La sobreexpremado de DeltaFosB en kerno konsumas imiti la protektan toksomanion-fenotipo, sed ne la protektan depresion-fenotipo de ekologia riĉiĝo (2014)

Front Behav Neurosci. 2014; 8: 297.

Publikigita interrete Aug 29, 2014. doi:  10.3389 / fnbeh.2014.00297

PMCID: PMC4148937

abstrakta

Mediaj riĉigoj produktas protektajn fenotipojn de toksomanio kaj deprimo en ratoj. ΔFosB estas transskriba faktoro, kiu reguligas rekompencon en la cerbo kaj estas induktita de psikologia streso same kiel drogoj de misuzo. Tamen, la rolo ludita de ΔFosB en la protektaj fenotipoj de media riĉiĝo ne estis bone studita. Ĉi tie, ni pruvas ke ΔFosB estas diferenca reguligita ĉe ratoj mamnutritaj en izolita kondiĉo (IC) kompare kun tiuj en riĉigita kondiĉo (EC) en respondo al bremsita streso aŭ kokaino.

Kronika streĉado aŭ kronika kokaina traktado ĉiu levas ΔFosB-proteinajn nivelojn en la kerno acumbens (NAc) de IC-ratoj, sed ne de EC-ratoj pro jam levita basala amasiĝo de ΔFosB vidita en EC-kondiĉoj..

Viral-mediaciita troekspreso de ΔFosB en la ŝelo de NAc de paro-loĝataj ratoj (t.e., sendepende de media riĉiĝo / izolado) pliigas operantajn respondojn por sukerozo kiam motivite de malsato, sed malkreskas respondi en satigitaj bestoj. Plie, ΔFosB-troekspreso malpliigas kokain-memadministradon, plibonigas estingon de kokain-serĉado kaj malpliigas restarigon de kokaino-induktita de koka-mem-administrado; ĉiuj kondutismaj trovoj konformaj al la riĉiga fenotipo.

En kontrasto, tamen, la tro-ekspreso osFosB ne ŝanĝis respondojn de paroj gastigitaj de ratoj en pluraj provoj de maltrankvilo kaj de depresia konduto.

Tiel, ΔFosB en la NAc-ŝelo imitas la protekta aldona fenotipo, sed ne la protekta depresia fenotipo de media riĉiĝo.

Ŝlosilvortoj: [pliigo]FosB, media riĉigo, depresio, kokaina memadministrado, adeno-asociita viruso (AAV), troekspresio

Enkonduko

Vivosperto, precipe en la fruaj stadioj, havas profundan efikon sur la konduto de bestoj dum la tuta vivo. La medio ludas esencan rolon en la vundebleco kaj rezisto al mensaj malordoj en homoj (Elisei et al., 2013; Akdeniz et al., 2014; Kato kaj Iwamoto, 2014; van Winkel et al., 2014). En modeloj de ronĝuloj, vivis en riĉigita medio de la demetiĝo de juna aĝo estis raportita produkti protektan toksomanion kaj depresion-fenotipojn. (Green et al., 2002, 2003, 2010; Laviola et al., 2008; Solinas et al., 2008, 2009; El Rawas et al., 2009; Thiel et al., 2009, 2010). En ĉi tiu paradigmo, bestoj estas asignitaj al riĉigita kondiĉo (EC) en kiu bestoj estas grupigitaj kaj havas ĉiutage aliron al novaj objektoj, aŭ izolita kondiĉo (IC) en kiu bestoj estas loĝataj unuope sen noveco aŭ socia kontakto. Bestoj breditaj en la riĉigita kondiĉo, kiu inkluzivas socian kontakton, ekzercadon kaj novecon, montras malpli da plifortigo kaj serĉado de kokaino aŭ amfetamino en la intravena drog-administrada paradigmo. (Green et al., 2002, 2010). Aldone al la fenotipo de toksomanio, tia eksponiĝo al riĉigo produktas similan efikon kontraŭ antidepresaj en bestaj modeloj de depresio (Green et al., 2010; Jha et al., 2011). Specife, riĉigitaj bestoj elmontras malpliigitan anhedonia-similan konduton en la sukeroza preferprovo, malpli socia retiro en socia interagadotesto, kaj malpli senmovecon en la devigita naĝotesto (FST). Malgraŭ la kontraŭ-toksomaniaj kaj antidepresivaj efikoj de riĉiĝo, la mekanismoj sub ĉi tiuj protektaj fenotipoj de ekologia riĉiĝo restas nekompreneble, kvankam nia antaŭa esplorado implicis rolon por malpliigita agado de la transkripta faktoro, CREB, en la kerno de akcentoj (NAc) ) mediante iujn el la efikoj de media riĉigo (Green et al., 2010; Larson et al., 2011). Tiel, la celo de ĉi tiuj diferencaj kroĉaj studoj estas uzi bazan sciencan aliron por identigi molekulajn mekanismojn de rezisto, kiuj poste povas esti tradukitaj al la kliniko. Ĉi tiu alproksimiĝo estas la ekvivalenta medio al bone establitaj genetikaj strategioj kiel selektema bredado (McBride et al., 2014).

Ĉi tie ni fokusas pri alia transskriba faktoro, ΔFosB, kiu estas induktita elstare en la NAc per iuj formoj de streso aŭ preskaŭ ĉiuj drogoj de misuzo, inkluzive de kokaino, morfino, alkoholo, nikotino kaj amfetamino (Hope et al., 1992; Kelz kaj Nestler, 2000; Perrotti et al., 2004, 2008). Kiel transskriba faktoro, ΔFosB dimerizas kun Jun-familiaj proteinoj, prefere JunD, por formi aktivan AP-1-komplekson, kiu ligas al la AP-1-respondo-elemento por plibonigi aŭ subpremi la transskribon de ĝiaj celaj genoj (Nestler, 2001), kvankam novaj esploroj sugestas, ke ΔFosB ankaŭ povas agi kiel homodimero (Wang et al., 2012). La proteino ΔFosB estas fortranĉita vario de FosB geno, kiu kaŭzas, ke la proteino ΔFosB malhavas du C-finaĵajn degronajn domajnojn, malhelpante al la proteino ΔFosB la rapidan degeneron viditan kun FosB kaj ĉiuj aliaj Fos-familiaj proteinoj. Ĉar ΔFosB estas eksterordinare stabila en la NAc, ΔFosB agas tre malsame en respondo al akraj vs. kronikaj stimuloj kompare kun aliaj proteinoj de Fos. Kun ripetita ekspozicio al drogoj de misuzo aŭ streso, ΔFosB-proteino iom post iom akumuliĝas kaj persistas dum tagoj ĝis semajnoj, dum FosB kaj aliaj Fos-proteinoj estas induktitaj nur por mallonga tempo (horoj) kaj disvolvas atenuan indukton post posta ekspozicio (Nestler et al., 2001; Nestler, 2008).

La graveco de ΔFosB estas ne nur ke ĝi estas tre induktita de drogoj de misuzo kaj streso, sed ke manipulado de ΔFosB en la cerbo pruviĝis tuŝi la konduton de bestoj. Selektive induktado de ΔFosB en la dinorfinaj mezaj sponaj neŭronoj en plenkreskaj musoj pliigas lokomotivan sentivecon responde al akra kaj ripetita kokaino, same kiel la rekompencajn respondojn al kokaino en la kondiĉita loko-preferita paradigmo kaj plifortigo en la memadministra paradigmo. (Kelz et al., 1999; Kelz kaj Nestler, 2000; Colby et al., 2003).

Kvankam la protektaj toksomanioj kaj deprimo-fenotipoj estis priskribitaj detale por medie riĉigitaj ratoj, ebla rolo por ΔFosB en la mediacio de ĉi tiuj protektaj fenotipoj ne estis plene taksita. Antaŭaj studoj pri media riĉigo montris, ke kompare kun norma medio (SE), riĉigita medio pliigas bazajn ΔFosB-nivelojn en kaj D1 kaj D2 mezaj sponaj neŭronoj de striaj regionoj en musoj. (Solinas et al., 2009; Lobo et al., 2013). Krome, riĉigitaj Wistar-ratoj montris levitajn ΔFosB pozitivajn ĉelojn en la NAc kaj prefrontal-kortekso kompare kun SE-ratoj, sugestante eblan rolon de ΔFosB en la protekta toksomania fenotipo al nikotino. (Venebra-Muñoz et al., 2014). Plue, tro ekspresado de ΔFosB tra la striato de musoj pliigas ĉiutage kuradon de radoj, kio povas esti analoga al la pliigita aktiveco de ratoj en riĉigita medio. (Werme et al., 2002).

En la nuna studo, ni hipotezis ke: (1) media riĉigo pliigus amasiĝon de bazaj ΔFosB-niveloj en la NAc; kaj (2) ĉi tiu amasiĝo de ΔFosB kontribuus al la protektaj efikoj de media riĉiĝo.

