Reversigo de dopamina sistemo disfunción en respondo al alta graso dieto (2013)

. Aŭtoro manuskripto; havebla en PMC 2014 Jun 1.

Eldonita en fina redaktita formo kiel:

PMCID: PMC3700634

NIHMSID: NIHMS435903

abstrakta

objektiva

Testi ĉu alta grasa dieto (HFD) malpliigas dopaminergian tonon en rekompencaj regionoj de la cerbo kaj taksi, ĉu ĉi tiuj ŝanĝoj inversiĝas post forigo de HFD.

Dezajno kaj Metodoj

Viraj kaj inaj musoj estis nutritaj 60% HFD dum 12 semajnoj. Plia grupo estis taksita 4 semajnoj post forigo de la HFD. Ĉi tiuj grupoj estis komparitaj al kontroloj nutritaj, agorditaj en aĝo. La prefero de sukero kaj sakarino estis mezurita kune kun mRNA-esprimo de genoj rilataj al dopamino per RT-qPCR. Dopamina kaj DOPAC estis mezuritaj uzante altan rendimentan likvan kromatografion. Metilado de DNA de la iniciatanto de DAT estis mezurita per imunoprecipitaĵo ADN metilata kaj RT-qPCR.

rezultoj

Post kronika HFD, prefero de sukrozo reduktiĝis, kaj poste normaligita post forigo de HFD. Malpliiĝis esprimo de dopamina geno, malpliigita dopamina enhavo kaj ŝanĝoj en DAT-iniciatema metilado estis observitaj. Grave, respondo al HFD kaj persisto de ŝanĝoj dependis de sekso kaj cerba regiono.

konkludoj

Ĉi tiuj datumoj identigas malpliigitan dopaminan tonon post frua vivkronika HFD kun kompleksa mastro de renversiĝo kaj persistado, kiu varias laŭ sekso kaj cerba regiono. CNS-ŝanĝoj, kiuj ne revertis post HFD-retiriĝo, povas kontribui al la malfacileco en konservado de pezo-perdo post dieta interveno.

Ŝlosilvortoj: Dopamina, Alt-Fat-dieto, DAT, seksaj diferencoj, obezeco, retiriĝo, ADN-metilado

Enkonduko

Konsumado de vaste disponebla, kalori-densa aĉa manĝaĵo estas konsiderata kiel ĉefa faktoro kontribuanta al la altaj tarifoj de obezeco en Usono (). Ĉar plaĉaj manĝaĵoj ofte konsumiĝas post kiam energiaj postuloj estas plenumitaj, la rekompencaj propraĵoj de plaĉaj manĝaĵoj povas superregi signalojn de homeostatika sateco. Multaj neurotransmisiloj ludas rolon en nutra konduto (ekz. Opioidoj, dopamino, GABA, serotonino) kaj ankaŭ en la integriĝo de periferiaj nutraj signaloj (ekz. Leptino, insulino, grelinino). Dopamina signalado estas ŝlosila mediatoro en manĝaĵa rekompenco kaj rekompenco-serĉado, ĉar dopamino en la mezolimbika / mezocortika regiono estas asociita kun la rekompencaj propraĵoj de manĝaĵo, sekso kaj drogoj de toksomanio (). Akra, plaĉa manĝaĵo kaŭzas eksplodon de dopamino en la centra rekompenca sistemo (,). Kun kronika konsumo de rekompenca manĝaĵo, la pliigita liberigo de dopamino kun la tempo povas konduki al adaptiĝoj, kiuj estas asociitaj kun rekompenca hipofunkcio.

Pluraj linioj de evidenteco subtenas la hipotezon de ŝanĝita dopamina funkcio en obezeco. Studoj pri homaj bildigoj malkaŝis senbridan aktivadon en rekompencaj regionoj de obesaj pacientoj dum trinkado de tre plaĉa solvo (milkshake) (). La senbrida rekompenco estis asociita kun malpli da cerba dopamina ricevilo D2-havebleco. Fakte, mutacioj en la homa dopamina D2-ricevilo estis ligitaj kaj kun obezeco kaj toksomanio (). Dopamina enhavo en la sinapso estas plejparte kontrolita per kaptiĝo de dopamina transportilo (DAT). La transportaj niveloj de dopamina estas negative korelaciitaj kun indekso de korpa maso kaj genetikaj variantoj de DAT ankaŭ asocias kun obesidad (,). Bestaj modeloj de obezeco pruvis malpliiĝojn en bazaj eksterĉelaj dopaminoj kaj reduktitan dopaminan neurotransmision en la kerno accumbens kaj ventral tegmental areo (,,). Malkreskoj en dopamin-rilataj genoj post kronika alta graso (HF) dieto sugestas malpliiĝan signaladon en rekompencaj regionoj (, ,,). Ĉi tiu malpliiĝo de dopamina agado post kronika alta graso-dieto povas redukti la sentivecon al naturaj rekompencoj kaj faciligi daŭran superkonsumadon kaj plian pezan akiron.

Frua vivo estas kritika periodo en cerba disvolviĝo, kaj la frua nutra medio povas influi cerbajn vojojn kontrolante manĝaĵon kaj energian metabolon. Frua ekspozicio de musoj al alta grasa dieto dum apenaŭ unu semajno ŝanĝis plenkreskan kalorian konsumon kaj esprimon de dopamin-rilataj signalaj molekuloj (). Plue, frua postnaska nutrado ĉe musoj, kaŭzita de eta eta nombro dum laktado, predikas la idaron al plenaĝa obezeco per ŝanĝo de hipotalamo.). Kvankam estas klare, ke frua vivmaniero povas influi cerban disvolviĝon kaj obesan riskon, oni scias malmulte pri la relativa daŭro de ĉi tiuj ŝanĝoj tra la tuta vivo. Aldone, antaŭaj studoj estis faritaj ĉe viraj bestoj, sed inoj malofte estis studitaj en ĉi tiu kunteksto. Al ĉi tiuj celoj, kaj viraj kaj virinaj musoj estis studitaj pri ŝanĝoj en gena esprimo kaj dopamina metabolo post kiam ili fariĝis obesaj en frua vivo per kronika konsumo de HF-dieto ekde naskiĝo tra 8-semajnoj. La dopamina sistemo ankaŭ estis taksita 4 semajnojn post forigo de la HF-dieto, por ekzameni ĉu la ŝanĝoj persistis aŭ renversiĝis.

