allikas
Wagoneri alkoholismi keskus ja Sõltuvus Teadusuuringud, Neuroteaduse Instituut, Texase Ülikool, Austin, Austin, TX, 78712, USA. [meiliga kaitstud].
Abstraktne
Abstract:
Taust:
Alkoholi tarbimise häirete tunnusmärgiks on võimetus vähendada või reguleerida alkoholi tarbimist. Uuringud, mis käsitlevad uudsete käitumis- ja geneetiliste mudelite kasutamist kogemustest tingitud muutuste tegemisel joomises, aitavad veelgi kaasa meie teadmistele alkoholi tarvitamise häirete kohta. Kaks F1-i hübriidsete hiirte tüvede võrdlemisel olid eelnevalt täheldatud alkoholi eneserääkimise käitumist. C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) Alkoholi eelistamine pärast alkoholi kõrge kontsentratsiooni ja rasestumise perioodide vähenemist on vähenenud samas C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) näitab püsivat alkoholi eelistust. Need fenotüübid on huvitavad, sest need hübriidid demonstreerivad geneetilise aditiivsuse (BxN) ja ülemäärasuse (BxF) esinemist etanooli tarbimises kogemusest sõltuval viisil.
Täpsemalt, BxF-il on pikaajaline alkoholi eelistamine ja BxN-il on madalat alkoholi eelistust pärast kõrge etanoolikontsentratsiooniga kogemusi; vähese etanoolikontsentratsiooniga kogemused annavad mõlemale hübriidile püsiva alkoholi eelistuse.
Käesolevas uuringus testisime hüpoteesi, et need fenotüübid on esindatud indutseeritava transkriptsioonifaktori, ΔFosB, diferentsiaalse toodanguga tasu, vastumeelsuse ja stressiga seotud aju piirkondades.
TULEMUSED:
Muutused neuronaalses plastiilsuses (mõõdetuna ΔFosB tasemete järgi) olid kogemustest sõltuvad, samuti aju piirkond ja genotüübi spetsiifilised, täiendavalt toetades, et neuronaalsed ahelad põhinevad etanooli tarbimise motivatsioonil..
BxN-hiirtel, kellel oli vähenenud alkoholi eelistused, oli Edinger-Westphali tuumas madalam AFosB tase kui hiirtel, kellel oli püsiv alkoholieelis, ja suurenenud AFosB tasemed keskse mediaalse amygdala puhul võrreldes kontrollhiirtega.
BxN hiirtel, kellel oli pikaajaline alkoholi eelistamine, ilmnesid suuremad AFosB tasemed ventral tegmentaalses piirkonnas, Edinger-Westphali tuum ja amygdala (kesk- ja külgmised vaheseinad).
Lisaks sellele BxN hiired ΔFosB tasemed Edinger-Westphali tuumas ja ventral tegmentaalsetes piirkondades korreleeruvad oluliselt positiivselt etanooli eelistustega. Lisaks näitas hierarhiline klastrite analüüs, et paljud etanoolist mittesaanud hiired, kelle üldine AFosB tase on üldine, on klastris, samas kui paljud hiired, kellel on pikaajaline alkoholi eelistamine üldiste kõrge AFosB tasemetega, on klastris koos.
KOKKUVÕTE:
Võrreldes ja kontrastides kahte alkoholi fenotüüpi, näitab see uuring, et tasu ja stressiga seotud ahelad (sh Edinger-Westphali tuum, ventral tegmental, amygdala) läbivad märkimisväärse plastilisuse, mis väljendub alkoholi eelistuste vähendamises.
Taust
Alkoholi kuritarvitamise ja alkoholismiga seostatakse teadaolevaid vastuvõtlikkuse tegureid, keskkonna- ja geneetilisi. Võime juua rohkesti alkoholi vähe mõjutavaid alkoholi on paljude alkohoolikute esmane sümptom, mis näitab, et alkoholile reageerimise madal tase on alkoholismi arengu peamine haavatavustegur [1,2]. Alkoholi mõõdukust mõjutavate neurobioloogiliste tegurite määratlemine aitab meil mõista alkoholi tarvitamist ja kuritarvitamist ning on tõhus strateegia täiustatud ravimeetodite väljatöötamiseks alkoholi tarvitamisega seotud häirete korral. Näriliste mudelite kasutamine inimeste haiguste jäljendamiseks on olnud võimas vahend selle haiguse mõistmise edendamisel ja ravi parandamisel. Alkoholi kuritarvitamise ja alkoholismi aspektide uurimiseks on kasutusel mitu näriliste mudelit, kuid ükski alkoholism ei kujuta endast täielikku mudelit. See, mil määral hiir suukaudselt manustab etanoolilahuseid sarnastes keskkonnatingimustes, sõltub suuresti selle geneetilisest taustast [3].
Hiljuti leidsime, et C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) ja FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 hübriidhiired annavad kahe pudeli eelistuste testides ise ebaharilikult kõrge alkoholi taseme (naised tarbivad 20 – 35 g / kg / päevas) ja meestel 7 – 25 g / kg / päevas, sõltuvalt kontsentratsioonist ja paradigmast) [4]. Sellel uuel geneetilisel mudelil on märkimisväärne eelis võrreldes olemasolevate inbred tüvedega, sealhulgas tõendid ülemäärase fenotüübi ja kõrge alkoholisisalduse joomise kohta [4]. Lisaks on BxF hiirte poolt täheldatud kõrge etanoolitarbimine täheldatud kahes täiendavas etanooli joomise paradigmas (joomine pimedas ja etanooli aktsepteerimine planeeritud vedeliku juurdepääsu ajal) [4]. Seejärel täheldasime hiirte kahe F1i hübriidtüve võrdlemisel erinevaid alkoholi eneseanalüüsi käitumisi: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) näitasid alkoholi eelistuste vähenemist pärast alkoholi kõrge kontsentratsiooni ja abstinensi perioodide ning BxF-i püsivat alkoholi eelistust5]. Kasutades käitumuslike testide akut, oleme näidanud, et BxN on tundlikumad kui BxF hiired etanooli aversiivsetele ja rahustavatele, kuid mitte rahuldavatele mõjudele. [6].
Alkoholitarbimise ja alkoholi kuritarvitamise alased teadmised täiendavad kõrge alkoholitarbimise ja kogemuste poolt põhjustatud muutustega alkoholi käitumist ja geneetilisi mudeleid. Alkoholi eelistuse fenotüüp on huvitav, sest BxN hiired näitavad esialgu suurt eelistust etanoolilahustele. Kuigi alkoholi tarbimise vähendamise motivatsiooniline aspekt pärast kõrge etanoolikontsentratsiooni ja abstinensi kogemust ei ole teada, võib BxN-i hiiri võrrelda keskmise alkoholitarbijaga, sest nad tarbivad ikka veel etanoolilahuseid, kuid vähendatud tasemel, arvatavasti vastumeelsete kogemuste tõttu.