Materialoj kaj metodoj

bestoj

Por media riĉigo, viraj Sprague-Dawley-ratoj (Harlan, Houston, TX, Usono) estis hazarde atribuitaj al aŭ EC aŭ IC-loĝado de postnaska tago 21 ĝis tago 51. EC-ratoj estis grupigitaj (20 per kaĝo) en granda metala kaĝo (70 × 70 × 70 cm) kun pluraj malmolaj plastaj objektoj (infanaj ludiloj, plastaj ujoj, PVC-tuboj, ktp.). Ĉi tiuj objektoj estis anstataŭigitaj per novaj objektoj kaj reordigitaj en novan agordon ĉiutage. IC-ratoj estis simple loĝataj en normaj polikarbonataj kaĝoj. Ratoj restis en ĉi tiuj kondiĉoj dum la eksperimentoj kaj ĉiuj kondutaj provoj kaj biokemiaj provoj komenciĝis post 51-aĝaj tagoj (t.e. almenaŭ 30-tagoj da riĉigo / izolado). Por la troekspreso de ΔFosB, viraj Sprague-Dawley-ratoj (Harlan, Houston, TX, Usono) estis akiritaj je grandeco 225 – 250 g kaj paro-loĝigitaj en normaj polikarbonataj kaĝoj antaŭ esti stereotaktike injektitaj kun adeno-asociita viral-vektoro (AAV2) tro ekspresi ΔFosB kun verda fluoreska proteino (GFP) aŭ nur GFP kiel kontrolo (vidu sube). Normaj ratoj kaj akvo estis libere haveblaj al ĉiuj ratoj krom dum kondutaj provoj kaj manĝa regulado. Ĉiuj ratoj estis konservitaj en kontrolita medio (temperaturo, 22 ° C; relativa humido, 50%; kaj 12 h lumo / malhela ciklo, lumoj sur 600 h) en Asocio por Takso kaj Akredito de Laboratoria Besto-Prizorgado (AAALAC) aprobita kolonio. . Ĉiuj eksperimentoj konformas al la NIH-Gvidilo por Prizorgo kaj Uzo de Laboratoriaj Bestoj kaj la Institucia Komitato pri Kuraco kaj Uzo de Bestoj de Universitato de Teksaso.

Ekologia riĉigo estas kunmetita manipulado konsistanta el noveco, socia kontakto kaj ekzercado. Paro loĝigo provizas socian kontakton kaj tiel reprezentas EC (vidu Gvidilon NIH). Tiel, la taŭga kontrolgrupo por kondiĉo kun noveco, socia kontakto kaj ekzerco estus grupo sen novedzo, socia kontakto aŭ ekzerco, la IC-kondiĉo. IC-ratoj montras malpli multajn signojn de kronika streso ol EC-ratoj. Specife, EC-ratoj pligrandigis suprajn adrenalojn (Mlynarik et al., 2004), malakceptis CORT-respondojn (Stairs et al., 2011), Atenuis tuja-frua gena indukto (Zhang et al., manuskripto en preparo) kaj ΔFosB-amasiĝo (Solinas et al., 2009; Lobo et al., 2013), ĉiuj signoj de kronika streso (Crofton et al., reviziante).

Psikologia streso

Riĉigitaj kaj izolitaj ratoj estis metitaj en malŝpareblajn molajn plastajn ronĝilojn (DecapiCone®, Braintree Scientific Inc., MA, Usono) dum 60-min por 1-tago (akra) aŭ 9-tagoj (ripetita). Por mallongaj eksponaj mRNA-testoj, 30-ratoj (5-ratoj per grupo) estis dekapitataj 30-min post la komenco de la lasta periodo de bremsita streĉado, cerboj de rato estis ĉerpitaj kaj la NAc estis disektita por ARNm-analizo. Por imunohistokemio, 12-ratoj perfuziĝis kun salo kaj 4% paraformaldehido, cerboj ĉerpitaj, post-fiksitaj en 4% paraformaldehido kaj stokitaj en 20%-glicerolo en 1xPBS ĉe 4 ° C. Rataj cerboj estis tranĉitaj ĉe 40 μm per frostiga mikrotomo. Cerboj estis rikoltitaj 24 h post la fina streso por permesi al la plenlonga proteino FosB degeli (Perrotti et al., 2008).

Intravena kokain-memadministrado kun media riĉigo

Enplantado de kateteroj intravenosas

Ratoj estis anestezitaj uzante ketaminon (100 mg / kg IP) kaj xilazinon (10 mg / kg IP) kaj Silasta katetero estis enmetita kaj sekurigita en la jugula vejno, elirante la haŭton sur la dorson de la besto. Ĉiutage oni konfuzis la katetojn kun 0.1 ml da sterila sala solvaĵo enhavanta heparinon (30.0 U / ml), penicilinan G-kalion (250,000 U / ml) kaj streptokinase (8000 IU / ml) por eviti infekton kaj konservi la kateteron en la daŭro dum la tuta daŭro de eksperimentoj.

Kokaino-memadministrado kun media riĉigo

Dudek riĉigitaj kaj 20 izolitaj ratoj estis metitaj en operantajn ĉambrojn 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, St. Albans, VT) kaj permesis premi levilon por infuzaĵoj de kokaino (0.5 mg / kg / infuzaĵo, NIDA-drogprovizo, Esplora Instituto pri Triangulo, NC, Usono) aŭ salo sub fiksa proporcio 1 (FR1) horaro por 2 h ĉiutage por tuta 14-tagoj. Por konservi similan konsumon de kokaino inter la grupoj EC kaj IC estis maksimume 30-infuzaĵoj por sesio. Tiĉa pretiga kapacito estis limigita al 30-specimenoj, do la plej malrapidaj respondaj ratoj de ĉiu grupo ne estis procesitaj, lasante N-ojn de 8 por kokaino kaj 7 por salaj grupoj. Tiel, ne ekzistis EC / IC-diferencoj en totala konsumado de kokaino aŭ tempokodo de infuzaĵoj inter EC kaj IC-ratoj. Rataj cerboj estis ĉerpitaj 3 h post la komenco de la lasta memadministra sesio kaj la NAc estis disektita por ARNm kaj proteina analizo. Unu flanko de la NAc estis uzata por Western blot, la alia flanko por qPCR.

Senkontesta administrado de kokaino kun media riĉigo

Por rekta komparo al antaŭe publikigita literaturo (Hope et al., 1994; Chen et al., 1995), EC (N = 12) kaj IC-ratoj (N = 12) estis injektitaj kun salo aŭ 20 mg / kg kokaino intraperitoneally (IP) dum 1-tago (akra) aŭ 9-tagoj (ripetita). Unu EC-specimeno estis perdita dum pretigo. La akra grupo ricevis injektojn da salo dum 8-tagoj kaj unu injekton de kokaino en la tago 9, tiel ke ĉiuj ratoj ricevis la saman nombron da injektoj. Kruinoj estis ĉerpitaj 30 min post la lasta injekto kaj la NAc disekcis por analizo de ARNm.

Cuantificación de mRNA uzante qPCR

La RNA estis ĉerpita homogenigante en RNA STAT-60 (Teltest, Friendswood, TX), apartigante RNA de DNA kaj proteino uzante kloroformon, kaj precipitante la tutan RNA kun izopropanol. Kontaminanta DNA estis forigita (TURBO DNA-Free, Life Technologies, CA, Usono) kaj 5 ug de la purigita RNA estis inversa transskribita en cDNA (SuperScript III First Strand Synthesis: Invitrogen-katalogo # 18080051). ΔFosB mRNA estis kvantigita uzante kvantan realtempan PCR (SYBR Green: Applied Biosystems, Foster City, CA) sur rapida termokciklilo 7500 de Aplikita Biosistemoj XNUMX kun printiloj dizajnitaj por detekti nur ΔFosB (antaŭen: AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT; inversigi: GCCGAGGACTTGAACT) detekti raton GAPDH (antaŭen: AACGACCCCTTCATTGAC; inversigi: TCCACGACATACTCAGCAC). Ĉiuj printempoj estis validigitaj kaj analizitaj por specifeco kaj lineareco antaŭ eksperimentoj (Alibhai et al., 2007).

Western blot

La dekstra flanko de la NAc de kokaino aŭ salo mem-administranta EC kaj IC-ratojn estis homogenigita en bufro enhavanta sukerozon, Hepes-buferon, natria fluoruro, 10% SDS, kaj proteazojn kaj fosfatase-inhibitojn (Sigma-Aldrich: P-8340, P -2850, P-5726). Koncentriĝo de proteinoj estis taksita uzante la Taĉan BCA-Proteinan Kestan Enspezon (Thermo Scientific, IL, Usono). Ĉar proteino eltirata de unu rato ne sufiĉis por analizo, 2-specimenoj de la sama grupo estis kunigitaj, produktante 4-specimenojn por ĉiu grupo. Proteinaj specimenoj estis denaturataj je 95 ° dum 5 min kaj kuris sur gelian gradientan 10-20% poliacrilamidon (Kriterio TGX, Laboratorioj Bio-Rad, CA, Usono), poste translokigitaj al membrano de polivinilidena fluoruro (PVDF) (Millipore, MA, Usono ). La membrano estis blokita per blot-grado blokanta (senbrida seka lakto), inkubita kun primaryFosB-primara antikorpo (kuniklo, 1: 1000, #2251, Cell Signaling Technology, MA, Usono) kaj primara antikorpo β-actina (muso, 1: 1000 , Cell Signaling Technology, MA, Usono), lavita per TBST kaj poste incuba per fluoreskaj malĉefaj antikorpoj (azeno kontraŭ kuniklo (780 nm), azeno kontraŭ muso (680 nm), 1: 15000, Li-Cor Biosciences, NE, USONO). Okcidentaj blotoj tiam estis bildigitaj (Odiseado, Li-Cor Biosciences, NE, Usono) kaj proteinniveloj kvantigitaj per la Odiseado-programaro.