Metodoj kaj Procedoj

Bestoj kaj eksperimenta modelo

C57BL / 6J-inoj estis breditaj kun viroj DBA / 2J (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME). Ĉiuj digoj nutris norman kontrolan dieton (#5755; 18.5% proteino, 12% grasa, 69.5% karbonhidrato) ĝis partumo kiam duono de la digoj / portiloj estis metitaj sur altan grasan dieton (Test Dieto, Richmond, IN #58G9; 18% proteino, 60% grasa kaj 20.5% karbonhidrato). Infanoj estis malplenigitaj je 3-semajnoj kaj restis sur la kontrola dieto aŭ la alta grasa dieto ĝis 12-semajnoj. Korpaj pezoj estis registritaj ĉiusemajne, kaj ambaŭ viraj (n = 5-10) kaj inaj (n = 5-10) musoj estis uzataj. La Institucia Komitato pri Kuraco kaj Uzo pri Bestoj (IACUC) de la Universitato de Pensilvanio aprobis ĉiujn procedojn.

Prefereco de Sukrozo kaj Sakarino

En apartaj eksperimentoj, musoj estis individue loĝigitaj (n = 8 – 10 / grupo) en normaj kaĝoj dum 3-tagoj kun unu botelo de 200 ml de la prova solvo (4% sukrozo aŭ 1% sakarina solvo (p / v)) kaj alia botelo kun 200 ml da klakakvo. Hejma chow estis havebla ad libitum. Sukrozo (ml), akvo (ml), kaj manĝaĵkonsumo (g), estis mezuritaj kaj la lokigo de la boteloj estis revertita ĉiutage. Prefero estis kalkulita uzante la mezumon de la mezuradoj de la lastaj 2 tagoj kiel sekvas: prefero% = [(sukeroza konsumo / sukerozo + akvo-konsumo) × 100].

Genomika DNA kaj Tuta RNA-izolado de la cerbo

Bestoj (n = 5 / grupo) estis eŭtanigitaj kun superdozo de karbona dioksido, sekvita de cervika disfluo; metodo rekomendita de la Panelo pri Eŭtanazio de la Usona Veterinara Kuracista Asocio. Tiam oni rapide forigis cerbojn kaj metis en RNAlater (Ambion, Austin, TX) dum 4-6 horojn antaŭ disekto. Cerbaj disecoj por izoli la antaŭfrontalan kortekson, la kernon acumbens kaj la ventran tegmentan areon estis preformitaj kiel antaŭe priskribitaj (,, ). Genomika DNA kaj tuta RNA estis izolitaj samtempe uzante AllPrep DNA / RNA Mini Kit (Qiagen).

Analizo de genaj esprimoj per kvanta Reala Tempo

Por ĉiu individua specimeno, 500ng de totala RNA estis uzata en inversa transskribo uzante Reverse Transcription Kit de Alta Kapacito (ABI, Foster City, CA). Esprimo de celaj genoj estis determinita per kvanta RT-PCR uzanta genajn specifaĵojn Taqman-sondojn kun Taqman-gena esprimo Master Mix (ABI) sur la ABI7900HT-Reala-Tempo-PCR-Ciklero. Genaj sondoj estas listigitaj en suplementa materialo. Relativa kvanto de ĉiu transskribaĵo estis determinita uzante deltajn valorojn CT kiel antaŭe priskribitajn en (). Ŝanĝoj en gena esprimo estis kalkulitaj kontraŭ senŝanĝa normo de GAPDH.

Ex vivo Dopamine kaj Dopamine Metabolitoj

Alta likva kromatografio (HPLC) estis uzata por mezuri la enhavon de dopamino kaj ĝiaj metabolitoj en la mezolimbaj rekompencaj lokoj de la cerbo (n = 8 – 12), kiel priskribite antaŭe (,). Oni kolektis cerbojn de bestoj kaj kroĉiĝis al dekstraj kaj maldekstraj hemisferoj. La NAc kaj PFC estis dissekcitaj kaj rapide frostigitaj per seka glacio kaj konservitaj je −80 ° C. La histo estis preparita por analizo per homogenigo en 0.1 N-klorhidrata acido, centrifugita ĉe 15,000 rpm por 15 min ĉe 2-8 ° C, kaj la supernatanto filtris. Specimenoj estis analizitaj per Bioanalitika Sistemoj HPLC (West Lafayette, IN, Usono) per elektrokemia detektilo LC-4C. Specimenoj (12 ul) estis injektitaj sur reversa fazo de mikroboro kolumno kun fluo de 0.6 ml / min kaj elektrodetektado ĉe + 0.6 V. Apartigo por dopamina kaj dopamina metabolitoj estis realigita per movebla fazo konsistanta el 90-mM natria acetato, Acida cítrico 35-mM, 0.34-mM etilendiamina tetraacetika acido, 1.2-mM natria oktila sulfato kaj 15% metanol v / v je pH de 4.2. Pintaj altecoj de specimenoj estis mezuritaj kaj komparitaj kun normoj por dopamino kaj ĝia metabolita 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC).

Imunoprecipitado ADN metilata (MeDIP)

MeDIP-provo estis preformita per MagMeDIP-ilaro (Diagenode, Denville, NJ). Metilata DNA estis imunoprecipitita uzante 0.15ul de magnetaj bidoj tegitaj kun kontraŭ-5metilcididina antikorpo (Diagenode) aŭ muso antaŭmuna imuno. Riĉiĝo en MeDIP-frakcio estis determinita per kvanta RT-PCR uzanta ChIP-qPCR Assay Master Mix (SuperArray) en la Reala-Tempo-Ciklero ABI7900HT. Por ĉiuj genoj ekzamenitaj, primeroj estis akiritaj de SuperArray (ChIP-qPCR Assays (−01) kb kahelaro, SuperArray) por la amplifo de genomaj regionoj ĉirkaŭ la CpG-lokoj situantaj proksimume 300-500 bp supren de la transskribaj startaj retejoj. Rezultoj de MeDIP estis esprimitaj kiel faldebla riĉigo de imunoprecipitata DNA por ĉiu retejo. Por kalkuli diferencigan okupan faldŝanĝon (% riĉigo), la valoroj de MeDIP DNA-frakcio CT estis normaligitaj al enportitaj DNA-frakcio CT-valoroj.

