Buaidh ìosal ΔFosB air comharran-stiùiridh opioid agus cannabinoid receptor-mediated sa nucleus accumbens (2011)

Neuropharmacology. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

Sim-Selley LJ, BP Cassidy, Sparta A., Zachariou V., Nestler EJ, Selley DE.

Stòr

Roinn Pharmacology agus Toxicology agus Institiud airson Sgrùdaidhean Drogaichean is Deoch-làidir, Sgoil Leigheas Oilthigh Co-fhlaitheis Virginia, Richmond, VA 23298, USA.

Abstract

Tha am bàillidh tar-sgrìobhaidh seasmhach ΔFosB air a thoirt a-steach don niuclas accumbens (NAc) le bhith a ’toirt a-steach cron air grunn dhrogaichean mì-ghnàthachaidh, agus tha abairt transgenic de ΔFosB anns an striatum a’ neartachadh feartan buannachdail morphine agus cocaine. Ach, chan eil tuigse iomlan air a ’bhunait meacanaigeach airson na beachdan sin. Chleachd sinn modail luch bitransgenic le faireachdainn inducible de ΔFosB a-steach dopamine D (1) gabhadair / neurons striatal anns a bheil dynorphin gus buaidh abairt ΔFosB a dhearbhadh air comharran gabhadair opioid agus cannabinoid anns an NAc. Sheall toraidhean gun deach gnìomhachd G-pròtain mu opioid-mediated agus casg air cyclase adenylyl a leasachadh anns an NAc de luchainn a chuir an cèill ΔFosB. San aon dòigh, chaidh casg kappa opioid air adenylyl cyclase a leasachadh anns an ΔFosB a ’cur an cèill luchagan. An coimeas ri sin, cha robh eadar-dhealachadh eadar comharran meadhain gabhadain cannabinoid eadar luchagan overexpressing ΔFosB agus luchainn smachd. Ttha co-dhùnaidhean hese a ’moladh gu bheil comharran gabhadain opioid agus cannabinoid air an atharrachadh gu eadar-dhealaichte le bhith a’ cur an cèill ΔFosB, agus a ’nochdadh gum faodadh abairt ΔFosB cuid de na buaidhean aige a thoirt gu buil tro chomharran gabhadain opioid mu agus kappa leasaichte anns an NAc.

Keywords: G-protein, adenylyl cyclase, striatum

1. Ro-ràdh

Gabhadairean opioid agus CB cannabinoid₁ gabhadairean (CB₁Is e R) na targaidean neurobiologic airson dà chlas dhrogaichean a tha air an cleachdadh gu farsaing a tha a ’toirt a-steach morphine, heroin agus opioids cungaidh, agus marijuana (Δ⁹-tetrahydrocannabinol (THC)), fa leth. Tha buaidhean gruamach opioids agus cannabinoids air am meadhanachadh le gabhadairean le pròtain G a tha a ’gnìomhachadh G sa mhòr-chuid_{i / o} pròtainean agus a ’toirt a-mach freagairtean buaidh sìos an abhainn leithid casg air adenylyl cyclase (Childers, 1991, Childers, et al., 1992, Howlett, et al., 2002). Buaidh motair, milleadh cuimhne agus buaidhean psychoactive aig Δ⁹-THC air an toirt a-mach le CB₁R (Huestis, et al., 2001, Zimmer, et al., 1999), a tha air an sgaoileadh gu farsaing san eanchainn, le ìrean àrda anns an ganglia basal, hippocampus agus cerebellum (Herkenham, et al., 1991). Tha na buaidhean analgesic agus buannachdail aig a ’mhòr-chuid de dhrogaichean opioid a tha buntainneach gu clinigeach agus air an droch chleachdadh air am meadhanachadh sa mhòr-chuid le gabhadairean mu opioid (MOR) (Matthes, et al., 1996), a tha air an neartachadh anns an t-siostam limbic agus an siostam eanchainn (Mansour, et al., 1994). Tha àite cudromach aig an t-siostam mesolimbic, air a dhèanamh suas de ro-mheasaidhean dopaminergic bhon sgìre teasach ventral (VTA) gu niuclas accumbens (NAc), ann am buaidhean buannachdail opioids agus cannabinoids (Bozarth and Wise, 1984, Vaccarino, et al., 1985, Zangen, et al., 2006), a bharrachd air drogaichean mì-ghnàthachaidh eile (Koob agus Volkow, 2010). A bharrachd air an sin, tha siostaman opioid endogenous agus cannabinoid an sàs ann am buaidhean buannachdail ioma-chlas de dhrogaichean psychoactive (Maldonado, et al., 2006, Trigo, et al., 2010). Mar sin, tha e cudromach dòighean a mhìneachadh leis am bi opioid agus CB₁Tha comharran R air an riaghladh anns an NAc.

Is e prìomh cheist ann an raon ana-cleachdadh dhrugaichean a bhith a ’comharrachadh phròtainean a tha a’ tomhas a ’ghluasaid bho bhuaidhean gruamach gu fad-ùine dhrogaichean psychoactive. Tha am bàillidh tar-sgrìobhaidh AP-1 ΔFosB gu sònraichte inntinneach leis gu bheil e na toradh caochlaideach splice truncated seasmhach den altram gine a bhios a ’cruinneachadh nuair a bhios tu a-rithist air drogaichean mì-ghnàthachaidh no duaisean nàdurrach (McClung, et al., 2004, Nestler, 2008, Nestler, et al., 1999). Tha sinn air faighinn a-mach gu bheil ΔFosB air a bhrosnachadh san eanchainn às deidh a bhith a ’nochdadh a-rithist gu morphine, Δ⁹-THC, cocaine no ethanol, le gach droga a ’toirt a-mach pàtran roinneil sònraichte de abairt ΔFosB (Perrotti, et al., 2008). B ’e lorg cunbhalach thar dhrogaichean gun robh ΔFosB air a bhrosnachadh gu mòr anns an striatum, far an robh na ceithir drogaichean a’ brosnachadh ΔFosB ann an cridhe NAc agus a h-uile gin ach Δ⁹-THC a ’toirt a-steach faireachdainn gu mòr anns an t-slige NAc agus caudate-putamen.

Sheall sgrùdaidhean cungaidh-leigheis gu robh co-rianachd an dopamine D.₁ gabhadain (D.₁R) chuir antagonist SCH 23390 bacadh air inntrigeadh ΔFosB anns an NAc agus caudate-putamen às deidh rianachd cocaine no morphine eadar-amail, a ’moladh cho cudromach sa tha D₁R-a ’cur an cèill neurons (Muller agus Unterwald, 2005, Nye, et al., 1995). Chaidh buaidh inntrigidh ΔFosB air giùlan dhrogaichean-mheadhain a sgrùdadh le bhith a ’cleachdadh luchagan bitransgenic a tha a’ cur an cèill ΔFosB ann an àireamhan neuronal sònraichte den NAc agus striatum dorsal (Chen, et al., 1998). Luchagan a tha a ’cur an cèill ΔFosB ann an dynorphin / D.₁Tha neurons adhartach R anns an NAc agus striatum dorsal (loidhne 11A) a ’nochdadh freagairtean atharraichte do dhrogaichean mì-ghnàthachaidh, gu sònraichte cugallachd nas fheàrr ri buaidhean buannachdail cocaine no morphine (Colby, et al., 2003, Kelz, et al., 1999, Zachariou, et al., 2006). Thachair na h-atharrachaidhean sin às aonais atharrachaidhean ann an ìrean MOR no diofar fo-phròtanan G-protein. Ach, chaidh ìrean dynorphin mRNA a lughdachadh anns an NAc de ΔFosB a ’cur an cèill luchagan (Zachariou, et al., 2006), a ’moladh gur e aon targaid de ΔFosB gine a tha a’ còdachadh peptide opioid endogenous. Dh ’fhaodadh inntrigeadh ΔFosB cuideachd atharrachaidhean giùlain a thoirt gu buil le bhith a’ riaghladh comharran gabhadain anns an NAc, ach cha deach sgrùdadh a dhèanamh air a ’chomas seo. Mar sin, chleachd na sgrùdaidhean a tha ann an-dràsta modal luch bitransgenic gus faighinn a-mach a bheil cus cuideam de ΔFosB ann an dynorphin / D₁Bidh R anns a bheil neurons striatal ag atharrachadh gnìomhachd G-protein MOR-meadhanaichte agus casg cyclase adenylyl MOR- agus KOR-mediated anns an NAc. Buaidh ΔFosB air CB₁Chaidh gnìomhachd G-pròtain R-meadhanaichte a mheasadh cuideachd air sgàth Δ⁹-Tha rianachd a ’toirt a-steach ΔFosB anns an NAc (Perrotti, et al., 2008) agus tha fios gu bheil an siostam endocannabinoid a ’riaghladh chuairtean duais eanchainn (Gardner, 2005, Maldonado, et al., 2006), ach cha deach sgrùdadh a dhèanamh air buaidh ΔFosB air an t-siostam endocannabinoid.

