Internet Gaming Disorderrekin lotuta dagoen mikroRNA adierazpen mailak (2018) lotutakoak

Laburpena

Aurrekariak

Interneten eta lineako jokoak erabiltzea eragiten duen mendekotasuna, Internet bidezko joko nahastea (IGD) deritzo. Aldatutako mikroRNA (miRNA) adierazpen profilak odolean eta garuneko ehunetan nahaste psikiatrikoak izan dira eta biomarkatzaile gisa proposatu dira. Hala ere, ez da IGD odol miRNA profilen berririk eman IGDn.

Metodoak

IGD-rekin lotutako miRNAak ezagutzeko, 51 laginen miRNA adierazpen profilak (25 IGD eta 26 kontrolak) aztertu genituen TaqMan Low Density miRNA Array erabiliz. Balidazioa egiteko, alderantzizko transkripziozko PCRa egin genuen 36 lagin independenteekin (20 IGD eta 16 kontrolekin).

Emaitzak

Aurkikuntzaren eta baliozkotze independentearen bidez, hiru miRNA (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, hsa-miR-652-3p) identifikatu genituen IGD taldean nabarmen murriztu zirenak. Hiru miRNA alterazio dituzten gizonezkoek IGD arrisku handiagoa zuten [alterazio-erlazioa (OR) 22, 95% CI 2.29 – 211.11] eta OR-ak dosi handitu egin ziren miRNA aldaketen kopuruarekin. Hiru miRNAren xedeak aurreikusitako geneak bide neuronalekin lotu ziren. Beheko hiru geneen proteinen adierazpena western blot-en bidez esploratu genuen eta GABRB2 eta DPYSL2-en adierazpena IGD taldean nabarmen handiagoa zela baieztatu genuen.

Ondorioa

Hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p eta hsa-miR-652-3p adierazpenak gutxiagotu egin zirela ikusi genuen IGD gaixoetan. Gure emaitzak lagungarriak izango dira IGDren fisiopatologia ulertzeko.

Keywords: Interneteko joko nahastea, mikroRNA, biomarkatzailea, mendekotasuna, western blot

Sarrera

Interneten eta Interneten oinarritutako jolasen erabilera addiktiboa ez da fenomeno soziala Interneteko sarbide azpiegitura zabala duten herrialdeetan, baizik eta balizko nahaste psikiatrikoak Interneteko joko nahastea (IGD) deitu zuen.-). Txosten epidemiologikoen arabera, nerabeen IGDaren prebalentzia tasak aldatu egiten dira herrialde guztietan, 0.8 eta 26.7% (% XNUMX) arte (). Bereziki, ikerketek% 10-tik gorako prebalentzia-indizeak erakusten dituzte Asiako herrialde askotan dauden nerabeetan, hala nola Hego Korea, Txina, Taiwan, Hong Kong eta Singapurren (). IGD kognizioan, harreman psikosozialetan eta eguneroko bizitzan narriadurarekin lotzen da; esate baterako, errendimendu akademikoa edo lanbidea gutxitzea (-). IGD orain III Atalean (Ikerketa Orokorraren Baldintzak) Buruko Nahasteen Eskuliburu Diagnostiko eta Estatistikoaren (DSM-V) bosgarren berrikuspenaren barruan sartzen da (). Dena den, garrantzi kliniko-soziala izan arren, ez da ezer ezagutzen IGDren mekanismo genetiko molekularraz.

Eskala handiko bikiek egindako azterlanek jatorri genetikoa iradoki dute IGDrentzat (, ). Vink et al. Herbehereetako Bikien 5,247 nerabeen bikingo monozigotiko eta diozgotikoekin Interneten erabilera konpultsiboan dauden desberdintasunak ikertu zituen eta jakinarazi zuten ezberdintasunen% 48 faktore genetikoek azaldu zutela (). Li et al. Txinako nerabe bikien 825 bikoteak ikusi dituzte eta faktore genetikoek 58 – 66 desberdintasunak% azaldu dituztela jakinarazi dute (). Horren arabera, neurotransmisioan, kognizioan eta atentzioan, hala nola dopamina hartzailearen D2 genean, parte hartzen duten geneen polimorfismoakDRD2), kateolamina-O-metiltransferasa gene (COMT), serotonina garraiatzailearen genea (5HTTLPR), eta hartzaile kolinergikoa alfa 4 alfa nikotinikoa (CHRNA4Interneten menpekotasunarekin lotura handia duela adierazi da (-). Berriki, Kim et al. 100 hautagaien gene baino gehiagoren aldaerak proiektatu zituzten neurotransmisoreen ekoizpenarekin, ekintzarekin eta metabolismoarekin erlazionatutako hurrengo belaunaldien sekuentziazio-analisiaren bidez eta rs2229910 NTRK3 genea IGD-rekin lotuta dago ().

Faktore genetikoez gain, jakina da fenotipo neurobehavioralak epigenetikoki kontrolatzen dituztela kodetuko ez duten ARNak mikroRNAak (miRNAs) barne (, ). MiRNAk kodetasun bakarreko ARN molekula ez diren kodetze txikiak dira (gutxi gorabehera 20 – 23 luzera duten nukleotidoak), proteina-kodeketako geneen adierazpenak erregulatzen baitute mRNA degradatuz eta hainbat gaixotasun prozesu fisiofisiologikoan rol garrantzitsua betetzen dute.). Froga-lerroak frogatu dute miRNA ugariak direla giza giza nerbio zentralaren (CNS) sisteman eta CNS sistemaren garapen eta heltzeetan parte hartzen duten helburu geneen adierazpen mailak doitzeko funtzionatzen dute.). Izan ere, azken azterlanek agerian utzi dute miRNAren adierazpen-profilak gaixotasun psikiatrikoak dituzten gaixoen garuneko ehunetan aldatzen direla, iradokizunak direla eta, nahasmendu psikiatrikoetarako biomarkatzaileak izan litezkeela., , ). Adibidez, postmortem azterketaren bidez, Lopez et al. glutamato metabotropiko hartzailearen-1202 genearen adierazpena erregulatzen duela eta antidepresiboaren erantzuna aurreikusten duen miR-4-en espresioa jakinarazi du depresio-nahaste handien gaixoen gaixotasun aurreko aurrealdeko ehunen erregulazio txikian.). Biomarkatzaileen azterketari dagokionez, planteamendu honek muga argia du, CNS-eko ehunen biopsia egitea ezinezkoa delako. Odolean (mi edo plasma) miRNA detektatu daitezkeenean, miRNA zirkulatzaileak abantaila zehatzak dituzte biomarkatzaile ez-inbaditzaile gisa, nahaste neuropsikiatrikoetan. Hala ere, orain arte ez dira miRNA profilak zirkuitu zirkulatzaileari buruzko ikerketak egin. MiRNA adierazpenen zirkulazio-profilak hobeto ulertzeak IGD garapenaren mekanismoa argitu dezake eta itzulpen klinikoa erraztuko du.

Ikerketan, IGDrekin lotutako miARN markatzaileak identifikatu nahi izan genuen, IGDren eta kontrol taldeen artean plasma mikroNA mieretan adierazitakoak behatuz eta haien ondorio biologikoak aztertuz.