statistikoj

Analizo de gena esprimo estis farita per Studenta T-testo komparante maljunajn matĉajn kontrolojn al HF kaj HF + reakiraj grupoj. La alfa nivelo estis ĝustigita por la multoblaj cerbaj regionoj enketitaj. Signifo de geno uzita en unu cerba regiono estis p = .05; por du regionoj, p = 0.025, por 3 cerbaj regionoj p = .016. Sukroza prefero, sakarina prefero, HPLC kaj MEDIP, korpaj pezoj kaj kortikosterona analizo analizitaj per unudirekta ANOVA por kompari kontrolon, HF, kaj HF + reakiraj grupoj. Post-hoc Bonferonni Multoblaj Komparotestoj estis uzataj por kompari parojn-saĝajn diferencojn inter grupoj. Signifo por ĉi tiuj provoj estis agordita al alfa nivelo de p = .05.

rezultoj

Musoj havis kontinuan aliron regi dieton (kontrolon) aŭ 60% altan grasan dieton (HFD) ĝis la aĝo de 12 semajnoj. En la aĝo de 12 semajnoj, duono de la HF-manĝitaj bestoj estis metitaj sur la doman manĝaĵon dum 4 semajnoj (reakiro de HF +). Kaj en maskloj kaj inoj, HFD-bestoj (cirkloj) estis pli pezaj ol kontroloj komenciĝantaj en aĝo de 9 semajnoj (p <.05) kaj restis pli pezaj ol kontroloj dum la resaniĝa periodo (Suplementa Figuro 1).

Testoj pri prefero de sukero kaj sakarino estis administritaj por taksi la respondon de bestoj al naturaj kaj nenutraj rekompencaj stimuloj. La prefero de sukero sed ne sakraina prefero estis ŝanĝita post eksponiĝo al HF-dieto kaj revenis al normalaj niveloj post resaniĝo al HFD en viroj kaj inoj. Unudirekta ANOVA rivelis sukerozan preferon signife malpliigis ĉe viroj (Fig. 1A) kaj tendencis al malpliiĝo de inoj (Fig. 1B) post HFD-ekspozicio (F (2,16) = 4.82, p <.05; F (2,16) = 5.41, p <.06, respektive). Post forigo de la HFD, ĉi tiu konduto normaligis kaj sakarosa prefero ne plu diferencis de kontroloj. Sakarina prefero ne estis ŝanĝita en ambaŭ viroj (Fig. 1C) aŭ inoj (Fig. 1D) kiel rezulto de HFD-ekspozicio.

figuro 1 

Prefereco en sukero sed ne sakarina prefero estas ŝanĝita post ekspozicio kun alta grasa dieto (HFD) kaj revenas al kontrolniveloj post HFD-resaniĝo en viroj kaj inoj

Ĉar dopamino estas ŝlosila regulilo de rekompenca konduto, dopamina-rilata gena esprimo estis ekzamenita ene de la rekompenca cirkvito de aparta kohorto de viroj kaj inoj post 12-semajnoj sur la HFD, kaj en plia grupo, post 4-semajnoj resaniĝo de la HFD. tablo 1 resumas la genekspresion kaj statistikan analizon en la VTA, PFC kaj NAc. En la VTA, tri genoj gravaj por reguligi dopaminajn nivelojn ĉe sinaptaj finaĵoj estis mezuritaj: katenolamina metil-transferase (COMT) implikita en inaktivigo de katekolaminaj neurotransmisiloj; dopamina transportilo (DAT), membrano disvastiganta pumpilon, kiu forigas dopaminon de la sinapso, kaj tirozina hidroksilase (TH), la ritmo-limigan enzimon por dopamina sintezo. Foldaj ŝanĝaj valoroj por ĉiu grupo estis determinitaj uzante maljunajn matĉajn kontrolojn (ekz. Ambaŭ kontrolaj tempopunktoj estas agorditaj al 1, kaj por klareco nur la kontrolo por HFD estas bildigita sur la grafeo). La t-testo de studento (n = 5 / grupo) rivelis en la vira VTA, ke COMT, DAT, kaj TH-mRNA estis signife malpliigitaj per HFD-ekspozicio (Fig 2A) kaj redonis al aŭ superis la kontrolnivelojn post reakira periodo de la dieto (reakiro HF +).

figuro 2 

Kronika alta grasa dieto (HFD) kaj resaniĝo post HFD ŝanĝas dopamin-rilatan genan esprimon en viroj kaj inoj
tablo 1 

Resumo de Gene-Esprimo kaj Statistikoj en Maskloj

En la PFC kaj NAC, genoj gravaj por dopamina signalado kaj dopamina turniĝo estis ekzamenitaj (n = 5 / grupo): COMT; proteina fosfatasa 1 reguliga subunuo 1B (DARPP-32), malsuprenfluo signalanta proteinon reguligitan de ricevilo-stimulado; dopamina ricevilo D1 (DRD1), postsinaptika G-proteina kuplita ricevilo, kiu stimulas adenilil-ciklase; kaj dopamina ricevilo D2 (DRD2), postsináptica G-proteino kuplita ricevilo, kiu inhibas adenilil-ciklase. En la maskla PFC (Fig. 2B), DARPP-32 estis pliigita, dum DRD1, kaj DRD2 malpliiĝis post HFD-ekspozicio, kaj ĉi tiuj ŝanĝoj persistis post la forigo de HFD (kvankam la kresko de DARPP-32 mRNA ne estis statistike fidinda). En la vira NAC (Fig. 2C), COMT, DRD1, kaj DRD2 estis malpliigitaj per HFD-ekspozicio, kaj restis sub kontrolniveloj post forigo de la HFD. DARPP-32-niveloj estis pliigitaj per HFD, sed signife malpliiĝis de kontroloj post 4-semajnoj de la HFD.

La samaj cerbaj regionoj kaj genoj estis ekzamenitaj en virinaj musoj (n = 5 / grupo). Kiel montrite en tablo 2, estis signifaj diferencoj observitaj en la padrono de gena esprimo en respondo al la HFD, same kiel al la resaniĝo de la dieto. Simile al viroj, en la VTA, mRNA-niveloj de COMT, kaj TH estis signife malpliiĝintaj post ekspozicio al HFD (Fig 2D). Tamen, male al viroj, ĉi tiuj ŝanĝoj persistis post la forigo de la HFD. Plue, en rekta opozicio al la ŝablono observita ĉe viroj, HFD-ekspozicio pliigis DAT-mRNA-esprimon en la VTA en inoj, kaj post forigo de la HFD-niveloj estis eĉ pli malaltaj ol aĝaj egalitaj kontroloj. En la PFC, nur DARPP-32 estis tuŝita de kronika HFD, kun signifa kresko en mRNA-niveloj post 12-semajno HFD, kaj reveno al kontrolaj niveloj post forigo de la HFD. Ambaŭ COMT kaj D1R mRNA estis signife malpliiĝintaj post 4-semajnoj de la HFD. En la ina NAC, COMT, DRD1 kaj DRD2 ĉiuj malpliiĝis post ekspozicio al HFD (Fig. 2F). DRD1 kaj DRD2 reakiris por kontroli nivelojn post forigo de dieto, dum COMT restis niveloj restis signife malpliigitaj post 4wk-reakiro.

