Krooniline tasu ennustavate stiimulite kokkupuude hasartmängudega sarnase ajakavaga võib soodustada tundlikkust amfetamiini suhtes rottidel (2014)

Martin Zack^1*, Robert E. Featherstone², Sarah Mathewson³ ja Paul J. Fletcher³

• ¹Kognitiivse psühhofarmakoloogia labor, neuroteaduse osakond, sõltuvus- ja vaimse tervise keskus, Toronto, ON, Kanada
• ²Translatiivne neuroteaduste programm, Pennsylvania ülikooli Philadelphia ülikooli psühhiaatria osakond, USA, PA, USA
• ³Biopsühholoogia osakond, neuroteaduste osakond, sõltuvus- ja vaimse tervise keskus, Toronto, ON, Kanada

Sõltuvust peetakse ajuhaiguseks, mille põhjustab krooniline kokkupuude ravimitega. Aju dopamiini (DA) süsteemide sensibiliseerimine vahendab seda mõju osaliselt. Patoloogilist hasartmängu (PG) peetakse käitumuslikuks sõltuvuseks. Seetõttu võib PG põhjustada krooniline kokkupuude hasartmängudega. Seda võimalust toetaks hasartmängudest põhjustatud DA-süsteemide sensibiliseerimise tuvastamine. Hasartmänguhüved tingivad DA vabastamise. Mänguautomaatide üks episood nihutab DA vastust tasu kättetoimetamisest näpunäidete (keerlevate rullide) algusele tasu eest vastavalt ajaliste erinevuste õppimise põhimõtetele. Seega mängivad konditsioneeritud stiimulid (CS) võtmerolli DA vastustes hasartmängudele. Primaatidel on DA vastus CS-le kõige tugevam, kui premeerimise tõenäosus on 50%. Selle ajakava kohaselt eeldab CS eeldatavat tasu, kuid ei anna teavet selle kohta, kas see ilmneb antud uuringus. Hasartmängude ajal peaks 50% ajakava tekitama DA maksimaalse vabanemise. See ühtib kaubandusliku mänguautomaadi tasu sagedusega (46%). DA vabanemine võib kaasa aidata sensibiliseerimisele, eriti amfetamiini puhul. Krooniline kokkupuude CS-ga, mis ennustab tasu 50% ajast, võiks seda mõju jäljendada. Testisime seda hüpoteesi kolmes uuringus rottidega. Loomad said 15 × 45-min kokkupuute CS-ga, mis ennustas tasu tõenäosusega 0, 25, 50, 75 või 100%. CS oli kerge; preemiaks oli 10% sahharoosilahus. Pärast väljaõpet said rotid sensibiliseerivat raviskeemi viiel eraldi annusel (1 mg / kg) d-amfetamiini. Lõpuks said nad 0.5 või 1 mg / kg amfetamiini nakatamise enne 90-min lokomotoorse aktiivsuse testi. Kõigis kolmes uuringus ilmnes 50% rühmas vastusena mõlemale stimuleerivale annusele suurem aktiivsus kui teistel rühmadel. Efekti suurused olid tagasihoidlikud, kuid ühtlased, mida peegeldab oluline grupi × asetuse seos (ϕ = 0.986, p = 0.025). Krooniline kokkupuude hasartmängusarnaste premeerivate stiimulite graafikuga võib soodustada amfetamiini suhtes ülitundlikkust, samamoodi nagu kokkupuude amfetamiiniga endas.

Sissejuhatus

Sõltuvust on iseloomustatud kui ajuhaigust, mille põhjustab krooniline kokkupuude kuritarvitustega (Leshner, 1997). Arvatakse, et neuroplastilisus vahendab sellise kokkupuute (Nestler, 2001). Aju dopamiini (DA) süsteemide sensibiliseerimine on neuroplastilisuse vorm, mis on seotud hüperreaktiivsusega ravimite konditsioneeritud stiimulitele (CS) ja kompulsiivsete ravimite otsimisega (Robinson ja Berridge, 2001). Sensibiliseerimist on funktsionaalselt määratletud DA suurema vabanemisega vastusena CS-le tasu eest ja suurenenud lokomotoorse reageerimisega farmakoloogilise DA-st väljakutsega (Robinson ja Berridge, 1993; Pierce ja Kalivas, 1997; Vanderschuren ja Kalivas, 2000). Kuigi sensibiliseerimine on ainult üks paljudest sõltuvusega seotud aju muutustest (vrd. Robbins ja Everitt, 1999; Koob ja Le Moal, 2008), on soovitatud, et muutused presünaptilises dopamiini vabanemises esindavad tavalisi neuroadapteerimisi, mis on seotud sõltuvuspõhise uimastite otsimisega (nt retsidiiv), kuna ravimid, mis kutsuvad esile lokomotoorse ülitundlikkuse opiaatide (nt morfiin) või stimulantide (nt amfetamiin) suhtes. , põhjustavad ka kustutatud operatiivsete reageeringute ennistamist heroiini või kokaiini enesejuhtimisel - retsidiivi loommudel (Vanderschuren et al., 1999). Tõendid, et ergutav ülitundlikkus (uimastipreemiate suurem väärtus) avaldub kõige enam pärast sõltuvusravimitega esmakordset kokkupuudet, viitab sellele, et sensibiliseerimine võib olla seotud ka sõltuvuse varajastes staadiumides (Vanderschuren ja Pierce, 2010).

Patoloogilist hasartmänge (PG) on psüühikahäirete diagnostika- ja statistilise käsiraamatu 5. Väljaandes kirjeldatud kui käitumissõltuvust ja klassifitseeritud hiljuti samasse kategooriasse kui ainete sõltuvushäired (Frascella et al., 2010; APA, 2013). See tähendab, et PG võib olla põhjustatud kroonilisest kokkupuutest hasartmängulaadse tegevusega, ühised mehhanismid võivad vahendada hasartmängude ja ravimitega kokkupuute tagajärgi (Zack ja Poulos, 2009; Leeman ja Potenza, 2012); ja et aju DA radade sensibiliseerimine võib olla selle protsessi üks oluline element.

Kliinilised tõendid toetavad seda võimalust kaudselt: Positronemissioontomograafiat (PET) kasutades Boileau ja tema kolleegid leidsid, et meessoost PG-isikud eraldavad vastusena amfetamiinile (0.4 mg / kg) oluliselt striaadi DA eraldumist kui tervete meeste kontrollrühmad (Boileau et al., 2013). Üldised grupierinevused olid olulised assotsiatiivses ja somatosensoorses striaatumis. Limbilises striaatumis, mis hõlmab tuuma akumulatsioone, rühmad ei erinenud. Kuid PG-ga isikutel korreleerus DA vabanemine jäsemetes otseselt PG-sümptomite raskusega. Need leiud on kooskõlas aju DA radade sensibiliseerimisega PG-s, kuid viitavad ka olulistele erinevustele inimese ainest sõltuvate indiviidide ja amfetamiini sensibiliseerimise klassikalise loommudeliga. Erinevalt PG subjektidest ja loomadest, kes puutusid kokku väikeste amfetamiini annustega (vrd. Robinson et al., 1982), sõltuvalt ainetest sõltuvatel inimestel ilmneb DA vähenenud vabanemine stimuleeriva toimega (Volkow jt, 1997; Martinez jt, 2007) ja loomadelt saadud tõendid viitavad sellele, et see võib peegeldada DA funktsiooni puudulikkust karskuse algfaasis pärast ainete kuritarvitamise liigseid mustreid (Mateo et al., 2005). Uuringutes, kus loomadel on näidatud stimulantide sensibilisatsiooni, täheldatakse DA suurenenud vabanemist tavaliselt pigem limbilises striaatumis kui dorsaalses (assotsiatiivses, somatosensoorses) striaatumis (Vezina, 2004). Kiiresti põhjustatud (st konditsioneeritud) narkootikumide otsimine korduvalt kokaiiniga kokku puutunud loomadel on siiski seotud DA intensiivsema vabanemisega selja kehas - tulemus arvatakse osutavat motiveeritud käitumise harjumuspärasemale vormile (Ito et al., 2002). Seega võib PG-ga patsientide üldine DA vabanemise tõus dorsaalsetes piirkondades olla seotud harjumustepõhise (paindumatu, rutiinse) premeerimise taotlusega, mis hõlmab „progresseerumist ventraalsest rümba enam dorsaalseks domeeniks” (Everitt ja Robbins, 2005, lk. 1481), samas kui raskusest sõltuv DA vabanemine limbilises striaatumis võib nendel isikutel paremini vastata stiimulite sensibiliseerimisele, nagu tavaliselt loomade puhul. PET-i leiud ei suuda tuvastada, kas DA hüperreaktiivsus oli nende PG subjektide eelnev tunnusjoon, hasartmängudega kokkupuute tagajärg või mõne muu protsessi tulemus. Selle küsimuse lahendamiseks on vaja demonstreerida sensibilisatsiooni esilekutsumist kroonilise hasartmänguga kokkupuutumisel isikutel, kes on enne kokkupuudet normaalsed. See tõstatab küsimuse, millised hasartmängude omadused kõige tõenäolisemalt ülitundlikkust põhjustavad.

Skinner märkis, et muutuv tugevdamise ajakava oli hasartmängude veetluse (või vähemalt selle püsivuse) jaoks oluline (Skinner, 1953). Mänguautomaatide mängus tehtud panustamiskäitumine vastab hästi instrumentaalse konditsioneerimise põhiprintsiipidele, mida kajastab eeldatav korrelatsioon rahalise väljamakse ja panuse suuruse vahel järjestikuste keerutuste korral (Tremblay et al., 2011). Seega näib, et muutuva suhtega opereeriv reageerimine pakub mänguautomaatide hasartmängude väliselt kehtivat mudelit.

Värsked uuringud loomadega pakuvad tugevat alust hasartmängude kokkupuute põhjuslikule mõjule sensibiliseerimisele. Singer ja tema kolleegid uurisid 55 1 – h päevaste fikseeritud (FR20) või muutuva (VR20) sahhariini tugevdamise mõju opereeritud kangi vajutamise paradigmas mõju järgnevale lokomotoorsele reaktsioonile väikese annuse (0.5 mg / kg) amfetamiini korral tervetel meestel ( Sprague Dawley) rotid (Singer jt, 2012). Nad püstitasid hüpoteesi, et kui hasartmängud põhjustavad sensibilisatsiooni, peaksid hasartmänge jäljendava muutuva režiimiga kokkupuutuvad rotid ilmutama amfetamiini suhtes suuremat reageeringut kui fikseeritud ajakavaga kokkupuutunud rotid. Nagu ennustatud, näitas VR20-i rühm 50% -list suuremat lokomotoorse reaktsiooni amfetamiinile kui FR20-rühm. Kontrastina näitasid rühmad soolalahuse süstimise järel samaväärset liikumist. Need leiud kinnitavad, et krooniline kokkupuude muutuva tugevdusega on piisav, et kutsuda esile hüperreaktiivsus DA väljakutsega tervetel loomadel, kes on randomiseeritud vastavasse ajakavasse.

Sellest tulemusest tuleneb mitmeid küsimusi: esiteks, mil määral vahendab tajutav situatsioon või selle puudumine operatsiooni reageerimise ja selle tulemuse vahel neid mõjusid? Kas õpitulemuste korral hõlmab see mõju „reageerimise-tulemuse ootust” või võib sarnast efekti näha operatiivse reageerimise puudumisel, st „stiimuli-tulemuse ootusele” Pavlovi paradigmas (vrd. Bolles, 1972)? Teiseks, kas eelneva sündmuse (reageering või stiimul) ja selle tulemuse vaheline juhutumise aste mõjutab sensibiliseerituse astet?

