Proc Natl Acad Sci US A. 2007 Mar 20; 104 (12): 5181-6. Epub 2007 Mar 9.
Ventura R, Morrone C, Puglisi-Allegra S.
Stòr
Stèidheachd Santa Lucia, Ionad Eòrpach airson Rannsachadh Brain (CERC), Via del Fosso di Fiorano 65, 00143 An Ròimh, an Eadailt. [post-d fo dhìon]
Abstract
Tha fianais o chionn ghoirid a ’moladh gu bheil brosnachaidhean buannachdail agus aversive a’ toirt buaidh air na h-aon raointean eanchainn, a ’toirt a-steach cortex prefrontal medial agus niuclas accumbens. Ged a tha fios gu bheil niuclas accumbens a ’freagairt ri brosnachaidhean iomchaidh, ge bith dè an fhalamhachadh hedonic aca, le barrachd sgaoilidh dopamine roghnach, chan eil fios aig mòran mu àite an cortex prefrontal ann am brosnachadh co-cheangailte ri duais agus aversion no mu na neurotransmitters a tha an sàs. An seo tha sinn a ’faighinn a-mach gun do chuir dòrtadh roghnach norepinephrine ann an cortex prefrontal luchainn às do mheudachadh ann an leigeil ma sgaoil norepinephrine le cortex prefrontal agus dopamine le niuclas accumbens a tha air a bhrosnachadh le biadh, cocaine, no lithium chloride agus a’ cur bacadh air suidheachadh an àite a tha air a bhrosnachadh leis an dà lithium cloride (aversion) agus biadh no cocaine (roghainn). Tha seo na fhianais gu bheil feum air tar-chuir cortical norepinephrine prefrontal airson a bhith a ’toirt buaidh air salchar brosnachail an dà chuid brosnachaidh co-cheangailte ri duais agus aversion tro mhodaladh dopamine ann an niuclas accumbens, sgìre eanchainn a tha an sàs anns a h-uile giùlan brosnachail.
Tha beathaichean a bharrachd air daoine buailteach a bhith a ’sireadh dhuaisean agus a’ seachnadh peanas. Tha an giùlan soilleir sùbailte seo a ’toirt a-steach comas a bhith a’ riochdachadh luach dhuaisean brosnachaidh is peanasachaidh, ro-innse a stèidheachadh mun deidhinn, agus na ro-innseachdan sin a chleachdadh gus giùlan a stiùireadh (1). Cho fad ‘s a dh’ fhaodar faireachdainnean a mhìneachadh mar “stàitean a tha air an togail le luchd-neartachaidh (duaisean agus peanasachadh)” (2), dh ’fhaodadh gum bi tuigse air na raointean eanchainn a tha an sàs ann a bhith a’ giullachd dhuaisean brosnachail brosnachail no gluasadach iomchaidh airson a bhith a ’tuigsinn grunn easbhaidhean tòcail ann an daoine.
Tha dàta o chionn ghoirid a ’sealltainn gu bheil niuclas accumbens (NAc) agus cortex prefrontal (pFC) a’ dèanamh suas substrate cumanta airson a bhith a ’giullachd an dà chuid brosnachaidhean buannachdail agus aversive (3 - 7). Tha striatum ventral (no NAc) an sàs ann a bhith a ’giullachd an fhiosrachaidh a tha mar bhunait air smachd brosnachail giùlan air a stiùireadh le amasan, agus tha sgrùdaidhean daonna is ainmhidh a’ toirt taic do dhreuchd coitcheann airson an raon eanchainn seo ann a bhith a ’giullachd an dà chuid brosnachaidhean buannachdail agus aversive, ge bith dè an fhaireachdainn (3 - 8 ).
A bharrachd air an sin, tha buidheann mòr fianais a ’moladh gu bheil pFC an sàs gu dìreach ann an giùlan air a stiùireadh le amasan a bharrachd air a bhith a’ giullachd buadhach (1, 9). Ach, ged a chaidh tar-chur dopamine ann an NAc a mholadh gus pròiseas “salient brosnachail” co-roinnte a thomhas ann am faothalachd adhartach is àicheil (3, 6), chan eil fios fhathast air àite pFC sa phròiseas seo agus an substrate neurochemical a tha an sàs.
Tha tar-chuir Norepinephrine ann am pFC air a ghnìomhachadh le brosnachaidhean aversive (10, 11) agus le brosnachaidhean appetitive aversive agus conditioned (12, 13). A bharrachd air an sin, chaidh sealltainn o chionn ghoirid gu robh norepinephrine ann am medial pFC (mpFC) an sàs ann am buaidhean buannachdail cuid de dhrogaichean a tha air an droch chleachdadh tron ghnìomh atharrachail aige air leigeil às dopamine ann an NAc (14, 15). Tha seo a ’moladh gu bheil tar-chuir cortical norepinephrine prefrontal a’ toirt a-steach dopamine accumbal gus a bhith a ’giullachd brosnachaidhean brosnachail saillte.
An seo, a ’cleachdadh luchainn, chuir sinn romhainn measadh a dhèanamh a bheil an siostam dopamine cortical norepinephrine / mesoaccumbens prefrontal na substrate neural cumanta a tha an sàs ann a bhith a’ giullachd brosnachaidhean adhartach is àicheil. Gu sònraichte, rinn sinn sgrùdadh a bheil feum air norepinephrine ann am mpFC, tron ghnìomh atharrachail aige air an t-siostam dopaminergic mesolimbic, airson a bhith a ’cur an cèill sunnd brosnachail gu brosnachaidhean co-cheangailte ri duais agus aversion.
Leis gu bheil eòlas na phrìomh dhearbhadh air buaidh brosnachail brosnachaidh sam bith a chaidh a thoirt seachad (7), rinn sinn measadh air a ’bhuaidh a bh’ aig a ’chiad nochdadh air brosnachaidhean nàdurrach (biadh palatable, seoclaid bainne) agus cungaidh-leigheis (cocaine) agus air brosnachadh cungaidh-leigheis aversive [lithium chloride (LiCl)] air sgaoileadh norepinephrine cortical prefrontal agus dopamine accumbal le microdialysis intracerebral. A bharrachd air an sin, gus faighinn a-mach an robh tar-chuir norepinephrine prefrontal a ’riaghladh barrachd às-sruthadh dopamine accumbal air a bhrosnachadh leis a’ chiad nochdadh air na brosnachaidhean brosnachail brosnachail sin, rinn sinn measadh cuideachd air buaidhean dìth-roghnach norepinephrine ann am mpFC air sgaoileadh dopamine ann an NAc agus air sgaoileadh norepinephrine ann am mpFC air a bhrosnachadh leis a ’chiad nochdadh ris na brosnachaidhean sin.