tablo 2 

Resumo de Gene-Esprimo kaj Statistiko en Inoj

Konsiderante la konsekvencan malpliiĝon de gena esprimo por genaminoj reguligantaj dopaminon en la VTA, dopaminaj kaj dopaminaj metabolitoj estis kvantigitaj en regionoj kiuj ricevas projekciojn de la VTA, la PFC kaj NAC. figuro 3 montras dopaminon (DA) kaj dopaminan metaboliton (DOPAC) de la PFC kaj NAC ĉe viroj (Fig. 3A, 3C) kaj inoj (Fig. 3B, 3D). En viroj, ekspozicio al HFD produktis malpliigon de dopamina nivelo en PFC (Fig. 3A) kaj NAC (Fig 3C) (F (2,13) ​​= 3.95; F (2,18) = 3.536, p <.05), kiu resaniĝis post forigo de HFD nur en la NAC. Dopamina spezo (DOPAC: DA-proporcio) pliiĝis en maskla PFC (F (2,12) = 3.85, p <.05) kaj NAC (F (2,17) = 4.69, p <.05). Kontraŭe, la efiko de HFD sur DA kaj DOPAC ĉe inoj estis kvalite malsama ol ĉe viroj. En la PFC, HFD ne influis DA aŭ DOPAC-nivelojn. En la NAc, DA-niveloj malpliigis ĉe HFD-nutritaj bestoj kaj restis malpliigitaj eĉ post forigo de la HFD (Fig. 3D, F (2,23) = 4.79, p <.05). DOPAC-niveloj estis senŝanĝaj en la NAc de inoj, kio rezultigis pliiĝon de DA-spezo (proporcio DOPAC: DA) (F (2,23) = 7.00, p <.01).

figuro 3 

Malkresko en Dopamina niveloj en PFC kaj NAC post HFD de naskiĝo kaj miksita resaniĝo post HFD-forigo

Konsiderante, ke DAT-transskribo povas esti reguligita per diferenca DNA-metilado kaj la observado de rimarkinda seksa diferenco en la esprimo de DAT en la VTA, DNA-metilado en la iniciatema regiono de DAT estis ekzamenita. En Figuro 4A, 4C DAT-gena esprimo en la VTA estas prezentita denove por klareco (prenita el Fig 2A kaj 2D). Metilation de DAT-iniciatinto signife pliigis ĉe virojFig. 4B) post HFD kaj revenis al kontrolaj niveloj ĉe virseksuloj de reakiro de HFD + (F (2,11) = 23.64, p <.01). En inoj, DAT-iniciatema metilado inklinis malpliiĝi en HFD-bestoj (D) kaj signife malpliiĝis en inaj reakiroj de HFD + (Fig 5D, F (2,12) = 5.70, p <.05).

figuro 4 

Ŝanĝoj en DNA-metilation-statuso de DAT-iniciatintoj paralelaj ŝanĝoj en gena esprimo en la VTA

Por taksi ĉu forigo de HFD en la resaniĝperiodo estis streĉilo, bazaj plasmaj niveloj de kortikosterono (ug / dl) estis regataj, HFD eksponis (12-semajnoj), HFD + 1wk-reakiro kaj HFD + 4wk-reakciaj grupoj (n = 5 / grupo, Suplementa Fig. 2). Unudirekta ANOVA malkaŝis neniujn signifajn diferencojn inter grupoj en viraj bestoj (F (3,16) = 3.21, ns).

diskuto

Kronika konsumo de alta grasa dieto (HFD) komenciĝanta en frua vivo estis uzata por establi dieton-induktitan obezecon en musoj. Musoj montris malpliigitan preferon de sukrozo kaj evidenteco de reduktita dopaminergia tono en rekompencaj regionoj de la cerbo. Post 4-semajnoj de la HFD, sukeroza prefero normaligita ĉe kaj viroj kaj inoj, tamen iuj persistemaj genaj ŝanĝoj persistis. Ĉi tiuj eksperimentoj provizas gravajn novajn datumojn priskribantajn la efikon de kronika HFD sur la cerba rekompenca sistemo, reliefigante la kapablon por resaniĝo kaj ŝlosilaj seksaj diferencoj inter viraj kaj virinaj musoj.

En HFD-nutritaj bestoj, malpliigita prefero de sukroza estis observita, kiu renversiĝis post resaniĝo. Ĉi tiuj trovoj etendas nian antaŭan raporton pri HFD-konsumado veturanta reduktitan sukerozan preferon () per pruvo, ke tio povas okazi kun pli mallonga daŭro de HFD-ekspozicio (12-semajnoj kontraŭ 22-semajnoj), kaj grave, ke la respondo reakiras sen manko de HFD. Inaj musoj pruvis la samajn respondajn ŝablonojn kiel maskloj. Ĉi tiuj trovoj estas konformaj al aliaj en la literaturo, kiuj montris per la inkludo de par-nutrita grupo kiu kronika HFD, kaj ne obezeco per si mem, mildigas la respondon por sukerozo en operanta tasko (). Simile, en la nuna studo, sukeroza prefero reakiris post 4 semajnoj for de la HFD, dum korpa pezo restis signife levita, subtenante la konkludon, ke malpliigita prefero al sukerozo estis pelita de la ekspozicio al HFD kaj ne de la akompananta korpa pezo. Precipe interese estis, ke ne estis ŝanĝo en sakramenta prefero. Ĉi tio povas indiki, ke kronika HFD malsame efikas sur la respondo al kaloriaj kaj ne-kaloriaj dolĉaj rekompencoj. Afiŝoj post ingesta efiko pruvas influi preferon sendepende de plaĝeco, ĉar pruviĝis ke sukerozo induktas dopaminon en "dolĉ-blindaj" gustaj receptoroj de musoj (), nutra valoro estas bezonata por rekompenco kaj plifortigo () kaj gusto-sendependaj metabolaj sentaj vojoj estis difinitaj en drosofila (). Sukarino estas signife pli dolĉa ol sukerozo, do penado establi ekvivalentecon en dolĉeco (tipe 4-10x pli alta koncentriĝo de sukerozo ()) tamen la ĝenerala prefero por sakarino estis pli malalta ol tiu por sukerozo ĉe ĉi tiuj bestoj. Tial, alternativa ekspliko povas esti, ke HFD malsame influis la sukerozan preferon, ĉar ĝi estis relative pli rekompenca ol sakarino (alta kontraŭ malalta valorvalora rekompenco), kvankam bestoj ankoraŭ elmontras fortan preferon por sakarino (~ 75-80% prefero por sakarino kompare) al ~ 85-90% prefero por sukerozo).