Huvitav on ka pikaajaline alkoholi eelistamise mudel, kuna BxF hiired tarbivad stabiilselt väga kõrgeid etanoolisisaldusi, sõltumata eelnevast kogemusest. Jätkuv ja vähenenud alkoholi eelistamine võib olla seotud alkoholi puudumise mõjuga - nähtus, kus loomadel on pärast sunniviisilise abstinenatsiooni perioodi märkimisväärselt suurenenud alkoholi tarbimine.e [7]. Alkoholi äravõtmise mõju on kasulik nähtus alkoholi tarvitamisega seotud suurenenud käitumise uurimiseks. Kuigi alkoholi puudulikkuse mõju indutseeriv eksperimentaalne ajakava erineb siinkohal kasutatavast ajakavast, on püsiva ja vähendatud alkoholi eelistuse võrdlemine alkoholi puudumise mõjuga seotud siin käsitletud erinevate käitumuslike fenotüüpidega alkoholi uuringute näriliste mudelite oluliseks nähtuseks. Alkoholi eelistuse vähendamine oleks alkoholi puudumise mõju vastand ja alkoholi eelistust võiks kirjeldada kui alkoholi puudumise mõju puudumist. Erinevate geneetiliste loomade mudelite, näiteks BxF ja BxN kasutamine aitab oluliselt kaasa valdkonna arengule, kuna arvatakse, et alkoholi tarvitamise häired tulenevad geneetika ja keskkonna keerukatest koostoimetest. Nende hübriidide vahetu varajase geeniekspressiooni tuvastamine annab ülevaate aju ahelatest, mis on olulised etanooli rahuldavate ja aversiivsete omaduste jaoks.
Etanooli ja teisi ravimisega seotud neuropiire on uuritud konkreetsetes näriliste mudelites, kasutades neuronaalse plastilisuse ja / või aktiivsuse molekulaarseid markereid [8-15]. Self-manustatud ja eksperimentaalselt manustatud etanool ei too kaasa samaväärseid aju metaboolseid kaarte, mis viitab sellele, et etanooli tugevdavat mõju toetavad spetsiifilised lülitused [8,9].
Üks võtmeelement, mida alkoholiuuringutes veel põhjalikult uurida, on püsiva ja vähendatud alkoholi eelistuste käitumise uurimine ning nende käitumiste käigus kaasatud neuronite ahelate tuvastamine. Selle katse eesmärk oli tuvastada püsivad ja vähendatud alkoholi eelistused. Kuna on näidatud, et krooniline alkoholi manustamine (koos teiste kuritarvitamise ravimitega) põhjustab aju piirkondlikke erinevusi ΔFosB tasemetes, testisime hüpoteesi, et neid käitumuslikke fenotüüpe esindab indutseeritava transkriptsioonifaktori ΔFosB diferentsiaalne tootmine aju piirkondades, mis on teadaolevalt osalema tasu, vastumeelsuse ja stressiga [10].
Kroonilised stiimulid, mis põhjustavad piirkondlikke erinevusi ΔFosB tasemetes, hõlmavad narkootikumide kuritarvitamist (alkohol, kokaiin, amfetamiin, nikotiin, morfiin ja antipsühhootikumid), kroonilist stressi (turvasurve, ettearvamatu jalašak, elektrokonvulsiivsed krambid) ja kompulsiivset ratast.11]. Aju pikaajaliste kohanduste potentsiaalse vahendajana on oluline erinevus FosB (FosB või ΔFosB) domineeriva variandi tuvastamisel kroonilise etanoolravi korral.
On mitmeid uuringuid, mis mõõdavad FosB ja ΔFosB pärast kroonilisi stiimuleid, mille puhul ei ole kindlaks tehtud, et ΔFosB oli domineeriv isovorm (nagu allpool kirjeldatud). Siiski on kindlad tõendid selle kohta, et ΔFosB, mitte FosB, on domineeriv isovorm pärast kroonilisi stiimuleid [10-12]. Ryabinini ja Wangi uuringus (1998) leiti, et madala alkoholisisaldusega DBA / 2J hiirtel põhjustasid neli päeva korduvaid etanoolisüsti FosB ekspressiooni tugevat suurenemist järgmistes aju piirkondades: eesmine koore amygdaloidne tuum, lateraalne vahesein, keskne amygdala , külgsuunaline amygdala, külgmine hüpotalamus, tuumakeha, stria terminalise voodi tuum ja talamuse paraventrikulaarne tuum [13]. Nende tulemused näitavad etanoolile reageerivat neurokontuuri. FosB ekspressiooni on mõõdetud ka kõrge alkoholisisaldusega C57BL / 6J hiirtel etanooli iseseisva manustamise ja säilitamise ajal piiratud juurdepääsutingimustes. FosB tasemed ei muutunud iseseisvuse omandamise ajal [14]. Kuid pärast kahe nädala pikkust piiratud ligipääsu etanooli enda manustamisele suurenesid FosB tasemed amygdala ja Edinger-Westphali tuuma keskmises keskjoones [15]. Kokkuvõttes on aruannetes välja toodud uued piirkonnad, mis tegelevad etanooli enesetäiendamisega, ning samuti mõjutavad nad mesokortikolimbilise rada ja laiendatud amygdala [16]. Siiski on oluline märkida, et ΔFosB tasemete muutused sõltuvad etanooli manustamisviisist, annusest ja töötlemisaja või ajakavaga kokkupuutumisest [13-15].
Selles uuringus kasutatud hiire tüved pakuvad huvitavaid mudeleid püsiva ja vähendatud alkoholi eelistuste võrdlemiseks ning nende erinevate alkoholivastuste eest vastutavate mehhanismide jaoks. See uuring demonstreerib, et vähendatud alkoholi eelistusega hiirtel on märkimisväärne plastiilsus tasu ja stressiga seotud ahelates (kaasa arvatud Edinger-Westphali tuum, ventral tegmental, amygdala, tuuma accumbens ja cingulate cortex).
