BEACHDAN: Tha na sgrùdaidhean DeltaFosB air a bheil sinn tric a’ toirt iomradh uile ag amas air an niùclas accumbens (ionad duaisean), agus fhuair iad a-mach gu bheil gnè gu ìre mhòr a’ cleachdadh nan aon uidheaman eanchainn ri meth & cocaine. Bho sgrùdadh cudromach leis an aon neach-rannsachaidh seo ( Achd Duaisean Nàdarra is Dhrogaichean air Innealan Plastachd Nèamhaidh Choitcheann le ΔFosB mar Mheadhanair Prìomh (2013) ):
Mar sin, bidh duaisean nàdurrach is drogaichean chan ann a-mhàin a ’tighinn còmhla air an aon shlighe neòil, bidh iad a’ tighinn còmhla air na h-aon eadar-mheadhanairean moileciuil, agus is dòcha anns na h-aon neurons anns na Nucleus Accumbens, gus buaidh a thoirt air beatha brosnachaidh agus “ag iarraidh” an dà sheòrsa dhuaisean
Bidh an toirt air falbh: meth, cocaine agus gnè a ’dèanamh na h-aon rudan bunaiteach ris na h-aon cheallan nearbh anns an ionad dhuaisean (an nobhail accumbens), ge bith dè a dhèanas iad ann an dòigh eile san eanchainn. Bha seo a ’toirt às a’ phuing àbhaisteach a bhith a ’bruidhinn gu bheil duaisean nàdurrach agus drugaichean eadar-dhealaichte ann an dòighean agus buaidhean.
Rinn an sgrùdadh ùr seo sgrùdadh air dè a bhios gnè a’ dèanamh ris a’ chuairt dhuaisean VTA. Is ann anns an VTA a thòisicheas na ceallan nearbhach a bhios a’ dèanamh dopamine – agus bidh iad a’ meuranachadh chun niùclas accumbens, cortex aghaidh, agus amygdala. Gu bunaiteach, is e an VTA stòr (tobar) a’ mhòr-chuid den dopamine againn. Faic an dà dhealbh seo den chuairt dhuaisean: Pic1 , Pic2
Fhuair luchd-rannsachaidh a-mach gu bheil gnè (climax) ag adhbhrachadh gum bi cuirp nan ceallan anns an VTA a’ crìonadh airson ùine (ann an fireannaich). Tha cuirp nan ceallan agus na dendrites aca a’ dèanamh suas stuth liath na h-eanchainn. Is e seo dìreach a bhios tràilleachd heroin a’ dèanamh ris an VTA (Chan e cleachdadh aon-ùine de heroin, ach cleachdadh heroin leantainneach). Thoir an aire gu bheil an aon chrìonadh seo de chuirp nan ceallan VTA a’ tachairt ann an tràillean heroin daonna.
Mairidh an snaidheadh cealla a tha air a ghintinn le feise air feadh co-dhiù 7 làithean. Bha na h-atharrachaidhean a dh'adhbhraich gnè air tilleadh gu àbhaisteach aig làithean 30, ach cha do rinn an luchd-rannsachaidh ach measadh air làithean 1, 7, agus 30.
Bidh crìonadh nam cuirp cealla ann an tràilleachd heroin ag adhbhrachadh dopamine nas ìsle anns an niùclas accumbens - no na chanas sinn dì-mhothachadh . Thug an luchd-rannsachaidh morphine dha na radain gus am freagairt (às deidh gnè) a mheasadh, ach cha do thachair dad. Mar as trice is toil leis na radain am morphine gu mòr, ach an seo bha iad air an dì-mhothachadh airson ùine. Ann an ùine ghoirid, cha robh cuairt duaise nan radain às deidh ejaculatory a’ freagairt ris an ìre ìosal de heroin. Bha luchd-rannsachaidh den bheachd gum biodh feum air dòsan nas àirde gus freagairt radain “àbhaisteach” adhbhrachadh.
Gu geàrr-chunntas - Bidh gnè (airson ùine) a ’dèanamh an aon rud anns an VTA agus a tha tràilleachd ri heroin: lughdachadh nan dopamine a’ dèanamh cuirp nan ceallan neòil. Bidh seo a ’leantainn gu dopamine nas ìsle anns an ionad dhuais, agus nas lugha de dhleastanas ri narcotics - agus bheir e co-dhiù 7 latha airson eanchainn radan faighinn air ais.
J Neurosci. 25 Ògmhios 2014;34(26):8825-36 . doi: 10.1523/JNEUROSCI.0133-14.2014.
Pitcher KK1, Cùirteagan CM2, Beloate LN3, Fuller J2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Coolen LM5.
Abstract
Bidh duais nàdarrach agus drogaichean mì-ghnàthachaidh a’ tighinn còmhla air an t-slighe mesolimbic agus a’ gnìomhachadh meacanaig choitcheann de plasticity neoni anns an niùclas accumbens. Bidh nochdadh leantainneach do opiates ag adhbhrachadh plasticity ann an neurons dopaminergic den raon tegmental ventral (VTA), a bhios a’ riaghladh fulangas duais morphine.
An seo, bidh sinn a ’dèanamh deuchainn air na h-tuairisgeulan gu bheil sgaoileadh le suirghe de opioids endogenous anns an VTA ag adhbharachadh atharrachadh moirfeòlach air ceallan dopamine VTA ann an radain fireann, a tha an uair sin a’ riaghladh an cleachdadh fad-ùine air ath-neartachadh èignichte air giùlan feise.
An toiseach, lùghdaich eòlas gnèitheasach meud soma dopamine VTA 1 agus 7 latha, ach chan ann 30 latha às deidh an t-seisean suirghe mu dheireadh . Chaidh a’ bhuaidh seo a bhacadh le naloxone ron gach seisean suirghe; mar sin, bha plasticity cealla dopamine VTA an urra ri gnìomh opioids endogenous.
An uair sin, bha ceangal aig VTA plasticity ri duais atharraichte atharrachadh, oir cha robh an fheadhainn fhireann a bha a ’faighinn a-mach mar roghainn roghnaichte airson 0.5 mg / kg mairbh.
An ath rud, chaidh a dhearbhadh an robh gnìomh opioid endogenous a’ meadhanachadh duais feise agus cuimhne ann an radain fhireann air an làimhseachadh le naloxone rè eòlas suirghe, an dàrna cuid gu siostamach no intra-VTA. Cha do chuir Naloxone casg air a’ chiad bhrosnachadh giùlain feise a chaidh a bhrosnachadh le eòlas thairis air seiseanan suirghe a-rithist is a-rithist, no roghainn àite cumhaichte airson suirghe. Ach, lughdaich làimhseachadh naloxone an abairt fad-ùine de bhrosnachadh giùlain feise a chaidh a bhrosnachadh le eòlas agus gnìomhachd neoni ann an raointean mesolimbic air adhbhrachadh le comharran cumhaichte co-cheangailte ri suirghe.
Le chèile, tha an dàta sin a ’sealltainn gu bheil opioids in-ghnèitheach aig àm gintinn plaideas niùclach ann an neurran dopamine VTA a dh’ fheumas nochdadh mar dhìleab airson duais morphine agus cuimhne fad-ùine airson giùlan duais nàdarra.
Ro-ràdh
Tha giùlanan duais nàdarra air an eadar-mheadhanachadh leis an t-siostam mesocorticolimbic (Meisel agus Mullins, 2006; Hoebel et al., 2009; Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young et al., 2011; Blum et al., 2012). Tha drogaichean de dhroch-dhìol ag adhbharachadh atharrachaidhean neraltach san t-siostam seo, a tha an uair sin a ’cur ri leasachadh agus cur an cèill mì-ghnàthachadh stuthan (Hyman et al., 2006; Nestler, 2012). Cho-dhùin sinn roimhe seo gu bheil eòlas le giùlan duais nàdarra, ie eòlas gnàthach ann an radain fireann, ag adhbharachadh plastaig niocrasach anns an nucleus accumbens (NAc), a ’gabhail a-steach spines dendritic meudaichte (Pitchers et al., 2010a) agus deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Anns an aon àm, tha an plasticity seo, air a stiùireadh le gnè, riatanach airson buaidh gnàth-eòlas air leantainneachd às dèidh sin, ri fhaicinn mar a bhith a ’toirt taic do thòiseachadh is coileanadh giùlan feise (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). A bharrachd air sin, bidh eòlas gnèitheach a ’toirt freagairt do psychostimulants, a’ gabhail a-steach mothachadh air gnìomhachd locomotives agus duais nas fheàrr (Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).
’S e an NAc aon targaid sìos an abhainn de na neuronan dopaminergic anns an raon tegmental ventral (VTA). Bidh neuronan dopamine VTA air an gnìomhachadh rè suirghe agus às dèidh dhaibh a bhith fosgailte do chomharran cumhaichte a tha a’ ro-innse duais feise ( Balfour et al., 2004 ; Frohmader et al., 2010a ), tro cheangal peptide opioid endogenous (EOP) aig gabhadan μ-opioid (MORs; Matthews agus German, 1984 ; Johnson agus North, 1992 ; Klitenick et al., 1992 ; Ikemoto et al., 1997 ; Balfour et al., 2004 ). Mar sin, bidh nochdadh do chomharran cumhaichte a tha ro-innseach air giùlan feise ag adhbhrachadh leigeil ma sgaoil EOP agus gnìomhachadh cealla dopamine VTA, a bhios a’ comasachadh brosnachadh feise ( Mitchell agus Stewart, 1990 ; van Furth et al., 1995 ; van Furth agus van Ree, 1996 ) agus leigeil ma sgaoil dopamine anns an NAc ( Fiorino et al., 1997 ).
Bidh nochdadh a-rithist is a-rithist do opiaidean exogenous ag adhbhrachadh atharrachaidhean moirfeòlais anns an VTA ( Mazei-Robison et al., 2011 ; Mazei-Robison agus Nestler, 2012 ), lùghdachadh ann am meud soma neurons dopamine VTA ( Sklair-Tavron et al., 1996 ; Spiga et al., 2003 ; Chu et al ., 2007 ; Russo et al., 2007 ; Mazei-Robison et al., 2011 ), lùghdachadh ann an ìrean phròtainean neurofilament ( Beitner-Johnson et al., 1992 ), àrdachadh ann an so-ghluasadachd cheallan dopamine, agus lùghdachadh ann an còmhdhail axoplasmic agus toradh dopamine chun NAc ( Beitner-Johnson et al., 1992 ; Mazei-Robison et al., 2011 ). Bidh na h-atharrachaidhean seo ann an niùron dopamine VTA ag adhbhrachadh fulangas duaise morphine agus tha iad sealach oir bidh iad a’ sgapadh taobh a-staigh mìos bho bhith a’ seachnadh dhrogaichean ( Russo et al., 2007 ). Chan eil e soilleir an-dràsta a bheil plasticity anns na niùronan dopamine VTA sònraichte do ghnìomhan opiates no a bheil iad cuideachd air an dèanamh le bhith a’ leigeil ma sgaoil EOP rè giùlan nàdarra duaise.
An seo, bidh sinn a ’feuchainn an beachd-bharail gu bheil eòlas duais nàdair ag adhbharachadh neuroplasticity coltach ris an adhbhar a dh’ adhbharaicheas opiates, agus mar sin, gum bi opiates a ’co-èigneachadh air inneal plaidigs a tha riatanach airson duais duais nàdarra agus cuimhne dhuaisean. Bidh sinn a ’dearbhadh a bheil eòlas gnàthach ann an radain fireann a’ lùghdachadh meud cuid neurons dopamine VTA tro phròiseas a tha an crochadh air gnìomh EOP anns an VTA. Còmhla ri sin, tha sinn a ’sgrùdadh a bheil atharraichean air an toirt le EOP ann an neurons VTA dopamine co-cheangailte ri ath-neartachadh giùlan luachaidh nàdarra agus sònrachadh brìgh searbhachd gu leigheasan co-cheangailte ri duais nàdarra, agus ag adhbharachadh thar-fhulangas a thaobh duais morphine.
Stuthan agus Dòighean-obrach
Animals
Fhuaireadh radain fhireann inbheach Sprague-Dawley (200–225 g) à Abhainn Charles agus chaidh an cur ann am paidhrichean ann an seòmraichean le solas fuadain air cearcall solais/dorchadas 12 uair anns a h-uile deuchainn (solais dheth aig 10:00m ach a-mhàin airson deuchainn fulangas morphine, solais dheth aig 5:00f). Bha biadh is uisge rim faighinn ad libitum ach a-mhàin rè deuchainnean giùlain. Chaidh ovariectomy boireannaich brosnachaidh a thoirt a-mach agus chaidh capsalan SILASTIC 5% 17-β-estradiol benzoate (trast-thomhas a-staigh 1.98 mm, fad 0.5 cm, Dow-Corning) a chur a-steach fon chraiceann. Chaidh stealladh progesterone (fon chraiceann, 500 μg ann an 0.1 ml de dh’ola sesame) a thoirt seachad 3–6 uairean mus deach an deuchainn gus gabhail ri gnèitheas a bhrosnachadh. Chaidh a h-uile modh-obrach aontachadh le Comataidhean Cùram Bheathaichean Oilthigh Western Ontario agus Oilthigh Michigan, agus bha iad a rèir stiùiridhean Comhairle Chanada air Cùram Bheathaichean agus Institiudan Nàiseanta na Slàinte a’ toirt a-steach beathaichean veirteabrach ann an rannsachadh.
Cursa tìme de VTA dopamine gu bheil meudachd air atharrachadh
Seiseanan suirghe gach latha.
Gus sgrùdadh a dhèanamh air cùrsa ùine nan atharrachaidhean ann am meud soma niùron dopamine anns an VTA, chaidh beathaichean aig an robh eòlas feise agus beathaichean gun eòlas feise a mharbhadh aig 1, 7, no 31 latha ( n = 5–8 gach buidheann) às deidh an latha mu dheireadh de suirghe (eòlach) no làimhseachadh (gun eòlas). Chaidh buidhnean aig an robh eòlas feise a mhaidseadh airson giùlan feise rè an t-seisein suirghe mu dheireadh, a bharrachd air àireamhan iomlan de sgaoladh thairis air na còig seiseanan (cuibheasachd de 5 airson gach buidheann), agus cha robh eadar-dhealachadh ann am paramadair sam bith de ghiùlan feise.
Seiseanan gintinn.