Teine küsimus puudutab ebakindluse rolli sensibiliseerimisel. Näiteks kas mängudel, mille tulemus on tõeliselt juhuslik - täiesti ettearvamatu - on suurem sensibiliseerimise potentsiaal kui mängudel, kus võiduvõimalused on selgelt määratletud, kuid mitte juhuslikud, isegi kui absoluutne tasu on madal? Käesolev uurimistöö käsitles neid küsimusi.

Eksperimentaalset ülesehitust teavitati ahvide oodatava tasu ja DA neuronite reageerimise kohta korraldatud uuringus (Fiorillo et al., 2003). Selle uuringu loomad said mahlatasu (USA) vastavalt muutuva suhtega graafikute 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Graafikud tähistas 1 / 4 erinev CS (ikoonid). 0% ajakava edastas tasu sama sageli kui 100% ajakava, kuid jättis CS välja. Peamiselt sõltuv meede oli DA-neuronite põlemiskiirus CS-i tekkimise ja USA-sse toimetamise või vahelejätmise vahel. Uuring leidis, et DA vastus suurenes tasu kättetoimetamise ebakindluse funktsioonina. Seega kutsus CS 100% ajakava kohaselt esile vähese aktiivsuse, 25 ja 75% ajakavade alusel CS esile mõõduka ja sarnase aktiivsuse taseme ning 50% ajakava kohaselt kutsus CS esile maksimaalse aktiivsuse. Mõlemal juhul suurenes tulistamisprotsent CS-USA intervalli jooksul, st ootuse lähenemisel vilja kandmisele.

Need leiud näitavad, et DA tegevus mitte ainult ei sõltu sellest, kas tasu on kindel (kindel suhe) või ebakindel (muutuv suhe), vaid varieerub ka pöördvõrdeliselt CS-i poolt edastatud teabe hulgaga preemiate kohta. 100% tingimustes kutsub CS esile eeldatava tasu ja ennustab suurepäraselt ka selle kohaletoimetamist. 25 ja 75% tingimustes kutsub CS esile ootuse ja ennustab preemia kättetoimetamist kolm neljast. 50% tingimustes kutsub CS esile ootusi, kuid ei paku teavet tasu kättetoimetamise kohta üksnes juhuse korral. Nende leidude põhjal Fiorillo et al. järeldas: “See ebakindlusest tingitud dopamiini suurenemine võib aidata kaasa hasartmängude rahuldust pakkuvatele omadustele” (lk 1901).

50% muutuva preemia mõju ühe seansi ajal ei tohiks mitme seansi jooksul muutuda, sest preemia tõenäosus jääb igal proovil täiesti ettearvamatuks. Seega, kui kaaluda tingimusi, mis maksimeerivad DA neuronite kroonilise aktiveerimise korduvate hasartmängude episoodide ajal, peaks 50% ajakava andma nii püsiva kui ka kõige tugevama efekti. See on tähelepanuväärne, arvestades, et kaubandusliku mänguautomaadi tuhandete keerutuste puhul täheldatud pikaajalise preemia (väljamakse> 0) määr 45.8% (Tremblay et al., 2011). Seega näib, et muutuv tasu 50% kajastab täpselt hasartmänguseadmete hallatavat väljamaksegraafikut.

Käesolevas uuringus kasutati samu konditsioneerimisskeeme nagu Fiorillo jt. kroonilises kokkupuutes rühmadevahelise kujundusega rottidega. Loomadel tehti ~ 3 nädalat igapäevaseid konditsioneerimisseansse, kus CS (valgus) oli ühendatud USA-ga (väike kogus sahharoosi). Pärast treeningfaasi puhkasid loomad enne sensibiliseerimise hindamist, mida indekseeris liikumisvastus amfetamiinile. Kirjanduse põhjal ennustati, et erineva tasustamisskeemiga kokkupuutuvate rottide ravimivaba liikumisharjumused ei erine, kuid neil on amfetamiini järgselt märkimisväärselt erinevad liikumisvõimalused, kusjuures 50% rühmal on suurem liikumisvastus ravimi suhtes võrreldes teised rühmad annuste jooksul, mis on eeldatav, kui 50% loomad oleksid eelnevalt kokku puutunud amfetamiini enda täiendavate annustega (st rist-sensibiliseerimine).

eksperiment 1

Materjalid ja meetodid

Õppeained

Neli rühma (n = 8 / rühm) täiskasvanud (300 – 350 g) isaseid Sprague-Dawley rotte (Charles River, St. Constant, Quebec, Kanada) paigutati eraldi läbipaistvatesse polükarbonaadikarpidesse (20 × 43 × 22 cm) tagurpidi 12 all: 12 hele-pime tsükkel. Nad said ad libitum juurdepääs toidule ja veele ning eksperimentaatori igapäevane käsitsemine 2-i nädalate jooksul enne uuringut. Iga rühm konditsioneeriti vastavalt ühele neljast muutuvast premeerimisskeemist: 0, 25, 50 või 100%. Selles esialgses uuringus jäeti 75% rühm välja, kuna Fiorillo jt. (2003) leidsid samaväärse CS-järgse DA vabastamise 25 ja 75% tasustamiskavade alusel, nii et mõlemad tingimused tingisid suurema DA vabastamise kui 100% CS-USA tingimus, kuid vähem kui 50% tingimus.

Aparatuur

Juurdepääs sahharoosiesitlustele ja CS-le tagati individuaalselt töötavates konditsioneerimiskarpides (33 × 31 × 29 cm). Iga kast oli varustatud armatuuriajakirjaga, mis asus esiseinal. Tuli oli ajakirja ülaosas asuv tuli. Mootoriga, solenoidiga juhitavat vedelikukannit võiks ajakirja põrandale tõsta. Kasti sündmusi kontrollis Med Associates seadmed ja tarkvara, kasutades MED-PC-s kirjutatud ettevõttesisest programmi. Lokomotoorikatsetusi tehti individuaalselt pleksiklaaspuurides (27 × 48 x 20 cm). Iga puur oli horisontaalse liikumise tuvastamiseks varustatud seiresüsteemiga, mis koosnes kuuest fotokiireelemendist.

Menetlus

koolitus. Uuring viidi läbi vastavalt Kanada loomakaitse nõukogu kehtestatud eetilistele juhistele. Rottide toidupiirang oli uuringu vältel 90% nende kehakaalust ja neid peeti individuaalselt. Iga rott sai 15 päeva sahharoosi tasustamise koolitust (10% vesilahus kontsentratsiooniga 0.06 ml preemia kohta): 5 järjestikused päevad × 3 nädalad, puhkepäevadega. Loomi hoiti enne ja pärast treeninguetappi tavapärasel chow'l; sahharoosiga kokkupuude piirdus viieteistkümne ~ 40-min treeninguga. Iga päevane sessioon koosnes 15 stiimulite esitlustest (valgus; CS), millest igaüks eraldati 120-i uuringute vahelise intervalliga. Valgus asus ajakirja ülemisel paneelil ja jäi põlema 25-ide jaoks, viimaste 5-ide ajal tehti sahharoos kättesaadavaks. Rühma 0 puhul tõsteti sahharoosi taset iga 140-i järel (5-ide jaoks), kuid stiimuli tuli ei põlenud. See võrdsustas intervalli kastme esitluse vahel rühmas 0 ja teistes rühmades (120 + 25 s). Iga raviseanss kestis ~ 40 min. Keskmiselt sai rühm 25 sahharoosi üks kord iga nelja CS esitluse jaoks; rühm 50 sai sahharoosi üks kord iga kahe CS esitluse jaoks ja rühm 100 sai sahharoosi pärast iga CS esitlust.

Testimine. Kaks nädalat pärast viimast sahharoosile juurdepääsu (või “konditsioneerimise”) seanssi hinnati lokomotoorse reaktsiooni d-amfetamiini (AMPH; ip) suhtes. Rottidele tehti kolm 2-h seanssi, et harjuda lokomotoorsete kastidega, millele järgnes kuus AMPH testisessiooni. AMPH-testimispäevad toimusid 1-wk intervallidega. Proovipäevadel manustati rottidele kastidesse harjumiseks 30 min, seejärel manustati neile üks kord 0.5 mg / kg AMPH annust, millele järgnes eraldi nädalasessioonidena viis 1.0 mg / kg annust (üks annus päevas) proovipäevadel 1 kuni 5. . AMPH-järgset liikumist hinnati igal seansil 90 min.

Andmete analüütiline lähenemine

Statistilised analüüsid viidi läbi SPSS-ga (v. 16 ja v. 21; SPSS Inc., Chicago IL). Kohest käitumuslikku reageerimist CS-le hinnati nina pistmise kaudu avasse, kus sahharoos väljastati. Seejärel võrreldi selle intervalli keskel olevate ninakõrvade keskmist arvu (5 s uuringu kohta) sama kestusega ninakõrvade keskmise arvuga (5 s) aja jooksul, mil CS puudus. Grupp × CS-i kohal olevate ja puuduvate ninakõrvalosade ANOVA-d jälgisid, et 15-i sahharoositreeningute ajal toimuvad erinevatel ajakavadel diskrimineerivad reageeringud näpule ja valimatud ninaotsakud.

Ravi mõju lokomotoorsetele reaktsioonidele hinnati rühma × seansi ANOVA-dega ravimivaba harjumusetapi (kolm seanssi), sensibiliseerimiseelse 0.5 mg / kg AMPH-i esilekutsumise (üks seanss) ja viie seansi jooksul 1 mg / kg AMPH-ga. sensibiliseerimisrežiim, kui rühmad eeldasid erinevat vastust korduvatele AMPH annustele. Rühma × seansi ANOVA-d hindasid ka iga AMPH testiseansi ajal ravimivabu lokomotoorseid reaktsioone 30-min süstimiseelse kohanemisfaasi ajal. Planeeritud võrdluste abil hinnati grupi 50 keskmise tulemuse erinevust grupi 0 ja grupi 100 (ilma eeldatava kontrolli vahel) ja rühma XNUMX (määramatuse kontroll puudub) osas t-testidHowell, 1992), kasutades MSOVi ja df-tõrketermineid vastava efekti jaoks (st grupi või rühma × seansi interaktsioon) ANOVA-st (Vein, 1971). Polünoomsete trendide analüüsid testisid seansside jooksul toimunud muutuste profiili.

Et teha kindlaks, kas lähenemisvastused CS juuresolekul ja puudumisel 15 sahharoosi treeningute ajal aitasid muuta lokomotoorseid vastuseid AMPH-le või vahendasid rühmade erinevusi AMPH vastuses, viidi AMPH-l läbi kovariatsiooni järelanalüüsid (ANCOVA-d). lokomotoorsete andmete, sealhulgas kogu ninakõrvalkoobaste summa (summa 15 seansside kohta), kui CS puudus kovariandina. Kovariaadi oluline mõju osutab sellele, et ravimivaba lähenemise vastused mõõtsid (mõjutasid tugevust) rühma või seansi mõju. Rühma või seansi mõju olulisuse vähenemine olulise kovariaadi juuresolekul osutab sellele, et lähenemisvastused vahendasid (arvestasid) rühma või seansi mõju. Grupi- või sessiooniefektide olulisuse langus olulise kovariatsiooniefekti puudumisel peegeldaks lihtsalt statistilise võimsuse kaotust, mis tuleneb df-i ümberpaigutamisest veaterminist kovariaadile, ja see ei mõjutaks tõlgenduse tõlgendamist. grupi või sessiooni mõjud.

