Perinatal Okcidenta Dieta Konsumo Gvidas al Profunda Plastikeco kaj GABAergic Fenotype Ŝanĝoj ene de Hypothalamus kaj Rekompencan Vojon de Naskiĝo al Seksa Matureco en Rato (2017)

. 2017; 8: 216.

Eldonita en linio 2017 Aug 29. doi:  10.3389 / fendo.2017.00216

PMCID: PMC5581815

abstrakta

Perinatala patrina konsumo de energio densa manĝaĵo pliigas la riskon de obezeco en infanoj. Ĉi tio estas asociita kun troa konsumo de aĉa manĝaĵo konsumata pro sia hedonaj posedaĵoj. La suba mekanismo, kiu ligas perinan patrinan dieton kaj idaron preferon de graso, estas ankoraŭ malbone komprenata. En ĉi tiu studo, ni celas studi la influon de patrina nutraĵo kun alta graso / alta sukero [okcidenta dieto (WD)] dum gestado kaj laktado laŭ la rekompencaj vojoj kontrolantaj la nutradon en la idaro de nasko ĝis seksa matureco. Ni elfaris longforman sekvadon de WD kaj Control-idaro ĉe tri kritikaj tempoperiodoj (infanaĝo, adoleskeco, kaj plenkreskeco) kaj koncentriĝis pri esplorado de la influo de perinatal-ekspozicio al plaĉa dieto sur (i) grasa prefero, (ii) gena esprimo de profilo , kaj (iii) neuroanatomaj / arkitekturaj ŝanĝoj de la mezolimbaj dopaminergiaj retoj. Ni montris, ke WD-nutrado limigita al la perinata periodo havas klaran longdaŭran influon sur la organizado de homeostataj kaj hedonaj cerbaj cirkvitoj sed ne sur grasa prefero. Ni pruvis periodan specifan evoluon de la prefero por graso, kiun ni korelaciis kun specifaj cerbaj molekulaj subskriboj. En la idaro de virgulinoj, kiuj observis virgulinojn, ni observis dum infanaĝo la ekziston de grasa prefero asociita kun pli alta esprimo de ŝlosila geno implikita en la dopamina (DA) sistemoj; en adoleskeco, alta grasa prefero por ambaŭ grupoj, iom post iom reduktita dum la testo de 3-tagoj por la WD-grupo kaj asociita kun malpliigita esprimo de ŝlosila geno implikita en la DA-sistemoj por la WD-grupo, kiu povus sugesti kompensan mekanismon por protekti ilin. de plia alta grasa ekspozicio; kaj fine en plenaĝeco, prefero por graso estis identa al kontrolo de ratoj sed asociita kun profunda modifo en ŝlosilaj genoj implikitaj en la reto γ-aminobutira acido, receptoroj de serotonino kaj polisialica acido-NCAM-dependa remodelado de la hipotalamo. Entute, ĉi tiuj datumoj malkaŝas, ke patrina vetero, limigita al la perinata periodo, havas neniun daŭran efikon al energia homeostazo kaj grasa prefero poste en la vivo, kvankam forta remodelado de la hipotalama hejmata kaj rekompenca vojo implikita en manĝa konduto okazis. Pliaj funkciaj eksperimentoj necesus por kompreni la gravecon de tiuj remodelado de cirkvitoj.

Ŝlosilvortoj: rekompenco, DOHaD, manĝaĵaj preferoj, nutrado, γ-aminobutria acido, TaqMan malalt-denseca tabelo

Enkonduko

Frua vivmedio kaj eventoj estas nun bone rekonitaj por kontribui al antaŭdiro al sano kaj malsano poste en la vivo (-). Oni proponis la koncepton pri metabola enmiksiĝo por priskribi kiel ŝanĝoj en la nutra kaj hormona medio dum la perinata periodo povas antaŭdiri la idaron al la obezeco kaj ĝiaj asociitaj patologioj poste. Grava afero de nia okcidenta vivmaniero estas subnutrado kiel konsekvenco de konsumado de energio densa manĝaĵo. Efektive, individuoj, kiuj estas elmontritaj al patrina konsumado de ĉi tiu speco de manĝaĵo, havas pli grandan riskon disvolvi obesidad kaj metabolan sindromon (, ). Multaj studoj pruvis, ke patrina alta graso-dieto (HFD) per gestado kaj suĉado havas longdaŭran efikon sur feta metabolo (-). Krom vojoj implikitaj en metabola regulado, cerbaj rekompencaj sistemoj ankaŭ ludas gravan rolon en nutrado de konduto (, ). Mezolimbika dopamina (DA) neurotransmisio, intense studita en la kunteksto de rekompenco kaj toksomanio, estas ŝanĝita en diet-induktita obezeco en ambaŭ homoj (-) kaj bestoj (-). DA projekcioj disvolviĝas, plejparte, posttage (), kaj tial ilia evoluo povas esti tuŝita de frua dieto. Dum la lastaj jaroj, eksperimentoj sur ronĝuloj evidentigis, ke patrina HFD-konsumado plibonigas hedonan nutradon en idaro (, ). Kvankam ĉi tiu observado implikis iujn ŝanĝojn en la DA-funkcia sistemo (-), limigitaj datumoj estas disponeblaj pri la ontogenio kaj la remodelado de la rekompencaj vojoj dum frua vivo (). Plie, ĉu kaj kiel la ne-DA-signalanta parto de la rekompenca sistemo kiel la GABA (γ-aminobutira acido) sistemo povus esti tuŝita de la perinatal-nutra streĉado ne estas dokumentita. Ĝuste, GABA-neŭronoj ŝajnas ludi ŝlosilan rolon en rekompenco kaj aversio. Ventra tegmenta areo (VTA) GABA-neŭronoj ricevas similan mastron de enigo de malsamaj cerbaj areoj (), kaj lastatempaj optogenet-bazitaj kondutismaj studoj reliefigas la ĉefan rolon de VTA GABA en kondiĉita aversio () Kaj rekompencas konsuman konduton (). Nucleus accumbens (NAc) estas ĉefe konsistigita de la projekcio de la GABAergic-mezaj sponaj neŭronoj kaj funkcias kiel limfika-motora interfaco integrante signalojn ekestiĝantajn de la limia sistemo kaj transformante ilin en agon tra elfluo al la ventra pallidum (VP) kaj aliaj motoroj.). Kaj fine, la hipotalamo, kiu estas konstituita de multnombraj GABA-ligoj en LH () kaj arka kerno, integras signalojn de malsato kaj saĝeco ().

Ĉi tiu studo celas identigi la influon de konsumado de patrina okcidenta dieto (WD) en la idaro de nasko ĝis seksa matureco (i) pri grasa prefero (ii) sur gena esprimo de la DA-sistemo, la GABAergic-sistemo kaj la plastikeco de hipotalamo. , kaj (iii) pri la neuroanatomaj / arkitekturaj ŝanĝoj de la mezolimbaj dopaminergiaj retoj por la sama periodo. Ni tial taksis, laŭ longedaŭra studo (de malplenigado, P25, ĝis seksa matureco, P45 kaj plenkreskula tempo, P95), la efikon de patrina WD sur korpa pezo kresko kaj adiposa histo-evoluo de idaro tenita sub regula malplenigo post la demeto. Samtempe ni faris grasan preferon-teston sekvitan de dediĉita transcriptomia analizo kaj posta ĉefa ĉefa analizo (PCA) de elekto de markiloj por manĝaĵa konsumado, elekto kaj instigo-reguligaj sistemoj. Niaj rezultoj signife riĉigis la lastatempajn rezultojn koncentriĝantajn pri nutra programado de la DA-sistemo.

Materialoj kaj metodoj

Etika Komento

Ĉiuj eksperimentoj estis faritaj konforme al la gvidlinioj de la loka komitato pri bestaj bestoj, la EU (direktivo 2010 / 63 / EU), la Institut National de la Recherche Agronomique (Parizo, Francio) kaj la Franca Veterinara Departemento (A44276). La eksperimenta protokolo estis aprobita de la institucia komitato pri etiko kaj registrita sub referenco APAFIS 8666. Ĉiu singardemo estis prenita por minimumigi streĉon kaj la nombron de bestoj uzataj en ĉiu serio de eksperimentoj.

Bestoj kaj Dietoj

Bestoj estis konservitaj en 12 h / 12 h lumo / malhela ciklo en 22 ± 2 ° C kun manĝaĵo kaj akvo ad libitum. Tridek du inoj Sprague-Dawley-ratoj (korpa pezo: 240 – 290 g) ĉe gestada tago 1 (G1) aĉetis rekte de Janvier (Le Genest Saint Isle, Francio). Ili estis gastigitaj individue kaj nutris aŭ kontrolan dieton (KD) (5% bova grasa grafo kaj 0% sukrozo) por 16 el ili aŭ WD (21% bova graso kaj 30% sukerozo) por 16 el ili dum la gestaciaj kaj laktaj periodoj. (vidu Tabelon Table1: 1: dieta kunmetaĵo en procento kcal de ABdiet Woerden, Nederlando). Ĉe la naskiĝo, la grandeco de la litero estis ĝustigita al ok idoj per portilo kun 1: 1-vira al virina proporcio. Ni konservis 12 el 16-digoj kun portilo kunmetita de 4-viroj kaj 4-inoj por ĉiu grupo. Ĉe la demeto (P21), la idaro naskita al KD kaj WD-digoj estis tenita sur norma chow ĝis la fino de la eksperimento (Figuroj (Figuroj1A, B) .1A, B). La korpa pezo de la hundido estis registrita ĉe la naskiĝo kaj poste ĉiutage ĉe 10: 00 am ĝis P21 (eltiro). Post eltiriĝo kaj ĝis la fino de la eksperimento, ratoj estis pezitaj ĉiun 3-tagojn. Ni prezentas nur datumojn pri vira idaro. Inaj ratoj estis uzataj por alia studo (Figuro (Figuro11).

tablo 1 

Dieta kunmetaĵo en procento kcal de ĉiu ero de la patrinaj dietoj administritaj dum gestado kaj laktado kaj norma dieto por idaro.
figuro 1 

Eksperimenta dezajno. (A) Skema diagramo de la studo. Tridek du inaj SPD-ratoj ĉe gestada tago 1 (G1) estis nutritaj aŭ kontrola dieto por 16 el ili aŭ okcidenta dieto por la aliaj dum gestado kaj laktado. Ĉe la demetiĝo, la idaro ...