Chaidh fireannaich gun eòlas feise a shònrachadh do aon seach aon de dhà shuidheachadh deuchainneach: gun eòlas feise no eòlach feise. Chaidh cead a thoirt do bheathaichean le eòlas feise suirghe còig tursan air làithean an dèidh a chèile le boireannaich a bha deònach gabhail riutha ann an cèidsichean deuchainn ceart-cheàrnach (60 × 45 × 50 cm) gus an nochd ejaculation no suas ri 1 uair a thìde (ge bith dè a thàinig an toiseach). Chaidh na cèidsichean a ghlanadh gu mionaideach le fuasgladh ethanol 70% agus chaidh leabaidh ùr a chur ris eadar seiseanan suirghe. Chaidh giùlan feise a dhèanamh rè na h-ìre dorcha (2–6 uairean a thìde às deidh don dorchadas tòiseachadh). Cha deach ach beathaichean a chuir a-mach rè co-dhiù ceithir de na còig seiseanan suirghe a mheas mar bheathaichean le eòlas feise agus chaidh an toirt a-steach do na deuchainnean. Chaidh a h-uile seisean suirghe fhaicinn agus chaidh giùlan feise a chlàradh. Chaidh an àireamh de intromissions (IMs) mounts (M), latency mount (ML; ùine bho thoirt a-steach a’ bhoireannaich chun a’ chiad mount), latency intromission (IL; ùine bho thoirt a-steach a’ bhoireannaich chun a’ chiad intromission), agus latency ejaculation (EL; ùine bhon chiad intromission gu ejaculation) a chlàradh ( Agmo, 1997 ). Chaidh beathaichean gun eòlas gnèitheasach a chur ann an cèidse deuchainn glan airson 1 uair aig an aon àm ri fireannaich aig an robh eòlas feise a’ suirghe san aon rùm, gus an robh iad fosgailte do fhàilidhean boireann fad às, agus ìrean coltach ri buaireadh agus nobhail àrainneachdail ri fireannaich eòlach.
A ’dèanamh cinnteach gu bheil bileag neo-chnìomh-droma.
Chaidh beathaichean a thoirt fo anesthetis dhomhainn le bhith a’ cleachdadh sodium pentobarbital (270 mg/kg, ip) agus chaidh an lìonadh le 50 ml de 0.9% saline, agus an uair sin 500 ml de 4% paraformaldehyde ann am bufair sodium phosphate (PB) 0.1 m. Chaidh na h-eanchainnean a thoirt air falbh agus an iar-shuidheachadh airson 1 uair aig teòthachd an t-seòmair (RT) san aon shocrachadh, agus an uair sin chaidh an bogadh ann an 20% sucrose agus 0.01% sodium azide ann an 0.1 m PB airson an stòradh aig 4°C. Chaidh earrannan coronal a ghearradh aig 35 μm air microtome reòta (H400R, Microm) agus chaidh an cruinneachadh ann an ceithir sreathan co-shìnte ann am fuasgladh crio-dhìonach (30% sucrose, 30% ethylene glycol ann an 0.1 m PB) agus an uair sin chaidh an stòradh aig 20°C. Chaidh a h-uile goir a dhèanamh aig RT le gluasad socair agus sruthladh pailt le 0.1 m PBS, pH 7.35, eadar goir. Chaidh earrannan a nochdadh do 1% H₂O₂ airson 10 mionaidean gus peroxidases endogenous a sgrios, agus an uairsin chaidh am bacadh airson 1 uair a thìde ann am fuasgladh goir (PBS+: PBS anns a bheil 0.4% Triton X-100; Sigma-Aldrich) agus 0.1% albumin serum bovine (Jackson Immuno Research Laboratories). An uairsin, chaidh earrannan a ghoir thar oidhche aig RT ann an tyrosine hydroxylase (TH)-antibody luchaige (1:20 000; Millipore ) . Às deidh goir antibody bun-sgoile, chaidh earrannan a ghoir ann an antibody gobhair an-aghaidh luchaige AlexaFluor 555-conjugated (1:100; Invitrogen, Eugene, OR) airson 30 mionaid. Mu dheireadh, chaidh na h-earrannan a nighe le 0.1 m PB, an cur air sleamhnagan glainne Superfrost Plus, an tiormachadh, agus an còmhdach le gelvatol anns an robh an àidseant an-aghaidh seargadh 1,4-diazabicyclo(2,2)octane (DABCO; 50 mg/ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978 ).
Mion-sgrùdadh dàta: meud neuron soma.
Chaidh ìomhaighean de niùronan TH-immunoreactive (IR) anns an VTA a thogail aig meudachadh 40 × aig trì ìrean rostral gu caudal ( Balfour et al., 2004 ). Cha deach eadar-dhealachaidhean sam bith a lorg eadar ceallan aig na diofar ìrean. Chaidh meud soma niùronan TH-IR a sgrùdadh a’ cleachdadh ImageJ (Institiudan Nàiseanta na Slàinte). Chaidh farsaingeachd chuibheasach, cuairt-thomhas, agus cuairteachadh a thomhas mar a chaidh a mhìneachadh le Sklair-Tavron et al. (1996) . Chaidh cuibheasachd de 25 cealla gach beathach (na 3 ìrean VTA uile còmhla) a sgrùdadh agus cha deach ach ceallan le niùclas soilleir ri fhaicinn a thoirt a-steach. Airson gach beathach, chaidh an farsaingeachd chuibheasach, cuairt-thomhas, agus cuairteachadh obrachadh a-mach. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil chaidh ANOVA dà-shligheach a chleachdadh [factaran: eòlas gnèitheasach (gun eòlas gnèitheasach no gun eòlas gnèitheasach) agus ùine (1, 7, no 31 latha)] agus an uairsin coimeasan post hoc a’ cleachdadh dòigh Holm-Sidak le ìre chudromachd de 0.05.
Bidh VTA neo-dopamine ag atharrachadh
Seiseanan measgaichte dà-chànanach.
Airson deuchainn a dhèanamh air co dhiubh a tha eòlas gnàthach aig seiseanan suirghe làitheil airson lùghdachadh ann an ìre TH-IR neuron parta, chaidh neòinean dopamine VTA de bheathaichean a bha air suirghe aig còig seiseanan bi -ekly mating a sgrùdadh. Bha seiseanan cruinneachaidh mar a chaidh iomradh gu h-àrd, ach thar ùine de 2.5 seachdainean. Chaidh Brains a chruinneachadh 7 d às dèidh maidseadh no làimhseachadh mu dheireadh.
A ’cur a-steach lipéadú Immunoperoxidase.
A bharrachd air an sin, chaidh a dhearbhadh an leigeadh cleachdadh dhòighean dathaidh mothachail le immunoperoxidase agus lorg chromogen le bhith a’ dèanamh lèirsinn air atharrachaidhean ann am meud soma TH-IR. Chaidh an lionadh-fala agus giullachd clò a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Às dèidh làimhseachadh le 1% H 2 O 2 agus PBS+, chaidh earrannan a ghoir thar oidhche aig RT ann an antibody polyclonal tyrosine hydroxylase (TH) luchaige (1:20 000; Millipore ). Às dèidh goir nan antibody bun-sgoile, chaidh earrannan a ghoir le IgG gobhair an-aghaidh coineanach ceangailte ri biotin (1 uair, 1:500 ann am PBS+; Vector Laboratories), avidin-biotin-horseradish peroxidase (1 uair, ABC elite; 1:1 000 ann am PBS; Vector Laboratories), agus 3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (10 mion, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich) air a neartachadh le nicil sulfate ann an (0.02% ann an 0.1 m PB) le haidridean piorocsaid (0.015%). Chaidh earrannan a nighe gu mionaideach ann an 0.1 m PB gus an ath-bhualadh a chrìochnachadh agus an cur air sleamhnagan glainne Superfrost plus le còd (Fisher) le 0.3% gelatin ann an ddH 2 O. Às dèidh dìth uisgeachaidh, chaidh na sleamhnagan uile a chòmhdach le stuth-cur DPX (dibutyl phthalate xylene; Sigma-Aldrich).
Mion-sgrùdadh dàta: meud neuron soma.
Chaidh ceallan TH-IR a sgrùdadh airson farsaingeachd, cuairt-thomhas, agus cuairteachadh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. A bharrachd air an sin, chaidh ceallan TH-IR ann an substantia nigra (SN), anns na h-earrannan ceudna a chaidh a chleachdadh airson mion-sgrùdadh cheallan TH-IR VTA, a sgrùdadh. Mu dheireadh, às dèidh mion-sgrùdadh a dhèanamh air ceallan TH-IR VTA agus SN, chaidh earrannan a cho-dhath le bhith a’ cleachdadh cresyl violet agus chaidh ceallan neo-TH-IR a sgrùdadh a’ cleachdadh nan aon dhòighean a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean naive agus eòlach a choimeas le bhith a’ cleachdadh deuchainnean t Oileanach dà-earballach le ìre chudromachd de 0.05.
Buaidh naloxone air lùghdachadh dopamine a tha an sàs ann an eòlas
Gus faighinn a-mach an robh pàirt aig MORan ann an atharrachaidhean ann am meud soma niùron dopamine a chaidh adhbhrachadh le eòlas feise, chaidh MORan a bhacadh rè giùlan feise. Fhuair leth de na beathaichean eòlas feise, ach chaidh an leth eile a làimhseachadh ach dh’fhan iad gun eòlas feise. Chaidh leigeil le beathaichean aig an robh eòlas feise suirghe air 5 latha an dèidh a chèile. Taobh a-staigh nam buidhnean aig an robh eòlas feise agus gun eòlas feise, chaidh beathaichean a làimhseachadh leis an antagonist MOR neo-roghnach naloxone (10 mg / kg, sc; Sigma-Aldrich, air a sgaoileadh ann an saline 0.9%) no saline 30 mionaid mus deach am boireannach a thoirt a-steach no mus deach a làimhseachadh (gun eòlas); agus mar sin a’ cruthachadh ceithir buidhnean deuchainneach: saline gun eòlas feise (Naive Sal), naloxone gun eòlas feise (Naive NLX), saline aig an robh eòlas feise (Exp Sal), agus naloxone aig an robh eòlas feise (Exp NLX; n = 5–8 gach buidheann). Cha robh buaidhean staitistigeil cudromach aig làimhseachadh Naloxone air paramadair sam bith de ghiùlan feise, air gin de na 5 latha, agus bha na buidhnean air an làimhseachadh le naloxone agus saline co-ionann ann an eòlas feise. Chaidh a h-uile beathach a mharbhadh tro perfusion intracardial 7 latha às deidh an t-seisean suirghe mu dheireadh. Chaidh earrannan, imdhíon-eòlas-cheimigeachd, agus mion-sgrùdadh dàta (ANOVA dà-shligheach; factaran: eòlas gnèitheasach agus làimhseachadh dhrogaichean) airson meud dopamine soma a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd.
Roghainn àite le moirfein
Dealbhadh dearbhach.
Roimhe seo, sheall Russo et al. (2007) gu bheil morphine leantainneach ag adhbhrachadh fulangas do dhuais morphine. Leis gu bheil eòlas gnèitheasach agus morphine leantainneach ag adhbhrachadh lùghdachaidhean coltach ri chèile ann am meud soma niùronan dopamine anns an VTA, chaidh cudromachd gnìomhach nan atharrachaidhean morphological air adhbhrachadh le gnè a dhearbhadh airson duais morphine. Chaidh beathaichean le eòlas gnèitheasach agus gun eòlas gnèitheasach a roinn ann an sia buidhnean deuchainneach eadar-dhealaichte ( n = 9–13 gach buidheann) stèidhichte air giùlan gnèitheasach (gun eòlas gnèitheasach no gun eòlas gnèitheasach) agus dòs morphine (0.5, 5.0, no 10.0 mg / kg, ip) agus chaidh an deuchainn airson roghainn àite cumhaichte air adhbhrachadh le morphine (CPP).
Morphine-CPP.
Chaidh an suidheachadh a dhèanamh 1 latha às dèidh an t-seisein suirghe mu dheireadh agus chaidh buidhnean a mhaidseadh airson coileanadh gnèitheasach rè na seisein suirghe mu dheireadh. Bha am paradigm CPP a chaidh a chleachdadh a’ toirt a-steach ro-dheuchainn, làithean suidheachaidh, agus iar-dheuchainn, agus bha an inneal stèidhichte air Tenk et al. (2009) . Gu h-aithghearr, bha trì seòmraichean fa leth anns an inneal CPP (MED Associates). Eadar gach seisean, chaidh an inneal a ghlanadh gu mionaideach le fuasgladh ethanol 70% gus comharran fàileadh maireannach a lughdachadh. Gus roghainnean fa leth a dhearbhadh, chaidh ro-dheuchainn a dhèanamh anns an deach cothrom an-asgaidh a thoirt do bheathaichean air an inneal gu lèir airson 15 mionaidean. Mar bhuidheann, cha do sheall beathaichean roghainn mhòr airson seòmar sònraichte, ach bha beagan roghainn tùsail aig gach beathach fa leth. Chaidh radain a sheall roghainn mhòr airson aon de na seòmraichean (eadar-dhealachadh >200 s eadar an ùine a chaidh a chaitheamh anns gach seòmar; <5% de bheathaichean) rè na ro-dheuchainn a thoirmeasg bhon sgrùdadh. Rè an t-suidheachaidh, chaidh an droga a pharadh ri seòmar a b’ fheàrr leis an toiseach no ri seòmar nach robh, a’ cleachdadh paradigm neo-chlaon ( Tzschentke, 2007 ) agus chaidh na beathaichean a chuingealachadh ris na seòmraichean airson 30 mionaid. Chaidh saline (ip) a stealladh dha na beathaichean sa mhadainn (9:00m gu 12:00f) agus chaidh an cuingealachadh ris an t-seòmar le saline (smachd). Anns an fheasgar (1:00–4:00f), chaidh morphine (ip, 0.5 mg/kg, 5.0 mg/kg no 10.0 mg/kg; morphine sulfate air a sgaoileadh ann an 0.9% saline, Johnson Matthey) agus chaidh an cuingealachadh ris an t-seòmar le morphine. Chaidh na beathaichean a chur fo dhà latha suidheachaidh. An ath latha (3 latha às dèidh an latha mu dheireadh de suirghe) chaidh deuchainn iar-dheuchainn, a bha co-ionann a thaobh modh-obrach ris an deuchainn ro-làimh, a dhèanamh. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil, chaidh an ùine a chaidh a chaitheamh anns an t-seòmar paidhir morphine rè na deuchainn às dèidh sin a choimeas ris an ùine a chaidh a chaitheamh anns an t-seòmar paidhir saline rè na deuchainn às dèidh sin airson fireannaich nach robh eòlach air gnè no a bha eòlach air taobh a-staigh gach dòs a’ cleachdadh deuchainn t paidhir . Chaidh p < 0.05 a mheas mar rud cudromach gu staitistigeil. Fhuair buidhnean smachd a bharrachd de bheathaichean nach robh eòlach air gnè agus a bha eòlach saline ann an seòmraichean paidhir agus neo-phaidhir gus a bhith nan smachdan àicheil. Cha deach eadar-dhealachaidhean sam bith anns an ùine a chaidh a chaitheamh eadar seòmraichean a lorg airson ceachtar buidheann.