Immunohistoĥemio

Por Figuro Figure11 (N = 3), ĉeloj enhavantaj ΔFosB estis videblaj kaj kalkulataj per imunohistoocheemia etikedado de ΔFosB en NAc-tranĉaĵoj makulitaj per DAB (DAB-peroksida substrato-ilaro, Vetoraj Laboratorioj, CA, Usono). La cerboj estis ĉerpitaj, post fiksitaj, krioprotektitaj kaj sekciitaj en 40 μm-tranĉaĵoj enhavantaj la NAc sur glitiga glacia mikrotomo (Leica Biosystems, IL, Usono). La tranĉaĵoj restis flosantaj kaj enŝovitaj per 1xPBS antaŭ ol estingis perogenajn peroksidasojn, antaŭ ol blokiĝis kun 3% normala kapra serumo (Jackson ImmunoResearch, PA, Usono) kun 0.3% tritono kaj avidino D (Vektoraj Laboratorioj, CA, Usono). NAc-tranĉaĵoj estis inkubataj kun FosB-primara antikorpo dum la nokto (1: 1000, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, Usono) kun 3% kapra serumo, 0.3% tritono, 1xPBS, kaj biotina solvo (Vector Laboratories, CA, Usono). Kvankam ĉi tiu antikorpo rekonas kaj FosB kaj ΔFosB, antaŭaj Western Blot-studoj montris, ke ĉe 24 h post stimulo, la granda plimulto de la imunohistoocheemia signalo estas kunmetita de ΔFosB ĉar FosB degradas bone antaŭ 24 h (Perrotti et al., 2008). Post lavado, tranĉaĵoj estis inkubitaj kun biotinilata kaprina kontraŭ-kuniklo duaranga antikorpo IgG (Vector Laboratories, CA, Usono), kapra serumo, kaj 1xPBS. Poste, tranĉaĵoj estis inkubitaj kun avidin-biotin-kompleksa (ABC) peroksidasa makulo por 15 min (Thermo Scientific, IL, Usono). Fine, tranĉaĵoj estis muntitaj, senhidratigitaj per etanolo kaj CitriSolv (Fischer Scientific, MA, Usono) kaj kovritaj per DPX (Fisher Scientific). Por kalkulado de ĉeloj, sekcioj estis samplaj de Bregma + 1.80 al + 1.44 de ĉiu besto. La tuta nombro de imunopozitivaj ĉeloj ΔFosB estis kalkulita el kvar sekcioj de NAc el kerno kaj ŝelo de ĉiu rato.

figuro 1  

streso kaj [pliigo]FosB en ratoj EC kaj IC. (A – D) Reprezenta imunohistoocheemia DAB-makulado de ΔFosB en NAc-ŝelo kaj kerno de IC (A kaj B) kaj EC (C kaj D) ratoj kun (B kaj D) kaj sen (A kaj C) ripetita streso (N = 3). (E) kvantoro ...

Tro-ekspresanta viruso Adeno-asociita [pliigo]FosB

AAV2-bazita vektoro kiu esprimas ΔFosB kaj humanigitan renilon GFP (hrGFP; Winstanley et al., 2007, 2009a,b) aŭ hrGFP-kontrolo-vektoro (N = 10 ĉiu) estis injektita bilateralmente en la raton NAc. Ĉar ne estas IC-homoj, paro-gastigitaj ratoj estis uzataj anstataŭ IC-ratoj por ĉi tiu studo por pliigi gravecon al la scienca komunumo per pruvo de la efikoj de ΔFosB Sendependa de la EC / IC-paradigmo. Estis uzata kiel kontrolo AAV esprimanta hrGFP, sed kiu ne tro elpremas ΔFosB. La esprimo de ΔFosB en vivo estis validigita per imunofluoreskenta makulado kun primara antikorpo FosB (1: 200, Rabbit, Cell Signaling Technology, MA, Usono). AAV-vektoroj estis injektitaj bilateralmente en la ŝelon de NAc (1 μl / flanko super 10 min) uzante koordinatojn (AP = 1.7, L = 2.0, D = −6.5). La kondutaj testoj komencis 3 semajnojn post la stereotoksika kirurgio. Ĝusta lokigo estis determinita imunohistokemie post la fino de kondutisma testado.

Neofobia sukroza

ΔFosB tro ekspresantaj ratoj (N = 10) kaj kontrolaj ratoj (N = 8) estis pritraktitaj dum 1 semajno antaŭ la komenco de kondutaj provoj. Por testi maltrankvilan konduton, ratoj estis taksitaj de neofobio al nova gusto (sukrozo). Ratoj estis apartigitaj en individuajn kaĝojn kaj akvo estis forigita je 1600 h. Normaj akvaj boteloj estis plenigitaj kun 1% p / v sukrosa solvo en la normala "frapa" akvo de la ratoj kaj pesis antaŭ ol esti metitaj sur ĉiun kaĝon ĉe 1800 h. Post 30 min, la boteloj estis forigitaj kaj reeziĝintaj, kaj la diferenco de la pezo de sukerosa boteloj antaŭ kaj post la testo estis kalkulita. Poste, sukerozo estis anstataŭigita sur la kaĝoj dum pliaj 2 tagoj por lasi la ratojn familiariĝi kun la gusto de sukerozo antaŭ la testo de prefero de sukeroza.

Levita pli maze

Alia testo de angoro-simila konduto, la pliigita labirinto (EPM), estis testita 2 tagojn post sukeroza neofobio. EPM mezuras vektor-modifitajn esploradajn kondutojn en nova kaj maltrankviliga produkta medio (Green et al., 2008). Du fermitaj brakoj kaj du malfermitaj brakoj (Med Associates Inc., VT, Usono) mezuris 12 × 50 cm estis 75 cm super la planko kaj havis fotobranĉojn ĉe la enirejo de ĉiu brako. Tempo pasita en la malfermitaj brakoj estis kontrolita dum 5 min per fotobranĉaj paŭzoj per Med-PC-programaro.

Malvarma induktita defecado

La tagon post EPM, tria maltrankviliga testo estis uzata: defecado en respondo al iomete streĉa medio (malvarme). Polikarbonataj musaj kaĝoj (33 × 17 × 13 cm) estis antaŭ-malvarmetigitaj sur glacio dum 10 min. La ratoj estis metitaj en la kaĝojn sur glacio dum 30-min kaj la nombro da fekal-boli estis registrita ĉiun 5-min.

Socia kontakto

En la sekva tago, depresio-simila konduto estis mezurita per socia interaga testo. Ratoj estis apartigitaj por la 24 h antaŭ testado. En testotago la ratoj estis metitaj en novan medion (plasta ujo, 45 × 40 × 45 cm) kun ilia kaĝo-kunulino kaj la konduto estis registrita video dum 30 min. La kvanto da tempo, kiam la paro de ratoj pasigis zorgadon unu kun la alia, estis mezurita de enketisto blinda al la stato de la ratoj.

Sakarozo-preferon

Post socia kontakto, la testo de prefero de sukerozo estis uzata kiel modelo de anhedonio. Parigitajn ratojn estis disigitaj ĉe 1600 h kun manĝaĵo sed ne rajtigis aliron al akvo por 2 h. Je 1800 h du pre-pesitaj akvoboteloj estis metitaj sur ĉiun kaĝon, unu enhavante akvon, la alian 1% sukerosolvaĵon en akvo. La akvo-boteloj estis metitaj en la normalan pozicion dum la sukroza estis metita proksimume 10 cm for. La boteloj estis forigitaj kaj reeziĝis post 15 min.

Agado de lokomotoro

Tri tagojn post sukeroza prefero, lokomotora agado estis taksita sub normalaj lumkondiĉoj metante la ratojn en klarajn Plexiglas-ĉambrojn (40 × 40 × 40 cm) kun maldika tavolo de litotukoj, ĉirkaŭita de du 4 × 4 fotobaj matricoj, unu 4 cm supre. la grundo kaj unu 16 cm super la tero por registri horizontalan ambuladon kaj vertikalan (eltenan) agadon. Photobeam-paŭzoj estis kontrolitaj por 2 h per modifita malferma kampo-aktiveca sistemo (San Diego Instruments, CA, Usono).

Testo de devigita naĝado

La lasta spontana kondutisma testo estis la FST, modelo sentema al antidepresivoj. Ratoj estis metitaj en Plexiglas-cilindron plenigitan kun proksimume 14 L da ĉambra temperaturo (24 ± 0.5 °) akvo por 15 min sur Sesio 1, kaj 5 min en Sesio 2 la sekvan tagon. La ratoj estis sekigitaj kaj remetitaj en siajn hejmajn kaĝojn. Naĝadagado estis registrita video kaj la enketo al la unua periodo de senmoveco (1 s) kaj totala tempo senmova estis determinita por Sesio 2 de esploristo blindigita al la kondiĉoj.

