Regulación estriatal de DeltaFosB, FosB e cFos durante a auto-administración e retirada de cocaína (2010)

J Neurochem. Manuscrito do autor; dispoñible en PMC Oct 1, 2011.
Publicado en forma definitiva editada como:
A versión editada definitiva deste editor está dispoñible en J Neurochem
Vexa outros artigos en PMC que cita o artigo publicado.

Abstracto

A exposición crónica ás drogas induce alteracións nos perfís de expresión xénica que se cre que subxacen ao desenvolvemento da adicción ás drogas. O presente estudo examinou a regulación da Fos-familia de factores de transcrición, específicamente cFos, FosB e ΔFosB, en subregiones estriais durante e despois da administración crónica de cocaína intravenosa en ratas autoadministradas e xugadas. Descubrimos que cFos, FosB e ΔFosB presentan patróns de expresión diferenciados rexional e temporalmente, cunha maior acumulación de proteína ΔFosB no núcleo accumbens (NAc) e no núcleo despois da administración crónica de cocaína, mentres que ΔFosB aumenta no caudado-putamen (CPu). similar con administración aguda ou crónica. En contraste, a tolerancia desenvolveuse para o ARNm inducido pola cocaína para BFosB en todas as subregiones estriaticas de 3 con administración crónica. A tolerancia tamén se desenvolveu para a expresión de FosB, especialmente no shell de NAc e no CPu. Curiosamente, a tolerancia á indución de cFos inducida pola cocaína dependía do control volátil da inxestión de cocaína en rexións ventral pero non dorsal, mentres que a regulación de FosB e ΔFosB era similar en animais de cocaína. Deste xeito, as neuroadaptacións mediadas por FOSB no CPu poden ocorrer máis cedo do que se pensaba coa iniciación do uso de cocaína por vía intravenosa e, xunto cunha maior acumulación de BFosB no NAc, poderían contribuír a incrementos relacionados coa adicción no comportamento que buscan a cocaína.

Palabras clave: cocaína, autoadministración, retirada, estriado, Fos

introdución

A exposición repetida a drogas adictivas produce neuroadaptacións en vías de recompensa cerebral que se cre que subxacen tanto no desenvolvemento do consumo compulsivo de drogas como na persistencia do desexo e da recaída no comportamento de procura de drogas na retirada. Moitas destas neuroadaptacións resultan da inducción de factores de transcrición e posterior regulación da expresión xénica, que poden ter efectos duradeiros sobre a estrutura e función neuronaisZhang et al. 2006). O factor de transcrición da familia Fos é de especial interese, xa que os membros desta familia mostran patróns de indución diferencial nas rexións estriaxias tras a exposición aguda e crónica á cocaína. Cando a cocaína é administrada agudamente de forma pasiva e non contingente (é dicir, por inxección intraperitoneal (IP)) aumenta cFos e ARNm e proteína FosB tanto no dorsal (caudado-putamen, CPu) e ventral (nucleus accumbens, NAc) estriado (Graybiel et al. 1990; Mozo et al. 1991; Esperanza et al. 1992), mentres que a tolerancia a esta resposta ocorre coa administración crónica pasiva (Esperanza et al. 1992, 1994; Alibhai et al. 2007). En contraste, os niveis estriatales de BFosB (35-37 kDa), unha variante de empalme truncada e estable da fosB xene, son elevados tras a exposición crónica pero non aguda da cocaína (Esperanza et al. 1994; Non et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997). Estas isoformas ΔFosB estables poden heterodimerizar con diferentes proteínas da familia xu que que cFos ou FosB (Chen et al. 1995), e tamén pode formar homodímeros funcionais consigo mesmos (Jorissen.) et al. 1997), o que suxire que a formación diferencial de complexos de proteínas activadoras-1 (AP-1) despois de cocaína crónica pode alterar a expresión xénica nos sitios AP-1 dun xeito distinto á expresión xénica producida pola exposición aguda á cocaína.Esperanza, 1998; Kelz e Nestler, 2000). Tamén ocorren cambios diferenciais nos perfís de expresión xénica dependendo de se as elevacións de BFosB son a curto prazo ou de longa duración, e estes cambios poden levar á expresión diferencial de comportamentos mediados por cocaína (McClung e Nestler, 2003). Exposición crónica a outras drogas incluíndo anfetamina, morfina,9O THC, a nicotina, o etanol e a fenciclidina tamén levan á acumulación de isoformas ΔFosB estables en rexións estriaxias (McClung et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Ademais, os descubrimentos recentes suxiren unha interacción negativa entre a acumulación de BFosB e os cFos inducidos por anfetaminas que poden explicar a tolerancia á indución de cFos atopada tras a exposición a estimulantes crónicos (Renthal et al. 2008). Xuntos, estes resultados levaron á hipótese de que as isoformas ΔFosB estables poden actuar como "interruptor molecular" e facilitar a transición do uso inicial de drogas a estados biolóxicos máis adictivos. (Nestlé et al. 2001; Nestler, 2008).

Aínda que a maioría dos estudos anteriores utilizaron tratamentos repetidos de cocaína pasiva para estudar a expresión das proteínas da familia Fos, e hai relativamente poucos exemplos desta regulación cando a cocaína é autoadministrada por vía intravenosa (IV) durante varias horas típicas dos patróns de abuso humano. Un estudo atopou que o ARNm cFos é elevado no CPu despois dunha soa sesión 30-min de auto-administración de cocaína en ratos (Kuzmin e Johansson, 1999), aínda que non se atoparon cambios no CPu de ratas despois de calquera sub-crónica ( 3 días) ou crónica (6-12 semanas) auto-administración de cocaína (Daunais) et al. 1993, 1995). Despois dun período de retirada, os aumentos mediados de cocaína na proteína cFos no NAc redúcense en ratas con ingesta previa de cocaínaBen-Shahar et al. 2004), mentres que os niveis elevados de cFos atópanse en todo o estriado tras a exposición a sinais asociados á cocaína (Neisewander et al. 2000; Kufahl et al. 2009). En contraste cos cFos, os niveis máis altos de proteínas de BFosB mostráronse en todo o estriado tras a autoadministración crónica da cocaína, e esta acumulación pode persistir polo menos no 1 día en que se retira.Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Non obstante, non hai informes que comparen cambios na capacidade de resposta de múltiples proteínas da familia Fos a esa administración intravenosa de cocaína con exposición aguda ou crónica. Dadas as posibles interaccións entre ΔFosB e cFos, a capacidade da formación de complexos AP-1 diferencial para producir efectos diferenciales na expresión xénica e o posible impacto destas diferenzas no comportamento mediado pola cocaína, tamén é importante confirmar que as alteracións no A expresión de cFos, FosB e ΔFosB que se producen despois da administración non contingente tamén se atopan cando a cocaína é autoadministrada voluntariamente e para determinar canto tempo estas alteracións poden persistir despois de que a administración de cocaína finalice. Polo tanto, no presente estudo comparamos os efectos da administración crónica de cocaína IV na expresión de BFosB, FosB e cFos en subregións estriais durante a administración e retirada de cocaína. Comparamos a regulación atopada coa autoadministración volitiva coa regulación en animais que reciben unha cantidade idéntica e un patrón temporal de cocaína a través de infusións non xenerosas despois da exposición aguda ou crónica. Tendo en conta que FosB e ΔFosB son variantes de empalme do mesmo fosB xene, tamén comparamos a regulación dos ARNm para FosB e ΔFosB coa regulación a nivel de proteína.