Materialak eta metodoak

Azterketa gaiak

3,166 nerabeak (12 – 18 urte bitartekoak) aztertu genituen DSM-V IGD puntuazioarekin. Horien artean, 251 (168 gizonezkoen eta 83 emakumezkoen) IGD gisa diagnostikatu zuten DSM-V irizpideen arabera.). 91 partikularrei (49 IGDak eta 42 kontrolak) guztira azterketa honen baimen informatua eman zuten. Horien artean, lau pertsona baztertuta zeuden bazterketa irizpideen arabera. Azkenean, 87 gizabanakoek (45 IGD gaiak eta 42 kontrol osasuntsua duten pertsonak) matrikulatu ziren azterketa honetan. Horien artean, 51eko partaideak (25 IGD gaixoak eta 26 kontrolak) 2014 eta 2016-en aurkitutako aurkikuntza gisa erregistratu ziren. 36eko beste parte-hartzaileek (20 IGD gaixoak eta 16 kontrolak) kontratatu ziren 2016-eko baliozko baliozko multzo gisa. Parte-hartzaile guztiek Koreako pertsonak izan ziren, Seul St. Mary (Hospital, Seoul, Hego Korea) eta Seoul-eko Unibertsitate Nazionaleko Boramae Ospitaleko (Seoul, Hego Korea) matrikulatuta. Parte-hartzaile guztiek elkarrizketa egituratu bat egin dute, psikiatra bat, Koreako Kiddie-ren baitan, Afektiboaren nahasteak eta eskizofrenia (K-SADS-PL) programaren arabera.). Parte-hartzaile guztiek Koreako-Wechsler-eko Adimen Eskalan blokeen diseinua eta hiztegia azpimarratu zituzten, 4th edizioa (K-WISC-IV).). Barrett Impulsiveness Scale (BIS) barrunbeak ebaluatu ziren.). Behavioral Inhibition System (BInS) eta Behavioral Aktibazio Sistemaren (BAS) eskalak neurtu ziren, nortasunaren dimentsioa ebaluatzeko.). Bazterketarako irizpideak honako hauek izan dira: iraganeko edo uneko medikoko gaixotasun nagusiak (adibidez, diabetes mellitua), nahaste neurologikoa (adibidez, desamortizazio-arazoak, buruko lesioak), nahaste psikiatrikoak (adibidez, depresio handiko nahasmendua, antsietate nahasteak), atzerapen mentala edo substantzien gehiegikeria (adib. , tabakoa, cannabis, alkohola). Ikasketa gaien ezaugarri orokorrak taulan laburbiltzen dira Table1.1. Ikerketa hau Unibertsitate Katolikoaren Mediku Unibertsitate Katolikoaren Review Board organikoak (MC16SISI0120) onartu zuen. Parte-hartzaile guztiek eta gurasoek idatzizko baimena eman zioten.

Table 1

Ikasketa gaien ezaugarri orokorrak.

 DiscoveryValidationKonbinatua
 
 KontrolIGDP-valueKontrolIGDP-valueKontrolIGDP-value
N2625 1620 4245 
Adina (urte)
Batez bestekoa (min-max)13 (12 - 17)13 (12 - 15)0.75915 (13 - 18)14.5 (12 - 18)0.62814 (12 - 18)14 (12 - 18)0.509
Asteko Internet joko orduak (h)
Batez bestekoa (min-max)5.25 (2 - 17)18 (6 - 46)1.27E-6a5.5 (2 - 23)8 (1 - 112)0.3745.5 (2 - 23)14 (1 - 112)1.63E-5a
Etxeko errenta hilero (milioi KRW)
Batez bestekoa (min-max)5 (1 - 9)3 (1 - 9)0.5884 (4 - 4)2 (2 - 2)1.0005 (1 - 9)3 (1 - 9)0.460
Hezkuntza (urte)
Batez bestekoa (min-max)8 (7 - 9)8 (7 - 9)0.58412 (12 - 12)6 (6 - 13)0.3058 (7 - 12)8 (6 - 13)0.269
K-WISC: bloke diseinua
Batez bestekoa (min-max)10.5 (4 - 17)10 (4 - 16)0.54410 (3 - 16)12.5 (4 - 15)0.12510 (3 - 17)11 (4 - 16)0.598
K-WISC: hiztegia
Batez bestekoa (min-max)9 (5 - 17)7 (5 - 13)0.1749.5 (8 - 15)11.5 (5 - 15)0.5959 (5 - 17)9 (5 - 15)0.527
KS
Batez bestekoa (min-max)24 (17 - 36)37 (22 - 51)3.81E-6a29 (17 - 34)59 (22 - 108)1.2E-5a25 (17 - 36)40 (22 - 108)2.05E-10a
BIS
Batez bestekoa (min-max)63 (35 - 75)67.5 (45 - 81)0.08061 (45 - 79)63 (32 - 82)0.83562 (35 - 79)65 (32 - 82)0.240
BAS
Batez bestekoa (min-max)31 (15 - 40)31 (13 - 51)0.55836.5 (22 - 48)34 (27 - 52)1.00032 (15 - 48)34 (13 - 52)0.637
paperontziak
Batez bestekoa (min-max)18 (10 - 26)17.5 (13 - 27)0.64218.5 (12 - 25)20 (13 - 21)0.13818 (10 - 26)19 (13 - 27)0.302
 

IGD, Interneteko jolasen nahaste pazienteak; KS, Korean Internet Addiction Proneness Scale; BIS, Barratt Impulsivity Scale; BAS, Behavioral Activation System; BInS, Behavioral Inhibition System; KRW, Korean Won.

aP <0.05 (Mann – Whitney – Wilcoxon proba).

TaqMan baxua dentsitatea miRNA array (TLDA) esperimentuak

Parte hartzaile bakoitzak odol periferikoa jaso zuen eta 4 h laborategira transferitu zen odol-zelularen lizentzia minimizatzeko. Espena 3,000 rpm-ra centrifugatu zen 10 min giro tenperaturan. Ondoren, supernatatzaileak (plasma geruza) odol zelulak kutsatu gabe bildu ziren. MiRNA zirkulatzaileak TaqMan miRNA ABC arazketa kit (Human Panel A; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, AEB) erabiliz fabrikatu ziren fabrikatzailearen instrukzioaren arabera. Laburbilduz, 50 µL plasma-laginak eta 100 µL buffer bufferrak nahastu ziren. Helburu espezifikoen aurkako miRNAko aleak dituzten magnesioen hibridazioaren ostean, miRNA mugitutako muga 100 µL eluitzeko bufferrekin eluitu egin ziren. Aurkikuntza fasean, 381 miRNA aztertu dira 51 plasma laginak (25 IGDs eta 26 kontrolak) TaqMan miRNA ABC arazketa kit (Human Panel A; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) fabrikatzailearen argibideen arabera. Megaplexa alderantzizko transkripzioa eta aurre-amplifikazioaren erreakzioak egin dira miNA-ren espresioaren analisirako kantitatea handitzeko MegaplexPreAmp Primers Human Pool A eta TaqManPreAmp Master Mix (Thermo Fisher Scientific) erabiliz. TLDA panelak A v2.0 (Thermo Fisher Scientific) ViiA7-en denbora errealeko PCR sisteman (Thermo Fisher Scientific) exekutatu zen, miRNAren adierazpena ebaluatzeko. Datu gordinak ExpressionSuite Software v1.0.4 (Thermo Fisher Scientific) erabiliz prozesatu ziren miARN bakoitzerako Ct balioak zehazteko.

