CRF-CRF1 Aithris Siostam anns a 'Mheadhain agus Basolateral Nuclei nan Amygdala Eadar-dhealachaidhean Eadar-dhealaichte Biadh Iomadach Bìdh Palatable (2013)

Neuropsychopharmacology. 2013 Samhain; 38 (12): 2456 - 2466.

Air fhoillseachadh air-loidhne 2013 Jul 10. Air fhoillseachadh air-loidhne 2013 Jun 10. doi: 10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Attilio Iemolo,¹ Angelo Blasio,¹ Stephen A St Cyr,¹ Fanny Jiang,¹ Rice Kenner C.,² Valentina Sabino,¹ agus Pietro Cottone^1,^*

Abstract

Tha biadh a tha air leth blasta agus daithead a ’toirt buaidh mhòr air leasachadh ithe èigneachail ann an reamhrachd agus eas-òrdughan ithe. Sheall sinn roimhe gu bheil ruigsinneachd eadar-amail air biadh palatable a ’leantainn gu corticotropin-release factor-1 (CRF₁) giùlan antagonist-reversible gabhadain, a tha a ’toirt a-steach cus gabhail a-steach biadh palatable, hypophagia de chow cunbhalach, agus giùlan coltach ri dragh. Ach, chan eil fios fhathast dè na raointean eanchainn a tha a ’toirt buaidh air na buaidhean sin. Bhathar a ’biathadh radain fireann Wistar an-còmhnaidh airson 7 làithean / seachdain (Chow / Chow buidheann), no air a bhiadhadh chow bho àm gu àm 5 làithean / seachdain, air a leantainn le daithead sucrose, palatable 2 làithean / seachdain (Chow / Palatable buidheann). Às deidh atharrachadh daithead cronail, buaidhean meanbh-bhualadh an CRF₁ chaidh antagonist gabhadair R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / taobh) ann am meadhan niuclas an amygdala (CeA), niuclas basolateral an amygdala (BlA), no niuclas leabaidh an stria terminalis (BNST) a mheasadh air cus in-ghabhail. den daithead palatable, hypophagia chow, agus giùlan coltach ri dragh. A bharrachd air an sin, chaidh dìonachd CRF a mheasadh ann an eanchainn radain rothaireachd daithead. Chuir Intra-CeA R121919 bacadh air an dà chuid cus biadh bidhe agus giùlan coltach ri dragh Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air hypophagia chow. Air an làimh eile, lughdaich intra-BlA R121919 an hypophagia chow a-steach Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air cus biadh blasta no giùlan coltach ri dragh. Cha robh buaidh sam bith aig làimhseachadh taobh a-staigh BNST. Cha do dh ’atharraich na leigheasan giùlan Chow / Chow radain. Nochd immunohistochemistry àireamh nas motha de cheallan CRF-positive ann an CeA - ach chan ann ann am BlA no BNST - de Chow / Palatable radain, an dà chuid tro bhith a ’tarraing air ais agus a’ faighinn cothrom às ùr air daithead palatable, an coimeas ri smachdan. Tha na toraidhean sin a ’toirt seachad fianais gnìomh gu bheil an CRF - CRF₁ tha àite eadar-dhealaichte aig siostam gabhadain ann an CeA agus BlA ann a bhith a ’meadhanachadh giùlan mì-chùramach mar thoradh air baidhsagal daithead palatable.

Keywords: bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin, BNST, tràilleachd, iomagain, hypophagia, radan

RO-RÀDH

Thathas a ’creidsinn gu bheil biadh a tha gu math blasta (me, biadh a tha saidhbhir ann an siùcar agus / no geir) nam prìomh adhbharan airson biadh èiginneach a nochdadh ann an cuid de dh’ reamhrachd agus eas-òrdughan ithe (Corwin, 2006; Yach et al, 2006). Tha mòran analach eadar tràilleachd dhrogaichean agus cus gabhail a-steach biadh a tha gu math blasta, a ’toirt a-steach call smachd air droga / biadh, neo-chomas crìoch a chuir air cleachdadh / overeating a dh’ aindeoin droch bhuaidhean, àmhghar, agus dysphoria nuair a tha thu a ’feuchainn ri stad a chuir air droga / biadh (Parylak et al, 2011; Volkow agus O'Brien, 2007). Thathas air na comharraidhean cumanta sin a mholadh a bhith ag èirigh bho eas-òrdughan cuairtean eanchainn, a tha a ’dol an-sàs ann an cuir ri drogaichean agus ithe èigneachail.

Seòrsa bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin 1 (CRF₁) tha antagonists gabhadain air am moladh mar thargaidean teirpeach ùr-nodha airson eas-òrdugh addictive air sgàth an comas lughdachadh a dhèanamh air buaidhean brosnachail tarraing a-mach (Logrip et al, 2011). Tha CRF na eadar-mheadhanair èiginneach de fhreagairtean endocrine, co-fhaireachdainn, agus giùlan gu cuideam (Bakshi agus Kalin, 2000; Vale et al, 1981). Tha CRF ann an neul paraventricular an hypothalamus a ’cumail smachd air freagairt hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) gu cuideam, ach tha buaidhean giùlain CRF neo-eisimeileach agus air am meadhanachadh le roinnean eanchainn extrahypothalamic (Koob agus Heinrichs, 1999). An CRF - CRF extrahypothalamic₁ siostam gabhadain air a thrusadh an urra ri drogaichean mì-ghnàthachaidh aithnichte tro chuairtean deoch-làidir / toirt air falbh, agus thathas a ’meas gu bheil an tar-tharraing seo mar eileamaid chumanta, a’ brosnachadh cus dhrogaichean tro inneal a tha air a dhaingneachadh gu h-àicheil (ie, toirt a-steach dhrogaichean èiginneach air a thoirt gu buil le bhith a ’toirt air falbh tarraing-às- staid tòcail àicheil brosnaichte; Heilig agus Koob, 2007; Koob, 2010; Shalev et al, 2010).

Ged a chaidh sgrùdadh a dhèanamh air coltachdan eadar drogaichean mì-ghnàthachaidh agus biadh gu farsaing a thaobh nam feartan neartachaidh adhartach aca (ie, cus de bhiadh air a thoirt a-mach le bhith a ’faighinn buaidh thlachdmhor; Avena et al, 2012; Blasio et al, 2013b; Corwin agus Grigson, 2009; Cottone et al, 2012; Hagan et al, 2003), tha an ro-bheachd gum faodadh cus de bhiadh a thoirt a-steach mar sheòrsa de ‘fèin-chungaidh-leigheis’ gus faochadh a thoirt don t-suidheachadh tòcail àicheil a tha co-cheangailte ri bhith a ’tarraing air ais bho bhiadhan a tha gu math blasta (gu ìre mhath gann) (Bale, 2005; Cottone et al, 2009a; Shalev et al, 2010).

Tha sinn air sealltainn roimhe seo gu bheil tarraing a-mach à ruigsinneachd cronail, eadar-amail air biadh a tha gu math blasta ag adhbhrachadh fastadh an t-siostam CRF extrahypothalamic agus nochdadh CRF₁ giùlan maladaptive a tha an urra ri gabhadan, a tha a ’toirt a-steach cus de bhiadh a-steach air ruigsinneachd ath-nuadhaichte don daithead a tha gu math palatable, hypophagia den daithead chow ris an gabhadh gabhail ris, agus giùlan coltach ri dragh rè staonadh (Cottone et al, 2009a).

Ach, fianais gnìomh dìreach a thaobh dè an raon eanchainn a tha an urra ris an CRF₁ tha atharrachaidhean giùlain a tha an urra ri gabhadan air an adhbhrachadh le rothaireachd daithead palatable a dhìth. Mar sin bha an sgrùdadh seo ag amas air faighinn a-mach an robh antagonism sònraichte air làrach CRF₁ bha gabhadairean taobh a-staigh meadhan niuclas an amygdala (CeA), niuclas basolateral an amygdala (BlA) no niuclas leabaidh an stria terminalis (BNST) comasach air casg a chuir air cus de bhiadh fìor palatable, hypophagia a chaidh a tharraing air ais gu cunbhalach. chow, agus giùlan coltach ri dragh. A bharrachd air an sin, bha an sgrùdadh seo ag amas air faighinn a-mach an deach abairt CRF ann an CeA, BlA, agus BNST a mheudachadh ann an radain rothaireachd daithead an coimeas ri smachdan, a ’cleachdadh immunohistochemistry. Ged a tha sinn air sealltainn roimhe gu bheil tarraing a-mach à biadh palatable co-cheangailte ri barrachd faireachdainn CRF ann an CeA, chan eil fios aig an àm seo ciamar a tha BlA agus BNST a ’toirt buaidh air baidhsagal daithead.

