Koncerna ekspozicio al metanfetamino kaj seksa konduto plibonigas la postajn rekompencojn de drogoj kaj kaŭzas kompetentan seksan konduton en masklaj ratoj (2011)

J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.

Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coelita LM.

fonto

Fako de Anatomio kaj Ĉela Biologio, Lernejo de Medicino kaj Dentologio de Schulich, Universitato de Okcidenta Ontario, Londono, Ontario N6A5C1, Kanado.

abstrakta

La uzantoj de Methamphetamine (Meth) raportas, ke ili plifortigas seksan plezuron, multajn seksajn partnerojn kaj okupas senprotektitan sekson pro perdo de inhiba kontrolo. Ĉi tiu komprenebla seksa konduto kontribuas al pliigita ofteco de sekse transdonitaj infektoj, sed la nekonata bazo por tio estas nekonata. Ni antaŭe establis paradigmon por komprenebla seksa konduto en virseksaj ratoj, en kiuj viscera malsano induktita de litia kloruro estis simila al seksa konduto (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). La nuna studo ekzamenis la efikojn de ripetita Meth-administrado pri seksa agado, kompensa seksa konduto, kaj sekso aŭ Meth-rekompenco. Unue, rezultoj pruvis, ke sep ĉiutagaj administradoj de 2 mg / kg, sed ne 1 mg / kg, Meth pliigis latancojn por komenci mating. Ĉi tiu difekto estis evidenta 30-min post la lasta Meth-administrado, sed dissipiĝis post 1 aŭ 7 d de posta droga abstino. Ripetita 1 mg / kg Meth-ekspozicio rezultigis devigan sekskulturan konduton 2-semajnojn post la lasta Meth-administrado. Ĉi tiu efiko dependis de Meth-administrado samtempe kun seksa sperto kaj ne estis observita en sekse spertaj bestoj, kiuj ricevis Meth sole. Plie, koncerna Meth kaj seksa sperto plibonigita kondiĉis lokan preferon (CPP) por Meth, kaj por konkurencaj Meth kaj mating kompare kun Meth aŭ mating alone. Kontraŭe, CPP por mating sole malpliiĝis. Kune, ĉi tiuj datumoj indikas, ke la asocio inter drog-uzo kaj matado povas esti postulita por esprimo de kompensa seksa konduto kaj estas rilatigita kun pliigita rekompenco serĉanta por samtempaj Meth-ekspozicio kaj matado.

Enkonduko

Seksaj rilatoj pri sano en malsagxaj loĝantaroj konsciis pri la efikoj de drogoj de misuzo pri seksa konduto, ĉar kronika drog-uzo estas asociita al nesekuraj seksaj praktikoj, kiuj kaŭzas pliigitan oftecon de sekse transdonitaj infektoj, inkluzive de homa imunodeficiencia viruso (HIV)Crowe kaj George, 1989; Peugh kaj Belenko, 2001; Sánchez et al., 2002; Raj et al., 2007; Fisher et al., 2011). Ĉi tiuj efikoj de drogoj sur seksa konduto estas bone dokumentitaj por la psikostimulanto de metanfetamino (Meth). Ĉu uzantoj ofte raportas pli altan seksan deziron, ekscitiĝon kaj plezuron kaj identigi tiujn faktorojn kiel primara motivado por drog-uzo (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verda kaj Halkitis, 2006). Plie, Meth-misuzo ofte estas asociita kun perdo de inhiba kontrolo de seksa konduto aŭ sekse komprenema konduto (Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson et al., 2002; Verda kaj Halkitis, 2006) kaj pliigita prevalencia de VIH (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; Parsons kaj Halkitis, 2002).

Homaj raportoj, kiuj pruvas ke Meth-uzado kiel antaŭdiro de seksaj riska kondutoj baziĝas sur memreportoj de kronikaj Meth-uzantoj, kiuj malhavas de fidinda mezuro por la rilato inter Meth-uzo kaj seksa konduto (Frohmader et al., 2010b). Tiel, esploro pri Mut-induktitaj ŝanĝoj en seksa konduto sub kontrolitaj eksperimentaj agordoj, uzanta beston, estas necesa por kompreni la kompleksan asocion inter Meth kaj seksa konduto.

Ĵus, nia laboratorio ekzamenis la efikojn de akra Meto sur kompensa seksserĉado en masklaj ratoj (Frohmader et al., 2010a). Ĉi tiuj studoj uzis kondiĉitan seksan aversion-paradigmon, en kiu la virseksaj ratoj lernis asocii kunbatadon kun posta viscera malsano (Peters, 1983; Agmo, 2002). Fojo kiun ĉi tiu asocio inter mating kaj la aversive stimulo estis establita, bestoj ne komencus mating konduton (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). La pretigado de unuj injektoj semajnoj antaŭ kondiĉado interrompis la akiraĵon de malhelpitaj seksaj respondoj (Frohmader et al., 2010a). Tiel, Mitraktataj virseksaj ratoj serĉis seksan konduton, kvankam matado estis asociita kun aversiva stimulo; ĉi tio estis nomata maladaptive aŭ compulsive mating.

Kiel antaŭaj studoj provas la efikojn de akra droga injekto kaj esplorado enketante la efikojn de ripetita Meth sur seksa rato de seksa rato estas limigita, la ĉefa celo de la nuna studo estis esplori la efikojn de ripetita Meth-administrado pri diversaj aspektoj de seksa konduto, inkluzive agado, kompensa serĉado de sekso kaj rekompenco. Unue, la efikoj de ripetita Meth sur mating estis testitaj post droga administrado kaj post periodoj de droga abstino por distingi inter mallongaj kaj longtempefektoj de Meth sur seksa funkcio. Tuj poste, la efikoj de ripetita Meth-administrado pri maladaptive-seksa konduto estis enketitaj, efektivigante la kondiĉitan seksan aversion-paradigmon. Krome, ĝi estis decidita ĉu lernaj asocioj inter ripetita Meth-ekspozicio kaj seksa konduto estis esencaj por la efikoj de Meth sur maladaptive seksa konduto. Fine, ĝi estis provita ĉu ripetita Meth-ekspozicio rezultas plibonigitan rekompencon por Meth kaj / aŭ mating, kiel difinita per kondiĉoj de preferata loko (CPP).

