J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.
Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coole LM.
Boarne
Department of Anatomy and Cell Biology, School of Medicine and Medicine, University of Western Ontario, London, Ontario N6A5C1, Canada.
Abstract
Methamphetamine (Meth) brûkers melde dat se ferhege seksueel wille hawwe, in protte seksuele partners, en meidwaan oan ûnbeskerme seks troch ferlies fan remmende kontrôle. Dit twangmjittige seksueel gedrach draacht by oan ferhege prevalens fan seksueel oerdraachbere ynfeksjes, mar de neurale basis hjirfoar is ûnbekend. Wy hawwe earder in paradigma fêststeld foar twangmjittige seksueel gedrach yn manlike rotten wêryn viscerale sykte dy't troch lithiumchloride feroarsake waard mei seksueel gedrach keppele waard (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). De hjoeddeistige stúdzje ûndersocht de effekten fan werhelle Meth-administraasje op seksuele prestaasjes, twangmjittige seksueel gedrach, en seks as Meth-beleanning. Earst lieten de resultaten sjen dat sân deistige administraasjes fan 2 mg / kg, mar net 1 mg / kg, Meth ferhege latencies om paring te begjinnen. Dizze beheining wie evidint 30 min nei lêste Meth administraasje, mar ferdwûn nei 1 of 7 d fan folgjende drugsûnthâld. Werhelle 1 mg / kg Meth-eksposysje resultearre yn twangmjittige seks-sykjende gedrach 2 wiken nei lêste Meth-administraasje. Dit effekt wie ôfhinklik fan Meth-administraasje dy't tagelyk mei seksuele ûnderfining wie en waard net waarnommen yn seksueel erfarne bisten dy't Meth allinich krigen. Boppedat, tagelyk Meth en seksuele ûnderfining ferbettere conditioned place preference (CPP) foar Meth, en foar tagelyk Meth en paring fergelike mei Meth of paring allinich. Yn tsjinstelling, CPP foar paring allinnich waard fermindere. Mei-elkoar jouwe dizze gegevens oan dat de assosjaasje tusken drugsgebrûk en paring ferplicht kin wêze foar ekspresje fan twangmjittige seksueel gedrach en is korrelearre mei ferhege beleanning dy't sykje foar tagelyk Meth-eksposysje en paring.
Ynlieding
Seksuele sûnensrelatearre sykten binnen ferslaafde populaasjes hawwe it bewustwêzen opwekke fan 'e effekten fan drugs fan misbrûk op seksueel gedrach, om't groanysk drugsgebrûk assosjeare is mei ûnfeilige seksuele praktiken dy't resultearje yn in ferhege prevalens fan seksueel oerdraachbere ynfeksjes, ynklusyf minsklik immunodefinysjefirus (HIV) (Crowe en George, 1989; Peugh en Belenko, 2001; Sánchez et al., 2002; Raj et al., 2007; Fisher et al., 2011). Dizze effekten fan drugs op seksueel gedrach binne goed dokumintearre foar de psychostimulant methamphetamine (Meth). Meth-brûkers rapportearje faak ferhege seksueel langstme, opwekking en wille en identifisearje dizze faktoaren as primêre motivaasje foar drugsgebrûk (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Grien en Halkitis, 2006). Boppedat wurdt Meth-misbrûk faak ferbûn mei ferlies fan remmende kontrôle fan seksgedrach of seksueel twangmjittige gedrach (Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson et al., 2002; Grien en Halkitis, 2006) en ferhege prevalens fan HIV (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; Parsons en Halkitis, 2002).
Minske rapporten dy't Meth-gebrûk as foarsizzer fan seksueel risikogedrach oantoand binne basearre op selsrapporten fan chronike Meth-brûkers dy't gjin betroubere mjitting hawwe foar de relaasje tusken Meth-gebrûk en seksueel gedrach (Frohmader et al., 2010b). Sa is in ûndersyk nei Meth-induzearre feroaringen yn seksueel gedrach ûnder kontroleare eksperimintele ynstellings mei in diermodel nedich om de komplekse feriening tusken Meth en seksueel gedrach te begripen.
Koartlyn ûndersocht ús laboratoarium de effekten fan akute Meth op twangmjittige sekssykjen yn manlike rotten (Frohmader et al., 2010a). Dizze stúdzjes brûkten in kondisearre seksaversion-paradigma wêryn manlike rotten learden om paring te assosjearjen mei folgjende viscerale sykte (Peters, 1983; Agmo, 2002). Sadree't dizze assosjaasje tusken paring en de aversive stimulus fêststeld wie, soene bisten gjin matinggedrach begjinne (Davis et al., 2010; Frohmader et al., 2010a). Meth-foarbehanneling fan in inkele ynjeksje wiken foar kondysjonearring fersteurde de oankeap fan remme seksuele antwurden (Frohmader et al., 2010a). Sa, Meth-foarbehannele manlike ratten sochten seksueel gedrach ek al mating wie assosjearre mei in aversive stimulus; dit waard maladaptive of twangmjittige paring neamd.
Om't eardere stúdzjes dy't de effekten fan in akute medisynynjeksje testen en ûndersyk ûndersiikje nei de effekten fan werhelle Meth op seksueel gedrach fan manlike ratten is beheind, wie it haaddoel fan 'e hjoeddeistige stúdzje om de effekten te ûndersiikjen fan werhelle Meth-administraasje op ferskate aspekten fan seksueel gedrach, ynklusyf prestaasjes, twangmjittige sykjen nei seks, en beleanning. Earst waarden de effekten fan werhelle Meth op paring hifke nei medisynadministraasje en nei perioaden fan drugsûnthâld om te ûnderskieden tusken koarte- en lange-termyn effekten fan Meth op seksuele funksje. Dêrnei waarden de effekten fan werhelle Meth-administraasje op maladaptive seksgedrach ûndersocht, it ymplementearjen fan it kondisearre seksaversion-paradigma. Dêrnjonken waard bepaald oft learde assosjaasjes tusken werhelle Meth-eksposysje en seksueel gedrach essensjeel wiene foar de effekten fan Meth op maladaptyf seksueel gedrach. Uteinlik waard it hifke oft werhelle Meth-eksposysje resulteart yn ferbettere beleanning foar Meth en / of paring, lykas bepaald troch kondisearre plak foarkar (CPP) paradigma's.