MATHANAN AGUS MODHAN

Cuspairean

Radain Wistar fireann (n= 140, às a bheil radain 33 airson deuchainnean CeA, radain 46 airson deuchainnean BlA, radain 39 airson deuchainnean BNST, agus radain 22 airson an deuchainn immunohistochemistry; Clàr Leasachail 1), le cuideam 180 - 230 g agus 41 - 47 latha a dh ’aois nuair a ràinig iad (Charles River, Wilmington, MA, na SA), bha iad singilte ann an cèidse le sreang, plastaig (27 × 48 × 20 cm) air solas cùil 12-h baidhsagal (a ’lasadh dheth aig uairean 1100), ann an taiseachd a tha ceadaichte le AAALAC- (60%) agus vivarium fo smachd teothachd (22 ° C). Bha radain air ad libitum ruigsinneachd air chow stèidhichte air arbhar (Harlan Teklad LM-485 Diet 7012; 65% kcal gualaisg, 13% geir, pròtain 21%, lùth metabolizable 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, USA) agus uisge, mura h-eilear ag innse a chaochladh . Bha na modhan a chaidh a chleachdadh san sgrùdadh seo a ’cumail ri Stiùireadh Institiud Nàiseanta Slàinte airson Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Saotharlann (àireamh foillseachaidh NIH 85-23, 1996 ath-sgrùdaichte) agus Prionnsapalan Cùram Bheathaichean Saotharlann, agus chaidh an aontachadh le Institiùd Campus Meidigeach Oilthigh Boston. Comataidh Cùram is Cleachdadh Bheathaichean.

drogaichean

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropyl-pyrazolo [2,3-a] pyrimidin-7-amine, NBI 30775) air a cho-chur mar a chaidh a mhìneachadh ann an Chen et al (2004). Tha R121919 na CRF làidir, neo-peptide, àrd-dàimh₁ gabhaltach an gabhadan (K_i= 2 - 5 nM), a tha a ’sealltainn còrr air gnìomhachd 1000-fold nas laige aig an CRF₂ gabhadair, pròtain ceangailteach CRF, no 70 seòrsachan gabhadan eile (Grigoriadis et al, 2000). Chaidh R121919 a sgaoileadh le bhith a ’cleachdadh measgachadh 18: 1: 1 de shalainn: ethanol: cremophor.

Deuchainnean giùlain

Ad libitum palatable diet alternation diet

An ruigsinneachd don ad libitum chaidh atharrachadh daithead palatable a dhèanamh mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (Cottone et al, 2008, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012). Goirid, às deidh dhaibh a bhith air an ainmeachadh, chaidh radain a roinn ann an dà bhuidheann a chaidh a mhaidseadh airson in-ghabhail bìdh, cuideam bodhaig agus èifeachdas biadhaidh nan làithean 3 - 4 roimhe. Chaidh aon bhuidheann a thoirt seachad an uairsin ad libitum ruigsinneachd air daithead chow (Chow) airson 7 latha san t-seachdain (Chow / Chow, buidheann smachd an sgrùdaidh seo) fhad ‘s a fhuair dàrna buidheann cothrom an-asgaidh air chow airson 5 làithean san t-seachdain, air a leantainn le 2 làithean de ad libitum gu daithead làn palatable, blas seoclaid, àrd-sucrose (Palatable; Chow / Palatable buidheann). Chaidh na deuchainnean giùlain uile a dhèanamh ann am radain a chaidh a rothaireachd airson daithead airson co-dhiù 7 seachdainean. B ’e an daithead‘ chow ’a’ chow stèidhichte air arbhar a chaidh a mhìneachadh gu h-àrd bho Harlan, ach bha an daithead palatable làn daithead, le blas seoclaid, àrd-sucrose (50% kcal), stèidhichte air AIN-76A a tha coimeasach ann am macronutrient cuibhreannan agus dùmhlachd lùth don daithead chow (foirmle le blas seoclaid 5TUL: 66.7% kcal gualaisg, 12.7% geir, 20.6% pròtain, lùth metabolizable 344 kcal / 100 g (Test Test, Richmond, IN, USA) air a dhealbhadh mar mionaideachd 45 mg cruinneagan bìdh gus an roghainn as fheàrr leotha a mheudachadh). Airson giorrachadh, thathas a ’toirt iomradh air a’ chiad 5 latha (chow a-mhàin) agus an 2 latha mu dheireadh (chow no palatable a rèir a ’bhuidheann deuchainneach) gach seachdain anns a h-uile deuchainn mar C agus P ìrean. Chaidh daithead palatable a thoirt seachad ann an GPF20 'J'-feeders (Ancare, Bellmore, NY, USA). Cha robh daitheadan a-riamh rim faighinn aig an aon àm.

Deuchainnean toirt a-steach biadh

Bhiodh radain a ’faighinn biadh ro-chuideam anns na cèidsichean dachaigh aca aig toiseach a’ chearcall dhorcha. Chaidh leigheasan a thoirt seachad ann am radain a chaidh a rothaireachd airson daithead co-dhiù seachdainean 7 nuair a dh ’ùraicheadh iad cothrom air an daithead palatable (C→P ìre), no ri daithead chow (P→C ìre). Chaidh R121919 a microinfused gu dà-thaobhach taobh a-staigh an CeA, am BlA, no am BNST (0, 0.5, agus 1.5 μg / taobh, 0.5 μl / taobh, ùine ro-làimhseachaidh 30-min) a ’cleachdadh dealbhadh ceàrnagach Laidinn air thuaiream taobh a-staigh.

Deuchainn bogsa aotrom-dorcha

Chaidh radain a dhearbhadh airson 10 min ann am bogsa ceart-cheàrnach aotrom-dorcha (50 × 100 × 35 cm) anns an robh an roinn solais aversive (50 × 70 × 35 cm) air a shoilleireachadh le solas lux 60. Bha còmhdach neo-shoilleir agus ∼50 lux de sholas air an taobh dhorcha (30 × 35 × 0 cm). Bha an dà roinn ceangailte le doras fosgailte, a leig leis na cuspairean gluasad gu saor eadar na dhà. Chaidh deuchainnean a dhèanamh an dèidh co-dhiù seachdainean 7 de atharrachadh daithead, 5 - 9 h às deidh an atharrachadh bhon daithead palatable gu daithead chow (P→C ìre); tha an ùine seo a ’dèanamh cinnteach gu bheil giùlan coltach ri dragh air adhbhrachadh le bhith a’ tarraing a-mach à biadh blasda a-steach Chow / Palatable radain (Cottone et al, 2009a, 2009b). Chaidh radain a chumail anns an t-seòmar sàmhach, dorcha airson co-dhiù 2 h mus dèanadh iad deuchainn. Bha fuaim geal an làthair aig àm cuairteachaidh agus deuchainn. Air latha an deuchainn, chaidh radain a thoirt a-steach gu dà-thaobhach le R121919 taobh a-staigh an CeA, am BlA, no am BNST (0, 0.5, agus 1.5 μg / taobh, 0.5 μl / taobh) 30 min mus deach an cur a-steach don roinn dhorcha mu choinneimh an dorais agus chaidh giùlan a chlàradh airson bhidio airson scòradh nas fhaide air adhart. Chaidh leigheasan a thoirt seachad a ’cleachdadh dealbhadh eadar-chuspair. Chaidh an ùine a chaidh a chaitheamh anns an roinn fhosgailte a thomhas mar chlàr-amais de ghiùlan coltach ri dragh. Chaidh an t-inneal a ghlanadh le uisge agus a thiormachadh às deidh gach cuspair.