Konduto (Provo de Elekto de Du Boteloj)

Tri kritikaj evoluoperiodoj estis studitaj (P21 al P25: junulo, P41 al P45: adoleskeco kaj P91 al P95: juna plenkreskulo). Viraj hundidoj de 24 (n = 12 po grupo) estis hazarde elektitaj kaj metitaj en individuan kaĝon por plenumi du-botelan elekton senpagan teston (Figuroj (Figuroj1A, B) 1A, B) (-). Ĉi tiu provo estis uzita por specife studi la allogon al grasa gusto disdonante ĝin de la dolĉa gusto kaj kiel eble plej multe de la metabolan efikon de konsumado de kalorioj. Efektive, 1% maizo-oleo-solva konsumo asocias nur kun konsumado de 0.09 kcal / ml nur. Post unu tago de kutimado al la ĉeesto de du boteloj, la testo efektiviĝis dum 2-tagoj ĉe P25 kaj pli ol 4-tagoj ĉe P41 kaj P91 (Figuro (Figuro1A) .1A). Detale, ĉe la demetiĝo (P21), 24-hundidoj estis loĝataj individue dum 2-tagoj (Figuro1A): 1A): tago 1, kutima fazo, tago 2, ratoj ricevis du-botelajn senpagajn elektojn inter emulsio de 1% maizo oleo en 0.3% xantana gomo (Sigma Aldrich, St. Quentin Fallavier, Francio) kaj solvo de xantana gumo ( 0.3%). Ĉe P41 kaj P91, 24-hundidoj estis uzataj kaj du-botela senpaga elekto estis proponita dum tri sinsekvaj tagoj. La konsumo de xantana goma solvo kaj gusto-solvo (maizo-oleo 1%) estis registrita ĉiutage ĉe 11: 00 am dum 3-tagoj (P45 kaj P95). La pozicio de la du boteloj estis ĉiutage inversigita por eviti pozicion de prefero de pozicio. La takso de grasa prefero estis kalkulita kiel la proporcio de "grasa solvo" volumo konsumita al la tuta volumo konsumita en 24 h. Ĉiuj ratoj estis konservitaj sub norma chow-dieto dum la tuta konduta testo.

Kolekto de Tissoj kaj Specimen de Sango

La tagon post la lasta tago de la du-botela senpaga elekto-testo, la duono de la ratoj (n = 6 po grupo) estis rapide eutanigitaj inter 09:00 kaj 12:00 matene de CO2 enspiro. Sango estis kolektita en tuboj kun EDTA (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, Francio) kaj centrifugita ĉe 2,500 g por 15 min ĉe 4 ° C. Plasmo frostiĝis je −20 ° C. Organoj kaj individua retroperitoneala grasa deponejo estis disektitaj kaj pezitaj. La cerbo estis rapide forigita kaj metis en cerban matricon (WPI, Sarasota, FL, Usono rato 300 – 600 g). Unue la hipotalamo estis diserta [laŭ la atlasaj koordinatoj de Paxinos: −1.0 al −4.5 mm de Bregma ()] tiam, por ĉiu rato, du koronaj tranĉaĵoj de 2 mm dikeco je la nivelo de NAc kaj alia je la nivelo de la VTA estis akiritaj. Specimenoj de dekstra kaj maldekstra NAc kaj dekstra kaj maldekstra VTA (kvar specimenoj entute per besto) rapide estis akiritaj per du malsamaj biopsiaj punĉoj (Stiefel Laboratories, Nanterre, Francio) (diametro de 4 mm por la NAc kaj 3 mm por la ventrala meza cerbo). La specimenoj estis serpentumitaj en likva nitrogeno kaj konservitaj je −80 ° C por posta determinado de gena esprimo per TaqMan malalt-denseca tabelo (TLDA).

La aliaj ratoj (n = 6 po grupo) estis profunde anestezitaj per pentobarbitalo (150 mg / kg ip) kaj perfuzitaj per transkardia fiziologia sala fluaĵo sekvata de glacia malvarma 4% paraformaldehido en fosfata bufro (PB), pH 7.4. La cerboj estis rapide forigitaj, mergitaj en la sama fiksilo dum 1 h je 4 ° C, kaj fine konservitaj en 25% PB-sakarozo dum 24-48 h. La cerboj tiam estis frostigitaj en izopentano je −60 ° C, kaj fine stokitaj je −80 ° C ĝis uzo. La NAc, hipotalamo kaj VTA estis tranĉitaj en 20 µm seriaj koronaj sekcioj kun kriostato (Microm, Microtech, Francheville, Francio). Du aŭ tri serioj de 10 vitraj lumbildoj enhavantaj 4-6 sekciojn estis faritaj por ĉiu cerba areo. Por ĉiu vitra glitado la seriaj sekcioj estas interspacigitaj de 200 µm (Fig (Figuro66).

figuro 6 

Kvantigado de pozitivaj neŭronoj de TH / NeuN en ventra tegmenta areo (VTA) kaj TH-densecaj fibroj en nukleaj akciboj (NAc) de demeto ĝis plenkreskeco en idaro de okcidenta dieto (WD) aŭ kontrolaj dietaj (CD) digoj nutritaj. (A) Skemo de Paxinos kaj tiu de Watson ...

Biokemiaj Plasmaj Analizoj

EDTA plasmo kolektita sur ratoj P25, P45, kaj P95 estis uzata por mezuri plasman glukozon, NEFA (neesterigitaj grasaj acidoj), insulinon kaj leptinon. Glukozo kaj NEFA estis mezuritaj uzante kolorimetriajn enzimajn reagojn kun specifaj kitoj (glukozo kaj NEFA PAP 150-kitoj, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, Francio). Hormonoj estis taksitaj kun specifaj ELISA-iloj sekvante la instrukciojn de la fabrikanto por insulino kaj leptino (rato / muso-insulino ELISA-kit, rato-leptina ELISA-kit, Linco Research, St. Charles, MO, Usono).

Immunohistoĥemio

Vitraj lumbildoj enhavantaj seriajn VTA kaj NAc-sekciojn unue estis blokitaj por 3-4 h kaj tiam inkubataj dumnokte je 4 ° C kun miksaĵo de la jenaj antikorpoj: muso kontraŭ-NeuN (1: 500; IgM; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, Usono) kaj anti-TH-kuniklo (1: 1,000; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, Usono). Post inkubacio kun primaraj antikorpoj kaj posta lavado kun PB, sekcioj estis inkubataj en miksaĵo de malĉefaj antikorpoj: konjugita azeno kontraŭ-musa IgM de Alexa 488 kaj konjugita azeno kontraŭ rabia IgG (568: 1; Invitrogeno, ThermoFisher Scientific, Waltham) , MA, Usono) por 500 h. Sekcioj estis muntitaj en superfrosto kaj oraj glitiloj (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, Usono), sekigitaj per aero, kaj kovritaj per antifada reagilo ProLong ™ Gold (Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, Usono).

TH Neŭronoj Grafo en VTA

Por ĉiu rato, TH-pozitivaj ĉeloj estis kalkulitaj kiel antaŭe priskribita () al tri malsamaj vizaĝo-kudraj niveloj de la VTA: ĉe la nivelo de la eliro de la tria nervo (distanco relative al Bregma: −5.3 mm), 200 µm rostral kaj 200 µm kaŭda al ĉi tiu nivelo. (Figuroj6A) .6A). Por la maldekstra kaj dekstra flanko, ciferecigita bildo enhavanta la tutan VTA de la akcesora fina stacio media ĝis la flanka bordo de la mezencefalono estis akirita uzante × 40-pligrandigon de NanoZoomer-XR Cifereca glitilo. C12000 (Hamamatsu, Japanio). Linio estis tirita ĉirkaŭ la perimetro de la VTA por ĉiu sekcio. La limoj estis elektitaj ekzamenante la formon de la ĉeloj kaj referencante al la atoro Paxinos kaj Watson. Dopaminergia neŭrono estis difinita kiel imunoreaktiva ĉela korpo NeuN (+) / TH (+) kun klare videbla kerno. Uzante la programon NIH Image J (kromprogramo de la ĉelo), la ĉeloj NeuN (+) / TH (+) estis kalkulitaj de du malsamaj homoj kun neniu scio pri la bestogrupoj. Kalkulantaj eraroj de Split-ĉeloj estis korektitaj per la formulo de Abercrombie (), kie N = n[t/(t + d)]N = totala nombro de ĉeloj; n = nombro de ĉeloj kalkulitaj; t = sekcio dikeco; kaj d = ĉela diametro), kaj ĉi tiu korekta faktoro estis 0.65. Datumoj estas esprimitaj kiel averaĝa [NeuN (+) / TH (+) en maldekstra kaj dekstra VTA] ± SEM.

Fibra Denseco en NA

La enhavo de proteino TH en la dopaminergiaj nervaj finaĵoj de la NAc estis taksita per anatomia densitometria analizo de imunelektitaj sekcioj de TH. La denseco de la fibroj TH estis kvantigita je tri arbitraj niveloj laŭ la vizaĝa akso de la NAc (Bregma 2.20, 1.70, kaj 1.20 mm) (Figuro (Figuro6B) .6B). Mallonge, ciferecigita bildo enhavanta la tutan striadon kaj NAc akiritan uzante × 40-pligrandigon de NanoZoomer-XR Cifereca glitiga skanilo C12000 (Hamamatsu, Japanio) estis akiritaj. Por donita NAc, linio estis tirita ĉirkaŭ la tuta kerno por difini la areon de mezurado de optika denseco (OD) (Figuro6B) .6B). La akirita valoro estis normaligita per la valoro OD mezurita el cirkla zono tirita sur la korpus callosum (regiono ne makulita por TH-imunokemio) de la sama sekcio per NIH Image J-programaro. Datumoj estas esprimitaj kiel meznombro de la OD-rilatumo (OD-valoro en NAc / OD-valoro en korpus callosum de la tri sekcioj) ± SEM.

