.

3.4. Diskuto

La rezultoj de ĉi tiu studo montris plifortigon de G-mediada G-proteina aktivado kaj inhibicio de adenylyl-ciklaso en la NAc de musoj kun induktebla transgena esprimo de ΔFosB en dinorfinas / D₁R enhavanta neŭronojn. KOR-mediaciita inhibicio de adenylyl cyclase-agado ankaŭ estis plifortigita en la NAc de osFosB-esprimante musojn, sugestante ke ΔFosB reguligas la endogenan opio-sistemon en la NAc. La DAMGO E_maks valoro estis pli granda por MOR-stimulita [³⁵S] GTPγS ligante, kaj ĝia EC₅₀ valoro estis pli malalta por adenyil ciclasa inhibicio, en ,FosB-tro-esprimante musojn kompare kun kontrolaj musoj. Ĉi tiuj trovoj sugestas la eblon de rezerva rezervo por efektor modulado sed ne G-proteina aktivigo sub la testaj kondiĉoj ekzamenitaj. La trovo ke maksimuma inhibicio de adenylyl-ciklaso de la KOR-agonisto estis influita de suggestsFosB-esprimo sugestas malaltan rezervan rezervon por la KOR-mediaciita respondo, kongrua kun la malaltaj niveloj de KOR-liganta ejoj en musmontrolo.Unterwald, et al., 1991). En kontrasto, CB₁R-mediata R-proteina agado kaj inhibicio de adenylyl-ciklaso ne tuŝis la esprimon de ΔFosB, sugestante, ke la opioidoj kaj kanabinoidaj sistemoj diferencas pro sia respondo al ΔFosB en ĉi tiuj NAc-neŭronoj.

La efiko de BFosB sur meznivela signalado de opioidaj receptoroj kongruas kun nia antaŭa raporto, ke la esprimo de BFosB en la striato ŝanĝis akutajn kaj kronikajn efikojn de morfino (Zachariou, et al., 2006). Unu trovo de tiu studo estis ke musoj kun transĝena esprimo de FosB en dinorfinoj / D₁R striataj neŭronoj estis pli sentemaj al morfino en lokkondiĉo ol kontroloj. Krome, ĉi tiu efiko estis imitita de la esprimo viral-mediata de BFosB per loko-specifa injekto en la NAc. Ĉi tiuj observoj kongruas kun la nunaj rezultoj, kiuj montras plibonigon de MOR-signalado en la NAc.

Ni antaŭe identigis la genan kodigon dynorphin kiel celo de ΔFosB, kaj proponis ke reduktita dinorfino estus konsekvenca kun plibonigitaj rekompencaj trajtoj de morfino en ΔFosB-bitransenaj musoj (Zachariou, et al., 2006). La nunaj rezultoj montras, ke la KOR-mediada inhibicio de adenylyl-ciklaso en la NAc estas plibonigita en ΔFosB esprimante musojn, kiuj povus reflekti kompensan kreskon de KOR-sentemo post reduktita dinorfino. Antaŭaj studoj montris, ke KOR estis suprelektita en certaj cerbaj regionoj de knokaŭto-fekrenofenoj, inkluzive NAc (Clarke, kaj aliaj, 2003).

Kontraste al ΔFosB, induktebla transgena esprimo de ΔcJun, la superrega negativa senpintigita senpintigita de la osFosB-partnera partnero cJun, ne ŝanĝis adenyil ciclasan inhibicion per MOR aŭ KOR-agonistoj. Ĉi tiuj rezultoj sugestas, ke bazaj niveloj de esprimo de BFosB, kiuj estas relative malaltaj, ne ludas gravan rolon en konservado de signaloj de opio-riceviloj ĉe ĉi tiu nivelo de signala transdukto en la NAc. La fakto ke la kondiĉita rekompencanta efiko de morfino malpliiĝis pro esprimo ΔcJun en nia antaŭa studo (Zachariou, et al., 2006) sugestas ĉu ke morfina indukto de ΔFosB dum la kondiĉa procedo gravas en regulado de kondutaj respondoj al la drogo aŭ ke transkribaĵaj efikoj de ΔFosB krom tiuj kiuj influas proksimajn signalojn de opioidaj riceviloj povus influi opi-opan rekompencon. Ĉiuokaze, rezultoj de ĉi tiu studo montras klare, ke, kiam isFosB-esprimo estas levita super bazaj niveloj en stria dinastio / D₁R-esprimantaj neŭronoj, ekzistas fortika pliiĝo en la kuplado de MOR kaj KOR al inhibicio de adenylyl-ciklaso en la NAc.