Entute, dopaminergika gena esprimo ene de la VTA, NAc kaj PFC estis malpliigita en viraj musoj post kronika HFD. Ĉi tiuj trovoj estas konformaj al aliaj studoj, kiuj observis malpliiĝojn en genoj rilataj al dopamino en respondo al HFD (,,). Malkreskoj en dopamina D2-receptoro-esprimo kaj funkcio estis observitaj en homaj bildaj studoj (, ) kaj modeloj de obeza ronĝulo (, ). Malpliiĝanta dopamina signalado reduktas la sentivecon al naturaj rekompencoj kaj tial povas faciligi daŭran superkonsumadon de plaĉaj manĝaĵoj kaj plian pezan akiron (,). Plue, interrompita dopamina homeostazo kaŭzita de malpliigita DAT-surfaca esprimo estas konata kaŭzi pliigitan konsumon de alta grasa dieto (). Escepto al ĉi tiu ŝablono estis vidita kun DARPP-32, fosfoproteino regulita per dopamina kaj cikla AMP, kiu pliiĝis post HFD en NAc kaj PFC. DARPP-32 ludas ŝlosilan rolon en la integriĝo de diversaj biokemiaj kaj kondutaj respondoj kontrolitaj de dopamino. Povas esti, ke la supreregulado de DARPP-32 estis kompensa responde al la kronika malsuprenregulado de D1R. En simila modelo (12 wk HFD en musoj), estis montrite ke D1R malsuprenreguligo estis kongruita per pliigo de fosforiligo de DARPP-32 en NAc ().

Malmultaj studoj ekzamenis la kapablon por reakiro de ĉi tiuj ŝanĝoj post forigo de la HFD. Tamen, en du lastatempaj raportoj, genekspreso ŝanĝiĝis kaj rekompenco-sistemaj difektoj persistis post mallonga retiriĝa periodo (14 – 18d) (, ). Kontraste, studoj ĉe obesaj pacientoj antaŭ kaj post gastrika pretervoja kirurgio montris renverson de dopaminergiaj ŝanĝoj post pli longa periodo de perdo de pezo (). En viroj, la padrono de resaniĝo variis laŭ cerba regiono. En la VTA, la observitaj malpliiĝoj en COMT, DAT, kaj TH estis ĉiuj normaligitaj kun la forigo de la HFD. En kontrasto, ĉiuj genaj esprimoj ŝanĝoj observitaj en la NAc kaj PFC ne normaligis. En la nuna studo, kronika HFD kondukis al grava pezo-kresko kaj post 4-semajnoj de la dieto, bestoj estis ankoraŭ signife pli pezaj ol kontroloj. Tial, la postaj metabolaj kaj hormonaj ŝanĝoj akompanantaj la obezecon (ekz. Pliigita leptino, levita adipokino) probable estis ankoraŭ ĉe 4 semajnoj for de la dieto. Tial, genekspresiaj ŝanĝoj normaligitaj (ekz. En la VTA) eble estis ĉefe kaŭzitaj de la HFD, dum tiuj, kiuj estis konservitaj (en NAc kaj PFC), povus esti pli streĉaj kun obezeco. Bontenado de perdo de pezo per dieto estas karakterize malalta (kun 67% () al 80% () de pacientoj reakiras la perditan pezon). Ĉi tiu persisto de genaj esprimaj ŝanĝoj en rekompencaj regionoj povus esti grava por parte klarigi ĉi tiun komunan okazon. Ankaŭ gravas rimarki, ke la observitaj ŝanĝoj de konduto kaj geno estas verŝajne ne kaŭzitaj de streso asociita kun ŝanĝiĝantaj dietoj, ĉar ne estis signifaj ŝanĝoj en bazaj plasmaj kortikosteronaj niveloj sur HFD aŭ post resaniĝo de 1wk aŭ 4wk.

Interesaj seksaj diferencoj estis rivelitaj, ambaŭ en la respondo al kronika HFD, kiel en respondo al forigo de dieto. Inoj estis similaj al viroj en montrado de totala malkresko en dopamin-rilataj genoj, kiuj antaŭdirus malpliiĝon de DA-aktiveco, precipe en la VTA kaj la NAc. Unu rimarkinda seksa diferenco estis la kresko de DAT-mRNA-esprimo en la ina VTA post HFD. Ĉi tiu diferenco en gena esprimo, kunigita al similaj malpliiĝoj de TH-gena esprimo en ambaŭ seksoj, sugestus signifajn diferencojn en dopamina neurotransmisio ene de la NAc, ambaŭ fine de la HFD-ekspozicio kiel post la resaniĝperiodo. Pli granda aprezo por la funkcia signifo de ĉi tiuj diferencoj estas grava fokuso de estonta esplorado.

Aldone, dum COMT kaj TH malpliiĝis reakiritaj en la vira VTA, ĉi tiuj malpliiĝoj persistis ĉe la inoj post 4-semajno de la HFD. Ankoraŭ estas determinite, ĉu ĉi tiuj diferencoj revenos kun pli longa tempo de la dieto, tamen ĝi subtenas la konkludon, ke inoj estas, almenaŭ tre malrapidaj, se ili resaniĝas. Plue, genekspresiaj ŝanĝoj de D1R kaj D2R en NAc kaj PFC estis tute malsamaj inter viroj kaj inoj. En maskloj, ekzistis ĝenerala malpliiĝo de gena esprimo en ambaŭ regionoj, kiuj plejparte persistis post dieta forigo. En inoj, D1R kaj D2R malpliiĝis en la NAc kaj poste resaniĝis, sed ne estis efiko de HFD sur dopaminaj riceviloj en PFC. En la aktualaj studoj, inaj bestoj estis oferitaj sen kalkuli estrusan stadion. Kvankam iuj el la observitaj finoj scias, ke ili varias tra la estrusciklo, inaj bestoj en ĉi tiu studo ne pruvis pliigitan variancon tra la finpunktoj, aparte kiam ili komparas la efikon de la diecaj manipuladoj.

