Biol psikiatria. 2008 Dec 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Jul 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
Iturria
Animalien Biologia Saila, Pennsylvania Unibertsitatea, Philadelphia, PA 19104-6046, AEB.
Laburpena
AURREKARIAK:
Sarirako sentsibilitatea droga-gehiegikeriaz eta gehiegikeriarekin loturiko portaerekin faktore predispositiboa izan da. Hala ere, sentsibilitatea saritzen laguntzen duten azpiko mekanismoak ezezagunak dira. Dopamina seinalizazioan disekulatzea hipotesiaren arabera sariaren sentsibilitatea handitzearen azpiko kausa izan daiteke, eta estimuluak saritzeko sistemaren normalizazioari ekin zion.
METODO:
Saguen sentsibilitatea handitzeko sagu genetikoa erabili genuen, Delta FosB-overexpressing sagua, sari bidezko aldaketak aztertzeko, gantz-dieta atsegina lortzeko. Sagu horiek seinaleztapen saria duten markatzaileak oinarrizko bi aste aztertu zituzten eta 6 aste dieta dieta zorrotzaren ondoren. Saguak aztertu ziren gantz gantzaren erretiratzea ondorengo jokabidearen azterketan, eredu honen ahultasuna ebaluatzeko estimuluak kentzea ebaluatzeko.
EMAITZAK:
Gure emaitzek erakusten dute sariaren bidezko aktibazioa aldatzea nukleoa, accumbens-hypothalamic-ventral tegmental area zirkuituan, Delta FosB nukleoa accumbens eta eskualde estrioletan. Phosphorylated adenosine monofosfato zikliko mailak (cAMP) erantzuna elementu bateratzeko proteina (PCREB), garuneko eratorritako faktore neurotrofiko (BDNF), eta dopamina eta adenosina monofosfato ziklikoak, fosfoprotein arautua, 32 kDa (DARPP-32) masa molekularrean, fosfoproteinaren nukleoan, fosforo fosforoetan, Delta FosB saguetan murriztu zen, dopamina seinaleztapena murrizteko iradokitzailea. Gantz gantzaren esposizioaren sei astetan guztiz hobetu egin ziren desberdintasun horiek, dieta atsegina lortzeko gaitasun aberasgarria indartuz. Delta FosB saguak lokomotora-jardueran eta antsietate-erantzunak 24 ordu handiak izan dira, gantz gutxien erretiratzea jarraituz.
ONDORIOAK:
Emaitza hauek Delta FosBren disekulazioa eta dopamina seinaleztapena erregulatzeko seinaleztapenarekin erlazionatutako sentsibilitatea azpimarratzen dute, dieta atseginak normalizatu ahal izateko eta obesitate mota batzuen fenotipo predisposible bat izan daiteke.
Sarrera
Gosetea eta sutasuna kontrolatzen dituzten neuralitate sistemen ezagutza gero eta handiagoa izan arren, obesitate tasak Estatu Batuetan areagotu dira. Gaur egungo droga-tratamenduak eraginkortasun mugatua du, eta jokabide aldaketek epe luzerako gutxieneko betetzeak pairatzen dituzte (1). Elikagai trinko eta kaltegarrien kontsumoa estresaren aldaketak eta sari bidezko aldaketak lotzen ditu garunean, elikagai horien onuragarriak diren propietateek energiaren oreka-seinaleak gainditu ditzakete (2-4). Elikagaiak koipe handia dauka sari natural gisa, garuneko saritutako zentroak modu trinkoan tratatzen diren moduan aktibatzen ditu eta, beraz, auto-administrazioaren paradigmaetan (5-8) erabili dira. Horrela, litekeena da elikadurak eta drogamenpekotasuneko jokabideak eta motibazioa elkarren azpiko mekanismo komunak izatea, baldintza bietarako tratamendu bide berriak irekitzea.
Elikagai atsegingarrien eta bideen arteko harremana aztertzean, saria eta estresa garunean arautzen dira, Aurretik identifikatu ditugun markatzaile molekularrak eta biokimikoak saria murriztu eta estresa areagotzea ondorengo gantz gantz (HF) atsegingarrien ondoren. Tratu txarrak dituzten drogen antzekoak, gure ikasketetan dieta atsegina esposizioaren ondorioz, transkripzio faktorea ΔFosB nukleoan accumbens (NAc), garuneko sari nagusiaren egitura (9, 10). ΔFosB indargabekotasuna adierazi duten saguak erakutsi duten elikagaien saririk handieneko tresnen (11) agerraldia erakutsi dute. Sariaren sentsibilitatearen rola eta sariaren sistemaren epe luzeko disziplina sentsibilizatzeko dieta molde eta biokimikoen erantzuna aztertzeko tresna baliagarria da.
Azterlan honetan, ΔFosB-soberexpressing saguak erabili ditugu, NA-hypothalamus-ventral tegmental area (VTA) neurozirkulazioan sariaren markatzaileen epe luzeko alterazioak aztertzeko, HF dieta atsegingarri baten aurrean. Sagu saritutako sentikor horientzako aurreko ikasketetan oinarrituta, ΔFosB induzitutako sentsibilitatean aldaketak eragiten dituzten hipotesiak hipertentsioaren dopamina sekuentziarekin batera disekzionatzea eragiten du. Gainera, hipertentsioaren arabera, HF dieta trinko energetiko baten sari natural baten esposizioak normalean sistema dopaminergikoak normalizatzen ditu saguetan, hau da, HF dieta honetatik ateratzeko estresa erantzuna gehiegizkoa da.. Dieta atsegina erabiltzearen alderdi berezia sari bikain gisa sartzeko aukera ematen digu hipotalamenaren sarrerak zirkuituan saritzeko, fenomeno bat aurreikusteko obesitatearen aurrean aurreikusitako biztanleen aurreikuspena izan daitekeen fenotipo batean. Hipotesi hau aztertzeko, dopamina neurotransmisoreen markatzaileak aztertu genituen, pCREB, BDNF eta DARPP-32 artean NA eta tirosin hidroxilasa eta dopamina garraiolari VTAan, HF erakusketaren ondoren. Dopamina irteeran eragina duten energiaren orekako markatzaile espezifikoak ere aztertu genituen, leptina eta orexinaren errezeptoreak VTAren eta orexinaren adierazpenean, hipotalamoaren alboan.