Mu dheireadh, rinn sinn sgrùdadh air a ’bhuaidh a bh’ aig ìsleachadh roghnach noradrenergic prefrontal air roghainn àite cumhaichte (CPP) air a bhrosnachadh le seoclaid agus cocaine agus air aversion àite le cumhachan (CPA) air a bhrosnachadh le LiCl. Chaidh modh suidheachadh àite a thaghadh airson an sgrùdaidh seo air sgàth gu robh e a ’ceadachadh measadh a dhèanamh air a bhith a’ faighinn thogalaichean blasta agus casgach gu brosnachaidhean le càraid le prìomh dhuaisean agus tachartasan casgach agus seach gu bheil buidheann mòr de fhianais a ’sealltainn gu bheil e na thomhas earbsach de phròiseasan a tha mar bhunait iomchaidheachd salient brosnachail do bhrosnachaidhean (3, 16).
TORAIDHEAN
Deuchainn 1.
Gus measadh a dhèanamh air a bheil a ’chiad nochdadh an dà chuid brosnachaidhean buannachdail agus aversive salient a’ toirt buaidh air norepinephrine prefrontal agus às-sruthadh dopamine accumbal, rinn sinn measadh, le microdialysis intracerebral, air buaidh cocaine siostamach no LiCl agus caitheamh seoclaid air sgaoileadh norepinephrine ann am mpFC agus às-sruthadh dopamine ann an NAc. A bharrachd air an sin, gus faighinn a-mach a bheil feum air tar-chuir cortical noradrenergic airson às-sruthadh dopamine accumbal air a bhrosnachadh leis a ’chiad nochdadh air na brosnachaidhean brosnachail brosnachail sin, rinn sinn measadh air buaidhean ìsleachadh noradrenergic roghnach air an fhreagairt dopamine accumbal air a bhrosnachadh le cocaine, seoclaid, agus LiCl. Bha cocaine, seoclaid, agus LiCl a ’toirt a-mach àrdachadh a rèir ùine ann an às-sruthadh norepinephrine ann am mpFC de bhuidhnean le làimhseachadh sham, a’ ruighinn àrdachadh as àirde de ≈200% aig 40 min, ≈70% aig 120 min, agus ≈100% aig 60 min, fa leth (Fig. 1a). Ged a chaidh aithris gu bheil barrachd sgaoileadh norepinephrine anns a ’pFC mar fhreagairt air cocaine, gu ar n-eòlas is e seo a’ chiad aithisg de dh ’às-sruthadh norepinephrine a chaidh a bhrosnachadh leis a’ chiad nochdadh air seoclaid no LiCl siostamach taobh a-staigh mpFC. Bha na brosnachaidhean sin cuideachd a ’toirt a-mach àrdachadh co-shìnte a rèir ùine ann an às-sruthadh dopamine ann an NAc de bheathaichean le làimhseachadh sham (Fig. 1b), ag aontachadh leis a’ bheachd gu bheil pàirt mòr aig an raon seo ann a bhith a ’giullachd brosnachaidhean iomchaidh ge bith dè an fhalamhachadh a th’ annta (3 , 6). Chaidh buaidhean an ìsleachaidh seo air leigeil ma sgaoil norepinephrine ann am mpFC a mheasadh cuideachd. Chaidh dòrtadh ro-riaghailteach norepinephrine fhaighinn le dòrtadh roghnach neurotoxic de luchd-dàimh cortical norepinephrine prefrontal (buidhnean lùghdaichte norepinephrine) ann am mpFC às deidh dìon dopamine le inhibitor togail roghnach. Bha an dòigh seo a ’toirt a-mach dòrtadh domhainn de ìrean teannachaidh de norepinephrine (≈90%), a’ fàgail ìrean teann de dopamine cha mhòr gun bhuaidh. Chaidh beathaichean smachd (buidhnean air an làimhseachadh le sgàil) a thoirt don aon làimhseachadh ris na luchagan a chaidh ìsleachadh ann an norepinephrine ach fhuair iad carbad intracerebral. (Bha ìrean teannachaidh Norepinephrine mar a leanas: buidheann le làimhseachadh sham, clò fliuch 698 ± 26 ng / g; buidheann lùghdaichte norepinephrine, 63 ± 17 ng / g clò fliuch. Bha ìrean teannachadh dopamine mar a leanas: buidheann le làimhseachadh sham, 203 ± Stuth fliuch 18 ng / g; buidheann lùghdaichte norepinephrine, clò fliuch 189 ± 16 ng / g.)
Fig. 1.
Ìsleachadh cortical cortical norepinephrine air norepinephrine extracellular ann am mpFC agus dopamine ann an NAc. Norepinephrine extracellular (NE) ann am mpFC (a) agus dopamine (DA) ann an NAc (b) de bheathaichean le sàl no norepinephrine air an stealladh le saline, (barrachd…)
Bha ìsleachadh norepinephrine roghnach ann am mpFC a ’cur bacadh air an àrdachadh ann an dopamine accumbal agus sgaoileadh norepinephrine cortical prefrontal air a bhrosnachadh leis an dà chuid drogaichean agus seoclaid (Fig. 1), ged nach tug e buaidh mhòr air dopamine extracellular basal ann an NAc (buidheann le làimhseachadh sham, 1.35 ± 0.15 pg gach 20 μl; buidheann lùghdaichte norepinephrine, 1.29 ± 0.18 pg gach 20 μl) no norepinephrine extracellular basal ann am mpFC (buidheann le làimhseachadh sham, 1.31 ± 0.18 pg gach 20 μl; buidheann norepinephrine-depleted, 1.26 ± 0.17 p. Cha robh na luachan basal cuibheasach de dopamine ann an NAc agus de norepinephrine ann am mpFC airson gach buidheann [saline, cocaine (20 mg / kg), LiCl (20 meq / kg), agus seoclaid] gu mòr eadar-dhealaichte
Tha na co-dhùnaidhean againn a ’sealltainn gu bheil tar-chur noradrenergic neo-iomlan taobh a-staigh mpFC na chumha riatanach airson sgaoileadh dopamine a bhrosnachadh air a bhrosnachadh leis an dà chuid brosnachaidhean buannachdail agus aversive taobh a-staigh NAc, mar sin a’ moladh gu làidir a phrìomh dhleastanas ann am beatha brosnachail.
