Ionghabháil Sucrose Iontráil Gáinneáil Mear AMPA Glacadóra (2013)

J Neurosci. Lámhscríbhinn an údair; ar fáil i PMC Deireadh Fómhair 3, 2013.
Foilsithe i bhfoirm eagarthóireachta deiridh mar:
Tá leagan críochnaitheach eagarthóra an ailt seo den alt seo ar fáil saor in aisce ag J Neurosci
Féach ailt eile sa PMC sin cite an t-alt foilsithe.

Abstract

Tá na meicníochtaí trína dtéann luach saothair nádúrtha cosúil le siúcra i gcion ar tharchur synaptic agus nach bhfacthas go mór iad. Anseo, déanaimid imscrúdú ar rialáil núicléas le sioncróite. Léirigh staidéir roimhe seo gur meicníocht mhór é gáinneáil gabhdóirí AMPA chun neart synaptic a rialáil, agus sin in vitro, déantar gáinneáil ar ghabhdóirí AMPA ina bhfuil an fochuideachta GluA1 trí mheicníocht dhá chéim a bhaineann le hiompar gabhdóra extrasynaptic agus ansin synaptic. Tugaimid faoi deara, i bhfrancach, go ndéantar ionghabháil laethúil arís agus arís eile ar réiteach shiúcrós 25% ar loic spontáineach ardaithe go neamh-ard agus go ndéantar croí-sioncóidí a ionchorprú trí ionchorprú Ca2+gabhdóirí AMPA tréscaoilte (CPARnna), atá ina ngabhdóirí AMPA nach bhfuil GluA1 iontu, nach bhfuil GluA2 iontu. Léirigh staidéir mhicreascópachta leictreafiseolaíocha, bithcheimiceacha agus cainníochtúla leictreon gur spreag oiliúint siúcróis (7 lá) daonra GluA24 intraspinous cobhsaí (> 1 uair), agus gur sna francaigh sin a spreagtar siúcrós aonair go tapa (5 nóiméad) ach go neamhbhuan (<24 hr) ardaithe. GluA1 ag láithreáin eachtardhomhanda. Bhí gá le CPARnna agus gabhdóirí dopamine D1 in vivo le haghaidh lóistín ardaithe tar éis ionghabháil shiúcróis. Go suntasach, prótacal 7-lá de ionghabháil laethúil de thuaslagán 3 de saccharin, milseoir neamh-chalrach, GluA1 sioncóideach spreagtha mar an gcéanna le ionghabháil shiúcró 25%. Taithníonn na torthaí seo gáinneáil ilchéime GluA1, a ndearnadh cur síos air roimhe seo in vitro, mar mheicníocht le haghaidh rialáil ghéar ar tharchur synaptic in vivo trí luach saothair nádúrtha. Spreagtar gáinneáil trí chonair chemosensory nach bhfuil ag brath ar luach caloric an tsiúcróis.

Réamhrá

Is fadhb shuntasach sláinte poiblí é ró-thomhaltas sucrose (Hu agus Malik, 2010), ach ní fios cad iad na meicníochtaí trína rialaítear luach saothair synapticeacha mar thoradh ar luach saothair nádúrtha, orosensory amhail siúcrós. Plaisteachas Synaptach sa núicléis accumbens, cuid lárnach de chuaird luach saothair na hinchinne (Sesack and Grace, 2010, cuireann sé le go leor cineálacha iompraíochta spreagtha, lena n-áirítear foghlaim luaíochta (Lá agus Carelli, 2007), freagairtí ar strus sóisialta (LaPlant et al., 2010), agus paiteolaíochtaí andúileLuscher agus Malenka, 2011). Is é is cúis le nochtadh cóicín arís agus arís eile ná plaisteachas synaptic i néaróin na n-einsímí agus i limistéar na n-aerphlandaí (Brebner et al., 2005; Grueter et al., 2010; Mameli et al., 2009; Pascoli et al., 2012; Thomas et al., 2001; Ungless et al., 2001). Nuair a dhéantar féin-riarachán cóicín rochtana a leathnú, agus aistarraingtí fada ina dhiaidh sin, déantar synapses a threisiú trí Cha a ionchorprú2+gabhdóirí glutamate AMPA-cineál-gluA2-annamh (CPARs), a bhfuil a n-idirghabhálacha comharthaíochta ag goir craving cóicín (Conrad et al., 2008; McCutcheon et al., 2011a). Cosúil le cóicín, duaiseanna ornáideacha mar shiúcróis d’ardú go láidir dopamineSmith, 2004), ach níor imscrúdaíodh ionduchtú luachana orosensory of plasticity accumbens.

Is éard atá i ngabhdóirí AMPA (AMPARs) ná idirghabhálaithe príomhúla tarchuir lárnaigh néarchórais, agus cuireann a ngáinneáil le próisis néata éagsúla, lena n-áirítear foghlaim agus cuimhne. (Nedelescu et al., 2010; Rumpel et al., 2005; Whitlock et al., 2006). Tá ceithre AMHAR éagsúla i gceist le AMPAR, GluA1-4. Is iad AMPARs ina bhfuil GluA2 ná Ca2+- a bheith in-ionchasach agus trácht go sioncronach, agus déanann gabhdóirí GluA2-easpa (homarmaithe GluA1 den chuid is mó) Ca2+ agus ceartú isteach a thaispeáint. Déanann GluA1 gáinneáil synaptic a bhíonn ag brath ar ghníomhaíocht a dhéanamh trí chonair dhá chéim ina gcuireann Serphinosphosplation próitéin próitéine atá ag brath ar cAMP (PKA) agus X próitéin cGMP-cink II (cGKII) cnuasaitheoir chun cinn ag suíomhanna extrasynaptic sa phlasma plasma (Esteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sun et al., 2008; Sun et al., 2005). Tar éis idirleathadh cliathánach chuig an sionapse, déanann PKC fosphorylation de Ser 818 a chobhsú.Boehm et al., 2006), ar ancaire leis an dlús postynaptic (Ehlers et al., 2007; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007). Mar2+/ kinase próitéin próitéiní calmodulin-spleách (CaMKII) fosfóiriú Ser 567 agus Ser 831 freisin a chuireann le hionchorprú synaptic agus le díriú extrasynaptic (Lu et al., 2010; Roche et al., 1996), faoi seach. Mar sin féin, níl a fhios cé acu in vivo Folaíonn ionchorprú CPAR na meicníochtaí gasta, ilchéime seo a ndéantar cur síos orthu in vitro.

Chun fiosrú a dhéanamh ar na meicníochtaí trína rialaíonn luach saothair orosúla mar shiúcrós sionapsanna eachtacha, tá paraidím á úsáid de ionghabháil shiúcréim ghearr agus athruithe a thomhas i dtarchur synaptic i néaróin accumbens. Tugaimid faoi deara go dtógann ionghabháil arís agus arís eile ar shiúcrós sioncóga trí CPARanna a ionchorprú, agus i ainmhí atá oilte in siúcrós, go bhfuil spreagadh aonair siúcróis leordhóthanach chun gáinneáil gluA1 gasta a spreagadh ar shuíomhanna extrasynaptic. Toisc go bhfuil sacarón, milseoir neamhchalrach, gáinneáil sioncópach spreagtha mar an gcéanna le siúcrós, tá gáinneáil mar fhreagra ar chosáin orosensory seachas caloric. Ina theannta sin, chuir bacainn CPAR cosc ​​ar ingearchlónna a spreagtar go spontáineach gníomhaíocht innill ghluaiste spontáineach in vivo, ag aithint tuilleadh CPARns mar rialtóirí tábhachtacha freagraí ar luach saothair nádúrtha.

Ábhair agus Modhanna

Ábhair agus nósanna imeachta máinliachta

Ba iad na hábhair na francaigh Sprague-Dawley (turgnaimh taconic) a raibh meáchan 150-300 orthu agus iad ag teacht agus francaigh E18 torracha Sprague-Dawley ag iompar clainne (turgnaimh chultúir taconacha). Cuireadh 2 in aghaidh an chaighean ar na francaigh do thurgnaimh iompraíochta ar thimthriall éadrom 12h / 12h (soilse amach ag 18: 00) agus bhí rochtain acu ar bhia agus ar uisce roghnach i gcónaí. D'fhaomh Coiste Cúraim agus Úsáide Ainmhithe Institiúide Scoil Leighis Ollscoil Nua-Eabhrac gach nós imeachta turgnamhach agus rinneadh iad de réir “Prionsabail Chúraim Ainmhithe Saotharlainne” (uimhir foilseacháin NIH 85 – 23).

Sucrose training agus tomhais innill ghluaiste

Iompraíodh rataí go dtí an seomra tástála 3 lá as a chéile le haghaidh 2 h / lá ina gcliabháin bhaile. Ar an gceathrú lá tugadh buidéil ina raibh uisce nó shiúcrós 25% isteach tríd an gcliabhán le haghaidh 5 min. Rinneadh buidéil a mheá ansin. I gcás gach turgnaimh, b'éigean do na francaigh 1 g de shiúcrós a ól le linn na rochtana ar an 5 min laistigh de 3 lá tosaithe na hoiliúna le bheith san áireamh sa staidéar; go deimhin, chomhlíon na francaigh go léir an critéar seo. I ndiaidh deireadh a chur le buidéal, d'fhan francaigh sa seomra tástála le haghaidh 30 min roimh iompar ar ais chuig an áis ainmhithe. Ar lá na híobairt, rinne CO na francaigh gan aithne2, decapitated ag gilitín, agus bailíodh samplaí fíocháin ar oighear. I gcás turgnaimh innill ghluaiste, cuireadh francaigh i ndlísheomraí tomhais gluaisteáin (Accuscan, Columbus, OH) ar feadh iomlán de 35-min. Tar éis 15-min sa seomra, tugadh isteach buidéal le stopallán bead trí bharr an tseomra agus cobhsaíodh é. Baineadh an buidéal ó bharr an tseomra tar éis 5-min, agus d'fhan na francaigh sa seomra ar feadh 15-min breise tar éis deireadh a chur le buidéal. Rinneadh an nós imeachta seo arís agus arís eile le haghaidh 7 lá as a chéile. Tomhaiseadh an fad a taistealaíodh ag baint úsáide as an gCóras VersaMax (Accuscan, Columbus, OH), a rinne monatóireacht ar ghníomhaíocht ainmhithe trí ghreille bíomaí solais 16 × 16 a thrasnaíonn an caighean ainmhí (42 × 42 × 30 cm) ar chúl agus ar chlé go deas . Stóráladh faisnéis faoi stádas bíoma, a scanadh ag ráta 100 uair in aghaidh an tsoicind, ar dhiosca. Cuireadh gníomhaíocht in iúl mar achar siúil mar a tomhaiseadh i cm le linn araidí 12-min éagsúla i seisiún min 3 (ba é an bosca bruscair deiridh 35-min).