La mekanismoj per kiuj MOR-kaj KOR-mediaciita signalado estas plibonigitaj per os -FosB-sur-esprimado ne estas klaraj, sed ni antaŭe pruvis ke MOR-niveloj, taksitaj de [³H] naloksono liganta, ne malsamas en la NAc de ΔFosB sur kontraŭ-for musojZachariou, et al., 2006). La sama studo trovis, ke Gα_iLa niveloj de 1 kaj 2 ne estis tuŝitaj en ĉi tiu regiono per esprimo de FosB. Tamen, antaŭaj analizo de genaj esprimoj montris, ke Gα_o mRNA estis superregita en NAc de ΔFosB sur musoj (McClung kaj Nestler, 2003). Estus de intereso en estontaj studoj amplekse ekzameni la efikon de transgenaj BFosB-esprimoj sur esprimo G-proteina subunueca nivelo ĉe proteina nivelo kaj ankaŭ pri la esprimo de multaj G-proteinoj moduladaj proteinoj.

Estas interese, ke didFosB-esprimo ne plibonigis CB₁R-mediaciita signalo en la NAc. Eblas ke ŝanĝoj en CB₁R-signalado okazas en diskreta loĝantaro de neŭronoj, kiu estas kaŝita en la tuta NAc-preparo. Ekzemple, administrado de Δ⁹- THC signife induktis ΔFosB en la kerno, sed ne ŝelo, de la NAc (Perrotti, kaj aliaj, 2008). Mindeed, ĝi estis montrita ke defio kun Δ⁹-THC post ripetita administrado de⁹-THC pliigis liberigon de dopamino en la kerno NAc, sed malpliigis liberigon en la ŝelo (Cadoni, et al., 2008). Estas ankaŭ grave noti, ke la 11A-linio de bitransenaj musoj esprimas ΔFosB nur en dinorfinaj / D₁R pozitivaj mezaj spongaj neŭronoj de la striato, sed CB₁R estas esprimita en ambaŭ dinorfinoj / D₁R kaj enkephalin / D₂R pozitivaj striataj neŭronoj (Hohmann kaj Herkenham, 2000), same kiel ĉe terminaloj de kortikaj fenomenoj (Robbe, kaj aliaj, 2001). Esprimo de la superreganta negativa regulilo de riptionFosB-mediada transskribo, uncJun, ankaŭ ne havis signifan efikon al cannabinoida ricevila signalado, kvankam ΔcJun estas induktebla en ambaŭ D₁ kaj D₂- enhavas populaciojn de mezaj dornaj neŭronoj en ĉi tiuj musoj (Peakman, et al., 2003). Estas eble, tamen, ke baza BFosB-esprimo estas sufiĉe malaltaj ke ΔcJun ne influus ricevilan signaladon, kiel sugestas rezultoj kun MOR kaj KOR. Ankaŭ eblas, ke CB₁R signalado estas modeste plibonigita per baza esprimo de FosB, tiel ke plia kreskanta esprimo de BFosB aŭ blokado de ĝiaj agoj kun ΔcJun havis nur malgrandajn efikojn, kiuj ne atingis la nivelon de statistika signifo. Nerekta subteno por ĉi tiu interpreto videblas komparante WIN55,212-2 EC₅₀ valoroj inter musoj esprimantaj JcJun kontraŭ ΔFosB. La proporcio de la WIN55,212-2 EC₅₀ valoro por inhibicio de adenyil ciclasa en musoj kun esprimo de ΔcJun induktita al ĝia EC₅₀ valoro por G-proteina aktivigo en musoj kun induktita esprimo de ΔFosB estis 4.0, dum la sama proporcio en musoj sen indukto de ambaŭ transgeno estis 1.2.