Tulemused

Ninahunnikud sahharoosi konditsioneerimise ajal

CS kohal. Joonis 1A näitab rühmade 25, 50 ja 100 keskmist ninakõrgust, samal ajal kui CS oli kohal 15 sahharoosi konditsioneerimisseanssidel (ninakõrvad ei olnud kodeeritud rühmale 0, mis ei saanud CS-d). 3i grupp × 15i seanss ANOVA andis rühma olulised peamised efektid, F_{(2, 21)} = 5.63, p = 0.011 ja seanss, F_{(14, 294)} = 14.00, p <0.001 koos olulise grupi × seansi interaktsiooniga, F_{(28, 294)} = 2.93, p <0.001. Joonis 1A osutab sellele, et seansi peamine mõju kajastas ninakõrvalkoobaste suurenemist kõigis kolmes rühmas seansside vahel ja rühma peamine efekt kajastas üldiselt kõrgemaid üldskoori rühmas 100 vs. grupis 25 keskmiste hinnetega rühmas 50. Märkimisväärne grupi × seansi interaktsioon kuupmeetrilise suundumuse korral, F_{(2, 21)} = 4.42, p = 0.030, näitas ninakõrvade kiiret tõusu, langust ja tasandamist grupi 100 sessioonide ajal, võrreldes rühmas 50 esineva lineaarse suurenemisega ja grupi 25 sessioonide madalama lineaarse suurenemisega.

 

Joonis 1. Sprague Dawley rottide rühmade 15-i sahharoositreeningute keskmised (SE) lähenemisvastused (ninakõrvad)n = 8 / rühm), mis on eksponeeritud sahharoosi tasule (10% lahus) ja mida antakse 0, 25, 50 või 100% muutuva ajakava alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. (A) Hinded, kui CS oli kohal (5 s x 15 katsed). (B) Hinded, kui CS puudus (5 × 15 s keskmine, kui tuli oli väljas).

CS puudub. Joonis 1B näitab kõigi nelja rühma keskmist ninakõrbust samaväärse kestuse jooksul (5 s x 15 uuringud), keskmistatud aja jooksul, mil CS puudus. 4i grupp × 15i seanss ANOVA andis rühma olulised peamised efektid, F_{(3, 28)} = 7.06, p = 0.001 ja seanss F_{(14, 392)} = 2.84, p <0.001 koos olulise grupi × seansi interaktsiooniga, F_{(42, 392)} = 3.93, p <0.001. Märkimisväärne grupi × seansi vastasmõju teise astme trendi jaoks, F_{(3, 28)} = 3.91, p = 0.019, ilma kuubitrendi interaktsioonita, F_{(3, 28)} <0.93, p > 0.44 peegeldas ninahüpete “inverteeritud U” profiili 0 rühma seansside ajal, võrreldes teiste rühmade seansside üldiselt stabiilse profiiliga.

Harjumus lokomotoorsetes kambrites

4 grupp × 3 seanss ANOVA andis seansi peamise efekti, F_{(2, 56)} = 5.67, p = 0.006 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(3, 28)} <1.60, p > 0.21. Keskmised (SE) kiirte purunemised 2 tunni jooksul olid liikumisboksides 1681 (123) 1. seansil, 1525 (140) 2. seansil ja 1269 (96) seansil 3. Kavandatud võrdlustel ei leitud olulisi erinevusi rühma 50 ja rühma vahel 0 või rühm 100 esimesel või viimasel harjumusseansil, t₍₈₄₎ <1.69, p > 0.05. Seega, AMPH puudumisel oli katsekastidega korduv kokkupuude seotud spontaanse liikumisaktiivsuse vähenemisega neljas rühmas (st Sessioni efekt) ja sahharoosi treeninggraafiku funktsioonina diferentsiaalse reageeringuta (interaktsioon puudub) .

Testiseansid

Sensibiliseerimise mõju 0.5 mg / kg AMPH nakatamist.

Süstimiseelne liikumine. 4 grupi ühesuunaline lokomotoorse vastuse ANOVA 30-min süstimiseelse kohanemisfaasi ajal ei andnud olulist mõju, F_{(3, 28)} <1.05, p > 0.38. Planeeritud võrdlustel ei leitud olulist erinevust rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel, t₍₃₂₎ <0.87, p > 0.40. Seetõttu ei arvestanud algsed erinevused süstimiseelses liikumises rühma erinevusi liikumisvastuses AMPH-le. Keskmised (SE) valgusvihu katkestused olid 559 (77).

Süstimisjärgne liikumine vs lõplik ravimitevaba harjumissessioon. Neljanda rühma × 4 seanss ANOVA võrdles rühmade liikumisvastuseid viimasel harjumisseansil ja vahetult pärast sensibiliseerimist 2 mg / kg AMPH-ga. Harjumusseansi (0.5 min) skaleid hinnati vastavalt AMPH testiseansi kestusele (120 min) (toore harjumuse skoor × 90/90). Analüüs andis Sessionile olulise peamise efekti, F_{(1, 28)} = 34.16, p <0.001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(3, 28)} <2.26, p > 0.10. Sessioni efekt peegeldas keskmise (SE) kiirte purunemise suurenemist vastusena doosile 952-lt (72) 1859-le (151). Planeeritud võrdlustel ei leitud olulisi erinevusi rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel vastusena annusele, t₍₅₆₎ <1.72, p > 0.10. Kuid kiirte purunemise skooride (M; SE) järjestus oli hüpoteesiga kooskõlas: rühm 50 (2205; 264)> rühm 0 (2025; 203)> rühm 100 (1909; 407)> rühm 25 (1296; 299) .

1 mg / kg AMPH mõju.

Süstimiseelne liikumine. 4 grupp × 5 seansi ANOVA lokomotoorse vastuse kohta 30-min süstimiseelse kohanemisfaasi ajal 1 mg / kg AMPH testisessioonidel andis sessiooni peamise efekti, F_{(4, 112)} = 43.64, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(3, 28)} <0.97, p > 0.42. Planeeritud võrdlustel ei leitud esimesel või viimasel testiseansil olulist erinevust rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel; t₍₁₄₀₎ <0.84, p > 0.30. Seetõttu ei arvestanud algtaseme erinevused liikumises rühma erinevusi liikumisvastuses AMPH-le. Annuseelse harjumuse faasi keskmised (SE) kiiruse purunemise skoorid 1. – 5. Seansil olid: 454 (30), 809 (53), 760 (36), 505 (35), 756 (39).

Süstimisjärgne liikumine. Joonis 2 näitab viie 1 mg / kg AMPH (üks kord nädalas) süsti mõju liikumisaktiivsuse skooridele neljas rühmas. 4 grupp × 5 seanss ANOVA andis seansi peamise efekti, F_{(4, 112)} = 8.21, p <0.001, grupi marginaalne peamine mõju, F_{(2, 45)} = 3.28, p = 0.085 ja olulist interaktsiooni pole, F_{(12, 122)} <0.77, p > 0.68.

 

Joonis 2. Keskmine (SE) lokomotoorse reaktsiooni (elektronkiirguse kiirte murdumiste arv 90 min kohta) väärtuseni 1 mg / kg d-amfetamiini (ip) 5 iganädalasetel sessioonidel Sprague Dawley rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus), toimetatud 0, 25, 50 või 100% muutuva ajakava alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. *p Planeeritud võrdluste põhjal rühma 0.05 ja rühma 50 ning rühma 0 keskmise erinevuse korral <100.

Planeeritud võrdluste käigus selgus, et rühma 50 skoorid erinesid oluliselt rühma 0, t₍₁₄₎ = 2.19, p = 0.037 ja rühm 100, t₍₁₄₎ = 2.36, p = 0.025 [ja erines grupist 25 marginaalselt, t₍₁₄₎ = 2.03, p = 0.051]. Seega ületas 50 rühmas lokomotoorse reaktsiooni 1 mg / kg AMPH-le kõigil viiel katseseansil usaldusväärselt ülejäänud kolme rühma vastust. Polünoomsete trendide analüüs tuvastas seansside vahel olulise ruutkeskmise suundumuse, F_{(1, 28)} = 32.47, p <0.0001 ja muid olulisi suundumusi pole, F_{(1, 28)} <1.78, p > 0.19. Joonis 2 näitab, et see tulemus peegeldas seansside vahel ümberpööratud U-mustrit.

Ninakõrva reageerimise varieerumise kontroll sahharoositreeningu ajal

ANNOVA järelkontroll lokomotoorsete reageeringute osas 1 mg / kg AMPH-le koos kovariandina ninakõrvadega (CS olemas) kolmes CS-i saanud rühmas andis rühma marginaalse põhiefekti, F_{(2, 20)} = 3.07, p = 0.069 ja olulisi muutujatega seotud efekte pole, F_{(4, 80)} <0.05, p > 0.85. Seega ei selgitanud treeningu ajal reageerinud lähenemisviis märkimisväärset varieerumist liikumisvastuses 1 mg / kg AMPH-le rühmades 25, 50 või 100.

ANNOVA järelkontroll lokomotoorsete reageeringute osas 1 mg / kg AMPH-le koos ninakõrvadega (CS puuduvad) kui kovariaator, andis kovariaadi olulise mõju, F_{(1, 27)} = 6.17, p = 0.020, grupi oluline põhiefekt, F_{(3, 27)} = 4.13, p = 0.016, marginaalne seanss × kovariatiivne interaktsioon, p = 0.080 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 108)} <1.48, p > 0.21. Seega seletas treeningu ajal reageerimata (valimatu) lähenemine liikumisvastuse olulist varieerumist 1 mg / kg AMPH-le. Kuid see variatsioon ei kattunud rühmaga seotud dispersiooniga, sest kovariaadi kaasamine analüüsi pigem suurendas kui vähendas rühma efekti olulisust.

Arutelu

Ninaotste andmed CS-i olemasolu ajal näitasid, et rühmad omandasid seose CS-i ja sahharoosi manustamise vahel, mida näitas treeningute ajal täheldatud vastuste suurenemine. Kui CS oli kohal, siis seanssidele reageerimise profiil näitas, et 100 ja 50% CS-USA ajakavad olid lähenemisviisi esilekutsumisel võrdselt tõhusad, samas kui 25% ajakava kutsus esile kii-indutseeritud lähenemisviisi tagasihoidlikuma suurenemise. Ninaotste andmed CS-i puudumisel viitavad sellele, et rühmad, kes said ükskõik millise kolmest CS-sahharoosi treenimiskavast (rühm 25, 50, 100), õppisid kiiresti oma ninakõrvalkoobasid CS-i puudumisel vähendama, samas kui rühma 0 kuuluvad loomad , mis ei saanud CS-d, õppis alles pärast ulatuslikku koolitust oma lähenemiskäitumist piiratud määral vähendama.

Kohanemisandmed näitavad, et rühmad ei erinenud enne AMPH-d ja korduvat katsekastidega kokkupuudet seostati ravimivaba lokomotoorse reaktsiooni vähenemisega. Seetõttu ei saa rühmadevahelisi erinevusi ja suurenenud reageerimist AMPH korduvate annuste kasutamisel seostada olemasolevate erinevustega lokomotoorse käitumisega.

0.5 mg / kg AMPH-ga sensibiliseerimisele eelnenud uuringu tulemused kinnitasid, et ravim suurendas lokomotoorset aktiivsust võrreldes viimase ravimivaba kohanemispäevaga. Kooskõlas hüpoteesiga oli 50 grupp kõrgem kui rühmad 0 või 100 (nagu ka grupp 25) annusele reageerimise keskmise osas, ehkki rühmadevahelised keskmised erinevused polnud olulised.