Buaidh naloxone siostamach air cuideachadh gnàthach ann an giùlan feise
Dealbhadh dearbhach.
Bidh eòlas feise ag adhbhrachadh gum bi giùlan feise nas fhasa a chumas suas airson co-dhiù mìos ( Pitchers et al., 2012 ). Gus buaidh bacadh MOR air giùlan feise a tha air adhbhrachadh le eòlas a sgrùdadh, fhuair beathaichean aig an robh eòlas feise naloxone no saline mus deach na còig seiseanan suirghe leantainneach a dhèanamh ( n = 12 gach fear) mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Seachdain às deidh an t-seisein suirghe mu dheireadh, chaidh deuchainn suirghe mu dheireadh a dhèanamh anns an deach leigeil leis na beathaichean uile suirghe gus an robh aon ejaculation no suas ri 1 uair a thìde ann. Cha deach làimhseachadh naloxone no saline a thoirt seachad mus deach suirghe air latha na deuchainn mu dheireadh. Chaidh paramadairean suirghe a choimeas gus faighinn a-mach an robh buaidh aig naloxone air brosnachadh suirghe a tha air adhbhrachadh le eòlas feise (latha 1 vs latha 5) no cumail suas an adhbhair seo (latha 5 vs deuchainn) a’ cleachdadh ANOVA dà-shligheach [factaran: làimhseachadh (saline an aghaidh naloxone) agus latha (latha 1, latha 5, no deuchainn)] agus dòigh Holm-Sidak airson coimeasan post hoc . Airson a h-uile deuchainn staitistigeil, chaidh p < 0.05 a mheas mar rud a bha cudromach gu staitistigeil.
Deuchainnean smachd a bharrachd
Naloxone siostamach air latha na deuchainn.
Gus sealltainn nach robh giùlan feise atharraichte air latha deuchainn suirghe mu dheireadh mar thoradh air dìth naloxone, thug sinn naloxone no saline air latha deuchainn suirghe mu dheireadh do bheathaichean a fhuair suirghe còmhla ri naloxone fhad ’s a bha iad a’ faighinn eòlas feise. Gu sònraichte, fhuair a h-uile beathach stealladh naloxone (10 mg / kg, sc) 30 mionaid mus deach suirghe gu aon ejaculation rè 5 latha an dèidh a chèile. Air latha deuchainn 7 latha às deidh sin, fhuair timcheall air leth de na beathaichean stealladh de naloxone (10 mg / kg, n = 7) no saline ( n = 6) 30 mionaid mus deach boireannach gabhaltach a thoirt a-steach. Chaidh giùlan feise fhaicinn agus a chlàradh. Chaidh paramadairean suirghe a choimeas gus faighinn a-mach an robh naloxone a’ toirt buaidh air an dàrna cuid comasachadh suirghe air adhbhrachadh le eòlas feise (latha 1 vs latha 5) no cumail suas an adhbhair seo (latha 5 vs deuchainn) a’ cleachdadh ANOVA dà-shligheach [factaran: làimhseachadh (saline an aghaidh naloxone) agus latha (latha 1, latha 5, no deuchainn)] agus dòigh Holm-Sidak airson coimeasan post hoc . Airson a h-uile deuchainn staitistigeil, chaidh p < 5% a mheas mar rud a bha cudromach gu staitistigeil.
Buaidh naloxone air cur an cèill geàrr-ùine air giùlan feise furasta.
Chaidh buaidhean làimhseachaidh naloxone (10 mg/kg, sc) rè suirghe a dhearbhadh air giùlan feise às dèidh sin rè latha deuchainn suirghe mu dheireadh, a chaidh a dhèanamh dìreach 1 latha às dèidh a’ suirghe mu dheireadh (saline, n = 5; naloxone, n = 4).
Ro-innleachd naloxone siostamach.
Gus faighinn a-mach an adhbharaich làimhseachadh ath-aithrisichte le naloxone leis fhèin lagachadh air giùlan feise 7 latha às deidh an làimhseachadh mu dheireadh, fhuair beathaichean nach robh eòlach air gnè còig stealladh làitheil naloxone (10 mg / kg, sc) no saline air làithean an dèidh a chèile mus deach deuchainn suirghe a dhèanamh 7 latha às deidh an stealladh naloxone no saline mu dheireadh. Air an latha deuchainn mu dheireadh seo, cha d’ fhuair beathaichean stealladh sam bith. Chaidh giùlan feise fhaicinn agus a chlàradh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh paramadairean suirghe a choimeas eadar buidhnean a’ cleachdadh deuchainnean t neo-phàraichte . Airson a h-uile deuchainn staitistigeil, chaidh p < 5% a mheas mar rud a bha cudromach gu staitistigeil.
Duais naloxone siostamach agus duais gnàthach.
Is e aon chothrom airson buaidhean teannachaidh naloxone air taisbeanadh cumail suas giùlan feise furasta gu bheil naloxone a ’cur bacadh air buaidhean buannachdail giùlan gnèitheasach. Gus an comas seo a dhearbhadh, chaidh am paradigm CPP a dhèanamh airson giùlan gnèitheasach dìreach às deidh in-stealladh naloxone no saline ann an fireannaich aig nach robh eòlas gnèitheasach roimhe. Bha dòigh-obrach CPP coltach ris na chaidh a mhìneachadh gu h-àrd airson morphine-CPP, a ’toirt a-steach pretest, làithean fuarachaidh, agus post-deuchainn.
Chaidh giùlan gnèitheasach a chàradh leis an t-seòmar nach robh roghnaichte an toiseach. Ann an dòigh chothromach, fhuair gach beathach stealladh de naloxone ( n = 12) no saline ( n = 11) 30 mionaid mus d’ fhuair iad cothrom air boireannach gabhaltach. B’ e timcheall air 13 mionaid fad cuibheasach an t-seisein suirghe. Aon mhionaid às deidh ejaculation, chaidh am beathach a chuir anns an t-seòmar càraideach airson 30 mionaid. Air an latha suidheachaidh eile, fhuair beathaichean stealladh de naloxone no saline (ge bith dè a fhuair iad mus do rinn iad suirghe), agus chaidh an cur anns an t-seòmar neo-chàraideach airson 30 mionaid. An uairsin, chaidh deuchainn iar-dheuchainn a dhèanamh, co-ionann ris an ro-dheuchainn. Gus roghainn an t-seòmair a dhearbhadh, chaidh an ùine a chaidh a chaitheamh anns an t-seòmar càraideach rè na ro-dheuchainn agus an deuchainn iar-dheuchainn a choimeas. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil, chaidh deuchainnean t càraideach a chleachdadh gus sgòran roghainn agus eadar-dhealachaidh a choimeas, agus ùine anns an t-seòmar càraideach rè na ro-dheuchainn agus an deuchainn iar-dheuchainn gus faighinn a-mach an deach CPP cudromach a chruthachadh airson giùlan gnèitheasach. Chaidh p < 0.05 a mheas cudromach.
Buaidh intra-VTA naloxone air cuideachadh gnàthach ann an giùlan feise
Dealbhadh dearbhach.
Gus faighinn a-mach an robh gnìomh EOP gu sònraichte anns an VTA, an urra ri buaidhean atharrachaidhean air giùlan feise a chaidh adhbhrachadh le eòlas feise, chaidh na beathaichean a thoirt a-steach don VTA le in-stealladh ionadail de naloxone no saline mus deach còig seiseanan suirghe làitheil a dhèanamh. Bha paradigm giùlain coltach ris an deuchainn naloxone siostamach. Chaidh leigeil le beathaichean aig an robh eòlas feise suirghe rè 5 latha an dèidh a chèile gus an robh aon ejaculation no suas ri 1 uair. Còig mionaidean deug mus deach am boireannach gabhaltach a thoirt a-steach, fhuair na radain fhireann in-stealladh dà-thaobhach de naloxone (10 μg / μl gach leth-chruinne; tomhas-lìonaidh 0.5 μl; air a sgaoileadh ann an 0.9% saline) no saline (0.5 μl gach leth-chruinne). Chaidh meanbh-stealladh dà-thaobhach a thoirt seachad aig ìre sruthadh de 0.5 μl / min thairis air eadar-ama 1 mionaid agus an uairsin 1 mionaid a bharrachd leis a’ chanula stealladh air fhàgail na àite airson sgaoileadh. Chaidh an canula stealladh an uairsin a chuir na àite leis a’ chanula meallta agus caip duslach. Seachdain às deidh an latha mu dheireadh de suirghe (latha deuchainn), rinn a h-uile beathach suirghe a-rithist gu ejaculation gun in-stealladh de naloxone no saline. Tha Figear 3 A a’ mìneachadh dealbhadh an deuchainn. Chaidh mion-sgrùdadh dàta a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh ann an deuchainn naloxone siostamach.
Lannsair-losgaidh.
Chaidh radain fhireann a chur fo anesthetis le stealladh intraperitoneal (0.1 ml/kg) de ketamine (0.87 mg/ml) agus xylazine (0.13 mg/ml), agus chaidh an cur ann an inneal stereotaxic (Kopf Instruments). Chaidh cannula stiùiridh dà-thaobhach 21-gauge (Plastics One) a leigeil sìos tro thuill bheaga drile anns a’ chlaigeann a-steach don eanchainn a dh’ionnsaigh an VTA aig −4.8 mm AP, ± 0.75 mm ML bhon bregma agus −7.8 mm DV bho mhullach a’ chlaigeann a rèir Paxinos agus Watson (2013) . Chaidh cannula a dhaingneachadh le acrylic fiaclaireachd a bha ceangailte ri trì sgriothan a chaidh a shuidheachadh anns a’ chlaigeann. Fhuair na beathaichean ùine ath-bheothachaidh 2-sheachdain, agus chaidh an làimhseachadh gach latha gus an cleachdadh iad ri modhan làimhseachaidh is stealladh a chaidh a chleachdadh rè deuchainnean giùlain.
Dearbhadh suidheachadh Cannula.
Chaidh suidheachadh nan canulas a sgrùdadh le bhith a’ cleachdadh TH-immunostaining gus dearbhadh gun robh an VTA air a thargaideadh gu ceart. Cha deach ach beathaichean leis na suidheachaidhean ceart a ghabhail a-steach anns na mion-sgrùdaidhean (meudan buidhne deireannach: saline eòlach n = 8; naloxone eòlach n = 6). Chaidh trì beathaichean a bharrachd a fhuair stealladh naloxone intra-VTA taobh a-muigh an VTA a chur còmhla ann am buidheann stealladh “a chaidh a chall”. Chaidh a’ bhuidheann a chaidh a chall a sgrùdadh air leth gus a bhith nan smachdan anatomical agus chaidh deuchainn Mann-Whitney U a chleachdadh gus coimeas a dhèanamh eadar giùlan air latha deuchainn mu dheireadh le fireannaich eòlach air an làimhseachadh le naloxone agus saline.
Beachd a ’toirt a-steach abairt-pERK co-cheangailte ri meatadh
Dealbhadh dearbhach.
Chaidh a shealltainn gu bheil nochdadh don chèidse anns an d’ fhuair fireannaich eòlas suirghe ag adhbhrachadh gnìomhachadh MOR anns an VTA agus gnìomhachd neoni ann an VTA agus NAc ( Balfour et al., 2004 ). Mar sin, tha an àrainneachd suirghe na chomharra fo chumhachan a tha a’ ro-innse duais feise. Rinn an sgrùdadh làithreach deuchainn a bheil feum air gnìomhachadh MOR rè eòlas feise airson gnìomhachadh neoni air a bhrosnachadh le comharran fo chumhachan às deidh sin. Chaidh Naloxone no saline a thoirt seachad gu siostamach (ip) 30 mionaid mus deach a chur anns an raon suirghe agus boireannach gabhaltach a thoirt a-steach airson suirghe (eòlach), no mus deach an làimhseachadh smachd a dhèanamh a bha a’ toirt a-steach a bhith air a chur anns a’ chèidse làimhseachaidh gun a bhith a’ taisbeanadh a’ bhoireannaich (àrainneachd neodrach; naive). Mar sin, chaidh ceithir buidhnean deuchainneach a chruthachadh: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal, agus Exp NLX. Seachdain às deidh an t-seisean suirghe mu dheireadh, chaidh leth de na beathaichean anns gach buidheann a nochdadh don chèidse suirghe (fireannaich Exp: comharran fo chumhachan co-cheangailte ri gnè) no don chèidse làimhseachaidh (fireannaich naive: comharran neo-shoilleir/neodrach), ach cha deach an leth eile a nochdadh do chomharran sam bith agus an àite sin dh’fhuirich iad anns na cèidsichean dachaigh (gus abairt pERK bunaiteach a dhearbhadh). Chruthaich am pàtran deuchainneach seo 8 buidhnean: Naive Sal-No Cue, Naive Sal+Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX+Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal+Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX+Cue ( n = 4 gach fear ach a-mhàin Naive NLX-No Cue, n = 3). Chaidh na beathaichean a phasgadh a-steach 10–15 mionaidean an dèidh dhaibh a bhith fosgailte don chomharra. Chaidh na beathaichean smachd a thoirt a-mach às na cèidsichean dachaigh aca agus chaidh an lìonadh a-steach aig an aon àm.
Immunohistochemistry.
Rinneadh roinneadh agus imdhíon-eòlas-cheimigeachd mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. An seo, chleachd sinn antibody polyclonal coineanach an aghaidh p42 agus p44 MAP Kinases ERK1 agus ERK2 (pERK; 1:4 000; Cell Signaling Technology). Chaidh am prìomh antibody a chomharrachadh gu farsaing anns an litreachas ( Roux agus Blenis, 2004 ; Murphy agus Blenis, 2006 ; Frohmader et al., 2010b ). A bharrachd air an sin, chuir dearmad a’ phrìomh antibody casg air a h-uile imdhíon-ath-ghnìomhachd agus nochd mion-sgrùdadh Western blot air clò eanchainn radain dà chòmhlan aig na cuideaman moileciuil iomchaidh.