Gene Expression de TLDA kaj TaqMan

RNA estis izolita de snap-frostigita NAc, VTA-riĉigitaj specimenoj, kaj hipotalamo, uzante la NucleoSpin RNA / protein-kiton (Macherey-Nagel, Hoerdt, Francio). Tuta RNA estis submetita al DNase-digesto sekvante la instrukciojn de la fabrikanto, la kvanto estis taksita per la absorbanco 260 / 280 nm UV, kaj la kvalito estis taksita uzante la Bioanalizilon de Agilent 2100, tiam la nombro de RNA-integreco (RIN) estis kalkulita. Specimenoj kun RIN sub 8 estis forĵetitaj. Unu mikrogramo de totala RNA estis inversa transskribita en cDNA uzante Altkapacitan RT-kiton (Applied Biosystems, Foster City, CA, Usono) en tuta volumo de 10 µl.

Kiel antaŭe priskribita (), la TLDA estas 384-puto mikro-fluida karto sur kiu 384 samtempaj realtempaj PCRoj povas esti realigitaj (Applied Biosystems, Foster City, CA, Usono). Ni uzis specife dizajnitan TLDA faritan por kovri malsamajn genajn familiojn koncernajn al plastikeco kaj reguligo de konsumado de manĝaĵoj. Ĉiu kutimo karto estis agordita kiel 2 × 4-specimenaj ŝarĝaj linioj enhavantaj 2 × 48-reagajn ĉambrojn (referenco: 96a). A 92-gena aro (Tabelo) S1 en Suplementa Materialo) kaj kvar domaj genoj (18S, Gapdh, Polr2a, kaj Ppia) estis studitaj. Realtempa PCR estis efektivigita per reaktoroj de Life Technologies TaqMan kaj funkciigis ABI Prism 7900HT-sekvencan detektosistemon (Applied Biosystems, Foster City, CA, Usono). Malmultaj fluoreskaj datumoj estis kolektitaj tra la PCR uzante la programon SDS 2.3 (Applied Biosystems, Foster City, CA, Usono), kiu plue generis sojlajn ciklojn Ct kun aŭtomata determino de kaj bazlinio kaj sojlo. Post filtrado uzante ThermoFisher nubo-App (ThermoFisher, Usono) por diskriminacii aberajn PCR-kurojn, la provoj per specimeno estis n = 6 (n = 5 por WD-grupo ĉe P25). La datumoj tiam estis analizitaj per ThermoFisher Cloud App (ThermoFisher, Usono) por relativa kvantigado. Relativa kvantigado de gena esprimo (RQ) baziĝis sur la kompara Ct-metodo uzanta la ekvacion RQ = 2-ΔΔCt, kie ΔΔCt por unu gena celo estis sia propra Ct-variaĵo subtrahita el kalibra specimeno kaj normaligita per endogena kontrolo. Precize, ni determinis la plej stabilan mastrumadon geno uzante geNorm-algoritmon (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, Usono). Inter la kvar genaj hejmaj genoj, Gapdh estis difinita kiel la endogena kontrolo por NAc kaj hipotalamo, kaj Ppia por VTA kaj tio estis vera por ĉiuj specimenoj de la tri tempaj periodoj analizitaj. Grafika reprezentado de genesprimo estis permane desegnita por asigni unu koloron por 10% pliigo de gena esprimo rilate al la KD-grupo. Signifa variaĵo, uzanta ne-parametran Wilcoxon subskribita-rango-testo, estis rimarkita kun asterisko.

Statistika Analizo

Rezultoj estas esprimitaj kiel meznombraj ± SEM en tabeloj kaj ciferoj. Ne-parametrika testo de Mann – Whitney estis uzata por la analizo de Korpa pezo ĉe malsamaj tempopunktoj, Grasaj preferoj kaj OD-rilatumo akirita de la imunohistokemio.

Por taksi la signifon de la grasaj preferoj de 3-tagoj, ni faris kolumnan statistikan analizon por ĉiu tago. Por ĉiu grupo, konsumo de grasa solvo kaj kontrolsolvo estis testita per la ne-parametrika subskribita rango de Wilcoxon. Ni komparis la preferindan mezvaloron kun la hipoteza valoro de 50% (punktita ruĝa linio). Signifa variaĵo estis rimarkita per ruĝa asterisko. Ni uzis la saman teston por la qPCR RQ-valoro-analizo; ni komparis la mezuman RQ-valoron kun la hipoteza valoro de 1. Signifa variaĵo estis rimarkita per asterisko (Figuro (Figuro44).

figuro 4 

Relativa gena esprimo en nukleo accumbens (NAc), ventra tegmenta areo (VTA), kaj hipotalamo de perinatal-okcidenta dieto manĝis ratojn kaj perinatal-kontrolan dieton manĝitajn ratojn je tri tempaj periodoj. Samtempa kvantigo de la esprimo de genoj en ...

Por la analizo de plasma ekzemplo, ni realigis teston ne-parametran Mann kaj Whitney. La nombro de TH-pozitivaj ĉeloj estis analizita per dudirekta ANOVA kaj la p valoro estis kalkulita. Pro la obleco de la efektivigitaj testoj, Bonferroni post hoc korekto estis aplikita nur sekvis ĉi tiun teston. Statistika analizo estis farita per Prism 6.0-programaro (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, Usono).

Malkontrolita PCA unue estis farita sur 130-parametroj (TLDA, konduto, kaj plasmaj datumoj) ĉe malsamaj tempopunktoj por ĉiu cerba biopsia punĉo (VTA, NAc, kaj hipotalamo) por bildigi la ĝeneralan strukturon de la datumaro (t.e. tri tutmondaj PCA laŭ tempopunkto). PCA povas esti difinita kiel la ortogonala projekcio de la datumoj sur malpli grandan dimensian linean spacon, tiel ke la varianco de la projektitaj datumoj maksimumiĝas en la subspaco. Ni unue filtris genojn ne esprimitajn aŭ iomete esprimitajn (Figuro (Figure5) .5). Valoroj por idaro de KD-digaj digoj kaj de WD-nutraj digoj aperis en malsamaj koloroj en individuaj PCA-intrigoj por bildigi se ĉi tiuj du eksperimentaj grupoj estas bone apartigitaj per la nekontrolitaj PCA-komponentoj. Ĉi tiu analizo disigas la grupojn de genoj diferencaj inter la du grupoj de idaro. Poste, fokusaj PCA-oj estis faritaj sur diversaj raketoj de ARNm-markiloj: plasteco (ĉela adhero, citoskeleto, neurotrofa faktoro, sinaptogenezo, kaj reguliga transskribo), DA-vojo, GABAergic-vojo, epigenetika modulatoroj (histona deacetilase kaj histona acetila transferase). Ĉi tiuj koncentritaj PCAs permesas bildigi samtempe la korelacion inter patrinaj dietoj kaj iuj markiloj kaj korelacioj inter specifaj familiaj genoj. Kvalita skalo estis uzata por la analizo de la PCA kaj koncentrita PCA: +++: tre bona disiĝo; ++: bona apartigo kun unu rato sur la malĝusta flanko de la PCA-disiĝo; +: sufiĉe bona disiĝo kun du ratoj (unu el ĉiu grupo) sur la malĝusta flanko, -: neniu klara disiĝo.

figuro 5 

Ĉefa analiza analizo (PCA). Poentaro disvastigas intrigon de PCA (A, B). (A) Tutmonda PCA de nucleus accumbens (NAc) specimenoj de P95-rataj viroj. Nigraj trianguloj respondas al idaro de kontrola dieto (KD) manĝitaj digoj kaj ruĝaj trianguloj respondas al idaro ...

rezultoj

Korpa Pezo kaj Kresko

La konsumado de patrina WD dum gestado (de G1 ĝis G21) ne influis korpan pezon ĉe naskiĝo (Figuro (Figuro2) 2) (KD: 6.55 ± 0.07 g vs WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (Figuroj (Figuroj2A, B) .2A, B). Korpa pezo de naskiĝo ĝis eltiro estis 21% pli alta en idaro naskita de digoj de WD ol en idoj de KD-digoj kun korpa pezo signife pli alta ĉe demetado en idaro naskita de digoj WD (36.19 ± 0.90 g vs 47.32 ± 1.48 g p <0.001) (Fig (Figuro2C) .2C). De la malpliiĝo ĝis la fino de la eksperimento (P95), la ratoj estis nutritaj per norma chow-dieto kaj korpa pezo restis pli alta por la idaro de WD-digoj ol de idaro de KD-uloj. En detaloj: dum adoleskeco (P39) (Figuroj (Figuroj2A, D), 2A, D), KD: 176.8 ± 3.3 g vs WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016 kaj ĉe P93 (juna plenkreskulo) (Figuroj (Figuroj2A, E) 2A, E) KD: 478 ± 9.9 g vs WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.

figuro 2 

Evoluado de korpaj pezoj de naskiĝo ĝis plenaĝeco. (A) Korpa peza tago 0 ĝis tago 100. Sukcena periodo en ruĝa kaj postnaĝanta periodoj (c) infanaĝo, (d) adoleskeco, kaj (e) junaj plenkreskuloj en griza. Sur kreska kurbo, vira idaro de kontrola dieto ...

Hormonoj kaj Metabolaj Markiloj ĉe Malsama Tempo-Periodo

Plasma leptino, insulino, glukozo, kaj NEFA-koncentriĝoj estis mezuritaj ĉe P25, P45, kaj P95. En ĉiuj aĝoj, plasma glukozo, NEFA kaj leptina nivelo de WD-idaro ne estis statistike malsamaj ol KD-idaro (Tabelo (Table2,2, n = 6 por grupo). Ni observis signifan kreskon de grasa deponejo (retroperitonea grasa maso-proporcio) ĉe idoj de WD-nutraj digoj nur ĉe P25 (p = 0.0327, provo de Mann kaj Whitney).

tablo 2 

Retroperitoneala graso-proporcio kaj dozo en plasmo: glukozo; insulino, NEFA, kaj leptino.