Tulemused
Alkoholikontsentratsioonide ja abstinensi perioodide mõju BxF- ja BxN-hiirte eneseanalüüsile
Et näidata, et etanoolisisalduse muutused ja / või abstinensi perioodid muutsid järgnevat etanooli tarbimist, kavandasime etanooli tarbimise mõõtmiseks neli ajakava (rühmad) (Joonis1a, b).1a, b). Igale hübriidile oli neli eksperimentaalset rühma: kõrged kontsentratsioonid, kõrged kontsentratsioonid koos abstinensuperioodidega, madalad kontsentratsioonid ja väikesed kontsentratsioonid koos abstinensi perioodidega. Täielikud andmed etanooli eelistuste kohta (joonis 1). \ T (Joonis2)2) ja tarbimine (joonis 1). \ t (Joonis3)3) andmed (kõigi gruppide ja mõlema genotüübi kohta) on esitatud viitamiseks. Pikaajalise ja vähendatud alkoholi eelistuste käitumuslike fenotüüpide loomiseks ja illustreerimiseks on 9% etanooli eelistused ja tarbimisandmed esitatud joonistel Joonised44 ja ja5.5. Need käitumuslikud fenotüübid põhinevad 9% etanooli eelistuse ja tarbimise võrdlemisel esimesel, teisel, kolmandal ja neljandal esitlusel kõrge kontsentratsioonirühmade rühmades ja vastavatest katsepäevadest madala kontsentratsiooniga rühmade puhul. Viidi läbi kahesuunaline 9% etanooli eelistuse ja tarbimise ANOVA (aeg x aeg). Kõrge kontsentratsiooni rühma puhul eelistatakse etanooli (joonis 1). \ T (Joonis4a)4a) ja tarbimine (joonis. \ t (Joonis5a)5a) olid BxF-i korral suuremad kui BxN-i puhul ning BxF-il oli püsiv alkoholieelistus ja -tarbimine, samal ajal kui BxN-il oli alkoholi eelistus ja tarbimine vähenenud (ETANOLI LÄHENEMIS - interaktsioon F (3,54) = 4.83, P <0, genotüüp F (01, 1,54) = 24.10, P <0.001, aeg F (3,54) = 9.92, P <0.0001; etanooli tarbimine - koostoime N / S, genotüüp F (1,54) = 50.73, P <0.0001, aeg F (3,54, 11.68) = 0.0001, P <XNUMX). Karskusest hoiduvate kõrge kontsentratsiooniga rühmade puhul eelistatakse etanooli (joonis fig (Joonis4b)4b) ja tarbimine (joonis. \ t (Joonis5b)5b) olid BxF puhul suuremad kui BxN ning BxF-il oli püsiv alkoholieelistus ja -tarbimine, samal ajal kui BxN-il oli alkoholi eelistus ja tarbimine vähenenud (ETANOLI LÄHENEMIS - interaktsioon F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotüüp F (1,132) = 250.43, P <0.0001, aeg F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ETANOLI TARBIMINE - interaktsioon F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotüüp F (1,132 510.88) = 0.0001, P <3,132, aeg F (22.42) = 0.0001, P <XNUMX). Madalate kontsentratsioonide rühma puhul eelistatakse etanooli (joonis fig (Joonis4c)4c) ja tarbimine (joonis. \ t (Joonis5c)5c) olid BxF puhul suuremad kui BxN ning mõlemal hübriidil oli püsiv alkoholieelistus ja -tarbimine (etanoolipreferents - interaktsioon N / S, genotüüp F (1,54) = 12.2, P <0.01, aeg N / S; etanooli tarbimine - interaktsioon) N / S, genotüüp F (1,54) = 74.83, P <0.0001, aeg N / S). Madalate kontsentratsioonidega abstinentsi rühma puhul eelistatakse etanooli (joonis fig (Joonis4d)4d) ja tarbimine (joonis. \ t (Joonis5d)5d) olid BxF puhul suuremad kui BxN ning mõlema hübriidi puhul vähenes alkoholieelistus ja -tarbimine mõõdukalt (ETANOLI LÄHENEMINE - interaktsioon N / S, genotüüp F (1,132) = 166.58, P <0.0001, aeg N / S; ETANOLI TARBIMINE - interaktsioon F (3,132 3.61) = 0.05, P <1,132, genotüüp F (480.64 0.0001) = 3,132, P <7.87, aeg F (0.0001 6) = XNUMX, P <XNUMX). Kokkuvõtlikult võib öelda, et kõrge kontsentratsiooniga rühmades (ilma karskuseta) oli BxF püsivalt eelistatud alkoholi, samal ajal kui BxN-il oli alkoholi eelistus vähenenud ja madala kontsentratsiooniga rühmades (ilma karskuseta) olid nii BxF-l kui ka BXNUMXxN-l püsivad alkoholieelistused. Kuna huvipakkuvad fenotüübid on kõige paremini tabatud rühmades, kus pole karskust, on ülejäänud uuringu keskmes need.
ΔFosB tasemed
AFosB kvantifitseerimist ja analüüsi kasutati, et tuvastada püsivalt ja vähendatud alkoholi eelistuste ajal krooniliselt aktiveeritud neurotsirkulatsioon. Iga hübriidi kohta oli kolm eksperimentaalset rühma: kõrge kontsentratsioon, madalad kontsentratsioonid ja vesi (kontroll). FosB andmed esitatakse protsentides AFosB positiivsete neuronite [(FosB-positiivsete neuronite #) # (AFosB-positiivsete neuronite + Nissl-positiivsete neuronite # #) kohta] (tabel (Table1).1). Eelmine töö on näidanud, et etanooli kogemus võib põhjustada neurodegeneratsiooni [17]. Seetõttu uurisime selles uuringus neuronaalseid numbreid ja ei näidanud selles uuringus kvantifitseeritud aju piirkondade genotüübi või rühma põhjal olulist erinevust. Järgmised kolm FosB andmete analüüsi: 1) kolmeastmeline ANOVA (genotüübi x rühma x aju piirkond), 2) kahesuunaline ANOVA (aju piirkonna x rühm) iga genotüübi jaoks ja 3) korrelatsioonimaatriksid töötati välja korrelatsiooni kaardistamiseks võrgud.
Korduvate mõõtmiste kolmepoolne ANOVA (genotüüp x rühm x aju piirkond) näitas genotüübi x aju piirkonna interaktsiooni [F (15,375) = 2.01, P <05], rühma x aju piirkonna interaktsiooni [F (15.375) = 1.99, P <0.01] ja ajupiirkonna peamine mõju [F (15,375 43.36) = 000, P <2,374]. Korduvad mõõtmised kahesuunaliselt ANOVA (aju piirkond x rühm) iga genotüübi kohta näitasid, et nii BxF kui ka BxN puhul oli rühma ja aju piirkonna peamine mõju [BxF - F (11.79) = 0001, P <.15,374, Grupp; F (25.64) = 0001, P <2,360, ajupiirkonna peamine mõju; BxN - F (43.38) = 0001, P <15,360, rühma peamine toime; F (23.73 0001) = XNUMX, P <XNUMX, genotüübi peamine mõju]. Post-hoc analüüs näitas BxN puhul kuut olulist rühmade erinevust (joonis fig (Joonis6a-c).6ac). AFosB taseme protsent oli madalamate kontsentratsioonide grupis suurem kui veerühmas La, CeC / CeL, EW ja VTA. Protsent ΔFosB oli kõrgkontsentratsioonide grupis suurem kui CeMPV veerühmas. Protsent ΔFosB oli madalamate kontsentratsioonide grupis kõrgem kui kõrgkontsentratsioonirühmas EW. Kõigi teiste aju piirkondade AFosB andmed on esitatud tabelis Table1.1. Pearsoni r-korrelatsioonanalüüsi abil määrati kindlaks, kas protsent ΔFosB-positiivsetest neuronitest antud ajupiirkonnas on korrelatsioonis etanooli tarbimise või eelistusega. Etanooli tarbimine ja eelistamine näitasid BxN hiirte EW ja VTA puhul olulist positiivset korrelatsiooni% ΔFosB-ga (ETANOLI TARBIMINE - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; etanooli sisaldus - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 kõigi jaoks).