2. Stuthan agus Dòighean

2.1. Ath-bheachdan

[³⁵S] GTPγS (1250 Ci / mmol), [α-³²P] ATP (800 Ci / mmol) agus [³Chaidh H] cAMP (26.4 Ci / mmol) a cheannach bho PerkinElmer (Shelton, CT). Chaidh ATP, GTP, GDP, cAMP, serum albumin bó, creatine phosphokinase, papaverine, imidazole agus WIN-55212-2, a cheannach bho Sigma Aldrich (St. Louis, MO). Chaidh GTPγS a cheannach bho Roche Diagnostic Corporation (Chicago, IL). Chaidh DAMGO a thoirt seachad le Prògram Solarachaidh Dhrugaichean an Institiud Nàiseanta air Mì-chleachdadh Dhrugaichean (Rockville, MD). Chaidh fluid scintillation Econo-1 fhaighinn bho Fisher Scientific (Norcross, GA). Chaidh fluid scintillation Ecolite fhaighinn bho ICN (Costa Mesa, CA). Chaidh na ceimigean eile gu lèir fhaighinn bho Sigma Aldrich no Fisher Scientific.

2.2. Luchagan

Chaidh luchagan bitransgenic fireann a thàinig bho NSE-tTA (loidhne A) × TetOp-ΔFosB (loidhne 11) a chruthachadh mar a chaidh a mhìneachadh ann an Kelz et al. (Kelz, et al., 1999). Chaidh luchagan bitransgenic a chruthachadh agus a thogail air doxycycline (100 µg ann an uisge òil) gus a bhith a ’cuir às do mhìneachadh transgene. Aig 8 seachdainean a dh ’aois, chaidh doxycycline fhàgail air falbh bhon uisge airson leth de na luchagan gus leigeil le transgene a mhìneachadh, ach chaidh luchagan a bha air fhàgail a chumail air doxycycline gus an transgene a chumail fodha. Chaidh eanchainn a chruinneachadh 8 seachdainean às deidh sin, an ùine aig a bheil buaidhean tar-sgrìobhaidh ΔFosB aig a ’char as àirde (McClung agus Nestler, 2003). Chaidh dàrna loidhne luch transgenic a chleachdadh anns a bheil Δc-Jun, prìomh antagonist àicheil de c-Jun, air a chuir an cèill ann an D₁R / dynorphin agus D.₂Ceallan R / enkephalin den striatum, hippocampus agus cortex parietal (Peakman, et al., 2003). Bidh C-Jun agus pròtainean teaghlaich Jun co-cheangailte a ’lùghdachadh le pròtainean teaghlaich Fos agus a’ ceangal ri làrach AP-1 de ghinean targaid gus ath-sgrìobhadh a riaghladh. Ach, tha briseadh an N-terminus de c-Jun (Δc-Jun) a ’toirt seachad an iom-fhillte tar-sgrìobhaidh neo-ghnìomhach agus comasach air bacadh a chuir air ceangal DNA de cho-mheasan gnìomhach AP-1. Chaidh luchagan bitransgenic fireann a thàinig bho NSE-tTA (loidhne A) × TetOp-FLAG-Δc-Jun (loidhne E) a chruthachadh mar a chaidh a mhìneachadh ann am Peakman et al. (Peakman, et al., 2003). Chaidh luchagan bitransgenic a chruthachadh agus a thogail air doxycycline (100 µg ann an uisge òil) gus a bhith a ’cuir às do mhìneachadh transgene. Chaidh cuileanan a thoirt air falbh aig seachdainean 3, air an gintinneachd, agus air an sgaradh ann am buidhnean, le leth air a chumail suas air uisge anns a bheil doxycycline agus leth air uisge òil cunbhalach gus abairt FLAG-Δc-Jun a bhrosnachadh. Chaidh eanchainn a chruinneachadh 6 seachdainean às deidh sin, an ùine aig an deach na h-ìrean as àirde de FLAG-Δc-Jun a thomhas (Peakman, et al., 2003). Chaidh a h-uile modh beathach a dhèanamh a rèir Stiùireadh Institiud Nàiseanta Slàinte airson Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Saotharlann.

2.3. Ullachadh meur

Chaidh brains a stòradh aig −80 ° C gu latha an assay. Mus deach assay, chaidh gach eanchainn a leaghadh, agus chaidh an NAc a sgaoileadh air deigh. Chaidh gach sampall a cho-sheòrsachadh ann an 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl₂, 1 mM EGTA, pH 7.4 (bufair membran) le stròcan 20 bho homogenizer glainne aig 4 ° C. Chaidh an homogenate a mhùthadh aig 48,000 × g aig 4 ° C airson 10 min, air ath-chaitheamh ann am bufair membran, centrifuged a-rithist aig 48,000 × g aig 4 ° C airson 10 min agus air ath-chosg ann an 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl₂, 0.2 mM EGTA, 100 mM NaCl, pH 7.4 (bufair assay). Chaidh ìrean protein a dhearbhadh le dòigh Bradford (Bradford, 1976) a ’cleachdadh serum albumin bó (BSA) mar an àbhaist.

2.4. Spreagadh Agonist [³⁵S] Ceangal GTPγS

Chaidh pilearan a chuir a-steach ro-làimh airson mionaidean 10 aig 30 ° C le adenosine deaminase (3 mU / ml) ann am bufair assay. Chaidh pilearan (pròtain 5 - 10 µg) an uairsin a thoirt a-steach airson 2 hr aig 30 ° C ann am bufair assay anns a bheil 0.1% (w / v) BSA, 0.1 nM [³⁵S] GTPγS, 30 µM GDP agus adenosine deaminase (3 mU / ml) le agus às aonais dùmhlachdan iomchaidh de DAMGO no WIN55,212-2. Chaidh ceangaltas neo-shònraichte a thomhas le 20 µM GTPγS. Chaidh an guir a thoirt gu crìch le sìoladh tro shìoltachain snàithleach glainne GF / B, air a leantainn le nigheachan 3 le 3 ml fuar-deighe 50 mM Tris-HCl, pH 7.4. Chaidh radioactivity ceangailte a dhearbhadh le spectrophotometry scintillation liquid às deidh toirt a-mach thar na sìoltachain ann an lionn scintillation Econo-1.

