નેટ ન્યુરોસી. લેખક હસ્તપ્રત; PMC 2016 જાન્યુ 15 માં ઉપલબ્ધ છે.
આખરે સંપાદિત સ્વરૂપમાં પ્રકાશિત:
નેટ ન્યુરોસી. 2014 મે; 17 (5): 704-709.
ઑનલાઇન 2014 એપ્રિલ 6 પ્રકાશિત. ડોઇ: 10.1038 / nn.3694
પી.એમ.સી.આઈ.ડી.
એનઆઇએચએમએસઆઇડી: એનઆઇએચએમએસએક્સએક્સએક્સ
વિલહોન ઇનગો,1,2,3,* લોરેન એમ બર્ગેનો,1,2 પીટર એ. ગ્રેબ્લેસ્કી,2 અને પોલ ઇએમ ફિલિપ્સ1,2
આ લેખના પ્રકાશકનું અંતિમ સંપાદિત સંસ્કરણ ઉપલબ્ધ છે નેટ ન્યુરોસી
કોમેન્ટરી જુઓ “ફાસિક ડોપામાઇન સિગ્નલિંગની ખોટ: નવી વ્યસન માર્કર"માં નેટ ન્યુરોસી, પૃષ્ઠ 17 પર વોલ્યુમ 644.
PMC માં અન્ય લેખો જુઓ ટાંકે પ્રકાશિત લેખ.
અમૂર્ત
ડ્રગ વ્યસન એ ન્યુરોસાયકિયાટ્રિક ડિસઓર્ડર છે જે ડ્રગના ઉપયોગને વધારીને ચિહ્નિત કરે છે. વેન્ટ્રોમેડિયલ સ્ટ્રાઇટમ (વીએમએસ) માં ડોપામાઇન ન્યુરોટ્રાન્સમિશન દુરૂપયોગિત દવાઓની તીવ્ર મજબૂતીકરણની અસરોમાં મધ્યસ્થી કરે છે, પરંતુ લાંબું ઉપયોગ સાથે ડોર્સોલેટર સ્ટ્રાઇટમ (ડીએલએસ) ને માદક દ્રવ્યોની શોધમાં નિયંત્રણ હોવાનું માનવામાં આવે છે. અમે કોકેન સ્વ-વહીવટ રેજીમેન દરમિયાન સ્ટ્રાઇટલ ડોપામાઇન પ્રકાશનને માપ્યું જે ઉંદરોમાં લેવાતી દવાઓની વધઘટ પેદા કરે છે. આશ્ચર્યજનક રીતે, અમે શોધી કાઢ્યું કે ફાસિક ડોપામાઇન બંને પ્રદેશોમાં ઘટાડો થયો છે કારણ કે કોકેનના પ્રમાણમાં વધારો થયો છે; વીએમએસમાં ડોપામાઇનમાં ઘટાડો થતાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો. ડોમેમાઇન પ્રેક્ઝર એલ-ડીઓપીએ (Dopamine Precursor L-DOPA) ની ડોઝ પર વીએમએસમાં ડોપામાઇન સિગ્નલેશનને ફરીથી ભરતા ડોઝમેઇન સિગ્નલિંગમાં વધારો થયો હતો, જેનાથી ઘટાડાયેલા ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશન અને અતિશય ડ્રગના ઉપયોગ વચ્ચેના causal સંબંધ દર્શાવે છે. આ રીતે, આ ડેટા એકસાથે ઉપયોગમાં લેવાતા વધુ પડતા ઉપચારના ઉપચારમાં યાંત્રિક અને રોગનિવારક આંતરદૃષ્ટિ પ્રદાન કરે છે.
પરિચય
ડ્રગ દુરૂપયોગ એ સ્ટ્રાઇટમમાં ડોપામાઇનના પ્રકાશન સાથે નજીકથી જોડાયેલું છે1,2. જો કે, ડોપામાઇન ન્યુરોટ્રાન્સમિશનમાં ડ્રગનો ઉપયોગ સંબંધિત ફેરફારો અવધિ અને પેટાગ્રહણમાં બદલાય છે3-5. વેન્ટ્રોમેડિયલ સ્ટ્રાઇટમ (વીએમએસ) માં ડોપામાઇનના એક્સ્ટ્રાસેસ્યુલર એકાગ્રતામાં ધીમે ધીમે વધારો, કોકેન સહિત દુરૂપયોગની ઘણી દવાઓ દ્વારા પ્રેરિત6, દવાઓના મજબુત ગુણધર્મોને પ્રતિબિંબિત કરવાનું માનવામાં આવે છે7, પ્રાણીઓ તેમના કોકેન સ્વ-વહીવટના દરને નિયંત્રિત કરે છે જેથી એબિલેટેડ સ્તરની આસપાસના ડોપામાઇન સાંદ્રતાને જાળવી શકાય.8. વી.એમ.એસ.ની અંદર, ન્યુક્લિયસ એસેમ્બન્સના કોર અને શેલ ઉપગ્રહમાં ડોપામાઇન સિગ્નલિંગની ઓવરલેપિંગ ભૂમિકાઓ નોંધવામાં આવી છે, પરંતુ પ્રાથમિક દવા પુરસ્કારમાં મધ્યસ્થી કરવા માટે શેલ પર ભાર મૂક્યો છે અને શરત મજબૂતીકરણ માટે સબસ્ટ્રેટ તરીકે કાર્ય કરવા માટેનો કોર1. ખરેખર, કેટલાક સેકંડ સુધી ચાલતા, ન્યુક્લિયસ એક્મ્બમ્બન્સ કોરમાં ફાસિક ડોપામાઇન મુક્ત થાય છે, જે પર્યાવરણ ઉત્તેજનાની પ્રસ્તુતિને શરત આપવામાં આવે છે જેનો વારંવાર ડ્રગ સાથે જોડી કરવામાં આવે છે.9-12 અને માદક દ્રવ્યો મેળવવા અને લેવી નિયંત્રિત કરવા સક્ષમ છે9. ડોપામાઇન રિલીઝ દ્વારા આવા શરતી ઉત્તેજનાનું એન્કોડિંગ સ્ટ્રાઇઅટમ (ડર્સોલેટર સ્ટ્રાઇટમ, ડીએલએસ) ના સેન્સોરીમોટર પાસાઓમાં પણ જોવા મળે છે.13, એક પ્રાણઘાતક પેટાવિભાગ જે આદિવાસી અને ફરજિયાત માદક દ્રવ્યોના વિકાસને જોડે છે14-16. આમ, મનોરંજનના ઉપયોગથી આગળ લઈ લેવાતી દવાઓની પ્રગતિ જુદા જુદા સ્ટ્રેટલ પેટાવિભાગોમાં ડોપામાઇન સિગ્નલિંગની સંલગ્નતાને પ્રતિબિંબિત કરવા માનવામાં આવે છે.1,17, સ્થાપિત દવા શોધવાની વર્તણૂંકના વિકાસ દરમિયાન લિંબિક (વીએમએસ) માંથી સેન્સરિમોટર (ડીએલએસ) સ્ટ્રાઇટમ પર શિફ્ટ પર ભાર મૂકતા.1,18. જો કે, ઔષધીય ડ્રગ લેતી વર્તણૂંક તરીકે દવા-સંબંધિત ક્રિયાઓ અથવા ફાસિક ડોપામાઇન દ્વારા ઉત્તેજનાની એન્કોડિંગમાં ફેરફાર થાય છે કે નહીં તે જાણી શકાતું નથી.
માદક દ્રવ્યોના માપદંડ જે મધ્યમ માદક દ્રવ્યોના વપરાશથી વ્યસનમાં પરિવર્તન લાવે છે તે શ્રેષ્ઠ છે, જે ડ્રગ સુધી લાંબી વપરાશ કરે છે.19,20, જેમ કે અઠવાડિયાના સમયગાળા માટે એક (ટૂંકા વપરાશ, શીએ) થી છ કલાક (લાંબા વપરાશ, LGA) ની ઍક્સેસને વિસ્તૃત કરવા જેવી21. આ પ્રકારની દવા સ્વ-વહીવટ રેજિમેન વધવા માટે સક્ષમ છે21 અને અનિવાર્ય દવા માંગે છે22, અન્ય મુખ્ય લક્ષણોમાં જે માનવોમાં પદાર્થ આધારિતતાને પાત્ર બનાવે છે23. અહીં, અમે પરીક્ષણ કર્યું છે કે કેવી રીતે એલજીએ કોકેઈન સ્થિર એસએ (AA) ના ઉપયોગના ઉપયોગમાં પહેલા સ્ટ્રાઇટમમાં ફાસિક ડોપામાઇન સિગ્નલિંગની પ્રાદેશિક ગતિશીલતાને અસર કરે છે.13 ડ્રગના ઉપયોગમાં વધારો થતાં ન્યુરોબાયોલોજીકલ મિકેનિઝમ્સની સારી સમજ મેળવવા.