TLDAren datuen analisia

MiRNA bakoitzaren atalase zikloak (Ct balioa) neurtu ditugu lehenengo. Ct balioa> 35 duten miARNak antzeman ezin diren moduan hartu ziren eta ondorengo analisietatik kanpo utzi ziren. Ct balio guztiak miR-374b (ΔCt balioa) Ct balioarekin normalizatu ziren, giza plasman zirkulatzen duten miRNA egonkorren adierazitakoa (). Espresioaren log2 tolesten arteko aldaketa ratioa ()Ct balioa) kalkulatu da kontrolatzeko laginen batez besteko balioak erabiliz.). MiRNA helburu bakoitzaren kuantifikazio erlatiboa (RQ) 2 gisa definitu zen-ΔΔCt. Bi taldeen arteko adierazpen desberdintasunaren azterketa hipotetikoetarako, aldagai aldaketen analisia (SVA) aplikatu genuen heterogeneotasunak ateratzeko, adibidez, batch efektuak esperimentuetan SVA paketea Bioconductor-en (). a P-balioa <0.05 bi taldeen artean nabarmen desberdina dela uste zen.

Gene Set Enrichment analisia

Gene multzo aberastasunaren azterketarako, ToppFun ToppGene Suite-n erabili dugu.) Gene Ontologia (GO) aberastutakoa baino gehiagorekin (adibidez)) terminoak, bideak eta gaixotasunak. Ikuspegi honetarako sarrera gisa, 1,230 miRNA hautagaien xede generoak erabili genituen. Bideen analisiak aurreikusitako xede geneen bide esanguratsuak erabili ziren, KEGG, BioCarta, Reactome, GeneMAPP eta MSigDBin ToppGene bideetatik. Aberastasun termino funtzionalen garrantzia Bonferroni-doitutakoaren arabera zehaztu zen P-value.

Atzerako transkripzioaren PCR (qRT-PCR) baliozkotzea eta erreplikatzea

Aurkikuntza-fasean desberdina izan den 10 miRNA baliozkotzeko, qRT-PCR TaqMan MicroRNA Assay (miR-15b-5p, #000390; miR-26b-5p, #000407; miR-29b-3p) 000413; miR-125b-5p, #000449; miR-200c-3p, #002300; miR-337-5p, #002156; miR-411-5p, #001610; miR-423-5p, #002340; miR-483 -5p, #002338; eta miR-652-3p, #002352) eta ViiA7 sistema (Life Technologies) fabrikatzailearen protokoloaren arabera. ARN osoaren hamar nanogenoak lehen mailako ADNN bihurtu ziren, miRNA espezifikoko lehenizleekin, TaqMan MicroRNA alderantzizko transkripzio kitarekin (#4366596, Life Technologies) TaqMan zundaketekin denbora errealean. MiARN bakoitzaren RQ 2 gisa definitu zen-ΔCt, non ΔCt dagokion laginaren atalase zikloen aldea da, miRNA endogenoaren aurka normalizatua (miR-374b-5p, #001319). PCR erreakzio guztiak hiru aldiz burutu ziren eta batez bestekoa izan zen Ct balioak. MiRNA bakoitzaren log2 fold-change ratio (ΔΔCt) kalkulatu dugu array-en oinarritutako analisian bezala. Mann-Whitney-Wilcoxon-eko parametro ez-parametriko bat egin da miRNAen adierazpen mailetan ezberdintasunak probatzeko atalasearekin. P-0.05-en balioa.

Western blot analisia

Eguzki-lagin bakoitzak lehen ugaritasun handiko 14 proteinak (albumina, immunoglobulina G, A immunoglobulina, serotransferrina, haptoglobina, alfa-1 antitripsina, fibrinogeno, alfa-2 macroglobulina, alfa-1 azido glikoproteina, immunoglobulina M, apolipoproteina AI agortu ziren) , A-II apolipoproteina, C3 osagarria eta transthyretin) MARS-14 zutabea erabiliz (4.6 × 50 mm, Agilent Technology, Santa Clara, CA, AEB) western blot analisiaren aurretik. MARS-14 zutabetik lortzen den loturarik gabeko frakzioa Amicon Ultracel-3 zentrifugatzeko iragazki baten bidez (3 kDa ebaki) erabiliz kontzentratu zen eta, ondoren, proteina kontzentrazioa zehaztu zen azido bicinoninikoaren metodoa erabiliz. Kontrol eta IGD serumeko laginak (10 eta 30 µg) 4-20% Mini-PROTEAN TGX aurrez aurreko gel batean (Bio-Rad, CA, AEB) bereizitako zenbateko berdinak eta polivinilidene difluoruro mintz batera transferitu ziren. Ondoren, mintzari TBS-T blokeatuta zegoen (190 mM NaCl, 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, eta 0.05% Tween 20) 5% gantz gabeko esnearekin 30 min. Ondoren, mintzek DPYSL2en aurkako lehen antigorputzekin inkubatu zituzten (1: 500, Novus Biologicals, Littleton, CO, USA), GABRB2 (1: 1000, Abcam, Cambridge, MA, USA) eta CNR1 (1: 100, Santa Cruz Biotechnology , Inc., Santa Cruz, CA, AEB), DUSP4 (1: 500, MybioSource, San Diego, CA, AEB) eta PI15 (1: 500, MybioSource, San Diego, CA, AEB) TBS-T-n 5-ekin % Gantz gabeko esne lehorra 4 ° C gauean, eta gero bigarren mailako antigorputz egokiekin, bai behi anti-sagua (1: 1,000, Santa Cruz Biotechnology) edo ahuntz anti-untxia (1: 1,000, Cell Signalling, Beverly, MA, USA ), horseradish peroxidase batera conjugated to 1 h tenperaturan. Seinalearen detekzioa kimiolumineszentziarekin egin da ECL erreaktiboarekin (GE health, Piscataway, NJ, AEB). Western blot emaitzak kuantifikatu ditugu TotalLab 1D analisirako softwarea (Dinamika lineala, Newcastle upon Tyne, UK) erabiliz. Ondoren, densitometria ratioa balioa kalkulatu zen lagin bakoitzaren densitometria balioa beste leku batzuetan bezala deskribatuta.). Normalizazioaren kontrol gisa, 46 IGD eta kontroleko laginen artean serum lagina erabili da esperimentu bakoitzerako. Estatistikaren esanahia Mann-Whitney-Wilcoxon ez parametrikozko test baten bidez zehaztu da atalase batekin P-0.05-en balioa.

Emaitzak

Ikerketarako gaien ezaugarriak

Ikasketa gaien ezaugarri demografikoak eta klinikoak taulan agertzen dira Table1.1. IGD eta kontrol-taldeak Interneten Addiction Korean Proneness Eskala arabera alderatu genuenean.K-Eskala) beste nonbait deskribatu bezala (, ), IGD taldeak kontrol taldekoa baino mediana K-eskala balioa baino handiagoa erakutsi zuen (37 vs. 24, P = 3.81 × 10-6) (Taula (Table1) .1). IGD taldean Internet bidezko jokoetan gastatutako asteroko batez besteko denbora kontrolek baino askoz luzeagoa izan zen (18 vs. 5.25 h, P = 1.27 × 10-6). Bi talderen artean ez zegoen alderik adinaren, hileko etxeko errentaren, hezkuntzaren iraupenaren, blokearen diseinuaren eta K-WISC, BIS, BInS eta BASen emaitza azpimarragarrien artean.

Diferenziaz adierazitako miRNAs IGD eta kontrolen artean

IGDrekin lotutako miRNAak ezagutzeko, bi urrats (aurkikuntza eta baliozkotze independentea) planteatu genuen. Ikerketaren diseinua eta estrategia orokorra S1 irudian ageri dira Material osagarrian. Aurkikuntza fasean, 51 laginen miRNA adierazpen profilak (25 IGDs eta 26 kontrolak) aztertu genituen 384 miRNAak dituzten miRNA matrizea erabiliz. 10 miRNAen adierazpen mailak IGD eta kontrol taldeen artean nabarmen desberdinak direla ikusi da (Table2) .2). 10 miRNA horien adierazpen maila erlatiboak Irudian erakusten dira Figure1.1. Horien artean, bi (hsa-miR-423-5p eta hsa-miR-483-5p) arautu ziren eta zortzi (hsa-miR-15b-5p, hsa-miR-26b-5p, hsa-miR-29b-XNUMpb hsa-miR-3b-125p, hsa-miR-5c-200p, hsa-miR-3c-337p, hsa-miR-5-411p, eta hsa-miR-5-652p) gutxieneko multzoan zeuden.