2.5. Measadh Cyclase Adenylyl

Chaidh pilearan (pròtain 5 - 25 µg) a ro-sgaoileadh le adenosine deaminase mar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd, an uairsin air an toirt a-steach airson 15 min aig 30 ° C an làthair no às aonais 1µM forskolin, le no às aonais DAMGO, U50,488H no WIN55,212-2, ann am bufair assay. ATP 50 µM, [α-³²P] ATP (1.5 µCi), 0.2 mM DTT, 0.1% (w / v) BSA, 50 µM cearcallach AMP, 50 µM GTP, 0.2 mM papaverine, 5 mM phosphocreatine, 20 aonadan / ml creatine phosphokinase agus adenosine deaminase (3 maminase) / ml) ann an tomhas deireannach de 100 µl. Fo na cumhaichean seo, iomlan [α-³²Bha P] cAMP a chaidh fhaighinn air ais sa chumantas nas ìsle na 1% den t-suim iomlan de chur-ris [α-³²P] ATP anns gach sampall. Chaidh an ath-bhualadh a thoirt gu crìch le bhith a ’goil airson 3 min agus [³²P] Chaidh AMP cearcallach a sgaradh leis an dòigh colbh dùbailte (Dowex agus alumina) de Salomon (Salomon, 1979). [³Chaidh H] cAMP (10,000 dpm) a chur ris gach tiùb ro chromatography colbh mar ìre a-staigh. Chaidh radioactivity a dhearbhadh le spectrophotometry scintillation liquid (èifeachdas 45% airson ³H) às deidh 4.5 ml den eluate a sgaoileadh ann an 14.5 ml de lionn scintillation Ecolite.

2.6. Mion-sgrùdadh dàta

Mura h-eilear ag innse a chaochladh, tha dàta air aithris mar luachan cuibheasach ± SE de dheuchainnean air leth 4 - 8, agus chaidh gach aon dhiubh a dhèanamh trì-fhillte. Glan-bhrosnaichte [³⁵Tha S] GTPγS ceangailteach air a thomhas mar cheangal ceangailteach air a bhrosnachadh le agonist minus basal. Tha gnìomhachd glan adenylyl cyclase air a bhrosnachadh le forskolin air a mhìneachadh mar ghnìomhachd air a bhrosnachadh le forskolin - gnìomhachd basal (pmol / mg / min). Tha casg sa cheud de ghnìomhachd cyclase adenylyl air a bhrosnachadh le forskolin air a mhìneachadh mar (gnìomhachd glan air a bhrosnachadh le forskolin às aonais agonist - gnìomhachd glan air a bhrosnachadh le forskolin ann an làthaireachd agonist / lìon forskolin-brosnaichte às aonais agonist) × 100. Chaidh a h-uile mion-sgrùdadh lùbte agus staitistigeil a dhèanamh a ’cleachdadh Prism 4.0c (Bathar-bog GraphPad, Inc., San Diego, CA). Chaidh lùban co-chruinneachaidh-buaidh a sgrùdadh le ais-tharraing neo-loidhneach iteagach gus EC fhaighinn₅₀ agus E._max luachan. Chaidh cudromachd staitistigeil an dàta buaidh-cruinneachaidh a dhearbhadh le mion-sgrùdadh dà-thaobh caochlaideachd (ANOVA), a ’cleachdadh dòs agonist agus inntrigeadh gine (air no dheth) mar na prìomh nithean. Brìgh staitistigeil de luachan lùbte (E._max no EC₅₀) air a dhearbhadh le deuchainn-t Oileanach dà-earbaill neo-chàraid, a ’cleachdadh ceartachadh Welch no cruth-atharrachadh freumh ceàrnagach den dàta far a bheil sin riatanach gus ceartachadh airson eadar-dhealachaidhean neo-ionann (air an lorg le F-test) ann an EC₅₀ luachan.

3. Toraidhean

3.1. Buaidh abairt ΔFosB air gnìomhachd G-pròtain opioid agus cannabinoid-mediated receptor

Gus faighinn a-mach a bheil MOR- no CB₁Chaidh gnìomhachd G-pròtain R-meadhanaichte atharrachadh le abairt transgenic inducible de ΔFosB anns an NAc, air a bhrosnachadh le agonist [³⁵Chaidh S] GTPγS ceangailteach a sgrùdadh ann an membran iomallach a chaidh ullachadh bhon roinn seo de luchainn bitransgenic a ’cur an cèill gu suidheachadh (ΔFosB air) no gun a bhith a’ cur an cèill (ΔFosB dheth) an transgene ΔFosB. Chaidh an analog MAM-roghnach enkephalin DAMGO a chleachdadh gus MOR a ghnìomhachadh agus chaidh an cannabinoid aminoalkylindole WIN55,212-2 a chleachdadh gus CB a ghnìomhachadh₁R. Chaidh na ligandan sin a shealltainn roimhe mar làn agonists aig MOR agus CB₁R, fa leth (Breivogel, et al., 1998, Selley, et al., 1997). Cha robh e do-dhèanta sgrùdadh a dhèanamh air gnìomhachd G-protein KOR-mediated oir tha an comharra ro ìosal ann an eanchainn creimich (Childers, et al., 1998). Sheall toraidhean brosnachadh a bha an urra ri dùmhlachd de ghnìomhachd G-protein leis an dà chuid DAMGO agus WIN55,122-2 ann an NAc bho ΔFosB dheth agus ΔFosB air luchagan (Figear 1). Airson gnìomhachd air a bhrosnachadh le DAMGO (Figear 1A), nochd ANOVA dà-thaobh den dàta buaidh-cruinneachaidh prìomh bhuaidhean cudromach ann an inbhe ΔFosB (p <0.0001, F = 22.12, df = 1) agus dùmhlachd DAMGO (p <0.0001, F = 29.65, df = 5) gun eadar-obrachadh cudromach (p = 0.857, F = 0.387, df = 5). Nochd mion-sgrùdadh ath-tharraing nonlinear de na lùban dùmhlachd-buaidh DAMGO E mòran nas motha_max luach ann an ΔFosB air luchagan (E._max = 73 ± 5.2% brosnachadh) an coimeas ri ΔFosB far luchagan (E._max = 56 ± 4.1% brosnachadh; p <0.05 eadar-dhealaichte bho ΔFosB air luchagan a rèir deuchainn-t Oileanach). DAMGO EC₅₀ cha robh luachan eadar-dhealaichte eadar ΔFosB air agus ΔFosB far luchagan (302 ± 72 nM an aghaidh 212 ± 56 nM, fa leth, p = 0.346).

Buaidh abairt ΔFosB air brosnachadh agonist [³⁵S] GTPγS ceangailteach anns an NAc. Chaidh meurran bho ΔFosB-expressing (ΔFosB air) no luchainn smachd (ΔFosB dheth) a mheasadh mar a chaidh a mhìneachadh ann am Modhan a ’cleachdadh diofar chruinneachaidhean ...

An coimeas ri toraidhean a fhuaireadh leis an agonist MOR DAMGO, cha deach eadar-dhealachaidhean inbhe ΔFosB an urra ri gnìomhachd G-pròtain fhaicinn leis an agonist cannabinoid WIN55,212-2 (Figear 1B). Nochd ANOVA dà-thaobh den dàta WIN55,212-2 dùmhlachd-buaidh prìomh bhuaidh chudromach ann an dùmhlachd WIN55,212-2 (p <0.0001, F = 112.4, df = 7), ach chan ann de inbhe ΔFosB (p = 0.172 , F = 1.90, df = 1) agus cha robh eadar-obrachadh ann (p = 0.930, F = 0.346, df = 7). San aon dòigh, cha robh buaidh sam bith aig inbhe ΔFosB air WIN55,212-2 E._max luachan (103 ± 6% an aghaidh brosnachadh 108 ± 8% ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth, p = 0.813 a rèir deuchainn-t Oileanach) no EC₅₀ luachan (103 ± 20 nM an aghaidh 170 ± 23 nM ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth, p = 0.123).

