Tha buaidh neònach-inntinneach a th 'ann an opioid aig ìre dona de dopaminergic neurons anns an sgìre fionnarach a' toirt buaidh air duais nàdarra is opiate (2014)

COMHARRAN: Tha Sgrùdaidhean DeltaFosB bidh sinn gu tric ag ainmeachadh a h-uile fòcas an nucleus accumbens (ionad duais), agus fhuair e a-mach gu bheil gnè gu ìre mhòr a ’siubhal air na h-aon uidheaman eanchainn ri meth & cocaine. Bhon sgrùdadh sònraichte leis an aon neach-rannsachaidh seo (Achd Duaisean Nàdarra is Drugaichean air Meadhanan Plastaigeachd Nàdarra Coitcheann le ΔFosB mar Phrìomh Eadar-mheadhan (2013)):

Mar sin, bidh duaisean nàdurrach is drogaichean chan ann a-mhàin a ’tighinn còmhla air an aon shlighe neòil, bidh iad a’ tighinn còmhla air na h-aon eadar-mheadhanairean moileciuil, agus is dòcha anns na h-aon neurons anns na Nucleus Accumbens, gus buaidh a thoirt air beatha brosnachaidh agus “ag iarraidh” an dà sheòrsa dhuaisean

Bidh an toirt air falbh: meth, cocaine agus gnè a ’dèanamh na h-aon rudan bunaiteach ris na h-aon cheallan nearbh anns an ionad dhuaisean (an nobhail accumbens), ge bith dè a dhèanas iad ann an dòigh eile san eanchainn. Bha seo a ’toirt às a’ phuing àbhaisteach a bhith a ’bruidhinn gu bheil duaisean nàdurrach agus drugaichean eadar-dhealaichte ann an dòighean agus buaidhean.

Rinn an sgrùdadh ùr seo sgrùdadh air na tha gnè a ’dèanamh ris an VTA. Is e an VTA far a bheil na ceallan neòil a tha a ’dèanamh dopamine a’ tòiseachadh - agus bidh iad a ’meur gu na nucleus accumbens, cortex front, agus amygdala. Gu bunaiteach, is e an VTA stòr (wellspring) a ’mhòr-chuid de na dopamine againn. Faic an 2 dhealbh seo den chuairt dhuais: Pic1, Pic2

Lorg luchd-rannsachaidh gu bheil gnè (climax) ag adhbhrachadh gu bheil na buidhnean cealla sa VTA a ’crìonadh gu sealach (ann am fireannaich). Buidhnean cell agus na cinn aca air a dhèanamh suas de chùis liath na h-eanchainn. Is e seo dìreach dè a bhios tràilleachd heroin a ’toirt air an VTA (Chan e cleachdadh aon uair air heroin, ach cleachdadh gaisgeach heroin). Thoir an aire gu bheil an aon lùghdachadh ann air buidhnean cealla VTA a tha a ’tachairt ann an tràillean heroin daonna.

Mairidh an snaidheadh ​​cealla a tha air a ghintinn le feise air feadh co-dhiù 7 làithean. Bha na h-atharrachaidhean a dh'adhbhraich gnè air tilleadh gu àbhaisteach aig làithean 30, ach cha do rinn an luchd-rannsachaidh ach measadh air làithean 1, 7, agus 30.

Bidh lughdachadh nam buidhnean cealla ann an tràilleachd heroin a ’leantainn gu dopamine nas ìsle anns na nucleus accumbens - no mar a chanas sinn ris dealachadh. Thug an luchd-rannsachaidh morphine dha na radain gus am freagairt aca a mheasadh (às deidh gnè), ach cha do thachair dad. Mar as trice is toil leis na radain am morphine, ach an seo bha iad air an dì-mheadhanachadh airson ùine. Ann an ùine ghoirid, cha robh cuairteachadh duais radain post-ejaculatory neo-fhreagarrach don ìre ìosal de heroin. Bha luchd-rannsachaidh den bheachd gum biodh feum air dòsan nas àirde gus freagairt radan “àbhaisteach” fhaighinn.

Gu geàrr-chunntas - Bidh gnè (airson ùine) a ’dèanamh an aon rud anns an VTA agus a tha tràilleachd ri heroin: lughdachadh nan dopamine a’ dèanamh cuirp nan ceallan neòil. Bidh seo a ’leantainn gu dopamine nas ìsle anns an ionad dhuais, agus nas lugha de dhleastanas ri narcotics - agus bheir e co-dhiù 7 latha airson eanchainn radan faighinn air ais.


 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pitcher KK1, Cùirteagan CM2, Beloate LN3, Fuller J2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Coolen LM5.

Abstract

Tha duais nàdarra agus drugaichean mì-ghnàthachaidh a ’tighinn gu co-dhùnadh air an t-slighe mesolimbic agus a’ cur an gnìomh inneal cumanta de phlastaig comas-cuirp anns an nucleus accumbens. Tha ùmhlachd leantainneach dha opiates a ’toirt buaidh air plaidealachd ann an neurons dopaminergic den sgìre reusanach fionnara (VTA), a tha a’ riaghladh fulangas duais morphine.

An seo, bidh sinn a ’dèanamh deuchainn air na h-tuairisgeulan gu bheil sgaoileadh le suirghe de opioids endogenous anns an VTA ag adhbharachadh atharrachadh moirfeòlach air ceallan dopamine VTA ann an radain fireann, a tha an uair sin a’ riaghladh an cleachdadh fad-ùine air ath-neartachadh èignichte air giùlan feise.

An toiseach, lùghdaich eòlas gnèitheach VTA dopamine am meud 1 agus làithean 7, ach cha b ’e 30 làithean às deidh an t-seisein mathaidh mu dheireadh. Chaidh an toradh seo a bhacadh le naloxone ro gach seisean measaidh; mar sin, bha plaideas cealla VTA dopamine an urra ri gnìomhachd de opioids in-ghaolach.

An uair sin, bha ceangal aig VTA plasticity ri duais atharraichte atharrachadh, oir cha robh an fheadhainn fhireann a bha a ’faighinn a-mach mar roghainn roghnaichte airson 0.5 mg / kg mairbh.

An uair sin, chaidh co-dhùnadh an robh gnìomh opiogen lasach a ’toirt seachad duais agus cuimhne feise ann an radain fireann a thathas a’ làimhseachadh le naloxone nuair a tha iad a ’faighinn cothromachadh, gu rianail no taobh a-staigh VTA. Cha do chuir Naloxone bacadh air cuideachadh furasta a dhèanamh le giùlan feise thairis air seiseanan bìdh ath-sheasmhach, no roghainn àite air an ullachadh airson co-aonadh. Ach, thug leigheas naloxone lùghdachadh air an dòigh-obrach san fhad-ùine a thaobh a bhith a ’comasachadh giùlan feise agus gnìomhachadh niùclach ann an ceàrnaidhean mesolimbic air adhbharachadh le leigheasan co-cheangailte ri meatadh..

Le chèile, tha an dàta sin a ’sealltainn gu bheil opioids in-ghnèitheach aig àm gintinn plaideas niùclach ann an neurran dopamine VTA a dh’ fheumas nochdadh mar dhìleab airson duais morphine agus cuimhne fad-ùine airson giùlan duais nàdarra.

 

Ro-ràdh

Tha giùlanan duais nàdarra air an eadar-mheadhanachadh leis an t-siostam mesocorticolimbic (Meisel agus Mullins, 2006; Hoebel et al., 2009; Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young et al., 2011; Blum et al., 2012). Tha drogaichean de dhroch-dhìol ag adhbharachadh atharrachaidhean neraltach san t-siostam seo, a tha an uair sin a ’cur ri leasachadh agus cur an cèill mì-ghnàthachadh stuthan (Hyman et al., 2006; Nestler, 2012). Cho-dhùin sinn roimhe seo gu bheil eòlas le giùlan duais nàdarra, ie eòlas gnàthach ann an radain fireann, ag adhbharachadh plastaig niocrasach anns an nucleus accumbens (NAc), a ’gabhail a-steach spines dendritic meudaichte (Pitchers et al., 2010a) agus deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Anns an aon àm, tha an plasticity seo, air a stiùireadh le gnè, riatanach airson buaidh gnàth-eòlas air leantainneachd às dèidh sin, ri fhaicinn mar a bhith a ’toirt taic do thòiseachadh is coileanadh giùlan feise (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). A bharrachd air sin, bidh eòlas gnèitheach a ’toirt freagairt do psychostimulants, a’ gabhail a-steach mothachadh air gnìomhachd locomotives agus duais nas fheàrr (Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).

Is e an NAc aon targaid sìos an sruth de na neurons dopaminergic anns an sgìre a tha a ’toirt a-steach fionnarachadh (VTA). Thèid neòinichean dopamine VTA an cur an gnìomh aig àm suirghe agus an uair sin bidh iad air an leigeil le leigheasan co-cheangailte ri fàisneachadh feise gnèitheach (Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010a), tro peptide opioid endogenous (EOP) - a ’ceangal aig glacadairean μ-opioid (MORs; Matthews agus German, 1984; MacIain agus a Tuath, 1992; Klitenick et al., 1992; Ikemoto et al., 1997; Balfour et al., 2004). Air an adhbhar sin, bidh nochdadh fios gu cuilean cleachte ro-innse airson giùlan feise ag adhbhrachadh gnìomhachadh EOP agus VTA dopamine-cell gnìomh, a bhios a ’comasachadh brosnachadh gnèitheasach (Mitchell agus Stewart, 1990; van Furth et al., 1995; van Furth agus van Ree, 1996) agus sgaoileadh dopamine anns an NAc (Fiorino et al., 1997).

Bidh a ’nochdadh uair is uair do dh’ neo-fhiadhaich allaidh ag adhbhrachadh atharrachaidhean moirfeòlach anns an VTA (Mazei-Robison et al., 2011; Mazei-Robison agus Nestler, 2012), lùghdaich meud cuid neurons VTA dopamine (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Chu et al., 2007; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011), ìrean lùghdachaidh de neurofilament air ìsleachadh (Beitner-Johnson et al., 1992), barrachd falainneachd de cheallan dopamine, agus còmhdhail axoplasmic lùghdaichte agus toradh dopamine don NAc (Beitner-Johnson et al., 1992; Mazei-Robison et al., 2011). Bidh na h-atharrachaidhean neoni dopamine VTA seo ag adhbhrachadh fulangas dhuaisean maoir agus tha iad neo-ghluasadach mar a bhios iad a ’sgaoileadh taobh a-staigh mìos de staonadh dhrogaichean (Russo et al., 2007). Chan eil e an-dràsta a bheil e coltach a bheil plasticity anns an niùc dopamine VTA gun choimeas air gnìomhan an opiates no ma thèid an toirt gu buil le bhith a ’sgaoileadh EOP tro ghiùlan a bhios a’ toirt luach nàdarra.

An seo, bidh sinn a ’feuchainn an beachd-bharail gu bheil eòlas duais nàdair ag adhbharachadh neuroplasticity coltach ris an adhbhar a dh’ adhbharaicheas opiates, agus mar sin, gum bi opiates a ’co-èigneachadh air inneal plaidigs a tha riatanach airson duais duais nàdarra agus cuimhne dhuaisean. Bidh sinn a ’dearbhadh a bheil eòlas gnàthach ann an radain fireann a’ lùghdachadh meud cuid neurons dopamine VTA tro phròiseas a tha an crochadh air gnìomh EOP anns an VTA. Còmhla ri sin, tha sinn a ’sgrùdadh a bheil atharraichean air an toirt le EOP ann an neurons VTA dopamine co-cheangailte ri ath-neartachadh giùlan luachaidh nàdarra agus sònrachadh brìgh searbhachd gu leigheasan co-cheangailte ri duais nàdarra, agus ag adhbharachadh thar-fhulangas a thaobh duais morphine.

Stuthan agus Dòighean-obrach

Animals

Chaidh radain fireann sprague-Dawley (200 – 225 g) fhaighinn bho Abhainn Charles agus bha iad ann an càraidean ann an seòmraichean air an lasadh gu saor-thoileach air cearcall éadrom / dorcha 12 h anns gach deuchainn (a ’lasadh dheth aig 10: 00 AM ach a-mhàin airson an deuchainn fulangas morphine , solais aig 5: 00 PM). Bha biadh is uisge rim faotainn ad libitum ach aig àm deuchainn giùlan. Bha an fheadhainn bhoireann gluasadach ovariectomized agus air an ion-ghlanadh le co-chur sìos 5% 17-β-estradiol capzoles solaisteach (trast-thomhas taobh a-staigh 1.98 mm, fad 0.5 cm, Dow-Corning). Chaidh in-steallaidhean de progesterone (fo-chraicinn, 500 μg ann an 0.1 ml de ola sesame) a thoirt seachad 3 – 6 h ro deuchainn gus gabhail ri gnìomhachd feise. Chaidh na modhan uile a dhaingneachadh le Oilthigh Taobh Siar Ontario agus Comataidhean Cùram Ainmhidhean Oilthigh Michigan, agus a bhith a ’ceangal ri stiùiridhean Comhairle Chanada air Cùram Bheathaichean agus Institiud Nàiseanta nan Slàinte a’ toirt a-steach beathaichean as-altach do rannsachadh.

Cursa tìme de VTA dopamine gu bheil meudachd air atharrachadh

Seiseanan suirghe gach latha.

Gus sgrùdadh a dhèanamh air an ùine de dh'atharrachaidhean ann an neuron dopamine, tha meud cuid anns an VTA, chaidh beathaichean gnèitheach is nàdurrach a mharbhadh aig 1, 7, no 31 d (n = 5 – 8 gach buidheann) an dèidh an latha mu dheireadh de cho-rèiteachadh (eòlasach) no làimhseachadh (naive). Bha buidhnean gnè-eòlach co-ionann ri dol-a-mach gnèitheasach rè an seisean mathaidh mu dheireadh, a bharrachd air na h-àireamhan iomlan de shùlairean thairis air na còig seiseanan (cuibheasachd 5 airson gach buidheann), agus cha robh iad eadar-dhealaichte ann am paramadair sam bith de ghiùlan feise.