Materialak eta metodoak
Animaliak
Saguaren bit-mekanismo gizonezkoak induziboki overexpress ΔFosB NAc eta dorsal striatum (Kelz et al., 1999) neuron dinosauro positiboen bidez sortzen ziren (ICR: C57Bl6 / SJL) Texas Southwestern Medical Center-ean eta mantendu eta Pennsylvania Unibertsitatean probatu zen. Saguak guztiak doxycycline-n (100 μg / ml edateko urarekin) mantentzen ziren, Pennsylvaniako Unibertsitatera iritsi arte. Gehiegizko esplotazioa bultzatzeko, doxycycline kendu egin da (n = 23) (12). Saguak kontrolatzea (n = 26) droga jarraitzen du. Saguak zortzi eguneko dieta-taldeei esleitu zitzaizkien doxycyline-k ezabatu ostean, gehienezko maila lortzeko (13). Saguak 12 batean mantentzen ziren: 12 argi iluneko zikloa (argiak 0700n) elikagaiak eta ur iragazkiak eskuragarri. Ikasketa guztiak Pennsylvania Unibertsitateko Animalien Laguntzarako eta Erabilerarako Batzordeak onartutako protokolo esperimentalen arabera egin ziren, eta prozedura guztiak jarraibide instituzionalen arabera egin ziren.
Dietaren esposizioa
Saguak etxe chow (n = 16) mantendu ziren edo HF (n = 16-17) gainean jarritako sei astez. Etxeko chow (Purina Lab Diet, St. Louis, MO) 4.00 kcal / g eduki zuen, 28% proteina, 12% gantz eta 60% karbohidrato osatua. HF diet (Research Diets, New Brunswick, NJ) 4.73 kcal / g biltzen du, 20% proteina, 45% gantz eta 35% karbohidratoz osatua.
Biokimika eta gene adierazpena
Saguak dieta esposizioaren sei astetan egin ondoren aztertu ziren. Brains skull eta izoztu osoa izotz lehorrean edo NAc disected (gutxi gorabehera 0.5 - 1.75 mm bregma, 3.5 - 5.5 mm sakoneran) eta nitrogeno likidoa izoztuta. Tissue-80 ° C-n gorde zen arte.
Analisi biokimikoak
Mendebaldeko blotsentzako metodoak material osagarrietan deskribatzen dira. Erabilitako antigorputzak honako hauek izan ziren: Cdk5, CREB eta BDNF (1: 500, Santa Cruz Bioteknologia, Santa Cruz, CA) eta fosfo-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Cell Signaling Technology, Danvers, MA).
Autoradiografia hartzailea
Autoradiografia metodo zehatzen material osagarrietan deskribatzen dira. Ligands erabiltzen ziren 2 nM H3 - SCH 23390 eta 5 nM H3 - spiperone (PerkinElmer, Boston, MA).
In situ hibridazioa
Ehunen tratamendua eta hibridazioa aurretiaz deskribatu ziren (14). DARPP-32 zunda P. Greengard-ek (Rockefeller Unibertsitatea) eman zuen eta J. Elmquist (Texaseko Southwestern Medical Center-eko Unibertsitatea) orexinaren zunda. DARPP-32-erako ebaluatutako diapositibak 3 egunetarako filmak ziren eta eguneratu ziren Xeximu eguneko filmetarako aplikatu zitzaizkien orekak. Filmaren irudien zenbaketa aurretiaz deskribatu zen (4).
QRT-PCR
RNA isolatu egin zen VTA-tik eta Gene TaqMan-en geneen adierazpenen azterketek ebaluatutako geneen adierazpena (Applied Biosystems, Foster City, CA). Metodo zehatzak eta analisi estatistikoak material osagarrietan aurki daitezke.
Portaeraren analisia
Sentsibilitatearen sentsibilitateak dieta-jokabide aldaketetan eragindako ondorioak aztertzeko, saguaren azpimultzo bat HF-tik erretiratu zen, esposizioaren lau astez eta etxera chow (n = 9 kontrola, n = 8 ΔFosB) itzuli zen. Erretiratzea ondorengo hogeita lau orduak, saguak kanporako eremuan aztertu ziren, gure aldez aurretik argitaratutako erretiratze paradigma (10) arabera. Laburki, sagua eremu irekiko aparatuaren erdian jarri zen eta bost minutuz kontrolatu zuen. Lerro osoaren gurutzak, fecal boli, erdian denbora eta erdiraino gurutzatzen ziren.
Estatistikak
Western blots izan ezik, datu guztiak bi noranzko ANOVA erabiliz aztertu ziren eta ondoren Fisher-en PLSD testarekin doxiciclina tratamendua (ΔFosB adierazpena) eta dieta egoera aldagai independente gisa. RT-PCR analisietarako, P balio murriztua erabili zen erlazionatutako gene taldeen arteko konparazio anitzak zuzentzeko (ikus material osagarriak). Western blots aztertu ziren ikasle baten t-testarekin doxiciclina tratamendua erabiliz aldagai independente gisa, blot bereko dentsitate optikoak alderatuz. Datu guztiak batez besteko ± SEM gisa aurkezten dira.