Alternative, kanabinoidoj povus indukti esprimon de BFosB sen rekta efiko al CB₁R signalado. En ĉi tiu scenaro, kanabinoidoj povus moduliĝi respondo al la psikoaktivaj efikoj de aliaj drogoj per ΔFosB-mediaciita transskriba regulado. Mifakto, administrado de⁹-THC produktas krucan sentemon al opioidoj kaj anfetamino (Cadoni, et al., 2001, Lamarque, kaj aliaj, 2001), kongrua kun ĉi tiu hipotezo. Plie, ripetita administrado de la cannabinoid-agonisto CP55,940 pliigis MOR-mediata G-proteina aktivigo en la NAc, simile al musoj indukteblaj esprimantaj ΔFosB en la nuna studo (Vigano, et al., 2005). La efiko de esprimo de BFosB en Δ⁹-T-mediataj kondutoj ne estis taksitaj, sed la nunaj rezultoj ne malhelpas interagon. La rezultoj de ĉi tiu kaj nia antaŭa studo (Zachariou, et al., 2006) montras ΔFosB-induktitajn modifojn en MOR kaj KOR / dinorfinon en la striato. La rekompencaj efikoj de⁹-THC, kiel mezurite per loka prefero, estas aboliciitaj en MOR nulaj musoj, dum forigo de KOR mildigita⁹-THC lokas aversion kaj rivelita Δ⁹-THC loka prefero (Ghozland, et al., 2002). Simile, kondiĉita loko aversión al Δ⁹-THC forestas en por-dinorfinaj knokaŭtoj kompare kun sovaĝaj musoj (Zimmer, et al., 2001). Ĉi tiuj datumoj sugestas ke Δ⁹-THC povus esti pli rekompencanta post ΔFosB-indukto kaj sekve indukto de MOR-signalado kun malpligrandiĝo de dinorfinaj esprimoj.

Resumey, la rezultoj de ĉi tiu studo montris tiun esprimon de ΔFosB en D₁R / dynorphin pozitivaj striataj neŭronoj plibonigis MOR-kaj KOR-mediaciita signalado ĉe la nivelo de G-proteina mediaciita inhibicio de adenylyl-ciklasa agado en la NAc. Ĉi tiu rezulto kongruas kun studoj, kiuj pruvis rolon por la endogena opio-sistemo en rekompenco (Trigo, et al., 2010), kaj provizas eblan mekanismon por ΔFosB-mediaciitaj efikoj sur rekompenco. En kontrasto, CB₁R-mediaciita signalo en la NAc ne estis signife influita de striateca ΔFosB-esprimo sub la kondiĉoj ekzamenitaj, kvankam pliaj studoj estas motivitaj por determini la efikon de ΔFosB-indukto sur la endocannabinoida sistemo.

Ĉefaĵoj pri Esplorado

MOR-signalado estas plibonigita en la kerno accumbens de musoj kiuj esprimas ΔFosB
KOR-inhibicio de adenylyl-ciklaso ankaŭ plifortiĝas en musoj esprimantaj ΔFosB
Esprimo de FosB ne ŝanĝas CB₁R-signalado en la kerno accumbens

Suplementa Materialo

01

Alklaku ĉi tie por vidi.^{(45K, pdf)}

Dankoj

La aŭtoroj dankas Hengjun He, Jordan Cox kaj Aaron Tomarchio por teknika helpo kun la [³⁵S] GTPajS devigaj testoj. Ĉi tiu studo estis subtenita de USPHS Grants DA014277 (LJS), DA10770 (DES) kaj P01 DA08227 (EJN).