Mion-sgrùdadh dàta.
Chaidh ceallan pERK-immunoreactive (-IR) a chunntadh ann an grunn roinnean den eanchainn a’ cleachdadh tiùb tarraing camara lucida ceangailte ri miocroscop Leica DMRD: NAc [cridhe (C) agus slige (S); 400 × 600 μm; cortex prefrontal medial; mPFC; raon cingulate anterior (ACA); cortex prelimbic (PL); cortex infralimbic (IL); 600 × 800 μm gach fear], caudate–putamen (CP; 800 × 800 μm), agus amygdala basolateral (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour et al., 2004 ; Frohmader et al., 2010b ; Pitchers et al., 2010b ). Chaidh dà earrann a chunntadh gach roinn den eanchainn agus chaidh àireamhan nan ceallan anns na raointean àbhaisteach de na mion-sgrùdaidhean an uairsin obrachadh a-mach mar àireamhan cheallan gach mm2 . Chaidh cuibheasachd an dà chunntaidh a dhèanamh gach beathach airson cuibheasachd na buidhne obrachadh a-mach. Chaidh cuibheasachdan buidhne taobh a-staigh bhuidhnean aig an robh eòlas feise no buidhnean naive a choimeas le bhith a’ cleachdadh ANOVA dà-shligheach [factaran: làimhseachadh dhrogaichean (NLX no Sal) agus comharra (comharra no gun chomharra)] agus an uairsin coimeasan post hoc a’ cleachdadh deuchainnean suim Holm-Sidak no Mann-Whitney far an robh sin iomchaidh le ìre cudromachd de p < 0.05. Anns an t-slige NAc de bheathaichean aig an robh eòlas feise, bha gluasad làidir a dh’ionnsaigh cudromachd nam factaran agus mar sin, chaidh coimeasan paidhir a dhèanamh gus coimeas a dhèanamh eadar buidhnean saline (Sal-No Cue) agus saline cue (Sal + Cue) a-mhàin.
Dealbhan.
Chaidh dealbhan didseatach a ghlacadh le camara CCD (Macrofire, Optronics) ceangailte ri miocrosgop Leica (DM5000B) le roghainnean camara stèidhichte. Chaidh na dealbhan a thoirt a-steach do bhathar-bog Adobe Photoshop 9.0. Cha deach na dealbhan atharrachadh ann an dòigh sam bith ach a-mhàin airson atharrachadh soilleireachd agus iomsgaradh.
toraidhean
Atharrachaidhean a dh ’adhbharachadh ann an gnè feise ann an ceallan dopamine VTA
Mar thoradh air eòlas feise chaidh lùghdachadh ann am meud VTA dopamine soma (Fig. 1A – C). Eòlas gnàthach air lùghdachadh gu mòr air farsaingeachd agus cuairt-thomhais cuid de cheallan VTA TH-IR (sgìre: F(1,31) = 23.068, p <0.001; perimeter, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Bha prìomh bhuaidh chudromach ann an ùine cuideachd (sgìre: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; cuairt-thomhais, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) agus eadar-obrachadh cudromach eadar eòlas agus ùine (sgìre: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; cuairt-thomhais, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Sheall an coimeas Pairwise gu robh an àrainn agus na cuairtean de cheallan TH-IR air an lùghdachadh gu mòr 1 agus 7 d an dèidh an latha mu dheireadh de ghiùlan feise ann an ainmhidhean a dh ’eòlas feise an coimeas ri smachdan gnèitheach [Fig. 1B, sgìre: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, cuairt-ùine: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Sgaoil a ’bhuaidh a bh’ aig giùlan feise nuair a chaidh a leantainn leis an ùine de dhuais mar a thill meud soma de neurons TH-IR gu bun-loidhne 31 d às deidh an t-seisean mataidh mu dheireadh (Fig. 1B, sgìre: p = 0.798; C, cuairt-ùine: p = 0.785). Cha deach atharrachaidhean a chaidh adhbhrachadh le feise a lorg ann an cuairteachadh aig gin de na puingean-ama (Fig. 1D). Cha robh lughdachadh meud VTA dopamine soma an crochadh air seiseanan suirghe làitheil, agus le bhith a ’faighinn cothrom air suirghe ann an còig seiseanan meirge le bhith a’ dèanamh co-aonadh, dh'adhbhraich sin meud dopamine VTA lùghdaichte (Fig. 2A,B, E – H, sgìre: p = 0.004; perimedr: p <0.001). An coimeas ri sin, cha tug eòlas gnè buaidh air meud soma TH-IR anns an substantia nigra (Fig. 2C, I – J, sgìre: p = 0.13; perimedr: p = 0.16) no air atharrachadh ann am meudachd ann an neurons VTA non-TH-IR faisg air làimh (Fig. 2D, E – H, sgìre: p = 0.46; perimedr: p = 0.45).
Atharrachaidhean ann an meudachd opioid-opioid ann an meud de neurons dopamine VTA. A, Ìomhaighean riochdachail de neòinean dopamine VTA bho bheathaichean gnèitheach gnèitheach agus le eòlas a sheallas an lùghdachadh ann an meud rudeigin 7 d às deidh an seisean maidseadh mu dheireadh. Bàr scèile, 5 μm. Dàta àireamhail a tha a ’sealltainn gun do dh'adhbhraich eòlas gnèitheach (Exp, barran dubha) lùghdachadh mòr san sgìre (B; ann an μm2) agus cuairt-thomhais (C; ann an μm) de cheal dopamine VTA, 1 d (Naive, Exp; n = 6) agus 7 d (Naive, n = 5; Exp, n = 6), ach chan eil 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) an dèidh matadh deireannach, an coimeas ri smachdan na feise gnèitheach (naive, bàraichean geal). Chaidh an sgìre a lùghdachadh gu 84% ann am fireannaich eòlach ann an coimeas ri smachdan naive aig 1 no 7 d. Chaidh crìochan a lùghdachadh gu 91.6 agus 90% ann am buidhnean fiosraichte an coimeas ri smachd aig 1 agus 7 d resp. Cha robh buaidh sam bith air cuairteachd (D). An plasticity cealla dopamine seo anns an àite (E) agus cuairt-thomhais (F) a chuir casg air naloxone (NLX, n = 8), ach chan eil salann (Sal, n = 7) leigheas nuair a tha iad a ’seasamh aig an aon àm, 7 d às deidh an seisean suathadh mu dheireadh an coimeas ri smachdan gnè-feise (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan gnè-feise na h-aon latha (B, Cno) an coimeas ri smachdan gnèitheach le feòil shaillte agus fireannach a tha a ’làimhseachadh gu feise air naloxone (E, F).
Cha do thuit eòlas gnèitheach air meud cuid de rudan ann am subsia nurra dopamine no neurons nondopamine VTA. Raon VTA TH-IR neuron soma (A; ann an μm2) agus cuairt-thomhais (B; ann an μm) ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlasach (dubh) a fhuair eòlas tro bhith a ’seasamh dà uair san t-seachdain seach ann an làithean an dèidh a chèile. Sgìre subsantia nigra TH-IR soma (Cagus) sgìre VTA non-TH-IR soma (Dc) ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlasach (dubh). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan gnè-feise. Dealbhan riochdachaidh a ’sealltainn Nurons (donn) N-IR (donn) ann an VTA de nòta feise (E), agus eòlach (F) fireann. G, H, Ìomhaigh mheudachaidh nas àirde den neuron a tha air a chomharrachadh leis an t-saighead E agus F fa leth. Tha neurons air an rùsgadh Nissl air an sealltainn ann an gorm anns na h-ìomhaighean seo. Ìomhaighean riochdachail a ’sealltainn neurons TH-IR ann an SN de nàdur gnèitheach (I) agus eòlach (J) fireann. Barraichean scèile: E-J, 20 μm.
Tha lùghdachadh gnè de dh ’eòlas air meud rudeigin a’ toirt buaidh air meur-dopamine VTA an urra ri gnìomhachadh gabhaltachd opioid
Chaidh an lùghdachadh de meud dopamine VTA ann an rudeigin soma a dh ’adhbharaicheas gnàth-eòlas gnèithe a bhacadh le naloxone an dìonadair neo-fhaicsinneach MOR, a bha ga rianachadh ro gach seisean measgachaidh. Bha buaidh chudromach aig làimhseachadh naloxone mus do thòisich seiseanan suidseadh air sgìre (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) agus air gluasad gu buaidh mhòr air cuairtF(1,22) = 2.892, p = 0.052). Chaidh eadar-obrachadh cudromach eadar eòlas agus leigheas naloxone a lorg ann an àite (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) agus cuairt-thomhas (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Sheall coimeasan Pairwise gu robh an ìre feise ann an ainmhidhean a chaidh an làimhseachadh airson salann a ’lùghdachadh gu mòr ann an raon agus perimedr neòinean dopamine VTA 7 d às dèidh an seisean measgachaidh mu dheireadh an coimeas ri an fheadhainn fhireann a tha a’ làimhseachadh salann (Fig. 1E, sgìre: p = 0.018; F, cuairt-ùine: p = 0.007). An coimeas ri sin, cha robh beathaichean le naoidhean a tha a ’làimhseachadh le feise diofraichte bho bheathaichean fireann le naloxone (Fig. 1E, sgìre: p = 0.483; F, cuairt-ùine: p = 0.330). A bharrachd, chaidh lùghdachadh mòr a dhèanamh air cuid de na beathaichean saillte eòlasach an taca ri beathaichean naloxone le eòlas (Fig. 1E, sgìre: p = 0.002; F, cuairt-ùine: p = 0.002). Bha a ’bhuaidh seo de naloxone sònraichte airson eòlas gnèitheasach, seach nach tug leigheas naloxone buaidh air ceallan TH-IR taobh a-staigh meud ann an fheadhainn fhireann a bha a’ làimhseachadh nialxone bho nàdur na smachdan saillte (Fig. 1E,F). A bharrachd, cha robh a ’bhuaidh seo de naloxone air lùghdachadh meud rudeigin a dh’ adhbharachadh air sgàth droch bhuaidh aig naloxone air giùlan feise, oir cha robh eadar-giùlain eadar-dhealaichte eadar fireannaich naloxone-agus saline-saillte, ach a-mhàin airson ùine nas fhaide gus tòiseachadh a ’leantainn às dèidh ejaculation (eathar an dèidh ejaculation) ann am fireannaich a tha air an làimhseachadh le naloxone tron chiad agus an còigeamh seisean seata (p = 0.03 agus p = 0.004, fa leth). Bha an fheadhainn fhireann a tha a ’làimhseachadh salann agus naloxone an-sàs ann an sùghadh a-mach anns gach aon de na còig seiseanan suirghe.
Duilgheadas mu dhuais duais co-cheangailte ri eòlas feise
Tha buaidhean eòlas feise air meud soma dopamine VTA le gnìomh EOP anns an VTA coltach ris an fheadhainn a chaidh aithris airson opiates exogenous ( Sklair-Tavron et al., 1996 ; Russo et al., 2007 ). Mar sin, chaidh a dhearbhadh a bheil plasticity cealla dopamine VTA air adhbhrachadh le duais nàdarra a’ toirt buaidh air duais airson an opiate morphine. Gu dearbh, dh’ adhbhraich eòlas feise fulangas duaise morphine, coltach ri buaidhean opiates cronach ( Russo et al., 2007 ). Dh’ fhàillig fireannaich aig an robh eòlas feise CPP a leasachadh airson dòs 0.5 mg / kg morphine; ach, chruthaich fireannaich gun eòlas feise CPP airson an dòs seo, mar a chithear le bhith a’ caitheamh barrachd ùine anns an t-seòmar paidhir morphine an taca ris an t-seòmar paidhir saline rè na deuchainn às dèidh ( Figear 3 ; p = 0.039). Chuir buidhnean nach robh eòlach air gnè seachad tòrr a bharrachd ùine anns an t-seòmar le paidhir morphine an taca ris an t-seòmar le paidhir saline le dòsan nas àirde de morphine: 5.0 mg/kg ( Figear 3 ; Naïve: p = 0.029; Exp: p = 0.012) agus 10.0 mg/kg ( Figear 3 ; Naïve: p < 0.001; Exp: p = 0.002).
Buaidhean eòlas gnèitheasach air duais morphine. Amannan a chaidh a chaitheamh ann an seòmraichean le saline (Sal) no le paidhir morphine (Mor; 0.5, 5 no 10 mg/kg de chuideam bodhaig) rè na deuchainn iar-làimh ann an fireannaich nach robh eòlach air gnè (Naive, n = 10–13) no a bha eòlach air gnè (Exp, n = 9–13). Dàta air a thaisbeanadh mar chuibheasachd ± SEM; * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ri seòmar le paidhir Sal taobh a-staigh nan aon bheathaichean. NS, Gun a bhith cudromach.