Deuchainn 2.
Gus sgrùdadh a dhèanamh a bheil feum air tar-chuir norepinephrine prefrontal airson a bhith a ’faighinn na togalaichean blasta agus dìonach gu brosnachaidhean le càraid le prìomh dhuaisean agus tachartasan casgach, rinn sinn measadh air buaidhean ìsleachadh norepinephrine prefrontal roghnach air suidheachadh àite.
Chuir ìsleachadh ro-chòmhnard noradrenergic às do gach cuid CPP air a bhrosnachadh le cocaine agus seoclaid a bharrachd air CPA air a bhrosnachadh le LiCl. Mar sin, ged a bha beathaichean le làimhseachadh sham a ’nochdadh roghainn chudromach airson an roinn le paidhir cocaine no seoclaid agus atharrachadh mòr air an roinn le paidhir LiCl (Fig. 2a), cha robh beathaichean a bha air an lughdachadh le norepinephrine a’ nochdadh roghainn sam bith airson an dàrna cuid (Fig. 2b ).
Fig. 2.
Ìsleachadh cortical cortical norepinephrine air suidheachadh àite. Buaidhean caitheamh bìdh (1 g de seoclaid bainne; buidheann le làimhseachadh sham, n = 8; buidheann lùghdaichte norepinephrine, n = 8) agus in-stealladh siostamach (ip) de shalainn (Sal) (buidheann le làimhseachadh sham, (barrachd…)
Thoir fa-near, ann an ro-dheuchainnean, chunnaic sinn gu robh an dà chuid CPP agus CPA de bheathaichean le làimhseachadh sham eadar-dhealaichte bho bheathaichean naïve. Cha robh beathaichean a bha air paidhir saline anns an dà roinn a ’nochdadh roghainn sam bith airson an dàrna cuid ge bith dè an suidheachadh a th’ ann an dochann (air a làimhseachadh le dubhaig no air ìsleachadh norepinephrine). Bha giùlan bheathaichean le dìth norepinephrine air an làimhseachadh le cocaine, seoclaid, no LiCl coltach ri giùlan bheathaichean nach d ’fhuair ach fuasgladh a’ charbaid rè trèanadh; ie, cha do sheall iad roghainn sam bith airson gach roinn.
SGEULACHDAN
An seo tha sinn a ’toirt cunntas air fianais gu bheil tar-chuir cortical norepinephrine prefrontal, tro mhodaladh dopamine ann an NAc, na chumha riatanach airson a bhith a’ toirt buaidh air salchar brosnachail an dà chuid brosnachaidh co-cheangailte ri duais agus aversion.
An toiseach, seach gu bheil eòlas ro-làimh na phrìomh dhearbhadh air buaidh brosnachail brosnachaidh sam bith a chaidh a thoirt seachad (7), rinn sinn measadh, le microdialysis intracerebral, air buaidhean a ’chiad nochdadh air cocaine siostamach no LiCl a bharrachd air buaidhean caitheamh seoclaid air norepinephrine no dopamine leigeil a-mach ann am mpFC agus NAc, fa leth. Bha cocaine, seoclaid, agus LiCl a ’toirt a-mach àrdachadh a bha an urra ri ùine anns an dopamine accumbal a bharrachd air ann an às-sruthadh norepinephrine prefrontal de bhuidhnean le làimhseachadh sham. Bha àrdachadh mòr de thar-shruth norepinephrine ri fhaicinn anns an mpFC de bheathaichean le làimhseachadh sham taobh a-staigh 20 min bho bhith a ’faighinn seoclaid; thill an tar-shruth gu ìrean bun-loidhne às deidh sin agus chaidh àrdachadh mòr leantainneach a leantainn. Ged nach robh an àrdachadh biphasic seo air a bhrosnachadh le seoclaid de norepinephrine ann am mpFC co-shìnte ri àrdachadh dopamine ann an NAc air feadh, bha coltas ann gu robh an àrdachadh tùsail co-cheangailte ri buaidh biadh palatable agus àrdachadh dopamine ann an NAc. Air an làimh eile, is dòcha gu bheil an dàrna àrdachadh mòr a ’riochdachadh co-dhàimh neurochemical den arousal cortical a dh’ fheumar airson a bhith a ’giullachd fiosrachadh spàsail co-cheangailte ri bhith a’ lorg agus a ’lorg duais a’ bhidhe (17). Gu dearbh, chaidh a ràdh gu bheil barrachd às-sruthadh norepinephrine a ’frithealadh a bhith a’ comharrachadh làthaireachd brosnachaidh le eòlas àrd brosnachaidh (17). Mar sin, dh ’fhaodadh an t-às-sruthadh norepinephrine meudaichte seo cead a thoirt don aire roghnach a dh’ fheumar gus biadh palatable a bharrachd a lorg agus dh ’fhaodadh e cuideachadh le bhith a’ faighinn seilbh blasta le cumhachan gu brosnachaidhean le biadh. Ach, chan urrainnear a bhith a ’diùltadh na buaidhean postestive a th’ aig toirt a-steach biadh air norepinephrine.
Ged a chaidh barrachd sgaoileadh dopamine ann an NAc a thoirt air adhart le brosnachadh buannachdail no aversive agus barrachd sgaoileadh norepinephrine anns a ’pFC mar fhreagairt air cocaine air aithris gu farsaing, gu ar n-eòlas is e seo a’ chiad aithisg de dh ’às-sruthadh norepinephrine air adhbhrachadh le foillseachadh seoclaid no LiCl taobh a-staigh mpFC. Nas cudromaiche, tha sinn a ’sealltainn an seo gu bheil tar-chuir cortical noradrenergic prefrontal riatanach airson às-sruthadh dopamine accumbal air a bhrosnachadh leis a’ chiad nochdadh air na brosnachaidhean brosnachail brosnachail sin. Gu dearbh, cha robh àrdachadh mòr sam bith ann an gach cuid norepinephrine prefrontal agus às-sruthadh dopamine accumbal, air a bhrosnachadh leis na brosnachaidhean sin, ri fhaicinn ann an luchagan lùghdaichte norepinephrine. Dh ’fhaodadh Norepinephrine ann am mpFC gluasad dopamine mesoaccumbens a chuir an gnìomh tro ro-mheasadh cortical prefrontal excitatory gu ceallan dopamine sgìre teascal ventral (18, 19) agus / no tro ro-mheasaidhean glutamatergic corticoaccumbal (20). A bharrachd air an sin, faodar dùil a bhith ann an àite airson ro-mheasaidhean pFC don locus coeruleus ann a bhith a ’toirt buaidh excitatory oir thathas air sealltainn gu bheil an niuclas seo a’ gnìomhachadh neurons dopamine sgìre teasach ventral (21 - 23), a dh ’fhaodadh leantainn gu barrachd sgaoileadh dopamine ann an NAc.