પરિણામો
નકામા કેથિઅરની અંદર રહેલા પુરુષ વિસ્તાર ઉંદરોને રોજિંદા એસએ સત્રો દરમિયાન કોકેઈન સ્વ-સંચાલિત કરવા માટે તાલીમ આપવામાં આવી હતી અને ત્યારબાદ બે નાક-પોક બંદરોથી સજ્જ ચેમ્બરમાં એલજીએ સત્રોમાં સંપાદન બદલવામાં આવ્યું હતું. સક્રિય પોર્ટમાં નાક ભરાઈને મજબૂતીકરણના નિયત-અંતરાલ (FI) 0.5 શેડ્યૂલ પર કોકેઈન (20 મિલિગ્રામ / કિલો / પ્રેરણા) અને 20-S ના પ્રકાશ-સ્વર ઉત્તેજનાની પ્રેરણાને વેગ મળ્યો. બીજા (નિષ્ક્રિય) નાક-પોક પોર્ટમાં, અથવા ઉત્તેજના પ્રસ્તુતિ (20-s ટાઇમ-આઉટ) દરમિયાન સક્રિય પોર્ટમાં જવાબો, પ્રોગ્રામ કરેલ પરિણામો વિના હતા. રિપોર્ટિંગના હેતુઓ માટે, નાક સમય-સમયની બહાર બહાર સક્રિય બંદરમાં જવાબો (દા.ત., કોકેઇન પ્રેરણા પ્રાપ્ત કરનાર લોકો) ને "સક્રિય નાક પોક્સ" તરીકે ઓળખવામાં આવે છે અને સમયાંતરે બહાર નિષ્ક્રિય પોર્ટમાં હોય છે તે "નિષ્ક્રિય" નાક પોક્સ ". સક્રિય નાક પોક્સની સંખ્યા નોંધપાત્ર નિષ્ક્રિય નાક પોક્સ (નાક-પોક પોર્ટની મુખ્ય અસર: F(1, 23) = 383.226, P <0.001; ફિગ 1) દર અઠવાડિયે (P <0.001). એસએએથી એલજીએમાં સ્વિચ કર્યા પછી, સમય સાથે કોકેઇનનું સેવન નોંધપાત્ર રીતે વધ્યું (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(3, 69) = 25.504, P <0.001; ફિગ 1), જેમ કે ઘણા લોકો દ્વારા સતત અહેવાલ24.
ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશનની લાંબા ગાળાના ડાયનેમિક્સનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, વંશના ન્યુક્લ્યુક્યુસ ન્યુક્લોકેમિકલ રેકોર્ડીંગ્સ એકસાથે વીએમએસના ન્યુક્લિયસ ઍક્યુમ્બન્સ કોર અને ડીએલએસમાં ક્રોનિકલ ઇમ્પ્લાન્ટ માઇક્રોસેન્સર્સમાં કરવામાં આવ્યા હતા.25 ફાસ્ટ-સ્કેન સાયક્લિક વોલ્ટમૅમેટ્રીનો ઉપયોગ કરીને (જુઓ પૂરક ફિગ. 1 ઇલેક્ટ્રોડ પ્લેસમેન્ટની હિસ્ટોલોજિકલ ચકાસણી માટે). એલજીએના પ્રથમ સપ્તાહમાં, અમે સક્રિય પ્રતિભાવો પછી વીએમએસમાં એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડોપામાઇન સાંદ્રતામાં ક્ષણિક વધારો જોવા મળ્યો હતો.P <0.001; ફિગ. 2a). સક્રિયકરણની આ પેટર્ન એલજીએ દરમિયાન ઘટી હતી જ્યાં ત્રીજા અઠવાડિયામાં ડોપામાઇનનું પ્રકાશન પ્રથમ કરતાં નોંધપાત્ર હતું (P <0.001) અને બીજું (P = 0.030) અઠવાડિયા (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,72) = 10.230, P <0.001; ફિગ. 2b). બીજા અઠવાડિયામાં ડીએલએસમાં પ્રકાશિત ફાસીક ડોપામાઇન ઉભરી આવ્યું (P = 0.006; ફિગ. 2C) પરંતુ એલજીએના ત્રીજા સપ્તાહમાં ગેરહાજર હતા (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,51) = 3.474, P = 0.039; સક્રિય પૉક × સપ્તાહની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F(2,51) = 4.021, P = 0.024; ફિગ. 2C, ડી). આ ડેટા દર્શાવે છે કે વીએમએસ અને ડીએલએસમાં ફાસિક ડોપામાઇન સંકેતો અનુક્રમે ડ્રગના વિવિધ તબક્કે ઉદ્ભવતા હોય છે જે SHA રિઝિમન માટે અમે જે અહેવાલ આપ્યા છે તેના સમાન છે.13. જો કે, આ સંકેતલિપી એલજીએ (LGA) દરમિયાન બંને પ્રદેશોમાં ઘટાડો થયો, તે સમયગાળા કે જેના પર તે જાણીતી છે કે અનાવશ્યક રીતે સંચાલિત કોકેનની ફાર્માકોકીનેટિક્સ બદલાતી નથી26,27.
ડોપામાઇન સિગ્નલિંગ અને ડ્રગના વપરાશના વધારા વચ્ચેના સંબંધને ચકાસવા માટે, અમે એલજીએ રેજિમેન દરમિયાન પ્રાણીઓને બે જૂથોમાં વિભાજીત કરીને દવા સ્વયં-વહીવટને વધારવા માટે સંવેદનશીલતામાં વ્યક્તિગત તફાવતોનો લાભ લીધો, તેના આધારે અમે રેખીય પર આધારિત નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવ્યો કે કેમ તે આધારે એલજીએ સેશન્સ ઉપર ડ્રગનો વપરાશ પાછો ખેંચવો અથવા નહીં (ફિગ. 3a, બી). પ્રાણીઓના આ અલગ થવાના માન્યતાએ દર્શાવ્યું હતું કે બિન-વધેલા પ્રાણીઓએ સક્રિય નાકમાં નોંધપાત્ર વધારો થયો નથી જે એલજીએના ત્રણ અઠવાડિયા દરમિયાન (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,18) = 0.633, P = 0.542; ફિગ. 3b, ડાબે), જ્યારે વધેલા ઉંદરોએ તેમની સેવનમાં નોંધપાત્ર વધારો કર્યો (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,26) = 14.826, P <0.001; ફિગ. 3b, અધિકાર; ઇન્ટેક × સપ્તાહની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F(2,44) = 4.674, P = 0.014) ત્રીજા એલજીએ અઠવાડિયા (ટી.) દરમિયાન બિન-એસ્કેલેટેડ પ્રાણીઓ કરતાં વધુ સક્રિય નાક પોક્સ બનાવે છે(22) = 2.307, P = 0.031; ફિગ. 3b). નોંધનીય રીતે, વધેલા પ્રાણીઓએ કોકેઈન મેળવવા માટે વધેલી પ્રેરણા દર્શાવી હતી, જેમ કે પ્રગતિશીલ ગુણોત્તર કાર્યમાં દર્શાવ્યું હતું (P = 0.028; પૂરક ફિગ. 2). વધેલી ઉંદરોમાં, વીએમએસમાં ડોપામાઇનના પ્રકાશનમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો હતો (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,51) = 15.507, P <0.001; ફિગ. 3C, અધિકાર, અને પૂરક ફિગ. 3a). જો કે, વીએમએસ ડોપામાઇન રિલીઝ બિન-વધેલી ઉંદરોમાં સ્થિર હતી (અઠવાડિયાની મુખ્ય અસર: F(2,18) = 0.057, P = 0.945; ફિગ. 3C, બાકી અને પૂરક ફિગ. 4a) વધતા ઉંદરોની તુલનામાં ત્રીજા અઠવાડિયામાં નોંધપાત્ર રીતે વધુ ફાસિક ડોપામાઇનનું વર્ણન કરે છે (ઇન્ટેકની મુખ્ય અસર: F(1,69) = 6.444, P = 0. 013; ફિગ. 3d, બાકી; ઇન્ટેક × સપ્તાહની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F(1,70) = 4.303, P = 0.042). ઍસ્કેલેટેડ અને નોન-એસ્કેલેટેડ ઉંદરો વચ્ચેના ડોપામાઇનમાં આ તફાવત, છ કલાક સ્વ-વહીવટ દરમ્યાન દેખાયો હતો (ટી(43) = 2.599, P = 0.013). મહત્ત્વની વાત એ છે કે, આ તફાવત અસાધારણ પ્રાણીઓમાં ડોપામાઇન કાર્યમાં સામાન્ય ઘટાડોથી પરિણમ્યો ન હતો, કારણ કે ડોપામાઇન બિન-અવરોધક પછી છોડવામાં આવ્યું હતું, કોકેનનો પ્રયોગક પ્રેરિત ઇન્ફ્યુઝન બિન-વધતા અને વધેલા પ્રાણીઓ (પ્રાણીઓમાં વધારો) વચ્ચે ભિન્ન નહોતો.P = 0. 605; પૂરક ફિગ. 5a).