Lèigh-lann intracranial, Modh Microinfusion, agus Suidheachadh Cannula

Lèigh-lann intracranial

Chaidh radain a chuir a-steach gu stereotaxically le cannulas dà-thaobhach, intracranial mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (Cottone et al, 2007; Iemolo et al, 2012; Sabino et al, 2007). Goirid, chaidh stàilinn gun staoin, cannulas treòrachaidh (24 trast-thomhas, Plastics One, Roanoke, VA, na SA) ìsleachadh dà-thaobhach 2.0 mm os cionn an CeA, am BlA, no am BNST. Chaidh ceithir sgriothan seudair stàilinn gun cheangal a cheangal ri claigeann an radan timcheall air an cannula. Chaidh roisinn làn fhiaclan ath-nuadhachadh (Henry Schein, Melville, NY, na SA) agus saimeant acrylic a chuir an sàs, a ’cruthachadh seòl-coise gu daingeann air acair a’ chanàil. B ’e na co-chomharran cannula bho bregma a chaidh a chleachdadh airson an CeA: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (bhon chlaigeann) leis a’ bhàr incisor air a shuidheachadh 5.0 mm os cionn na loidhne eadar-roinneil, a rèir an atlas de Pellegrino (1979). B ’e na co-chomharran cannula a chaidh a chleachdadh airson an BlA: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (bhon chlaigeann) le claigeann còmhnard, a rèir Paxinos and Watson (2007). B ’iad na co-chomharran cannula a chaidh a chleachdadh airson an BNST: AP −0.6, ML ± 3.5, DV −4.8 (bhon chlaigeann) le claigeann còmhnard agus ceàrn teilt 14 °. Bha stylet dummy stàilinn stainless (Plastics One) a ’cumail suas truailleadh a’ chanàil. Às deidh obair-lannsa, fhuair na radain ùine ath-bheothachaidh 7-latha, nuair a bha iad air an làimhseachadh gach latha.

Modh-obrach microinfusion

Chaidh drogaichean a meanbh-chleachdadh ann an eanchainn radain mar a chaidh a mhìneachadh roimhe (Blasio et al, 2013b; Dore et al, 2013). Airson microinfusion intracranial, chaidh an stoidhle dummy a thoirt a-mach às an cannula treòrachaidh, agus chaidh in-stealladh stàilinn stainless 31-thomhas a chuir a-mach 2 mm nas fhaide na bàrr an cannula treòrachaidh; chaidh an in-stealladh a cheangal tro phìoban PE 20 ri microsyringe Hamilton (Hamilton, Reno, Nevada) air a stiùireadh le pumpa microinfusion ioma-syringe (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, USA). Chaidh microinfusions a dhèanamh ann an tomhas 0.5 μl air an lìbhrigeadh thairis air 2 min; chaidh in-stealladh fhàgail airson 1 mionaid a bharrachd gus an sruth-cùil a lughdachadh.

Àite cannula

Chaidh àite Cannula a dhearbhadh aig deireadh gach deuchainn (faic Figear 1). Chaidh cuspairean anesthetized (isoflurane, 2 - 3% ann an ogsaidean) agus air an gluasad gu transcardial le fuar-deigh 4% paraformaldehyde (PFA) ann an uisge (pH 7.4) agus microinfused le Cresyl violet (0.5 μl / taobh). Chaidh brains an uairsin a shocrachadh thar oidhche ann an 4% PFA agus air an cothromachadh ann an sucrose 30% ann am PFA. Chaidh earrannan coronal de 40 μm a chruinneachadh le bhith a ’cleachdadh cryostat (Thermo Scientific HM-525) agus chaidh àiteachan a dhearbhadh fo mhiocroscop. Chaidh dà fhichead cuspair (14 airson CeA, 16 airson BlA, agus 10 airson BNST) a thoirmeasg bho sgrùdadh air sgàth suidheachadh ceàrr cannula. Chaidh dàta bho àiteachan ceàrr a sgrùdadh gus cuideachadh le bhith a ’mìneachadh sònrachas buaidhean làraich.

Figear 1

Dealbh de sliseagan eanchainn radain coronal. Tha dotagan a ’riochdachadh na làraich stealladh ann am meadhan niuclas an amygdala (CeA) (a), niuclas basolateral an amygdala (BlA) (b) agus niuclas leabaidh an stria terminalis (BNST) (c) a tha air a ghabhail a-steach san sgrùdadh dàta. ...

CRF Immunohistochemistry

Modh giùlain, perfusions, agus immunohistochemistry

Rats (nChaidh = 22) a rothaireachd air daithead airson seachdainean 7, anesthetized, agus 2 - 4 h perfused an dèidh a bhith air a thionndadh an dàrna cuid bhon daithead palatable gu daithead chow (P→C ìre) no bho dhaithead chow chun daithead palatable (C→P ìre). Chaidh radain a thoirt anesthetized agus an uairsin air an gluasad gu transcardial le saline + 2% (w / v) sodium nitrite (pH = 7.4) an toiseach, agus le 4% paraformaldehyde buffered ann am Borax (pH = 9.5) an ath rud. Chaidh radain an uairsin a dhì-chomasachadh agus na h-eanchainnean a chruinneachadh sa bhad, an cur ann an ∼20 ml de 4% PFA, agus a stòradh ann an sucrose 30% ann am fuasgladh 4% PFA aig 4 ° C gus an t-saturation.

Airson fradharc CRF, chaidh brains a ghearradh ann an earrannan coronal 40 μm a ’cleachdadh cryostat agus an uairsin air an stòradh ann an cryoprotectant aig −20 ° C. Chaidh a h-uile siathamh earrann (240 μm bho chèile) den CeA, BlA, agus BNST gu lèir a thaghadh ann an dòigh eagarach air thuaiream agus air an giullachd airson immunocytochemistry. Chaidh earrannan a bha a ’seòladh gu saor a nighe ann an saline bufair potasium fosfáit (KPBS). Às deidh a ’chiad nighe, fhuair earrannan guir ann am fuasgladh KPBS 0.3% hydrogen peroxide airson 30 min gus casg a chuir air peroxidases endogenous. Chaidh earrannan an uairsin a nighe a-rithist agus an cur ann am fuasgladh bacaidh (3% serum gobhar àbhaisteach, 0.25% Triton X100, agus 0.1% serum albumin bó) airson 2 h. Chaidh earrannan an uairsin a chuir a-steach do antibody bun-sgoile (dilution 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Bith-theicneòlas Santa Cruz) ann am fuasgladh bacadh agus air a bhrosnachadh airson 72 h aig 4 ° C. Às deidh nighe a bharrachd, chaidh earrannan a thoirt a-steach do fhrith-fhilleadh àrd-sgoile (caolachadh 1: 1000, deuchainn-lannan biotinylated an aghaidh coineanach (BA-1000), Burlingame, California) ann am fuasgladh bacadh airson 2 h aig teòthachd an t-seòmair. Chaidh earrannan a nighe agus an uairsin a thoirt a-steach ann am fuasgladh ABC avidin-biotin horseradish peroxidase (Vector Laboratories) ann am fuasgladh bacaidh airson 1 h. Chaidh earrannan an uairsin a thoirt a-steach a ’cleachdadh pasgan substrate diaminobenzidine (Vector Laboratories) a rèir stiùireadh an neach-dèanamh agus aon uair‘ s gu robh an ath-bhualadh deiseil chaidh earrannan a rinsigeadh ann an KPBS, gan cur suas air sleamhnagan agus leigeil leotha tiormachadh thar oidhche. An ath latha, chaidh sleamhnagan a dhì-ghalarachadh le bhith a ’cleachdadh cruinneachaidhean deoch làidir ceumnaichte agus air an còmhdach le bhith a’ cleachdadh DPX mountant (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Meudachadh cuirp cealla CRF +

Chaidh tomhas de bhuidhnean cealla CRF + a dhèanamh a rèir an dòigh stereology neo-phàirteach. Chaidh an t-sreath de earrannan a sgrùdadh airson gach baidse staining. Chaidh earrannan a sgrùdadh le bhith a ’cleachdadh miocroscop Olympus (Center Valley, PA, na SA) BX-51 uidheamaichte le camara bhidio beò Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Canada), ìre motair trì-axis MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, USA), agus stèisean-obrach coimpiutair pearsanta. Chaidh a h-uile cunntas cealla a dhèanamh air sleamhnagan le còd le neach-sgrùdaidh dall air na suidheachaidhean làimhseachaidh. Chaidh a h-uile sgìre a mhìneachadh cha mhòr air ìomhaigh dhidseatach gach roinn a chaidh a thaghadh air thuaiream a ’cleachdadh modal sruth-obrach fractionator optigeach de bhathar-bog Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, USA). Chaidh a h-uile cruth a tharraing aig àrdachadh ìosal a ’cleachdadh amas Olympus PlanApo N 2X le fosgladh àireamhach 0.08 agus air a chunntadh le bhith a’ cleachdadh amas Olympus UPlanFL N 40X le fosgladh àireamhach 0.75. Chaidh frèam a ’ghriod agus am frèam cunntais a shuidheachadh gu 275 × 160 μm. Chaidh sòn dìon de 2 μm agus àirde dissector de 20 μm a chleachdadh. Chaidh na h-earrannan reòta a ghearradh an toiseach aig tighead ainmichte de 40 μm. Bidh dìonachd agus cur suas a ’leantainn gu tighead earrann atharraichte, a chaidh a thomhas aig gach làrach cunntaidh. Chaidh tiugh earrann cuibheasach a thomhas leis a ’bhathar-bog agus a chleachdadh gus tuairmse a dhèanamh air meud iomlan na roinne sampaill agus an àireamh iomlan de cheallan CRF +.

