J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.
Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM.
Fuente
Departamento de Anatomía y Biología Celular, Escuela Schulich de Medicina y Odontología, Universidad de Western Ontario, Londres, Ontario N6A5C1, Canadá.
Resumen
Los usuarios de metanfetamina (Meth) informan haber aumentado el placer sexual, numerosas parejas sexuales y tener relaciones sexuales sin protección debido a la pérdida del control inhibitorio. Este comportamiento sexual compulsivo contribuye a una mayor prevalencia de infecciones de transmisión sexual, pero se desconoce la base neuronal para esto. Anteriormente establecimos un paradigma para el comportamiento sexual compulsivo en ratas macho en las cuales la enfermedad visceral inducida por el cloruro de litio se emparejaba con el comportamiento sexual (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). El estudio actual examinó los efectos de la administración repetida de Meth sobre el rendimiento sexual, el comportamiento sexual compulsivo y el sexo o la recompensa de Meth. Primero, los resultados demostraron que siete administraciones diarias de 2 mg / kg, pero no 1 mg / kg, Meth aumentaron las latencias para iniciar el apareamiento. Este deterioro fue evidente 30 min después de la última administración de Meth, pero se disipó después de 1 o 7 d de la posterior abstinencia de drogas. La exposición repetida a 1 mg / kg Meth dio lugar a un comportamiento compulsivo de búsqueda de sexo 2 semanas después de la última administración de Meth. Este efecto dependió de que la administración de Meth fuera concurrente con la experiencia sexual y no se observó en animales con experiencia sexual que recibieron Meth solo. Además, la experiencia sexual y meth concurrente mejoró la preferencia de lugar condicionada (CPP) para Meth, y para Meth y apareamiento concurrentes en comparación con Meth o apareamiento solo. Por el contrario, la CPP para el apareamiento solo se redujo. En conjunto, estos datos indican que la asociación entre el uso de drogas y el apareamiento puede ser necesaria para la expresión del comportamiento sexual compulsivo y se correlaciona con una mayor recompensa en busca de exposición y apareamiento simultáneos de Meth.
Introducción
Las enfermedades relacionadas con la salud sexual dentro de las poblaciones de adictos han aumentado la conciencia de los efectos de las drogas de abuso en el comportamiento sexual, ya que el uso crónico de drogas se asocia con prácticas sexuales inseguras que resultan en una mayor prevalencia de infecciones de transmisión sexual, incluido el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) (Crowe y George, 1989; Peugh y Belenko, 2001; Sánchez et al., 2002; Raj et al., 2007; Fisher et al., 2011). Estos efectos de las drogas en el comportamiento sexual están bien documentados para la metanfetamina (metano) psicoestimulante. Los usuarios de metanfetamina a menudo reportan un mayor deseo sexual, excitación y placer e identifican estos factores como la motivación principal para el uso de drogas (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verde y Halkitis, 2006). Además, el abuso de Meth se asocia comúnmente con la pérdida del control inhibitorio del comportamiento sexual o el comportamiento sexualmente compulsivo (Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson y otros, 2002; Verde y Halkitis, 2006) y mayor prevalencia del VIH (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; Parsons y Halkitis, 2002).
Los informes humanos que demuestran el uso de Meth como predictor de comportamientos de riesgo sexual se basan en informes personales de usuarios de Meth crónicos que carecen de una medida confiable de la relación entre el uso de Meth y el comportamiento sexual (Frohmader et al., 2010b). Por lo tanto, se requiere una investigación de los cambios inducidos por Meth en el comportamiento sexual en entornos experimentales controlados utilizando un modelo animal para comprender la compleja asociación entre Meth y el comportamiento sexual.
Recientemente, nuestro laboratorio examinó los efectos de Meth aguda en la búsqueda compulsiva de sexo en ratas macho (Frohmader et al., 2010a). Estos estudios utilizaron un paradigma de aversión sexual condicionada en el que las ratas macho aprendieron a asociar el apareamiento con la enfermedad visceral posterior (Peters, 1983; Agmo, xnumx). Una vez establecida esta asociación entre el apareamiento y el estímulo aversivo, los animales no iniciarían el comportamiento de apareamiento (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). El tratamiento previo de la metanfetamina de una sola inyección semanas antes del acondicionamiento interrumpió la adquisición de respuestas sexuales inhibidas (Frohmader et al., 2010a). Por lo tanto, las ratas macho tratadas previamente con Meth buscaban un comportamiento sexual a pesar de que el apareamiento estaba asociado con un estímulo aversivo; Esto se denominó apareamiento inadaptado o compulsivo.
Como los estudios anteriores que prueban los efectos de una inyección aguda de medicamentos y la investigación que investiga los efectos de Meth repetida en el comportamiento sexual de ratas macho son limitados, el objetivo principal del presente estudio fue investigar los efectos de la administración repetida de Meth en diferentes aspectos del comportamiento sexual, incluidos Actuación, búsqueda compulsiva de sexo, y recompensa. Primero, los efectos de la Meth repetida en el apareamiento se probaron después de la administración de la droga y después de los períodos de abstinencia de la droga para distinguir entre los efectos a corto y largo plazo de la Meth en la función sexual. A continuación, se investigaron los efectos de la administración repetida de Meth en el comportamiento sexual inadaptado, implementando el paradigma de aversión sexual condicionada. Además, se determinó si las asociaciones aprendidas entre la exposición repetida a Meth y el comportamiento sexual eran esenciales para los efectos de Meth en el comportamiento sexual inadaptado. Finalmente, se probó si la exposición repetida a Meth resulta en una recompensa mejorada para Meth y / o apareamiento, según lo determinen los paradigmas de preferencia de lugar condicionado (CPP).