Table 2

Diferentzialki adierazitako mikroRNAak (miRNA) eta tolestura aldaketak.

miRNADiscoveryValidationKonbinatua
 
 P-valueAldaketa tolesteaP-valueAldaketa tolesteaP-valueAldaketa tolestea
HSA-Mir-15b-5p0.0330.8290.6941.1190.3810.947
HSA-Mir-26b-5pa0.0080.8710.0490.8410.0130.857
HSA-Mir-29b-3p0.0050.4000.5601.1870.0890.647
HSA-Mir-125b-5p0.0210.5820.2900.9500.0690.723
HSA-Mir-200c-3pa0.0110.3360.0030.5422.93 × 10-50.415
HSA-Mir-337c-5p0.0090.3850.5820.8720.0200.553
HSA-Mir-411-5p0.0040.3220.3361.2820.1580.595
HSA-Mir-423-5p0.0261.3870.1890.9550.5181.175
HSA-Mir-483-5p0.0181.8610.7651.4130.2111.647
HSA-Mir-652-3pa0.0190.7150.0490.8770.0110.782
 

amiRNAs nabarmen aldatu dira bai aurkikuntza eta balioztatze multzoetan modu koherentean.

 

Irudi bat, irudia eta abar gordetzen duen kanpoko fitxategia. Objektuaren izena fpsyt-09-00081-g001.jpg

10 erlatiboki adierazitako miRNAen adierazpen mailak. Kuantifikazio erlatiboa (RQ) miR-374b-5p-era normalizatu zen.

qRT-PCR hautagaien miRNA balioztatzea

10 hautagai miRNA balioztatzeko, qRT-PCR egin genuen balioztatze-multzo independente batekin (20 IGDs eta 16 kontrolak) (S1 taula Material osagarrian). MiRNA horietatik hiru (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p eta hsa-miR-652-3p) nabarmen gutxitu ziren balioztatze-multzoko IGD taldean (taula. (Table2) .2). Beste hiru miRNA (hsa-miR-337c-5p, hsa-miR-125b, eta hsa-miR-423-5p) ere gutxitu egin ziren IGD taldean, baina ez dira nabarmen. Lau miRNA mantendu (hsa-miR-15b-5p, hsa-miR-29b-3p, hsa-miR-411-5p eta hsa-miR-423-5p) aurka azaldu ziren balioztatze-multzoan. Aurkikuntza- eta balioztatze-multzoak konbinatu genituenean (guztira 45 IGD subjektu eta 42 kontrolak), hiru miRNA balioztatuak etengabe esanguratsuak ziren (taula (Table2) .2). Informazio zehatza, kokapen kromosomikoak, sekuentzia helduak eta hiru miRNA hauen CNSn adierazpen maila eskuragarri daude S2 taulan Material osagarrian.

Hiru miRNAs aldi berean aldatzea eragin sinergikoa IGD arriskuan

Hiru miRNAren eragin konbinatua ebaluatzeko, lau azpitaldeen (0, 1, 2 edo 3 miRNA alterazioekin) odds ratioak (OR) erlazioak ikusi ditugu. miRNA alterazioa RQ balioa zehaztu zen "atalean deskribatu bezalaMaterialak eta metodoak". Hiru miRNAen markatzaile guztiak IGD taldean arautu zirenez, miRNA horren RQ balioa azpian zegoena aldatu egin zen. Hiru miRNAren azterketarako gai bakoitzaren informazio zehatza S3 taulan dago Material osagarrian. Azpi-talde bakoitzerako, odds kontrolen kopuruak IGDen arteko erlazio gisa kalkulatu ziren, orduan OR bakoitza azpitalde bakoitzaren odds zatituta kalkulatu zen azpitaldeko odds aldaketarik egin gabe. Hiru miRNA alterazio izan duten pertsonek 22 arriskua erakutsi zuten, miRNA aldaerarik izan gabe baino (OR 22, 95% CI 2.29 – 211.11). ORek gero eta joera handiagoa erakusten dute 0 eta 3 etatik alteratutako miRNA kopurua (r2 = 0.996) (irudia (Figure22).

Irudi bat, irudia eta abar gordetzen duen kanpoko fitxategia. Objektuaren izena fpsyt-09-00081-g002.jpg
Odds ratioak (OR) beherantz araututako mikroRNA (miRNA) markatzaileen arabera. Puntuen gaineko estimazioen gainetik dauden balioak EDak dira (95% konfiantza-tartea).

Kandidatuen miRNAren Xede Geneen azterketa GO eta Pathway

IGI taldean hiru miRNA markatzaileen funtzioei buruzko xehetasunak lortzeko, miRWalk 2.0 datu-basea erabiliz aurreikusi ziren haien xede geneak (). 1,230 geneak lau koherente (miRWalk, miRanda, RNA22 eta Targetscan) helburu xume gisa iragartzen zituzten helburu gisa miRWalk datu-basea erabiliz.-) (S4 taula Material osagarrian). ToppFun ToppFene Gene-ren aberastasun-azterketak ikusita, miRNA horien xede geneak nabarmenki lotuta zeuden garapen neuronal bideekin erlazionatuta zeuden, esate baterako, "Axon gidaritza" eta GO bezalako terminoak "neurogenesiak" (Material osagarriaren S5 taula).

Aurreikusitako Xede Geneen Adierazpena

Hiru miRNAren helburu beheko geneen artean, 140 aldi berean bi miRNA edo gehiago aurreikusten ziren (taula S4 Material osagarrian). Beheko xedeen geneetako proteinen adierazpen mailak IGD eta kontrol taldeen artean desberdinak diren ala ez aztertzeko, 2 geneak aukeratu ditugu (DUSP4 PI15), 3 miRNAs eta 3 gene osagarriak beherako helburu bezala aurreikusten direnak (GABRB2, DPYSL2, eta CNR1) 2 miRNAetarako aurreikusitakoetatik eta western blot azterketak egin zituzten 28 IGDs eta 28 kontroletako plasma laginekin esperimenturako erabilgarri daudenekin. IGD eta kontrol taldeen arteko bost helburuen adierazpenak alderatu ditugu, bandaren intentsitatea eta eremua beste nonbait deskribatuz (). Horien artean, DPYSL2 (28 IGDs eta 28 kontrolen adierazpen mailak) P = 0.0037) eta GABBR2 (27 IGD eta 28 kontrol, P = 0.0052) nabarmen altuagoak izan ziren IGD taldean (irudia (Figure3) .3). Hala ere, ezin izan dugu CNR1-en adierazpen diferentzialak behatu (P = 0.0853), DUSP4 (P = 0.5443), eta PI15 (P = 0.6346).

 

Irudi bat, irudia eta abar gordetzen duen kanpoko fitxategia. Objektuaren izena fpsyt-09-00081-g003.jpg

Western blot irudiak eta laukitxoko puntuak adierazpen erakusten dute (A) DPYSL2 eta (B) GABRB2. Bi DPYSL2 eta GABRB2 proteinek Interneten joko nahastearen (IGD) eta kontrol laginen arteko adierazpen mailetan desberdintasun nabarmenak agertu zituzten (P-balioa <0.05). Bi proteinak maila altuagoetan adierazi ziren IGD laginetan.