Piednotoj

Malgarantio de Eldonisto: Ĉi tio estas PDF-dosiero de unita manuskripto, kiu estis akceptita por publikigado. Kiel servo al niaj klientoj ni provizas ĉi tiun fruan version de la manuskripto. La manuskripto suferas kopion, kompostadon kaj revizion de la rezultanta pruvo antaŭ ol ĝi estas publikigita en ĝia fina maniero. Bonvolu noti, ke dum la procezo de produktado povas malkovri erarojn, kiuj povus influi la enhavon, kaj ĉiujn laŭleĝajn malvirtojn, kiuj aplikeblas al la ĵurnalo.

Referencoj

Bozarth MA, Saĝa RA. Anatomie distingitaj kampoj de riceviloj de opiaĵoj medias rekompencon kaj fizikan dependecon. Scienco. 1984;224: 516-517. [PubMed]
Bradford MM. Rapida kaj sentema metodo por kvantigi mikrogramajn kvantojn de proteino uzante la principon de proteino-tinkturo liganta. Anal. Biochem. 1976;72: 248-254. [PubMed]
Breivogel CS, Childers SR, Deadwyler SA, Hampson RE, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Kronika delta⁹-Tetrahydrocannabinol-kuracado produktas temp-dependan perdon de G-proteinoj cannabinoides-aktivigitaj en la cerbo. J. Neurochem. 1999;73: 2447-2459. [PubMed]
Breivogel CS, Selley DE, Childers SR. Cannabinoid-receptoro agonisto efikeco por stimulado [³⁵S] GTPγS ligante al muskoloraj membranoj korespondas kun agonist-induktitaj malpliiĝoj en GDP-afineco. J. Biol. Kem. 1998;273: 16865-16873. [PubMed]
Cadoni C, Pisanu A, Solinas M, Acquas E, Di Chiara G. Konduteca sentemo post ripetata ekspozicio al Delta 9-tetrahydrocannabinol kaj kruc-sentemo kun morfino. Psikofarmacologio (Berl) 2001;158: 259-266. [PubMed]
Cadoni C, Valentini V, Di Chiara G. Kondutima sentemo por delta 9-tetrahidrocannabinolo kaj kruc-sentivigo kun morfino: diferencaj ŝanĝoj en akuta ŝelo kaj kerna dopamina transdono. J. Neurochem. 2008;106: 1586-1593. [PubMed]
Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Transgenaj bestoj kun induktebla, celita esprimo de genoj en cerbo. Mol. Pharmacol. 1998;54: 495-503. [PubMed]
Childers SR. Dua-kurieroj kunigitaj kontraŭ opiode riceviloj. Vivo Sci. 1991;48: 1991-2003. [PubMed]
Childers SR, Fleming L, Konkoy C, Marckel D, Pacheco M, Sexton T, Ward S. Opioid kaj cannabinoid-ricevilinhibicio de adenylyl-ciklaso en cerbo. Ann. NY Acad. Sci. 1992;654: 33-51. [PubMed]
Childers SR, Xiao R, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Stimulo de kapa opiázida ricevilo³⁵S] GTPγS ligante en kobera cerbo: Manko de indikaĵoj por kappa₂-elekta aktivado de G-proteinoj. Biochem. Pharmacol. 1998;56: 113-120. [PubMed]
Clarke S, Zimmer A, Zimmer AM, Hill RG, Kitchen I. Regiono-selektema suprenregulo de mikro, delta- kaj kappa-opi-opaciaj riceviloj sed ne de opi-infektaj receptoroj 1 en cerboj de enkefalino kaj dinorfinaj muso. Neurokienco 2003;122: 479-489. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Stritala ĉelo-specifa sobreexpremado de DeltaFosB plibonigas stimulon por kokaino. J. Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Gardner EL. Endocannabinoida signalada sistemo kaj cerba rekompenco: emfazo al dopamino. Pharmacol. Bioĥem. Konduto. 2005;81: 263-284. [PubMed]