નોન-એસ્કેલેટીંગ ઉંદરોના વીએમએસમાં જાળવી રાખેલા ફાસિક ડોપામાઇનને વિપરીત, અમે પહેલા જાણ કરી હતી કે પ્રાણીઓમાં ડોપામાઇનના પ્રકાશનમાં ઘટાડો થયો છે જે દૈનિક સત્ર દીઠ ફક્ત એક કલાકની મર્યાદિત કોકેન ઍક્સેસ (SHA) ત્રણ સપ્તાહની અંદર પસાર થઈ હતી.13. તેથી, અમે શીએ અથવા એલજીએ કોકેન સ્વ-વહીવટ હેઠળ પસાર થયેલા પ્રાણીઓમાં ડોપામાઇન ફંક્શન અને ડ્રગ ઇન્ટેક વચ્ચેના સંબંધના વિગતવાર વર્ણનાત્મકતાને મંજૂરી આપવા માટે આ SHA ઉંદરો પાસેથી મેળવેલા ડેટા પર વધારાના વિશ્લેષણ કર્યા. જ્યારે શીએ દરમિયાન પ્રાણીઓમાં સરેરાશ માદક દ્રવ્યોનો નોંધપાત્ર વધારો થયો ન હતો, ત્યાં શીએ કોકેન સ્વ-વહીવટના ત્રણ અઠવાડિયાથી વધુ પ્રમાણમાં પ્રાણીઓના ઉપભોક્તા (6 ના 16) માં ઉપચારના નોંધપાત્ર વધારાને પ્રદર્શિત કરતા વ્યક્તિગત તફાવતો હતા. રસપ્રદ વાત એ છે કે, એસએ કોકેન સ્વ-વહીવટના ત્રીજા અઠવાડિયામાં વીએમએસ ફાસીક ડોપામાઈન પ્રાણીઓના સમૂહમાં સ્થિર પદાર્થ વપરાશ (એટલે કે, નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવતો નથી) જાળવી રાખતો હતો તે ત્રીજા અઠવાડિયામાં બિન-એસ્કેલેટેડ પ્રાણીઓ કરતા નોંધપાત્ર રીતે અલગ નહોતો. એલજીએ (પી = 0.741; પૂરક ફિગ. 5b). SHA પ્રાણીઓએ તેમની ડ્રગના સેવનમાં વધારો કર્યો, ડ્રગના વપરાશના નીચા દર (32.7 ± 3.9 વિરુદ્ધ 43.9 ± 3.1 પ્રથમ કલાકમાં ઇન્ફ્યુઝન્સ, પી = 0.017) અને ઓછી વ્યુત્પન્ન ડોપામાઇન પ્રકાશન (પી = 0.049; પૂરક ફિગ. 5b) પ્રાણીઓની તુલનાએ એલજીએની શરતો હેઠળ તેમની સેવન વધારી. તેમ છતાં, તેમના બિન-વધતા જતા સમકક્ષો (પી = 0.094) ની સરખામણીમાં વીએમએસ ડોપામાઇનમાં ઘટાડો માટે બિન-નોંધપાત્ર વલણ હતું અને શીએ અને એલજીએ વધતી જતી ઉંદરો વચ્ચેના સમય સાથે ડોપામાઇનને છોડવા માટે કોઈ મહત્વપૂર્ણ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા (કોઈ ઇન્ટેક × રિઝમેન ઇન્ટરેક્શન: F(1,57) = 0.111 P = 0.740; પૂરક ફિગ. 5b). આ અલગ તફાવતોને ધ્યાનમાં રાખીને, અમે ડોપામાઇનના સ્તર અને ઉન્નતીકરણની માત્રા વચ્ચે પ્રત્યક્ષ સંબંધ માટે પરીક્ષણ કરવા માટે તમામ SHA અને LgA ઉંદરોમાં રીગ્રેશન વિશ્લેષણ કર્યું હતું અને નોંધપાત્ર નકારાત્મક સહસંબંધ (SHA અને LgA ઉંદરો એકસાથે પૂરા પાડ્યા હતા; R = -0.628 , P = 0.005) જે પ્રાણીઓમાં સૌથી નીચલા ડોપામાઇનનું અઠવાડિયું 3 (અઠવાડિયા) માં છોડ્યું હતું તેમાં સૌથી વધુ વધારોફિગ. 3e, બાકી). તેથી, વીએમએસમાં ડોપામાઇન સિગ્નલિંગનું હલનચલન દવા સ્વ-વહીવટીકરણ LGA અને SHA ડ્રગ-ઍક્સેસ રેજિન્સની વૃદ્ધિની આગાહી કરતું હતું. આ ડેટા હાઇલાઇટ કરે છે કે ડોપામાઇનના પ્રકાશનમાં થયેલા ફેરફારોથી સંબંધિત જર્મન પાસું એ છે કે પ્રાણીઓ સ્વયં-વહીવટની રીજીમેનને બદલે તેઓ આગળ વધ્યા છે કે નહીં સે દીઠ. તેવી જ રીતે, આપણે શોધી કાઢીએ છીએ કે બધી ઉંદરોમાં, એકોલેશન એ કોકેન માટે વધેલી પ્રેરણાના નોંધપાત્ર આગાહીકર્તા છે (P = 0.037, પૂરક ફિગ. 6a), પરંતુ એલજીએ / એસએ રેજીમેન, પ્રોગ્રેસિવ રેશિયો શેડ્યૂલમાં આકારણી કરાયેલ નથી (P = 0.340, પૂરક ફિગ. 6b).
વીએમએસથી વિપરીત, ડીએલએસમાં પ્રતિકાર-વિરોધી ડોપામાઇન પ્રકાશન એસીલેટેડ અને નોન-એસ્કેલેટેડ એલજીએ (PGA) પ્રાણીઓ વચ્ચે અલગ નહોતું (ઇન્ટેકની મુખ્ય અસર: F(1,48) = 0.472, P = 0. 496; ફિગ. 3d, જમણે અને સપ્લિમેન્ટરી ફીગ્સ. 3b અને 4b), અથવા એસએ અથવા એલજીએ (C = LXA) કોકેન સ્વ-વહીવટ (R = -0.112, P = 0.649; ફિગ. 3e, જમણે). આમ, જ્યારે વીએમએસમાં ડોપામાઇન ડ્રગ લેવાની વધઘટ સાથે સંકળાયેલું હતું, ત્યારે ડીએલએસમાં એક સમાન સહસંબંધ જોવા મળ્યો ન હતો, એક મગજ વિસ્તાર જે વિસ્તૃત દવા સ્વ-વહીવટ સાથે વ્યાપક રીતે સંકળાયેલ છે.1,14,16,18.
ન્યુરોસાયેમિસ્ટ્રી અને વર્તણૂંક વચ્ચેના આ ઉત્તેજક સંબંધને ધ્યાનમાં રાખીને, અમે અનુમાન કર્યો હતો કે ફાસિક ડોપામાઇન સિગ્નલિંગમાં ઘટાડો એ ડ્રગ લેવાની વધઘટ પેદા કરવા માટે કારણભૂત હતું, જેમ કે ડોપામાઇન-રીસેપ્ટર વિરોધી દ્વારા ઉત્પાદિત દવામાં વધારો28-30, અને તેથી પુનર્સ્થાપિત કરવું એ ઉન્નતિમાં ઉલટાવી દેશે (ફિગ. 4a). તેથી, અમે વધેલા પ્રાણીઓનો ઉપચાર કર્યો (P = 0.024; ફિગ. 4b) સત્ર પહેલાં એલ-ડીઓપીએ (PH-DOPA) સાથે ફાસિક ડોપામાઇન પ્રકાશન વધારવાનું શરૂ કર્યું31. એલ-ડીઓપીએ ડોઝ-આશ્રિત રીતે (0, 10, 30, અને 90 એમજી / કિગ્રા, અંતરાય) કોકેઇનનો ઘટાડો ઘટાડો (એલ-ડીઓપીએની મુખ્ય અસર: F(3,53) = 5.053, P = 0.004; ફિગ. 4b), X-1x એમજી / કિલો પૂર્વ-વૃદ્ધિ સ્તર પર પાછા લેવા સાથે. મહત્વનું છે, એલ-ડીઓપીએની 30 એમજી / કિલો ડોઝ વીએમએસમાં ફાસિક ડોપામાઇન સિગ્નલિંગને સંપૂર્ણપણે પુનઃસ્થાપિત કરવા માટે પૂરતી હતી (જુઓ પૂરક ફિગ. 7 દવાઓ લેવા દરમ્યાન)F(2,8) = 6.316, P = 0.023; ફિગ. 4C), એક અસર પણ સંપૂર્ણ છ કલાક સ્વ-વહીવટ માટે જોવા મળે છે (F(2,8) = 7.610, P = 0.0141). આમ, વી.એમ.એસ. માં ફાસિક ડોપામાઇનના જથ્થામાં પ્રકાશનની આગાહી, કોકેન સ્વ-વહીવટ સત્ર દરમિયાન (રે = -0.525, P = 0.046; ફિગ. 4d). એલ-ડીઓપીએની આ વર્તણૂકીય અસર કોકેઈનના ફાર્માકોલોજિકલ પ્રતિભાવમાં ફેરફારો દ્વારા સમજાવી શકાતી નથી, કેમ કે વીએમએસ ડોપામાઇનમાં ધીમી સાંદ્રતા ફેરફાર એલ.ઓ.પી.ઓ.પી. સારવાર દ્વારા બદલાતી ન હોય તેવા દવાઓના પ્રેરણાને બાદ કરતા નથી અને વાસ્તવમાં, પૂર્વ- ઉન્નતિ, વધારો, અને એલ-ડીઓપીએ-સારવારવાળા રાજ્યોમાં વધારો (F(2,8) = 0.020, P = 0.980; પૂરક ફિગ. 8). આ ઉપરાંત, એલ-ડીઓપીએ (L-DOPA) સ્થાનિક સ્તરે વી.એમ.એસ.માં દાખલ થવા પર ડ્રગના વપરાશ અંગે એલ-ડીઓપીએની અસર પણ જોવા મળી હતી (જુઓ પૂરક ફિગ. 9 પ્રેરણા સાઇટ્સ માટે) એક સત્ર (ટી(7) = 6.517, P <0.001; ફિગ. 4e). એકસાથે લેવામાં આવે છે, અભ્યાસના આ સમૂહ દર્શાવે છે કે ડ્રગ એક્સેસ પહેલાં સંચાલિત એલ-ડીઓપીએની એક ડોઝ એ ડોપામાઇન સિગ્નલિંગને પુનઃસ્થાપિત કરવામાં અને પૂર્વ-વૃદ્ધિવાળા રાજ્યમાં કોકેનનો ઉપયોગ સામાન્ય બનાવવાની અસરકારક છે.