Procedementos experimentais

Temas e cirurxía

As ratas Sprague-Dawley de machos adultos que inicialmente pesaban aproximadamente 250-300 g estaban aloxados nun ambiente controlado por temperatura e humidade nun ciclo de luz-escuridade 12 h (acéndese en 7: 00 AM). Os animais foron alimentados con alimentos e auga ad libitum en todo momento, con excepción de que se mantiveron en 85% do seu peso de alimentación libre durante o adestramento de panca de sacarosa (45 mg, BioServ). O adestramento de prensa levouse a cabo en cámaras operantes ventiladas (Med Associates, Georgia, VT) ata que se cumpriron os criterios de adquisición (pellets 100 por sesión para sesións consecutivas 3) baixo un programa de reforzo de relación fixa 1 (FR1). A continuación alimentáronse os animais ad libitum durante polo menos 24 h antes da cirurxía. Para a cirurxía, en ratas recibiu atropina (0.04 mg / kg, subcutánea) para a respiración axudante e un catéter crónico permaneceu dentro da vara xugular dereita baixo anestesia de pentobarbital sódico (50 mg / kg, IP) segundo procedementos publicados anteriormente (Edwards et al. 2007a). Tras a cirurxía, as ratas recibiron unha inxección de penicilina (200,000 IU / kg intramuscular) para previr a infección e os catetos foron lavados diariamente con solución salina bacteriostática 0.2 ml (20 IU / ml) que contén sulfato de gentamycin (0.33 mg / ml). Todos os procedementos experimentais foron realizados de acordo co Instituto Nacional de Saúde Guía para o coidado e uso de animais de laboratorioe foron aprobados polo Comité de uso e uso dos animais institucionais do Southwestern Medical Center (IACUC) da UT Southwestern.

Procedementos de aparellos e autoadministración

Tras a recuperación da cirurxía de 1 wk, os animais dividíronse en varios grupos experimentais / tempo de retiradaFig. 1A), e volveu ás cámaras de proba operantes en sesións diarias como se describiu anteriormente (Edwards et al. 2007b). As ratas do grupo de control non tratado foron aloxadas soas e manipuladas diariamente nas súas gaiolas domésticas sen exposición ao ambiente de auto-administración. As ratas do grupo de auto-administración de cocaína (CSA) autorizáronse a autoadministración voluntaria de cocaína (infusión 0.5 mg / kg / 50 μl) baixo un programa de reforzo de relación fixa 1 (FR1) en sesións diarias de 4 h, días 6 conducidos / wk, para un total de 18 días. Cada palanca activa produciu unha infusión de cocaína de 2.5 que se asociou coa iluminación dunha luz sobre a panca activa. A luz da casa extinguiuse durante as infusións de cocaína, e houbo un período adicional de tempo de espera de 12.5 despois da infusión na que a luz da casa permaneceu fóra. A panca que respondía durante o período de infusión e tempo de espera foi rexistrada, pero non tivo ningunha consecuencia. Había unha palanca inactiva adicional nas cámaras, pero a resposta a esta panca era sen consecuencia. As ratas do grupo de yugo crónico (CY) estaban emparelladas con ratas que se autoadministraron activamente e recibían infusións pasivas de cocaína en cantidades e patróns temporais idénticos aos seus compañeiros de auto-administración. As ratas do xugo agudo (AY) do grupo tamén se emparellaron con ratas do grupo CSA crónico, pero recibiron infusións salinas pasivas no canto de cocaína ata o último día de autoadministración, cando recibiron unha soa sesión de infusións pasivas de cocaína para o primeiro tempo. Finalmente, permitíuselle ao grupo Saline SA autoadministrarse solución salina durante todo o tempo para identificar posibles cambios relacionados coa cirurxía, as probas ou outros procedementos experimentais en comparación cos controis non tratados. Utilizáronse comparacións entre os grupos AY e CY para identificar cambios na capacidade de resposta de cFos, FosB ou ΔFosB con exposición aguda e crónica á cocaína, mentres que os grupos CSA e CY foron comparados para identificar cambios na expresión cFos, FosB ou ΔFosB que eran específicamente relacionado cos efectos farmacolóxicos e gratificantes da cocaína. Os tecidos de todos os grupos de estudo recolléronse inmediatamente despois da última sesión de proba de 4 h para comparar a regulación inducida por cocaína de cFos, FosB e ΔFosB, e determinouse a persistencia de cambios inducidos pola cocaína para algúns grupos de estudo con tecido 24 h ou 3. tras a sesión de proba final. Os procedementos cuantitativos de western blot e RT-PCR utilizáronse para as diseccións de subregións estriaxicas para evitar os posibles problemas relacionados coa reactividade cruzada dos anticorpos e mellorar a sensibilidade para detectar cambios.

figura 1  

(A) Cronograma que amosa os réximes de administración e retirada de cocaína. As liñas sólidas indican a administración intravenosa de infusións de cocaína (0.5 mg / kg / infusión) en animais crónicos autoconsultados (CSA) e xugo (CY) para un total. ...