AFosB ekspressiooni, genotüübi, aju piirkonna ja etanooli tarbimise keerulist seost uuriti edasi, kasutades põhikomponentide analüüsi ja hierarhilist klastrit. Põhikomponentide analüüs näitas, et suurem osa varieeruvusest (~ 80%) oli andmetes esindatud 5i komponentidega. Seejärel teostati ja kontrolliti esimest põhikomponenti kasutades üksikisikute ja aju piirkondade poolt rühmitamata järelvalveta hierarhilist klastrit (joonis (Joonis7).7). Individuaalne klasterdamine näitas tugevat, kuid mitte täiuslikku rühmitusmudelit, mis põhines etanooli tarbimisel, sõltumata genotüübist. Paljud etanoolist mittesaanud hiired klastrisid kokku ja näitasid vähem üldist ΔFosB-d kui keskmine ja paljud hiired, kes näitasid pidevat alkoholi eelistust, koondusid kokku ja näitasid üldisemat ΔFosB-d kui keskmine. Need kaks klastrit olid kõige erinevamad. Kolm klastrit esindasid ΔFosB väärtuste ja etanooli joomise fenotüüpide suuremat kui väiksemat ja keskmist segu.
Arutelu
Võrreldes kahe F1 hübriidsete hiirte tüvesid, täheldati alkoholi omast sõltuvat käitumist. BxN-il on alkoholisisalduse vähenemine pärast suurte alkoholisisalduse ja abstinensuse perioodide kogemusi, samas kui BxF-il on püsiv alkoholi eelistamine. BxF-mudelid on stabiilsed, suur tarbimine (püsiv alkoholi eelistused) ja BxN mudelid mõõdukat joomist (vähendatud alkoholi eelistused). Neuronaalne plastiilsus (või aktiivsus, mõõdetuna ΔFosB tasemete järgi) oli erinev sõltuvalt etanoolikogemusest, toetades veelgi spetsiifilise neuronaalse ahela olulist rolli püsivas ja vähendatud alkoholi eelistuses.
Kõrge alkoholi tarbiva tüve C57BL / 6 puhul sõltuvad etanooli eelistused ja tarbimine suurel määral etanooli algkontsentratsioonist, abstinensi pikkusest ja alatüvest (C57BL / 6Cr või C57BL / 6J) [7,18]. Me leidsime, et BxF hiirtel täheldatud etanooli eelistused ja tarbimine olid neljas erinevas testitud ajakavas järjepidevalt kõrgemad (ja stabiilsemad kui BxN-is). Mõõdukalt kõrge etanoolieelne eelistus ja tarbimine BxN-s püsisid ainult ühe kroonilise joomiskava alusel (vähene kontsentratsioon ilma abstinentsita), samas kui kõigi teiste krooniliste joogikavade testimisel täheldati eelistuste ja tarbimise vähenemist. BxN-i vähendatud alkoholi eelistused pakuvad uudset loomamudelit, kus kogemus (etanooli korduv esitus pärast mitmekordset suurt etanoolikontsentratsiooni ja / või mitut lühikest abstinensusaega) vähendab oluliselt nende reaktsiooni eelnevalt väga eelistatud etanoolikontsentratsioonile.
Self-manustatud ja eksperimentaalselt manustatud etanool toodavad erinevaid aju metaboolseid kaarte, mis viitab sellele, et etanooli tugevdav toime on aluseks spetsiifilisele ahelale [8,9]. Testisime hüpoteesi, et püsivaid ja vähendatud alkoholi eelistuste käitumisfenotüüpe esindab indutseeritava transkriptsioonifaktori ΔFosB diferentsiaalne tootmine aju piirkondades, mis teadaolevalt osalevad tasustamises, vastumeelsuses ja stressis. ΔFosB on ainulaadse pikaajalise stabiilsusega transkriptsioonifaktor, mis ei desensitiseeri stiimuleid, kuna c-Fos teeb seda pigem krooniliste ravide ajal. AFosB suurenemine on tingitud suurenenud neuronaalsest aktiivsusest ja arvatakse, et need peegeldavad pikaajalist neuronaalset plastilisust. Leidsime, et AFosB-positiivsete neuronite protsent aju piirkondades sõltub genotüübist (BxF ja BxN) ja rühmast (veekontroll, madalad kontsentratsioonid ja kõrge kontsentratsioon).
Fvõi BxN, post-hoc analüüs näitas, et vabatahtlik etanooli tarbimine põhjustas suurenenud ΔFosB EW tuumas, VTA ja amygdala: näitab suurenenud neuronaalset plastilisust aju piirkondades, mis teadaolevalt osalevad etanoolis, tasu ja stressivastustes. BxN hiirtel kõrge kontsentratsiooniga rühmas (vähendatud alkoholi eelistused) on EW-s vähenenud neuronaalne plastilisus, mis viitab sellele, et need neuronid reageerivad alkoholi tarbimisele kogemusest sõltuva plastilisusega. Madala kontsentratsiooniga rühmas (eksponeeritud püsiv alkoholi eelistused) on neuronite plastilisus EW-s suurem kui kõrgkontsentratsioonides ja veekontrolligruppides. Kuigi läbi viidud erinevad etanoolijookide paradigmad ja geneetilised hiiremudelid, on meie tulemused BxN hiirte EW-s nõus eelnevate etanoolitarbimise uuringutega [14,15]. Mitte-preganglionset EW on hiljuti iseloomustatud sellisena, et see sisaldab periokulomotoorseid urokortiini (Ucn) sisaldavaid neuroneid [19]. Ucn1 on kortikotropiini vabastav faktor (CRF) sarnane peptiid, mis seob CRF1i ja CRF2 retseptoreid. Varasemad uuringud, mis kasutasid geneetilisi, farmakoloogilisi ja kahjustusi, on näidanud, et Ucn1 on seotud alkoholi tarbimise reguleerimisega [19-22]. Tsiin on teadaolev geneetiline eelsoodumus suure alkoholi tarbimise korral närilistel, mis on korrelatsioonis kõrgemate Ucn1-i tasemetega EW-s ja LSi-s [23]. Seega oli post-hoc tähtsuse puudumine, mida me täheldasime EW-s kõrge alkoholi eelistavate ja tarbivate BxF hiirtega, ootamatu. Võib-olla on see tingitud ΔFosB taseme pisut kõrgenenud tasemest BxF veerühmas võrreldes BxN veerühmaga. Tõepoolest, kõigi püsivate alkoholi eelistustega hiirte protsent AFosB tasemed (BxF High Concentrations grupp, BxF Low Concentrations grupp ja BxN Low Concentrations grupp) olid üsna sarnased.