અમે પછી પરીક્ષણ કર્યું હતું કે L-DOPA નો ઉપયોગ લાંબા ગાળાની ડોઝિંગ રેજીમેન્સમાં વધતી જતી દવાના વપરાશને ઘટાડવા માટે અસરકારક છે, જે ક્લિનિકલ એપ્લિકેશન્સને વધુ સુસંગત છે. સૌ પ્રથમ, અમે વધતા જતા એલ-ડીઓપીએના સતત રોજના પ્રેરણા દરમિયાન પ્રયોગો હાથ ધર્યા હતા. પ્રાણીઓને કોકેઈનની સ્વયં સંચાલિત કરવા માટે તાલીમ આપવામાં આવી હતી અને ત્યારબાદ એલજીએ પર સ્વિચ કરવામાં આવી હતી અથવા શીએ પર રહી હતી, તે દરમિયાન તે બે સત્ર માટે એલ-ડીઓપીએ (30 મિલિગ્રામ / કિલો, ઇન્ટ્રાવેન્યુસ) અથવા સોલિન સાથે ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવી હતી.ફિગ. 5a). એલ-ડીઓપીએ (R-DOPA) એ રિઝિમ-વિશિષ્ટ રીતમાં ડ્રગના સેવનને નોંધપાત્ર રીતે અસર કરે છે (સારવારની મુખ્ય અસર: F(1,53) = 9.297, P = 0.004; ઉપચારની મુખ્ય અસર: F(1,53) = 5.968, P = 0.018; ફિગ. 5a) એલજીએ (LGA) પ્રાણીઓમાં કોકેઇનના પ્રમાણમાં ઘટાડો થયો છે (P = 0.004), પરંતુ SHA પ્રાણીઓ નથી (P = 0.170; ફિગ. 5a), અને નિષ્ક્રિય નાક પોક્સ (એલજીએ, P = 0.202; શા, P = 0.101; ડેટા બતાવ્યો નથી). તેથી, એલ-ડીઓપીએ સારવાર એલજીએ દરમિયાન ડ્રગના વપરાશમાં વધારો અટકાવવા માટે અસરકારક હતી. જો કે, સારવાર સમાપ્તિ પર, આ અસર સહન કરી ન હતી (P = 0.789; ફિગ. 5a). બીજું, અમે સતત વધતા જતા ડ્રગ વપરાશ સાથે પ્રાણીઓમાં સતત દિવસો પર એલ-ડીઓપીએનું સંચાલન કર્યું. પ્રાણીઓને પોતાનું સ્વ સંચાલક કોકેઈન માટે તાલીમ આપવામાં આવી હતી અને તે પછી એલજીએમાં ફેરવાઈ હતી, અથવા ત્રણ અઠવાડિયા માટે SHA પર રહી હતી. પછી આ પ્રાણીઓને ત્રીજા સપ્તાહમાં સ્વ-વહીવટ સત્રો પહેલાં એલ-ડીઓપીએ અથવા સૅલાઇન સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી (ફિગ. 5b). એલ.એ.જી.-પ્રશિક્ષિત પ્રાણીઓએ SHA- પ્રશિક્ષિત પ્રાણીઓની સરખામણીમાં પ્રથમ બે અઠવાડિયા દરમિયાન કોકેઈન ઉપયોગમાં નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવ્યો (રિઝિમની મુખ્ય અસર: F(1,51) = 15.706, P <0.001; ડેટા બતાવેલ નથી). એલ-ડોપા સારવારથી એક નિયમ-વિશિષ્ટ અસર પેદા થાય છે (ઉપચારની મુખ્ય અસર: F(1,51) = 5.303, P = 0.025; ઉપચારની મુખ્ય અસર: F(1,51) = 11.884, P = 0.001; ફિગ. 5b), એલજીએ (LGA) પ્રાણીઓમાં કોકેઈનનું પ્રમાણ ઘટાડવું (P = 0.048), પરંતુ SHA પ્રાણીઓ નથી (P = 0.210; ફિગ. 5b) નિષ્ક્રિય જવાબ આપ્યા વિના (એલજીએ, P = 0.641; શા, P = 0.664). મહત્વનું છે, સક્રિય નાક પોક્સ પર એલ-ડીઓપીએની વિભેદક અસર વધુ મજબૂત હતી જ્યારે પ્રાણીઓને એસએ અને એલજીએ (વધેલા પ્રાણીઓ, P = 0.005; નોન-એસ્કેલેટેડ પ્રાણીઓ, P = 0.421; ફિગ. 5C), સૂચવે છે કે એલ-ડીઓપીએ ડ્રગ વપરાશને અસર કરતાં વધુ પ્રમાણમાં વધતા કોકેઈનનો વપરાશ ઓછો કર્યો છે સે દીઠ, એક ક્રિયાપ્રતિક્રિયા જે દિવસોમાં (ઇન્ટેક × સારવાર (દિવસ 1) ક્રિયાપ્રતિક્રિયા સાથે વિકસિત થઈ છે: F(1,51) = 0.562, P = 0.457; પરંતુ ઉપચાર × સારવાર (દિવસ 5) ઇન્ટરેક્શન: F(1,51) = 4.091, P = 0.048). મહત્વનું છે, વધતી જતી અને બિન-વધતી ઉપજાતિઓ તેમજ તીવ્ર અને કાલ્પનિક રીતે સંચાલિત એલ-ડીઓપીએની બિન-વધતી અસરો વચ્ચેના તફાવતો પણ છ-છ કલાક સ્વ-વહીવટ દરમ્યાન જોવા મળે છે (પૂરક ફિગ. 10). આ તારણો દર્શાવે છે કે પ્રાણીઓમાં ફાસિક ડોપામાઇનનું પ્રકાશન ઘટ્યું છે જે તેમના કોકેઇનના સેવનમાં વધારો કરે છે અને ડોપામાઇન પ્રેક્ઝર, એલ-ડીઓપાએ વારંવાર વહીવટ સાથે પુનર્સ્થાપિત કરે છે, આ વધારોને અટકાવે છે અને ઉલટાવે છે, જે દર્શાવે છે કે ડોપામાઇનમાં ઘટાડો ડ્રગ સ્વ-વહીવટમાં વધારો કરે છે.
ચર્ચા
હાલના અભ્યાસમાં, અમે ડ્રગ ઇન્ટેકની વધઘટ દરમિયાન વીએમએસ અને ડીએલએસમાં ફાસીક ડોપામાઇનને છૂટા કરવાની તપાસ કરી હતી, તે એવી ઘટના છે જે ડ્રગના નિર્ભરતા માટે એક મુખ્ય ડાયગ્નોસ્ટિક માપદંડનું મોડેલ કરે છે.21,23. અમારા તારણો દર્શાવે છે કે વીએમએસ અને ડીએલએસમાં ઘટાડાવાળા ડોપામાઇન સિગ્નલિંગ સાથે એસકેલેશન સંકળાયેલું છે, વીએમએસમાં ડોપામાઇનમાં ઘટાડો સાથે નોંધપાત્ર રીતે વૃદ્ધિની દર સાથે સંબંધિત છે. આ અસર ફૅસીક ડોપામાઇન માટે પસંદગીયુક્ત હોવાનું જણાય છે કારણ કે હાલના અભ્યાસમાં ટૉનિક ડોપામાઇનમાં તુલનાત્મક ફેરફારો જોવા મળતા નથી, અગાઉના કામમાં ઉંદરોમાં સમાન ઉપચારનો ઉપયોગ કરીને27 અથવા બિન-માનવ આદિજાતિમાં સંબંધિત સ્વ-વહીવટની પ્રતિબંધો32,33. ડ્રગ ઉપાડ દરમિયાન ઘટાડાયેલી ફાસીક ડોપામાઇન કાર્યની અનેક અહેવાલો છે (છેલ્લા સ્વ-વહીવટી સત્રમાંથી 18 કલાક અને સાત દિવસ વચ્ચે પરીક્ષણ કર્યું છે) જે કોકેનની ઓછી સંવેદનશીલતા સાથે સંકળાયેલું છે.34-37. જ્યારે અમે શીએ અને એલજીએ ઉંદરો વચ્ચે કોકેનને ડોપામાઇનના પ્રતિભાવમાં સમાન ઘટાડો જોયો હતો (પૂરક ફિગ. 5a), આ અસર વધતી જતી હોવાનું જણાય તેવું લાગતું નહોતું કારણ કે નોન-કોમ્પિનેંટ કોકેઈનને ન્યુરોકેમિકલ પ્રતિક્રિયા એ વધતી ઉંદરો અને જે ન હતી (કોઈ ઇન્ટેક નથી. F(1,34) = 1.964 P = 0.170; પૂરક ફિગ. 5a). એ જ રીતે, કોકેનની ફાર્માકોલોજિકલ ક્રિયાઓના કારણે કોકઈન પછી 90 સેકંડ સુધીની ટૉનિક ડોપામાઇન સાંદ્રતામાં ટોચનું પરિવર્તન, તે જ પ્રાણીઓની પૂર્વ-વધેલી અને વધતી જતી સ્થિતિ વચ્ચે ભિન્ન નથી.પૂરક ફિગ. 8). આથી, ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશનનું એકમાત્ર પાસું જે આપણે જોયું છે કે જે ડ્રગના વપરાશમાં વધારો થયો છે તે આગાહી કરવામાં આવી હતી, જે સક્રિય નાક પોક પછી તરત જ ફેસીઅસ પ્રતિસાદ હતો, જે મુખ્યત્વે ડ્રગ સંબંધિત સંકળાયેલી સંકેત છે.9,11,13. આ ન્યુરોકેમિકલ પ્રતિક્રિયા પ્રાણીઓમાં ઘટાડો થયો છે, જેણે તેમની ડ્રગ ઇન્ટેકને વધારી દીધી છે, જે સામાન્ય લર્નિંગ પ્રોસેસની યાદ અપાવે છે, જ્યાં પુરસ્કાર-સંબંધિત ઉત્તેજના દ્વારા પ્રાપ્ત કરેલા વીએમએસમાં ડોપામાઇન મુક્ત થાય છે કારણ કે તે ઉત્તેજના અસ્થાયી રૂપે આગાહી કરે છે38,39. જો કે, સ્વ-વહીવટ દરમિયાન ડોપામાઇનના પ્રકાશનને બાદ કરતાં શીખવાની પ્રક્રિયામાં ઘણીવાર આકસ્મિક શીખવાની અપેક્ષા રાખવામાં આવે છે, જે સ્થાપિત ડ્રગ લેવાના લાંબા સમય પછી પ્રાપ્ત થાય છે. તદુપરાંત, પ્રાણીઓ કે જે તેમની ડ્રગના સેવનમાં વધારો કરતા નથી, ફાસિક ડોપામાઇન પ્રકાશનની હલનચલન સ્થાન લેતું નથી, તેમછતાં પણ આ પ્રાણીઓ એસિમ્પ્ટોટિક ભેદભાવપૂર્ણ વાહક વર્તન દર્શાવે છે.