Emaitzak
Basal biokimikoa desberdintasunak
ΔFosB gehiegizko adierazpeneko saguetan sari sentikortasun hobea oinarritzen duten bide molekularrak argitzeko, seinale garrantzitsuenetako molekula batzuen mailak aztertu ziren NAc-n. ΔFosB saguen NAc-n Cdk5 maila handitzeko joera egon zen doxiciclinan mantendutako zabor-lagunen kontroleko animaliekin alderatuta (F = 5.1, P = 0.08; 1A irudia). OsFosB saguek pCREB maila nabarmen murriztu zuten (F = 7.4, P <0.05; 1B irudia), baita CREB maila osoa ere (F = 5.4, P = 0.05; 1C irudia). BDNFren murrizketa nabarmena ere ikusi zen ΔFosB saguen NAc (F = 10.6, P <0.05; 1D irudia).
Kopuru 1
Saguak ΔFosB overexpressingak NA dopamina murriztuko seinaleztapenaren markatzaile biokimikoak erakutsi ditu
Elikadura eta gorputz pisua dieta gantz altuetan
Ondoren, naturalki aberasgarria den HF dieta baten ondorioak aztertu ditugu ΔFosB gehiegizko adierazpeneko saguetan molekula seinaleetan izandako alterazioetan. Ez zegoen desberdintasunik ΔFosB saguen eta kontrolen artean janaria hartzean, bai etxeetan, bai HFn. Hala eta guztiz ere, gorputzeko pisura normalizatutako kaloria-sarrerarekin murrizketa orokorra gertatu zen FFosB saguei (F = 11.2, P <0.01; 2A irudia). Dietaren esposizioaren sei asteen amaieran, HFa jasotzen zuten saguek nabarmen pisatzen zuten chow dietetan (F = 17.2, P <0.001), eta ΔFosB saguak kontrolek baino gutxiago pisatzen zuten orokorrean (F = 5.6, P <0.05; irudia. 2B). Efektu hau chow dietako taldeen arteko desberdintasunen (P <0.05) espezifikoa zen.
Kopuru 2
ΔFosB saguak overexpressingek ez zuten elikagaien ingesta desberdina izan txerto edo koipe handiko (HF) dietak
Gantz gutxiko dieta desberdintasun biokimikoak
NAren seinaleztapenaren oinarrizko desberdintasunak HF dietak nola aldatzen diren jakiteko, oinarrian aztertu diren seinale-proteina berekoak sei HF astean jaso zituzten animalietan aztertu ziren. Ez ziren Cdk5 mailetan desberdintasun esanguratsurik (Fig. 3A). PCREB eta CREBren maila desberdinak ez ziren ezberdinak HF sei astetan igaro ondoren (Fig. 3B, C). BDNF-ren mailak nabarmen igo ziren ΔFosB saguen HF esposizioaren sei astetan jarraituz (F = 6.5, P = 0.05; Fig. 3D).
Kopuru 3
Gantz altua (HF) dieta ΔFosB soberexpressing sagu NAc behatutako seinaleztapen aldeak hobetu ditu
Dopamina receptor autoradiography
Hartzaileen autoradiografia erabili dugu NAF-n dopamina seinaleztatzean ΔFosB-k eragindako alterazioak dopamina hartzailearen adierazpenaren aldaketekin lotuta dauden ala ez ebaluatzeko (4A irudia). Gantz ugari duen dietak D1 dopamina hartzailearen loturaren dentsitatea apur bat handitzen duela dirudi (P = 0.14), eta alde hori handiagoa da osFosB saguetan (4B irudia). HFren ondoren D1 lotzeko eremua handitzeko joera ere egon zen (P = 0.06), eta post hoc probek esanguratsua zela erakutsi zuten ΔFosB saguetan (P <0.05; 4C irudia). D1 hartzaileekin alderatuta, ez da aldaketarik egon D2 hartzailearen lotura dentsitatean (kontrol chow = 97.6 ± 6.9, kontrol HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) edo lotura eremuan (kontrol chow = 47.3 ± 3.4, kontrol HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) NAc-n ikusi ziren.
Kopuru 4
Gantz dieta handia (HF) D1 dopamina-ren hartzaileen loturaren eta DARPP-32 adierazpenen nukleoen (NAc) nukleoaren azelerazioaren aldaketak ekarri zituen.
DARPP-32 NA adierazpena
In situ hibridazioa erabili zen NAc-en DARPP-32ren adierazpen mailak zehazteko (4D irudia). Gantz-dieta handiak DARPP-32 adierazpena nabarmen handitu zuen garuneko eskualde honetan (F = 5.1, P <0.05), eta dietaren eta ΔFosB adierazpenaren (F = 8.9, P <0.05) arteko elkarrekintza nabarmena izan zen, ΔFosB saguak handiagoa zela dietak eragindako aldaketa (4E irudia). Kontrolaren eta ΔFosB saguen arteko DARPP-32 adierazpenean oinarrizko aldea agerian geratu zen post hoc proben bidez (P <0.01), baita DARPP-32 adierazpenaren hazkundea ere HF FosB saguetan (P <0.01).
Geneen adierazpena VTAn
QRT-PCR VTA-n geneen adierazpenean izandako aldaketak ebaluatzeko erabili zen, ordainsariaren erregulazioan aurrez inplikatutako hainbat gene giltzarri zuzenduz. Lagin guztiak β-aktinara normalizatu ziren. Tratamenduarekin β-aktinaren adierazpena aldatu ez zela ziurtatzeko, saiakuntza berezi bat egin zen β-aktina bigarren barne kontrol batekin alderatzeko, GAPDH. Ez zegoen desberdintasun esanguratsurik β-aktinaren adierazpenean (ΔCT balioak, β-aktina - GAPDH: kontrol chow = 2.29 ± 0.21, kontrol HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
ΔFosB adierazpenaren eta dietaren tratamenduaren arteko elkarreraginerako joera ikusi zen tirosina hidroxilasa adierazteko (F = 3.6, P <0.06; 5A irudia). HFrako sei asteko esposizioak tirosina hidroxilasaren adierazpena kontroleko saguetan murriztu eta ΔFosB saguetan adierazpena areagotzen duela dirudi. ΔFosB adierazpenaren eta dietaren esposizioaren arteko elkarrekintza nabarmena ikusi zen dopamina garraiatzailearen adierazpenerako (F = 6.7, P <0.03; 5B irudia). Tirosina hidroxilasaren antzera, HFren esposizioak dopamina garraiatzaileen adierazpena murriztu zuen kontroleko saguetan eta adierazpena nabarmen handitu zen ΔFosB saguetan (P <0.05). Kontrolaren eta ΔFosB saguen arteko dopamina garraiatzailearen adierazpenaren oinarrizko aldeak ez zuen garrantzirik lortu (P = 0.16), baina HFren 6 aste ondoren, ΔFosB saguek dopamina garraiatzaile maila nabarmen altua adierazi zuten kontrolekin alderatuta (P <0.05).