Materialen en metoades
Subjects
Folwoeksen manlike Sprague Dawley-ratten (210-225 g) waarden krigen fan Charles River Laboratories en ûnderbrocht yn pearen fan itselde geslacht yn standert Plexiglas-kaaien (thúskaaien) mei stikken PVC-pipe foar miljeuferriking. Dieren waarden ûnderbrocht yn in keamer ûnderhâlden op in 12/12 h omkearde ljocht / tsjuster syklus (ljochten út om 11:00 AM) mei iten en wetter beskikber ad libitum. Alle testen waarden útfierd yn 'e tsjustere syklus ûnder reade ferljochting. Stimulusfroulju (200-225 g; Charles River Laboratories) brûkt foar seksueel gedrach waarden bilateraal ovariektomisearre en krigen in subkutane ymplantaat mei 5% estradiolbenzoat en 95% cholesterol. Om seksuele ûntfanklikens te stimulearjen, waarden wyfkes 0.5 mg progesteron yn 0.1 ml sesamoalje (sc) 4 h foar seksueel gedrach administreare. Eksperimintele prosedueres waarden goedkard troch de Animal Care Committee oan 'e Universiteit fan Western Ontario en de University of Michigan Committee on Animal Care and Use en wiene yn oerienstimming mei rjochtlinen sketst troch de Kanadeeske Ried foar Animal Care en National Institutes of Health.
Eksperimintele ûntwerpen
Seksuele gedrach
It hjoeddeistige eksperimint ûndersocht de effekten fan werhelle Meth op seksuele prestaasjes en motivaasje fuortendaliks nei drugsynjeksje en folgjende perioaden fan drugsabstinens. Trije-en-tritich manlike rotten krigen seksuele ûnderfining yn aparte testkooien (paringsarena's; 60 × 45 × 50 sm) mei skjin bedding tidens fiif twa kear yn 'e wike paringsesjes. Tidens elke paringssesje mochten mantsjes mei in ûntfanklik wyfke parearje oant de werjefte fan ien ejakulaasje of foar 1 h, wat it earst barde. Ien wike nei de lêste paringssesje waarden mantsjes wend oan eksperimintele prosedueres en krigen in subkutane ynjeksje fan 1 ml / kg saline foar trije opienfolgjende dagen. Nei elke ynjeksje waarden bisten pleatst yn Plexiglas lokomotoraktiviteitskeamers (40.5 × 40.5 sm; Med Associates) útrist mei 16 × 16 fotobeam-arrays; lokomotoraktiviteit waard opnommen foar 30 min. Neist it opnimmen fan ambulant gedrach nei behanneling ynjeksje, it pleatsen fan mantsjes yn 'e lokomotorkeamers levere in medisyn-assosjearre omjouwing ûnderskieden fan dy fan paringsgedrach. Dêrnei krigen manlju in deistige ynjeksje fan 1 of 2 mg / ml / kg Meth of auto (saline, 1 ml / kg; n = 11 elk) foar 7 opfolgjende dagen. Nei elke ynjeksje waarden manlju yn 'e lokomotoraktiviteitskeamers pleatst en lokomotoraktiviteit waard foar 30 min opnommen, wêrnei't se weromkamen nei har hâldkaaien. Op 'e lêste dei fan Meth-administraasje waarden mantsjes nei 30 min fuorthelle út' e lokomotoraktiviteitskeamer en pleatst yn 'e paringsarena om te testen foar effekten fan Meth op seksueel gedrach. Dieren waarden wer hifke foar seksueel gedrach yn 'e paringsarena's nei 1 d of 1 wike fan drugsûnthâld.
Tidens de paringsesjes waarden standertparameters foar seksueel gedrach waarnommen en opnommen, ynklusyf latencies oant berch (tiid fan yntroduksje fan froulike oant earste berch) en yntromisje (tiid fan yntroduksje fan froulike oant earste yntromission), dy't yndikatyf binne fan seksuele motivaasje (Hull et al., 2002), lykas latency oant ejakulaasje (tiid fan earste yntromisje oant ejakulaasje), oantallen mounts en yntromisjes foar ejakulaasje, en postejaculatory ynterval, dy't maatregels binne fan seksuele prestaasjes (Hull et al., 2002; Pfaus, 2009). Ferskillen tusken groepen waarden bepaald foar elke parameter fan seksueel gedrach mei net-parametryske Kruskal-Wallis-analyse en Dunn's post hoc fergelikingen, op betsjuttingsnivo's fan 0.05.
Lokomotoraktiviteit
Lokomotoraktiviteit nei elke Meth-ynjeksje waard analysearre mei Med Associates-analysesoftware as ôfstân reizge binnen 5 min yntervallen. Groepferskillen waarden ûndersocht mei net-parametryske Kruskal-Wallis-analyse en Dunn's post hoc ferlikings. Om Meth-induzearre lokomotorsensibilisaasje te ûndersiikjen, waard Meth-induzearre aktiviteit yn 'e lêste 10 min fan' e test fergelike tusken de earste en sânde ynjeksjedei binnen elke drugsdosis-behannelingsgroep mei help fan pearen t tests. In betsjuttingsnivo fan 0.05 waard tapast op alle fergelikingen.
Conditioned sex aversion
Experiment 1.
Earst waarden 50 manlike rotten wend oan saline-ynjeksjes foar trije opienfolgjende dagen en mantsjes krigen seksuele ûnderfining tidens trije paring-sesjes. Foar elke paring sesje waarden bisten ynjeksje mei 1 mg / kg Meth of 1 ml / kg saline (sc), pleatst yn paringsarena's, en, 30 min letter, mochten mei in ûntfanklike froulike oant ejakulaasje of 1 h. Parameters foar seksueel gedrach waarden opnommen en analysearre (sjoch Seksueel gedrach, hjirboppe). Twa wiken letter waarden bisten ûnderwurpen oan in kondisearre seksaversion-paradigma. Mantsjes waarden ûnderferdield yn fjouwer eksperimintele groepen neffens foarbehanneling (Meth of saline) en kondysje [lithiumchloride (LiCl)-paar of -unpaired]; groepen wiene saline-ûnpaarde (n = 12), Meth-unpaired (n = 12), saline-paired (n = 13), en Meth-paired (n = 13). It kondisearre aversion-paradigma bestie út acht opienfolgjende 2 d-kondysjeproeven. Tidens de earste dei waarden alle mantsjes yn 'e paringsarena pleatst foar in habituaasjeperioade fan 10 min, wêrnei't in ûntfanklik wyfke yntrodusearre waard. Wyfkes waarden geuren troch it swabben fan amandeloalje op 'e hals en basis fan' e sturt foar it parjen, om't olfaktoryske oanwizings binne oantoand om it gedrach fan manlike oanpak te fasilitearjen en de kondysje te fersterkjen (Lawrence en Kiefer, 1987; Agmo, 2002). Mantsjes mochten foar 30 min of oant ien ejakulaasje pearje. As intromissions net binnen de earste 15 min foarkommen, waard de paring beëinige. Ien minút nei ejakulaasje as beëiniging fan proef, mantsjes krigen in 127.2 mg / kg intraperitoneale ynjeksje fan 10 ml / kg LiCl (paarde mantsjes) of saline (unpaired mantsjes). LiCl as saline waarden administraasje nettsjinsteande oft paring barde. De folgjende dei krigen net-paarde mantsjes in 10 ml / kg-ynjeksje fan LiCl, wylst paired mantsjes saline krigen. Dieren waarden nei de ynjeksjes werombrocht nei de thúskoai.
