ઓપ્ટોજેનેટિક્સ કોકેઈન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદના (2) માં ડોપામાઇન ડીએક્સએનએક્સએક્સ રીસેપ્ટર્સને વ્યક્ત કરતી એક્ક્મ્બાલ મીડિયમ સ્પાઇની ચેતાકોષની ભૂમિકા દર્શાવે છે.

પર જાઓ:

અમૂર્ત

ન્યુક્લિયસ એકમ્બમ્બન્સ (એનએએસી) ની અંદર લાંબા સમયથી ચાલતા, ડ્રગથી પ્રેરિત અનુકૂલનને ડ્રગ-મધ્યસ્થી વ્યસનકારક વર્તણૂકોમાં ફાળો આપવા માટે સૂચવવામાં આવ્યું છે. અહીં અમે એનએએસી માધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સ (એમએસએન) ની ભૂમિકાની તપાસ માટે toપ્ટોજેનેટિક અભિગમનો ઉપયોગ કર્યો છે, જેમાં કોપેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનામાં ડોપામાઇન ડીએક્સએનએમએક્સ રીસેપ્ટર્સ (ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ) વ્યક્ત કરવામાં આવે છે. ચેનલરહોડોપ્સિન-એક્સએનએમએક્સ (સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ) ને એન્કોડિંગ એડેનો સાથે સંકળાયેલ વાયરલ વેક્ટરને ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-ક્રિ ટ્રાન્સજેનિક ઉંદરના એનએસીમાં પહોંચાડવામાં આવ્યો. આ અમને એનએસીમાં D2R-MSNs ની પસંદગીયુક્ત રીતે ફોટોસ્ટિમ્યુલેશન કરવાની મંજૂરી આપી. D2R-MSNs સ્થાનિક અવરોધક સર્કિટ બનાવે છે, કારણ કે D2R-MSN ના ફોટોસ્મ્યુલેશન પડોશી એમએસએનએસમાં અવરોધક પોસ્ટ્સનેપ્ટિક કરંટ (આઇપીએસસી) ઉત્તેજિત કરે છે. એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએમએન-એમએસએનનું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન વિવો માં ન તો દીક્ષાને અસર કરી ન કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ. જો કે, ડ્રગના ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન ફોટોસ્ટિમ્યુલેશન, કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાની તીવ્ર અભિવ્યક્તિ. આ પરિણામો બતાવે છે કે એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ-એમએસએન એ ઉપાડ-પ્રેરિત પ્લાસ્ટિસિટીમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે અને ડ્રગના દુરૂપયોગને સમાપ્ત કર્યા પછી ફરીથી થવામાં ફાળો આપી શકે છે.

કીવર્ડ્સ: toપ્ટોજેનેટિક્સ, મધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સ, ડોપામાઇન ડીએક્સએનયુએમએક્સ રીસેપ્ટર્સ, કોકેઇન, ડ્રગ વ્યસન

પરિચય

ડોપામાઇન (ડીએ) સંકેત ઇનામની અપેક્ષા અને લક્ષ્ય-નિર્દેશિત વર્તન સાથે સંકળાયેલ છે (વાઇઝ, 2004; જાઓ અને ગ્રેસ, 2005; બેરીજ, 2007). ડોપામિનર્જિક ડિસઓર્ડરની જાણીતી પેથોલોજીઓમાંની એક છે ડ્રગ વ્યસન (રોબિન્સન અને બેરીજ, 1993, 2003). વ્યસનયુક્ત પદાર્થોના વારંવાર સંપર્કમાં આવ્યા પછી, અનુકૂલનશીલ ફેરફારો ડીએ મેસોલીમ્બિક માર્ગમાં પરમાણુ અને સેલ્યુલર સ્તરે થાય છે; આ ડ્રગની પરાધીનતા તરફ દોરી શકે છે, જે એક લાંબી, રિલેપ્સિંગ ડિસઓર્ડર છે જેમાં અનિયમિત ડ્રગ લેવાની અને ડ્રગ લેવાની વર્તણૂક તેમના ગંભીર નકારાત્મક પરિણામો હોવા છતાં યથાવત્ રહે છે (થોમસ એટ અલ., 2008; બાયક, 2013). મેસોલીમ્બીક ડોપામિનેર્જિક સિસ્ટમમાં થતાં ફેરફારોનું લક્ષણ આમ નશો વ્યસનને સમજવાની ચાવી છે.

સ્ટ્રોએટમના માધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સ (એમએસએન) માં ડોપામાઇન ડીએક્સએનએમએક્સ રીસેપ્ટર્સ (ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ) અને ડીએક્સએનયુએમએક્સ રીસેપ્ટર્સ (ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર) ખૂબ વ્યક્ત કરવામાં આવે છે. એવું સૂચવવામાં આવ્યું છે કે વેન્ટ્રલ સ્ટ્રાઇટમમાં લાંબા સમયથી ચાલતા ડ્રગ-પ્રેરણા અનુકૂલન, ન્યુક્લિયસ એકમ્બમ્બન્સ (એનએસી) તરીકે વધુ સારી રીતે જાણીતા છે, વ્યસનના વિકાસમાં તેમજ ડ્રગની શોધમાં અને ફરીથી થતાં વર્તણૂકો (લોબો અને નેસ્ટલર, 2011; સ્મિથ એટ અલ., 2013). વેન્ટ્રલ ટેગમેન્ટલ એરિયાના ડોપામિનર્જિક સેલ બ bodiesડીઝ મોટે ભાગે એનએસીને જન્મ આપે છે. એનએસીમાં 95% થી વધુ કોષો એમએસએન છે, જે ચાર મુખ્ય મગજના ક્ષેત્રોમાંથી ઉત્તેજનાપૂર્ણ ઇનપુટ્સ મેળવે છે: પ્રેફ્રન્ટલ કોર્ટેક્સ, હિપ્પોકampમ્પસનું વેન્ટ્રલ સબિક્યુલમ, બેસોલ્ટ્રલ એમીગડાલા અને થેલેમસ (સેસackક અને ગ્રેસ, 2010; લüશર અને મલેન્કા, 2011). એનએસીમાંના એમએસએનને બે મુખ્ય પેટા વસ્તીઓમાં વહેંચી શકાય છે: સીધા માર્ગનો એમએસએન જે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ વ્યક્ત કરે છે અને સીધા મિડબ્રેઇન ડીએ વિસ્તારોમાં પ્રોજેક્ટ કરે છે, અને પરોક્ષ માર્ગ એમએસએન જે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ વ્યક્ત કરે છે અને વેન્ટ્રલ પેલિડમ (ક્રેઇઝર અને મલેન્કા, 2008; સેસેક અને ગ્રેસ, 2010; લüશર અને મલેન્કા, 2011; સ્મિથ એટ અલ., 2013). એમએસએનએન ગેબએર્જિક હોવાને કારણે, એમએસએન ન્યુરોન્સનું સક્રિયકરણ તેમના ડાઉનસ્ટ્રીમ લક્ષ્યોને રોકે છે જે જીએબીએર્જિક (ચેવાલીઅર અને ડેનિઆઉ, 1990). તેથી, D1R-MSNs ના સક્રિયકરણથી મિડબ્રેઇન ડી.એ. ન્યુરોન્સને ઉત્તેજીત કરવામાં આવશે, જે પછીથી પુરસ્કાર સંબંધિત વર્તણૂકોના નિયમનમાં ફાળો આપે છે (લüશર અને મલેન્કા, 2011; બોકલિસ્ચ એટ અલ., 2013).