Oiliúint Saccharin

Chun comparáid a dhéanamh idir an gáinneáil ar GluA1 a spreagann siúcrós agus éifeachtaí ionghabhála saccharin, bhí francaigh fhiáine 12 (250 g) lonnaithe sa tsaoráid ainmhithe ar thimthriall éadrom / dorcha 12. Rinneadh na francaigh go léir a chíoradh ansin sa seomra tástála trína n-iompar chuig an seomra tástála, d'fhág siad uair 2, agus iad a iompar ar ais chuig an áis ainmhithe. Tugadh buidéil rochtana do na francaigh ar an lá 4th (tar éis lá 3 tar éis a chéile), ina raibh uisce, siúcrós, nó sacharin. Tugadh rochtain do bhuidéal 4 ar bhuidéal ina raibh uisce ar bharr an cháis agus an spout ag druidim isteach sa chaighean tríd an lid. B'ionann an t-am rochtana agus 5 nóiméad, ansin baineadh an buidéal, agus tar éis 15 min tugadh francaigh bhreise ar ais chuig an áis ainmhithe. Tugadh rochtain ar fhrancaigh 4 ar thuaslagán shiúcróis 25 agus tugadh rochtain do na francaigh 4 ar thuaslagán saccharin 3% (Sweet'n Low). Tomhaiseadh méid an tsreabháin a caitheadh. Rinneadh an nós imeachta seo arís le haghaidh laethanta 7. Ar an lá 7th ólacháin, díreach tar éis an bhuidéal a bhaint, rinneadh francaigh a íobairt agus lománaíodh croílár accumbens agus rinne leibhéil an Iarthair tástáil ar leibhéil GluA1.

Leictreifiseolaíocht

Siúcrós a bhí i rats mar a thuairiscítear thuas i gcliatháin phlaisteacha shoiléire agus, tar éis an bhuidéal a bhaint ar an lá 7, bhí siad ainéistéitithe le cetamine (100 mg / kg ip) agus xylazine (10 mg / kg ip) agus le hainmhí salannach (turgnaimh mEPSC) nó decapitated láithreach (turgnaimh ceartaithe). Brains a bhaint go tapa i sreabhach cerebrospinal saorga (ACSF) comhdhéanta de na nithe seo a leanas (i mM): le haghaidh turgnaimh mEPSC: NaCl (118), KCl (2.5), CaCl2 (3), MgCl2 (1), NaHCO3 (26), NaH2PO4 (1), D-ghlúcós (10), osmolarity coigeartaithe go 325 mOsm agus aeraithe ag 95% O2/ 5% CO2 (pH 7.4); le haghaidh turgnamh ceartúcháin: Siúcrós 75, 87 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 0.5 CaCl2, 7 MgCl2 6 H2O, 25 NaHCO3, 10 dextrose, bubbled le 95% O2 / 5% CO2 (pH 7.4). Gearradh slisní corónacha (300μm tiubh) ina raibh an núicléas accumbens i ACSF fuar-oighir ag baint úsáide as vibrotome (Leica, VT1200S) agus coinníodh faoi uisce iad in ACSF (ACSF, i MM: 124 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 2.5 CaCl2, 1.5 MgSO4 7H2O, 26 NaHCO3, agus 10 dextrose) le haghaidh <30 min; ansin coimeádtar é i réamh-goradán slice ag teocht an tseomra ar feadh 1 uair an chloig ar a laghad chun ligean dó téarnamh. Le haghaidh turgnaimh mEPSC: aistríodh slice amháin ansin go dtí seomra taifeadta ina raibh sé líonta faoi uisce ag líon níolón ag 32 ° C le téitheoir agus rialtóir tuaslagáin inlíne TC324B (Warner Instruments, CT). Rinne ACSF an seomra a shruthlú go leanúnach ag ráta tairiseach 2 ml / nóim. Aithníodh néaróin spíonacha mheánmhéide ó chroí-réigiún núicléas accumbens faoi threoir amhairc ag baint úsáide as micreascópacht físe codarsnachta trasnaíochta infridhearg-difreálach (Hamamatsu C5405) le micreascóp díreach Olympus BX50WI atá feistithe le cuspóir tumtha uisce 40x achair oibre fhada. Leictreoidí paiste (4–6 MΩ) líonta le tuaslagán pípéad intéirríneach comhdhéanta de (i mM): CsCl (145), HEPES (10), EGTA (0.5), agus MgATP (5). Coigeartaíodh osmolarity go 290 mOsm le siúcrós, agus rinneadh pH a choigeartú go 7.4 le CsOH. Taifeadadh sruthanna iar-shionaptacha eisiatacha miniature (mEPSCanna) i láthair bicuculline (10μM) agus tetrodotoxin (1μM) ag baint úsáide as aimplitheoir Axopatch 200B (Gléasanna Móilíneacha, CA) agus arna ndigitiú ag Digidata 1322A (Gléasanna Móilíneacha, CA). Le haghaidh turgnaimh cheartaithe: aistríodh slisní go dtí an seomra taifeadta agus sáraíodh iad (2.0–2.5 ml nóim-1) le ACSF ocsaiginithe ag 33-35 ° C ina bhfuil 50 icrm picrotoxin chun EPSCanna a leithlisiú. Rinneadh taifeadtaí cille sómacha aramatacha ó néaróin spíonacha lárnacha an réigiúin lárnaigh i gclamp voltais le aimplitheoir 700B Multiclamp (Gléasanna Móilíneach) ag baint úsáide as micreascópacht físe IR-DIC. Líonadh pípéidí paiste (4-6 MΩ) le tuaslagán intracellular (i mM: 125 C-gluconate, 2 CsCl, 5 TEA-Cl, 4 Mg-ATP, 0.3 GTP, 10 phosphocreatine, XPNUMX HEPTA, 10 EGTA, agus 0.5 QX -3.5). Rinneadh sonraí a scagadh ag 314 kHz, a dhigitiú ag 2 kHz, agus anailís a dhéanamh orthu le Clampfit 10 (Feistí Móilíneacha). Cuireadh spreagadh frithghléasach (10-0.01 ms, 1-5 μA, 150 Hz) i bhfeidhm le leictreoidí beag bipolar gloine 0.2 – 0.05 mm ón leictreoid taifeadta. Tar éis ~ 0.5 min de thaifeadadh bunlíne, rinneadh tuaslagán ina raibh Naspm (10 μM) a phíobadh isteach sa dabhach le haghaidh 200 min. Rinneadh athruithe ar aimplitiúid EPSC a thomhas roimh agus tar éis cur i bhfeidhm drugaí ag féidearthachtaí coinneála −10, −70, −50, 30, + 0, + 20 agus + 40 mV. An t-innéacs ceartaithe (ir) a ríomh trí aon athrú ionchasach i bpoitéinseal cúlú a cheartú agus a ríomh ón gcothromóid seo a leanas: ir = (I-70 / 70) / (I+ 40 / 40), cá bhfuil I-70 agus I+ 40 iad na h-aimplitheoirí EPSC a taifeadadh ag −70 mV agus + 40 mV, faoi seach.

Codánú fo-aicéiteach agus blocáil an Iarthair

Bailíodh Accumbens ar oighear mar a thuairiscítear thuas. Nuair a rinneadh an croí agus an bhlaosc a dhioscadh ar leithligh, deimhníodh an deighilt trí chodáin synaptosome le haghaidh dopamine β-hiodrocsalase, einsím a aimsíodh i gcríochfoirt axons leis an mblaosc, a thástáil.Sesack and Grace, 2010). Ullmhaíodh codáin chill iomláin, synaptosome, agus PSD mar a tuairiscíodh roimhe seo (Jordan et al., 2004). Athchóiríodh millíní Synaptosomal i 200 μl 25 m Tris le 1 Triton X-100, snoite ag 4 ° C le haghaidh 30-min, agus lártheifneofar iad ag 13,800 × g do 15-min i PSDs micrilerifuge go millíní. Athchóiríodh na millíní ina raibh PSDanna amh i 25 mM Tris le 2% SDS. Rinne bloic an Iarthair anailís ar chodáin ar ghloine SDS-PAGE mar a tuairiscíodh roimhe seo (Jordan et al., 2004). Baineadh úsáid as na hantasubstaintí seo a leanas: dopamine β-hiodrocsalase (1: 1,000, Abcam), GluA1 (1: 1,000, Millipore), fosfar-Ser 845 GluA1 (1: 1,000, Millipore), GluA2 (1: 1,000, Millipore) agus tubulin (1: 10,000, Sigma).

