Bidh an ìre mhath de dh'fhàs saill a 'lùghdachadh ath-shuidheachadh Dopamine gun atharrachadh air DAT Gene Expression (2013)

  • Jackson J. Cone,
  • Elena H. Chartoff,
  • Dàibhidh N. Potter,
  • Stephanie R. Ebner,
  • Mitchell F. Roitman

Abstract

Faodaidh leasachadh reamhrachd air a bhrosnachadh le daithead (DIO) atharrachadh gu làidir air grunn thaobhan de chomharran dopamine, a ’toirt a-steach abairt còmhdhail dopamine (DAT) agus ath-ghlacadh dopamine. Ach, tha an cùrsa ùine de dh ’atharrachaidhean a tha air a bhrosnachadh le daithead ann an abairt agus gnìomh DAT agus a bheil atharrachaidhean mar sin an urra ri leasachadh DIO fhathast gun fhuasgladh. An seo, thug sinn biadh dha radain daithead àrd (HFD) no ìosal (LFD) airson seachdainean 2 no 6. Às deidh nochdadh daithead, chaidh radain a thoirt a-steach le urethane agus chaidh gnìomh DAT striatal a mheasadh le bhith a ’brosnachadh dealanach nan cuirp cealla dopamine anns an sgìre teasach ventral (VTA) agus a’ clàradh atharrachaidhean mar thoradh air sin ann an dùmhlachd dopamine anns an striatum ventral a ’cleachdadh voltammetry cearcallach luath-scan. Rinn sinn tomhas cuideachd air buaidh HFD air DAT co-cheangailte ri buill-bodhaig ann am bloighean cealla striatal bho bhuidheann fa leth de radain às deidh dhaibh a bhith fosgailte don aon phròtacal daithead. Gu sònraichte, cha robh gin de na buidhnean làimhseachaidh againn eadar-dhealaichte ann an cuideam bodhaig. Lorg sinn easbhaidh anns an ìre de ath-ghlacadh dopamine ann am radain HFD an coimeas ri radain LFD às deidh 6 ach chan e seachdainean 2 de nochdadh daithead. A bharrachd air an sin, chaidh an àrdachadh ann an dopamine a chaidh a dhùsgadh às deidh dùbhlan cungaidh-leigheis de chocaine a lughdachadh gu mòr ann an HFD an coimeas ri radain LFD. Nochd mion-sgrùdadh blot an iar nach robh buaidh daithead air pròtain DAT iomlan. Ach, lùghdaich seachdainean 6 de nochdadh HFD gu mòr an isoform 50 kDa DAT ann am bloigh co-cheangailte ri membran synaptosomal, ach chan ann ann am bloigh co-cheangailte ri ath-chuairteachadh endosomes. Tha an dàta againn a ’toirt seachad tuilleadh fianais airson atharrachaidhean a tha air an adhbhrachadh le daithead ann an ath-ghabhail dopamine gu neo-eisimeileach bho atharrachaidhean ann an cinneasachadh DAT agus a’ sealltainn gum faod atharrachaidhean mar sin nochdadh às aonais leasachadh DIO. 

Luaidh: Cone JJ, Chartoff EH, Potter DN, Ebner SR, Roitman MF (2013) Tha daithead fada geir àrd a ’lughdachadh ath-ghabhail Dopamine gun a bhith ag atharrachadh sloinneadh gine DAT. PLoS AON 8 (3): e58251. doi: 10.1371 / journal.pone.0058251

Deasaiche: Sidney Arthur Simon, Ionad Meidigeach Oilthigh Dhiùc, Stàitean Aonaichte Ameireagaidh

Fhuair thu: Dàmhair 26, 2012; Air a ghabhail: 5 an Gearran, 2013; Foillsichte: Am Màrt 13, 2013

Dlighe-sgrìobhaidh: © 2013 Cone et al. Is e seo artaigil ruigsinneachd fosgailte air a chuairteachadh fo chumhachan Cead Sònrachadh Creative Commons, a tha a ’ceadachadh cleachdadh, sgaoileadh agus ath-riochdachadh gun bhacadh ann am meadhan sam bith, cho fad‘ s a tha an t-ùghdar agus an stòr tùsail air an creideas.

Maoineachadh: Bha am pròiseact a chaidh a mhìneachadh a ’faighinn taic bho thabhartasan Institiudan Nàiseanta Slàinte (NIH) DA025634 (MFR) agus T32-MH067631 bhon Phrògram Trèanaidh Neo-eòlas Bith-meidigeach (JJC). Chaidh taic a bharrachd a thoirt seachad leis an Ionad Nàiseanta airson Goireasan Rannsachaidh agus an Ionad Nàiseanta airson adhartachadh Saidheansan Eadar-theangachaidh, NIH, tro thabhartas UL1RR029877 (JJC) agus le Co-bhanntachd Bith-mheidigeach Chicago le taic bho Mhaoin Searle aig Urras Coimhearsnachd Chicago (JJC). Tha an susbaint an urra ris na h-ùghdaran a-mhàin agus chan eil sin gu riatanach a ’riochdachadh beachdan oifigeil an NIH no Co-bhanntachd Bith-mheidigeach Chicago. Cha robh pàirt aig an luchd-maoineachaidh ann an dealbhadh sgrùdaidh, cruinneachadh is sgrùdadh dàta, co-dhùnadh foillseachadh, no ullachadh an làmh-sgrìobhainn.

Ùidhean farpaiseach: Tha na h-ùghdaran air innse nach eil com-pàirtean sam bith ann.

Ro-ràdh

Tha an fheadhainn a tha reamhar agus reamhar a ’riochdachadh ceudad a tha a’ sìor fhàs nas motha de na Stàitean Aonaichte agus àireamhan air feadh na cruinne [1], [2]. Ged a tha mòran shlighean ann gu reamhrachd, is dòcha gur e aon de na cunnartan as motha a thaobh cuideam bodhaig fallain tricead agus caitheamh bhiadhan àrd-bhlasta, làn caloric. [3]. Gu dearbh, tha an dùmhlachd lùth (kcal / g) de bhiadh gu làidir a ’cur ri cus cuideim agus reamhrachd ann an inbhich [4], [5]. Bidh biadhan blasta a ’leigeil ma sgaoil dopamine ann an striatum an dà chuid daoine agus beathaichean neo-dhaonna [6], [7], [8], [9] agus tha ìrean suimeil de gheir ann am biadh air an ceangal gu dearbhach ri neart fhreagairtean neòil anns an striatum ventral [10]. Mar sin, tha coltas gu bheil dopamine agus an striatum a ’cur ri roghainnean airson biadhan dùmhail lùth. O chionn ghoirid, chaidh a shealltainn gum faod eadar-dhealachaidhean ann an daithead atharrachadh aig an aon àm ann an cuairteachadh striatal agus giùlan air a stiùireadh le biadh [11]. Ach, is dòcha nach eil uiread de luach anns an fhianais a tha a ’sìor fhàs gum faod eadar-dhealachaidhean ann am biadh a tha air an uisgeachadh, gu sònraichte a thaobh geir, fios air ais agus atharrachadh a dhèanamh air comharran dopamine striatal.

Tha soidhneadh dopamine striatal air a riaghladh le grunn fhactaran a ’toirt a-steach cinneasachadh dopamine leis na h-enzyman tyrosine hydroxylase, gabhadairean dopamine ro-agus postynaptic, agus luchd-còmhdhail dopamine presynaptic (DATs), a tha uile air a bhith an sàs ann an reamhrachd. [12], [13]. Faodaidh atharrachaidhean ann an àireamh no gnìomh DAT atharrachadh a thoirt air raon buaidh dopamine a chaidh a leigeil ma sgaoil agus mar thoradh air sin gnìomh striatal [14], [15]. Thathas air sealltainn gu bheil insulin, a chaidh a leigeil ma sgaoil mar fhreagairt air biadh neo-fhighte, a ’toirt buaidh air gnìomh DAT [16], [17]. Mar sin, is e an DAT aon de na tagraichean as coltaiche airson buaidh daithead.

O chionn ghoirid, chaidh sgrùdadh a dhèanamh air co-dhàimh eadar reamhrachd agus ruigsinneachd DAT a bharrachd air atharrachaidhean ann an daithead air gnìomh DAT. Tha clàr-amais cuirp (BMI) air a cho-cheangal gu dona le cothrom DAT anns an striatum daonna [18]. Tha ceangal DAT, agus mar sin ri fhaighinn, air a lughdachadh ann an luchagan biadhaidh daithead àrd geir (HFD) [19]. Tha reamhrachd ceangailte ri HFD (DIO) co-cheangailte ri ìre nas ìsle de ath-ghabhail dopamine leis an DAT ann am radain [20]. Air an toirt còmhla, tha na sgrùdaidhean sin a ’moladh gum faod reamhrachd a chaidh a stèidheachadh le caitheamh HFD buaidh mhòr a thoirt air riaghladairean presynaptic èiginneach de chomharran dopamine - gu sònraichte an DAT. Ach, chan eil fios fhathast dè a ’chùrsa ùine de dh’ atharrachaidhean a dh ’adhbhraicheas daithead ann an comharrachadh dopamine agus a bheil leasachadh DIO riatanach airson atharrachaidhean a nochdadh. Rinn sinn measadh air gnìomh DAT le bhith a ’dùsgadh sgaoileadh dopamine anns an striatum ventral agus a’ tomhas an ìre ath-ghabhail ann am radain a ’cleachdadh voltammetry cearcallach luath-scan. Gus faighinn a-mach an robh ath-ghabhail dopamine lùghdaichte air adhbhrachadh le lughdachadh gine DAT, thomhais sinn DAT mRNA anns an sgìre teasach ventral agus substantia nigra a ’cleachdadh qRT-PCR fìor-ùine. A bharrachd air an sin, chleachd sinn dòigh-obrach briseadh bith-cheimiceach agus sgrùdadh blot an Iar gus ìrean DAT striatal a dhearbhadh ann an membran synaptosomal amh agus endosomal. Bha radain an dàrna cuid seachdainean 2 no 6 de dhaithead àrd no geir ìosal, ach chaidh a h-uile tomhas a dhèanamh às aonais DIO. Tha na co-dhùnaidhean againn a ’moladh gum bi caitheamh fada de HFD, neo-eisimeileach bho DIO, a’ lughdachadh ìre ath-ghabhail dopamine anns an striatum ventral gun a bhith a ’lughdachadh abairt DAT.