Kopuru 5
Gantz dieta handia (HF) esposizioa eta ΔFosB adierazpenek molekula askoren adierazpenean aldaketak ekarri zituzten VTAn
ΔFosB adierazpen handituaren eragina adierazi zuen joera TrkB mailak murrizteko VTAn (F = 5.7, P <0.04; 5C irudia). Κ-opioideen hartzailearen adierazpenean eragin nagusirik izan ez zen arren, adierazpen murriztuaren joera zegoen ΔFosB saguetan (P = 0.08; 5D irudia). Leptinaren hartzailearen adierazpena VTAn ere zehaztu zen. Dietaren esposizioaren eragin nabarmena aurkitu zen (F = 6.1, P <0.03), HF-k VTA-n leptina hartzailearen maila nabarmen murrizten baitzuen ΔFosB eta kontroleko saguetan (5E irudia). VTA-n orexin hartzailearen 1 adierazpena ere aztertu zen. Dietak eragin nabarmena izan zuen orexinaren hartzailearen adierazpenean (F = 9.0, P <0.02), HF-ra jasandako saguak VTAn maila altuagoak adieraziz (5F irudia). ΔFosB saguek joera bat ere izan zuten garuneko eskualde honetan orexin 1 hartzailearen maila altuagoak adierazteko (P <0.05).
Orexinaren adierazpena alboko hipotalamoan
Alboko hipotalamoan orexinaren mailak neurtu genituen, VTAren inerbazio orexinergikoaren jatorria, in situ hibridazioaren bidez (6A irudia). InteractionFosB adierazpenaren eta dietaren esposizioaren arteko elkarreragin nabarmena izan zen orexinaren adierazpenean (F = 9.1, P <0.01), HF-k orexina maila nabarmen handitzen baitzuen kontroleko saguetan (P <0.05) eta adierazpenaren beherakada ΔFosB saguetan (6B irudia). Orexinaren adierazpenean desberdintasun esanguratsurik egon ez bazen ere, HFren 6 aste ondoren, ΔFosB saguek orexina maila nabarmen murriztu zuten kontrolekin alderatuta (P <0.05).
Kopuru 6
Gantz altuak (HF) dietak orexinaren adierazpenean eragina izan zuen kontroletan (Ctrl) eta ΔFosB soberakada soberakinak
Bejokabide analisiak
Dieta-aldaketek eragindako kitzikapenaren eta emozionaltasunaren aldaketak ebaluatzeko, saguak eremu irekiko probara jasan zituzten 24 ordutan HF dieta kendu eta gero (10). Eszitazio neurri gisa puntuatutako lerroen gurutze osoek affectedFosB adierazpena (F = 6.6, P <0.05) eta dietak (F = 4.6, P <0.05; 7A irudia) eragin zuten. ΔFosB saguak aktiboagoak ziren ingurune berrian kontrolak baino, eta post hoc probek erakutsi zuten HF-tik erretiratutako saguak aktiboagoak zirela chow-ean jasandakoak baino (P <0.05). Gorotz boli antsietate antzeko jokabidearen neurri gisa kontatu ziren (10). ΔFosB adierazpenaren efektu nagusia izan zen (F = 10.2, P <0.01), ΔFosB gehiegizko espresioarekin ingurune berrian fecal boli gehiago sortzen zuten, batez ere etxeko chow eta HF erretiratze taldeetan (7B irudia). HF dietan mantendutako osFosB saguek fecal boli gutxiago ekoitzi zuten chow-ean mantendutakoek baino eta proba egin baino 24 ordu lehenago erretiratutakoek. Badirudi kontroleko saguak ez direla dietak kaltetuta. Ez zen significantFosB adierazpenaren edo dietaren efektu esanguratsurik izan eremu irekiaren erdian igarotako denboran (kontrol chow = 14.5 ± 3.1 seg, kontrol HF = 18.0 ± 3.2 seg, kontrol W / D = 15.4 ± 1.9 seg, ΔFosB chow = 16.9 ± 2.4 seg, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 seg, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 seg).
Kopuru 7
Saguek ΔFosB gehiegizko adierazpena gantz-dieta altuen (HF) erretiratzeen eraginpean sentikorragoak izan ziren
Eztabaida
Obesitatearen tratamenduan, elikadura suspertzean eta pisu gainetan eragina duten faktoreak identifikatzeko premia kritikoa dago. Brain saritzeko bideak elikagai atseginak eta aldaketa dietetikoen (6, 10, 15, 16) motibazioa eta erantzuna izaten dute. Seinale oregigenoek eta anorexigenoek hipotalamo-VTA-NA zirkuituan sarbidea zuzenean eragiten dutenean, sari bikaineko energia-aberatsak diren sentsibilizazioko geneen elucidation-a eman dezakete obesitate tratamenduan (17, 18). Horregatik, sariaren eta energiaren orekako markatzaile biokimikoen eta molekularren seinaleztapena aztertu genituen hypothalamus-VTA-NA zirkuituan ΔFosB-overexpressing sagu baten HF dieta bati erantzunez saria hobetzeko (13, 19, 20) , eta dieta-erretiratzea jarraitzen duen jokabidearen sentikortasuna. Dopamina ΔFosB saguetan dopamina sekundarioa deskonektatuta egongo litzateke hipotesiaren arabera, HF dieta baten onuragarriak diren ondorioak normalizatuko lirateke, energiaren orekako seinaleak eta dopamina sistemaren arteko elkargunean sartzen direlako.