Por kompletigi la trovojn de gena esprimo, dopamino estis mezurita en la primaraj projekciaj regionoj de la VTA, nome la PFC kaj la NAc. Dopamina niveloj tendencis al paralelaj ŝanĝoj viditaj en TH-mRNA en la VTA. En la NAc de kaj viroj kaj inoj, niveloj de DA malpliiĝis en respondo al la HFD-dieto; respondo, kiu resaniĝis en viroj, sed ne en inoj. En la PFC, dopamina nivelo ankaŭ malpliiĝis per HFD, tamen, ne estis reakiro ekster la dieto en la PFC. Aldone, inoj havis pli malaltajn nivelojn de dopamino en la antaŭfrontalaj kortekso ol viroj. Seksdiferencoj en DAT-esprimo kaj funkcio estas bone konataj en la literaturo, kaj inoj montras pliigitan DAT-esprimon () kaj funkcio (), kaj ĉi tiuj diferencoj povas kontribui al la malsamaj bazniveloj de dopamino inter viroj kaj inoj. Ekzameno de la DOPAC: DA-rilatumo ankaŭ estas informa. Pliigo de ĉi tiu rilatumo eble reflektis kompensan respondon kaŭzitan de malpliiĝoj de DA. La longtempa funkcia signifo de ĉi tiuj ŝanĝoj en dopamina metabolo estus lumigita per mezurado de ŝanĝoj en dopamina liberigo uzanta en vivo mikrodijalizo.

Plie, ĉi tiuj datumoj identigas dinamikan reguladon de DNA-metilado ene de la iniciatinto de la DAT-geno, precipe en la viroj. Lastatempe, ni pruvis, ke DAT-esprimo povas esti dinamike reguligita per diferenciala DNA-metilado en respondo al HFD (), kaj tio pliigis metilation de DAT-iniciatilo korelacias kun malpliigo de gena esprimo. Ĉi tie ni identigas la plastikecon de ĉi tiu respondo, ĉar la pliigita DNA-metilado (kaj malpliigita esprimo de la ARNm) vidita ĉe viroj maskloj renversas post forigo de la HFD. Epigenetika genregulado, ekzemple per ŝanĝoj en DNA-metilado, prezentas vojon, per kiu organismoj povas facile adaptiĝi al mediaj defioj. Epigenetikaj markoj povas konservi tra la tuta vivdaŭro (), kaj en kultivaj embriaj ĉeloj, ambaŭ reverteblaj kaj konstantaj padronoj de diferenca DNA-metilado estis observitaj en respondo al ŝanĝiĝantaj mediaj kondiĉoj (). Ĉi tiuj datumoj estas la unuaj en pruvi en vivo dinamika metilado-ŝablono, kiu ŝanĝiĝas kun la ĉeesto aŭ foresto de media defio. Rimarkis, ke ĉi tiu sama ŝablono ne estis observita en inoj. Dum la komenca respondo al la HFD estis kiel antaŭdiris (malpliigita DNA-metilado pelanta pliigitan genan esprimon), ĉi tiu ŝablono ne konserviĝis dum la retrova periodo. Ĉi tio sugestas, ke DNA-metilado kaj gena esprimo eble fariĝos nekunigitaj dum la kvar semajnoj de la HFD aŭ ĝi eble sugestas, ke DAT-mRNA estas reguligita per aliaj rimedoj ĉe inoj.

En viroj, prefero de sukerozo, gena esprimo rilata al DA en la VTA, kaj dopamino en la NAc sekvas konstantan padronon, de subpremo en respondo al la kronika HFD, kiu resaniĝas post forigo de la dieto. Interese, dum la kondutismaj respondoj al sukerozo estas similaj en la inoj, ambaŭ la gena esprim-ŝablono kaj NAc-dopamina nivelo montras mankon de resaniĝo post forigo de la HFD. Rekompenc-rilataj kondutoj klare influas aldonajn neurotransmisiajn sistemojn kiel la opioidoj, kaj eble ĉe inoj, la konduta respondo al sukerozo pli forte asocias kun ŝanĝoj en opioidoj. Entute, la nunaj datumoj sugestas, ke seksaj diferencoj en ambaŭ la komenca respondo al HFD, same kiel resaniĝo post forigo de HFD, rilate dopamin-rilatan genan esprimon reprezentas gravan direkton por estonta esplorado direktita al kiel kronika konsumo de HFD efikas sur la cerba rekompenca sistemo. Plej precipe, ĉi tiuj datumoj identigas signifan plastikecon en la dopaminergia respondo al HFD, sugestante, ke kvankam la adversaj efikoj de kronika HFD-konsumo kaj / aŭ obezeco estas signifaj, la potencialo por resaniĝo ekzistas.

Kio estas jam konata pri ĉi tiu temo

  • Esprimo kaj funkcio de dopamina ricevilo malpliiĝas ĉe obesaj pacientoj
  • Kronika ekspozicio al alta dika dieto kaŭzas ŝanĝojn en dopamin-rilataj genoj kaj rekompencan konduton
  • Dopamina neŭrotransmisio estas ŝanĝita en obesaj ronĝuloj.

Al kio ĉi tiu manuskripto aldonas temon

  • Identigo de seksaj diferencoj en la respondo de CNS al alta grasa dieto.
  • Taksado de la plastikeco de dopaminergiaj ŝanĝoj post la forigo de la alta grasa dieto.
  • Identigo de dinamikaj ADN-metilaj ŝanĝoj en respondo al alta grasa dieto

Suplementa Materialo

Dankojn

Ĉi tiu laboro estis subtenata de la jenaj subvencioj: MH087978 (TMR), MH86599 (IL), kaj T32 GM008076 (JLC).

Piednotoj

 

Deklaro pri Konfliktoj de Intereso

La aŭtoroj havas neniujn konfliktojn por malkaŝi.