Mar sin, tha na toraidhean againn, ann an aonta le aithisgean roimhe, a ’sealltainn gu bheil an dà chuid brosnachadh neo-chumhaichte agus brosnachaidhean casgach a’ meudachadh às-sruthadh norepinephrine ann am mpFC (10 - 15) a bharrachd air sgaoileadh dopamine ann an NAc (3, 24). Nas cudromaiche, ge-tà, tha iad a ’dearbhadh gu bheil tar-chur noradrenergic neo-iomlan taobh a-staigh mpFC na chumha riatanach airson sgaoileadh dopamine a bhrosnachadh air a bhrosnachadh an dà chuid le brosnachaidhean cóg-eòlach agus nàdurrach buannachdail taobh a-staigh NAc. Mar sin, tha iad a ’comharrachadh norepinephrine prefrontal agus tar-chur dopamine accumbal mar shiostam neural a tha e coltach gu bheil gnìomhachd le brosnachaidhean gun duais agus aversive mar substrate airson salchar brosnachail. Tha an sealladh seo a ’faighinn taic bho thoraidhean bho dheuchainnean giùlain air buaidh ìsleachadh norepinephrine prefrontal air suidheachadh cocaine-, seoclaid-, no LiCl-brosnaichte.
Mar sin, is e an dàrna lorg cudromach den sgrùdadh seo gu bheil dòrtadh cortical norepinephrine prefrontal a ’toirt buaidh air gach cuid CPP air a bhrosnachadh le cocaine no biadh agus CPA air a bhrosnachadh le LiCl. Ged a bha beathaichean le làimhseachadh dubhaig a ’nochdadh roghainn mhòr airson an roinn càraid cocaine no seoclaid agus atharrachadh mòr air an roinn le paidhir LiCl, cha robh beathaichean a bha air an lughdachadh le norepinephrine a’ nochdadh roghainn airson an dàrna cuid, agus mar sin a ’sealltainn gu bheil feum air tar-chuir cortical preoreal norepinephrine. airson a bhith a ’faighinn thogalaichean le cumhachan gu brosnachaidhean le càraid le prìomh thachartasan duais no aimhreit ann am modh suidheachadh àite.
Tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta a’ sealltainn, ann an luchagan cortical norepinephrine-depleted prefrontal, gun robh dìth sgaoileadh norepinephrine air a bhrosnachadh le bhith a ’toirt a-steach brosnachaidhean buannachdail agus aversive (cocaine, biadh, no LiCl, brosnachadh gun chumhachan) a’ cur casg air brosnachadh brosnachaidh brosnachail do bhrosnachadh suidheachadh (pàtran spàsail) rè na seiseanan càraid. Cuideachd, thoir fa-near nach do chuir dòrtadh norepinephrine prefrontal bacadh air pròiseasan co-cheangail no mnemonic oir, mar a chaidh a shealltainn roimhe seo, bha beathaichean a bha air an lughdachadh le norepinephrine comasach air gnìomh seachain fulangach (15) ionnsachadh agus an co-theacsa a cheangal ri buaidhean dhrogaichean (14). Ach, tha feum air tuilleadh sgrùdaidh gus tuigse fhaighinn air dè dìreach na h-uireasbhaidhean a th ’ann an ainmhidhean lùghdaichte cortical norepinephrine.
Thathas den bheachd gu bheil sgaoileadh dopaminergic taobh a-staigh NAc a ’tomhas buaidh hedonic duais no cuid de thaobhan de dhuais (faic ref. 25 airson ath-sgrùdadh). Tha na toraidhean againn, ann an aonta le beachd eadar-dhealaichte (3), a ’sealltainn gu bheil pàirt aig tar-chur dopamine ann an NAc ann an giùlan a tha brosnachail agus adhartach; nas cudromaiche, ge-tà, tha iad a ’dearbhadh gu bheil am pròiseas brosnachaidh seo air a riaghladh le norepinephrine cortical prefrontal. Gu dearbh, bidh dòrtadh roghnach preoreal norepinephrine a ’toirt a-mach bloc an dà chuid CPP air a bhrosnachadh le cocaine no seoclaid agus CPA air a bhrosnachadh le LiCl agus lagachadh sgaoileadh dopamine ann an NAc air a bhrosnachadh leis na brosnachaidhean iomchaidh sin ann an luchagan smachd, mar sin a’ sealltainn gu bheil tar-chuir noradrenergic prefrontal, tro mhodaladh. de sgaoileadh dopamine taobh a-staigh NAc, na chumha riatanach airson a bhith a ’giullachd brosnachail an dà chuid brosnachadh co-cheangailte ri duais agus aversion.
Air an toirt còmhla, tha na toraidhean a th ’ann an-dràsta bho dheuchainnean giùlain agus microdialysis a’ sealltainn gu bheil tar-chuir norepinephrine prefrontal chan ann a-mhàin a ’meadhanachadh feartan buannachdail dhrogaichean a tha air an droch chleachdadh mar as trice, mar a chaidh a mholadh le sgrùdaidhean roimhe (14, 15), ach tha e riatanach airson buaidh salient brosnachail an dà chuid duais- agus brosnachaidhean co-cheangailte ri aversion, a ’sealltainn nas fhaide air adhart gu bheil drogaichean addictive, a bharrachd air brosnachaidhean cungaidh-leigheis aversive, a’ gabhail brath air an aon uidheamachd neurobiologic ri brosnachaidhean nàdurrach.
Gu crìch, tha an dàta againn a ’leudachadh co-dhùnaidhean roimhe a tha a’ comharrachadh an t-siostam dopaminergic mesolimbic mar “shiostam salient” a tha an sàs anns a h-uile giùlan brosnachail (3, 6, 26). Tha iad cuideachd a ’sealltainn gu bheil an siostam seo fo smachd cortical prefrontal norepinephrine, agus mar sin a’ toirt taic don bheachd gu bheil brosnachaidhean buannachdail agus aversive a ’toirt buaidh air slighean coltach ris san CNS (7).