આનુવંશિક રીતે ઇજનેરી ઉંદરોનો ઉપયોગ કરતા તાજેતરના અધ્યયનો જે સેલ-પ્રકાર વિશિષ્ટ રીતે ક્ર recકombમ્બિનેઝને વ્યક્ત કરે છે, કોકેન વ્યસન વર્તણૂકોમાં ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએન અને ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએન માટે વિવિધ ભૂમિકાઓ જાહેર કરી છે. આવા ઉંદર વિશિષ્ટ ઝેર, toપ્ટોજેનેટિક પ્રોબ્સ અથવા ડીઆરએડીડી (ડિઝાઇનર ડ્રગ દ્વારા વિશેષ રૂપે સક્રિયકૃત ડિઝાઇનર રીસેપ્ટર્સ) ને ડીએક્સએન્યુએમએક્સઆર-એમએસએન અથવા ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએનઓને પસંદ કરીને ચાલાકી કરવા માટે આનુવંશિક લક્ષ્યને સક્ષમ કરે છે. આ અભિગમથી વ્યસનકારક વર્તણૂકોમાં એમએસએનઓની ભૂમિકા વિશેની કેટલીક સંમતિ તરફ દોરી ગઈ છે: ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએન સ્પષ્ટ રીતે વ્યસનકારક વર્તણૂકોને પ્રોત્સાહન આપે છે, જ્યારે ડ્રગ-પ્રેરિત વ્યસન વર્તણૂકોના વિકાસમાં કોઈ ચોક્કસ ભૂમિકા (અથવા અવરોધક ભૂમિકા) સૂચવવામાં આવી નથી (હિકિડા એટ અલ., 2010; લોબો એટ અલ., 2010; ફર્ગ્યુસન એટ અલ., 2011; બોક એટ અલ., 2013). કોકિનના સંસર્ગમાં એમએસએન બંનેની વસતીમાં સિનેપ્ટિક ફેરફાર અને જનીન અભિવ્યક્તિમાં બદલાવ લાવવામાં આવે છે (લોબો એટ અલ., 2010; લોબો અને નેસ્લર, 2011; ગ્રુટર એટ અલ., 2013). તેમ છતાં એવું લાગે છે કે D1R-MSNs અને D2R-MSNs કોકેન-મધ્યસ્થી વ્યસનકારક વર્તણૂકોમાં વિરોધી ભૂમિકા ભજવે છે, D2R-MSNs ની ચોક્કસ ભૂમિકા સ્પષ્ટ નથી.

પહેલાં તે બતાવવામાં આવ્યું છે કે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ (બાઇક એટ અલ.) ની ગેરહાજરીને કારણે સંવેદનશીલતામાં થોડો ઘટાડો થતાં, ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર નોકઆઉટ (કેઓ) ઉંદર સામાન્ય કોકેન-મધ્યસ્થી વર્તણૂક સંવેદના અને કોકેન-શોધતી વર્તણૂકો દર્શાવે છે. 1995; ચૌસ્મર એટ અલ., 2002; સિમ એટ અલ., 2013). જો કે, ડ્રગની ઉપાડ દરમિયાન તનાવના સંપર્કમાં કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ તેમજ ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર કો માઉસ (કોમ ઉઇસ. સિમ એટ અલ.) 2013). એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆરની વિશિષ્ટ પછાડવું મૂળભૂત લોકમોટર પ્રવૃત્તિને અસર કરતી નથી, અથવા કોકેઇન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાને અસર કરતું નથી, પરંતુ કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાના અભિવ્યક્તિને અટકાવવા માટે તાણની ક્ષમતાને પ્રદાન કરે છે (સિમ એટ અલ., 2013). આ તારણો ભારપૂર્વક સૂચવે છે કે એનએસીમાં D2R ના નાકાબંધી, કોકેન-મધ્યસ્થી વર્તણૂકીય સંવેદનાને અટકાવતું નથી. તેના કરતા, એવું લાગે છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર ઉપાડ દરમિયાન તાણ-પ્રેરિત સિનેપ્ટિક ફેરફારોના નિયમનમાં એક વિશિષ્ટ ભૂમિકા ભજવે છે જે કોકેન-લેવી અને ફરીથી લગાડવાની વર્તણૂકમાં વધારો તરફ દોરી જાય છે (સિમ એટ અલ., 2013).

અહીં આપણે કોકૈન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનામાં એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએનની ભૂમિકાનું વધુ મૂલ્યાંકન કરવા માટે toપ્ટોજેનેટિક્સનો ઉપયોગ કર્યો છે. મગજની ટુકડાઓનો ઉપયોગ કરીને, અમે શોધી કા .ીએ છીએ કે ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસનું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન પાડોશી એમએસએનનો સમાવેશ કરતા એનએસીમાં સ્થાનિક અવરોધક સર્કિટને સક્રિય કરે છે. એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ-એમએસએનનો ફોટોસ્મ્યુલેશન વિવો માં ન તો દીક્ષાને અસર કરે છે અને ન કોકેઈન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ. જો કે, ડ્રગના ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ-એમએસએનનું પુનરાવર્તિત સક્રિયકરણ, કોકેન-પ્રેરિત વ્યસન વર્તનને સંતુલિત કરે છે. અમારા પરિણામો બતાવે છે કે એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ- એમએસએન એ ઉપાડ-પ્રેરિત પ્લાસ્ટિસિટીમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે અને ડ્રગના દુરૂપયોગને સમાપ્ત કર્યા પછી ફરીથી થવામાં ફાળો આપી શકે છે.

સામગ્રી અને પદ્ધતિઓ

ઉંદર

સીએક્સએનયુએમએક્સબીએલ / એક્સએનએમએક્સ પૃષ્ઠભૂમિ પર ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે બીએસી ટ્રાન્સજેનિક ઉંદર એમએમઆરઆરસી (મ્યુટન્ટ માઉસ રીજિયન રિસોર્સ સેન્ટર્સ, બીએક્સએનએમએક્સ.એફવીબી (સીજી) -ટીજી (ડીઆરડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રિઅર) ઇઆરએક્સન્યુમએક્સએક્સ / એમ્યુકડ) માંથી મેળવવામાં આવ્યા છે. વર્તણૂકીય પ્રયોગોમાં, D2-Cre ટ્રાન્સજેનનો અભાવ ધરાવતા કચરાપેટીઓ D57-Cre ઉંદરના નિયંત્રણ તરીકે ઉપયોગમાં લેવાય છે. ઉંદરને તાપમાન અને ભેજની સતત સ્થિતિમાં, અને એક 6-h પ્રકાશ, 6-h શ્યામ સમયપત્રક હેઠળ ચોક્કસ રોગકારક મુક્ત અવરોધ સુવિધામાં જાળવવામાં આવ્યા હતા. એનિમલ કેર અને હેન્ડલિંગ એ કોરિયા યુનિવર્સિટી અને કેઆઇએસટીની સંસ્થાકીય એનિમલ કેર એન્ડ યુઝ સમિતિઓ દ્વારા મંજૂર ધોરણો અનુસાર કરવામાં આવી હતી.

વાયરસ વેક્ટરની તૈયારી

પાએવી-એએફએક્સએનએમએક્સએઆઈએચસીએચઆરએક્સએનએમએક્સ (એચએક્સએનએમએક્સએક્સ) -ઇવાયએફપી-ડબલ્યુપીઆરઇ ઉદારતાપૂર્વક કાર્લ ડિઝેરothથ (સ્ટેનફોર્ડ યુનિ. એએવીની તૈયારી માટે, એન્ટિબાયોટિક્સ અને એફબીએસ સાથે ડીએમઇએમ મીડિયામાં હેકએક્સએનએમએક્સટીએલ કોષો ઉગાડવામાં આવ્યા હતા. રક્તસ્રાવના આગલા દિવસે, 1-સે.મી. ડીશમાંથી 2% સંગમથી વધુ ચાર પ્લેટો પાંચ 134-સે.મી. ડીશ પર tedોળવામાં આવી હતી અને 293 – 90 એચ માટે અથવા 10 સુધી 15% સંગમ સુધી. હેટએક્સએનએમએક્સટીએલ કોષોને પેટએવી-ડીઆઈઓ-સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ-ઇવાયએફપી, પાએવી-ડીજે અને પીહેલ્પરથી જેટપીઆઈ ટ્રાંફેક્શન રીએજન્ટ (ક્યુબિઓજેન) નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. ડીએનએ / ડીએમઇએમ / પીઇઆઈ કોકટેલ 18 મિનિટ માટે ઓરડાના તાપમાને વમળ અને સેવવામાં આવ્યું હતું. સેવન પછી, પ્રત્યેક 22 સે.મી. ડીશમાં ટ્રાન્સફેક્શન મિશ્રણ ઉમેરવામાં આવ્યું. ટ્રાન્સફેક્ટેડ કોષોનું સ્થાનાંતરણ પછી 60 h ની ખેતી કરવામાં આવી હતી અને 70% માટે 293% સોડિયમ ડિઓક્સિઆલteક્ટ (સિગ્મા; D2) અને 20 એકમો / બેન્ઝોન nucસ ન્યુક્લીઝ (સીગ્મા; એક્સએન્યુએમએક્સ) ની મિલી. 15 મિનિટ માટે 48 at g પર સેન્ટ્રિફ્યુગ દ્વારા સેલ્યુલર કાટમાળ દૂર કર્યા પછી, સુપરનેટatન્ટ એક 0.5 મીમી પીવીડીએફ ફિલ્ટર (મિલિપોર) દ્વારા ફિલ્ટર કરવામાં આવ્યું. એએવી-ડીજે કણોની શુદ્ધિકરણ, હાઇટ્રેપ હેપરિન એફિનીટી ક colલમ્સ (જીઇ હેલ્થકેર) નો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવી હતી. એએવીની સાંદ્રતા માટે, એક્સએન્યુએમએક્સ મોલેક્યુલર વેઇટ કટoffફવાળા એમિકonન અલ્ટ્રા-એક્સએનએમએક્સ કેન્દ્રત્યાગી ફિલ્ટર એકમોનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. કેન્દ્રિત વાયરસ iqu6750 ° C પર સંગ્રહિત કરવા માટે સ્થિર અને સ્થિર છે. અંતિમ વાયરલ સાંદ્રતા 50 ~ 1014 × 37 હતી12 દરેક એએવી માટે મિલી દીઠ વાયરસના કણો.