Materialoj kaj metodoj

temoj

Plenkreskuloj de Sprague Dawley ratoj (210-225 g) estis akiritaj de Charles River Laboratories kaj loĝigitaj en samseksemaj paroj en normaj ĉasoj Plexiglas (hejmaj kaĝoj) enhavantaj pecojn de PVC-tubo por ekologia riĉiĝo. Bestoj estis loĝigitaj en ĉambro konservita ĉe 12 / 12 h revertita lumo / malhela ciklo (malŝaltas ĉe 11: 00 AM) kun manĝaĵo kaj akvo havebla ad libitum. Ĉiuj provoj estis faritaj dum la malluma ciklo sub ruĝa lumigado. Stimuloj inoj (200-225 g; Charles River Laboratories) uzitaj por seksa konduto estis bilaterally ovariectomized kaj ricevis subcutanean enplanton enhavanta 5% estradiol-benzoaton kaj 95-% kolesterolon. Por indukti seksan receptivecon, inoj administris 0.5-mg de progesterono en 0.1 ml de sesama oleo (sc) 4 h antaŭ seksa konduto. Eksperimentaj proceduroj estis aprobitaj fare de la Animal Care Committee en la Universitato de Okcidenta Ontario kaj la Komitato pri Mezurita Prizorgado kaj Uzo de la Universitato de Miĉigano kaj konsentis pri gvidlinioj priskribitaj de la Kanada Konsilio pri Bestoj pri Bestoj kaj Naciaj Mezlernejoj de Sano.

Eksperimentaj dezajnoj

Seksa konduto

La nuna eksperimento enketis la efikojn de ripetita Meto sur seksa agado kaj instigo tuj post droga injekto kaj sekvantaj drogaj abstinencaj periodoj. Tridek tri virseksaj ratoj akiris seksan sperton en apartaj testaj kaĝoj (matantaj areoj; 60 × 45 × 50 cm) enhavantaj purajn ĉemizojn dum kvin dufoje-semajnaj kunsidoj. Dum ĉiu kunsido, la maskloj estis permesitaj kuniĝi kun akceptema ino ĝis la ekrano de eksakulado aŭ por 1 h, kio okazis unue. Semajno post la lasta kunsido, viroj estis kutimitaj al eksperimentaj proceduroj kaj ricevis subcutanan injekton de 1 ml / kg salina dum tri sinsekvaj tagoj. Sekvante ĉiun injekton, bestoj estis metitaj en ĉambroj de aktiveco de Plexiglas (40.5 × 40.5 cm; Med Associates) ekipitaj kun 16 × 16-fotobeam-arrays; lokomotoro estis registrita por 30-min. Krom registri ambulantan konduton sekvantan traktan injekton, metante virojn en la lokomotorĉambroj provizis drogon-asociitan medion apartan de tiu de mating-konduto. Poste, maskloj ricevis ĉiutagan injekton de 1 aŭ 2 mg / ml / kg Meto aŭ veturilo (salina, 1 ml / kg; n = 11 ĉiu) por 7 sinsekvaj tagoj. Sekvante ĉiun injekton, maskloj estis metitaj en la lokomotorĉambroĉambroj kaj lokomotorganizado estis registrita por 30-min, post kiam ili revenis al siaj tenantaj kaĝoj. En la lasta tago de la administrado de Meth, viroj estis forigitaj el la lokomotorĉambro post 30-min kaj enmetis ilin en la matematika areno por provi la efikojn de Meth sur seksa konduto. Bestoj estis testitaj denove por seksa konduto en la kadukaj areoj sekvantaj 1-d aŭ 1-semajnon de drog-abstino.

Dum la kunvenaj kunsidoj, normaj parametroj por seksa konduto estis observitaj kaj registritaj, inkluzive de latencoj por munti (tempo de enkonduko de ino al unua monto) kaj interrompo (tempo de enkonduko de ino al unua intromisión), kiuj estas indikaj de seksa instigo (Hull et al., 2002), same kiel latencia al eksakulado (tempo de unua interrompo al eyakulado), nombroj da muntoj kaj intrompioj antaŭ eksakulado kaj postjakuladora intervalo, kiuj estas mezuroj de seksa agado (Hull et al., 2002; Pfaus, 2009). Diferencoj inter grupoj estis determinitaj por ĉiu parametro de seksa konduto per neparametria analizo de Kruskal-Wallis kaj Dunn's post hoc komparoj, ĉe signifaj niveloj de 0.05.

Agado de lokomotoro

Lokomotora agado post ĉiu Meth-injekto estis analizita per analiza programaro Med Associates kiel distanco vojaĝita ene de 5-minutaj intervaloj. Grupaj diferencoj estis ekzamenitaj per neparametria analizo de Kruskal-Wallis kaj Dunn post hoc komparoj. Por ekzameni la induktitan sensorigilon de induktitaj indikiloj, la aktiveco de la induktita tempo dum la lasta 10-min de la provo estis komparita inter la unua kaj sepa sepajekjekago ene de ĉiu droga dosea traktado kun simila paro t provoj. Grava nivelo de 0.05 aplikiĝis al ĉiuj komparoj.

Kondulita seksa aversio

Eksperimento 1.