Colección de tecidos

As ratas sacrificáronse mediante irradiación de microondas dirixida á rexión principal (5 kW, 1.5 s, Murimachi Kikai, Tokio, Xapón). Os cerebros foron rapidamente disecados e arrefriados e os punzóns de tecido bilateral (capa 14) do núcleo accumbens (NAc), o núcleo NAc e caudate-putamen (CPu) obtivéronse a partir de cortes coronal 1.5 mm con base en coordenadas obtidas de Paxinos e Watson (1998, ilustrado en Imaxe 1B). As mostras de tecidos foron homoxeneizadas por sonicación en tampón de lise que contén inhibidores de proteasa e fosfatase. Os homoxenatos foron fervidos para 5 min, colocados no xeo e posteriormente ensaiado por Lowry para determinar as concentracións de proteínas. Os homoxenatos foron entón alícanos en mostras de 20 μg e almacenados a -80 ° C ata o seu uso.

Western Blot

As mostras de tecidos cargáronse en xeles de poliacrilamida% 12 para a súa separación por electroforese en solución salina tamponada con Tris / Glicina / dodecil sulfato sódico (TGS; Bio-Rad, Hercules, CA). Tras a separación, as mostras foron transferidas por electroforese (250 mA para 18 h) a membranas de fluoruro de polivinilideno (PVDF; Amersham, Piscataway, NJ) e posteriormente bloqueadas en leite seco 3% sen graxa e solución salina tamponada 1 × Tris / Tween (TTBS; Bio -Rad, Hercules, CA) durante a noite en 4 ° C. As membranas foron entón incubadas en 1: dilución 1000 do anticorpo primario Fra (proporcionada polo doutor Michael Iadarola, National Institutes of Health, Bethesda, MD) nunha solución de leite 3% / 1 × TTBS durante a noite a 4 ° C. As membranas foron lavadas en 1 × TTBS (veces 4, 15 min cada un), e incubados en 1 × TTBS que contén unha dilución 1: 25000 de anticorpo secundario de coello anti-coello conxugado con peroxidasa de rábano (Bio-Rad, Hercules, CA) para 1 h at room temperatura. As membranas foron lavadas de novo e logo desenvolvidas utilizando a detección quimioluminiscente mediada por Hyperfilm de Pierce Super Signal West Dura (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL) (ECL plus; Amersham). A localización das bandas de proteínas cFos, FosB e ΔFosB está ilustrada en Imaxe 1C. Escollemos examinar só as formas expresadas de BFosB (é dicir, 35-37 kDa) neste estudo, xa que se pensan que se acumulan con uso crónico de drogas e producen a neuroplasticidade que subxace á adicción (Nestlé et al. 2001). Scion Image (Frederick, MD) foi usada para asignar unha inmunorreactividade absoluta ás bandas, e usouse un escáner para tomar imaxes dixitais das películas. Despois da detección, as membranas foron despoxadas e probadas de novo para a β-tubulina (1: 200000, sinal de células, Danvers, MA). Os niveis de β-tubulina utilizáronse como control de carga para normalizar os niveis de proteínas relacionadas con Fos.

RT-PCR

Utilizouse RT-PCR cuantitativa (qRT-PCR) para determinar os cambios do ARNm FosB e ΔFosB inmediatamente e 24 h despois da administración de cocaína. Os animais foron eutanasiados por decapitación rápida e o núcleo de NAc, o shell NAc e CPu foron illados como se describiu (Graham et al. 2007; Bachtell et al. 2008). As mostras individuais homoxeneizáronse inmediatamente en RNA-STAT-60 (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswood, TX) e conxeláronse en xeo seco ata que se extraeu o ARNm segundo as instrucións do fabricante. En breve, engadiuse cloroformo a cada mostra e illouse a capa acuosa despois da centrifugación. O ARNm total precipitouse con isopropanol en presenza de acrilamida lineal (Ambion, Austin, TX). As mostras centrífugáronse e os gránulos de ARNm extraídos laváronse con etanol ao 70% e resuspendéronse en auga DEPC. O ARNm total tratouse coa ADNasa (Ambion, Foster City, CA) e transcribiuse inversamente a ADNc con hexámeros aleatorios usando o superíndice III (Invitrogen, Carlsbad, CA). As secuencias iniciais usadas para amplificar FosB, ΔFosB e gliceraldehído-3-fosfato deshidroxenase (GAPDH) foron 5′-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 ′ e 5′-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3 ′, 5′-AGGCAGAGCTGGAGGGAGGGTCGG ′, E 3′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-5 ′ e 3′-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-5 ′, respectivamente. Os limiares de ciclo (cT) calculáronse a partir de reaccións por triplicado usando a segunda derivada da curva de amplificación. Os valores de FosB e osFosB cT normalizáronse a valores de GAPDH cT (ΔcT) xa que GAPDH non estaba regulado pola cocaína. Os cambios de dobra calculáronse usando o método ΔΔcT como se describiu anteriormente (manual de Applied Biosystems).

Análise estatística

Os niveis de cada proteína expresáronse como% de cambio dos controis non tratados para cada rexión cerebral e punto de tempo, e os grupos de estudo comparáronse por análise de varianza unidireccional (ANOVA), co nivel de significación establecido en p <0.05. Os efectos globais foron seguidos de comparacións post-hoc mediante probas Fishers LSD. As correlacións entre a inxestión de cocaína e os cambios nos niveis de proteínas foron avaliadas mediante regresión lineal.

Resultados

Os animais do grupo CSA que se lles permitiu autoadministración de cocaína voluntariamente mostraron patróns estables de autoadministración de cocaína ata a terceira semana de SA (días 13-18). Durante a última semana de SA o consumo diario medio de cocaína en ratas CSA e os seus socios CY foi 46.9 (± 1.8) mg / kg / día (rango: 37-60 mg / kg / día). O último día da proba, as ratas CSA no grupo de retirada 0 h (WD) autoadministráronse 44.5 (± 2.5) mg / kg de cocaína (alcance 25.5-57.5 mg / kg) e unha cantidade idéntica de cocaína foi recibida polo seu CY e socios AY.