Sensibiliseerimisseansside puhul näitasid rühmadevahelised kavandatud võrdlused, et eelnev kokkupuude 50% konditsioneeritud sahharoositasuga tõi märkimisväärselt lokomotoorse ravivastuse amfetamiini annusele 1.0 mg / kg võrreldes ülejäänud kolme skeemiga. See efekt ilmnes esimesest annusest alates ega muutunud korduvate annuste kasutamisel märgatavalt. Trendianalüüs näitas kahefaasilist vastust (kogu proovi korral) korduvatele AMPH annustele, mis suurenesid kuni kolmanda annuseni ja seejärel vähenesid. Kovariaadina jälgitud ANCOVA jälgimine ninapokkidega (CS puudub) kinnitasid, et erinevusi nelja rühma liikumisvastuses 1 mg / kg AMPH-le ei vahendanud sahharoositreeningute ajal reageerimata valikuline lähenemine.

Grupiefekt sensibiliseerimisseansside ajal on kooskõlas meie hüpoteesiga. Kahefaasiline sessiooniefekt ei ole kooskõlas oodatava jätkuva eskaleerimisega lokomotoorsete reaktsioonide korral korduvate AMPH annustega. See võib olla seotud annustamisintervalliga. Selle probleemi lahendamiseks tuleks kasutada protseduuri (alternatiivsed päevased annused), mis näib indutseerivat lokomotoorse vastuse järjepidevat eskaleerumist 1.0 mg / kg AMPH annustega (st käitumuslik sensibiliseerimine). AMPH-d sensibiliseeriva raviskeemi mõju hilisemale reageerimisele teisele 0.5 mg / kg nakatamisele toetaks veelgi selle toime üldisust. Soolaprobleemi lisamine enne AMPH-d määraks eeldatava ootuse või süstimisega seotud (nt stressi) mõju rolli lokomotoorsele reaktsioonile AMPH-le. 75% -lise konditsioneeritud sahharoosirühma kaasamine aitaks selgitada tasude määramatuse ja premeerimissageduse rolli rühmade 50 ja rühma 25 vastuste mustris. Lisaks sellele, et võimaldada hinnata (ANCOVA) ravimivabade lähenemisviiside vastuste osakaalu liikumisel AMPH-i korral (kasutades ninakõrvarõngaid koos CS-ga kui kovariandina), kodeeriti ninakõrvad ka rühma 0 selle ajavahemiku jooksul, mil CS esines teistes neljas rühmas (st nii, et kõigi viie rühma - sealhulgas rühma 0, mille CS-d ei saanud - ninakõrvalkoobasid - saaks kaasata kovariatsiooni analüüsi koos kovariaadina esineva CS-ga). Need täpsustused lisati katsesse 2.

eksperiment 2

Materjalid ja meetodid

Katse 2 metoodika oli sarnane eksperimendi 1 metoodikaga, kuid muudeti, et paremini lähendada raviskeemi, mis leidis usaldusväärselt indutseerivat AMPH sensibiliseerimist (Fletcher et al., 2005). Muudatused olid järgmised: (a) 75% CS-sahharoosi rühm (n = 8); (b) Sahharoositreeningu ajal said rotid (välja arvatud rühm 0) 20 CS (kergeid) esitlusi (erinevalt 15 katses 1); (c) CS-esitlused eraldati 90-i keskmise uuringutevahelise intervalliga; vahemik: 30 – 180 (võrreldes 120 katsega 1), mis kompenseerib treeningkatsete kasvu, et võrdsustada iga treeningu kestus katse 1 kestusega; d) iga kolme kohanemisseansi kestust lühendati 120 väärtusest 90 min, et see vastaks katseseansside kestusele; e) Süstimise lokomotoorsete mõjude hindamiseks lisati soolalahus (ip, 1 ml / kg) (90 min) (sahharoosijärgne koolituspäev 8). Rep (nt ootus, stress); (f) 1 mg / kg sensibiliseerimisseansid toimusid pigem nädalavahetustel (treeningujärgsed päevad 12 – 21), mitte nädalase intervalliga, nagu eksperimendis 1; g) Lisaks sensibiliseerimisele 0.5 mg / kg AMPH-ga (treeningjärgne päev 9) lisati teine ​​sensibiliseerimisjärgne 0.5 mg / kg AMPH-proov (sahharoosi järgne koolituspäev 28), et testida sensibiliseeriv toime annuste vahel; (h) ninakorgid, kui CS oli olemas, kodeeriti kõigi rühmade jaoks (sealhulgas rühm 0); (i) ninaotsad, kui CS puudus, registreeriti vahetult enne CS-i algust 5-i intervalliga, et ennustada enneaegsele lähenemisele reageerimist.

Tulemused

Ninahunnikud sahharoosi konditsioneerimise ajal

5i grupp × 15i seanss × 2i faas (CS olemas, CS puudub) Ninakõrvitsade ANOVA andis rühma olulised peamised mõjud, F_{(4, 19)} = 2.89, p = 0.050, seanss F_{(14, 266)} = 2.28, p = 0.006 ja faas, F_{(1, 19)} = 14.72, p = 0.001, aga ka oluline kolmesuunaline interaktsioon, F_{(56, 266)} = 1.38, p = 0.050. Paneelid (A, B) joonisel fig 3 joonistage rühmade keskmine nina pistmise skoor vastavalt CS praeguse ja CS puuduva faasi korral. Kahe paneeli võrdlusest selgub, et faasi peamine mõju peegeldas üldisemaid nina vastuse reaktsioone, kui CS oli olemas või puudus. Seetõttu esinesid vastused märksa sagedamini kui enneaegsed vastamata vastused. Grupi ja seansi peamisi mõjusid ei suudetud kõrgema astme interaktsiooni tõttu hõlpsasti tõlgendada. Viimane tulemus peegeldas viie rühma skooride ühtlustumist seansside ajal suhteliselt stabiilselt madalal tasemel, kui CS puudus (joonis 3B) koos tulemuste lahknemisega kõrgete (rühm 75, rühm 100), vahepealsete (rühm 50) ja madalamate (rühm 0, rühm 25) ninakõrguse tasemetega, mis reageerivad seansside jooksul, kui CS oli kohal (joonis 3A). Madalama järgu polünoomilistest suundumustest (lineaarne, ruutkeskmine, kuupmeeter) sai oluliseks ainult lineaarse trendi kolmepoolne interaktsioon, F_{(4, 19)} = 2.32, p = 0.094, kajastades ninakõrvade üldist monotoonset suurenemist grupi 75 sessioonide ajal ja suhteliselt kiiremat stabiliseerumist kõrgetel, keskmistel ja madalatel reageerimise tasemetel teistes rühmades, kui CS oli olemas.

 

Joonis 3. Sprague Dawley rottide rühmade 15-i sahharoositreeningute keskmised (SE) lähenemisvastused (ninakõrvad)n = 8 / rühm), mis on eksponeeritud sahharoosi tasule (10% lahus) ja mida antakse 0, 25, 50, 75 või 100% muutuva ajakava alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. (A) Hinded, kui CS oli kohal (5 s x 20 katsed). (B) Hinded, kui CS puudus (5 × 20 s keskmine, kui tuli oli väljas).

Harjumus lokomotoorikastides

Ravimivabade lokomotoorsete reaktsioonide 5 grupp × 3 seanss ANOVA andis seansi olulise efekti, F_{(2, 70)} = 60.01, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <0.70, p > 0.60. Esimese ja viimase harjumisseansi 50. rühma plaanipärane võrdlus rühma 0 ja rühmaga 100 ei andnud olulist mõju, ts <0.84, p > 0.40. Seetõttu ei erinenud võtmerühmades keskmine ravimivaba liikumisvastus enne testimist. Keskmine (SE) kiirete purunemiste arv 90 minuti jooksul oli 2162. seansil 118 (1), 1470. seansil 116 (2) ja 1250. seansil 98 (3).

Testiseansid

Soolalahus. 5-grupi × 2-i seanss ANOVA võrdles lokomotoorse reageeringu lõppu kohanemisseansi ja soolalahuse manustamise seansi vahel. ANOVA andis Sessioni peamise efekti, F_{(1, 35)} = 62.46, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <0.65, p > 0.64. Joonis 4 Joonistab rühma keskmise ja näitab, et seansi efekt kajastas lokomotoorse reaktsiooni üldist langust viimasest ravimivabast harjumissessioonist soolalahuse seansini, mis rühmade kaupa ei varieerunud. Seega jätkus lokomotoorse reaktsiooni langus kolme kohanemisseansi ajal neljandal ravimivabal kokkupuutel katsekastidega.

 

Joonis 4. Keskmine (SE) lokomotoorse reaktsiooni väärtus (elektronkiirguse kiirte purunemiste arv 90 min kohta) viimasel 3i ravimivaba harjumise seansil ja järgneval seansil pärast soolalahuse süstimist (ip, 1 ml / kg) Sprague Dawley rühmades. rotid (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100.

0.5 mg / kg AMPH mõju.

Süstimiseelne liikumine. 5-grupi × 2-seansi ANOVA süstimiseelse liikumisega (30-min) sensibiliseerimiseelse ja -järgse 0.5 mg / kg AMPH-testi päevadel andis sessiooni olulise efekti, F_{(1, 35)} = 13.39, p = 0.001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <1.79, p > 0.15. Planeeritud võrdlustel ei leitud esimesel seansil olulisi erinevusi rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel; t₍₇₀₎ <1.00, p > 0.30. Kuid teisel (sensibiliseerimisjärgsel) seansil näitas grupp 50 (1203; 121) oluliselt rohkem eeltöötluse kiirte purunemisi (M; SE) kui rühm 100 (756; 103), t₍₇₀₎ = 5.11, p <0.001, kuid ei erinenud rühmast 0 (1126; 211), t₍₇₎ <0.88, p > 0.40. Seetõttu ei arvestanud algtaseme erinevused liikumises rühma erinevusi liikumisvastuses esimesele 0.5 mg / kg AMPH annusele, kuid võisid aidata kaasa erinevustele rühma 50 ja rühma 100 vahel liikumisvastuses teisele 0.5 mg / kg AMPH annusele . Esimesel ja teisel 0.5 mg / kg AMPH testiseansil olid süstimiseelse faasi keskmised (SE) kiirte purunemised 757 (41) ja 974 (59).

Süstimisjärgne liikumine. 5-grupi × 2-seansi ANOVA lokomotoorse vastuse kohta 0.5 mg / kg AMPH-le enne ja pärast 5-i annust sensibiliseerivat režiimi andis Sessioni peamise efekti, F_{(1, 35)} = 76.05, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <1.10, p > 0.37. Joonis 5 näitab iga rühma ja sessiooni keskmisi hindeid.

 

Joonis 5. Lokomotoobi keskmine (SE) reaktsioon (elektronkiirguse kiirte purunemiste arv 90 min kohta) väärtusele 0.5 mg / kg d-amfetamiini eraldi seanssidel enne ja pärast d-amfetamiini sensibiliseerivat režiimi 5-seansil (1.0 mg / kg; ip) seansi kohta) Sprague Dawley rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. *p Planeeritud võrdluste põhjal rühma 0.05 ja rühma 50 ning rühma 0 keskmise erinevuse korral <100.