Stuthan agus Dòighean-obrach

Aithris Èisteachd

Chaidh an sgrùdadh seo a dhèanamh a rèir na molaidhean anns an Stiùireadh airson Cùram is Cleachdadh Bheathaichean Saotharlann nan Institiudan Nàiseanta Slàinte. Chaidh am protocol aontachadh le Comataidh Cùram Bheathaichean aig Oilthigh Illinois, Chicago. Chaidh a h-uile lannsa a dhèanamh fo anesthesia urethane, agus chaidh a h-uile oidhirp a dhèanamh gus fulangas a lughdachadh.

Cuspairean

Chaidh radain àbhaisteach Sprague - Dawley fireann (n = 67), timcheall air 2 mìosan a dh'aois agus le cuideam 225 - 275 g nuair a ràinig iad. Bha beathaichean air an cumail leotha fhèin ann an cèidsichean plastaig (26.5 × 50 × 20 cm) ann an àrainneachd fo smachd teothachd- (22 ° C) agus taiseachd- (30%) air solas 12∶12 h: cearcall dorcha (solais air adhart aig 07∶00 h). Thug radain a-steach don ghoireas airson seachdain le ad libitum ruigsinneachd gu lab lab àbhaisteach agus uisge.

Gabhail a-steach biadh agus tomhas cuideam bodhaig

Às deidh dhaibh a bhith air an ainmeachadh, chaidh radain a thomhas agus a thoirt seachad air thuaiream do 1 de bhuidhnean 4 a bha air an ath-chothromachadh airson cuideam tùsail a ’chuirp. Chaidh dà bhuidheann a chumail air daithead geir ìosal (LFD; Diets Rannsachaidh, New Brunswick, NJ; D12450B; 10% kilocalories bho gheir (3.85 kcal / g)). Chaidh na buidhnean 2 eile a chumail suas air HFD (Diets Rannsachaidh; D12492; 60% kilocalories bho gheir (5.24 kcal / g)). Airson gach daithead, chaidh radain a chumail an dàrna cuid airson seachdainean 2 no 6 (wks). Mar sin, bha na buidhnean 4: LFD-2 wk (n = 18), HFD-2 wk (n = 16), LFD-6 wk (n = 16) agus HFD-6 wk (n = 17). Bha aig a h-uile buidheann ad libitum ruigsinneachd uisge. Chaidh tomhas bidhe agus tomhas cuideam bodhaig a dhèanamh trì tursan / wk agus tha dàta air aithris air leth airson radain a tha a ’dol tro chlàran foltammetric no mion-sgrùdadh pròtain / teachdaireachd DAT.

Modhan lannsaireachd agus Tomhais Dopamine

Às deidh nochdadh daithead, chaidh fo-sheata de radain nach robh eadar-dhealaichte ann an cuideam bodhaig ullachadh airson clàran bholtammetric (LFD-2 wk (n = 8), HFD-2 wk (n = 6), LFD-6 wk (n = 6) , agus HFD-6 wk (n = 7)) fo anesthesia urethane (1.5 g / kg) [mar ann an 9,21]. Chaidh cannula treòrachaidh (Siostaman Bioanalytical, West Lafayette, IL) a shuidheachadh os cionn an striatum ventral (1.3 mm anterior, 1.5 mm fadalach bho bregma), chaidh dealan iomraidh uèir airgid clorinated (Ag / AgCl) a chuir a-steach don cortex contralateral agus bha an dà chuid ceangailte ris a ’chlaigeann le sgriothan stàilinn gun staoin agus saimeant fhiaclan. Chaidh micromanipulator anns an robh electrod carbon-fiber (CFE) a chuir a-steach don cannula treòrachaidh agus chaidh an electrod ìsleachadh a-steach don striatum ventral. Bha an CFE agus an electrod iomraidh ceangailte ri prìomh cheann agus chaidh comas an CFE a sganadh bho −0.4 gu +1.3 V (vs. Ag / AgCl) agus air ais (400 V / s; 10 Hz). Chaidh dealan brosnachail bipolar (Plastics One, Roanoke, VA) a thoirt sìos mean air mhean a-steach don sgìre teasach ventral / substantia nigra pars compacta (VTA / SNpc; 5.2 mm posterior, 1.0 mm fadalach agus an toiseach 7.0 mm ventral bho bregma) ann an àrdachadh 0.2 mm . Aig gach àrdachadh, chaidh trèana de bhuillean gnàthach (60 buillean, 4 ms gach buille, 60 Hz, 400 µA) a lìbhrigeadh. Nuair a tha an dealan brosnachail air a shuidheachadh anns an VTA / SNpc agus an CFE anns an striatum, bidh brosnachadh gu h-earbsach a ’nochdadh sgaoileadh dopamine - air a thoirt a-mach à dàta voltammetric a’ cleachdadh mion-sgrùdadh prìomh phàirtean. [9], [22]; agus air a thionndadh gu dùmhlachd às deidh gach CFE a bhith air a calibratadh ann an siostam stealladh sruthadh às deidh gach deuchainn [23]. Chaidh suidheachadh an electrod brosnachail a bharrachadh airson an sgaoileadh as àirde. Chaidh cead a thoirt don CFE an uairsin cothromachadh a dhèanamh airson 10 min mus do thòisich e air an deuchainn. Chaidh sgaoileadh dopamine a dhùsgadh le brosnachadh dealain den VTA / SNpc (na h-aon pharaimearan mar gu h-àrd), agus chaidh na h-atharrachaidhean mar thoradh air sin ann an dùmhlachd dopamine a thomhas bho −5 s gu 10 s an coimeas ri brosnachadh. Dìreach às deidh a bhrosnachadh, chaidh radain a stealladh le hydrocloride cocaine air a sgaoileadh ann an 0.9% saline (10 mg / kg ip) agus, 10 min nas fhaide air adhart, chaidh am brosnachadh a-rithist. Chaidh bholtachdan gnìomhaichte, togail dàta, agus mion-sgrùdadh a dhèanamh a ’cleachdadh bathar-bog a chaidh a sgrìobhadh ann an LabVIEW (Ionnsramaidean Nàiseanta, Austin, TX, USA) [22].

Ath-ghabhail Dopamine

Chaidh ath-ghlacadh dopamine a mhodaladh le bhith a ’cleachdadh Bathar-bog Sgrùdaidh Demon Voltammetry (24; Oilthigh Wake Forest, Winston-Salem NC). An seo tha sinn ag aithris air an tau seasmhach lobhadh mar an tomhas againn air ìre ath-ghabhail dopamine. Tha Tau a ’tighinn bho lùb lùbte exponential a tha a’ toirt a-steach a ’mhòr-chuid den lùb glanaidh dopamine agus a tha gu math ceangailte (r = .9899) le Km, an dàimh a tha coltach ri dopamine airson an DAT [24]. Gus faighinn a-mach dè a ’bhuaidh a th’ aig cocaine air dùmhlachd dopamine as àirde rinn sinn coimeas eadar luachan a fhuaireadh ro agus às deidh rianachd (% atharrachadh).

Eachdraidh-inntinn

Às deidh gach clàradh, chaidh dealan stàilinn gun staoin (AM Systems #571500, Sequim, WA) a thoirt sìos chun aon doimhneachd ris an CFE agus chaidh lesion (10 µA, 4 s) a dhèanamh gus an àite clàraidh a chomharrachadh. Chaidh brains a thoirt air falbh agus an stòradh ann an 10% formalin. Chaidh miocroscop aotrom a chleachdadh gus àite an lesion air earrannan coronal (50 µm) a chomharrachadh tron ​​striatum. Chaidh a h-uile clàr a chaidh aithris an seo a dhèanamh anns an striatum ventral [25].