Unue, 50-virseksaj ratoj estis kutimitaj al salaj injektoj dum tri sinsekvaj tagoj kaj maskloj gajnis seksan sperton dum tri kunsidoj. Antaŭ ĉiu matinga kunsido, bestoj estis injektitaj per 1 mg / kg Meth aŭ 1 ml / kg saline (sc), metitaj en mating arenas, kaj, 30 min poste, estis permesitaj mate kun akceptema ino ĝis eyaculado aŭ 1 h. Parametroj por seksa konduto estis registritaj kaj analizitaj (vidu Seksa konduto, supre). Du semajnoj poste, bestoj estis submetitaj al kondiĉita seksa aversio paradigma. Homoj estis subdividitaj en kvar eksperimentajn grupojn laŭ pretratado (Meth aŭ saline) kaj kondiĉado [litio-kloruro (LiCl) -pirita aŭ -premita]; grupoj estis saline-senparaj (n = 12), Meth-unpaired (n = 12), salinea (n = 13) kaj Meth-paired (n = 13). La kondiĉita aversio-paradigma konsistis el ok sinsekvaj 2-d kadradiĝaj provoj. Dum la unua tago, ĉiuj maskloj estis metitaj en la matĉa areno por periodo de periodo de 10-min, post kiam akceptema ino estis enkondukita. Inoj estis odoritaj per svingado de migdalaj oleo sur la kolo kaj bazo de la vosto antaŭ matigado, ĉar olfatikaj kuracoj estis montritaj por faciligi virseksan alproksimiĝon kaj fortigi kondiĉadon (Lawrence kaj Kiefer, 1987; Agmo, 2002). Oni rajtas mortigi homojn por 30-min aŭ ĝis unu eyakulado. Se intrompioj ne okazis ene de la unua 15-min, matingiĝo estis nuligita. Unu minuto post la eyakulado aŭ provo finiĝis, viroj ricevis 127.2 mg / kg intraperitoneal injekton de 10 ml / kg LiCl (similaj maskloj) aŭ saline (senparaj viroj). LiCl aŭ saline estis administritaj sendepende de ĉu mating okazis. La sekvan tagon, senparaj viroj ricevis 10 ml / kg injekton de LiCl dum similaj viroj ricevis saline. Bestoj estis revenitaj al la hejma kaĝo post injektoj.

Eksperimento 2.

Por provi ĉu la efikoj de Meth-pretratado sur kondiĉita seksa aversio dependas de la samtempa ekspozicio al Meth kaj mating aŭ pro Meth sola, plua eksperimento estis efektivigita. Viraj ratoj (n = 20) ricevis seksan sperton dum kvin kunsidoj, sed sen Meth aŭ salinaj traktadoj (n = 10 ĉiu). Anstataŭe, 1 semajno post seksa sperto, ili ricevis sep unufoje ĉiutagajn injektojn de ĉu Meth (1 mg / kg, sc) aŭ saline kaj 2 semajnoj poste estis submetitaj al la kondiĉita seksa aversion-paradigma (vidu Experiment 1, supre).

Por ambaŭ eksperimentoj kaj dum ĉiu kondiĉo de provizo, analizis parametroj por seksa konduto kaj grupaj diferencoj estis difinitaj por ĉiu provizo de kondiĉado uzante ANOVA de du vojoj (faktoroj: Meth / saline pretreatment, conditioning). Pearson χ2 analizo estis uzata por kompari diferencojn inter grupoj en la procentoj de maskloj kiuj montris montojn, intrompiojn aŭ eksakuladon ene de ĉiu klimatizilo.

Kondiĉa loko prefero

Por provi ĉu antaŭtraktado de Meth influis rekompencon por Meth aŭ seksa konduto, CPP-eksperimentoj estis faritaj. Tri-kupeaj aparatoj (Med Associates) enhavantaj du pli grandajn eksterajn ĉambrojn (28 × 22 × 21 cm) kun distingeblaj vidaj kaj palpaj signaloj kaj apartigitaj per malgranda centra kupeo (13 × 12 × 21 cm), estis uzataj por ĉiuj CPP-eksperimentoj . Pordoj ambaŭflanke de la centra kupeo disigis la ĉambrojn, kaj povus esti levitaj por permesi la liberan movadon de la bestoj tra la aparato, aŭ mallevitaj por limigi ilin al aparta areo. La aparato estis ekipita per lumradioj por mezuri la tempon pasigitan en ĉiu ĉambro. En la unua tago, 15 min-antaŭtesto estis farita por determini la komencan ĉambran preferon de ĉiu besto, per kio ĉiu besto rajtis vagi libere inter ĉambroj de la CPP-aparato. Neniuj signifaj preferoj por ambaŭ ĉambroj estis detektitaj inter eksperimentaj grupoj. Bestoj estis ekskluditaj de la studo se ili montris plilongigitan preferon por specifa ĉambro (diferenco pli ol 120 s; montrita de <10% de la temoj). Kondiĉigo estis farita dum la tagoj 2 kaj 3. Dum kondiĉado, la komence nepreferita ĉambro (parigita ĉambro) estis parigita kun rekompenca manipulado dum 30 min. La komence preferata ĉambro (neparigita ĉambro) estis parigita kun kontrolmanipulado. La ordo en kiu la bestoj estis elmetitaj al la parigitaj kaj neparaj ĉambroj estis kontraŭpezita ene de ĉiu eksperimenta grupo. Posttesto, kiu estis simile identa al la antaŭtesto, estis farita en la kvara kaj fina tago.

Eksperimento 1.

Unue, 50-virseksaj ratoj estis kutimitaj al salaj injektoj dum tri sinsekvaj tagoj kaj maskloj gajnis seksan sperton dum tri kunsidoj. Dum ĉiu matinga kunsido, bestoj estis injektitaj per 1 mg / kg Meth aŭ 1 ml / kg saline (sc), metitaj en testaj kaĝoj, kaj, 30 min poste, permesis mate kun akceptema ino ĝis eyaculado aŭ 1 h. Parametroj por seksa konduto estis registritaj kaj analizitaj (por priskribo, vidu Seksa konduto, supre). Unu semajnon poste, bestoj estis distribuitaj en kvar eksperimentajn grupojn egalitajn por kuracado kaj seksa agado por CPP-provoj. Dum kondiĉado, maskloj estis injektitaj per Meto aŭ salino (kongruante al la antaŭa frapado) kaj 30-min poste estis permesitaj unuiĝi ĝis eksakulado. Unu minuto post la eyakulado, la besto estis metita en la parĉan ĉambron. La senpaga ĉambro estis asociita kun aŭ injekto (Meth aŭ saline) aŭ mating sen injekto. Sekvante la postteston, prefere poentaron (la procento de tempo elspezita en la parigita ĉambro dum la pretendanto kaj posttesto; kalkulita kiel tempo pasigita en parigita ĉambro dividita de tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100) kaj CPP-poentaro (Eksperimento 1; tempo pasita en la parigita ĉambro dum la posttesto malpli la pretendema) estis kalkulita por ĉiu temo. Preferoj estis komparitaj ene de eksperimentaj grupoj uzante parigita t provoj kaj CPP-poentaroj estis komparitaj inter eksperimentaj grupoj uzantaj unudirektan ANOVA kaj la malpli signifan diferencan teston de Fisher por post hoc komparoj, ĉiuj kun 95-konfidaj niveloj.