Jooniselt nähtub, et seansiefektiga kaasnes keskmiste (SE) kiirguse keskmiste (SE) kiiruste märkimisväärne suurenemine 90 min kohta alates 0.5 mg / kg annusest 1, 3674 (216) kuni 0.5 mg / kg annusest 2, 6123 (275). Koostoime või grupiefekti puudumine näitas, et sensibiliseerimine AMPH suhtes ei varieerunud rühmade vahel usaldusväärselt. Vaatamata ANOVA rühmas esinevate oluliste mõjude puudumisele nähtub joonise kontrollimisel, et 50 grupp reageeris kõige paremini nii esimesele kui ka teisele 0.5 mg / kg annusele. Esimese 0.5 mg / kg annuse vastuse kavandatud võrdlustel ei ilmnenud olulist erinevust rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel, ts₍₃₅₎ <0.48, p > 0.50. Kuid vastusena teisele (post-sensibiliseerimisele) 0.5 mg / kg annusele näitas rühma 50 oluliselt suurem liikuvus kui rühmas 0, t₍₃₅₎ = 2.00, p <0.05, samuti rühm 100, t₍₃₅₎ = 3.29, p <0.01.

Võttes arvesse ülalnimetatud 0.5 mg / kg AMPH seansi olulist rühmasisest erinevust süstimiseelse liikumise osas, viidi läbi 5 rühma × 2 seansi ANCOVA jälgimine lokomotoorse vastuse osas 0.5 mg / kg AMPH suhtes, kontrollides enne süstimisliikumine teisel seansil. See analüüs andis kovariaadi olulise mõju, F_{(1, 34)} = 8.65, p = 0.006, seansi peamine efekt F_{(1, 34)} = 10.83, p = 0.002 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 34)} <0.85, p > 0.50. Oluline on see, et ANCOVA MS-i vea ja df-vea põhjal kavandatud võrdlused kinnitasid, et keskmine liikumisvastus AMPH teisele 0.5 mg / kg annusele püsis 50. rühmas oluliselt suurem kui rühmas 100, t₍₃₄₎ = 3.09, p <0.01 ja rühm 0, t₍₃₄₎ = 1.88, p <0.05 (ühe sabaga), kui kontrolliti süstimiseelset varieerumist 2. seansist. Seega ilmnes rühmas 50 sensibiliseerimisjärgse lokomotoorse reaktsiooni väärtus 0.5 mg / kg AMPH suhtes märkimisväärselt suurem kui rühmas 100 või rühmas 0 ning neid grupierinevusi ei vahendatud süstimiseelsel liikumisel testipäevadel.

1.0 mg / kg AMPH mõju.

Süstimiseelne liikumine. 5 grupi × 5 seansi ANOVA 30-min süstimiseelse tulemuse kohta 1 mg / kg AMPH sensibiliseerimisseanside korral andis Sessioni peamise efekti, F_{(4, 140)} = 16.70, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <0.94, p > 0.45. Planeeritud võrdlustel ei leitud esimesel seansil olulist erinevust süstimiseelses liikumises rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel; t₍₁₇₅₎ <1.66, p > 0.10. Kuid viimasel seansil näitas grupp 50 (1167; 140) oluliselt rohkem valgusvihku (M; SE) kui grupis 100 (1000; 99), t₍₁₇₅₎ = 2.35, p <0.05, kuid ei erinenud rühmast 0 (1085, 120), t₍₁₇₅₎ <1.16, p > 0.20. Seetõttu aitasid süstimiseelse liikumise erinevused põhjustada erinevusi rühmade 50 ja 100 vahel liikumisvastuses lõplikule 1 mg / kg AMPH annusele. Keskmised (SE) valgusvihu katkemised proovi süstimiseelses faasis 1. – 5. Seansil olid: 810 (46), 784 (52), 760 (53), 726 (46), 1009 (51).

Süstimisjärgne liikumine. 5 grupp × 5 seansi ANOVA vastustest 1 mg / kg AMPH-le andis seansi olulise efekti, F_{(4, 140)} = 6.72, p <0.001, marginaalne grupi × seansi interaktsioon, F_{(16, 140)} = 1.57, p = 0.085 ja sellel puudub rühma peamine mõju, F_{(4, 35)} <0.44, p > 0.77. Polünoomide suundumuste analüüs näitas olulist lineaarset suundumust, F_{(1, 35)} = 9.19, p = 0.005 ja kuupmeetriline trend, F_{(1, 35)} = 21.63, p <0.001, seansside 1 kuni 5 jooksul. Joonis 6 näitab iga rühma ja seansi keskmisi lokomotoorseid punkte.

 

Joonis 6. Keskmine (SE) lokomotoorse reaktsiooni (elektronkiirguse kiirte murdumiste arv 90 min kohta) väärtuseni 1 mg / kg d-amfetamiini (ip) 5 iganädalasetel sessioonidel Sprague Dawley rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100.

Jooniselt nähtub, et seansi efekt kajastas kogu proovi keskmise (SE) kiirguspauside olulist suurenemist kogu proovi korral seansist 1, 4624 (213) kuni sessioonini 5, 5736 (272), kinnitades sensibiliseerumist AMPH suhtes. Kuupmeetriline trend tähistas seansside 1, 3 ja 5 suhtelist maksimumi, seansside 2 ja 4 langustega, eriti rühmade 0 ja 50 puhul. Jooniselt selgub ka, et vaatamata olulise interaktsiooni puudumisele näitas rühm 25 seansside jooksul järk-järgult suuremat lokomotoorse reaktsiooni ja erines oluliselt teistest 4 ja 5 seansside rühmadest (vastavalt 9 ja 22%, kui järgmine kõrgeim rühm). Planeeritud võrdluste käigus leiti, et rühm 50 ei erinenud oluliselt rühmadest 0 ega 100, t₍₁₇₅₎ <0.89, p > 0.40 esimesel või viimasel 1 mg / kg AMPH testiseansil.

Ninakõrva reageerimise varieerumise kontroll sahharoositreeningu ajal

Kaks 5 rühma × 2 sessiooni ANCOVA-d, mis käsitlevad lokomotoorse vastuse suurenemist 0.5 mg / kg AMPH-le enne ja pärast sensibiliseerimisrežiimi, sealhulgas kogu ninaotsad sahharoositreeningu ajal, kui CS on olemas ja CS puuduvad eraldi kovariaatoritena, ei leidnud kummagi kovariaadi korral olulist mõju, F_{(1, 18)} <1.03, p > 0.31. Seetõttu ei vahendanud treeningu ajal reageerimine lähenemisviisides rühmade erinevusi vastuses annusele 0.5 mg / kg AMPH.

Kaks 5 rühma × 5 seansi ANCOVA-d, mis esinesid sensibiliseerimisseansside ajal 1 mg / kg suhtes lokomotoorse vastuse korral (ninakõrvaltooted olemas, CS puuduvad), kuna eraldi kovariaadid ei andnud CS-i olemasolul kovariaadi olulist mõju, F_{(4, 104)} <1.04, p > 0.38 ja kovariaadi marginaalne peamine efekt CS puudumisel, F_{(1, 18)} = 3.32, p = 0.085.

Arutelu

Selle uuringu tulemused ei toetanud järjepidevalt hüpoteesi, et 50-grupp demonstreerib seansside jooksul suuremat lokomotoorseid reaktsioone kui teised rühmad. 1 mg / kg AMPH andmed kinnitasid sensibiliseerumise tekkimist alternatiivse annustamisrežiimi kasutamisel. Rühmadevaheline muster näitas suundumust suurema sensibiliseerimise järele rühmas 25 viimastel sessioonidel, rühmas 50 selliseid tõendeid ei olnud. Seevastu 0.5 mg / kg annuse tulemused osutasid rühmas 50 suurenenud sensibiliseerimise suundumusele, kinnitades samal ajal rühmade liikumisvõime olulist üldist suurenemist teise suhtes võrreldes esimese 0.5 mg / kg AMPH annusega. Soolalahuse süstimise tühine mõju kinnitas, et eeldatav või süstimisega seotud stress ei aidanud kaasa AMPH mõjule.

Ninaotsaku andmed näitasid taas lähenemisviisile reageerimise üldist suurenemist treeningute ajal, kui CS oli olemas, ilma vastava puudumisega, kui CS puudus. Seetõttu näisid loomad omandavat seose CS-i ja sahharoosiauhindade vahel. Grupilised erinevused ninakõrvalsageduste esinemissageduses, kui CS oli olemas, vastavad enam-vähem vastavate ajakavade kohaste tasude esitamise sagedusele: rühmad 75 ja 100 näitavad kõige rohkem ninakõrgusi, rühmad 50 näitavad ninakõrvade keskmist arvu ja rühmad 0 ja 25 kuvab kõige vähem ninakõrvu. Need tulemused viitavad sellele, et CS pidi kontrollima lähenemisviisi, järgides üldist tasu tõenäosust. Ehkki spekulatiivne, võib 50 rühmas 2 esineva CS-ga esinevate madalamate ninakõrvaltoimete üks võimalik seletus katse 1 vs. katse 1 puhul olla uuringutevahelise intervalli lühendamine, kuna pikemad uuringutevahelised intervallid (eksperiment XNUMX) näivad soodustavat impulsiivset kalduvused ja see on seotud DA suurenenud voolavusega eesmise cingulate, prebicic ja infralimbic cortices (Dalley et al., 2002). Seetõttu võis katse 30 (ja 2) katsetevahelise intervalli 3% -line lühendamine muuta kortikaalse DA taset ja edendada selektiivsemat (st juhinduda tasu suhtelisest sagedusest) versus impulsiivset (mitte juhindumist tasude sagedusest) vastates rühmas 50 katse 2 treeningkatsete ajal, võrreldes katsega 1.

Ninakõrvalkoobastel esinevate oluliste kovariaadiga seotud mõjude puudumine CS-i praeguses seisundis ANCOVA-des viitab sellele, et sahharoositreeningu ajal reageerimine ei vahendanud CS-i sahharoosi erineva manustamise ajakava reageeringut AMPH-le. Kovariaadi marginaalne oluline mõju CS-i puudumise korral ANNOVA-s lokomotoorsete reageeringute korral 1 mg / kg AMPH-le viitab sellele, et kalduvus enneaegsele ravimivabale reageerimisele seletas mõnda AMPH-i lokomotoorse toime varieeruvust sensibiliseerimisseansside ajal.

Üheskoos näitavad tõendid, et konditsioneerimisajaloo mõju võib olla paremini märgatav 0.5 AMPH kui 1 mg / kg AMPH korral ja et protokoll, mis tekitab sensibilisatsiooni muu manipuleerimise puudumisel, võib varjata või muuta ülearuseks oletatava mõju sensibiliseerimist soodustav käitumuslik manipuleerimine (st krooniline muutuv tasu).

Käitumise sensibiliseerimine AMPH suhtes on laboris tugev mõju. Väljaspool laboratooriumi eskaleerub krooniline patoloogiline tase vaid vähesel määral patoloogilise tasemeni. Ehkki sensibiliseerimisrisk on seotud sõltuvuse (või uimastite otsimise) riskiga, eriti psühhostimulantide (Vezina, 2004; Flagel et al., 2008), paljud tegurid peale sensibiliseerimisriski võivad eelsoodumuseks olla sõltuvus (nt Verdejo-Garcia et al., 2008; Conversano jt, 2012; Volkow jt, 2012). Sellegipoolest võivad sensibiliseerimisele haavatavad tunnustegurid mõjutada konditsioneerimise ajalugu, et rõhutada ettearvamatu kasu (st 50% CS-USA ajakava) mõju DA süsteemi reaktsioonivõimele. Selle võimaluse uurimiseks kasutati katses 3 sama protseduuri nagu katses 2, kuid Sprague Dawley tüve rottide asemel kasutati Lewise tüve.