Ghozland S, Matthes HW, Simonin F, Filliol D, Kieffer BL, Maldonado R. Efektoj motivigiloj de kanabinoidoj estas mediaciitaj de mu-opi-elektoj kaj kappa-opi-opciado-riceviloj. J. Neurosci. 2002;22: 1146-1154. [PubMed]
Herkenham M, Lynn AB, Johnson MR, Melvin LS, de Costa BR, Rice KC. Karakterizado kaj lokalizo de cannabinoidaj receptoroj en rato-cerbo: kvanta en vitro aŭtoradiografia studo. J. Neurosci. 1991;11: 563-583. [PubMed]
Hohmann AG, Herkenham M. Lokalizado de cannabinoide CB (1) receptoraj mRNA en neŭronaj subpopulacioj de rato striato: duobla etikta en situ hibridiga studo. Sinapso. 2000;37: 71-80. [PubMed]
Howlett AC, Barth F, Bonner TI, Cabral G, Casellas P, Devane WA, Felder CC, Herkenham M, Mackie K, Martin BR, Mechoulam R, Pertwee RG. Internacia Kuniĝo de Farmakologio. XXVII. Klasifiko de cannabinoidaj riceviloj. Farmakologia Revizio. 2002;54: 161-202.
Huestis MA, Gorelick DA, Heishman SJ, Preston KL, Nelson RA, Moolchan ET, Frank RA. Blokado de efikoj de fumita marianauano de la selektita CB1-cannabinoid-ricevila antagonisto SR141716. Arko. Genia psikiatrio. 2001;58: 322-328. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Esprimo de la faktoro de transskribo deltaFosB en la cerbo kontrolas sentivecon al kokaino. Naturo. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Koob GF, Volkow ND. Neŭrokcirĉifilo de toksomanio. Neuropsychofarmacology. 2010;35: 217-238. [PMC libera artikolo] [PubMed]
Lamarque S, Taghzouti K, Simon H. Kronika traktado kun Delta (9) -tetrahidrocannabinol plibonigas la lokomotoran respondon al anfetamino kaj heroino. Implikaĵoj por vundebleco al drogomanio. Neurofarmacologio. 2001;41: 118-129. [PubMed]
Maldonado R, Valverde O, Berrendero F. Partopreno de la endocannabinoida sistemo en drogodependeco. Tendencoj Neurosci. 2006;29: 225-232. [PubMed]
Mansour A, Fox CA, Thompson RC, Akil H, Watson SJ. Esprimo de mu-opioida ricevila mRNA-esprimo en rato CNS: komparo kun mu-ricevila ligado. Brain Res. 1994;643: 245-265. [PubMed]
Matthes HWD, Maldonado R, Simonin F, Valverde O, Slowe S, Mi Kuirejo, Befort K, Dierich A, LeMeur M, Dolle P, Tzavara E, Hanoune J, Roques BP, Kieffer BL. Perdo de morfino-induktita analgesio, rekompenco-efiko kaj retiriĝemaj simptomoj en musoj mankantaj la µ-opi-infan receptorogenon. Naturo. 1996;383: 819-823. [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Reguligo de gen-esprimo kaj kokaino rekompencas de CREB kaj DeltaFosB. Nat. Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekula ŝaltilo por longtempa adapto en la cerbo. Brain Res. Mol. Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Muller DL, Unterwald EM. D1 dopamina riceviloj modulas deltaFosB-indukadon en rat-striatumo post intermita morfina administrado. J. Pharmacol. Ekspliko Ther. 2005;314: 148-154. [PubMed]
Nestler EJ. Revizio. Transskribaj mekanismoj de toksomanio: rolo de DeltaFosB. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC libera artikolo] [PubMed]
Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: molekula mediatoro de longtempa neŭtrala kaj kondutodaleco. Brain Res. 1999;835: 10-17. [PubMed]
Nye HE, Espero BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Studoj farmacológicos de la regulado de la inducción kronika de antígeno de FOS por la kokaino en la striatumo kaj la kerno accumbens. J. Pharmacol. Ekspliko Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Necesebla, cerba regiono-specifa esprimo de reganta negativa mutanto de c-Jun en transgenaj musoj malpliigas sentivecon al kokaino. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Mazeo I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distingaj ŝablonoj de DeltaFosB-indukto en cerbo per drogoj de misuzo. Sinapso. 2008;62: 358-369. [PMC libera artikolo] [PubMed]
Robbe D, Alonso G, Duchamp F, Bockaert J, Manzoni OJ. Lokaligado kaj mekanismoj de agado de cannabinoidaj riceviloj ĉe la glutamatergaj sinapsoj de la muskerna kerno accumbens. J. Neurosci. 2001;21: 109-116. [PubMed]
Salomon Y. Adenylate cyclase-analizo. Adv. Cikla Nukleotida Res. 1979;10: 35-55. [PubMed]
Selley DE, Sim LJ, Xiao R, Liu Q, Childers SR. Mu opiode ricevilo-stimulita [³⁵S] GTPγS liganta ĉe ratamion kaj kulturajn ĉelajn liniojn: Signalaj transdukaj mekanismoj subaktivaj agonistaj efikecoj. Mol. Pharmacol. 1997;51: 87-96. [PubMed]
Trigo JM, Martin-Garcia E, Berrendero F, Robledo P, Maldonado R. La endogena opioida sistemo: komuna substrato en drogomanio. Drogado de Alkoholo 2010;108: 183-194. [PubMed]
Unterwald EM, Knapp C, Zukin RS. Lokigo neuroanatomia de opioidaj riceviloj κ1 kaj κ2 en cerbo de rato kaj kobaj cerboj. Brain Res. 1991;562: 57-65. [PubMed]
Vaccarino FJ, Bloom FE, Koob GF. Blokado de nuklea akcumbenaj riceviloj mildigas intravenan rekompencon de heroino ĉe la rato. Psikofarmacologio (Berl) 1985;86: 37-42. [PubMed]
Vigano D, Rubino T, Vaccani A, Bianchessi S, Marmorato P, Castiglioni C, Parolaro D. Molekulaj mekanismoj implikitaj en la nesimetria interago inter cannabinoidaj kaj opio-sistemoj. Psikofarmacologio (Berl) 2005;182: 527-536. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Esenca rolo por DeltaFosB en la kerno konsumas en morfina ago. Nat. Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zangen A, Solinas M, Ikemoto S, Goldberg SR, Wise RA. Du cerbaj lokoj por cannabinoid rekompenco. J. Neurosci. 2006;26: 4901-4907. [PubMed]
Zhu J, Luo LY, Li JG, Chen C, Liu-Chen LY. Aktivigo de la klonita homa kappa opioida receptoro per agonistoj plibonigas ligadon [35S] GTPγS al membranoj: determino de potencoj kaj efikecoj de ligandoj. J. Pharmacol. Ekspliko Ther. 1997;282: 676-684. [PubMed]
Zimmer A, Valjent E, Konig M, Zimmer AM, Robledo P, Hahn H, Valverde O, Maldonado R. Manko de delta -9-tetrahydrocannabinol-eforaj efikoj en dinorfinaj mankoj. J. Neurosci. 2001;21: 9499-9505. [PubMed]
Zimmer A, Zimmer AM, Hohmann AG, Herkenham M, Bonner TI. Pliigita morteco, hipoaktiveco kaj hipoalgesio en kanabenoida CB1-receptoraj knokaŭtaj musoj. Proc. Natl. Acad. Sci. Usono 1999;96: 5780-5785. [PMC libera artikolo] [PubMed]