Efiko de Perinatal WD sur Grasa Prefero de Senfortiĝo ĝis Plenkreskeco

Por esplori la efikon de WD sur grasa prefero, ni uzis du-botelajn elektajn paradigmojn ĉe tri malsamaj tempopunktoj dum kresko. Ĉi tiu provo estis uzata por studi specife la preferon al grasa gusto, evitante laŭeble la metabolan efikon de ĝia ingestaĵo. Ni montris, ke diferencoj en “kroma” kaloria konsumado el la botelo (ĉe P25, P45 kaj P95) ne estas statistike signifaj. inter grupoj (Figuroj S1A – C en Suplementa Materialo). Plie la diferenco en konsumo de 1% maizoleo rezultigas pliiĝon de kalorioj de 1% por WD-ratoj ĉe P25 (WD: 4.9% vs KD: 3.9% de kalorioj ingestitaj) kaj 0.5% por KD-ratoj ĉe P45 (WD: 2% vs KD: 2.5% de kalorioj ingestitaj) (Cifroj S1D – F en Suplementa Materialo). Ĉe P25, idoj de KD-digoj havas neniun preferon por graso (44.87 ± 9.8%, p = 0.339); kontraŭe WD-ratoj preferas grason (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 post Wilcoxon-subskribita rango, ruĝa asterisko). Cetere estas statistika diferenco inter la du grupoj kun p = 0.0347 (Mann kaj Whitney-testo, nigra haŝiŝa etikedo) (Fig (Figuro33A).

figuro 3 

Evolua evoluo de grasa prefero de demetiĝo ĝis plenaĝeco. (A) Unua taga prefero de graso ĉe P25, P45, kaj P95. Diversaj aroj de bestoj estis uzataj en ĉiu tempopunkto (n = 6 / grupo / tempopunkto). (B) Tri sinsekvaj tagoj da graso ...

Ĉe P45 kaj P95, la du grupoj havas signifan preferon por graso, t.e., signife diferenca de la teoria valoro de 50% (ĉe P45, KD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 kaj WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; ĉe P95, KD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 kaj WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 post subskribita rango de Wilcoxon, ruĝa asterisko) (Fig (Figuro3A) .3A). La valoroj por la du grupoj estis nedistingeblaj post unu tago de gusto-prezento (ĉe P45 p = 0.7857 kaj ĉe P95 p = 0.9171 Mann-Whitney-testo) (Fig (Figuro33A).

Por scii, kiel la ratoj reguligas sian grasan konsumon kun la tempo, ni ripetis la grasan prezenton dum tri sinsekvaj tagoj ĉe P45 kaj P95 (Figuroj (Figuroj3B, C) .3B, C). Interese ĉe P45, nur viroj de WD-digoj iom post iom perdis la preferon por grasa solvo (Figuro) (Figuro3B) 3B) (tria tago: 53.12 ± 8.36% p = 0.851 post Wilcoxon-subskribita rango-testo). Tamen ĉe P95 (plenaĝa aĝo) ĉiuj bestoj preferis la grason sen evoluo dum la 3-taga testo (Fig (Figuro33C).

En resumo, en ĉi tiu modelo, ni observis, en frua etapo (infanaĝo) preferon por graso en rato nutrita de WD-digoj kun progresiva malintereso dum la tempo en adoleskeco. Ni observis neniun diferencon inter la du grupoj de ratoj en plenaĝeco.

Molekula Subskribo de Cerba Plastikeco kaj GABA-Remodeligoj en la Hipotalamo kaj Rekompona Vojoj

Por determini, ĉu patrina WD-konsumado dum gestado kaj laktado havas efikon sur la hipotalamo kaj rekompencaj vojoj de la idaro, ni mezuris la relativan esprimon de pluraj ŝlosilaj faktoroj de cerba plastikeco, cerba modeligado kaj markiloj de neŭronaj cirkvitoj implikitaj en manĝaĵa konsumado kaj epigenetiko. regulistoj. Ni uzis TLDA por analizi ilian abundon en malsamaj cerbaj regionoj (t.e. hipotalamo, VTA, kaj NAc) (Tabelo S1 en Suplementa Materialo) ĉe la tri tempoperiodoj. Kribrado estis farita post la du-botelaj elektaj provoj ĉe P25, P45, kaj P95 (Figuro (Figuro1) 1) sur ses viroj naskitaj de digoj nutritaj de WD kaj sur ses viroj naskitaj de digoj nutritaj de KD.

Ĉe P25 en hipotalamo, kvin genoj el dek tri malsamaj kategorioj montris signife pli malaltan mRNA-espriman nivelon ĉefe en plastaj markiloj kaj GABA-markiloj, kiuj iras inter −20% (Gfap) kaj −40% (Gabra5) en pupoj de DD-nutritaj digoj kompare kun ratoj de KD-manĝeblaj digoj. En rekomendaj vojaj biopsioj (VTA kaj NAc), du genoj montris statistikan pli altan mRNA-esprimon-nivelon (D2R kaj Gabra1), t.e., DA-signaladon kaj GABA-receptorojn kaj unu genon pli malaltan esprimon (Hcrtr2) (t.e., oreksan 2-ricevilon) en NAc dum kvar genoj montris signife pli altan mRNA-espriman nivelon (Map2, Gabara1, Hcrtr1, kaj Hcrtr2) (t.e., plastaj markiloj, GABA-receptoroj kaj serotoninergiaj riceviloj) en VTA (Figuro (Figuro44).

Ĉe P45 en hipotalamo, kvin genoj de dek tri malsamaj kategorioj montris pli malaltan mRNA-espriman nivelon inter −20% (Fos) kaj −50% (FosB) en pupoj de digoj nutritaj de WD kompare kun ratoj de digoj nutritaj de KD. Ĉe P45 en rekomendaj vojaj biopsioj, kvar genoj montris pli altan mRNA-espriman nivelon (Gfap, Dat, Cck2r, kaj Kat5) kaj du genoj pli malalta esprimo (Fos kaj FosB) en NAc dum tri genoj montris pli malaltan mRNA-espriman nivelon (Arko, FosB, kaj Th) kaj unu geno pli alta nivelo (Gabrg2) en VTA.

Ĉe P95 en hipotalamo, 20-genoj el dek tri malsamaj kategorioj montris pli altan mRNA-espriman nivelon inter + 20 kaj + 40% (Syt4 al Gjd2) kaj 3-genoj montris pli malaltan mRNA-esprimon (FosB, D1r, kaj Gabarb1) nutritaj digoj kompare kun ratoj de digoj nutritaj de KD. Ĉe P95 en rekompencaj biopsioj, 12-genoj montris pli altan mRNA-espriman nivelon inter + 20 kaj + 40% (Syn1 al Hcrt1) kaj 1-geno pli malalta esprimo (Th) en NAc, 6-genoj montris pli altan mRNA-espriman nivelon (Ncam1 , Gja1, Gjd2, Gabra5, Htr1a, kaj Htr1b), kaj 6 genoj montris pli malaltan mRNA-espriman nivelon (Cntf, Igf1, Fos, Socs3, Gabrb2, kaj Hdac3).

Ni tiam plenumis tri nekontrolitajn PCA-respondojn al la tri cerbaj biopsioj uzante ĉiujn kvantigitajn parametrojn (t.e., plasma dozo, kondutaj datumoj kaj mRNA-esprimaj variadoj). Klara disiĝo de la du grupoj estis akirita nur ĉe P95 por NAc kaj VTA (Tabelo) (Table33).

tablo 3 

Ĉefa sinteza analizo (PCA) sintezo: kvalita analizo de PCA-grupa apartigo por tutmonda PCA kaj fokusa PCA.

Laŭ la PCA-korelacia rondo kaj la TLDA-datumoj (reprezentantaj la plimulton de la variabloj inkluzivitaj en ĉi tiu PCA), ni difinis la genajn familiojn, kiuj povus esti respondecaj pri la apartigo kaj plenumis fokusan PCA (Figuroj (Figuroj5A, B, 5A, B, ekzemple). La enfokusigita PCA rivelis, ke ĉe P25 DA-markiloj en NAc kaj plastaj markiloj en hipotalamo povus apartigi la du grupojn de idaro (Tabelo (Table33 por resumo). Nenia diskriminacio tiam estis akirita ĉe P45. Tamen, la sama analizo ĉe P95 malkaŝis, ke la malsamaj markiloj de la sistemo GABA en NAc kaj hipotalamo, plus la plastaj markiloj (en hipotalamo, NAc kaj VTA) kaj epigenetikaj reguligiloj (nur en NAc) kontribuas disigi la du grupojn de bestoj ( Figuro (Figuro5; 5; Tablo Table33).

Ĉi tiu analizo malkaŝas la daŭran influon de perinatala dieto sur GABAergic-markiloj same kiel plasteco kaj epigenetikaj markiloj ambaŭ en la homeostata kaj la rekompenca vojo implikita en nutra konduto.