Eztabaida

Jakinarazi da miRNAak garapen neuronalean parte hartzen dutela (, ), eta garuneko miRNAen adierazpen diferentziala eskizofrenian (gaixotasun psikiatrikoetan) antzeman da). Beraz, miRNA zirkulatzen duten profilak IGDrako biomarkatzaile erabilgarriak izan daitezkeela pentsa daiteke. MiRNA zirkulatzaileak iradokitzen dira biomarkatzaile gisa nahaste neuropsikiatriko askotarako (-); hala ere, IGD garapenaren atzean dauden mekanismo molekularrak oraindik ez dira asko ezagutzen bere garrantzi klinikoa eta soziala izan arren. Zehazki, ez da azterketarik egin IGDrekin lotutako miRNAei buruz. Ikerketa honen helburua bi bider zen. Lehenik eta behin, IGDrekin lotutako plasma miRNAak deskubritzen saiatu ginen. Bigarrenik, miRNA hautagaien inplikazio biologikoa ebaluatu genuen downstream geneen proteinen adierazpena eta GO esploratuz. MiRNA adierazpen profilen eta generoaren balioztapenen deskribapenaren bidez genoma zabalaren bitartez, hiru miRNAren adierazpena (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p eta hsa-miR-652-3p) aurkitu genuen IGD gaixoetan nabarmen kontrol txikiagoak. Nahiz eta beste zazpi miRNA hautagaien adierazpen ereduak baliozkotzean ez ziren errepikatu, negatibo faltsua izan daiteke azterlan honetan laginaren tamaina txikia dela eta. Jakingo dugu, hau da, odol miRNA adierazpen profilak IGDrako biomarkatzaile erabilgarriak izan zitezkeen lehenengo txostena da. Hiru miRNA markatzaileak konbinatzeak IGD arriskuan dauden pertsonak identifikatzeko goiz tresna inbaditzaile gisa balio dezake.

Ikerketa honetan identifikatutako miRNAak nahaste neuropsikiatriko ugarietan daudela jakinarazi dute. Odolean hsa-miR-200c-ren adierazpena eskizofrenian (adibidez, eskizofrenia) hainbat gaixotasun psikiatrikoan behera utzita dagoela jakinarazi da) eta depresio handiko pasarteak (). MiR-200c zatiak sinapsi-frakzioetan oso adierazita zeudela jakinarazi zen, aurrekoaren guztizkoaren kasuan (esate baterako)) eta, gainera, zelula neuronalen heriotzarekin lotuta egotea (). Aurreko txosten hauetan oinarrituta, miR-200c neurona garapenean parte hartzen du eta gaixotasun neuropsikiatrikoekin lotu daiteke, bere adierazpena asaldatu bada. Hainbat ikerketek iradoki dute miR-652-en arteko lotura eta gaixotasun neuropsikiatrikoak izateko arriskua. Gure planteamendua antzekoa da, eskizofrenia egiteko odol biomarkatzaileak identifikatzeko, Lai et al. TLDA azterketa eskizofrenia duten pazienteekin eta kontrol normalekin burutu da eta hna-miR-652-en barne miRNA zazpi eskizofreniarekin desberdina izan zela ikusi dute.). Ondorengo azterketan, miRNAren adierazpen datuak erabiliz aurreikuspen-eredu bat diseinatu zuten eta kontrol eskizofrenia arrakastaz bereizten zuten). Alkoholikoetan ere hsa-miR-652-en adierazpen aldatu zen.). Hsa-miR-26b zelula neuronalen bereizketa aktibatu zenean aurkitu da.). Perkins et al. jakinarazi du eskizofrenia gaixoen aurrez aurreko kortexan hsa-miR-26b erregulatu egin dela.).

MiRNA horien adierazpen asaldatuaren eta IGDaren Fisiopatologiaren arteko erlazioaren arteko lotura zuzena ez den arren, ondoriozta dezakegu miRNA horien disregulazioa IGDko fisiopatologiarekin lotu daitekeela aurreikusitako aurreko txostenetan oinarrituz. . Hala nola, miRNA hiru hesteetako gene batzuk GABRB2, CNR1, NRXN1, eta DPYSL2 gaixotasun neuropsikiatrikoekin lotuta daude. Gamma-aminobutyric azidoa (GABA) da inhibitzaile nagusia neurotransmisore CNS da. GABA hartzailearen desregulazioa nahasteak, antsietatea eta depresioa barne hartzen ditu.), IGDren ezaugarri nagusiak ere badaude.). GABA hartzaileen geneak dituzten polimorfismo genetikoak alkoholaren menpekotasunarekin eta eskizofreniarekin lotuta daude., ). Dihydropyrimidinase antzeko 2 (DPYSL2) kolapsin erantzun mediatzaile proteina familiako kidea da, hau da, mikrotubuluen muntaia, seinaleztapen sinaptikoa eta hazkuntza axonalean duen eginkizuna. Ondorioz, molekula hau biomarkatzaile gisa iradoki da, nahaste psikiatrikoen kasuan., ). Polimorfismoa DPYSL2 alkoholik gabeko nahastearekin lotuta egon dela jakinarazi da gene hori.). Aurreko txostenak eta gure datuek iradokitzen dute GABRB2 eta DPYSL2aren gehiegizko adierazpena, beheratutako araututako miRNAren beheko helburuak direla eta, ondorioz, gaixotasun neuropsikiatrikoak IGD barne hartzen ditu. 1 (CNR1) motako hartzaile Cannabinoidoa, neurotransmisorea askatu eta kannabinoideen seinaleztapenen arazoak sortzen ditu, zenbait gaixotasun neuropsikiatrikoekin lotuta daude.). Polimorfismo genetikoa CNR1 gene ezagutzen da kaukasoarrek substantziaren menpekotasunarekin lotuta dagoela). Arratoi eredu batean, Hippocampus ventral CNR1 aktibazioa gizarte portaera eta kognizio normala eten egiten du.). NRXN familian alterazio genetikoa ezaguna da zenbait gaixotasun neuropsikiatrikoetan parte hartzen duela, besteak beste, mendetasuna (besteak beste).).

Hiru miRNA hautagaiek modu zuzenagoan inplikazio biologikoa aztertzeko, haien beheko helburuko geneen proteina-adierazpenak aztertu ditugu. 140 hautagai arrunten (2 edo miRNA gehiago behean aurreikusita) plasma-laginak erabilgarritasun mugatua direla eta, western blot-ek 5 helburuak (GABRB2, DPYSL2, CNR1, DUSP4 eta PI15) aztertu eta GABRB2-en adierazpena baieztatu dugu. eta DPYSL2 nabarmen handiagoa zen IGD taldean. Aurreko txostenak eta gure datuek iradokitzen dute GABRB2 eta DPYSL2en gehiegizko adierazpena, beheratutako araututako miRNAren beheko xedeak direla eta, ondoriozta dezaket gaixotasun neuropsikiatrikoak IGD barne patogenia. GO eta bide neuralen garapenaren bideetatik aztertutako emaitzek miRNA markatzaileen inplikazio neurobiologikoa ere onartzen dute. Beste aurkikuntza interesgarriak miRNAen aldi bereko aldaketak eragin sinergikoa izan ziren. 3 miRNA guztien beherapenen araberako pertsonek 22 aldiz handiagoa izan zuten beherapenik ez zutenek baino arrisku handiagoa, eta ORk dosi-mendekoak ziren. Hiru aldaketa horietarako aldaketak oso zabalak izan ziren arren, laginaren tamaina mugatua baitzen, korrelazio positiboar2 = 0.996) -k hiru miRNAren efektu sinergikoa onartzen du.