NA-ren dopamina-seinaleetan disekulazio-adierazleen adierazgarriak aztertzeko, D1 hartzaile-mailak eta downstream eragileak aztertu ditugu. D1 hartzailearen loturetan ezberdintasun garrantzitsuak egon arren, HF erakusketaren joera izan da ΔFosB saguetan bateratzeko eremua handitzeko. Hau da, interesgarria da ΔFosBren indukzioa droga eta sari naturalen arabera neuron espiniko ertaineko azpimodu dinosauro positiboetan agertzen dela, batez ere D1 hartzaileek adierazten duten moduan (9, 21). Downstream dopamina seinaleztapen helburu pCREB maila nabarmen murriztu ziren ΔFosB saguetan, D1 errezeptore murriztua aktibatzeko garuneko eskualdean (22, 23). Interesgarria da, halaber, ΔFosB saguetan CREB maila guztietan jaitsiera nabarmena detektatu dugu, dopamina seinale transdukzioaren gaitasun murriztuagoa proposatuz. PCREB (24) jaitsiera luzeko ondorioak izan daitezke. BDNF adierazpena pCREB-k arautzen du, D1 aktibazioarekin altxatzen da eta NAk (25, 26) saririk gabeko neuroplasticitatearen bitartekari garrantzitsua da. Hori dela eta, BDNF proteina murriztu egin dugu ΔFosB saguaren NAn batean.
DcP-32 (27) express NA neuron bizkarrezurreko neurona guztiak. Bere eragingailu urriak asko egiten ditu saritzeko bide nagusietan (28), eta droga-menpekotasunean eta dopamina-sisteman inplikatutako beste gaixotasun batzuetan inplikatutako inplikatutako gaixotasunak eta eskizofrenia barne hartzen ditu. (27, 29). Baso murrizketa sakonak DARPP-32 adierazpenean detektatu dugu ΔFosB saguaren NAkean. DARPP-32 adierazpena BDNF-k arautzen du, eta, beraz, adierazpen murriztua zuzenean erlazionatuta egon daiteke ΔFosB saguetan (27, 29, 30) detektatu diren BDNF mailetan. Nahiz eta DARPP-32 fosforilazio egoera aldaketa moderatuetan NAc (27) barruko seinale barruko seinaleak aldatzen diren. Aurreko ikasketek ez dute DARPP-32 proteina aldaketarik egin ΔFosB saguetan 12-wk-tik doxycycline-ren kentzea jarraituz, ebaluazio estruktural zabalagoa egin zenean (31). ΔFosB-ren efektuak DARPP-32-en ondorioak denbora eta eskualde zehatzak izan ditzakeela iradokitzen du.
Hipotesiaren arabera, ΔFosB saguetan NA dopamina-aren seinaleen indizeen murrizketa dramatikoak litekeena da VTA dopamina-proiekzioko neuronetan aldaketak eragiten dituztela, nahiz eta ΔFosB ez dago neuron horien artean soberexpressatuta. Hori dela eta, dopamina-geneen espresioa aztertu genuen VTAan, tirosina hidroxilasa eta dopamina transportadora barne. Tirosina hidroxilasa eta dopamina garraiolariaren mailak positiboki dopamina irteera lotzen dira. ΔFosB saguen joera izan zen tirosina hidroxilasa murriztua eta dopamina garraiolariaren murrizketa esanguratsua erakusteko, Dopamina seinaleztapenaren NA diskoaren arabera.. Dopamina-geneekin lotutako murrizketa basal horiek ΔFosB saguaren VTArekin batera presumiboki aldatzen ari diren NA-ren erreakzioa islatzen dute epe luzerako ΔFosB soberexpresioan, BDNF hartzailearen adierazpena aztertu genuen, TrkB, Vc (32) NArako feedbackaren mekanismo posible gisa. Tirosina hidroxilasa eta dopamina transbordadorea bezalakoak, TrkB adierazpenean ere ΔFosB saguetan murriztu zen joera bat izan zen, eta horrek ez zuen garrantzirik lortu konparazio anitzetarako zuzendutakoan. BDNF-TrkB konplexua berregituratu daiteke eta VTA barruan jarduten du tokiko geneen adierazpena eragiteko eta hazkunde eta mantentze zelularrak sustatzeko (33). Gainera, NA-ren TrkB presinapticaren BDNFren aktibazioa zuzenean dopamina neurotransmisorea estimulatzen du (32), dopamina-seinaleen azpiko seinaleztapena murrizteko.
Κ-opioideen errezeptoreen aktibazio dinorfina dopamina seinaleztapena arautzen du eta NAk VTArako iritzia ematen duen beste mekanismo bat da. (34). Κ-opioideen hartzaileen adierazpena VTAn ΔFosB saguetan murriztuko zela erakutsi zuen. ΔFosB soberexipresioa dimentsioko adierazpidea NA karpetan (20) murrizteko erakutsi da, ΔFosB saguek VTA garbiaren murrizketa sakona izan dezakete κ-opioidearen aktibazioa. Dinorfinaren seinaleztatzeak normalean dopamina neuronen gaineko inhibizio efektua izan arren [35], tratu txarrak sendatzeko auto-administrazio hobea erakusten duten arratoiek dinorfina maila murriztua erakusten dute NAc-n, eta sari sentikortasuna hobetzeko oinarrizkoa den dinorfinaren seinaleztapenaren eginkizuna adierazten dute [36]. , 37). Dinorfinaren - κ-opioide sistema desregulatzea droga gehiegikeria eskuratzearekin eta irautearekin lotu da, dopamina bideen normalizazioan seinaleztapen opioideen oreka kritikoa onartzen duena. (38).