BxN-i puhul vähenes etanoolitarbimine madala kontsentratsiooniga rühmades VTA neuronaalset plastilisust (suurem kui kõrge kontsentratsiooniga ja veekontrollirühmades). Etanooli eelistus ja tarbimine olid samuti madalamate kontsentratsioonide grupis suuremad. Post-hoc tähtsuse puudumine, mida me täheldasime VTA-s kõrge alkoholi eelistavate ja tarbivate BxF-hiirte puhul, oli ootamatu ja see võib olla tingitud ΔFosB veidi kõrgematest tasemetest veekontrollirühmas. AFosB taseme protsent oli BxF veerühmas veidi kõrgem kui BxN veerühmas, samas kui AFosB tasemed olid kõikidel hiirtel, kellel esinesid püsivad alkoholi eelistused, üsna sarnased (BxF High Concentrations grupp, BxF Low Concentrations grupp ja BxN Low Concentrations grupp) . VTA dopamiinisüsteem mängib olulist rolli etanooli tugevdavate mõjude vahendamisel ja osaleb paljudes vastastikustes seostes, mis on olulised etanooli ja tasustamisega seotud käitumise jaoks [24-26]. Lisaks VTA projektid amygdala ja EW tuumale. On näidatud, et rotid manustavad etanooli otse VTA-sse [27]. Samuti suurendab etanooli kokkupuude dopamiinergiliste neuronite põlemiskiirust VTA-s [28,29]. Suurenenud põlemiskiirust võib seostada AFosB induktsiooniga VTA-s, mida täheldati pärast kroonilist vabatahtlikku etanooli manustamist BxN-is.
Alkoholisõltuvus põhjustab pikaajalisi neuroadaptatsioone, mille tulemuseks on negatiivsed emotsionaalsed seisundid; oluline negatiivse tugevdamise mehhanism on kortikotropiini vabastav faktor (CRF) signaalimine amygdala sees [30]. CeA neuronite farmakoloogilised manipulatsioonid on suunatud GABA, CRF, opioidide, serotoniini, dünorfiini ja norepinefriini retseptoritele [25,31-34]. GABA antagonistid, samuti CRF antagonistid vähendavad etanooli tarbimist [32,33,35]. CeA kahjustused vähendavad pidevat juurdepääsu vabatahtlikule etanooli tarbimisele [36]. Meie tulemused toetavad veelgi CeA rolli alkoholi tarbimise käitumises. GABAergilised neuronid tsentraalses amygdalas moodustavad heterogeense populatsiooni, mille ühendused on seotud nende peptiidisisaldusega. Need GABAergilised neuronid integreerivad CeA väljundaktiivsuse. Nagu vaadatud [Wee ja Koob (2010]), sIgapäevased uuringud on tuvastanud dünorfiini ja kapa opioidiretseptorite rolli etanooli intaktooni hooldamisel ja eskalatsioonil.e [37]. Hiljuti on Walker jt näidanud, et κ-opioidiretseptori antagonist, nor-binaltorfiin, laienenud amygdala sees vähendab selektiivselt etanooli iseseisvat manustamist sõltuvatel loomadel [38]. Kappa opioidiretseptori signalisatsioon on endiselt teadusuuringute põhihuvi stressi, tasu ja vastumeelsuse ristumiskohas. Samuti on näidatud, et stressi poolt indutseeritud etanooli eneseanalüüs on vahendatud kappa opioidiretseptori signalisatsiooniga [39]. CeA keskosa võib jagada latero-kapsli (CeL / CeC) ja keskse tagaosa ventralisse. CeL / CeC GABAergilised neuronid saavad VTA-lt dopamiinergilisi innervatsioone; nagu eelnevalt mainitud, aktiveeritakse need neuronid pärast akuutset etanooli manustamist ja näitavad suurenenud AFosB hiiri, kellel on püsiv alkoholi eelistus. Vt ka Mc [Pruut (2002]) CeA ja alkoholi mõjude suurepärase läbivaatamise kohta [40]. Meie uuringus näitasid BxN hiired, kellel oli pikaajaline alkoholi eelistus (Low Concentrations grupp), suurenenud neuronite plastilisus CeC / CeL ja La ja BxN hiirtel, kellel oli vähendatud alkoholi eelistused (High Concentrations grupp), näitas CeMPV-s suurenenud neuronaalset plastilisust. Need tulemused viitavad sellele, et spetsiifiline etanoolikogemus hõlmab plastiilsust GABAergilistes neuronites amygdalas. Nende andmetega koos VTA ja EW neuronaalse plastilisuse vastavate muudatustega soovitame seda ahelat püsivalt alkoholi eelistuste tingimustes oluliselt plastiliselt muuta.
Varasemad uuringud on näidanud, et C57BL / 6J hiirtel on võimalik saavutada kõrge alkoholisisalduse tase kahe pudeli valikul, kuid need vere alkoholisisaldused ei ole püsivad ja sageli ei vasta joomine Dole ja Gentry (1984) esitatud farmakoloogilise motivatsiooni kriteeriumidele.41,42]. BxN-hiired, kellel on vähenenud alkoholi eelistused, tarbisid vähem kui tavalise C57BL / 6J hiire puhul [1]. Seega, kuigi me ei võtnud vere alkoholisisalduse proove, ei ole tõenäoline, et BxN hiirtel, kellel on vähenenud alkoholi eelistused, saavutati püsivad farmakoloogiliselt olulised vere alkoholisisaldused, mis viitab sellele, et nendes aju piirkondades ei ole plastilisuse esilekutsumiseks vajalik kõrge alkoholisisaldus. Oluline on märkida, et ka BxF-is eksisteerib grupi väga oluline mõju, kuigi BxF-aju piirkondade post-hoc-tulemused (korrigeeritud mitmekordseteks võrdlusteks) ei näidanud olulisi muutusi AFosB positiivsete neuronite protsentides ühegi piirkonna suhtes pärast kroonilist etanooli tarbimist nende erinevate sõiduplaanidega.
Muutujate vaheliste võimalike suhete visualiseerimiseks viidi läbi hierarhiline klastrite moodustamine. Saadud analüüsi kuumakaart näitab üldist suundumust ΔFosB taseme ja etanooli tarbimise vahel, sõltumata genotüübist. Kõrgemad AFosB tasemed olid seotud kõrge joogiga ja madalamad ΔFosB tasemed olid seotud kontrollloomadega; suhe ei olnud siiski piisav, et täpselt ennustada joogifenotüüpe, mis põhinevad ainult ΔFosB tasemel.