Imunohistokemio de TH-Ĉeloj Konfirmita Transskriba Analizo

Ĉar ni observis iom da variado en TH-mRNA en NAc kaj VTA ĉe la diversaj disvolvaj periodoj, ni celis korelacii ĉi tiujn rezultojn kun TH-imunostacio. La nombro de pozitivaj ĉeloj de TH / NeuN estis analizita en la VTA, kie troviĝas dopaminergiaj ĉelaj korpoj kaj la OD-imunelektado de TH estis kvantigita en la nervaj finaĵoj situantaj en la NAc. TH (+) ĉeloj estis malpli abundaj en la VTA de WD kompare kun KD-ratoj ĉe P45 nur (Figuroj (Figuroj6A, C, E; 6A, C, E; Figuro S2A en Suplementa Materialo). Ne estis signifa interagado inter sekcio-nivelo kaj la TH / NeuN-kvantigo ĉe la tri periodoj (P25 p = 0.9991, P45 p = 0.9026, kaj P95 p = 0.9170). Ĉe P45 nur, statistika diferenco estis akirita inter la du idaj grupoj (p = 0.0002) (Figuro (Figuro6E) .6E). Krome, ni observis neniun diferencon en OD de TH-imunostacio en la NAc ĉe P25 kaj P45 inter la du grupoj (OD-rilataj valoroj ĉe P25: 1.314 ± 0.022 en KD vs 1.351 ± 0.026 en WD, p = 0.2681; OD-rilataj valoroj ĉe P45: 1.589 ± 0.033 en KD kontraŭ 1.651 ± 0.027 en WD, p = 0.1542). Tamen signifa malpliigo de OD de TH-nervaj finaĵoj estis trovita en NAc de WD-grupo ĉe P95 (OD-rilataj valoroj ĉe p95: 1.752 ± 0.041 en KD kontraŭ 1.550 ± 0.046 en WD, p = 0.0037) (Figuroj (Figuroj6B, D, F; 6B, D, F; Figuro S2B en Suplementa Materialo).

diskuto

En ĉi tiu studo, ni hipotezis, ke patrina perinatal subnutrado influos la programon de disvolviĝo de rekompencaj vojoj implikitaj en energia homeostazo, manĝa elekto kaj manĝa konsumado de la idaro. Ni vaste ekzamenis la efikon de patrina WD-konsumado de naskiĝo ĝis malpliiĝo de GABA, serotonino kaj DA vojoj de specifaj cerbaj regionoj (VTA, NAc, kaj hipotalamo) en la idaro, de infanaĝo ĝis plenaĝeco. Niaj rezultoj sugestas, ke la uzo de dieto, riĉa en graso kaj dolĉa, strikte restriktita al la perinata periodo havas efikon sur frua prefero de graso (infanaĝo) en la idaro korelaciita kun ŝanĝo en la gena esprimo kaj ŝanĝoj neuroanatomaj / arkitekturaj de la mezolimbaj. dopaminergiaj retoj. Tamen, kiam la idaro estis tenita sub chow-dieto, ni observis en adoleskaj junulinoj ratojn kun progresiva perdo de allogado al graso, kiu estis korelaciita kun malpliigita esprimo de genoj de la DA-sistemo kaj iomete redukto de TH-pozitivaj neŭronoj en la VTA. . Poste dumviva grasa prefero ne diferencis inter grupoj, kvankam grava plastikeco de la GABAergic-retoj kaj de la energia homeostasis reto de la hipotalamo identiĝis en rato de digoj kun virĉevaloj (figuro (Figuro77).

figuro 7 

Abstraktado de grafikaĵoj. NAc, nucleus accumbens; VTA, ventrala tegmentala areo.

La unua trafo de perinatal-WD-konsumado, kiun ni observis en ĉi tiu studo, estas pliigita korpa pezo de la idaro ĉe la demeto, sed neniu diferenco ĉe naskiĝo. Efektive, bestoj de la grupo WD gajnas 21% pli da pezo ol KD fine de la suĉoperiodo. Antaŭaj studoj havigis konfliktajn rezultojn rilate ŝanĝon en nasko pezo por idaro de digoj kun virgulinoj: pli alta korpa pezo (, ), pli malalta korpa pezo (, , ) aŭ neniu diferenco (, ). Niaj datumoj kongruas kun lastatempa metaregresista analizo () farita sur 171-eksperimentaj eldonaĵoj, kiuj konkludis, ke patrina eksponiĝo al HFD ne influis naskitan pezon, sed induktis pliigitan korpan pezon fine de la laktoperiodo. La pli alta korpa pezo de la WD-heredaĵo probable reflektas ŝanĝon en lakta konsisto kaj / aŭ lakta produktado, kiu estis ilustrita en antaŭaj publikaĵoj (, ). Konforme al ilia pli alta korpa pezo, la retroperitoneala grasa proporcio de la idaro de WD estis signife pli alta ol tiu de la idaro de la KD fine de la periodo de suĉado (P25, Tabelo Tabelo2), 2), kiu ankaŭ kongruas kun antaŭaj studoj (, ). Tamen, la pli alta adiposeco ne persistis ĉe P45 kaj P95, kaj aliaj metabolaj parametroj kiel insulino, NEFA, kaj glukoza plasmo ne diferencis inter grupoj. Niaj rezultoj pruvis, ke sen klara patrina obezeco dum gestado kaj laktado, la dieto per si mem ne sufiĉas por indukti daŭrajn metabolajn efikojn en la idaro (, , ).

Oni raportis, ke perinatal HFD-konsumado pozitive korelacias kun idaro prefero por bongusta manĝaĵo (). En nia studo, ni realigis longforman studon celantan testi grasan preferon ĉe idaro, kiu estas eluzita sur regula frito.

Efiko de Perinatal WD sur Infanaĝo (post Mallevado)

Roduloj hundidoj manĝas solidan manĝaĵon 19 – 20 tagojn post naskiĝo () kiam iliaj cerbaj rekompencaj vojoj ankoraŭ ne maturiĝas (). Estis do tre interese studi ilian tre fruan preferon por graso kaj korelacii ĉi tiun fruan preferon kun analizo de cerbaj transskriboj. Afterus post demetiĝo, ni observis preferon por graso en idaro de WD, kiu ne evidentiĝis ĉe KD-ratoj. Ĉi tio kongruas kun aliaj raportoj, kiuj montras ligon inter perinatala subnutrado kaj plaĉa manĝa prefero kaj malalta prefero por graso en frua aĝo por kontrolaj ratoj ().

La tutmonda PCA ne permesis diskriminacion al la grupo de infanoj koncerne patrinan dieton en tiu aĝo. Tamen, kiam celita PCA, limigita al DA-markiloj, efektiviĝis, ni akiris bonan apartigon de la grupoj. Efektive, estas markita kresko en la esprimo de la MXR-riceviloj de D2 en la NAc en WD-hundidoj. Ĉi tiu postsinaptika D2-troa ekspreso en la NAc povus esti parte implikita en pli alta instigo por graso (). Malmultaj aliaj transskribaĵoj estas modifitaj en WD-hundidoj kompare kun CD-hundidoj, kiel ekzemple pliigo de alfa 1 GABAA-subunuo en NAc kaj VTA kaj malkresko de alfa 5 GABAA-subunuo en la hipotalamo, kiu sugestas reorganizon de GABAA-riceviloj en ĉi tiuj kernoj.

Efiko de Perinatal WD sur Adoleskeco

Ĉe P45, ni observis similan altan grasan preferon por ambaŭ grupoj en la unua tago de prezento, sed interese, la WD-ratoj iom post iom perdis sian intereson pri graso post ripetita prezento. La adoleskeco estas kritika periodo de neŭrohavora reorganizado necesa por dumviva kognitiva prilaborado (), kaj diversaj studoj montris markitan vundeblecon al malutila kognitiva efiko de grasa dieto (-). Ĉi tiu rezulto estas en ŝajna kontraŭdiro kun antaŭa laboro de la grupo de Muhlhausler (, ) en kiuj junaj ratoj (6-semajnoj) montris klaran preferon por manĝaĵoj. Tamen, en iliaj publikaĵoj la eksperimenta paradigmo estis malsama, ĉar la ratoj havis senpagan aliron al malplenaj normoj kaj manĝaĵoj de la demeto ĝis la ofero (6-semajnoj).

Samtempe ni mezuris kreskon de Dat mRNA en la NAc kaj malkreskon de Th mRNA en la VTA, kiu estis konfirmita de la imunohistokemio, kiu montris reduktitan TH (+) ĉelnumeron en la VTA de ratoj WD. Post levita transcriptomic-agado por la DA-sistemo ĉe la malplenigado, la reduktita aktiveco ĉe P45 eble klarigos la malaltan intereson por la agrabla manĝaĵo observita ĉe niaj WD-ratoj. Oni ankaŭ devas rimarki, ke la sistema malpliiĝo de mRNA-esprimo de FosB kaj FosB en la diversaj kernoj, kiujn ni analizis, povus esti marko de malpliigita cerebra aktiveco post patrina eksponiĝo al WD.

Adoleskaj WD-ratoj montris pli rapidan malintereson pri graso kontraŭa al ilia pli frua konduto. La uzo de "normala" dieto dum infanaĝo ŝajnas "protekti" ilin al troigita grasa prefero de adoleskeco. Kontraŭe, kiam ratoj havas senpagan aliron al malplenaj manĝaĵoj post la demeto, kiel en Ref. (, ), ili montras en adoleskeco fortan preferon por graso. Ĉi tiu rezulto sugestas, ke 3-semajnoj chow-dieto post demeto povus esti reprogramita la cirkvitoj kaj fari la adoleskan idaron malpli sentema al akra grasa defio.