Stèidhichte air cumadh nan lùban agus an fhìrinn gu bheil na sgrùdaidhean a rinn sinn roimhe air lùban dùmhlachd-buaidh WIN55,212-2 biphasic a nochdadh san eanchainn (Breivogel, et al., 1999, Breivogel, et al., 1998), chaidh na lùban WIN55,212-2 a sgrùdadh cuideachd a ’cleachdadh modail dà làrach. Sheall mion-sgrùdadh air an dàta cuibheasach beagan adhartais ann am mathas freagarrachd a ’cleachdadh a’ mhodail dà-làrach (R.² = 0.933 agus 0.914, suim cheàrnagan = 3644 agus 5463 ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth) an coimeas ris a ’mhodal aon-làrach (R² = 0.891 agus 0.879, suim cheàrnagan = 6561 agus 6628 ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth). Ach, cha deach eadar-dhealachadh mòr sam bith a lorg eadar ΔFosB air agus far luchagan anns an E_max no EC₅₀ luachan de na làraich neart àrd no ìosal (Clàr Leasachail 1), ged a bha gluasad a dh ’ionnsaigh EC nas ìsle₅₀ luach aig an làrach potency àrd ann an luchagan le ΔFosB air (EC₅₀àrd = 28.0 ± 10.6 nM) an coimeas ris an fheadhainn le ΔFosB dheth (EC₅₀àrd = 71.5 ± 20.2 nM; p = 0.094). A bharrachd air an sin, cha robh buaidh sam bith aig inbhe ΔFosB air basal [³⁵S] GTPγS ceangailteach ann an membran NAc (253 ± 14 an aghaidh 226 ± 14 fmol / mg ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth, p = 0.188). Tha an dàta seo a ’sealltainn gun do mheudaich abairt transgenic inducible de ΔFosB anns an NAc de luchainn gnìomhachd G-protein MOR-meadhanaichte gun a bhith a’ toirt buaidh mhòr air CB₁Gnìomhachd G-pròtain R-meadhanaichte no basal.

3.2. Buaidh ΔFosB air bacadh opioid agus cannabinoid-mediated receptor cyclase adenylyl

Gus measadh a dhèanamh air a ’bhuaidh a th’ aig faireachdainn transgenic inducible de ΔFosB air modaladh gnìomhachd buaidh sìos le MOR agus CB₁Chaidh sgrùdadh a dhèanamh air R, casg air gnìomhachd cyclase adenylyl air a bhrosnachadh le 1 µM ann an membran NAc. A bharrachd air MOR- agus CB₁Toirmeasg R-meadhanaichte air gnìomhachd adenylyl cyclase, chaidh buaidhean gnìomhachd KOR a sgrùdadh cuideachd a ’cleachdadh an làn-agonist KOR-roghnach U50,488 (Zhu, et al., 1997), leis gu robh toraidhean roimhe a ’sealltainn gu robh dynorphin mRNA na thargaid de ΔFosB anns a’ mhodal bitransgenic (Zachariou, et al., 2006). Sheall toraidhean gu robh DAMGO, U50,488 agus WIN55,212-2 gach fear a ’toirt a-steach casg air gnìomhachd cyclase adenylyl anns gach cuid ΔFosB dheth agus ΔFosB air luchagan (Figear 2). ANOVA dà-thaobh de dhàta buaidh-cruinneachaidh DAMGO (Figear 2A) nochd prìomh bhuaidhean cudromach de inbhe ΔFosB (p = 0.0012, F = 11.34, df = 1) agus dùmhlachd DAMGO (p <0.0001, F = 29.61, df = 6), ach cha robh eadar-obrachadh cudromach ann (p = 0.441, F = 0.986 , df = 6). Nochd mion-sgrùdadh ath-tharraing nonlinear de lùban dùmhlachd-buaidh DAMGO gu robh DAMGO EC gu math nas ìsle₅₀ luach ann an ΔFosB air luchagan (101 ± 11 nM) an coimeas ri ΔFosB far luchagan (510 ± 182 nM, p <0.05 a rèir deuchainn-t oileanach). Ach, cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an DAMGO E._max luachan (20.9 ± 1.26% an aghaidh casg 19.8 ± 1.27% ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth, p = 0.534).

Buaidh abairt ΔFosB air casg gnìomhachd cyclase adenylyl anns an NAc. Chaidh meurran bho luchagan ΔFosB-expressing (ΔFosB on) no smachd (ΔFosB dheth) a mheasadh mar a chaidh a mhìneachadh ann am Modhan an làthair 1 µM ...

Bha casg air cyclase adenylyl KOR-meadhanaichte cuideachd eadar-dhealaichte mar ghnìomh de mhìneachadh transgenic inducible de ΔFosB (Figear 2B). Sheall ANOVA dà-thaobh de dhàta buaidh cruinneachaidh U50,488 prìomh bhuaidhean cudromach de inbhe ΔFosB (p = 0.0006, F = 14.53, df = 1) agus dùmhlachd U50,488 (p <0.0001, F = 26.48, df = 3) , gun eadar-obrachadh cudromach (p = 0.833, F = 0.289, df = 3). Nochd mion-sgrùdadh ath-tharraing neo-riaghailteach de lùban dùmhlachd-buaidh U50,488 E._max luach ann an ΔFosB air luchagan (casg 18.3 ± 1.14%) an coimeas ri ΔFosB far luchainn (12.5 ± 2.03% casg; p <0.05 eadar-dhealaichte bho ΔFosB air adhart le deuchainn-t Oileanach), gun eadar-dhealachadh mòr ann an U50,488 EC₅₀ luachan (310 ± 172 nM an aghaidh 225 ± 48 nM ann an ΔFosB air agus far luchagan, fa leth, p = 0.324).

An coimeas ri buaidhean a chaidh fhaicinn le MOR agus KOR, cha robh buaidh mhòr sam bith ann an abairt ΔFosB transgenic inducible air casg cyclase adenylyl leis an agonist cannabinoid WIN55212-2 (Figear 2C). Sheall ANOVA dà-shligheach de dhàta buaidh-cruinneachaidh WIN55,212-2 buaidh mhòr air dùmhlachd dhrogaichean (p <0.0001, F = 23.6, df = 2), ach chan ann air inbhe ΔFosB (p = 0.735, F = 0.118, df = 1) agus cha robh eadar-obrachadh cudromach ann (p = 0.714, F = 0.343, df = 2). A bharrachd air an sin, cha robh buaidh sam bith aig inbhe ΔFosB air gnìomhachd cyclase adenylyl basal no forskolin air a bhrosnachadh às aonais agonist sam bith. B ’e gnìomhachd basal adenylyl cyclase 491 ± 35 pmol / mg / min ann an ΔFosB air luchagan an coimeas ri 546 ± 44 ann an ΔFosB far luchagan (p = 0.346 a rèir deuchainn-t Oileanach). Mar an ceudna, bha gnìomhachd adenylyl cyclase an làthair 1 µM forskolin aig 2244 ± 163 pmol / mg / min ann an ΔFosB air luchagan an aghaidh 2372 ± 138 pmol / mg / min ann an ΔFosB far luchagan (p = 0.555).