Experiment 2.
Om te testen oft de effekten fan Meth-foarbehanneling op kondisearre seksaversion ôfhinklik wiene fan 'e simultane bleatstelling oan Meth en paring of troch Meth allinich, waard in ekstra eksperimint útfierd. Manlike rotten (n = 20) krige seksuele ûnderfining tidens fiif paringsesjes, mar sûnder Meth- of saline-behannelingen (n = 10 elk). Ynstee, 1 wike nei seksuele ûnderfining, krigen se sân ien kear deis ynjeksjes fan Meth (1 mg / kg, sc) of saline en 2 wiken letter waarden ûnderwurpen oan it kondisearre seksaversion-paradigma (sjoch eksperimint 1, hjirboppe).
Foar beide eksperiminten en yn elke kondysjeproseduere waarden parameters foar seksueel gedrach analysearre en groepferskillen waarden bepaald foar elke kondysjeproseduere mei in twa-wei ANOVA (faktoaren: Meth / saline foarbehanneling, kondysje). Pearson χ2 analyze waard brûkt om ferskillen tusken groepen te fergelykjen yn 'e persintaazjes fan mantsjes dy't mounts, intromissions, of ejakulaasje sjen litte binnen elk kondysjoneel spoar.
Oanwêzich plak foarkar
Om te testen oft Meth-foarbehanneling beleanning foar Meth of seksueel gedrach beynfloede, waarden CPP-eksperiminten útfierd. In apparaat mei trije fakken (Med Associates) mei twa gruttere bûtenste keamers (28 × 22 × 21 sm) mei te ûnderskieden fisuele en tûkele oanwizings en skieden troch in lyts sintrale fak (13 × 12 × 21 sm), waard brûkt foar alle CPP-eksperiminten . Doarren oan beide kanten fan it sintrale fak skieden de keamers, en koe wurde ferhege om de bisten 'frije beweging troch it apparaat te tastean, of ferlege om se te beheinen ta in bepaald gebiet. It apparaat wie foarsjoen fan fotobeams om de tiid te mjitten yn elke keamer. Op 'e earste dei waard in pretest fan 15 minuten útfierd om de earste keamerfoarkar fan elk dier te bepalen, wêrby't elk dier frij koe omgean tusken keamers fan it CPP-apparaat. Gjin signifikante foarkarren foar beide keamers waarden ûntdutsen tusken eksperimintele groepen. Dieren waarden útsletten fan 'e stúdzje as se in útwreide foarkar foar in spesifike keamer sjen litte (in ferskil oer 120 s; werjûn troch <10% fan' e ûnderwerpen). Kondysjonearring waard útfierd yn 'e dagen 2 en 3. By kondysjonearring waard de yn earste ynstânsje net foarkommende keamer (paarde keamer) keppele mei in beleanningsmanipulaasje foar 30 min. De yn earste ynstânsje foarkommende keamer (unpaired keamer) waard keppele mei in kontrôle manipulaasje. De folchoarder wêryn't de bisten bleatsteld waarden oan 'e keppele en unpaarde keamers waard yn elke eksperimintele groep tsjinwicht. In posttest dy't prosedureel identyk wie oan de pretest waard útfierd op 'e fjirde en lêste dei.
Experiment 1.
Earst waarden 50 manlike rotten wend oan saline-ynjeksjes foar trije opienfolgjende dagen en mantsjes krigen seksuele ûnderfining tidens trije paring-sesjes. Tidens elke mating sesje waarden bisten ynjeksje mei of 1 mg / kg Meth of 1 ml / kg saline (sc), pleatst yn testkaaien, en, 30 min letter, tastien om te paren mei in reseptive froulike oant ejakulaasje of 1 h. Parameters foar seksueel gedrach waarden opnommen en analysearre (foar beskriuwing, sjoch Seksueel gedrach, hjirboppe). Ien wike letter waarden bisten ferdield yn fjouwer eksperimintele groepen dy't oerienkomme foar medisynbehanneling en seksuele prestaasjes foar CPP-testen. Tidens kondysjonearring waarden mantsjes ynjeksje mei Meth of saline (oerienkomstich mei de foarige medisynbehanneling) en 30 minuten letter mochten se meie oant ejakulaasje. Ien minút nei ejakulaasje waard it bist yn 'e keppele keamer pleatst. De unpaired keamer waard assosjearre mei of in ynjeksje (Meth of saline) of mating sûnder in ynjeksje. Nei de posttest, in foarkarskoare (it persintaazje tiid bestege yn 'e keppele keamer tidens de foar- en neitest; berekkene as tiid bestege oan keppele keamer dield troch tiid yn keppele + unpaarde keamer × 100) en CPP-skoare (eksperimint 1; ferskil yn tiid trochbrocht yn 'e keppele keamer tidens de posttest minus de foartest) waarden foar elk ûnderwerp berekkene. Foarkarskoares waarden fergelike binnen eksperimintele groepen mei help fan pearen t tests en CPP-skoares waarden fergelike tusken eksperimintele groepen mei in ienwize ANOVA en Fisher's minste signifikante ferskiltest foar post hoc fergelikingen, allegear mei 95% fertrouwen nivo.
Experiment 2.