Micreascópacht leictreon

Ar an lá a cuireadh fíochán (lá 7 de thraenáil shiúcróis), cuireadh francaigh ó ghrúpaí tástála 3 (Uisce, Sucrose / Water, Sucrose; francaigh / grúpa tástála 3) i ndlísheomraí tomhais gluaisteáin le haghaidh 15-min; tugadh buidéal isteach ag barr an tseomra ag 15-min. Fuair ​​francaigh sa ghrúpa Uisce uisce, fuair francaigh i ngrúpa ucrose siúcrós 25%, fuair francaigh sa ghrúpa Sucrose / Water, a raibh sócrós 25 caite acu do 6 lá, uisce. Bhí na galair ainéistéitithe go domhain le Nembutal (50 mg / kg ip) agus rinneadh iad a scagadh go trasghearrthach le maolán fosfáite 0.1 (pH 7.4) ina raibh paraformaldehyde 4% agus glutaraldehyde 0.1% ag ráta 50 ml / min le linn na chéad 3-min, ansin ag ráta 20 ml / min don 7-min ina dhiaidh sin. Ullmhaíodh fíocháin le haghaidh lipéadú imdhíonachta (PEG) ar gabhadh a ghabháil agus gabhadh íomhánna mar a tuairiscíodh roimhe seo (Nedelescu et al., 2010). Rinneadh imdhíonolaí a rangú de réir a suímh i gcoibhneas leis an PSD ag acomhail neamhshiméadracha synaptic mar “scoilt” ““ in aice le PSD ”(laistigh de leithead PSD XD ón PSD),“ ag PSD, “scannán intraspinous,” nó “extrasynaptic.” Ó ba shamplaí ó chroílár na n-aithreacha iad gach ainmhí, synapses 1. Cinntíodh sampláil randamach trí anailís a dhéanamh ar na chéad sionapsanna 93 randamacha go léir agus muid ag scuabadh go córasach trasna na heangaí, agus ansin an líon céanna synapses a chomhthiomsú ó gach ceann de na trí ainmhí a fuair cóireálacha ante mortem comhionann. Rinneadh dhá chineál cainníochtaithe. Ba é a bhí i gceist ná leibhéal GluR93-imdhíonachta a mheas, trí líon na gcáithníní PEG a tharla ag réimsí feidhmiúla scoite den dromlach a chur ag scóir. Ba é an ceann eile ná measúnú a dhéanamh ar líon na gcáithníní PEG a bhí lipéadaithe ag an PSD. Breithníodh fiú synapses atá lipéadaithe ag cáithnín 1 PEG amháin, lipéadaithe, bunaithe ar obair níos luaithe a léirigh sainiúlacht an ghnáthaimh GluR1-PEG (Nedelescu et al., 2010). Rinneadh anailís ar na héifeachtaí cóireála ar chéatadán agus ar leibhéal GluR1-immunolabeling ag ANOVA aontreo le comparáidí pleanáilte iardhíolta (LSD Fisher). Chun deireadh a chur le claontacht thurgnamhach, bhí na sonraí dallaithe tríthoiseach: rinne turgnamh amháin oiliúint shiúcróis agus choinnigh sé taifid ar na hainmhithe sna trí ghrúpa tástála, chruthaigh an dara turgnamh na leictreon micrographs agus shann sé cód alfa-uimhriúil nua do gach micrograph agus choinnigh sé an cód séalaithe , agus rinne trí thurgnóir breise scanadh ar na micreagraif agus rinneadh cáithníní PEG a chainníochtú. Tar éis don chainníochtú PEG a bheith críochnaithe, thionóladh na turgnaimh chun céannachtaí gach micreagraif a nochtadh.

Ionchlannú Cannula agus instealltaí intraranial

Fostaíodh instealladh ionrathach chun Naspm agus APV a sheachadadh chuig croílár accumbens. Le haghaidh ionchlannú cannula, mar a luadh roimhe seo (Carr et al., 2010), bhí francaigh go han-ainéistéiseach le ketamine (100 mg / kg ip) agus xylazine (10 mg / kg ip) agus ghann iad tar éis an obráide leis an benamine anailgéiseach (1 mg / kg faoi bhun an chraicinn). Rats a ionchlannú stereotaxically le dhá treoir 26-thomhas cannulae (PlasticsOne, Roanoke, VA) go déthaobhach i gcroílár accumbens le comhordanáidí: 1.6 mm anterior le bregma; 2.9 mm cliathánach leis an uaim shagttal, rinn na leideanna dronuilleach 8 ° i dtreo dhromchla na líne lár, 5.6 mm ventral to skull. Bhí aicrileach déadach ar siúl i Cannulae agus coinníodh paitinní le stíl ocsaíde. I gcás instealltaí intraranial, luadh réitigh Naspm agus APV ina dhá fhaid cm 30 de fheadáin PE-50 a bhí ceangailte ag ceann amháin le steallairí 25-μl Hamilton a líonadh le huisce driogtha agus ag an deireadh eile injector cannulae 31-thomhas, a shín 2.0 mm thar na treoracha ionchlannaithe. Suiteáladh na steallairí ar dhá shealbhóir caidéal steallaire micreolóin Harvard 2272 a chuir na toirt insteallta 0.5 μl ar fáil thar thréimhse 100 soic. Nóiméad amháin tar éis na n-instealltaí a thabhairt chun críche, baineadh injector cannulae ó threoracha, athraíodh stíleanna, agus cuireadh ainmhithe isteach i ndlísheomraí tástála le haghaidh traenála shiúcróine. Tar éis íobairt ainmhithe, rinneadh anailís ar chodanna inchinn chrióigineach le haghaidh logánú cannula; Eisíodh 2 as 15 ainmhithe as an staidéar mar gheall ar shocrúchán cannula míchuí.

Anailís staitistiúil

Baineadh úsáid as ANOVA aon-bhealach agus tástálacha iar-iascaigh Fisher ina dhiaidh sin le haghaidh turgnaimh micreascópachta leictreon, imdhíontaceimic agus biotinylation. Baineadh úsáid as t-thástálacha dhá-sciath Mac Léinn le haghaidh leictreifiseolaíocht. Maidir le turgnaimh hipirghníomhaíochta shiúcróis, baineadh úsáid as ANOVA dhá bhealach, agus tástálacha iar-sheoltóra Fisher ina dhiaidh sin.

TORTHAÍ

Tréithriú paraidím ionghabhála siúcróis

D'fhostaíomar paraidím ionghabhála shiúcró chun iarmhairtí luaíochta nádúrtha, foghabhálacha ar tharchur synaptic a imscrúdú (Figiúr 1A). Iompraíodh francaigh fhireann aosach chuig seomra tástála ar feadh trí lá as a chéile. Ar an gceathrú lá (an chéad lá oiliúna), cuireadh na francaigh i seomra tomhais gluaisteáin. Tar éis XNUM nóiméad de thomhas ghníomhaíocht innill ghluaiste sa seomra, tugadh isteach buidéil ina raibh uisce (d’ainmhithe Uisce) nó tuaslagán shiúcrós 15% (d’ainmhithe Sucrose) isteach sna seomraí tomhais trí phoill i gclúdach an tseomra. Baineadh na buidéil amach tar éis 25 nóiméad agus rinneadh gníomhaíocht innill ghluaiste a thomhas ar feadh 5 nóiméad breise sular cuireadh ainmhithe ar ais chuig cáis bhaile. Rinneamar an nós imeachta seo arís ar 15 lá as a chéile. I roinnt turgnaimh, leathnaíodh oiliúint shiúcróis go 7th lá. Chuir an rochtain ghearr, neamh-theagmhasach seo ar réiteach an-inlasta ar ár gcumas imscrúdú a dhéanamh ar éifeachtaí géara agus charnacha iontógáil shiúcróis, mar go raibh siorcós go hiontaofa ag ainmhithe i rith na fuinneoige rochtana laistigh de thrí lá ón oiliúint (Figiúr 1B). Chuir na coinníollacha turgnamhacha seo ar chumas comparáid a dhéanamh idir na grúpaí tástála díreach tar éis deireadh a chur le ionghabháil. Ba é ár gcritéar maidir le cuimsiú sa staidéar ná go dtosaíonn francaigh ar cheann amháin ar a laghad de shiúcróis a ithe le linn na tréimhse rochtana laistigh de thrí lá ó thosach na hoiliúna; níor eisíodh aon ainmhithe ón staidéar ar bhonn an chritéir seo.

Figiúr 1  

Is éard atá i gceist le ionghabháil sucrose arís agus arís eile ingearchlónna díomuana de lóistín spontáineach.

Thugamar faoi deara gur chaith ainmhithe Sucrose i bhfad níos mó tuaslagáin shiúcra laistigh de thrí lá ón oiliúint,Figiúr 1B). Ina theannta sin, cé nár breathnaíodh aon difríochtaí suntasacha i lóistín spontáineach ar laethanta oiliúna 1 – 6 (sonraí nár taispeánadh iad), bhreathnaíomar ingearchló suntasach den achar iomlán a taistealaíodh in ainmhithe Sucrose i gcomparáid le hainmhithe uisce sa trí nóiméad tar éis an buidéal a bhaint den lá 7 (Figiúr 1D), agus bhí an difríocht seo i láthair freisin ar an lá 8 (Figiúr 1E). Níor breathnaíodh aon difríochtaí san achar iomlán a taistealaíodh idir ainmhithe Uisce agus Siúcóis sna trí nóiméad roimh thabhairt isteach buidéal ar aon cheann de na laethanta tástála (Figiúr 1C), rud a thugann le fios gur freagairt ghéar ar fhuíolluithe sorcóis a bhí i gceist le lóistín ardaithe a bhain go sonrach leis an bhfrancach a bhí oilte mar shiúcrós, seachas freagra coinníollaithe ar an seomra innill ghluaiste. Ag teacht leis an bhféidearthacht seo, bhí comhghaol dearfach dearfach idir an méid siúcróis a caitheadh ​​agus an fad iomlán a taistealaíodh (Figiúr 1F). Ní raibh aon difríocht i meáchain ainmhithe idir na grúpaí Sucrose agus Water roimh nó tar éis na laethanta 7 oiliúna (níor taispeánadh sonraí).

Tógann ionghabháil sucrose ionchorprú CPAR

Mar thoradh ar oiliúint sucrose, tháinig athrú neamhbhuan ar lóistín ar an lá oiliúna deiridh. Chun a fháil amach an raibh athruithe leictreifitheolaíochta sa nucleus accumbens in éineacht leis an toradh seo ar ionghabháil shiúcrós, réigiún a rialaíonn iompar luaíochta, d'ullmhaíomar slisní núicléas díreach tar éis an mbuidéal a bhaint ar an lá 7 agus taifeadadh ó néaróin i gcroílár an accumbensFigiúr 2A). Tá an croí-fho-alt gafa le freagairtí innill ghluaiste ar spreagthaí sásúla (Sesack and Grace, 2010). Fuaireamar amach go raibh an t-aimplitiúid agus minicíocht na sruthanna spéisiúla postynaptic miniature excitatory (mEPSCanna) i bhfad níos mó i gcroílár na n-ainmhithe Sucrose i gcomparáid le hainmhithe Uisce (Figiúr 2B). Léirigh sé seo go bhféadfadh tomhaltas siúcróis arís agus arís eile rialáil synaptic a rialú go dearfach i gcroílár an núicléas accumbens. Chun a fháil amach an raibh ionchorprú ag corprú CPAR i bpéacadh tar éis shiúcróis, shocraíomar innéacsanna ceartúcháin le haghaidh néaróin lárnacha trí EPSCanna a thomhas ag poitéinseal membrane éagsúla (Figiúirí 2C, 2D agus 2E). Tá CPARanna ag ceartú isteach go hinmhianaithe ag poitéinseal díláraithe mar gheall ar imshuíomh polaimíne endogenous. Chonaiceamar ceartúchán suntasach i dtaifeadtaí ó néaróin ainmhithe Sucrose, mar a léirigh neamhlíthiúlacht sa ghaol I / V, i gcomparáid le hainmhithe Uisce (Figiúr 2E), chomh maith le méadú suntasach ar innéacs ceartaithe (Figiúr 2F).