Mion-sgrùdadh staitistigeil

Oileanach t-steach chaidh a chleachdadh gus factaran le dà ìre a sgrùdadh. Chaidh ANOVAn a dhèanamh gus sgrùdadh a dhèanamh air factaran le barrachd air dà ìre. Às deidh buaidh omnibus cudromach ANOVAs (p<0.05), Fisher's LSD post hoc chaidh deuchainnean coimeas a chleachdadh. Chaidh deuchainn Dunnett a chleachdadh gus faighinn a-mach an robh R121919 a ’gabhail a-steach àbhaisteach Chow / Palatable radain gu làimhseachadh carbaid Chow / Chow-fed ìrean. B ’e na bathar-bog / pasganan grafaigeach a chaidh a chleachdadh Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Bathar-bog Systat, Chicago, IL, na SA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, na SA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, na SA), agus PASW Staitistig 18.0 (SPSS, Chicago, IL, USA).

TORAIDHEAN

Buaidhean Microinfusion de R121919 a-steach don CeA

Gabhail a-steach cus de bhiadh palatable

Gus faighinn a-mach a bheil CRF₁ Bidh gabhadairean anns an CeA a ’tomhas cus de bhiadh blasta ann am radain le daithead, bidh sinn a’ meanbh-làrach gu sònraichte an CRF roghnach₁ antagonist gabhadair R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais e biadh a-steach aig toiseach na P ìre. Mar a chithear ann an Figear 2a, toirt a-steach biadh a ghabhas ithe le biadh Chow / Palatable bha radain dà-fhillte nas àirde na smachd air biadhadh chow Chow / Chow radain. Antagonism de CeA CRF₁ chuir gabhadairean stad air an ithe cus seo de bhiadh palatable a-steach Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air biadh a-steach do radain smachd (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc sheall coimeas gu robh an dòs as àirde de R121919 (1.5 μg / taobh) a ’lughdachadh gu mòr an ìre de bhiadh a ghabhas ithe an coimeas ri carbad a-steach Chow / Palatable radain. Gabhail a-steach Chow / Palatable cha robh radain a bha a ’leantainn meanbh-sgaoileadh an dòs 1.5 μg / taobh gu math eadar-dhealaichte bho bhith a’ faighinn a-steach làimhseachadh carbaid Chow / Chow radain. A ’dearbhadh sònrachas na buaidhean airson CRF₁ gabhadairean anns an CeA, cha deach buaidh sam bith fhaicinn ann an toirt a-steach biadh de chuspairean le cannulae mì-chothromach (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Figear 2

Buaidhean microinfusion den fhactar roghnach corticotropin-release-1 (CRF₁) antagonist gabhadair R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / taobh) ann am meadhan niùclas an amygdala (CeA) air cus ithe de bhiadh palatable, hypophagia de cunbhalach ...

Hypophagia den daithead chow cunbhalach

Gus faighinn a-mach a bheil CRF₁ Bidh gabhadairean anns an CeA a ’dèanamh eadar-mheadhanachadh air hypophagia daithead chow ann am radain rothaireachd daithead, chuir sinn microinfused R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn biadh a-steach aig toiseach na C ìre. Mar a chithear ann an Figear 2b, toirt a-steach làimhseachadh carbaid Chow / Palatable B ’e radain ∼1 / 3 den in-ghabhail de làimhseachadh carbaid Chow / Chow radain (hypophagia). Cha tug làimhseachadh R121919 buaidh air hypophagia a ’chow cunbhalach a-steach Chow / Palatable radain (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). A ’dearbhadh nan toraidhean a gheibhear ann an P ìre, cha tug microinfusion R121919 anns an CeA buaidh air smachd chow Chow / Chow radain (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Giùlan coltach ri dragh air a tharraing air ais

Gus faighinn a-mach a bheil CeA CRF₁ Bidh gabhadairean a ’toirt buaidh air an t-suidheachadh tòcail àicheil a tha air adhbhrachadh le bhith a’ toirt air falbh am biadh palatable ann am radain rothaichte, chuir sinn làrach microinfused gu sònraichte R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn giùlan coltach ri dragh a ’cleachdadh an deuchainn bogsa dorcha-dorcha 5 h a-steach don C ìre. Mar a chithear ann an Figear 2c, sheall radain a chaidh an toirt a-mach gu cruaidh bho bhith a ’faighinn cothrom eadar-amail air an daithead a bha gu math tlachdmhor lùghdachadh mòr san ùine a chaidh a chaitheamh ann an roinn aotrom a’ bhogsa aotrom-dorcha. Chuir Microinfusion de 1.5 μg / taobh de R121919 anns an CeA, an dòs a lughdaich gu h-èifeachdach cus de bhiadh palatable, a chuir casg air giùlan coltach ri dragh le bhith a ’meudachadh na h-ùine a chaitheadh ann an raon aotrom a’ bhogsa a-steach Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air a’ ghiùlan a-steach Chow / Chow radain (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). A ’dearbhadh sònrachas na buaidhean airson CRF₁ gabhadairean anns an CeA, cha deach buaidh sam bith fhaicinn ann an toirt a-steach biadh de chuspairean le cannulae misplaced (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Buaidhean Microinfusion de R121919 a-steach don BlA

Gabhail a-steach cus de bhiadh palatable

Gus faighinn a-mach a bheil BlA CRF₁ Bidh gabhadairean a ’tomhas cus ithe de bhiadh palatable ann am radain rothaireachd daithead, chuir sinn làrach microinfused gu sònraichte R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn biadh a-steach aig toiseach na P ìre. Eu-coltach ris na chaidh a choimhead às deidh rianachd R1219191 a-steach don CeA, mar a chithear ann an Figear 3a microinfusion dà-thaobhach den CRF roghnach₁ cha tug antagonist gabhadair a-steach don BlA buaidh mhòr air toirt a-steach biadh palatable a-steach Chow / Palatable radain (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). San aon dòigh, caitheamh chow cunbhalach ann an Chow / Chow cha deach buaidh a thoirt air radain le R121919 microinfusion (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Figear 3

Buaidhean microinfusion den fhactar roghnach corticotropin-release-1 (CRF₁) antagonist gabhadair R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / taobh) ann an niuclas basolateral an amygdala (BlA) air cus ithe de bhiadh palatable, hypophagia de cunbhalach ...

Hypophagia den daithead chow cunbhalach

Gus faighinn a-mach a bheil CRF₁ Bidh gabhadairean anns a ’BlA a’ dèanamh eadar-mheadhanachadh air hypophagia chow ann am radain rothaichte, chuir sinn R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn biadh a-steach aig toiseach na C ìre. Mar a chithear ann an Figear 3b, chunnacas àrdachadh mòr ann an in-ghabhail chow cunbhalach às deidh meanbh-sgaoileadh an CRF₁ antagonist gabhadair ann am BlA na Chow / Palatable radain (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Gu dearbh, an dòs as àirde (1.5 μg) de R121919 microinfused anns a ’BlA rè C ìre àrdachadh mòr air caitheamh daithead cunbhalach chow le 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) sa cheud an coimeas ri làimhseachadh carbaid Chow / Chow radain. Lùghdaich R121919, ach cha do chuir e bacadh gu tur, an hypophagia a chaidh a tharraing air ais aig an dòs as àirde a chaidh a thoirt a-steach. A ’dearbhadh an dàta a fhuaireadh a-steach P ìre, cha tug R121919 microinfusion buaidh air in-ghabhail cunbhalach chow a-steach Chow / Chow radain (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). A ’dearbhadh sònrachas na buaidhean airson CRF₁ gabhadairean anns a ’BlA, cha robhas a’ faicinn buaidh sam bith ann an toirt a-steach biadh de chuspairean le cannulae mì-chothromach (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Giùlan coltach ri dragh air a tharraing air ais