Om te testen oft effekten fan Meth-foarbehanneling op CPP foar Meth of mating ôfhinklik wiene fan 'e simultane bleatstelling oan Meth en mating of troch Meth allinich, waard in ekstra eksperimint útfierd. Manlike rotten krigen Meth (1 mg / kg) en paren tagelyk foar 4 opienfolgjende dagen (n = 10). Twa kontrôtgroepen bleaunen seksueel naïv en krigen of Meth of saline (n = 10 elk). Ien wike letter waard CPP foar Meth útfierd. Alle mantsjes krigen in ynjeksje fan Meth yn 'e peare keamer en in saline-ynjeksje waard ferbûn mei de unpaired keamer. Foarkarskoares waarden berekkene en fergelike binnen eksperimintele groepen mei help fan keppele t tests mei betsjutting nivo fan 0.05.
Experiment 3.
Om te testen oft simultane bleatstelling oan Meth en paring kritysk is foar feroare seksuele beleanning, waard in paring CPP-stúdzje útfierd. Manlike rotten krigen of Meth (1 mg / kg) of saline tagelyk mei paring foar fjouwer opienfolgjende dagen (n = 10 elk). Ien wike letter waard CPP foar seksueel gedrach hifke. Alle mantsjes waarden nei de paring yn 'e peare keamer pleatst en gjin paring waard ferbûn mei de unpaired keamer. Foarkarskoares waarden berekkene en fergelike binnen eksperimintele groepen mei help fan keppele t tests mei betsjutting nivo fan 0.05.
Betingst plak aversion
Om te testen oft Meth-eksposysje de gefoelichheid feroaret foar LiCl-induzearre sykte, waard in kondisearre plakaversje (CPA) eksperimint útfierd. CPA-testen waarden útfierd yn 'e earste helte fan' e tsjustere perioade mei itselde apparaat as dat brûkt waard foar CPP-eksperiminten (sjoch Conditioned place foarkar, hjirboppe). Foar trije opfolgjende dagen krigen manlike rotten seksuele ûnderfining tagelyk mei Meth (1 mg / kg) of saline (n = 10 elk). Ien wike letter krigen alle mantsjes in LiCl-ynjeksje (10 ml / kg, ip) keppele mei de yn earste ynstânsje foarkommende keamer, wylst in lykweardige doasis saline ferbûn wie mei de yn earste ynstânsje net foarkommende keamer. Nei de posttest, gemiddelde foarkarskoare (it persintaazje tiid bestege yn 'e keppele keamer tidens de foar- en neitest; berekkene as tiid bestege oan keppele keamer dield troch tiid yn keppele + unpaire keamer × 100) en CPA-score (ferskil yn tiid bestege yn de keppele keamer tidens de posttest minus de foartest) waarden foar elk ûnderwerp berekkene. Foarkarskoares waarden fergelike binnen eksperimintele groepen mei help fan pearen t tests, wylst CPA skoares waarden fergelike tusken eksperimintele groepen mei help fan unpaired t tests, allegear mei betsjuttingsnivo fan 0.05.
results
Seksuele gedrach
Meth beynfloede signifikant inisjatyf fan seksueel gedrach doe't paring 30 minuten nei de lêste medisynynjeksje waard hifke. Dit effekt wie dose-ôfhinklik by 2 mg / kg, mar net 1 mg / kg, Meth. Meth signifikant ferhege berch- en yntromisjelatinsjes (p = 0.001 en 0.002, respektivelik) fergelike mei saline kontrôles (Fig. 1A). Meth hie gjin ynfloed op de persintaazjes fan mantsjes dy't it gedrach inisjearre, en 100% fan 'e mantsjes meie yn alle trije behannelingsgroepen. Meth hie gjin lange-termyn effekten op it inisjearjen fan seksueel gedrach, om't Meth-foarbehannele mantsjes gjin feroare paringsgedrach lieten sjen yn ferliking mei saline-foarbehannele kontrôles doe't paring waard hifke tidens drugsûnthâld dagen 1 en 7 (Fig. 1B,C). Uteinlik hie Meth gjin ynfloed op seksuele prestaasjes op elk momint, om't d'r gjin effekten wiene op latencies foar ejakulaasje (Fig. 1) of oantallen mounts en intromissions (gegevens net werjûn). Sa, werhelle Meth beheinde inisjatyf fan paring doe't hifke koart nei administraasje, mar hie gjin lange-termyn effekten op seksuele motivaasje of prestaasjes.
Effekten fan werhelle Meth op seksuele prestaasjes. A-C, Latencies to mount (ML), intromission (IL), en ejaculation (EL) nei administraasje fan 0, 1, of 2 mg / kg Meth 30 min nei de sânde en lêste medisynynjeksje (A) en drugsûnthâld dagen 1 (B) en 7 (C). Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikante ferskillen fan saline-ynjeksjede manlju (p <0.05).
Lokomotoraktiviteit
Meth by 1 of 2 mg / kg doses ferhege lokomotoryske aktiviteit yn ferliking mei kontrôles (p < 0.001, 1 en 2 mg/kg; Fig. 2A,B). Werhelle Meth-administraasje resultearre yn in sensibilisearre lokomotorreaksje - mantsjes dy't 1 mg / kg Meth waarden tatsjinne, lieten in signifikant gruttere lokomotoraktiviteit sjen nei de lêste medisynynjeksje yn ferliking mei de earste ynjeksje (p = 0.042; Fig. 2C). Yn tsjinstelling, 2 mg / kg Meth resultearre yn signifikant fermindere lokomotoraktiviteit op 'e lêste dei yn ferliking mei de earste dei (p = 0.009; Fig. 2C), wat yndikatyf wêze kin fan ferheging fan stereotypysk gedrach.
Effekten fan werhelle Meth op lokomotoraktiviteit. A, B, Ofstân reizge troch manlju dy't 0, 1, of 2 mg / kg Meth oanjûn wurde nei de earste (A) en lêste (B) Meth ynjeksje. Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikante ferskillen fan kontrôle foar alle behannelinggroepen (p < 0.05); #signifikante ferskillen tusken 1 mg/kg Meth en allinich kontrôle (p <0.05). C, Meth-induzearre sensibilisearre lokomotorreaksje. Ofstân reizge troch manlju dy't 0, 1, of 2 mg / kg Meth administreare nei de earste en lêste Meth-ynjeksje yn 'e lêste 10 min fan opnames fan lokomotoraktiviteit. Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Wichtich ferskil fan seksueel naïve mantsjes fan deselde behannelinggroep (p <0.05).