Figiúr 2  

Déantar sionapses lárnacha a fhréamhú tar éis ionghabháil siúcróis arís agus arís eile.

Chun ingearchló leibhéil CPAR a dhearbhú trí mhodh eile, rinneamar taifeadadh ó chroí-néaróin accumbens tar éis an seachfhreastalaí CPAR, 1-Naphthylacetyl spermine (Naspm) a chur isteach sa dabhach. Fuaireamar amach gur laghdaigh Naspm aimplitiúid EPSC go suntasach i dtaifeadtaí ó néaróin ó shiúcra ach ní ó ainmhithe uisce (Figiúirí 3A – C). Ina theannta sin, tar éis cóireáil Naspm, bhí an gaol I / V i néaróin ó ainmhithe Sucrose líneach, rud a léiríonn an toirmeasc ar CPARanna i sionapsanna ainmhithe Sucrose, agus níor breathnaíodh aon tionchar suntasach ar an gcaidreamh I / V tar éis cóireáil Naspm i néaróin ó ainmhithe Uisce (Figiúirí 3D). Léirítear sna torthaí seo go spreagann ionghabháil shiúcrós arís agus arís eile ionchorprú CPARanna i synapses de chroílár accumbens.

Figiúr 3  

Is cúis le ionghabháil sucrose ionchorprú Ca2 + gabhdóirí AMPA infhéideartha.

Cuireann ionghabháil sucrose gáinneáil ar GluA1

Is gabhdóirí AMPA iad CPARanna nach bhfuil an fo-aonad glacadóra GluA2 AMPA acu. Dá bhrí sin, is minic a bhíonn gáinneáil ar ghníomhú GluA1 atá ag brath ar ghníomhaíocht ar an nGluAXNUMX i gceist le corprú synaptic CPARannaHe et al., 2009; Isaac et al., 2007; Liu agus Zukin, 2007; Plant et al., 2006). Chun ionchorprú ionchorprach CPAR a dheimhniú tar éis oiliúint shiúcróis, rinneamar fiosrú ar mhéadaigh ionghabháil shiúcrós léiriú sioncópach GluA1. Tugadh rochtain do rats ar shiúcrós mar a thuairiscítear thuas le haghaidh 7 lá as a chéile. Ar laethanta 1, 3, 5, agus 7, chuireamar na codáin dlúis cille, synaptosome agus postynaptic (PSD) ar leataobh ó thrí réigiún inchinn: croílár (croí), cipéis bhlaosc (bhlaosc) agus cortex somatosensory (cortex). Rinneamar anailís ar na codáin chill iomláin agus PSD ag blot an Iarthair chun GluA1 agus GluA2 a léiriú.

Níor aimsíomar aon athruithe ar GluA1 ná GluA2 sna codáin chill iomláin de accumbens a scaoileann ar na laethanta tástála a scrúdaíodh, ag tabhairt le fios nach rialaíonn tomhaltas siúcróis arís agus arís eile leibhéil fhoriomlána na bpróitéiní seo (Figiúirí 4A – C). Sna codáin PSD, is amhlaidh a mhéadaigh GluA1 go suntasach ar an lá 7 sa chroí ach ní sa bhlaosc agus níor athraigh GluA2 go suntasach i gceachtar den dá chodán (Figiúirí 4D – 4F agus sonraí nach dtaispeántar). Thugamar faoi deara nach raibh aon mhéadú suntasach ar GluA1 sa chroí-chodán PSD sna laethanta tástála roimhe seo (Figiúirí 4D – F) agus níor athraigh GluA1 nó GluA2 sna codáin cortex PSD ar aon cheann de na laethanta tástála (ní thaispeántar na sonraí). Tá GluA1 méadaithe, go háirithe i gcomparáid le GluA2, i gcroí-PSDanna tar éis ionghabháil siúcróis arís agus arís eile ag teacht leis an gceartú méadaithe a breathnaíodh i néaróin lárnacha, mar a thuairiscítear thuas.

Figiúr 4  

Dlús Postsynaptic Méadaítear GluA1, ach ní GluA2, i gcroílár núicléas accumbens tar éis ionghabháil shiúcróis.

Tá sé léirithe go gcuireann gáinneáil GluA1 atá ag brath ar ghníomhaíochtaí le plaisteacht synaptic in vitro agus freisin in vivo (Lu agus Roche, 2011). Léiríodh meicníocht thapa, ilchéimneach do gháinneáil GluA1 in vitro (Serulle et al., 2007; Sun et al., 2008; Sun et al., 2005). Go dtí seo, áfach, rannchuidíonn an mheicníocht ilchéime seo le GluA1 carnadh synaptic in vivo nár tástáladh. Chun a chinneadh an ionsaíonn an oiliúint shiúcróis gáinneáil GluA1 go géar ag an meicníocht ilpháipéir, déanaimid GluA1 logánta ag núicléas le hainmhithe na n-ainmhithe siúcróis agus uisce-oilte trí mhicreascópacht leictreon chainníochtúil. Baineadh an croí-fhíochán Accumbens ar an seachtú lá d'oiliúint shiúcróis ó ghrúpaí tástála francaigh 3. Ba fhrancaigh iad seo: 1) a chaith uisce le haghaidh laethanta 7 (Uisce), 2) a d'ídigh siúcrós le haghaidh laethanta 7 (Sucrose), agus 3) a ídigh siúcrós do laethanta 6 agus uisce ar an lá 7 (Sucrose / Water). Íocadh na galair ar an 7th lá, XNUM nóiméad tar éis siúcrós nó uisce a chaitheamh. Dá bhrí sin, léirigh comparáid idir dhá cheann de na grúpaí tástála, ainmhithe Sucrose / Water agus Sucrose, le chéile agus le hainmhithe Uisce, scála ama na n-athruithe postynaptic a d'eascair ó thomhaltas siúcróis i bhfrancaigh faoi oiliúint shiúcrós. Thomhais muid imdhíonadh postembed (PEG) ar a dtugtar GluA5 i gcodanna éagsúla 1 postynaptic: cíteasól spine dendritic (intraspinous), membrane plasma (membrane), PSD, in aice le PSD, agus scoilt synaptic, agus na trí urrann deiridh curtha le chéile mar 'PSD '(Fíor 5A). Chun deireadh a chur le claontacht turgnamhaí, bhí céannacht ghrúpa trialach leictreon micreagra dalláilte faoi thrí.

Figiúr 5  

Nochtann micreascópacht leictreon ionduchtú gáinneála ilchéime GluA1 trí ionghabháil shiúcróis.

Thaispeáin ainmhithe Siúcra agus Siúcra / Uisce araon GluA1 intraspinous ardaithe i gcomparáid le hainmhithe Uisce (Fíor. 5B agus 5C). Tugann sé seo le fios go méadaíonn tomhaltas siúcróis ainsealach linn intracellular de ghabhdóirí AMPA ina bhfuil GluA1 in aice le suíomhanna synaptic, gabhdóirí a d'fhéadfadh a bheith ar fáil go héasca do gháinneáil synaptic, agus, níos tábhachtaí fós, gur féidir leis an linn snámha intracellular seo leanúint ar aghaidh le haghaidh XNUM uair an chloig tar éis ídiú deiridh siúcróis . Ansin scrúdaíomar an cheist shuntasach maidir le cé acu an féidir le spreagadh géar-shiúcróis gáinneáil gluA24 gasta a spreagadh. Thugamar faoi deara go raibh méadú suntasach ar an scannán plasma extrasynaptic GluA1 in ainmhithe Sucrose i gcomparáid le hainmhithe Siúcra / Uisce agus Uisce araon (Figiúirí 5B agus 5D). Tugann an bhreathnóireacht seo le fios gur féidir le luaíocht nádúrtha, orosensory a sholáthraíonn spreagthach siúcróis amháin, go tapa (<5 nóim) ach go neamhbhuan (am lobhadh <24 h) an daonra eachtardhomhanda de ghabhdóirí AMPA ina bhfuil GluA1 a ardú, ag cruthú linn lipéad a bhfuil na gabhdóirí ann féadfaidh sé trácht ar an synapse.

Go suntasach, in vitro Tá sé molta ag staidéir go dtarlaíonn ionchorprú synaptic gabhdóirí AMPA i gcéimeanna 2. Ar an gcéad dul síos, osclaíonn fosfathúchán glutamate- nó dopamine-dependchen-Serope leibhéil na ngabhdóirí ag suíomhanna extrasynaptic sa scannán plasmaEsteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sun et al., 2008; Sun et al., 2005), agus sa dara ceann, cuireann Ser 818 fosfactú chun cinn ionchorprú sioncópach (Boehm et al., 2006). Léiríonn ár gcóimheas micreascópachta leictreon le hainmhithe Sucrose le hainmhithe Siúcra / Uisce agus Uisce gur breathnaíodh an chéad chéim de gháinneáil GluA1 in vitro (Makino agus Malinow, 2009), go dtarlaíonn gáinneáil tapa ar an scannán extrasynaptic freisin in vivo tar éis luach saothair orosensory a sholáthar.