Gus faighinn a-mach a bheil BlA CRF₁ Bidh gabhadairean a ’toirt buaidh air an staid tòcail àicheil a tha air adhbhrachadh le bhith a’ toirt air falbh am biadh palatable ann am radain rothaichte, chuir sinn làrach microinfused gu sònraichte R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn giùlan coltach ri dragh 5 h a-steach don C ìre. Mar a chithear ann an Figear 3c, biadh palatable air a tharraing air ais Chow / Palatable chaith radain nas lugha de ùine san roinn solais an coimeas ri Chow / Chow radain (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). Cha tug R121919, microinfused a-steach don BlA, buaidh mhòr air an ùine a chaidh a chaitheamh anns an raon solais (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

Buaidhean Microinfusion de R121919 a-steach don BNST

Gabhail a-steach cus de bhiadh palatable

Gus faighinn a-mach a bheil BNST CRF₁ Bidh gabhadairean a ’tomhas cus ithe de bhiadh palatable ann am radain rothaireachd daithead, bha R121919 air an làrach gu sònraichte meanbh-chuimseachadh a-steach don raon eanchainn seo agus chaidh tomhas bìdh a thomhas aig toiseach an P ìre. Mar a chithear ann an Figear 4b, microinfusion dà-thaobhach den CRF roghnach₁ cha tug antagonist gabhadair a-steach don BNST buaidh mhòr air toirt a-steach biadh palatable a-steach Chow / Palatable radain (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). San aon dòigh, caitheamh chow cunbhalach ann an Chow / Chow cha deach buaidh a thoirt air radain le R121919 microinfusion (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Figear 4

Buaidhean microinfusion den fhactar roghnach corticotropin-release-1 (CRF₁) antagonist gabhadair R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / taobh) ann an niuclas leabaidh an stria terminalis (BNST) air cus ithe de bhiadh palatable, hypophagia de ...

Hypophagia den daithead chow cunbhalach

Gus faighinn a-mach a bheil BNST CRF₁ Bidh gabhadairean a ’tomhas hypophagia daithead chow ann am radain rothaichte, chuir sinn R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn biadh a-steach aig toiseach na C ìre. Mar a chithear ann an Figear 4a, Cha tug R121919 microinfusion buaidh air in-ghabhail chow cunbhalach a-steach Chow / Chow radain (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). San aon dòigh, cha tug làimhseachadh R121919 buaidh air hypophagia a ’chow cunbhalach a-steach Chow / Palatable radain (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Giùlan coltach ri dragh air a tharraing air ais

Gus faighinn a-mach a bheil BNST CRF₁ Bidh gabhadairean a ’toirt buaidh air an staid tòcail àicheil a tha air adhbhrachadh le bhith a’ toirt air falbh am biadh palatable ann am radain rothaichte, chuir sinn làrach microinfused gu sònraichte R121919 a-steach don raon eanchainn seo agus thomhais sinn giùlan coltach ri dragh 5 h às deidh an atharrachadh bho P→C ìre. Mar a chithear ann an Figear 4c, biadh palatable air a tharraing air ais Chow / Palatable chaith radain nas lugha de ùine san roinn solais an coimeas ri smachd Chow / Chow radain (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). Cha tug R121919, microinfused dà-thaobhach aig an dòs de 1.5 μg / taobh a-steach don BNST buaidh mhòr air an ùine a chaidh a chaitheamh anns an raon solais (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF Immunohistochemistry

Figear 5 a ’nochdadh micrographs riochdachail de cheallan CRF + anns an CeA, BlA, agus BNST a-steach Chow / Chow agus Chow / Palatable radain, a ’leantainn an ad libitum modh-obrach atharrachaidh daithead palatable. Sheall sgrùdadh air immunoreactivity CRF den CeA gu robh eadar-dhealachadh mòr eadar Chow / Palatable agus Chow / Chow radain rè an dà chuid C agus a ' P ìre (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Cha deach eadar-dhealachadh cudromach gu staitistigeil am measg bhuidhnean a choimhead ann am BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) no BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Figear 5

Micrographs riochdachail de immunoreactivity bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin (CRF) ann am meadhan niuclas an amygdala (CeA) (a - d), niuclas basolateral an amygdala (BlA) (e - h), agus niuclas leabaidh an stria terminalis (BNST ) (i - l) ...

SGEULACHDAN

Chaidh an sgrùdadh seo a dhealbhadh gus làrach na h-eanchainn a chomharrachadh a tha an urra ri bhith a ’toirt a-steach cus biadh a tha gu math palatable ann am radain fo regimen alternation daithead. Tha na co-dhùnaidhean againn a ’dearbhadh prìomh dhreuchd don CeA ann a bhith a’ meadhanachadh cus ithe de bhiadh a tha gu math blasta. A bharrachd air an sin, tha sinn a ’sealltainn gu bheil àite aig siostam CRF anns a’ BlA, gu eadar-dhealaichte bhon CeA, anns a ’phròiseas dì-luachaidh a bhios a’ tachairt nuair a thèid lughdachadh ann am meud duais bìdh.

Tha sinn air sealltainn roimhe seo gu bheil cuairtean cunbhalach de chothrom air agus tarraing air ais bho daithead siùcair, a tha gu math palatable a ’leantainn gu cus ithe de bhiadh palatable a bharrachd air hypophagia gruamach a tha an urra ri tarraing air ais den daithead chow cunbhalach agus giùlan coltach ri dragh (Blasio et al, 2013a; Cottone et al, 2009a, 2009b). Thathas an dùil gu bheil cus ithe air a choimhead an seo air a stiùireadh leis an t-suidheachadh tòcail àicheil a tha air adhbhrachadh le tachartasan cunbhalach de tharraing air ais bho bhiadhan fìor palatable tro CRF-CRF extrahypothalamic₁ inneal meadhain siostam gabhadain, a tha coltach ris a ’phròiseas coltach ri‘ kindling ’mar bhunait air eas-òrdugh addictive (Breese et al, 2005; Cottone et al, 2009a; Koob, 2008; Parylak et al, 2011).

Tha toraidhean an sgrùdaidh seo a ’sealltainn gu bheil CRF₁ bidh gabhadairean an CeA agus BlA a ’dèanamh eadar-dhealachadh eadar-dhealaichte air atharrachaidhean beathachaidh agus giùlan coltach ri iomagain radain a tha air daithead le daithead. Rianachd an CRF roghnach₁ Chuir antagonist gabhadain taobh a-staigh an CeA bacadh air an dà chuid cus ithe agus giùlan coltach ri dragh a-staigh Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air hypophagia an daithead cunbhalach neo-leasaichte. Gu h-inntinneach, thug rianachd R121919 a-steach don BlA, lughdachadh air hypophagia an daithead chow nach robh cho blasda (ie, barrachd in-ghabhail chow cunbhalach) ann an Chow / Palatable radain, gun a bhith a ’toirt buaidh air cus ithe no giùlan coltach ri dragh. Nuair a chaidh microinfused anns a ’BNST, cha tug R121919 buaidh air gin de na caochladairean a chaidh a thomhas Chow / Palatable radain (cus ithe den daithead a tha gu math tlachdmhor, gabhail a-steach daithead cunbhalach chow agus giùlan draghail a tha coltach ri tarraing air ais). Bha na buaidhean cungaidh-leigheis a chaidh a choimhead roghnach airson Chow / Palatable radain leis gu bheil R121919, meanbh-chleachdadh taobh a-staigh CeA, BlA, no BNST de Chow / Chow smachd air radain, gun èifeachd. Mar sin, an CRF - CRF₁ tha coltas gu bheil siostam gabhadain an CeA agus BlA a ’toirt buaidh eadar-dhealaichte air na toraidhean giùlain a thig bho rothaireachd daithead palatable cronach. Air an làimh eile, an CRF - CRF₁ chan eil e coltach gu bheil siostam gabhadain an BNST an sàs anns na h-atharrachaidhean giùlain a tha air an adhbhrachadh le atharrachadh daithead palatable.

