Tha eòlas duais nàdurrach a 'atharrachadh sgaoileadh gabhaltas AMPA agus NMDA agus a' gnìomhachadh anns a 'núcleas accumbens (2012)

PLoS One. 2012; 7 (4): e34700. doi: 10.1371 / journal.pone.0034700. Epub 2012 Apr 18.

Pitchers KK, Schmid S, Di Sebastiano AR, Wang X, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM.

Stòr

Roinnean Anatomy agus Bith-eòlas Cell, Sgoil Leighis agus Fiaclaireachd Schulich, Oilthigh Taobh Siar Ontario, Lunnainn, Ontario, Canada.

Abstract

Tha duais nàdarra agus drugaichean mì-ghnàthachaidh a ’tighinn am bàrr air an t-siostam mesolimbic a tha a’ toirt buaidh air gluasadan agus giùlan duais. Tha drogaichean a ’toirt a-steach atharraichean neurraigeach san t-siostam seo, a’ gabhail a-steach atharrachaidhean tar-sgrìobhaidh, moirfeòlach agus sioncpaigeach, a tha a ’cur ri leasachadh agus cur an cèill cuimhneachain is tràilleachd co-cheangailte ri drogaichean. Roimhe seo, chaidh aithris gu bheil eòlas gnèitheasach ann an radain fireann, giùlan duais nàdarra, a ’toirt buaidh air neuroplasticity coltach san t-siostam mesolimbic agus a’ toirt buaidh air duais nàdarra agus giùlan co-cheangailte ri drogaichean.

Cho-dhùin an rannsachadh seo an-dràsta co-dhiù a dh ’adhbharaicheas gnàth-eòlas atharrachaidhean maireannach ann an coimeasgadh, no malairt gabhadain gutamate ionotropic no obraich anns an nucleus accumbens (NAc), a’ leantainn air amannan stad eadar-dhuais eadar-dhealaichte: 3 day, 1 week, no 1 mìos às deidh an seisean mathaidh mu dheireadh.

Bidh Sprague Fireann a ’leantainn aig 5 làithean an dèidh a chèile (gnàth-eòlas) no a’ leantainn air adhart le bhith a ’fulang le feise. Nochd fireannaich a bha a ’eòlas gu feise agus a bha a’ toirt taic do thòiseachadh agus a bhith a ’nochdadh matadh aig gach àm. An ath-riochdachadh taobh-uillteach agus membrane de N-methyl-D-aspartate (NMDA: NR1 fo-bhuidheann) agus receptors α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionate (AMPA: GluA1, GluA2 subunits) ann an NAc a chaidh a dhearbhadh a ’cleachdadh deuchainn croise pròtain bis (sulfosuccinimidyl) suberate (BS (3)) agus sgrùdadh Blot an Iar na dhèidh.

Chaidh NR1 abairt a mheudachadh aig a bhith a ’cumail a-mach latha 1 an dà chuid aig an uachdar agus taobh a-staigh feansa, ach lughdaich e aig an uachdar aig an t-seachdain 1 de staonadh. Chaidh GluA2 àrdachadh ann an intracellularly aig seachdain 1 agus mheudaich e aig an uachdar às deidh mìos 1 de staonadh. Mu dheireadh, chaidh na clàraidhean electrophysisio-clèithe làn-chealla a chàradh lughdachadh ann an co-mheas AMPA / NMDA de shruthan sioncopach ann an neurons sligean NAc an dèidh brosnachadh luchd-leanmhainn cortal ann am fireannaich a dh ’eòlas feise an dèidh a’ bhùthan pàighidh.

Le chèile, tha an dàta sin a ’sealltainn gu bheil eòlas gnèitheil ag adhbharachadh atharrachaidhean fad-ùine ann an abairt agus gnìomh glutamate cladhach anns an NAc. Ged nach eil seo buileach co-ionann, tha coltas coltach ris an neuroplasticity a tha air a ghineadh le gnè agus mar a dh ’adhbharaicheas psychostimulants, a’ moladh uidheaman coitcheann airson ath-dhaingneachadh duais nàdarra agus dhrogaichean.

Ro-ràdh

Tha an siostam mesolimbic air a dhèanamh suas de raointean eanchainn eadar-cheangailte, a ’gabhail a-steach na sgìre ro-innleachdach ventral, cortex prefrontal meadhanach (mPFC), agus accumbens niùclas (NAc). [1]. Le chèile, tha na h-eanchainn sin a ’ceangal dòighean-beatha a tha gu nàdarra a’ toirt seachad a ’toirt seachad biadh [2], [3], [4], [5], ag òl [6], giùlan na màthar [7], ceangal sòisealta [8], [9] agus giùlan gnèitheasachr [10], [11], [12], [13], [14]. Tha sgrùdaidhean giùlan air sealltainn gu bheil giùlan feise fireann fireann a ’toirt duais agus ag ath-dhaingneachadh mar a tha radain fhireann a’ dèanamh roghainn suidheachaidh airson a bhith ag obrachadh còmhla. [15], [16], [17], ag adhartachadh astaran ruith nas luaithe ann an T-mazes [18], raon-laighe dìreach le gàirdean [19] no a ’cur bacadh air sreap [20], agus coileanadh obraichean obrachail gus faighinn a-steach do bhoireannaich a bhios a ’gabhail gu feise [21], [22]S an Iar- A bharrachd air sin, bidh eòlas gnèitheil ag adhbhrachadh cuideachadh le giùlan gnèitheasach às dèidh sin, a ’gabhail a-steach barrachd brosnachaidh agus coileanadh gnèitheasach [23], agus a ’toirt buaidh air a bhith a’ toirt fianais air roghainn àite suidheachaidh airson meatadh [15]. Tha na h-atharrachaidhean giùlain seo a ’moladh gu bheil ionnsachadh agus cuimhne nàdarra co-cheangailte ri duais air a ghabhail a-steach, a thathar a’ smaoineachadh a dh ’atharraicheas tro atharrachaidhean anns an t-siostam mesolimbic a dh'adhbhraicheas eòlas giùlain eadar-dhealaichte. [11].

Mar thaic don bheachd-bharail seo, tha sinn air sealltainn roimhe seo gun do dh'adhbhraich eòlas gnèitheach ùpraid de deltafosB anns an NAc, a bha an uair sin deatamach airson cuideachadh le tòiseachadh agus coileanadh giùlan feise às deidh eòlas feise. [23].

Còmhla ri sin, dh'adhbhraich eòlas gnèithe meudachadh ann an loisgeadh dendritic agus àireamh de chnàimhean-droma anns an NAc [11]. Tha psychostimulants a ’brosnachadh atharrachaidhean den aon sheòrsa ann an tar-sgrìobhadh agus morfology [24], [25], [26]. Chaidh sealltainn gu bheil fèin-fhiosrachadh gnèitheach ag atharrachadh freagairt ri drogaichean de dhroch-dhìol, a ’toirt a-steach mothachalachd do ghnìomhachd einnseanan ionnsaigheach sìobhaltach (tar-mhothachadh) agus duais leasaichte leigheas-inntinn. [10], [11], [27]. Chaidh a dhearbhadh gu bheil ùine tarraing air ais no stad às deidh cothrom fhaighinn air drogaichean riatanach airson cràidheadh ​​nas motha airson an druga, ris an canar guir crùbadh. [28]. Mar an ceudna, tha ùine staoin buailteach a ’leantainn air eòlas feise deatamach airson àrdachadh fhaighinn air duais psychostimulant gnè-feise agus àrdachadh ann am meuran diadhaidh is cnàimhean droma anns an NAc [11]. Mar sin, bidh eòlas gnèitheasach agus brùthadh às dèidh sin bhon duais nàdarra seo ag adhbharachadh atharrachaidhean fad-ùine anns an t-siostam mesolimbic a tha coltach ris an fheadhainn a dh'adhbhraicheas psychostimulants, agus a tha a ’toirt buaidh air freagairtean giùlain an dà chuid airson duais nàdarra is dhrogaichean.

Chaidh aithris gu bheil psychostimulants ag atharrachadh mòran atharrachaidhean a bharrachd anns an NAc, cuid dhiubh a tha an urra ri ùine airson casg dhrogaichean. Tha na h-atharrachaidhean sin a ’toirt a-steach atharrachaidhean ann an malairt gabhadan glutamate agus gnìomh [29], [30]. Coca air ais uair Air a leantainn le ùine grinn fhada (seachdainean 3 – 7), bidh seo ag adhbharachadh meudachadh a ’nochdadh le uachdair a’ toirt air falbh le gabhadan gabhail-a-steach α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionate (AMPA) agus N-methyl-D-aspartate (NMDA) fo-chompanaich gabhaltach, ach cha deach atharrachadh sam bith a dhèanamh às deidh sin ùine airson stad goirid (1 day).

A bharrachd, tha buaidh ga thoirt air fo-fhreumhan de ghabhadairean AMPA agus NMDA le bhith a ’nochdadh dhrogaichean agus aig amannan grinn às dèidh sin, mar a bhios aithris air an taobh a-staigh de GluA2-ann an eas-ùmhlachd ga ath-riaghladh an dèidh greisean fada seann-bhrisidh (5 – 7 seachdainean) [31], [32]. Tha am PFC a ’toirt seachad tabhartas mòr glutamatergous don NAc [33] agus tha sgrùdaidhean electrhisio-eòlasach air sealltainn gun adhbharaich ath-dhruga cocaine atharrachaidhean ann an AMPA / NMDA co-dhiù ann an niùclairean sligeach PFC a tha a ’freagairt PFC agus atharrachaidhean ann an leisgeul neo-chumanta de neurons NSA a dh’ fhaodadh a bhith an urra ri ùine stad-dhrogaichean agus fo-roinn NAc [34], [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41]. Bidh plasticity niùclach a dh ’adhbharaicheas drogaichean mar sin a’ cur ri atharrachaidhean ann an dìth mothachaidh grugaidheachd [42], [43], [44], [45] agus sireadh dhrogaichean [31], [46], [47].