Tha na toraidhean againn a ’toirt lèirsinn air neurobio-eòlas duais agus strì oir tha iad a’ sealltainn gu bheil a bhith a ’giullachd an dà chuid brosnachaidhean buannachdail agus aversive salient a’ toirt a-steach na h-aon raointean eanchainn; ie, tha iad a ’comharrachadh tar-chuir dopaminergic prefrontal noradrenergic agus accumbal mar shiostam neural cumanta. Cuidichidh tuigse air na siostaman neurotransmitter a tha air an cur an gnìomh le brosnachaidhean buannachdail no dùbhlanach agus na h-innealan moileciuil aca mar bhunait airson a bhith a ’soilleireachadh gnìomhachd nan siostaman neòil a tha an sàs ann am faireachdainnean adhartach a bharrachd air àicheil..
MATHANAN AGUS MODHAN
Ainmhidhean.
Chaidh luchagan fireann den strain C57BL / 6JIco a chaidh a thoirt a-steach (Charles River Laboratories, Wilmington, MA), a tha air an cleachdadh gu cumanta ann an phenotyping neurobehavioral, 8 - 9 seachdainean aig àm nan deuchainnean, a chumail mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (14, 15). Anns gach buidheann deuchainneach bha eadar sia is ochd beathaichean. Chaidh a h-uile deuchainn a dhèanamh a rèir lagh nàiseanta na h-Eadailt (Reachdas Decreto àireamh. 116, 1992) a ’riaghladh cleachdadh bheathaichean airson rannsachadh.
Drogaichean.
Chaidh hydrate chloral, 6-hydroxydopamine (6-OHDA), GBR 12909, hydrocloride cocaine, agus LiCl a cheannach bho Sigma - Aldrich (St. Louis, MO). Chaidh cocaine (20 mg / kg), LiCl (3.0 meq / kg), hydrad chloral (350 - 450 mg / kg), agus GBR 12909 (15 mg / kg) a sgaoileadh ann an saline (0.9% NaCl) agus stealladh ip ann an a tomhas-lìonaidh 10 ml / kg. Chaidh 6-OHDA a sgaoileadh ann an saline anns a bheil sodium metabisulfite (0.1 M). Airson deuchainnean bìdh, b ’e seoclaid bainne an duais (1 g; Nestlé, Vevey, an Eilbheis).
Microdialysis.
Chaidh beathaichean a thoirt anesthetized le chloral hydrate (450 mg / kg), air a chuir suas ann am frèam stereotaxic (Innealan David Kopf, Tujunga, CA) uidheamaichte le inneal-luch, agus air a chuir a-steach gu aon-thaobhach le cannula treòrachaidh (stàilinn gun staoin, trast-thomhas taobh a-muigh 0.38 mm ; Metalant AB, Stockholm, an t-Suain) ann am mpFC no ann an NAc (14, 15). B ’e fad a’ chanàil treòrachaidh 1 mm airson mpFC agus 4.5 mm airson NAc. Chaidh an cannula treòrachaidh a shocrachadh le glaodh epoxy, agus chaidh saimeant fiaclaireachd a chuir ris airson tuilleadh seasmhachd. Bha na co-chomharran bho bregma [air an tomhas a rèir modhan Franklin agus Paxinos (27)] mar a leanas: + 2.52 anteroposterior agus 0.6 lateral airson mpFC agus + 1.60 anteroposterior agus 0.6 lateral airson NAc [a ’mhòr-chuid a’ toirt a-steach fo-roinneadh an t-slige (27)]. Chaidh an probe (fad membran dialysis de 2 mm airson mpFC agus 1 mm airson NAc agus trast-thomhas taobh a-muigh 0.24 mm, probe microdialysis cuprophane MAB 4; Metalant AB) a thoirt a-steach 24 h ro dheuchainnean microdialysis. Chaidh na beathaichean a thoirt a-steach gu h-aotrom le hydrate chloral (350 mg / kg) gus cuir a-steach an probe microdialysis le làimh a-steach don stiùireadh cannula. Chaidh beathaichean a thilleadh chun na cèidsichean dachaigh aca. Bha an tubair dearbhaidh a-muigh agus a-staigh air a dhìon le Parafilm a chaidh a chuir an sàs gu h-ionadail. Chaidh na buill-bodhaig a dhearbhadh airson faighinn a-steach in vitro de dopamine agus norepinephrine (bha ath-bheothachadh càirdeach mar a leanas: dopamine, 10.7 ± 0.82%; norepinephrine, 12.2 ± 0.75%; n = 20) air an latha mus deach a chleachdadh gus dearbhadh fhaighinn air ais.
Bha an probe microdialysis ceangailte ri pumpa CMA / 100 (Leigheas Carnegie, Stockholm, an t-Suain) tro phìoban PE 20 (Metalant AB) agus swivel lionn dà-sianal torque ultralow (modail 375 / D / 22QM; Laboratories Instech, Coinneamh Plymouth, PA) gus leigeil le gluasad an-asgaidh. Chaidh lionn cerebrospinal fuadain (147 mM NaCl / 1 mM MgCL / 1.2 mM CaCl2 / 4 mM KCl) a phumpadh tron probe dialysis aig ìre sruth seasmhach de 2 μl / min. Chaidh deuchainnean a dhèanamh 22–24 h às deidh suidheachadh probe. Chaidh gach beathach a chuir ann an cèidse cruinn le uidheamachd microdialysis (Instech Laboratories) agus leapannan cèidse dachaigh air an làr. Chaidh perfusion dialysis a thòiseachadh 1 h nas fhaide air adhart. Às deidh tòiseachadh air briseadh dialysis, chaidh luchagan fhàgail gun dragh airson ≈2 h mus deach sampallan bun-loidhne a chruinneachadh. Chaidh a ’cho-chruinneachadh cuibheasach de na trì sampaill a chaidh a chruinneachadh dìreach ron làimhseachadh (<eadar-dhealachadh 10%) a ghabhail mar dùmhlachd basal. Mus do thòisich deuchainnean microdialysis, chaidh na luchagan a shònrachadh do aon de na leigheasan eadar-dhealaichte (saline, cocaine, seoclaid, no LiCl) taobh a-staigh gach buidheann (làimhseachadh sham no norepinephrine depleted). Airson deuchainnean le biadh, chaidh na beathaichean a chuir air clàr bochdainn bìdh (28) 4 latha mus do thòisich deuchainnean.