ચહેરાના મૂલ્ય પર, ડ્રગના ઉપયોગની પ્રગતિમાં ઘટાડો થતાં ડોપામાઇનના અવલોકનો વ્યસનની અસંખ્ય સમકાલીન સિદ્ધાંતો સાથે મતભેદ હોવાનું જણાય છે. ડ્રગ પ્રેરિત પ્રોત્સાહક સંવેદનાત્મક પ્રક્રિયાઓ પર ધ્યાન કેન્દ્રિત થિયરીઓ દુરુપયોગની દવાઓના વારંવાર સંપર્કમાં વીએમએસ ડોપામાઇન સિસ્ટમની વધતી પ્રતિક્રિયાશીલતાને ઉત્તેજિત કરે છે જે ડ્રગ અને ક્યુ સંપર્કમાં સંવેદનશીલ પ્રતિભાવમાં મધ્યસ્થી કરે છે.40, એવી ઘટના જે એલજીએ પછી ખાસ કરીને મજબૂત છે41. ડ્રગની વ્યસનમાં અવિરત શિક્ષણ અને આદતની રચનાની ભૂમિકા પરના કન્સેપ્ચ્યુલાઇઝેશન સૂચવે છે કે ડીએલએસમાં ઉભરતા ડોપામાઇન સિગ્નલિંગમાં માદક દ્રવ્યો પર અંકુશ આવે છે.1,14,16. તદુપરાંત, વ્યસનની અગ્રણી ગણતરીત્મક મોડલ્સ ખાસ કરીને ડ્રગ-સંબંધિત સંકેતોમાં ડોપામાઇન સિગ્નલિંગને વ્યસન તરફ દોરી જાય છે.42,43. તેનાથી વિપરિત, ડાકિસિન અને ગોલ્ડ દ્વારા સૂચવવામાં આવતા વ્યસનની ડોપામાઇન અવક્ષય પૂર્વધારણા સાથે અમારા તારણો વધુ સુસંગત હોવાનું જણાય છે.44, અને સંબંધિત વિરોધી-પ્રક્રિયા સિદ્ધાંતો21 જે ઇનામ-સંબંધિત પ્રક્રિયાઓની ડ્રગ-દુરૂપયોગ-પ્રેરિત દમન પર ભાર મૂકે છે. આ પ્રકારના દમનને માદક પદાર્થના નશાના પ્રાધાન્યના સ્તરને જાળવવા માટે ડ્રગના ઉપયોગના વળતરપૂર્ણ સ્વ-નિયમનને અનુમાનિત કરવા માટે પૂર્વધારણા કરવામાં આવી છે.21. ખાસ કરીને, માનવીઓ અને પ્રાણીઓ કોકેઈનની નીચી એકમની માત્રામાં વધારો કરે છે અને તેની પ્રતિક્રિયા વધે છે45,46. આ પ્રક્રિયા વીએમએસમાં ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશન દ્વારા નિયમન થાય છે8 અને, પરિણામે, ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશન ઘટાડે છે (દા.ત., ડોપામાઇન રીસેપ્ટર એન્ટિગોઇઝમ દ્વારા) દવા વપરાશના દરમાં વધારો કરે છે28,29. તેથી, ડોપામાઇન સિગ્નલિંગમાં ઘટાડો જે આપણે એલજીએ દરમિયાન જોયો હતો તે ડ્રગના સેવનના ઉપભોક્તાને નિયમનકારી અપ્રેગ્યુલેશનને પ્રાધાન્ય આપી શકે છે. આ પૂર્વધારણાને સમર્થન આપતા, વીએમએસમાં ડોપામાઇનમાં ઘટાડો એ પ્રાણીઓમાં સૌથી વધારે ઉચ્ચારણ છે જે ડ્રગ લેતા વધારે પ્રમાણમાં વધારો દર્શાવે છે.
આમ, અમે દલીલ કરી હતી કે ડોપામાઇન ટ્રાન્સમિશનને પુનર્સ્થાપિત કરવાથી વધારો થશે. ખરેખર, એલ-ડીઓપીએ (DOPA) વહીવટ ડ્રગના સેવનની વૃદ્ધિને અટકાવવા અને ફેરવવા માટે અસરકારક હતી. નોંધનીય છે કે, ડ્રગના ઉપયોગ અંગે એલ-ડીઓપીએની અસરો સારવારના નિમ્ન સમાપ્તિને સહન કરતી નથી, સૂચવે છે કે તે અંતર્ગત ન્યુરોડેપ્ટેશનને રોકતું નથી. તેથી, અમારું ડેટા સૂચવે છે કે વૃદ્ધિ દ્વારા પ્રક્રિયામાં મધ્યસ્થી થાય છે જે દવા લેતી વખતે ફાસિક ડોપામાઇનમાં ઘટાડો દ્વારા વ્યક્ત થાય છે. આ તારણો મનોવૈજ્ઞાનિક દુર્વ્યવહારના ક્લિનિકલ સારવારમાં એલ-ડીઓપીએ ઉપયોગ માટે મિકેનિકલ માહિતી પ્રદાન કરે છે, એક એવી વ્યૂહરચના કે જેમાં કેટલાક આશાસ્પદ છે, પરંતુ એકંદરે મિશ્ર, પરિણામો તાજેતરના ક્લિનિકલ ટ્રાયલ્સની થોડી સંખ્યામાં47. વિશિષ્ટરૂપે, એલ-ડીઓપીએએ નિવારણ પેદા કર્યા વગર વધતા જતા ડ્રગનો ઉપયોગ ઘટાડ્યો હોવાથી, અમે સૂચવ્યું છે કે તે હાનિ ઘટાડવાના અભિગમો માટે વધુ યોગ્ય છે અને ખાસ કરીને, વ્યસનીઓ વર્તણૂક ઉપચાર કાર્યક્રમો દાખલ કરતી વખતે તેમના ડ્રગના ઉપયોગની ડિગ્રીને નિયંત્રણમાં લેવાની મંજૂરી આપે છે. એકંદરે, અમારા તારણોમાં ફાસિક ડોપામાઇન પ્રકાશનમાં ઘટાડો થયો છે જે લાંબી દવા વપરાશ દરમિયાન થાય છે જે મનોરંજનથી અનિયંત્રિત ડ્રગના ઉપયોગમાં પરિવર્તન મધ્યસ્થી કરે છે.
પદ્ધતિઓ
પ્રાણીઓ
ચાર્લ્સ રિવર (હોલિસ્ટર, સીએ, યુએસએ) ની પુખ્ત પુરુષ વિસ્તાર ઉંદરોને 300G અને 400G ની વચ્ચે વજન આપવામાં આવ્યું હતું અને તેને એક સાથે 12-H પ્રકાશ / 12-H શ્યામ ચક્ર (0700 પર લાઇટ) પર રાખવામાં આવ્યું હતું અને નિયંત્રિત તાપમાન અને ભેજ સાથે ખોરાક અને પાણી ઉપલબ્ધ જાહેરાત લિબિટમ. વૉશિંગ્ટન ઇન્સ્ટિટ્યૂશનલ એનિમલ કેર અને યુઝ કમિટી દ્વારા તમામ પ્રાણીનો ઉપયોગ મંજૂર કરવામાં આવ્યો હતો, અને શસ્ત્રક્રિયાની પ્રક્રિયા અસુરક્ષિત પરિસ્થિતિઓ હેઠળ કરવામાં આવી હતી. વોલ્ટમૅમેટ્રી પ્રયોગો માટે 50 પ્રાણીઓને સર્જરી કરવામાં આવી હતી, જેમાંથી 29 એ પ્રયોગો દરમિયાન કેથિઅર પેટેન્સી જાળવી રાખ્યું હતું, ઓછામાં ઓછા એક કાર્યકારી અને હિસ્ટોલોલીકલી ચકાસાયેલ ઇલેક્ટ્રોડ હતા અને વર્તણૂકના માપદંડો પસાર કર્યા હતા (નીચે જુઓ). ફાર્માકોલોજિકલ પ્રયોગ માટે, 28 ઉંદરના 32 જે કેથિસ્ટર ઇમ્પ્લાન્ટેશન હેઠળ હતા, ઇન્ટ્રાવેનિયસ કૅથિઅર પેટેન્સી જાળવી રાખ્યું હતું અને અભ્યાસમાં તેનો ઉપયોગ કરવામાં આવતો હતો. SHA pre-experimental training દરમિયાન પ્રાણીઓને તેમના સ્વ-વહીવટી દરના આધારે પ્રાયોગિક જૂથોમાં સામ્યતા આપવામાં આવી હતી. નમૂનાના માપો અગાઉના પ્રકાશનોમાં નોંધાયેલા સમાન હોય છે13.