Eksperimento 2.

Por provi ĉu efektojn de Meth-pretratado en CPP por Meth aŭ mating dependas de la samtempa ekspozicio al Meth kaj mating aŭ pro Meth sola, plua eksperimento estis efektivigita. Masklaj ratoj ricevis Meth (1 mg / kg) kaj mating samtempe por 4 sinsekvaj tagoj (n = 10). Du grupoj de kontrolo restis sekse naivaj kaj ricevitaj ankaŭ Meth aŭ saline (n = 10 ĉiu). Unu semajnon poste, CPP por Meth estis farita. Ĉiuj maskloj ricevis injekton de Meth en la parigita ĉambro kaj salina injekto asociis kun la senpaga ĉambro. Preferaj poentaroj estis kalkulitaj kaj komparitaj ene de eksperimentaj grupoj uzante parigita t provoj kun graveco de 0.05.

Eksperimento 3.

Por provi ĉu samtempa ekspozicio al Meth kaj mating estas kritika por ŝanĝita seksa rekompenco, matematika CPP-studo estis efektivigita. Masklaj ratoj ricevis aŭ Meth (1 mg / kg) aŭ saline samtempe kun mating dum kvar sinsekvaj tagoj (n = 10 ĉiu). Unu semajnon poste, CPP por seksa konduto estis provita. Ĉiuj maskloj estis metitaj en la parĉambro sekvanta matadon kaj neniu mating estis asociita kun la senpaŝita ĉambro. Preferaj poentaroj estis kalkulitaj kaj komparitaj ene de eksperimentaj grupoj uzante parigita t provoj kun graveco de 0.05.

Korinklinita loko aversion

Por provi ĉu Meth-ekspozicio ŝanĝas sentivecon al LiCl-induktita malsano, kondiĉita loko aversion (CPA) eksperimento estis efektivigita. CPA-provado estis efektivigita dum la unua duono de la malluma periodo uzante la saman aparaton, kiel tio uzis por CPP-eksperimentoj (vidu Preferita loka prefero, supre). Dum tri sinsekvaj tagoj, viraj ratoj akiris seksan sperton samtempe kun Meth (1 mg / kg) aŭ salina (n = 10 ĉiu). Unu semajno poste, ĉiuj maskloj ricevis litan injekton (10 ml / kg, ip) parigita kun la komence preferata ĉambro, dum ekvivalenta dozo de salino estis asociita kun la komence nepra ĉambro. Sekvante la posttestan preferan interpunkcion (la procento de tempo elspezita en la parigita ĉambro dum la pretendanto kaj posttesto; kalkulita kiel tempo pasita en parigita ĉambro dividita per tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100) kaj CPA-poentaro (diferenco en tempo pasita en la parigita ĉambro dum la posttesto malpli la pretendema) estis kalkulita por ĉiu temo. Preferoj estis komparitaj ene de eksperimentaj grupoj uzante parigita t provoj, dum CPA-interpunkcioj estis komparitaj inter eksperimentaj grupoj per senpagaj t provoj, ĉiuj kun graveco nivelo de 0.05.

rezultoj

Seksa konduto

Meth signife influis la iniciacion de seksa konduto kiam mating estis provita 30-min sekvanta la lastan drogan injekton. Ĉi tiu efiko estis dozo-dependa ĉe 2 mg / kg, sed ne 1 mg / kg, Meth. Meth signife pliigis muntojn kaj interrompojnp = 0.001 kaj 0.002, respektive) kompare kun salaj kontroloj (Figo. 1A). Meth ne influis la procentojn de virseksuloj, kiuj komencis konduton, kaj 100% de maskloj en la tri traktataj grupoj. Meth ne havis longtempajn efikojn sur la iniciato de seksa konduto, ĉar Mitraktataj maskloj ne montris ŝanĝiĝintajn matingajn kondutojn kompare kun saline-pretendaj kontroloj kiam matado estis provita dum drogaj abstinencaj tagoj 1 kaj 7 (Figo. 1B,C). Fine, Meth ne tuŝis seksan agadon en ajna tempo ĉar ne estis efikoj sur malĉefaj al eksakulado (Figo. 1) aŭ nombroj da montoj kaj intromisiones (datumoj ne montritaj). Tiel, ripetita Malsukcesita iniciato de matado kiam estis provita baldaŭ post administrado, sed ne havis longtempajn efikojn sur seksa instigo aŭ agado.

Figuro 1.   

Efektoj de ripetita Meth sur seksa agado. A-C, Latencoj munti (ML), interrompo (IL) kaj eksakulado (EL) sekvanta administradon de 0, 1, aŭ 2 mg / kg Meth 30 min post la sepa kaj lasta droga injekto (A) kaj drogaj abstinencaj tagoj 1 (B) kaj 7 (C). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Gravaj diferencoj de salaj-injektitaj maskloj (p <0.05).

Agado de lokomotoro

Metas ĉe 1 aŭ 2 mg / kg dozo pliigis lokomotor-aktivecon kompare kun kontroloj (p <0.001, 1 kaj 2 mg / kg; Figo. 2A,B). Ripetita Meth-administrado rezultigis sentivigitajn lokomotorojn-respondojn, kiuj administris 1 mg / kg Meth montris signife pli grandan lokomotivan aktivecon sekvantan la lastan drogan injekton kompare kun la unua injekto (p = 0.042; Figo. 2C). Kontraŭe, 2 mg / kg Meth rezultigis signife malpliigis lokomotivan aktivecon en la lasta tago kompare kun la unua tago (p = 0.009; Figo. 2C), kiuj povas indiki kreskojn en stereotikaj kondutoj.

Figuro 2.   

Efektoj de ripetita Meth en lokomotoro. A, B, Distanco vojaĝita de viroj administritaj 0, 1, aŭ 2 mg / kg Meth sekvanta la unuan (A) kaj lasta (B) Meta injekto. Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Gravaj diferencoj de kontrolo por ĉiuj traktataj grupoj (p <0.05); #Signifaj diferencoj inter 1 mg / kg Metho kaj kontrolo nur (p <0.05). CMit-induktita sentivega lokomotila respondo. Distanco vojaĝita de viroj administritaj 0, 1, aŭ 2 mg / kg Meth sekvantan la unuan kaj lastan Meth-injekton dum la lasta 10-min de lokomotoraj registradoj. Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Signifa diferenco de seksaj naiva maskloj de la sama trakta grupo (p <0.05).