સ્ટીરિઓટેક્સિક ઇન્જેક્શન અને optપ્ટિકલ ફાઇબર પ્લેસમેન્ટ

પ્રાણીઓને શરીરના વજનના ગ્રામ દીઠ 1.6 µl અને 0.05 µl ઝાયલાઝિન (રોમ્પૂન, બાયર) ના inj ઇંજેક્શન્સ દ્વારા એનેસ્થેસાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા અને એક સ્ટીરિઓટેક્સિક ઉપકરણમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા (ડેવિડ કોપ ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ્સ, તુજુંગા, સીએ). વાયરસના ઇન્જેક્શન માટે, 31-ગેજ સિરીંજની સોય દ્વિપક્ષીય રીતે 2 virus (એપી +0; એમએલ ± 1.7; ડીવી -1.3) ના ખૂણા પર 4.5 virusl વાયરસ એનએસીમાં રેડવા માટે 0.1 અલ / મિનિટના દરે ઉપયોગમાં લેવામાં આવી હતી. ઇન્જેક્શન પછી ધીમે ધીમે પાછો ખેંચતા પહેલા સોયને 10 મિનિટ માટે મૂકવામાં આવી હતી. ઇમ્પ્લાન્ટેશન માટે ફાઇબર-optપ્ટિક કેન્યુલામાં ઝિરકોનીયા ફેરુલ (વ્યાસ 1.25 મીમી અને 4.5 મીમી લાંબી) અને icalપ્ટિકલ ફાઇબરની ફ્લેટ ટીપ (200 flatm વ્યાસ) નો સમાવેશ થાય છે. ડી 2-એમએસએનએસના પ્રકાશ માટે એનએસીમાં ફાઇબર-ઓપ્ટિક કેન્યુલાનું રોપવું વાયરસના ઇન્જેક્શન પછી તરત જ કરવામાં આવ્યું હતું. ફાઇબર-ઓપ્ટિક કેન્યુલાના રોપણી માટેના કોઓર્ડિનેટ્સ એનએસીને લક્ષ્ય બનાવવા માટે 0 ° (એપી +1.7; એમએલ L 1.35; ડીવી -4.2) નો કોણ હતા. Icalપ્ટિકલ ફાઇબરને એન્કર કરવામાં મદદ કરવા માટે, ફાઇબર-optપ્ટિક કેન્યુલાની રોપણી સાઇટના પાછળના ભાગમાં, બે સ્ક્રૂ ખોપરીમાં લંગર કરવામાં આવી હતી. ખોપરી ઉપર ફાઇબર-ઓપ્ટિક કેન્યુલાને ઠીક કરવા માટે, કેન્યુલાના પાયાની આસપાસ ખોપરીની સપાટી પર સી એન્ડ બી સુપરબ&ન્ડ (સન મેડિકલ) લાગુ કરવામાં આવ્યો હતો. એકવાર સી એન્ડ બી સુપરબondન્ડ સખત થઈ ગયા પછી, કેન્યુલા ધારક પાસેથી છોડવામાં આવી અને ડેન્ટલ સિમેન્ટ (પોલી-એફ, ડેન્ટ્સપ્લાય) ને કેન્યુલા અને સ્ક્રૂની આસપાસ લાગુ કરવામાં આવી. કેન્યુલેશન સાઇટની આસપાસના કાપને બંધ કરવા માટે, વેટબોન્ડ ટીશ્યુ એડહેસિવ (3 એમ, 7003449) નો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. ઇમ્પ્લાન્ટેશન પછી, ઉંદરોને સતત 5 દિવસ સુધી એન્ટિબાયોટિક્સ (એનરોફ્લોક્સાસિન, 12 મિલિગ્રામ / કિગ્રા, ક્યુ 5 એચ) અને એનાલિજેસીયા (કાર્પ્રોફેન, 24 મિલિગ્રામ / કિગ્રા, ક્યૂ 3 એચ) ની સબક્યુટેનીયસ ઇન્જેક્શન આપવામાં આવ્યું.

વિવો માં ફોટોસ્મ્યુલેશન

એક 200 µm પેચ કોર્ડ સ્લીવનો ઉપયોગ કરીને ક્રોનિકલી ઇમ્પ્લાન્ટેબલ optપ્ટિકલ ફાઇબરના બાહ્ય ભાગ સાથે જોડાયેલું હતું. Icalપ્ટિકલ રેસા એફસી / પીસી એડેપ્ટર દ્વારા વાદળી લેસર ડાયોડ (એક્સએનયુએમએક્સ એનએમ, એમબીએલ-III 473-473 મેગાવોટ) સાથે જોડાયેલા હતા, અને પ્રકાશ કઠોળ એક ઉત્તેજક (બીએનસી એક્સએનએમએક્સ) દ્વારા જનરેટ કરવામાં આવ્યા હતા. સીએચઆરએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સપ્રેસિંગ ન્યુરોન્સના ફોટોસ્ટિમ્યુલેશન માટે, સ્ટીમ્યુલેશન દાખલો એ 150 હર્ટ્ઝ ફ્રીક્વન્સી, 575 એમએસ પલ્સ અવધિ અને 2 – 20 મેગાવોટ લાઇટ પાવર હતી. પેચ કોર્ડમાંથી નીકળતી લાઇટ પાવરને એસએક્સએન્યુએમએક્સસી લાઇટ સેન્સર સાથે પાવર મીટર (પીએમએક્સએનએમએક્સએક્સડી) ની મદદથી માપવામાં આવી હતી.

વર્તણૂકલક્ષી વિશ્લેષણ

2 – 11 અઠવાડિયાની ઉંમરે, પુરુષ D13-Cre ઉંદર સાથે વર્તણૂક પ્રયોગો કરવામાં આવ્યા હતા, જેમાં ઉંદરનો અપવાદ, ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજિકલ વિશ્લેષણને આધિન હતો જે 5 – 6 અઠવાડિયાની ઉંમરનો હતો. વય-મેળ ખાતી ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે અને ક્રે નેગેટિવ કંટ્રોલ ઉંદરને વાયરસનો ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યો હતો અને વ્યક્તિગત રૂપે રાખવામાં આવ્યો હતો અને વર્તણૂકીય કસોટી સુધી પાંજરામાં liંચકવાની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. દરેક મેનીપ્યુલેશન માટે, ઉંદરોને વસ્તીને મંજૂરી આપવા અને તાણ ઘટાડવા માટે પ્રયોગની શરૂઆતના 2 મિનિટ પહેલા પ્રાયોગિક રૂમમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યો હતો (પ્રાયોગિક રૂમની તેજસ્વીતા 60 લક્સ હતી). કોઈ પણ સંભવિત ગંધ સંકેતોને દૂર કરવા માટે, દરેક પ્રાયોગિક ઉપકરણોને 70% ઇથેનોલથી પ્રયોગો વચ્ચે સાફ કરવામાં આવ્યાં હતાં.