Bha na toraidhean giùlain is cungaidh-leigheis againn a ’faighinn taic bhon amharc gu robh immunoreactivity CRF taobh a-staigh CeA de Chow / Palatable chaidh radain àrdachadh gu mòr an coimeas ri Chow / Chow smachd a chumail air radain, nuair a thèid iad a-mach à agus às deidh ruigsinneachd ath-nuadhaichte don daithead a tha gu math tlachdmhor (Cottone et al, 2009a). Gu h-inntinneach, cha deach eadar-dhealachadh mòr fhaicinn ann an immunoreactivity CRF eadar buidhnean taobh a-staigh BlA no BNST. Barrachd immunoreactivity CRF a chaidh fhaicinn ann an CeA de Chow / Palatable tha radain co-chòrdail ris na fhuair sinn a-mach roimhe gu bheil tarraing air ais bhon daithead palatable co-cheangailte ri sgaoileadh nas motha de CRF anns an CeA (Cottone et al, 2009a). Ach, an aghaidh na chaidh a shealltainn roimhe, cha do dh ’adhbhraich ùrachadh ruigsinneachd air an daithead palatable tilleadh faireachdainn CRF anns an CeA gus smachd a chumail air ìrean. Is dòcha gu bheil an eadar-dhealachadh eadar na toraidhean a fhuaireadh an seo agus an sgrùdadh roimhe seo co-cheangailte ris a ’phuing ùine eadar-dhealaichte de chruinneachadh an eanchainn, agus an rùn anatomical eadar-dhealaichte de na dòighean a chaidh a chleachdadh gus abairt CRF a thomhas. Ach a dh ’aindeoin sin, tha an àrdachadh a chaidh fhaicinn ann an abairt CRF anns an CeA aig àm tarraing a-mach agus às deidh ruigsinneachd ath-nuadhaichte air an daithead palatable co-chòrdail ri buaidhean roghnach bacadh air giùlan coltach ri dragh (aig àm tarraing air ais) agus cus ithe (ruigsinneachd ath-nuadhaichte) ann an Chow / Palatable radain. Mar sin, faodar an neo-chunbhalachd a tha coltach eadar an dà sgrùdadh a mhìneachadh còmhla mar a leanas: aig àm tarraing a-mach bidhe palatable, àrdachadh abairt CRF anns an CeA de radain rothaireachd daithead an coimeas ri smachdan agus tha e an urra ri droch bhuaidh a nochdadh. Tha an abairt CeA CRF fhathast air atharrachadh suas gu na ciad uairean de ruigsinneachd fìor phailt, a ’brosnachadh cus ithe. Às deidh cus caitheamh bìdh blasta, ge-tà, bidh CRF a ’tilleadh air ais gu ìrean smachd (Cottone et al, 2009a).

Tha na toraidhean giùlain, cungaidh-leigheis agus moileciuil air an sealltainn a ’toirt taic don bheachd gu bheil an CRF - CRF₁ tha àite cudromach aig an t-siostam gabhadain anns an CeA ann a bhith a ’meadhanachadh an staid droch bhuaidh agus cus de bhiadh blasta ann am radain rothaireachd daithead, coltach ris na chaidh a dhearbhadh gu farsaing airson eisimeileachd deoch làidir is drogaichean (Koob, 2010). Gu dearbh, tha radain a tha an urra ri ethanol a ’taisbeanadh barrachd sgaoileadh extracellular de CRF anns an CeA aig àm tarraing a-mach agus tha rianachd antagonist gabhadair CRF a-steach don CeA comasach air fèin-rianachd ethanol àrdachadh aig àm tarraing a-mach (Func et al, 2006; Merlo Pich et al, 1995). Gu h-iongantach, tha beathaichean a tha an urra ri codlaid a ’nochdadh barrachd faireachdainn CRF anns an CeA aig àm tarraing a-mach (Cèitean et al, 2003) agus bacadh air gabhadairean CRF anns an CeA, ach chan e am BNST, a ’lughdachadh soidhnichean giùlain de tharraing air ais (Heinrichs et al, 1995; McNally agus Akil, 2002). Prìomh dhreuchd airson CRF - CRF₁ Tha siostam anns an CeA cuideachd air a nochdadh ann an eisimeileachd nicotine. Gu dearbh, tha tarraing air ais mecamylamine-precipitated nicotine co-cheangailte ri mòr-tharraing den CRF - CRF₁ siostam gabhadain ann an CeA (Seòras et al, 2007), agus taobh a-staigh CeA, ach chan e taobh a-staigh BlA, microinfusion de CRF₁ bidh antagonist gabhadair a ’lughdachadh na h-àrdachaidhean a tha an urra ri tarraing air ais nicotine ann an stairsneach duais eanchainn (Bruijnzeel et al, 2012). Ann am radain a tha an urra ri cannabinoid, tha tarraing air ais co-cheangailte ri àrdachadh comharraichte ann an dùmhlachd CRF extracellular anns an CeA (Rodriguez de Fonseca et al, 1997). Gu h-iomlan, tha an fhianais seo a ’toirt taic làidir don bheachd-smuain a tha an CRF - CRF₁ Tha an siostam gabhadain anns an CeA na phrìomh eadar-mheadhanair de dhroch bhuaidh àicheil a tha air a tharraing air ais, còmhla ri cus dhrogaichean is deoch làidir rè eisimeileachd. Bidh na co-dhùnaidhean againn a ’leudachadh an eòlais seo gu bhith ag ithe cus de bhiadh a tha gu math tlachdmhor, a’ moladh gum bi neuroadaptations analogous a ’tachairt.

Tha co-dhùnaidhean an sgrùdaidh seo a ’sealltainn gu bheil an hypophagia a tha an urra ri tarraing às biadh a tha an urra ri tarraing às an daithead chow nach eil cho blasta air a lughdachadh le microinfusion taobh a-staigh BlA den CRF roghnach₁ antagonist gabhadain, ach ged nach tug làimhseachadh dhrogaichean taobh a-staigh BlA buaidh air cus ithe agus giùlan coltach ri iomagain. Com-pàirt eadar-dhealaichte bhon BlA CRF - CRF₁ siostam gabhadain ann am builean rothaireachd daithead a ’moladh gum faodadh hypophagia de chow a bhith a’ riochdachadh pròiseas giùlain a tha neo-eisimeileach bho ghiùlan coltach ri dragh. An àite sin, tha na co-dhùnaidhean sin co-chòrdail ris a ’bheachd gu bheil am BlA a’ meadhanachadh taobhan mothachaidh agus brosnachaidh de thachartasan brosnachail brosnachail. Gu dearbh, tha mòran fianais ann gu bheil am BlA air leth cudromach ann a bhith a ’meadhanachadh phròiseasan luachaidh agus freagairtean dùbhlanach a thaobh lughdachadh dhuaisean (ie, buaidh Crespi, iomsgaradh àicheil leantainneach, ìsleachadh duais, agus mar sin air adhart; Hatfield et al, 1996; Salinas et al, 1996; Wellman et al, 2005), agus, mar sin, dh ’fhaodadh gum bi an hypophagia a thig mar thoradh air an atharrachadh bhon daithead a tha gu math blasta gu daithead chow nach eil cho blasda a’ riochdachadh pròiseas lughdachadh hedonic, seach inneal a tha an urra ri homeostasis lùth (ie, neo-eisimeileach bho in-ghabhail lùth roimhe no buannachd cuideam bodhaig. ; Cottone et al, 2008, 2009b). Bacadh de CRF₁ Mar sin, thathas a ’gabhail beachd air gabhadairean taobh a-staigh BlA gus hypophagia chow a lughdachadh (ie, gus àrdachadh a thoirt air chow) le bhith a’ lughdachadh a ’phròiseas luachaidh a bhios a’ tachairt nuair a dh ’atharraicheas tu bhon bhiadh a tha gu math blasta gu chow nach eil cho blasda. Co-cheangailte ris a ’cho-theacsa seo cuideachd tha an neo-chunbhalachd a tha coltach eadar na toraidhean molecular agus giùlan / pharmacological a chaidh fhaighinn anns a’ BlA. Ged a tha an CRF₁ b ’urrainn do antagonist gabhadain meud an hypophagia chow a lughdachadh nuair a chaidh a thoirt a-steach don BlA, cha deach eadar-dhealachadh mòr sam bith fhaicinn ann an immunoreactivity CRF san raon seo nuair a bhathar a’ dèanamh coimeas eadar smachd agus daithead radain baidhsagal. Faodar an eadar-dhealachadh follaiseach seo a mhìneachadh le bhith a ’beachdachadh gu bheil pròiseasan luachaidh BlA-eisimeil dhuaisean eile a’ tachairt gu corporra agus gu bheil brìgh mean-fhàs cudromach aca ann an taghadh bhiadhan a bheir an duais / luach lùtha as àirde (Moireach et al, 2011). Mar sin, faodar a ràdh nach fheum meadhanachadh nam pròiseasan sin anns a ’BlA neuroadaptations san t-siostam CRF (coltach ris an fheadhainn a chaidh a choimhead sa CeA). A ’toirt taic don bheachd-bharail seo, ged a dh’ fheumas cus ithe rothaireachd baidhsagal daithead a leasachadh, bidh hypophagia den chow eile nach eil cho measail a ’tachairt às deidh a’ chiad atharrachadh bhon daithead a tha gu math palatable air ais chun chow cunbhalach (Cottone et al, 2008). A bharrachd air an sin, tha e cudromach a dhaingneachadh, stèidhichte air na toraidhean a fhuaireadh le bhith a ’stealladh an antagonist gabhadair CRF1 a-steach don BlA agus CeA, an CRF₁ tha coltas gu bheil hypophagia a tha an urra ri gabhadair a chithear an seo mar phròiseas giùlan eadar-dhealaichte seach an anhedonia a chithear ann an toirt air falbh dhrogaichean. Ach a dh ’aindeoin sin, thathas air dearbhadh gu bheil tarraing air ais bho ruigsinneachd eadar-amail air biadh palatable a’ brosnachadh freagairtean hypohedonic eile leithid barrachd gluasad anns an deuchainn snàmh èignichte agus lughdaich e freagairt ann an clàr co-mheas adhartach de dhaingneachadh (Cottone et al, 2008; Iemolo et al, 2012).