Sprague Dawley rottidel on DA transporterite keskmised tasemed, madalamad kui Wistari tüve rottidel (Zamudio jt, 2005), kuid kõrgem tase kui Wistar-Kyoto rottidel („depressiivne“ tüvi) tuumade tuumades, amügdalas, ventraalses tegmentaalses piirkonnas jarodus nigra (Jiao jt, 2003). See profiil võib muuta Sprague Dawley rotid DA funktsiooni keskkonna- või farmakoloogiliste manipulatsioonide suhtes ainult mõõdukalt tundlikuks. Seevastu Lewise rottidel on võrreldes teiste tüvedega (nt F2) madalad DA transporterite, aga ka D3 ja D344 DA retseptorite tuumadibrandus ja dorsaalne striaatum.Flores jt, 1998). Need morfoloogilised erinevused võivad aidata kaasa Lewise rottide erinevale reageerimisele DA manipulatsioonidele. Lewise rottidel on ka eksperimentaalsete ravimimanipulatsioonide osas rõhutatud reaktsioonid võrreldes teiste tüvedega (nt F344). Kõige tähtsam on see, et Lewise rottidel on sensibiliseeritus metamfetamiini suhtes suurem, mida iseloomustab madal vastus algannustele, kuid suurem vastus järgnevatele annusteleCamp jt, 1994). Lewise rottidel on ka kokaiini erinevate annuste (Kosten et al., 1994; Haile jt, 2001). Sellele mõjude mustrile tuginedes arvasime, et Lewise rotid võimaldavad meil uurida, kas tundlikkus ülitundlikkuse suhtes võimendab konditsioneerimisskeemi mõjusid järgnevale vastusele AMPH-le.

eksperiment 3

Materjalid ja meetodid

Metoodika oli sama nagu eksperimendis 2, välja arvatud Lewise rottide kasutamine (saabumisel 200 – 225 g, Charles River, Quebec, Kanada).

Tulemused

Ninahunnikud sahharoosi konditsioneerimise ajal

5i grupp × 15i seanss × 2i faas (CS olemas, CS puudub) Ninakõrvitsade ANOVA andis rühma olulised peamised mõjud, F_{(4, 34)} = 6.12, p = 0.001, seanss, F_{(14, 476)} = 3.42, p <0.001 ja faas, F_{(1, 34)} = 20.83, p <0.001, samuti märkimisväärne kolmepoolne interaktsioon, F_{(56, 476)} = 1.56, p = 0.008. Paneelid (A, B) joonisel fig 7 joonistage rühmade keskmine nina pistmise skoor vastavalt CS praeguse ja CS puuduva faasi korral. Kahe paneeli võrdlusest selgub, et faasi peamine mõju peegeldas üldisemaid nina vastuse reaktsioone, kui CS oli olemas või puudus. Seetõttu esines vastusevariante oluliselt sagedamini kui eelküpsemaid vastuseid. Grupi ja seansi peamisi mõjusid ei suudetud kõrgema astme interaktsiooni tõttu hõlpsasti tõlgendada. Kolmesuunaline interaktsioon kajastas viie rühma skooride ühtlustumist seansside ajal suhteliselt stabiilselt madalal tasemel, kui CS puudus [paneel (B)] koos hinnete erinevusega, kui CS esines iga rühma suhteliselt diskreetsetes profiilides, mis ühtivad nende premeerimissageduse järjekorraga: kõrgeimast (rühm 100) madalaimani (rühm 25) [paneel (A)]. Oluline oli ainult interaktsiooni lineaarne trend, F_{(4, 34)} = 4.03, p = 0.009, kajastades ninakõrvade üldist järjepidevat suurenemist grupi 100 sessioonide ajal, kui CS oli kohal, võrreldes ninakõrvade suurenemise profiiliga suhteliselt ebaühtlasel profiilil teistes rühmades selles faasis.

 

Joonis 7. Keskmine (SE) lähenemisvastus (nina pistmine) 15 sahharoositreeningutel Lewise rottide rühmades (n = 8 / rühm), mis on eksponeeritud sahharoosi tasule (10% lahus) ja mida antakse 0, 25, 50, 75 või 100% muutuva ajakava alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. (A) Hinded, kui CS oli kohal (5 s x 20 katsed). (B) Hinded, kui CS puudus (5 × 20 s keskmine, kui tuli oli väljas).

Harjumus lokomotoorikastides

5 grupp × 3 seanss ANOVA andis seansi peamise efekti, F_{(2, 70)} = 23.07, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(8, 70)} <1.47, p > 0.18. Keskmiste (SE) lokomotoorsete skooride kõverjooneline muster ilmnes 1. seansist 1076 (74) kuni 2. seansini 644 (48) kuni 3. seansini 762 (59). Esimese ja viimase harjumisseansi 50. rühma plaanipärane võrdlus rühma 0 ja rühmaga 100 näitas 50. rühmas oluliselt vähem kiirete katkemist (M = 911; SE = 109) vs grupp 0 (M = 1103; SE = 176) kohanemisseansil 1, t₍₁₀₅₎ = 2.02, p <0.05, kuid rühma 50 ja rühma 100 vahel pole vahet (M = 1066; SE = 150), t₍₁₀₅₎ <1.20, p > 0.20 sellel seansil. 50. rühm ei erinenud viimasel harjumusseansil oluliselt ei rühmast 0 ega rühmast 100, t₍₁₀₅₎ <0.93, p > 0.30. Seetõttu ei erinenud keskmine ravimivaba liikumisvastus võtmerühmades enne testimist järjekindlalt.

Testiseansid

Soolalahus. 5-grupi × 2-seansi lokomotoorsete reageeringute ANOVA viimasel kohanemisseansil ja soolalahuse testimisseanss andis sessiooni olulise efekti, F_{(1, 35)} = 50.12, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <0.57, p > 0.68. Joonis 8 näitab kahe seansi rühma keskmisi hindeid ja näitab, et seansi efekt kajastas olulist langust harjumisest soolalahuse testini. Seega süsti kättesaamine Rep (nt ootus, stress) ei parandanud lokomotoorse reageerimist.

 

Joonis 8. Keskmine (SE) lokomotoorse reaktsiooni väärtus (elektronkiirguse kiirte murdumiste arv 90 min kohta) viimasel 3i ravimivabast kohanemisprotsessist ja järgneval sessioonil pärast soolalahuse süstimist (ip, 1 ml / kg) Lewise rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100.

0.5 mg / kg AMPH mõju.

Süstimiseelne liikumine. Süstimiseelse liikumise 5 grupp × 2 seanss ANOVA andis Sessioni olulise efekti, F_{(1, 35)} = 15.04, p <0.001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <1.19, p > 0.33. Planeeritud võrdlustel ei leitud kummalgi testiseansil olulist erinevust rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel, t₍₇₀₎ <0.99, p > 0.30. Seetõttu ei arvestanud algsed erinevused süstimiseelses liikumises rühma erinevusi liikumisvastuses 0.5 mg / kg AMPH-le. Esimese ja teise (pärast sensibiliseerimist) 0.5 mg / kg seansside keskmised (SE) kiirte katkestused süstimiseelses faasis olid 325 (25) ja 473 (36).

Süstimisjärgne liikumine. 5-grupi × 2-seansi ANOVA lokomotoorse vastuse kohta 0.5 mg / kg annustele, mis manustati enne ja pärast kroonilist 1 mg / kg AMPH, andis Sessioni peamise efekti, F_{(1, 34)} = 87.44, p <0.0001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 34)} <0.94, p > 0.45. Joonis 9 Joonistab iga rühma ja seansi keskmised lokomotoorsed skoorid ja näitab, et seansi efekt kajastas suurenenud üldist vastust teisele 0.5 mg / kg annusele, mis on kooskõlas sensibiliseerimisega. Jooniselt nähtub ka, et rühmad toimisid 1-i sessioonil väga sarnaselt, kuid see rühm 50 näitas rohkem lokomotoorset aktiivsust kui teised 2-i seansi rühmad. Planeeritud võrdlused vastusena esimesele 0.5 mg / kg annusele ei tuvastanud olulisi erinevusi rühma 50 ja rühma 0 või rühma 100 vahel, t₍₃₅₎ <1.28, p > 0.20. Rühmal 50 oli teise 0.5 mg / kg annuse korral oluliselt suurem liikumisvastus kui rühmas 0, t₍₃₅₎ = 4.32, p <0.001 või rühm 100, t₍₃₅₎ = 2.24, p <0.05.

 

Joonis 9. Lokomotoobi keskmine (SE) reaktsioon (elektronkiirguse kiirte purunemiste arv 90 min kohta) väärtusele 0.5 mg / kg d-amfetamiini eraldi seanssidel enne ja pärast d-amfetamiini sensibiliseerivat režiimi 5-seansil (1.0 mg / kg; ip) seansi kohta) Lewise rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. *p Planeeritud võrdluste põhjal rühma 0.05 ja rühma 50 ning rühma 0 keskmise erinevuse korral <100.

1 mg / kg AMPH mõju.

Süstimiseelne liikumine. Sensibiliseerivate seansside 5-grupi × 5-seansi ANOVA 30-min süstimiseelse tulemuse tulemustest andis Sessioni peamise efekti, F_{(4, 140)} = 4.10, p = 0.004 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} = 1.25, p > 0.31. Planeeritud võrdlustest selgus, et valgusvihu purunemine süstimiseelses faasis (M; SE) oli 50. rühmas (395; 62) oluliselt madalam kui rühmas 100 (508; 62), t₍₁₇₅₎ = 2.58, p <0.01, kuid mitte rühm 0, t₍₁₇₅₎ <1.83, p > 0.10, 1 mg / kg AMPH seansil 1. Viimasel 1 mg / kg AMPH seansil leiti plaanipärastest võrdlustest ka, et süstimiseelne liikumine 50. rühmas (378; 60) oli oluliselt madalam kui rühmas 100 (650; 75). ), t₍₁₇₅₎ = 6.17, p <0.001, kuid ei kuulu 0 rühma, t₍₁₇₅₎ <1.84, p > 0.10. Kuna nende grupierinevuste suund (kontrollrühm = rühm 50) oli hüpoteesitud mustriga vastupidine, ei saa hüpoteesiga kooskõlas olevaid grupierinevusi süstimisjärgses liikumises seostada süstimiseelsete algtaseme erinevustega. Seansside 1 kuni 5 keskmised (SE) üldised kiirte purunemised süstimiseelses faasis olid: 442 (34), 452 (32), 542 (40), 411 (26), 504 (37).

Süstimisjärgne liikumine. 5i rühm × 5 sessioonide ANOVA annus 1 mg / kg annustele andis sessiooni olulise efekti, F_{(4, 140)} = 6.15, p <0.001 ja muid olulisi mõjusid pole, F_{(4, 35)} <0.57, p > 0.68. Polünoomide suundumuste analüüs näitas olulist lineaarset suundumust, F_{(1, 35)} = 9.34, p = 0.004 ja kuupmeetriline trend, F_{(1, 35)} = 5.08, p = 0.031, viimane tulemus tähistab seansside 3 ja 5 suhtelisi maksimume. Joonis 10 joonistab need skoorid ja näitab, et hoolimata olulise interaktsiooni puudumisest ANOVA-s, näitas 50-grupp 1 mg / kg lõpliku annuse vastusena oluliselt suuremat liikumist kui ülejäänud neli rühma. Seetõttu näitasid kavandatud võrdlused rühmas 5 50-ist oluliselt kõrgemaid keskmisi hindeid kui kõigis teistes rühmades, t₍₃₅₎ > 3.68, p <0.001.