IGD-rekin lotutako miRNA markatzaileak eta hiru miARN alterazio guztiek duten 22 aldiz altuagoak dituzten arrisku bat aurkitu genuen, miRNA aldaketarik ez dutenak baino handiagoak izan arren, azterketa honetan muga batzuk daude. Lehenik eta behin, lagin txikiaren tamaina handiagoa izan da miRNA markatzaile esanguratsuen falta. Bigarrenik, gure datuak ez baitira nahikoa plasma-miRNA profilak kausa edo efektua diren zehazteko, ezin baitugu berretsi ez diren inbaditzaile markatzaile horien rol biologikoak ingurune klinikoan. MiRNA profilaketa gehiago eta haien garapenaren generoaren behealdeko azterketa garuneko banku-bankuko giza garuneko ehunak erabiliz erantzun zuzena eman dezake. Garuneko ehun analisiak jolasen nahaste animalien eredu batekin ere lagungarria izango litzateke. Hirugarrenik, plasma laginen erabilgarritasun mugatua dela eta, bost korrelazio hautazko molekula soilik aztertu genituen. Abiadura handiko helburuak aztertzea lagin multzo handiago batekin lagungarria izango da IGDren mekanismo molekularra ulertzeko.

Laburbilduz, miRNAren adierazpen-profilen eta baliozkotze independentearen genomaren zabalkuntza proiektuaren bidez, hiru IGD lotutako miRNAak aurkitu ditugu (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p eta hsa-miR-652-3p). Euren behera gene askok diharduten nahaste neuropsikiatrikoetan parte hartzen dutela, eta korronte alternoko horien adierazpen aldatuaren balioztatze esperimentala azterketa honetan identifikatutako miRNAren inplikazioa onartzen dute. Hiru miARN guztiak beherako arautzea duten pertsonek arrisku handia dutela aurkitu dugu. Ezagutza kliniko edo ingurumeneko arrisku faktoreekin eta diagnostiko irizpideekin batera, gure aurkikuntzak esku-hartze goiztiarra erraztu dezakete IGD arrisku handiagoa duten pertsonei laguntzeko.

Etika-adierazpena

Ikerketa hau Unibertsitate Katolikoaren Mediku Unibertsitate Katolikoaren Review Board organikoak (MC16SISI0120) onartu zuen. Parte-hartzaile guztiek eta gurasoek idatzizko baimena eman zioten.

Autorearen ekarpenak

MLk eta HCk modu berean lagundu zuten. ML, D-JK eta Y-JC azterketa diseinatu zuten. SJ, S-MC, YP, DC eta JL esperimentuak eta datuen sorrera. J-WC, S-HP, J-SC eta D-JK bildutako odol laginak eta informazio klinikoa. ML, HC, S-HY eta Y-JC datuak aztertu dira. ML, HC, S-HY eta Y-JC deskribatu dute eskuizkribua. Y-JC proiektuak gainbegiratu zuen.

Interes-gatazkaren adierazpena

Egileek diotenez, ikerketa interes-gatazka potentzial gisa ulertu daitekeen edozein merkataritza edo finantza harremanik izan ez zenean egin zen.

Oin-oharrak

 

Finantzaketa. Lan hau Brain Research Programaren beka bat izan zen, Koreako Ikerketa Fundazio Nazionalaren (NRF) Fundazioaren bitartez, Zientzia Ministerioak eta IKTak eta Etorkizuneko Plangintza (NRF-2015M3C7A1064778) Ministerioak finantzatuta.

 