Sukura operanto respondanta

Kontrolu AAV-ratojn kaj ΔFosB-tro-ekspresajn ratojn estis reguligitaj al 85% de senpaga nutra pezo dum 7-tagoj. Ĉiuj ratoj estis trejnitaj por bari gazetaron por sukeroza buletoj (Bio-Serv, NJ, Usono) laŭ FR1-horaro de plifortikigo por 15-minaj sesioj en sinsekvaj 5-tagoj. Tiam al ratoj oni donis senpagan aliron al manĝaĵoj dum 3-tagoj kaj denove rajtigis presi por sukerosaj buletoj laŭ FR1-horaro por 15-min, ĉi-foje ĉe 100% senpaga nutra pezo.

Kokaina memregado

akiraĵo

Unu semajnon post katetera kirurgio (kiel priskribite pli supre), ĉiuj ratoj (7-kontrolaj ratoj kaj 10 ΔFosB tro-ekspresaj ratoj, unu kontrolo-rato estis perdita de katetera kirurgio) estis metitaj en operantajn ĉambrojn 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, St. Albans, VT) kaj rajtis mem-administri 0.2 mg / kg / infuza unu-dozon de kokaino por 2 h per sesio dum 4 tagoj; tiam 0.5 mg / kg / infuzaĵo dum 3-tagoj laŭ FR1-horaro. Ĉiu infuzaĵo estis liverita intravejne en volumo de 0.01 ml super 5.8 s. La infuzaĵo estis signalita per lumigado de du lumturoj por 20 s, kiuj signalis tempodaŭron dum kiu ne plu povis atingi pliajn infuzaĵojn.

formorto

Ĉar kronika kokainekspozicio supozeble kaŭzus amasiĝon de ΔFosB en kontrolaj ratoj, kio kaŭzus ke la ratoj en ambaŭ vektoraj kondiĉoj havus altajn nivelojn de ΔFosB en la cerbo, la ratoj limiĝis al siaj hejmaj kaĝoj dum 4-tagoj sen memadministrado permesi. LevelsFosB-proteinaj niveloj malpliiĝantaj en kontrol-vektoraj ratoj. Post abstinado de 4-tagoj, ratoj estis metitaj en la ĉambron de operacioj kaj permesis mem-administri salan anstataŭe de kokaino sub FR1-horaro por 1 h-sesioj por 3 sinsekvaj tagoj.

Fiksa rilatuma doza respondo

Ĉiu rato (kontrolo kaj ΔFosB troekspresanta) rajtis mem-administri 0.00325, 0.0075, 0.015, 0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5 mg / kg / infuza kokaino en ordo supreniranta laŭ FR1-horaro ĉiutage dum 5 sinsekvaj tagoj. Ratoj mem-administris ĉiun dozon de kokaino dum 30 min.

Rekomenco de induktita de kokaino

Ratoj spertis en-sesian restarigan proceduron. Ratoj ricevis 0.5 mg / kg / infuzaĵon laŭ FR1-horaro por 60 min sekvita per 3 h de formorto (kun kontingentaj kokainaj manieroj). Tuj poste ili ricevis IP-injekton (Green et al., 2010) de kokaino el unu el kvin dozon (0, 2.5, 5, 10, aŭ 20 mg / kg) laŭ hazarda ordo por ĉiu rato tra la 5-sesioj de restarigo. La lasta 3 h-fazo de la kunsido estis reintegrigita, ree kun kokainaj manieroj, sed tamen sen kokainaj infuzaĵoj. Post ĉiu sesio de reintegriĝo induktita de kokaino, la ratoj ricevis 2-tagajn tagojn de alta dozo (0.5 mg / kg / infuzaĵo) kokaino laŭ FR1-horaro por 2 h por konservi altajn indicojn de respondado tra sesioj. Dum la procezo de mem-administrado de kokaino, la kateteroj de iuj ratoj iom post iom perdis paciencon; tial la datumoj de 6-kontrolaj ratoj kaj 7 ΔFosB-tro-ekspresaj ratoj estis uzataj en ĉi tiu analizo.

Statistika analizo

Duflankaj analizoj de varianco (ANOVAoj) kaj duflankaj ripetaj mezuroj ANOVA estis faritaj por kompari la kvar kuracajn grupojn kaj planitaj komparoj estis uzataj por kompari diferencojn inter kondiĉoj. Signifo inter nur du kondiĉoj estis analizita per tiu de Studento t-testo. Ĉiuj t-testaj datumoj pasis la normon de Shapiro-Wilk. Ĉiuj datumoj estas esprimitaj kiel meznombro ± SEM. Statistika signifo estis fiksita ĉe p <0.05. Ĉiuj riĉigitaj ratoj por ununura eksperimento estis loĝigitaj en unu kaĝo sed traktataj kiel apartaj temoj, havigante implicojn pri la afero de ebla pseŭdo-apliko.

rezultoj

EC-ratoj montras pli altajn bazajn nivelojn de [pliigo]FosB en NAc ol IC-ratoj

Kompare al IC-ratoj, EC-ratoj havas signife pli grandan nombron da ΔFosB pozitivaj ĉeloj en ambaŭ NAc-kerno (t(4) = -3.31, p <0.05) kaj ŝelo (t(4) = -6.84, p <0.05) (Figuroj 1A, C, E, F), sugestante, ke la baza tono de ΔFosB estas pli alta ĉe EC-ratoj kompare al IC-ratoj. Krome, Western blot-rezultoj montris fortan tendencon por EC-salaj ratoj havantaj pli altan bazan nivelon de proteinFosB-proteino en la NAc kompare al IC-salaj ratoj (t(6) = -2.03, p = 0.089; Figuro Figure2A) 2A) uzante dutrakan teston. Tamen, konsiderante la pliigitan esprimon en Figuroj 1A – F kaj la kreskoj viditaj en aliaj artikoloj (Solinas et al., 2009), ni fidas tiurilate. La trovoj de Western blot ankaŭ kontrolas, ke preskaŭ ĉiuj FosB-similaj imunoreaktivecoj detektitaj de imunohistokemio estis ΔFosB kaj ne FosB, kio ne estis detektebla ĉe 24 h.

figuro 2  

Kokaino kaj [pliigo]FosB en ratoj EC kaj IC. (A – B) Meza ΔFosB-proteino (A) kaj mRNA (B) nivelo (± SEM) en NAc post 14-tagoj da mem-administrado de salo aŭ kokaino en IC kaj EC-ratoj (N = 7 – 8). Ruĝaj bandoj en Panelo denota ...

[pliigo]FosB estas diferenca induktita en EC kaj IC-ratoj pro streĉiĝo

Estis signifa ĉefa efiko de ripetita bremsa streĉado en ambaŭ ŝeloj (F(1, 8) = 16.6, P <0.005) kaj kerno (F(1, 8) = 7.9, P <0.05) de la NAc kaj ĉefa efiko de media riĉiĝo en ŝelo (F(1, 8) = 22.3, P <0.005; Figuroj 1A – F). Pli grave, la interagado inter streĉado kaj media riĉigo ankaŭ estis signifa en ambaŭ ŝeloj (F(1, 8) = 25.6, P <0.01) kaj kerno (F(1, 8) = 6.7, P <0.05). La interago estis tia, ke, post ripeta subpremado, la nombro de positiveFosB-pozitivaj ĉeloj signife pliiĝis en IC-ratoj, dum ĉi tiu nombro ne ŝanĝiĝis en EC-ratoj post ripeta streĉo.

Por plue esplori kiel ΔFosB estas dinamike reguligita per akra vs. ripetita streso kaj permesi komparon kun antaŭa esplorado (Alibhai et al., 2007), indukto de ΔFosB mRNA estis studita kun akra kaj ripeta restora streĉado (Fig (Figuro1G) .1G). Estis grava ĉefa efiko de streĉo (F(2, 24) = 31.9, P <0.001) kaj media riĉigo (F(1, 24) = 5.1, P <0.05). En la IC-ratoj, ΔFosB-mRNA estis forte induktita post akra modereco. Tamen kun ripeta streĉo, la indukto de ΔFosB-mRNA estis signife mildigita kompare kun la akra indukto. Ankaŭ estis signifa interago (F(2, 24) = 4.6, P <0.05), montrante, ke la akra indukto de ΔFosB-mRNA estis malpli ĉe EC-ratoj kompare kun IC-ratoj. Tiel, EC-ratoj havas pli altajn bazajn nivelojn de ΔFosB proteino en la NAc, sed malpli ΔFosB mRNA indukto en respondo al akra streĉisto.

[pliigo]FosB estas malsame induktita de kokaino en NAc de EC kaj IC-ratoj

Por determini ĉu EC kaj IC-ratoj respondas malsame al kokaino, ni studis la reguladon de ΔFosB-proteino kaj mRNA en rato NAc post kokaina memadministrado (Figuroj 2A, B respektive). Okcidenta eksplodo montris signifan ĉefan efikon de kokaino (F(1, 12) = 24.9, P <0.001) kaj signifa interago (F(1,12) = 5.5, P <0.05). La interago estis tia, ke ΔFosB pliiĝis pli en IC-ratoj ol EC-ratoj (Figuro (Figuro2A) .2A). Fakte post kokaina memadministrado ΔFosB-proteinaj niveloj estis signife levitaj nur en IC-ratoj. Koncerne al mRNA-niveloj, qPCR-rezultoj ankaŭ malkaŝis signifan ĉefan efikon de kokaino (F(1, 26) = 47.1, P <0.001) kaj ĉefa efiko de media riĉiĝo (F(1, 26) = 13.8, P <0.005). Kvankam ĝeneralaj niveloj estis pli malaltaj en EC-ratoj, ambaŭ grupoj pliigis ΔFosB-mRNA (Fig (Figuro2B2B).