Efiko de Perinatal WD sur Plenkreskuloj

Plenkreskaj ratoj jam ne montris diferencon de prefero por graso, eĉ post ripetita prezentado de grasoj kiel jam priskribitaj (, ). Samtempe ni observis malpliiĝon de Th mRNA kaj proteino en la NAc, kaj tendencon al malpliigita esprimo de Dat mRNA en la VTA. Naef kaj kunulo () jam raportis malaltan agadon de la DA-sistemo en plenkreskaj ratoj nutritaj en perinatala periodo kun HFD, kun neklara DA respondo al amfetamino mezurita kun mikrodiálisis kaj pliiga instigo por grasa rekompenco (vidu tabelon, kiu resumis lastatempajn datumojn de qPCR pri ĉi tiu modelo, Tabelo S2 en Suplementa Materialo). Unu limigo de TH-kvantigo (mRNA kaj imunohistomemio) en NAc devenas de la fakto, ke NAc-ĉeloj ankaŭ povus esprimi Th mRNA kaj proteinon kaj tiam povus fleksi la DA-kvantojn de fibroj (, ). Tamen, la uzo de TH-imunostacio en NAc plejparte malkaŝis la densajn aksonajn finaĵojn venantajn de neŭronaj DA-neŭronoj (VTA kaj SNc). Kutime, la TH-esprimantaj neŭronoj en la striatumo kaj NAc povus esti distingitaj nur ĉe tre DA-lesionigitaj bestoj () kaj tial povus esti apenaŭ konstatebla en niaj senmuntaj sekcioj. En ĉi tiu studo, ni ankaŭ observis fortan kreskon de mu opioidaj riceviloj en NAc kiam aliaj grupoj, kun malsamaj modeloj, montris malpliiĝan esprimon en la ventrala striato de rato frue eksponita al HFD (dum laktado kaj gestado) (, ) aŭ neniu ŝanĝo (). Ĉi tiuj modifoj, mezuritaj nur ĉe mRNA-nivelo, povus reflekti etan hipo-aktivecon de la DA-cirkvitoj asociitaj kun pli alta opioida sentiveco () kiuj probable ne sufiĉas por efiki sur la kondutisma provo, kiun ni efektivigis. Ĉi tiuj supozoj bezonas esti konfirmitaj per funkciaj aliroj. En lastatempa papero, kun simila modelo, Romani-Perez et al., Ne povis observi signifan kreskon de instigo en operantaj kestoj por HFD-idaro, sed observis pli mallongan latentecon atingi celon en kuregita test-paradigmo (). Malgraŭ la foresto de longedaŭra grasa prefero en niaj eksperimentaj kondiĉoj, ni trovis, ke perinatal-patrina WD-konsumado havas longdaŭran efikon sur aliaj cerebraj cirkvitoj plejparte mediaciitaj de GABA-remodelado en NAc kaj Hipotalamo. NAc estas konsiderata kiel "sentema sentinelo" por konsumata konduto (). Lastatempaj studoj montris, ke konsumado de manĝaĵoj estis subpremita per inhibicio de GABA-liberigantaj neŭronoj de LH (). O'Connor et al. montris, ke NAc D1R-neŭronoj (GABAergic-projektantaj neŭronoj) selekte inhibicias neŭtronajn LH-VGAT por ĉesigi manĝaĵon (). Ĉi tiuj eksperimentoj malkaŝas GABA-cirkviton (NAc / Hypothalamus), kiu eble respondecas pri kontrolado de konduta respondo. Ĉi tiu ventra striatum-hipotalama sistemo kompletigas alian cirkviton, kiu implikas la lito-nukleon stria terminalis GABA-liberigan VGAT projektantan neŭron al la glutamato liberigante Vglut LH-neŭronojn kaj rektan inhibicion de LH vglut2 eligas nutradon (). Alia grava ero de la apetito-reguliga cirkvito, kiu implikas NAc-ŝelon, estas GABA-liberiga inhiba projekcio al la VP (). Ĉi tiuj datumoj reliefigas la gravegan rolon de GABA-signalado en la interago inter hipotalamo kaj NAc por antaŭenigi nutradon. En nia studo, ni ne sukcesis diskriminacii la loĝantaron de neŭronoj implikitaj en la GABA-remodelado kaj kiel ĉi tiuj modifoj povus ŝanĝi la retojn. Tamen la centra rolo de GABA-cirkvitoj meritas pli da intereso. Precipe estus tre interese plenumi pliajn funkciajn eksperimentojn de ĉi tiuj GABA-cirkvitoj per elektrofisiologiaj aliroj (). Ni ankaŭ observis tutmondan suprenreguligon de mRNA-transskribo por 5HT1a kaj 5HT1b-receptoroj en la tri kernoj studitaj. La plimulto de projekciaj serotoninaj fibroj devenas de la dorsa raba kerno (DRN) kaj mediana rafa kerno (MRN). Lastatempaj datumoj de en vivo registradoj kaj figuradaj studoj montris pozitivan rolon de 5HT en rekompenco (). 5HT-fibroj de DRN okupiĝas pri impulsiveco-kontrolo (). Pliigi 5HT1a en VTA kaj NAc povus esti kompensa mekanismo, kiu povus kontroli impulsecon. En hipotalamo, farmacologiaj studoj sugestas, ke subtipoj de 5HT1a-riceviloj eble subpremos nutradan konduton induktitan de stimulado de serotonina (, ). Pliigita 5HT1a kaj b-riceviloj en hipotalamo povus potenci la nutrad-supran agadon de serotonino kaj tial povus konsistigi kompensan mekanismon. Ĉi tiuj supozoj bezonas esti kontrolitaj farante taŭgajn funkciajn eksperimentojn.

Ĉi tiuj retaj ŝanĝoj estas asociitaj kun modifoj de plastaj markiloj kiel Ncam mRNA. En la hipotalamo de plenkreskaj ratoj, ni observis pliiĝon en Ncam1 kaj St8sia4-transskribaĵoj sugestante kaj pliigon en polisialic-acida (PSA) signalado. PSA estas ĉel-surfaca glicano kiu modulas ĉel-al-ĉelajn interagojn. Polisalilado de ĉelaj adeptaj proteinoj estas implikita en diversaj sinaptaj plastic-dependaj procezoj en la centra nerva sistemo kaj laŭdire estis bezonata por la adapta sinapsa plasteco de nutraj cirkvitoj dum akra pozitiva energia bilanco (, ). Krome aliaj reguligantoj de ĉela interagado kaj sinaptogenezo povus esti implikitaj en ĉi tiu hipotalama plastikeco.

Konklude (Figuro (Figure7), 7), patrina WD-konsumado havas longdaŭran influon sur la organizado de la homeostataj kaj hedonaj cirkvitoj reguligantaj manĝan konduton en la idaro. Per la analizo de tri kritikaj tempoperiodoj, ni povis montri klaran evoluon por grasa prefero korelaciita kun specifaj cerbaj molekulaj subskriboj. Dum infanaĝo, la prefero por graso eble rilatas al pli alta aktiveco de la DA-sistemo. Adoleskeco, karakterizita per inversigo de grasa prefero, estis asociita kun pli malalta esprimo de DA-sistemaj markiloj sugestantaj kompensan mekanismon. Tre interesa punkto sciigi estas, ke en ĉi tiu modelo, ekvilibra dieto post demetiĝo povus protekti adoleskan raton kontraŭ malpuraj nutraĵaj kutimoj reduktante sian deziron al graso. Kvankam en plenaĝeco la du grupoj havas similan altan preferon por graso, ratoj de virŝafaj manĝantoj montris profundan remodeladon de la GABA-cirkvitoj. Kiuj estas la sekvoj de ĉi tiu daŭra plastikeco? Ĉu troigita obesogena dieta konsumado dum adoleskeco reaktivigos ĉi tiun senbridan rekompencan sistemon? Tiaj demandoj povus esti signifaj en la nutra sekvado de novnaskitoj kaj infanoj pliiĝintaj en okcidentigitaj landoj.

Etika Komento

Ĉiuj eksperimentoj estis faritaj konforme al la gvidlinioj de la loka komitato pri bestaj bestoj, la EU (direktivo 2010 / 63 / EU), la Institut National de la Recherche Agronomique (Parizo, Francio) kaj la Franca Veterinara Departemento (A44276). La eksperimenta protokolo estis aprobita de la institucia komitato pri etiko kaj registrita sub referenco APAFIS 8666. Ĉiu singardemo estis prenita por minimumigi streĉon kaj la nombron de bestoj uzataj en ĉiu serio de eksperimentoj.

Aŭtoro Kontribuoj

JP kaj PB faris eksperimenton kaj partoprenas la diskuton kaj redakcion. TM plenumis la PCA-n kaj partoprenis diskutadon kaj redaktadon. SN kontribuis al la desegno de la eksperimento kaj partoprenis diskutadon. PP kontribuis al la desegno de la eksperimento, partoprenis la diskutojn kaj verkis la manuskripton. VP desegnis kaj plenumis la eksperimentojn, analizis la datumojn kaj verkis la manuskripton.

Konflikto pri Interesa Rakonto

La aŭtoroj deklaras, ke la esplorado estis farita sen manko de komercaj aŭ financaj rilatoj, kiujn oni povus konsideri kiel ebla konflikto de intereso.

Dankojn

La aŭtoroj ŝatus agnoski Guillaume Poupeau kaj Blandine Castellano pro prizorgado de la bestoj dum la studo, Anthony Pagniez pro sia helpo en mRNA-eltiro kaj TLDA, Isabelle Grit pro ŝia helpo en plasmo-specimenoj, kaj Alexandre Benani kaj Marie-Chantal Canivenc pro ilia helpema diskuto kaj TLDA-desegno.

Piednotoj

 

Financado. Ĉi tiu esplorado estis subtenita de region des pays de la Loire subvencio PARIMAD (VP), LCL-fonduso (VP kaj PP), fondaĵo SanteDige (VP) kaj INRA Metaprogram DIDIT (SN, VP, PP).

 

 

Suplementa Materialo

La Suplementa Materialo por ĉi tiu artikolo povas esti trovita interrete ĉe http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.

Figuro S1

Tuta energia konsumado el maizo-oleo enhavanta botelon. (A) La konsumado de kalorioj el la maizo-oleo-botelo por 24 h ĉe P25 en hundidoj de okcidenta dieto (WD) nutris digojn kaj hundidojn de kontrolaj dietoj (KD). (B) La konsumado de kalorioj el la maizo-oleo-botelo por 24 h ĉe P45 (la tria tago de botelo-testo). (C) La konsumado de kalorioj el la maizo-oleo-botelo por 24 h ĉe P95 (la tria tago de botelo-testo). Por paneloj (A – C), datumoj estas esprimitaj kiel meznombro ± SEM, neniu statistika diferenco (p > 0.05) estis observita, post Mann kaj Whitney-ne-parametrika testo, en ĉiuj aĝoj. (D) Procento de kalorioj konsumitaj de la maizo-oleo-botelo kompare kun la tuta kaloria konsumado (maizo-oleo-botelo + norma chow-dieto) por 24 h ĉe P25 en WD-hundidoj kaj KD-hundidoj. (E) Procento de kalorioj konsumitaj de la maizo-oleo-botelo komparas al la tuta kaloria konsumado (maizo-oleo-botelo + norma chow-dieto) por 24 h ĉe P45 (la tria tago da botela testo) en WD-hundidoj kaj KD-hundidoj. (F) Procento de kalorioj konsumitaj de la maizo-oleo-botelo komparas al la totala kaloria konsumado (maizo-oleo-botelo + norma chow-dieto) por 24 h ĉe P95 (la tria tago da botela testo) en WD-hundidoj kaj KD-hundidoj. Por paneloj (D, E), datumoj estas esprimitaj en procento de totala kaloria konsumado neniu statistika diferenco (p > 0.05) estis observita, sekvante chii-kvadraton kun korekto de Yates, en ĉiuj aĝoj.