Conditioned sex aversion
Seksuele gedrach
Tidens de Meth-foarbehannelingsfaze fan eksperimint 1 waard seksueel gedrach net beynfloede troch 1 mg / kg Meth-behanneling yn elk fan 'e trije folgjende sesjes yn ferliking mei saline-foarbehannele manlju (Table 1). Dizze resultaten befêstigje gebrek oan effekten fan dizze dosis Meth op seksueel gedrach, sels as it yn deselde omjouwing wurdt administreare. Boppedat feroare Meth-foarbehanneling gjin seksueel gedrach yn 'e earste dei fan it kondysjeparadigma (foardat LiCl-paaring; Table 1) of tidens ien fan 'e kondysjeproeven yn' e LiCl-ûnpaarde groepen. Dizze resultaten befêstigje dat Meth gjin lange termyn effekten hie op seksueel gedrach.
Oersjoch fan seksueel gedrach
Begrippe seksuele gedrach
Experiment 1.
Yn tsjinstelling, werhelle Meth-behanneling fersterke twangmjittige sekssykjen. Yn kontrôle, saline-foarbehannele bisten, kondisearre seksaversion ynhibearre seksueel gedrach signifikant. Spesifyk, fermindere persintaazjes fan LiCl-paarde mantsjes dy't monteare en yntromitearre yn ferliking mei unpaired saline-foarbehannele mantsjes wiene earst evident op 'e sechsde (p = 0.039) kondysjonearringsproef en oanhâlde troch kondysjonearringsproef 7 (p = 0.005; gegevens net werjûn) en 8 (p < 0.001; Fig. 3B). In signifikant ferskil yn it persintaazje mantsjes dy't ejakulearren wie earst evident op 'e fjirde (p = 0.041) kondysjonearringsproef en bleau troch de kondysjonearring (p < 0.001; Fig. 3C). Meth-foarbehanneling hat lykwols ynfloed op kondisearre seksaversion, om't Meth-foarbehannele mantsjes keppele mei LiCl gjin signifikante ynhibysje fan seksueel gedrach berikten oant de lêste kondysjeproseduere yn ferliking mei unpaired Meth-foarbehannele mantsjes. Spesifyk waarden de persintaazjes fan Meth-foarbehannele LiCl-paar manlju dy't yntromisjes en ejakulaasje werjaan, allinich signifikant fermindere tidens kondysjonearringsproef 8 (p = 0.03 en p = 0.011 respektivelik). Sa, Meth foarbehanneling 2 wiken foar it begjin fan kondysjonearring resultearre yn maladaptive of compulsive seks-sykje gedrach.
Effekten fan tagelyk mating (seks) en Meth-foarbehanneling op kondisearre seksaversion (eksperimint 1). A, Eksperimintele groepen befette saline- (Sal) of Meth-foarbehannele mantsjes dy't LiCl krigen nei paring (Paired males) en saline- of Meth-pretreated mantsjes dy't sâltwinning krigen nei paring (Unpaired males). Tidens de twadde dei fan elke kondysjeproef krigen pear mantsjes saline en unpaired mantsjes krigen LiCl. B, C, Persintaazje mantsjes dy't mounting (B) en ejakulearjen (C) tidens kondisearre seksaversion nei Meth-foarbehanneling tagelyk mei seksuele ûnderfining administraasje. * Signifikant ferskil fan saline-foarbehannele unpaarde mantsjes (p < 0.05); #signifikant ferskil fan Meth-foarbehannele unpaire manlju (p <0.05).
Experiment 2.
De effekten fan Meth-foarbehanneling op kondisearre seksaversion wiene ôfhinklik fan tagelyk Meth en paringsûnderfining. Spesifyk waard kondisearre seksaversje net beynfloede yn seksueel ûnderfûne mantsjes dy't Meth-foarbehanneling en paringsûnderfining op ferskate tiden krigen (net-konkurrent). Persintaazjes fan Meth-foarbehannele LiCl-paarde mantsjes dy't mounts en ejaculations sjen litte wiene net oars fan saline-foarbehannele pear mantsjes (Fig. 4). Dizze gegevens suggerearje dat de earste assosjaasje tusken Meth en seksuele ûnderfining in bydragende faktor wie foar de effekten fan Meth op twangmjittige seksgedrach.
Effekten fan nonconcurrent mating (seks) en Meth-foarbehanneling op kondisearre seksaversion (eksperimint 2). Persintaazje mantsjes dy't mounting (A) en ejakulearjen (B) tidens LiCl kondisearre seksaversion nei Meth-foarbehanneling net assosjearre mei seksuele ûnderfining. Twa groepen waarden opnommen: LiCl-paar foarbehannele mei saline en LiCl-pair foarbehannele mei Meth.
Betingst plak aversion
Oanfoljende kontrôle-eksperiminten die bliken dat it ûnfermogen om paring te ynhibearjen nei foarbehanneling fan Meth net te tankjen is oan in stompe gefoelichheid foar LiCl-induzearre viscerale sykte, om't alle mantsjes in ôfkear foarmen fan 'e keamer ferbûn mei in inkele dosis LiCl. Spesifyk bestege sawol saline- as Meth-foarbehannele mantsjes signifikant minder tiid yn 'e LiCl-paarde keamer tidens de posttest yn ferliking mei de foartest (p = 0.037 en 0.045 respektivelik; Fig. 5A). Boppedat wie it ferskil fan tiid trochbrocht yn 'e LiCl-paarde keamer nei de posttest tsjin foartest identyk yn Meth- en saline-foarbehannele groepen (Fig. 5B).
Effekten fan tagelyk mating (seks) en Meth-foarbehanneling op LiCl-induzearre CPA. A, B, Foarkarskoare (tiid bestege oan keppele keamer dield troch tiid yn keppele + unpaire keamer × 100; A) en CPA-skoare (ferskil yn tiid bestege yn 'e keppele keamer tidens de posttest minus pretest; B) yn pare mantsjes foarbehannele mei saline (Sal; seks + saline) of Meth (seks + Meth). Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikante ferskillen fan pretest binnen deselde eksperimintele groep (p <0.05).