Järeldused
Kaks F1-i hübriidset hiirte tüve täheldati alkoholi omast sõltuvalt käitumisest: BxN-il ilmnes alkoholisisalduse vähenemine pärast suure alkoholi kontsentratsiooni kogemust, samas kui BxF-il on pikaajaline alkoholi eelistamine. BxF-mudelid on stabiilsed, suur tarbimine (püsiv alkoholi eelistused) ja BxN mudelid mõõdukat joomist (vähendatud alkoholi eelistused). Muutused neuronaalses plastiilsuses (mõõdetuna ΔFosB tasemega) olid kogemustest sõltuvad, samuti aju piirkonna ja genotüübi spetsiifilised, neuronite ahela edasine määratlemine on etanooli tarbimise motivatsiooniliste aspektide aluseks. Need tulemused näitavad, et ühe vanemliini muutmine hübriidhiirtel põhjustab muutusi alkoholitarbimise mustrites ja märgatavaid muutusi ΔFosB ekspressiooni mustrites, mis viitab sellele, et nendes erinevates hübriidhiirtes on erinevad aju võrgud.
Meetodid
eetika
See uuring viidi läbi rangelt kooskõlas riiklike tervishoiuinstituutide laborite loomade hooldamise ja kasutamise juhendis esitatud soovitustega. Protokolli kiitis heaks Texase Ülikooli institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee Austinis (AUP 2010 – 00028). Kõik operatsioonid viidi läbi naatriumpentobarbitaali anesteesia all ja kõik jõupingutused tehti kannatuste minimeerimiseks.
Loomad
Uuringud viidi läbi C1BL / 57J-st saadud F6-i hübriidsete hiirte ja FVB / NJ või NZB / B1NJ hiirtega (BxF F1 ja BxN F1, ema tüvi x isadüvi). C57BL / 6J, FVB / NJ ja NZB / B1NJ kasvatajad osteti firmalt The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) ja paaritasin 7 – 8 nädalat. Järglased võõrutati iga genotüübi isoseksuaalsetesse rühmadesse (BxF F1, BxN F1). Testime ainult naissoost hiiri, et hõlbustada võrdlust eelnevalt kogutud andmetega [1,5,6]. Hiired hoiti standardsetes puurides koos toiduga ja veega ad libitum. Kolooniaruum ja testiruum olid 12 h valguses: 12 h tume tsükkel (tuled 07is: 00).
Kaks pudeli valiku etanooli eelistuste testi
Kahe pudelivaliku meetodit kasutati etanooli vabatahtliku manustamisviisi määramiseks emastel BxF ja BxN hiirtel [1,6]. F1i hübriidsed emased hiired (vanus 63 päeva) paigutati individuaalselt standardkarkassidesse, samal ajal harjutades ühe nädala jooksul pudeleid, mis sisaldasid vett enne imanoolilahuse sisseviimist. Pärast harjumist oli hiirtel juurdepääs kahele identsele pudelile: üks sisaldas vett ja teine etanoolilahust. Asendi eelistuste reguleerimiseks muudeti iga päev toru asendeid. Võimaliku mahavoolu ja aurustumise arvestamiseks lahutati kontroll-puurides ilma hiirteta saadud torude keskmine kaal iga päev individuaalsetest joogiväärtustest. Hiiri kaaluti kogu 4 päeva jooksul kogu katse vältel. Kogu katse vältel mõõdeti kogu vedeliku tarbimist iga päev. Iga hiire jaoks arvutati tarbitud etanooli kogus ja etanooli eelistus ning need väärtused arvutati iga etanooli kontsentratsiooni kohta. Alkoholikontsentratsioonide ja abstinensi perioodide mõju iseeneslikule manustamisele BxF ja BxN hiirtel demonstreeriti eksperimentaalsete rühmadega, millel oli juurdepääs kõrgele kontsentratsioonile (laienev juurdepääs 3-35% etanoolilahustele, millele järgnesid 3i korduvad tsüklid 9, 18, ja 27% etanool, lõppedes 9% etanooli lõpliku esitlusega ja teise madala kontsentratsiooniga rühmaga (laienev ligipääs 3-9% etanoolile, ülejäänud katse teostati ligipääsuga 9% etanoolile). Kõigil nendel rühmadel oli alarühm, mis tegi või ei kogenud kolme ühe nädala pikkuseid abstinensuse perioode. Kontroll-hiirtel esinesid samasugused tingimused kui eksperimentaalsed hiired, kuid neile pakuti ainult ühte pudeli vett.
Kokku oli iga hübriidi kohta viis rühma: vesi (n = 14-16), kõrged kontsentratsioonid (n = 10), kõrged kontsentratsioonid koos abstinensiaegadega (n = 20), madalad kontsentratsioonid (n = 10) ja madalad kontsentratsioonid Abstinents Periods (n = 20). Vaadake joonist Joonis11 üksikasjalikud kaks pudelivalikurühma.
ΔFosB Immunohistokeemia ja kvantifitseerimine
ΔFosB immunohistokeemiat (IHC) mõõdeti 16 aju piirkonnas hiirtelt, kellel oli 72 päeva pidev juurdepääs kas veele (kontroll) või veele ja alkoholile [kõrged kontsentratsioonid ja madalad kontsentratsioonid]. Kõrge kontsentratsiooni mõju etanooli eelistamisele ja tarbimisele oli palju suurem kui karskusest; seetõttu ei kaasatud karskusperioode kogenud rühmi ΔFosB IHC mõõtmistesse. Lisaks viidi katse läbi pärast püsiva või vähendatud alkoholi eelistuse esmakordset ilmnemist, et näidata käitumisharjumuste fenotüüpide stabiilsust korduvate etanooli kontsentratsiooni muutuste tsüklitega, et uurida kroonilise etanooli tarbimise mõjusid. Neli kuni kaheksa tundi pärast alkoholi eemaldamist eksperimendi 73. päeval anesteseeriti hiired sügavalt (175 mg / kg naatriumpentobarbitaali) ja perfusiooniti intrakardiaalselt 20 ml 0.01 M fosfaatpuhverdatud soolalahusega (PBS), millele järgnes 100 ml 4% paraformaldehüüd PBS-is. Ajud eemaldati, fikseeriti 4% paraformaldehüüdis temperatuuril 4 ° C, kinnistati 3% agaroosi, lõigati (50 um, koronaal) vibratoomile, pandi krüoprotektorisse (30% sahharoosi, 30% etüleenglükooli ja 0.1% polüvinüüli). pürrolidoon PBS-is) öö läbi temperatuuril 4 ° C ja säilitati temperatuuril –20 ° C, kuni see oli töödeldud IHC jaoks. Sulatatud sektsioone pesti PBS-ga, töödeldi 0.3% H2O2-ga ja inkubeeriti mittespetsiifilise märgistamise minimeerimiseks üks tund 3% normaalses kitseseerumis. Seejärel inkubeeriti koelõike üleöö temperatuuril 4 ° C 3% normaalse kitseseerumi ja anti-FosB-ga (SC-48, 1: 5000 lahjendus, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Lõike pesti, inkubeeriti ühe tunni jooksul biotinüleeritud kitse küülikutevastases Ig-s (lahjendus 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA), pesti ja inkubeeriti avidiin-biotiinikompleksis (lahjendus 1: 200, Elite kit-Vector Laboratories). . Peroksüdaasi aktiivsus visualiseeriti reaktsioonil 0.05% diaminobensidiiniga (sisaldab 0.015% H2O2). Koesektsioonid olid värvitud Nissl'iga (kasutades metüleensinist / azure II). Slaidid kodeeriti pimedateks lugemisteks. AFosB-IR neuronid loendati 50X (õli) suurendusel, kasutades optilist fraktsioneerivat meetodit ja StereoInvestigator arvutitarkvara. Proovivõtuparameetri teave: loendusraam (50um x 50um x 10um) oli kõikides piirkondades ühesugune; siiski määrati iga aju piirkonna ruudu suurus, et tagada kahepoolsete rakkude koguarv võrdne 100-300-ga, et saavutada variatsioonikordaja vähem kui 0.1. Andmed arvutati protsendina ΔFosB positiivsetest tuumadest (ΔFosB positiivsete tuumade arv / neuronite arv) iga piirkonna kohta.