Bloigh subcellular de Stiallan Fìnealta

Chaidh radain (LFD-2 wk, HFD-2 wk, LFD-6 wk, agus HFD-6 wk; n = 10 / buidheann; gun eadar-dhealachadh sam bith ann an cuideam bodhaig) a mharbhadh le decapitation. Chaidh bloigh bith-cheimiceach a dhèanamh a ’cleachdadh a’ phròtacal a chaidh a mhìneachadh ann an [26], le mion-atharrachaidhean. Chaidh brains a thoirt air falbh gu sgiobalta, reòta ann an isopentane agus a ghearradh air cryostat (HM505E, Microm, Walldorf, a ’Ghearmailt, −20 ° C) gus an do ràinig iad an striatum. Dà-thaobhach 1-mm3 chaidh punches tron ​​striatum ventral (cuideam cuibheasach clò: 15.2 mg) a cho-sheòrsachadh airson 20 s ann an TEVP fuar-deighe 0.8 ml (bunait 10 mM Tris, 5 mM NaF, 1 mM Na3VO4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, pH 7.4) + 320 mM sucrose bufair. Chaidh aliquot 100 µl de homogenate iomlan (H) a shàbhaladh. Chaidh an còrr de H a tharraing sa mheadhan aig 800 × g airson 10 min aig 4 ° C. Chaidh am pellet (P1, nuclei agus sprùilleach mòr) ath-chaitheamh ann am bufair 0.2 ml TEVP agus a shàbhaladh. Chaidh an t-uachdar (S1) a thoirt air falbh agus a chuir ann an tiùb glan air deigh. Chaidh S1 a centrifug aig 9200 × g airson 15 min aig 4 ° C gus pellet a ghineadh (P2, membran synaptosomal amh) agus supernatant (S2). Chaidh P2 a rinsigeadh aon uair ann am bufair sucrose TEVP + 35.6 mM agus an uairsin air a chuir air ais ann an 0.25 ml de bufair sucrose TEVP + 35.6 mM, air a thionndadh gu socair airson 3 s agus air a chòmhdach le hypo-osmotically le bhith a ’cumail an sampall air deigh airson 30 min. Chaidh Supernatant (S2) a chruinneachadh agus a shnìomh aig 165,000 × g airson 2 h gus pellet a ghineadh (P3, membran aotrom, ath-chuairteachadh endosomes) a chaidh ath-chaitheamh ann an TEVP (0.1 ml) agus a shàbhaladh. Chaidh a h-uile sampall a chumail aig −80 ° C gus an deach electrophoresis gel polyacrylamide.

Electrophoresis gel agus blotadh an iar

Chaidh susbaint protein a dhearbhadh le bhith a ’cleachdadh an inneal Bio-Rad DC Protein Assay (Hercules, CA), agus chaidh dùmhlachd gach sampall atharrachadh gu pròtain 0.3 mg / ml. Chaidh bufair sampall NuPAGE LDS (lithium dodecyl sulfate) (Invitrogen, Carlsbad, CA) agus 50 mM dithiothreitol a chur ris gach sampall mus teasachadh iad aig 70 ° C airson 10 min. Gus an aon uiread de phròtain a luchdachadh airson gach bloigh, chaidh 3 µg de gach sampall a luchdachadh a-steach do gels NuPAGE Novex 4–12% Bis-Tris (Invitrogen) airson an sgaradh le electrophoresis gel. Chaidh proteinichean a ghluasad às deidh sin gu membran fluvinide polyvinylidene (PVDF) (Saidheansan Beatha PerkinElmer, Boston, MA). Chaidh làraichean ceangail neo-shònraichte a bhacadh airson 2 hr aig teòthachd an t-seòmair ann a bhith a ’bacadh bufair (5% bainne tioram neo-fheòil ann am PBS agus 0.02% Tween 20 [PBS-T]). Chaidh blocaichean an uairsin a thoirt a-steach do antibody bun-sgoile (1∶3000 luch monoclonal anti-NR2B [# 05–920, Millipore], 1∶5000 coineanach anti-DAT [# AB2231, Millipore], agus 1∶1000 luch anti-transferrin luch ( TfR) [# 13–6800, Invitrogen]. Chaidh blots a ghearradh ann an 3 pàirtean: àrd (> 97 kDa), meadhanach (46–97 kDa), agus cuideaman ìosal (<46 kDa) agus gach pàirt air a dhearbhadh le antibody a dh ’aithnich pròtain taobh a-staigh an raon cuideam sin. Is e cuideaman molecular a tha coltach airson na antibodies a chaidh a chleachdadh: NR2B, 180 kDa; DAT, 75, 64, agus 50 kDa; TrfR, 95 kDa. Às deidh sgrùdadh a dhèanamh air blots raon cuideam meadhanach airson DAT, chaidh antibodies a thoirt air falbh le guir le bufair stiall (62.5 mM Tris, 2% SDS, 100 mM β-mercaptoethanol, pH 6.8) airson 15 min aig 50 ° C. Às deidh sin chaidh blocaichean ath-bhacadh agus a dhearbhadh le anti-TfR. SeeBlue Plus 2 (Invitrogen) ro- chaidh inbhean dathte a ruith airson tuairmse cuideam moileciuil.

Chaidh immunoblots protein a sgrùdadh le bhith a ’cleachdadh Bathar-bog Ìomhaigh Molecular Carestream 5.0. Chaidh dian lom (suim nam piogsail taobh a-staigh a ’chòmhlan ùidh às aonais suim nam piogsail cùil) a dhearbhadh airson gach còmhlan. Gus coimeas a dhèanamh eadar blots, chaidh dàta a dhèanamh àbhaisteach do na smachdan LFD aig 2 agus 6 wks. Tha dàta air a chuir an cèill mar an inntrigeadh cuibheasach fillte an coimeas ri LFD ± SEM.

Freagairt cainneachdail fìor-ùine Reverse Transcriptase Polymerase Chain (qRT-PCR)

Às deidh cruinneachadh de punches striatal airson mion-sgrùdadh blot an iar, chaidh brains reòta a roinn gu corporra air a ’mhicrotome gus an do ràinig iad an VTA / SN. Dà-thaobhach 1-mm3 chaidh punches de stuth VTA agus SN (cuideam cuibheasach clò = 15.0 mg) a dhèanamh agus chaidh RNA a thoirt a-mach a ’cleachdadh PureLink RNA Mini Kit (Invitrogen). Chaidh càileachd agus meud RNA a mheasadh le bhith a ’cleachdadh RNA 6000 Nano Chip (Agilent, Santa Clara, CA) air Agilent Bioanalyzer 2100. Bha àireamh iomlanachd RNA (RIN) nas àirde na 7 airson a h-uile sampall, a ’nochdadh càileachd àrd. Chaidh aon mhicrogram de RNA iomlan a chleachdadh gus cDNA a cho-chur le bhith a ’cleachdadh iScript cDNA Synthesis Kit (BioRad) ann an iCycler ThermoHybaid (Thermo Scientific). Primers sònraichte airson DAT (Slc6a3; Forward primer: GGAAGCTGGTCAGCCCCTGCTT, Reverse primer: GAATTGGCGCACCTCCCCTCTG), β-actin (Nba; air adhart primer: AGGGAAATCGTGCGTGACAT; : Chaidh genes GCTCCTGTGCACACCATTTTCCC) (àireamhan aontachaidh Genbank NM_012694, NM_031144, agus NM_001004198) a dhealbhadh a ’cleachdadh NCBI Primer-BLAST (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/) agus air a cheannach bho Integrated DNA Technologies (Coralville, Iowa). Dhearbh sgrùdadh lùb leaghte agus electrophoresis gel polyacrylamide sònrachas na primers. Tha na amplicons DAT, β-actin, agus Tbp nam paidhrichean bonn 266, 182, agus 136 de dh'fhaid, fa leth.

Chaidh pasgan Q-PCR (iQ SybrGreen Supermix, BioRad) a chleachdadh. Chaidh an ath-bhualadh a dhèanamh air Siostam Dearbhaidh PCR Fìor-ùine Dath Singilte MyiQ (BioRad) ann an tomhas de 20 µl, le 2 µL de 3 µM ​​air adhart agus air ais primers agus sampall 4 µL cDNA caolaichte 1∶10. B ’e suidheachadh rothaireachd PCR 95 ° C airson 5 min; Cearcaill 40 aig 94 ° C airson 15 s, 60 ° airson 15 s, 72 ° C airson 15 s. Chaidh dàta a chruinneachadh aig teòthachd leughaidh de 84 ° C airson 15 s stèidhichte air teodhachd leaghadh amplicon. Chaidh lùban caolachaidh àbhaisteach a chruthachadh airson gach primer a chaidh a shuidheachadh le caolachadh sreathach (1.00, 0.2, 0.04, agus 0.008-fold) prìomh stoc cDNA anns a bheil measgachadh co-ionann de cDNA bho gach buidheann làimhseachaidh. An log10 de na luachan lùghdachaidh air an dealbhadh an aghaidh luachan cearcall stairsnich airson na barraichean àbhaisteach. Chaidh bathar-bog siostam optigeach MyiQ (BioRad) a chleachdadh gus an dàta a sgrùdadh. Chaidh sampaill anns nach robh teamplaid cDNA agus sampaill bho ath-bheachdan cDNA anns nach robh reverse transcriptase a ruith mar smachdan airson truailleadh agus leudachadh DNA genomic, fa leth. Chaidh luachan aithris a dhèanamh àbhaisteach gu luachan cuibheasach nan inbhean a-staigh ß-actin agus Tbp airson gach sampall. Tha dàta air a chuir an cèill mar ìrean cuibheasach cuibheasach de DAT / inbhean a-staigh mRNA ± SEM.