Oanwêzich plak foarkar
experiment 1
Selsrapportûndersiken litte sjen dat Meth-gebrûk seksueel wille ferbettert en in primêre motivaasje is foar drugsgebrûk (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Grien en Halkitis, 2006). Dizze Meth-induzearre ferbettering fan seksueel wille is net hifke yn it knaagdiermodel. Dêrom waard CPP-paradigma brûkt om te testen oft seksueel gedrach mei Meth mear beleanjend is as beide mating of Meth-administraasje allinich. Yn oerienstimming mei eardere stúdzjes (Agmo en Berenfeld, 1990; Pfaus en Phillips, 1991; Tenk et al., 2009), paring yn saline-foarbehannele kontrôle-manlju resultearre yn CPP-mantsjes trochbrocht mear tiid yn 'e seks + saline-paired keamer dan de saline-paired keamer tidens de posttest (p = 0.001; Fig. 6C,D). Derneist foarmen kontrôlemanlju gjin foarkar foar de seks + saline-paarde keamer boppe de seks-paired keamer, wat oantoand dat in saline-ynjeksje foar paring gjin ynfloed hat op seksuele beleanning (Fig. 6C,D). Resultaten lieten sjen dat Meth CPP foar seks fergrutte yn fergeliking mei beide mating of Meth allinich. Manlju bestege mear tiid tidens de posttest yn 'e seks + Meth-paire keamer dan de seks-paired keamer (p < 0.001; Fig. 6C) of de Meth-paired keamer (p = 0.02; Fig. 6C), of fergelike mei de kontrôtgroep (p = 0.002 en 0.05 respektivelik; Fig. 6D). Dêrom liket seksueel gedrach tagelyk mei Meth mear beleanjend te wêzen as seksueel gedrach of Meth allinich yn bisten dy't foarbehannele waarden mei seksueel gedrach en Meth tagelyk.
Effekten fan tagelyk mating (seks) en Meth-foarbehanneling op mating- en Meth-induzearre CPP (eksperimint 1). Fjouwer groepen waarden opnommen. A, Twa groepen krigen seks + saline (Sal) foarbehanneling en de folgjende behanneling yn 'e paired / unpaired keamer: seks + saline / seks, seks + saline / saline. De earste groep tsjinne as in negative kontrôle, om't saline net ferwachte waard om CPP foar seks te feroarjen. De twadde groep tsjinne as in positive kontrôle, om't seks ferwachte waard om CPP te feroarsaakjen. B, De oare twa groepen krigen seks + Meth foarbehanneling en de folgjende yn 'e peare / unpaired keamers: seks + Meth / seks of seks + Meth / Meth. De folchoarder wêryn't de bisten bleatsteld waarden oan 'e keppele en unpaarde keamers waard yn elke eksperimintele groep tsjinwicht. C, Foarkarskoare (tiid bestege oan keppele keamer dield troch tiid yn keppele + unpaarde keamer × 100). Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikante ferskillen fan pretest binnen deselde eksperimintele groep (p <0.05). D, CPP-skoare (ferskil yn 'e tiid trochbrocht yn' e keppele keamer tidens de posttest minus de foartest). Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikante ferskillen fan 'e seks + saline/seksgroep (p <0.05).
experiment 2
Dêrnei waard bepaald oft de konkurrearjende foarbehanneling fan Meth en seks beynfloede CPP foar Meth allinich yn ferliking mei saline-behanneling yn 'e unpaired keamer. Yndied foarmen Meth-foarbehannele mantsjes dy't tagelyk mei elke drugsynjeksje in foarkar foarmen foar de Meth-paire keamer (p = 0.01; Fig. 7). Yn tsjinstelling, manlju dy't werhelle saline of Meth-ynjeksjes krigen sûnder de kontekst fan paring, lieten gjin ferhege foarkar sjen foar de Meth-paarde keamer tidens de posttest.
Effekten fan tagelyk mating (seks) en Meth-foarbehanneling op Meth-induzearre CPP (eksperimint 2). Foarkarsscore (tiid bestege oan keppele keamer dield troch tiid yn keppele + unpaarde keamer × 100) yn manlju foarbehannele mei saline (Sal), Meth, of seks + Meth. Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM. * Signifikant ferskil mei foartest binnen deselde eksperimintele groep (p <0.05).
experiment 3
Uteinlik waard it hifke oft tagelyk Meth en paring foarbehanneling CPP beynfloede foar allinich paring. Mantsjes foarbehannele mei Meth en paring foarmen gjin foarkar foar seksueel gedrach, bewiisd troch in gebrek oan ferhege tiid trochbrocht yn 'e seks-paire keamer. Yn tsjinstelling, manlju dy't waarden behannele mei saline en paring foarmen wol in foarkar foar de seks-paired keamer (p = 0.003; Fig. 8). Mei-elkoar suggerearje dizze gegevens dat de assosjaasje tusken Meth en paring resulteart yn ferhege stimulearringskrêft foar Meth yn 'e ôfwêzigens fan paring en foar paring tagelyk mei Meth, mar fermindere stimulâns foar paring yn' e ôfwêzigens fan 'e medisyn.
Effekten fan tagelyk mating (seks) en Meth-foarbehanneling op paring-induzearre CPP (eksperimint 3). Foarkarsscore (tiid bestege oan in pear keamer dield troch tiid yn pear + unpaired keamer × 100) yn mantsjes foarbehannele mei seks + saline (Sal) of seks + Meth. Gegevens wurde presintearre as gemiddelde ± SEM.
Diskusje
De hjoeddeistige stúdzje testte de effekten fan werhelle Meth op seksueel gedrach mei spesifyk fokus op seksuele prestaasjes, maladaptive of compulsive seks-sykjen, en mating en / of Meth-beleanning. TDe wichtichste fynst fan dizze stúdzje wie dat Meth-foarbehanneling gjin ynfloed hat op ekspresje fan seksueel gedrach, mar feroarsake twangmjittich seksueel gedrach yn 'e wiken nei foarbehanneling. Dit effekt op twangmjittige seksueel gedrach wie ôfhinklik fan 'e tagelyk ûnderfining mei Meth en mating. Fierder fersterke tagelyk Meth en paring foarbehannelingen Meth-beleanning, mar fermindere seksuele beleanning. Mei-elkoar litte dizze stúdzjes sjen dat in assosjaasje tusken Meth en mating kritysk is foar de ûntwikkeling of útdrukking fan twangmjittige seksueel gedrach en feroaringen yn seksuele en drugsbeleanning.