Seiseanan gintinn.

Bha an fheadhainn fhireann neo-ghnèitheach air an toirt do aon chuid de dhà dh ’suidheachadh deuchainn: a’ buntainn gu feise no le gnè. Bha cead aig beathaichean le eòlas air gnè feise còig uairean a ’suidhe air làithean a’ leantail le boireannaich ghlasa ann an cèidichean deuchainn ceart-cheàrnach (60 × 45 × 50 cm) gus an taisbeanadh de ejaculation no suas gu 1 h (ge bith dè a thàinig an toiseach). Chaidh na cèidsichean a ghlanadh gu mionaideach le fuasgladh ethanol 70% agus chaidh leapannan ùra a chuir eadar seiseanan suathadh. Chaidh giùlan feise a dhèanamh aig an ìre dhorch (2 – 6 h an dèidh dhut an dorchadas a dhèanamh). Cha robh ach beathaichean a bha a ’gluasad a-mach aig co-dhiù ceithir de na còig seiseanan brathaidh air am meas mar ghnè aig a’ chùis agus chaidh an toirt a-steach do dheuchainnean. Chaidh a h-uile seisean measgaichte a chlàradh agus chaidh giùlan gnèitheasach a chlàradh. An àireamh de mhùthaidhean (M), anns a bheil sreap (ML; ùine bho bhith a ’toirt a-steach an tè bhoireann gu toiseach), fuath a-staigh (IL; àm bho toirt a-steach an tè bhoireann gu toiseach), agus amhaidheachd ejaculation (EL; chaidh ùine bho chiad in-sgrùdadh gu ejaculation) a chlàradh (Agmo, 1997). Chaidh beathaichean sìtheil a chuir ann an cèidse deuchainn glan airson 1 h aig an aon àm ri fireannaich a bha a ’eòlas gnèitheasach a’ tighinn còmhla san aon seòmar, gus am biodh iad a ’coimhead air droch àilean boireann, agus ìrean coltach de dh'aimhreit agus ùr-ghnàthachadh àrainneachdail mar fhir ùra.

A ’dèanamh cinnteach gu bheil bileag neo-chnìomh-droma.

Chaidh beathaichean a bhruthadh gu domhainn le bhith a ’cleachdadh sodium pentobarbital (270 mg / kg, ip) agus a’ drùidheadh ​​gu h-eadar-dhealaichte le 50 ml de shalann 0.9%, air a leantainn le 500 ml de paraformaldehyde 4% ann am bufair sodium phosphate 0.1 m (PB). Chaidh Brains a thoirt air falbh agus an cur air ais airson 1 h aig teòthachd an t-seòmair (RT) anns an aon cho-shocair, agus an uairsin air a bhogadh ann an siorcag 20 agus azide sodium 0.01% ann an 0.1 m PB airson a stòradh aig 4 ° C. Chaidh earrannan crùnaidh a ghearradh aig 35 μm air microtome reòthte (H400R, Microm) agus chaidh an cruinneachadh ann an ceithir sreath co-shìnte ann am fuasgladh cryoprotectant (roscroin 30%, 30% glycol eitilne ann an 0.1 m PB) agus an uair sin ga stòradh aig 20 ° C. Chaidh a h-uile gluasad a dhèanamh aig RT le toileachas socair agus ròsan lìonmhor le 0.1 m PBS, pH 7.35, eadar guir. Bha earrannan air an nochdadh ri 1% H2O2 airson 10 min gus cuir às do peroxidases in-ghaolach, an uairsin air a bhacadh airson 1 h ann an fuasgladh guir (PBS +: PBS anns a bheil 0.4% Triton X-100; Sigma-Aldrich) agus 0.1% serum albumin (Laboratories Research Immun Jackson). An uair sin, chaidh earrannan an goirteachadh thar oidhche aig RT ann an luchag tyrosine hydroxylase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). An dèidh do ghintinn bun-antibody, chaidh earrannan a ghintinn ann am antibody antibat luch 555-conjugated anti-luch (1: 100; Invitrogen, Eugene, OR) airson 30 min. Mu dheireadh, chaidh earrannan a nighe le 0.1 m PB, air an cur air sleamhnain ghloine Superfrost Plus, air an tiormachadh, agus air an còmhdach le gelvatol anns a bheil an stuth gintinn 1,4-diazabicyclo (2,2) octane (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Mion-sgrùdadh dàta: meud neuron soma.

Chaidh ìomhaighean de neurons im-dìonach (IR) anns an VTA a ghabhail aig 40 × meudachd aig trì ìrean gluasadach gu ìre uamhasach (Balfour et al., 2004). Cha deach eadar-dhealachaidhean sam bith a lorg eadar ceallan aig na diofar ìrean. Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air meud meud neurons TH-IR a ’cleachdadh ImageJ (Institiudean Nàiseanta Slàinte). Chaidh meud meadhanach, cuairt-ùine agus cuairteachadh a thomhas mar a chaidh a mhìneachadh le Sklair-Tavron et al. (1996). Chaidh àireamhan cuibheasach de 25 cheallan gach beathach (còmhla gach ìre VNUMX VTA) a sgrùdadh agus cha robh ann ach ceallan le niùclas a bha follaiseach a-steach. Airson gach beathach, chaidh an àrainn chuibheasach, cuairt-ùine agus cuairteachadh a thomhas. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil chaidh ANOVA dà-shligheach a chleachdadh [factaran: eòlas gnèitheach (gnè feise no gnè naive) agus ùine (3, 1, no 7 d)] air a leantainn le post hoc coimeasan a ’cleachdadh modh Holm – Sidak le ìre chudromach de 0.05.

Bidh VTA neo-dopamine ag atharrachadh

Seiseanan measgaichte dà-chànanach.

Airson deuchainn a dhèanamh air co dhiubh a tha eòlas gnàthach aig seiseanan suirghe làitheil airson lùghdachadh ann an ìre TH-IR neuron parta, chaidh neòinean dopamine VTA de bheathaichean a bha air suirghe aig còig seiseanan bi -ekly mating a sgrùdadh. Bha seiseanan cruinneachaidh mar a chaidh iomradh gu h-àrd, ach thar ùine de 2.5 seachdainean. Chaidh Brains a chruinneachadh 7 d às dèidh maidseadh no làimhseachadh mu dheireadh.

A ’cur a-steach lipéadú Immunoperoxidase.

A bharrachd air sin, chaidh deuchainn a dhèanamh air a ’cleachdadh tro mheadhanan air leth brìoghmhor le immunoperoxidase agus lorg cromogen, le bhith a’ dèanamh atharrachadh sam bith air atharrachaidhean meud TH-IR. Bha giullachd agus giullachd an t-siùcair ga ghiùlan mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. An dèidh làimhseachadh le 1% H2O2 agus PBS +, chaidh earrannan a ghintinn thar oidhche aig RT ann an tyrosine polyclonal hydroxylase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). An dèidh do ghintinn bun-chnàmh, chaidh na h-earrannan a ghoradh le gob biotin-co-chuimichte e-rabbit IgG (1 h, 1: 500 ann PBS +; Laboratories Vector), peroxidase avidin-biotin-horseradish (1 h, ABC elite; 1: 1 000 in PBS ; Vector Laboratories), agus 3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (10 min, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich) air a leasachadh le sulfate nickel (0.02% ann an 0.1 m PB) le hydrogen peroxide (0.015%). Chaidh earrannan a nighe gu mionaideach ann an 0.1 m PB gus an fhreagairt a thoirt gu crìch agus a chuir air Superfrost le còd agus sleamhnagan glainne (Fisher) le 0.3% gelatin ann an ddH2O. An dèidh dhaibh a bhith a ’glanadh, bha na sleamhnagan uile air an còmhdach le suaicheantas DPX (dibutyl phthalate xylene; Sigma-Aldrich).

Mion-sgrùdadh dàta: meud neuron soma.

Chaidh ceallan TH-IR a sgrùdadh airson sgìre, cuairt-thomhas, agus cuairteachd mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. A bharrachd air an sin, chaidh mion-sgrùdadh a dhèanamh air ceallan TH-IR ann an substantia nigra (SN), anns na h-aon earrannan a chaidh a chleachdadh airson mion-sgrùdadh air ceallan VTA TH-IR. Mu dheireadh, às deidh mion-sgrùdadh de cheallan VTA agus SN TH-IR, chaidh earrannan a chuir an aghaidh a ’cleachdadh cresyl violet agus chaidh ceallan neo-TH-IR a sgrùdadh a’ cleachdadh na h-aon dhòighean mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean naive agus eòlach a choimeas le bhith a ’cleachdadh Oileanaich dà-earbaill t deuchainnean le ìre chudromach de 0.05.

Buaidh naloxone air lùghdachadh dopamine a tha an sàs ann an eòlas

Gus faighinn a-mach an robh MORS air pàirt a ghabhail ann an atharrachaidhean a dh ’adhbharaich ann an gnè gnàthaichte de na droma sam bith, bha bac air MOR ri giùlan feise. Fhuair leth de na beathaichean eòlas gnàthach, ach chaidh dèiligeadh ris an leth eile ach dh'fhuirich iad a ’feise gu nàdurrach. Bha cead aig beathaichean le eòlas air gnè feise a dhèanamh air 5 làithean an dèidh a chèile. Taobh a-staigh nam buidhnean gnèitheach is ionnsaidh, bha beathaichean air an làimhseachadh leis an neulxone (10 mg / kg, sg; Sigma-Aldrich, salann) no 0.9 salann mus tugadh a-steach am boireannach (eòlach) no mus do làimhsich iad (naive); mar sin a ’cruthachadh ceithir buidhnean deuchainneach: salann gnèitheach (Naive Sal), naloxone gnèitheach (Naive NLX), salann gnèitheach (Exp Sal), agus naloxone le gnè feise (Exp NLX; n = 5 – 8 gach buidheann). Cha robh buaidh staitistigeil staitistigeach aig làimhseachadh Naloxone air paramadair de ghiùlan feise, air gin sam bith den 5 d, agus bha buidhnean naloxone-agus saline-co-ionann dìreach ann an eòlas gnèitheasach. Chaidh a h-uile beathach a mharbhadh tro lionn-perfusion dealaichte 7 d às deidh an seisean mathaidh mu dheireadh. Chaidh roinn, immunohistochemistry, agus anailis dàta (ANOVA dà-rathad; factaran: eòlas gnèitheasach agus leigheas dhrogaichean) airson meud dopamine mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd.

Roghainn àite le moirfein

Dealbhadh dearbhach.

roimhe sin, Russo et al. (2007) sheall e gun robh mairt cronach a ’toirt buaidh air fulangas airson duais morphine. Bhon a dh ’adhbharaicheas eòlas gnèitheach agus morphine cronail lùghdachadh co-ionann ann am meud meud neurons dopamine anns an VTA, chaidh buntanas gnìomhachail nan atharrachaidhean moirfeil-gnèitheach a dhearbhadh airson duais morphine. Bha beathaichean gnèitheach is gnèitheach air an roinn ann an sia buidhnean deuchainneach eadar-dhealaichte (n = 9 – 13 gach buidheann) stèidhichte air giùlan feise (feise neo-chràbhach no eòlasach) agus dòs mara (0.5, 5.0, no 10.0 mg / kg, ip) agus chaidh an deuchainn airson roghainn àite ceangailte aig moirfinn (CPP).

Morphine-CPP.

Chaidh an cruth-tìre a dhèanamh 1 d às dèidh an t-seisein mu dheireadh agus chaidh buidhnean an aon ràmh ri coileanadh gnèitheil rè an t-seisein aca. Bha am paradigm CPP a bha air a chleachdadh a ’toirt a-steach pretete, làithean freagarrach, agus iar-dheuchainn, agus bha uidheam stèidhichte air Tenk et al. (2009). Ann an ùine ghoirid, bha trì seòmraichean sònraichte anns an uidheam CPP (MED Associates). Eadar gach seisean, chaidh an t-inneal a ghlanadh gu mionaideach le fuasgladh 70% ethanol gus lughdachadh cuisean olfactory a lughdachadh. Gus roghainnean fa leth a dhearbhadh, chaidh deuchainn a chumail far an d ’fhuair beathaichean cothrom an-asgaidh air an uidheamachd gu lèir airson 15 mion. Mar bhuidheann, cha do sheall beathaichean mòran roghainn airson seòmar sònraichte, ach b ’fheàrr le gach beathach fa leth. Chaidh radain a bha a ’nochdadh roghainn mhòr airson aon de na seòmraichean (> 200 s eadar-dhealachadh eadar an ùine a chaidh a chaitheamh anns gach seòmar; <5% de bheathaichean) rè an deuchainn a chuir a-mach às an sgrùdadh. Aig àm an t-suidheachaidh, chaidh droga a pharadh an dàrna cuid gu seòmar a b ’fheàrr leotha no neo-roghnaichte a’ cleachdadh paradigm neo-phàirteach (Tzschentke, 2007agus) bha beathaichean air an cuingealachadh ris na seòmraichean airson 30 min. Chaidh beathaichean a spìonadh le salann (ip) anns a ’mhadainn (9: 00 AM gu 12: 00 PM) agus air an cuingealachadh ris an t-seòmar le paidhrichean saillte (smachd). Air an fheasgar (1: 00 – 4: 00 PM), chaidh ainmhidhean a chuir a-steach le morphine (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg no 10.0 mg / kg; sulfáit morphine air a sgaoileadh ann an salann 0.9%, Johnson Matthey) agus cuingealaichte dhan t-seòmar le pàpaichean-mara. Bha dà bheathach ga thoirt air beathaichean. An ath latha (3 d an dèidh an latha mu dheireadh de bhith a ’riochdachadh), chaidh deuchainn iar-deuchainn a dhèanamh a tha co-chosmhail ris an pretest. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil, chaidh an ùine a chaidh a chaitheamh san t-seòmar paidhir morphine tron ​​iar-dheuchainn a choimeas ris an ùine a chaidh a chur san t-seòmar paidhir-shaillte ann an ath-deuchainn airson fireannaich gnèitheach no fiosrachail taobh a-staigh gach dòsan a ’cleachdadh càraid t deuchainn. p Bha <0.05 air a mheas cudromach gu staitistigeil. Fhuair buidhnean smachd a bharrachd de bheathaichean feise naive agus eòlach saline ann an seòmraichean càraid agus gun chàradh gus a bhith nan smachdan àicheil. Cha deach eadar-dhealachadh sam bith san ùine a chaidh a chaitheamh eadar seòmraichean a lorg airson gach buidheann.