Materiales y Métodos
Materias
Las ratas Sprague Dawley macho adultas (210-225 g) se obtuvieron de Charles River Laboratories y se alojaron en parejas del mismo sexo en jaulas de plexiglás estándar (jaulas caseras) que contienen piezas de tubería de PVC para enriquecimiento ambiental. Los animales se alojaron en una habitación mantenida en un ciclo 12 / 12 h con luz / oscuridad invertida (luces apagadas en 11: 00 AM) con comida y agua disponibles ad libitum. Todas las pruebas se realizaron durante el ciclo de oscuridad con iluminación roja. Las hembras de estímulo (200 – 225 g; Charles River Laboratories) utilizadas para el comportamiento sexual fueron ovariectomizadas bilateralmente y recibieron un implante subcutáneo que contenía 5% de benzoato de estradiol y 95% de colesterol. Para inducir la receptividad sexual, a las mujeres se les administró 0.5 mg de progesterona en 0.1 ml de aceite de sésamo (sc) 4 h antes del comportamiento sexual. Los procedimientos experimentales fueron aprobados por el Comité de Cuidado de Animales de la Universidad de Western Ontario y el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Michigan y estuvieron de acuerdo con las pautas delineadas por el Consejo Canadiense de Cuidado de Animales y los Institutos Nacionales de Salud.
Diseños experimentales
Comportamiento sexual
El experimento actual investigó los efectos de Meth repetido en el rendimiento sexual y la motivación inmediatamente después de la inyección de drogas y después de los períodos de abstinencia de drogas. Treinta y tres ratas macho ganaron experiencia sexual en jaulas de prueba separadas (arenas de apareamiento; 60 × 45 × 50 cm) que contenían camas limpias durante cinco sesiones de apareamiento dos veces por semana. Durante cada sesión de apareamiento, a los machos se les permitió aparearse con una hembra receptiva hasta la visualización de una eyaculación o para 1 h, lo que ocurriera primero. Una semana después de la última sesión de apareamiento, los machos se acostumbraron a procedimientos experimentales y recibieron una inyección subcutánea de 1 ml / kg de solución salina durante tres días consecutivos. Después de cada inyección, los animales se colocaron en cámaras de actividad locomotora de plexiglás (40.5 × 40.5 cm; Med Associates) equipadas con matrices de fotobos 16 × 16; La actividad locomotora se registró para 30 min. Además de registrar el comportamiento ambulatorio después de la inyección del tratamiento, colocar a los machos en las cámaras locomotoras proporcionó un entorno asociado con el fármaco distinto del comportamiento de apareamiento. Luego, los hombres recibieron una inyección diaria de 1 o 2 mg / ml / kg de metanfetamina o vehículo (solución salina, 1 ml / kg; n = 11 cada uno) para 7 días consecutivos. Después de cada inyección, los machos se colocaron en las cámaras de actividad locomotora y la actividad locomotora se registró para 30 min, después de lo cual regresaron a sus jaulas de retención. En el último día de la administración de Meth, los machos se retiraron de la cámara de actividad locomotora después de 30 min y se colocaron en la arena de apareamiento para evaluar los efectos de Meth en el comportamiento sexual. Los animales se analizaron nuevamente para determinar el comportamiento sexual en las arenas de apareamiento después de 1 d o 1 semana de abstinencia de drogas.
Durante las sesiones de apareamiento, se observaron y registraron los parámetros estándar para el comportamiento sexual, incluidas las latencias a montar (el tiempo desde la introducción de la hembra al primer montaje) y la intromisión (el tiempo desde la introducción de la hembra hasta la primera intromisión), que son indicativos de la motivación sexual (Hull et al., 2002), así como la latencia a la eyaculación (tiempo desde la primera intromisión a la eyaculación), el número de monturas e intromisiones antes de la eyaculación, y el intervalo posterior a la eyaculación, que son medidas del rendimiento sexual (Hull et al., 2002; Pfaus, 2009). Las diferencias entre los grupos se determinaron para cada parámetro de la conducta sexual mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis y el análisis de Dunn. post hoc Comparaciones, a niveles significativos de 0.05.
Actividad locomotora
La actividad locomotora después de cada inyección de Meth se analizó utilizando el software de análisis Med Associates como la distancia recorrida en intervalos de 5 minutos. Las diferencias de grupo se examinaron mediante el análisis no paramétrico de Kruskal-Wallis y el análisis de Dunn post hoc comparaciones Para examinar la sensibilización locomotora inducida por Meth, se comparó la actividad inducida por Meth durante el último 10 mínimo de la prueba entre el primer y séptimo día de inyección dentro de cada grupo de tratamiento de dosis de fármaco usando par t pruebas Se aplicó un nivel de significación de 0.05 a todas las comparaciones.
Aversión sexual condicionada
Experimento 1.
Primero, las ratas macho 50 se habituaron a inyecciones de solución salina durante tres días consecutivos y los machos obtuvieron experiencia sexual durante tres sesiones de apareamiento. Antes de cada sesión de apareamiento, los animales se inyectaron con 1 mg / kg Meth o 1 ml / kg de solución salina (sc), se colocaron en arenas de apareamiento y, 30 min más tarde, se dejaron aparearse con una hembra receptiva hasta la eyaculación o 1 h. Los parámetros para el comportamiento sexual se registraron y analizaron (ver Comportamiento sexual, más arriba). Dos semanas después, los animales fueron sometidos a un paradigma de aversión sexual condicionada. Los machos se subdividieron en cuatro grupos experimentales de acuerdo con el tratamiento previo (Meth o solución salina) y el acondicionamiento [cloruro de litio (LiCl) pareado o desapareado]; los grupos fueron sin solución salina (n = 12), Meth-desapareado (n = 12), salino-emparejado (n = 13), y Meth-emparejado (n = 13). El paradigma de aversión condicionada consistió en ocho pruebas de condicionamiento 2 d consecutivas. Durante el primer día, todos los machos fueron colocados en la arena de apareamiento durante un período de habituación mínimo de 10, después de lo cual se introdujo una hembra receptiva. Las hembras se perfumaron frotando aceite de almendra en el cuello y la base de la cola antes de aparearse, ya que se ha demostrado que las señales olfativas facilitan el comportamiento de acercamiento masculino y fortalecen el condicionamiento (Lawrence y Kiefer, 1987; Agmo, xnumx). A los machos se les permitió aparearse durante 30 min o hasta una eyaculación. Si no se produjeron intromisiones en el primer 15 mínimo, se terminó el apareamiento. Un minuto después de la eyaculación o terminación de la prueba, a los hombres se les administró una inyección intraperitoneal de 127.2 mg / kg de 10 ml / kg de LiCl (hombres emparejados) o solución salina (hombres no emparejados). Se administraron LiCl o solución salina independientemente de si se produjo el apareamiento. Al día siguiente, los machos no apareados recibieron una inyección de 10 ml / kg de LiCl, mientras que los machos apareados recibieron solución salina. Los animales fueron devueltos a la jaula de casa después de las inyecciones.