3.3. Buaidh ΔcJun air casg opioid agus cannabinoid receptor-mediated de adenylyl cyclase

Leis gu robh abairt transgenic inducible de ghluasad comharra bacaidh ΔFosB leasaichte bho MOR agus KOR gu cyclase adenylyl anns an NAc, bha e inntinneach a bhith a ’dearbhadh am biodh neach-bacadh àicheil ceannasach de ath-sgrìobhadh ΔFosB-meadhanaichte ag atharrachadh comharran gabhadair opioid ann an dòigh eile. Gus dèiligeadh ris a ’cheist seo, chaidh casg a chuir air gnìomhachd cyclase adenylyl air a bhrosnachadh le fAMkolin le DAMGO agus U50,488 ann an buill-bodhaig a chaidh ullachadh bhon NAc de luchainn bitransgenic le bhith a’ cur an cèill ΔcJun. Cha do sheall na toraidhean buaidh mhòr sam bith bho abairt ΔcJun air casg gnìomhachd cyclase adenylyl le MOR no KOR (Figear 3). Sheall ANOVA dà-shligheach de lùban dùmhlachd-buaidh DAMGO prìomh bhuaidh chudromach ann an dùmhlachd DAMGO (p <0.0001, F = 20.26, df = 6), ach chan ann de inbhe ΔcJun (p = 0.840, F = 0.041, df = 1) agus cha robh eadar-obrachadh cudromach ann (p = 0.982, F = 0.176, df = 6). San aon dòigh, cha robh eadar-dhealachadh mòr ann an E._max no EC₅₀ luachan eadar luchagan le ΔcJun air (E._max = 23.6 ± 2.6%; EC₅₀ = 304 ± 43 nM) no ΔcJun dheth (E._max = 26.1 ± 2.5%, p = 0.508; EC₅₀ = 611 ± 176 nM, p = 0.129). Chaidh toraidhean co-ionann fhaicinn le U50,488, mar sin gun robh ANOVA dà-thaobh de na lùban dùmhlachd-buaidh a ’sealltainn buaidh chudromach de cho-chruinneachadh (p <0.0001, F = 11.94, df = 6), ach chan ann de inbhe ΔcJun (p = 0.127 , F = 2.391, df = 1) agus cha robh eadar-obrachadh cudromach ann (p = 0.978, F = 0.190, df = 6). San aon dòigh, cha robh eadar-dhealachaidhean mòra ann an E._max no EC₅₀ luachan eadar luchagan le ΔcJun air (E._max = 14.8 ± 2.9%; EC₅₀ = 211 ± 81 nM) no dheth (E._max = 16.7 ± 1.8%, p = 0.597; EC₅₀ = 360 ± 151 nM, p = 0.411).

Buaidh abairt ΔcJun air casg gnìomhachd adenylyl cyclase anns an NAc. Chaidh meurran bho luchagan ΔcJun-expressing (ΔcJun on) no smachd (ΔcJun dheth) a thoirt a-steach an làthair DAMGO (A), U50,488H (B) no WIN55,212-2 ...

Cha tug abairt ΔcJun cuideachd buaidh mhòr air bacadh air adenylyl cyclase anns an NAc leis an agonist cannabinoid. Sheall ANOVA dà-thaobh de na lùban WIN55,212-2 dùmhlachd-cruinneachaidh prìomh bhuaidh chudromach ann an dùmhlachd WIN55,212-2 (p <0.0001, F = 15.53, df = 6), ach chan ann de genotype (p = 0.066, F = 3.472, df = 1) agus cha robh eadar-obrachadh cudromach ann (p = 0.973, F = 0.208, df = 6). San aon dòigh, cha robh eadar-dhealachaidhean mòra ann an WIN55,212-2 E._max luachan (13.0 ± 2.3% agus casg 13.6 ± 0.9% ann an ΔcJun air luchagan an aghaidh, fa leth, p = 0.821) agus no EC₅₀ luachan (208 ± 120 nM agus 417 ± 130 nM ann an ΔcJun air luchagan an aghaidh, fa leth, p = 0.270). Mar sin, ged a bha gluasad beag ann a dh ’ionnsaigh comas nas ìsle de WIN55,212-2 ann an luchagan a’ cur an cèill ΔcJun, cha do dh ’atharraich an transgene gu mòr casg cannabinoid air adenylyl cyclase. A bharrachd air an sin, cha robh buaidh sam bith aig inbhe ΔcJun air gnìomhachd cyclase basal no forskolin-bhrosnaichte adenylyl. B ’e gnìomhachd cyclase basal adenylyl 1095 ± 71 pmol / mg / min agus 1007 ± 77 pmol / mg / min (p = 0.403) ann an luchagan le ΔcJun air no dheth, fa leth. B ’e gnìomhachd cyclase adenylyl a chaidh a bhrosnachadh le 1 µM forskolin 4185 ± 293 pmol / mg / min an aghaidh 4032 ± 273 pmol / mg / min (p = 0.706) ann an luchagan le ΔcJun air no dheth, fa leth.

3.4. Deasbad

Nochd toraidhean an sgrùdaidh seo gnìomhachd G-pròtain MOR-meadhanaichte leasaichte agus casg air cyclase adenylyl ann an NAc de luchainn le abairt transgenic inducible de ΔFosB ann an dynorphin / D₁R anns a bheil neurons. Chaidh casg KOR-meadhanaichte air gnìomhachd adenylyl cyclase a leasachadh cuideachd anns an NAc de ΔFosB a ’cur an cèill luchagan, a’ moladh gu bheil ΔFosB a ’riaghladh an t-siostam opioid endogenous anns an NAc. An DAMGO E._max bha luach nas motha airson MOR-bhrosnaichte [³⁵S] GTPγS ceangailteach, agus a EC₅₀ bha luach nas ìsle airson casg adenylyl cyclase, ann an luchagan ΔFosB a ’cur an cèill cus an coimeas ri luchagan smachd. Tha na co-dhùnaidhean sin a ’toirt a-mach comas air tèarmann gabhadain airson modaladh buaidhiche ach chan e gnìomhachd pròtain G fo na cumhachan assay a chaidh a sgrùdadh. Tha an lorg gu robh an casg as motha de cyclase adenylyl leis an agonist KOR fo bhuaidh abairt ΔFosB a ’moladh tèarmann gabhadair ìosal airson freagairt KOR-meadhanaichte, co-chòrdail ris na h-ìrean ìosal de làraich ceangail KOR ann an eanchainn luch (Unterwald, et al., 1991). Air an làimh eile, CB₁Cha robh buaidh aig abairt ΔFosB air gnìomhachd G-pròtain R-meadhanaichte agus casg cyclase adenylyl, a ’moladh gu bheil na siostaman opioid agus cannabinoid eadar-dhealaichte anns an fhreagairt aca air ΔFosB anns na neurons NAc sin.

Tha buaidh ΔFosB air soidhneadh opioid receptor-mediated co-chòrdail ris an aithisg againn roimhe gun do dh ’atharraich abairt ΔFosB anns an striatum buaidhean gruamach agus cronail morphine (Zachariou, et al., 2006). B ’e aon lorg den sgrùdadh sin gu robh luchagan le abairt transgenic de ΔFosB ann an dynorphin / D.₁Bha neurons striatal R nas mothachail do morphine ann an suidheachadh an àite na smachdan. A bharrachd air an sin, chaidh a ’bhuaidh seo a mhaslachadh le bhith a’ cur an cèill ΔFosB gu meadhanaichte le in-stealladh sònraichte làraich a-steach don NAc. Tha na beachdan sin co-chòrdail ris na toraidhean làithreach a tha a ’nochdadh soidhneadh MOR leasaichte san NAc.

Chomharraich sinn roimhe an còdachadh gine dynorphin mar thargaid de ΔFosB, agus mhol e gum biodh dynorphin lùghdaichte co-chòrdail ri togalaichean buannachdail morphine ann an luchagan bitransos ΔFosB (Zachariou, et al., 2006). Tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ sealltainn gu bheil casg KOR-meadhanaichte air adenylyl cyclase anns an NAc air àrdachadh ann an ΔFosB a ’cur an cèill luchagan, a dh’ fhaodadh a bhith a ’nochdadh àrdachadh dìolaidh ann an cugallachd KOR às deidh dynorphin lùghdaichte. Tha sgrùdaidhean roimhe air sealltainn gun deach KOR a riaghladh ann an cuid de roinnean eanchainn de luchagan bualadh prodynorphin, nam measg NAc (Clarke, et al., 2003).