Chan eil fios aig an àm seo a bheil atharrachaidhean coltach ri malairt gabhaltachd glutamate a ’tachairt às deidh dhaibh duais dhuaisean nàdarra agus staranachd an dèidh làimhe bho duais nàdarra. Mar sin, b 'e amas an rannsachaidh làithreach am beachd a dhearbhadh gu bheil eòlas gnèitheach ag adhbharachadh atharrachaidhean ann am malairt gabhadain AMPA no NMDA anns an NAc agus atharrachaidhean ann an neart sioncronach neòinean sligeach PFC a tha a ’freagairt. A bharrachd air an sin, chaidh na ceumannan sin a cho-dhùnadh aig 3 amannan eadar-dhealaichte an dèidh an t-seisein èididh mu dheireadh gus sgrùdadh a dhèanamh air buaidh ùine staoin bho dhuais nàdarrach (seachdain 1 no 1 mìos às deidh an rèiteachadh mu dheireadh) air plastalachd anns an NAc ann an coimeas ri ùine gun stad (1 latha às deidh companach deireannach.

toraidhean

Deuchainn 1: Cobhair Gnè

B ’e amas an deuchainn 1 cùrsa ùine a dhearbhadh airson cuideachadh le giùlan gnèitheasach às deidh fèin-fhiosrachadh feise. Roimhe sin, thathar air a bhith a ’faighinn grèim air giùlan feise suas gu 1 seachdain às deidh an seisean mathaidh mu dheireadh [23], ach cha deach rannsachadh a dhèanamh roimhe seo ma thèid cuideachadh giùlain gnèitheasach le giùlan feise a chumail suas an dèidh ùine fhada de chuir an sàs. An seo, chaidh deuchainn a dhèanamh air dà bhuidheann de radain fhireann airson a bhith a ’bruidhinn mu dhol an sàs ann an giùlan feise fad-ùine, seachdain 1 no 1 mìos às deidh an seisean maidseadh mu dheireadh. An toiseach, sheall an dà bhuidheann gu robh e furasta dol-a-mach gnèitheasach ann an còig seiseanan suirghe gach latha mar a sheall iad le cùisean gu math nas giorra a bhith a ’nochdadh (Figear 1A; Seachdain 1, d=0.028; Mìos 1, d=0.019), intromission (Figear 1B; Mìos 1, d=0.016; gluasad aig seachdain 1, d=0.078) agus ejaculation (Figear 1C; Seachdain 1, d=0.016; Mìos 1, d=0.008) air an latha 5 an coimeas ris an latha 1 de eòlas gnèitheach. Còmhla ri sin, chaidh cuideachadh le giùlan feise a chumail suas gach seachdain 1 agus a ’mhìos 1 às deidh an t-seisein seo mu dheireadh, seach gun robh gluasadan gu crìochan a ’caolachadh nas giorra air Latha na Deuchainn (seachdain 1 no 1 mìos às deidh latha 5 de eòlas gnèitheach) an coimeas ri latha suathadh 1 (Figear 1A: mount late, mìos 1, d=0.016; Figear 1B: latency intromission, mìos 1, d=0.046; Figear 1C: latency ejaculation, seachdain 1, d=0.016; Mìos 1, d=0.008) agus chan eil eadar-dhealachaidhean mòra ann eadar latha suirghe 5 agus Latha Deuchainn airson paramadair giùlain sam bith aig àm sam bith (ach a-mhàin maitheas sèididh aig mìos 1; p=0.016). Mar sin chaidh cumail suas giùlan feise stèidhichte air eòlas a chumail suas rè ùine mìos 1 de bhith a ’seasamh ri chèile.

Figear 1    

Cumail suas fad-ùine air giùlan gnèitheasach.

Deuchainn 2: Ath-sgaoileadh / Mìneachadh Fo-ghabhail Glutamate Ionotropic

B ’e an t-amas a bha aig deuchainn 2 a bhith a’ lorg an abairt le fo-chompanaich iontropic glutamate glacadair ann am fireannaich a ’eòlas feise agus neo-dhiadhaidh a’ leantainn aig amannan stad eadar-dhealaichte. Chaidh uachdar fon-uisge AMPAR agus NMDAR agus pollagan in-lìon a thomhas a ’cleachdadh inneal ath-cheangail membrane-impermeant (BS3. Tha blots riochdaire a ’nochdadh uachdar (High MW,> 250 kDa) agus bannan intracellular air an toirt a-steach Figear 2M.

Figear 2  
Cur an cèill is sgaoileadh fo-ghabhaltachd glutamate anns an NAc.

Aon latha an dèidh eòlas feise, chaidh aithris a dhèanamh air fo-chomas NR1 ann an uachdar (S), in-lusach (I) agus iomlan (S + I) (S, Figear 2A, d=0.025; I, Figear 2D, d=0.035; S + I, Figear 2J, d=0.023) ann an ainmhidhean a tha a ’faighinn gu feise ann an coimeas ri smachdan gnèitheach neo-ghnèitheach (Figear 2N). Aon seachdain an dèidh a bhith a ’maidseadh mu dheireadh, bha ìsleachadh mòr air an uachdar gus eadar-loidhne co-mheas eadar-lìonmhor de NR1 (co-mheas S / I; Figear 2G; td=0.024) gun atharrachaidhean mòra ann an uachdar no cur an cèill am falach, an coimeas ri beathaichean gnèitheach neo-ghnèitheach. Chaidh cur an cèill GluA2 gu mòr suas aon seachdain an dèidh a ’mhaidseadh mu dheireadh, ann an in-fhuaimneach agus ann an abairt iomlan, gun atharrachadh ann an nochdadh uachdar (I, Figear 2E, d=0.026; S + I, Figear 2K, d=0.014) ann an ainmhidhean a tha a ’faighinn gu feise ann an coimeas ri naiv (Figear 2O). An àite sin, aon bhliadhna an dèidh a ’mheasgachaidh mu dheireadh, chaidh GluA2 a leudachadh gu mòr ann an co-mheas S / I (Figear 2H; td=0.046) còmhla ri gluasad staitistigeil a dh'ionnsaigh àrdachadh ann an abairt air an uachdar (Figear 2B; td=0.055) ann an ainmhidhean a tha a ’faighinn gu feise ann an coimeas ri smachdan naidhe. Cha deach atharrachaidhean ann an GluA1 a lorg aig latha 1 no 1 seachdain às deidh an ath-chothromachadh mu dheireadh. An dèidh mìos 1, bha coltas ann gun robh dreach GluA1 agus coimeas eadar S / I ri meudachadh ann an ainmhidhean a dh ’eòlas feise an coimeas ri smachdan naïve, ach cha deach gluasadan staitistigeil a lorg (S, Figear 2C, d=0.098; S / I, Figear 2I, d=0.083). Mar sin, ann an geàrr-chunntas, an toiseach aig 1 latha de ghalarachadh, chaidh faighinn a-mach iomlan a thogail de NR1, agus an dèidh sin le barrachd in-aon-fhuaimneach de GluA2 às deidh seachdain 1 de staonadh agus barrachd aithris air uachdar GluA2 agus GluA1 às deidh 1 mìos de staonadh (an dara fear a-mhàin) mar ghluasad staitistigeil.

Deuchainn 3: Electrhysiology

B 'e amas deuchainn 3 faighinn a-mach a bheil eòlas feise a ’atharrachadh neart synaptic ann an neurraichean sligeach PFC a tha a’ freagairt. Chaidh sruthan sioncopach a chlàradh ann an nèamhan meadhanach boillsgeach anns an t-slige de CnC de dh'fhir a bha a ’coimhead gu feise agus naïidh às deidh dha snàithleanan a bhathas an dùil a thighinn bhon PFC. Chaidh an co-mheas AMPA / NMDA a lùghdachadh gu mòr ann an beathaichean le gnè feise 1 day (p=0.005), seachdain 1 (p=0.016), agus mìos 1 (p=0.005) an dèidh an t-seisein èididh mu dheireadh an coimeas ris a ’bhuidheann smachd gnèitheach le gnè (Figear 3A, B, C). Gus faighinn a-mach an robh atharrachadh ann an coltachd sgaoilidh tar-sgaoilidh presynaptic, chaidh sgrùdadh a dhèanamh air co-mheasan pwllach ann am paidhrichean. Cha robh an ìre de chuideachadh le sgaoileadh tar-sgaoilidh a thachair mar fhreagairt do bhrosnachadh beothail ann an càraidean eadar diofar ghnèithean le beathach feise agus ainmhidhean ainneamh aig àm sam bith (Figear 3D).

Figear 3    

Co-rèiteachaidhean AMPA / NMDA airson fireannaich a tha eòlach air gnè agus ginidh aig latha 1, seachdain 1 no 1 mìos às deidh an seisean measgachaidh no làimhseachaidh mu dheireadh.

Deasbaireachd

Sheall an sgrùdadh a th ’ann an-dràsta gu bheil gnàth-eòlas feise ag adhbhrachadh atharrachadh ann an sgaoileadh sgaoileadh glutamate ionotropic agus ag obair ann an NAc de radain fhireann agus gun robh cuid de na h-atharrachaidhean sin ag atharrachadh bho fad ùine staoin bho ghiùlan feise. Ann an coimeas ri fireannaich a ’gnè feise, nochd fireann fireann le àrdachadh geàrr-ùine ann an abairt fho-bhiadh NR1 gu h-iomlan mar thoradh air àrdachadh ann an amaran glacaidh uachdar agus in-mheallta. Chaidh abairt GluA2 a mheudachadh intracellularly agus aig an uachdar às deidh seachdain 1 agus mìos 1 de staonadh duais, fa leth. Mu dheireadh, cha deach an abairt GluA1 atharrachadh gu mòr aig àm sam bith. A bharrachd air an sin, bha tomhas AMPA / NMDA air a lùghdachadh gu luath agus a dh ’fhada air a bhith aig beathaichean le eòlas gnèitheach, a chaidh a chlàradh bho neurons sligeach PFC a thug freagairt bho PFC ann an coimeas ri smachdan nait. Tha na toraidhean againn a ’sealltainn gu bheil malairt gabhaltachd glutamate an crochadh air fad ùine stad bho dhol a-mach feise, ach chan eil atharrachaidhean ann an neart synaptic aig synapses air an cruthachadh le luchd-taic cortical ro-dhligheach don slige NAc. Tha na prìomh cho-dhùnaidhean seo coltach ri aithisgean a ’leantainn air ais cocaine a’ nochdadh a thaobh AMPAR subunit barrachd air nochdadh ann an uachdar às deidh lasadh dhrogaichean fada agus lùghdachadh anns a ’bhad anns a’ cho-mheas AMPA / NMDA, ach eadar-dhealaichte a thaobh abairt fho-amar NMDAR, agus lùghdachadh leantainneach ann am AMPA / Co-mheas NMDA.