Meth-foarbehanneling, doe't tagelyk mei paring, hie effekten op lange termyn op it fermogen fan it kondisearre seksaversion-paradigma om seksueel gedrach te ynhibearjen. Dit effekt kin net maklik ferklearre wurde troch in tekoart yn learen of ûnthâld, om't Meth-foarbehannele mantsjes gjin bewiis hawwe foar beheind learen tidens CPP of LiCl-induzearre seksaversion paradigma's. Derneist is it net wierskynlik dat werhelle administraasje fan 'e lege dosis Meth de kognitive beheiningen en neurotoxisiteit feroarsake dy't typysk sjoen wurde nei chronike bleatstelling oan hege doses Meth yn ratten (Walsh en Wagner, 1992; Friedman et al., 1998; Chapman et al., 2001; Schröder et al., 2003) en minsken (Ornstein et al., 2000; Simon et al., 2002; Kalechstein et al., 2003), as ien-dei Meth-bingeing-paradigma's dy't deselde dosis brûke as de hjoeddeistige stúdzje, it learen fan objekt-erkenning net beynfloede en net resultearre yn neurotoxisiteit (Marshall et al., 2007). In oare alternative ferklearring foar de beheinde oanwinst of útdrukking fan kondisearre seksaversion is in ferlies fan gefoelichheid foar LiCl. Dieren wiene lykwols likegoed by steat om in kondisearre ôfkear te krijen fan in keamer earder keppele mei LiCl. Hjirtroch hienen Meth-foarbehannele mantsjes gjin fermindere assosjatyf ûnthâld of fermindere gefoelichheid foar LiCl of LiCl-induzearre sykte. It liket derop dat Meth-foarbehanneling maladaptive of twangmjittige sekssykjen feroarsake, nettsjinsteande learde negative gefolgen, wat yn oerienstimming is mei minsklike rapporten (Frosch et al., 1996; Halkitis et al., 2001; McKirnan et al., 2001; Rawson et al., 2002; Somlai et al., 2003; Grien en Halkitis, 2006; Springer et al., 2007).
Boppedat wurdt it effekt fan Meth en paring foarbehanneling op fermindere ynhibysje fan maladaptyf seksueel gedrach net maklik ferklearre troch in ferbettere beleanning ferbûn mei paring. Yn tsjinstelling, yn bisten dy't tagelyk Meth en matingsûnderfining krigen, waard beleanningssykjen ferbûn mei paring fermindere. Dêrom moat in oare ferklearring foarsteld wurde foar de effekten fan konkurrearjende Meth en mating foarbehanneling op 'e útdrukking fan maladaptyf seksueel gedrach. In resinte neuroanatomyske stúdzje fan ús laboratoarium identifisearre harsensgebieten wêr't Meth effekten kin bemiddelje op seksueel gedrach (Frohmader et al., 2010c). Hjir waard neurale aktivearring feroarsake troch paring as Meth ûndersocht mei respektivelik neuronale aktiviteitsmarkers lykas Fos as fosforylaasje fan MAPK. Meth en mating koaktivearre neuroanen yn 'e nucleus accumbens, basolaterale amygdala, en it anterior cingulate gebiet fan' e mediale prefrontale cortex (Frohmader et al., 2010c) en yn 'e orbitofrontale cortex (Frohmader en Coolen, 2010). De prefrontale en orbitofrontale cortices binne fan bysûnder belang, om't se bydrage oan ferslaavjend gedrach (Kalivas en Volkow, 2005; Kalivas et al., 2005; Lasseter et al., 2010; Winstanley et al., 2010). Boppedat is hypoaktiviteit fan dizze harsensgebieten korrelearre mei ferskate psychiatryske betingsten ferbûn mei ferlies fan remmende kontrôle (Graybiel & Rauch, 2000; Taylor et al., 2002; London et al., 2005). Dizze rigels fan bewiis suggerearje dat Meth kin hannelje yn dizze frontale cortices om feroaringen op lange termyn te feroarjen dy't op 'e beurt twangmjittige seksueel gedrach bemiddelje. Yn oerienstimming mei dit is oantoand dat hege ynsidinsje fan twangmjittige seksueel gedrach oerlapet mei oare psychiatryske steuringen, ynklusyf drugsferslaving, eangst en stimmingssteurnissen. (Bancroft, 2008). Ek wurde drugs-induzearre dysfunksje fan 'e mediale prefrontale en orbitofrontale cortices hypothetisearre om ferantwurdlik te wêzen foar fermindere ympulskontrôle (Brewer en Potenza, 2008; Fineberg et al., 2010) en ferhege seks-rjochte gedrach waarnommen yn in protte ferslaafden (Jentsch en Taylor, 1999; Bancroft, 2008). ikYn oerienstimming mei dit, resultearren lijen fan 'e mediale prefrontale cortex yn manlike rotten yn twangmjittige seks-sykjende gedrach yn it kondisearre seksaversion-paradigma dat brûkt wurdt yn' e hjoeddeistige stúdzjes (Davis et al., 2010).
Eardere ûndersiken hawwe oantoand dat werhelle administraasje oan psychostimulanten of opiaten fersterket troch drugs-induzearre beleanning as mjitten troch CPP (Lett, 1989; Shippenberg en Heidbreder, 1995; Shippenberg et al., 1996). Dêrneist seksuele ûnderfining feroarsake pafolgende sensibilisaasje fan d- amfetamine beleanning (Pitchers et al., 2010). Yn 'e aktuele stúdzje waarden de effekten fan Meth en / of seksuele ûnderfining op Meth CPP hifke ûnder betingsten dy't net ferwachte wurde te resultearjen yn drug CPP: lege dosis Meth, in ienige kondysjeproseduere, en testen yn' e tsjustere faze fan 'e dei yn tiden fan leechste CPP (Webb et al., 2009a,b). De sensibilisearjende regimen fan werhelle Meth of fan seksuele ûnderfining dy't brûkt wurde yn 'e hjoeddeistige stúdzje feroarsake gjin ferbettere Meth CPP. Meth-foarbehanneling tagelyk mei paring hat lykwols Meth-beleanning ferbettere, wat oanjout dat dizze assosjaasje tusken Meth en mating in ferbettering feroarsake yn beleanning sykjen foar Meth. Dizze resultaten ferskine yn oerienstimming mei minsklike rapporten fan ferhege Meth dy't sykjen foar identifisearjen fan seksueel wille tidens Meth nimme as in primêre driuwfear foar drugsgebrûk (Semple et al., 2002; Schilder et al., 2005; Grien en Halkitis, 2006). It is op it stuit ûndúdlik hokker komponinten fan seksueel gedrach kritysk binne foar de assosjaasje tusken Meth en mating. Yn de hjoeddeiske stúdzje, alle mantsjes mated oan ejakulaasje. Us eardere befiningen suggerearje lykwols dat sosjale ynteraksjes genôch wêze kinne om maladaptyf seks-sykjend gedrach te inducearjen (Frohmader et al., 2010a).