Ag teacht le torthaí leictreifiseolaíochta agus bithcheimiceacha a bhfuil cur síos orthu thuas, léirigh PEG EM gur tharraing iontógáil sucrose an dara céim i ngáinneáil GluA1 ar ghabhdóir GluA1 isteach sa sionapsa ós rud é go raibh an leibhéal imdhíontaíochta GluA1 ag an PSD i bhfad níos mó i gcás Sucrose i gcomparáid le francaigh uisce, agus bhí treocht i dtreo GluA1 méadaithe i Sucrose / Water i gcomparáid le francaigh uisce (Figiúirí 5B agus 5E). Tá an méadú in ainmhithe Sucrose / Water comhsheasmhach le corprú gasta GluA1 a dhíothaíonn le leathré sioncónach ~ 24 hr ,, nó corprú gluA1 go tapa agus a athsholáthar le GluA1 / 2 sioncónach thar thréimhse ama chomhchosúil. Bhí céatadán na synapses ag léiriú GluA1 sa PSD i bhfad níos mó freisin i bhfrancaigh Sucrose i gcomparáid le francaigh uisce (Figiúr 5F), ag tabhairt le tuiscint go ndearna GluA1 gáinneáil ar synapses nach raibh GluA1 iontu roimhe seo. Tugann sé seo le tuiscint freisin go dtagann an méadú ar aimplitiúid mEPSC a breathnaíodh i francaigh siúcrós mar thoradh ar mhéadú ar GluA1 synaptic, agus go bhféadfadh an méadú ar mhinicíocht mEPSC a bheith mar thoradh ar earcaíocht GluA1 go synapses accumbens a bhí ciúin roimhe seo, cé nach féidir potentiation scaoileadh glutamate a dhíbhe. Thomhais muid freisin líon na synapses i ngach ceann de na trí ghrúpa tástála chun a fháil amach an spreagfadh ionghabháil siúcrós synaptogenesis; ní raibh aon difríochtaí idir na trí ghrúpa tástála (sonraí gan a thaispeáint). Tagaimid ar an gconclúid go n-ardaíonn ionghabháil siúcróis arís agus arís eile linn snámha intraspinous cobhsaí (> 24 uair an chloig) de GluA1, agus gur leor spreagadh siúcróis amháin do francach oilte siúcrós (6 lá) chun GluA5 a ardú go tapa (1 nóiméad) sa membrane plasma eachtardhomhanda, b’fhéidir gabhdóirí a tharraingt ón linn intraspinous. Molaimid go ndéantar cuid de na gabhdóirí extrasynaptic seo a ionchorprú ar bhealach cobhsaí sa PSD, rud a fhágann go n-athraíonn an t-innéacs ceartaithe breathnaithe agus athruithe PSD GluA1, sula bhfillfidh an linn extrasynaptic ar an mbunlíne ag 24 h tar éis an spreagtha. Nochtann na torthaí seo gur féidir le luaíocht nádúrtha gáinneáil tapa GluA1 a spreagadh go géar in ainmhí oilte.

Tá gníomhaíocht CPAR ag teastáil le haghaidh lóistín ardaithe tar éis ionghabháil siúcróis

Faigheann néaróin spíonacha meánacha ionchuir dopaminergic agus glutamatergic araon (Calabresi, et al., 1992). D'fhonn measúnú a dhéanamh ar rannpháirtíocht chomharthaí glutamate sa loic spontáineach ardaithe a bhreathnaíomar tar éis ionghabháil shiúcróis i bhfrancaigh faoi oiliúint shiúcrós, chuir muid cannaí isteach i gcroílár francaigh accumbens, agus ainmhithe oilte i ndlísheomraí tomhais gluaisteáin mar a thuairiscítear thuas. Ar an lá 8 de thraenáil shiúcróis, rinneamar microhúchán ar Naspm isteach sa chroí sula dtosófaí sa seomra tástála innill ghluaiste. Laghdaigh an t-instealladh an t-achar iomlán a thaistil na hainmhithe Sucrose agus chuir sé deireadh leis an difríocht idir ainmhithe Sucrose agus Uisce a fheictear díreach tar éis baint an bhuidéil (Figiúr 6A). Chun a fhíorú nach raibh tionchar ag an strus a bhain le láimhseáil na n-ainmhithe ar fhreagairt an tsiúcróis, chuir muid salanda isteach sa chroí an lá dar gcionn (lá 9 de thraenáil shiúcróis); arís breathnaíodh hipirghníomhaíocht shuntasach sna hainmhithe Sucrose díreach tar éis aistriú buidéal (Figiúr 6B). Léiríonn sé seo go raibh cosc ​​ar leith ag Naspm ar ingearchló loighciúil a spreagtar. Chuir instealladh an freasúra NMDAR, APV, isteach sa chroílár na laethanta ina dhiaidh sin an difríocht idir ainmhithe Sucrose agus Water (Figiúr 6C), ag léiriú go bhfuil gá le NMDAR freisin le haghaidh insealbhú spontáineach tar éis ionghabháil shiúcróis. D'fhonn a chinneadh an raibh ról ag freagairt choinníollaithe ar an seomra tástála in ionduchtú hipirghníomhaíochta, cuireadh ainmhithe sa seomra le haghaidh min 35 gan tabhairt isteach buidéal; níor breathnaíodh aon difríochtaí idir an t-achar a taistealaíodh idir ainmhithe Siúcra agus Ainmhithe Uisce (Figiúr 6D). Ní raibh tionchar ag Naspm agus APV ar thomhaltas siúcróis (Figiúr 6E), ag léiriú nach bhfuil gá le príomh-CPARanna agus NMDARs le haghaidh iontógáil bríomhar siúcróis. Ainmhithe nár cuireadh canulas iontu i gcroílár na n-ainmhithe (2 as ainmhithe 15), mar a ndearnadh measúnú orthu iar-íobairt (Figiúr 6F), nár cuireadh san áireamh sa staidéar. Mar fhocal scoir, léiríonn na sonraí seo le chéile go n-ídíonn tomhaltas siúcróis le francach faoi oiliúint shiúcrós gáinneáil shioncópach ar GluA1 i nóiméad 5, agus go gcuireann bac na meicníochtaí comharthaíochta a rialaíonn an gháinneáil seo cosc ​​ar airde na gníomhaíochta gluaisteáin spontáineach i ndiaidh an tsiúcróis.

Figiúr 6  

Éilíonn suiteáil spontáineach ardaithe tar éis ionghabháil siúcróis CPARanna agus NMDARs.

D'fhéadfaí dhá bhealach chun comharthaíocht shiúcróis a shamhlú. Tionscnaítear ceann amháin, conair dhochtpóiseach nó orosensory, trí shiúcrós ceangailteach leis an ngabhdóir blas milis, a fhreagraíonn don choimpléasc gabhdóra heitriméadrach G i dteannta le próitéin, T1R2 / T2R3 (Kitagawa et al., 2001; Max et al., 2001; Nelson et al., 2001; Sainz et al., 2001). Is féidir le cothaithigh atá saibhir ó thaobh calraí feidhm na hinchinne a rialáil trí bhealaí meitibileach atá neamhspleách ar bhlas, cé nach dtuigtear go maith na meicníochtaí (de Araujo et al., 2008). Chun idirdhealú a dhéanamh idir an dá rogha seo ar chonair gháinneála GluA1 a spreagann siúcrós, rinneamar an prótacal oiliúna a athdhéanamh le trí ghrúpa francaigh (francaigh / grúpa 4) a tugadh rochtain dóibh ar 5 nóiméad do bhuidéil ina raibh, uisce, tuaslagán shiúcrós 25% , nó sacairín 3% (Íseal agus Íseal). Baineadh na buidéil agus d'fhan na francaigh ar feadh 15 nóiméad níos faide sa chaighean oiliúna. Rinneadh an oiliúint arís ar laethanta 7. Ní raibh na méideanna leachta a chaitheann na grúpaí tástála siúcróis agus saccharin difriúil go mór lena chéile agus bhí an dá cheann níos mó ná an tomhaltas ag an ngrúpa uisce, ag teacht le luach saothair ón dá shubstaint bhinn (Figiúr 7A). Ar an lá 7 ólacháin, díreach tar éis deireadh a chur le buidéal, rinneadh francaigh a íobairt, lománaíodh agus comhthiomsaíodh fíochán croí an accumbens le haghaidh gach grúpa tástála, an codán PSD scoite amach agus leibhéil GluA1 á dtromadh ag blot an Iarthair (Figiúr 7B). Mar a bhí roimhe seo, thaispeáin ainmhithe a d’éirigh le siúcrós GluA1 ardaithe i gcodán PSD i gcoibhneas leis an ngrúpa uisce (Figiúr 7C). Go suntasach, ardaíodh GluA1 freisin i gcodán PSD na n-ainmhithe a chaith saccharin. Ní raibh aon difríocht shuntasach idir leibhéil GluA1 sna codáin chill iomláin ó chroí-uisce uisce, siúcrós agus ainmhithe sacharin, ag tabhairt le tuiscint go raibh an méadú GluA1 sonrach don chodán sioncópach (Figiúr 7D). Toisc go spreagann saccharin an coimpléasc gabhdóra blas blasta atá comhcheangailte le próitéin G mar shiúcrós (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001), ach níl aon luach calorrach ann, deimhnímid go bhfuil spreagadh an ghabhdóra blas milis leordhóthanach chun comharthaíocht a thosú a mhéadaíonn leibhéil GluA1 ag croí-synapses núicléas.

Figiúr 7  

Cuireann Oiliúint Saccharin Méadú ar GluA1 Synaptic Cosúil le hOiliúint Siúcóis.