Kondulita seksa aversio

Seksa konduto

Dum la Fazo de pretratación Meth de la Eksperimento 1, la seksa konduto ne estis tuŝita de 1 mg / kg Meth-traktado dum ĉiu el la tri postaj kunsidoj kompare kun saline-pretraj maskloj (tablo 1). Ĉi tiuj rezultoj konfirmas mankon de efikoj de ĉi tiu dozo de Meth sur seksa konduto, eĉ kiam administrita en la sama medio. Krome, Met pretreatment ne ŝanĝis seksan konduton dum la unua tago de la kondiĉo paradigma (antaŭ la kuniĝo de LiCl; tablo 1) aŭ dum iu ajn el la kondiĉoj pri klimatizado en la grupoj senligitaj de LiCl. Ĉi tiuj rezultoj konfirmas, ke Meth ne havis longajn efektojn sur seksa konduto.

Rigardu ĉi tiun tablon:   

Tablo 1.    

Superrigardo pri seksa konduto

Komforta seksa konduto

Eksperimento 1.

Kontraŭe, ripetita Meth-traktado plifortigis la devigan seksan serĉadon. En kontrolo, saline-pretenditaj bestoj, kondiĉita seksa aversio signife malhelpis seksan konduton. Specife, malkreskaj procentoj de LiCl-similaj maskloj, kiuj muntis kaj interrompis kompare kun senparaj salin-pretraj viroj, estis unue evidentaj en la sesa (p = 0.039) kondiĉado kaj persistis per kondiĉado de provo 7 (p = 0.005; datumoj ne montritaj) kaj 8 (p <0.001; Figo. 3B). Signifa diferenco en la procento de maskloj, kiuj eyakuladis, estis unue evidenta sur la kvara (p = 0.041) kondiĉo de kondiĉado kaj persistis laŭlonge de kondiĉado (p <0.001; Figo. 3C). Tamen, Met pretreatment influis kondiĉitan seksan aversion, ĉar Meth-pretraktaj viroj kun LiCl ne atingis gravan inhibicion de seksa konduto ĝis la lasta kondamnita procezo komparita kun senpagaj Meti-pretraj viroj. Specife, la procentoj de Met-pretendataj LiCl-similaj maskloj montrante intrompiojn kaj eksakuladojn estis signife malpliiĝitaj nur dum kondiĉado de provo 8 (p = 0.03 kaj p = 0.011, respektive). Tiel, Met pretreatment 2 semajnoj antaŭ la komenco de kondiĉado rezultigis maladaptive or compulsive sex-seeking behavior.

Figuro 3.   

Efektoj de koincidantaj matĉoj (sekso) kaj Meth-pretratado sur kondiĉita seksa aversio (Eksperimento 1). A, Eksperimentaj grupoj inkludis saline- (Sal) aŭ Meth-pretraktitajn virseksojn, kiuj ricevis Lakajn sekajn matĉojn (Virinojn) kaj salinajn aŭ Mit-pretrajnajn virseksojn, kiuj ricevis salinajn sekvantajn matojn (Senpagaj maskloj). Dum la dua tago de ĉiu kondamnita procezo, similaj viroj ricevis salinajn kaj senparajn virojn ricevitajn LiCl. B, C, Procento de maskloj muntantaj (B) kaj eyaculanta (C) dum kondiĉita seksa aversio sekvanta Met pretreatment administrita samtempe kun seksa sperto. * Signifa diferenco de salaj-pretenditaj senparaj viroj (p <0.05); #signifa diferenco de Meth-pretreated unpaired males (p <0.05).

Eksperimento 2.

La efikoj de Meth-pretigado sur kondiĉita seksa aversio dependis de samtempe Meth kaj matinga sperto. Specife, kondiĉita seksa aversio ne influis seksajn spertajn virseksojn, kiuj ricevis Met pretratadon kaj matan sperton ĉe malsamaj tempoj (nekonkureblaj). Procentoj de Met-pretrataj LiLl-similaj maskloj, kiuj montris montojn kaj eĥakuladojn, ne diferencis al salaj-pretraj similaj viroj (Figo. 4). Ĉi tiuj datumoj sugestas, ke la komenca asocio inter Meth kaj seksa sperto estis kontribuanta faktoro al la efikoj de Meth sur komprenebla seksa konduto.

Figuro 4.    

Figuro 4.    

Efektoj de nekonkura matado (sekso) kaj Met-pretratado sur kondiĉita seksa aversio (Eksperimento 2). Procento de maskloj muntantaj (A) kaj eyaculanta (B) dum LiCl kondiĉita seksa aversio sekvanta Meth pretreatment ne asociita kun seksa sperto. Du grupoj estis inkluditaj: LiCl-parigita pretendita kun salina kaj LiCl-parigita pretendita kun Meth.

Korinklinita loko aversion

Pliaj kontrolaj eksperimentoj malkaŝis, ke la nekapablo malhelpi mati sekvantan Mit pretreatment ne estas pro malforta sentemo al LiCl-induktita viscera malsano, ĉar ĉiuj maskloj formis aversion al la ĉambro asociita kun sola dozo de LiCl. Specife, ambaŭ saline-kaj Meth-pretraj virseksuloj elspezis signife malpli da tempo en la ĉambro kunigita de LiCl dum la posttesto kompare kun la ŝajnigu (p = 0.037 kaj 0.045, respektive; Figo. 5A). Aliflanke, la diferenco de tempo elspezita en la ĉambro kunigita de LiCl sekvanta la posttestan versus ŝajnon estis identa en Meth- kaj saline-pretenditaj grupoj (Figo. 5B).

Figuro 5.    

Figuro 5.    

Efektoj de koincidantaj matĉoj (sekso) kaj Meth-pretratado pri LiCl-induktita CPA. A, B, Preferenta poentaro (tempo elspezita en parigita ĉambro dividita per tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100; A) kaj CPA-poentaro (diferenco en tempo elspezita en la parigita ĉambro dum la posttesto malpli ŝajnigu; B) en varmaj maskloj ŝajnigitaj kun salino (Sal; sekso + salino) aŭ Meth (sekso + Meth). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Gravaj diferencoj de ŝajnoj ene de la sama eksperimenta grupo (p <0.05).