Neurale substraten dy't de fersterkende effekten kinne bemiddelje fan tagelyk Meth en paring foar behanneling op Meth-beleanning omfetsje de nucleus accumbens en basolaterale amygdala. Lang duorjende feroaringen yn dendrityske spine-tichtens en morfology yn 'e accumbens resultearje út werhelle medisynadministraasje (Brown en Kolb, 2001; Robinson et al., 2002; Li et al., 2003; Robinson en Kolb, 2004) of seksuele ûnderfining (Meisel en Mullins, 2006; Pitchers et al., 2010), en wurde hypothetisearre om drugs-induzearre lokomotor en beleanningsensibilisaasje te bemiddeljen (Pierce en Kalivas, 1997; Vanderschuren en Kalivas, 2000; Li et al., 2004). De basolaterale amygdala is kritysk foar ûnthâld fan kondisearre stimuli ferbûn mei drugsstimuli (Grace en Rosenkranz, 2002; Laviolette en Grace, 2006) en belutsen by beleanningssensibilisaasje en fersterking (Everitt et al., 1999; Kardinaal et al., 2002; Sjoch, 2002). Lesions of inactivations fan de basolaterale amygdala blokkearje de oankeap (Whitelaw et al., 1996) en ekspresje (Grimm en See, 2000) fan kondisearre-cued kokaïne werynrjochting. Boppedat resultearje basolaterale amygdala-lêsjes yn fermindere reagearjen foar kondisearre stimuli keppele mei iten (Everitt et al., 1989) of seksueel fersteuring (Everitt et al., 1989; Everitt, 1990) yn rotten. Dêrom is it mooglik dat psychostimulant- en paring-induzearre wizigingen yn accumbens en basolaterale amygdala resultearje yn potentiearre beleanningssalience fan Meth.
Sensibilisearjende regimenten fan drugs binne oantoand om seksueel gedrach te fasilitearjen. Sensibilisearjende foarbehannelingen fan d-amfetamine (10 deistige ynjeksjes fan 1.5 mg / kg) fasilitearje seksueel gedrach (Fiorino en Phillips, 1999a,b) likegoed as it gedrach fan seksuele stimulâns benaderje (Nocjar en Panksepp, 2002). Stúdzjes yn froulike rotten foarbehannele mei Meth (trije deistige ynjeksjes fan 5 mg / kg) resultearre yn ferhege ûntfanklik gedrach (Holder et al., 2010). Yn tsjinstelling liet de hjoeddeistige stúdzje gjin effekten sjen fan in sensibilisearjend regimint fan Meth-behanneling op seksueel gedrach. Mooglike ferklearrings foar dizze diskrepânsje omfetsje de legere medisyndosearring brûkt yn 'e hjoeddeistige stúdzje, ferskate beoardielingen fan seksuele motivaasje, en seksferskillen (Becker en Hu, 2008).
Stúdzjes oer kjifdiermodellen fan Meth-ferslaving hawwe koartlyn rjochte op drugsbingeing-paradigma's om Meth-induzearre gedrachsproblemen te ûndersykjen (Belcher et al., 2008; Izquierdo et al., 2010; O'Dell et al., 2011), neuroplastyske feroaringen (Brennan et al., 2010), en neurotoxisiteit (Moszczynska et al., 1998; Kuczenski et al., 2007; Graham et al., 2008). It haaddoel fan dizze stúdzjes wie om plasma-drugsnivo's te berikken yn 'e rat tichtby dy fûn yn minsklike Meth-ferslaafden. Yn tsjinstelling liet de hjoeddeistige stúdzje sjen dat ienris deistich passive administraasje fan leechdosis Meth genôch wie om lang duorjend twangmjittige seksueel gedrach te feroarsaakjen. In Meth bingeing paradigma waard net brûkt om praktyske redenen: hege doses Meth beynfloedzje seksueel gedrach (Frohmader et al., 2010a) en minsklike brûkers brûke faak medisinen dy't seksuele prestaasjes ferbetterje om seksuele funksje te behâlden (Semple et al., 2009). De fokus fan 'e hjoeddeistige sets fan stúdzjes wie om seksueel beleanning en twangmjittige paring te ûndersiikjen yn bisten mei ûnbeheind matinggedrach. De resultaten litte sjen dat twangmjittige seksueel gedrach en feroare drugs- en seksuele beleanning kinne wurde feroarsake troch heul lege eksposysje foar drugs ienris tagelyk mei seksuele ûnderfining en binne net ôfhinklik fan it inducearjen fan bingeing-nivo's fan Meth yn it harsens.
Tegearre foarmje de hjoeddeistige set fan stúdzjes in wichtige stap nei in better begryp fan 'e effekten fan Meth op twangmjittige seksueel gedrach en assosjaasjes tusken drugs en seksuele beleanning. Boppedat, dizze gegevens parallel oan dy rapportearre yn minsklike ferslaafden; sadwaande kin it manlike ratmodel fierder brûkt wurde om molekulêre en strukturele meganismen fan Meth-effekten op seksueel gedrach te ûndersiikjen en mooglik bydrage oan takomstige drugsferslavingstherapyen.
Fuotnoten
- Oanbean Augustus 4, 2011.
- Ferzje ûntfong Septimber 8, 2011.
- akseptearre Septimber 23, 2011.
Dit wurk waard stipe troch Canadian Institutes of Health Research Grant RN 014705 oan LMC
De skriuwers ferklearje gjin konkurrearjende finansjele belangen.
- Korrespondinsje moat stjoerd wurde oan Lique M. Coolen, Universiteit fan Michigan, ôfdieling molekulêre en yntegraal fysiology, Medical Science II, keamer 7732B, 1137 E. Catherine Street, Ann Arbor, MI 48109-5663. [e-post beskerme]
- Copyright © 2011 de auteurs 0270-6474 / 11 / 3116473-10 $ 15.00 / 0
Referinsjes
;