Tha dol-a-mach gnèitheasach air leth luachmhor agus daingnichte. Mar sin, mar a bhios radain fireann a ’faighinn eòlas gnèitheasach, tha e a’ nochdadh barrachd brosnachaidh gnèitheasach agus coileanadh, a tha air a nochdadh le annasan nas giorra gus ejaculation seallaidh agus taisbeanaidh a thòiseachadh, agus barrachd èifeachdachd copulation [10], [23]. An seo, chaidh a dhaingneachadh gun robh an cothromachadh seo de ghiùlan feise an làthair aig seachdain 1 às deidh maidseadh, agus chaidh co-dhùnadh gun robh giùlan gnèitheasach air a chumail suas airson suas ri 1 mìos bho bhith a ’seasamh ri chèile. Tha an ìomhaigh ràitheil a th ’a’ fhulang le giùlan feise gnàthach a ’co-fhreagairt ris an rannsachadh a rinn sinn roimhe a’ sealltainn thar-bhlasadh ris na buaidhean a th 'aig an amphetamine a tha a ’toirt buaidh air an locomotaibh nuair a thèid a dheuchainn aig na h-aon amannan staoin coltach ri chèile. [11]. Tha sgrùdaidhean a rinneadh roimhe seo air a bhith a ’toirt buaidh air an NAc mar eadar-mheadhanair giùlan gnèitheasach comasach. Bidh an dà chuid na cinn as motha aig a ’chuir a-steach mating no cuirp ceangailte ri ìre gintinn [48], agus tha eòlas gnàthach a ’toirt gu buil meuran dendritic agus cnàimhean-droma ann am meadhan agus slige na h-Alba seachdain an dèidh dhaibh grèim fhaighinn air [11]. A bharrachd air sin, le bhith a ’lùghdachadh gnìomhachd an fhactair tar-chuir deltaFosB anns an NAc tro ghinead gine air a dhèanamh le meur-lòchran aig luchd-ceuma ag atharrachadh cleachdadh gnàthach [23], [49]S an Iar- Ttha na toraidhean sin a ’moladh gu bheil an NAc ceangailte gu sònraichte ri daingneachadh giùlan feise, agus gu bheil e deatamach dha buaidh dhrogaichean thar-mhothachail air eòlas feise. [23].

Sheall an sgrùdadh a th ’ann an-dràsta gun do dh’ adhbharaich atharrachadh gnàthach atharrachaidhean ann an co-chur AMPAR agus / no malairt dhaoine a bha an urra ri fad an ùine casg-feise. An toiseach, bha e follaiseach gu robh àrdachadh ann an abairt eadar-fhollaiseach de abairt GluA2 aig 1 Week, a dh ’fhaodadh a bhith a’ nochdadh gu robh sopadh gu leòr ann an GluA2 agus / no endocytosis. An uair sin, chaidh co-mheas uachdar GluA2 (ìre gu ìre mhòr mar thoradh air àrdachadh san uachdar) a lorg aig 1 mìos às deidh an suirghe mu dheireadh, a tha a ’moladh ath-sgaoileadh de ghalaran gu uachdar na cille. Bha atharrachaidhean ann an malairt ann am AMPAR às dèidh faighinn a-steach do chocan cuideachd an crochadh air fad na h-ùine airson casg dhrogaichean [50]. Anns an fharsaingeachd, tha ìrean cealla agus sioncosomal GluA1 agus ìrean GluA2 / 3 air am meudachadh às deidh seachdain de staonadh bho chocàin agus thèid an cumail aig ìrean àrda airson suas ri 3 seachdainean às deidh an innsidh cocaine mu dheireadh. [51], [52], [53], [54], [55]. An dèidh ùine nas fhaide ùine de dhrogaichean dhrogaichean (seachdainean 5), dh'fhuirich an dreach gnùise GluA1 air àrd agus bha lùghdachadh beag ann an uachdar GluA2 / co-chur in-ìreach, agus mar sin chaidh GluA2-gann de AMPARs an àrd-riaghladh. [31], [56]. Chaidh an nochdadh nas motha seo de ghabhadairean GluA2-gun a bhith aig an uachdar a lorg às deidh tarraing a-mach fad-ùine (5 – 7 seachdainean) bho fèin-rianachd cocain le cothrom-ruigsinn, ach gun a bhith a ’leantainn air falbh bho bhith a’ tarraing air falbh bho choc gun bhacadh [32]. A bharrachd air an sin, chuir bacadh de GluA2-lacking AMPAR casg air a bhith a ’lorg dhrogaichean [31], [57]. Tha na h-atharrachaidhean ann am malairt gabhadain AMPA às deidh dhaibh a bhith a ’faighinn a-mach à feise agus eadar-dhealachadh beagan eadar-dhealaichte bho na tha air a thòiseachadh le cocaine. A thaobh meudachadh air sealladh grùide GluA1, tha an dàta a th ’ann an-dràsta a’ sealltainn àrdachadh beag ann an gabhadain GluA1 aig uachdar an membrane a dh'fhàillig air brìgh staitistigeil a ruigsinn aig mìos 1 às deidh fèin-fhiosrachadh gnàthach, agus mar sin a ’moladh gum feum abairt gnùise GluA1 a bhith a’ toirt seachad ùine nas fhaide airson nas fhaide suas -leachd, coltach ris na h-atharrachaidhean a dh'adhbhraich a ’chocaine an dèidh 5 seachdainean de ghalarachadh [31]. Còmhla ri sin, tha an dàta a th ’ann an-dràsta eadar-dhealaichte a thaobh GluA2 a chaidh tro lùghdachadh beag an dèidh 5 no barrachd sheachdainean gun cocaine, agus dh'adhbhraich eòlas gnèitheasach agus mìos 1 de sta anns an àithne gun tàinig àrdachadh ann an nochdadh grùin GluA2. Tha sinn a ’smaoineachadh gum faod reachd-smachd AMPA ann an NAc a bhith riatanach airson buaidhean fad-ùine eòlas feise air giùlan duais às dèidh sin agus barrachd duais amphetamine. [11] a ’leantainn nan tràthan fada a chaidh a dhearbhadh san sgrùdadh seo. Ann an coimeas ri sin, chan eil atharrachaidhean ann an dòigh-labhairt gabhaltais AMPA no malairt dhaoine riatanach airson buaidhean geàrr-ùine gnàthach air giùlan dhuaisean. Mar thaic, tha mòran aithisgean air sealltainn nach eil craoladh AMPAR atharraichte riatanach airson mothachaidh giùlain dhrugaichean a dh ’adhbharachadh le drogaichean gu psychostimulants (airson ath-sgrùdadh). [30]). Chaidh mothachadh a dhèanamh air cugallachd agus tar-mhothachadh an dèidh latha 1 de dhìteas duais gun atharrachaidhean ann an briseadh suas AMPAR [11], [53]. A bharrachd, chaidh mothachadh do dhèanteachd giùlain a nochdadh le bhith a ’nochdadh gu tric ris an amphetamine aig an neach-inntinn, nach eil ceangailte ri atharrachaidhean sam bith ann an sgaoileadh AMPAR. [50], [53], [58].

Cha robh sgrùdadh air ìre NMDARs air a sgrùdadh gu mòr na dreuchd AMPAR a thaobh mothachadh do ghiùlan agus malairt gabhaltachd. Chuir cleasaiche NMDAR neo-roghnach (MK-801) casg air leasachadh mothachaidh locothan le cocaine no amphetamine, ach cha do chuir e bacadh air abairt den mhothachadh seo. [59], [60]. Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air ìre NMDAR ann an giùlan feise tro bhith a ’coimhead gu riaghailteach ann an sgìre ro -ipteach no in-mheadhonach air MK-801, a chuir casg air giùlan gnè ann an radain fhireann agus fhiosrach. [61], [62], [63]. Bidh NMDAR cuideachd a ’cur taic ri duaisean nàdurrach eile mar a chuir na h-ìobairtean NMDAR sìos biadh ann am baboons [64] agus barrachd dòrtadh bìdh ann an radain [65]. Tha abairt NMDAR sa NAc air atharrachadh le bhith a ’faighinn a-steach do chocaine, agus nas fhaide (3 seachdainean) ach chan eil tràthan goirid (1 day) a’ tighinn gu ìre bho bhith a ’reic a-rithist ann an cocaine an àrdachadh de fo-NM NM (NR1, NR2A, NR2B) [55], [60]. Tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a 'sealltainn gun do dh'adhbhraich eòlas gnàthach àrdachadh ann an abairt iomlan NR1 aig 1 day mar thoradh air ìrean meudaichte anns an dà chuid an uachdar còmhnard agus amar-fiadhachd in-mheurrach, a thuilleadh air an ìre uachdrach / ìre eadar-ghlan a-mhàin às dèidh ùine staoin 1. Mar sin, tha sinn a ’smaoineachadh gum faodadh an t-àrdachadh tùsail ann an tar-chur NMDAR a bhith riatanach airson buaidhean geàrr-ùine gnàthach a thaobh giùlan duais às dèidh sin.

A bharrachd, dh ’fhaodadh gum bi an t-àrdachadh geàrr-ùine ann am fo-bhuidheann NR1 a’ leantainn eòlas gnàthach a bhith a ’nochdadh cruthachadh sioncàmhach sàmhach a dh’ èireas tro ghnè. Huang et al [66] sheall iad gun robh cocan a chaidh a dhèanamh a-rithist ag adhbharachadh synapses sàmhach anns a ’bhrath NAc, anns an robh fastadh iar-synaptic na NMDAR cudromach. Tha synapster glutamatergic sàmhach a ’taisbeanadh sruthan gnìomha a tha ag obair aig NMDAR mura h-eil sruthan AMPAR ann. [67], [68], [69]. Chaidh a nochdadh gun urrainn dha bhith a ’faighinn a-mach mu chocan synapses sàmhach a ghineadh air feadh na h-eanchainn agus gun toir na synapses ùra sin fo-fhuaim dha eòlas às deidh sin. [66], [70]. Tha NMDAR air a dhèanamh suas de aon fo-bhuidheann NR1 co-dhiù còmhla ri aon no barrachd subunits NR2 (A – D). Tha NR1 riatanach airson cruthachadh sianalan gnìomhach; mar sin dh ’fhaodadh gun atharraich atharrachaidhean ann an abairt NR1 clàr-amais airson atharrachadh anns an àireamh de ghabharan NMDA gnìomhach. Tha còcainn air an ath-aithris a ’stiùireadh cur-a-steach NR1 agus NR2B- anns a bheil NMDARs agus a’ gineadh sruthan sàmhach ann am slige na NAc. Chaidh casg a chuir air na synapses sàmhach seo NR2B le bhith a ’rianachd a’ chocàin a thug mothachadh do dh ’atharrachadh an dèidh sin air einnseanan le cocaine. [71]. Lùghdaich an àireamh de synapses sàmhach às deidh grunn làithean de sparradh cocain fhad's a dh ’leanadh mothachadh air einnseanan, a 'moladh gum faodadh synapses ro-làimh a bhith an sàs ann an cruthachadh chuairtean plastaig ùra a dh’ fhaodar atharrachadh (a dh ’fhaodadh droch bhuaidh a thoirt seachad) gus na giùlanan leantaileach seo a thoirt còmhla. Mar sin, tha sinn a ’smaoineachadh gum faodadh d’ riaghladh an-àirde de NR1 a-mach gu luath an dèidh eòlas gnèitheach a bhith air sgàth an àrdachadh ann an NMDAR ann an synapses sàmhach a chaidh a chruthachadh às ùr. A bharrachd air an sin, ma dh ’fhaodadh buaidh gnàthach a bhith air a leantainn le spàirn fhada sàmhach, dh’ fhaodadh sin siùcmaidean sàmhach a lughdachadh, a ’mìneachadh an dà chuid ìre NR1 a’ sruthadh / ìre in-lionnach agus an t-àrdachadh ann an fo-cheannsachaidhean AMPAR le amannan staoin fada, mar a tha synapses gun airgead.