કોકેન સંવેદના

કોકેન સંવેદનાની શરૂઆત માટે, ઉંદરને સતત 3 દિવસ સુધી ખારા ઇન્જેક્શન (આઈપ) ની આદત આપવામાં આવી હતી અને ત્યારબાદ તેને ખારા અથવા કોકેઇન (15 મિલિગ્રામ કિગ્રા) દ્વારા ઇન્જેક્શન આપવામાં આવ્યું હતું.-1, આઇપી) સતત 5 દિવસો સુધી. ઉંદરને ઇન્ટ્રાપેરીટોનેલી (આઇપ) ઇંજેકટ કરવામાં આવ્યું હતું ક્યાં તો કોકેન હાઇડ્રોક્લોરાઇડ (જહોનસન મેટની, એડિનબર્ગ, યુકે) દ્વારા ક્ષાર (0.9% NaCl) અથવા 30 G ની સોય સાથે ક્ષારમાં વિસર્જન કરવામાં આવ્યું હતું. દરેક ઇન્જેક્શન પછી તરત જ, ઉંદરોને 30 મિનિટ માટે ખુલ્લા મેદાનના ચેમ્બરમાં આડી લોકોમોટર પ્રવૃત્તિ માટે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું. સંવેદનાની દીક્ષા અને અભિવ્યક્તિ પર ફોટોસ્ટિમ્યુલેશનની અસરના માપન માટે (આકૃતિ) (આકૃતિ'''5), 5), ઉંદરને ડ્યુઅલ ફાઇબર-optપ્ટિક પેચ કોર્ડ્સ દ્વારા દ્વિપક્ષીય રીતે વાદળી પ્રકાશની રોશની આપવામાં આવી હતી, ઘરના પાંજરામાં 3 મિનિટ સત્રો દરમિયાન ચાર 30-min અવધિ માટે. માઉસની ખોપરી ઉપર સ્થિત ફાઇબર-icપ્ટિક કેન્યુલામાંથી પેચ કોર્ડ્સ દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને ઉંદરને ઓછામાં ઓછું 10 મિનિટ બાકીનું આપવામાં આવ્યું હતું. પછી ઉંદરોને ક્યાં તો કોકેઇન અથવા ખારા (કોક 1d-coc 5d) દ્વારા ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા. સંવેદનાની શરૂઆત કર્યા પછી, ક્ષારના ઇન્જેક્શન વિના, 14 દિવસ માટે કોકેન પાછો ખેંચી લેવામાં આવ્યો. આ ખસીના સમયગાળા દરમિયાન, કોઈ ફોટોસ્ટિમ્યુલેશન લાગુ કરવામાં આવ્યું ન હતું. ત્યારબાદ કોકેન પ્રત્યે વર્તણૂકીય સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ પછી ડ્રગની ચેલેન્જ ડોઝના ઇન્જેક્શન દ્વારા નક્કી કરવામાં આવી (10 મિલિગ્રામ કિગ્રા-1, આઇપ) આકૃતિમાં સચિત્ર પ્રમાણે એનએએસીના ફોટોસ્મ્યુલેશન પછી આકૃતિએક્સ.એન.એમ.એક્સ.એન.એમ.એક્સ.એન.એન.એન.એમ.એક્સ. કોકેઇન ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન ફોટોસ્મ્યુલેશનની અસરને માપવા (આકૃતિ) (આકૃતિ 6), 6), ઉંદર ઉપર વર્ણવ્યા મુજબ સંવેદનશીલતા માટે સમાન પ્રોટોકોલ આધિન હતા આકૃતિ 5) 5) સિવાય ફોટોસ્ટિમ્યુલેશન આપવામાં આવ્યું હતું. કોકેન સંવેદનાની શરૂઆત કર્યા પછી, એક્સએનયુએમએક્સ દિવસોના ઉપાડના કુલ સમયગાળા દરમિયાન, એનએસીએક્સ પર દરરોજ ફોટોસ્મ્યુલેશન લાગુ કરવામાં આવતું હતું. 1 દિવસના ઉપાડ પછી, ઉંદરના બધા જૂથોને કોકેનની પડકારની માત્રા સાથે ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા, (14 મિલિગ્રામ કિગ્રા-1).

આકૃતિ 1 

ન્યુક્લિયસ umbમ્બબેન્સમાં મધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સનું પસંદગીયુક્ત ફોટોસ્ટેમ્યુલેશન. (એ) એએવી-ડીઆઈઓ-સીઆરએક્સએનએમએક્સ-ઇવાયએફપી વાયરલ વેક્ટરના ડિલિવરી દ્વારા, એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ ન્યુરોન્સમાં સીએચઆરએક્સએનએમએક્સની પસંદગીયુક્ત અભિવ્યક્તિ. સ્કેલ બાર્સ: બેકગ્રાઉન્ડ ફિગર, 2 મીમી: શામેલ કરો, 2 µm. (બી) Confocal છબીઓ ...
આકૃતિ 2 

D2RCre-MSNs નું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન સ્થાનિક અવરોધક સર્કિટ્સ ચલાવે છે. (એ) લાઇવ એનએસી સ્લાઈસની કocન્કોકલ ઇમેજ, રંગથી ભરેલા ન્યુરોન દર્શાવે છે જે ChR2 અને પડોશી કોષ (એરોહેડ) દર્શાવતી નથી જે ChR2 વ્યક્ત કરે છે અને ફોટોસ્ટીયુલેટેડ થઈ શકે છે. (બી) આઈપીએસસી ...
આકૃતિ 3 

એનએસી કોષોની ગુણધર્મો. (એ) એલેક્ઝા 594 ભરેલા ન્યુરોન્સની બે-ફોટોન ફ્લોરોસન્સ છબી. (એક્સએક્સટીએક્સ) ChR2 + / AP જૂથમાંથી ન્યુરોન બતાવે છે, જ્યારે (એક્સએક્સટીએક્સ) ChR2− / IPSC જૂથમાંથી ન્યુરોન બતાવે છે. (એક્સએક્સટીએક્સ) અને (એક્સએક્સટીએક્સ) ના ઉચ્ચ-વિશિષ્ટ છબીઓ છે ...
આકૃતિ 4 

બેસલ લોકોમોટર પ્રવૃત્તિ પર એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સ-એમએસએનનાં ઇન-વીવો toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણની અસરો. (એ) એએવી-ડીઆઈઓ-સીઆરએક્સએનએમએક્સ-ઇવાયએફપી સાથે એનએસીમાં ઇન્જેક્ટેડ ડીએક્સએનયુએમએક્સ ક્રે ઉંદરના ધનુષ્યનું દૃશ્ય, ત્યારબાદ ફાઇબર optપ્ટિક કેન્યુલાનું દ્વિપક્ષીય રોપવું. 2 nm વાદળી પ્રકાશ ઉત્તેજના ...
આકૃતિ 5 

કોકેન પ્રત્યે સંવેદનશીલતા દરમિયાન D2-MSN ના સક્રિયકરણની અસરો. (એ) કોકેનમાં સંવેદનાની દીક્ષા અને અભિવ્યક્તિ દરમિયાન D2-MSNs ના ફોટો-ઉત્તેજના માટેની પ્રાયોગિક યોજના. બ્લુ-લાઇટ ઇલ્યુમિનેશન (2 ~ 5 mW, 5 એમએસ, 20 હર્ટ્ઝ) ચાર માટે વિતરિત કરાઈ ...
આકૃતિ 6 

પુનરાવર્તિત કોકેઇનના સંપર્કમાં પાછા લેવા દરમિયાન D2-MSN ના સક્રિયકરણની અસરો. (એ) કોકેન પરત ખેંચાતી વખતે D2-MSNs ના ફોટો-ઉત્તેજના માટેની પ્રાયોગિક યોજના. બ્લુ-લાઇટ ઇલ્યુમિનેશન (2 ~ 5 mW, 5 એમએસ, 20 હર્ટ્ઝ) ની આઠ 3- મિનિટ અવધિ માટે વિતરિત કરવામાં આવી ...