 

Referencoj

1 Swinburn B, Sacks G, Ravussin E. Pliigita nutra energiprovizo estas pli ol sufiĉa por klarigi la usonan epidemion de obezeco. Am J Clin Nutr. 2009; 90: 1453 – 1456. [PubMed]
2 Fibro HC, Phillips AG. Mezokorticolimbaj dopaminaj sistemoj kaj rekompenco. Ann NY Acad Sci. 1988; 537: 206 – 215. [PubMed]
3 Hernandez Ludoviko, Hoebel Bartley G. Manĝaĵa Rekompenco kaj Kokaino Pliigas Ekstracelan Dopaminon en la Nukleaj Akumuloj kiel Mezurita de Mikrodialysis. Vivsciencoj. 1988; 42 (18): 1705 – 1712. [PubMed]
4. Sahr Allison E, Sindelar Dana K, Alexander-Chacko Jesline T, Eastwood Brian J, Mitch Charles H, Statnick Michael A. Aktivigo de Mesolimbaj Dopaminaj Neŭronoj Dum Novaj kaj Ĉiutage Limigita Aliro al Bongusta Manĝaĵo Blokiĝas de la Opioida Antagonisto LY255582. American Journal of Physiology - Reguliga, Integra kaj Kompara Fiziologio. 2008 aŭgusto 1; 295 (2): R463 – R471. [PubMed]
5. Stiko E, Spoor S, Bohon C, Malgranda DM. Rilato inter obesidad kaj malhelpa striata respondo al manĝaĵo estas moderata per TaqIA A1 alelo. Scienco. 2008; 322: 449-452. [PMC libera artikolo] [PubMed]
6 Nobla EP, Blum K, Ritchie T, Montgomery A, Sheridan PJ. Alelika asocio de D2 geno de dopamina ricevilo kun receptoro-ligantaj trajtoj en alkoholismo. Arch Gen Psychiatr. 1991; 48: 648 – 654. [PubMed]
7 Chen PS, Yang YK, Yeh TL, Lee IH, Yao WJ, Chiu NT, et al. Korelacio inter korpa maso-indico kaj striatala dopamina transporta havebleco en sanaj volontuloj - studo pri SPECT. Neuroimage. 2008; 40 (1): 275 – 279. [PubMed]
8 Bezonas AC, Ahmadi KR, Spektanto TD, Goldstein DB. Obezeco estas Asociita kun Genetikaj Variaĵoj, kiuj Altigas Dopaminan Haveblecon. Analoj de Homa Genetiko. 2006 May; 70 (Pt 3): 293 – 303. [PubMed]
9 Geiger BM, Frank LE, Caldera-siu AD, Stiles L, Pothos EN. Manko de centra dopamino en multoblaj modeloj de obezeco. Apetito. 2007; 49 (1): 293.
10 Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, Pothos EN. Difektoj de mezolimbic dopamina neŭrotransmisio en rata obezeco de rato. Neŭroscienco. 2009 Apr 10; 159 (4): 1193 – 119. [PMC libera artikolo] [PubMed]
11 Konuso JJ, Robbins HA, Roitman JD, Roitman MF. Konsumo de alta grasa dieto influas fazan dopamin-liberigon kaj rekuperon en la kerno accumbens. Apetito. 2010 Jun; 54 (3): 640.
12 Vucetic Zivjena, Carlin Jesselea, Totoki Kathy, Reyes Teresa M. Epigenetika Malreguligo de la Dopamina Sistemo en Dieta-Induktita Obezeco. Revuo por Neŭrokemio. 2012 Jan 5; [PMC libera artikolo] [PubMed]
13 Alsiö J, Olszewski PK, Norbäck AH, Gunnarsson ZEA, Levine AS, Pickering C, Schiöth HB. Ĝenerala Esprimo de Dopamina D1-Malpliiĝo en la Nukleaj Akcentoj Ĉe Longtempa Elmontro Al Plaĉa Manĝaĵo Kaj Difektiloj Dependanta De Dieta-Induktita Obesita Fenotipo En Ratoj. Neŭroscienco. 2010 Dec 15; 171 (3): 779 – 787. [PubMed]
14 Johnson Paul M, Kenny Paul J. Dopamine D2 Receptoroj en Adiccio-Kiel Rekompenca Malfunkcio kaj Deviga Manĝado En Obesaj Ratoj. Naturo-Neŭroscienco. 2010 May; 13 (5): 635 – 641. [PMC libera artikolo] [PubMed]
15 Huang Xu-Feng, Yu Yinghua, Zavitsanou Katerina, Han Mei, Storlien Len. Diferenca esprimo de dopamina D2 kaj D4-receptoro kaj tirozina hidroksilase mRNA en musoj inklina, aŭ rezistema, al kronika alta dika induktita obezeco de dieto. Esploro pri Molekula Cerbo. 2005 Apr 27; 135 (1 – 2): 150 – 161. [PubMed]
16 Teegarden SL, Scott AN, Bale TL. Frua vivo-ekspozicio al alta grasa dieto antaŭenigas longtempajn ŝanĝojn en dietaj preferoj kaj centra rekompenco-signalado. Neŭroscienco. 2009 Sep 15; 162 (4): 924 – 932. [PMC libera artikolo] [PubMed]
17 Bouret SG. Rolo de Fruaj Hormonaj kaj Nutraj Spertoj en Formado de Manĝa Konduto kaj Hipotalamika Disvolviĝo. The Journal of Nutrition. 2010 Jan 1; [PubMed]
18 Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Materna Alt-Grasa Dieto Altigas Metilacion kaj Genan Esprimon de Dopamino kaj Opioid-Rilataj Genoj. Endokrinologio. 2010 Okt; 151 (10): 0000 – 0000. [PMC libera artikolo] [PubMed]
19 Reyes Teresa M, Walker John R, DeCino Casey, Hogenesch John B, Sawchenko Paul E. Kategorie Distingaj Akraj Streĉiloj Elicitaj Disimilaj Transkripciaj Profiloj en la Paraventricula Kerno de la Hipotalamo. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 2003 Jul 2; 23 (13): 5607 – 5616. [PubMed]
20 Cleck Jessica N, Ecke Laurel E, Blendy Julie A. Endocrine kaj Gene-Esprimo Ŝanĝoj Sekvante Forigita Naĝan Stresan Eksponon Dum Kokaino-Abomeno en Musoj. Psikofarmakologio. 2008 Nov; 201 (1): 15 – 28. [PMC libera artikolo] [PubMed]
21 Pfaffl MW. Nova matematika modelo por relativa kvantigo en reala tempo rt-pcr. Nukleaj Acidoj Res. 2001; 20: e45. [PMC libera artikolo] [PubMed]
22 Mayorga AJ, Dalvi A, Page ME, Zimov-Levinson S, Hen R, Lucki I. Antidepresiv-similaj kondutaj efikoj en mutantaj receptoroj de 5-hydroxytryptamine (1A) kaj 5-hydroxytryptamine (1B). J Pharmacol Exp Ther. 2001; 298: 1101 – 110. [PubMed]