An coimeas ri ΔFosB, cha do dh ’atharraich abairt transgenic inducible de ΔcJun, an mutant truncated àicheil as motha den chom-pàirtiche ceangailteach ΔFosB cJun, casg cyclase adenylyl le agonists MOR no KOR. Tha na co-dhùnaidhean sin a ’moladh nach eil pàirt cudromach aig ìrean basal de abairt ΔFosB, a tha an ìre mhath ìosal, ann a bhith a’ cumail suas comharran gabhadan opioid aig an ìre seo de ghluasad chomharran anns an NAc. Chaidh an fhìrinn gun deach buaidh buannachdail morphine a lughdachadh le abairt ΔcJun anns an sgrùdadh roimhe againn (Zachariou, et al., 2006) a ’moladh an dàrna cuid gu bheil inntrigeadh morphine de ΔFosB rè a’ mhodh suidheachaidh cudromach ann a bhith a ’riaghladh freagairtean giùlain don druga no gum faodadh buaidhean tar-sgrìobhaidh ΔFosB ach an fheadhainn a tha a’ toirt buaidh air soidhneadh proximal le gabhadairean opioid buaidh a thoirt air duais opioid. Co-dhiù, tha toraidhean an sgrùdaidh seo a ’nochdadh gu soilleir, nuair a thèid abairt ΔFosB àrdachadh os cionn ìrean basal ann an dynorphin striatal / D.₁A ’cur an cèill neurons, tha àrdachadh làidir ann an ceangal MOR agus KOR gus casg a chuir air adenylyl cyclase anns an NAc.

Chan eil na dòighean anns am bi comharran MOR- agus KOR-meadhanaichte air an àrdachadh le overexpression ΔFosB soilleir, ach tha sinn air sealltainn roimhe seo gu bheil ìrean MOR, air am measadh le [³H] ceangaltach naloxone, chan eil iad eadar-dhealaichte anns an NAc de ΔFosB air luchagan an aghaidh (Zachariou, et al., 2006). Lorg an aon sgrùdadh gu robh Gα_iCha deach buaidh a thoirt air ìrean pròtain 1 agus 2 san roinn seo le abairt ΔFosB. Ach, sheall sgrùdaidhean eagar abairtean gine roimhe gu robh Gα_o Chaidh mRNA a riaghladh ann an NAc de ΔFosB air luchagan (McClung agus Nestler, 2003). Bidh ùidh ann an sgrùdaidhean san àm ri teachd sgrùdadh coileanta a dhèanamh air buaidh abairt transgenic ΔFosB air abairt subunit G-protein aig ìre pròtain a bharrachd air a bhith a ’cur an cèill mòran de phròtainean modulatory G-protein.

Tha e inntinneach nach do chuir abairt ΔFosB ri CB₁Comharran R-meadhanaichte anns an NAc. Tha e comasach gun atharraich ann am CB₁Tha comharran R a ’tachairt ann an sluagh air leth de neurons a tha falaichte ann an ullachadh NAc gu lèir. Mar eisimpleir, rianachd Δ⁹- Thug THC a-steach ΔFosB gu mòr ann an cridhe, ach chan e slige, an NAc (Perrotti, et al., 2008). Mindeed, thathas air sealltainn gu bheil an dùbhlan sin le Δ⁹-THC às deidh rianachd Δ a-rithist⁹-THC mheudaich sgaoileadh dopamine ann an cridhe NAc, ach lughdaich e leigeil ma sgaoil anns an t-slige (Cadoni, et al., 2008). Tha e cuideachd cudromach cuimhneachadh gu bheil an loidhne 11A de luchainn bitransgenic a ’cur an cèill ΔFosB a-mhàin ann an dynorphin / D₁R neurons spìosrach meadhanach adhartach den striatum, ach CB₁Tha R air an cur an cèill anns gach cuid dynorphin / D.₁R agus enkephalin / D.₂R neurons striatal adhartach (Hohmann agus Herkenham, 2000), a bharrachd air cinn-uidhe de dh ’aithrisean cortical (Robbe, et al., 2001). Cha robh buaidh mhòr aig a bhith a ’cur an cèill an riaghladair àicheil as làidire de ath-sgrìobhadh ΔFosB-mediated, ΔcJun, air comharran gabhadair cannabinoid, ged a tha ΔcJun air a chuir an cèill gu h-oideachail anns an dà D₁ agus D₂- a ’cumail àireamhan de neurons spìosrach meadhanach anns na luchagan sin (Peakman, et al., 2003). Tha e comasach, ge-tà, gu bheil an abairt basal ΔFosB ìosal gu leòr nach toireadh ΔcJun buaidh air comharran gabhadain, mar a chaidh a mholadh le toraidhean le MOR agus KOR. Tha e comasach cuideachd gum bi CB₁Tha comharran R air a leasachadh gu ìre le faireachdainn basal ΔFosB, mar sin nach robh ach glè bheag de bhuaidhean nach do ràinig ìre brìgh staitistigeil le bhith a ’meudachadh abairt ΔFosB no a’ cur bacadh air na rinn e le ΔcJun. Faodar taic neo-dhìreach airson a ’mhìneachadh seo fhaicinn le bhith a’ dèanamh coimeas eadar WIN55,212-2 EC₅₀ luachan eadar luchagan a ’cur an cèill ΔcJun an aghaidh ΔFosB. An co-mheas de WIN55,212-2 EC₅₀ luach airson casg cyclase adenylyl ann an luchagan le faireachdainn brosnaichte de ΔcJun chun EC₅₀ b ’e 4.0 an luach airson gnìomhachd G-pròtain ann an luchagan le faireachdainn brosnaichte de ΔFosB, ach b’ e 1.2 an aon cho-mheas ann an luchagan gun inntrigeadh de gach transgene.

Air an làimh eile, dh ’fhaodadh cannabinoids abairt ΔFosB a bhrosnachadh gun buaidh dhìreach sam bith air CB₁R a ’comharrachadh. Anns an t-suidheachadh seo, dh ’fhaodadh cannabinoids freagairt a thoirt do bhuaidh psychoactive dhrogaichean eile tro riaghladh tar-sgrìobhaidh ΔFosB-mediated. I.n fìrinn, rianachd Δ⁹-THC a ’toirt a-mach tar-mhothachadh gu opioids agus amphetamine (Cadoni, et al., 2001, Lamarque, et al., 2001), co-chòrdail ris a ’bheachd seo. A bharrachd air an sin, chaidh aithris gu robh rianachd a-rithist den agonist cannabinoid CP55,940 ag àrdachadh gnìomhachd G-protein MOR-meadhanaichte anns an NAc, coltach ri luchagan a ’cur an cèill ΔFosB gu h-oideachail san sgrùdadh làithreach (Vigano, et al., 2005). Buaidh abairt ΔFosB air Δ⁹Cha deach giùlan -THC-meadhanaichte a mheasadh, ach chan eil na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ cur bacadh air eadar-obrachadh. Toraidhean seo agus an sgrùdadh a rinn sinn roimhe (Zachariou, et al., 2006) a ’sealltainn atharrachaidhean ΔFosB-brosnaichte ann am MOR agus KOR / dynorphin anns an striatum. Na buaidhean buannachdail aig Δ⁹Tha -THC, mar a tha air a thomhas a rèir roghainn àite, air a chuir às ann an luchagan MOR null, ach tha cuir às do KOR lagaichte Δ⁹-THC àite aversion agus nochd Δ⁹-THC roghainn àite (Ghozland, et al., 2002). San aon dòigh, aversion àite cumhaichte gu Δ⁹-THC neo-làthaireach ann an bualadh pro-dynorphin an coimeas ri luchagan seòrsa fiadhaich (Zimmer, et al., 2001). Tha an dàta seo a ’moladh gu bheil Δ⁹-THC is dòcha gum biodh barrachd duais ann às deidh inntrigeadh ΔFosB agus inntrigeadh mar thoradh air soidhnichean MOR le lughdachadh ann an abairt dynorphin.