Regulación diferencial da proteína BFosB en subregiones estriadas tras cocaína aguda ou crónica

Atopouse unha regulación diferencial da proteína BFosB en subregiones estriaxias inmediatamente despois de 4 h de administración intravenosa de cocaína (0 h WD). No shell de NAc, só a cocaína crónica produciu aumentos significativos nos grupos CSA e CY (45-61%) en comparación cos controis non tratados (Fig. 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005). No núcleo NAc, atopáronse aumentos significativos de ΔFosB (41%) tras unha exposición aguda no grupo AY (Fig. 2B, F4,60 = 17.04, p <0.001), e aumentos aínda maiores (89-95%) atopáronse despois da cocaína crónica. En contraste coa maior acumulación de osFosB no NAc con administración crónica de cocaína, o CPu mostrou aumentos similares en osFosB (86-102%) tanto en grupos de cocaína aguda como crónica (Fig. 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001). Non houbo diferenza nos aumentos de osFosB entre os grupos CSA e CY en calquera subrexión estriada, o que indica que a regulación estaba relacionada coa exposición á cocaína, independentemente do consumo volitivo de cocaína. A regulación de osFosB persistiu durante polo menos 24 horas despois da cocaína crónica na casca NAc (F2,32 = 5.19, p = 0.02), núcleo NAcF4,60 = 4.53, p = 0.02) e CPu (F2,34 = 12.13, p <0.001), pero volveu aos niveis de base despois de 3 semanas. Atopáronse aumentos similares en osFosB cando se compararon os grupos de cocaína co grupo Saline SA, agás que os aumentos menores na casca NAc dos animais AY acadaron importancia cando se comparan con Saline SA, pero non cos controis sen tratar. Non obstante, non houbo unha regulación significativa de osFosB en animais que se autoadministraron solución salina durante todo o adestramento en comparación con controis non tratados, o que indica que a regulación de osFosB debeuse á cocaína e non a un resultado dos procedementos cirúrxicos ou de proba.

figura 2  

Regulación de BFosB inmediatamente despois da administración de cocaína e en 24 h e 3 semanas WD. Os niveis de FosB (35-37 kDa) exprésanse como a media ± cambio de porcentaxe SEM dos controis de homecage non tratados (Control). Tecido de solución salina ...

Tolerancia á regulación da proteína FosB tras a cocaína crónica

En contraste coa regulación de BFosB, unha soa exposición a 4 h de administración de cocaína IV produciu aumentos substancialmente maiores na proteína FosB en todas as subregiones estriaticas de 3, pero unha tolerancia substancial nesta resposta desenvolveuse despois da administración crónica de cocaína. No shell de NAc, o FosB aumentou (260%) inmediatamente despois de 4 h de administración aguda de cocaína en animais AY, pero estes aumentos reducíronse (ata 142-146%) despois da administración crónica en grupos CY e CSA (Fig. 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001). Atopáronse aumentos similares en FosB (295%) no CPu de animais AA que tamén se reduciron (a 135-159%) despois da administración crónica de cocaína en grupos CY e CSA (Fig. 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001). No núcleo de NAc, a administración aguda de cocaína produciu aumentos menos substanciais en FosB (164%) en animais AY en comparación coas outras rexións cerebrais; con todo, estes aumentos foron aínda maiores que os producidos despois da administración crónica (109-112-%) nos grupos CY e CSA (Fig. 3B, F4,57 = 20.23, p <0.001). Como se atopou con osFosB, a regulación de FosB despois da cocaína crónica non foi modulada polo control volitivo da inxestión de cocaína. Non obstante, a diferenza do osFosB, os aumentos de proteína FosB non persistiron tanto na capa como no núcleo de NAc despois de 24 h, aínda que os aumentos residuais (38-52%) persistiron na CPu (F2,32 = 3.590, p <0.05). Os niveis de FosB non se viron afectados por procedementos cirúrxicos nin por probas en animais salinos que se autoadministraron.

figura 3  

Regulación de FosB inmediatamente despois da administración de cocaína e en 24 h e 3 semanas WD. Os niveis de proteínas de FosB (46-50 kDa) exprésanse como a media ± cambio de porcentaxe do SEM cos controis de homecage non tratados (ver figura 2 lenda para abreviaturas) ...

Atenuación da inducción do ARNm de BFosB e FosB logo de cocaína crónica

A exposición aguda a 4 h de administración de cocaína por vía intravenosa produciu aumentos similares (11-16 fold) en ΔFosB mRNA na NAc shell (F3,19 = 15.82, p <0.001), núcleo NAc (F3,19 = 13.275, p <0.001 e CPu (F3,11 = 5.78, p = 0.03) cando se compara cos controis Saline SA (0 h WD, Fig. 4A). Non obstante, esta resposta foi fuertemente suprimida en grupos CY e CSA tras a administración crónica de cocaína no shell de NAc (3-4 fold), NAc core (4 fold) e CPu (3 fold). A pesar de que a administración aguda de cocaína IV produciu aumentos maiores na proteína FosB en relación a ΔFosB, a administración aguda de cocaína induciu aumentos relativamente máis baixos no ARNm para o FosB (dobra 4-9) que para o osFosB (dobra 11-16) en todas as subregións striatal 3 (Fig. 4B). Esta resposta foi prácticamente abolida tras a cocaína crónica na cuncha de NAcF3,19 = 26.22, p <0.001) e CPu (F3,11 = 4.24, p <0.05), aínda que aumentos pequenos pero significativos (2 veces) permaneceron nos grupos CY e CSA no núcleo de NAc (F3,19 = 11.10, p <0.001). Os aumentos inducidos por cocaína tanto en osFosB como en FosB en animais AY non se retiveron despois das 24 h WD cando se compararon con este mesmo grupo control Saline SA. Unha análise adicional da relación dos niveis de ARNm de FosB a toFosB no punto de tempo de 0 h WD mostrou que a administración de cocaína reduciu notablemente a cantidade relativa de FosB a ARNm de osFosB na capa NAc (F3,19 = 4.79, p = 0.02), núcleo NAcF3,19 = 4.49, p = 0.02) e CPu (F3,11 = 5.59, p = 0.03) debido á maior formación da isoforma ΔFosB e independentemente da tolerancia substancial á resposta inducida pola cocaína en ambos mRNA despois da administración crónica (Fig. 4C). Non houbo diferenzas significativas nestas relacións se a cocaína se autoadministrou ou recibiu pasivamente a infusión con xugo, e as relacións relativas de FosB: ΔFosB volveu á normalidade nas tres rexións cerebrais co punto de tempo 24h WD (datos non mostrados).

figura 4  

Regulación do ARNm para FosB e BFosB inmediatamente despois da administración de cocaína e en 24 h WD. RT-PCR cuantitativa das transcricións para ΔFosB (A), FosB (B) e a relación FosB / ΔFosB transcritas (C) exprésanse como media ± ...