સ્ટીરિઓટેક્સિક શસ્ત્રક્રિયા
ઉંદરોને એસોફ્લ્યુરેન સાથે એનેસ્થેસાઇઝ્ડ કરવામાં આવ્યો હતો, સ્ટીરિઓટેક્સિક ફ્રેમમાં મૂકવામાં આવ્યો હતો, જે નોનસ્ટેરોઇડ એન્ટિ-ઇન્ફ્લેમેટરી કારપ્રોફેન (5 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, સબકટેનસેસ) સાથે સંચાલિત હતો, અને શરીરનું તાપમાન જાળવવા માટે આઇસોથર્મલ પેડ પર મૂકવામાં આવ્યું હતું. ખોપરી ઉપરની ચામડી આલ્કોહોલ અને બેટાડિન સાથે સ્લેબ કરવામાં આવી હતી, લિડોકેઇન (0.5 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ) અને બ્યુપીવાકાઇન (0.5 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ) ના મિશ્રણથી સ્નાન કરાઈ હતી, અને ક્રેનિયમનો ખુલ્લો મુકાબલો કરવામાં આવ્યો હતો. ડીએલએસ (1.2-એમએમ અગ્રવર્તી, 3.1-mm લંબાઈ અને 4.8- એમએમ વેન્ટ્રલ બ્રેગમાને લક્ષ્યાંકિત કરવા માટે) ની ખોપરી માટે કોરેનિયમમાં છિદ્રો અને ડ્યુરા મેટરને સાફ કરવામાં આવ્યાં હતાં.48) અને ન્યુક્લિયસ વીએમએસ (1.3-એમએમ અગ્રવર્તી, 1.3-mm લંબાઈ અને 7.2- એમએમ વેન્ટ્રલ બ્રેગમાને) ની કોરને કોર કરે છે. એક કાર્બન ફાઇબર માઇક્રોઇલેક્ટ્રોડ ઘરેલું બનાવે છે25 ડી.એમ.એસ. માં વીએમએસ અને બીજામાં સ્થાન પામ્યું હતું, અને એગ / એજીસીએલ સંદર્ભ ઇલેક્ટ્રોઇડ ફોરબ્રેઇનના અલગ ભાગમાં રોપવામાં આવ્યું હતું. પ્રાણીઓના જુદા જુદા સમૂહમાં, માર્ગદર્શક કેન્યુલાસ (26 ગેજ; પ્લાસ્ટિક વન, રોનોક, વીએ, યુએસએ), સમાન લંબાઈના "ડમી" કેન્યુલાઝ દ્વારા અવરોધિત, વીએમએસને લક્ષ્ય બનાવવા દ્વિપક્ષીય રીતે સ્થપાયેલી હતી. ઇલેક્ટ્રોડ્સ અને માર્ગદર્શિકા કેન્યુલાને સ્ક્રુ દ્વારા ખોપરી ઉપર લગાવેલા ક્રેનિઓપ્લાસ્ટિક સિમેન્ટથી સુરક્ષિત કરવામાં આવી હતી. શસ્ત્રક્રિયા પછી, ઉંદરોને લાંબા-અભિનય, બિન-અસ્થિર એન્ટિ-ઇન્ફ્લેમેટરી કારપ્રોફેન (5 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, સબકટેનથી) સાથે સંચાલિત કરવામાં આવ્યા હતા અને એમ્બ્યુલરી સુધી શરીરનું તાપમાન જાળવવા માટે એક આઇસોથર્મલ પેડ પર મૂકવામાં આવ્યા હતા. એક અઠવાડિયા પછી એક અલગ શસ્ત્રક્રિયા દરમિયાન બધા પ્રાણીઓને ઇન્ટ્રાવેનસ કેથેટર્સ સાથે રોપવામાં આવ્યા હતા.
ઇન્ટ્રાવેનસ કેથેટર્સની ઇમ્પ્લાન્ટેશન
ઉંદરો આઇસોફ્લુરેનથી એનેસ્થેસાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા, જેને નોનસ્ટીરોઇડ એન્ટી-ઇન્ફ્લેમેટરી કારપ્રોફેન (5 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, સબક્યુટ્યુઅન) દ્વારા સંચાલિત કરવામાં આવ્યા હતા, અને શરીરનું તાપમાન જાળવવા માટે આઇસોધર્મલ પેડ પર મૂકવામાં આવ્યા હતા. કેથેટર્સ 0.6 મીમીના બાહ્ય વ્યાસ સાથે સિલાસ્ટિક ટ્યુબિંગથી બનાવવામાં આવ્યાં હતાં અને ઇન્ફ્યુઝન પંપના જોડાણ માટે એક છેડે (નસના નિવેશથી અંતર; પ્લાસ્ટિક વન, વીએ, યુએસએ) સાથે "હબ" સાથે જોડાયેલા હતા. કેથેટર્સને શરીરના આગળના ભાગ તરફના ખભાની પાછળના ભાગની એક ચીરો દ્વારા સબકટ્યુનલી રીતે દબાણ કરવામાં આવ્યું હતું, અને કેથેટરના નિકટવર્તી અંત નજીક સિલિકોન રબરના મણકા દ્વારા સહાયિત જમણા જ્યુગ્યુલર નસમાં લંગર કરવામાં આવ્યા હતા. નકારાત્મક દબાણ સાથે લોહી ખેંચીને કેથેટરની શ્રેષ્ઠ સ્થિતિની ચકાસણી કરવામાં આવી હતી. ત્યારબાદ ટેફલોન મેશના ટુકડા દ્વારા આસપાસના પેશીઓમાં ભરાયેલા હબને સુરક્ષિત કરવામાં આવ્યાં અને ચીરો બંધ થઈ ગયો, જેનાથી ઉંદરની પાછળના ભાગમાંથી હબ બહાર નીકળી ગયો. ત્યારબાદ કેથેટરને હેપરિન સોલ્યુશન (ખારામાં 80 યુ / મીલી) સાથે ફ્લશ કરવામાં આવ્યું હતું અને પોલીવિનીલપાયરોલિડોન (પીવીપી) અને હેપરિન (1000 યુ / એમએલ) ના સ્નિગ્ધ સોલ્યુશનથી ભરેલું હતું. કેથેટર હ polyબને પોલિઇથિલિન ટ્યુબિંગના ટૂંકા, લહેરવાળા ટુકડાથી cાંકી દેવામાં આવ્યાં હતાં અને પીટીપી સોલ્યુશન કેથેટરમાં પેટન્ટનેસ સુનિશ્ચિત કરવા માટે રહ્યું. શસ્ત્રક્રિયા બાદ, ઉંદરોને ઓછામાં ઓછા પાંચ દિવસ સુધી સ્વસ્થ થવાની મંજૂરી આપવામાં આવી.
કોકેન સ્વ-વહીવટ
સેલ્ફ એડમિનિસ્ટ્રેશન સત્રોનું સંચાલન 0900 અને 1700 કલાક વચ્ચે કરવામાં આવ્યું હતું. ઉંદરોએ સમાંતર પેનલ્સ પર સ્થિત બે નાક-પોક રિસ્પોન્સ ડિવાઇસ (ઇન્ટિગ્રેટેડ ક્યુ લાઇટ સાથે પોર્ટ) સાથે સજ્જ મોડ્યુલર ઓપરેંટ ચેમ્બર (મેડ એસોસિએટ્સ, વીટી, યુએસએ) માં કોકેઈન (સિગ્મા, સેન્ટ લૂઇસ, એમઓ, યુએસએ) સ્વ-સંચાલકને શીખ્યા. એક જ દીવાલ, ઘરની પ્રકાશ અને સ્પીકરો શુદ્ધ-ટોન અને સફેદ-અવાજ ઉત્તેજના પ્રદાન કરે છે. ઓપરેટન્ટ ચેમ્બરને સાઉન્ડ-એ્યુએન્યુએટેડ બાહ્ય ચેમ્બરમાં રાખવામાં આવ્યો હતો. ઉંદરો (3-4 મહિના જૂના) ને FI20 મજબૂતીકરણ શેડ્યૂલ પર ઓપરેટર પ્રતિસાદ પછી કોકેન મેળવવા માટે તાલીમ આપવામાં આવી હતી. સક્રિય બંદરમાં નાક-પૉકીંગ (પ્રાણીઓ વચ્ચે સંતુલિત બાજુ) ના પરિણામે ઓડિયોવિઝ્યુઅલ ઉત્તેજનાની 0.5-સેકંડ રજૂઆત સાથે જોડી રાખવામાં આવે છે (લગભગ દસ સેકન્ડમાં 20 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ) કોકેનનું તાત્કાલિક અંતરાય પ્રેરણા (નાકની અંદર પ્રકાશનો પ્રકાશ પોક પોર્ટ અને ટોન; કંડિશન કરેલા ઉત્તેજના, સીએસ). સીએસ પ્રસ્તુતિ દરમિયાન, 20- સેકન્ડ ટાઇમ આઉટ લાદવામાં આવ્યો હતો, જેમાં નાક પોકિંગને આગળ નશીલા પ્રેરણા અથવા અન્ય કોઈ પ્રોગ્રામ થયેલા પરિણામો ન મળ્યા. સત્ર દરમિયાન ડ્રગની ઉપલબ્ધતા સફેદ ઘોંઘાટ અને ઘરના પ્રકાશના પ્રકાશને સૂચવે છે. પ્રતિક્રિયા વિશિષ્ટતા માટે નિયંત્રિત કરવા માટે, બીજા (નિષ્ક્રિય) પોર્ટના નાક-પૉકીંગનું નિરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું, પરંતુ તે ક્યારેય પ્રબળ થયું નહીં. અભ્યાસમાં સમાવેશ કરવા માટેના બે સતત સત્રો પર પ્રત્યેક સત્ર દીઠ પાંચ અથવા વધુ સક્રિય પ્રતિસાદોના માપદંડ સાથે પૂર્વ તાલીમ સત્રો પછી, ઉંદરોને દરરોજ એક કલાક (ટૂંકા વપરાશ; શીએ) માટે એક દિવસ અને છ પછી કોકેઈન સુધી દૈનિક ઍક્સેસ આપવામાં આવતી હતી. ત્રણ અઠવાડિયા (દિવસ દીઠ પાંચ દિવસ) માટે દિવસ દીઠ કલાક (લાંબા વપરાશ; એલજીએ). બે થી પાંચ સત્રોમાં પ્રાણીઓ વચ્ચેના માપદંડ સુધી પહોંચવાની સત્રોની સંખ્યા. અગાઉ જાણ કરેલા નિયંત્રણ જૂથમાંથી વર્તણૂક પરિણામો13 એલજીએ કોકેન સ્વ-વહીવટ હેઠળ ઉંદરોના વર્તણૂંક ડેટાની સમાન સંખ્યાના SHA રેજીમેન હેઠળ પ્રશિક્ષિત ઉંદરોને તુલના કરવા માટે ઉપયોગમાં લેવાય છે.