Buaidh naloxone siostamach air cuideachadh gnàthach ann an giùlan feise

Dealbhadh dearbhach.

Bidh eòlas feise a ’leantainn air adhart gu giùlan feise a chumail suas airson co-dhiù 1 mìos (Pitchers et al., 2012). Gus sgrùdadh a dhèanamh air a ’bhuaidh a bha aig blocadh MOR air cuideachadh gnàthach le giùlan feise, fhuair beathaichean gnèitheasach aon chuid naloxone no salann mus do thòisich na còig seiseanan leantainneachd leantainneach (n = 12 an aon) mar a tha air a mhìneachadh gu h-àrd. Aon seachdain an dèidh an t-seusain mu dheireadh, chaidh deuchainn measgachaidh mu dheireadh a dhèanamh far an robh cead aig a h-uile beathach meatadh a-mach gus am biodh aon e-sùla no suas gu 1 h. Cha deach dèiligeadh ri naloxone no leigheas salann mus do chuir iad maidseadh air an latha deuchainn mu dheireadh. Chaidh paramadairean coimeasgadh an coimeas ri faighinn a-mach an tug naloxone buaidh air cuideachadh gnàthachadh gnè (latha 1 vs latha 5) no cumail suas an aghaidheachd seo (latha 5 vs deuchainn) a ’cleachdadh ANOVA [slighe: leigheas (salann bho naloxone agus) dòigh airson latha (1, latha 5, no deuchainn)] agus modh Holm – Sidak post hoc coimeas. Airson gach deuchainn staitistigeil, p Bhathas den bheachd gu robh <0.05 cudromach gu staitistigeil.

Deuchainnean smachd a bharrachd

Naloxone siostamach air latha na deuchainn.

Gus sealltainn nach robh giùlan gnàthach atharraichte air an latha deuchainn deuchainn mu dheireadh air sgàth dìth naloxone, thug sinn seachad aon chuid naloxone no salann air latha deuchainn deuchainn deireannach dha beathaichean a fhuair matadh còmhla ri naloxone fhad's a fhuair iad eòlas feise. Gu sònraichte, fhuair a h-uile beathach cuir a-steach naloxone (10 mg / kg, sg) suathadh 30 roimhe sin ri aon ejaculation rè 5 lathaichean an dèidh a chèile. Air latha na deuchainn 7 d an dèidh sin, fhuair timcheall air leth de na beathaichean stealladh de naloxone (10 mg / kg, n = 7) no salann (n = 6) 30 mionaid mus tugadh boireannaich boireann a-steach. Chaidh giùlan feise a chlàradh agus a chlàradh. Chaidh paramadairean coimeasgadh an coimeas ri faighinn a-mach an tug naloxone buaidh air cuideachadh gnàthachadh gnè (latha 1 vs latha 5) no cumail suas an aghaidheachd seo (latha 5 vs deuchainn) a ’cleachdadh ANOVA [slighe: leigheas (salann bho naloxone agus) dòigh airson latha (1, latha 5, no deuchainn)] agus modh Holm-Sidak post hoc coimeas. Airson gach deuchainn staitistigeil, p Bhathas den bheachd gu robh <5% cudromach gu staitistigeil.

Buaidh naloxone air cur an cèill geàrr-ùine air giùlan feise furasta.

Chaidh buaidhean naloxone (10 mg / kg, sg) leigheas nuair a bhathar a ’seasamh ri linn deuchainn a dhèanamh air giùlan feise an dèidh sin aig àm deuchainn deuchainn eile, a chaidh a dhèanamh a-mhàin 1 d às dèidh maidse mu dheireadh (salann, n = 5; naloxone, n = 4).

Ro-innleachd naloxone siostamach.

Gus faighinn a-mach a bheil e a ’làimhseachadh ath-chleachdadh naloxone na aonar le bhith ag adhbharachadh droch ghiùlan feise 7 d às deidh an leigheas mu dheireadh, fhuair beathaichean gnèitheasach ginteil còig naloxone gach latha (10 mg / kg, sc) no in-stealladh saline air lathaichean mus tàinig deuchainn matadh 7 d às deidh na naloxone deireannach no inneal-salainn. Air an latha deuchainn deireannach seo, cha d ’fhuair ainmhidhean stealladh sam bith. Chaidh giùlan feise a chlàradh agus a chlàradh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Chaidh crìochan eadar-chothromachaidh a choimeas eadar buidhnean a bha gun phlanadh t deuchainnean. Airson gach deuchainn staitistigeil, p Bhathas den bheachd gu robh <5% cudromach gu staitistigeil.

Duais naloxone siostamach agus duais gnàthach.

Is e aon chothrom airson buaidhean teannachaidh naloxone air taisbeanadh cumail suas giùlan feise furasta gu bheil naloxone a ’cur bacadh air buaidhean buannachdail giùlan gnèitheasach. Gus an comas seo a dhearbhadh, chaidh am paradigm CPP a dhèanamh airson giùlan gnèitheasach dìreach às deidh in-stealladh naloxone no saline ann an fireannaich aig nach robh eòlas gnèitheasach roimhe. Bha dòigh-obrach CPP coltach ris na chaidh a mhìneachadh gu h-àrd airson morphine-CPP, a ’toirt a-steach pretest, làithean fuarachaidh, agus post-deuchainn.

Chaidh giùlan feise a chuir air dòigh còmhla ris an t-seòmar nach robh air a chuir a-mach roimhe. Ann an dòigh neo-chothromach, fhuair gach beathach stealladh de naloxone (n = 12) no salann (n = 11) 30 mionaid mus faigh iad cothrom air boireannach freagarrach. Is e ∼13 mionaid a bha san ùine chuibheasach aig àm suirghe. Aon mionaid an dèidh ejaculation, chaidh an ainmhidh a chur anns an t-seòmar càraidichte airson 30 min. Air an latha eile, fhuair ainmhidhean stealladh de aon chuid naloxone no saline (ge bith dè a fhuair iad mus do chuir iad ri chèile), agus chaidh an cur a-steach don t-seòmar gun ullachadh airson 30 min. An uairsin, chaidh deuchainn eile a dhèanamh, co-ionann ris an ro-theachd. Gus co-dhùnadh a dhèanamh air roghainn seòmar, chaidh ùine a chaidh a chosg san t-seòmar càraidichte rè an ro-dheuchainn agus às dèidh deuchainn a choimeas. Airson mion-sgrùdadh staitistigeil, càraid t chaidh deuchainnean a chleachdadh gus coimeas a dhèanamh eadar sgòran roghainn agus eadar-dhealachaidh, agus ùine ann an seòmar càraidichte rè an pretete agus às dèidh deuchainn gus faighinn a-mach an deach CPP cudromach a chruthachadh airson giùlan feise. p Bha <0.05 air a mheas cudromach.

Buaidh intra-VTA naloxone air cuideachadh gnàthach ann an giùlan feise

Dealbhadh dearbhach.

Gus faighinn a-mach an robh gnìomh EOP gu sònraichte san VTA, an urra ri buaidhean atharrachaidhean gnàth-ghnèitheach air giùlan feise air giùlan feise, chaidh beathaichean a-steach gu h-ionadail de naloxone no saline a-steach don VTA ro còig seiseanan suathadh làitheil. Bha paradigm giùlain coltach ris an deuchainn naloxone rianail. Bha cead aig beathaichean le eòlas gnàthach meatadh a dhèanamh rè làithean 5 an dèidh a chèile gu aon ejaculation no suas gu 1 h. Còig mionaidean deug mus tugadh a-steach am boireannach glacte, fhuair na radain fireann sgàilean dà-thaobhach bho aon chuid naloxone (10 μg / μl gach leth-chruinne; 0.5 μl deise; air a sgaoileadh ann an 0.9% salainn) no salann (0.5 μl an leth-chruinne). Chaidh microinjections dà-thaobhach a rianachd aig ìre srutha de 0.5 μl / min thairis air ùine 1 min agus an uair sin mionaid 1 a bharrachd leis a ’chanas-stealladh air fhàgail airson sgaoileadh. Chaidh an canula agus a ’huile duslach a chuir an àite a’ chantain stealladh. Aon seachdain an dèidh an latha mu dheireadh de chòmhdachadh (latha deuchainn), bidh na h-ainmhidhean uile air am maidseadh aon uair eile gu ejaculation às aonais dòrtadh de naloxone no salann. Figear 3A a ’dealbhachadh an dealbhadh deuchainn. Chaidh mion-sgrùdadh dàta a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh ann an deuchainn naloxone rianail.

Lannsair-losgaidh.

Bha radain fhireann air an dathadh le stealladh gnèitheach (0.1 ml / kg) de ketamine (0.87 mg / ml) agus xylazine (0.13 mg / ml), agus air an cur ann an uidheam stereotaxic (Ionnstramaidean Kopf). Chaidh canulas treòrachaidh dà-thaobhach 21-Plastics (Plastics One) a lùghdachadh tro thuill drile beaga anns a ’chlaigeann a-steach don eanchainn don VTA aig −4.8 mm AP, N 0.75 mm ML bho bhryg mm agus g7.8 mm bho mhullach a 'chlaigeann a rèir Paxinos and Watson (2013). Chaidh Cannulas a dhaingneachadh le acrylic fiaclaireachd a lean ri trì sgriubhaichean dhan chlaigeann. Chaidh ùine ath-bheothachaidh 2-seachdain a thoirt dha beathaichean, agus chaidh dèiligeadh riutha a h-uile latha airson a bhith a ’seasamh ri dòighean làimhseachaidh is glasaidh a chaidh a chleachdadh aig àm deuchainn giùlain.

Dearbhadh suidheachadh Cannula.

Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air suidheachadh nan canulas a ’cleachdadh TH-immunostain gus dearbhadh gun deach an VTA a chuimseachadh gu ceart. Cha robh ach beathaichean le àiteachan freagarrach air an toirt a-steach ann am mion-sgrùdaidhean (meudan nam buidhnean deireannach: salann eòlasach n = 8; eòlas fhaighinn air naloxone n = 6). Chaidh trì beathaichean a bharrachd a fhuair in-stealladh naloxone taobh a-staigh VTA a chaidh an stiùireadh taobh a-muigh an VTA an cur còmhla ann am buidheann stealladh air an dochann. Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air a ’bhuidhinn a chaidh a chall air leth gus a bhith mar smachdan anatamaimigeach agus Mann-Whitney U chaidh an deuchainn a chleachdadh gus coimeas a dhèanamh air giùlan an latha dheireannach le deuchainnean le naloxone agus fir le eòlas saillte.

Beachd a ’toirt a-steach abairt-pERK co-cheangailte ri meatadh

Dealbhadh dearbhach.

Chaidh a shealltainn gu bheil an cèidse anns am bi an fheadhainn bhoireann a chaidh fhaighinn san eadar-dhealachadh ag adhbhrachadh gnìomhachadh MOR anns an VTA agus gnìomhachd neurral ann an VTA agus NAc (Balfour et al., 2004). Mar sin, tha an suidheachadh brathaidh mar chue air a dhearbhadh le duais gnèitheach. Rinn an rannsachadh làithreach dearbhadh an robh feum air gnìomhachadh MOR aig àm gnàth-eòlas airson gnìomhachadh niùc le cue-induced às deidh sin. Chaidh naloxone no saline a lìbhrigeadh gu rianail (ip) 30 mionaid mus do shuidhich e san raon coimeasgadh agus toirt a-steach boireannach gabh-a-steach airson matadh (eòlasach), no ro an làimhseachadh smachd a bha ann an suidheachadh cage gun taisbeanadh bhoireann (gun taobh àrainneachd; naive; Mar sin, chaidh ceithir buidhnean deuchainneach a chruthachadh: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal, agus Exp NLX. Seachdain an dèidh seisean suirghe mu dheireadh, bha leth na beathaichean anns gach buidheann air am faighinn chun cèidse (fireannaich Exp: leigheasan co-cheangailte ri gnè) no cèidse làimhseachadh (fireannaich naive: cainnt neònach / neo-phàirteach), ach cha robh an leth eile fosgailte do agus ma dh ’fhaodadh tu a bhith agad mar sin, dh'fhuirich iad anns na cèidsichean dachaigh (gus bun-bheachd pERK a shuidheachadh). Chruthaich am paradigm deuchainn seo buidhnean 8: Naive Sal-No Cue, Naive Sal + Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n = 4 an aon rud ach a-mhàin Naive NLX-No Cue, n = 3). Bha na h-ainmhidhean air an sàrachadh bho 10 – 15 mionaid às deidh dha a bhith faisg air cue. Chaidh beathaichean a bha fo smachd a thoirt air falbh bho na cèidsichean dachaigh aca agus an cleachdadh còmhla aig an aon àm.

Immunohistochemistry.

Chaidh roinn agus immunohistochemistry a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. An seo, chleachd sinn antibod polyclonal coineanach an aghaidh p42 agus p44 MAP Kinases ERK1 agus ERK2 (pERK; 1: 4 000; Teicneòlas Comharradh Cell). Chaidh a ’bhun-antibody a chomharrachadh anns an litreachas (Roux agus Blenis, 2004; Murphy agus Blenis, 2006; Frohmader et al., 2010b). A bharrachd, chuir bacadh às a ’bhun-antibody bacadh air a h-uile sgrùdadh immunoreactive agus blot an Iar de mheirleach na h-eanchainn radain a-mach gun robh dà chòmhlan aig na cuideaman moilecular iomchaidh.