 

Joonis 10. Keskmine (SE) lokomotoorse reaktsiooni (elektronkiirguse kiirte purunemiste arv 90 min kohta) väärtuseni 1 mg / kg d-amfetamiini (ip) 5 iganädalasetel sessioonidel Lewise rottide rühmades (n = 8 / grupp), kes olid varem kokku puutunud 15 igapäevase konditsioneerimissessiooniga sahharoosi tasuga (10% lahus) ja mida pakuti muutuva ajakava 0, 25, 50, 75 või 100% alusel. Konditsioneeritud stiimuliks oli kerge (120 s). Rühm 0 sai konditsioneeritud stiimulite puudumisel sama palju soodustusi kui rühm 100. *p Planeeritud võrdluste põhjal rühma 0.05 ja rühma 50 ning rühma 0 keskmise erinevuse korral <100.

Ninakõrva reageerimise varieerumise kontroll sahharoositreeningu ajal

Kaks 5 rühma × 2 sessiooni ANCOVA-d, mis käsitlevad lokomotoorse vastuse suurenemist 0.5 mg / kg AMPH-le enne ja pärast sensibiliseerimisrežiimi, sealhulgas kogu ninaotsad sahharoositreeningu ajal, kui CS on olemas ja CS puuduvad eraldi kovariaatoritena, ei leidnud kummagi kovariaadi korral olulist mõju, F_{(1, 32)} <0.44 p > 0.51. Kaks 5 rühma × 5 seansi liikumisvastuse ANCOVA-d 1 mg / kg AMPH-le sensibiliseerimisseansside ajal koos kogu ninahoogudega (CS on olemas, CS puudub) kui erinevad kovariaadid ei andnud kovariaadi olulist mõju, kui CS oli olemas või puudus, F_{(1, 33)} <0.14, p > 0.71. Seetõttu ei arvestanud ravimivaba lähenemisviis rühmade erinevusi liikumisvastuses mõlemale AMPH doosile.

Arutelu

Sensibiliseerimine tekkis korduva 1.0 mg / kg amfetamiini mõju suhtes. Harjumus- ja soolalahuse andmed kinnitavad, et see mõju ei olnud tingitud olemasolevatest erinevustest, eeldatavast või stressiga seotud reaktsioonidest süstile. Ninahoogudega ANCOVA-d kinnitavad, et need mõjud ei olnud tingitud ravimivaba lähenemisviisist. Nina pistmise andmed näitasid ise, et rühmad omandasid seose CS ja sahharoositasu väljavaate vahel. Rühmade koolituse lõpus reageerinud nina-pistmisega vastavus oli vastavuses üldise preemiasagedusega erinevatel ajakavadel - kõrgeimast (rühm 100) madalamani (rühm 0), nagu see oli 2. katses. nina pistmise tase selles katses võrreldes 1. ja 2. katsega võib peegeldada selektiivsemat lähenemist Lewise rottide preemiale reageerimisel (Kosten et al., 2007).

Annuse 0.5 mg / kg andmed näitasid, et Lewise rottidel ilmnes esialgne lokomotoorse reaktsioon AMPH-le (joonis 9) oli Sprague Dawley rottidega võrreldes mõnevõrra alla surutud (eksperiment 2; joonis fig 5), kuid rühmasiseselt suurenes vastus teisele annusele Lewise rottidel märkimisväärselt (peaaegu kahekordne vastus esimesele 0.5 mg / kg annusele) pärast 5-i seansi AMPH-režiimi. Kõige märkimisväärsem on see, et rühmas 50 ilmnes suurem lokomotoorse vastus kui kõik rühmad, välja arvatud rühm 25, teise (st sensibiliseeriva) 0.5 mg / kg AMPH annuseni ja suurema lokomotoorse vastuse saavutamiseni lõpliku 25 mg / kg AMPH annuseni (kõigil teistel rühmadel, sealhulgas rühmal 1) (viimane sensibiliseerimise sessioon) .

Katsete grupi paremusjärjestuse kokkuvõtlik analüüs

Sensibiliseerimise grupierinevuste usaldusväärsuse määramiseks hinnati mitteparameetrilises analüüsis teise (postkroonilise AMPH) 0.5 mg / kg annuse ja lõpliku 1.0 mg / kg AMPH annuse keskmist lokomotoorse vastuse rühma ja astme vahelist pidevust. 3i katsetest. Analüüs andis olulise efekti, φ = 0.986, p = 0.025, kajastades asjaolu, et rühm 50 oli kõigil võrdlustel peale ühe esikohal. 50 rühma kõrgem asetus võrreldes kõigi teiste rühmadega vastuseks teisele (postkroonilise AMPH) 0.5 mg / kg annusele on kujutatud joonisel 5 (katse 2) ja joonis 9 (katse 3). 50 rühma kõrgem asetus teiste rühmade suhtes vastusena lõplikule 1.0 mg / kg annusele on kujutatud joonisel 2 (katse 1) ja joonis 10 (katse 3). Ainus erand sellest mustrist oli vastus 1.0 lõplikule annusele mg / kg Sprague-Dawley rottidel katses 2.

Üldine arutelu

Käesolevas katseseerias testiti hüpoteesi, et hasartmängulaadse tasustamiskava krooniline kokkupuude võib sensibiliseerida aju DA radu sarnaselt kroonilise kokkupuutega kuritarvitamise ravimitega. Tõendid sellise mõju kohta viitavad sellele, et neuroplastilisus, mis arvatavasti aitab kaasa ka narkomaaniale, võib olla põhjustatud kroonilisest kokkupuutest ettearvamatute tasustamiskavadega. Kooskõlas uimastisõltuvust käsitleva kirjandusega on lokomotoorse vastuse suurenemine AMPH-i indekseeritud DA süsteemi 0.5 ja 1.0 mg / kg annuste suhtes DA süsteemi reaktsioonivõimega, suurema liikumisega vastusena hilisematele annustele, mis operatiivselt määravad sensibilisatsiooni (vrd. Robinson ja Berridge, 1993; Pierce ja Kalivas, 1997; Vanderschuren ja Kalivas, 2000).

Üldiselt vastavad tulemused meie hüpoteesile. Kuid need viitavad ka eksperimentaalse efekti märkimisväärsele varieerumisele protseduuriliste tegurite tõttu. Konditsioneerimisskeemi mõjud olid tagasihoidlikud, kuid järjepidevad: rühmas 50 ilmnes mõlemast annusest suurem reageerimine kui neljal teisel rühmal pärast viit annustamisskeemi. Kuigi üldiselt F- dispersioonianalüüsides olid grupiga seotud mõju väärtused sageli ebaolulised, võtmerühmade erinevused kinnitati paarikaupa kavandatud võrdlustega. Sellega seoses tuleb märkida, et “praegune mõtlemine on siiski see üldine tähtsus [jaoks F ANOVA-s] pole vajalik. Esiteks on üldtesti ja mitmekordse võrdlustesti abil kontrollitud hüpoteesid üsna erinevad, üsna erineva võimsustasemega. Näiteks üldine F tegelikult jaotab erinevused rühmade vahel rühmade vabadusastmete arvu järgi. Selle tulemus on üldine lahjendamine F olukorras, kus mitu grupivahendit on üksteisega võrdsed, kuid erinevad teistest keskmistest ”(Howell, 1992, lk. 338). See on täpselt olukord, mida rakendati nendes katsetes, kus rühm 50 eeldas erinevat rühma 0 ja rühma 100 kontrollidest, kuid rühma 25 või rühma 75 osas nende kontrollrühmade vahel erinevusi ei ennustatud.

Nina pistmise andmed kinnitasid, et igas katses omandasid loomad seost CS-i ja sahharoosipreemia väljavaate vahel. Erinevate rühmade ninakõrvalsageduse ja üldise premeerimissageduse vastavus nende vastavatele treeningkavadele viitab sellele, et sahharoositasu juhitav keskmine ravimitevaba lähenemisviis reageerib. Ninakõrvalkoobaste vahendava mõju puudumine ANCOVA-de rühmas esinevatele lokomotoorsetele reaktsioonidele AMPH-le näitas, et kahe käitumise aluseks on erinevad protsessid.

Mõnel juhul ilmnes konditsioneerimisskeemi mõju vastusena esimesele AMPH annusele; muudel juhtudel ilmnes see alles pärast korduvaid annuseid. Grupis esinevad erinevused lokomotoorse reageeringu osas esimesele AMPH annusele viitavad sellele, et hasartmängusarnaste tasustamiskavadega kokkupuude on üksi sensibilisatsiooni esilekutsumiseks. Grupilised erinevused liikumises pärast mitut AMPH-i annust osutavad peenemale toimele, mida võiks iseloomustada kui tundlikkust, mis avaldub ainult koos pideva kokkupuutega esmase sensibiliseeriva ainega (st amfetamiiniga).

Erinevused ravivastuse mustrites näitavad, et pikem intervall treeningu ja esmase AMPH-st nakatumise vahel võib maksimeerida võimaluse tuvastada konditsioneerimisravi loomulik sensibiliseeriv toime. See omakorda viitab sellele, et konditsioneeritud preemiaga kokkupuute mõju võib aja jooksul inkubeeruda - seda nähtust täheldatakse ka stimulantide sensibiliseerimisel (Grimm et al., 2006). Kahe amfetamiini annuse vastuse muster viitab sellele, et 0.5 mg / kg annus võib olla tõhusam kliimamuutuste ajaloo ilmutamisel. See omakorda viitab sellele, et praeguse treeningprotokolli kohaselt on konditsioneerimismõjud mõnevõrra peened ja neid võib varjata ülemmõjude mõju AMPH annuste ja tingimustega, mis tekitavad de novo sensibiliseerimine.

Eksperimendis 3 on kahefaasiline ravivastus 0.5 mg / kg annustele ja järkjärguline paremuse ilmnemine rühmas 50 kooskõlas Lewise rottide eeldatava profiiliga vastusena metamfetamiinile (Camp jt, 1994). See toetab käesolevate järelduste paikapidavust ja viitab asjaolude kattuvusele, mis mõõdavad haavatavust psühhostimulantide sensibiliseerimise suhtes, ja hasartmängudele sarnase tasustamisgraafiku vahel.

Katsete jooksul ületas rühma 50 sensibiliseerimise lokomotoorse reaktsioon üldiselt amfetamiini erinevates annustes ja erinevates looma tüvedes teiste rühmade vastavust. Suur rühmasisene varieeruvus ja tagasihoidlik rühmadevaheline efekti suurus näitavad aga DA muude süsteemi reageerimisvõime amfetamiini muude tegurite rolli pärast kokkupuudet konditsioneeritud sahharoosi erineva ajakavaga. Kuigi DA-neuronite reageering signaalide premeerimisele võib pakkuda hasartmängude jämedat mudelit (Fiorillo et al., 2003), nagu kõigi mudelite puhul, on kaotsi läinud teabe kadumine, st põhiprotsessi demonstreerimiseks. Selle tulemusel ilmnes Fiorillo et al. CS-USA tingimuste mõju muster. uuring ei üldistanud täielikult lokomotoorset vastust amfetamiinile. Mudeli edasiseks täiustamiseks on vaja hasartmängude neid aspekte, mis mõjutavad DA süsteemi funktsioone.