Tha cuideachadh le bhith a ’faighinn cothrom air giùlan bratach an crochadh air gnìomhachd gabhaltachd opioid
Tha na co-dhùnaidhean gu ruige seo a ’sealltainn gu bheil EOP ag obair anns an VTA tro 5 seiseanan suathadh làitheil ag adhbhrachadh plasticity an neurons dopamine VTA a tha coltach ri buaidhean mairbh cronach no fèin-rianachd heroin (Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Bha sinn a ’smaoineachadh gun robh lughdachadh VTA dopamine gu ìre cudromach airson ionnsachadh a dhuaiseachadh agus gu sònraichte airson cuideachadh gnàthach le giùlan feise a rèir brosnachaidh agus coileanadh. Chaidh an beachd-bharail seo a dhearbhadh le bhith a ’blocadh MOR le bhith a’ cleachdadh naloxone nuair a bha e a ’ceangal ri chèile agus a’ sgrùdadh na buaidhean air cuideachadh le bhith a ’faighinn grèim air giùlan feise tro bhith a’ tachairt thairis air còig seiseanan seata làitheil. Tha dàta air a thoirt a-steach Figear 4 airson na ciad agus an còigeamh seisean measgaichte a-mhàin, oir is iad sin an dàta as fheàrr a tha a ’sealltainn cleachdadh èigneachaidh le bhith a’ giùlain. A bharrachd, thèid deuchainn a dhèanamh air buaidhean fad-ùine co-cheangailte ri leigheas naloxone rè nan seiseanan suirghe air cumail suas cothrom cleachdaidh le bhith a ’faighinn aire bho bhith a’ làimhseachadh deuchainn, nuair a bhios deuchainn ann mu dheireadh thall 1 seachdain nas fhaide air adhart. Figear 4A a ’sealltainn an dealbhadh deuchainn. Bha prìomh bhuaidh chudromach aig seisean suirghe air a h-uile paramadair de ghiùlan feise (druim an fhuaim: F(2,55) = 11.286, p <0.001; latency intromission: F(2,55) = 8.767, p <0.001; latency ejaculation: F(2,55) = 10.368, p <0.001) agus làimhseachadh naloxone air latencies gu mount (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) agus intromission (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Sheall coimeasan Pairwise gun tug leigheas naloxone buaidh air dol-a-mach gnèithe aig a ’chiad seisean measgachaidh oir bha gluasadan fada nas fhaide aig beathaichean naloxone airson a’ chiad shreath (p = 0.002) agus intromission (p = 0.002) an coimeas ri smachdan saillte air a ’chiad latha de choimeasadh. Chaidh buaidh seo naloxone air giùlan gnè a dhùsgadh le eòlas gnèitheasach agus cha robhar ga choimhead ri linn gin de na seiseanan mathaidh a leanas (Clàr 1). A bharrachd air an sin, cha do chuir rianachd naloxone ro gach aon de na còig seiseanan brathaidh bacadh air ciad-cheangal giùlan feise le eòlas feise. A ’leantainn le buaidh daingneachaidh eòlas feise, bha fireannach a bha a’ làimhseachadh salann a ’taisbeanadh lùghdachaidhean nach bu bheag a bhith a’ fàs (Fig. 4B; p = 0.032) cur a-steach (Fig. 4C; p = 0.033) agus ejaculation (Fig. 4D; p <0.001) rè a ’chòigeamh seisean suirghe an coimeas ris a’ chiad seisean suirghe, a chomharraich comas air giùlan gnèitheasach. San aon dòigh, bha fireannaich a bha air an làimhseachadh le naloxone a ’nochdadh latencies gu math nas giorra airson a dhol suas (Fig. 4B; p <0.001), intromission (Fig. 4C; p <0.001), agus ejaculation (Fig. 4D; p = 0.017) air a ’chòigeamh coimeas ris a’ chiad latha. A bharrachd, cha robh an fheadhainn fhireann a bha a ’làimhseachadh naloxone eadar-dhealaichte bho smachdan salann ann an gin de na h-ath-sgrùdaidhean anns a’ chòigeamh seisean seata.
Tha pàirt chudromach aig opioids endogenous ann a bhith a’ comasachadh giùlan feise air adhbhrachadh le eòlas. A , Dealbhadh deuchainneach. B - D , Paramadairean giùlain feise airson fireannaich air an làimhseachadh le saline (Sal, bàraichean geala, n = 11) no naloxone (NLX; bàraichean dubha, n = 12) le rianachd siostamach. Is e an dàta a chithear latency gu sreap ( B ; diogan), intromission ( C ; diogan), agus ejaculation ( D ; diogan) air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a chèile de suirghe. A bharrachd air an sin, tha dàta air a shealltainn airson an deuchainn suirghe mu dheireadh, 7 latha às deidh a’ chòigeamh seisean suirghe. Tha dàta air a thaisbeanadh mar chuibheasach ± SEM; tha + a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar làithean 1 agus 5 taobh a-staigh làimhseachadh; tha * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar latha deuchainn agus latha 5 taobh a-staigh làimhseachadh; tha # a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar buidhnean naloxone agus saline taobh a-staigh latha.
Rianachd Naloxone mus eil iad a ’ceangal ri àireamhan nas anmoiche airson a bhith a’ seasamh agus a ’cur ma sgaoil air a’ chiad latha de sheachnadh
Ann an coimeas ri sin, chuir leigheas naloxone ann an seisean eòlas gnàthach bacadh air cumail suas dòigh-giùlain èasgaidh air a dhèanamh le eòlas air an latha deuchainn deuchainn deireannach. Chaidh an latha deuchainn a dhèanamh 7 d às deidh an seisean suathadh mu dheireadh às aonais stealladh naloxone. Bha an fheadhainn fhireann air an làimhseachadh le salann a ’taisbeanadh an èasachadh a dh’ fhaodadh a bhith an sàs ann an giùlan feise. Gu sònraichte, cha robh eadar-dhealachaidhean idir airson a bhith a ’suidhe, eadar-ghearradh, agus ejaculation eadar-dhealaichte eadar a’ chòigeamh seisean measgachaidh agus an latha deuchainn dheireannach (Fig. 4B – D). Ach, bha na fireannaich a bha a ’làimhseachadh naloxone a’ sealltainn gun robh àrdachadh mòr ann an in-imrichean gu bhith (Fig. 4B; p = 0.033), intromission (Fig. 4C; p = 0.036) agus ejaculation (Fig. 4D; p = 0.049) air latha na deuchainn ann an coimeas ris a ’chòigeamh seisean measgachaidh. Cuideachd, air latha na deuchainn bha e coltach gun robh beathaichean naloxone gu math nas slaodaiche na na fireannaich a tha a ’làimhseachadh salann mar a chithear bho chionn ghoirid gu bhith a’ nochdadh (Fig. 4B; p = 0.017) agus intromission (Fig. 4C; p = 0.043). Mar sin, chuir leigheas naloxone bacadh air cumail suas, ach chan ann air a ’chiad leasachadh, de chuideachadh cleachdaidh le gnìomhachd feise. Tha na toraidhean seo a ’sealltainn gu bheil pàirt deatamach dha plaisteachas dopamine VTA a dh’ obraich le EOP air cur an cèill fad-ùine air ath-dhaingneachadh giùlan duais nàdarra.
Chaidh grunn dheuchainnean smachd a bharrachd a dhèanamh gus faighinn a-mach gun do thachair buaidh stad-ghabhaltachd opioid air call ath-neartachadh san fhad-ùine air giùlan feise neo-eisimeileach bho dìth rianachd naloxone air an latha deuchainn deuchainn deireannachFig. 5A,B), gun robh iad gu sònraichte a thaobh call cumail suas fad-ùine, ach cha robh geàrr-ùine ann an cuideachadh le bhith a ’ceangal le chèile (Fig. 5E,F), nach robh iad air an adhbharachadh le bhith a ’toirt a-steach gach latha gu naloxone leotha fhèin (Fig. 5C,D), agus cha robh iad air an adhbhrachadh le call duais gnèitheach ann am fireannaich a bha a ’làimhseachadh naloxone (Fig. 5G,H). An toiseach, a bhith a ’sealltainn nach robh giùlan gnàthach atharraichte air an deuchainn deuchainn mu dheireadh air sgàth dìth naloxone, chaidh naloxone no salann a thoirt seachad air an latha deuchainn deuchainn mu dheireadh dha beathaichean a fhuair matadh còmhla ri naloxone fhad's a fhuair iad eòlas feise (Fig. 5A). Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air cùisean-à-beul gu bhith a ’cur suas (Fig. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) agus intromission (Clàr 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Cha robh buaidh mhòr sam bith aig latha suirghe air latency gu ejaculation (Clàr 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, cha robh leigheas naloxone aig àm suirghe a ’toirt buaidh air cuideachadh giùlan feise sna còig seiseanan eòlas gnàthach. Tha an dà bhuidheann (buidhnean a tha a ’làimhseachadh salann agus naloxone mar a chaidh a shuidheachadh le leigheas a fhuaireadh aig àm an deuchainn mathaidh mu dheireadh; a fhuair naloxone nuair a bha iad a’ seasamh) a ’nochdadh giùlan gnàthaichte furasta air an latha 5 an coimeas ris an latha 1 agus a’ nochdadh gu bheil na h-ùineachan gu math nas giorra sa chiad àite (Fig. 5B; salann: p = 0.033; naloxone: p = 0.014) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.034; naloxone: p = 0.026). Cha b ’ann na beathaichean a fhuair an dara cuid naloxone no salann air latha na deuchainn mu dheireadh cuairtean fada na bu mhotha.Fig. 5B; salann: p = 0.018; naloxone: p = 0.029) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.019; naloxone: p = 0.020) an coimeas ris a ’chòigeamh latha de eòlas suirghe. Mar sin, cha robh buaidh aig rianachd naloxone no salann air latha an deuchainn dìreach mus do ghabh iad ri suathadh buaidh buaidh naloxone aig seiseanan eòlas gnàthach agus bha cuideachadh le bhith a ’dèiligeadh ri gluasad gnàthach co-ionann ris an fheadhainn a chithear ann an ainmhidhean nach d’fhuair air an latha deuchainn deuchainn mu dheireadh (Fig. 4).
Tha opioids endogenous cudromach ann an cur an cèill san fhad-ùine de bhrosnachadh giùlan feise air adhbhrachadh le eòlas. A , Dealbhadh deuchainneach airson deuchainn gu buaidh làimhseachadh NLX air latha na deuchainn. B , Latency suas air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a chèile de suirghe agus latha deuchainn suirghe mu dheireadh (Deuchainn) às deidh stealladh saline (liath) no naloxone (dubh). Tha dàta a’ riochdachadh cuibheasach ± SEM. * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar latha 1 agus latha 5 taobh a-staigh làimhseachadh. # a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar latha Deuchainn agus Latha 5 taobh a-staigh làimhseachadh. C , Dealbhadh deuchainneach airson deuchainn gus buaidh ro-làimhseachaidh naloxone leis fhèin gun eòlas feise air giùlan suirghe a dhearbhadh. D , Latency suas air latha deuchainn suirghe mu dheireadh, 7 latha às deidh 5 latha de stealladh saline no naloxone às aonais suirghe. Tha dàta a’ riochdachadh cuibheasach ± SEM. E , Dealbhadh deuchainneach airson deuchainn gus deuchainn a dhèanamh an robh buaidh aig làimhseachadh naloxone air taisbeanadh geàrr-ùine de ghiùlan feise air a dhèanamh nas fhasa ann am beathaichean a bha eòlach air feise. F , Latency Mount air latha 1 agus latha 5 de chòig latha an dèidh a chèile de suirghe agus latha deuchainn suirghe mu dheireadh, 1 latha às dèidh latha 5 ann an làthair stealladh saline (liath) no naloxone (dubh). Tha dàta a’ riochdachadh cuibheasach ± SEM. * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar latha 1 agus latha 5 taobh a-staigh làimhseachadh. G , Dealbhadh deuchainneach airson deuchainn gus deuchainn a dhèanamh an do chuir làimhseachadh naloxone bacadh air buaidhean buannachdail giùlan feise. H , An ùine a chaidh a chaitheamh ann an seòmar càraideach suirghe (ann an diogan) rè na deuchainn ro-làimh (geal) agus às dèidh deuchainn (dubh) airson beathaichean a fhuair naloxone no saline mus do rinn iad suirghe. Tha dàta a’ riochdachadh cuibheasach ± SEM; * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ris an deuchainn ro-làimh.
Is e dàta a chithear an seo gu bheil buaidh air a bhith aig in-smachd agus ejaculation (diogan) bho dheuchainnean smachd a chaidh a dhèanamh gus faighinn a-mach gun do thachair buaidhean blogaichean MOR air call ath-neartachadh san fhad-ùine air giùlan feise neo-eisimeileach bho dìth rianachd naloxone air an latha deuchainn deuchainn deireannach
Gus faighinn a-mach an e làimhseachadh naloxone, nuair a chaidh a chur còmhla ri eòlas gnèitheasach agus gun a bhith air ath-aithris le naloxone per se, a dh’ adhbhraich lagachadh air giùlan gnèitheasach 7 latha às deidh an làimhseachadh mu dheireadh, fhuair beathaichean nach robh eòlach air gnèitheasach còig stealladh làitheil de naloxone no stealladh saline mus deach deuchainn suirghe mu dheireadh a dhèanamh 7 latha às deidh sin ( Figear 5 C ). Cha deach eadar-dhealachaidhean cudromach sam bith a lorg airson paramadair suirghe sam bith eadar buidhnean a fhuair ro-làimhseachadh le saline agus naloxone ( Figear 5 D ; latency mount; latency intromission: saline 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; latency ejaculation: saline 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Tha na toraidhean seo a’ nochdadh nach eil naloxone leis fhèin gu leòr airson giùlan gnèitheasach às deidh sin atharrachadh, coltach ri dìth bhuaidhean naloxone leis fhèin air plasticity neuron dopamine VTA.
Tha sinn a ’smaoineachadh gum bi làimhseachadh naloxone ann an togail eòlas gnàthach a’ toirt buaidh air an dòigh anns a bheil gnàths giùlan feise air adhbharachadh le gnè feise. Gus seo a dheuchainn a-rithist, chaidh deuchainn a dhèanamh air buaidh leigheas naloxone aig àm suirghe air giùlan gnèitheasach às dèidh sin tro dheuchainn mathaidh mu dheireadh, a chaidh a dhèanamh a-mhàin 1 d às dèidh nan mathanachadh mu dheireadh (dealbhadh deuchainneach; Fig. 5E). Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air cnoc (Fig. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) agus latencies intromission (Clàr 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Cha robh prìomh bhuaidh chudromach aig an latha air latency ejaculation (Clàr 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Dìreach mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, sheall a h-uile fireannach (a dh ’aindeoin leigheasan salann no naloxone) gu bheil iad a’ dol gu h-èifeachdach ri linn nan còig seiseanan eòlas gnàthach a sheall na h-iondachaidhean gu math nas giorra gu bhith (Fig. 5F; salann: p = 0.002; naloxone: p = 0.018) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.006; naloxone: p = 0.009) air an latha 5 an coimeas ris an latha 1. Mar an ceudna, chaidh giùlan feise a chaidh a dhèanamh a shealltainn air latha na deuchainn an coimeas ris an latha 1 air a chomharrachadh le sgeadachaidhean gu math nas giorra gu bhith a ’nochdadh (Fig. 5F; salann: p = 0.001; naloxone: p = 0.020) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.004; naloxone: p = 0.009). Nas cudromaiche, cha robh làimhseachadh naloxone aig àm suirghe a ’toirt buaidh mhòr air cuideachadh gnàthach gnè le bhith a’ giùlain a-mach nuair a chaidh deuchainn a dhèanamh air 1 d an dèidh gnàth-eòlas, neo-eisimeileach bho leigheas naloxone air an latha deuchainn deuchainn seo.