Mion-sgrùdadh dàta.

chaidh ceallan pERK-immunoreactive (-IR) a chunntadh ann an àireamh de roinnean na h-eanchainn le bhith a ’cleachdadh tiùb tarraing camara camera lucida ceangailte ri Leica Miocroscop DMRD: NAc [core (C) agus slige (S); 400 × 600 μm; cortex prefrontal meadhanach; mPFC; àite glanadh an taobh a-muigh (ACA); prelimbic cortex (PL); cortex infralimbic (IL); 600 × 800 μm an aon], caudate-putamen (CP; 800 × 800 μm), agus amygdala basolateral (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010b; Pitchers et al., 2010b). Chaidh dà earrann a chunntadh anns gach roinn na h-eanchainn agus an uair sin chaidh àireamh de cheallan anns na raointean sgrùdaidh àbhaisteach a thomhas mar àireamhan de cheallan gach mm2. Chaidh an dà chunntas a chuibheasachd airson gach beathach airson a bhith a ’cunntas dòigh ann am buidhnean. Chaidh coimeas a dhèanamh eadar ìrean cuibheasach buidhne taobh a-staigh buidhnean gnèitheach no ionnsaigheach le bhith a ’cleachdadh ANOVA [factaran: làimhseachadh dhrogaichean (NLX no Sal) dà-shligheach agus cue (neo-ghlan no chanainn)] agus an uairsin post hoc coimeasan a ’cleachdadh deuchainnean Holm – Sidak no Mann-Whitney far a bheil sin iomchaidh le ìre chudromach de p <0.05. Anns an t-slige NAc de bheathaichean le eòlas feise, bha gluasad làidir a dh ’ionnsaigh brìgh nam factaran agus mar sin, chaidh coimeasan pairwise a dhèanamh gus coimeas a dhèanamh eadar buidhnean saline (Sal-No Cue) agus saline cue (Sal + Cue) a-mhàin.

Dealbhan.

Chaidh ìomhaighean didseatach a ghlacadh a ’cleachdadh camara CCD (Macrofire, Optronics) ceangailte ri a Leica miocroscop (DM5000B) le suidheachadh camara stèidhichte. Chaidh dealbhan a thoirt a-steach gu bathar-bog Adobe Photoshop 9.0. Cha deach ìomhaighean atharrachadh ann an dòigh sam bith ach a-mhàin atharrachadh air coltas agus iomsgaradh.

toraidhean

Atharrachaidhean a dh ’adhbharachadh ann an gnè feise ann an ceallan dopamine VTA

Mar thoradh air eòlas feise chaidh lùghdachadh ann am meud VTA dopamine soma (Fig. 1A – C). Eòlas gnàthach air lùghdachadh gu mòr air farsaingeachd agus cuairt-thomhais cuid de cheallan VTA TH-IR (sgìre: F(1,31) = 23.068, p <0.001; perimeter, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Bha prìomh bhuaidh chudromach ann an ùine cuideachd (sgìre: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; cuairt-thomhais, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) agus eadar-obrachadh cudromach eadar eòlas agus ùine (sgìre: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; cuairt-thomhais, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Sheall an coimeas Pairwise gu robh an àrainn agus na cuairtean de cheallan TH-IR air an lùghdachadh gu mòr 1 agus 7 d an dèidh an latha mu dheireadh de ghiùlan feise ann an ainmhidhean a dh ’eòlas feise an coimeas ri smachdan gnèitheach [Fig. 1B, sgìre: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, cuairt-ùine: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Sgaoil a ’bhuaidh a bh’ aig giùlan feise nuair a chaidh a leantainn leis an ùine de dhuais mar a thill meud soma de neurons TH-IR gu bun-loidhne 31 d às deidh an t-seisean mataidh mu dheireadh (Fig. 1B, sgìre: p = 0.798; C, cuairt-ùine: p = 0.785). Cha deach atharrachaidhean a chaidh adhbhrachadh le feise a lorg ann an cuairteachadh aig gin de na puingean-ama (Fig. 1D). Cha robh lughdachadh meud VTA dopamine soma an crochadh air seiseanan suirghe làitheil, agus le bhith a ’faighinn cothrom air suirghe ann an còig seiseanan meirge le bhith a’ dèanamh co-aonadh, dh'adhbhraich sin meud dopamine VTA lùghdaichte (Fig. 2A,B, E – H, sgìre: p = 0.004; perimedr: p <0.001). An coimeas ri sin, cha tug eòlas gnè buaidh air meud soma TH-IR anns an substantia nigra (Fig. 2C, I – J, sgìre: p = 0.13; perimedr: p = 0.16) no air atharrachadh ann am meudachd ann an neurons VTA non-TH-IR faisg air làimh (Fig. 2D, E – H, sgìre: p = 0.46; perimedr: p = 0.45).

Figear 1. 

Atharrachaidhean ann an meudachd opioid-opioid ann an meud de neurons dopamine VTA. A, Ìomhaighean riochdachail de neòinean dopamine VTA bho bheathaichean gnèitheach gnèitheach agus le eòlas a sheallas an lùghdachadh ann an meud rudeigin 7 d às deidh an seisean maidseadh mu dheireadh. Bàr scèile, 5 μm. Dàta àireamhail a tha a ’sealltainn gun do dh'adhbhraich eòlas gnèitheach (Exp, barran dubha) lùghdachadh mòr san sgìre (B; ann an μm2) agus cuairt-thomhais (C; ann an μm) de cheal dopamine VTA, 1 d (Naive, Exp; n = 6) agus 7 d (Naive, n = 5; Exp, n = 6), ach chan eil 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) an dèidh matadh deireannach, an coimeas ri smachdan na feise gnèitheach (naive, bàraichean geal). Chaidh an sgìre a lùghdachadh gu 84% ann am fireannaich eòlach ann an coimeas ri smachdan naive aig 1 no 7 d. Chaidh crìochan a lùghdachadh gu 91.6 agus 90% ann am buidhnean fiosraichte an coimeas ri smachd aig 1 agus 7 d resp. Cha robh buaidh sam bith air cuairteachd (D). An plasticity cealla dopamine seo anns an àite (E) agus cuairt-thomhais (F) a chuir casg air naloxone (NLX, n = 8), ach chan eil salann (Sal, n = 7) leigheas nuair a tha iad a ’seasamh aig an aon àm, 7 d às deidh an seisean suathadh mu dheireadh an coimeas ri smachdan gnè-feise (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan gnè-feise na h-aon latha (B, Cno) an coimeas ri smachdan gnèitheach le feòil shaillte agus fireannach a tha a ’làimhseachadh gu feise air naloxone (E, F).

Figear 2. 

Cha do thuit eòlas gnèitheach air meud cuid de rudan ann am subsia nurra dopamine no neurons nondopamine VTA. Raon VTA TH-IR neuron soma (A; ann an μm2) agus cuairt-thomhais (B; ann an μm) ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlasach (dubh) a fhuair eòlas tro bhith a ’seasamh dà uair san t-seachdain seach ann an làithean an dèidh a chèile. Sgìre subsantia nigra TH-IR soma (Cagus) sgìre VTA non-TH-IR soma (Dc) ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlasach (dubh). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan gnè-feise. Dealbhan riochdachaidh a ’sealltainn Nurons (donn) N-IR (donn) ann an VTA de nòta feise (E), agus eòlach (F) fireann. G, H, Ìomhaigh mheudachaidh nas àirde den neuron a tha air a chomharrachadh leis an t-saighead E agus F fa leth. Tha neurons air an rùsgadh Nissl air an sealltainn ann an gorm anns na h-ìomhaighean seo. Ìomhaighean riochdachail a ’sealltainn neurons TH-IR ann an SN de nàdur gnèitheach (I) agus eòlach (J) fireann. Barraichean scèile: E-J, 20 μm.

Tha lùghdachadh gnè de dh ’eòlas air meud rudeigin a’ toirt buaidh air meur-dopamine VTA an urra ri gnìomhachadh gabhaltachd opioid

Chaidh an lùghdachadh de meud dopamine VTA ann an rudeigin soma a dh ’adhbharaicheas gnàth-eòlas gnèithe a bhacadh le naloxone an dìonadair neo-fhaicsinneach MOR, a bha ga rianachadh ro gach seisean measgachaidh. Bha buaidh chudromach aig làimhseachadh naloxone mus do thòisich seiseanan suidseadh air sgìre (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) agus air gluasad gu buaidh mhòr air cuairtF(1,22) = 2.892, p = 0.052). Chaidh eadar-obrachadh cudromach eadar eòlas agus leigheas naloxone a lorg ann an àite (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) agus cuairt-thomhas (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Sheall coimeasan Pairwise gu robh an ìre feise ann an ainmhidhean a chaidh an làimhseachadh airson salann a ’lùghdachadh gu mòr ann an raon agus perimedr neòinean dopamine VTA 7 d às dèidh an seisean measgachaidh mu dheireadh an coimeas ri an fheadhainn fhireann a tha a’ làimhseachadh salann (Fig. 1E, sgìre: p = 0.018; F, cuairt-ùine: p = 0.007). An coimeas ri sin, cha robh beathaichean le naoidhean a tha a ’làimhseachadh le feise diofraichte bho bheathaichean fireann le naloxone (Fig. 1E, sgìre: p = 0.483; F, cuairt-ùine: p = 0.330). A bharrachd, chaidh lùghdachadh mòr a dhèanamh air cuid de na beathaichean saillte eòlasach an taca ri beathaichean naloxone le eòlas (Fig. 1E, sgìre: p = 0.002; F, cuairt-ùine: p = 0.002). Bha a ’bhuaidh seo de naloxone sònraichte airson eòlas gnèitheasach, seach nach tug leigheas naloxone buaidh air ceallan TH-IR taobh a-staigh meud ann an fheadhainn fhireann a bha a’ làimhseachadh nialxone bho nàdur na smachdan saillte (Fig. 1E,F). A bharrachd, cha robh a ’bhuaidh seo de naloxone air lùghdachadh meud rudeigin a dh’ adhbharachadh air sgàth droch bhuaidh aig naloxone air giùlan feise, oir cha robh eadar-giùlain eadar-dhealaichte eadar fireannaich naloxone-agus saline-saillte, ach a-mhàin airson ùine nas fhaide gus tòiseachadh a ’leantainn às dèidh ejaculation (eathar an dèidh ejaculation) ann am fireannaich a tha air an làimhseachadh le naloxone tron ​​chiad agus an còigeamh seisean seata (p = 0.03 agus p = 0.004, fa leth). Bha an fheadhainn fhireann a tha a ’làimhseachadh salann agus naloxone an-sàs ann an sùghadh a-mach anns gach aon de na còig seiseanan suirghe.

Duilgheadas mu dhuais duais co-cheangailte ri eòlas feise

Tha buaidhean gnàth-eòlas air meud VTA dopamine rudeigin mar thoradh air gnìomh EOP anns an VTA coltach ris an fheadhainn a chaidh aithris airson codlaid dhiadhaidh (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007). Mar sin, chaidh deuchainn a dhèanamh air a ’bheil buaidh aig plasticity air a’ bhuannachd cealla VTA dopamine air duais airson an eàrr-chluasag. Gu dearbh, dh'adhbhraich fèin-fhiosrachadh gnèitheach fulangas duais dhuaisean-mara, coltach ri buaidhean de dhuilleagan-cadail (Russo et al., 2007). Dh ’fhàillig air fireannaich a’ eòlas feise a bhith a ’leasachadh CPP airson dòs-droma mairt 0.5 mg / kg; ach, nuair a rinn na fireannaich gnèitheasach CPP suas airson an dòs seo, mar a chaidh a shealltainn le bhith a ’caitheamh barrachd ùine san t-seòmar paidhir morphine ann an coimeas ris an t-seòmar còmhla ri linn am deuchainn (Fig. 3; p = 0.039). Chaith gach buidheann gnè-ghnèitheach agus eòlach ùine a bharrachd mòran nas motha anns an t-seòmar paidhir morphine ann an coimeas ris an t-seòmar saidhbhir le paidhrichean nas àirde de mhoirfinn: 5.0 mg / kg (Fig. 3; Naït: p = 0.029; Exp: p = 0.012) agus 10.0 mg / kg (Fig. 3; Naït: p <0.001; Exp: p = 0.002).

Figear 3. 

Buaidh eòlas feise air duais mairbh-mara. Amannan air an caitheamh ann an seòmraichean saline- (Sal) no morphine- paired (Mòr; 0.5, 5 no 10 mg / kg) anns an iar-deuchainn ann an gnè feise (Naive, n = 10 – 13) no eòlasach (Exp, n = Fir fhireann 9 – 13). Presented dàta air a thaisbeanadh mar ± SEM; * a ’comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri seòmar le paidhir-taobh a-staigh de aon bheathaichean. NS, Gun chudromach.