Figuro S2

Reprezentaj fotomicrografoj de TH-imunostacio en kerno accumbens (NAc) kaj ventrala tegmental areo (VTA) ĉe tri malsamaj tempopunktoj. (A) Fotomicrografo de TH / NeuN-imunostacio ĉe la nivelo de la VTA, −5.30 mm de Bregma. Ruĝa etikedado estas por NeuN, kaj verda por TH. La blanka sago montras la eliron de la tria nervo. (B) Fotomicrografo de TH-imunostacio ĉe la nivelo de la NAc, + 1.70 mm de Bregma. Verda etikedado estas por TH. La blanka sago montras la antaŭan komisaron.

Tablo S1

Listo de gen-densa tabelo de malalta denseco de TaqMan kun la inventitaj kodoj de respondaj vivteknologioj.

Tablo S2

Resumo de publikigitaj datumoj pri esprimo transskribas dopaminajn vojojn. La ruĝaj signoj respondas al infaneca periodo, la bluaj al adoleskeco, kaj la nigraj al adolto. =: respondas al simila transskriba esprimo inter grupoj, +: respondas al pli alta transskriba esprimo ĉe hundidoj de alta kaloria dieto [manĝaĵoj, okcidenta dieto (WD), aŭ alta grasa dieto (HFD)] manĝataj digoj, kaj -: korespondas al pli malalta transskriba esprimo en hundidoj de alta kaloria dieto (junk food, WD aŭ HFD) nutritaj digoj.