Plé

Tá sé léirithe againn gur féidir le duaiseanna orosensory, ídiú arís agus arís eile ar shiúcrós, ionchorprú sioncópach GluA1 a tharlú go géar trí mheicníocht gáinneála ilchéime a thuairiscítear roimhe seo. in vitro. Bhí tomhaltas sucrose arís agus arís eile thar laethanta 6-7 neartaithe ag sioncronaí lárnacha leictreolaitheolaíocha trí CPARanna a chur isteach. Bhí GluA1 bailithe leis an éifeacht seo ach ní raibh GluA2 ann i PSD an chroí, agus bhí sé sainiúil go réigiúnach agus go meánach, mar nár breathnaíodh aon athruithe roimh an lá oiliúna 7 sa chroílár, agus níor breathnaíodh aon athrú sa bhlaosc accumbens nó i cortex somatosensory. Léirigh anailís micreascópach leictreonach gur mhéadaigh ionghabháil siúcróis arís agus arís eile (t1/2 > 24 uair) daonra gabhdóirí intraspinous ina bhfuil GluA1. Siúcrós go tapa freisin (5 nóiméad) agus go neamhbhuan (t1/2 <24 uair an chloig) leibhéil ardaithe gabhdóirí ina bhfuil GluA1 ag láithreáin eachtar-aicmeacha in ainmhithe atá oilte le siúcrós, ag méadú daonra na AMPARanna atá in ann idirleathadh go cliathánach sa synapse. Méadaíodh Synaptic GluA1, arna léiriú ag an gcodán PSD agus arna bhrath ag PEG-EM, go mór i Siúcrós i gcomparáid le hainmhithe Uisce. Molaimid ó na torthaí seo go ndéanfaí an mheicníocht dhá chéim de exocytosis extrasynaptic agus ina dhiaidh sin gáinneáil synaptic le haghaidh ionchur synaptic AMPAR a ndearnadh cur síos air roimhe seo in vitro (Boehm et al., 2006; Makino agus Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sun et al., 2005) is féidir é a thionscnamh go tapa in vivo trí luach saothair nádúrtha, foghabhálach.

Níor breathnaíodh athruithe ar leibhéil GluA1 synaptic ach amháin tar éis seisiúin oiliúna 7, rud a thug le tuiscint go bhfuil gá le próiseas roinnt lá le haghaidh treoshuímh. I dturgnaimh bithcheimiceacha in vivo, níor bhreathnaíomar ar mhéaduithe suntasacha i gcroílár PSD GluA1 ar laethanta 1, 3, agus 5 de thraenáil shiúcróis; ní raibh GluA7 sa PSD ach amháin tar éis na laethanta 1 d'oiliúint shiúcróis ardaithe go suntasach. I dturgnaimh micreascópachta leictreon, thugamar faoi deara go raibh treocht i dtreo méadaithe GDA6 méadaithe ag ainmhithe Sucrose / Water, a bhí oilte le haghaidh laethanta 24 ach nach bhfuair spreagadh siúcróis. Thaispeáin na hainmhithe seo freisin GluA1 intraspinous ardaithe i gcomparáid le hainmhithe Uisce, ach níor breathnaíodh aon athrú ar an membrane extrasynaptic GluA1. Tarraingímid trí chonclúid as na torthaí seo. Ar an gcéad dul síos, déanann gabhdóirí AMPA ina bhfuil GluA1 carnadh go díograiseach le spreagadh siorcóin i ndiaidh a chéile. Ós rud é gur léirigh staidéir roimhe seo go dtógann ionghabháil siúcróis scaoileadh dopamine sna accumbens (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada et al., 2005), agus gur féidir le D1Rs aistriúchán GluA1 áitiúil a thiomáint i ndíchlónna (Smith et al., 2005), is féidir le scaoileadh dopamine tar éis ionghabháil siúcróis sintéis GluA1 áitiúil a spreagadh as a dtagann carnadh GluA1 intraspinous. Nó is féidir go léireodh an méadú intreach an gáinneáil ar GluA1 ó shuíomhanna distal. Is dócha go gcuireann gáinneáil exocytotic ón linn snámha intraspinous ardaithe seo leis an linn snámha extrasynaptic sa scannán plasma. Ar an dara dul síos, nuair a bhreathnaítear ar mhéadú ar an mbileog extrasynaptic GluA1 i Sucrose, ach nach bhfuil in ainmhithe Siúcra / Uisce ná Uisce, tugtar le fios go mbogann na gabhdóirí extrasynaptic trí dara céim isteach sa tsionapse nó go ndéantar iad a fhréamhú laistigh den 24 hr tar éis ídiú siúcróis, ag déanamh an díomuan linn snámha extrasynaptic. Ar an tríú dul síos, molann an t-ingearchló d'ainmhí Sucrose PSD GluA1 i gcomparáid le hainmhithe Uisce, ach ní Ainmhithe Sucrose / Water go n-aistríonn gabhdóirí go cliathánach isteach sa tsionapse ón linn na ngabhdóirí ón ngáinneáil go tapa chuig an scannán plasma extrasynaptic. Ní féidir linn a rá nach gá GluA1 a gháinneáil go díreach ón linn snámha intreach leis an tsionapse. Is cosúil, áfach, nach bhfuil cosán den sórt sin ann mar gheall ar na staidéir a thaispeánann go gcuirtear GluA1 isteach go heisiatach (Boehm et al., 2006; Makino agus Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sun et al., 2005). Léiríonn na torthaí seo an chéad léiriú gur breathnaíodh an cúrsa ama do gháinneáil ar GluA1 (<5 nóim) agus an cosán in vitro breathnaítear freisin in vivo. Ina theannta sin, tugann ár dtorthaí le fios go n-athraíonn spreagthaí a thugann luach saothair arís agus arís eile don chumas chun sioncópacht a threoshuíomh tríd an linn de ghabhdóirí intraspinous atá in ann a ngáinneáil a ardú.

Ós rud é gur tharraing gáinneáil GluA1 ar shiúcrós mar thoradh ar an sacharin, níor ghá an t-ábhar calorrach de shiúcrós. Spreagann Saccharin an gabhdóir blas milis céanna, T1R2 / T2R3, mar shiúcrós (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001),is dócha go dtosaíonn gníomhachtú an ghabhdóra seo ag ionchorprú GluA1 i synapses MSN. Ardaíonn Sucrose scaoileadh dopamine sna accumbens ó néaróin VTA (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada et al., 2005) lag brú ar gháinneáil dromchla GluA1. Mar sin is dócha go mbeidh an cosán a nascann an gabhdóir blas milis leis an VTA lárnach don plasticity a ndéantar staidéar air anseo.

Is dócha go mbeidh gá le gáinneáil gluA1 gasta tar éis ionghabháil siúcróis i ndáil le loighneacht spontáineach a rialáil. Go deimhin, in ainmhithe a bhfuil oiliúint shiúcróis orthu, chuir cosc ​​ar CPARanna cosc ​​ar ingearchló de ghníomhaíocht uath-ghluaisteáin tar éis ionghabháil shiúcróis. Bhí an fad iomlán a thaistil francaigh tar éis tomhaltas siúcróis arna thomhas ar laethanta comhleanúnacha ardaithe go suntasach ach amháin don tréimhse 3 min díreach tar éis ídiú siúcróis ar an seachtú lá oiliúna. Gníomhaíocht mhéadaithe díreach tar éis breathnóireacht ar shiúcrós ag tosú i lá 3 na hoiliúna, ach ní raibh sé an-éagsúil go dtí an lá 7. Tá an cúrsa gníomhaíochta seo comhoiriúnach leis an am a chaitheann GluA1 i gcroí-dhíorthaigh accumbens. Ba thoradh feidhmiúil ar an ngáinneáil mhéadaithe ar gháinneáil CPAR ar shionapsanna MSN sa chroílár accumbens ó chuir instealladh Naspm isteach sa chroí na méaduithe ar ghníomhaíocht. Léirigh cosc ​​lóistín ardaithe ag coscairí gabhdóra NMDA go raibh gá le comhartha glutamate trí ghabhdóirí NMDA chomh maith le CPARanna chun gníomhaíocht innill ghluaiste a ardú. Níor cuireadh isteach ar ionghabháil sucrose, áfach, nuair a cuireadh cosc ​​ar chomharthaíocht glutamate, ag teacht le staidéir roimhe seo a léiríonn go bhfuil baint ag croílár accumbens le freagairtí mótair a bhaineann le luach saothair orosensory ach nach ídiú féin (Smith, 2004). Tuairiscíodh cúrsa ama comhchosúil chun hipearbhrú a fhorbairt chun hipirghníomhaíocht oiriúnaithe a fhorbairt in ainmhithe a chothaíonn a mbéile laethúil i dtimpeallacht shainiúil (Matthews et al., 1996). Má bhí an freagra reatha ina hipirghníomhaíocht choinníollach a d'eascair as comhthéacs a chomhoiriúnú agus as siúcrós, áfach, bheadh ​​seachadadh sócróite ann roimhe sin, nár breathnaíodh. Is féidir go bhfuil spreagthach taiscéalaíoch ag na hábhair. Bheadh ​​gá le turgnaimh bhreise chun idirdhealú a dhéanamh i dtaobh an raibh spreagadh ardaithe tar éis ionghabhála shiúcróis mar thaiscéalaíocht i gcomparáid le foirm íogaireachta mótair nó iompraíochta eile. Ar aon nós, bhí comharthaíocht glutamat ag teastáil d’fhoirgneamh loingseoireachta spontáineach, agus mar thoradh air sin, bhí cuid de na CPARanna i gcroílár accumbens mar thoradh air.

D'fhéadfadh an ghníomhaíocht mhéadaithe innill ghluaiste tar éis ionghabháil siúcróis a bheith mar thoradh díreach ar an gclaonadh breathnaithe de chroí-sioncóipí a bhí ag teacht chun cinn, de réir mar a chuireann aschur méadaithe ón gconair ganglia basal díreach loingseoireacht chun cinn trí chosc a chur ar thalamus mótair (Sesack and Grace, 2010). Tis dóichí go ndéanann sé synapses a mhaireachtáil is dóichí go bhfuil cónaí orthu ar chonair dhíreach ina bhfuil néaróin lárnacha, a chuireann D1Ranna in iúl. Bheadh ​​poitéinseal synapses neurons conair dhírigh mar thoradh dá ndéanfadh D1R gáinneáil ar a bhfuil GEMA1 ina bhfuil gáinneáil chun sioncronú sna néaróin seo tar éis scaoileadh dopamine láidir. Mhéadófaí an ghníomhaíocht i dtorthaí réamh-mheastacháin coisctheacha na néarón conair dhírigh chun núicléis aschuir ganglia a basal, rud a chuirfeadh cosc ​​ar thalamus mótair agus a chuirfeadh gníomhaíocht cortex mótair chun cinn (Gerfen agus Surmeier, 2011; Kravitz et al., 2010; Sesack and Grace, 2010). Is dócha go dtarlóidh an phéacadh sioncópach a bhreathnaítear tar éis ionghabháil shiúcróis arís agus arís eile go sonrach i néaróin chonair dhírigh mar is féidir le dopamine a ghníomhaíonn tríd an ngabhdóir D1 fosfathúchán GluA1 S845 a spreagadh, as a dtiocfaidh gáinneáil dromchla.