Kondiĉa loko prefero

Eksperimento 1

Mem-raportaj studoj malkaŝas, ke Meth uzas plibonigi seksan plezuron kaj estas primara instigo por drog-uzo (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verda kaj Halkitis, 2006). Ĉi tiu Ment-induktita plibonigo de seksa plaĉo ne estis provita en la roedor-modelo. Sekve, CPP-paradigma estis uzata por pruvi ĉu seksa konduto kun Meth estas pli rekompencanta ol ĉu mating aŭ Meth-administrado sole. En konsento kun antaŭaj studoj (Agmo kaj Berenfeld, 1990; Pfaus kaj Phillips, 1991; Tenk et al., 2009), enkadriĝanta en saline-pretendaj kontrolaj maskloj rezultigis CPP-maskloj elspezis pli da tempo en la sekso + saline-parita ĉambro ol la salina parĉambro dum la posttesto (p = 0.001; Figo. 6C,D). Krome, la maskloj de kontrolo ne preferis la seksan ĉambron en la seksa parĉambro, pruvante, ke salina injekto antaŭ matado ne influis seksan rekompencon (Figo. 6C,D). Rezultoj montris, ke Meth pliigis CPP por sekso kompare kun ĉu mating aŭ Meth sola. Homoj pasis pli da tempo dum la posttesto en la sekso + Meth-simila ĉambro ol la seksa parĉambro (p <0.001; Figo. 6C) aŭ la Metita ĉambro (p = 0.02; Figo. 6C), aŭ kompare kun la grupo de kontrolo (p = 0.002 kaj 0.05, respektive; Figo. 6D). Sekve, seksa konduto kun Meth ŝajnas esti pli rekompencanta ol seksa konduto aŭ Meth sola en bestoj, kiuj ŝajnis kun seksa konduto kaj Meth samtempe.

Figuro 6.    

Figuro 6.    

Efektoj de koincidantaj matĉoj (sekso) kaj Meth-pretratado sur mating- kaj Meth-induktita CPP (Eksperimento 1). Kvar grupoj estis inkluditaj. A, Du grupoj ricevis seksan + salinon (Sal) pretratadon kaj la sekvan traktadon en la parigita / senpaga ĉambro: sekso + salino / sekso, sekso + salino / salino. La unua grupo servis kiel negativa kontrolo, ĉar saline ne atendis ŝanĝi CPP por sekso. La dua grupo funkciis kiel pozitiva kontrolo, ĉar oni atendis, ke la sekso kaŭzas CPP. B, La aliaj du grupoj ricevis sekson + Meth pretreatment kaj jenajn en la parigitaj / senparaj ĉambroj: sekso + Muto / sekso aŭ sekso + Meth / Meth. La ordo, en kiu la bestoj estis elmontritaj al la parigitaj kaj senparaj ĉambroj, estis kompensitaj en ĉiu eksperimenta grupo. C, Preferenta poentaro (tempo elspezita en parigita ĉambro dividita per tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Gravaj diferencoj de ŝajnoj ene de la sama eksperimenta grupo (p <0.05). D, CPP-poentaro (diferenco en tempo elspezita en la parigita ĉambro dum la posttesto malpli la ŝajnigu). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Gravaj diferencoj de la sekso + salina / seksa grupo (p <0.05).

Eksperimento 2

Tuj poste, ĝi decidis ĉu koncerna pretratado de Meth kaj sekso influis CPP por Meth sola komparita kun salina traktado en la senpaga ĉambro. Efektive, Mitraktataj virseksuloj, kiuj interŝanĝiĝis samtempe kun ĉiu droga injekto, formis preferon por la Meth-ĉambro (p = 0.01; Figo. 7). Kontraŭe, maskloj, kiuj ricevis ripetitajn salinojn aŭ Meth-injektojn sen la kunteksto de matado, ne montris pli grandan preferon por la Meth-ĉambro dum la posttesto.

Figuro 7.    

Figuro 7.    

Efektoj de koincidantaj matĉoj (sekso) kaj Met-pretigado pri Meth-induktita CPP (Eksperimento 2). Preferenta poentaro (tempo elspezita en parigita ĉambro dividita per tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100) en maskloj ŝajnigitaj kun salino (Sal), Meth, aŭ sekso + Meth. Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. * Signifa diferenco de ŝajnigu ene de la sama eksperimenta grupo (p <0.05).

Eksperimento 3

Fine, ĝi estis provita ĉu samtempe Meth kaj mating pretreatment tuŝis la CPP por mati sole. Homoj pretenditaj kun Meth kaj mating ne preferis seksan konduton, evidentigitan de manko de pliigita tempo en la seksa parĉambro. Kontraŭe, maskloj, kiuj estis traktataj kun salino kaj matado, fariĝis prefero por la seksa parĉambro (p = 0.003; Figo. 8). Kune, ĉi tiuj datumoj sugestas, ke la asocio inter Meth kaj mating rezultigas pli grandan stimulon por Meth, sen manko de matado kaj kuniĝo kune kun Meth, sed reduktis stimulon por matiĝi ĉe la manko de la drogo.

Figuro 8.    

Figuro 8.    

Efektoj de koincidantaj matĉoj (sekso) kaj Meth-pretratado pri matematika indika CPP (Eksperimento 3). Preferenta poentaro (tempo elspezita en parigita ĉambro dividita per tempo en parigita + senpaga ĉambro × 100) en maskloj ŝajnigitaj kun sekso + salino (Sal) aŭ sekso + Meth. Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM.

diskuto

La nuna studo pruvis la efikojn de ripetita Meto sur seksa konduto kun specifa fokuso sur seksa agado, maladaptive aŭ compulsive seksa serĉado, kaj mating aŭ / aŭ rekompenco. Tli ĉefa serĉo de ĉi tiu studo estis, ke Mit pretreatment ne influis la esprimon de seksa konduto, sed kaŭzis komprenean seksan konduton en la sekvaj semajnoj. Ĉi tiu efiko sur komprenebla seksa konduto dependas de la samtempa sperto kun Meth kaj mating. Plie, samtempe Mit kaj matingaj pretratoj plibonigis Meth-rekompencon, sed reduktis seksan rekompencon. Kune, ĉi tiuj studoj montras, ke asocio inter Meth kaj mating estas kritika por la evoluo aŭ esprimo de kompensa seksa konduto kaj ŝanĝoj en seksa kaj droga rekompenco.