Mion-sgrùdadh staitistigeil

Bidh abairt DAT ag atharrachadh gu beothail rè cuairt-beatha an dà chuid dhaoine [27] agus radain [28], [29]. A bharrachd air an sin, bidh an fhreagairt dopamine agus giùlan gu cocaine ag atharrachadh mar a bhios radain òga a ’tighinn gu ìre [30]. Mar sin, dh ’fhaodadh tomhasan de DAT a bhith eadar-dhealaichte le aois agus toirmeasg coimeas brìoghmhor eadar na buidhnean 2 wk agus 6 wk. Mar sin, chaidh dòighean buidhne airson in-ghabhail bìdh, cuideam bodhaig, dùmhlachd dopamine stùc, tau, atharrachadh%, agus abairt gine càirdeach a choimeas air leth airson buidhnean 2 agus 6 wk a ’cleachdadh deuchainn-t neo-ullaichte nan oileanach. Airson mion-sgrùdaidhean blot an iar, chaidh eadar-dhealachaidhean buidhne ann an dian bann DAT àbhaisteach a choimeas air leth airson buidhnean 2 agus 6 wk a ’cleachdadh ANOVA (dietXfraction) dà-shligheach. Chaidh na mion-sgrùdaidhean staitistigeil uile a dhèanamh ann an Graph Pad 5 (Prism Inc.).

toraidhean

Bidh HFD a ’brosnachadh barrachd caitheamh geir

Mus do nochd daithead cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith ann an cuideam corp tùsail anns an 2 wk (LFD: 275.22 +/− 4.1 g; HFD: 280.87 +/− 4.8 g; p = 0.37), no 6 wk (LFD: 287.31 +/− 4.9 g; HFD: 289.44 +/− 5.1 g; 6 wk p = 0.97) buidhnean. A dh ’aindeoin a bhith ag ithe daithead le co-dhèanamh gu tur eadar-dhealaichte, cha do lorg sinn eadar-dhealachaidhean sam bith ann an cuideam bodhaig eadar buidhnean daithead a’ leantainn an dàrna cuid 2 no 6 wks (Fig. 1a - b; an dà ns). Cha robh eadar-dhealachadh sam bith cuideachd anns na kcals iomlan a chaidh ithe eadar buidhnean a ’leantainn an dà chuid 2 agus 6 wks de nochdadh daithead (Fig. 1c - d; ns). Ach, bha radain HFD ag ithe mòran a bharrachd kcals bho gheir (Fig. 1e – f; 2 wks: t (32) = 25.59; 6 wks: t (31) = 27.54; p<0.0001 airson an dà ùine daithead).

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 1. In-ghabhail bìdh agus tomhas cuideam bodhaig.

Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith eadar HFD agus LFD ann an cuideam deireannach a ’chuirp (a - b) no kilocalories iomlan air an ithe (c - d) a ’leantainn an dàrna cuid seachdainean 2 no 6 de nochdadh daithead. (e - f) Bha radain HFD ag ithe mòran a bharrachd kilocalories bho gheir na radain LFD an dà chuid ann an suidheachaidhean seachdain 2 agus 6 (***p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g001

Bidh HFD leantainneach a ’lughdachadh ìre ath-ghabhail DA

Chaidh clàran bholtammetric a dhèanamh anns an striatum ventral (Figear 2). Figear 3 a ’sealltainn atharrachaidhean riochdachail dealanach ann an dùmhlachd dopamine a chaidh fhaighinn bho radain a’ leantainn 6 wks de dhaithead. Aig a ’bhun-loidhne, cha robh eadar-dhealachadh eadar meud dopamine falaichte eadar buidhnean daithead agus thar amannan daithead (Fig. 4a - b, an dà ns). Ach, mhol sgrùdadh air eisimpleirean fa leth gu robh an ìre crìonaidh às deidh dùmhlachd dopamine stùc eadar-dhealaichte eadar buidhnean daithead às deidh 6 wks de nochdadh daithead (Figear 3 a - b airson eisimpleirean). Tha an ìre crìonaidh gu mòr mar thoradh air glanadh dopamine leis an DAT [31], a mhodail sinn mar aon ìre eas-chruthach gus tau a dhearbhadh. Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith eadar buidhnean daithead a ’leantainn 2 wks de nochdadh daithead (Fig. 4c). Ach, às deidh 6 wks de nochdadh daithead, bha tau gu math nas motha ann an radain HFD-6 wk an coimeas ri LFD-6 wk (Fig. 4d; t (11) = 2.668; p<0.05). Mar sin, bidh 6 wks de HFD a ’lughdachadh ìre glanaidh dopamine anns an striatum ventral an coimeas ri beathaichean a bha ag ithe LFD.

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 2. Dearbhadh histological air làraich clàraidh airson mion-sgrùdadh ath-ghabhail.

Tha làraichean clàraidh airson radain a tha air am biathadh LFD air an còdadh le triantanan glasa agus airson radain HFD le cearcallan dubha. Tha na h-àireamhan a ’comharrachadh astar ann am mm roimhe gu Bregma. Figear air atharrachadh bho Paxinos agus Watson 2006.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g002

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 3. Bidh brosnachadh dealain den VTA / SNc a ’nochdadh spìc mean air mhean ann an dùmhlachd dopamine.

Eisimpleirean riochdachail de dhàta a fhuaireadh às deidh seachdainean 6 de nochdadh daithead. a) Tha cuilbheart dath air a thoirt air falbh le cùl-fhiosrachadh a ’sealltainn atharrachaidhean gnàthach aig diofar chomasan san dealan roimhe (−5 gu 0 s an coimeas ri tòiseachadh) agus às deidh (0.1 gu 10 s an coimeas ri tòiseachadh) brosnachadh dealain (STIM) den VTA / SNc. Is e ùine an abscissa, is e an comas dealain an òrdachadh, agus tha atharrachaidhean gnàthach air an còdachadh ann an dath meallta. Mheudaich dopamine [air a chomharrachadh leis na feartan oxidation aige (+ 0.6 V; uaine) agus lughdachadh (−0.2 V; gorm)] mar fhreagairt don bhrosnachadh anns an radan wk LFD-6 seo. b) Dìreach mar a tha ann an a), ach bho radan HFD-6 wk. c) Tha dùmhlachd dopamine mar ghnìomh ùine air a thoirt a-mach bhon phlota dath ann an a) agus tha tau air a chomharrachadh tro lùb iomchaidh. Tha dà dotag dhearg a ’comharrachadh an stùc agus an dùmhlachd dopamine aig an àm nuair a ruigear tau. Tha Tau air a chomharrachadh aig an taobh cheart. d) Dìreach mar a tha ann an c) ach tha dàta air a thoirt a-mach à b).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g003

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 4. Bidh sia seachdainean de dhaithead àrd geir a ’lughdachadh ìre ath-ghabhail dopamine agus a’ daingneachadh freagairt dopamine gu cocaine.

Co-chruinneachadh cuibheasach dopamine stùc air a dhùsgadh le brosnachadh VTA / SNpc a ’leantainn an dàrna cuid 2 (a) no seachdainean 6 (b) de nochdadh daithead ro in-stealladh cocaine. c - d) Tau cuibheasach a ’leantainn 2 (c) wks no 6 wks (d) de nochdadh daithead. Bha Tau gu math nas motha airson radain HFD-6 wk an coimeas ri radain LFD-6 wk (*p e - f) Atharrachadh sa cheud ann an dùmhlachd dopamine as àirde an dèidh in-stealladh cocaine airson 2 (e) agus 6 (f) seachdainean de nochdadh daithead. Bha atharrachadh sa cheud gu math nas lugha ann an HFD-6 wk an coimeas ri radain wk LFD-6 (**p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g004

Bidh HFD leantainneach a ’lughdachadh freagairt DA do chocaine

Gus tuilleadh sgrùdadh a dhèanamh air atharrachaidhean a tha air am brosnachadh le daithead ann an DAT, chuir sinn a-steach radain leis a ’choca bacaidh DAT. Tha dùmhlachd dopamine as àirde an dèidh brosnachadh dealain air adhbhrachadh le sgaoileadh dopamine ach tha e cuideachd air a chuingealachadh le bhith a ’toirt air falbh dopamine aig an aon àm leis an DAT [21]. Chomharraich sinn buaidh cocaine air sgaoileadh dopamine le bhith a ’tomhas an atharrachaidh ann am meud dopamine falaichte an coimeas ri luachan ro-dhrogaichean (% atharrachadh). Cha tug dà wks de HFD buaidh air% atharrachadh an coimeas ri LFD (Fig. 4e; ns). Ach, às deidh 6 wks de nochdadh daithead, chaidh atharrachadh% a mhilleadh gu mòr ann an HFD an coimeas ri LFD (Fig. 4f; t (10) = 4.014; p<0.01). Tha na co-dhùnaidhean againn a ’moladh gu bheil 6, ach chan e 2 wks, de nochdadh HFD a’ lughdachadh freagairt dopamine gu cocaine.

Bidh foillseachadh fada HFD a ’lughdachadh sloinneadh pròtain DAT ann am pilearan synaptosomal

Gus faighinn a-mach an robh buaidhean HFD fada mar thoradh air atharrachaidhean ann an àireamh DAT, chaidh ìrean pròtain DAT a thomhas ann an homogenates teann iomlan (bloigh H), membran synaptosomal (bloigh P2) agus endosomes ath-chuairteachadh intracellular (bloigh P3). Tha DAT na Nglycoprotein ceangailte le cuideam moileciuil eadar 50 agus 80 kDa mar thoradh air ìrean nas àirde de glycosylation mar a bhios am pròtain aibidh [32]. Chaidh bloigh a dhearbhadh le abairt bheairteach den fho-ionad NR2B den gabhadair NMDA ann am bloigh membran synaptosomal agus den gabhadair transferrin anns a ’chuibhreann endosomal (mar eisimpleir blot faic Fig. 5b). Cha do lorg sinn eadar-dhealachaidhean sam bith ann am pròtain DAT iomlan às deidh 2 agus 6 wks de nochdadh daithead (cha deach dàta a shealltainn). Gus deuchainn a dhèanamh airson eadar-dhealachaidhean sònraichte ann am pròtain DAT, chleachd sinn ANOVA (dietXfraction) dà-shligheach. Co-chòrdail ris na deuchainnean foltammetry, cha robh 2 wks de nochdadh daithead gu leòr gus ìrean de aon de na isofoirmean DAT atharrachadh ann am bloighean P2 no P3 (Fig. 5. c, e, g; uile ns). Ach, às deidh 6 wks de nochdadh daithead, bha eadar-obrachadh dietXfraction mòr (F(1,18) = 8.361, p<0.01); Fig. 5d) airson an isoform 50 kD den DAT. Mar sin, lùghdaich HFD fada gu mòr an isoform 50 kD den DAT anns a ’chuibhreann P2 agus dh’ adhbhraich e gluasad a dh ’ionnsaigh àrdachadh anns a’ chuibhreann P3. Cha do lorg sinn buaidh daithead no bloigh air an 64 kD (Fig. 5f; ns) no an 70 kD (Fig. 5h; ns) DAT isoform.