Ann an geàrr-chunntasy, sheall toraidhean an sgrùdaidh seo an abairt sin de ΔFosB ann an D.₁Leasaich neurons striatal dearbhach R / dynorphin comharran MOR- agus KOR-meadhanaichte aig ìre casg meadhain G-protein de ghnìomhachd cyclase adenylyl anns an NAc. Tha an toradh seo co-chòrdail ri sgrùdaidhean a tha air àite a nochdadh don t-siostam opioid endogenous mar dhuais (Trigo, et al., 2010), agus a ’toirt seachad uidheamachd a dh’ fhaodadh a bhith ann airson buaidhean ΔFosB-meadhanaichte air duais. Air an làimh eile, CB₁Cha deach buaidh mhòr a thoirt air soidhneadh R-meadhanaichte anns an NAc le abairt striatal ΔFosB fo na cumhaichean a chaidh a sgrùdadh, ged a tha feum air tuilleadh sgrùdaidhean gus buaidh inntrigidh ΔFosB air an t-siostam endocannabinoid a dhearbhadh.

Prìomh phuingean rannsachaidh

Tha soidhneadh MOR air a neartachadh anns na nucleus accumbens de luchainn a tha a ’cur an cèill ΔFosB
Tha casg KOR air cyclase adenylyl cuideachd air àrdachadh ann an luchagan a ’cur an cèill ΔFosB
Chan eil foillseachadh ΔFosB ag atharrachadh CB₁R a ’comharrachadh anns na nucleus accumbens

Material a bharrachd

01

Cliog an seo gus faicinn.^{(45K, pdf)}

Buidheachas

Tha na h-ùghdaran a ’toirt taing do Hengjun He, Jordan Cox agus Aaron Tomarchio airson taic theicnigeach leis an [³⁵S] Measaidhean ceangailteach GTPγS. Fhuair an sgrùdadh seo taic bho Thabhartasan USPHS DA014277 (LJS), DA10770 (DES) agus P01 DA08227 (EJN).

Footnotes

Àicheadh an fhoillsichear: Seo faidhle PDF de làmh-sgrìobhainn neo-aithnichte a chaidh a chlò-bhualadh. Mar sheirbheis do ar luchd-cleachdaidh tha sinn a ’toirt seachad an tionndadh tràth seo den làmh-sgrìobhainn. Thèid an làmh-sgrìobhainn a chopaigeadh, a chuir an clò agus ath-sgrùdadh air an dearbhadh a thig às mus tèid fhoillseachadh anns an riochd mu dheireadh aige. Thoir fa-near gum faodar mearachdan a lorg rè a ’phròiseas riochdachaidh a dh’ fhaodadh buaidh a thoirt air an t-susbaint, agus air na h-àicheadh laghail a dh ’fheumas co-cheangailte ris an iris.