Experimento 2.
Para probar si los efectos del tratamiento previo con Meth en la aversión sexual condicionada dependían de la exposición simultánea a Meth y el apareamiento o solo debido a Meth, se realizó un experimento adicional. Ratas machon = 20) recibió experiencia sexual durante cinco sesiones de apareamiento pero sin tratamientos con Meth o solución salina (n = 10 cada uno). En cambio, 1 semana después de la experiencia sexual, recibieron siete inyecciones una vez al día de Meth (1 mg / kg, sc) o solución salina y 2 semanas más tarde se sometieron al paradigma de aversión sexual condicionada (consulte el Experimento 1, más arriba).
Para ambos experimentos y durante cada prueba de acondicionamiento, se analizaron los parámetros para el comportamiento sexual y se determinaron las diferencias de grupo para cada prueba de acondicionamiento utilizando un ANOVA de dos vías (factores: tratamiento previo con solución salina / metano, acondicionamiento). Pearson χ2 El análisis se usó para comparar las diferencias entre los grupos en los porcentajes de varones que mostraron monturas, intromisiones o eyaculación dentro de cada rastro de acondicionamiento.
Preferencia de lugar condicionado
Para probar si el pretratamiento con Meth afectaba la recompensa por Meth o el comportamiento sexual, se llevaron a cabo experimentos de CPP. Para todos los experimentos de CPP se utilizó un aparato de tres compartimentos (Med Associates) que contiene dos cámaras exteriores más grandes (28 × 22 × 21 cm) con señales visuales y táctiles distinguibles y separadas por un pequeño compartimento central (13 × 12 × 21 cm). . Las puertas a ambos lados del compartimento central separaban las cámaras y podían elevarse para permitir el libre movimiento de los animales por todo el aparato, o bajarse para confinarlos a un área en particular. El aparato estaba equipado con rayos fotoeléctricos para medir el tiempo de permanencia en cada cámara. El primer día, se realizó una prueba previa de 15 minutos para determinar la preferencia de cámara inicial de cada animal, por lo que se permitió que cada animal deambulara libremente entre las cámaras del aparato CPP. No se detectaron preferencias significativas para ninguna de las cámaras entre los grupos experimentales. Los animales fueron excluidos del estudio si mostraban una preferencia extendida por una cámara específica (una diferencia de más de 120 s; mostrada por <10% de los sujetos). El acondicionamiento se realizó durante los días 2 y 3. Durante el acondicionamiento, la cámara inicialmente no preferida (cámara pareada) se emparejó con una manipulación de recompensa durante 30 min. La cámara inicialmente preferida (cámara no emparejada) se emparejó con una manipulación de control. El orden en el que los animales fueron expuestos a las cámaras apareadas y no apareadas se compensó dentro de cada grupo experimental. En el cuarto y último día se llevó a cabo una prueba posterior que fue idéntica desde el punto de vista del procedimiento a la prueba previa.
Experimento 1.
Primero, las ratas macho 50 se habituaron a inyecciones de solución salina durante tres días consecutivos y los machos obtuvieron experiencia sexual durante tres sesiones de apareamiento. Durante cada sesión de apareamiento, los animales se inyectaron con 1 mg / kg Meth o 1 ml / kg de solución salina (sc), se colocaron en jaulas de prueba y, 30 min más tarde, se dejaron aparear con una hembra receptiva hasta la eyaculación o 1 h. Los parámetros para el comportamiento sexual se registraron y analizaron (para una descripción, ver Comportamiento sexual, arriba). Una semana más tarde, los animales se distribuyeron en cuatro grupos experimentales combinados para el tratamiento con medicamentos y el rendimiento sexual para las pruebas de CPP. Durante el acondicionamiento, a los hombres se les inyectó Meth o solución salina (que coincidía con el tratamiento farmacológico anterior) y luego se dejó que 30 min se apareara hasta la eyaculación. Un minuto después de la eyaculación, el animal se colocó en la cámara emparejada. La cámara no emparejada se asoció con una inyección (Meth o solución salina) o apareamiento sin una inyección. Después de la prueba posterior, una puntuación de preferencia (el porcentaje de tiempo pasado en la cámara pareada durante la prueba preliminar y la prueba posterior; calculado como el tiempo pasado en la cámara pareada dividido por el tiempo en la cámara emparejada + no pareada × 100) y la puntuación CPP (Experimento 1; diferencia en el tiempo pasado en la cámara pareada durante la prueba posterior (menos la prueba previa) se calculó para cada sujeto. Las puntuaciones de preferencia se compararon dentro de los grupos experimentales utilizando pares t Las pruebas y las puntuaciones de CPP se compararon entre grupos experimentales utilizando un ANOVA de una vía y la prueba de diferencia mínima significativa de Fisher para post hoc Comparaciones, todas con niveles de confianza 95%.
Experimento 2.