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 5. Bidh caitheamh daithead làn geir a ’lughdachadh pròtain DAT co-cheangailte ri membran anns an striatum ventral.

a) Ìomhaigh riochdachail a ’sealltainn na pungan teannachaidh (2) 1 × 1 mm air an toirt bhon striatum ventral a chaidh a chur còmhla airson mion-sgrùdadh pròtain DAT. VStr = Ventral Striatum; DStr = Striatum Dorsal; cc = corpus callosum; ac = coimisean roimhe. b) Blots an iar riochdachail den dàta air a thaisbeanadh ann an c - h. L = LFD; H = HFD; TfR = gabhadair transferrin; NR2B = Fo-ghoireas NR2B de gabhadair NMDA. c) Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith ann am pròtain 50 kD DAT airson bloighean P2 no P3 às deidh seachdainean 2 de nochdadh daithead. d) Tha pròtain 50 kD DAT air a lughdachadh gu mòr anns a ’P2 (* = p<.05), ach chan e bloigh P3 de stuth striatal ventral ann an HFD-6 wk an coimeas ri radain LFD-6 wk. Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith ann am pròtain DAT 64 kD a ’leantainn an dàrna cuid 2 (e) no seachdainean 6 (f) de nochdadh daithead. Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith ann am pròtain 70 kD DAT a ’leantainn an dàrna cuid 2 (g) no seachdainean 6 (h) de nochdadh daithead.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g005

Gus faighinn a-mach an robh ìrean lùghdaichte de phròtain DAT anns a ’chuibhreann P2 mar thoradh, gu ìre, air lùghdachadh ann an tar-sgrìobhadh DAT, chaidh ìrean VTA / SNc DAT mRNA a thomhas anns na h-aon radain mar gu h-àrd (Fig. 6a mar eisimpleir). Cha do choimhead sinn eadar-dhealachaidhean sam bith eadar buidhnean daithead ann am midbrain DAT mRNA às deidh an dàrna cuid 2 no 6 wks de nochdadh daithead (Fig. 6b - c; an dà ns). Mar sin, chan eil coltas ann gu bheil eadar-dhealachaidhean ann an ìrean pròtain DAT taobh a-staigh an striatum ventral mar thoradh air easbhaidhean ann an cinneasachadh DAT.

Dealbhag a 'ghlacaidh

Luchdaich a-nuas:

Slideadh PowerPoint

dealbh nas motha

dealbh tùsail

Figear 6. Chan eil caitheamh daithead làn geir ag atharrachadh ìrean DAT mRNA. a)

Ìomhaigh riochdachail a ’sealltainn punches clò 1 × 1 mm air an toirt bhon VTA / SN agus air an toirt còmhla airson mion-sgrùdadh DAT mRNA. cp = penduncle cerebral; pc = coimisean posterior; MM = niuclas mamail medial. Cha robh eadar-dhealachaidhean sam bith ann an ìrean DAT mRNA càirdeach an dèidh seachdainean 2 (b) no seachdainean 6 de nochdadh daithead (c).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g006

Deasbaireachd

Faodaidh caitheamh fada HFD leantainn gu DIO agus plastachd taobh a-staigh an t-siostam nearbhach meadhanach. Tha e coltach gu bheil neurons dopamine agus gabhadairean dopamine striatal mar aon sheata de thargaidean CNS a tha fo bhuaidh HFD agus ann an daoine reamhar [11], [13], [33]. An seo tha sinn ag aithris gun do lughdaich HFD an ìre de ath-ghlacadh dopamine anns an striatum ventral agus bha a ’bhuaidh seo an urra ri fad an nochdaidh. Gu cudromach, thachair buaidh HFD air gnìomh DAT às aonais DIO. Ged nach do rinn sinn tomhas dìreach air comharran adiposity bodhaig san sgrùdadh seo, chaidh beathaichean a sheòrsachadh gu traidiseanta mar DIO no a bhith an aghaidh daithead stèidhichte air buannachd cuideam bodhaig a-mhàin às deidh dhaibh a bhith fosgailte do HFD [34]. Rinn HFD leantainneach lùghdachadh mòr air comas cocaine, a tha a ’toirt buaidh air an DAT, gus meud sgaoileadh dopamine a neartachadh. Rinn sinn tomhas air ìrean pròtain DAT anns an striatum ventral a ’cleachdadh mion-sgrùdadh blot an Iar - a’ dèanamh eadar-dhealachadh eadar DAT ionadail taobh a-staigh bloighean subcellular a bha air am beairteachadh airson an dàrna cuid an membran plasma no ath-chuairteachadh endosomes. Lorg sinn lùghdachadh mòr ann an isoform neo-àbhaisteach den DAT co-cheangailte ris an membran plasma. Mar sin, tha coltas gu bheil HFD fada a ’lughdachadh ìre ath-ghabhail dopamine tron ​​DAT a tha buailteach le bhith a’ cur a-steach do mhalairt DAT no is dòcha aibidh ach chan ann le bhith a ’lughdachadh abairt gine DAT no seasmhachd DAT mRNA. A bharrachd air an sin, tha e coltach gur e ùine eadar dà agus sia seachdainean de bhith a ’nochdadh HFD an t-àite teannachaidh as tràithe airson plastachd a tha air a bhrosnachadh le daithead a thaobh an DAT.

Tha reamhrachd ceangailte ri grunn thaobhan de chomharran dopamine striatal, a ’toirt a-steach cothrom DAT anns an dà dhuine [18] agus luchainn [19]. Ach, dìreach o chionn ghoirid chaidh a shealltainn gu bheil leasachadh DIO ag atharrachadh ìre ath-ghabhail dopamine ann am radain [20]. Ged a sheall an sgrùdadh seo ath-ghlacadh dopamine le droch bhuaidh an dèidh dopamine a chaidh a chuir an gnìomh gu h-obann às deidh dìreach seachdainean 4 de HFD, chaidh na beathaichean a chaidh an cumail suas air HFD a thaghadh stèidhichte air cuideam tùsail agus mar sin dh ’fhaodadh iad sluagh sònraichte a riochdachadh. A ’cumail ris a’ bheachd seo, lean beathaichean HFD ag ithe barrachd chalaraidhean agus a ’faighinn barrachd cuideam an coimeas ri smachdan LFD. Thug sgrùdadh eile o chionn ghoirid cunntas air ath-ghlacadh dopamine le call às deidh seachdainean 12 de HFD ann am radain a-muigh [35]. Ach, bha eadar-dhealachaidhean mòra ann an cuideam bodhaig eadar na beathaichean a ’biadhadh HFD an aghaidh daithead àbhaisteach lab chow nuair a chaidh na tomhasan ath-ghabhail a dhèanamh. Mar sin, cha robh e soilleir a bheil easbhaidhean ann an ath-ghlacadh dopamine a ’nochdadh mar thoradh dìreach air, no ro-làimh, leasachadh DIO. An coimeas ris na h-aithisgean o chionn ghoirid seo, cha do lorg sinn eadar-dhealachaidhean sam bith ann an cuideam bodhaig no caitheamh kcal iomlan eadar na buidhnean daithead againn nuair a chaidh tomhas ath-ghabhail a dhèanamh. Gun do lorg sinn eadar-dhealachaidhean ann an ath-ghlacadh dopamine às deidh 6, ach chan e 2, tha seachdainean de HFD a ’moladh gu bheil atharrachaidhean a tha air am brosnachadh le daithead ann an ath-ghabhail dopamine mar fhreagairt do dh’ atharrachaidhean cronail, ach chan e acrach, ann an co-dhèanamh daithead. A bharrachd air an sin, tha na co-dhùnaidhean againn a ’moladh, an àite a bhith mar thoradh air reamhrachd, gum faodadh atharrachaidhean le daithead ann an DAT cur ri leasachadh a’ ghalair. Feumaidh sgrùdaidhean san àm ri teachd aghaidh a thoirt air co-dhiù a bheil àireamhan bheathaichean a tha buailteach eadar-dhealaichte bho DIO [34] tha eadar-dhealachaidhean preexisting ann an abairt / gnìomh DAT no tha iad eadar-dhealaichte buailteach atharrachaidhean ann an DAT a tha air am brosnachadh le daithead.