Referencoj

1 Barker DJ. La fetaj originoj de malsanoj de maljuneco. Eur J Clin Nutr (1992) 46 (Suppl 3): S3 – 9. [PubMed]
2 Desai M, Gayle D, Han G, Ross MG. Programita hiperfagio pro reduktitaj anoreksigenaj mekanismoj en intrauterina kresk-restriktita idaro. Reproduktas Sci Mil Kverkoj Calif (2007) 14: 329 – 37.10.1177 / 1933719107303983 [PubMed] [Kruco Ref]
3 Goran MI, Dumke K, Bouret SG, Kayser B, Walker RW, Blumberg B. La obesogena efiko de alta fruktoza ekspozicio dum frua evoluo. Endocrinol Nat Rev (2013) 9: 494 – 500.10.1038 / nrendo.2013.108 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
4 Levin ESTI. Metabola enpremado: kritika efiko de la perinata medio sur la regulado de energia homeostazo. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci (2006) 361: 1107 – 21.10.1098 / rstb.2006.1851 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
5 Olson CM, Strawderman MS, Dennison BA. Patrina pezo-kresko dum gravedeco kaj infana pezo en aĝo de 3-jaroj. Matern Child Health J (2009) 13: 839.10.1007 / s10995-008-0413-6 [PubMed] [Kruco Ref]
6 Chen H, Simar D, Morris MJ. Hipotalamika neŭroendokrina cirkvitado estas programita de patrina obezeco: interagado kun postnata nutra medio. PLoS Unu (2009) 4: e6259.10.1371 / journal.pone.0006259 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
7 Muhlhausler BS, Adam CL, Findlay PA, Duffield JA, McMillen IC. Pliigita patrina nutrado ŝanĝas disvolviĝon de la apetito-reguliga reto en la cerbo. FASEB J (2006) 20: 1257 – 9.10.1096 / fj.05-5241fje [PubMed] [Kruco Ref]
8 Samuelsson AM, Matthews PA, Argenton M, Christie MR, McConnell JM, Jansen EHJM, et al. Dieto-induktita obezeco en inaj musoj kondukas al ofera hiperfagio, adiposeco, hipertensio kaj insulina rezisto. Hipertensio (2008) 51: 383 – 92.10.1161 / HYPERTENSIONAHA.107.101477 [PubMed] [Kruco Ref]
9 Kenny PJ. Komunaj ĉelaj kaj molekulaj mekanismoj en obesidad kaj drogmanio. Nat Rev Neurosci (2011) 12: 638 – 51.10.1038 / nrn3105 [PubMed] [Kruco Ref]
10 Denis RGP, Joly-Amado A, Webber E, Langlet F, Schaeffer M, Padilla SL, et al. Ŝanco povas veti nutradon sendepende de AgRP-neŭronoj. Ĉela Metabilo (2015) 22: 646 – 57.10.1016 / j.cmet.2015.07.011 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
11 Stice E, Spoor S, Bohon C, Malgranda DM. Rilato inter obezeco kaj senbrida striatala respondo al manĝaĵo estas moderigita de TaqIA A1-alelo. Scienco (2008) 322: 449 – 52.10.1126 / scienco.1161550 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
12 Frank GK, Reynolds JR, Shott ME, Jappe L, Yang TT, Tregellas JR, et al. Anoreksio nervosa kaj obesidad estas asociitaj kun kontraŭa cerba rekompenco-respondo. Neuropsikofarmakologio (2012) 37: 2031 – 46.10.1038 / npp.2012.51 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
13 Verda E, Jacobson A, Haase L, Murphy C. Malpligrandigita kerno akumena kaj kaŭda kerno-aktivado al plaĉa gusto estas asociita kun obezeco en pli maljunaj plenkreskuloj. Cerbo Res (2011) 1386: 109 – 17.10.1016 / j.brainres.2011.02.071 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
14 Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, Clegg DJ, et al. Eksponiĝo al altaj niveloj de dieta graso mildigas psikostimulan rekompencon kaj mezolimban dopaminon ĉe la rato. Behav Neurosci (2008) 122: 1257 – 63.10.1037 / a0013111 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
15 Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, Pothos EN. Difektoj de mezolimbic dopamina neŭrotransmisio en rata obezeco de rato. Neŭroscienco (2009) 159: 1193 – 9.10.1016 / j.neuroscience.2009.02.007 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
16 Rivera HM, Kievit P, Kirigiti MA, Bauman LA, Baquero K, Blundell P, et al. Materna alta grasa dieto kaj obezeco trafas plaĉan konsumadon kaj dopaminan signaladon en nehomaj primataj idaroj. Obezeco (2015) 23: 2157 – 64.10.1002 / oby.21306 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
17 Gugusheff JR, Ong ZY, Muhlhausler BS. La fruaj originoj de manĝaj preferoj: celantaj la kritikajn fenestrojn de disvolviĝo. FASEB J (2015) 29: 365 – 73.10.1096 / fj.14-255976 [PubMed] [Kruco Ref]
18 Bayol SA, Farrington SJ, Stickland NC. Patrina "manĝaĵo de manĝaĵoj" dum gravedeco kaj laktado antaŭenigas troigitan guston por "manĝaĵoj" kaj pli grandan inklinon al la obesidad en idaro. Br J Nutr (2007) 98: 843 – 51.10.1017 / S0007114507812037 [PubMed] [Kruco Ref]
19 Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Patrina alta grasa dieto ŝanĝas metiladon kaj genan esprimon de dopamino kaj opioid-rilataj genoj. Endokrinologio (2010) 151: 4756 – 64.10.1210 / eo.2010-0505 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
20 Naef L, Moquin L, Dal Bo G, Giros B, Gratton A, Walker KD. Materna alta graso konsumas senintaksan reguladon de dopamino en la kerno kaj plialtigas instigon por grasaj rekompencoj en la idaro. Neŭroscienco (2011) 176: 225 – 36.10.1016 / j.neuroscience.2010.12.037 [PubMed] [Kruco Ref]
21 Ong ZY, Muhlhausler BS. Materna "manĝ-manĝaĵo" de rataj digoj ŝanĝas manĝajn elektojn kaj disvolviĝon de la mezolimbia rekompenca vojo en la idaro. FASEB J (2011) 25: 2167 – 79.10.1096 / fj.10-178392 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
22 Romaní-Pérez M, Lépinay AL, Alonso L, Rincel M, Xia L, Fanet H, et al. Efiko de perinatal-ekspozicio al alta dika dieto kaj streĉo sur respondoj al nutraj defioj, manĝ-motivita konduto kaj mezolimbia dopamina funkcio. Int J Obes (Lond) (2017) 41 (4): 502 – 9.10.1038 / ijo.2016.236 [PubMed] [Kruco Ref]
23 Beier KT, Steinberg EE, DeLoach KE, Xie S, Miyamichi K, Schwarz L, et al. Cirkvita arkitekturo de VTA-dopaminaj neŭronoj rivelitaj per sistema enira-elira mapado. Ĉelo (2015) 162: 622 – 34.10.1016 / j.cell.2015.07.015 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
24 Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, et al. GABA-neŭronoj de la VTA-veturanta kondiĉita loko aversio. Neŭrono (2012) 73: 1173 – 83.10.1016 / j.neuron.2012.02.015 [PubMed] [Kruco Ref]
25 van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Aktivigo de VTA GABA-neŭronoj malhelpas rekompencan konsumon. Neŭrono (2012) 73: 1184 – 94.10.1016 / j.neuron.2012.02.016 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
26 Hu H. Rekompenco kaj aversio. Annu Rev Neurosci (2016) 39: 297 – 324.10.1146 / annurev-neuro-070815-014106 [PubMed] [Kruco Ref]
27 Stanley BG, Urstadt KR, Charles JR, Kee T. Glutamate kaj GABA en flankaj hipotalamaj mekanismoj kontrolantaj manĝaĵon. Fiziol Behav (2011) 104: 40 – 6.10.1016 / j.physbeh.2011.04.046 [PubMed] [Kruco Ref]
28 Ancel D, Bernard A, Subramaniam S, Hirasawa A, Tsujimoto G, Hashimoto T, et al. La buŝa lipida sensilo GPR120 ne estas nemalhavebla por la orosensoria detekto de dietaj lipidoj en musoj. J Lipid Res (2015) 56: 369 – 78.10.1194 / jlr.M055202 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
29 Ackroff K, Lucas F, Sclafani A. Prefikso de gusto kiel funkcio de grasfonto. Fiziol Behav (2005) 85: 448 – 60.10.1016 / j.physbeh.2005.05.006 [PubMed] [Kruco Ref]
30 Camandola S, Mattson parlamentano. Toll-simila ricevilo 4 mediacias grason, sukeron, kaj umami gustan preferon kaj manĝaĵan konsumon kaj korpan pezan reguladon. Obezeco (2017) 25: 1237 – 45.10.1002 / oby.21871 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
31 Coupé B, Amarger V, Grit I, Benani A, Parnet P. Nutra programado influas hipotalamikan organizadon kaj fruan respondon al leptino. Endokrinologio (2010) 151: 702 – 13.10.1210 / eo.2009-0893 [PubMed] [Kruco Ref]
32 Paillé V, Brachet P, Damier P. Rolo de nigrala lezo en la genezo de diskinesioj en ratmodelo de Parkinson-malsano. Neuroreport (2004) 15: 561 – 4.10.1097 / 00001756-200403010-00035 [PubMed] [Kruco Ref]
33 Benani A, Hryhorczuk C, Gouazé A, Fioramonti X, Brenachot X, Guissard C, et al. Manĝaĵa konsumado de adaptaĵo al dieta graso implikas PSA-dependan reŝanĝon de la arka melanocortina sistemo en musoj. J Neŭroscio (2012) 32: 11970 – 9.10.1523 / JNEUROSCI.0624-12.2012 [PubMed] [Kruco Ref]
34 Kirk SL, Samuelsson AM, Argenton M, Dhonye H, Kalamatianos T, Poston L, et al. Patrina obezeco induktita de la dieto en ratoj konstante influas centrajn procezojn reguligantajn konsumadon de naskado. PLoS Unu (2009) 4: e5870.10.1371 / journal.pone.0005870 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
35 Ong ZY, Muhlhausler BS. Konsumanta malaltan grasan dieton de la demetiĝo ĝis la plenaĝeco inversigas la programadon de manĝaj preferoj en viraj, sed ne en inaj, idaro de "junaj manĝaĵoj" -frakaj ratoj. Acta Physiol Oxf Engl (2014) 210: 127 – 41.10.1111 / apha.12132 [PubMed] [Kruco Ref]
36 Ribaroff GA, Wastnedge E, Drake AJ, Sharpe RM, Chambers TJG. Animalaj modeloj de patrina alta grasa dieta ekspozicio kaj efikoj al metabolo en idaro: meta-regresa analizo. Obes Rev (2017) 18 (6): 673 – 86.10.1111 / obr.12524 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
37 Bautista CJ, Montaño S, Ramirez V, Morales A, Nathanielsz PW, Bobadilla NA, et al. Ŝanĝoj en lakta konsisto ĉe obesaj ratoj konsumantaj altan grasan dieton. Br J Nutr (2015) 115: 538 – 46.10.1017 / S0007114515004547 [PubMed] [Kruco Ref]
38 Rolls BA, Gurr MI, Van Duijvenvoorde PM, Rolls BJ, Rowe EA. Laktado ĉe maldikaj kaj obesaj ratoj: efiko de kafeja nutrado kaj de dieta obezeco sur lakta konsisto. Fiziolo Konduto (1986) 38: 185 – 90.10.1016 / 0031-9384 (86) 90153-8 [PubMed] [Kruco Ref]
39 Blanka CL, Purpera MN, Morrison KD. La patrina obezeco estas necesa por programi efikon de alta dika dieto sur la idaro. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (2009) 296: R1464.10.1152 / ajpregu.91015.2008 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
40 Sun B, Purcell RH, Terrillion CE, Yan J, Moran TH, Tamashiro KLK. Patrina alta graso-dieto dum gestado aŭ suĉado malsame efikas sur la leptina sentemo kaj la obezeco. Diabeto (2012) 61: 2833 – 41.10.2337 / db11-0957 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
41 Berthoud HR. Metabolaj kaj hedonaj veturadoj en la neŭra kontrolo de apetito: kiu estas la estro? Curr Opin Neurobiol (2011) 21: 888 – 96.10.1016 / j.conb.2011.09.004 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
42 Henning SJ, Chang SS, Gisel EG. Ontogenio de manĝokontroloj en suĉaj kaj demetantaj ratoj. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol (1979) 237: R187 – 91. [PubMed]
43 Leibowitz SF, Lucas DJ, Leibowitz KL, Jhanwar YS. Disvolvaj padronoj de konsumado de macronutrientoj en inaj kaj viraj ratoj de demetiĝo ĝis matureco. Fiziolo Konduto (1991) 50: 1167 – 74.10.1016 / 0031-9384 (91) 90578-C [PubMed] [Kruco Ref]
44 Trifilieff P, Feng B, Urizar E, Winiger V, Ward RD, Taylor KM, et al. Kreskanta dopamina D2-receptoro-esprimo en la plenkreska kerno akcenta plibonigas instigon. Mol Psikiatrio (2013) 18: 1025 – 33.10.1038 / mp.2013.57 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
45 Lanco LP. Adoleska cerbo kaj aĝaj rilataj kondutaj manifestiĝoj. Neurosci Biobehav Rev (2000) 24: 417 – 63.10.1016 / S0149-7634 (00) 00014-2 [PubMed] [Kruco Ref]
46 Vendruscolo LF, Gueye AB, Darnaudéry M, Ahmed SH, Cador M. Sukerkonsumado dum adoleskeco selektive ŝanĝas motivon kaj rekompencan funkcion ĉe plenkreskaj ratoj. PLoS Unu (2010) 5: e9296.10.1371 / journal.pone.0009296 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
47 Boitard C, Parkes SL, Cavaroc A, Tantot F, Castanon N, Layé S, et al. Ŝanĝado de adoleska dika dieto al plenkreska dieta dieto restarigas nekonkciajn ŝanĝojn. Fronto Behav Neurosci (2016) 10: 225.10.3389 / fnbeh.2016.00225 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
48 Naneix F, Darlot F, Coutureau E, Cador M. Longdaŭraj deficitoj en hedonaj kaj nukleaj akcentoj al reakcio al dolĉaj rekompencoj per sukera konsumo dum adoleskeco. Eur J Neurosci (2016) 43: 671 – 80.10.1111 / ejn.13149 [PubMed] [Kruco Ref]
49 Baker H, Kobayashi K, Okano H, Saino-Saito S. Kortika kaj striata esprimo de tirozina hidroksilasa ARNm en neonataj kaj plenkreskaj musoj. Ĉela Mol-Neurobiolo (2003) 23: 507 – 18.10.1023 / A: 1025015928129 [PubMed] [Kruco Ref]
50 Jaber M, Dumartin B, Sagné C, Haycock JW, Roubert C, Giros B, et al. Diferenca regulado de tirosina hidroksilase en la bazaj ganglioj de musoj malhavantaj la transportilon de dopamino. Eur J Neŭrosci (1999) 11: 3499 – 511.10.1046 / j.1460-9568.1999.00764.x [PubMed] [Kruco Ref]
51 Klietz M, Keber U, Carlsson T, Chiu WH, Höglinger GU, Weihe E, et al. L-DOPA-induktita diskinesio estas asociita kun manka nombra malreguligo de striatosin tiroksina hidroksilasa mRNA-esprimanta neŭronoj. Neŭroscienco (2016) 331: 120 – 33.10.1016 / j.neuroscience.2016.06.017 [PubMed] [Kruco Ref]
52 Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Will MJ. Corticostriatal-hipotalámica cirkvitado kaj manĝaĵa instigo: integriĝo de energio, ago kaj rekompenco. Fiziol Behav (2005) 86: 773 – 95.10.1016 / j.physbeh.2005.08.066 [PubMed] [Kruco Ref]
53 Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J, et al. Vidante hipotalamajn retajn dinamikojn por apetitaj kaj konsumaj kondutoj. Ĉelo (2015) 160: 516 – 27.10.1016 / j.cell.2014.12.026 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
54 O'Connor EC, Kremer Y, Lefort S, Harada M, Pascoli V, Rohner C, et al. Neŭromaj D1R-neŭronoj projekciantaj al flanka hipotalamo rajtigas nutradon. Neŭrono (2015) 88: 553 – 64.10.1016 / j.neuron.2015.09.038 [PubMed] [Kruco Ref]
55 Jennings JH, Rizzi G, Stamatakis AM, Ung RL, Stuber GD. La inhibicia cirkvitarkitekturo de la flankaj hipotalamo orkestras nutradon. Scienco (2013) 341: 1517 – 21.10.1126 / scienco.1241812 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
56 Stratford TR, Wirtshafter D. Flanka hipotalamo implikado en nutrado eligita de la ventrala pallidum. Eur J Neurosci (2013) 37: 648 – 53.10.1111 / ejn.12077 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
57 Paille V, Fino E, Du K, Morera-Herreras T, Perez S, Kotaleski JH, et al. GABAergic-cirkvitoj kontrolas spike-temp-dependan plastikecon. J Neŭroscio (2013) 33: 9353 – 63.10.1523 / JNEUROSCI.5796-12.2013 [PubMed] [Kruco Ref]
58 Fonseca MS, Murakami M, Mainen ZF. Aktivigo de dorsaj rapidaj serotonergiaj neŭronoj antaŭenigas atendadon sed ne plifortigas. Curr Biol (2015) 25: 306 – 15.10.1016 / j.cub.2014.12.002 [PubMed] [Kruco Ref]
59 Doya K. Metalearning kaj neuromodulado. Neŭra Reto (2002) 15: 495 – 506.10.1016 / S0893-6080 (02) 00044-8 [PubMed] [Kruco Ref]
60 Leibowitz SF, Aleksandro JT. Hipotalamika serotonino regante manĝan konduton, manĝgrandecon kaj korpan pezon. Biol-Psikiatrio (1998) 44: 851 – 64.10.1016 / S0006-3223 (98) 00186-3 [PubMed] [Kruco Ref]
61 Voigt JP, Fink H. Serotonino kontrolanta nutradon kaj satecon. Behav Brain Res (2015) 277: 14 – 31.10.1016 / j.bbr.2014.08.065 [PubMed] [Kruco Ref]
62 Brenachot X, Rigault C, Nédélec E, Laderrière A, Khanam T, Gouazé A, et al. La histona acetiltransferasa MOF aktivigas hipotalamikan polisiligon por malebligi obezon induktitan de dieto ĉe musoj. Mol Metab (2014) 3: 619 – 29.10.1016 / j.molmet.2014.05.006 [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]