Tha na co-dhùnaidhean làthaireach a ’toirt gu aire gun do dh'adhbharaich gnàth-eòlas gnèitheasach agus brìgh staoin atharrachaidhean air malairt gabhaltachd glutamate agus cur an cèill atharrachaidhean ann an neart sioncopach aig synaps drùidhteach sa NAc. Mar sin, modh electrophysiology stèidhichte air sgrùdadh a rinn Thomas agus luchd-gleidhidh roimhe [72] Chaidh an cleachdadh gus sgrùdadh a dhèanamh air obair neach-gleidhidh glutamate ann an neurons sligean NAc às deidh na h-aon ùine staitistigeil a chithear gu bheil e ag adhbharachadh giùlan gnèitheasach agus drogaichean, agus ath-riarachadh ga faighinn le glutamate. Coltach ri rannsachaidhean a rinneadh roimhe seo an dèidh dhaibh cocaine a nochdadh, chaidh plasticity a dhearbhadh ann an synapses NAc a bha freagairteach dha beachdan PFC. Tha PFC gu math stèidhichte gus prìomh phàirt a ghabhail ann an giùlan èigneachail agus mì-ghnàthachadh dhrugaichean [73], [74]. Mar an ceudna, tha am PFC riatanach airson a bhith a ’leasachadh no a’ cur an cèill giùlan feise èigneachail, mar thoradh air loidhnichean PFC ri bhith a ’lorg giùlan gnèitheach ann an radain fireann [75]. Sheall an dàta làthaireach gun do dh'adhbhraich eòlas gnàthach lùghdachadh anns a ’bhad agus maireannach ann am co-mheas AMPA / NMDA anns na neòinean slige aig PFC a thug freagairt.

Roimhe seo, bha e air a dhearbhadh gun robh a ’phrìomh eadar-dhealachadh eadar duais nàdarra is dhrogaichean gu bheil atharrachadh ann an co-mheas AMPA / NMDA às deidh duais nàdarra sealach agus sgaoilidh e le ùine ach leanaidh atharrachaidhean le drogaichean [76]. Bha am beachd-bharail seo stèidhichte air toraidhean a bha co-cheangailte ri cocaine, ach chan e biadh no sucrose, a ’toirt àrdachadh meud-ùine AMPA / NMDA anns a’ VT.A [76]. Air an làimh eile, tha an sgrùdadh làithreach a ’sealltainn gun do dh'adhbhraich eòlas gnèitheach atharrachadh fad-ùine ann an co-mheas AMPA / NMDA anns an NAc.

Ach, tha plasticity slige a tha air a ghineadh le gnè air a bhith eadar-dhealaichte bhon plathadh às deidh dha cocaine a nochdadh, a chaidh a shealltainn gu robh iad co-cheangailte ri atharrachadh dà-dhèanta ann an iomallachd AMPAR.. An dèidh do chocan nochdadh agus aon latha de staonadh dhrogaichean, lùghdachadh ann an co-mheasan AMPA / NMDA [72] agus trom-inntinn ann an comas losgadh [34] a lorg, coltach ris na toraidhean a fhuaireadh airson buaidhean geàrr-ùine gnàthach. Ach, an dèidh ùine gràinidh 14 bho chocaine, tha neurons sligean NAc air co-mheasan AMPA / NMDA àrdachadh, a tha a ’moladh gun neartaich spionnadh bho chocaine neart synaptic anns an NAc [54]S an Iar- Hgidheadh, bidh toraidhean faighinn a-mach ann an cocan ann an atharrachadh dà-thaobhach ann am plastaig sioncmaiseach le freagairtean AMPA le lùghdachadh a dh ’aithghearr a dh’ aithghearr air drogaichean, ach dh ’àrdaich e a-mach de dhrogaireachd AMPAR le casg-cuirp fhada. An coimeas ri sin, mar thoradh air a bhith a ’cumail a-mach à eòlas gnèitheach, bha lughdachadh ann am bacadh AMPAR ann am slige NAc, ged a bhithear a’ coimhead ri mothachadh air gnìomhachd locomotives agus duais co-cheangailte ri amphetamine aig na h-amannan grinn sin [11]. Ach, tha aithisgean eile air sealltainn gun robh lughdachadh ann an corragan craicinn gnèitheach anns a ’chridhe agus anns a’ shligean aig àm geàrr-ùine agus fada an dèidh don choc a bhith air nochdadh. [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], a ’nochdadh dìth atharrachadh leth-bhreith, coltach ri buaidhean eòlas feise. A bharrachd, tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ sealltainn nach eil eòlas gnàthach ag adhbharachadh atharrachadh ann an coltachd sgaoilidh glutamate presynaptic stèidhichte air dìth eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean airson coimeasg pullach paidhir. Tha Kalivas agus co-oibrichean air sealltainn gu bheil cocain a tha a ’dol air adhart a’ toirt atharrachadh air eadar-mheadhanairean am measg phlèanaichean glutamate neo-sioncronach neo-chliùiteach anns an NAc, co-dhiù an dèan sinn atharrachadh fhathast air atharrachaidhean leithid seo (airson ath-sgrùdadh). [77]).

Tha e coltach gun cuir obair glutamatergic a-steach don NAc bho raointean eanchainn eile na an PFC dreuchd gnìomhach ann am buaidh eòlas feise air giùlan duais às dèidh sin. Tbidh NAc a ’faighinn in-ghabhail glutamatergic bhon amygdala basolateral (BLA) agus fo-leaghadh fionnarach an hippocampus [78]. Bidh pàirt aig a ’BLA ann an giùlan nàdarra a tha a’ sireadh dhuaisean [79], [80], a tha deatamach airson ceanglaichean brosnachaidh àrainneachd le duais gnèitheach [81] agus airson giùlan ionnsramaid a thoirt air adhart gu bhith a ’seasamh ri chèile [82]. Mar sin, tha e buailteach a bhith a ’beachdachadh mar a dh'atharraich atharrachaidhean gnè ann an neart synaptic aig synapses a tha a’ freagairt BLA cuideachd.

Tha a ’cho-mheas AMPA / NMDA aig PFC synapses ann am slige NAc co-chòrdail ris an leudachadh ann an NR1 a dh’ aithghearr às deidh fèin-fhiosrachadh gnèitheach, ach neo-chunbhalach le barrachd GluA2 agus GluA1 an dèidh greisean fada. Is e aon mhìneachadh gu bheil malairt gabhadain air tachairt aig synapses a ’faighinn steach glutamatergic ag èirigh bho raointean eile na h-eanchainn taobh a-muigh PFC. Cuideachd, tha inns na NAc, a bharrachd air slige NAc, anns na samhla pròtaran a ’dùnadh a-mach an comas co-rèiteachaidhean ceart a dhèanamh eadar an abairt pròtain agus dàta neart synaptic. A dh ’aindeoin sin, tha na toraidhean a th’ ann an-dràsta a ’sealltainn gu soilleir gu bheil giùlan duais nàdarra agus sparradh duais às dèidh sin ag adhbharachadh plathadhachd sioncopach anns an NAc le ionnanachdan is eadar-dhealachaidhean seach an fheadhainn a dh'adhbhraich psychostimulants.

In co-dhùnadh, gun deach dearbhadh gu robh gnàth-eòlas gnèitheasach agus brùthadh duais an dèidh sin ann an radain fhireann a ’adhbharachadh cuideachadh luath agus maireannach ann an giùlan feise, coltach ri buaidhean gnàth-shìde air mothachadh do ghluasad san locomotive a tha a’ toirt buaidh air amphetamine [11], agus bha e co-cheangailte ri lùghdachadh luath agus maireannach ann an co-chomharran AMPA / NMDA ann an synapses ann am suaicheantas NAc. A bharrachd, dh'adhbhraich fèin-fhiosrachadh gnèitheas àrdachadh luath de NMDAR agus ath-sgaoileadh a bha gu mall ag ath-sgaoileadh AMPAR gu uachdar niùclas nan NAc. Mar sin, coltach ri buaidhean psychostimulants, faodaidh giùlan duais nàdarra atharrachaidhean fad-ùine adhbhrachadh ann an abairt gabhaltachd glutamate, malairt dhaoine, agus leisgeul. Ach, a bhith a ’cumail a-mach bho eòlas gnèitheasach, a’ leantainn air sin bho bhith a ’leantainn cocaine, dh'adhbharaich sin gun do lean an lùghdachadh ann am co-mheas AMPA / NMDA ann am slige na NAc. Chaidh grunn bharailean a dhearbhadh a dh'fhaodadh a bhith ann airson bun-chùisean taice airson an neo-chunbhalachd seo, nam measg atharrachaidhean air synapses a bha a ’freagairt BLA, a’ leantainn air eòlas duais nàdarra. Tha na dàta sin a-rithist a ’nochdadh an dà chuid ionnanachdan agus eadar-dhealachaidhean eadar buaidhean fad-amail de dhuais air nàdar agus dhrogaichean agus dh’ urrainn dhaibh cur ri tuigse nas fheàrr air mar a dh ’fhaodas drogaichean obrachadh air an t-slighe duais nàdarra seo.

Dòighean-obrach

Aithris Èisteachd

Chaidh a h-uile modh aontachadh le Comataidh Cùram agus Cleachdadh Ainmhidhean aig Oilthigh Taobh Siar Ontario agus chaidh a cho-cheangal ri stiùireadh Comhairle Cùram Bheatha ann an Canada a bha a ’toirt a-steach beathaichean veirteabrach ann an rannsachadh.