HF dieta trinko energetiko baten sorkuntzako gaitasunean oinarrituta, hipotalamoaren aktibazioaren bidez normalizatzen den sariaren sistema normalizatzen duten ΔFosB saguetan dopamina eta opioideen sariaren kontrako disekulazioa azeleratu egingo lirateke. -VTA-NA zirkuitua. Sei aste dieta-esposizioan, ΔFosBren eta kontrol saguaren arteko elikagaien arteko desberdintasunak ez ziren ikusi, ΔFosB saguetan saririk gabeko markatzaile biokimiko eta molekularretan aurkitutako aldaketak ez zirela kaloria kontsumitutako desberdintasunak eragiten. Aurreikusitako moduan, pCREBn, CREB, BDNF, DARPP-32 eta κ-opioideen hartzaileen maila guztietan detektatu ziren oinarrizko desberdintasunak ΔFosB eta kontrol saguaren arteko mailak murriztu egin ziren. HBF (29, 39-41) ΔFosB saguaren dopamina irteera handitu egin zen. .
Tirosina hidroxilasa eta dopamina VTA garraiolarien azterketak ΔFosBren aurkako erantzun harrigarriak eta HF jarraituz kontrolatzen ditu.. Kontrol saguak tirosinaren hidroxilasa eta dopamina garraiolariaren adierazpena murriztu zuen, eta ΔFosB saguak bistaratu zirenean, dopamina-gene horietako bietan ere bai. Interesgarria denez, tirosina hidroxilasa adierazpena kokaina kroniko edo metanfetaminaren administrazioan (42-44) VTAan aldatzen da, eta ΔFosB saguek HF sari naturala aurkitu dezakete sagu kontrolik baino.
VTArako sarrera hipotalamiko potentziala nola aztertu daiteke energia-oreka islatzen duten seinaleak birbidaltzeko, leptina-hartzailearen adierazpena eta orexina-hartzailea-1 ere aztertu dira. Leptinaren zirkulazioak HF-k handitzen du eta leptina VTA-rekin ere jardun daiteke dopamina seinaleztapena aldatzeko (18, 45). VTAren leptina-hartzailearen adierazpena HF-koa izan zen, bai ΔFosB eta bai kontrol saguetan, pisu gaineko eta dieta-sarrerarekin antzekoak izan zirelako. Gantz altuak ere orexinaren errezeptore-1 adierazlea bai ΔFosB-en eta kontrol-saguetan. Orexin-ek dopamina neuronak aktibatzen ditu VTAn, VTA plastizitatea sustatzen du, eta dopamina maila handitzen du NA (46-48). Dieta gantz handia erakutsi da oreina adierazpenean saguetan, gure behaketekin (49, 50) arabera. Horrela, orexinaren hartzailearen adierazpena eta VTAren leptinen seinaleztapenaren aldaketak ΔFosB eta kontrol saguetan sarien dieta sustatzea ahalbidetuko luke, energia-orekako seinaleen erreferentziak eta saritzeko zuzenean lotuta dauden bideen arteko bereizketa sustatuz.
Sariaren erretiratzea eragiten duten estresak aztertzea, saguak aztertu ziren XFXX kanpoko proba batean, HF kentzea jarraituz. ΔFosB saguak dieta hobeagatiko erretiratzeen ondorio akutuak sentituagoak ziren, arousal jarduera handitu eta fecal boli produkzioa irekitako esparru berrian, gainerako kontrol eta dieta taldeekin alderatuta. ΔFosB saguak ere frogatu zuten portaera eredu interesgarria sariaren eta estresaren sentsibilitatea iradokitzen duen proba honetan, HF dietarekin hasieran papera fekalaren produkzioa murriztuz, eta antsietatearekin erlazionatutako erantzuna handitzen. Eremu irekiko jardueraren hazkuntzari dagokionez, ez zen orexinaren adierazpenaren aldaketekin lotzen, estresaren eragina izan daitekeen erlazio bat proposatuz, orexin bitartekaritza seinaleztapeneko aldaketak besterik ez direla. Oro har, datu horiek gure hipotesia onartzen dute ΔFosB saguek dieta hobetsien erretirorako efektu akutuak sentikorrak izango lirateke, sariaren sentsibilitate handiagoagatik.
Nola funtzionatzen du EAEko ΔFosB epe luzerako overexpression-ek jokabide eta sari bidezko seinaleztapeneko aldaketak dakartza?? VTAren bat-bateko detektatzeko eredu bat proposatu dugu, NAk eta hipotalamoaren aldaketek aldez aurretik jasotako seinaleak bidaltzen dizkieten dopamina sistemaren erregulazioa zehazteko, saritutako bidezko disregulazioaren eta obesitatearen kontrako joera (Fig. 8). HF-ren esposizioan, energia-saldoa eta saria jasotzen dituzten bolumen anitzek VTA bateratzen dute. Leptinaren eta orexinearen seinaleztapenaren handitzeak eta aldaketaren aldaera aldakuntzatik aldentzen direnean, seinale orekszientea HF-k ΔFosB saguetan (17, 18, 45, 47, 51-53) erantzuten die. BDNFn koipeak sortutako goi-kotizazioek sarirako iritzia ematen diote VTAari, dopamina-ren geneen adierazpenean aldaketa gehiago sustatuz.
Kopuru 8
Gantz altuak (HF) dieta normalizatzen du ΔFosB saguetan sariaren deskontua ezartzen
Emaitza horiek saritzeko sentsibilitatearen markatzaile molekularrak delineatu dituzte eta adierazi dopamina sistemaren epe luzeko disekulazioak aditiboak eta obesitatea duten pertsonen predisposition dezake. Gainera, datu horiek helburu garrantzitsu bat eskaintzen dute helburu praktiko terapeutikoetan, obesitatearen tratamendua eta prebentzioa eta sariaren sisteman zentratu daitezkeen bestelako nahasteak zehazteko. Etorkizunean, garrantzitsua izango da sistema hori HF dietaren kentzea nola erantzuten duen ikertzea, baita sentsibilitatearen sexu desberdintasunak saria eta gantz dieta esposizioa aztertzea.