Tolerancia relacionada co reforzo de cFos inducidos pola cocaína no NAc

En contraste coa regulación dos produtos xenéticos FosB que representaban unha resposta farmacolóxica á cocaína, independentemente da administración pasiva ou volitiva, a regulación de cFos nas subregións NAc estaba fortemente influenciada polo contexto da autoadministración da cocaína en comparación con animais que recibían cocaína por infusións pasivas de xugo. A exposición á cocaína aumentou os niveis de proteína cFos (109-126%) tanto no núcleo de NAc como no núcleo con administración aguda ou crónica en grupos AY e CYFig. 5A-B). Non obstante, cando as infusións de cocaína se entregaron de xeito contingente de resposta en animais que se autoadministraron, esta resposta foi reducida (a 55%) na cuncha de NAc (F4,60 = 9.14, p <0.001) e non conseguiu aumentar significativamente os cFos no núcleo de NAc (F4,57 = 5.92, p <0.001). Na CPu, a tolerancia aos cFos inducidos pola cocaína desenvolveuse coa administración pasiva crónica ou volicional de cocaína (Fig. 5C), e reduciuse a inducción de cFos en animais AY (164%) (a 45-57%) en grupos CY e CSA (F4,67 = 13.29, p <0.001), similar ao desenvolvemento da tolerancia na indución da proteína FosB nas 3 subrexións estriais. Así, a tolerancia relacionada co reforzo aos cFos inducidos pola cocaína produciuse especificamente nas rexións mesolímbicas do estriado. Nas 3 rexións estriais, non se atoparon aumentos de cFos en animais salinos que se autoadministraron e non persistiron despois das 24 h WD.

figura 5  

Regulación de cFos inmediatamente despois da administración de cocaína e en 24 h WD. Niveis de proteínas de cFos (52-58 kDa) en ratas de control (Control, SA Salina), en ratas que recibiron cocaína pasiva de xugo aguda (AY) ou crónica (CY), e en ratas que foron sometidas a ...

Relación entre o consumo de cocaína, cFos e ΔFosB en subregións de estriado

Dado que as cantidades de autoadministración de cocaína varían entre animais individuais e os seus socios xugados, comparamos a cantidade de inxestión de cocaína coa indución de niveis de proteína cFos, FosB e ΔFosB por múltiples análises de regresión lineal (ver Táboa suplementaria 1 para os resultados de todas as correlacións potenciais). Houbo correlacións significativas entre o consumo de cocaína e os niveis de cFos en ratas que recibiron administración aguda de cocaína por infusións pasivas, e estas relacións diferían nas subregións estratales dorsal e ventral. No núcleo de NAc, a inducción de cFos inmediatamente despois de 4 h de administración aguda de cocaína IV foi correlacionada fuertemente e negativamente coa inxestión de cocaína, mentres que unha relación similar pero insignificante atopouse na cuncha de NAc (Fig 6). En contraste, a inducción de cFos foi correlacionada positivamente co consumo de cocaína no CPu. Non houbo correlacións significativas entre o consumo de cocaína (activo ou pasivo) e os niveis de proteína de FosB ou ΔFosB en calquera subregión estriatal. Non obstante, houbo unha forte correlación positiva entre os niveis de cFos e ΔFosB na cáscara NAc 24 h logo de cocaína, pero só en animais que recibiron cocaína a través da auto-administración volitiva (Fig 7), e a pesar de que os niveis globais de cFos non se alteraron en 24 h WD. Tendencias similares (p <0.07) para correlacións positivas entre os niveis de proteínas cFos e osFosB atopáronse inmediatamente despois de 4 h de autoadministración de cocaína no núcleo de NAc e no CPu de animais que recibían cocaína por primeira vez (grupo AY).

figura 6  

Correlación específica da rexión entre a inxestión de cocaína e a inmunorreactividade de cFos tras a cocaína aguda (AY). O aumento por cento na inmunorreactividade de cFos está negativamente relacionado co consumo de cocaína na sesión final no núcleo de NAc (A) e está correlacionado positivamente ...
figura 7  

Correlación significativa entre cFos e ΔFosB no shell NAc en animais autoadministrados. O aumento por cento na inmunorreactividade de cFos está correlacionado positivamente coa inmunorreactividade BFosB despois de 24 h WD na auto-administración de cocaína ...

Conversa

No presente estudo examinamos os efectos da exposición intravenosa aguda e crónica á cocaína ou a auto-administración crónica na regulación dos niveis de BFosB, FosB e cFos nas subregións NAc shell, NAc core e CPu. Os estudos anteriores atoparon de xeito consistente que ΔFosB só aumenta tras unha exposición repetida, e non despois da administración aguda de cocaína usando inxeccións de cocaína IP pasivas (Esperanza et al. 1994, Non et al. 1995; Chen et al. 1995). Do mesmo xeito, descubrimos que a exposición crónica a cocaína IV aumentaba ΔFosB en todas as subregións estriaxicas examinadas, independentemente de se se administrase de xeito volitivo ou pasivo. Non obstante, unha das principais diferenzas cos estudos anteriores é que a administración aguda de cocaína aumentou os niveis de proteína ΔFosB tanto no núcleo de NAc como no CPu, e aproximouse a importancia na cuncha de NAc (p <0.1). Unha posible explicación desta diferenza pode ser a dose e / ou a duración da exposición á cocaína, xa que as ratas do grupo AY recibiron múltiples infusións de cocaína IV durante a sesión única de 4 h, o que provocou a inxestión total de cocaína que oscilou entre os 25.5 e os 57.5 ​​mg / kg. animais individuais, que superan amplamente as doses de 10-20 mg / kg normalmente empregados cunha inxección IP de bolo único (Esperanza et al. 1994; Sotavento et al. 2006). Ademais, a cocaína administrouse a través dunha vía de administración IV máis directa que produce niveis cerebrais máis altos de cocaína e dopamina que persisten ao longo da sesión, mentres que estes efectos normalmente diminúen nunha hora despois da inxección IP.Bradberry, 2002). Así, a capacidade de BFosB de acumularse despois dunha exposición aguda única á cocaína depende probablemente da forza e da duración do estímulo da cocaína utilizado no presente estudo. En calquera caso, a conclusión de que ΔFosB pode acumularse tras unha única exposición á cocaína indica que ΔFosB podería exercer os seus efectos máis rapidamente do que se pensaba, posiblemente resultando dun borracho inicial de autoadministración.