FI20 કોકેન સ્વ-વહીવટના ત્રણ SHA અથવા LgA અઠવાડિયા પછી, ઉંદરોનો સબસેટ પ્રગતિશીલ-ગુણોત્તર પરીક્ષણમાં થયો. આ સત્રો FI20 સત્રોની સમાન હતા સિવાય કે પ્રાણીઓને આ સત્ર દરમિયાન કોકેઈનના સતત ઇન્ફ્યુઝન માટે વધતી સંખ્યામાં ઓપરેટ પ્રતિભાવો કરવાની જરૂર હતી. દરેક ટ્રાયલ પર ઑપરેટરની આવશ્યકતા (T) 1.4 નું ગોળાકાર ડાઉન પૂર્ણાંક હતું(T - 1) લીટર પ્રેસ, 1 લિવર પ્રેસથી શરૂ થાય છે (તે છે, 1, 1, 1, 2, 3, 5, 7, 10, 14, 20, 28, 40, 56, 79, 111, 155, 217, 304, 426, XNUMX, XNUMX, XNUMX, XNUMX, XNUMX, XNUMX) . આ કામની આવશ્યકતા એટલી ઊંચી બની જાય છે કે અંતે પ્રાણીઓ પ્રતિકાર કરવાનું બંધ કરે છે અને "બ્રેક પોઇન્ટ" સુધી પહોંચે છે. બ્રેક પોઇન્ટને કાર્યરત રીતે 30 મિનિટના સમયગાળા પહેલા મેળવેલા ઇન્ફ્યુશનની કુલ સંખ્યા તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી, જેમાં કોઈ ઇન્ફ્યુશન પ્રાપ્ત થયો ન હતો.
એલ-ડોપા / બેન્સેરઝાઇડ વહીવટ
એલ-ડીઓપીએ (એલ-એક્સએનએક્સએક્સ-ડાયહાઇડ્રોક્સિફેનેલાલાનાઇન) એલ-ડીઓપીએ (પેરિફેરલ, સેન્ટ લૂઇસ, એમઓ, યુએસએ બંને) ના પેરિફેરલ બ્રેકડાઉન ઘટાડવા માટે પેરિફેરલી એક્ટિંગ ડીઓપીએ ડિકાર્બોક્સિલેઝ ઇન્હિબિટર બેનસેરાઝાઇડ સાથે સંયોજનમાં આપવામાં આવ્યું હતું. બંને દવાઓ ક્ષારમાં વિસર્જન કરવામાં આવી હતી અને 3,4 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ વજનના વજનમાં ઇન્ટ્રાવેન્સથી ઇન્ફ્રાવેન્સથી દાખલ કરવામાં આવી હતી. L-DOPA ને 1, 30, 0, અથવા 10 એમજી / કિલોગ્રામ પર સત્ર શરૂ થતાં પહેલાં 30 મિનિટ સંચાલિત કરવામાં આવ્યા હતા, જ્યારે એલ-ડીઓપીએ ડોઝ સંચાલિત હોવા છતાં બેંસેરાઝાઇડને 90 એમજી / કિગ્રા પર સતત આપવામાં આવ્યું હતું. અભ્યાસના પ્રથમ સેટ (ડોઝ રિસ્પોન્સ) માં, એક દિવસમાં ઉંદરોને એલ-ડીઓપીએ સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી (ફિગ 4). એલ-ડીઓપીએ (DOPA) ડોઝમાંથી કોઈએ સામાન્ય કામગીરીને અવરોધિત કરી દીધી અથવા ડિસક્નેસિયાને લીધે તેનો ઉપયોગ થતો નથી. પુનરાવર્તિત એલ-ડીઓપીએ વહીવટની સંભવિત રૂબરૂ અસરોને ટાળવા માટે, એલ-ડીઓપીએ સારવાર પછી ઉંદરોને "એલ-ડીઓપીએ સેશન્સ" પછી તાલીમ આપવામાં આવી હતી. અભ્યાસના બીજા સેટમાં, પ્રાણીઓને આ એલ-ડીઓપીએ (D-LOP) સાથે સારવાર કરવામાં આવી હતી, દરેક સ્વ-વહીવટ સત્ર પહેલા બે અઠવાડિયા સુધી ચાલે છે (ફિગ 5). અભ્યાસના ત્રીજા સમૂહમાં, ઉંદરોએ એલજીએ દરમિયાન વધેલા કોકેન સ્વ-વહીવટનું પ્રદર્શન કર્યું, એલ-ડીઓપીએ (દ્વિપક્ષીય પ્રવાહ) ની દ્વિપક્ષીય પ્રેરણાની અસરો (25-50 μg 0.5 μl ACSF માં ઓગળેલા દરેક ગોળાર્ધમાં ઓગળેલા; 0.25 μl / min; સિગ્મા, સેન્ટ. લ્યુઇસ, એમઓ, યુએસએ) અને એસીએસએફમાં ડ્રગ લેવાની વર્તણૂંક અંગેની વીએમએસમાં તપાસ કરવામાં આવી હતી. પ્રેરણા દિવસો પર, ડમી કેન્યુલાને 33-gauge પ્રેરણા કેન્યુલાથી બદલવામાં આવ્યું હતું જે માર્ગદર્શિકા કેન્યુલાથી 1.0 એમએમ બહાર નીકળી ગયું હતું. સેશન શરુ કરતાં દસ મિનિટ પહેલાં ઇન્ફ્યુશન આપવામાં આવ્યું હતું. પ્રેરણા પછી, ડ્રગના ફેલાવા માટે પરવાનગી આપવા માટે દૂર કરવાના બે મિનિટ પહેલાં કેન્યુલાસને સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા.