iomraidhean

Bozarth MA, Wise RA. Bidh raointean gabhadair opiate air leth anatomically a ’luachadh duais agus eisimeileachd corporra. Saidheans. 1984;224: 516-517. [Sgaoileadh]
Bradford MM. Modh luath agus mothachail airson tomhas meudan microgram de phròtain a ’cleachdadh prionnsapal ceangal dath pròtain. Anal. Biochem. 1976;72: 248-254. [Sgaoileadh]
Breivogel CS, Childers SR, Deadwyler SA, Hampson RE, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Delta cronach⁹-tetrahydrocannabinol làimhseachadh a ’toirt a-mach call a tha an urra ri ùine de phròtainean G-gnìomhaichte le gabhadain cannabinoid san eanchainn. J. Neurochem. 1999;73: 2447-2459. [Sgaoileadh]
Breivogel CS, Selley DE, Childers SR. Èifeachdas agonist gabhadair cannabinoid airson brosnachadh [³⁵S] Tha ceangal GTPγS ri buill-bodhaig cerebellar co-dhàimheil ri lùghdachaidhean agonist-brosnaichte ann an dàimh GDP. J. Biol. Chem. 1998;273: 16865-16873. [Sgaoileadh]
Cadoni C, Pisanu A, Solinas M, Acquas E, Di Chiara G. Mothachadh giùlain an dèidh nochdadh a-rithist air Delta 9-tetrahydrocannabinol agus tar-mhothachadh le morphine. Eòlas-inntinn (Berl) 2001;158: 259-266. [Sgaoileadh]
Cadoni C, Valentini V, Di Chiara G. Mothachadh giùlain gu delta 9-tetrahydrocannabinol agus tar-mhothachadh le morphine: atharrachaidhean eadar-dhealaichte ann an slige accumbal agus tar-chur dopamine cridhe. J. Neurochem. 2008;106: 1586-1593. [Sgaoileadh]
Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Beathaichean transgenic le faireachdainn gine inducible, cuimsichte san eanchainn. Mol. Pharmacol. 1998;54: 495-503. [Sgaoileadh]
Childers SR. Dàrna teachdairean Opioid-coupled. Beatha Sci. 1991;48: 1991-2003. [Sgaoileadh]
Childers SR, Fleming L, Konkoy C, Marckel D, Pacheco M, Sexton T, Ward S. Opioid agus casg gabhadair cannabinoid de cyclase adenylyl san eanchainn. Ann. NY Acad. Sci. 1992;654: 33-51. [Sgaoileadh]
Childers SR, Xiao R, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Spreagadh gabhadair opioid Kappa de [³⁵S] GTPγS ceangailteach ann an eanchainn muc guinea: Dìth fianais airson kappa₂-seactive gnìomhachadh G-proteins. Biochem. Pharmacol. 1998;56: 113-120. [Sgaoileadh]
Clarke S, Zimmer A, Zimmer AM, Hill RG, Kitchen I. Ath-riaghladh roghnach sgìre de gabhadairean meanbh-, delta- agus kappa-opioid ach chan e gabhadairean 1 coltach ri gabhadair opioid ann an eanchainn luchagan cnagadh enkephalin agus dynorphin. Eun-eòlas. 2003;122: 479-489. [Sgaoileadh]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Tha ro-dhuilgheadas sònraichte air seòrsa de chill de DeltaFosB a ’toirt piseach air brosnachadh a’ chocain. J. Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [Sgaoileadh]
Gardner EL. Siostam comharran endocannabinoid agus duais eanchainn: cuideam air dopamine. Pharmacol. Biochem. Behav. 2005;81: 263-284. [Sgaoileadh]
Ghozland S, Matthes HW, Simonin F, Filliol D, Kieffer BL, Maldonado R. Tha buaidhean gluasadach cannabinoids air am meadhanachadh le gabhadairean mu-opioid agus kappa-opioid. J. Neurosci. 2002;22: 1146-1154. [Sgaoileadh]
Herkenham M, Lynn AB, Johnson MR, Melvin LS, de Costa BR, Rice KC. Caractar agus sgìreachadh gabhadairean cannabinoid ann an eanchainn radan: sgrùdadh fèin-ghluasadach cainneachdail in vitro. J. Neurosci. 1991;11: 563-583. [Sgaoileadh]
Hohmann AG, Herkenham M. Ionadail de mRNA gabhadair cannabinoid CB (1) ann am fo-fhòrsaichean neuronal de striatum radan: sgrùdadh tar-chinealach in situ le bileag dùbailte. Sinapse. 2000;37: 71-80. [Sgaoileadh]
Howlett AC, Barth F, Bonner TI, Cabral G, Casellas P, Devane WA, Felder CC, Herkenham M, Mackie K, Martin BR, Mechoulam R, Pertwee RG. Aonadh Eadar-nàiseanta Pharmacology. XXVII. Seòrsachadh gabhadairean cannabinoid. Lèirmheas Pharmacological. 2002;54: 161-202.
Huestis MA, Gorelick DA, Heishman SJ, Preston KL, Nelson RA, Moolchan ET, Frank RA. Bacadh de bhuaidhean marijuana air a smocadh leis an antagonist gabhadair cannabinoid CB1-roghnach SR141716. Bogha. Gen. Psychiatry. 2001;58: 322-328. [Sgaoileadh]
Kelz MB, Chen J, WA Carlezon, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Féin DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Mìneachadh air a ’bhàillidh tar-sgrìobhaidh deltaFosB anns an eanchainn a’ riaghladh brìgh ann an cocaine. Nàdar. 1999;401: 272-276. [Sgaoileadh]
Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry de thràilleachd. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 217-238. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Lamarque S, Taghzouti K, Simon H. Tha làimhseachadh cronach le Delta (9) -tetrahydrocannabinol a ’neartachadh freagairt locomotor gu amphetamine agus heroin. Buadhan airson so-leòntachd a thaobh drogaichean. Neuropharmacology. 2001;41: 118-129. [Sgaoileadh]
Maldonado R, Valverde O, Berrendero F. Com-pàirteachadh an t-siostam endocannabinoid ann an tràilleachd dhrogaichean. Trends Neurosci. 2006;29: 225-232. [Sgaoileadh]
Mansour A, Fox CA, Thompson RC, Akil H, Watson SJ. abairt mRNA receptor mu-Opioid anns an radan CNS: coimeas ri ceangal mu-receptor. Brain Res. 1994;643: 245-265. [Sgaoileadh]
Matthes HWD, Maldonado R, Simonin F, Valverde O, Slowe S, Kitchen I, Befort K, Dierich A, LeMeur M, Dolle P, Tzavara E, Hanoune J, Roques BP, Kieffer BL. Call analgesia air a bhrosnachadh le morphine, buaidh duais agus comharran tarraing air ais ann an luchagan às aonais an gine receptor µ-opioid. Nàdar. 1996;383: 819-823. [Sgaoileadh]
McClung CA, Nestler EJ. Riaghladh air riochdachadh gine agus duais cocaine le CREB agus DeltaFosB. Nat. Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [Sgaoileadh]
McClung CA, Ulery PG, LI Perrotti, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: gluasad moileciuil airson atharrachadh ùine-fhada san eanchainn. Brain Res. Mol. Brain Res. 2004;132: 146-154. [Sgaoileadh]
Muller DL, EM Unterwald. Bidh gabhadan dopamine D1 ag atharrachadh an inneal inntrigidh deltaFosB ann an striatum radain às deidh rianachd mairtine sgudail. J. Pharmacol. Leudachain Ther. 2005;314: 148-154. [Sgaoileadh]
Nestler EJ. Lèirmheas. Innealan tar-sgrìobhaidh a thaobh tràilleachd: dreuchd DeltaFosB. Feallsanachd. Trans. R. Soc. Latharna. B. Biol. Sci. 2008;363: 3245-3255. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: eadar-mheadhanair moileciuil de plasticity neural agus giùlan fad-ùine. Brain Res. 1999;835: 10-17. [Sgaoileadh]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Rannsachadh eòlas-inntinn air riaghladh inntrigidh antigen a tha ceangailte ri FOS le cocaine anns an striatum agus nucleus accumbens. J. Pharmacol. Leudachain Ther. 1995;275: 1671-1680. [Sgaoileadh]
Peakman MC, Colby C, LTS Perrotti, T um, P Carle, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stoc JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, a ’toirt a-steach faireachdainn cuingealaichte de roinn-nàdur de chaochlan àicheil c-Jun ann an luchachan transgenic a’ lùghdachadh mothachadh do chocàin. Brain Res. 2003;970: 73-86. [Sgaoileadh]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, DJ Knapp, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Pàtranan eadar-dhealaichte air inntrigeadh DeltaFosB san eanchainn le drogaichean de dhroch-dhìol. Sinapse. 2008;62: 358-369. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Robbe D, Alonso G, Duchamp F, Bockaert J, Manzoni OJ. Ionadail agus dòighean gnìomh gabhadairean cannabinoid aig synapses glutamatergic de niuclas luch. J. Neurosci. 2001;21: 109-116. [Sgaoileadh]
Measadh cyclase Salomon Y. Adenylate. Adv. Cycle Nucleotide Cyclic. 1979;10: 35-55. [Sgaoileadh]
Selley DE, Sim LJ, Xiao R, Liu Q, Childers SR. Mu opioid air a bhrosnachadh le gabhadair [³⁵S] GTPγS ceangailteach ann an thalamus radan agus loidhnichean cealla cultair: Innealan tar-chuir comharran a tha mar bhunait air èifeachdas agonist. Mol. Pharmacol. 1997;51: 87-96. [Sgaoileadh]
Trigo JM, Martin-Garcia E, Berrendero F, Robledo P, Maldonado R. An siostam opioid endogenous: substrate cumanta ann an cuir dhrogaichean. An crochadh air deoch-làidir. 2010;108: 183-194. [Sgaoileadh]
Unterwald EM, Knapp C, Zukin RS. Àiteachadh neuroanatomical de gabhadairean κ1 agus κ2 opioid ann an eanchainn muc radan agus guinea. Brain Res. 1991;562: 57-65. [Sgaoileadh]
Vaccarino FJ, Bloom FE, Koob GF. Bidh bacadh de ghlacadairean codlaid niuclas accumbens a ’lughdachadh duais heroin intravenous anns an radan. Eòlas-inntinn (Berl) 1985;86: 37-42. [Sgaoileadh]
Vigano D, Rubino T, Vaccani A, Bianchessi S, Marmorato P, Castiglioni C, Parolaro D. Innealan molecular a tha an sàs anns an eadar-obrachadh asymmetric eadar siostaman cannabinoid agus opioid. Eòlas-inntinn (Berl) 2005;182: 527-536. [Sgaoileadh]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, MP Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Ròl deatamach do DeltaFosB anns an niùclas accumbens ann an gnìomhachd mara. Nat. Neurosci. 2006;9: 205-211. [Sgaoileadh]
Zangen A, Solinas M, Ikemoto S, Goldberg SR, Wise RA. Dà làrach eanchainn airson duais cannabinoid. J. Neurosci. 2006;26: 4901-4907. [Sgaoileadh]
Zhu J, Luo LY, Li JG, Chen C, Liu-Chen LY. Tha gnìomhachadh an gabhadair kappa opioid daonna clonichte le agonists ag adhartachadh [35S] GTPγS ceangailteach ri buill-bodhaig: dearbhadh air comasan agus èifeachdas ligandan. J. Pharmacol. Leudachain Ther. 1997;282: 676-684. [Sgaoileadh]
Zimmer A, Valjent E, Konig M, Zimmer AM, Robledo P, Hahn H, Valverde O, Maldonado R. Às-làthaireachd buaidhean dysphoric delta -9-tetrahydrocannabinol ann an luchagan le dìth dynorphin. J. Neurosci. 2001;21: 9499-9505. [Sgaoileadh]
Zimmer A, Zimmer AM, Hohmann AG, Herkenham M, Bonner TI. Barrachd bàsmhorachd, hypoactivity, agus hypoalgesia ann an luchagan bualadh gabhadain cannabinoid CB1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999;96: 5780-5785. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]