Curiosamente, a cantidade de acumulación de FosB difería entre as rexións striatal dorsal e ventral no transcurso da administración crónica de cocaína. No núcleo de NAc, a cantidade de BFosB atopada inmediatamente despois do último día de administración crónica (0 h WD) foi máis que o dobre da cantidade que se atopou tras a administración aguda e un aumento de ΔFosB máis pequeno no shell NAc só alcanzou importancia despois da administración crónica. , independentemente de se a cocaína se autoadministrou ou se recibiu por infusión pasiva de xugo. Os aumentos coa administración crónica de cocaína probablemente reflicten a acumulación de proteína BFosB altamente estable xa que persistiron durante polo menos 24 horas despois da última exposición. En contraste, grandes aumentos na cantidade de inFosB no CPu non se diferenciáronse da exposición aguda ou crónica, reflectindo potencialmente un teito producido pola exposición aguda nesta rexión cerebral. Non obstante, mesmo no CPu, a acumulación de proteína BFosB probablemente contribuíu aos niveis persistentes de ΔFosB despois da exposición crónica, xa que se desenvolveu unha tolerancia substancial ao mRNA inducido por cocaína para ΔFosB en todas as rexións cerebrais 3 con administración crónica.

A administración aguda de cocaína IV tamén aumentou os niveis de proteína FosB de lonxitude completa, con maiores aumentos na capa CPu e NAc que no núcleo NAc. Non obstante, o ARNm para FosB foi inducido por case 10 veces na capa NAc e menos de 5 veces no núcleo CPu e NAc. Desenvolveuse unha tolerancia substancial ata a capacidade da cocaína para inducir tanto ARNm como proteínas para FosB con administración crónica, aínda que se mantivo unha menor indución de proteína FosB e podería competir con osFosB por socios de unión a AP-1. A proporción relativa de ARNm de FosB / ΔFosB tamén se reduciu pola administración aguda de cocaína debido á indución relativamente maior de osFosB, de conformidade cos informes anteriores sobre anfetamina (Alibhai et al. 2007). En contraste cos resultados anteriores con tratamentos repetidos de anfetaminas, a redución na proporción relativa do ARNm de FosB / BFosB por cocaína aguda permaneceu despois da administración crónica, o que reflicte a relativamente maior inducción residual de BFosB que FosB.

O feito de que os niveis de FosB aumenten despois de que a cocaína aguda incluso empregase patróns e a duración da administración máis típica do uso de drogas intravenosas humanas ten implicacións importantes para o proceso de dependencia. Así, ΔFosB podería contribuír á actividade de unión de AP-1 co uso inicial de cocaína se se administraron doses adecuadas. Non obstante, ΔFosB competiría tanto con FosB como con cFos para a actividade de unión a AP-1, conducindo á expresión xénica e á neuroplasticidade descendente distinta da administración crónica cando ΔFosB é elevado con cFos e FosB substancialmente reducidos. Por iso, ΔFosB pode ter maiores efectos tras a administración crónica de cocaína debido á maior acumulación no estriado ventral e á diminución da competencia para os socios vinculantes de AP-1 en dorsal e ventral. Tendo en conta que a sobre-expresión específica de alFosB específica para o estriado aumenta a motivación para a cocaína (Colby et al. 2003), unha acumulación tan rápida de BFosB coa exposición inicial á cocaína pode perpetuar o uso de cocaína en etapas moi tempranas do proceso de adicción. Ademais, tal expresión andFosB prominente e xeneralizada en todo o estriado con exposición aguda alteraría a actividade de unión de AP-1 dun xeito que podería facilitar a formación de hábitos compulsivos a través do inicio precoz de circuítos dorsais.Belin e Everitt, 2008).

Tendo en conta a estabilidade das isoformas BFosB, os niveis de ΔFosB permaneceron notablemente elevados horas 24 logo da última sesión de administración de cocaína, consistente con estudos anteriores que utilizaron administración de cocaína intravenosa crónica (Pich et al. 1997; Perotti et al. 2008). Outros estudos que utilizaron a administración de experimentadores pasivos de inxeccións de cocaína en IP atoparon que a acumulación de BFosB pode persistir para as semanas 1-2 de retirada (Esperanza et al. 1994; Brenhouse e Stellar, 2006; Sotavento et al. 2006), aínda que non atopamos ningunha evidencia destes cambios 3 semanas despois do cesamento da administración de cocaína. Xuntos, estes estudos suxiren que a acumulación de osFosB pode persistir durante períodos de retirada relativamente curtos (<3 semanas) e contribuír directamente ao consumo continuo de cocaína, pero pode non contribuír directamente a unha maior propensión á recaída na retirada prolongada. Non obstante, detectouse a inmunorreactividade ΔFosB en neuronas estriais que conteñen receptor D1 despois de 30 días de retirada da cocaína repetida en ratos (Sotavento et al. 2006). Esta mostraxe específica de células pode ser máis sensible á acumulación BFosB residual que a análise de tecidos enteiro utilizada no presente estudo, ou quizais os cambios de ΔFosB só persisten máis en ratos que en ratas. Tamén é posible que ΔFosB induza unha cascada de eventos transcricionais que levan a cambios morfolóxicos de longa duración, como a formación de espina dendrítica nas neuronas estriais que conteñen D1 (Sotavento et al. 2006; Labirinto et al. 2010). A este respecto, varios obxectivos de FosB incluíndo Cdk5 e NFκB aumentan tras a cocaína crónica, e estes factores poden modificar o circuíto do núcleo accumbens a través de cambios na estrutura e / ou función neuronal (Ang et al. 2001; Benavides e Bibb, 2004; Nestler, 2008). Así, é posible que a acumulación de ΔFosB sostida durante a retirada non sexa necesaria para o seu impacto duradeiro no futuro comportamento da toma de drogas ou na procura, pero pode representar un "interruptor molecular" que desencadea múltiples procesos celulares que facilitan a transición cara a máis estados biolóxicos adictos (Nestlé et al. 2001).