Selles uuringus kasutatud FosB antikeha (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) tõstatati FosB sisemise piirkonna vastu ja tunneb ära nii FosB kui ka ΔFosB. Kuigi see antikeha tunneb ära nii FosB kui ka AFosB, nimetatakse selles uuringus kvantifitseeritud immunopositiivseid neuroneid kui FosB positiivseid neuroneid, kuna on näidatud, et kuritarvitamise ravimid, kaasa arvatud alkohol, indutseerivad neuronites spetsiifiliselt AFosB, mitte FosB. Perrotti jt. ([2008]) mõõdeti ΔFosB induktsiooni (vastusena kuritarvitatavate ravimite, sealhulgas alkoholi, kroonilisele manustamisele), kasutades kahte antikeha: ühe, mis tunneb ära FosB ja ΔFosB (SC-48) ja ühe selektiivse ΔFosB (mitte kaubanduslikult saadaval) ja leidis, et kõigi ravimite puhul FosB antikeha (SC-48) abil täheldatud immunoreaktiivsus on tingitud ΔFosB-st, kuna nad ei tuvastanud immunoreaktiivseid neuroneid, kasutades täispika FosB-le selektiivset antikeha [10]. Lisaks on teada, et ΔFosB indutseeritakse aju piirkonna ja rakutüübi spetsiifilisel viisil, kasutades erinevaid kroonilisi ravimeetodeid ja selle teema kohta on suurepärased ülevaated [11,43,44].
Neuroanatoomiliste struktuuride lühendid ja asukohad
Il - infralimbiline ajukoor (+1.70 mm); Cg1 - tsingulaarkoor 1 (+1.1 mm); Cg2 - tsingulaarkoor 1 (+1.10 mm); NAcc südamik - tuum accumbens tuum (+1.10 mm); NAcc kest - nucleus accumbens kest (+1.10 mm); LSi - külgmine vaheseina vahe (+1.10 mm); La - külgmine mandelkeha (−1.22 mm); Bla - basolateraalne mandelkeha (−1.22 mm); CeC / CeL - tsentraalne kapsel ja tsentraalne külgmine mandelkeha (−1.22 mm); CeMPV - amigdala kesktuuma mediaalne posterioventraalne osa (−1.22 mm); PAG - perikvaduktaalne hall (−3.64 mm); EW - Edinger-Westphali tuum (−3.64 mm); VTA - ventraalne tegmentaalne ala (−3.64 mm); DR - seljarapp (- 4.60 mm); PBN - parabrahhiaalne tuum (−5.2 mm); NTS - nucleus tractus solitarius (−6.96 mm). Hiire aju stereotaksilistes koordinaatides[45] kasutati iga aju piirkonna kvantifitseerimiseks ühe kuni kolme sektsiooni subjektiivseks sobitamiseks.
Statistilised menetlused
Andmed on esitatud kui keskmine ± SEM, kui ei ole teisiti märgitud. Andmed jagati tavaliselt. Statistika viidi läbi, kasutades Statistica versiooni 6 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) ja GraphPad Prism versiooni 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Korduvad meetmed viidi läbi etanooli tarbimise ja eelistuste andmete jaoks kahesuunalised ANOVA-d, et hinnata erinevusi rühmade vahel. ΔFosB andmete jaoks viidi läbi kaks- ja kolmeastmelised ANOVA-d, et hinnata interaktsioone ja peamisi mõjusid rühmale (kõrged kontsentratsioonid, madalad kontsentratsioonid ja vesi), aju piirkonnale ja genotüübile. Bonferroni korrigeerimine mitme võrdluse ja Bonferroni post-hoc korrigeerimiseks viidi läbi vajaduse korral. Eriti oletasime, et stressi ja tasu ahelad oleksid suurendanud FosB hiirtel, vähendades alkoholi eelistust. Iga hübriidristi puhul kasutati Pearsoni r, et tuvastada olulisi korrelatsioone ΔFosB tasemete ja etanooli eelistuste ja tarbimise vahel etanooliga kogenud hiirtel.
Hierarhiline klastreerimine viidi läbi selleks, et visualiseerida, kuidas andmed ühiselt varieeruvad ja hindavad, kuidas andmegrupp koos. Arvutatud mediaanväärtused asendasid kadunud protsendi ΔFosB andmeid, mis ei ületanud 15% andmetest. Kuigi on suurem ebakindlus kui juhul, kui arvestuslikud väärtused oleksid tegelikult täheldatud, nõuab hierarhiline klastrite analüüs täielikku liikmelisust või täielikku kustutamist juhtumipõhiste võrdluste jaoks. Hierarhiline klastrimine viidi läbi Wardi meetodil ja saadud klastrid telliti põhikomponendi analüüsi esimese põhikomponendi järgi (JMP®, versioon 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Vee- ja etanooliga kogenud rühmade puhul oli iga aju piirkonna AFosB andmed transformeeritud z-skooriga ja klastrite arvu määramiseks tehti põhikomponentide analüüs. Seejärel koondati andmed aju piirkondade ja üksikisikute poolt, kasutades jälgitud hierarhilist klastrite analüüsi.
Autorite sissemaksed
Uuringu kujundamisel aitasid kaasa ARO, YAB, RAH, TAJ. ARO omandas andmed. ARO, IP, RDM analüüsis andmeid. Käsikirja koostamisel ja läbivaatamisel osalesid ARO, RDM, IP, TAJ, YAB ja RAH. Kõik autorid lugesid ja kinnitasid lõpliku käsikirja.