Tha cuideachadh le bhith a ’faighinn cothrom air giùlan bratach an crochadh air gnìomhachd gabhaltachd opioid

Tha na co-dhùnaidhean gu ruige seo a ’sealltainn gu bheil EOP ag obair anns an VTA tro 5 seiseanan suathadh làitheil ag adhbhrachadh plasticity an neurons dopamine VTA a tha coltach ri buaidhean mairbh cronach no fèin-rianachd heroin (Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Bha sinn a ’smaoineachadh gun robh lughdachadh VTA dopamine gu ìre cudromach airson ionnsachadh a dhuaiseachadh agus gu sònraichte airson cuideachadh gnàthach le giùlan feise a rèir brosnachaidh agus coileanadh. Chaidh an beachd-bharail seo a dhearbhadh le bhith a ’blocadh MOR le bhith a’ cleachdadh naloxone nuair a bha e a ’ceangal ri chèile agus a’ sgrùdadh na buaidhean air cuideachadh le bhith a ’faighinn grèim air giùlan feise tro bhith a’ tachairt thairis air còig seiseanan seata làitheil. Tha dàta air a thoirt a-steach Figear 4 airson na ciad agus an còigeamh seisean measgaichte a-mhàin, oir is iad sin an dàta as fheàrr a tha a ’sealltainn cleachdadh èigneachaidh le bhith a’ giùlain. A bharrachd, thèid deuchainn a dhèanamh air buaidhean fad-ùine co-cheangailte ri leigheas naloxone rè nan seiseanan suirghe air cumail suas cothrom cleachdaidh le bhith a ’faighinn aire bho bhith a’ làimhseachadh deuchainn, nuair a bhios deuchainn ann mu dheireadh thall 1 seachdain nas fhaide air adhart. Figear 4A a ’sealltainn an dealbhadh deuchainn. Bha prìomh bhuaidh chudromach aig seisean suirghe air a h-uile paramadair de ghiùlan feise (druim an fhuaim: F(2,55) = 11.286, p <0.001; latency intromission: F(2,55) = 8.767, p <0.001; latency ejaculation: F(2,55) = 10.368, p <0.001) agus làimhseachadh naloxone air latencies gu mount (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) agus intromission (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Sheall coimeasan Pairwise gun tug leigheas naloxone buaidh air dol-a-mach gnèithe aig a ’chiad seisean measgachaidh oir bha gluasadan fada nas fhaide aig beathaichean naloxone airson a’ chiad shreath (p = 0.002) agus intromission (p = 0.002) an coimeas ri smachdan saillte air a ’chiad latha de choimeasadh. Chaidh buaidh seo naloxone air giùlan gnè a dhùsgadh le eòlas gnèitheasach agus cha robhar ga choimhead ri linn gin de na seiseanan mathaidh a leanas (Clàr 1). A bharrachd air an sin, cha do chuir rianachd naloxone ro gach aon de na còig seiseanan brathaidh bacadh air ciad-cheangal giùlan feise le eòlas feise. A ’leantainn le buaidh daingneachaidh eòlas feise, bha fireannach a bha a’ làimhseachadh salann a ’taisbeanadh lùghdachaidhean nach bu bheag a bhith a’ fàs (Fig. 4B; p = 0.032) cur a-steach (Fig. 4C; p = 0.033) agus ejaculation (Fig. 4D; p <0.001) rè a ’chòigeamh seisean suirghe an coimeas ris a’ chiad seisean suirghe, a chomharraich comas air giùlan gnèitheasach. San aon dòigh, bha fireannaich a bha air an làimhseachadh le naloxone a ’nochdadh latencies gu math nas giorra airson a dhol suas (Fig. 4B; p <0.001), intromission (Fig. 4C; p <0.001), agus ejaculation (Fig. 4D; p = 0.017) air a ’chòigeamh coimeas ris a’ chiad latha. A bharrachd, cha robh an fheadhainn fhireann a bha a ’làimhseachadh naloxone eadar-dhealaichte bho smachdan salann ann an gin de na h-ath-sgrùdaidhean anns a’ chòigeamh seisean seata.

Figear 4. 

Tha pàirt deatamach aig opiooidean aon-ghnèitheach ann a bhith a ’comasachadh giùlan feise ann an èasachadh. A, Dealbhadh deuchainn. B-D, Paramadairean giùlan feise airson fireannaich a tha air an làimhseachadh le salann (sal, bàraichean geala, n = 11) no naloxone (NLX; bàraichean dubha, n = 12) le rianachd eagarach. Tha an dàta a tha ri fhaicinn a ’gluasad gu ìre (B; diogan), cuairteachadh (C; diogan), agus ejaculation (D; diogan) air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a chèile ann an sàsachadh. A thuilleadh air sin, tha dàta air a shealltainn airson an deuchainn mathaidh mu dheireadh, 7 d às dèidh an còigeamh seisean measgachaidh. Tha an dàta air a thaisbeanadh mar chiall ± SEM; tha + a ’comharrachadh eadar-dhealachadh cudromach eadar làithean 1 agus 5 taobh a-staigh leigheis; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr eadar latha deuchainn agus latha 5 taobh a-staigh leigheis; # a ’sealltainn eadar-dhealachadh cudromach eadar buidhnean naloxone agus salann taobh a-staigh latha.

Faic an clàr seo: 

Clàr 1. 

Rianachd Naloxone mus eil iad a ’ceangal ri àireamhan nas anmoiche airson a bhith a’ seasamh agus a ’cur ma sgaoil air a’ chiad latha de sheachnadh

Ann an coimeas ri sin, chuir leigheas naloxone ann an seisean eòlas gnàthach bacadh air cumail suas dòigh-giùlain èasgaidh air a dhèanamh le eòlas air an latha deuchainn deuchainn deireannach. Chaidh an latha deuchainn a dhèanamh 7 d às deidh an seisean suathadh mu dheireadh às aonais stealladh naloxone. Bha an fheadhainn fhireann air an làimhseachadh le salann a ’taisbeanadh an èasachadh a dh’ fhaodadh a bhith an sàs ann an giùlan feise. Gu sònraichte, cha robh eadar-dhealachaidhean idir airson a bhith a ’suidhe, eadar-ghearradh, agus ejaculation eadar-dhealaichte eadar a’ chòigeamh seisean measgachaidh agus an latha deuchainn dheireannach (Fig. 4B – D). Ach, bha na fireannaich a bha a ’làimhseachadh naloxone a’ sealltainn gun robh àrdachadh mòr ann an in-imrichean gu bhith (Fig. 4B; p = 0.033), intromission (Fig. 4C; p = 0.036) agus ejaculation (Fig. 4D; p = 0.049) air latha na deuchainn ann an coimeas ris a ’chòigeamh seisean measgachaidh. Cuideachd, air latha na deuchainn bha e coltach gun robh beathaichean naloxone gu math nas slaodaiche na na fireannaich a tha a ’làimhseachadh salann mar a chithear bho chionn ghoirid gu bhith a’ nochdadh (Fig. 4B; p = 0.017) agus intromission (Fig. 4C; p = 0.043). Mar sin, chuir leigheas naloxone bacadh air cumail suas, ach chan ann air a ’chiad leasachadh, de chuideachadh cleachdaidh le gnìomhachd feise. Tha na toraidhean seo a ’sealltainn gu bheil pàirt deatamach dha plaisteachas dopamine VTA a dh’ obraich le EOP air cur an cèill fad-ùine air ath-dhaingneachadh giùlan duais nàdarra.

Chaidh grunn dheuchainnean smachd a bharrachd a dhèanamh gus faighinn a-mach gun do thachair buaidh stad-ghabhaltachd opioid air call ath-neartachadh san fhad-ùine air giùlan feise neo-eisimeileach bho dìth rianachd naloxone air an latha deuchainn deuchainn deireannachFig. 5A,B), gun robh iad gu sònraichte a thaobh call cumail suas fad-ùine, ach cha robh geàrr-ùine ann an cuideachadh le bhith a ’ceangal le chèile (Fig. 5E,F), nach robh iad air an adhbharachadh le bhith a ’toirt a-steach gach latha gu naloxone leotha fhèin (Fig. 5C,D), agus cha robh iad air an adhbhrachadh le call duais gnèitheach ann am fireannaich a bha a ’làimhseachadh naloxone (Fig. 5G,H). An toiseach, a bhith a ’sealltainn nach robh giùlan gnàthach atharraichte air an deuchainn deuchainn mu dheireadh air sgàth dìth naloxone, chaidh naloxone no salann a thoirt seachad air an latha deuchainn deuchainn mu dheireadh dha beathaichean a fhuair matadh còmhla ri naloxone fhad's a fhuair iad eòlas feise (Fig. 5A). Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air cùisean-à-beul gu bhith a ’cur suas (Fig. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) agus intromission (Clàr 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Cha robh buaidh mhòr sam bith aig latha suirghe air latency gu ejaculation (Clàr 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, cha robh leigheas naloxone aig àm suirghe a ’toirt buaidh air cuideachadh giùlan feise sna còig seiseanan eòlas gnàthach. Tha an dà bhuidheann (buidhnean a tha a ’làimhseachadh salann agus naloxone mar a chaidh a shuidheachadh le leigheas a fhuaireadh aig àm an deuchainn mathaidh mu dheireadh; a fhuair naloxone nuair a bha iad a’ seasamh) a ’nochdadh giùlan gnàthaichte furasta air an latha 5 an coimeas ris an latha 1 agus a’ nochdadh gu bheil na h-ùineachan gu math nas giorra sa chiad àite (Fig. 5B; salann: p = 0.033; naloxone: p = 0.014) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.034; naloxone: p = 0.026). Cha b ’ann na beathaichean a fhuair an dara cuid naloxone no salann air latha na deuchainn mu dheireadh cuairtean fada na bu mhotha.Fig. 5B; salann: p = 0.018; naloxone: p = 0.029) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.019; naloxone: p = 0.020) an coimeas ris a ’chòigeamh latha de eòlas suirghe. Mar sin, cha robh buaidh aig rianachd naloxone no salann air latha an deuchainn dìreach mus do ghabh iad ri suathadh buaidh buaidh naloxone aig seiseanan eòlas gnàthach agus bha cuideachadh le bhith a ’dèiligeadh ri gluasad gnàthach co-ionann ris an fheadhainn a chithear ann an ainmhidhean nach d’fhuair air an latha deuchainn deuchainn mu dheireadh (Fig. 4).

Figear 5. 

Tha opioids in-ghnèitheach cudromach ann an cur an cèill fad-ùine air cuideachadh èasgaidh air giùlan feise. A, Deagh deuchainn airson deuchainn gus buaidh leigheas NLX air latha na deuchainn a dhearbhadh. B, Mount latency air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a chèile de cho-aonadh agus latha deuchainn deuchainn deireannach (Deuchainn) a ’leantainn air ais le stealladh galair (glas) no naloxone (dubh). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM. * a ’sealltainn eadar-dhealachadh cudromach eadar an latha 1 agus an latha 5 taobh a-staigh leigheis. # a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr eadar latha deuchainn agus latha 5 taobh a-staigh an leigheis. C, Dealbhaich deuchainn airson deuchainn gus deuchainn a dhèanamh air buaidh ro-leigheas naloxone gun eòlas gnèitheasach air gintinn. D, Mount latency air an latha deuchainn mathaidh mu dheireadh, 7 làithean a ’leantainn latha 5 de ghoirteachadh saillte no naloxone nuair nach eil briodadh ann. Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM. E, Dealbhadh deuchainn airson deuchainn gus dearbhadh an tug leigheas naloxone buaidh air taisbeanadh geàrr-ùine de ghiùlan gnèitheach le beathaichean ann an ainmhidhean a dh ’eòlas feise. F, Mount latency air latha 1 agus latha 5 de chòig latha an dèidh a chèile de cho-aonadh agus latha deuchainn deuchainn deireannach, 1 latha an dèidh latha 5 ann an làthaireachd stealladh salainn (glas) no naloxone (dubh). Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM. * a ’sealltainn eadar-dhealachadh cudromach eadar an latha 1 agus an latha 5 taobh a-staigh leigheis. G, Dealbhadh deuchainneach airson deuchainn gus dearbhadh an robh leigheas naloxone a ’cuir casg air buaidhean luachmhor giùlan feise. H, Ùine a tha air a chaitheamh ann an seòmar còmhla (ann an diogan) ri linn an ro-sheach (geal) agus iar-dheuchainn (dubh) airson beathaichean a tha a ’faighinn naloxone no salann mus dèan iad briodadh. Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ris an fheadhainn a bu chomasaiche.

Faic an clàr seo: 

Clàr 2. 

Is e dàta a chithear an seo gu bheil buaidh air a bhith aig in-smachd agus ejaculation (diogan) bho dheuchainnean smachd a chaidh a dhèanamh gus faighinn a-mach gun do thachair buaidhean blogaichean MOR air call ath-neartachadh san fhad-ùine air giùlan feise neo-eisimeileach bho dìth rianachd naloxone air an latha deuchainn deuchainn deireannach

Gus faighinn a-mach an e leigheas naloxone a bh ’e nuair a bh’ e air a phòsadh ri eòlas gnèitheasach agus nach deach ath-aithris gu naloxone per se a dh ’adhbharaich droch ghiùlan feise 7 d às deidh an leigheas mu dheireadh, fhuair beathaichean gnèitheasach ginteachd còig nòsan gach latha de naloxone no in-stealladh salann mus do chuir iad deuchainn deuchainn mu dheireadh 7 d nas fhaide air adhart (Fig. 5C). Cha deach eadar-dhealachaidhean mòra sam bith a lorg airson paramadachadh suathaidh eadar buidhnean saillte agus naloxone a chaidh a ro-ullachadh (Fig. 5D; streap; latency intromission: saline 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; gleusadh ejaculation: salann 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Tha na toraidhean sin a ’sealltainn nach eil naloxone leis fhèin gu leòr airson giùlan gnèitheasach ath-nuadhachadh, coltach ri dìth buaidh naloxone air placity dopamine VTA.