Animals

Fhuair radain inbheach Sprague Dawley (deuchainn 1 agus 2: 10 – 12 seachdainean; deuchainnean 3, 8 – 10 seachdainean aig àm tòiseachadh deuchainnean) bho Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Bha beathaichean den aon ghnè a ’fuireach ann an cèids Plexiglas le tiùb tunail ann an seòmar air a riaghladh le teothachd air a chumail air cearcall dorcha dorcha 12 / 12 hr le biadh agus uisge ri fhaighinn. ad libitum ach aig àm deuchainn giùlan. Fhuair boireannaich brosnachaidh (210 – 220 gramaichean) airson seiseanan suathadh ion-phlanadh ìochdarach anns a bheil 5% estradiol bezoate agus colesterol 95% às dèidh dìth dà-thaobhach. Chaidh gabhail ri gnèitheas a bhrosnachadh le rianachd 500 µg progesterone ann an ola 0.1 mL sesame mu 4 uair a thìde mus deidheadh ​​a dhearbhadh.

Eòlas Gnè

Bha na radain fhireann gu lèir a ’clann gu ìre mus do thòisich na deuchainnean. Chaidh seiseanan gintinn a chumail rè an ìre dhorch dhorch (eadar 2 – 6 uairean an dèidh tòiseachadh na h-ùine dhorcha) fo sholas dearg. Anns gach seisean measgaichte bha e comasach dha radain fhireann a dhol suas gu ejaculation no gu uair 1, agus chaidh paramadairean airson giùlan feise a chlàradh, a ’gabhail a-steach: suain (ML; àm bho bhith a’ tòiseachadh gus an tè den chiad ìre), fanaid eadar-dhèante (IL; àm tòiseachaidh; de bhoireannaich gus a ’chiad dol-a-mach le drùdhachadh na fala), agus gleusadh ejaculation (EL; ùine bhon chiad in-chur gu ejaculation) [83]. Chaidh smachd a chumail air na gnèithean feise, anns na h-aon seòmraichean ri na h-ainmhidhean suirghe agus mar sin bha iad fosgailte do na h-aon ìrean fuaim, buaireadh coitcheann agus fàilidhean fad às bho bhoireannaich torrach, ach cha robh cead aca eadar-ghnìomhachadh no companach le boireannaich ghlasa.

Deuchainn 1: Cobhair Gnè

Bidh radain fhireann Sprague Dawley a ’seasamh sna cèidsichean dachaigh aca airson 5 airson seiseanan suirghe gach latha. Chaidh beathaichean a roinn ann am buidhnean deuchainn 2 agus chaidh an dearbhadh airson giùlan gnèitheach seachdain 1 no 1 mìos às dèidh an seisean mathaidh mu dheireadh (Latha na Deuchainn;=7 gach buidheann). Chaidh buidhnean a mhaidseadh le crìochan de ghiùlan feise agus cha deach eadar-dhealachaidhean mòra sam bith a lorg eadar buidhnean airson tomhas giùlan feise sam bith fhad ’sa bha iad a’ faighinn eòlas feise.

Mion-sgrùdadh Dàta

Chaidh coimeas a dhèanamh eadar buidhnean mar a bhith a ’dèanamh measadh air Latha 1 agus 5 de eòlas gnèitheach gus cuideachadh le giùlan gnàthach le eòlas gnèitheasach, eadar Latha 1 agus Latha deuchainn, agus eadar Latha 5 agus Latha deuchainn (seachdain 1 no 1 mìos às deidh Latha 5) airson beinn. , gluasadan in-ghearraidh agus ejaculation a ’cleachdadh deuchainn Clàr-chomharraichte Wilcoxin le ìre cudromachd 5%.

Deuchainn 2: Ath-sgaoileadh / Mìneachadh Fo-ghabhail Glutamate Ionotropic

Gus sgrùdadh a dhèanamh air ath-riarachadh gabhadain ionotropic, chaidh feum a dhèanamh de paradigm coltach ri deuchainn 1. Bha radain fireann Sprague Dawley air an roinn ann am buidhnean a bha fiosraichte a thaobh gnè agus ginidh. Airson na buidhnean le eòlas gnàthach, chaidh eòlas gnàthach fhaighinn tro 5 seiseanan suathadh làitheil (mar a tha mìnichte gu h-àrd). An uair sin chaidh na fireannaich a dh ’eòlas feise a roinneadh ann am buidhnean deuchainn 3 (air am maidseadh le crìochan modh-giùlain gnèitheach) airson cruinneachadh maothran, an dàrna cuid 1 day, seachdain 1, no mìos 1 às deidh an seisean maidseadh mu dheireadh. Bha brains bho smachdan gnèitheach neo-ghnèitheach (air an làimhseachadh mar a tha mìnichte gu h-àrd) air an cruinneachadh aig puingean-seasaimh co-ionann às deidh an làimhseachadh mu dheireadh. Ghabh na buidhnean a-steach: fiosrachadh gnèitheach (AMPAR: 1D, n=9; 1W, n=12; 1M, n=12; NMDAR: 1D, n=9, 1W no 1M, n=6) no neo-chràbhach feise (AMPAR: 1D, n=9; 1W, n=12; 1M, n=12; NMDAR: 1D, n=9, 1W no 1M, n=6).

Crois-còmhnard a ’co-cheangal

Chaidh beathaichean a euthanachadh le sodium pentobarbital (270 mg / kg; ip) agus an uairsin air a dhì-chomasachadh. Às deidh dhaibh a dhol dheth, chaidh gach eanchainn a thoirt air falbh gu sgiobalta agus a chuir ann an saline fuar-deighe. Chaidh NAc dà-thaobhach a sgaoileadh le bhith a ’cleachdadh matrix eanchainn radan (ionnstramaidean ASI, Warren, MI, na SA) agus lann scalpel a rèir crìochan NAc air am mìneachadh le Paxinos & Watson (1998). An ath rud, chaidh stuth-ceangail NAc a ghearradh ann an ciùban 400 × 400 µm a ’cleachdadh chopper clò McIlwain (Vibratome, St. Louis, MO, USA). Bha modh-obrach airson tar-cheangal subunit gabhadair AMPA agus NMDA stèidhichte air Boudreau & Wolf [53]. Sa bhad às dèidh sgrìobadh, chaidh maothran na h-eanchainn a ghluasad gu sgiobalta gu pìob Eppendorf anns a bheil 1 mL de aCSF fuar-deighe air a shnìomh leis an bis pròtain ath-cheangail bis (sulfosuccinimidyl) suberate (BS3, 2 mM; Teicneòlas bith-beò aig Pierce, Rockford, IL, na SA) agus le greim airson mionaid 30 air rocair aig 4 ° C. BS3 nach eil e a ’dol thairis air meuran craicinn, a’ toirt cothrom dha pròtainean air an sgaoilte le sruthan srutha a thras-cheangal gu taghte, agus mar sin a ’cruthachadh iomallan cuideam àrd moileciuil, agus chan eil pròtainean ion-ghlanach gan atharrachadh. Tha am freagairt seo a ’toirt cothrom do lobhtaichean pròtain de dh'ùirneis agus in-mheadhain a bhith air an sgaradh air MW le bhith a’ cleachdadh electrophoresis sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel (SDS-PAGE) agus sgrùdadh Blot an Iarthair. Chaidh an fhreagairt tar-cheangail a mhùchadh le bhith a ’cur ri 100 µL de ghliutine 1 M airson 10 mionaid aig 4 ° C. Chaidh feòil a ’shiùbhladh le ceann-làthaireachd aig 14 000 rpm airson 2 mionaidean aig 4 ° C agus chaidh an t-àrd-neach a chuir air falbh. Chaidh na peilearan an cur an dara taobh ann an 400 µL de bhufair lysis fuar-deighe [25 mM Hepes (pH 7.4), 500 mM NaCl, 2 mM EDTA, 1 mM DTT, 1 mM PMSF, 20 mM NaF, 0.1% Nonidet P-40 (0.1 %), dìonach dìonadair dìon (Ministop, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, a ’Ghearmailt) agus cocktail neach-dìon phosphatase 1 (Phosstop, Roche Diagnostics GmbH,)]. Bha samhlaichean air an cur sìos airson diogan 5 gus briseadh a-steach gu maoth, agus an uair sin a chaidh a chromadh aig rionnag 14 000 airson 2 min aig 4 ° C agus air a chuir sa bhad gu bloc deigh. Chaidh supernatant a ghluasad gu pìob ùr Eppendorf, às an deach 30 µL de shampall a chuir air deigh agus chaidh an sàr-neach a bha air fhàgail a stòradh aig −80 ° C airson sgrùdadh Blot an Iar. Airson gach ball, chaidh an àireamh pròtain de lysates thar-cheangail a dhearbhadh a ’cleachdadh assay BCA (ThermoFisher Scientific Inc., Waltham, MA) agus NanoDrop ND-1000 spectrophotometer (ThermoFisher Scientific Inc., Waltham, MA).

Mion-sgrùdadh Blot an Iar

Bha na pròtainean pròtain (20 µg) air an luchdachadh is air an toirt air falbh le reul-uidheam air geansaidh 4-15% gels Tris-HCl (Bio-Rad Laboratories Ltd, Mississauga, Ontario, Canada) a ’cleachdadh siostam Cell Tar-Blot Mini (Bio-Rad Laboratories Ltd.) agus Tris-Glycine-SDS a ’ruith bufair [25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS (pH8.3)]. Precision Plus pròtain Chaidh na h-inbhean gu h-iomlan (Bio-Rad Laboratories Ltd.) an cleachdadh mar chomharran cuideam molecular. An dèidh sgaradh, chaidh pròtainean a ghluasad gu na bileagan dh ’an-bheag de stuth polvinoileene (MillDFore, Billerica, MA, SA) Millipore ann an còmhnard a’ cleachdadh siostam cnàmh fliuch Trans-Blot (Bio-Rad Laboratories Ltd.) airson a bhith a ’dìon. Bha an gluasad pròtain air a ruith ann am bufair tar-chuir (meamran 20% agus 0.037% SDS ann an Tris-Glycine [25 mM Tris, 192 mc Glycine (pH 8.3)] aig 82 V airson 1 hr aig teòthachd seòmar (RT). co-dhiù a tha dùblaichte, cothromaichte thar bhuidhnean, agus thairis air guthan fa leth.