Chaidh dialysate a chruinneachadh a h-uile min 20 airson 120 (airson buidhnean cocaine agus LiCl) no 160 (airson buidhnean bìdh) min. Chan eil ach dàta bho luchainn le cannula air a shuidheachadh gu ceart air aithris. Bha àiteachan air am breithneachadh le staining gorm methylene. Chaidh fichead microliters de na sampallan dialysate a sgrùdadh le HPLC. Chaidh an 20 μl a bha air fhàgail a chumail airson sgrùdadh a dh ’fhaodadh a bhith ann. Cha deach dùmhlachdan (pg gach 20 μl) a cheartachadh airson faighinn seachad air probe. Anns an t-siostam HPLC bha siostam Alliance HPLC (Waters, Milford, MA) agus lorgaire coulometric (modail 5200A; Coulochem II, ESA, Chelmsford, MA) air a thoirt seachad le cealla fuarachaidh (M 5021) agus cill anailis (M 5011) . Chaidh an cealla fuarachaidh a shuidheachadh aig 400 mV, chaidh electrod 1 a shuidheachadh aig 200 mV, agus chaidh electrod 2 a shuidheachadh aig −250 mV. Chaidh colbh Nova-Pack C18 (3.9 × 150 mm; Uisgeachan) a chaidh a chumail aig 33 ° C a chleachdadh. B ’e an ìre sruth 1.1 ml / min. Bha an ìre gluasadach mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (14, 15). B ’e crìoch lorgaidh assay 0.1 pg.
Ìsleachadh Norepinephrine ann am mpFC.
Tha anesthesia agus seata lannsaireachd air am mìneachadh gu h-àrd. Chaidh beathaichean a thoirt a-steach le GBR 12909 (15 mg / kg) 30 min ro microinjection 6-OHDA gus neurons dopaminergic a dhìon. Chaidh in-stealladh dà-thaobhach de 6-OHDA (1.5 μg gach 0.1 μl airson 2 min airson gach taobh) a dhèanamh a-steach do mpFC [bha co-chomharran + 2.52 anteroposterior, ± 0.6 lateral, agus −2.0 ventral a thaobh bregma (27)] tro stàilinn gun staoin. cannula (trast-thomhas taobh a-muigh 0.15 mm; Unimed, Lausanne, an Eilbheis) ceangailte ri syringe 1-μl le tiùb polyethylene agus air a stiùireadh le pumpa CMA / 100. Chaidh an cannula fhàgail na àite airson min 2 a bharrachd às deidh deireadh an in-fhilleadh. Chaidh beathaichean le làimhseachadh haham a thoirt don aon làimhseachadh ach fhuair iad carbad intracerebral. Chaidh beathaichean a chleachdadh airson microdialysis no deuchainnean giùlain 7 làithean às deidh obair-lannsa.
Chaidh ìrean teannachadh Norepinephrine agus dopamine ann am mpFC a mheasadh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (14, 15) gus measadh a dhèanamh air ìre an ìsleachaidh.
Suidheachadh àite.
Chaidh deuchainnean giùlain a dhèanamh le bhith a ’cleachdadh inneal suidheachadh àite (14, 15, 29). Anns an uidheam bha dà sheòmar Plexiglas liath (15 × 15 × 20 cm) agus alley sa mheadhan (15 × 5 × 20 cm). Cheangail dà dhoras sleamhnachaidh (4 × 20 cm) an alley ris na seòmraichean. Anns gach seòmar chaidh dà cho-shìnte trì-cheàrnach (5 × 5 × 20 cm) a dhèanamh de Plexiglas dubh agus air an rèiteachadh ann an diofar phàtranan (an-còmhnaidh a ’còmhdach an aon uachdar den t-seòmar) air an cleachdadh mar bhrosnachaidhean cumhaichte. Chaidh beathaichean a chleachdadh airson deuchainnean giùlain 7 làithean às deidh obair-lannsa. Mus deach an suidheachadh, chaidh na luchagan a shònrachadh do aon de na leigheasan eadar-dhealaichte (saline, cocaine, seoclaid, no LiCl) taobh a-staigh gach buidheann (làimhseachadh sham no norepinephrine depleted).
Chaidh mìneachadh a dhèanamh roimhe seo air an dòigh trèanaidh airson suidheachadh àite (14, 15). Goirid, air latha 1 (pretest), bha luchainn an-asgaidh sgrùdadh a dhèanamh air an uidheamachd gu lèir airson 20 min. Anns na làithean 8 a leanas (ìre fuarachaidh), bha luchagan air an cuingealachadh gach latha airson 40 min mu seach ann an aon den dà sheòmar. Airson suidheachadh àite le brosnachaidhean cungaidh-leigheis, chaidh aon de na pàtranan a pharadh gu cunbhalach le saline agus am fear eile le cocaine (20 mg / kg ip, CPP) no LiCl (3.0 meq / kg ip, CPA) rè na h-ìre fuarachaidh. Chaidh na dòsan sin a thaghadh a rèir sgrùdaidhean roimhe a ’sealltainn gu bheil luchagan C57BL / 6JIco a’ taisbeanadh CPP nas làidire aig dòs cocaine de 20 mg / kg (30, 31) agus gluasad a dh ’ionnsaigh aversion ann an deuchainn CPA aig dòs LiCl de 3.0 meq / kg (32). Airson beathaichean anns a ’bhuidheann smachd, chaidh an dà sheòmar a pharadh le saline. Airson CPP le biadh, chaidh aon de na pàtranan a pharadh gu cunbhalach le biadh àbhaisteach (1 g de dhaithead àbhaisteach na luchaige) agus am fear eile le biadh blasda (1 g de seoclaid bainne). Chaidh na beathaichean a chuir air clàr cuibhreachadh bìdh (28) 4 làithean mus do thòisich an suidheachadh. Mhair an clàr-ama seo tro shuidheachadh an t-suidheachaidh.