Para probar si los efectos del tratamiento previo de Meth en CPP para Meth o apareamiento dependían de la exposición simultánea a Meth y el apareamiento o debido a Meth solo, se realizó un experimento adicional. Las ratas macho recibieron Meth (1 mg / kg) y se aparearon simultáneamente durante 4 días consecutivos (n = 10). Dos grupos de control permanecieron sexualmente ingenuos y recibieron Meth o solución salina (n = 10 cada uno). Una semana más tarde, se realizó CPP para Meth. Todos los varones recibieron una inyección de Meth en la cámara pareada y una inyección de solución salina se asoció con la cámara no pareada. Las puntuaciones de preferencia se calcularon y compararon dentro de grupos experimentales utilizando pares t Pruebas con nivel de significancia de 0.05.
Experimento 3.
Para probar si la exposición simultánea a Meth y el apareamiento son críticos para la recompensa sexual alterada, se realizó un estudio de CPP de apareamiento. Las ratas macho recibieron Meth (1 mg / kg) o solución salina simultáneamente con el apareamiento durante cuatro días consecutivos (n = 10 cada uno). Una semana después, se probó el CPP para el comportamiento sexual. Todos los machos se colocaron en la cámara pareada después del apareamiento y ningún emparejamiento se asoció con la cámara no pareada. Las puntuaciones de preferencia se calcularon y compararon dentro de grupos experimentales utilizando pares t Pruebas con nivel de significancia de 0.05.
Aversión condicionada al lugar.
Para probar si la exposición a Meth altera la sensibilidad a la enfermedad inducida por LiCl, se realizó un experimento de aversión a un lugar condicionado (CPA). La prueba de CPA se realizó durante la primera mitad del período de oscuridad utilizando el mismo aparato que el utilizado para los experimentos de CPP (ver preferencia de lugar condicionado, más arriba). Durante tres días consecutivos, las ratas macho ganaron experiencia sexual al mismo tiempo que Meth (1 mg / kg) o solución salina (n = 10 cada uno). Una semana más tarde, todos los machos recibieron una inyección de LiCl (10 ml / kg, ip) emparejado con la cámara inicialmente preferida, mientras que una dosis equivalente de solución salina se asoció con la cámara inicialmente no preferida. Después de la prueba posterior, la puntuación media de preferencia (el porcentaje de tiempo pasado en la cámara pareada durante la prueba preliminar y la prueba posterior; calculado como el tiempo pasado en la cámara pareada dividido por el tiempo en la cámara pareada + no pareada × 100) y el puntaje CPA (diferencia en el tiempo pasado en la cámara emparejada durante la prueba posterior menos la prueba previa se calcularon para cada sujeto. Las puntuaciones de preferencia se compararon dentro de los grupos experimentales utilizando pares t pruebas, mientras que las puntuaciones de CPA se compararon entre los grupos experimentales utilizando par no pareado t Pruebas, todas con nivel de significancia de 0.05.
Resultados
Comportamiento sexual
La meth afectó significativamente el inicio de la conducta sexual cuando se probó el apareamiento 30 min después de la última inyección del fármaco. Este efecto fue dependiente de la dosis a 2 mg / kg, pero no a 1 mg / kg, Meth. Meth aumentó significativamente las latencias de montaje e intromisión (p = 0.001 y 0.002, respectivamente) en comparación con los controles de solución salina ( A). Meth no afectó los porcentajes de hombres que iniciaron el comportamiento y 100% de hombres se aparearon en los tres grupos de tratamiento. Meth no tuvo efectos a largo plazo en el inicio del comportamiento sexual, ya que los machos tratados previamente con Meth no mostraron un comportamiento de apareamiento alterado en comparación con los controles pretratados con solución salina cuando se probó el apareamiento durante los días de abstinencia de fármacos 1 y 7 ( B,C). Finalmente, Meth no afectó el rendimiento sexual en ningún momento ya que no hubo efectos en las latencias a la eyaculación ( ) o números de montajes e intromisiones (datos no mostrados). Por lo tanto, el inicio repetido de la alteración de la Meth cuando se probó poco después de la administración, pero no tuvo efectos a largo plazo en la motivación o el rendimiento sexual.
Efectos de la metanfetamina repetida en el rendimiento sexual. C.A, Latencias para montar (ML), intromisión (IL) y eyaculación (EL) después de la administración de 0, 1 o 2 mg / kg Meth 30 min después de la séptima y última inyección de fármaco (A) y los días de abstinencia de drogas 1 (B) y 7 (C). Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencias significativas con respecto a los machos inyectados con solución salina (p <0.05).
Actividad locomotora
La metanfetamina a dosis de 1 o 2 mg / kg aumentó la actividad locomotora en comparación con los controles (p <0.001, 1 y 2 mg / kg; A,B). La administración repetida de Meth dio lugar a una respuesta locomotora sensibilizada: a los hombres a los que se les administró 1 mg / kg Meth mostraron una actividad locomotora significativamente mayor después de la última inyección del fármaco en comparación con la primera inyección (p = 0.042; C). En contraste, 2 mg / kg Meth resultó en una disminución significativa de la actividad locomotora en el último día en comparación con el primer día (p = 0.009; C), que puede ser indicativo de aumentos en los comportamientos estereotipados.
Efectos de la Meth repetida en la actividad locomotora. A, B, Distancia recorrida por los machos a los que se administró 0, 1 o 2 mg / kg Meth después del primero (A) y última (B) Inyección de metanfetamina. Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencias significativas del control para todos los grupos de tratamiento (p <0.05); #diferencias significativas entre 1 mg / kg Meth y control solo (p <0.05). C, Respuesta locomotora sensibilizada inducida por meth. Distancia recorrida por los machos a los que se administró 0, 1 o 2 mg / kg Meth después de la primera y última inyección de Meth durante el último 10 min de registros de actividad locomotora. Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencia significativa con respecto a los hombres sexualmente ingenuos del mismo grupo de tratamiento (p <0.05).