Bu chòir a thoirt fa-near, ged-tà Chow / Palatable tha radain air a bhith a ’rothaireachd daithead, tha na h-atharrachaidhean giùlain agus neurochemical a tha air an sealltainn an seo a’ tachairt aig àm tarraing a-mach, seach a bhith a ’tarraing a-mach à daithead palatable. Tha a bhith a ’cur cuideam air an taobh seo gu sònraichte buntainneach oir ann an rannsachadh tràilleachd tha eadar-dhealachaidhean mòra ann am buaidhean giùlain, cungaidh-leigheis agus neurochemical de acute vs chaidh uchd-mhacachd fhada a choimhead (Heilig et al, 2010; Koob agus Le Moal, 2008). Bidh sgrùdaidhean san àm ri teachd luachmhor gus faighinn a-mach mar a bheir tarraing air ais fada buaidh air toraidhean rothaireachd daithead.

Is e puing deasbaid buntainneach an urrainnear a bhith den bheachd gu bheil an giùlan cus bìdh blasta a tha sinn a ’faicinn ann an co-theacsa a’ mhodail beathach seo ‘èigneachail’. Ann an rannsachadh tràilleachd preclinical, chaidh an teirm ‘èigneachail’ a chleachdadh gu mòr airson cunntas a thoirt air cus gabhail a-steach dhrogaichean aig àm tarraing a-mach, a tha air a stiùireadh le staid droch bhuaidh agus a tha faochadh bho bhith ag ùrachadh ruigsinneachd air an druga (Ahmed agus Koob, 2005; Koob agus Le Moal, 2005). Tha an gabhail seo ris an teirm ‘èigneachail’ stèidhichte air an fhrèam bhun-bheachdail gu bheil eas-òrdugh èigneachaidh air a chomharrachadh le iomagain agus cuideam mus dèan thu giùlan èiginneach, agus faochadh bhon cuideam le bhith a ’coileanadh an giùlan èigneachail (Koob, 2009; Koob agus Volkow, 2010). Ann an co-theacsa a ’mhodail beathach a thathar a’ cleachdadh an seo, dh ’fhaodadh an cus giùlan ithe a bhith air a mhìneachadh mar sheòrsa de ghiùlan‘ èigneachail ’leis an fhianais a chaidh fhoillseachadh roimhe gu bheil radain le ruigsinneachd eadar-amail air an daithead palatable a’ nochdadh droch staid tòcail aig àm tarraing a-mach bìdh palatable, air a chomharrachadh. le giùlan coltach ri iomagain agus trom-inntinn, a tha faochadh bho bhith ag ùrachadh ruigsinneachd (Cottone et al, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012).

Ann an geàrr-chunntas, tha toraidhean an sgrùdaidh seo a ’toirt seachad fianais gnìomh riatanach gu bheil an CRF - CRF₁ tha àite eadar-dhealaichte aig siostam gabhadain an CeA agus an BlA ann a bhith a ’meadhanachadh giùlan mì-chùramach mar thoradh air ruigsinneachd eadar-amail air biadh palatable. Anns an CeA, an CRF - CRF₁ Tha an siostam gabhadain na phrìomh eadar-mheadhanair de bhith ag ithe cus de bhiadh palatable agus a ’bhuaidh àicheil a tha an urra ri tarraing air ais, ach anns a’ BlA bidh e a ’meadhanachadh freagairtean casgach nan cuspairean a thig bho lughdachadh duais.

MAOINEACHADH AGUS NOCHDADH

Chan eil na h-ùghdaran a 'nochdadh strì eadar com-pàirtean

Acknowledgments

Tha sinn a ’toirt taing do Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak airson taic theicnigeach, agus Tamara Zeric airson taic theicnigeach agus deasachaidh. Tha sinn cuideachd a ’toirt taing do Elena F Crawford airson molaidhean feumail co-cheangailte ri CRF immunohistochemistry. Chaidh am foillseachadh seo a dhèanamh comasach le àireamhan tabhartais DA023680, DA030425, MH091945, MH093650, agus AA016731, bhon Institiud Nàiseanta air Mì-chleachdadh Dhrugaichean (NIDA), an Institiud Nàiseanta Slàinte Inntinn (NIMH), agus an Institiud Nàiseanta air Mì-chleachdadh Deoch Làidir agus Deoch Làidir. NIAAA), le Àrd-ollamh Leasachadh Dreuchd Peter Paul (PC) agus le Prògram Cothroman Rannsachaidh Fo-cheumnach Oilthigh Boston (UROP). Fhuair an rannsachadh seo taic cuideachd bho Phrògraman Rannsachaidh Intramural NIH den Institiud Nàiseanta air Mì-chleachdadh Dhrugaichean, agus an Institiud Nàiseanta Mì-chleachdadh Deoch Làidir agus Deoch Làidir, NIH, DHHS. Tha na tha ann an urra ris na h-ùghdaran a-mhàin agus chan eil iad gu riatanach a ’riochdachadh beachdan oifigeil nan Institiudan Nàiseanta Slàinte.

Footnotes

Fiosrachadh Leasachail a ’dol leis a’ phàipear air làrach-lìn Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