Material osagarria
Lotura. metodoak
Egin klik hemen ikusteko. (61K, doc)
Eskertzak
Autoreak eskerrak eman nahi dizkio Cathy Steffen animaliei ugaltzeko eta transferitzeko laguntza. Lan hau Pennsylvaniako Diabetes Zentroaren (DK019525) Unibertsitateko beka baten laguntzarekin eta Osasun Mentaleko Institutu Nazionalaren (R01 MH51399 eta P50 MH66172) laguntzekin eta Droga gehiegikeriaren Institutu Nazionalaren (R01 DA07359) laguntzekin.
Oin-oharrak
Finantza txostenak: Egile guztiek ez dute interes ekonomiko biomedikorik edo interes gatazkatsu potentzialik.
Erreferentziak
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Bizitza aldatu eta farmakoterapiak obesitatearentzako probatutako ausazko proba. N Engl J Med. 2005: 353 (20): 2111-20 [PubMed].
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Obesitatea gutxitzeko nikotina saritzea: giza eta saguaren gurutze alderatzea. Psikopharmakologia (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Sariaren sentsibilitatearen banakako desberdintasunak janariari buruzko irrika eta pisu erlatiboarekin erlazionatzen dira emakume osasuntsuetan. Gosea. 2005: 45 (2): 198-201 [PubMed].
4. Kelley AE, Berridge KC. Sari naturalen neurozientziak: drogak gehiegizko garrantzia. J Neurosci. 2002: 22 (9): 3306-11 [PubMed].
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Dopamina kronikoki altxatutako saguak erakutsi dute hobekuntza motiboa, baina ez ikastea, elikagaien saria lortzeko. Neuropsychopharmacology. 2006: 31 (7): 1362-70 [PubMed].
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham, arto-olioa elikatzen du arratoiaren dopamina akumulens handitzen. Am J Physiol Erregulatzen Integr Comp Physiol. 2006: 291 (5): R1236-9 [PubMed].
7. Mendoza J, Ángeles-Castellanos M, Escobar C. Elikagai atsegingarrien bidez murgildutako janaria-aurrea hartzeko jarduera eta burmuineko saritutako eremuetan c-Fos adierazpena bultzatzen du. Neurozientzia. 2005: 133 (1): 293-303 [PubMed].
8. Schroeder BE, Binzak JM, Kelley AE. Aktibazio cortical prefrontalaren profil komun bat, nikotina edo txokolatearekin lotutako testuinguruaren inguruko esposizioaren ondoren. Neurozientzia. 2001: 105 (3): 535-45 [PubMed].
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: adituren aldagai molekular iraunkorra. Proc Natl Acad Sci US A. 2001; 98 (20): 11042-6. [PMC doako artikulua] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Dietetiko lehentasunetan gutxitzen diren produkzioak emozionaltasun handiagoa eta dietak berregituratzeko arriskua sortzen dute. Biol psikiatria. 2007: 61 (9): 1021-9 [PubMed].
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB Nucleus Accumbens-en elikadura-indar armatuaren jokabidea eta motibazioa arautzen ditu. Neurozientzia aldizkaria. 2006: 26 (36): 9196-9204 [PubMed].
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Animalia transgenikoak burmuinean gene induzitu eta zuzendutako gene adierazpena. Mol Pharmacol. 1998: 54 (3): 495-503 [PubMed].
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Transkripzio faktorearen adierazpena deltaFosB garunean kokaina sentsibilitatea kontrolatzen du. Nature. 1999: 401 (6750): 272-6 [PubMed].
14. Bale TL, Dorsa DM. Sexu-desberdintasunak eta estrogenoak eragiten ditu oxytocin hartzailearen mezularia ribonucleic acid adierazpen ventromedial hipotalamoan. Endokrinologia. 1995: 136 (1): 27-32 [PubMed].
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Azukre-menpeko arratoiek azukrearen erantzun hobeak erakusten dituzte abstinentzia ondoren: azukre-gabezia efektuaren froga. Fisiol Behav. 2005: 84 (3): 359-62 [PubMed].
16. Will MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-opioidsek gantz gantzaren sarrera erregulatzen du garatutako banaketa sarearen bidez. J Neurosci. 2003: 23 (7): 2882-8 [PubMed].
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Urdaileko seinaleztapenean, seinaleztapenean, nukleoaren estimulazio opioidearen eraginez induzitutako koipe gantzerako beharrezkoa da. J Neurosci. 2007: 27 (41): 11075-82 [PubMed].
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Leptin hartzailearen seinaleztapena midbrain dopamina neuronetan elikadura arautzen du. Neuron. 2006: 51 (6): 801-10 [PubMed].
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosBren zelula-mota espezifiko espezifikoen Striatal zelulak pizgarriak hobetzen ditu. J Neurosci. 2003: 23 (6): 2488-93 [PubMed].
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB funtsezko eginkizuna morfina-ekintza batean nukleoan pilatzen da. Nat Neurosci. 2006: 9 (2): 205-11 [PubMed].
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaina induzitutako bizkarrezur dendritikoa D1-en eta D2 dopamina-hartzaileko nukleoen bizkarrezurreko neurona ertainetan. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103 (9): 3399-404. [PMC doako artikulua] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Droga-menpekotasunaren analisi genetikoa: cAMP erantzunaren elementua lotzen duen proteina. J Mol Med. 1998: 76 (2): 104-10 [PubMed].
23. Nestler EJ. Droga-menpekotasunaren mekanismo molekularrak. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 24-32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. CREB Laburpena eta jarduera burmuinean: eskualdeko espezifikazioa eta indukzio elektrokonvulsiboko sekuentziak. Biol psikiatria. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatin remodeling kokaina-induced plasticity azpian oinarritutako gako-mekanismoa da. Neuron. 2005: 48 (2): 303-14 [PubMed].