Aversión sexual condicionada
Comportamiento sexual
Durante la fase de tratamiento previo con Meth del Experimento 1, el comportamiento sexual no se vio afectado por el tratamiento con Meth 1 mg / kg durante cada una de las tres sesiones posteriores en comparación con los hombres tratados con solución salina (Tabla 1). Estos resultados confirman la falta de efectos de esta dosis de Meth en el comportamiento sexual, incluso cuando se administra en el mismo entorno. Además, el tratamiento previo de Meth no alteró el comportamiento sexual durante el primer día del paradigma de condicionamiento (antes del emparejamiento de LiCl; Tabla 1) o durante cualquiera de los ensayos de condicionamiento en los grupos sin par de LiCl. Estos resultados confirman que Meth no tuvo efectos a largo plazo en el comportamiento sexual.
Resumen de la conducta sexual
Comportamiento sexual compulsivo
Experimento 1.
En contraste, el tratamiento repetido con Meth mejoró la búsqueda compulsiva de sexo. En control, los animales pretratados con solución salina y la aversión sexual condicionada inhibieron significativamente el comportamiento sexual. Específicamente, los porcentajes reducidos de machos emparejados con LiCl que se montaron y se intromitieron en comparación con los machos sin tratar con solución salina no apareada fueron evidentes por primera vez en la sexta (p = 0.039) prueba de condicionamiento y persistió a través de la prueba de condicionamiento 7 (p = 0.005; datos no mostrados) y 8 (p <0.001; B). Una diferencia significativa en el porcentaje de varones que eyaculó fue evidente por primera vez en el cuarto (p = 0.041) prueba de condicionamiento y persistió durante todo el condicionamiento (p <0.001; C). Sin embargo, el tratamiento previo con Meth afectó la aversión sexual condicionada, ya que los hombres tratados previamente con Meth emparejados con LiCl no alcanzaron una inhibición significativa de la conducta sexual hasta el último ensayo de acondicionamiento en comparación con los hombres no tratados con Meth. Específicamente, los porcentajes de machos emparejados con LiCl tratados con Meth que mostraron intromisiones y eyaculación disminuyeron significativamente solo durante el ensayo de acondicionamiento 8 (p = 0.03 y p = 0.011, respectivamente). Por lo tanto, el tratamiento previo de Meth 2 semanas antes del inicio del condicionamiento dio lugar a un comportamiento de búsqueda de sexo inadaptado o compulsivo.
Efectos del apareamiento concurrente (sexo) y el tratamiento previo de Meth en la aversión sexual condicionada (Experimento 1). ALos grupos experimentales incluyeron machos con solución salina (Sal) o tratados previamente con Meth que recibieron LiCl después del apareamiento (machos emparejados) y los machos tratados con solución salina o Meth que recibieron solución salina después del apareamiento (machos no apareados). Durante el segundo día de cada prueba de acondicionamiento, los machos emparejados recibieron solución salina y los machos no emparejados recibieron LiCl. B, C, Porcentaje de machos que montan (B) y eyacular (C) durante la aversión sexual condicionada después del tratamiento previo con Meth administrado simultáneamente con la experiencia sexual. * Diferencia significativa de los varones no pareados tratados con solución salina (p <0.05); #diferencia significativa de los machos no pareados tratados previamente con Meth (p <0.05).
Experimento 2.
Los efectos del tratamiento previo de Meth en la aversión sexual condicionada dependían de la experiencia simultánea de Meth y de apareamiento. Específicamente, la aversión sexual condicionada no se vio afectada en hombres con experiencia sexual que recibieron tratamiento previo con Meth y experiencia de apareamiento en diferentes momentos (no concurrentes). Los porcentajes de hombres emparejados con LiCl pretratados con metanfetamina que mostraron monturas y eyaculaciones no fueron diferentes de los hombres emparejados pretratados con solución salina ( ). Estos datos sugieren que la asociación inicial entre Meth y la experiencia sexual fue un factor que contribuyó a los efectos de Meth en el comportamiento sexual compulsivo.
Efectos del apareamiento no concurrente (sexo) y del tratamiento previo de la metanfetamina en la aversión sexual condicionada (Experimento 2). Porcentaje de machos que montan (A) y eyacular (B) durante la aversión sexual condicionada por LiCl después del tratamiento previo de Meth no asociado con la experiencia sexual. Se incluyeron dos grupos: tratamiento previo con LiCl emparejado con solución salina y tratamiento previo con emparejamiento de LiCl con Meth.
Aversión condicionada al lugar.
Experimentos de control adicionales revelaron que la incapacidad de inhibir el apareamiento después del tratamiento previo con Meth no se debe a una sensibilidad contundente a la enfermedad visceral inducida por LiCl, ya que todos los hombres formaron una aversión a la cámara asociada con una dosis única de LiCl. Específicamente, los machos tratados previamente con solución salina y Meth pasaron significativamente menos tiempo en la cámara emparejada con LiCl durante la prueba posterior en comparación con la prueba previa (p = 0.037 y 0.045, respectivamente; A). Además, la diferencia del tiempo pasado en la cámara emparejada con LiCl después de la prueba posterior a la previa a la prueba fue idéntica en los grupos tratados previamente con Meth y solución salina ( B).
Efectos del apareamiento concurrente (sexo) y el tratamiento previo de Meth en el CPA inducido por LiCl. A, B, Puntuación de preferencia (tiempo empleado en una cámara emparejada dividida por el tiempo en una cámara emparejada + no emparejada × 100; A) y el puntaje de CPA (diferencia en el tiempo pasado en la cámara pareada durante el postest prueba menos la prueba previa); B) en machos apareados pretratados con solución salina (Sal; sexo + solución salina) o Meth (sexo + Meth). Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencias significativas de la prueba previa dentro del mismo grupo experimental (p <0.05).