Tänusõnad
Soovime tänada dr. Jody Mayfield ja Colleen McClung abistavateks aruteludeks ning Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour ja Darshan Pandya tehnilise abi saamiseks. Seda uuringut toetas integreeriv neuroteaduse algatus alkoholismi konsortsiumi toetuste AA13520 ja riikliku alkoholi kuritarvitamise ja alkoholismi instituudi AA06399-S ja AA16424.
Tehtud tööd
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Tulemüüri müüt ja vastus alkoholile missiooni indiaanlastel. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Alamgruppide tulemused alkoholi kui alkoholi tarvitamishäirete riskitegurina reageerimise taseme kohta: naiste ja latiinode kolledži populatsioon. Alkohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Etanooli vabatahtlik tarbimine 15i inbred hiirte tüvedes. Psühhofarmakoloogia. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hübriid C57BL / 6J x FVB / NJ hiired joovad rohkem alkoholi kui hiired C57BL / 6J. Alkohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Hübriidhiired kui kõrge alkoholitarbimisega geneetilised mudelid. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. C57BL / 6JxFVB / NJ ja C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 hübriidhiirte käitumuslikud erinevused: etanooli tarbimise kontroll. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. C57BL / 6J alkoholi puuduse ja eskalatsiooni efekti teke. Alkohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Etanooli ja etanooli / sahharoosi enda manustamise mõju lokaalse aju glükoosi kasutamise määradele rottidel. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ. Madalad ja mõõdukad etanooliannused tekitavad rottidel selged aju metabolismi muutused. Alkohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indutseerimise eritunnused ajus kuritarvitamise ravimitega. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulaarne lüliti aju pikaajaliseks kohanemiseks. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB kogunevad GABAergilise raku populatsiooni ventraalse tegmentaala tagumises otsas pärast psühhostimulantravi. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Wang YM. Korduv alkoholi manustamine mõjutab diferentsiaalselt c-Fos ja FosB valgu immunoreaktiivsust DBA / 2J hiirtel. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. ITF ekspressioon hiire ajus alkoholi enda manustamise ajal. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Cross Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Alkoholi tarvitamine põhjustab aju piirkonna selektiivseid muutusi indutseeritavate transkriptsioonifaktorite ekspressioonis. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Kalivas PW. Kuidas teha kindlaks, millised ravimi poolt põhjustatud neuroplastilised muutused on olulised? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Cross Ref]
- Crews FT, Nixon K. Neurodegeneratsiooni ja regeneratsiooni mehhanismid alkoholis. Alkohol. 2009;44: 115 – 127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Cross Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Etanoolivaba toime iseloomustus C57BL / 6 hiirtel. Alkohol. 2006;40: 119 – 126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urokortiin 1 jaotus hiire ajus on tüvest sõltuv. Neuroteadus. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabiniin AE. Edinger-Westphali tuuma kahjustused C57BL / 6J hiirtel häirivad etanooli poolt põhjustatud hüpotermiat ja etanooli tarbimist. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Urokortiin 1 mikroinjektsioon hiire külgseinte vahele reguleerib alkoholi tarbimise omandamist ja ekspressiooni. Neuroteadus. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Urokortiin 1 ekspressioon viiel roti joone paaril, mis on selektiivselt kasvatatud alkoholi tarbimise erinevuste tõttu. Psühhofarmakoloogia. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Cross Ref]
- Ryabiniin AE, Weitemier AZ. Urokortiini 1 neurokontuur: etanoolitundlikkus ja potentsiaalne osalemine alkoholitarbimises. Brain Res Rev 2006;52: 368 – 380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Cross Ref]
- Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Alkoholi enda manustamine: mesolimbilise dopamiini roll. Ann NY ACAD Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ, Li TK. Alkoholismi loomamudelid: näriliste kõrge alkoholi tarvitamise käitumise neurobioloogia. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Cross Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurocircuitry eesmärgid etanooli tasu ja sõltuvuse osas. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Etanooli intrakraniaalne manustamine isaste Wistari rottide ventral tegmentalisse piirkonnas: tõendid dopamiini neuronite kaasamise kohta. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Cross Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Väikesed etanooliannused aktiveerivad dopamiinergilisi neuroneid ventral tegmental piirkonnas. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Cross Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Etanool suurendab roti ventraalse tegmentaala dopamiini neuronite põlemiskiirust in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Cross Ref]
- Heilig M, Koob GF. Kortikotropiini vabastava teguri oluline osa alkoholisõltuvuses. Trends Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Tõendid selle kohta, et amygdala osaleb 5-HT3 retseptori antagonistide inhibeerivates toimes alkoholi tarvitamisel rottidel. Alkohol. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Cross Ref]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. CRF1-retseptori ja opioidiretseptori antagonistide toime alkoholist eelistatavate (P) rottide alkoholisisalduse suurenemisele. Alkohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. GABAA retseptori antagonism pikendatud amygdala-s vähendab etanooli omastamist rottidel. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Cross Ref]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Etanool suurendab GABAergilist ülekannet nii pre- kui postsünaptilistes kohtades roti keskmistes amygdala neuronites. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Amigdala intramuskulaarne muskimool vähendab sõltuvates rottides toimiva etanooli manustamist. Alkohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Cross Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Vähenenud eksperimentaalne ärevus ja vabatahtlik etanoolitarbimine rottidel pärast keskset, kuid mitte basolateraalset amygdala kahjustust. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Cross Ref]
- Wee S, Koob GF. Dünorfiin-kapa opioidide süsteemi roll narkootikumide kuritarvitamise tugevdavate mõjude puhul. Psühhofarmakoloogia (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Dynorphin / kappa opioidiretseptori süsteemide suunamine alkoholi kuritarvitamise ja sõltuvuse raviks. Alkohol. 2012;46: 359 – 370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Endogeenne kapa-opioidide vahendamine etanooliga konditsioneeritud kohapreferentsi ja eneseanalüüsi stressi poolt indutseeritud võimendamisel. Psühhofarmakoloogia (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Cross Ref]
- McBride WJ. Amygdala keskne tuum ning alkoholi ja alkoholi tarbimise mõju närilistele. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Alkoholismi analoogi suunas hiirtel: mudeli skaalategurid. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Alkoholismi analoogi suunas hiirtel: farmakoloogiliselt motiveeritud joomise tunnustamise kriteeriumid. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [PMC tasuta artikkel] [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ. Sõltuvuse molekulaarne neurobioloogia. Olen J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Cross Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: pikaajalise närvi- ja käitumusliku plastilisuse molekulaarne vahendaja. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Cross Ref]
- Franklin KJ, Paxinos G. Hiire aju stereotaksilistes koordinaatides. 2. San Diego, CA: akadeemiline; 2001.