Kvankam la proteinaj datumoj subtenis la originalan hipotezon, ĝi estis hipotezita el Figuro Figuro1G1G ke EC-ratoj montrus malpli mRNA indukto ol izolitaj ratoj en ĉi-supra kokaineksperimento, kio ne okazis, probable ĉar figuro Figuro1G1G utiligis markilon de 30 min kaj la kokainan eksperimenton utiligis markilon kun 3 h. Por plue pridemandi la mRNA-hipotezon, 30-mintempa punkto estis uzita por esplori ambaŭ akrajn kaj ripetajn kokainajn traktadojn kiel pli bonan komparon al Figuro Figuro1G.1G. Ĉar akra mem-administrado de kokaino estas problema laŭ naturo (t.e., lernado pri akiro), EC kaj IC-ratoj ricevis akutajn aŭ 9-tagojn da ripetaj senkontingentaj kokainaj IP-injektoj (20 mg / kg). Kiel hipotezita, estis grava ĉefa efiko de media riĉigo (F(1, 17) = 14.3, P <0.005), sed la ĉefa efiko de kuracado de kokaino (F(2, 17) = 3.4, P = 0.057) kaj la interago (F(2, 17) = 3.4, P = 0.055) nur montris fortajn tendencojn per du-vosta testo. Tamen, konsiderante ke ni havis direktajn hipotezojn el Figuro Figuro1G, 1G, ni estas ege komfortaj laŭ nia opinio, ke EC-ratoj montras malpli da indukto ol IC-ratoj (Figuro (Figuro2C2C).

Troa elpremo de [pliigo]FosB en NAc-ŝelo imitas la protektan riĉigo-induktitan toksomanion-fenotipon

Por esplori la efikon de ΔFosB sur rato-konduto sendependa de media riĉigo / izolado (t.e., fari ĉi tiujn rezultojn pli koncernaj al ne-EC / IC-studoj), adeno-asociita viruso (AAV) kutimis tro ekspresi ΔFosB bilateralmente en la NAc en ne riĉigitaj par-gastigitaj ratoj. Laŭ niaj antaŭaj studoj, la NAc-ŝelo estas plej sentema al kontrolado de depresio kaj drog-prenanta / serĉanta konduton do AAV-vektoroj estis injektitaj en la NAc-ŝelo en ĉi tiu studo (Green et al., 2006, 2008, 2010). Figuroj 3A, B montru la reprezentan imunohistofluoreskon de ΔFosB kun la kontrolo-vektoro (panelo A; t.e., endogena ΔFosB-esprimo) kaj la ΔFosB-troekspresanta vektoro (panelo B) en la ŝelo de NAc.

figuro 3  

Troa elpremo de [pliigo]FosB en NAc-ŝelo imitas la protektan toksomanian fenotipon de media riĉigo. (A – B) Reprezenta imunohistokemio de ΔFosB por hrGFP-kontrolo (A) kaj ΔFosB-troekspresanta (B) AAV-vektoroj. ...

Validiginte la titolon, en vivo esprimo kaj ĝenerala lokigo de la viral-vektoro, ni unue studis la efikon de troekspreso de ΔFosB en ansermodeloj. Troa ekspreso de ΔFosB en la NAc-ŝelo ne sufiĉis por reprodukti la ansiogenan efikon de media riĉigo en la sukrosa neofobio kaj malvarma streĉita defekta paradigmo. (datumoj ne montritaj) Krome, ne estis efiko sur la EPM (datumoj ne montritaj). Ĉar media riĉigo produktas antidepresan similan efikon ĉe ratoj, ni poste faris testojn rilataj al depresio sur ΔFosB-tro-ekspresantaj ratoj. Simile al maltrankvilaj modeloj, rezultoj montris, ke troekspresiva ΔFosB en NAc-ŝelo ne sufiĉis por malpliigi similan depresion en la sukeroza prefero-testo, la socia interaga testo, aŭ la FST. (datumoj ne montritaj)

En la ekologia riĉiga paradigmo, EC-ratoj elmontras pli malaltan bazan lokomotivan agadon ol IC-ratoj (Bowling et al., 1993; Bovlo kaj Bardo, 1994; Smith et al., 1997; Green et al., 2003, 2010). Por esplori la efikon de troekspreso ΔFosB en la ŝelo de NAc, spontanea lokomotora aktiveco estis provita dum 120 min. Uzante du-vostan teston, la rezultoj malkaŝis, ke tro ekspresado de ΔFosB en la ŝelo de NAc produktis fortan tendencon por malpliiĝo de barata lokomotora agado en ratoj (Figuro (Figuro3C; 3C; t(16) = 1.84, p = 0.084). Kvankam ili ne estas sufiĉe statistike signifaj per du-vosta testo, ĉi tiuj datumoj ankoraŭ intrigas, konsentite ke ili konformas al nia eksplicita direkta hipotezo bazita sur Green et al. (2010), kiu konformas al la efiko de media riĉigo.

IKontraŭe al modeloj de depresio kaj angoro, troekspresio de ΔFosB en NAc-ŝelo povis produkti EC-similan fenotipon en multnombraj paradigmoj de toksomanio / plifortigo. MiEn la mem-administra testo de sukerosa buleto-operantaj, estis grava interagado inter troa ekspreso ΔFosB kaj malsato instigi ratojn (F(1, 16) = 7.4, P <0.01). Ratoj troekspresas osFosB en la NAc-ŝelo grave prenis pli sukerosaj buletoj en malsataj instigaj kondiĉoj (t.e. ĉe 85% senpaga nutraĵa pezo), sed malpli multaj buletoj sub la malalta instigita kondiĉo (t.e. 100% senpaga nutra pezo; Figuro) Figuro3D), 3D), kiu imitas la EC-fenotipon perfekte (Green et al., 2010).

En la media paradigmo de riĉigo, EC-ratoj montris reduktitan serĉadon de kokaino en estingo kaj kokaina induktita restarigo (Green et al., 2010). Tiel, prenado kaj serĉado de kokaino estis mezuritaj en ΔFosB-esprimantaj ratoj uzante la paradigman administradan administradon de kokaino. Kiel modelo de avido, la paradigmo de kokaina formorto malkaŝis, ke la troa ekspreso de shellFosB en la ŝelo de NAc malpliiĝis de la serĉado de drogojr (F(1, 15) = 6.7, P <0.05; Figuro Figuro3E) .3E). Ankaŭ estis grava ĉefa efiko de sesio (F(2, 30) = 74.0, P <0.001). Por prizorgado respondanta laŭ FR1-horaro, estis signifa ĉefa efiko de dozo (F(7, 105) = 222.6, P <0.001) kaj signifa interago (F(7, 105) = 2.3, P <0.05) en akumula kokaino. La naturo de la interago estis tia, ke diferencoj estis videblaj nur ĉe pli altaj dozoj de kokaino (Fig (Figuro3F) .3F). Finfine, ĉe kokaina induktita restarigo estis grava ĉefa efiko de dozo (F(4, 44) = 15.5, P <0.001) kaj tendenco por ĉefa efiko de ΔFosB-troesprimo per duvosta testo (F(1, 11) = 4.1, P = 0.067). Tamen, konsiderante la direktan hipotezon de Green et al. (2010) kaj la statistike signifaj kaj konsekvencaj rezultoj en Figuroj 3D, E, F, verŝajne ΔFosB malpliigas reintegriĝon (Figuro (Figuro3G) .3G). Respondi la dozon de 10 mg / kg estis signife pli malalta por ratoj esprimantaj ΔFosB. La rezultoj entute indikas, ke troekspreso ΔFosB en rato NAc-ŝelo malpliigas kokainan prenadon kaj serĉadon de kondutoj, kio konformas al la kondutaj efikoj de media riĉiĝo.

diskuto

La vundebleco de individuoj al toksomanio kaj depresio estas multe trafita de mediaj faktoroj. Ekologia riĉigo estas paradigmo, kiu manipulas la vivmedion de bestoj, produktante protektajn efikojn kontraŭ multaj psikiatriaj kondiĉoj. ΔFosB ludas ŝlosilan rolon en reguligado de rekompenca funkcio en multoblaj cerbaj regionoj, inkluzive de la NAc kaj dorsal striatum (Koob et al., 1998; Saĝa, 1998; Wallace et al., 2008; Grueter et al., 2013; Pitchers et al., 2013). En ĉi tiu projekto, ni studis la dinamikan reguladon de ΔFosB per bremsado de streso kaj kokaino en riĉigitaj kaj izolitaj ratoj. La ĉefaj trovoj de ĉi tiu projekto estas:

(1) EC-ratoj levis ΔFosB-nivelojn en la NAc ĉe bazlinio kompare kun IC-ratoj;

(2) nur IC-ratoj amasigas plian ΔFosB-proteinon kun ripetita streĉo;

(3) EC-ratoj montras mildigitan indukton de ΔFosB mRNA post streĉo aŭ kokaino; kaj

(4) troekspresanta ΔFosB en la NAc de paro-gastigitaj ratoj imitas la protektan toksomanion-fenotipon, sed ne la protektan depresian fenotipon.