Mu dheireadh, rinn sinn deuchainn air a’ chomas gum faodadh buaidhean maothachaidh naloxone air an dòigh san tèid giùlan feise a chur an cèill san fhad-ùine mar thoradh air buaidh bacaidh naloxone air feartan duaiseach giùlan feise. Ach, cha do dh’atharraich naloxone a chaidh a thoirt seachad dìreach ron suirghe cruthachadh CPP airson suirghe ( Figear 5 G ), a’ moladh nach do dh’atharraich làimhseachadh naloxone duais feise. Chruthaich buidhnean le chèile air an làimhseachadh le saline agus naloxone CPP cudromach airson giùlan feise mar a chithear leis an ùine a chaidh a chaitheamh ann an seòmar paidhir ghnèitheasach ( Figear 5 H ; saline: p = 0.038; naloxone: p = 0.002) rè na deuchainn às dèidh sin an taca ris a’ ro-dheuchainn. Mar sin, chan eil naloxone a’ toirt a bhuaidh àicheil air cumail suas giùlan feise le bhith a’ cur bacadh air an duais co-cheangailte ri giùlan feise.
Tha cuideachadh le giùlan feise an crochadh air gnìomh EOP anns an VTA
Dearbhadh gu bheil EOP ag obair gu sònraichte anns an VTA gus cuideachadh le giùlan gnèitheil san fhad-ùine a bhrosnachadh, an dealbhadh deuchainn a tha air a mhìneachadh ann an Figear 3A chaidh a dhèanamh a-rithist le in-laigsean naloxone taobh a-staigh VTA seach in-steallaidhean cunbhalach. Bha na toraidhean co-ionann ris an rianachd eagarach a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air gach ìre de ghiùlan feise (Fig. 6A, a ’seasamh mun cuairt: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, latency latency: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, ejaculation latency: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) agus làimhseachadh naloxone taobh a-staigh VTA air cùisean èiginn gu bhith a ’suidhe (F(1,33) = 7.345, p = 0.011) agus intromission (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Cha do chuir naloxone taobh a-staigh VTA bacadh air cuideachadh furasta a dhèanamh le giùlan feise tro na 5 d air a bhith a ’maidseadh, oir sheall fireannaich a bha air an làimhseachadh le naloxone lughdachadh ann an gluasad gu bhith (Fig. 6A; p = 0.001), intromission (Fig. 6B; p <0.001), agus ejaculation (Fig. 6C; p = 0.001) air an latha 5 an coimeas ris an latha 1. Cha robh an fheadhainn fhireann a tha air an làimhseachadh le naloxone diofraichte bho fhir air an làimhseachadh le salann air a ’chòigeamh là de bhith a’ tighinn còmhla ri gin de na h-athraichean. Dh'adhbhraich làimhseachadh taobh a-staigh VTA naloxone, mar rianachd siostaigeach, meudachadh mòr (Fig. 6A; p <0.001) agus latencies intromission (Fig. 6B; p <0.001) air a ’chiad latha suirghe an coimeas ri fireannaich a bha air an làimhseachadh le saline, nach deach fhaicinn ann an seiseanan mataidh às deidh sin (nuair nach robh eadar-dhealachadh eadar fireannaich le làimhseachadh naloxone agus saline). B ’e aon bheachd ris nach robh dùil, anns an deuchainn seo, nach do sheall fireannaich a bha air an làimhseachadh le saline comasachadh staitistigeil a thaobh comasachadh latencies mount no intromission (mar a chaidh a shealltainn anns a h-uile deuchainn a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd), agus cha deach ach latency ejaculation a ghiorrachadh air a’ chòigeamh latha an coimeas ris a ’chiad latha (saline: p = 0.001).
Bidh opioids endogenous anns an VTA a’ meadhanachadh comasachadh giùlan feise air adhbhrachadh le eòlas agus a chumail suas san fhad-ùine. Paramadairean giùlain feise airson fireannaich air an làimhseachadh le saline (Sal, bàraichean geala, n = 8) no NLX (bàraichean dubha, n = 6) le rianachd intra-VTA. Is e an dàta a chithear latency gu sreap ( A ), intromission ( B ), agus ejaculation ( C ) air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a chèile de suirghe. A bharrachd air an sin, chithear dàta airson an latha deuchainn suirghe mu dheireadh, 7 latha às deidh latha 5 às aonais stealladh saline no naloxone. Tha an dàta a’ riochdachadh cuibheasachd ± SEM; tha + a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar làithean 1 agus 5 taobh a-staigh làimhseachaidh; * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar latha deuchainn agus latha 5 taobh a-staigh làimhseachaidh; # a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr eadar buidhnean naloxone agus Sal taobh a-staigh latha. Dealbhan sgemataig de earrannan VTA coronal (H, −4.60; I, −5.00; J, −5.25 bhon bregma) a’ comharrachadh làraichean stealladh intra-VTA airson a h-uile beathach ann an Deuchainn 5 (saline; geal; naloxone, dubh; Missed, liath), a’ cleachdadh dealbhan teamplaid bho Swanson Brain Maps ( Swanson, 2004 ). Bha na canulas dà-thaobhach, ach tha làraichean stealladh air an riochdachadh gu aon-thaobhach airson goireasachd taisbeanaidh. fr, Fasciculus retroflexus; ML, Medial lemniscus; SN, substantia nigra.
Chuir leigheas taobh-a-steach naxolone taobh a-staigh VTA bacadh air cumail suas giùlan feise furasta a chaidh a choimhead ann am fireannaich a bha a ’faighinn eòlas gnàthach, coltach ri buaidhean naloxone siostamach. Gu sònraichte, air an latha deuchainn mu dheireadh bha fireannich nas fhaide aig fir a bha a ’làimhseachadh naloxone a bhith a’ suidhe (Fig. 6A; p = 0.011), intromission (Fig. 6B; p = 0.010), agus ejaculation (Fig. 6C; p = 0.015) an coimeas ris a ’chòigeamh seisean seata agus an coimeas ris an fheadhainn fhireann air an latha deuchainn dheireannach (Fig. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). An coimeas ri sin, cha robh beathaichean air an làimhseachadh le salann eadar-dhealaichte bho àm gu àm gu bhith a ’suidhe agus gluasad eadar an latha deuchainn deireannach agus latha 5 a thaobh gintinn. Bha na buaidhean seo gu sònraichte airson lìbhrigeadh naloxone don VTA, mar fhireannach le làraich canhaidh faisg air làimh ach gun a bhith ag amas air an VTA (Fig. 6D; n = 3) a ’nochdadh cuideachadh fad-ùine air giùlan feise coltach ri smachdan air an làimhseachadh le salann (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 agus gu math eadar-dhealaichte an coimeas ri beathaichean naloxone taobh a-staigh VTA air an latha deuchainn deuchainn deireannach (ML, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).
Tha feum air gnìomh EOP airson gnìomhachadh neral co-cheangailte ri cuislean a tha co-cheangailte ri gnè
Stèidhichte air na toraidhean gu ruige seo, bha sinn a ’tuigsinn gun robh gnìomhachadh EOP ann am VTA aig àm suirghe agus lùghdachadh meud VTA às dèidh sin riatanach airson a bhith a’ comharrachadh sàth brosnachaidh airson brosnachadh luachaidh le taic agus mar sin, a ’cumail suas le giùlan feise. Gus deuchainn a dhèanamh air an beachd-bharail seo chaidh sgrùdadh a dhèanamh air buaidhean casg air luchd-gabhail opioid nuair a bhios iad a ’faighinn cothrom air gnìomhachd neraltach le bhith ag adhbharachadh bho bhith a’ faighinn fiosrachadh mu dhuilgheadasan co-theacsail le bhith ag adhbharachadh duais gnèitheach (leigheasan co-cheangailte ri gnè). Bha beathaichean gnèitheach cuideachd fosgailte ri leigheasan àrainneachdail, ach cha robh iad sin co-cheangailte ri eòlas suirghe roimhe, agus mar sin bha iad neo-phàirteach. Mu dheireadh, chaidh ìrean pERK bun-loidhne a shònrachadh ann am buidhnean smachd gnèitheach agus naive a dh'fhuirich ann an cèidsichean na dachaigh agus nach robh a ’faighinn cuisean sam bith (-CoN Cue). A ’daingneachadh agus a’ leudachadh nan toraidhean a fhuaireadh roimhe (Balfour et al., 2004), faicsinneachd dha cuirp co-theacsach co-cheangailte ri duais gnè roimhe a chuir mòran a-steach ann an abairt pERK ann am fireannaich le eòlas gnèitheach ann an NAc (Fig. 7) agus mPFC (Fig. 8A – C), ach cha robh e ag adhbharachadh gnìomhachadh neuronal ann am BLA (Fig. 8Dno) CPu (chan eil dàta air a shealltainn). Bha prìomh bhuaidh bho bhith a ’toirt cue gu ìre ann am bunait NAc (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), agus PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), agus làimhseachadh naloxone ann am bunait NAc (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), agus PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Bha eadar-obrachadh mòr ann am bun-ìre NAc (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014), agus IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). An toiseach, bha àrdachadh susbainteach bho cheangal Cue a ’ceangal ri suathadh a’ fàs nas motha ann an ainmhidhean a fhuair làimhseachadh co-cheangailte ri salann (Exp Sal + Cue) an coimeas ri smachdan nach robh fosgailte do chuesan agus a thugadh bhon chèidse dachaigh (Exp Sal-No Cue) ann am bunait NAcFig. 7A; p <0.001), agus fo-roinnean mPFC ACA (Fig. 8A; p = 0.001), PL (Fig. 8B; p = 0.003), agus IL (Fig. 8C; p = 0.029). An coimeas ri sin, ann an ainmhidhean gnèitheach le feòil shaillte, cha robh mothachadh dha na leigheasan co-theacsail, nach robh co-cheangailte ri duais feise, a ’toirt air falbh PK ann an ceàrnaidhean sam bith den eanchainn (Naive Sal + Cue ann an coimeas ri naive Sal-No Cue; Figsichean. 7, 8), a ’taisbeanadh gu bheil inntrigeadh air pERK gu sònraichte airson a bhith a’ nochdadh nan leigheasan co-cheangailte ri eòlas gnèitheach. A bharrachd, cha do dh'atharraich gnàth-eòlas gnèitheas an abairt bhun-ìre pERK ann an gin de na roinnean na h-eanchainn, oir cha robh eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean a chaidh a thoirt bho chàraidean na dachaigh, co-dhiù feòlmhor no eòlasach, agus làimhseachadh le salann no naloxone.
Tha feum air gnìomh opioid endogenous airson gnìomhachadh neoni ann an NAc air a bhrosnachadh le comharran cumhaichte co-cheangailte ri gnè. Àireamhan de cheallan pERK-IR gach mm2 ann an cridhe agus slige niùclas accumbens ( A ) ann am beathaichean gun eòlas feise (geal) agus eòlach (Exp; dubh) a chaidh a làimhseachadh ro-làimh le NLX siostamach no saline (Sal) rè seiseanan suirghe (fireannaich Exp) no seiseanan làimhseachaidh (fireannaich Naive). Chaidh buidhnean an dàrna cuid a nochdadh do chomharran co-theacsa (Cue), a bha nan comharran co-cheangailte ri suirghe ann am fireannaich Exp agus comharran neodrach ann am beathaichean Naive, no air an toirt bho na cèidsichean dachaigh (Gun Chomharra; air a chomharrachadh le dìth leubail Cue). Tha dàta air a thaisbeanadh mar chuibheasachd ± SEM; * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ri smachdan ro-làimhseachaidh saline gun chomharra fosgailte (Naive Sal-No Cue agus Exp Sal-No Cue); # a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ri buidheann Exp fosgailte do Cue air a làimhseachadh le Sal (Exp Sal+Cue). Dealbhan riochdachail de cheallan pERK-IR gach mm2 ann an cridhe NAc fhireannaich aig a bheil eòlas feise le Sal ( C , D ) no NLX ( E , F ) a chaidh an dàrna cuid a thoirt bhon chèidse dachaigh (Gun chomharra, C, E), no a chaidh fhoillseachadh do na comharran co-theacsail co-cheangailte ri suirghe (Cue; D , F ). N = 4 gach buidheann ach a-mhàin Naive NLX (Gun chomharra), n = 3. ac, commissure anterior. Bàr sgèile, 100 μm.
Buaidhean naloxone air abairt pERK air adhbhrachadh le comharran suirghe ann an roinnean targaid VTA eile. Àireamhan cheallan pERK-IR gach mm2 ann am beathaichean nach robh eòlach air gnè (geal) agus eòlach (Exp; dubh) a chaidh a làimhseachadh ro-làimh le NLX siostamach no saline (Sal) rè seiseanan suirghe agus a chaidh fhoillseachadh do na comharran co-theacsa (Cue) no cèidse dachaigh (gun chomharran) anns an ACA ( A ), PL ( B ), IL ( C ), agus BLA ( D ). Tha an dàta a’ riochdachadh a’ chuibheas ± SEM; tha * a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ri smachdan a chaidh a làimhseachadh ro-làimh le saline gun chomharran fosgailte (Naive Sal-No Cue agus Exp Sal-No Cue); tha # a’ comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an taca ri smachdan a chaidh a làimhseachadh le Sal agus a chaidh a nochdadh gu gnè (Naive Sal+Cue).
Mar thaic don bharail againn, lughdaich làimhseachadh naloxone rè eòlas gnèitheasach gu mòr brosnachadh pERK leis na comharran cumhaichte co-cheangailte ri gnè. Cha robh eadar-dhealachadh sam bith ann an abairt pERK anns na fireannaich eòlach seo a chaidh a làimhseachadh le naloxone agus a bha fosgailte do chomharran (Exp NLX+Cue) bho abairt pERK bunaiteach ann an gin de na buidhnean smachd neo-àbhaisteach no eòlach air an toirt bho na cèidsichean dachaigh (Naive Sal-No Cue no Naive NLX-No Cue). A bharrachd air an sin, bha abairt pERK anns na fireannaich eòlach a chaidh a làimhseachadh le naloxone agus a bha fosgailte do chomharran (Exp NLX+Cue) gu math nas ìsle an taca ri beathaichean eòlach a chaidh a làimhseachadh le saline agus a bha fosgailte do chomharran (Exp Sal+Cue) ann an cridhe NAc ( Figear 7 A ; p = 0.002) agus fo-roinnean mPFC ( Figear 8 A , ACA: p < 0.001; B , PL: p = 0.002; C , IL: p = 0.015).