Airson a h-uile deuchainn suidheachadh-àite, chaidh paidhrichean a chothromachadh gus am biodh leth de gach buidheann deuchainneach air am brosnachadh gun chùmhnant (cocaine, seoclaid, no LiCl) air a chàradh le aon den dà phàtran; airson an leth eile de gach buidheann, chaidh an spreagadh gun chumhachan a pharadh leis a ’phàtran eile. Chaidh deuchainnean airson CPP no CPA a chuir an cèill air latha 10 le bhith a ’cleachdadh an dòigh-obrach as fheàrr. Chaidh dàta giùlain a chruinneachadh agus a sgrùdadh leis an t-siostam tracadh bhidio làn fèin-ghluasadach EthoVision (Noldus, Wageningen, An Òlaind). Goirid, tha an siostam deuchainneach air a chlàradh le camara bhidio CCD. Tha an comharra an uairsin air a dhidsiotachadh (le inneal cruaidh ris an canar frèam grabber) agus ga thoirt gu cuimhne a ’choimpiutair. Nas fhaide air adhart, tha an dàta didseatach air a mhion-sgrùdadh leis a ’bhathar-bog EthoVision gus“ ùine a chaitheamh ”(ann an diogan), a tha air a chleachdadh mar dàta amh airson sgòran roghainn anns gach roinn den inneal le gach cuspair.
Staitistig.
Suidheachadh àite.
Airson deuchainnean suidheachadh-àite, chaidh mion-sgrùdaidhean staitistigeil a dhèanamh le bhith a ’tomhas na h-ùine (ann an diogan) a chaidh a chaitheamh anns an ionad (Ionad), paidhrichean dhrogaichean / seoclaid (Càraid), agus cuibhreannan saline / biadh àbhaisteach (gun ullachadh) air latha an deuchainn. A thaobh bheathaichean a ’faighinn paidhir saline leis an dà roinn, chaidh an roinn càraid aithneachadh mar a’ chiad fhear ris an robh iad fosgailte.
Buaidhean sàrachadh roghnach cortical preoreal norepinephrine air suidheachadh àite.
Chaidh dàta bho dheuchainnean suidheachadh-àite a sgrùdadh le bhith a ’cleachdadh ANOVA a-rithist agus aon le tomhas eadar factar (pretreatment, dà ìre: sham air a làimhseachadh agus norepinephrinedepleted) agus aon taobh a-staigh factar (pairing, trì ìrean: Ionad, Càraid, agus gun ullachadh) airson gach làimhseachadh [ saline / saline, saline / cocaine (20 mg / kg), saline / LiCl (3 meq / kg), agus biadh / seoclaid àbhaisteach]. Leis gur e na coimeasan cudromach an fheadhainn eadar roinnean Càraid is gun ullachadh, chaidh coimeasan ùine a dhèanamh anns na seòmraichean sin le bhith a ’cleachdadh ceumannan ANOVA a-rithist taobh a-staigh gach buidheann.
Nochd ANOVA dà-thaobh pretreatment mòr × eadar-obrachadh càraid airson cocaine [F (2, 28) = 3.47; P <0.05], LiCl [F (2, 28) = 4.55; P <0.05], agus seoclaid [F (2, 28) = 3.5; P <0.05].
Nochd ceumannan ath-aithriseach ANOVA taobh a-staigh gach buidheann buaidh mhòr aig a ’bhàillidh càraid a-mhàin airson beathaichean le làimhseachadh sham a chaidh an stealladh le cocaine [F (1, 14) = 24.3; P <0.0005], LiCl [F (1, 14) = 10.3; P <0.01], no seoclaid [F (1, 14) = 7.31; P <0.05].
Ìsleachadh Norepinephrine ann am mpFC.
Chaidh buaidhean dòrtadh preoreal norepinephrine air ìrean teann de dopamine agus norepinephrine ann am mpFC a sgrùdadh le ANOVA dà-thaobh. Bha na factaran mar a leanas: lesion (dà ìre: làimhseachadh sham agus ìsleachadh norepinephrine) agus deuchainn (dà ìre: deuchainn giùlan agus deuchainnean microdialysis). Chaidh coimeasan fa leth eadar buidhnean a dhèanamh nuair a bha sin iomchaidh le deuchainn post hoc, deuchainn ioma-raon Dhonnchaidh. Chaidh mion-sgrùdaidhean staitistigeil a dhèanamh air dàta bho dheuchainnean giùlain agus microdialysis. Sheall ANOVA dà-shligheach airson buaidhean dòrtadh norepinephrine prefrontal air ìrean teannachadh dopamine agus norepinephrine ann am mpFC buaidh lesion mòr airson norepinephrine a-mhàin [F (1, 188) = 2.02; P <0.0005], ach gun bhuaidhean deuchainneach.
Microdialysis.
Chaidh mion-sgrùdaidhean staitistigeil a dhèanamh air dàta amh (dùmhlachd pg gach 20 μl). Chaidh buaidhean dòrtadh preoreal norepinephrine air sgaoileadh norepinephrine ann am mpFC no air às-sruthadh dopamine ann an NAc de bheathaichean le dùbhlan cocaine (20 mg / kg) no LiCl (3 meq / kg) a sgrùdadh le ceumannan ANOVA a-rithist le dhà eadar factaran (pretreatment, dà ìre, làimhseachadh sham agus ìsleachadh norepinephrine; agus làimhseachadh, trì ìrean, saline, cocaine, agus LiCl) agus aon taobh a-staigh factar (ùine, seachd ìrean, 0, 20, 40, 60, 80, 100, agus 120). Chaidh buaidhean dòrtadh preoreal norepinephrine air sgaoileadh norepinephrine ann am mpFC no air às-sruthadh dopamine ann an NAc de bheathaichean a bha fosgailte do seoclaid a sgrùdadh le ceumannan ANOVA a-rithist le aon eadar factar (pretreatment, dà ìre, làimhseachadh sham agus ìsleachadh norepinephrine) agus aon taobh a-staigh factar ( ùine, naoi ìrean, 0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, agus 160). Chaidh buaidhean sìmplidh a mheasadh le ANOVA aon-shligheach airson gach puing ùine. Chaidh coimeasan fa leth eadar buidhnean a dhèanamh nuair a bha sin iomchaidh le deuchainn post hoc, deuchainn ioma-raon Dhonnchaidh.
Nochd mion-sgrùdaidhean staitistigeil airson buaidhean brosnachaidh pharmacologach air às-sruthadh norepinephrine prefrontal pretreatment mòr × làimhseachadh × eadar-obrachadh ùine [F (12, 180) = 4.98; P <0.005]. Nochd mion-sgrùdaidhean staitistigeil airson buaidhean caitheamh seoclaid air sgaoileadh norepinephrine ro-aithris pretreatment × ùine [F (8, 80) = 7.77; P <0.005]. Nochd mion-sgrùdaidhean buaidh shìmplidh buaidh mhòr ùine a-mhàin airson a ’bhuidheann a chaidh a làimhseachadh le dubhaig agus eadar-dhealachadh mòr eadar buidhnean a tha air an làimhseachadh le dubhaig agus air an lughdachadh le norepinephrine às deidh in-stealladh cocaine no LiCl a bharrachd air às deidh caitheamh seoclaid.