Preferencia de lugar condicionado
Experiment 1
Los estudios de autoinforme revelan que el uso de Meth aumenta el placer sexual y es una motivación principal para el uso de drogas (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verde y Halkitis, 2006). Esta mejora del placer sexual inducida por Meth no se ha probado en el modelo de roedor. Por lo tanto, el paradigma de CPP se usó para probar si el comportamiento sexual con Meth es más gratificante que el apareamiento o la administración de Meth solo. De acuerdo con estudios previos (Agmo y Berenfeld, 1990; Pfaus y Phillips, 1991; Tenk et al., 2009), el apareamiento en machos de control pretratados con solución salina dio lugar a CPP: los machos pasaron más tiempo en la cámara de sexo + par de solución salina que la cámara de solución salina emparejada durante la prueba posterior (p = 0.001; C,D). Además, los machos de control no formaron una preferencia por la cámara emparejada sexo + solución salina sobre la cámara emparejada sexo, lo que demuestra que una inyección de solución salina antes del apareamiento no afectó la recompensa sexual ( C,D). Los resultados mostraron que Meth aumentó el CPP por sexo en comparación con el apareamiento o con Meth solo. Los machos pasaron más tiempo durante la prueba posterior en la cámara de sexo + combinación meth que la cámara emparejada por sexo (p <0.001; C) o la cámara emparejada en metanfetamina (p = 0.02; C), o en comparación con el grupo control (p = 0.002 y 0.05, respectivamente; D). Por lo tanto, el comportamiento sexual concurrente con Meth parece ser más gratificante que el comportamiento sexual o Meth solo en animales que fueron tratados previamente con comportamiento sexual y Meth al mismo tiempo.
Efectos del apareamiento concurrente (sexo) y el tratamiento previo de Meth en el CPP inducido por apareamiento y Meth (Experimento 1). Se incluyeron cuatro grupos. A, Dos grupos recibieron pretratamiento de sexo + solución salina (Sal) y el siguiente tratamiento en la cámara apareada / no apareada: sexo + solución salina / sexo, sexo + solución salina / solución salina. El primer grupo sirvió como control negativo, ya que no se esperaba que la solución salina alterara el CPP por sexo. El segundo grupo sirvió como control positivo, ya que se esperaba que el sexo causara CPP. B, Los otros dos grupos recibieron pretratamiento con sexo + metanfetamina y lo siguiente en las cámaras pareadas / no apareadas: sexo + metanfetamina / sexo o sexo + metanfetamina / metanfetamina. El orden en que se expusieron los animales a las cámaras emparejadas y no apareadas se compensó dentro de cada grupo experimental. C, Puntuación de preferencia (tiempo empleado en una cámara emparejada dividida por el tiempo en una cámara emparejada + no emparejada × 100). Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencias significativas de la prueba previa dentro del mismo grupo experimental (p <0.05). D, Puntuación de CPP (diferencia en el tiempo pasado en la cámara pareada durante la prueba posterior menos la prueba previa). Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencias significativas del sexo + salina / grupo sexual (p <0.05).
Experiment 2
A continuación, se determinó si el tratamiento previo concomitante de Meth y el sexo influyeron en la CPP para Meth solo en comparación con el tratamiento con solución salina en la cámara no pareada. De hecho, los machos tratados previamente con Meth que se aparearon simultáneamente con cada inyección de fármaco formaron una preferencia por la cámara emparejada con Meth (p = 0.01; ). En contraste, los machos que recibieron repetidas inyecciones de solución salina o Meth sin el contexto de apareamiento no mostraron una mayor preferencia por la cámara emparejada con Meth durante la prueba posterior.
Efectos del apareamiento concurrente (sexo) y el tratamiento previo de Meth en la CPP inducida por Meth (Experimento 2). Puntuación de preferencia (tiempo gastado en una cámara emparejada dividida por el tiempo en una cámara emparejada + no emparejada × 100) en varones tratados previamente con solución salina (Sal), metanfetamina o sexo + metanfetamina. Los datos se presentan como media ± SEM. * Diferencia significativa de la prueba previa dentro del mismo grupo experimental (p <0.05).
Experiment 3
Finalmente, se probó si el tratamiento previo con Meth y el apareamiento afectaron a la CPP solo para el apareamiento. Los machos tratados previamente con Meth y el apareamiento no formaron una preferencia por el comportamiento sexual, como lo demuestra la falta de mayor tiempo dedicado a la cámara de parejas sexuales. En contraste, los machos que fueron tratados con solución salina y apareamiento formaron una preferencia por la cámara emparejada por sexo (p = 0.003; ). Juntos, estos datos sugieren que la asociación entre Meth y el apareamiento da como resultado un aumento de la prominencia de incentivo para Meth en ausencia de apareamiento y para el apareamiento concurrente con Meth, pero reduce la prominencia de incentivo para el apareamiento en ausencia de la droga.
Efectos del apareamiento concurrente (sexo) y el tratamiento previo de Meth en el CPP inducido por el apareamiento (Experimento 3). Puntuación de preferencia (tiempo dedicado a la cámara emparejada dividida por el tiempo en la cámara emparejada + no emparejada × 100) en varones pretratados con sexo + solución salina (Sal) o sexo + metanfetamina. Los datos se presentan como media ± SEM.
Discusión
El estudio actual probó los efectos de Meth repetida en el comportamiento sexual con un enfoque específico en el rendimiento sexual, la búsqueda de sexo inadaptada o compulsiva, y el emparejamiento y / o la recompensa de Meth. TEl principal hallazgo de este estudio fue que el tratamiento previo con Meth no afectó la expresión del comportamiento sexual, sino que causó un comportamiento sexual compulsivo en las semanas posteriores al tratamiento previo. Este efecto sobre el comportamiento sexual compulsivo dependía de la experiencia concurrente con Meth y el apareamiento. Además, los tratamientos previos de metanfetamina y apareamiento aumentaron la recompensa de Meth, pero redujeron la recompensa sexual. Juntos, estos estudios muestran que una asociación entre Meth y el apareamiento es fundamental para el desarrollo o la expresión de conductas sexuales compulsivas y los cambios en la recompensa sexual y de drogas.