An dèidh sin, chaidh seicichean a ghrùdadh ann an 2[co-mheas]Fuasgladh 3 de Buffking Bussking Odyssey (LI-COR Biosciences, Lincoln, NE) agus Tris-Buffered Saline (TBS; 50 mM Tris agus 150 mM NaCl (pH8.0)) airson 1 hr air clàr saighead aig RT. Chaidh na bileagan an uairsin a ghrùdadh airson 16 horn air crathadh aig 4 ° C le an dàrna cuid coineanach polyclonal anti-GluA1 (∼106 kDa; 1[co-mheas]1K; Millipore, Cat # AB1504) agus GluA2 (∼100 kDa; 1[co-mheas]4K; Millipore, Cat # AB1768), no anti-NR1 monoclonal luch (∼130 kDa; 1[co-mheas]2K; Upstate (Millipore), Cat # 05-432). Chaidh na bun-antibodies seo a chleachdadh roimhe agus a dhearbhadh [84], [85], agus a chuir ri chèile aon chòmhlan aig an cuideam mhoilecànach iomchaidh a chaidh a bhacadh le bhith a ’toirt a-steach an antibody le peptide nuair a bhathar a’ cleachdadh air stuth nach eil air a cheangal le crois. Chaidh a h-uile antibodies a lagachadh ann am 2[co-mheas]Measgachadh 3 de Odyssey a ’Dùnadh Bufair le TBS-T (TBS + 0.05% Tween-20 (pH8.0). An dèidh trì fheòil 10-min ann an TBS-T, chaidh na meamranan a ghrùdadh ann an antibodies àrd-ìreach air an lagachadh ann am 2[co-mheas]Measgachadh 3 de Odyssey Blocking Buffer agus TBS-T airson 1 hr aig RT. Tha na antibodies àrd-sgoile a ’toirt a-steach Alexa-680 gobhar fo-chuingichte an aghaidh na coineanaich (1[co-mheas]5K; Invitrogen, Carlsbad, CA, na SA) no IR Dye800 gobhar fo-chuingeach CW-tochte (1[co-mheas]10K; LI-COR Biosciences). Chaidh lèirsinn dìonachd flùranach a shealltainn agus dealbhan a ghlacadh a ’cleachdadh sganair Odyssey 2.1 (LI-COR Biosciences).

Mion-sgrùdadh meud agus anailis

Airson gach sampall pròtain, chaidh ìrean dian fluorescence airson gach còmhlan (High MW,> 250 kDa airson faireachdainn uachdar, agus bannan aig an MW sònraichte a tha air an liostadh gu h-àrd airson abairt intracellular) a dhearbhadh a ’cleachdadh bathar-bog Odyssey agus chaidh cuibheasachd a thomhas airson gach beathach. Chaidh luachan dùmhlachd bann uachdar (S), intracellular (I), co-mheas (S / I, tomhas de sgaoileadh subunit gabhadain) agus luachan dùmhlachd bann iomlan (S + I, tomhas de làn-ghabhail gabhadain) gu luachan cuibheasach smachd naïve feise co-fhreagarrach buidhnean. Cha robh eadar-dhealachadh sam bith ann an dian fluorescence eadar na mac-samhail de gach sampall (air a luchdachadh ann an diofar gels), a ’dearbhadh an dìth caochlaideachd ann an luchdachadh nan sampallan pròtain. Chaidh a h-uile dàta Western Blot a sgrùdadh eadar smachdan feise agus smachd feise na feise aig an aon àm a ’cleachdadh deuchainnean-t gun chàradh le ìre brìgh de 0.05

Deuchainn 3: Electrhysiology

Chaidh an aon dealbhadh deuchainn a chleachdadh mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd airson deuchainnean 1 agus 2. Chaidh na fireannaich a dh ’eòlas feise a roinneadh ann am buidhnean deuchainn 3, air an co-fhreagairt airson coileanadh giùlain gnè, agus stèidhichte air an àm a chaidh cruinneachadh meineachan a dhèanamh 1 day, seachdain 1 no mìos 1 às deidh an seisean maidseadh mu dheireadh (1 day, n=7; 1 week, n=9; Mìos 1, n=10). Cha robh eadar-ghiùlan feise anns na radain fhireann òga sin eadar-dhealaichte bho dhol a-mach gnèitheasach nan radain fireann as sine ann an deuchainnean 1 agus 2. Bha radain air an sìolachadh le sodium pentobarbital (270 mg / kg; ip) agus an uairsin le perfusion transcardial le ogsaidean fuar-deighe (95% O2, 5% CO2) fuasgladh ullachaidh anns a bheil [250 mc Sucrose, 2.5 mM KCl, 1.25 mM NaH2PO4, 4 mM MgCl2, 0.1 mM CaCl2, 26 MM NaHCO3, 10 glucose mM, 3 mM myoinositol, 2 mM sodium pyruvate, agus 0.5 mM ascorbat]. Chaidh an eanchainn a chreachadh agus a chur ann am fuasgladh ullachaidh ogsaideanadh fuar-deighe. Chaidh sliseagan de na eanchainn dubh, 400 µm tiugh, fhaighinn bho gach beathach a ’cleachdadh vibratome (Microm, Walldorf, a’ Ghearmailt). Chaidh sliseagan 4 an eanchainn gu h-iomlan a ghluasad gu seòmar suidhe le lionn-cnàimh fuadain (aCSF) [125 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 1.25 mM NaH2PO4, 1.3 mM MgCl2, 2.5 mM CaCl2, 26.2 MM NaHCO3 agus 10 glucose], air a theasachadh gu 32 ° C airson mionaid 30, agus an uair sin ceadaichte dha faighinn air ais gu teòthachd seòmar airson co-dhiù 1 hr mus deach aon slis a chuir ann an seòmar clàraidh. Chaidh an seòmar seo a sparradh le ACSF le ogsaidean aig 22 ° C. Cha robh eadar-dhealachaidhean eadar buidhnean airson crìochan giùlain gnèitheach. Bha brains air an cruinneachadh bho smachdan gnèitheach neo-chuiseach aig gach ceann de na puingean-ama 3 às deidh an làimhseachadh mu dheireadh (n=3 – 4 an aon).

Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air neurons slige ann am sgeilpean fo-thapaidh NAc nach robh stròc droma air [72]. Chaidh microelectrodes bipolar stàilinn dhosmálta a chuir anns a ’chrìoch prelimbic cortex-NAc gu crìche ris an dealan-clàraidh clàraidh airson brosnachadh preynaptic air snàithleanan cortach càirdeach. Chaidh neurlan spìosrach meadhanach mòr aithneachadh le lèirsinn am meudachd (timcheall air 30 – 35 µ trast-thomhas M) agus comas meidheadair an ìre mhath ìosal fo −75 gu −85 mV. Chaidh clàraidhean a dhèanamh a ’cleachdadh inneal ath-nuadhachaidh Axopatch 200A agus ìre samplachaidh de 20 kHz (Digidata 1340), le criathradh ìosal ìosal 10 kHz. Chaidh PClamp 9.0 a chleachdadh airson pròtacalan deuchainn agus mion-sgrùdadh. Chaidh co-èignichean a bhrosnachadh le buillean paidhir (50 ms ISI) aig 0.1 Hz agus neurons le bhith a ’cleachdadh dealan-droma tungstain co-chuimseach bipolar. Bha ceallaichean air an clampadh aig bholtaids aig −80 mV, agus air an lagachadh gu + 40 mV airson 500 ms ro bhrosnachadh synaptic, gus am maloc magnesium de sruthan NMDA a mhaothachadh. Chaidh co-mheasan AMPA / NMDA a shocrachadh le bhith a ’toirt cuibheas de EPSCs aig + 40 mV ann an dìth no an neach-gleidhidh an APTR AP5 (50 µM; sruthan cealla iomlan 30 × smachd agus 30 × ann an làthaireachd AP5). Chaidh freagairt NMDA obrachadh a-mach le bhith a ’toirt air falbh clàran AP5 bho smachd. Chaidh mullach AMPAR EPSC a roinn leis an ìre as àirde de NMDAR EPSC gus co-mheas AMPA / NMDA a thoirt seachad. Gus co-mheasaidhean pullach ann an càraidean a thomhas, chaidh tomhas a dhèanamh aig −80 mV le brosnachadh presynaptic (30 ×).

Mion-sgrùdadh Dàta

Chaidh dàta bho na smachdan feise gnèitheach a chur còmhla gus aon bhuidheann smachd a chruthachadh (n=10 neurons ann an 10 ainmhidhean) oir cha deach eadar-dhealachaidhean staitistigeil a lorg eadar puingean-ùine taobh a-staigh smachdan. Buidhnean a tha fiosraichte gu feise (1 day, n=7; 1 week, n=9; Mìos 1, n=Niùclasach 10; mar as trice aon neuron gach beathach) an coimeas ris a ’bhuidheann smachd feise mar naomh, a’ cleachdadh ANOVA aon-slighe (factaran: àm tìm) agus air a leantainn le Fisher LSD airson post hoc coimeas ri ìre cudromachd 5%.

Acknowledgments

Tha sinn a ’toirt taing don Dr. Marina E. Wolf agus Mike Milovanovic aig Rosalind Franklin Oilthigh Leighis agus Saidheans airson an comhairle teicnigeach aca.

Footnotes

Ùidhean farpaiseach: Tha na h-ùghdaran air innse nach eil com-pàirtean sam bith ann.

Maoineachadh: Institiud Rannsachadh Slàinte Chanada gu LMC agus ARD, agus Comhairle nan Saidheansan Nàdarra agus Rannsachadh Rannsachaidh gu LMC agus KKP. Cha robh àite sam bith aig an luchd-maoineachaidh ann an dealbhadh ionnsachaidh, cruinneachadh dàta agus sgrùdadh, co-dhùnadh am foillseachadh, no ullachadh na làmh-sgrìobhainn.