23 Vucetic Z, Kimmel J, Reyes TM. Kronika Alt-Grasa Dieto Kondukas Postnatalan Epigenetikan Reguladon de μ-Opioid-Ricevilo en la Cerbo. Neuropsikofarmakologio. 2011 doi: 10.1038 / npp.2011.4. anticipe interreta publikado 16 Februaro 2011. [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
24 Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschöp MH, Lipton JW, Clegg DJ, et al. Eksponiĝo al altaj niveloj de dieta graso mildigas psikostimulan rekompencon kaj mezolimban dopaminon ĉe la rato. Behav Neurosci. 2008; 122 (6) [PMC libera artikolo] [PubMed]
25 de Araujo Ivan E, Oliveira-Maia Albino J, Sotnikova Tatyana D, Gainetdinov Raul R, Caron Marc G, Nicolelis Miguel AL, Simon Sidney A. Manĝaĵa Rekompenco en la Sencela Ricevilo-Signalo. Neŭrono. 2008 Mar 27; 57 (6): 930 – 941. [PubMed]
26 Beeler Jeff A, McCutcheon James E, Cao Zhen FH, Murakami Mari, Alexander Erin, Roitman Mitchell F, Zhuang Xiaoxi. Gusto Senkontaktigita de Nutrado Malsukcesas Subteni la Plifortigajn Propraĵojn de Manĝaĵo. La Eŭropa Revuo pri Neŭroscienco. 2012 Aug; 36 (4): 2533 – 2546. [PMC libera artikolo] [PubMed]
27 Dus Monica, Min SooHong, Keene Alex C, Lee Ga Young, Suh Greg SB. Sendependa gusto de la Kaloria Enhavo de Sukero en Drosophila. Procedoj de la Nacia Akademio de Sciencoj de Usono de Ameriko. 2011 Jul 12; 108: 11644 – 11649. [PMC libera artikolo] [PubMed]
28 Wang Gene-Jack, Volkow Nora D, Logan Jean, Pappas Naoml R, Wong Christopher T, Zhu Wel, Netusll Noelwah, Fowler Joanna S. Brain-dopamino kaj obezeco. La Lanceto. 2001; 357 (9253): 354 – 357. [PubMed]
29 Huang XF, Zavitsanou K, Huang X, Yu Y, Wang H, Chen F, et al. Dopamina transportilo kaj D2-ricevilo liganta densecojn en musoj inklina aŭ imuna al kronika alta grasa dieto-induktita obezeco. Behav Brain Res. 2006; 175 (2): 415 – 419. [PubMed]
30 Fortuna Jeffrey L. La Obeseco-Epidemio kaj Manĝaĵa toksomanio: Klinikaj Similaĵoj al Drogodependeco. Revuo por Psikoaktivaj Drogoj. 2012 Mar; 44 (1): 56 – 63. [PubMed]
31 Koob George F, Moal Michel Le. Toksomanio kaj la cerbo-kontraŭrevena sistemo. Ĉiujara Revizio de Psikologio. 2008; 59: 29 – 53. [PubMed]
32 Speed ​​Nicole, Saunders Christine, Davis Adeola R, Anthony Owens W, Matthies Heinrich JG, Saadat Sanaz, Kennedy Jack P, et al. Difektita Striatala Akt Signalado Malhelpas Dopaminan Homeostasis Kaj Pliigas Manĝadon. PLOS UNU. 2011 Sep 28; 6 (9) doi: 10.1371 / journal.pone.0025169. [PMC libera artikolo] [PubMed] [Kruco Ref]
33 Sharma S, Fulton S. Dieto-induktita Obezo Antaŭenigas Depres-similan Konduton Kiu Estas Asociita Kun Neŭralaj Adaptiĝoj en Cerbaj Rekompencaj Cirkvitoj. Internacia Revuo por Obezeco 2005. 2012 Apr 17; [PubMed]
34 Steele Kimberley E, Prokopowicz Gregory P, Schweitzer Michael A, Magunsuon Thomas H, Lidor Anne O, Kuwabawa Hiroto, Kumar Anil, Brasic James, Wong Dean F. Alteraciones de Centraj Dopaminaj Receptoroj Antaŭ kaj Post Gastrika Bypass Kirurgio. Kirurgio de Obezeco. 2009 Okt 29; 20 (3): 369 – 374. [PubMed]
35 Phelan Suzanne, Wing Rena R, Loria Catherine M, Kim Yongin, Lewis Cora E. Prevalenco kaj Antaŭdiroj de Prizorgado-Prizorgado en Biracia Kohorto: Rezultoj de la Korona Arteria Riska Disvolviĝo en Juna Plenkreskula Studo. Usona Revuo pri Antaŭzorga Medicino. 2010 Dec; 39 (6): 546 – 554. [PMC libera artikolo] [PubMed]
36 Kampo AE, Wing RR, Manson JE, Spiegelman DL, Willett WC. Rilato de Granda Pezo-Perdo al Longatempa Pezo-Ŝanĝo inter Junaj kaj Mezaĝaj Usonaj Virinoj. International Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders: Journal of the International Association for the Study of Obesity. 2001 Aug; 25 (8): 1113 – 1121. [PubMed]
37 Morissette M, Di Paolo T. Sekso kaj Estra Ciklo-Variadoj de Rata Striatala Dopamina Ujektaj Lokoj. Neŭroendokrinologio. 1993 Jul; 58 (1): 16 – 22. [PubMed]
38 Bhatt Sandeep D, Dluzen Dean E. Dopamina Transporta Funkcio-Diferencoj inter Masklaj kaj Inaj CD-1-Musoj. Esploro de Cerbo 2005 Feb 28; 1035 (2): 188 – 195. doi: 10.1016 / j.brainres.2004.12.013. [PubMed] [Kruco Ref]
39 Ollikainen Miina, Smith Katherine R, Joo Eric Ji-Hoon, Hong Kiat Ng, Andronikos Roberta, Novakovic Boris, et al. DNA Metilation-Analizo de Multoblaj Teksaĵoj de Novnaskitaj Ĝemeloj Malkaŝas Ambaŭ Genetikajn Kaj Intraŭterajn Komponentojn al Variaĵo en la Homa Neonata Epigenomo. Homa Molekula Genetiko. 2010 Nov 1; 19 (21): 4176 – 4188. [PubMed]
40 Tompkins Joshua D, Hall Christine, Chen Vincent Chang-yi, Li Arthur Xuejun, Wu Xiwei, Hsu David, et al. Epigenetika Stabileco, Adaptebleco, kaj Revertebleco en Homaj Embriaj Stemaj Ĉeloj. Procedoj de la Nacia Akademio de Sciencoj de Usono de Ameriko. 2012 Jul 31; 109 (31): 12544 – 12549. [PMC libera artikolo] [PubMed]