Metajxo, kiam koincidis kun matado, havis longtempajn efikojn sur la kapablo de la kondiĉita seksa aversio paradigma por deteni seksan konduton. Ĉi tiu efiko ne povas facile esti klarigita per deficito en lernado aŭ memoro, pro tio ke Metodemaj virseksuloj ne montris evidentecon de difektita lernado dum CPP aŭ LiCl-induktitaj seksperfortaj paradigmoj. Krome, estas neprobabla, ke ripetita administrado de la malalta dozo de Meth kaŭzis la konumajn difektojn kaj neurotoxicidad kutime vidantan sekvantan kronikan ekspozicion al altaj dozoj de Meth en ratoj (Walsh kaj Wagner, 1992; Friedman et al., 1998; Chapman et al., 2001; Schröder et al., 2003) kaj homoj (Ornstein et al., 2000; Simon et al., 2002; Kalechstein et al., 2003), kiel ununuraj Meth-bingeantaj paradigmoj uzantaj la saman dozon, pro tio ke la nuna studo ne malhelpis la objektivan rekonon de lernado kaj ne kaŭzis neurotoxicidad (Marshall et al., 2007). Alia alternativa klarigo por la malfavora akiraĵo aŭ esprimo de kondiĉita seksa aversio estas perdo de sentemo por LiCl. Tamen, bestoj estis same kapablaj akiri kondiĉitan aversion al ĉambro antaŭe parigita kun LiCl. Sekve, Mitraktataj virseksuloj ne difektis asocian memoron aŭ reduktitan sentivecon al LiCl aŭ LiCl-induktita malsano. Ŝajnas, ke Mit pretreatment kaŭzis maladaptive aŭ compulsive seksa serĉado, malgraŭ lernitaj negativaj konsekvencoj, kio estas laŭ homaj raportoj (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson et al., 2002; Somlai et al., 2003; Verda kaj Halkitis, 2006; Springer et al., 2007).

Plie, la efiko de Meth kaj mating pretreatment en reduktita inhibicio de maladaptive seksa konduto ne facile klarigas per plibonigita rekompenco asociita al mating. Kontraŭe, en bestoj, kiuj ricevis samtempe Meth kaj matingan sperton, rekompencoj de rekompenco asociitaj kun matado estis reduktitaj. Sekve, alia ekspliko devas esti proponita por la efikoj de koincidaj Methoj kaj matoraj pretekstoj pri la esprimo de maladaptive seksa konduto. Freŝa neŭtraatomia studo de nia laboratorio identigis cerbajn areojn kie Meth povas medii efikojn sur seksa konduto (Frohmader et al., 2010c). Ĉi tie, neŭtrala aktivigo induktita de mating aŭ Meth estis ekzamenita uzante neŭtralajn aktivajn markilojn kiel Fos aŭ fosforilado de MAPK respektive. Metodoj kaj matoj kondukis neŭronojn en la kerno accumbens, basolateral amygdala, kaj la antaŭa cingula areo de la medial prefrontal korto (Frohmader et al., 2010c) kaj en la orbitofrontal korto (Frohmader kaj Coolen, 2010). La kortumoj prefrontales kaj orbitofrontales estas de aparta intereso pro tio ke ili kontribuas al kondutoj adictivos (Kalivas kaj Volkow, 2005; Kalivas et al., 2005; Lasseter et al., 2010; Winstanley et al., 2010). Plie, la hipoaktiveco de ĉi tiuj cerbaj areoj estis rilatigita kun pluraj psikiatraj kondiĉoj asociitaj kun perdo de inhiba kontrolo (Graybiel kaj Rauch, 2000; Taylor et al., 2002; Londono et al., 2005). Ĉi tiuj evidentecoj sugestas, ke Meth povas agi en ĉi tiuj frontaj kortumoj por kaŭzi longtempajn ŝanĝojn, kiuj samtempe mezuras kompensan seksan konduton. Konforme al ĉi tio, alta efiko de compulsiva seksa konduto montriĝis translokiĝi kun aliaj psikiatraj malordoj, inkluzive de drogofultado, angoro kaj humoro-malordoj (Bancroft, 2008). Same, la disfunción induktita de drogoj de la kortumoj prefrontales kaj orbitofrontales mediales estas hipotezadas por esti respondeca de la kontrolo reduktita de impulso (Brewer kaj Potenza, 2008; Fineberg et al., 2010) kaj pliigita sekso-direktita konduto observata en multaj toksomaniuloj (Jentsch kaj Taylor, 1999; Bancroft, 2008). Miinterkonsento kun ĉi tio, lezoj de la medial prefrontala krozo en virseksaj ratoj rezultigis devigan sekskultan konduton en la kondiĉita seksa aversio paradigma uzita en la nunaj studoj (Davis et al., 2010).

Antaŭa esplorado montris, ke ripetita administrado al psikostimulantoj aŭ opioj plibonigas rekompencon de drogoj, kiel mezurita de CPP (Lett, 1989; Shippenberg kaj Heidbreder, 1995; Shippenberg et al., 1996). Krome, seksa sperto kaŭzis posta sentiveco de drekompencamamina rekompenco (Pitchers et al., 2010). En la nuna studo, la efikoj de Meth kaj / aŭ seksa sperto pri Meth-CPP estis testitaj sub kondiĉoj, kiuj ne atendus rezulti en drogprogramo: malalta dozo de Meth, ununura kondiĉo, kaj provado dum la malluma fazo de la tago ĉe tempoj de plej malalta CPP (Webb et al., 2009a,b). La sentivaj regimentoj de ripetita Meto aŭ de seksa sperto uzataj en la nuna studo ne kaŭzis plibonigitan Meth-CPP. Tamen, Met pretreatment samtempe kun mating plibonigis Meth-rekompencon, indikante ke ĉi tiu asocio inter Meth kaj mating kaŭzis pliboniĝon en rekompenco serĉante Meth. Ĉi tiuj rezultoj konsentas pri homaj raportoj pri pliigita Meth serĉanta indentigantan seksan plezuron dum Meth prenanta kiel ĉefa disko por drog-uzo (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verda kaj Halkitis, 2006). Nuntempe ne estas klare, ke komponantoj de seksa konduto estas kritikaj por la asocio inter Meth kaj mating. En la nuna studo, ĉiuj maskloj miksis al eksakulado. Tamen, niaj antaŭaj trovoj sugestas, ke sociaj interagoj eble sufiĉas por indukti maladaptivan sekskostan konduton (Frohmader et al., 2010a).