ઇમ્યુનોફ્લુરેસન્સ અને કોન્ફોક્કલ લેસર માઇક્રોસ્કોપી

ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ માટે, ઉંદરોને ઝોલિટિલ (વિરબેક, એક્સએનએમએક્સએલ / જી, ઇન્ટ્રાપેરીટોનેલી) અને એનેસ્એનએક્સએક્સએલએક્સ / જી રોમ્પૂન (બેઅર) દ્વારા એનેસ્થેસાઇઝ કરવામાં આવ્યા હતા અને ફિલ્ટર-વંધ્યીકૃત એક્સએન્યુએમએક્સ એમ પીબીએસ સાથે છૂટા કરવામાં આવ્યા હતા, ત્યારબાદ એક્સએન્યુએમએક્સ% પેરાફોર્મldડિહાઇડ / પીબીએસ સોલ્યુશન (ફિક્સેશન) નો ઉપયોગ કરીને ફિક્સેશન આપવામાં આવ્યું હતું. ત્યારબાદ મગજને દૂર કરવામાં આવ્યો અને ઉપરની જેમ આઇસ-કોલ્ડ ફિક્સિએટિવ સાથે 1.6 h માટે પોસ્ટ-ફિક્સ. પછી મગજને 0.05% સુક્રોઝ / 0.1 M PBS માં 4 દિવસ માટે ડિહાઇડ્રેટ કરવામાં આવ્યાં. તે પછી મગજ સ્થિર થઈ ગયા હતા અને 4--m- જાડા સળંગ કોરોનલ વિભાગો એક ક્રિઓસ્ટાટ (લાઇકાના સીએમ એક્સએન્યુએમએક્સ, જર્મની) પર તૈયાર કરવામાં આવ્યાં હતાં. 30 M PBS માં 0.1% નો સામાન્ય બકરી સીરમ અને 2% ટ્રાઇટોન X-40 ધરાવતા વિભાગો (1900 µm) અવરોધિત કરવામાં આવ્યા હતા અને 40% XXUMUMX- 1P પર સસલું પોલિક્લોનલ એન્ટી-ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ) દ્વારા સળગાવી. 0.1% ટ્રાઇટોન X-5 ધરાવતા પીબીએસ સાથેના ધોવા પછી, એલેક્ઝા ફ્લorર 0.2 બકરી વિરોધી સસલું આઇજીજી (100: 2; મોલેક્યુલર પ્રોબ્સ, યુજેન, ઓઆર, યુએસએ) અને 1 ml / ml 500, સાથે 5084 h માટે નમૂનાઓ આર.ટી. 4% નોર્મલ બકરી સીરમ અને 0.2% ટ્રાઇટન X-100 ધરાવતા પીબીએસમાં 1-diamidino-568-phenyl-indole HCl (DAPI; સિગ્મા, સેંટ લૂઇસ, MO, USA) નકારાત્મક નિયંત્રણ તરીકે, નમૂનાઓ ફક્ત ડીએપીઆઈ અને ગૌણ એન્ટિબોડીથી સેવામાં આવ્યા હતા. વિભાગોની તપાસ સીએક્સએન્યુએમએક્સ પ્લાન એપો × 1 / 500 વોટર ક confન્કોકલ લેસર સ્કેનીંગ સિસ્ટમ (એલએસએમ 0.2, ઝીસ, બર્લિન, જર્મની) પર કરવામાં આવી હતી.

ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજી અને ફોટોક્લેશનમાં ન્યુક્લિયસ એક્યુમ્બેન્સ કાપી નાંખ્યું

ઉંદરનો ઉપયોગ વાયરસના ઇન્જેક્શન પછીના 4 અઠવાડિયા પછી પ્રયોગો માટે કરવામાં આવ્યો હતો, ChR2-EYFP ની શ્રેષ્ઠ અભિવ્યક્તિ પ્રાપ્ત કરવા માટે. તીવ્ર મગજની ટુકડાઓ તૈયાર કરવા માટે પછી ઉંદરોને એનેસ્થેસાઇટીઝ કરવામાં આવે છે અને તેને કાપી નાખવામાં આવતું હતું. મગજને ઝડપથી દૂર કરવામાં આવ્યું અને તરત જ આઇસ-કોલ્ડ કટીંગ સોલ્યુશનમાં મૂકવામાં આવ્યું (એમએમમાં) 250 સુક્રોઝ, 26 નાહકો3, 10 ડી-ગ્લુકોઝ, 3 માયો-ઇનોસિટોલ, 2.5 KCl, 2 Na-pyruvate, 1.25 NaH2PO4, 0.5 એસ્કોર્બિક એસિડ, 1 Kynurenic એસિડ અને 7 MgCl2 જેને 95% O સાથે પરપોટા કરવામાં આવી હતી2/ 5% CO2 (પીએચ = એક્સએનએમએક્સ). કોરોનલ મગજની ટુકડાઓ (7.4 thickm જાડા) એ એનએસી (Vica XTUMN S) નો ઉપયોગ કરીને તૈયાર કરવામાં આવી હતી અને પછી ગેસ્ડ કૃત્રિમ સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી (એસીએસએફ) માં (એમએમ) સમાવવામાં આવેલ: 250 ડી-ગ્લુકોઝ, 1200 NaCl, 11 NaHCO3, 1.25 નાહ2PO4, 2.5 KCl, 1.25 MgCl2 અને 2.5 CaCl2 રેકોર્ડિંગ પહેલાં 34 h C માટે 1 at C પર. કાપી નાંખ્યું ત્યારબાદ સબમર્ઝન રેકોર્ડિંગ ચેમ્બરમાં સ્થાનાંતરિત કરાઈ જેમાં ઓ2સંતૃપ્ત એસીએસએફ સોલ્યુશન સતત સુપરફ્યુઝ્ડ હતું. એનએએનસી અને વીટીએના કોષો એક્સએનયુએમએક્સએક્સ-ફોટોન માઇક્રોસ્કોપ (ઓલિમ્પસ એફવીએક્સએનયુએમએક્સ એમપીઇ, ટોક્યો, જાપાન) નો ઉપયોગ કરીને વિઝ્યુઅલાઇઝ્ડ કરવામાં આવ્યા હતા, જેમાં એક્સએન્યુએમએક્સએક્સ પાણી નિમજ્જન લેન્સ અને ઇન્ફ્રારેડ ડીઆઈસી ઓપ્ટિક્સ છે. આખા સેલ પેચ ક્લેમ્પ રેકોર્ડિંગ્સ મલ્ટિકલેમ્પ 2B એમ્પ્લીફાયર અને ડિજિડેટા 1000A ડિજિટાઇઝર (મોલેક્યુલર ડિવાઇસીસ, LLC) સાથે એનએસી કોષો પાસેથી મેળવવામાં આવ્યા હતા. પીસીએલએએમપી એક્સએન્યુએમએક્સ સ softwareફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને ડેટાના નમૂના લેવામાં આવ્યા હતા અને ક્લેમ્પફિટ એક્સએન્યુએમએક્સ સ softwareફ્ટવેર (મોલેક્યુલર ડિવાઇસીસ, એલએલસી) નો ઉપયોગ કરીને વધુ વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યાં હતાં. 25 – 700 MΩ વચ્ચેના રેઝિસ્ટન્સવાળા પેચ ઇલેક્ટ્રોડ્સ (એમએમમાં) ધરાવતા આંતરિક સોલ્યુશનથી ભરેલા હતા: 1440 K-gluconate, 10.2 NaCl, 10.2 MgCl2, 20 HEPES, 4 Na2એટીપી, એક્સએનએમએક્સ ના3GTP, 0.5 EGTA અને 10 Na2- ફોસ્ફોક્રેટિન, પીએચ સાથે 7.3 એન કોએચનો ઉપયોગ કરીને 1 સાથે ગોઠવ્યો. પ્રયોગોના સબસેટમાં જીએબીએ રીસેપ્ટર્સને અવરોધિત કરવા માટે, મગજની કટકામાં બાયકુલિન (10 µM) સ્નાન દ્વારા લાગુ કરવામાં આવી હતી.