TO presente estudo atopou que a acumulación de osFosB mediada por cocaína non está influenciada polo control volitivo da inxestión de cocaína en animais que se autoadministran de acordo con estudos anteriores utilizando procedementos inmunohistoquímicos e múltiples drogas de abuso. (Perotti et al. 2008; Pich et al. 1997). Isto indica que os incrementos inducidos pola cocaína en BFosB e FosB probablemente están relacionados coa resposta farmacolóxica á cocaína ou a outros eventos de sinalización de receptores monoaminérxicos. En contraste con ΔFosB, descubrimos que o desenvolvemento da tolerancia aos cFos inducidos pola cocaína foi influenciado substancialmente polo control volitorio do consumo de cocaína no NAc, pero non no CPu. Así, a tolerancia aos cFos inducidos pola cocaína no NAc non se produciu en animais que recibiron cocaína de forma pasiva por infusión crónica con xugo en comparación coa infusión de xugo agudo. Estes descubrimentos difieren notablemente de numerosos informes de tolerancia a cFos inducidos por psicoestimulantes no NAc cando as drogas son administradas por inxección pasiva de IP.Esperanza et al. 1994; Non et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997; Alibhai et al. 2007). Tendo en conta que a tolerancia aos cFos en animais autoadministradores de cocaína é paralela a varios estudos con inxeccións repetidas de IP, a falta de tolerancia coa administración crónica por vía intravenosa pode estar relacionada co estrés asociado a múltiples e imprevisibles inxeccións de cocaína.Goeders 1997). A perda de tolerancia no estrato ventral no canto do dorsal sería consistente cun efecto selectivo nos circuítos límbicos implicados nas respostas motivacionais e emocionais. Ademais, mentres que a tolerancia á inducción de cFos ocorreu en animais que se autoadministraron cocaína, permaneceu un aumento substancial de ∼50% na proteína cFos no shell de NAc inmediatamente despois da súa sesión de autoadministración final e unha tendencia (p <0.1) para os incrementos de cFos tamén se produciron no núcleo. As razóns para esta discrepancia probablemente reflicten diferenzas entre a inxección IP e varias infusións IV durante un período de 4 h como se comentou anteriormente. A indución residual de cFos no NAc despois da autoadministración crónica de cocaína é un descubrimento novidoso que obriga a reconsiderar o seu papel no proceso de adicción, polo cal os complexos AP-1 que conteñen cFos, ΔFosB e FosB coexistirían ata certo punto despois da exposición crónica .

Dada a recente evidencia de que a cFos está directamente regulada por baixo da acumulación de BFosB no estriado dorsal (Renthal et al. 2008), é interesante que os cFos inducidos pola cocaína no CPu estivesen paralelos cos aumentos de ΔFosB con exposición aguda á cocaína. Unha posibilidade é que a acumulación de BFosB con administración aguda ocorre demasiado tarde na sesión 4 h para afectar a inducción de cFos, mentres que a súa presenza 24 h despois de cocaína en animais tratados crónicamente impide a inducción de cFos coa posterior exposición á cocaína. Esta idea é consistente cunha tendencia (p = 0.067) para unha correlación positiva moderada entre os niveis de cFos e ΔFosB no CPu coa administración aguda de cocaína (0 h WD). Esta noción tamén é consistente coa forte correlación positiva entre a inducción de cFos ea inxestión de cocaína no CPu de animais agudos agudos. Estes descubrimentos suxiren que, do mesmo xeito que o ΔFosB, a resposta de cFos pode reflectir a dose de cocaína que se recibiu. Non obstante, no NAc, a maior acumulación de ΔFosB coa administración de cocaína xugo non pode explicar a falta de tolerancia na resposta de cFos nestes animais. Ademais, aínda que a tolerancia á indución de cFos era evidente nos animais que se autoadministraron, a forte correlación positiva entre os cFos residuais e os niveis de BFosB na cáscara NAc despois da retirada de 24 non soporta unha interacción negativa entre cFos e ΔFosB no estriado ventral. Outra diferenza cos datos do CPu é que cFos no núcleo de NAc correlacionáronse negativamente con respecto á ingesta de cocaína inmediatamente despois da administración aguda de cocaína, o que podería reflectir unha taquifilaxia dentro da sesión que ocorre cunha exposición máis elevada á dose no estriado ventral.

En xeral, os resultados do presente estudo indican que cFos, FosB e ΔFosB sofren distintos patróns rexionais de expresión tras unha administración aguda e crónica de cocaína intravenosa. Estes patróns de expresión dependen exclusivamente da duración e da cantidade de exposición á droga, e a tolerancia aos cFos inducidos pola cocaína é altamente dependente da auto-administración volátil da cocaína. Os resultados tamén mostran que ΔFosB pode acumularse con administración de cocaína aguda e crónica mediante inxección intravenosa, apoiando a idea de que a acumulación de BFosB pode ser importante nos primeiros procesos que promoven un aumento do comportamento que busca a cocaína e contribúe ao desenvolvemento da adicción á cocaína. En última instancia, será importante entender como ΔFosB pode influír indirectamente no desexo persistente de drogas na retirada a través de influencias relativamente a curto prazo na expresión xénica durante o uso de cocaína e períodos de retirada precoz. Os esforzos para identificar os distintos obxectivos posteriores e os seus efectos sobre a morfoloxía e / ou función neuronal acabarán por aclarar o papel de BFosB e outros antígenos relacionados con Fos na expresión dun comportamento adictivo.

Material complementario

Táboa de apoio S1

Táboa suplementaria 1. Resultados de correlación global para análises regresionais lineais. Os tres paneis esquerda conteñen correlacións entre a inxestión de cocaína e os niveis de cFos (panel superior), FosB (panel central) ou ΔFosB (panel inferior). Os tres paneis da dereita conteñen correlacións entre cFos e ΔFosB (panel superior), cFos e FosB (panel central) e FosB e ΔFosB (panel inferior). As rexións cerebrais relativas e os puntos de tempo WD móstranse para cada análise individual, xunto cos valores r- e p correspondentes. * p <0.05, T0.1> p> 0.05.

Grazas

Os autores non declaran conflitos de interese respecto de este traballo. Este traballo foi apoiado por NIH becas DA 10460 e DA 08227 e pola cátedra Wesley Gilliland en Investigación Biomédica.

Abreviaturas usadas

  • CPU
  • caudado-putamen
  • NAc
  • núcleo accumbens
  • AY
  • xugo agudo
  • CY
  • xugo crónico
  • CSA
  • auto-administración de cocaína
  • WD
  • retirada
  • IV
  • intravenoso
  • IP
  • intraperitoneal.