Oni povus atendi de la publikigita literaturo, kiu montras, ke transgenraj ΔFosB tro-ekspresaj musoj montras pliigitan sentivecon al kokainaj rekompenco kaj memadministrado je malaltaj drogaj dozoj (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Vialou et al., 2010; Robison et al., 2013), ke la ΔFosB-tro-ekspresaj ratoj en la nuna eksperimento montrus pliigitan propension al kokain-memadministrado kaj serĉado. IEn la aktualaj eksperimentoj, tamen, tro ekspresado ΔFosB en la ŝelo de NAc malpliiĝis la konsumon de kokaino kaj serĉado de kokaino dum estingo kaj restarigo, indikante malpliigitan motivon por kokaino. La diskreteco povus esti pro la fakto, ke la transgenikaj musoj esprimis ΔFosB tra la tuta striato, sed nur en dinorfinaj + ĉeloj (Colby et al., 2003). En la nuna eksperimento ΔFosB estis tro ekspresita per AAV-vektoro, kiu infektas dinorfinon + kaj encefalinon + neŭronojn. Due, la nuna studo fokusiĝis sur la NAc-ŝelo prefere ol la tuta stria regiono.

Aldone al la fenotipo de toksomanio, media riĉigo produktas profilojn antidepresivajn kaj ansiogenajn ĉe ratoj (Green et al., 2010; Vialou et al., 2010). En la nuna studo, troekspreso de ΔFosB en la NAc ne povis produkti efikojn en iu ajn el la tri deprimo aŭ tri maltrankvilaj provoj. Kvankam estas multaj eblaj faktoroj kiuj povas kontribui al ΔFosB imitante la riĉigitan toksomanion sed ne al la depresio-fenotipo, estas eble ke la NAc-ŝelo estas pli reganta por toksomania konduto dum la depresio-konduto povas esti mediata pli fortike de aliaj regionoj. La aktualaj trovoj kontraŭas studojn musoj Kie oFosB troekspreso en la NAc (kie oni ne povas fidinde distingi ŝelon kontraŭ kerno) produktis fortikajn antidepresivajn efikojn en pluraj kondutismaj provoj (Vialou et al., 2010). Unu ebla kialo estas, ke eble estas pli facile vidi la efikon de ΔFosB sur severaj stresaj kondutmodeloj kiel socia malvenko-streso. La nuna studo pri troekspreso esploris konduton similan al depresio en la foresto de severa streĉisto.

Konstante tra ĉi tiu studo, altaj bazaj niveloj de ΔFosB (ekz. De riĉiĝo, ripetita streso aŭ kokaino) korelaciis kun pli malfortaj postaj induktoj de ΔFosB. Ĉi tio povas reprezenti plafonan efikon, kun neniu plia indukto ebla super levitaj bazaj niveloj de la proteino. Eblas ankaŭ, ke akumulitaj niveloj de ΔFosB povus nutriĝi por inhibi plian indukton de ΔFosB mRNA post streĉado aŭ kokaino kiel negativan retrospektivon. Ekzemple, EC-ratoj havis altajn nivelojn de ΔFosB kaj montris mildigitan indukton de ΔFosB post streso aŭ kokaino. Ĉi tio substrekas la negativan korelacion inter ΔFosB-proteinaj niveloj kaj ĝia mRNA-indukto. La negativaj reagoj de amasigitaj ΔFosB ankaŭ respondecas pri la mildigita indukto de ΔFosB kun ripeta streĉado ĉe IC-ratoj.

Por esti klara, ni ne asertas, ke la paradigma medio pri riĉigo havas rektan tradukan gravecon, ĉar estas tre malmultaj infanoj kreskintaj en vera senvaloraĵo (oni devas rimarki, ke soci-ekonomia senvaloraĵo ne egalas al ekologia senigo). La utileco de ĉi tiu paradigmo estas, ke ĝi estas ne-drogaj, ne-kirurgiaj, ne-genetikaj manipuladoj, kiuj produktas protektajn kondutajn fenotipojn por toksomanio kaj depresio, kiuj povas esti ekspluatataj en laboratori-kontrolita medio kiel baza scienca ilo por identigi molekulajn mekanismojn. subteniva resaniĝo al psikiatriaj kondiĉoj. Antaŭa esplorado detale priskribis la kondutajn fenotipojn (Bowling et al., 1993; Bovlo kaj Bardo, 1994; Bardo et al., 1995; Green et al., 2002, 2003; El Rawas et al., 2009) kaj pli freŝaj studoj (Solinas et al., 2009; Green et al., 2010; Lobo et al., 2013), kune kun la aktuala studo, provizas indikojn pri la transkripciaj mekanismoj sub la koncernaj kondutaj fenotipoj. La malsupreniraj transkripciaj celoj genoj / proteinoj produktantaj la protektajn fenotipojn estas nuntempe esploritaj (Fan et al., 2013a,b; Lichti et al., 2014).

Nia konceptado pri media riĉigo estas, ke riĉiĝo estas kontinuumo kun izolado ĉe la malalta fino kaj plena riĉiĝo ĉe la alta fino. "Plena "riĉiĝo en ĉi tiu kazo estas difinita kiel medio kie la subjektoj estas elmontritaj al noveco, ne minaca socia kontakto kun konsiletoj, kaj estas permesitaj spaco kaj objektoj por ekzercado. Tjen tri faktoroj ĉiuj reprezentas la kunmetitan kondiĉon de "riĉiĝo" ĉar ili ĉiu rekompencas kaj ĉiu liberigas dopaminon en la NAc, kaj kiel tia, aktivigas komunan neŭrobiologian cirkviton. (Louilot et al., 1986; Calcagnetti kaj Schechter, 1992; Korvo kaj Hutto, 1992; Rebec kaj aliaj. 1997; Bevins et al., 2002). En ĉi tiu konceptado, izolado estas konsiderata kiel la grupo de kontrolo ĉar ĝi reprezentas la foreston de la manipulado (t.e., riĉigo; Crofton et al., En revizio). Tamen aliaj konceptoj estas eblaj. En unu alterna konceptado, la kontinuumo samas, sed la izoliga grupo estas la eksperimenta grupo kaj la riĉigita grupo regas. MiĈi tiu modelo, senigante la subjektojn de normala riĉiĝo is la efektiva manipulado. IEn ĉi tiu kazo, anstataŭ diri, ke riĉiĝo estas protekta, oni dirus, ke izoleco donas susceptibilidad. Ankoraŭ tria konceptado opinias, ke ne ekzistas kontinuumo kaj ke riĉiĝo kaj izoleco estas du esence malsamaj manipuladoj. En ĉi tiu vido, riĉigo kaj izoleco devas esti apartigitaj kaj ambaŭ kompare al paro-loĝata kontrolo. Manko de universala konsento pri la naturo de riĉiĝo reprezentas limigon de la paradigmo, tamen donas direkton por estontaj studoj. Sendepende, la rezultoj de ĉi tiuj eksperimentoj restas firmaj sendepende de la posta interpreto.

Mediaj kaj vivospertoj forte influas la disvolvon kaj esprimon de multaj psikiatriaj kondiĉoj. Kompreni la mekanismon de la protektaj toksomanioj kaj deprimo-fenotipoj de media riĉigo traktas fundamentan demandon en esplorado pri mensa malordo - nome la media kontribuo al susceptibilidad aŭ rezisto al psikiatriaj kondiĉoj. Ĉi tiu studo substrekas la signifon de ΔFosB en reguligado de toksomaniulaj kondutoj. En estontaj studoj, la agado de ΔFosB kaj ĝiaj aktivigaj kaj inhibiciaj efikoj sur specifaj celaj genoj bezonas esti plu esploritaj en la modelo de media riĉigo.

Financado kaj malkaŝo

Yafang Zhang, neniu; Elizabeth J. Crofton, neniu; Dingge Li, neniu; Mary Kay Lobo, neniu; Xiuzhen Fan, neniu; Eric J. Nestler, R37DA007359; Thomas A. Green, DA029091.

Konflikto de intereso-deklaro

La aŭtoroj deklaras, ke la esplorado estis farita sen manko de komercaj aŭ financaj rilatoj, kiujn oni povus konsideri kiel ebla konflikto de intereso.

Dankojn

Ĉi tiuj eksperimentoj estis financitaj per subvencio de Nacia Instituto pri Drogaj Misuzoj, DA029091 kaj R37DA007359. Kokaino provizita de la Nacia Instituto pri Drogaj Misuzoj.