CHR2-EYFP વ્યક્ત કરતી એનએએસી કોષો એલઇડી લાઇટ સ્રોત (460 ± 27 એનએમ, યુએચપી-માઇક-એલઇડી-એક્સએનએમએક્સ, પ્રીઝમmaટિક્સ) દ્વારા ફોટોસ્મૂલેટેડ કરવામાં આવ્યા હતા. એલઇડીમાંથી વાદળી પ્રકાશ વધુ ઉત્તેજના ફિલ્ટર (460 – 470 nm) થી સજ્જ ફિલ્ટર ક્યુબ દ્વારા ફિલ્ટર અને તાણયુક્ત હતું; પ્રકાશનો પ્રકાશ (495 એમએસ અવધિ, 10 – 0.0366 mW / mm2) 25 – 5 હર્ટ્ઝની ફ્રીક્વન્સીઝ પર 40X ઉદ્દેશ્ય લેન્સ દ્વારા મગજની કટકામાં પહોંચાડવામાં આવ્યા હતા. પ્રયોગોના સબસેટમાં, 2 s અવધિ પ્રકાશના સામાચારોના જવાબમાં ChR2- અભિવ્યક્ત કોષોમાં ફોટોક્રન્ટ્સ માપવામાં આવ્યા.

આંકડાકીય વિશ્લેષણ

ડેટા means સેમ તરીકે રજૂ કરવામાં આવે છે અને બે-પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થી સાથે વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું t-બેસ્ટ, અથવા બોનફેરોની દ્વારા અનુસરતા વૈવિધ્યના બે-માર્ગ વિશ્લેષણ સાથે આ પોસ્ટ પરીક્ષણ. એ P<0.05 ની કિંમત આંકડાકીય રીતે મહત્વપૂર્ણ માનવામાં આવતી હતી.

પરિણામો

ન્યુક્લિયસ umbમ્બબેન્સમાં મધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સનું પસંદગીયુક્ત ફોટોસ્ટેમ્યુલેશન

કોકેન-મધ્યસ્થી વ્યસનકારક વર્તણૂકોમાં એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએનઓની ભૂમિકા નક્કી કરવા માટે, અમે એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ ન્યુરોન્સને ઉત્તેજીત કરવા માટે toપ્ટોજેનેટિક અભિગમનો ઉપયોગ કર્યો. પ્રકાશ દ્વારા એનએએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએનઓની પ્રવૃત્તિને પસંદગીયુક્ત રીતે નિયંત્રિત કરવા માટે, એએવી-ડીઆઈઓ-સીઆરએક્સએનએમએક્સ-ઇવાયએફપી કોડિંગ વાઇરલ વેક્ટર્સને સ્ટીઅરોટેક્સલી ડીક્સએનએમએક્સઆર-ક્રિ બીએસી ટ્રાન્સજેનિક ઉંદરના એનએસીમાં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા. વાયરલ ઇન્જેક્શન પછીના 2 અઠવાડિયા પછી, સીએઆરએક્સએનએમએક્સ-ઇવાયએફપીની મજબૂત અભિવ્યક્તિ એનએએસી (આકૃતિ) માં જોવા મળી (આકૃતિ xNUMXA) .1A). ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સમાં સીએચઆરએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સપીએક્સની વિશિષ્ટતાની પુષ્ટિ પુષ્ટિ પુષ્ટિ ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ ક confન્કોકલ વિશ્લેષણ દ્વારા કરવામાં આવી હતી: વાયએફપી-ટ Chગ કરેલા સીઆરએક્સએનએમએક્સએક્સને એનએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર સાથે સહ-સ્થાનિક બનાવ્યું હતું (આકૃતિ (આકૃતિ 1B), 1B) બતાવી રહ્યું છે કે, એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સપીઆર-એક્સપ્રેસિંગ ન્યુરોન્સમાં ChR2 વ્યક્ત કરવામાં આવ્યું હતું.

જોકે આવા અભિગમનો ઉપયોગ અન્ય અધ્યયનમાં કરવામાં આવ્યો છે (દા.ત., લોબો એટ અલ., 2010), વાયરસ ઇંજેક્શન પ્રક્રિયાઓની વિગતો એક લેબોથી બીજામાં બદલાય છે, જે આપણી વિશિષ્ટ પ્રાયોગિક શરતો હેઠળ toપ્ટોજેનેટિક નિયંત્રણને દસ્તાવેજીકરણ કરવાનું મહત્વપૂર્ણ બનાવે છે. અમે એનએસી ટુકડાઓમાં એમએસએન તરફથી સંપૂર્ણ-સેલ પેચ ક્લેમ્બ રેકોર્ડિંગ્સ બનાવીને ChR2 ની કાર્યાત્મક અભિવ્યક્તિનું મૂલ્યાંકન કર્યું છે. એમ.એસ.એન.એસ દ્વારા ઓળખવામાં આવી હતી: (એક્સએન્યુએમએક્સ) પ્રમાણમાં હાયપરપોલરાઇઝ્ડ રેસ્ટિંગ મેમ્બ્રેન સંભવિત (આરએમપી), typically1 એમવી કરતા સામાન્ય રીતે વધુ નકારાત્મક; (એક્સએનયુએમએક્સ) લાગુ વર્તમાન કઠોળના જવાબમાં એપી ફાયરિંગની નિયમિત પદ્ધતિ; (એક્સએનએમએક્સ) વર્તમાન નાડી દરમિયાન પ્રથમ એપીના ફાયરિંગની લાંબી વિલંબ; (80) હાયપરપોલરાઇઝેશન-સક્રિયકૃત કેશન વર્તમાન (I) ને કારણે હાયપરપોલારીકરણ દરમિયાન વોલ્ટેજ "સgગ" ની ગેરહાજરી.h); અને (5) તેમના સેલ બોડીના પ્રમાણમાં નાના કદ (ચાંગ અને કિટાઇ, 1985; ઓ ડોનલ અને ગ્રેસ, 1993; લે મોઈન અને બ્લોચ, 1996; ટેવર્નિયા એટ અલ., 2008). બ્લુ લાઇટ (470 nm) એ આખા ક્ષેત્રના દૃશ્ય (0.78 mm) ઉપર લાગુ કરવામાં આવી2) જ્યારે s69 mV ની હોલ્ડિંગ સંભવિત પર એમએસએનને વોલ્ટેજ-ક્લેમ્પીંગ કરતી વખતે. કેટલાક એમએસએનએ ChR2 વ્યક્ત કર્યા, તેમના સોમાટામાં વાયએફપી ફ્લોરોસન્સ તરીકે સ્પષ્ટ છે (આકૃતિઓમાં તીર 1C1, C3). આવા ન્યુરોન્સ પ્રકાશિત પ્રકાશ ઉત્તેજના મોટા ફોટોક્રિએન્ટ્સ બહાર કા withીને, નોંધપાત્ર ફોટોક્રocન્ટ્સ પ્રદર્શિત કરે છે (આકૃતિ (આકૃતિ XXXXD) .1D). પીક ફોટોકોરન્ટ કંપનવિસ્તાર અને પ્રકાશની તીવ્રતા (આકૃતિ) વચ્ચેનો સંબંધ (આકૃતિ 1E) 1E) ની 0.054 ± 0.0023 mW / mm ની અડધી મહત્તમ પ્રકાશ સંવેદનશીલતા હતી2 અને 1.16 ± 0.16 એનએ (સરેરાશ ± સેમ, n = 4)

વર્તમાન-ક્લેમ્બની સ્થિતિ હેઠળ, ChR2 વ્યક્ત કરતા એમએસએનએ પ્રકાશ કઠોળની ટ્રેનોના જવાબમાં એપીઓને વિશ્વાસપૂર્વક કા firedી મૂક્યા (એક્સએન્યુએમએક્સ એમએસ અવધિ; આકૃતિ; આકૃતિ) આકૃતિ 1F) .1F). આ શરતો હેઠળ, 0.1 mW / mm કરતા વધારે પ્રકાશની તીવ્રતા2 એપી (આકૃતિ) ને ઉદગમ કરવા માટે પૂરતા હતા (આકૃતિ 1G, 1G, n = 5). 20 હર્ટ્ઝ સુધીની ફોટોમિલેશન ફ્રીક્વન્સીઝ પર એપીને વિશ્વસનીય રીતે ઉત્તેજીત કરાયા હતા, જ્યારે એક્સએન્યુએક્સએક્સ હર્ટ્ઝ પર પ્રકાશ-પ્રેરિત પ્રતિક્રિયાઓનું નિરંતર નિરાકરણ લાવવાનું કારણ બને છે જે એપીઝને દૂર કરવામાં ઓછા અસરકારક હતા (આંકડા 1F, જી).

ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસનું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન સ્થાનિક અવરોધક સર્કિટ્સ ચલાવે છે

એનએસીમાં સ્થાનિક સર્કિટ્સ પર ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સએનએસ-એમએસએસની પ્રવૃત્તિના પરિણામોની તપાસ કરવા માટે, અમે સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ-નેગેટિવ એમએસએન (આકૃતિ) માં પોસ્ટસિએપ્ટિક પ્રતિસાદનું માપન કરતી વખતે, સીએઆરએક્સએનએમએક્સ દર્શાવતા પ્રિસ્નેપ્ટીક એમએસએનને ફોટોશૂટ બનાવ્યા. (આકૃતિ xNUMXA) .2A). આકૃતિમાં બતાવેલ ન્યુરોન આકૃતિ xNUMXA2A ChY2 વ્યક્ત કરતું નથી, જેમ કે EYFP ફ્લોરોસન્સની ગેરહાજરી તેમજ આકૃતિમાં બતાવ્યા પ્રમાણે ટૂંકા-વિલંબિત ફોટોક્રિઅન્ટ્સની ગેરહાજરી દ્વારા સૂચવવામાં આવ્યું છે. આકૃતિ 1D.1D. જો કે, જ્યારે પોસ્ટસિએપ્ટિક એમએસએનએક્સએનએમએક્સએક્સ એમવીની સંભવિત તરીકે રાખવામાં આવી હતી, ત્યારે 69 N 10 એમએસ (લેટર આકૃતિ) ની વિલંબ પછી 9.0 એમએસ સમયગાળાની પ્રકાશ સામાચારો બાહ્ય પ્રવાહોને ઉત્તેજીત કરી (આકૃતિ 2B, 2B, n = 15). આ જવાબોની પ્રકૃતિ નક્કી કરવા માટે, પોસ્ટસનેપ્ટિક પટલ સંભવિત −99 mV થી N39 mV ની વચ્ચે બદલાયેલી હતી, જ્યારે લાઇટ ફ્લેશ લાગુ કરવામાં આવી હતી (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXC) .2C). પ્રકાશ પ્રેરિત પ્રતિસાદ પટલ સંભવિત (આકૃતિ) સાથે ભિન્ન હોય છે (આકૃતિ xNUMXD, 2D, n = 6) અને તેમની ધ્રુવીયતાને −81 ± 3.4 mV પર ઉલટાવી દીધી. આપેલ છે કે ક્લોરાઇડ આયનો માટેની સંતુલન સંભવિત 80 એમવી અમારી આયનીય પરિસ્થિતિઓ હેઠળ છે, પ્રકાશ-પ્રેરિત બાહ્ય પ્રવાહ પોસ્ટરોસેપ્ટીક જીએબીએ દ્વારા મધ્યસ્થી ક્લોરાઇડ ફ્લક્સને કારણે હોઈ શકે છે.A રીસેપ્ટર્સ. આ શક્યતાને ચકાસવા માટે, જી.એ.બી.એ.A બાહ્ય સોલ્યુશનમાં રીસેપ્ટર એન્ટીગોનિસ્ટ બાયક્યુલિન (10 µM) ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. આ દવાએ પ્રકાશ-પ્રેરિત પ્રતિસાદ (આકૃતિ) ને સંપૂર્ણપણે અવરોધિત કર્યા છે (આકૃતિ 2B), 2B), પુષ્ટિ આપતા કે પ્રકાશ પ્રેરિત પ્રતિભાવો GABAergic અવરોધક પોસ્ટ્સસેપ્ટીક કરંટ (આઇપીએસસી) હતા.

ફોટોમિલેશન પરના તેમના જવાબોના આધારે, અમે જે એમએસએનથી રેકોર્ડ કર્યા છે તે 4 જૂથોમાંના એકમાં વર્ગીકૃત કરી શકાય છે: (1) કોષોને ફોટોસ્ટ્યુલેશન (CHR2 + / એપી) ના જવાબમાં એપીઝને ફાયર કરવા માટે પૂરતા પ્રમાણમાં અભિવ્યક્ત કરે છે, જે ઉપર વર્ણવેલ છે; (2) કોષો જે ChR2 નો નાનો જથ્થો વ્યક્ત કરે છે, જે પ્રકાશના જવાબમાં સબસ્ટ્રેસહોલ્ડ ડિપોલાઇઝેશનને સ્પષ્ટ કરે છે (સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ + / એપી નથી); (2) મૌન કોષો કે જેમાં ChR2 ની કોઈ અભિવ્યક્તિ નહોતી પરંતુ ChR3 (CHR2− / IPSC) દર્શાવતા પ્રેસિનપ્ટીક MSN દ્વારા પ્રકાશ-પ્રેરિત IPSC પ્રાપ્ત થયા છે; અને (2) ChR2- નકારાત્મક કોષો કે જે અન્ય MSNs (CHR4− / No IPSC) ના ફોટોસ્ટેશનના જવાબમાં IPSC પ્રદર્શિત કરતા નથી. આ કેટેગરીમાંના દરેકમાં કોષોનું પ્રમાણ પ્રમાણ આકૃતિમાં દર્શાવવામાં આવ્યું છે આકૃતિ 2E2E (n = 53). એકંદરે, લગભગ અડધા કોષો (45.3%) એ ChR2 (જૂથોનો સરવાળો (1) અને (2)) વ્યક્ત કર્યો. અમે રેકોર્ડ કરેલા એમએસએનમાંથી કોઈપણ ફોટોસ્મ્યુલેશનના જવાબમાં ફોટોક્રન્ટ્સ અને આઈપીએસસી બંને પ્રદર્શિત નથી કરતા; આ સૂચવે છે કે D2R- સકારાત્મક એમએસએનએ એનએસીની અંદર આ જ કોષ વસ્તીના અન્ય સભ્યોને જન્મ આપતા નથી.

પ્રકાશના પ્રતિસાદનું આ વર્ગીકરણ સૂચવે છે કે સીએચએક્સએક્સએનએમએક્સ + / નો એપી સેલ્સ (જૂથ એક્સએનએમએક્સ) અને સીએચઆરએક્સએન્યુએમએક્સ / નો આઇપીએસસી કોષો (જૂથ એક્સએનએમએક્સ) નો ફોટોસ્ટેમ્યુલેશન સર્કિટ પ્રવૃત્તિમાં ફાળો આપી શકે તેવા કોઈ વિદ્યુત સંકેતો પેદા કરશે નહીં. આમ, સર્કિટ ફંક્શન પર ફોટોસ્ટેમ્યુલેશનની અસરોને નિર્ધારિત કરવા માટે, અમે સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ + / એપી એમએસએન (જૂથ એક્સએનએમએક્સ) ની ગુણધર્મોને વિગતવાર વર્ણવ્યા, જે એનએસી ફોટોસ્ટીમ્યુલેટેડ હોય ત્યારે એપી પેદા કરશે, અને સીએચએક્સએનએમએક્સએક્સ / આઇપીએસસી કોષો (જૂથ એક્સએનએમએક્સ), જે સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ + / એપી એમએસએન માટે પોસ્ટસિએપ્ટિક છે કારણ કે તેઓ પ્રકાશ પ્રેરિત આઇપીએસસી મેળવે છે. એનએસીમાં સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ + / એપી અને સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ / આઇપીએસસી કોષો બંને સ્પાઇની ન્યુરોન્સ તરીકે ઓળખાઈ (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXA) .3A). આ બે જૂથોમાં ન્યુરોન્સના મોર્ફોલોજિકલ અથવા ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજિકલ ગુણધર્મોમાં કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત નથી. ઉદાહરણ તરીકે, તે બે જૂથોમાં ન્યુરોન્સનો સોમાટા કદમાં સમાન હતો (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXB) .3B). આ ઉપરાંત, તેમના આરએમપી (−83.0 ± 1.7 વિ. N85.0 ± 1.8 mV; મીન ± સેમ; n = 10, આકૃતિ આકૃતિ 3C) 3C) અને ઇનપુટ પ્રતિકાર (113 ± 15 વિ. 133 ± 13 MΩ, n = 6, આકૃતિ આકૃતિ 3D) 3D) પણ જુદા નહોતા (p > 0.05 બે-પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થીની t-તેમ) જ્યારે હાલની કઠોળ (આંકડા) ના જવાબમાં તેમની એપી ફાયરિંગ પેટર્ન 3E, એફ) પણ સમાન હતા (p > 0.05 બે-પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થીની t-શ્રેષ્ઠ, n = 6). સારાંશમાં, એનએસીમાં ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસનું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન પોસ્ટસેપ્ટિક ન્યુરોન્સ સાથેના સ્થાનિક અવરોધક સર્કિટ્સને સક્રિય કરે છે જે ડીએક્સએન્યુએમએક્સઆર-એમએસએનએસ સાથે ખૂબ સમાન છે પરંતુ ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર વ્યક્ત કરતું નથી.