References

  • Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ. Regulación de fosB FosB expresión do ARNm: estudos in vivo e in vitro. Res. Cerebral. 2007; 1143: 22-33. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Ang E, Chen J, P Zagouras, Magna H, Holanda J, E Schaeffer, EJ Nestler. Indución do factor nuclear-κB no núcleo accumbens por administración crónica de cocaína. J Neurochem. 2001; 79: 221-224. [PubMed]
  • Bachtell RK, Choi KH, Simmons DL, Falcon E, Monteggia LM, Neve LN, Self DW. O papel da expresión GluR1 no núcleo incorpora neuronas na sensibilización da cocaína e no comportamento que busca a cocaína. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2229-2240. [PubMed]
  • Belin D, Everitt BJ. Os hábitos de procura de cocaína dependen da conectividade serie dependente de dopamina que une o ventre co estriado dorsal. Neurona. 2008; 57: 432-441. [PubMed]
  • Benavides DR, Bibb JA. Papel do Cdk5 no abuso de drogas e na plasticidade. Ann NY Acad Sci USA. 2004; 1025: 335-344. [PubMed]
  • Ben-Shahar O, Ahmed SH, Koob GF, Ettenberg A. A transición do uso de drogas controladas a compulsiva está asociada a unha perda de sensibilización. Res. Cerebral. 2004; 995: 46-54. [PubMed]
  • Bradberry CW. Dinámica da dopamina extracelular nas accións agudas e crónicas da cocaína. Neurocientífico. 2002; 8: 315-322. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos e ΔFosB son alterados diferencialmente en distintas subregiones do núcleo accumbens shell en ratas sensibilizadas por cocaína. Behav Neurosci. 2006; 137: 773-780. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulación das proteínas proteFosB e FosB por tratamentos electroconvulsivos e tratamentos de cocaína. Mol Pharmacol. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Antígenos relacionados con Fos crónicos: variantes estables de BFosB inducidas no cerebro por tratamentos crónicos. J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. A sobreexpresión específica do tipo de célula estriatal de enhanFosB aumenta o incentivo para a cocaína. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW. Alteracións relacionadas coa adicción en D1 e D2 Respostas do comportamento dos receptores da dopamina tras a auto-administración crónica da cocaína. Neuropsychopharm. 2007a; 32: 354 – 366. [PubMed]
  • Edwards S, Graham DL, Bachtell RK, Self DW. Tolerancia específica da rexión á fosforilación de proteínas dependentes de cAMP regulada por cocaína tras autoadministración crónica. Eur J Neurosci. 2007b; 25: 2201 – 2213. [PubMed]
  • Goeders NE. Un papel neuroendocrino no reforzo da cocaína. Psiconeuroendocrinol. 1997; 22: 237-259. [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. A anfetamina e a cocaína inducen a activación específica de fármacos do xene c-fos en compartimentos matrices-estréosomas e subdivisións límbicas do estriado. Proc Natl Acad Sci USA. 1990; 87: 6912-6916. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Graham DL, Edwards S, Bachkell ​​RK, DiLeone RJ, Rios M, Self DW. A actividade dinámica do BDNF no núcleo accumbens co uso de cocaína aumenta a autoadministración e a recaída. Nat Neurosci. 2007; 10: 1029-1037. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulación da expresión xenética inmediata e da unión AP-1 no núcleo da rata accumbens pola cocaína crónica. Proc Natl Acad Sci USA. 1992; 89: 5764-5768. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, MJ Iadarola, Nakabeppu Y, Duman RS, EJ Nestler. Indución dun complexo AP-1 de longa duración composto de proteínas similares a Fos no cerebro por cocaína crónica e outros tratamentos crónicos. Neurona. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hope BT. Cocaína e complexo do factor de transcrición AP-1. Ann NY Acad Sci. 1998; 844: 1-6. [PubMed]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Dimerización e propiedades de unión ao ADN do factor de transcrición ΔFosB. Bioquímica. 2007; 46: 8360-8372. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, et al. A expresión do factor de transcrición BFosB no cerebro controla a sensibilidade á cocaína. Natureza. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL. c-Fos expresión asociada ao restablecemento do comportamento que busca a cocaína por sinais condicionados por contingentes de resposta. Sinapsis. 2009; 63: 823-835. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Lee K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Formación dendrítica da columna vertebral inducida pola cocaína en neuronas espiñas medias que conteñen receptores de dopamina D1 e D2 no núcleo accumbens. Proc Natl Acad Sci USA. 2006; 103: 3399-3404. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mecánico M, Mouzon E, Neve RL, SJ Haggarty, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Papel esencial da histona metiltransferase G9a na plasticidade inducida pola cocaína. Ciencia. 2010; 327: 213-216. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. BFosB: un interruptor molecular para a adaptación a longo prazo no cerebro. Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, RA Fuchs, LTL Tran-Nguyen, Palmer A, Marshall JF. Expresión da proteína Fos e comportamento que busca a cocaína nos ratos tras a exposición a un ambiente autoadministración de cocaína. J Neurosci. 2000; 20: 798-805. [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔFosB: Un interruptor molecular sostido para a dependencia. Proc Natl Acad Sci USA. 2001; 98: 11042-11046. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Nestler EJ. Mecanismos de transcrición da adicción: papel de BFosB. Phil Trans R Soc B. 2008; 363: 3245-3255. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Estudos farmacolóxicos sobre a regulación da indución crónica de antíxeno relacionada coa FOS por cocaína no estriado e no núcleo accumbens. J Pharmacol Exp. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indución de ΔFosB en estruturas cerebrais relacionadas coa recompensa tras o estrés crónico. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, et al. Patróns distintos de inducción de BFosB no cerebro por drogas de abuso. Sinapsis. 2008; 62: 358-369. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson GC. O cerebro de rata en coordenadas estereotáxicas. 4th. Nova York: Academic Press; 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Sustratos comúns neuronais para as propiedades adictivas da nicotina e da cocaína. Ciencia. 1997; 275: 83-86. [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, et al. O BFosB media a desensibilización epigenética da c-fos xene tras a exposición crónica á anfetamina. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, et al. A influencia de DeltaFosB no núcleo é o comportamento relacionado coa recompensa natural. 2008; 28: 10272-10277. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Young ST, Porrino LJ, Iadarola MJ. A cocaína induce proteínas c-Fos-inmunorreactivas estriatales mediante D dopaminérxica1 receptores. Proc Natl Acad Sci USA. 1991; 88: 1291-1295. [Artigo gratuíto de PMC] [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos facilita a adquisición e extinción de cambios persistentes inducidas pola cocaína. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]