Anns an t-slige NAc, cha tug an anailis ANOVA dà-shligheach buaidhean staitistigeil cudromach bho na factaran nochdadh do chomharran agus làimhseachadh naloxone. Ach, sheall coimeas paidhir gun do bhrosnaich nochdadh do chomharran pERK anns a’ bhuidheann a fhuair làimhseachadh le saline aig an robh eòlas feise (Exp SAL+Cue) an taca ris a’ bhuidheann smachd gun nochdadh do chomharran gun Saline ( Figear 7 B ; Naive SAL-No Cue: p = 0.0163).
Deasbaireachd
Tha an sgrùdadh làithreach a’ sealltainn gun do dh’ adhbhraich EOP ag obair anns an VTA rè giùlan feise, giùlan duaise nàdarrach, lùghdachadh làidir ach sealach ann am meud soma cheallan dopamine VTA. Cha deach an lùghdachadh ann am meud soma fhaicinn ann an neurons neo-dopamine VTA, no ann an neurons dopamine anns an substantia nigra faisg air làimh, a’ moladh gun robh an t-atharrachadh seo sònraichte do cheallan dopamine VTA. Tha coltas gu bheil am plasticity dopamine VTA seo coltach ris an fhear a tha air adhbhrachadh le nochdadh opiate leantainneach ( Sklair-Tavron et al., 1996 ; Russo et al., 2007 ; Mazei-Robison et al., 2011 ) agus dh’ adhbhraich e fulangas coltach ri duais opiate exogenous (morphine). Sheall sinn gu bheil plasticity dopamine VTA deatamach airson neartachadh fad-ùine (cumail suas) ach chan ann geàrr-ùine (leasachadh), giùlan feise agus gnìomhachd neural air a bhrosnachadh le duais co-cheangailte ri duais (pERK) ann an roinnean targaid VTA: NAc agus mPFC. Tha na co-dhùnaidhean seo a’ nochdadh gu bheil pàirt aig plasticity dopamine VTA ann an abairt fad-ùine follaiseachd brosnachaidh chomharran ro-innseach duais nàdarra no cuimhne duais.
Chaidh a chlàradh gu math gum bi cleachdaidhean gnàthach a ’toirt buaidh air giùlan feise an dèidh sin, a’ toirt a-steach gluasad nas luaithe gu bhith a ’tòiseachadh air suathadh agus barrachd coileanaidh (Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Tha an cothromachadh no an daingneachadh de ghiùlan feise air a chumail suas airson co-dhiù 28 d an dèidh maidseadh (Pitchers et al., 2012). A thuilleadh air an sin, chaidh a shealltainn gun robh giùlan gnèitheasach agus sanasan gleusach ro-innseach air duais dhuais co-cheangailte ri in-imrich san VTA agus gnìomhachadh neuronal a thòiseachadh tro shiostam mesolimbic, a ’gabhail a-steach ann an VTA (dopamine agus nuropamine neurons), NAc, PFC, agus BLA (Balfour et al., 2004, 2006). Tha e fìor chudromach gu bheil niùclairean dopamine VTA stèidhichte ann a bhith ag ionnsachadh agus a ’sònrachadh stòras brosnachail brosnachaidhean co-cheangailte ri duaisean (Berridge agus Robinson, 1998; Berridge et al., 2009; Flagel et al., 2011) agus tha iad riatanach airson ro-innse duais (Schultz, 2010). Tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ leudachadh air an eòlas a th ’againn an-dràsta le bhith a’ sealltainn gu bheil neuroplasticity VTA a ’toirt seachad duais dha-rìribh riatanach dha na dreuchdan seo, agus tha e an urra ri gnìomhachadh MOR le EOP anns an VTA. Chan eil fios againn an-dràsta cò an EOP an ligand MOR a bhios ag obair sa VTA rè giùlan feise fireann. Ged a tha β ceann-droma agus enkephalin air a bhith ceangailte ri brosnachadh brosnachaidh airson luchd-neartachaidh bìdh (Hayward et al., 2002), tha seo fhathast ri stèidheachadh airson giùlan feise fireann. Tha sinn air sealltainn roimhe seo nach eil niùclairean β-endorphin air an cur an gnìomh aig àm suirghe, agus chan eil àrdachadh ann am POMC mRNA; mar sin, a ’moladh gur dòcha nach e or endorphin an EOP riatanach a tha ag obair sa VTA aig àm suirghe (Davis et al., 2007). Bha am plasticity VTA dopamine seo riatanach airson gnìomhachd niùcrach anns a ’bhuil, mPFC, NAc, agus VTA às deidh dha a bhith an làthair aig na leigheasan àrainneachdail a dh’ bhuanaicheadh na dhuais. A bharrachd, bha VTA dopamine plasticity riatanach airson a bhith a ’toirt a-steach gluasad is coileanadh barrachd air giùlan gnèitheil san ùine-fhada. An coimeas ri sin, cha robh feum air neuroplasticity VTA air adhbharachadh le eòlas gnèitheach airson freagairt gràineanach mar dhuais feise (air a dhearbhadh le CPP) agus furasdachadh geàrr-ùine de bhrosnachadh gnèitheasach (aig àm gnàth-eòlas no 1 d nas fhaide air adhart) a dh ’fhuireach, a dh’ aindeoin masgadh MOR nuair a bha iad ri chèile (Mehrara agus Baum, 1990). An àite sin, tha an dàta a ’moladh gum bi neuroplasticity VTA dopamine a’ toirt san fhad-ùine (7 d an dèidh na h-eòlas gnè mu dheireadh; Pitchers et al., 2012) a bhith a ’taisbeanadh“ miann ”de dhuais feise agus barrachd fhreagairtean brosnaichte do chupanan suathadh (Miller agus Baum, 1987; Berridge agus Robinson, 1998).
Nochd beathaichean le eòlas gnàthach tar-fhulangas airson duais morphine, coltach ri buaidhean ruith cuibhle ann an luchagan, giùlan eile a bheir duais seachad, buaidh air a bhacadh le leigheas naloxone (Lett et al., 2001, 2002agus agus iad an crochadh a bhith an crochadh air plaidigs dopamine cealla VTA (toraidhean làithreach). Coltach ri duaisean nàdarra, bidh còmhdachadh dà-chànanach air na h-opiates mar morphine no heroin ag adhbharachadh lùghdachadh gluasadach de mheud dopamine VTA (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). A bharrachd, tha sgaoileadh fosgailte le amannan tarraing a-mach goirid ag adhbhrachadh fulangas duaise, a dh ’adhbharachadh le bhith a’ dèanamh feum de dh ’nas motha de dhrogaichean gus buidhnean duais a chruthachadh (Shippenberg et al., 1987; Russo et al., 2007), agus bidh e ag adhbharachadh gum bi beathaichean fèin-rianachd a ’toirt air falbh an drogaichean (Ahmed et al., 2000; Walker et al., 2003). Mar sin, bidh EOP agus opiates ag obair air fo-fhiaclan neomrach cumanta gus gabhail ri fulangas duais ann an tarraing air ais tràth, a dh ’fhaodadh a bhith a’ nochdadh inneal dìth dachaigh dìomhair airson cur an aghaidh brosnachadh le bhith ag ath-nochdadh (Koob agus Le Moal, 2005). An coimeas ri seo, aig àm bacadh dhrogaichean de dhrogaichean fad-ùine, thèid fulangas a thilleadh gu cugallachd do dh ’stuth gèillidh don druga (Na Hearadh agus Aston-Jones, 2003; Aston-Jones and Harris, 2004; Na Hearadh agus Gewirtz, 2004). Gu h-inntinneach, chaidh faighinn a-mach gun d ’fhuaradh lorg air gnè feise le bhith a’ cumail greim air gnè feise de 7 – 28 d d ization an-thar-mhothachadh airson duais leigheas-inntinn (Pitchers et al., 2010a), a tha an urra ri abairt air deltaFosB le bhith a ’ceangal ri chèile agus gabhadan dopamine gnìomhachadh 1 anns an NAc (Pitchers et al., 2013). Air an adhbhar sin, tha fèin-fhiosrachadh air duais dhuaisean co-cheangailte ri diadhachd agus sàrachadh inntinn co-ionann aig an aon àm, ged a tha deuchainn fhathast ann air ùine nas fhaide a ’toirt buaidh air foill air duais dhuaisean-mara. Tha sinn a ’dearbhadh gum faodar na buaidhean eadar-dhealaichte sin air duais dhrogaichean a bhith air an eadar-mheadhanachadh le diofar sheòrsan de phlastaig niùclach ann an diofar roinnean den t-siostam mesolimbic: tha gnìomh VTA EOP agus plasticity dopamine a’ eadraiginn an fòirneart duais taobhach (sgrùdadh làithreach), fhad's a tha NAc deltaFosB a ’cur na h-innsidh sensitimulant (Pitchers et al., 2013). Faodaidh an dà thachartas seo cur ri àrdachadh ìre de dhrogaichean a ghabhail thairis (Ahmed agus Koob, 1998, 1999; Ahmed et al., 2000, 2002, 2003; Walker et al., 2003).
Chan eil fios fhathast dè na dòighean moileciuil leis a bheil EOP a’ toirt buaidh air neurons dopamine VTA rè giùlan duaise nàdarra. Tha slighe IRS2-Akt-mTORC2 na phrìomh eadar-mheadhanair de lùghdachadh ann am meud soma anns an VTA air adhbhrachadh le morphine a-rithist is a-rithist ( Jaworski et al., 2005 ; Russo et al., 2007 ; Mazei-Robison et al., 2011 ). Faodar atharrachaidhean ann am meud neurons dopamine anns an VTA a tha air an adhbhrachadh le rianachd morphine a-rithist is a-rithist a chasg le bhith a’ toirt a-steach factar neurotrophic a thig bhon eanchainn (BDNF; Sklair-Tavron agus Nestler, 1995 ) taobh a-staigh VTA. Bidh BDNF a’ gnìomhachadh na slighe seo tro chomharran TrkB ( Russo et al., 2007 ), kinase gabhadair le dlùth-cheangal àrd ri BDNF agus pàirt de shlighe IRS2-Akt ( Seroogy agus Gall, 1993 ; Numan agus Seroogy, 1999 ), agus air a chur an cèill air neurons dopamine agus GABA anns an VTA. Bidh lùghdachadh nan diofar phàirtean de shlighe IRS2-Akt a’ cleachdadh teicneòlas gluasaid gine vectar bhìorasach ag atharrais air buaidhean nochdadh leantainneach do dh’opaid. A bharrachd air an sin, faodar buaidhean nochdadh do dh’opaid a shàbhaladh le bhith ag ath-nuadhachadh na slighe chomharran seo ( Russo et al., 2007 ) agus bidh cus-chur-an-gnìomh pàirt de mTORC2 a’ cur casg air lùghdachadh soma dopamine VTA air adhbhrachadh le morphine ( Mazei-Robison et al., 2011 ). Mar sin, tha obair a bh’ ann roimhe a’ sgrùdadh buaidhean opaidean leantainneach air meud soma dopamine VTA a’ sealltainn gu bheil lùghdachadh slighe IRS2-Akt-mTOR air adhbhrachadh le morphine an dà chuid gu leòr agus riatanach airson a’ bhuaidh seo ( Mazei-Robison agus Nestler, 2012 ). Mar sin, tha e tàmailteach a bhith a’ beachdachadh gu bheil buaidhean eòlas feise air neuroplasticity dopamine VTA air an eadar-mheadhanachadh san aon dòigh le BDNF agus slighe IRS2-Akt-mTORC2.
Ann an co-dhùnadh, sheall an sgrùdadh làthaireach gu bheil neuroplasticity VTA air adhbharachadh le eòlas le giùlan duaisichte nàdarrach, gu h-àraid le bhith a ’leantainn air adhart le feise feise fireann. Gu sònraichte, bidh EOP ag obair anns an VTA gus meud dopamine soma a lùghdachadh, a thathar a ’gabhail a-mach gu bhith co-cheangailte ri barrachd eireachdais niùclach agus nas lugha de thoradh dopamine a dh'adhbhraicheas siostam hypodopaminergic, agus ag atharrachadh obrachadh siostam mesolimbic mar fhreagairt do chungaidhean a tha ro-innse air duais feise. A bharrachd, tha neuroplasticity VTA deatamach airson brosnachadh brosnachaidh agus duais cuimhneachaidh, ach chan ann airson buaidh ghormach giùlan feise. Mu dheireadh, tha buaidh aig neuroplasticity VTA air adhbhrachadh le giùlan duais nàdarra le ùine ghoirid de dhuais a bhith air a thoirt suas air duais duais comhla agus dh ’fhaodadh e buaidh a thoirt air so-leònteachd leasachadh tràilleachd dhrogaichean.
Footnotes
- Air fhaighinn san Fhaoilleach 12, 2014.
- An t-ath-bhreithneachadh a fhuaireadh a thàinig sa Chèitean 17, 2014.
- Gabhail ri Cèitean 20, 2014.
-
Fhuair an rannsachadh seo taic bho thabhartasan bho Institiud Rannsachadh Slàinte airson Canada gu LMC agus na Saidheansan Nàdarra agus Comhairle Rannsachaidh Innleadaireachd gu KKP
-
Bidh na h-ùghdaran a ’foillseachadh nach eil com-pàirtean ionmhasail a tha farpaiseach.
- Bu chòir litrichean a chur gu Dr Lique M. Coolen, Oilthigh Ionad Meidigeach Mississippi, Roinn Eòlas-inntinn agus Biophysics, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [post-d fo dhìon]
- Còraichean © 2014 na h-ùghdaran 0270-6474 / 14 / 348825-12 $ 15.00 / 0
iomraidhean
- ↵
- Agmo A
(1997) Giùlan feise fireann fireann. Protoc Brain Res Brain Res 1: 203-209.
- ↵
- Ahmed SH,
- Koob GF
(1998) Eadar-ghluasad bho bhith a ’gabhail a-steach gu ìre meadhanach gu cus dhrogaichean: atharrachadh ann an àite suidhichte ban-fhiadhaich. saidheans 282: 298-300.
- ↵
- Ahmed SH,
- Koob GF
(1999) Àrdachadh fad-ùine anns a ’phuing suidhichte airson fèin-rianachd cocaine an dèidh àrdachadh ann an radain. Eòlas-inntinn 146: 303-312.
- ↵
- Ahmed SH,
- Walker JR,
- Koob GF
(2000) Àrdachadh leantainneach anns an dealas airson heroin a thoirt a-steach ann an radain le eachdraidh de dhrogaichean dhrogaichean. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.
- ↵
- Ahmed SH,
- Kenny PJ,
- Koob GF,
- Markou A
(2002) Fianais neurobio-eòlasach airson allostasis hedonach co-cheangailte ri bhith ag àrdachadh cleachdadh cocain. Nat Neurosci 5: 625-626.