Neuraj substratoj, kiuj povas mezuri la plibonigajn efikojn de koincidaj Methoj kaj matoraj pretekstoj pri Meth-rekompenco inkluzivas la kernon accumbens kaj basolateral amygdala. Longtempaj ŝanĝoj en dendritaj spinoj-denseco kaj morfologio en la akumbens-rezulto de ripetita droga administrado (Bruna kaj Kolb, 2001; Robinson et al., 2002; Li et al., 2003; Robinson kaj Kolb, 2004) aŭ seksa sperto (Meisel kaj Mullins, 2006; Pitchers et al., 2010), kaj estas hipotezitaj por mediate drog-induktita lokomotoro kaj rekompenci sentigadon (Pierce kaj Kalivas, 1997; Vanderschuren kaj Kalivas, 2000; Li et al., 2004). La basolateral amigdala estas kritika por memoro pri kondiĉoj stimulitaj asociitaj kun drogaj stimuloj (Grace kaj Rosenkranz, 2002; Laviolette kaj Grace, 2006) Kaj implikita en rekompencaj sentoj kaj plifortigo (Everitt et al., 1999; Kardinalo et al., 2002; Vidu, 2002). Lezoj aŭ senaktivigoj de la basolatera amigdala blokas la akiraĵon (Whitelaw et al., 1996) kaj esprimo (Grimm and See, 2000) de kondiĉita kuracita kokaino. Plie, basolateral amigdalaj leszoj rezultigas reduktan respondon por kondiĉitaj stimuloj parigitaj kun manĝaĵo (Everitt et al., 1989) aŭ seksa plifortigo (Everitt et al., 1989; Everitt, 1990) en ratoj. Sekve, eblas, ke psikostimulantoj kaj mating-induktitaj ŝanĝoj en akumbens kaj basolaterales amigdalaj rezultigas potencan rekompencon de Meth.

Sensitigaj regimentoj de drogoj estis montritaj por faciligi seksan konduton. Sentante pretendojn de d-amphetamine (10 ĉiutagaj injektoj de 1.5 mg / kg) faciligas seksan konduton (Fiorino kaj Phillips, 1999a,b) kaj ankaŭ alproksimigi konduton al seksaj stimuloj (Nocjar kaj Panksepp, 2002). Studoj en inaj ratoj pretenditaj kun Meth (tri ĉiutagaj injektoj de 5 mg / kg) rezultigis pliigitajn akceptajn kondutojn (Holder et al., 2010). Kontraŭe, la nuna studo ne montris efikojn de sentema regimento de Meth-traktado sur seksa konduto. Eblaj klarigoj por ĉi tiu discrepanco inkluzivas la pli malaltan drogon-dosieron uzita en la nuna studo, malsamaj taksadoj de seksa instigo kaj seksaj diferencoj (Becker kaj Hu, 2008).

Studoj pri rolantaj modeloj de Meth-toksomanio ĵus koncentris sur drogaj balaj paradigmoj por enketi Meth-induktitajn kondutajn difektojn (Belcher et al., 2008; Izquierdo et al., 2010; O'Dell et al., 2011), neŭroplataj ŝanĝoj (Brennan et al., 2010) kaj neurotoxicidad (Moszczynska et al., 1998; Kuczenski et al., 2007; Graham et al., 2008). La ĉefa celo de ĉi tiuj studoj estis atingi plasmajn drogajn nivelojn en la rato proksime al tiuj trovitaj en homaj Metoduloj. Kontraŭe, la nuna studo pruvis, ke unufoje ĉiutaga pasiva administrado de malalta dozo Meth sufiĉas por kaŭzi longdaŭran kompensan seksan konduton. Meth-bingeca paradigmo ne estis uzata por praktikaj kialoj: alta dozo de Meth difektas seksan konduton (Frohmader et al., 2010a) kaj homaj uzantoj ofte uzas seksajn agojn plibonigante drogojn por subteni seksan funkcion (Semple et al., 2009). La fokuso de la nunaj serioj de studoj estis esplori seksan rekompencon kaj devigan matadon en bestoj kun senmova matematika konduto. La rezultoj pruvas, ke komprenebla seksa konduto kaj ŝanĝita drogoj kaj seksaj rekompencoj povas esti kaŭzitaj de tre malalta droga ekspozicio, kiam ili samtempe kun seksaj spertoj kaj ne dependas de indukti bingezajn nivelojn de Meth en la cerbo.

Kune, la nuna aro de studoj formas gravan paŝon al pli bona kompreno pri la efikoj de Meth sur kompensa seksa konduto kaj asocioj inter drogo kaj seksa rekompenco. Aliflanke, ĉi tiuj datumoj paralelaj tiuj raportitaj en homaj toksomaniuloj; tiel, la maskla modelo povas esti pli uzata por ekzameni molekulajn kaj strukturajn mekanismojn de Meth-efikoj sur seksa konduto kaj eble kontribui al estontaj drogaj terapioj.

Piednotoj

    • Ricevita Aŭgusto 4, 2011.
    • Revizio ricevita Septembro 8, 2011.
    • akceptita Septembro 23, 2011.
  • Ĉi tiu laboro estis subtenata de kanadaj Institutoj de Sanaj Esploroj Grant RN 014705 al LMC

  • La aŭtoroj deklaras neniujn konkurencajn financajn interesojn.

  • Korespondado devas esti adresita al Lique M. Coolen, Universitato de Miĉigano, Sekcio de Molekula kaj Integra Fiziologio, Medicina Scienco II, Salono 7732B, 1137 E. Catherine Street, Ann Arbor, MI 48109-5663. [retpoŝte protektita]
Antaŭa Sekcio    

Referencoj