iomraidhean

1. Morgane PJ, Galler JR, Mokler DJ. Lèirmheas air siostaman is lìonraidhean den limb forebrain / limbic midbrain. Prog Neurobiol. 2005;75: 143-160. [Sgaoileadh]
2. Avena NM, ME Bocarsly, Rada P, Kim A, Hoebel BG. An dèidh a bhith a ’gabhail buille gach latha air fuasgladh sucrose, tha bochdainn bìdh ag adhbhrachadh iomagain agus a’ dèanamh mì-chothromachadh dopamine / acetylcholine. Physiol Behav. 2008;94: 309-315. [Sgaoileadh]
3. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Tha eadar-dhealachadh sònraichte eadar sprùilleach agus sparradh saill ann an giùlan coltach ri tràillean. J Nutr. 2009;139: 623-628. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
4. Avena NM. Ag ithe ithe a ’chaitheimh: beachdan neurochemical bho mhodalan bheathaichean. A ’Biadh Ith. 2009;17: 89-92. [Sgaoileadh]
5. Z Zutictic, Reyes TM. Cuairtean dopaminergic meadhanach a ’cumail smachd air biadh agus duais bidhe: buaidh air riaghladh reamhrachd. Wiley Interdisciplín An t-Urr Syst Biol Med. 2010;2: 577-593. [Sgaoileadh]
6. Yoshida M, Yokoo H, Mizoguchi K, Kawahara H, Tsuda A, et al. Bidh ithe agus òl ag adhbhrachadh sgaoileadh dopamine nas motha anns an nccleus accumbens agus ceàrnaidh chuibhrinn fionnarach sa radan: tomhas le in vivo microdialysis. Neurosci Lett. 1992;139: 73-76. [Sgaoileadh]
7. Numan M. Siostaman brosnachail agus cuairteachadh neodrach de ghiùlan mhàthaireil anns an radan. Dev Psychobiol. 2007;49: 12-21. [Sgaoileadh]
8. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Innealan ceallach airson ceangal sòisealta. Horm Behav. 2001;40: 133-138. [Sgaoileadh]
9. LJ Òg, Wang Z. Neurobiology de cheangal paidhir. Nat Neurosci. 2004;7: 1048-1054. [Sgaoileadh]
10. Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. A ’measgachadh measgachaidhean: ath-sgrùdadh air buaidh dhrugaichean air giùlan gnè ann am mac an duine agus modailean bheathaichean. Horm Behav. 2010;58: 149-162. [Sgaoileadh]
11. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, et al. Neuroplasticity anns an t-siostam mesolimbic a dh'adhbhraicheas duais nàdarra agus brìgh an dèidh làimhe. Eòlas-inntinn Biol. 2010;67: 872-879. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
12. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, et al. Tha buaidh DeltaFosB anns an niùclas a ’cur suas air giùlan duais co-cheangailte ri nàdar. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
13. Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, et al. Atharrachaidhean ann an sloinneadh gine taobh a-staigh an nucleus accumbens agus striatum às dèidh eòlas gnèitheach. Genes Brain Behav. 2005;4: 31-44. [Sgaoileadh]
14. Bradley KC, Meisel RL. Tha in-ghabhaltachd c-Fos anns an necleus accumbens agus gnìomhachd locomotives amphetamine air an toirt am follais le eòlas gnèitheasach roimhe seo ann an hamstairean boireann boireann. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [Sgaoileadh]
15. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Duais dhrabasta ann an radain fireann: buaidh eòlas gnèitheach air roghainnean àite suidhichte co-cheangailte ri ejaculation agus eadar-theachdan. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
16. Agmo A, Berenfeld R. Daingneachadh feartan ejaculation anns an radan fireann: àite opioids agus dopamine. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [Sgaoileadh]
17. Agmo A, Gomez M. Tha ath-dhaingneachadh gnèitheach air a thoirmeasg le stad de naloxone a-steach don sgìre ro-ghnèitheach meadhain. Behav Neurosci. 1993;107: 812-818. [Sgaoileadh]
18. Kagan J. Luach luachaidh eadar-dhealaichte air giùlan gnèitheach neo-iomlan agus iomlan. J Comp Physiol Psychol. 1955;48: 59-64. [Sgaoileadh]
19. Lopez HH, Ettenberg A. Buadhan brosnachail feise: lughdachadh buaidh brosnachail aig àm gabhaltachd dopamine. Pharmacol Biochem Behav. 2002;72: 65-72. [Sgaoileadh]
20. Sheffield FD, Wulff JJ, Backer R. Luach a dh ’aindeoin copulation gun lughdachadh air gnè feise. J Comp Physiol Psychol. 1951;44: 3-8. [Sgaoileadh]
21. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Sgrùdaidhean de ghiùlan ionnsramaideach le ath-neartachadh gnèitheach ann an radain fireann (Rattus norvegicus): I. Smachd air na gluasadan lèirsinneach goirid le paidhir gheur. J Comp Psychol. 1987;101: 395-406. [Sgaoileadh]
22. Everitt BJ, Stacey P. Sgrùdaidhean de ghiùlan ionnsramaideach le ath-neartachadh gnèitheach ann an radain fireann (Rattus norvegicus): II. Buaidh laigsean sgìre ro-thogalach, sparradh, agus testosterone. J Comp Psychol. 1987;101: 407-419. [Sgaoileadh]
23. Luchd-glèidhidh KK, KS Frohmader, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, et al. Tha DeltaFosB anns an nucleus accumbens deatamach airson a bhith a ’toirt buaidh air buannachdan duaise. Genes Brain Behav. 2010;9: 831-840. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
24. Dietz DM, Dietz KC, Nestler EJ, Russo SJ. Siostaman moileiciùlach airson plasticity a tha air a bhrosnachadh le psychostimulant. Bùth-leigheis-leigheis. 2009;42(Suppl 1): S69 – 78. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
25. McClung CA, Nestler EJ. Riaghladh air riochdachadh gine agus duais cocaine le CREB agus DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [Sgaoileadh]
26. Robinson TE, Kolb B. Plaisteachas structarail co-cheangailte ri bhith a ’nochdadh do dhrogaichean de dhroch-dhìol. Neuropharmacology. 2004;47(Suppl 1): 33-46. [Sgaoileadh]
27. Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM. Bidh nochdadh còmhla ri methamphetamine agus giùlan feise a ’neartachadh duais dhrogaichean às dèidh sin agus ag adhbharachadh giùlan feise èigneachail ann an radain fhireann. J Neurosci. 2011;31: 16473-16482. [Sgaoileadh]
28. Grimm JW, Hope BT, Wise RA, Shaham Y. Neuroadaptation. Goir de bhith a ’gineadh a’ chocàin an dèidh tarraing às. Nàdar. 2001;412: 141-142. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
29. Tòmas MJ, Kalivas PW, Shaham Y. Neuroplasticity anns an t-siostam mesolimbic dopamine agus tràilleachd airson cocain. Br J Pharmacol. 2008;154: 327-342. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
30. Madadh ME. An Bermuda Triangle de neuroadaptations a ’toirt air falbh bho chocaine. Trends Neurosci. 2010;33: 391-398. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
31. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, et al. Cruthachadh accumbens GluR2-a-mach le bhith a ’gabhail a-steach gabhadan AMPA le bhith a’ guir a ’gineadh de chocàin. Nàdar. 2008;454: 118-121. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
32. McCutcheon JE, Wang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Tha gabhadain AMPA calcium-so-dhrùidhteach an làthair anns an niùclas a 'toirt synapses às deidh dhaibh a bhith air an toirt air falbh bho bhith a ’faighinn a-mach à còca ach chan eil iad a’ dèanamh cocaine deuchainneach. J Neurosci. 2011;31: 5737-5743. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
33. McGeorge AJ, Faull RL. Rianachd an ro-shealladh bhon chortex cerebrral chun an striatum san radan. Eun-eòlas. 1989;29: 503-537. [Sgaoileadh]
34. Kourrich S, Thomas MJ. Neurons coltach ris, atharrachaidhean mu choinneamh: tha eòlas psychostimulant ag atharrachadh eadar-dhealachadh eadar lotaichean losgadh ann am meur accumbens an aghaidh slige. J Neurosci. 2009;29: 12275-12283. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
35. Ishikawa M, Mu P, Moyer JT, Wolf JA, Quock RM, et al. Plaisteachas meuran co-cheangailte ri Homeostatic a tha air a dhraibheadh ​​anns an niùclas accumbens neurons. J Neurosci. 2009;29: 5820-5831. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
36. Moussawi K, Pacchioni A, Moran M, Olive MF, Gass JT, et al. Tha N-Acetylcysteine ​​a ’tilleadh mu choinneamh metaphsticity a tha air a ghineadh le cocaine. Nat Neurosci. 2009;12: 182-189. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
37. Mu P, Moyer JT, Ishikawa M, Zhang Y, Panksepp J, et al. Bidh a bhith ag innse mu dheidhinn cocaine gu riaghailteach a ’riaghladh an lùghdachaidh ann an membrane gnèitheach de neurons niùclasaich a tha ann. J Neurosci. 2010;30: 3689-3699. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
38. Zhang XF, Cooper DC, White FJ. Tha leigheas ath-dhèanta de chocain a ’lùghdachadh gu bheil an sruth calcium làn-chealla ann an niùclas radan a’ faighinn neurons. J Pharmacol Exp Ther. 2002;301: 1119-1125. [Sgaoileadh]
39. Zhang XF, Hu XT, Geal FJ. Plaisteachas cealla slàn ann an tarraing air ais chocain: sruthan sodium lùghdaichte ann an niùclas accumbens niùclasach. J Neurosci. 1998;18: 488-498. [Sgaoileadh]
40. Hu XT, Basu S, Geal FJ. Bidh rianachd còcainn air ais a ’toirt casg air HVA-Ca2 + na comasan agus a’ cur ris a ’ghnìomhachd aig K + chaintean ann an nobhail radan. J Neurophysiol. 2004;92: 1597-1607. [Sgaoileadh]
41. Hu XT, Ford K, White FJ. Bidh rianachd còcainn air ais ag ìsleachadh calcineurin (PP2B) ach a ’leasachadh DARPP-32 modh-atharrachadh de sruthan sodium ann an nucleus radain neifionan. Neuropsychopharmacology. 2005;30: 916-926. [Sgaoileadh]
42. Madadh ME. An t-àite a tha aig aimneachan neo-chliùiteach amino ann an drùidheadh ​​gluasadach gu gluasadan inntinn. Prog Neurobiol. 1998;54: 679-720. [Sgaoileadh]
43. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Atharrachaidhean ann an tar-chur dopaminergic agus glutamatergic ann an inntrigidh agus cur an cèill a dh ’fhaireachdainn giùlain: sgrùdadh breithneachail air sgrùdaidhean ro-innleachdach. Eòlas-inntinn (Berl) 2000;151: 99-120. [Sgaoileadh]