Nochd mion-sgrùdaidhean staitistigeil airson buaidhean brosnachaidh pharmacologach air às-sruthadh dopamine accumbal pretreatment mòr × làimhseachadh × eadar-obrachadh ùine [F (12, 180) = 10.02; P <0.0005]. Nochd mion-sgrùdaidhean staitistigeil de dhàta seoclaid ro-aithris mòr × eadar-obrachadh ùine [F (8, 80) = 2.12; P <0.05]. Nochd mion-sgrùdaidhean buaidh shìmplidh buaidh mhòr ùine a-mhàin dha na buidhnean le làimhseachadh sham agus eadar-dhealachadh mòr eadar buidhnean a bha air an làimhseachadh le dubhaig agus norepinephrine an dèidh in-stealladh dhrogaichean (cocaine no LiCl) a bharrachd air às deidh caitheamh seoclaid.
BUIDHEACHADH
Tha sinn a ’toirt taing don Dr E. Catalfamo airson taic sgileil. Fhuair an rannsachadh seo taic bho Ministero della Ricerca Scientifica e Tecnologica (PRIN 2005), Università “La Sapienza” Ateneo (2004 / 2005), agus Ministero della Salute (Progetto Finalizzato RF03.182P).
RABHADH
NAc niuclas accumbens
cortex prefrontal pFC
mpFC medial pFC
Roghainn àite fo chumha CPP
CPA suidheachadh suidheachadh atharraichte
6-OHDA 6-hydroxydopamine.
FOOTNOTES
Chan eil na h-ùghdaran a 'nochdadh strì eadar com-pàirtean
Tha an artaigil seo na tagradh dìreach PNAS.
IOMRAIDHEAN
1. O'Doherthy J. Curr Opin Neurobiol. 2004; 14: 769–776. [PubMed]
2. Rolls ET. Giùlan Brain Sci. 2000; 23: 177 - 191. [PubMed]
3. Berridge KC, Robinson TE. Brain Res Urr 1998; 28: 309 - 369. [PubMed]
4. Becerra L, Breiter HC, Wise R, Gonzalez RG, Borsook D. Neuron. 2001; 32: 927 - 946. [PubMed]
5. Gottfried JA, O'Doherthy J, Dolan RJ. J Neurosci. 2002; 22: 10829–10837. [PubMed]
6. Jensen J, Mcintosh AR, Crawley AP, Mikulis DJ, Remington GR, Kapur S. Neuron. 2003; 40: 1251 - 1257. [PubMed]
7. Borsook D, Becerra L, Carlezon WA, Jr, Shaw M, Renshaw P, Elman I, Levine J. Eur J Pain. 2007; 11: 7 - 20. [PubMed]
8. Wise R. Nat Rev Neurosci. 2004; 5: 483 - 494. [PubMed]
9. Bechara A, Tranel D, Damasio H. Brain. 2000; 123: 2189 - 2202. [PubMed]
10. McQuade R, Creton D, Stanford SC. Psychopharmacology. 1999; 145: 393 - 400. [PubMed]
11. Dazzi L, Seu E, Cherchi G, Biggio G. Eur J Pharmacol. 2003; 476: 55 - 61. [PubMed]
12. Feenstra MGP, Teske G, Botterblom MHA, de Bruin JP. Neurosci Lett. 1999; 272: 179 - 182. [PubMed]
13. Mingote S, de Bruin JPC, Feenstra MGP. J Neurosci. 2004; 24: 2475 - 2480. [PubMed]
14. Ventura R, Cabib S, Alcaro A, Orsini C, Puglisi-Allegra S. J Neurosci. 2003; 23: 1879 - 1885. [PubMed]
15. Ventura R, Alcaro A, Puglisi-Allegra S. Cereb Cortex. 2005; 15: 1877 - 1886. [PubMed]
16. Di Chiara G, Bassareo V, Fenu S, De Luca MA, Spina L, Cadoni C, Acquas E, Carboni E, Valentini V, Lecca D. Neuropharmacology. 2004; 47: 227 - 241. [PubMed]
17. Aston-Jones G, Rajkowski J, Cohen J. Biol Psychiatry. 1999; 46: 1309 - 1320. [PubMed]
18. Shi WX, Pun CL, Zhang XX, Jones MD, Bunney BS. J Neurosci. 2000; 20: 3504 - 3511. [PubMed]
19. Sesack SR, Pickel VM. J Comp Neurol. 1992; 320: 145 - 160. [PubMed]
20. Darracq L, Drouin C, Blanc G, Glowinski J, Tassin JP. Neo-eòlas. 2001; 103: 395 - 403. [PubMed]
21. Jodo E, Chiang C, Aston-Jones G. Neo-eòlas. 1998; 83: 63 - 79. [PubMed]
22. Grenhoff J, Nisell M, Ferre S, Aston-Jones G, Svensson TH. J Neural Transm. 1993; 93: 11 - 25.
23. Liprando LA, Miner LH, Blakely RD, Lewis DA, Sesack SR. Synapse. 2004; 52: 233 - 244. [PubMed]
24. Salamone JD, Correa M, Mingote S, Weber SM. J Pharmacol Exp Ther. 2003; 305: 1 - 8. [PubMed]
25. Everitt BJ, Robbins TW. Nat Neurosci. 2005; 11: 1481 - 1487. [PubMed]
26. Horvitz JC. Giùlan Brain Res. 2002; 137: 65 - 74. [PubMed]
27. Franklin KBJ, Paxinos G. Brain na luchaige: Ann an co-chomharran stereotaxic. San Diego: Acadaimigeach; 1997.
28. Ventura R, Puglisi-Allegra S. Synapse. 2005; 58: 211 - 214. [PubMed]
29. Cabib S, Orsini C, Le Moal M, Piazza PV. Saidheans. 2000; 289: 463 - 465. [PubMed]
30. Romieu P, Phan VL, Martin-Fardon R, Maurice T. Neuropsychopharmacology. 2002; 4: 444 - 455. [PubMed]
31. Orsini C, Bonito-Oliva A, Conversi D, Cabib S. Psychopharmacology. 2005; 181: 327 - 336. [PubMed]
32. Risinger FO, Coineagan CL. Giùlan Biochem Pharmacol. 2000; 1: 17 - 24. [PubMed]
;