El tratamiento previo de la metanfetamina, cuando coincidía con el apareamiento, tuvo efectos a largo plazo en la capacidad del paradigma de aversión sexual condicionada para inhibir el comportamiento sexual. Este efecto no puede explicarse fácilmente por un déficit en el aprendizaje o la memoria, ya que los varones pretratados con Meth no mostraron ninguna evidencia de aprendizaje deficiente durante los paradigmas de aversión sexual inducidos por CPP o LiCl. Además, es poco probable que la administración repetida de la dosis baja de Meth causara los trastornos cognitivos y la neurotoxicidad observada típicamente después de la exposición crónica a dosis altas de Meth en ratas (Walsh y Wagner, 1992; Friedman et al., 1998; Chapman et al., 2001; Schröder et al., 2003) y los humanos (Ornstein et al., 2000; Simon et al., 2002; Kalechstein et al., 2003), como paradigmas de atracón de Meth de un solo día que utilizan la misma dosis que el estudio actual, no afectaron el aprendizaje de reconocimiento de objetos y no dieron lugar a neurotoxicidad (Marshall et al., 2007). Otra explicación alternativa para la adquisición o expresión alterada de la aversión sexual condicionada es una pérdida de sensibilidad para LiCl. Sin embargo, los animales eran igualmente capaces de adquirir una aversión condicionada a una cámara previamente emparejada con LiCl. Por lo tanto, los machos tratados previamente con Meth no tenían memoria asociativa deteriorada o sensibilidad reducida a LiCl o enfermedad inducida por LiCl. Parece que el tratamiento previo de Meth causó una búsqueda de sexo inadaptada o compulsiva, a pesar de las consecuencias negativas aprendidas, lo que está en línea con los informes humanos (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson y otros, 2002; Somlai et al., 2003; Verde y Halkitis, 2006; Springer y otros, 2007).
Además, el efecto del tratamiento previo con Meth y el apareamiento en la inhibición reducida de la conducta sexual inadaptada no se explica fácilmente por una recompensa mayor asociada con el apareamiento. En contraste, en los animales que recibieron Meth y experiencia de apareamiento concurrentes, se redujo la búsqueda de recompensa asociada con el apareamiento. Por lo tanto, se debe proponer otra explicación para los efectos del tratamiento simultáneo de Meth y el apareamiento en la expresión de la conducta sexual inadaptada. Un estudio neuroanatómico reciente de nuestro laboratorio identificó áreas del cerebro donde Meth puede mediar los efectos sobre el comportamiento sexual (Frohmader et al., 2010c). Aquí, la activación neural inducida por el apareamiento o Meth se examinó utilizando marcadores de actividad neural como Fos o fosforilación de MAPK, respectivamente. Meth y apareamiento de neuronas coactivadas en el núcleo accumbens, amígdala basolateral y el área cingulada anterior de la corteza prefrontal medial (Frohmader et al., 2010c) y en la corteza orbitofrontal (Frohmader y Coolen, 2010). Las cortezas prefrontales y orbitofrontales son de particular interés ya que contribuyen a comportamientos adictivos (Kalivas y Volkow, 2005; Kalivas et al., 2005; Lasseter et al., 2010; Winstanley et al., 2010). Además, la hipoactividad de estas áreas del cerebro se ha correlacionado con varias afecciones psiquiátricas asociadas con la pérdida del control inhibitorio (Graybiel y Rauch, 2000; Taylor et al., 2002; London et al., 2005). Estas líneas de evidencia sugieren que Meth puede actuar en estas cortezas frontales para causar alteraciones a largo plazo que a su vez median el comportamiento sexual compulsivo. De acuerdo con esto, se ha demostrado que la alta incidencia de comportamiento sexual compulsivo se superpone con otros trastornos psiquiátricos, como la adicción a las drogas, la ansiedad y los trastornos del estado de ánimo (Bancroft, 2008). Además, se presume que la disfunción inducida por fármacos de las cortezas prefrontal medial y orbitofrontal es responsable de la reducción del control de los impulsos (Cervecero y Potenza, 2008; Fineberg et al., 2010) y mayor comportamiento dirigido al sexo observado en muchos adictos (Jentsch y Taylor, 1999; Bancroft, 2008). yoDe acuerdo con esto, las lesiones de la corteza prefrontal medial en ratas macho dieron como resultado un comportamiento compulsivo de búsqueda de sexo en el paradigma de aversión sexual condicionada utilizado en los estudios actuales (Davis et al., 2010).
Investigaciones anteriores han demostrado que la administración repetida a psicoestimulantes u opiáceos mejora la recompensa inducida por el fármaco según lo medido por CPP (Lett, 1989; Shippenberg y Heidbreder, 1995; Shippenberg et al., 1996). Además, la experiencia sexual causó sensibilización subsiguiente de drecompensa de la anfetaminaLanzadores et al., 2010). En el estudio actual, los efectos de Meth y / o la experiencia sexual en Meth CPP se probaron en condiciones en las que no se esperaba que produjeran CPP del fármaco: dosis baja de Meth, un ensayo de condicionamiento único y pruebas durante la fase oscura del día en los momentos de menor CPP (Webb et al., 2009a,b). Los regímenes de sensibilización de Meth repetidos o de la experiencia sexual utilizados en el estudio actual no causaron un aumento de la CPP de Meth. Sin embargo, el tratamiento previo de Meth concurrente con el apareamiento mejoró la recompensa de Meth, lo que indica que esta asociación entre Meth y el apareamiento causó una mejora en la búsqueda de recompensas para Meth. Estos resultados aparecen de acuerdo con los informes humanos de un aumento de Meth que busca el placer sexual indentificador durante la toma de Meth como un impulso principal para el uso de drogas (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Verde y Halkitis, 2006). Actualmente no está claro qué componentes del comportamiento sexual son críticos para la asociación entre Meth y el apareamiento. En el presente estudio, todos los machos se aparearon con la eyaculación. Sin embargo, nuestros hallazgos anteriores sugieren que las interacciones sociales pueden ser suficientes para inducir conductas de búsqueda de sexo inadaptadas (Frohmader et al., 2010a).