Tha sinn a ’smaoineachadh gum bi làimhseachadh naloxone ann an togail eòlas gnàthach a’ toirt buaidh air an dòigh anns a bheil gnàths giùlan feise air adhbharachadh le gnè feise. Gus seo a dheuchainn a-rithist, chaidh deuchainn a dhèanamh air buaidh leigheas naloxone aig àm suirghe air giùlan gnèitheasach às dèidh sin tro dheuchainn mathaidh mu dheireadh, a chaidh a dhèanamh a-mhàin 1 d às dèidh nan mathanachadh mu dheireadh (dealbhadh deuchainneach; Fig. 5E). Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air cnoc (Fig. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) agus latencies intromission (Clàr 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Cha robh prìomh bhuaidh chudromach aig an latha air latency ejaculation (Clàr 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Dìreach mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, sheall a h-uile fireannach (a dh ’aindeoin leigheasan salann no naloxone) gu bheil iad a’ dol gu h-èifeachdach ri linn nan còig seiseanan eòlas gnàthach a sheall na h-iondachaidhean gu math nas giorra gu bhith (Fig. 5F; salann: p = 0.002; naloxone: p = 0.018) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.006; naloxone: p = 0.009) air an latha 5 an coimeas ris an latha 1. Mar an ceudna, chaidh giùlan feise a chaidh a dhèanamh a shealltainn air latha na deuchainn an coimeas ris an latha 1 air a chomharrachadh le sgeadachaidhean gu math nas giorra gu bhith a ’nochdadh (Fig. 5F; salann: p = 0.001; naloxone: p = 0.020) agus intromission (Clàr 2; salann: p = 0.004; naloxone: p = 0.009). Nas cudromaiche, cha robh làimhseachadh naloxone aig àm suirghe a ’toirt buaidh mhòr air cuideachadh gnàthach gnè le bhith a’ giùlain a-mach nuair a chaidh deuchainn a dhèanamh air 1 d an dèidh gnàth-eòlas, neo-eisimeileach bho leigheas naloxone air an latha deuchainn deuchainn seo.

Mu dheireadh, rinn sinn deuchainn air a ’chomas gum bi buaidhean teannachaidh naloxone air an abairt fad-ùine de ghiùlan feise furasta mar thoradh air buaidh bacaidh naloxone air feartan buannachdail giùlan gnèitheasach. Ach, cha do dh ’atharraich naloxone a chaidh a rianachd dìreach mus do thòisich iad a’ briodadh cruthachadh CPP airson matadh (Fig. 5G), a ’moladh nach do dh'atharraich leigheas naloxone duais gnàthach. Bha an dà chuid buidhnean a tha a ’làimhseachadh salann agus naloxone nan CPP cudromach airson giùlan feise mar a chaidh a chomharrachadh le ùine a bharrachd a chaidh a chosg ann an seòmar le càraidean feise (Fig. 5H; salann: p = 0.038; naloxone: p = 0.002) rè an iar-dheuchainn an coimeas ris an ro-theachd. Mar sin, chan eil naloxone a ’toirt droch bhuaidh air cumail suas giùlan gnàthach le bhith a’ cuir casg air an duais co-cheangailte ri giùlan feise.

Tha cuideachadh le giùlan feise an crochadh air gnìomh EOP anns an VTA

Dearbhadh gu bheil EOP ag obair gu sònraichte anns an VTA gus cuideachadh le giùlan gnèitheil san fhad-ùine a bhrosnachadh, an dealbhadh deuchainn a tha air a mhìneachadh ann an Figear 3A chaidh a dhèanamh a-rithist le in-laigsean naloxone taobh a-staigh VTA seach in-steallaidhean cunbhalach. Bha na toraidhean co-ionann ris an rianachd eagarach a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd. Bha prìomh bhuaidh chudromach aig latha suirghe air gach ìre de ghiùlan feise (Fig. 6A, a ’seasamh mun cuairt: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, latency latency: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, ejaculation latency: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) agus làimhseachadh naloxone taobh a-staigh VTA air cùisean èiginn gu bhith a ’suidhe (F(1,33) = 7.345, p = 0.011) agus intromission (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Cha do chuir naloxone taobh a-staigh VTA bacadh air cuideachadh furasta a dhèanamh le giùlan feise tro na 5 d air a bhith a ’maidseadh, oir sheall fireannaich a bha air an làimhseachadh le naloxone lughdachadh ann an gluasad gu bhith (Fig. 6A; p = 0.001), intromission (Fig. 6B; p <0.001), agus ejaculation (Fig. 6C; p = 0.001) air an latha 5 an coimeas ris an latha 1. Cha robh an fheadhainn fhireann a tha air an làimhseachadh le naloxone diofraichte bho fhir air an làimhseachadh le salann air a ’chòigeamh là de bhith a’ tighinn còmhla ri gin de na h-athraichean. Dh'adhbhraich làimhseachadh taobh a-staigh VTA naloxone, mar rianachd siostaigeach, meudachadh mòr (Fig. 6A; p <0.001) agus latencies intromission (Fig. 6B; p <0.001) air a ’chiad latha suirghe an coimeas ri fireannaich a bha air an làimhseachadh le saline, nach deach fhaicinn ann an seiseanan mataidh às deidh sin (nuair nach robh eadar-dhealachadh eadar fireannaich le làimhseachadh naloxone agus saline). B ’e aon bheachd ris nach robh dùil, anns an deuchainn seo, nach do sheall fireannaich a bha air an làimhseachadh le saline comasachadh staitistigeil a thaobh comasachadh latencies mount no intromission (mar a chaidh a shealltainn anns a h-uile deuchainn a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd), agus cha deach ach latency ejaculation a ghiorrachadh air a’ chòigeamh latha an coimeas ris a ’chiad latha (saline: p = 0.001).

Figear 6. 

Tha opioids in-sheòrsach anns an VTA a ’rèiteachadh cuideachadh furasdaichte ann an giùlan feise agus a chumail suas san fhad-ùine. Paramadairean giùlan feise airson fireannaich a tha air an làimhseachadh le salann (sal, bàraichean geala, n = 8) no NLX (bàraichean dubha, n = 6) le rianachd taobh a-staigh VTA. Tha an dàta a tha ri fhaicinn a ’gluasad gu ìre (A), intromission (B), agus ejaculation (Cc) air làithean 1 agus 5 de chòig latha an dèidh a ’bhàsachadh. A thuilleadh air sin, tha dàta air a shealltainn airson an latha deuchainn deuchainn deireannach, 7 d an ath latha 5 às aonais stealladh saillte no naloxone. Tha dàta a ’riochdachadh ± SEM; tha + a ’comharrachadh eadar-dhealachadh cudromach eadar làithean 1 agus 5 taobh a-staigh leigheis; * a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr eadar latha deuchainn agus latha 5 taobh a-staigh leigheis; # a ’sealltainn eadar-dhealachadh cudromach eadar buidhnean naloxone agus Sal taobh a-staigh latha. Dealbhannan sgeadaichte de roinnean VTA crùinteach (H, −4.60; I, −5.00; J, −5.25 bho bregma) a ’comharrachadh làraich stealladh taobh a-staigh VTA dha na h-ainmhidhean uile anns an Deuchainn 5 (salann; geal; naloxone, dubh, a dhìth, glas), a ’cleachdadh dealbhan teamplaid bho Mhapaichean Brain Swanson (Swanson, 2004). Bha Cannulas dà-thaobhach, ach tha làraich stealladh air an riochdachadh gu neo-thaobhach airson cothrom an taisbeanaidh. fr, Fasciculus retroflexus; ML, Medial lemniscus; SN, subsia nigra.

Chuir leigheas taobh-a-steach naxolone taobh a-staigh VTA bacadh air cumail suas giùlan feise furasta a chaidh a choimhead ann am fireannaich a bha a ’faighinn eòlas gnàthach, coltach ri buaidhean naloxone siostamach. Gu sònraichte, air an latha deuchainn mu dheireadh bha fireannich nas fhaide aig fir a bha a ’làimhseachadh naloxone a bhith a’ suidhe (Fig. 6A; p = 0.011), intromission (Fig. 6B; p = 0.010), agus ejaculation (Fig. 6C; p = 0.015) an coimeas ris a ’chòigeamh seisean seata agus an coimeas ris an fheadhainn fhireann air an latha deuchainn dheireannach (Fig. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). An coimeas ri sin, cha robh beathaichean air an làimhseachadh le salann eadar-dhealaichte bho àm gu àm gu bhith a ’suidhe agus gluasad eadar an latha deuchainn deireannach agus latha 5 a thaobh gintinn. Bha na buaidhean seo gu sònraichte airson lìbhrigeadh naloxone don VTA, mar fhireannach le làraich canhaidh faisg air làimh ach gun a bhith ag amas air an VTA (Fig. 6D; n = 3) a ’nochdadh cuideachadh fad-ùine air giùlan feise coltach ri smachdan air an làimhseachadh le salann (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 agus gu math eadar-dhealaichte an coimeas ri beathaichean naloxone taobh a-staigh VTA air an latha deuchainn deuchainn deireannach (ML, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

Tha feum air gnìomh EOP airson gnìomhachadh neral co-cheangailte ri cuislean a tha co-cheangailte ri gnè

Stèidhichte air na toraidhean gu ruige seo, bha sinn a ’tuigsinn gun robh gnìomhachadh EOP ann am VTA aig àm suirghe agus lùghdachadh meud VTA às dèidh sin riatanach airson a bhith a’ comharrachadh sàth brosnachaidh airson brosnachadh luachaidh le taic agus mar sin, a ’cumail suas le giùlan feise. Gus deuchainn a dhèanamh air an beachd-bharail seo chaidh sgrùdadh a dhèanamh air buaidhean casg air luchd-gabhail opioid nuair a bhios iad a ’faighinn cothrom air gnìomhachd neraltach le bhith ag adhbharachadh bho bhith a’ faighinn fiosrachadh mu dhuilgheadasan co-theacsail le bhith ag adhbharachadh duais gnèitheach (leigheasan co-cheangailte ri gnè). Bha beathaichean gnèitheach cuideachd fosgailte ri leigheasan àrainneachdail, ach cha robh iad sin co-cheangailte ri eòlas suirghe roimhe, agus mar sin bha iad neo-phàirteach. Mu dheireadh, chaidh ìrean pERK bun-loidhne a shònrachadh ann am buidhnean smachd gnèitheach agus naive a dh'fhuirich ann an cèidsichean na dachaigh agus nach robh a ’faighinn cuisean sam bith (-CoN Cue). A ’daingneachadh agus a’ leudachadh nan toraidhean a fhuaireadh roimhe (Balfour et al., 2004), faicsinneachd dha cuirp co-theacsach co-cheangailte ri duais gnè roimhe a chuir mòran a-steach ann an abairt pERK ann am fireannaich le eòlas gnèitheach ann an NAc (Fig. 7) agus mPFC (Fig. 8A – C), ach cha robh e ag adhbharachadh gnìomhachadh neuronal ann am BLA (Fig. 8Dno) CPu (chan eil dàta air a shealltainn). Bha prìomh bhuaidh bho bhith a ’toirt cue gu ìre ann am bunait NAc (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), agus PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), agus làimhseachadh naloxone ann am bunait NAc (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), agus PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Bha eadar-obrachadh mòr ann am bun-ìre NAc (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014), agus IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). An toiseach, bha àrdachadh susbainteach bho cheangal Cue a ’ceangal ri suathadh a’ fàs nas motha ann an ainmhidhean a fhuair làimhseachadh co-cheangailte ri salann (Exp Sal ​​+ Cue) an coimeas ri smachdan nach robh fosgailte do chuesan agus a thugadh bhon chèidse dachaigh (Exp Sal-No Cue) ann am bunait NAcFig. 7A; p <0.001), agus fo-roinnean mPFC ACA (Fig. 8A; p = 0.001), PL (Fig. 8B; p = 0.003), agus IL (Fig. 8C; p = 0.029). An coimeas ri sin, ann an ainmhidhean gnèitheach le feòil shaillte, cha robh mothachadh dha na leigheasan co-theacsail, nach robh co-cheangailte ri duais feise, a ’toirt air falbh PK ann an ceàrnaidhean sam bith den eanchainn (Naive Sal + Cue ann an coimeas ri naive Sal-No Cue; Figsichean. 7, 8), a ’taisbeanadh gu bheil inntrigeadh air pERK gu sònraichte airson a bhith a’ nochdadh nan leigheasan co-cheangailte ri eòlas gnèitheach. A bharrachd, cha do dh'atharraich gnàth-eòlas gnèitheas an abairt bhun-ìre pERK ann an gin de na roinnean na h-eanchainn, oir cha robh eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean a chaidh a thoirt bho chàraidean na dachaigh, co-dhiù feòlmhor no eòlasach, agus làimhseachadh le salann no naloxone.

Figear 7. 

Tha feum air gnìomh opiogen de-ghnèitheach airson gnìomhachadh niùclach ann an NAc air a stiùireadh le leigheasan co-cheangailte ri gnè. Àireamhan de cheallaichean pERK-IR gach mm2 anns a ’bhunait niùclas accumbens (A) agus slige (Bc) ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlach (Exp; dubh) a chaidh a dhèanamh a-mach le NLX siostamach no salann (Sal) ri linn seiseanan suirghe (fireann fireann) no seiseanan làimhseachaidh (fireann fireann). Bha buidhnean an dàrna cuid airson cuiridhean co-theacsail (Cue), a bha nan comharraidhean ceangailte le seilleanan ann am fireannaich Exp agus cuisean neodrach ann an ainmhidhean sìtheil, no air an toirt bho chàraichean dachaigh (No Cue; air a chomharrachadh le dìth bile-Cue). Tha an dàta air a thaisbeanadh mar chiall ± SEM; tha * a ’comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan glaiste a tha fosgailte dhan t-salann (Naive Sal-No Cue agus Exp Sal-No Cue); indicates a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri buidheann Exp a tha air a làimhseachadh le sùil bho na cuilean (Exp Sal ​​+ Cue). Ìomhaighean riochdachail de cheallan pERK-IR gach mm2 ann am bunait NAc de dh'fhir gnè le Sal (C, D) no NLX (E, F) a bha air an toirt bhon chèidse dachaigh (Chan eil Cue, C, E), no air an nochdadh ris na leigheasan co-cheangailte ri meatadh (Cue; D, F). N = 4 gach buidheann ach a-mhàin Naive NLX (Chan eil Cue), n = 3. ac, Anterior commissure. Bàr scèile, 100 μm.

Figear 8. 