Referencoj

  1. Akdeniz C., Tost H., Meyer-Lindenberg A. (2014). La neurobiologio de socia ekologia risko por skizofrenio: evolua esplora kampo. Soc. Psikiatrio Psikiatrio. Epidemiol. 49, 507 – 517 10.1007 / s00127-014-0858-4 [PubMed] [Kruco Ref]
  2. Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ (2007). Reguligo de mRNA-esprimo de fosB kaj DeltafosB: studoj en vivo kaj in vitro. Cerbo Res. 1143, 22 – 33 10.1016 / j.brainres.2007.01.069 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  3. Bardo MT, Bowling SL, Rowlett JK, Manderscheid P., Buxton ST, Dwoskin LP (1995). Ekologia riĉigo mildigas lokomotivan sentivigon, sed ne en vitro-dopamina liberigo, induktita de amfetamino. Farmacolo. Biochem. Konduto 51, 397-405 10.1016 / 0091-3057 (94) 00413-d [PubMed] [Kruco Ref]
  4. Bevins RA, Besheer J., Palmatier MI, Jensen HC, Pickett KS, Eurek S. (2002). Novelo-objekta loko: kondutaj kaj dopaminergiaj procezoj en esprimo de novega rekompenco. Konduto Cerbo Res. 129, 41-50 10.1016 / s0166-4328 (01) 00326-6 [PubMed] [Kruco Ref]
  5. Bovlo SL, Bardo MT (1994). Lokomotoraj kaj rekompencaj efikoj de amfetamino en riĉigitaj, sociaj kaj izolaj kreskigitaj ratoj. Farmacolo. Biochem. Konduto 48, 459 – 464 10.1016 / 0091-3057 (94) 90553-3 [PubMed] [Kruco Ref]
  6. Bovlo SL, Rowlett JK, Bardo MT (1993). La efiko de media riĉiĝo sur amfetamin-stimulita lokomotiva agado, dopamina sintezo kaj dopamina liberigo. Neŭrofarmakologio 32, 885 – 893 10.1016 / 0028-3908 (93) 90144-r [PubMed] [Kruco Ref]
  7. Calcagnetti DJ, Schechter MD (1992). Loĝokondiĉo rivelas la rekompencan aspekton de socia interagado en junaj ratoj. Fiziolo. Konduto 51, 667 – 672 10.1016 / 0031-9384 (92) 90101-7 [PubMed] [Kruco Ref]
  8. Chen J., Nye HE, Kelz MB, Hiroi N., Nakabeppu Y., Hope BT, et al. (1995) Reguligo de delta FosB kaj FosB-similaj proteinoj per elektrokonvulsivaj prenoj kaj kokainaj traktadoj. Mol. Farmacolo. 48, 880 – 889 [PubMed]
  9. Colby CR, Whisler K., Steffen C., Nestler EJ, Self DW (2003). Striatala ĉel-speca troa ekspreso de DeltaFosB plibonigas stimulon por kokaino. J. Neurosci. 23, 2488 – 2493 [PubMed]
  10. Crowder WF, Hutto CW (1992). Funkciigaj lokcirkvitaj mezuroj ekzamenitaj per du nondrogaj plifortigiloj. Farmacolo. Biochem. Konduto 41, 817 – 824 10.1016 / 0091-3057 (92) 90233-6 [PubMed] [Kruco Ref]
  11. Elisei S., Sciarma T., Verdolini N., Anastasi S. (2013). Resilience kaj deprimaj malordoj. Psikiatro. Danub. 25 (Suppl. 2), S263 – S267 [PubMed]
  12. El Rawas R., Thiriet N., Lardeux V., Jaber M., Solinas M. (2009). Mediana riĉigo malpliigas la bonvolajn sed ne la aktivigajn efikojn de heroino. Psikofarmakologio (Berl) 203, 561 – 570 10.1007 / s00213-008-1402-6 [PubMed] [Kruco Ref]
  13. Fano X., Li D., Lichti CF, Verda TA (2013a). Dinamika proteomiko de kerno akuzita en respondo al akra psikologia streĉo en medie riĉigitaj kaj izolitaj ratoj. PLoS Unu 8: e73689 10.1371 / journal.pone.0073689 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  14. Fano X., Li D., Zhang Y., Verda TA (2013b). Malsamaj fosfoproteomaj reguligoj de kerno akcentita en medie riĉigitaj kaj izolitaj ratoj kiel respondo al akra streĉiteco. PLoS Unu 8: e79893 10.1371 / journal.pone.0079893 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  15. Green TA, Alibhai IN, Hommel JD, Dileone RJ, Kumar A., ​​Theobald DE, et al. (2006) Indukto de induktebla kAMP-frua subpremanta esprimo en kerno akcentita per streĉo aŭ amfetamino pliigas kondutajn respondojn al emociaj stimuloj. J. Neurosci. 26, 8235 – 8242 10.1523 / jneurosci.0880-06.2006 [PubMed] [Kruco Ref]
  16. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, et al. (2010) Mediaj riĉigadoj produktas kondutan fenotipon mediatan per malalta cikla adenosina monofosfata reago-elemento liganta (CREB) agadon en la kerno accumbens. Biol. Psikiatrio 67, 28 – 35 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  17. Green TA, Alibhai IN, Unterberg S., Neve RL, Ghose S., Tamminga CA, et al. (2008) Indukto de aktivaj transskribaj faktoroj (ATFoj) ATF2, ATF3 kaj ATF4 en la kerno akcentaj kaj ilia reguligo de emocia konduto. J. Neurosci. 28, 2025 – 2032 10.1523 / jneurosci.5273-07.2008 [PubMed] [Kruco Ref]
  18. Green TA, Cain ME, Thompson M., Bardo MT (2003). Mediaj pliriĉigoj malpliigas nikotin-induktan hiperactivecon en ratoj. Psikofarmakologio (Berl) 170, 235 – 241 10.1007 / s00213-003-1538-3 [PubMed] [Kruco Ref]
  19. Verda TA, Gehrke BJ, Bardo MT (2002). Ekologia riĉigo malpliigas intravenan amfetaminan memadministradon en ratoj: dozon-respondaj funkcioj por fiksaj kaj progresiv-proporciaj horaroj. Psikofarmakologio (Berl) 162, 373 – 378 10.1007 / s00213-002-1134-y [PubMed] [Kruco Ref]
  20. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC (2013). ΔFosB malsame modulas rektan kaj nerektan vojfunkcion. Proc. Natl. Acad. Sci. Usono 110, 1923 – 1928 10.1073 / pnas.1221742110 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  21. Espero B., Kosofsky B., Hyman SE, Nestler EJ (1992). Reguligo de tuja frua gena esprimo kaj AP-1-ligado en la rato-kerno akuzita de kronika kokaino. Proc. Natl. Acad. Sci. Usono 89, 5764 – 5768 10.1073 / pnas.89.13.5764 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y., et al. (1994) Indukto de longdaŭra AP-1-komplekso kunmetita de ŝanĝitaj Fos-similaj proteinoj en cerbo per kronika kokaino kaj aliaj kronikaj traktadoj. Neŭra 13, 1235 – 1244 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2 [PubMed] [Kruco Ref]
  23. Jha S., Dong B., Sakata K. (2011). Riĉigita medikamentterapio renversas similan konduton de depresio kaj restarigas reduktitan hipokampan neŭrogenon kaj proteinajn nivelojn de cerb-derivitaj neŭrotrofaj faktoroj en musoj malhavantaj sian esprimon per iniciatinto IV. Transl. Psikiatria 1: e40 10.1038 / tp.2011.33 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  24. Kato T., Iwamoto K. (2014). Kompleta DNA-metilado kaj hidroximetilado-analizo en la homa cerbo kaj ĝia impliko en mensaj malordoj. Neŭrofarmakologio 80, 133 – 139 10.1016 / j.neuropharm.2013.12.019 [PubMed] [Kruco Ref]
  25. Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM, et al. (1999) Esprimo de la transskriba faktoro deltaFosB en la cerbo kontrolas sentivecon al kokaino. Naturo 401, 272-276 10.1038 / 45790 [PubMed] [Kruco Ref]
  26. Kelz MB, Nestler EJ (2000). deltaFosB: molekula ŝaltilo subesta longtempa neŭra plasteco. Curr. Opinio. Neurol. 13, 715-720 10.1097 / 00019052-200012000-00017 [PubMed] [Kruco Ref]
  27. Koob GF, Sanna PP, Bloom FE (1998). Neŭroscienco de toksomanio. Neŭra 21, 467 – 476 [PubMed]
  28. Larson EB, Graham DL, Arzaga RR, Buzin N., Webb J., Green TA, et al. (2011) Troa ekspreso de CREB en la nukleo accumbens-ŝelo pliigas kokainan plifortigon en mem-administrantaj ratoj. J. Neurosci. 31, 16447 – 16457 10.1523 / JNEUROSCI.3070-11.2011 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  29. Laviola G., Hannan AJ, Macrì S., Solinas M., Jaber M. (2008). Efikoj de riĉigita medio sur bestaj modeloj de neurodegenerativaj malsanoj kaj psikiatriaj malordoj. Neurobiol. Disaj. 31, 159 – 168 10.1016 / j.nbd.2008.05.001 [PubMed] [Kruco Ref]