Erreferentziak

1. KS gaztea. Internet mendekotasuna: nahaste kliniko berri baten sorrera. Cyber ​​Psychol Behav (1998) 1 (3): 237 – 44.10.1089 / cpb.1998.1.237 [Gurutze Ref]
2. Petry NM, Rehbein F, Ko CH, O'Brien CP. Interneteko jokoaren desordena DSM-5-en. Curr Psikiatria Rep (2015) 17 (9): 72.10.1007 / s11920-015-0610-0 [PubMed] [Gurutze Ref]
3. Cho H, Kwon M, Choi JH, Lee SK, Choi JS, Choi SW, et al. Interneten menpekotasunaren eskala garatzea, DSM-5-en proposatutako Internet joko-desoreka irizpideetan oinarrituta. Addict Behav (2014) 39 (9): 1361 – 6.10.1016 / j.addbeh.2014.01.020 [PubMed] [Gurutze Ref]
4. Kuss DJ, Griffiths MD, Karila L, Billieux J. Internet mendekotasuna: ikerketa epidemiologikoa berrikusteko azken hamarkadan. Curr Pharm Des (2014) 20 (25): 4026 – 52.10.2174 / 13816128113199990617 [PubMed] [Gurutze Ref]
5. Park M, Choi JS, Park SM, Lee JY, Jung HY, Sohn BK, et al. Interneteko joko desordena duten pertsonen entzumen gertakari potentzialen bidezko informazioaren prozesamendu disfuntzionala. Translated Psychiatry (2016) 6: e721.10.1038 / tp.2015.215 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
6. Lim JA, Lee JY, Jung HY, Sohn BK, Choi SW, Kim YJ, et al. Interneten jolasen nahastea duten pertsonen bizi-kalitatearen eta funtzio kognitiboaren aldaketak: 6 hilabeteko jarraipena. Medikuntza (Baltimore) (2016) 95 (50): e5695.10.1097 / MD.0000000000005695 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
7. van Rooij AJ, Van Looy J, Billieux J. Interneteko jokoaren nahasmendua hezkuntza-eraikuntza gisa: kontzeptualizazio eta neurketarako inplikazioak. Psikiatria Klinikoa Neurosci (2016) 71 (7): 445 – 58.10.1111 / pcn.12404 [PubMed] [Gurutze Ref]
8. American Psychiatric Association, editor. , editorea. Buruko nahasteak eskuliburu diagnostikoa eta estatistikoa: DSM-5. 5th ed Arlington, VA: American Psychiatric Association; (2013).
9. Vink JM, van Beijsterveldt TC, Huppertz C, Bartels M, Boomsma DI. Nerabeen Interneten erabilera derrigorrezkoa den herentziazina. Addict Biol (2016) 21 (2): 460 – 8.10.1111 / adb.12218 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
10. Li M, Chen J, Li N, Li X. Interneten erabilera problematikoaren azterketa bikoitza da: bere herentziazko eta elkarte genetikoarekin kontrol ahalegina. Twin Res Hum Genet (2014) 17 (4): 279 – 87.10.1017 / thg.2014.32 [PubMed] [Gurutze Ref]
11. Han DH, Lee YS, Yang KC, Kim EY, Lyoo IK, Renshaw PF. Dopamina geneak eta sarituko dute mendekotasuna nerabeen Interneten gehiegizko bideo-jokoekin. J Addict Med (2007) 1 (3): 133 – 8.10.1097 / ADM.0b013e31811f465f [PubMed] [Gurutze Ref]
12. Lee YS, Han DH, Yang KC, Daniels MA, Na C, Kee BS, et al. Depresioa 5HTTLPR polimorfismoa eta Interneten gehiegizko erabiltzaileen tenperamentua bezalako ezaugarriak. J eragina du Disord (2008) 109 (1 – 2): 165 – 9.10.1016 / j.jad.2007.10.020 [PubMed] [Gurutze Ref]
13. Montag C, Kirsch P, Sauer C, Markett S, Reuter M. Pentsamenduaren kasua kontrolatzeko azterketa egiten da CHRNA4 genearen rola. J Addict Med (2012) 6 (3): 191 – 5.10.1097 / ADM.0b013e31825ba7e7 [PubMed] [Gurutze Ref]
14. Kim JY, Jeong JE, Rhee JK, Cho H, Chun JW, Kim TM, et al. Zehaztutako exome sekuentziazioa interneteko jolasen nahasmenduaren babes-aldaera bat identifikatzeko, tirozin-kinasa neurotropikoko hartzailearen rs2229910-en, 3 mota (NTRK3): azterketa pilotua. J Behav Addict (2016) 5 (4): 631 – 8.10.1556 / 2006.5.2016.077 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
15. Issler O, Chen A. MikrRNAen eginkizuna zehaztea nahaste psikiatrikoetan. Nat Rev Neurosci (2015) 16 (4): 201 – 12.10.1038 / nrn3879 [PubMed] [Gurutze Ref]
16. Kocerha J, Dwivedi Y, Brennand KJ. Kode ez-arrazagarriak eta gaixotasun psikiatrikoak mekanismo portaera mekanikoa. Mol Psikiatria (2015) 20 (6): 677 – 84.10.1038 / mp.2015.30 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
17. Ambros V. MicroRNAs: potentzial handia duten erregulatzaile txikiak. Gelaxka (2001) 107 (7): 823 – 6.10.1016 / S0092-8674 (01) 00616-X [PubMed] [Gurutze Ref]
18. Hollins SL, Cairns MJ. MicroRNA: garunen ingurumen estresaren garapen genomikoaren ARN bitartekaritza txikiak. Prog Neurobiol (2016) 143: 61 – 81.10.1016 / j.pneurobio.2016.06.005 [PubMed] [Gurutze Ref]
19. Lopez JP, Lim R, C Cruceanu, C, L Fasano, Labonte B, et al. miR-1202 depresio nagusien eta antidepresiboen tratamenduan inplikatutako primaten espezifikoak eta garuneko aberastutako mikroNA da. Nat Med (2014) 20 (7): 764 – 8.10.1038 / nm.3582 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
20. Kim YS, Cheon KA, Kim BN, Chang SA, Yoo HJ, Kim JW, et al. Kiddie-ordutegiaren fidagarritasuna eta baliozkotasuna afektuen nahasteak eta eskizofrenia-presente eta bizitza bertsioa Koreera (K-SADS-PL-K). Yonsei Med J (2004) 45 (1): 81 – 9.10.3349 / ymj.2004.45.1.81 [PubMed] [Gurutze Ref]
21. Kwak K, Oh S, Kim C. Wechsler Koreako Adimen Eskalaren eskuliburua Children-IV (K-WISC-IV) -Mana. Seoul, Hego Korea: Hakjisa; (2011).
22. Patton JH, Stanford MS, Barratt ES. Barratt Impulsiveness eskalaren faktorearen egitura. J Clin Psychol (1995) 51 (6): 768-74.10.1002 / 1097-4679 (199511) 51: 6 <768 :: AID-JCLP2270510607> 3.0.CO; 2-1 [PubMed] [Gurutze Ref]
23. Carver C, TL zuria. Jokabidearen inhibizioa, jokabidearen aktibazioa, eta erantzuna afektiboak, sari eta zigor impenanteei: BIS / BAS eskalak. J Pers Soc Psychol (1994) 67 (2): 319 – 33.10.1037 // 0022-3514.67.2.319 [Gurutze Ref]
24. Weiland M, Gao XH, Zhou L, Mi QS. RNA txikiek inpaktu handia dute: giza gaixotasunetarako biomarkatzaile gisa mikroRNA zirkulatzaileak. RNA Biol (2012) 9 (6): 850 – 9.10.4161 / rna.20378 [PubMed] [Gurutze Ref]
25. Dvinge H, Bertone P. HTqPCR: goi-throughput analisia eta denbora errealeko PCR datuak kuantitatiboak ikusteko R. Bioinformatika (2009) 25 (24): 3325 – 6.10.1093 / bioinformatika / btp578 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
26. Porru JT, Storey JD. Gene adierazpenen azterketan heterogeneotasuna atzematen duena aldagai analogo analisien bidez. PLoS Genet (2007) 3 (9): 1724 – 35.10.1371 / journal.pgen.0030161 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
27. Chen J, Bardes EE, Aronow BJ, Jegga AG. ToppGene multzoa gene zerrenden aberastasun analisiak eta hautematen geneen lehentasuna. Nucleic Acids Res (2009) 37 (Web zerbitzariaren arazoa): W305 – 11.10.1093 / nar / gkp427 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
28. Ashburner M, Ball CA, Blake JA, Botstein D, Butler H, Cherry JM, et al. Gene ontologia: biologia bateratzeko tresna. Gene ontologiako partzuergoa. Nat Genet (2000) 25 (1): 25 – 9.10.1038 / 75556 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
29. Cheon DH, Nam EJ, Park KH, Woo SJ, Lee HJ, Kim HC, et al. Oinarrizko espektrometria top-down masa molekularreko giza proteomaren analisi osoa. J Proteome Res (2016) 15 (1): 229 – 44.10.1021 / acs.jproteome.5b00773 [PubMed] [Gurutze Ref]
30. Parkeko CH, Chun JW, Cho H, Jung YC, Choi J, Kim DJ. Internet joko-adikuntzako burmuina estatu patologiko batean itxi al da? Addict Biol (2017) 22 (1): 196 – 205.10.1111 / adb.12282 [PubMed] [Gurutze Ref]
31. Dweep H, Gretz N. miRWalk2.0: mikroRNA-xede interakzioen atlas integrala. Nat Metodoak (2015) 12 (8): 697.10.1038 / nmeth.3485 [PubMed] [Gurutze Ref]