Gu ar n-eòlas, is e seo a ’chiad sgrùdadh a tha a’ sealltainn gu bheil HFD a ’lughdachadh freagairt dopamine gu cocaine. Leis gu bheil àite dopamine ann an duais dhrogaichean, tha na toraidhean againn co-chòrdail ri obair a rinneadh roimhe a ’sealltainn gu bheil radain a’ biathadh HFD airson timcheall air seachdainean 6 nas slaodaiche gus fèin-rianachd cocaine fhaighinn na bha beathaichean a ’biadhadh daithead smachd [36]. Gu cudromach, bha a ’bhuaidh seo cuideachd neo-eisimeileach bho leasachadh DIO. A bharrachd air an sin, tha radain a chaidh a briodadh gu roghnach airson a bhith buailteach do DIO a ’nochdadh roghainn àite cocaine nas ìsle, a’ moladh gu bheil na feartan buannachdail de chocaine air am briseadh anns na beathaichean sin [37]. Dh ’fhaodadh an fhreagairt lùghdaichte do chocaine a chunnaic sinn ann an radain HFD-6 wk a bhith mar thoradh air nas lugha de chothrom DAT striatal. Ach, bidh cocaine cuideachd a ’meudachadh soidhneadh dopamine tro uidheamachdan nach eil an urra ri DAT. Gu sònraichte, dh ’fhaodadh HFD a bhith air bacadh a thoirt air gluasad cocaine air a thoirt air falbh bho cheallan dopamine glèidhte [38]. Bidh cocaine cuideachd a ’daingneachadh sgaoileadh GABA gu neurons dopamine taobh a-staigh an VTA [39] agus a ’brosnachadh oscilidhean ann an ìre losgaidh cuirp cealla dopamine [40]. Dh'fhaodadh HFD buaidh a thoirt air gin de na pròiseasan sin no a h-uile gin dhiubh. Feumaidh rannsachadh san àm ri teachd aghaidh a thoirt air na h-uidheamachdan a tha mar bhunait air mar a bhios HFD ag atharrachadh taobhan buannachdail de chocaine agus / no a ’chomas airson atharrachaidhean neòil air adhbhrachadh le drogaichean [18]. Bidh caitheamh HFD a ’lughdachadh an dà chuid giùlan [41] agus freagairt dopamine [20], [42] gu amphetamine, a tha cuideachd a ’toirt buaidh air an DAT. Gu cudromach, cha bhith radain aig an robh HFD a chaidh a mhaidseadh gu caloric ri radain a bha a ’biadhadh daithead smachd a’ leasachadh DIO ach tha iad fhathast a ’fàilligeadh roghainn àite le amphetamine a leasachadh [41]. Còmhla ris an dàta a tha air a thaisbeanadh an seo, tha e coltach gu bheil caitheamh HFD a ’brùthadh an fhreagairt do psychostimulants. Bidh a h-uile droga de dhroch dhìol a ’toirt buaidh air an t-siostam dopamine, agus thathas den bheachd gu bheil àrdachadh air a bhrosnachadh le drogaichean de chomharran dopamine deatamach airson leasachadh tràilleachd [43]. Mar sin, tha an fhreagairt nas lugha air cocaine ann an radain HFD co-chòrdail ri aithisgean gu bheil cunnart fad-beatha mòran nas ìsle aig daoine reamhar airson eas-òrdugh ana-cleachdadh stuthan a leasachadh [44]. Feumaidh obair san àm ri teachd aghaidh a chur air a bheil ìre suimeil duais cocaine eadar-dhealaichte ann an daoine reamhar an coimeas ri smachdan cuideam àbhaisteach.

Tha ar mion-sgrùdadh blot an iar a ’moladh nach eil caitheamh fada de HFD a’ toirt buaidh air pròtain DAT striatal iomlan, ach an àite sin a ’lughdachadh amalachadh an isoform DAT neo-glycosylated 50 kDa DAT a-steach do memblan synaptosomal. Fhad ‘s a tha DAT glycosylation a’ leasachadh ìre còmhdhail dopamine agus a ’meudachadh seasmhachd uachdar buill [45], [46], [47], DAT neo-glycosylated bho dhaoine [45], [46] a bharrachd air radain [47] gu furasta a ’giùlan dopamine. A bharrachd air an sin, tha deuchainnean immunolabeling a ’nochdadh gu bheil ìrean DAT neo-glycosylated nas àirde anns an ventral an coimeas ri striatum dorsal an dà chuid ann am muncaidhean agus daoine [47]. Air an toirt còmhla, tha na sgrùdaidhean sin a ’moladh gum faodadh na h-ìrean lùghdaichte de 50 kDa DAT cur ris an easbhaidh ath-ghabhail a chunnaic sinn ann an radain 6 wk HFD. Tha an dàta againn co-chòrdail ri sgrùdadh roimhe a ’sealltainn caitheamh HFD a’ lughdachadh na tha ri fhaighinn de DAT ann an striatum ventral luchainn [19]. Ach, cha do thomhais an sgrùdadh seo sgìreachadh DAT ann an diofar roinnean intracellular. A bharrachd air an sin, tha na co-dhùnaidhean againn co-chòrdail ri sgrùdadh a ’sealltainn lughdachadh ann an uachdar cealla DAT ann an striatum radain DIO [20]. Thuirt an sgrùdadh seo cuideachd nach robh buaidh aig daithead anns a ’mhodal DIO air ìrean pròtain DAT iomlan. Bidh sinn a ’leudachadh an lorg seo gus sealltainn nach eil HFD a’ toirt buaidh air pròtain DAT iomlan ann am radain a-muigh. Mar sin, chan eil caitheamh fada de HFD ag atharrachadh abairt DAT, ach faodaidh e bacadh a chur air malairt DAT no aibidh.

Tha an dìth eadar-dhealachaidhean ann an ìrean VTA / SNpc DAT mRNA às deidh an dàrna cuid 2 no 6 wks de nochdadh HFD a ’toirt taic don bheachd nach robh buaidh aig ar làimhseachadh daithead air ìrean DAT iomlan. Tha an toradh seo eadar-dhealaichte le aithisg roimhe a ’sealltainn lughdachadh DAT mRNA ann an VTA na luchaige às deidh seachdainean 17 de chaitheamh HFD [12]. Ach, san sgrùdadh seo chaidh ìrean DAT mRNA a thomhas an dèidh dha na buidhnean daithead a bhith eadar-dhealaichte ann an cuideam bodhaig airson seachdainean 12. Mar sin, tha coltas ann gu bheil na toraidhean aca a ’riochdachadh atharrachaidhean ìre fadalach gu DIO. Ann an geàrr-chunntas, tha an dàta againn a ’toirt seachad fianais làidir gu bheil nochdadh do HFD a’ leantainn gu atharrachaidhean obrachail ann an ath-ghlacadh dopamine striatal le bhith a ’lughdachadh DAT co-cheangailte ri buill-bodhaig gun a bhith ag atharrachadh abairt DAT iomlan. Gu cudromach, tha sinn ag aithris gum faod aimhreitean a tha air an adhbhrachadh le daithead anns an DAT tachairt mus tòisich DIO, a ’moladh gum faodadh na h-atharrachaidhean sin cur ri leasachadh reamhrachd.

Tha an dàta againn a ’cur ri litreachas a tha a’ sìor fhàs a ’toirt buaidh air daithead ann an riaghladh gnìomh dopamine, agus a’ toirt seachad tuilleadh fianais gu bheil atharrachaidhean a tha air am brosnachadh le daithead ann an abairt DAT a ’leantainn gu atharrachaidhean buntainneach a thaobh gnìomh ann an comharrachadh dopamine. Tha atharrachaidhean a tha air am brosnachadh le daithead ann an dinamics soidhneadh dopamine striatal tron ​​DAT dualtach buaidh a thoirt air giùlan biadhaidh. Bidh brosnachaidhean co-cheangailte ri biadh a ’dùsgadh àrdachadh mean air mhean ann an dopamine striatal [9], [48], [49], a tha dualtach a bhith a ’daingneachadh agus a’ neartachadh gnìomhan air an stiùireadh le biadh [50]. An seo tha sinn a ’sealltainn gu bheil seachdainean 6 de chaitheamh HFD a’ leudachadh fad sgaoileadh dopamine mean air mhean le bhith a ’lughdachadh DAT co-cheangailte ri buill-bodhaig ann an sgìre den striatum far a bheil gnìomh dopamine deatamach airson toirt a-steach biadh [51]. Dh ’fhaodadh atharrachaidhean a tha an urra ri daithead ann an DAT a bhith a’ brosnachadh inneal toirt air adhart far am bi comharran dopamine fada a tha air am piobrachadh le brosnachadh bìdh a ’meudachadh gnìomhachd gabhadairean dopamine D1 striatal dàimh ìosal, a tha deatamach airson giùlan dòigh-obrach [52], [53], [54]. Thar ùine, dh ’fhaodadh àrdachadh fada de dopamine striatal atharrachaidhean a bhrosnachadh, leithid lughdachadh gabhadan dopamine D2 (D2R), a tha air a nochdadh an dà chuid ann am modalan reamhrachd daonna agus creimich [11], [33]. Tha an sgrùdadh againn a ’moladh nach eil leasachadh reamhrachd riatanach gus ath-ghlacadh dopamine atharrachadh. Mar sin, dh ’fhaodadh lùghdachaidhean co-cheangailte ri daithead ann an DAT membran a dhol ro agus a’ cur ri toiseach ìsleachadh D2R, reamhrachd, agus giùlan ithe èiginneach a bhios a ’leasachadh thar cùrsa caitheamh HFD [11].

Acknowledgments

Tha sinn airson taing a thoirt dha Drs. Jamie D. Roitman agus Seumas E. McCutcheon airson beachdan cuideachail air dreachan nas tràithe den làmh-sgrìobhainn. Tha susbaint a ’phàipeir seo an urra ris na h-ùghdaran a-mhàin agus chan eil sin gu riatanach a’ riochdachadh beachdan oifigeil an NIH no Co-bhanntachd Bith-mheidigeach Chicago.