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Self DW. BDNF dinamikaren jarduera nukleoan kokaina erabiltzearekin bat datorrenean autoadministrazioa eta errekastoa areagotzen ditu. Nat Neurosci. 2007: 10 (8): 1029-37 [PubMed].
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 tratu txarrak dituzten hainbat droga burutzen ditu. AAPS J. 2005; 7 (2): E353-60. [PMC doako artikulua] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Geneen espresioaren desberdintasunak saguetan metanfetaminaren sentikortasunean hautematen direnak. Mamm Genoma. 2005: 16 (5): 291-305 [PubMed].
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT eta CDK5 / p35 bitaminak neuron neuronak in vitro DARPP-32 indukzio neurotrofikoaren garuneko deribatuak bitartekari dira. J Biol Chem. 2007: 282 (10): 7352-9 [PubMed].
30. Benavides DR, Bibb JA. Cdk5-ren papera gehiegikeria eta plastikotasunean. Ann NY Acad Sci. 2004: 1025. 335-44 [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Coca-ren esposizio kronikoaren ondorioak Cdk5 proteina neuronalean arautzen dira. Nature. 2001: 410 (6826): 376-80 [PubMed].
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrofinasek trp eta p75Lntr errezeptoreen bidez neuronaren mesencephalic neuronak dopamina askatzeko estimulatzen dute. J Biol Chem. 1996: 271 (35): 21100-7 [PubMed].
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNFren funtsezko eginkizuna dopamina bide mesolimikoan, porrota sozialaren estresan. Zientzia. 2006: 311 (5762): 864-8 [PubMed].
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr. Dopamina mesolimikoan saria zirkuituan depresioan. Biol psikiatria. 2006: 59 (12): 1151-9 [PubMed].
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Kappa opioidearen inhibizioa dopamina somatodendritikoa inhibizio korronte postsynaptic. J Neurophysiol. 2007: 97 (1): 883-91 [PubMed].
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Brain dynorphin eta enchaphalin sistemak Fischer eta Lewis arratoietan: morfina tolerantzia eta erretiratzea ondorioak. Brain Res. 1995: 683 (1): 25-35 [PubMed].
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Alkoholaren prezisiorako (AA) eta alkohol-saihesten (ANA) arratoien artean ezberdintasunak prodinorfina eta proenkefalina sistemetan. Alkohola Exp. 1994: 18 (5): 1272-9 [PubMed].
38. Kreek MJ. Kokaina, dopamina eta opioide endogenoa. J Addict Dis. 1996: 15 (4): 73-96 [PubMed].
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. CREBen aurpegi askok. Trends Neurosci. 2005: 28 (8): 436-45 [PubMed].
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamine D1 hartzaileek bitartekaritza egiten dute CREB fosforilazioan NMDA hartzailearen fosforilazioan Ser897-NR1 bidez. J Neurochem. 2003: 87 (4): 922-34 [PubMed].
41. Self DW. Dopamina-sistema mesolimikoan neuroadaptazioen droga-hartzearen eta behaketa-jokabidearen erregulazioa. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 242-55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfina eta kokaina, tirosina hidroxilasa trikimiko komuneko ekintza kronikoek burmuin dopaminergikoan saritzen duten eskualdeetan. J Neurochem. 1991: 57 (1): 344-7 [PubMed].
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Hope BT. Neuronadaptazio molekularrak ebakidura eta ventral area barrutian 90 egunean abstentzioa behartuta kokaina auto-administrazioa arratoietan. J Neurochem. 2003: 85 (6): 1604-13 [PubMed].
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Metanfetaminaren auto-administrazioa tirosinaren hidroxilasa eta dopamina garraiolarien mailan, arratoi mesolimiko eta nigrostriatalen dopamina bideetan. Psikopharmakologia (Berl) 2006; 185 (4): 505-13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Leptinaren mesoacumbens dopamina bidearen erregulazioa. Neuron. 2006: 51 (6): 811-22 [PubMed].
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Proteina kinasearen C inplanteak dopamina estrakelularraren induzitutako altitudean induzitutako C eta bere aberasgarria efektua. Eur J Neurosci. 2007: 25 (5): 1537-45 [PubMed].
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Mintzaplinako bide mesolimiko bidezko aktibazioa eta morfina eragindako portaerak aktibatzen dituzten sistema orekinergikoen inplikazioa zuzena. J Neurosci. 2006: 26 (2): 398-405 [PubMed].
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin VTAko A-ren kritikoa da plastiko sináptikoa eta kokaina sentsibilizatzeko kokaina indukzioarentzat. Neuron. 2006: 49 (4): 589-601 [PubMed].
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Orexin-A eta neuropeptido Y aldaketen aldaketak elikatutako arratoien dieta azkarrak eta koipeak dituzten hipotalamoetan. J Vet Sci. 2004: 5 (4): 295-302 [PubMed].
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Elikagaiak erregulatzen dituzten peptidoak: orexinaren geneen adierazpena areagotzen da hipertriglikeridemia estatuetan. Am J Physiol Erregulatzen Integr Comp Physiol. 2003: 284 (6): R1454-65 [PubMed].
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Elikagaien sarrerarekin aritzen diren peptidoak: gosea-inducing accumbens manipulazioa hypothalamic orexin neuronak aktibatzen ditu eta POMC neuronak inhibitzen ditu. Am J Physiol Erregulatzen Integr Comp Physiol. 2003: 284 (6): R1436-44 [PubMed].
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Orexin / hypocretinaren subpoblazio baten aktibazioa, hipotalamenaren neuronak GABAAren hartzaile-bitartekaritzan oinarrituta, nukleoaren oszilazioen inhibizioaren bidez, baina ez ingurune berri baten esposizioaren arabera. Eur J Neurosci. 2004: 19 (2): 376-86 [PubMed].
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Oreka hipotalamiko alboko neuronak sariaren bila. Nature. 2005: 437 (7058): 556-9 [PubMed].
;