44. Madadh ME, Ferrario CR. Plasticity receptor AMPA anns an niùclas accumbens às deidh dha a bhith an-còmhnaidh còmhla ri cocaine. Neurosci Biobehav An t-Urr. 2010;35: 185-211. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
45. Pierce RC, Bell K, Duffy P, Kalivas PW. Bidh a ’chocain air ais air ais a’ toirt a-mach sgaoileadh searbhag neo-dhiadhach amino anns an niùclas accumbens dìreach ann an radain a tha air mothachadh do ghiùlan a leasachadh. J Neurosci. 1996;16: 1550-1560. [Sgaoileadh]
46. Suto N, Tanabe LM, Austin JD, Creekmore E, Pham CT, et al. Tha a ’chiad eòlas air psychostimulants a’ cur ri ath-shuidheachadh cocain a ’sireadh le nucleus accumbens AMPA. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 2149-2159. [Sgaoileadh]
47. Còrnais JL, Kalivas PW. Tar-chur glutamate anns an niùclas accumbens mheadhanan ath-bheothachadh ann an tràilleachd cocain. J Neurosci. 2000;20: RC89. [Sgaoileadh]
48. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Bidh dol-a-mach gnèitheasach agus leigheasan co-cheangailte ri gnè a ’cur an siostam mesolimbic an gnìomh ann an radain fhireann. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [Sgaoileadh]
49. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, et al. Bidh DeltaFosB ann an cuairtean duais eanchainn a ’toirt taic do dhuilgheadas airson freagairtean cuideam is a-thaobh droch-fhaireachdainn. Nat Neurosci. 2010;13: 745-752. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
50. Ferrario CR, Li X, Wang X, Reimers JM, Uejima JL, et al. Dleastanas ath-riarachadh gabhadan glutamate ann an mothachadh locothan gu cocaine. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 818-833. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
51. Boudreau AC, Ferrario CR, Glucksman MJ, Wolf ME. Mion-atharrachaidhean air slighean comharrachaidh agus pròtain ùr-nodha kinase A fosglaidhean co-cheangailte ri mothachadh do ghiùlan air giùlan cocaine. J Neurochem. 2009;110: 363-377. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
52. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Madadh ME. Bidh gabhadain AMPA anns a ’chnàmh radan a’ fàs nas motha nuair a tha iad a ’tarraing air ais a’ choc, ach bidh iad a ’suidheachadh an dèidh dùbhlan cocaine ann an co-bhoinn ri atharrachadh atharrachadh air kinases pròtain mitogen-gnìomha. J Neurosci. 2007;27: 10621-10635. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
53. Boudreau AC, Wolf ME. Tha an ìre de dh'iompar ris a ’chocaine co-cheangailte ri bhith a’ nochdadh gu h-àrd còmhdachadh còmhnard AMPA anns an nuumbeus accumbens. J Neurosci. 2005;25: 9144-9151. [Sgaoileadh]
54. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Bidh eòlas cococaidh a ’riaghladh plaidigs synaptic leth-dhèante anns an nuumbeus accumbens. J Neurosci. 2007;27: 7921-7928. [Sgaoileadh]
55. Ghasemzadeh MB, Mueller C, Vasudevan P. Tha an ìre de dhuilgheadas giùlain ann an cocaine co-cheangailte ri malairt gabhaltachd glutamate nas motha chun dùmhlachd postynaptic às deidh ùine tarraing às air falbh. Eun-eòlas. 2009;159: 414-426. [Sgaoileadh]
56. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, et al. Plaisteachas synaptic air a dh ’ionnsaigh Cocaine: tha leantainneachd san VTA a’ gluasad atharrachaidhean ann an NAc. Nat Neurosci. 2009;12: 1036-1041. [Sgaoileadh]
57. KR ainmeil, K Vataresan V, Sadri-Vakili G, Schmidt HD, Mierke DF, et al. Tha sgrùdadh deatamach air malairt dhrogaichean phosphorylation a tha a ’gabhail a-steach le luchd-gabhail AMPA le GluR2 anns an nuumbeus accumbens ann a bhith ag ath-shuidheachadh a’ lorg cocain. J Neurosci. 2008;28: 11061-11070. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
58. Bachtell RK, Self DW. Bidh an sgaoileadh cocain ath-nuadhaichte a ’dèanamh atharrachaidhean thar-ùine ann an giùlan niùclas accumbens AMPA. J Neurosci. 2008;28: 12808-12814. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
59. Karler R, Calder LD, Chaudhry IA, Turkanis SA. Bacadh air “fo-fhaireachdainn air ais” gu cocaine agus amphetamine le MK-801. Beatha Sci. 1989;45: 599-606. [Sgaoileadh]
60. Schumann J, Yaka R. Bidh tarraing a-mach à bhith a ’faighinn a-mach bho bhith a’ faighinn a-mach bho chocaine gun stad a ’fàs gu h-àrd ann an gluasad gu ruige NMDA agus gnìomhachd ERK anns an nucleus accumbens. J Neurosci. 2009;29: 6955-6963. [Sgaoileadh]
61. Powell WS, Dominguez JM, Hull EM. Tha freumhaiche NMDA a ’toirt buaidh air dùblachadh agus àrdachadh gnàth-chaise ann an giùlan feise fireann anns an radan. Behav Neurosci. 2003;117: 69-75. [Sgaoileadh]
62. Fleming AS, Kucera C. Bidh buaidh gnàth-eòlasach air a chuir an dà chuid leis an inhibitor pròtain-synthesis, cycloheximide, agus leis an galair NMDA noncompetitive, MK-801. Behav Neural Biol. 1991;56: 319-328. [Sgaoileadh]
63. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown JL, Davis BA, et al. Bidh gintinn a ’toirt a-steach na gabhadan a th’ ann an NMDA anns an raon meadhanach ro-àbhaisteach de radain fhireann. Behav Neurosci. 2007;121: 1023-1031. [Sgaoileadh]
64. Bisaga A, Padilla M, Garawi F, Sullivan MA, Haney M. Buaidhean ath-dhaingniche agus craving eile air an roghainn toitean a smocadh anns an obair-lann. Sgaoileadh. 2007;22: 41-47. [Sgaoileadh]
65. Yonghui L, Xigeng Z, Yunjing B, Xiaoyan Y, Nan S. Buaidhean eadar-dhealaichte le MK-801 air a ’nochdadh biadh agus roghainn àite suidheachaidh morphine ann an radain. J Psychopharmacol. 2006;20: 40-46. [Sgaoileadh]
66. Huang YH, Lin Y, Mu P, Lee BR, Brown TE, et al. Bidh eòlas in cocivo in vivo a ’gineadh sioncogaidean sàmhach. Neuron. 2009;63: 40-47. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
67. Liao D, Zhang X, O'Brien R, Ehlers MD, Huganir RL. Riaghladh synapses postynaptic morphologach ann a bhith a ’leasachadh neurons hippocampal. Nat Neurosci. 1999;2: 37-43. [Sgaoileadh]
68. Pickard L, Noel J, Henley JM, Collingridge GL, Molnar E. Atharrachaidhean atharrachail ann an sgaoileadh sioncronach AMPA agus NMDA agus cuir a-steach subunit AMPA ann an neurons beò hippocampal. J Neurosci. 2000;20: 7922-7931. [Sgaoileadh]
69. Groc L, Gustafsson B, Hanse E. AMPA a ’comharrachadh ann an synapster glutamatergic nascent: an sin agus chan eil ann! Trends Neurosci. 2006;29: 132-139. [Sgaoileadh]
70. Marie H, Morishita W, Yu X, Calakos N, Malenka RC. Ginealach de synapses sàmhach le faireachdainn teann ann an vivo de CaMKIV agus CREB. Neuron. 2005;45: 741-752. [Sgaoileadh]
71. Brown TE, Lee BR, Mu P, Fearghas D, Dietz D, et al. Dòigh stèidhichte air synapse sàmhach airson mothachadh dha einnseanan co-cheangailte ri cocaine. J Neurosci. 2011;31: 8163-8174. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
72. Tòmas MJ, Beurrier C, Bonci A, Malenka RC. Luaidh fad-ùine anns an niùclas accumbens: co-cheangal niùclach de mhothachadh giùlain ri cocaine. Nat Neurosci. 2001;4: 1217-1223. [Sgaoileadh]
73. Feil J, Sheppard D, Fitzgerald PB, Yucel M, Lubman DI, et al. Tràilleachd, sireadh dhrogaichean èigneachail, agus àite nam meòlaichean toisich ann an riaghladh smachd taobhach. Neurosci Biobehav An t-Urr. 2010;35: 248-275. [Sgaoileadh]
74. Goldstein RZ, Volkow ND. Mì-rian an cortex ro-chumanta ann an tràilleachd: toraidhean neuroimaging agus buaidhean clionaigeach. Nat Urr Neurosci. 2011;12: 652-669. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
75. Davis JF, Loos M, Di Sebastiano AR, Brown JL, Lehman MN, et al. Bidh sòlachan an cortex mefrontal meadhanach ag adhbhrachadh giùlan gnèitheach tàmailteach ann an radain fireann. Eòlas-inntinn Biol. 2010;67: 1199-1204. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
76. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, et al. Tha cocaine ach chan e duais nàdarra fèin-rianachd no dòrtadh cnò èigeantach ag ullachadh LTP leantaileach anns an VTA. Neuron. 2008;59: 288-297. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
77. Kalivas PW. Tha an glutamate beachd-bharail airson tràilleachd. Nat Urr Neurosci. 2009;10: 561-572. [Sgaoileadh]
78. Belujon P, Grace AA. Hippocampus, amygdala, agus cuideam: siostaman eadar-obrachail a tha a ’toirt buaidh air buailteachd do dhrogaichean. Ann Acad Acad Sgi. 2011;1216: 114-121. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
79. Aig an aon àm, Ambroggi F, Nicola SM, Fields HL. Tabhartasan bhon amygdala agus cortex meadhanach ro-dhligheach gu bhith a ’freagairt freagairt. Eun-eòlas. 2008;155: 573-584. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
80. GD GD, Spart, DR, van Leeuwen WA, Hardjoprajitno JE, et al. Bidh tar-chur brìgheil bhon amygdala gu nucleus accumbens a ’comasachadh duais iarraidh. Nàdar. 2011;475: 377-380. [Sgaoileadh]
81. bhan Furth WR, Wolterink G, van Ree JM. Riaghladh giùlan feise fireann: a bhith an sàs ann an opioids an eanchainn agus dopamine. Brain Res Brain Res An t-Urr. 1995;21: 162-184. [Sgaoileadh]
82. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Eadar-obrachaidhean eadar am amdadala agus ventral striatum ann an comainn brosnachaidh-duais: sgrùdaidhean a ’cleachdadh clàr-òrdugh dara-òrdugh de threiseachadh gnèitheach. Eun-eòlas. 1989;30: 63-75. [Sgaoileadh]
83. Agmo A. Giùlan feise fireann fireann. Protoc Brain Res Brain Res. 1997;1: 203-209. [Sgaoileadh]
84. Nelson CL, M Milovanovic, Wetter JB, Ford KA, Wolf ME. Chan eil atharrachadh ann an mothachadh giùlain ann an amphetamine an cois atharrachadh ann an nochdadh còmhnard glutamate glacadair anns an nucleus ratumbens. J Neurochem. 2009;109: 35-51. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
85. Gao C, Wolf ME. Bidh gabhadan dopamine a ’riaghladh cruth gnàth-shìde NMDA ann an neurons cortex ro-dhìreach. J Neurochem. 2008;106: 2489-2501. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]