A ’bhuaidh aig naloxone air a bhith a’ co-fhreagairt abairt PERK le gluasad ann an roinnean eile VTA. Àireamhan de cheallaichean pERK-IR gach mm2 ann an beathaichean gnèitheach (geal) agus eòlach (Exp; dubh) a chaidh a dhèanamh a-mach le NLX siostamach no salann (Sal) ri linn seiseanan suirghe agus air an leigeil a-steach do na leigheasan co-theacsail (Cue) no do chèidse dachaigh (gun leigheasan) anns an ACA (A), PL (B), IL (C), agus BLA (D). Tha an dàta a ’riochdachadh mean SEM; tha * a ’comharrachadh eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan glaiste a tha fosgailte dhan t-salann (Naive Sal-No Cue agus Exp Sal-No Cue); # a ’sealltainn eadar-dhealachadh mòr an coimeas ri smachdan gnèitheach neo-shunndach a tha air an leigheas le Sal (Naive Sal + Cue).

Mar thaic ri ar beachd-bharail, tha leigheas naloxone aig àm feise gnèitheach a ’toirt a-steach inntrigidh gu ìre nas ìsle tro na leigheasan co-cheangailte ri gnè. Cha robh eadar-dhealachadh pERK anns na fireannaich làn-aithnichte seo a tha làimhseachadh le Naloxone (Exp NLX + Cue) eadar-dhealaichte bho nochdadh bun-loidhne pERK ann an gin de na buidhnean smachd feise no fiosrachail a thugadh bho cèidsichean dachaigh (Naive Sal-No Cue no Naive NLX- Chan eil Cùil). A bharrachd air sin, bha abairt PERK anns na fireannaich làn-fhuaimte air an làimhseachadh le naloxone (Exp NLX + Cue) gu math nas ìsle an coimeas ri beathaichean eòlasach cue air an còmhdach le saline (Exp Sal ​​+ Cue) sa chridhe NAc (Fig. 7A; p = Fo-roinnean 0.002) agus mPFC (Fig. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

Ann am slige NAc, cha tug am anailis ANOVA dà-shligheach buaidh chudromach gu staitistigeach air na factaran a tha a ’toirt a-mach fiosrachadh agus leigheas naloxone. Ach, sheall coimeas pairwise gun do chuir foillseachadh cue air adhart pERK anns a ’bhuidheann gnèitheasach le tinneas saillte (Exp SAL + Cue) ann an coimeas ris a’ bhuidheann smachdachaidh neo-nathrach bho Saline a tha fosgailte do ghabhar (Fig. 7B; Naive SAL-No Cue: p = 0.0163).

Deasbaireachd

Tha an sgrùdadh a th ’ann an-dràsta a 'sealltainn gun do dh'adhbhraich EOP ag obair anns an VTA ann an giùlan feise, giùlan duais nàdarra, lùghdachadh làidir ach neo-ghluasadach ann am meud cuid de cheallan dopamine VTA. Cha deach an lùghdachadh ann am meud soma a thoirt am follais ann an neurran nach robh dopamine VTA, no ann an neurran dopamine anns a ’bhuil prìseil faisg air làimh, a tha a’ moladh gun robh an atharrachadh seo sònraichte do cheallan dopamine VTA. Bidh an plasticity VTA dopamine seo coltach ris an fhear seo a dh ’obraicheas an sgaoileadh dà-shùileach cronach (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011agus agus gun do dh ’adhbharaich e fulangas coltach ris an duais sin a’ toirt taic do dh ’opiate exogenous (moirfinn). Sheall sinn gu bheil VTA dopamine plasticity riatanach airson a bhith a ’cumail suas san fhad-ùine (cumail suas) ach chan eil geàrr-ùine (leasachadh), ath-neartachadh air giùlan gnèitheasach agus gnìomhachd niùcrach a tha ceangailte ri cue (pERK) ann an roinnean cuimsichte VTA: NAc agus mPFC. Tha na toraidhean seo nan comharra air àite airson plaisteas dopamine VTA anns an ùine fhada a ’sealltainn an tàladh brosnachaidh a tha ann airson comharran duaisiche nàdurrach nàdurra no cuimhne dhuaisean.

Chaidh a chlàradh gu math gum bi cleachdaidhean gnàthach a ’toirt buaidh air giùlan feise an dèidh sin, a’ toirt a-steach gluasad nas luaithe gu bhith a ’tòiseachadh air suathadh agus barrachd coileanaidh (Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Tha an cothromachadh no an daingneachadh de ghiùlan feise air a chumail suas airson co-dhiù 28 d an dèidh maidseadh (Pitchers et al., 2012). A thuilleadh air an sin, chaidh a shealltainn gun robh giùlan gnèitheasach agus sanasan gleusach ro-innseach air duais dhuais co-cheangailte ri in-imrich san VTA agus gnìomhachadh neuronal a thòiseachadh tro shiostam mesolimbic, a ’gabhail a-steach ann an VTA (dopamine agus nuropamine neurons), NAc, PFC, agus BLA (Balfour et al., 2004, 2006). Tha e fìor chudromach gu bheil niùclairean dopamine VTA stèidhichte ann a bhith ag ionnsachadh agus a ’sònrachadh stòras brosnachail brosnachaidhean co-cheangailte ri duaisean (Berridge agus Robinson, 1998; Berridge et al., 2009; Flagel et al., 2011) agus tha iad riatanach airson ro-innse duais (Schultz, 2010). Tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ leudachadh air an eòlas a th ’againn an-dràsta le bhith a’ sealltainn gu bheil neuroplasticity VTA a ’toirt seachad duais dha-rìribh riatanach dha na dreuchdan seo, agus tha e an urra ri gnìomhachadh MOR le EOP anns an VTA. Chan eil fios againn an-dràsta cò an EOP an ligand MOR a bhios ag obair sa VTA rè giùlan feise fireann. Ged a tha β ceann-droma agus enkephalin air a bhith ceangailte ri brosnachadh brosnachaidh airson luchd-neartachaidh bìdh (Hayward et al., 2002), tha seo fhathast ri stèidheachadh airson giùlan feise fireann. Tha sinn air sealltainn roimhe seo nach eil niùclairean β-endorphin air an cur an gnìomh aig àm suirghe, agus chan eil àrdachadh ann am POMC mRNA; mar sin, a ’moladh gur dòcha nach e or endorphin an EOP riatanach a tha ag obair sa VTA aig àm suirghe (Davis et al., 2007). Bha am plasticity VTA dopamine seo riatanach airson gnìomhachd niùcrach anns a ’bhuil, mPFC, NAc, agus VTA às deidh dha a bhith an làthair aig na leigheasan àrainneachdail a dh’ bhuanaicheadh ​​na dhuais. A bharrachd, bha VTA dopamine plasticity riatanach airson a bhith a ’toirt a-steach gluasad is coileanadh barrachd air giùlan gnèitheil san ùine-fhada. An coimeas ri sin, cha robh feum air neuroplasticity VTA air adhbharachadh le eòlas gnèitheach airson freagairt gràineanach mar dhuais feise (air a dhearbhadh le CPP) agus furasdachadh geàrr-ùine de bhrosnachadh gnèitheasach (aig àm gnàth-eòlas no 1 d nas fhaide air adhart) a dh ’fhuireach, a dh’ aindeoin masgadh MOR nuair a bha iad ri chèile (Mehrara agus Baum, 1990). An àite sin, tha an dàta a ’moladh gum bi neuroplasticity VTA dopamine a’ toirt san fhad-ùine (7 d an dèidh na h-eòlas gnè mu dheireadh; Pitchers et al., 2012) a bhith a ’taisbeanadh“ miann ”de dhuais feise agus barrachd fhreagairtean brosnaichte do chupanan suathadh (Miller agus Baum, 1987; Berridge agus Robinson, 1998).

Nochd beathaichean le eòlas gnàthach tar-fhulangas airson duais morphine, coltach ri buaidhean ruith cuibhle ann an luchagan, giùlan eile a bheir duais seachad, buaidh air a bhacadh le leigheas naloxone (Lett et al., 2001, 2002agus agus iad an crochadh a bhith an crochadh air plaidigs dopamine cealla VTA (toraidhean làithreach). Coltach ri duaisean nàdarra, bidh còmhdachadh dà-chànanach air na h-opiates mar morphine no heroin ag adhbharachadh lùghdachadh gluasadach de mheud dopamine VTA (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). A bharrachd, tha sgaoileadh fosgailte le amannan tarraing a-mach goirid ag adhbhrachadh fulangas duaise, a dh ’adhbharachadh le bhith a’ dèanamh feum de dh ’nas motha de dhrogaichean gus buidhnean duais a chruthachadh (Shippenberg et al., 1987; Russo et al., 2007), agus bidh e ag adhbharachadh gum bi beathaichean fèin-rianachd a ’toirt air falbh an drogaichean (Ahmed et al., 2000; Walker et al., 2003). Mar sin, bidh EOP agus opiates ag obair air fo-fhiaclan neomrach cumanta gus gabhail ri fulangas duais ann an tarraing air ais tràth, a dh ’fhaodadh a bhith a’ nochdadh inneal dìth dachaigh dìomhair airson cur an aghaidh brosnachadh le bhith ag ath-nochdadh (Koob agus Le Moal, 2005). An coimeas ri seo, aig àm bacadh dhrogaichean de dhrogaichean fad-ùine, thèid fulangas a thilleadh gu cugallachd do dh ’stuth gèillidh don druga (Na Hearadh agus Aston-Jones, 2003; Aston-Jones and Harris, 2004; Na Hearadh agus Gewirtz, 2004). Gu h-inntinneach, chaidh faighinn a-mach gun d ’fhuaradh lorg air gnè feise le bhith a’ cumail greim air gnè feise de 7 – 28 d d ization an-thar-mhothachadh airson duais leigheas-inntinn (Pitchers et al., 2010a), a tha an urra ri abairt air deltaFosB le bhith a ’ceangal ri chèile agus gabhadan dopamine gnìomhachadh 1 anns an NAc (Pitchers et al., 2013). Air an adhbhar sin, tha fèin-fhiosrachadh air duais dhuaisean co-cheangailte ri diadhachd agus sàrachadh inntinn co-ionann aig an aon àm, ged a tha deuchainn fhathast ann air ùine nas fhaide a ’toirt buaidh air foill air duais dhuaisean-mara. Tha sinn a ’dearbhadh gum faodar na buaidhean eadar-dhealaichte sin air duais dhrogaichean a bhith air an eadar-mheadhanachadh le diofar sheòrsan de phlastaig niùclach ann an diofar roinnean den t-siostam mesolimbic: tha gnìomh VTA EOP agus plasticity dopamine a’ eadraiginn an fòirneart duais taobhach (sgrùdadh làithreach), fhad's a tha NAc deltaFosB a ’cur na h-innsidh sensitimulant (Pitchers et al., 2013). Faodaidh an dà thachartas seo cur ri àrdachadh ìre de dhrogaichean a ghabhail thairis (Ahmed agus Koob, 1998, 1999; Ahmed et al., 2000, 2002, 2003; Walker et al., 2003).

Chan eil fios againn fhathast mu na dòighean moilecular a dh ’fheumas EOP buaidh a thoirt air niùclairean dopamine VTA fhad's a tha iad a’ giùlan duais nàdarra. Tha an t-slighe IRS2-Akt-mTORC2 mar eadar-mheadhanair mòr de mheud air a lùghdachadh anns an VTA air adhbhrachadh le mearachd mar as trice (Jaworski et al., 2005; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Gabhaidh atharrachadh sam bith a thaobh rianachd morphine air a thionndadh ann am meud neurran dopamine san VTA a bhacadh le in-theachdan taobh a-staigh VTA de fhactar neurotrophic a thig bhon eanchainn (BDNF; Sklair-Tavron agus Nestler, 1995). Cuiridh BDNF an t-slighe seo air adhart tro chomharradh TrkB (Russo et al., 2007), gabhadan kinase le dlùth-cheangal ri BDNF agus pàirt de shlighe IRS2-Akt (Seroogy agus Gall, 1993; Numan agus Seroogy, 1999), agus air a chur an cèill air niùclairean dopamine agus GABA anns a ’VTA. Bidh briseadh sìos nan diofar phàirtean de shlighe IRS2-Akt a ’cleachdadh teicneòlas tar-chuir vector viral a’ samhlachadh na buaidhean bho bhith a ’faighinn a-mach mu dh’ opiate. A thuilleadh air an sin, faodar buaidh an leigeil a-mach air sàrachadh tro bhith a ’toirt air ais an slighe comharrachaidh seo (Russo et al., 2007agus) gum bi cur às do phàirt de mTORC2 a ’cur casg air lughdachadh dopamine VTA aig ìre moirf-muine (Mazei-Robison et al., 2011). Mar sin, tha obair a chaidh a dhèanamh roimhe a ’sgrùdadh buaidh meud de dhuilleagan-cadail aig ìre VTA dopamine soma a’ sealltainn gu bheil lughdachadh air a ’ghluasad moirfein air slighe IRS2-Akt-mTOR gu leòr agus riatanach airson seo a thoirt gu buil (Mazei-Robison agus Nestler, 2012). Mar sin, tha e buailteach a bhith a ’beachdachadh gun toir BDNF agus slighe IRS2-Akt-mTORC2 buaidh mar seo air eòlas gnèitheach air neuroplasticity VTA dopamine.

Ann an co-dhùnadh, sheall an sgrùdadh làthaireach gu bheil neuroplasticity VTA air adhbharachadh le eòlas le giùlan duaisichte nàdarrach, gu h-àraid le bhith a ’leantainn air adhart le feise feise fireann. Gu sònraichte, bidh EOP ag obair anns an VTA gus meud dopamine soma a lùghdachadh, a thathar a ’gabhail a-mach gu bhith co-cheangailte ri barrachd eireachdais niùclach agus nas lugha de thoradh dopamine a dh'adhbhraicheas siostam hypodopaminergic, agus ag atharrachadh obrachadh siostam mesolimbic mar fhreagairt do chungaidhean a tha ro-innse air duais feise. A bharrachd, tha neuroplasticity VTA deatamach airson brosnachadh brosnachaidh agus duais cuimhneachaidh, ach chan ann airson buaidh ghormach giùlan feise. Mu dheireadh, tha buaidh aig neuroplasticity VTA air adhbhrachadh le giùlan duais nàdarra le ùine ghoirid de dhuais a bhith air a thoirt suas air duais duais comhla agus dh ’fhaodadh e buaidh a thoirt air so-leònteachd leasachadh tràilleachd dhrogaichean.