32. Enright AJ, John B, Gaul U, Tuschl T, Sander C, Marks DS. MicroRNA helburuak Drosophila. Genome Biol (2003) 5 (1): R1.10.1186 / gb-2003-5-1-r1 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
33. Miranda KC, Huynh T, Tay Y, Ang YS, Tam WL, Thomson AM, et al. Eredu oinarritutako metodoa mikroRNA lotesleen guneak eta horien dagozkien heteroduplexak identifikatzeko. Gelaxka (2006) 126 (6): 1203 – 17.10.1016 / j.cell.2006.07.031 [PubMed] [Gurutze Ref]
34. Lewis BP, Burge CB, Bartel DP. Kontserbatutako hazia uztartzeak, askotan adenosinak inguratuta, adierazten du milaka giza gene mikroRNA helburuak direla. Gelaxka (2005) 120 (1): 15 – 20.10.1016 / j.cell.2004.12.035 [PubMed] [Gurutze Ref]
35. Schratt GM, Tuebing F, Nigh EA, Kane CG, Sabatini ME, Kiebler M, et al. Garuneko microRNA batek dendritiko bizkarrezurra garatzen du. Natura (2006) 439 (7074): 283 – 9.10.1038 / nature04367 [PubMed] [Gurutze Ref]
36. Sempere LF, Freemantle S, Pitha-Rowe I, Moss E, Dmitrovsky E, Ambros V. Ugaztun mikroNAk egindako espresio profilak garuneko adierazitako mikro ARN azpimultzo bat deskribatzen du, murina eta giza neurona desberdintzea izan daitekeen rolekin. Genome Biol (2004) 5 (3): R13.10.1186 / gb-2004-5-3-r13 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
37. Beveridge NJ, Tooney PA, Carroll AP, Gardiner E, Bowden N, Scott RJ, et al. MiARN nahastea 181b eskizofrenian denboraren kortexan. Hum Mol Genet (2008) 17 (8): 1156 – 68.10.1093 / hmg / ddn005 [PubMed] [Gurutze Ref]
38. Wei H, Yuan Y, Liu S, Wang C, Yang F, Lu Z, et al. Eskizofrenian miRNA zirkulazio mailak detektatzea. Am J Psikiatria (2015) 172 (11): 1141 – 7.10.1176 / appi.ajp.2015.14030273 [PubMed] [Gurutze Ref]
39. Dwivedi Y. MikroRNAren aplikazio patogeno eta terapeutikoak depresio-nahaste handian. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psikiatria (2016) 64: 341 – 8.10.1016 / j.pnpbp.2015.02.003 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
40. Hara N, Kikuchi M, Miyashita A, Hatsuta H, Saito Y, Kasuga K, et al. Serum microRNA miR-501-3p Alzheimer gaixotasunaren progresioarekin lotutako biomarkatzaile potentzial gisa. Acta Neuropathol Commun (2017) 5 (1): 10.10.1186 / s40478-017-0414-z [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
41. Gardiner E, Beveridge NJ, Wu JQ, Carr V, Scott RJ, Tooney PA, et al. 1q3-eko DLK14-DIO32 eskualdean inprimatua, eskizofrenia lotutako miRNA sinadura definitzen du odol periferikoetako mononukleoen zeluletan. Mol Psikiatria (2012) 17 (8): 827 – 40.10.1038 / mp.2011.78 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
42. Belzeaux R, Bergon A, Jeanjean V, Loriod B, Formisano-Treziny C, Verrier L, et al. Erantzun ez diren eta gaixotasunik gabeko pazienteek transkripzioaren sinadura periferiko desberdinak dituzte depresio handiko pasarteetan. Translated Psychiatry (2012) 2: e185.10.1038 / tp.2012.112 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
43. Lugli G, Torvik VI, Larson J, Smalheiser NR. MikroRNA eta haien aitzindarien adierazpena saguaren helduaren aurreko zatien zatikia sinaptikoetan. J Neurochem (2008) 106 (2): 650 – 61.10.1111 / j.1471-4159.2008.05413.x [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
44. Stary CM, Xu L, Sun X, Ouyang YB, RE White, Leong J, et al. MicroRNA-200c-ek ​​laguntzen du lesioaren ischemia fokuko iragankorra lesioak reelin zuzenduz. Trazua (2015) 46 (2): 551 – 6.10.1161 / STROKEAHA.114.007041 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
45. Lai CY, Yu SL, Hsieh MH, Chen CH, Chen HY, Wen CC, et al. MicroRNAren adierazpena aberrazio eskizofreniarako odol periferiko potentzial gisa. PLoS One (2011) 6 (6): e21635.10.1371 / journal.pone.0021635 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
46. Lai CY, Lee SY, Scarr E, Yu YH, Lin YT, Liu CM, et al. MikrRNAren espresio arraroa eskizofreniarako biomarkatzaile gisa: estatu akututik barkamena partziala, eta odol periferikotik ehun corticalera. Translated Psychiatry (2016) 6: e717.10.1038 / tp.2015.213 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
47. Lewohl JM, Nunez YO, Dodd PR, Tiwari GR, Harris RA, Mayfield RD. Giza alkoholikoen buruan mikroRNAen arautzea. Alkohola klinikoa Res (2011) 35 (11): 1928 – 37.10.1111 / j.1530-0277.2011.01544.x [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
48. Dill H, Linder B, Fehr A, Fischer U. Intronic miR-26b kontrolatzen du neuronalizazio neuronalak bere ostalariaren transkripzioa erreprimituz, ctdsp2. Genes Dev (2012) 26 (1): 25 – 30.10.1101 / gad.177774.111 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
49. Perkins DO, Jeffries CDa, Jarskog LF, Thomson JM, Woods K, Newman MA, et al. MikroRNAren adierazpena eskizofrenia eta nahaste eskizoaffektiboa duten pertsonen prefrontal kortexan. Genome Biol (2007) 8 (2): R27.10.1186 / gb-2007-8-2-r27 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
50. Kumar K, Sharma S, Kumar P, Deshmukh R. GABA (B) hartzaileen liganduen potentzial terapeutikoa drogen mendekotasuna, antsietatea, depresioa eta beste zenbait nahasteetan Pharmacol Biochem Behav (2013) 110: 174 – 84.10.1016 / j.pbb.2013.07.003 [PubMed] [Gurutze Ref]
51. McCracken ML, Borghese CM, Trudell JR, Harris RA. GABAA-ren beta2 subunitatearen amino azido amarratza bat, alkoholen eta anestesien ekintzetarako kritikoa. J Pharmacol Exp (2010) 335 (3): 600 – 6.10.1124 / jpet.110.170472 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
52. Zong L, Zhou L, Hou Y, Zhang L, Jiang W, Zhang W, et al. GABRB2-en transkribapena duen araudi genetikoa eta epigenetikoa: genotipo-menpeko hidroximetilazioa eta metilazio eskizofrenian. J Psychiatr Res (2017) 88: 9 – 17.10.1016 / j.jpsychires.2016.12.019 [PubMed] [Gurutze Ref]
53. Fukata Y, Itoh TJ, Kimura T, C Menager, Nishimura T, Shiromizu T, et al. CRMP-2-ek tubulina heterodimeroekin lotzen du mikrotubuluen muntaia sustatzeko. Nat Cell Biol (2002) 4 (8): 583 – 91.10.1038 / ncb825 [PubMed] [Gurutze Ref]
54. Kekesi KA, Juhasz G, Simor A, Gulyassy P, Szego EM, Hunyadi-Gulyas E, et al. Proteinako kortexan eta suizidioaren biktimen amigdalaren funtzionatutako proteina sare aldatuak. PLoS One (2012) 7 (12): e50532.10.1371 / journal.pone.0050532 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
55. Taylor A, Wang KS. Kaukasoetako laginetan DPYSL2 gene-polimorfismoen eta alkoholen mendekotasunaren arteko lotura. J Neural Transm (Vienna) (2014) 121 (1): 105 – 11.10.1007 / s00702-013-1065-2 [PubMed] [Gurutze Ref]
56. Hua T, Vemuri K, Pu M, Qu L, Han GW, Wu Y, et al. CB1 giza kannabinoide hartzailearen kristal egitura. Gelaxka (2016) 167 (3): 750 – 62.e14.10.1016 / j.cell.2016.10.004 [PMC doako artikulua] [PubMed] [Gurutze Ref]
57. Benyamina A, Kebir O, Blecha L, Reynaud M, Krebs MO. CNR1 genearen polimorfismoek addictive nahasteak dira: berrikuspen sistematiko bat eta meta-analisia. Addict Biol (2011) 16 (1): 1 – 6.10.1111 / j.1369-1600.2009.00198.x [PubMed] [Gurutze Ref]
58. Loureiro M, Kramar C, Renard J, Rosen LG, Laviolette SR. Hippocampuseko kannabinoideen transmisioa nukleoa accumbens neuronak aktibatzen du eta saria eta aversion lotutako emozio-zaletasuna modulatzen ditu. Biol Psikiatria (2016) 80 (3): 216 – 25.10.1016 / j.biopsych.2015.10.016 [PubMed] [Gurutze Ref]
59. Kasem E, Kurihara T, Tabuchi K. Neurexinak eta neuropsikiatrikoak. Neurosci Res (2017) 127: 53 – 60.10.1016 / j.neures.2017.10.012 [PubMed] [Gurutze Ref]