Scrúdaigh roinnt staidéar na héifeachtaí a bhaineann le spreagadh arís agus arís eile le cóicín agus ina dhiaidh sin aistarraingt, cóireáil a théann i bhfeidhm go mór ar fheidhm an chórais luaíochta agus ar deireadh thiar is cúis le híogrú cóicín, a bhfuil tréithe mótair ardaithe ag cóicín, craving drugaí agus athiompú air. (Kalivas et al., 1998). Mar thoradh ar instealladh IP arís agus arís eile le cóicín le haghaidh laethanta 5-10 agus aistarraingt ina dhiaidh sin, tháinig méadú de réir a chéile ar ghabhdóirí AMPA 14 i ndromchla GluA2 ina bhfuil gabhdáin (Boudreau et al., 2007; Kourrich et al., 2007). Mar sin féin, ag laethanta 45 ón tarraingt siar tar éis 10 d de féin-riarachán, breathnaíodh méadú mór san innéacs ceartaithe i MSNanna francach (McCutcheon et al., 2011b) ag léiriú méadú ar CPAR. Mar sin, breathnaíodh gáinneáil CPAR tar éis ionghabháil shiúcróis, sa saothar reatha, agus féin-riarachán cóicín, cé gur faoi choinníollacha cóireála an-éagsúla. Toisc nach eol na hiarmhairtí láithreacha a bhaineann le féin-riarachán nó instealladh cóicín (mar shampla, ag post 5 nóiméad), ní féidir beart cóicín a chur i gcomparáid go díreach leis an obair shiúcróis reatha. Ar an gcaoi chéanna, níl a fhios an leanann CPARanna ar aghaidh i sionapsanna MSN d'ainmhithe a bhfuil oiliúint shiúcrós orthu tar éis dóibh oiliúint shiúcróis a scor nó má thaispeánann na hainmhithe sin íogrú siúcróis tar éis aistarraingt fhada.

Tá sé ríthábhachtach tuiscint a fháil ar cé chomh luachmhar is atá rialtáin a rialaíonn plaisteach agus iompraíocht chun aghaidh a thabhairt ar andúil, hyperphagia, cearrbhachas paiteolaíoch, agus neamhoird iompraíochta eile (Basar et al., 2010; Berridge, 2009; Luscher agus Malenka, 2011). Rannchuidíonn ró-thomhaltas siúcra leis an eipidéim otrachta (Hu agus Malik, 2010), agus cé go bhféadfadh sé a bheith cosúil le mí-úsáid drugaí (Avena et al., 2008), níor scrúdaíodh a mheicníocht go forleathan. Bunaíonn na torthaí reatha buneilimintí de phlaisteacht a spreagann luach saothair as ar féidir le staidéir amach anseo dul i ngleic le hiompraíocht chasta a rialú, agus bealaí nua a sholáthar chun dul i ngleic le paiteolaíochtaí a bhaineann le duaiseanna.

Admhálacha

Gabhaimid buíochas le baill de Shaotharlann Ziff, san am a chuaigh thart agus san am i láthair, as cúnamh teicniúil agus díospóireachtaí cabhracha, lena n-áirítear H. Girma, L. Lee agus Drs. B. Fernholz, B. Jordan, W. Lu, G. Rameau, S. Restituito & Y. Serulle. Thacaigh Comhaltacht Predoctoral Institiúid Náisiúnta Meabhairshláinte F31MH76617-01 agus Deontas Oiliúna NIH 5T32DC000063 leis an obair seo do Chlár Oiliúna Ollscoil Nua-Eabhrac sna Néareolaíochtaí (DST), R01NS061920 ón Institiúid Náisiúnta um Neamhoird Néareolaíocha agus Stróc (EBZ), 1R21MH091445- 01 ón Institiúid Náisiúnta Meabhairshláinte agus ón Oifig Taighde ar Shláinte na mBan, Clár Deontas Fhondúireacht Teaghlaigh Klarman i dTaighde Neamhoird Itheacháin, Ciste Dúshlán Taighde NYU agus P30EY13079 (CA), an Institiúid Náisiúnta um Mí-Úsáid Drugaí DA003956 agus Dámhachtain Imscrúdaitheora Neamhspleách ó NARSAD (KDC), an Institiúid Náisiúnta um Bodhaire agus Neamhoird Cumarsáide eile deontas DC009635 do RCF, agus trí dheontas síl san Ionad Feabhais ar Andúil ó Ionad Leighis Langone Ollscoil Nua Eabhrac.

Nótaí nótaí

Coinbhleacht leasa: Dearbhaíonn na húdair aon leasanna iomaíocha airgeadais.