વોલ્ટેમેટ્રિક માપ અને વિશ્લેષણ
પ્રાયોગિક સત્રો (દરેક અઠવાડિયામાં બે સત્ર દરમિયાન કરવામાં આવતી રેકોર્ડીંગ્સ) દરમિયાન ફાસ્ટ-સ્કેન સાયક્લિક વોલ્ટેમેટ્રી દ્વારા ડોપામાઇન શોધ માટે, ક્રોનિકલી ઇમ્પ્લાન્ટેડ કાર્બન ફાઇબર માઇક્રોસેન્સર્સ હેડ-માઉન્ટ વોલ્ટેમેટ્રિક એમ્પ્લીફાયર સાથે જોડાયેલા હતા, જે પીસી-સંચાલિત ડેટા-એક્વિઝિશન અને વિશ્લેષણ પ્રણાલી સાથે સંકળાયેલા હતા. (નેશનલ ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ્સ, ટેક્સાસ, યુએસએ) ઇલેકટ્રીકલ સ્વિવેલ (મેડ એસોસિએટ્સ, વીટી, યુએસએ) દ્વારા કે જે પરીક્ષણ ચેમ્બરની ઉપર માઉન્ટ કરવામાં આવી હતી. 100 Hz ની સેમ્પલિંગ દર પ્રાપ્ત કરવા માટે પ્રત્યેક 10 એમએસના વોલ્ટેમેટિક સ્કેનને પુનરાવર્તિત કરવામાં આવ્યા હતા. પ્રત્યેક વોલ્ટેમેમેટ્રીક સ્કેન દરમિયાન, કાર્બન-ફાઇબર ઇલેક્ટ્રોડની સંભવિત રૂપે -0.4 V વિરુદ્ધ એજી / એજીક્લથી + 1.3 V (એન્ોડિક સ્વીપ) અને 400 V / s (પાછળના 8.5-MS) પર સ્કેન ટાઇમ પર પાછા (કેથોડિક સ્વીપ) થી રેમ્પેડ કરવામાં આવી હતી. ) અને સ્કેન વચ્ચે -0.4 V પર રાખવામાં આવી હતી. જ્યારે ઇલેક્ટ્રોડની સપાટી પર ડોપામાઇન હાજર હોય છે, ત્યારે તે એન્કોડિક સ્વીપ દરમિયાન ડોપામાઇન-ઓ-ક્વિનોન (પીક પ્રતિક્રિયા લગભગ + 0.7 V પર શોધવામાં આવે છે) બનાવે છે જે કેથોડિક સ્વીપમાં ડોપામાઇનને ઘટાડે છે (પીક પ્રતિક્રિયા આશરે -0.3 વી). ઇલેક્ટ્રોનની આગામી આવર્તન વર્તમાન તરીકે માપવામાં આવે છે અને તે વિદ્યુત વિચ્છેદન-વિશ્લેષણમાંથી પસાર થયેલા પરમાણુઓની સીધી પ્રમાણસર છે. વોલ્ટમૅમેટ્રીક ડેટા 0.025 - 2,000 Hz પર બેન્ડ-પાસ ફિલ્ટર કરેલું હતું. દરેક સ્કેનમાંથી મેળવેલ બેકગ્રાઉન્ડ-બાદબાકી, સમય-સમાપ્ત વર્તમાન વિશ્લેષકની રાસાયણિક હસ્તાક્ષર લાક્ષણિકતા પ્રદાન કરે છે, જે અન્ય પદાર્થોમાંથી ડોપામાઇનના રિઝોલ્યુશનને મંજૂરી આપે છે.49. ડોપામાઇનને પ્રમાણભૂત તાલીમ સમૂહનો ઉપયોગ કરીને કેમોમેટ્રિક વિશ્લેષણ દ્વારા વોલ્ટેમેટિક સિગ્નલથી અલગ પાડવામાં આવ્યો હતો25 ક્રોનિકલી ઇમ્પ્લાન્ટેડ ઇલેક્ટ્રોડ્સ દ્વારા શોધી કાઢેલી ઇલેક્ટ્રિકલી ઉત્તેજિત ડોપામાઇન પ્રકાશનને આધારે. ઇલેક્ટ્રોડ્સની સરેરાશ પોસ્ટ-ઇમ્પ્લાન્ટેશન સંવેદનશીલતાના આધારે ડોપામાઇન સાંદ્રતા અંદાજવામાં આવી હતી25. સરેરાશ એકાગ્રતાના વિશ્લેષણ પહેલાં, બધા ડેટાને ટ્રાયલ રનિંગ એવરેજની અંદર 5-point સાથે સુગંધિત કરવામાં આવ્યા હતા. ઓપરેટન્ટ રિસ્પોન્સ (પોસ્ટ-રિસ્પોન્સ) અથવા સીએસની બિન-આકસ્મિક રજૂઆત પછી ડોપામાઇનની સાંદ્રતા સાત સેકંડ (અંદાજિત ફાસિક સિગ્નલની અંદાજિત અવધિ) પર સરેરાશ હતી અને ઑપરેંટ કરતા પહેલા બે સેકંડમાં સરેરાશ સાંદ્રતા સાથે સરખામણી કરવામાં આવી હતી. પ્રતિભાવ (આધારરેખા). સીએસ અને બીજા અને ત્રીજા અઠવાડિયામાં (દરેક 20 સેકંડ માટે સત્ર દીઠ બે વખત) દર રેકોર્ડિંગ સત્રો દરમિયાન, બિન-આકસ્મિક રીતે રજૂ કરવામાં આવ્યું હતું, પરંતુ તે સમયગાળા દરમિયાન ડ્રગ ડિલિવરી અને કય વચ્ચે જોડાણ સંબંધી કન્ડિશનિંગમાં દખલ ટાળવા માટે પ્રથમ સપ્તાહ દરમિયાન નહીં. જ્યાં આ સંગઠન સંભવતઃ વિકાસશીલ હતું.
આંકડાકીય વિશ્લેષણ
સ્વયં-વહીવટી સત્રમાં અને પછી પ્રાણીઓ અને અઠવાડિયામાં વ્યક્તિગત આંકડાકીય સિકલનો સરેરાશ આંકડાકીય શક્તિ વધારવા માટે સરેરાશ કરવામાં આવતો હતો. પ્રતિક્રિયા, મગજ ક્ષેત્ર, કોકેનનો ઇન્ટેક અને અઠવાડિયાના પરિબળો સાથે મલ્ટિવેરિયેટ ANOVA નો ઉપયોગ કરીને સંકેતોની તુલના કરવામાં આવી હતી. ઇલેક્ટ્રોકેમિકલ ડેટા સાથે સરખામણી કરવા માટે, વર્તણૂંક ડેટા પણ અઠવાડિયામાં પકડાયા હતા. એલ-ડીઓપીએ પ્રયોગો, સંબંધિત ડ્રગ ટ્રીટમેન્ટ (કોઈ ઉપચાર, એલ-ડોપા ડોઝ, અથવા વાહન) ના વર્તણૂંક ડેટા (સતત દિવસો પર સરેરાશ દિવસો દરમ્યાન સરેરાશ) નો ડ્રગ ટ્રીટમેન્ટ, ટ્રેનિંગ રિઝિમેન, કોકેન ઇન્ટેક, મલ્ટિવેરિયેટ ANOVA નો ઉપયોગ કરીને વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. અને અઠવાડિયાના પરિબળો તરીકે. નોંધપાત્ર મુખ્ય અસરો અથવા ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓના કિસ્સામાં, પોસ્ટ-હોક વિશ્લેષણ હાથ ધરવામાં આવ્યા હતા અને P બહુવિધ પરીક્ષણ માટે હોલ્મ-બોનફેરોની સુધારણા પદ્ધતિ અનુસાર મૂલ્યોને સમાયોજિત કરવામાં આવ્યા હતા50. પ્લસ પ્રિઝમ (ગ્રાફપૅડ સૉફ્ટવેર, લા જોલા, સીએ, યુએસએ) નો ઉપયોગ કરીને બનાવવામાં આવ્યા હતા. એસપીએસએસ, વર્ઝન 17.0 (શિકાગો, આઇએલ, યુએસએ) અને પ્રિઝમનો ઉપયોગ કરીને આંકડાકીય વિશ્લેષણ હાથ ધરવામાં આવ્યા હતા. ડેટા પેરામેટ્રિક આંકડાકીય વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે. ડેટા સંગ્રહ અને વિશ્લેષણ પ્રયોગોની શરતોને અંધત્વમાં રજૂ કરાયા ન હતા.
રેકોર્ડિંગ સાઇટ્સની હિસ્ટોલોજિકલ ચકાસણી
પ્રયોગ પૂર્ણ થયા પછી, પ્રાણીઓને કેટામાઇન (100 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ) અને ઝાયલેઝિન (20 એમજી / કિલોગ્રામ) ના ઇન્ટ્રેપરિટોનેલ ઇન્જેક્શન સાથે એનેસ્થેસાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા. ઇલેક્ટ્રોઇડ પ્રત્યારોપણવાળા પ્રાણીઓમાં, રેકોર્ડીંગ સાઇટ્સને ટ્રાયકાર્ડિઅલ પર્ફ્યુઝનથી પહેલા 300% -પારાફોર્મેલ્ડેહાઇડ દ્વારા ઇલેક્ટ્રોલિટીક ઇજા (4 V) સાથે ચિહ્નિત કરવામાં આવ્યા હતા. પેરાફોર્મેલ્ડેહાઇડમાં પેનફોર્મલ્ડેહાઇડમાં મગજ દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને ચોવીસ કલાક પછી પોસ્ટ-ફિક્સ્ડ થઈ ગયા હતા અને ત્યારબાદ ઇસોપેંટેન સ્નાનમાં ઝડપથી સ્થિર થઈ ગયા હતા, એક ક્રાયોસ્ટેટ (50-μm કોરોનલ સેક્શન્સ, -20 ° C) પર કાપીને, અને સીસેલ વાયોલેટ સાથે દ્રશ્યમાન કરવામાં મદદ કરવા માટે રચનાત્મક માળખાં અને ઇલેક્ટ્રોડ-પ્રેરિત ઘાવ અથવા પ્રેરણા સાઇટ્સ.
પૂરક સામગ્રી
1
8
9
10
11
2
3
4
5
6
7
સમર્થન
તકનીકી સપોર્ટ માટે સ્કોટ એનજી-ઇવાન્સ, ક્રિસ્ટીના એકર્સ સૅનફોર્ડ, ચૅડ ઝિટેઝ, નિકોલ મુરે અને ડેનિયલ હેડિડીનો આભાર, અને મનીકા આર્નોલ્ડ અને જેરેમી ક્લાર્ક ઉપયોગી પ્રતિભાવ માટે આભાર. આ સંશોધન જર્મન સંશોધન ફાઉન્ડેશન (ડોશે ફોર્શંગસેમેમેન્સિફેફ્ટ, ડીએફજી) ગ્રાન્ટ ડબલ્યુઆઈ XXX / 3643-1 (આઇડબલ્યુ), આલ્કોહોલ એન્ડ ડ્રગ ઇન્સ્ટિટ્યુટ (PEMP) અને યુનિવર્સિટી ઓફ વોશિંગ્ટન (PEMP) ના પ્રોવોસ્ટ અને રાષ્ટ્રીય સંસ્થાઓ દ્વારા પુરસ્કારો દ્વારા સમર્થિત હતું. આરોગ્ય અનુદાન T1-DA32 (LMB), F027858-DA32 (PAG), P033004-DA01 (PEMP), R015916-DA21 (PEMP) અને R021793-DA01 (PEMP).
ફૂટનોટ્સ
લેખક યોગદાન
આઇડબ્લ્યુ અને પીઇએમપી ડિઝાઇન સંશોધન, આઇડબ્લ્યુ, એલએમબી અને પેગ દ્વારા સંશોધન કરવામાં આવ્યું છે, અને આઇડબ્લ્યુએ વિશ્લેષણ કર્યું છે; આઇડબ્લ્યુ અને પીઇએમપીએ પેપર લખ્યું.
લેખકની માહિતી
લેખકો વ્યાજના કોઈ સંઘર્ષની જાહેરાત કરે છે.
સંદર્ભ