Material a bharrachd

Fiosrachadh Leasachail

Cliog an seo airson faidhle dàta a bharrachd.^{(129K, pdf)}

iomraidhean

Ahmed SH, Koob GF. Eadar-ghluasad gu tràilleachd dhrogaichean: modail ath-neartachaidh àicheil stèidhichte air lùghdachadh allostatic ann an gnìomh duais. Psychopharmacology (Berl) 2005; 180: 473 - 490. [Sgaoileadh]
Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Modalan beathach de shiùcar is geir: dàimh ri tràilleachd bìdh agus barrachd cuideam bodhaig. Dòighean Mol Biol. 2012; 829: 351 - 365. [Sgaoileadh]
Bakshi VP, Kalin NH. Modalan imcheist corticotropin-release hormone agus ainmhidhean: eadar-obrachadh gine-àrainneachd. Eòlas-inntinn Biol. 2000; 48: 1175 - 1198. [Sgaoileadh]
Bale TL. Mothalachd gu cuideam: dysregulation de shlighean CRF agus leasachadh ghalaran. Giùlan Horm. 2005; 48: 1 - 10. [Sgaoileadh]
Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. Tha 2013aRimonabant a ’cuir às do dhragh ann am radain a chaidh a thoirt a-mach à biadh palatable: dreuchd amygdala sa mheadhan Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
Siostam Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioid anns an cortex prefrontal cortex mediates ag ithe ithe coltach ri Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Frèam bun-bheachdail airson etiology deoch-làidir: beachd-smuain 'kindling' / stress. Psychopharmacology (Berl) 2005; 178: 367–380. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M, et al. Tha bacadh de ghabhadan CRF1 ann am meadhan niuclas an amygdala a ’dèanamh nas miosa den dysphoria a tha co-cheangailte ri toirt air falbh nicotine ann am radain. Giùlan Biochem Pharmacol. 2012; 101: 62 - 68. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Dealbhadh 2,5-dimethyl-3- (6-dimethyl-4-methylpyridin-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] py rimidine (NBI 30775 / R121919) agus structar - dàimhean gnìomhachd sreath de chumhachd làidir agus beòil antagonists gabhadair bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin. J Med Chem. 2004; 47: 4787 - 4798. [Sgaoileadh]
Corwin RL. Bingeing radain: modail de cus giùlan eadar-amail. Blas. 2006; 46: 11 - 15. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Corwin RL, Grigson PS. Sealladh farsaing air Symposium - tràilleachd bìdh: fìrinn no ficsean. J Nutr. 2009; 139: 617 - 619. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. A ’biathadh microstructure ann an reamhrachd a tha air a bhrosnachadh le daithead buailteach do radain resistant: buaidhean meadhanach urocortin 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 - 504. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, et al. Bidh fastadh siostam CRF a ’meadhanachadh taobh dorcha de ithe èigneachail. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016 - 20020. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Bidh ruigsinneachd eadar-amail air biadh as fheàrr leotha a ’lughdachadh èifeachdas ath-neartachaidh chow ann am radain. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066 - R1076. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Atharrachaidhean lùthmhor, co-cheangailte ri iomagain agus metabolail ann am radain boireann le ruigsinneachd eile air a ’bhiadh as fheàrr leotha. Psychoneuroendocrinology. 2009b; 34: 38 - 49. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Bidh antagonism gabhadairean sigma-1 a ’blocadh ithe coltach ri èigneachadh. Neuropsychopharmacology. 2012; 37: 2593 - 2604. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Bidh Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF a ’meadhanachadh buaidhean anxiogenic agus anti-dhuais, ach chan e na buaidhean anorectic aig PACAP Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.113 [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh] [Crois Ref]
Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Fillidh a chuir a-mach Corticotropin taobh a-staigh niùclas meadhanach an amygdala a ’toirt seachad na h-eadar-dhiadan leasaichte ann an radain ethanol-eisimeileachd. J Neurosci. 2006; 26: 11324 – 11332. [Sgaoileadh]
Seòras O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH, et al. Bidh gnìomhachd siostam CRF-CRF1 a ’meadhanachadh àrdachadh air a tharraing air ais le fèin-rianachd nicotine ann am radain a tha an urra ri nicotine. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198 - 17203. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, et al. In vitro caractar R121919: antagonist gabhadair corticotropin-release factor1 (CRF1) airson làimhseachadh a dh’fhaodadh a bhith ann an trom-inntinn agus eas-òrdughan co-cheangailte ri dragh. Comann Neuroscience. 2000; Abstract 807: 4 - 9.
Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Dreuchd biadh agus acras palatable mar fhactaran brosnachaidh ann am modail beathach de bhith ag ithe cus cuideam. Int J Eat eas-òrdugh. 2003; 34: 183 - 197. [Sgaoileadh]
Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Bidh leòintean neurotoxic de amygdala basolateral, ach chan eil iad meadhanach, a ’cur bacadh air buaidh dara-òrdugh Pavlovian agus lughdachadh luach ath-neartachaidh. J Neurosci. 1996; 16: 5256 - 5265. [Sgaoileadh]
Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Tarraing a-mach geur, staonadh fada agus droch bhuaidh ann an deoch-làidir: a bheil iad ceangailte. Addict Biol. 2010; 15: 169 - 184. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Heilig M, Koob GF. Prìomh dhreuchd airson factar leigeil ma sgaoil corticotropin ann an eisimeileachd deoch làidir. A ’gluasad Neurosci. 2007; 30: 399 - 406. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Cuir stad air factar corticotropin a bhios a ’leigeil mu sgaoil anns an amygdala a tha a’ toirt buaidh air an tarraing air ais mairtre. Behav Pharmacol. 1995; 6: 74 – 80. [Sgaoileadh]
Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, et al. Le bhith a ’tarraing air ais bho ruigsinneachd cronail, eadar-amail air biadh a tha gu math blasta a’ brosnachadh giùlan coltach ri trom-inntinn ann am radain ithe èiginneach. Giùlan Pharmacol. 2012; 23: 593 - 602. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Koob GF. Dreuchd airson siostaman cuideam eanchainn ann an tràilleachd. Neuron. 2008; 59: 11 – 34. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Koob GF. Substrathan neurobiologic airson taobh dorcha èigneachaidh ann an tràilleachd. Neuropharmacology. 2009; 56 (Suppl 1: 18 - 31. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Koob GF. An t-àite aig na CRF agus na peptides a tha co-cheangailte ri CRF ann an taobh dhorcha tràilleachd. Res Brain. 2010; 1314: 3 – 14. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Koob GF, Heinrichs SC. Dreuchd airson factar leigeil às corticotropin agus urocortin ann am freagairtean giùlain do luchd-cuideam. Brain Res. 1999; 848: 141 - 152. [Sgaoileadh]
Koob GF, Le Moal M. Plasticity air duais neurocircuitry agus “taobh dorcha” tràilleachd dhrogaichean. Nat Neurosci. 2005; 8: 1442 – 1444. [Sgaoileadh]
Koob GF, Le Moal M. Review. Siostaman niùc-eòlais airson pròiseasan brosnachail an nàmhaid. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113 – 3123. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry de thràilleachd. Neuropsychopharmacology. 2010; 35: 217 – 238. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Dleastanas bàillidh a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin ann an tràilleachd dhrogaichean: comas airson eadar-theachd pharmacologach. Drogaichean CNS. 2011; 25: 271 - 287. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Màidsear M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morphine agus buaidh cocaine air CRF biosynthesis anns a ’ragh-radan meadhanach de amygdala. Neuropeptides. 2003; 37: 105 – 110. [Sgaoileadh]
McNally GP, Akil H. Dleastanas hormona a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin anns an amygdala agus niuclas leabaidh an stria terminalis ann am buaidhean giùlain, modulatory pian, agus endocrine bho tharraing opiate. Neo-eòlas. 2002; 112: 605 - 617. [Sgaoileadh]
Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF, et al. Meudachadh de ìrean immunoreactivity coltach ri factar a tha a ’leigeil ma sgaoil corticotropin ann amygdala radain dùisg rè cuideam cuibhreachaidh agus toirt air falbh ethanol mar a tha air a thomhas le microdialysis. J Neurosci. 1995; 15: 5439 - 5447. [Sgaoileadh]
Moireach E, Wise S, Rhodes S. 2011 Dè as urrainn do dhiofar eanchainn a dhèanamh le duais In Gottfried JA (eds) .Neurobiology of Sensation and Reward, Caibideil 4 CRC Press: Boca Raton, FL, USA [Sgaoileadh]
Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. An taobh dorcha de chur-ris bìdh. Giùlan Physiol. 2011; 104: 149 - 156. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Paxinos G, Watson C. 2007The Rat Brain ann an Co-chomharran Stereotaxic6th edn.Academic Press
Pellegrino A. Atlas Stereotaxic den Rat Brain. Plenum: New York; 1979.
Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Cur air adhart factar corticotropin a bhios a ’leigeil a-mach san t-siostam limbic nuair a tha cannabinoid air a thoirt air falbh. Saidheans. 1997; 276: 2050 – 2054. [Sgaoileadh]
Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. Tha 14-Methoxymetopon, agonist mu opioid air leth làidir, a ’toirt buaidh biphasically air toirt a-steach ethanol ann am radain as fheàrr le deoch-làidir Sardinian. Psychopharmacology (Berl) 2007; 192: 537 - 546. [Sgaoileadh]
Salinas JA, Pàrant MB, McGaugh JL. Bidh leòintean searbhag Ibotenic den fhillte amygdala basolateral no meadhan niuclas a ’toirt buaidh eadar-dhealaichte air an fhreagairt do lughdachaidhean ann an duais. Brain Res. 1996; 742: 283 - 293. [Sgaoileadh]
Shalev U, Erb S, Shaham Y. Dleastanas CRF agus neuropeptides eile ann an ath-shuidheachadh cuideam air a bhith a ’sireadh dhrogaichean. Brain Res. 2010; 1314: 15 - 28. [Artaigil saor PMC] [Sgaoileadh]
Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Caractar peptide hypothalamic ugh 41-tàmh a bhrosnaicheas secretion corticotropin agus beta-endorphin. Saidheans. 1981; 213: 1394 - 1397. [Sgaoileadh]
Volkow ND, O'Brien CP. Cùisean airson DSM-V: am bu chòir reamhrachd a bhith air a ghabhail a-steach mar eas-òrdugh eanchainn. Am J Psychiatry. 2007; 164: 708–710. [Sgaoileadh]
Bidh toirmeasg Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA-meadhanaichte de bhlocaichean amygdala basolateral a ’toirt duais do dh’ ìsleachadh ann am macaques. J Neurosci. 2005; 25: 4577 - 4586. [Sgaoileadh]
Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Buaidh epidemiologic agus eaconamach de ghalaran cruinne reamhrachd agus tinneas an t-siùcair. Nat Med. 2006; 12: 62 - 66. [Sgaoileadh]