Los sustratos neuronales que pueden mediar en los efectos de mejora de Meth y el tratamiento previo de apareamiento en la recompensa de Meth incluyen el núcleo accumbens y la amígdala basolateral. Los cambios duraderos en la densidad de la columna dendrítica y la morfología en los accumbens resultan de la administración repetida de medicamentos (Marrón y Kolb, 2001; Robinson et al., 2002; Li et al., 2003; Robinson y Kolb, 2004) o experiencia sexual (Meisel y Mullins, 2006; Lanzadores et al., 2010), y se hipotetizan para mediar el locomotor inducido por fármacos y recompensar la sensibilización (Pierce y Kalivas, 1997; Vanderschuren y Kalivas, 2000; Li et al., 2004). La amígdala basolateral es crítica para la memoria de estímulos condicionados asociados con estímulos de drogas (Gracia y Rosenkranz, 2002; Laviolette y Grace, 2006) e involucrado en la sensibilización y refuerzo de la recompensa (Everitt et al., 1999; Cardinal et al., 2002; Ver, 2002). Las lesiones o inactivaciones de la amígdala basolateral bloquean la adquisición (Whitelaw et al., 1996) y la expresión (Grimm y See, 2000) de reincorporación a la cocaína condicionada. Además, las lesiones de la amígdala basolateral dan como resultado una respuesta reducida para los estímulos condicionados combinados con alimentos (Everitt et al., 1989) o refuerzo sexual (Everitt et al., 1989; Everitt, 1990) en ratas. Por lo tanto, es posible que los cambios inducidos por el psicoestimulante y el acoplamiento en la amígdala basolateral resulten en una prominencia prominente de la recompensa de Meth.
Se ha demostrado que los regimientos sensibilizadores de drogas facilitan el comportamiento sexual. Sensibilizando los pretratamientos de d-anfetamina (las inyecciones diarias de 10 de 1.5 mg / kg) facilitan el comportamiento sexual (Fiorino y Phillips, 1999a,b) así como el comportamiento de aproximación a estímulos sexuales (Nocjar y Panksepp, 2002). Los estudios en ratas hembra tratadas previamente con Meth (tres inyecciones diarias de 5 mg / kg) dieron como resultado un aumento de los comportamientos receptivos (Holder et al., 2010). En contraste, el estudio actual no mostró los efectos de un regimiento sensibilizador del tratamiento con Meth en el comportamiento sexual. Las posibles explicaciones de esta discrepancia incluyen la menor dosis de fármaco utilizada en el estudio actual, las diferentes evaluaciones de la motivación sexual y las diferencias de sexo (Becker y Hu, 2008).
Los estudios sobre modelos de roedores de la adicción a la metanfetamina se han centrado recientemente en los paradigmas de atracones de drogas para investigar las alteraciones del comportamiento inducidas por la metanfetamina (Belcher et al., 2008; Izquierdo et al., 2010; O'Dell et al., 2011), cambios neuroplásticos (Brennan et al., 2010), y neurotoxicidad (Moszczynska et al., 1998; Kuczenski et al., 2007; Graham et al., 2008). El objetivo principal de estos estudios fue lograr niveles de fármacos en plasma en ratas cercanas a los encontrados en adictos a Meth humanos. En contraste, el estudio actual demostró que una vez que la administración pasiva diaria de Meth en dosis bajas fue suficiente para causar un comportamiento sexual compulsivo de larga duración. Un paradigma de atracones de Meth no se usó por razones prácticas: las dosis altas de Meth afectan el comportamiento sexual (Frohmader et al., 2010a) y los usuarios humanos a menudo usan drogas para mejorar el rendimiento sexual para mantener la función sexual (Semple et al., 2009). El enfoque de los conjuntos de estudios actuales fue investigar la recompensa sexual y el apareamiento compulsivo en animales con un comportamiento de apareamiento intacto. Los resultados demuestran que el comportamiento sexual compulsivo y la alteración de la droga y la recompensa sexual pueden deberse a una exposición muy baja a la droga una vez que concuerda con la experiencia sexual y no dependen de la inducción de niveles de Meth en el cerebro.
Juntos, el conjunto actual de estudios constituye un paso importante hacia una mejor comprensión de los efectos de Meth en el comportamiento sexual compulsivo y las asociaciones entre la droga y la recompensa sexual. Además, estos datos son paralelos a los reportados en adictos humanos; por lo tanto, el modelo de rata macho puede usarse más para examinar los mecanismos moleculares y estructurales de los efectos de Meth en el comportamiento sexual y potencialmente contribuir a futuras terapias de adicción a las drogas.
Notas a pie de página
- Recibido Agosto 4, 2011.
- Revisión recibida Septiembre 8, 2011.
- Aceptados Septiembre 23, 2011.
Este trabajo fue apoyado por los Institutos Canadienses de Salud. Beca de Investigación RN 014705 a LMC
Los autores declaran no tener intereses financieros en competencia.
- La correspondencia debe ser dirigida a Lique M. Coolen, Universidad de Michigan, Departamento de Fisiología Molecular e Integrativa, Ciencias Médicas II, Sala 7732B, 1137 E. Catherine Street, Ann Arbor, MI 48109-5663. [email protected]
- Copyright © 2011 los autores 0270-6474 / 11 / 3116473-10 $ 15.00 / 0
Referencias
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