Kokkuvõttes pakuvad selle katseseeria tulemused ajutist alust hüpoteesile, et hasartmängusarnaste tasustamiskavade pidev kokkupuude suurendab aju DA süsteemi reageerimisvõimet psühhostimulantide väljakutsele. Sellisena laiendavad nad: Singer jt. (2012) kes näitas, et fikseeritud ajakava korral suurendab eelnev kokkupuude muutuva tugevdamise ajakavaga operaatori paradigmas järgnevat lokomotoorseid reaktsioone amfetamiinile. Täpsemalt osutavad käesolevad leiud tasu kättetoimetamise ebakindlusele kui kriitilisele tegurile, mis mõjutab muutuva tasu mõju. Mõju ulatus operandi paradigmas oli oluliselt suurem kui nendes katsetes leitud efektid. See võib kajastada hasartmängulaadse aktiivsuse suuremat kroonilist kokkupuudet (55 vs. 15 päeva); see võib kajastada mõju, mida nõuab operatiivne reageerimine tasu esilekutsumiseks (st agentuuri roll), mitte passiivne kokkupuude, nagu käesolevas uuringus. Koolituse kestuse pikendamine praeguses paradigmas aitaks neid küsimusi lahendada.

Nendest katsetest ei saa välja selgitada muutuva tasu ja tugevdamise ajakavade kehtivust hasartmängude mudelitena. Tulevased uuringud, milles uuritakse eeldatava ajaloo mõju näriliste hasartmängude riskikäitumisele, võiksid seda küsimust käsitleda. Sarnaselt peab täiendavat uurimist ootama vastavus siin leitud käitumusliku sensibiliseerimise ja patoloogiliste mänguritega hiljuti leitud amfetamiini kõrgenenud striataalse DA vastuse vahel (Boileau et al., 2013). Mikrodialüüs võiks seda küsimust lahendada ja inimeste andmete põhjal ennustatakse, et rühma 50 „hasartmängude fenotüüp” DA suuremat vabanemist täheldatakse kõige selgemalt dorsaalses (sensomotoorses) striaatumis, mitte ventraalses (limbilises) striaatumis . 50% muutuva CS + tasude kokkupuute valideerimine nendes teistes paradigmades toetaks selle kasutamist PG heauskse eksperimentaalse mudelina.

Kui mõned hasartmänguvormid toovad selgelt kaasa instrumentaalse reageerimise (nt mänguautomaadid), siis muudes hasartmänguvormides (nt loterii) on seos toimingu (pileti ostmine, st panuse panemine), tasu märkide (st , loteriinumbrid) ja tasu ise (võidunumber ja rahaline väljamakse) on palju hajusam. Sellele vaatamata võib DA aktiveerimine CS-USA intervalli jooksul toimuda. See võib selgitada, miks „võidunumbri” teatavaks tegemisel pööratakse tähelepanu sellele, kui iga üksik loteriipall järjest langeb, moodustades võidunumbris konkreetse numbrite jada. Ehkki konkreetse numbri esinemise tõenäosus on matemaatiliselt määratletud, on iga üksiku lotopalli tulemus binaarne - tabamus (vastab mängija numbrile) või möödalaskmine (ei ühti mängija numbriga) - ja mis tahes antud katse tulemus pole teada. Selline stsenaarium võib paremini kirjeldada rühma 50 kogemusi käesolevates katsetes, kus preemiat pakuti mitte tingimuslikult, vaid ka ettearvamatult ning CS ainult näitas tasu saamise potentsiaali, paljastamata, kas see juhtub antud katses. Mänguautomaadid on PG-ga tihedamalt seotud kui loteriipiletid (Cox et al., 2000; Bakken et al., 2009), osutades sellele elanikkonnale hasartmängude tasustamisel oluliste instrumentide (ja vahetuse) olulisele osale (Loba jt, 2001). Sellegipoolest näib käesolevates katsetes modelleeritud Pavlovi protsess (CS + ebakindel tasu) vajalik kui mitte piisav osa hasartmängude kogemusest.

Koos selge instrumentaalse nõude puudumisega võisid eksperimentaalefektide suhteliselt tagasihoidlikule ja varieeruvale mustrile kaasa aidata ka paljud muud kujundusfunktsioonid. Rühmad erinesid üldises kokkupuutes sahharoosiga, samuti CS-i ja sahharoositasu vahelise situatsiooni vahel. Ehkki see võis kaasa aidata rühmadevahelisele varieeruvusele, ei suuda see hõlpsasti selgitada, miks kõige suurema sahharoosiga kokkupuutunud loomade (rühm 100) loomade sensibiliseerimine oli väiksem kui rühma 50. Lisaks ei saanud rühm 0 enne uuringut sahharoosiga kokkupuudet. Ehkki see välistas kii-st põhjustatud ootuse saada tasu, ei kontrollinud see stiimuli olemasolu enne preemia kohaletoimetamist, mis oli olemas kõigis teistes rühmades. Selle probleemi lahendamiseks peaksid tulevased uuringud hõlmama tingimust, kus loomad saavad iga uuringu eest tasu pärast juhuslikku kokkupuudet neutraalse stiimuliga (st kelle olemasolu ei tähenda tasu potentsiaali).

Veel üks kavandamise piirang on abistava käitumise tekkimine, mis võib mõjutada treeningkava mõju. Ebakindluse korral võivad loomad välja töötada ebausklikku käitumist, mille eesmärk on tugevdada tajutavat kontrolli ja vähendada ebakindlusest tingitud DA aktiveerumist (vrd. Harris et al., 2013). Seetõttu on võimalik, et eksperimentaalse kavandamise kontrollimatud aspektid võimaldasid loomadel tasakaalustada konditsioneerimiskava mõju. Selline efekt võib kaasa aidata suhteliselt tagasihoidlikule ja varieeruvale ravivastusele amfetamiini rühmas 50 pärast CS + sahharoosi treenimist. Tulevased uuringud peaksid registreerima spontaanset käitumist, välja arvatud ninaotsad, treeningutel, et seda võimalust testida, ja võimalusel selle statistilist kontrolli. Kuna selline käitumine peaks eeldatavalt tasakaalustama või summutama ajakavast põhjustatud ebakindluse mõju, tuleks 50i rühmas paikneva amfetamiini lokomotoorset reaktsiooni tugevdada, kui seda kontrollitakse (protseduuriliselt või statistiliselt). Seetõttu pakub käesolev (kontrollimatu) ülesehitus konservatiivset testi 50% CS + preemia mõju kohta amfetamiini sensibiliseerimisele.

Välise kehtivuse osas piirab isaste rottide kasutamine tulemuste üldistatavust. Selge “karistamise” tingimuse puudumine erineb ka hasartmängudest, kus tavalised on suured rahalised kaotused ja neil on oluline motiveeriv mõju (Nieuwenhuis jt, 2005; Singh ja Khan, 2012). Ka tasu kogumise võime puudub praeguses paradigmas ja on leitud, et mänguautomaadimängu kumulatiivsed võidud mõjutavad inimestel DA manipulatsioone (Tremblay et al., 2011; Smart jt, 2013). Samamoodi on jackpoti võimalus oluline erinevus praeguse mudeli ja tegeliku hasartmängu vahel.

Nendele piirangutele vaatamata viitavad praegused tulemused sellele, et 50% muutuv CS + tasu võib siduda hasartmängude tugevdava mõjuga seotud DA teid (Fiorillo et al., 2003; Anselme, 2013). Sellele hasartmängutaolisele ajakavale järgnenud AMPH-le reageerimise rist-sensibiliseerimine on kooskõlas DA pöördelise rolliga hasartmängude ja psühhostimuleerivate ravimite mõjudes (Zack ja Poulos, 2009) ja laiendab varasemaid uuringuid patoloogiliste mängurite (AMPH) mängimise motivatsiooni ristpõhjendamise kohta (Zack ja Poulos, 2004). Need tulemused viitavad kaudselt ka sellele, et tagasihoidlikud AMPH annused, mis ei põhjusta suprafüsioloogilist DA vabanemist, võivad aju aktiivsust paremini modelleerida vastusena katkendlikele tasusignaalidele (st hasartmängude ajal) kui kokkupuude kõrge (st liigse laadiga) stimulantide annused (vrd. Vanderschuren ja Pierce, 2010). Selle kirjavahetuse otsest tuge saab tuletada, hinnates DA vabanemist vastusena 50% varieeruvale CS-USA ajakavale ja AMPH erinevatele annustele, kasutades mikrodialüüsi.

Eksperimentaalsest vaatepunktist näib, et nii praegune Pavloviani mudel kui ka varasem muutuva tugevdamise funktsionaalne mudel loovad fenotüübi, mis sarnaneb inimese patoloogilise mänguriga. Sellisena pakuvad need väärtuslikku täiendust näriliste hasartmänguülesannetele, mis modelleerivad hasartmängude käitumist (sõltuva meetmena), kuid kus seni on ainult tööl olnud terved loomad, mis on samaväärsed inimeste sotsiaalsete mänguritega. Kirjanduse põhjal võivad muutuva tasuga krooniliselt kokku puutunud loomad nende ülesannete täitmisel, eriti reageerimisel DA-ergilistele ravimitele, erineda. Rottide hasartmängude fenotüübi ja hasartmänguülesannete kombineerimine võib võimaldada PG raviks mõeldud ravimite süstemaatilist väljatöötamist, mida ei pruugi ainult tervete loomade puhul täielikult saavutada. Eespool kirjeldatud eksperimentaalse kavandamise ja treeningrežiimi täiendavad täpsustused peaksid parandama selles paradigmas treenitud loomade ja tegelike patoloogiliste mängurite vahelist seost.

Kliinilis-sotsioloogilisest vaatepunktist leitakse, et kokkupuude 50% muutuva CS + preemiaga, mis ühtib kommertsiaalse mänguautomaadi preemiate ajakavaga (Tremblay et al., 2011), muudab aju DA süsteemi usaldusväärsetel ja kestvatel viisidel, mis viitab sellele, et mõnel juhul võib hasartmängutegevus, näiteks kuritarvitamine, olla patogeen, mis võib põhjustada sõltuvust. Kuid tagasihoidlik efekti suurus ja suur varieeruvus reageerimisel 50% CS + preemiale viitavad sellele, et sarnaselt kuritarvitamise ravimitega sõltub ka hasartmängusarnaste preemiakavade kalduvus sõltuvust soodustada suuresti mänguri varasemast riskiprofiilist. Sellegipoolest näib mõistlik, et kõrge riskitasemega inimeste võimaliku hasartmängudega seotud kahjulike mõjude vältimiseks võiks laiendada ka hasartmängude kasutamist poliitikat, mis hoiab ära kuritarvitamisega seotud ravimite kasutamist ja vähendab nende kuritarvitamist.

Huvide konflikti avaldus

Autorid kinnitavad, et uuring viidi läbi ilma kaubandus- või finantssuhete puudumisel, mida võiks tõlgendada võimaliku huvide konfliktina.

Tunnustused

Seda uurimistööd rahastati Kanada looduslike teaduste ja tehnikauuringute nõukogu toetustest Paul J. Fletcherile. Täname südamest pr Djurdja Djordjevicit figuuride ettevalmistamise eest.

viited

Muutis:

Bryan F. Singer, Michigani ülikool, USA

Arvustusi:

Louk Vanderschuren, Utrechti ülikool, Holland
Ruud Van Den Bos, Nijmegeni Radboudi ülikool, Holland
Patrick Anselme, Liège'i ülikool, Belgia