Cuibhreannan Ùghdar

Chruthaich agus dhealbhaich na deuchainnean: JJC EHC MFR. Choilean e na deuchainnean: JJC DNP SRE. Mion-sgrùdadh air an dàta: JJC EHC SRE MFR. Sgrìobh am pàipear: JJC EHC MFR.

iomraidhean

  1. 1. Flegal KM, Carroll MD, Kit BK, Ogden CL (2012) Leithead reamhrachd agus gluasadan ann an cuairteachadh clàr-amais cuirp am measg inbhich na SA, 1999 - 2010. JAMA 307: 491 - 497.
  2. 2. Ogden CL, Carroll MD, Curtin LR, McDowell MA, Tabak CJ, et al. (2006) Tricead reamhar is reamhrachd anns na Stàitean Aonaichte, 1999 - 2004. JAMA 295: 1549 - 1555.
  3. Seall an artaigil
  4. PubMed / NCBI
  5. Google Scholar
  6. 3. Drewnowski A, Almiron-Roig E (2010) Beachdan Daonna agus Roghainnean airson Biadhan Saill. Ann an: Montmayeur JP, le Coutre J, luchd-deasachaidh. Dearbhadh geir: Blas, inneach, agus buaidhean post-gabhaltach, Caibideil 11. Boca Raton, FL: Clò CRC.
  7. Seall an artaigil
  8. PubMed / NCBI
  9. Google Scholar
  10. Seall an artaigil
  11. PubMed / NCBI
  12. Google Scholar
  13. Seall an artaigil
  14. PubMed / NCBI
  15. Google Scholar
  16. Seall an artaigil
  17. PubMed / NCBI
  18. Google Scholar
  19. Seall an artaigil
  20. PubMed / NCBI
  21. Google Scholar
  22. Seall an artaigil
  23. PubMed / NCBI
  24. Google Scholar
  25. Seall an artaigil
  26. PubMed / NCBI
  27. Google Scholar
  28. Seall an artaigil
  29. PubMed / NCBI
  30. Google Scholar
  31. Seall an artaigil
  32. PubMed / NCBI
  33. Google Scholar
  34. Seall an artaigil
  35. PubMed / NCBI
  36. Google Scholar
  37. Seall an artaigil
  38. PubMed / NCBI
  39. Google Scholar
  40. Seall an artaigil
  41. PubMed / NCBI
  42. Google Scholar
  43. Seall an artaigil
  44. PubMed / NCBI
  45. Google Scholar
  46. Seall an artaigil
  47. PubMed / NCBI
  48. Google Scholar
  49. Seall an artaigil
  50. PubMed / NCBI
  51. Google Scholar
  52. Seall an artaigil
  53. PubMed / NCBI
  54. Google Scholar
  55. Seall an artaigil
  56. PubMed / NCBI
  57. Google Scholar
  58. Seall an artaigil
  59. PubMed / NCBI
  60. Google Scholar
  61. Seall an artaigil
  62. PubMed / NCBI
  63. Google Scholar
  64. Seall an artaigil
  65. PubMed / NCBI
  66. Google Scholar
  67. Seall an artaigil
  68. PubMed / NCBI
  69. Google Scholar
  70. 4. Rolls BJ (2009) An dàimh eadar dùmhlachd lùth daithead agus lùth. Eòlas-cuirp & Giùlan 97: 609–15.
  71. 5. Ledikwe JH, Blanck HM, Kettel Khan L, Serdula MK, Seymour JD, et al. (2006) Tha dùmhlachd lùth daithead ceangailte ri toirt a-steach lùth agus inbhe cuideam ann an inbhich na SA. Iris Ameireagaidh de Bheathachadh Clionaigeach 83: 1362 - 8.
  72. Seall an artaigil
  73. PubMed / NCBI
  74. Google Scholar
  75. Seall an artaigil
  76. PubMed / NCBI
  77. Google Scholar
  78. Seall an artaigil
  79. PubMed / NCBI
  80. Google Scholar
  81. Seall an artaigil
  82. PubMed / NCBI
  83. Google Scholar
  84. Seall an artaigil
  85. PubMed / NCBI
  86. Google Scholar
  87. Seall an artaigil
  88. PubMed / NCBI
  89. Google Scholar
  90. Seall an artaigil
  91. PubMed / NCBI
  92. Google Scholar
  93. Seall an artaigil
  94. PubMed / NCBI
  95. Google Scholar
  96. Seall an artaigil
  97. PubMed / NCBI
  98. Google Scholar
  99. Seall an artaigil
  100. PubMed / NCBI
  101. Google Scholar
  102. Seall an artaigil
  103. PubMed / NCBI
  104. Google Scholar
  105. Seall an artaigil
  106. PubMed / NCBI
  107. Google Scholar
  108. Seall an artaigil
  109. PubMed / NCBI
  110. Google Scholar
  111. Seall an artaigil
  112. PubMed / NCBI
  113. Google Scholar
  114. Seall an artaigil
  115. PubMed / NCBI
  116. Google Scholar
  117. Seall an artaigil
  118. PubMed / NCBI
  119. Google Scholar
  120. Seall an artaigil
  121. PubMed / NCBI
  122. Google Scholar
  123. Seall an artaigil
  124. PubMed / NCBI
  125. Google Scholar
  126. Seall an artaigil
  127. PubMed / NCBI
  128. Google Scholar
  129. Seall an artaigil
  130. PubMed / NCBI
  131. Google Scholar
  132. Seall an artaigil
  133. PubMed / NCBI
  134. Google Scholar
  135. Seall an artaigil
  136. PubMed / NCBI
  137. Google Scholar
  138. Seall an artaigil
  139. PubMed / NCBI
  140. Google Scholar
  141. Seall an artaigil
  142. PubMed / NCBI
  143. Google Scholar
  144. Seall an artaigil
  145. PubMed / NCBI
  146. Google Scholar
  147. Seall an artaigil
  148. PubMed / NCBI
  149. Google Scholar
  150. Seall an artaigil
  151. PubMed / NCBI
  152. Google Scholar
  153. Seall an artaigil
  154. PubMed / NCBI
  155. Google Scholar
  156. 6. DM beag, Jones-Gotman M, Dagher A (2003) Tha sgaoileadh dopamine air a bhrosnachadh le biadhadh ann an striatum dorsal a ’ceangal ri ìrean tlachd bìdh ann an saor-thoilich daonna fallain. NeuroImage 19: 1709 - 1715.
  157. 7. Bassero V, Di Chiara G (1999) Freagairt eadar-dhealaichte air sgaoileadh dopamine gu brosnachaidhean bìdh ann an roinnean slige / cridhe niuclas accumbens. Neo-eòlas 89: 637 - 41.
  158. 8. Roitman MF, Wheeler RA, Wightman RM, Carelli RM (2008) Tha freagairtean ceimigeach fìor-ùine anns na nucleus accumbens ag eadar-dhealachadh brosnachaidhean buannachdail agus dùbhlanach. Neo-eòlas nàdair 11: 1376 - 7.
  159. 9. Brown HD, McCutcheon JE, Cone JJ, Ragozzino ME, Roitman MF (2011) Bidh duais bìdh bun-sgoile agus brosnachadh ro-innse duais a ’dùsgadh diofar phàtranan de chomharran dopamine ìre air feadh an striatum. Iris Eòrpach Neuroscience 34: 1997 - 2006.
  160. 10. Grabenhorst F, Rolls ET, Parris BA, d ’Souza AA (2010) Mar a tha an eanchainn a’ riochdachadh luach duais geir sa bheul. Cortex cerebral 20: 1082 - 91.
  161. 11. Johnson PM, Kenny PJ (2010) gabhadairean Dopamine D2 ann an dòs duais coltach ri tràilleachd agus ithe èigneachail ann am radain reamhar. Neo-eòlas nàdair 13: 635 - 41.
  162. 12. Vucetic Z, Carlin JL, Totoki K, Reyes TM (2012) Dì-riaghladh epigenetic den t-siostam dopamine ann an reamhrachd a tha air a bhrosnachadh le daithead. Iris neurochemistry 120: 891 - 84.
  163. 13. Stice E, Spoor S, Bohon C, Small DM (2008) Tha an dàimh eadar reamhrachd agus freagairt striatal blunted air biadh air a mhodaladh le allele TaqIA A1. Saidheans 322: 449 - 452.
  164. 14. Cragg SJ, Rice ME (2004) A ’dannsa seachad air an DAT aig synapse DA. Gluasadan ann an Neo-eòlas 27: 270 - 7.
  165. 15. Dreyer JK, Herrik KF, Berg RW, Hounsgaard JD (2010) Buaidh sgaoileadh dopamine ìre agus tonic air gnìomhachd gabhadain. Iris Neuroscience 30: 14273 - 83.
  166. 16. Figlewicz DP, Szot P, Chavez M, Woods SC, Veith RC (1994) Bidh insulin intraventricular a ’meudachadh mRNA còmhdhail dopamine ann an rad VTA / substantia nigra. Rannsachadh Brain 644: 331 - 4.
  167. 17. Mebel DM, Wong JC, Dong YJ, Borgland SL (2012) Bidh insulin anns an sgìre teasach ventral a ’lughdachadh biadhadh hedonic agus a’ cuir casg air dùmhlachd dopamine tro bhith ag ath-ghlacadh. Iris Eòrpach Neuroscience 36: 2336 - 46.
  168. 18. Chen PS, Yang YK, Yeh TL, Lee IH, Yao WJ, et al. (2008) Co-dhàimh eadar clàr-amais cuirp agus còmhdhail còmhdhail dopamine striatal ann an saor-thoilich fallain - sgrùdadh SPECT. NeuroImage 40: 275 - 9.
  169. 19. South T, Huang XF (2008) Bidh foillseachadh daithead àrd-geir a ’meudachadh gabhadair dopamine D2 agus a’ lughdachadh dùmhlachd ceangailteach gabhadair còmhdhail dopamine anns na nucleus accumbens agus caudate putamen de luchainn. Rannsachadh neurochemical 33: 598 - 605.
  170. 20. Speed ​​N, Saunders C, Davis AR, Owens WA, Matthies HJG, et al. (2011) Bidh soidhnichean Akt striatal maothaichte a ’cur dragh air homeostasis dopamine agus a’ meudachadh biadhadh. PloS aon 6: e25169.