Footnotes

  • Air fhaighinn san Fhaoilleach 12, 2014.
  • An t-ath-bhreithneachadh a fhuaireadh a thàinig sa Chèitean 17, 2014.
  • Gabhail ri Cèitean 20, 2014.
  • Fhuair an rannsachadh seo taic bho thabhartasan bho Institiud Rannsachadh Slàinte airson Canada gu LMC agus na Saidheansan Nàdarra agus Comhairle Rannsachaidh Innleadaireachd gu KKP

  • Bidh na h-ùghdaran a ’foillseachadh nach eil com-pàirtean ionmhasail a tha farpaiseach.

  • Bu chòir litrichean a chur gu Dr Lique M. Coolen, Oilthigh Ionad Meidigeach Mississippi, Roinn Eòlas-inntinn agus Biophysics, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [post-d fo dhìon]

iomraidhean

    1. Agmo A

    (1997) Giùlan feise fireann fireann. Protoc Brain Res Brain Res 1: 203-209.

    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1998) Eadar-ghluasad bho bhith a ’gabhail a-steach gu ìre meadhanach gu cus dhrogaichean: atharrachadh ann an àite suidhichte ban-fhiadhaich. saidheans 282: 298-300.

    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1999) Àrdachadh fad-ùine anns a ’phuing suidhichte airson fèin-rianachd cocaine an dèidh àrdachadh ann an radain. Eòlas-inntinn 146: 303-312.

    1. Ahmed SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Àrdachadh leantainneach anns an dealas airson heroin a thoirt a-steach ann an radain le eachdraidh de dhrogaichean dhrogaichean. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

    1. Ahmed SH,
    2. Kenny PJ,
    3. Koob GF,
    4. Markou A

    (2002) Fianais neurobio-eòlasach airson allostasis hedonach co-cheangailte ri bhith ag àrdachadh cleachdadh cocain. Nat Neurosci 5: 625-626.

    1. Ahmed SH,
    2. Lin D,
    3. Koob GF,
    4. Parsons LH

    (2003) Chan eil meudachadh ann an fèin-rianachd cocain an crochadh air niùclas cocain air atharrachadh gu ìre agus a ’àrdachadh ìrean dopamine. J Neurochem 86: 102-113.

    1. Aston-Jones G,
    2. Na Hearadh GC

    (2004) Substaintí eanchainn airson barrachd dhrogaichean a lorg airson toirt a-mach. Neuropharmacology 47: 167-179.

    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Coolen LM

    (2004) Bidh giùlan feise agus sanasan àrainneachd gnè-cheangailte ag obrachadh an siostam mesolimbic ann an radain fhireann. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

    1. Balfour ME,
    2. Brown JL,
    3. Yu L,
    4. Coolen LM

    (2006) Tabhartasan ion-dhèanta bho fho-dhraighean bho cortex ro-ro-làimh meadhanach gu gnìomhachadh niùclasach às deidh giùlan feise sa radan fireann. Neuroscience 137: 1259-1276.

    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Pròtainean neurofilament agus an siostam dopamine mesolimbic: riaghailt choitcheann tro mhoirfinn cronach agus muiceag dhiadhachd ann an sgìre vent ventolve rhes. J Neurosci 12: 2165-2176.

    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dè an dleastanas a th ’aig dopamine ann an duais: buaidh dhiadhachdach, duais foghlaim, no saoradh brosnachaidh? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

    1. Berridge KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Sgaoileadh co-phàirtean de dhuais: “a’ còrdadh ”,“ ag iarraidh ”, agus ag ionnsachadh. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

    1. Blum K,
    2. Werner T,
    3. Càrn S,
    4. P Carnes,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. M Oscar-Berman M,
    8. M Gold

    (2012) Gnè, drogaichean, agus roc n rolla: a ’toirt beachd air gnìomhachadh meilisimbic cumanta mar dhleastanas airson polymorphisms gine duaise. J Drugaichean Psychoactive 44: 38-55.

    1. Chu NN,
    2. Zuo YF,
    3. Meng L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Tha brosnachadh dealanach air an iomall a ’dol air ais an lùghdachadh meud meud cealla agus barrachd ìre BDNF anns an sgìre a tha cuimseach fionnarach ann an radain co-cheangailte ri mairtrean. Brain Res 1182: 90-98.

    1. Davis BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden KA,
    5. Coolen LM

    (2007) Cur an gnìomh neurons POMC rè ionnsaigh coitcheann ach chan ann tro ghiùlan feise ann an radain fhireann. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Atharrachaidhean mòra-dathach ann an niùclas accumbens cuir a-mach dopamine aig àm buaidh Coolidge ann an radain fhireann. J Neurosci 17: 4849-4855.

    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Akers CA,
    8. Clinton SM,
    9. PE PE,
    10. Akil H

    (2011) Ròl roghnach airson dopamine ann an ionnsachadh brosnachail. Nature 469: 53-57.

    1. KS Frohmader,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. Coolen LM

    (2010a) A ’measgachadh measgachaidhean: ath-sgrùdadh air buaidh dhrugaichean air giùlan gnè ann am daoine agus ann am modalan bheathaichean. Horm Behav 58: 149-162.

    1. KS Frohmader,
    2. Wiskerke J,
    3. Wise RA,
    4. Lehman MN,
    5. Coolen LM

    (2010b) Bidh Mhammphetamine a ’toirt air fo-bheanntan de neurons a tha a’ riaghladh giùlan feise ann an radain fireann. Neuroscience 166: 771-784.

    1. Harris AC
    2. Gewirtz JC

    . Eòlas-inntinn 171: 140-147.

    1. GC na Hearadh,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Brosnachadh agus ionnsachadh air atharrachadh às deidh tarraing air falbh bho òtrachas: fianais airson a bhith a ’faighinn a-mach mu dh’ phròiseas duais. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

    1. MD Hayward,
    2. Pintar JE,
    3. Low MJ

    (2002) Easbhaidh dhuaisean taghte ann an luchagan às aonais beta-endorphin agus enkephalin. J Neurosci 22: 8251-8258.

    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Rada P

    (2009) Tràilleachd nàdarrach: modal giùlain agus cuairteachaidh stèidhichte air tràilleachd siùcair ann an radain. J Addict Med 3: 33-41.

    1. Hyman SE
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Innealan neòinidh airson tràilleachd: àite ionnsachaidh agus cuimhne co-cheangailte ri duaisean. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

    1. Ikemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) GABA (A). J Neurochem 69: 137-143.

    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. DP Seeburg,
    4. CC Hoogenraad,
    5. Sheng M

    . J Neurosci 25: 11300-11312.

    1. Johnson SW,
    2. RA a Tuath

    (1992) Bidh Opioids a ’neadachadh neurons dopamine le bhith a’ dèanamh an-àirde de cheanglaichean eadar-ghlan ionadail. J Neurosci 12: 483-488.

    1. Klitenick MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Riaghladh mu leigeil a-mach dopamine somatodendritic anns an sgìre reusanta fosgail le opioids agus GABA: sgrùdadh microdialysis in vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.

    1. Koob GF,
    2. Le Moal M

    (2005) Plasticity de dhuais neurocircuit duais agus “taobh dorcha” tràilleachd dhrogaichean. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

    1. Lennette DA

    (1978) Meadhanach sreap nas fheàrr airson meanbh-chruth dìon dìon. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT

    . Sgaoileadh 72: 355-358.

    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT
    4. Flynn G

    . Pharocol Biochem Behav 72: 101-105.

    1. Matthews RT,
    2. DC Gearmailteach

    (1984) Fianais dealan-eòlas-eòlasach airson claonadh le raon ro-innleachdach ro-gharainneach dopronan dopamine le maorach. Neuroscience 11: 617-625.

    1. Mazei-Robison MS,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Vinish M,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Hurd YL,
    18. Cheer JF,
    19. Han MH
    20. Russo SJ,
    21. et al.

    (2011) Dleastanas airson comharradh mTOR agus gnìomhachd neuronal ann an atharrachaidhean air a chruthaich moirfein ann an sgìre a tha a ’dèanamh fionnarachadh ventral neurons dopamine. Neuron 72: 977-990.

    1. Mazei-Robison MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Plaisteachas moilecular agus ceallachail air a ghluasad bho opiate gu ceàrn ro-innleachdach fionnara agus locus coeruleus catecholamine neurons. Harb Spring Harb Perspect 2: a012070.

    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Tha Naloxone a ’briseadh a-steach an abairt ach chan eil e a’ faighinn fhaighinn bho radain fireann freagairt freagairt roghnach airson boireannach boireann. Eòlas-inntinn 101: 118-125.

    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Eòlas feise ann an cnàimhean bhoireann: uidheaman ceallach agus buaidh gnìomhail. Brain Res 1126: 56-65.

    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Tha Naloxone a ’bacadh casg air suathadh agus roghainn àite gu bhith na bana-bheò ann an radain fireann gu luath an dèidh sparradh. Pharocol Biochem Behav 26: 781-789.

    1. Mitchell JB,
    2. Stiùbhart J

    . Pharocol Biochem Behav 35: 643-650.

    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    (2006) ROGHAINNEAN comharrachaidh MAPK: an t-àite ceart aig an àm cheart. Tursan Biochem Sci 31: 268-275.

    1. Nestler EJ

    (2012) Innealan tar-sgrìobhaidh de dhroch dhrogaichean. Clin Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

    1. Paxinos G,
    2. MacBhàtair C

    (2013) An eanchainn radain ann an co-chomharran stereotaxic (Acadaimigeach, Boston), Ed 7.

    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Coolen LM

    (2010a) Neuroplasticity anns an t-siostam mesolimbic a dh'adhbhraicheas duais nàdarra agus sparradh duais às dèidh sin. Eòlas-inntinn Biol 67: 872-879.

    1. Pitchers KK,
    2. KS Frohmader,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2010b) Tha DeltaFosB anns an nucleus accumbens deatamach airson a bhith a ’toirt buaidh air buannachdan duaise. Genes Brain Behav 9: 831-840.

    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Wang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2012) Bidh eòlas duais nàdarra ag atharrachadh sgaoileadh AMPA agus NMDA agus ag obair ann an nucleus accumbens. PLoS One 7: e34700.

    1. Pitchers KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. Coolen LM

    (2013) Bidh duaisean nàdurrach is dhrogaichean a ’gnìomhachadh air innleachdan plaideas neralnach coitcheann le DeltaFosB mar phrìomh eadar-mheadhanair. J Neurosci 33: 3434-3442.

    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ERK agus p38 kinases pròtain air a ghnìomhachadh tro MAPK: teaghlach de kinases pròtain le gnìomhan bith-eòlasach eadar-dhealaichte. Microbiol Mol Biol Rev 68: 320-344.

    1. Russo SJ,
    2. CA Bolanos,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. W Renthal,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NE,
    9. Wiley MD,
    10. Fèin DW,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) Slighe IRS2-Akt ann am midbrain dopamine bidh neurons a ’riaghladh freagairtean giùlain agus ceallach do opiates. Nat Neurosci 10: 93-99.

    1. Schultz W

    (2010) Ioma-dhleastanasan bho neurons dopamine. F1000 Biol Rep 2: 2.

    1. Seroogy KB,
    2. CM CM

    (1993) Cur an cèill neurotrophins le neurons dopaminergic midbrain. Sgaoileadh 124: 119-128.

    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A

    (1987) Raointean brosnachail de opioids: fianais gu bheil gnìomhachadh de Delta-receptors a ’toirt taic do phròiseasan neartachaidh. Brain Res 436: 234-239.

    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) A ’toirt buaidh air mairsinn agus na neurotrophins, NT-3, NT-4, agus BDNF, air locus coeruleus neurons in vitro. Brain Res 702: 117-125.

    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Lane SB,
    4. Harris HW,
    5. BS Bunney,
    6. Nestler EJ

    (1996) Bidh morphine marbhtach a ’toirt buaidh air atharrachaidhean follaiseach ann am morf-eòlas an neolons mesolimbic dopamine. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.

    1. Spiga S,
    2. DT Serra,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M
    5. Diana M

    . Eur J Neurosci 17: 605-612.

    1. Swanson LW

    (2004) Mapaichean eanchainn: structar an eanchainn radain (Acadamaigeach, San Diego), Ed 3.

    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pitchers KK,
    5. Coolen LM

    (2009) Duais dhrabasta ann an radain fireann: buaidh eòlas gnèitheach air roghainnean àite suidhichte co-cheangailte ri ejaculation agus eadar-theachdan. Horm Behav 55: 93-97.

    1. Tzschentke TM

    (2007) A ’tomhas duais le paradig roghainn an àite (CPP): ùrachadh nan deichead mu dheireadh. Biol Addict 12: 227-462.

    1. van Furth WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Brosnachadh feise: com-pàirteachas bho opioids dùthchasach ann an sgìre a tha cuimseach fionnarach. Brain Res 729: 20-28.

    1. van Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Riaghladh giùlan feise fireann: a bhith an sàs ann an opioids an eanchainn agus dopamine. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. Inturrisi CE,
    5. Koob GF

    (2003) Bidh an teachd a-steach neo-dhuilleagach a ’toirt gu buil barrachd fèin-rianachd a thaobh heroin ann an radain. Pharocol Biochem Behav 75: 349-354.

    1. KA Òg,
    2. Gobrogge KL,
    3. Liu Y,
    4. Wang Z

    (2011) Neurobiology de chnuasachadh paidhir: lèirsinn bho chnàmhaiche monogamous gu sòisealta. Front Neuroendocrinol 32: 53-69.

  •