Lorg atharrachaidhean molecular ann an methamphetamine-activation Fos-nochdadh neurons bho striatum dorsal singilte le cnàm le bhith a 'cleachdadh seòrsachadh cealla-ghnìomhachd (FACS) (2013)

Tha methamphetamine agus drugaichean eile a ’dèanamh co-roinn bheag de na neurons uile san eanchainn. Leasaich sinn modh stèidhichte air cealla flùranach-ghnìomhach (FACS) roimhe seo gus atharrachaidhean mi-chnàmhach a chomharrachadh a thug cothrom roghnachail a chleachdadh le neurons a chaidh a ghnìomhachadh, a chuireas an gnìomhachd feadrach air adhart. Ach, tha an dòigh seo ag iarraidh gun tèid cothlachadh a thoirt air sampaill bho mhòran radain. Tha sinn a-nis a ’toirt iomradh air dòigh leasaichte stèidhichte air FACS gus atharrachaidhean mi-chearcallach a chomharrachadh ann am Fos-in-bhith a’ nochdadh neurons stràise droma bho aon roc le bhith a ’cleachdadh ro-innleachd ioma-fhillte.

Tha Fos and NeuN (comharradh neuronal) immunohistochemistry a ’sealltainn gun deach 5-6% de neurons striatum dorsal an cur an gnìomh 90 min às dèidh in-steallaidhean methamphetamine (5 mg / kg, ip) agus gun robh nas lugha na 0.5% de neurons air an cur an sàs le in-steallaidhean.

Chleachd sinn FACS gus neurons air neo-ainmichte NN a thoirt air falbh ann an neurons Fos-dearfach agus Fos-diúltach agus abairt mRNA a mheas le bhith a ’cleachdadh RT-qPCR bho cho beag ri còig neurons Fos-deimhinneach. Thug Methamphetamine àrdachadh de 3-20-fillte de ghineadan tràth sa bhad, homer-2, c-fos, fosB, agus a isoforms (ΔfosB agus nobhail isoform ΔfosB-2) ann an niùclairean Fos-positive ach chan eil Fos-diúltach. Bha inntrigidh ginealach tràth mRNA aig 10-fillte nas ìsle no neo-làthaireach nuair a bha e air a mheasadh ann an sampaill neo-chrìochnaichte bho aon-chnàmh aon-droma striatum. Tha an dòigh leasaichte againn ga dhèanamh comasach a bhith ag atharrachadh atharrachaidhean moileciuilteach sònraichte ann an neurons a tha air an cur an gnìomh le drogaichean no leigheasan co-cheangailte ri drogaichean ann am modalan tràilleachd toinnte.

Tha methamphetamine agus drugaichean eile a ’dèanamh co-roinn bheag de na neurons uile san eanchainn. Tha sinn ag aithris an-seo gu bheil dòigh nas fheàrr air atharrachaidhean a dhèanamh a dh ’atharraicheas gu roghnach ann an neurons a chaidh a chuir an gnìomh le bhith a’ taisbeanadh an gnìomhachd neurrach Fos. Chleachd sinn FACS còmhla ri ro-amharradh PCR a chaidh a chuimseachadh gus measadh a dhèanamh air abairt gine mhì-mhyamhetamine a dh'adhbhraich bho cho beag ri 5 neurons a tha a ’cur an àrach à aon striatum dorsal. Thug Methamphetamine meud 3-20-ciallach de ghineachan tràth (IEGs) a-steach do neurons àrach Fos-deimhinneach ach Fos-diúltach. Le bhith a ’dèanamh ath-mheudachadh air PCR a tha air a chuimseachadh bidh e comasach sgrùdadh a dhèanamh air atharrachaidhean mi-mhiotalach sònraichte ann an neurons a tha air an cur an gnìomh le drogaichean no sanasan co-cheangailte ri drogaichean ann am modalan tràilleachd toinnte.

Foillsichte 2013. Is e obair bho Riaghaltas na SA a tha san artaigil seo agus tha e ann an raon poblach sna SA.