- ↵
- Ahmed SH,
- Lin D,
- Koob GF,
- Parsons LH
(2003) Chan eil meudachadh ann an fèin-rianachd cocain an crochadh air niùclas cocain air atharrachadh gu ìre agus a ’àrdachadh ìrean dopamine. J Neurochem 86: 102-113.
- ↵
- Aston-Jones G,
- Na Hearadh GC
(2004) Substaintí eanchainn airson barrachd dhrogaichean a lorg airson toirt a-mach. Neuropharmacology 47: 167-179.
- ↵
- Balfour ME,
- Yu L,
- Coolen LM
(2004) Bidh giùlan feise agus sanasan àrainneachd gnè-cheangailte ag obrachadh an siostam mesolimbic ann an radain fhireann. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.
- ↵
- Balfour ME,
- Brown JL,
- Yu L,
- Coolen LM
(2006) Tabhartasan ion-dhèanta bho fho-dhraighean bho cortex ro-ro-làimh meadhanach gu gnìomhachadh niùclasach às deidh giùlan feise sa radan fireann. Neuroscience 137: 1259-1276.
- ↵
- Beitner-Johnson D,
- Guitart X,
- Nestler EJ
(1992) Pròtainean neurofilament agus an siostam dopamine mesolimbic: riaghailt choitcheann tro mhoirfinn cronach agus muiceag dhiadhachd ann an sgìre vent ventolve rhes. J Neurosci 12: 2165-2176.
- ↵
- Berridge KC,
- Robinson TE
(1998) Dè an dleastanas a th ’aig dopamine ann an duais: buaidh dhiadhachdach, duais foghlaim, no saoradh brosnachaidh? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.
- ↵
- Berridge KC,
- Robinson TE,
- Aldridge JW
(2009) Sgaoileadh co-phàirtean de dhuais: “a’ còrdadh ”,“ ag iarraidh ”, agus ag ionnsachadh. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.
- ↵
- Blum K,
- Werner T,
- Càrn S,
- P Carnes,
- Bowirrat A,
- Giordano J,
- M Oscar-Berman M,
- M Gold
(2012) Gnè, drogaichean, agus roc n rolla: a ’toirt beachd air gnìomhachadh meilisimbic cumanta mar dhleastanas airson polymorphisms gine duaise. J Drugaichean Psychoactive 44: 38-55.
- ↵
- Chu NN,
- Zuo YF,
- Meng L,
- Lee DY,
- Han JS,
- Cui CL
(2007) Tha brosnachadh dealanach air an iomall a ’dol air ais an lùghdachadh meud meud cealla agus barrachd ìre BDNF anns an sgìre a tha cuimseach fionnarach ann an radain co-cheangailte ri mairtrean. Brain Res 1182: 90-98.
- ↵
- Davis BA,
- Fitzgerald ME,
- Brown JL,
- Amstalden KA,
- Coolen LM
(2007) Cur an gnìomh neurons POMC rè ionnsaigh coitcheann ach chan ann tro ghiùlan feise ann an radain fhireann. Behav Neurosci 121: 1012-1022.
- ↵
- Fiorino DF,
- Coury A,
- Phillips AG
(1997) Atharrachaidhean mòra-dathach ann an niùclas accumbens cuir a-mach dopamine aig àm buaidh Coolidge ann an radain fhireann. J Neurosci 17: 4849-4855.
- ↵
- Flagel SB,
- Clark JJ,
- Robinson TE,
- Mayo L,
- Czuj A,
- Willuhn I,
- Akers CA,
- Clinton SM,
- PE PE,
- Akil H
(2011) Ròl roghnach airson dopamine ann an ionnsachadh brosnachail. Nature 469: 53-57.
- ↵
- KS Frohmader,
- Pitchers KK,
- Balfour ME,
- Coolen LM
(2010a) A ’measgachadh measgachaidhean: ath-sgrùdadh air buaidh dhrugaichean air giùlan gnè ann am daoine agus ann am modalan bheathaichean. Horm Behav 58: 149-162.
- ↵
- KS Frohmader,
- Wiskerke J,
- Wise RA,
- Lehman MN,
- Coolen LM
(2010b) Bidh Mhammphetamine a ’toirt air fo-bheanntan de neurons a tha a’ riaghladh giùlan feise ann an radain fireann. Neuroscience 166: 771-784.
- ↵
- Harris AC
- Gewirtz JC
. Eòlas-inntinn 171: 140-147.
- ↵
- GC na Hearadh,
- Aston-Jones G
(2003) Brosnachadh agus ionnsachadh air atharrachadh às deidh tarraing air falbh bho òtrachas: fianais airson a bhith a ’faighinn a-mach mu dh’ phròiseas duais. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.
- ↵
- MD Hayward,
- Pintar JE,
- Low MJ
(2002) Easbhaidh dhuaisean taghte ann an luchagan às aonais beta-endorphin agus enkephalin. J Neurosci 22: 8251-8258.
- ↵
- Hoebel BG,
- Avena NM,
- Bocarsly ME,
- Rada P
(2009) Tràilleachd nàdarrach: modal giùlain agus cuairteachaidh stèidhichte air tràilleachd siùcair ann an radain. J Addict Med 3: 33-41.
- ↵
- Hyman SE
- Malenka RC,
- Nestler EJ
(2006) Innealan neòinidh airson tràilleachd: àite ionnsachaidh agus cuimhne co-cheangailte ri duaisean. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.
- ↵
- Ikemoto S,
- Kohl RR,
- McBride WJ
(1997) GABA (A). J Neurochem 69: 137-143.
- ↵
- Jaworski J,
- Spangler S,
- DP Seeburg,
- CC Hoogenraad,
- Sheng M
. J Neurosci 25: 11300-11312.
- ↵
- Johnson SW,
- RA a Tuath
(1992) Bidh Opioids a ’neadachadh neurons dopamine le bhith a’ dèanamh an-àirde de cheanglaichean eadar-ghlan ionadail. J Neurosci 12: 483-488.
- ↵
- Klitenick MA,
- DeWitte P,
- Kalivas PW
(1992) Riaghladh mu leigeil a-mach dopamine somatodendritic anns an sgìre reusanta fosgail le opioids agus GABA: sgrùdadh microdialysis in vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.
- ↵
- Koob GF,
- Le Moal M
(2005) Plasticity de dhuais neurocircuit duais agus “taobh dorcha” tràilleachd dhrogaichean. Nat Neurosci 8: 1442-1444.
- ↵
- Lennette DA
(1978) Meadhanach sreap nas fheàrr airson meanbh-chruth dìon dìon. Am J Clin Pathol 69: 647-648.
- ↵
- Lett BT,
- Grant VL,
- Koh MT
. Sgaoileadh 72: 355-358.
- ↵
- Lett BT,
- Grant VL,
- Koh MT
- Flynn G
. Pharocol Biochem Behav 72: 101-105.
- ↵
- Matthews RT,
- DC Gearmailteach
(1984) Fianais dealan-eòlas-eòlasach airson claonadh le raon ro-innleachdach ro-gharainneach dopronan dopamine le maorach. Neuroscience 11: 617-625.
- ↵
- Mazei-Robison MS,
- Koo JW,
- Friedman AK,
- Lansink CS,
- Robison AJ,
- Vinish M,
- Krishnan V,
- Kim S,
- Siuta MA,
- Galli A,
- Niswender KD,
- Appasani R,
- Horvath MC,
- Neve RL,
- Worley PF,
- Snyder SH,
- Hurd YL,
- Cheer JF,
- Han MH
- Russo SJ,
- et al.
(2011) Dleastanas airson comharradh mTOR agus gnìomhachd neuronal ann an atharrachaidhean air a chruthaich moirfein ann an sgìre a tha a ’dèanamh fionnarachadh ventral neurons dopamine. Neuron 72: 977-990.
- ↵
- Mazei-Robison MS,
- Nestler EJ
(2012) Plaisteachas moilecular agus ceallachail air a ghluasad bho opiate gu ceàrn ro-innleachdach fionnara agus locus coeruleus catecholamine neurons. Harb Spring Harb Perspect 2: a012070.
- ↵
- Mehrara BJ,
- Baum MJ
(1990) Tha Naloxone a ’briseadh a-steach an abairt ach chan eil e a’ faighinn fhaighinn bho radain fireann freagairt freagairt roghnach airson boireannach boireann. Eòlas-inntinn 101: 118-125.
- ↵
- Meisel RL,
- Mullins AJ
(2006) Eòlas feise ann an cnàimhean bhoireann: uidheaman ceallach agus buaidh gnìomhail. Brain Res 1126: 56-65.
- ↵
- Miller RL,
- Baum MJ
(1987) Tha Naloxone a ’bacadh casg air suathadh agus roghainn àite gu bhith na bana-bheò ann an radain fireann gu luath an dèidh sparradh. Pharocol Biochem Behav 26: 781-789.
- ↵
- Mitchell JB,
- Stiùbhart J
. Pharocol Biochem Behav 35: 643-650.
- ↵
- Murphy LO,
- Blenis J
(2006) ROGHAINNEAN comharrachaidh MAPK: an t-àite ceart aig an àm cheart. Tursan Biochem Sci 31: 268-275.
- ↵
- Nestler EJ
(2012) Innealan tar-sgrìobhaidh de dhroch dhrogaichean. Clin Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.
- ↵
SgaoileadhMedlineGoogle Scholar
- Paxinos G,
- MacBhàtair C
(2013) An eanchainn radain ann an co-chomharran stereotaxic (Acadaimigeach, Boston), Ed 7.
- Pitchers KK,
- Balfour ME,
- Lehman MN,
- Richtand NM,
- Yu L,
- Coolen LM
(2010a) Neuroplasticity anns an t-siostam mesolimbic a dh'adhbhraicheas duais nàdarra agus sparradh duais às dèidh sin. Eòlas-inntinn Biol 67: 872-879.
- Pitchers KK,
- KS Frohmader,
- Vialou V,
- Mouzon E,
- Nestler EJ,
- Lehman MN,
- Coolen LM
(2010b) Tha DeltaFosB anns an nucleus accumbens deatamach airson a bhith a ’toirt buaidh air buannachdan duaise. Genes Brain Behav 9: 831-840.
- Pitchers KK,
- Schmid S,
- Di Sebastiano AR,
- Wang X,
- Laviolette SR,
- Lehman MN,
- Coolen LM
(2012) Bidh eòlas duais nàdarra ag atharrachadh sgaoileadh AMPA agus NMDA agus ag obair ann an nucleus accumbens. PLoS One 7: e34700.
- Pitchers KK,
- Vialou V,
- Nestler EJ,
- Laviolette SR,
- Lehman MN,
- Coolen LM
(2013) Bidh duaisean nàdurrach is dhrogaichean a ’gnìomhachadh air innleachdan plaideas neralnach coitcheann le DeltaFosB mar phrìomh eadar-mheadhanair. J Neurosci 33: 3434-3442.
- Roux PP,
- Blenis J
(2004) ERK agus p38 kinases pròtain air a ghnìomhachadh tro MAPK: teaghlach de kinases pròtain le gnìomhan bith-eòlasach eadar-dhealaichte. Microbiol Mol Biol Rev 68: 320-344.
- Russo SJ,
- CA Bolanos,
- Theobald DE,
- DeCarolis NA,
- W Renthal,
- Kumar A,
- Winstanley CA,
- Renthal NE,
- Wiley MD,
- Fèin DW,
- Russell DS,
- Neve RL,
- Eisch AJ,
- Nestler EJ
(2007) Slighe IRS2-Akt ann am midbrain dopamine bidh neurons a ’riaghladh freagairtean giùlain agus ceallach do opiates. Nat Neurosci 10: 93-99.
- Schultz W
(2010) Ioma-dhleastanasan bho neurons dopamine. F1000 Biol Rep 2: 2.
- Seroogy KB,
- CM CM
(1993) Cur an cèill neurotrophins le neurons dopaminergic midbrain. Sgaoileadh 124: 119-128.
- Shippenberg TS,
- Bals-Kubik R,
- Herz A
(1987) Raointean brosnachail de opioids: fianais gu bheil gnìomhachadh de Delta-receptors a ’toirt taic do phròiseasan neartachaidh. Brain Res 436: 234-239.
- Sklair-Tavron L,
- Nestler EJ
(1995) A ’toirt buaidh air mairsinn agus na neurotrophins, NT-3, NT-4, agus BDNF, air locus coeruleus neurons in vitro. Brain Res 702: 117-125.
- Sklair-Tavron L,
- Shi WX,
- Lane SB,
- Harris HW,
- BS Bunney,
- Nestler EJ
(1996) Bidh morphine marbhtach a ’toirt buaidh air atharrachaidhean follaiseach ann am morf-eòlas an neolons mesolimbic dopamine. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.
- Spiga S,
- DT Serra,
- Puddu MC,
- Foddai M
- Diana M
. Eur J Neurosci 17: 605-612.
- Swanson LW
(2004) Mapaichean eanchainn: structar an eanchainn radain (Acadamaigeach, San Diego), Ed 3.
- Tenk CM,
- Wilson H,
- Zhang Q,
- Pitchers KK,
- Coolen LM
(2009) Duais dhrabasta ann an radain fireann: buaidh eòlas gnèitheach air roghainnean àite suidhichte co-cheangailte ri ejaculation agus eadar-theachdan. Horm Behav 55: 93-97.
- Tzschentke TM
(2007) A ’tomhas duais le paradig roghainn an àite (CPP): ùrachadh nan deichead mu dheireadh. Biol Addict 12: 227-462.
- van Furth WR,
- van Ree JM
(1996) Brosnachadh feise: com-pàirteachas bho opioids dùthchasach ann an sgìre a tha cuimseach fionnarach. Brain Res 729: 20-28.
- van Furth WR,
- Wolterink G,
- van Ree JM
(1995) Riaghladh giùlan feise fireann: a bhith an sàs ann an opioids an eanchainn agus dopamine. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.
- Walker JR,
- Chen SA,
- Moffitt H,
- Inturrisi CE,
- Koob GF
(2003) Bidh an teachd a-steach neo-dhuilleagach a ’toirt gu buil barrachd fèin-rianachd a thaobh heroin ann an radain. Pharocol Biochem Behav 75: 349-354.
- KA Òg,
- Gobrogge KL,
- Liu Y,
- Wang Z
(2011) Neurobiology de chnuasachadh paidhir: lèirsinn bho chnàmhaiche monogamous gu sòisealta. Front Neuroendocrinol 32: 53-69.