  171. 21. Bidh Roitman MF, Wescott S, Cone JJ, McLane BP, Wolfe HR (2010) MSI-1436 a ’lughdachadh gabhail a-steach biadh cruaidh gun a bhith a’ toirt buaidh air gnìomhachd còmhdhail dopamine. Bith-cheimigeachd agus giùlan Pharmacology 97: 138 - 43.
  172. 22. Heien MLAV, Johnson MA, Wightman RM (2004) A ’fuasgladh neurotransmitters a lorgar le voltammetry cearcallach luath-scan. Ceimigeachd anailiseach 76: 5697 - 704.
  173. 23. Sinkala E, McCutcheon JE, Schuck MJ, Schmidt E, Roitman MF, et al. (2012) Calibration electrode le cealla sruthadh microfluidic airson voltammetry cearcallach luath-scan. Lab air chip 12: 2403 - 08.
  174. 24. Yorgason JT, España RA, Jones SR (2011) Boltammetry deamhain agus bathar-bog anailis: mion-sgrùdadh air atharrachaidhean air an adhbhrachadh le cocaine ann an comharrachadh dopamine a ’cleachdadh grunn cheumannan cinneachail. Iris de dhòighean neur-saidheans 202: 158 - 64.
  175. 25. Paxinos G, agus Franklin KBJ (2004) An eanchainn radan ann an co-chomharran stereotaxic. San Diego, CA: Clò Acadaimigeach.
  176. 26. Hallett PJ, Collins TL, Standaert DG, Dunah AW (2008) Bloigh bith-cheimiceach de stuth-eanchainn airson sgrùdaidhean air cuairteachadh gabhadan agus malairt dhaoine. Pròtacalan gnàthach ann am bòrd neuro-saidheans / deasachaidh, Jacqueline N. Crawley… [et al.] Caibideil 1: Aonad 1.16.
  177. 27. Meng SZ, Ozawa Y, Itoh M, Takashima S (1999) Atharraichean leasachaidh agus co-cheangailte ri aois ann an còmhdhail dopamine, agus gabhadairean dopamine D1 agus D2 ann an ganglia basal daonna. Rannsachadh Brain 843: 136 - 144.
  178. 28. Moll GH, Mehnert C, Inbhir Ùige M, Bock N, Rothenberger A, et al. (2000) Atharraichean co-cheangailte ri aois ann an dùmhlachd luchd-còmhdhail monoamine presynaptic ann an diofar roinnean den eanchainn radan bho bheatha òg òg gu deireadh aois inbheach. Rannsachadh eanchainn leasachaidh 119: 251 - 257.
  179. 29. Cruz-Muros I, Afonso-Oramas D, Abreu P, Perez-Delgado MM, Rodriguez M, et al. (2009) Buaidhean a tha a ’fàs nas sine air abairt còmhdhail dopamine agus uidheamachdan dìolaidh. Neurobiology of Aging 30: 973 - 986.
  180. 30. Badanich KA, Adler KJ, Kirstein CL (2006) Tha deugairean eadar-dhealaichte bho inbhich ann an roghainn àite le cocaine agus dopamine air a bhrosnachadh le cocaine anns an niuclas accumbens septi. Iris Eòrpach de Pharmacology 550: 95 - 106.
  181. 31. Jones SR, Garris PA, Kilts CD, Wightman RM (1995) Coimeas eadar gabhail dopamine ann an niuclas amygdaloid basolateral, caudate-putamen, agus niuclas accumbens an radan. Iris neurochemistry 64: 2581 - 9.
  182. 32. Rao A, Simmons D, Sorkin A (2011) Sgaoileadh subcellular eadar-dhealaichte de roinnean endosomal agus an neach-còmhdhail dopamine ann an neurons dopaminergic. Neo-eòlas molecular agus cealla 46: 148 - 58.
  183. 33. Wang GJ, Volkow ND, Thanos PK, Fowler JS (2009) Ìomhaigh de shlighean dopamine eanchainn: buaidh air tuigse reamhrachd. Iris de leigheas tràilleachd 3: 8 - 18.
  184. 34. Levin BE, Dunn-Meynell AA, Balkan B, Keesey RE (1997) Gintinn roghnach airson reamhrachd agus strì an aghaidh daithead ann an radain Sprague-Dawley. Iris Eòlas-inntinn Ameireagaidh 273: R725 - 730.
  185. 35. Morris JK, Bomhoff GL, Gorres BK, Davis VA, Kim J, et al. (2011) Tha strì an aghaidh insulin a ’toirt buaidh air gnìomh dopamine nigrostriatal. Neurology deuchainneach 231: 171 - 80.
  186. 36. Wellman PJ, Nation JR, Davis KW (2007) Milleadh air togail fèin-rianachd cocaine ann am radain air an cumail suas air daithead làn geir. Cungaidh-eòlas, bith-cheimigeachd, agus giùlan 88: 89 - 93.
  187. 37. Thanos PK, Kim R, Cho J, Michaelides M, Anderson BJ, et al. (2010) Sheall radain S5B a bha an aghaidh reamhrachd barrachd roghainn àite le cocaine na na radain OM a tha buailteach do reamhrachd. Eòlas-cuirp & giùlan 101: 713–8.
  188. 38. Venton BJ, Seipel AT, Phillips PEM, Wetsel WC, Gitler D, et al. (2006) Bidh cocaine a ’meudachadh sgaoileadh dopamine le bhith a’ gluasad amar tèarmann a tha an urra ri synapsin. Iris Neuroscience 26: 4901 - 04.
  189. 39. Steffenson SC, Taylor SR, Horton ML, Barber EN, Lyte LT (2008) Bidh cocaine a ’cuir casg air neurons dopamine anns an sgìre tegmenal ventral tro bhacadh cleachdadh-eisimeil de shianalan sodium mothachail air bholtadh GABA neurons. Iris Eòrpach Neuroscience 28: 2028 - 2040.
  190. 40. Shi WX, Pun CL, Zhou Y (2004) Bidh psychostimulants a ’brosnachadh oscilidhean tricead ìosal ann an gnìomhachd losgaidh neurons dopamine. Neuropsychopharmacology 29: 2160 - 2167.
  191. 41. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, et al. (2008) Le bhith a ’nochdadh ìrean àrda de gheir daithead a’ lughdachadh duais psychostimulant agus tionndadh dopamine mesolimbic anns an radan. Neo-eòlas giùlain 122: 1257 - 63.
  192. 42. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, et al. (2009) Easbhaidhean neurotransmission dopamine mesolimbic ann an reamhrachd daithead radan. Neo-eòlas 159: 1193 - 9.
  193. 43. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ (2006) Innealan Neartachaidh Tràilleachd: Dleastanas Ionnsachaidh is Cuimhne co-cheangailte ri Duais. Addiction 29: 565 - 598.
  194. 44. Sìm GE, Von Korff M, Saunders K, Miglioretti DL, Crane PK, et al. (2006) Comann eadar reamhrachd agus eas-òrdugh inntinn-inntinn ann an sluagh inbheach na SA. Tasglannan de Leigheas-inntinn Coitcheann 63: 824 - 30.
  195. 45. Torres GE, Carneiro A, Seamans K, Fiorentini C, Sweeney A, et al. (2003) Oligomerization agus malairt neach-còmhdhail dopamine daonna. Iris Ceimigeachd Bith-eòlasach 278: 2731 - 2739.
  196. 46. Li LB, Chen N, Ramamoorthy S, Chi L, Cui XN, et al. (2004) Dreuchd N-glycosylation ann an gnìomh agus malairt uachdar neach-còmhdhail dopamine daonna. Iris Ceimigeachd Bith-eòlasach 279: 21012 - 21020.
  197. 47. Afonso-Oramas D, Cruz-Muros I, de la Rosa DA, Abreu P, Giraldez T, et al. (2009) Tha glycosylation còmhdhail dopamine a ’buntainn ri so-leòntachd cheallan dopaminergic midbrain ann an galar parkinson. Neurobiology de ghalar 36: 494 - 508.
  198. 48. Roitman MF, Stuber GD, Phillips PEM, Wightman RM, Carelli RM (2004) Tha Dopamine ag obair mar mhoduladair subsecond de bhith a ’sireadh biadh. Iris Neuroscience 24: 1265 - 71.
  199. 49. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF (2012) Bidh cuisean ro-innseach ro-innseach a ’dùsgadh barrachd dopamine ceumnach na cuisean ro-innse saccharin. Synapse 66: 346 - 51.
  200. 50. Flagel SB, Clark JJ, Robinson TE, Mayo L, Czuj A, et al. (2011) Dreuchd roghnach airson dopamine ann an ionnsachadh brosnachaidh-duais. Nàdar 469: p53 - 7d.
  201. 51. Szczypka MS, Mandel RJ, Donahue BA, Snyder RO, Leff SE, et al. (1999) Bidh lìbhrigeadh gine viral gu roghnach ag ath-nuadhachadh biadhadh agus a ’cur casg air luchainn a tha gann de dopamine. Neuron 22: 167 - 78.
  202. 52. Di Ciano P, Cardinal RN, Cowell RA, Little SJ, Everitt BJ (2001) Com-pàirt eadar-dhealaichte de gabhadairean NMDA, AMPA / kainate, agus dopamine ann an cridhe niuclas accumbens ann a bhith a ’faighinn agus a’ coileanadh giùlan dòigh-obrach pavlovian. Iris Neuroscience 21: 9471 - 9477.
  203. 53. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PRL, Kay K, Thwin MT, et al. (2010) Riaghladh giùlan motair parkinsonian le smachd optogenetic air circuitry ganglia basal. Nàdar 466: 622 - 6.
  204. 54. Kravitz AV, Tye LD, Kreitzer AC (2012) Dreuchdan sònraichte airson neurons striatal slighe dìreach agus neo-dhìreach ann an daingneachadh. Neo-eòlas nàdair 15: 816 - 818.