tagairtí

  1. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Fianaise ar andúil siúcra: éifeachtaí iompraíochta agus neurochemical a bhaineann le hiontógáil siúcra ró-fhada, iomarcach. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20 – 39. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  2. Basar K, Sesia T, Groenewegen H, Steinbusch HW, Visser-Vandewalle V, Temel Y. Nuculus accumbens agus impulsivity. Prog Neurobiol. 2010; 92 – 533. [PubMed]
  3. Berridge KC. Luach saothair bia 'Is maith leat' agus 'ag iarraidh': foshraitheanna inchinne agus róil i neamhoird itheacháin. Fiseolaíocht & iompar. 2009; 97: 537–550. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  4. Boehm J, Kang MG, Johnson RC, Esteban J, Huganir RL, Málainn R. Tá ionchorprú sioncóideach gabhdóirí AMPA le linn LTP á rialú ag suíomh fosfaireachais PKC ar GluR1. Neuron. 2006; 51 – 213. [PubMed]
  5. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Glacann gabhdóirí AMPA an chill francach sa núicléas francach le linn aistarraingt an chóicín, ach méadaíonn siad tar éis dhúshlán an chóicín i gcomhar le gníomhachtú athraithe de kinases próitéiní gníomhachtaithe mitogen. J Neurosci. 2007; 27 – 10621. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  6. Brebner K, Wong TP, Liu L, Liu Y, Campsall P, Grey S, Phelps L, Phillips AG, Wang YT. Bíonn dúlagar fadtéarmach agus léiriú íogaireachta iompraíochta ag núicléas. Eolaíocht. 2005; 310 – 1340. [PubMed]
  7. Cacciapaglia F, Saddoris MP, Wightman RM, Carelli RM. Dinimic dhifreálach scaoilte dopamine sa chroílár núicléas accumbens agus rian na ngnéithe ar leith d'iompraíocht sprioc-threoraithe do shiúcrós. Neuropharmacology 2012 [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  8. Calabresi P, Maj R, Pisani A, Mercuri NB, Bernardi G. Dúlagar fadtéarmach synaptic sa striatum: tréithriú fiseolaíoch agus cógaseolaíochta. J Neurosci. 1992; 12 – 4224. [PubMed]
  9. Carr KD, Chau LS, Seachadadh, Gustafson K, Stouffer M, Tukey DS, Athshuíomh Athshlánaithe, Ziff EB. Fo-aonad glacadóra AMPA GluR1 síos an sruth de spreagadh Dopamine D-1 i núicléas accumbens bhlaosc idirghabhálacha méaduithe luach saothair méadaithe i bhfrancaigh faoi shrianta bia. Néareolaíocht. 2010; 165 – 1074. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  10. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, Shaham Y, Marinelli M, Wolf ME. Foirmiú accumbens GluR2-in easnamh gabhdóirí AMPA ag mealladh goir na craving cóicín. Dúlra. 2008; 454 – 118. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  11. Lá JJ, Carelli RM. Tugann an núicléas méadú ar an bhfoghlaim. Neuroscientist. 2007; 13 – 148. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  12. de Araujo IE, Oliveira-Maia AJ, Sotnikova TD, Gainetdinov RR, Caron MG, Nicolelis MA, Simon SA. Luach saothair bia in éagmais comharthaíochta gabhdóra blas. Neuron. 2008; 57 – 930. [PubMed]
  13. Ehlers MD, Heine M, Groc L, Lee MC, Choquet D. Gaisteáil dhifriúil de ghabhdóirí GluR1 AMPA trí ghníomhaíocht sioncóideach a bhaineann go sonrach le hionchur. Neuron. 2007; 54 – 447. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  14. Esteban JA, Shi SH, Wilson C, Nuriya M, Huganir RL, Malinow R. Rialaíonn an phosphorylation PKA d'fhochuideachtaí gabhdóra AMPA gáinneáil synaptic plasticity bunúsacha. Nat Neurosci. 2003; 6 – 136. [PubMed]
  15. Gerfen CR, Surmeier DJ. Córais teilgthe striatal a mhodhnú le dopamine. Athbhreithniú bliantúil ar an néareolaíocht. 2011; 34 – 441. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  16. Grueter BA, Brasnjo G, Malenka RC. Spreagann TRPV1 postsynaptic dúlagar fadtréimhseach a bhaineann go sonrach le cineál cille sa núicléis accumbens. Néareolaíocht nádúir. 2010; 13 – 1519. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  17. Sé K, Song L, Cummings LW, Goldman J, Huganir RL, Lee HK. Cobhsaíocht Ca2 + gabhdóirí AMPA inbhraite ag suíomhanna perisynaptic ag phosphorylation GluR1-S845. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106: 20033 – 20038. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  18. Hu FB, Malik VS. Deochanna milsithe siúcra agus riosca otracht agus diaibéiteas cineál 2: fianaise eipidéimeolaíoch. Fiseolaíocht & iompar. 2010; 100: 47–54. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  19. Isaac JT, Ashby MC, McBain CJ. Ról an fhochuideachta GluR2 i bhfeidhm gabhdóra AMPA agus i bplaisteacht synaptic. Neuron. 2007; 54 – 859. [PubMed]
  20. Jordan BA, Fernholz BD, Boussac M, Xu C, Grigorean G, Ziff EB, Neubert TA. Próitéiní dlús núíosaigh creimire núíosaigh a shainaithint agus a fhíorú. Mol Próitéamaíocht Cille. 2004; 3 – 857. [PubMed]
  21. Kalivas PW, Pierce RC, Cornish J, Sorg BA. Ról maidir le híogrú i dúil agus athiompú in andúil cóicín. J Pharmacol. 1998; 12 – 49. [PubMed]
  22. Kitagawa M, Kusakabe Y, Miura H, Ninomiya Y, Hino A. Sainaithint ghéiniteach mhóilíneach géine gabhdóra iarrthóra le haghaidh blas milis. Cumarsáid taighde bithcheimiceach agus bithfhisiciúil. 2001; 283 – 236. [PubMed]
  23. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Déanann taithí chóicín rialú ar phlaisteacht dhéthreoch Déaptic sa nuumbens accumbens. J Neurosci. 2007; 27 – 7921. [PubMed]
  24. Kravitz AV, Gníomhacha BS, PR Parker, Kay K, Thwin MT, Deisseroth K, Kreitzer AC. Rialáil a dhéanamh ar iompraíochtaí mótair parkinsonacha trí rialú optaigineach a dhéanamh ar chuairdín basal basal. Dúlra. 2010; 466 – 622. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  25. LaPlant Q, Vialou V, Covington HE, 3rd, Dumitriu D, Feng J, Warren BL, Maze I, Dietz DM, Watts EL, Iniguez SD, et al. Rialaíonn Dnmt3a iompraíocht mhothúchánach agus plasticity spine sa núicléis accumbens. Nat Neurosci. 2010; 13 – 1137. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  26. Liu SJ, Zukin RS. Ca2 + gabhdóirí AMPA inbhraite i bplaisteacht synaptic agus bás neuronal. Treochtaí sna heolaíochtaí. 2007; 30 – 126. [PubMed]
  27. Lu W, Isozaki K, Roche KW, Nicoll RA. Is é suíomh CaMKII sa chéad lúb intracellular de GluA1 a dhíríonn ar spriocghabhálacha gabhdóirí AMPA. Proc Natl Acad Sci US A. 2010; 107: 22266 – 22271. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  28. Lu W, Roche KW. Rialáil iarchur ar gháinneáil agus ar fheidhm gabhdóra AMPA. Tuairim reatha i néareolaíocht 2011 [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  29. Luscher C, Malenka RC. Plaisteachas synaptic atá ag teacht ó dhrugaí i andúil: ó athruithe móilíneacha go hathmhúnlú ciorcaid. Neuron. 2011; 69 – 650. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  30. Ionchorprú Makino H, Malinow R. AMPA i synapses le linn LTP: ról na gluaiseachta cliathánach agus exocytosis. Neuron. 2009; 64 – 381. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  31. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, Spanagel R, Luscher C. Plaisteachas synaptic a spreagann cóicín: spreagann marthanacht sa VTA oiriúnuithe sa NAc. Nat Neurosci. 2009; 12 – 1036. [PubMed]
  32. Masuda K, Koizumi A, Nakajima K, Tanaka T, Abe K, Misaka T, Ishiguro M. Tréithriú na modhanna ceangailteach idir gabhdóirí blas milis an duine agus comhdhúile milse meáchain mhóilíneach íseal. Ceapacha amháin. 2012; 7: e35380. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  33. Matthews K, Wilkinson LS, Robbins TW. Trí dheighilt mháthar arís agus arís eile ar fhrancaigh réamhthosaithe, déantar freagairtí iompraíochta ar dhreasachtaí príomhúla agus coinníollaithe nuair a bhíonn siad fásta. Physiol Behav. 1996; 59 – 99. [PubMed]
  34. Max M, Shanker YG, Huang L, Rong M, Liu Z, Campagne F, Weinstein H, Damak S, Margolskee RF. Tá Tas1r3, ag ionchorprú gabhdóra blas úr iarrthóra, ag luí leis an sofhreagracht milis lócas Sac. Géineolaíocht dúlra. 2001; 28 – 58. [PubMed]
  35. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF. Cothaíonn leideanna sárchruthú-réamh-mheasta scaoileadh dopamine céimnithe níos mó ná leideanna saccharin-tuartha. Synapse. 2012; 66 – 346. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  36. McCutcheon JE, Wang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Tá gabhdóirí AMPA cailciam-thréscaoilteacha i láthair san núicléas mar gheall ar aistarraingtí fada ó fhéin-riarachán cóicín ach gan cóicín a riarann ​​an turgnamh. The Journal of neuroscience: iris oifigiúil an Chumainn Néareolaíochta. 2011a; 31: 5737. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  37. McCutcheon JE, Loweth JA, Ford KA, Marinelli M, Wolf ME, Tseng KY. Aisiompaíonn gníomhachtú Grúpa I mGluR carnadh coiscín de ghabhdóirí AMPA cailciam-tréscaoilteacha i núicléis accumbenssynapses trí mheicníocht kinase próitéin C. J Neurosci. 2011b; 31: 14536 – 14541. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  38. Tarchuireann Nedelescu H, Kelso CM, Lazaro-Munoz G, Purpura M, Cain CK, Ledoux JE, Aoki C. gabhdóirí AMPA inchríochnaitheacha GluR1, chuig synapses neamhshiméadracha sa amygdala cliathánach le linn na céime tosaigh de eagla cuimhne a fhoirmiú: imdhíonocróiticeimic leictreon micreascópach staidéar. The Journal of néareolaíocht chomparáideach. 2010; 518 – 4723. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  39. Nelson G, MA Hoon, Chandrashekar J, Zhang Y, Ryba NJ, Zuker CS. Gabhdóirí blas milis mhamálta. Cill. 2001; 106 – 381. [PubMed]
  40. Ó MC, VA Derkach, Guire ES, Soderling TR. Gáinneáil membrane Extrasynaptic rialú ag GluR1 serine primes phosphorylation AMC gabhdóirí AMPA do potentiation fadtéarmach. J Biol Chem. 845; 2006 – 281. [PubMed]
  41. Pascoli V, Turiault M, Luscher C. Is féidir iompraíocht oiriúnaitheach a spreagtar ó dhrugaí a aisiompú nuair a dhéantar fuilaistriú synaptic a sheachaint. Dúlra. 2012; 481 – 71. [PubMed]
  42. Gléasra K, Pelkey ​​KA, Bortolotto ZA, Morita D, Terashima A, McBain CJ, Collingridge GL, Isaac JT. Ionchorprú neamhghabhálach na ngabhdóirí dúchasacha GluR2-in easnamh le linn an phéacadh fadtéarmach hippocampal. Nat Neurosci. 2006; 9 – 602. [PubMed]
  43. Rada P, Avena NM, Hoebel BG. Scaoiltear dopamine arís agus arís eile ar shiúcra sa bhlaosc accumbens arís agus arís eile. Néareolaíocht. 2005; 134 – 737. [PubMed]
  44. Roche KW, O'Brien RJ, Mammen AL, Bernhardt J, Huganir RL. Saintréith de shuíomhanna ilfhosfaireachta ar fhochuideachta AMPA GluR1. Neuron. 1996; 16 – 1179. [PubMed]
  45. Rumpel S, LeDoux J, Zador A, Málainn. R. Gáinneáil ghabhdóra iar-adamhach ar bhunús foghlama comhthiomsaí. Eolaíocht. 2005; 308 – 83. [PubMed]
  46. Sainz E, Korley JN, Battey JF, Sullivan SL. Comhalta núíosach den teaghlach T1R de ghabhdóirí blas toimhdean a shainaithint. Iris neurochemistry. 2001; 77 – 896. [PubMed]
  47. Serulle Y, Zhang S, Ninan I, Puzzo D, McCarthy M, Khatri L, Arancio O, Ziff EB. Rialaíonn idirghníomhaíocht GluR1-cGKII gáinneáil gabhdóirí AMPA. Neuron. 2007; 56 – 670. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  48. Sesack SR, Grace AA. Gréasán duaiseanna Cortico-Basal Ganglia: microcircuitry. Neuropsychopharmacology: foilseachán oifigiúil de Choláiste Neuropsychopharmacology Mheiriceá. 2010; 35 – 27. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  49. Smith GP. Déanann an dopamine Accumbens idirghabháil ar an éifeacht luachmhar a bhaineann le spreagadh orosensory ag siúcrós. Goile. 2004; 43 – 11. [PubMed]
  50. Smith WB, Starck SR, Roberts RW, Schuman EM. Feabhsaíonn dopaminergic spreagadh shintéise próitéine áitiúil léiriú dromchla GluR1 agus tarchur synaptic i néaróin hippocampal. Neuron. 2005; 45 – 765. [PubMed]
  51. Gréine X, M Milovanovic, Zhao Y, Wolf ME. Spreagann spreagadh géarmhíochaine agus ainsealach dopamine gabhdóirí gáinneáil ghabhdóra AMPA i néaróin núicléas na néaróin atá comhbhrúite le néaróin cortex réamhbhunaithe. The Journal of neuroscience: iris oifigiúil an Chumainn Néareolaíochta. 2008; 28 – 4216. [Airteagal saor in aisce PMC] [PubMed]
  52. Sun X, Zhao Y, Wolf ME. Spreagann spreagadh gabhdóirí dopamine ionchur sioncóideach gabhdóra AMPA i néaróin cortex réamhbhunaithe. J Neurosci. 2005; 25 – 7342. [PubMed]
  53. Thomas MJ, Beurrier C, Bonci A, Malenka RC. Dúlagar fadtéarmach sa núicléas accumbens: comhghaol néarach de íogrú iompraíochta go cóicín. Nat Neurosci. 2001; 4 – 1217. [PubMed]
  54. MA neamh-neamhghnách, Whistler JL, Malenka RC, Bonci A. Fágann nochtadh aon chóicín in vivo go dtarlaíonn an phéacadh fadtéarmach i néaróin dopamine. Dúlra. 2001; 411 – 583. [PubMed]
  55. Whitlock JR, Heynen AJ, Shuler MG, Bear MF. Spreagann an fhoghlaim neartú fadtéarmach sa hippocampus. Eolaíocht. 2006; 313 – 1093. [PubMed]