  30. Lichti CF, Fan X., angla RD, Zhang Y., Li D., Kong F., et al. (2014) Ekologia riĉigo ŝanĝas proteinan esprimon kaj ankaŭ la proteoman respondon al kokaino en rato-kerno. Fronto. Konduto Neŭroscio. 8: 246 10.3389 / fnbeh.2014.00246 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  31. Lobo MK, Zaman S., Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, et al. (2013) Δ FosB-indukto en striataj mezaj sponaj neŭronaj neŭtipoj en respondo al kronikaj farmacologiaj, emociaj kaj optogenetikaj stimuloj. J. Neurosci. 33, 18381 – 18395 10.1523 / JNEUROSCI.1875-13.2013 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  32. Louilot A., Le Moal M., Simon H. (1986). Diferenca reaktiveco de dopaminergiaj neŭronoj en la kerno akuzanta en respondo al malsamaj kondutaj situacioj. Studo en vivo voltammetrika en liberaj moviĝantaj ratoj. Cerbo Res. 397, 395 – 400 10.1016 / 0006-8993 (86) 90646-3 [PubMed] [Kruco Ref]
  33. McBride WJ, Kimpel MW, Mcclintick JN, Ding ZM, Edenberg HJ, Liang T., et al. (2014) Ŝanĝoj en gena esprimo ene de la plilongigita amigdala sekvante binge-similan alkoholon trinkantan de adoleskaj alkoholuloj (P) ratoj. Farmacolo. Biochem. Konduto 117, 52 – 60 10.1016 / j.pbb.2013.12.009 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  34. Mlynarik M., Johansson BB, Jezova D. (2004). Riĉigita medio influas adrenokortikan respondon al imuna defio kaj gena esprimo de glutamato-receptoro en rato hipokampo. Ann. NY Akademio. Sci. 1018, 273 – 280 10.1196 / analoj.1296.032 [PubMed] [Kruco Ref]
  35. Nestler EJ (2001). Molekula neurobiologio de toksomanio. Estas. J. toksomaniulo. 10, 201 – 217 10.1080 / 105504901750532094 [PubMed] [Kruco Ref]
  36. Nestler EJ (2008). Recenzo. Transskribaj mekanismoj de toksomanio: rolo de DeltaFosB. Filozofoj. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 363, 3245 – 3255 10.1098 / rstb.2008.0067 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  37. Nestler EJ, Barrot M., Self DW (2001). DeltaFosB: daŭra molekula ŝaltilo por toksomanio. Proc. Natl. Acad. Sci. Usono 98, 11042 – 11046 10.1073 / pnas.191352698 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  38. Perrotti LI, Hadeishi Y., Ulery PG, Barrot M., Monteggia L., Duman RS, et al. (2004) Indukto de deltaFosB en rekompenc-rilataj cerbaj strukturoj post kronika streso. J. Neurosci. 24, 10594 – 10602 10.1523 / jneurosci.2542-04.2004 [PubMed] [Kruco Ref]
  39. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B., Renthal W., Maze I., Yazdani S., et al. (2008) Distingaj ŝablonoj de DeltaFosB-indukto en cerbo per drogoj de misuzo. Sinapso 62, 358 – 369 10.1002 / syn.20500 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  40. Kruĉoj KK, Vialou V., Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM (2013). Naturaj kaj drogaj rekompencoj agas sur oftaj neŭralaj plastaj mekanismoj kun ΔFosB kiel ŝlosila mediatoro. J. Neurosci. 33, 3434 – 3442 10.1523 / jneurosci.4881-12.2013 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  41. Rebec GV, Christensen JR, Guerra C., Bardo MT (1997). Regionaj kaj tempaj diferencoj en reala tempo dopamina elfluo en la kerno akcenta dum nove elektebla noveco. Cerbo Res. 776, 61-67 10.1016 / s0006-8993 (97) 01004-4 [PubMed] [Kruco Ref]
  42. Robison AJ, Vialou V., Mazei-Robison M., Feng J., Kourrich S., Collins M., et al. (2013) Kondutaj kaj strukturaj respondoj al kronika kokaino postulas nutran buklon kun ΔFosB kaj kalcio / calmodulin-dependa proteino kinase II en la nukleo accumbens-ŝelo. J. Neurosci. 33, 4295 – 4307 10.1523 / jneurosci.5192-12.2013 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  43. Smith JK, Neill JC, Costall B. (1997). Postmovadaj loĝkondiĉoj influas kondutajn efikojn de kokaino kaj d-amfetamino. Psikofarmakologio (Berl) 131, 23 – 33 10.1007 / s002130050261 [PubMed] [Kruco Ref]
  44. Solinas M., Chauvet C., Thiriet N., El Rawas R., Jaber M. (2008). Reverto de kokaino toksomanio per media riĉigo. Proc. Natl. Acad. Sci. Usono 105, 17145 – 17150 10.1073 / pnas.0806889105 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  45. Solinas M., Thiriet N., El Rawas R., Lardeux V., Jaber M. (2009). Mediaj riĉigoj dum fruaj stadioj de la vivo reduktas la kondutajn, neŭrokemiajn kaj molekulajn efikojn de kokaino. Neuropsikofarmakologio 34, 1102 – 1111 10.1038 / npp.2008.51 [PubMed] [Kruco Ref]
  46. Stairs DJ, Prendergast MA, Bardo MT (2011). Mediaj-induktitaj diferencoj en kortikosterona kaj glukortikoida ricevilo blokado de amfetamina mem-administrado en ratoj. Psikofarmakologio (Berl) 218, 293 – 301 10.1007 / s00213-011-2448-4 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  47. Thiel KJ, Pentkowski NS, Peartree NA, Pentristo MR, Neisewander JL (2010). Mediaj vivkondiĉoj enkondukitaj dum devigita sindeteno ŝanĝas serĉadon de kokaino kaj esprimo de proteino Fos. Neŭroscienco 171, 1187 – 1196 10.1016 / j.neuroscience.2010.10.001 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  48. Thiel KJ, Sanabria F., Pentkowski NS, Neisewander JL (2009). Kontraŭdiraj efikoj de media riĉiĝo. Int. J. Neuropsikofarmakolo. 12, 1151 – 1156 10.1017 / s1461145709990472 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  49. van Winkel M., Peeters F., Van Winkel R., Kenis G., Collip D., Geschwind N., et al. (2014) Efiko de variado en la geno BDNF sur socia streĉa sentiveco kaj bufra efiko de pozitivaj emocioj: repliko kaj etendo de geno-medio-interago. Eur. Neuropsikofarmakolo. 24, 930 – 938 10.1016 / j.euroneuro.2014.02.005 [PubMed] [Kruco Ref]
  50. Venebra-Muñoz A., Corona-Morales A., Santiago-García J., Melgarejo-Gutiérrez M., Caba M., García-García F. (2014). Riĉigita medio mildigas nikotinan memadministradon kaj induktas ŝanĝojn en expressionFosB-esprimo en la rato prefrontal de la rato kaj kerno accumbens. Neuroreport 25, 694 – 698 10.1097 / wnr.0000000000000157 [PubMed] [Kruco Ref]
  51. Vialou V., Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, Dietz DM, Ohnishi YN, et al. (2010) DeltaFosB en cerbaj rekompencaj cirkvitoj mediacias eltenemon al streĉaj kaj kontraŭpremaj respondoj. Nat. Neŭroscio. 13, 745 – 752 10.1038 / nn.2551 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  52. Wallace DL, Vialou V., Rios L., Carle-Florence TL, Chakravarty S., Kumar A., ​​et al. (2008) La influo de DeltaFosB en la kerno alkutimiĝas al natura rekompenco-rilata konduto. J. Neurosci. 28, 10272 – 10277 10.1523 / jneurosci.1531-08.2008 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  53. Wang Y., Cesena TI, Ohnishi Y., Burger-Caplan R., Lam V., Kirchhoff PD, et al. (2012) Malgranda molekula kribrado identigas reguligilojn de la transskriba faktoro ΔFosB. ACS Chem. Neŭroscio. 3, 546 – 556 10.1021 / cn3000235 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  54. Werme M., Messer C., Olson L., Gilden L., Thorén P., Nestler EJ, et al. (2002) Delta FosB reguligas radojn. J. Neurosci. 22, 8133 – 8138 [PubMed]
  55. Winstanley CA, Bachtell RK, Theobald DE, Laali S., Green TA, Kumar A., ​​et al. (2009a). Pliigita impulsemo dum retiriĝo de kokain-memadministrado: rolo por DeltaFosB en la orbitofrontala kortekso. Cerbo. Kortekso 19, 435 – 444 10.1093 / cercor / bhn094 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  56. Winstanley CA, Green TA, Theobald DE, Renthal W., LaPlant Q., DiLeone RJ, et al. (2009b). La indukto de DeltaFosB en orbitofrontala kortekso potencas lokomotivan sentiviĝon malgraŭ mildigo de la kognitiva misfunkcio kaŭzita de kokaino. Farmacolo. Biochem. Konduto 93, 278 – 284 10.1016 / j.pbb.2008.12.007 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
  57. Winstanley CA, LaPlant Q., Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, et al. (2007) DeltaFosB-indukto en orbitofrontala kortekso mediacias toleron al kokaina-induktita kognitiva misfunkcio. J. Neurosci. 27, 10497 – 10507 10.1523 / jneurosci.2566-07.2007 [PubMed] [Kruco Ref]
  • Saĝa RA (1998). Drog-aktivigo de cerbaj rekompencaj vojoj. Drogaj alkoholoj Dependas 51, 13-22 10.1016 / s0376-8716 (98) 00063-5 [PubMed] [Kruco Ref]