કોકૈન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનામાં એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએનનું toપ્ટોજેનેટિક સ્ટીમ્યુલેશન

અમે પછીના વર્તણૂક પરિણામોની તપાસ કરી વિવો માં એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ-એમએસએનનો ફોટોસ્મ્યુલેશન. કારણ કે ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમમાં D2R-MSNs નું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન, લોકમોટર પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો કરે છે (ક્રાવીટ્ઝ એટ અલ., 2010), અમે મૂળભૂત લોકમોટર પ્રવૃત્તિ પર accક્યુબેન્સ D2R-MSN સક્રિયકરણની અસરો લાક્ષણિકતા દ્વારા પ્રારંભ કરી હતી. આ હેતુ માટે, D2R-Cre ઉંદરને DIO-AAV-ChR2-EYFP વાયરસ દ્વારા દ્વિપક્ષીય રીતે NAC (D2-Cre (+) NAc-ChR2) માં ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા. ત્યારબાદ ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએનઓને બ્લ્યુ લાઇટ (એક્સએનએમએક્સ એનએમ, એક્સએનએમએક્સ એમએસ પલ્સ અવધિ, એક્સએનયુએમએક્સ હર્ટ્ઝ) ના ફોટા ઓપ્ટિકલ ફાઇબર દ્વારા એનએસીને પહોંચાડવામાં આવ્યા. 2 મિનિટ સત્રની અંદર ચાર 473- મિનિટ સમયગાળા દરમિયાન ફોટોસ્ટુલી લાગુ કરવામાં આવી હતી જ્યારે ઉંદરને લોકમોટર એક્ટિવિટી રેકોર્ડિંગ ચેમ્બરમાં રાખવામાં આવ્યા હતા (આકૃતિ (આકૃતિ xNUMXA) .4A). સમાંતરમાં, કંટ્રોલ ન nonન-ક્રિએટ ડબ્લ્યુટી લિટરમેટ ઉંદરને એ જ રીતે વાયરસ દ્વારા ઇન્જેક્શન આપ્યું હતું અને સમાન બ્લુ લાઈટ ઇલ્યુમિનેશન પ્રાપ્ત થયું હતું. D2-Cre (+) NAC-ChR2 ઉંદરએ નિયંત્રણ D2R-Cre (-) NAc-ChR2 ઉંદરની તુલનામાં બેઝલ લોકમોટર પ્રવૃત્તિની તુલનાત્મક અથવા સહેજ એલિવેટેડ સ્તર પ્રદર્શિત કર્યું (આંકડા) 4B, સી). ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-ક્રિઅન (+) એનએસી-સીઆરએક્સએનએક્સએક્સ ઉંદરમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ-એમએસએસના ફોટોસ્મ્યુલેશનને લીધે, લોટોમોટર પ્રવૃત્તિમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો જે પ્રકાશ ઉત્તેજના બંધ થયા પછી પુન recoveredપ્રાપ્ત થયા (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXB) .4B). D2R-Cre (-) NAc-ChR2 ઉંદર (આંકડા) નિયંત્રણમાં આવી કોઈ અસર જોવા મળી નથી 4B, સી), જે સૂચવે છે કે ફોટોસ્ટિમ્યુલેશનની અસરો મગજના પેશીઓને ગરમ કરવા જેવી શક્ય બિન-વિશિષ્ટ અસરો કરતાં, ChR2 ના સક્રિયકરણને કારણે થઈ છે. તેથી, અમારા ડેટાએ સંકેત આપ્યો છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનએસના ફોટોસ્મ્યુલેશનથી લોકોમોટર પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો થયો.

આ પરિણામોએ એનએસીની અંદર ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર- એમએસએનએસની પ્રવૃત્તિને નિયંત્રિત કરવાની અમારી ક્ષમતા સ્થાપિત કરી છે વિવો માં. આગળ અમે કોકેનના વારંવાર વહીવટ માટે વર્તણૂકીય સંવેદના પર D2R-MSN પ્રવૃત્તિના પ્રભાવને તપાસવા માટે આ ક્ષમતાનો ઉપયોગ કર્યો. વર્તણૂકીય સંવેદના એ તે પ્રક્રિયાને સંદર્ભિત કરે છે જે મનોરોગ ઉત્તેજકો, જેમ કે કોકેઈન ,ના પ્રારંભિક સંપર્કને લોકોમોટર પ્રવૃત્તિને ઉત્તેજીત કરવા માટે અનુગામી ડ્રગના સંપર્કની ક્ષમતાને વધારવા માટે પરવાનગી આપે છે. આ પ્રક્રિયાને દીક્ષા અને અભિવ્યક્તિના તબક્કામાં વિભાજિત કરી શકાય છે: દીક્ષા વર્તન સંવેદનાને ઉત્તેજિત કરતી તાત્કાલિક ન્યુરલ ઘટનાઓનું વર્ણન કરે છે (વેન્ડરશ્યુરન અને કાલિવસ, 2000; સિમ એટ અલ., 2013), જ્યારે અભિવ્યક્તિ વર્તણૂકીય પ્લાસ્ટિસિટીના લાંબા ગાળાના સ્વરૂપ તરીકે જાણીતી છે જે ડ્રગના ઉપાડ પછી પણ ચાલુ રહે છે (વેન્ડરશ્યુરન અને કાલિવસ, 2000; સિમ એટ અલ., 2013). તેથી અમે આ દરેક તબક્કા દરમિયાન એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ- એમએસએન ની પ્રવૃત્તિને નિયંત્રિત કરવા માટે toપ્ટોજેનેટિક્સનો ઉપયોગ કરતી વખતે, કોકિનના પુનરાવર્તિત ઇંટરપેરીટોનેલ (આઇપી) ઇન્જેક્શન દરમિયાન, કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાની તપાસ કરી.

3 દિવસોમાં ખારા ઇન્જેક્શનની આદત પછી, ઉંદરને સતત 15 પર કોકેન (5 મિલિગ્રામ / કિલો) સાથે ઇન્જેક્શન આપવામાં આવ્યું હતું અને દરેક ઈન્જેક્શન પછી 30 મિનિટ માટે લોમમોટર રિસ્પોન્સ રેકોર્ડ કરવામાં આવ્યા હતા (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXA) .5A). ફોટોમિથુલીને 30 મિનિટ સત્રો દરમિયાન ડિલિવરી કરવામાં આવી હતી, કોકેઇન ઇન્જેક્શન પહેલાં, 3 મિનિટના સમયગાળાને કાપીને, 5 મિનિટ અવધિ જ્યાં પ્રકાશ બંધ હતો (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXA) .5A). આપેલ છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનએસના ફોટોસ્મ્યુલેશન મૂળભૂત લોકમોટર પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો કરે છે (આકૃતિ (આકૃતિ 4), 4), કોટેઇનના વહીવટ પહેલાં તુરંત જ ફોટોસ્ટુલી પહોંચાડવામાં આવી હતી, જેથી કોકેઇન ઇન્જેક્શનના વર્તણૂકીય પ્રતિસાદમાં શક્ય દખલ ન થાય.

બંને ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે (-) એનએસી-સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ ઉંદર અને ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે (+) એનએસી-સીએચઆરએક્સએનએમએક્સ ઉંદરને પુનરાવર્તિત કોકેઇન ઇન્જેક્શન (આકૃતિ) ના જવાબમાં લોકોમોટર પ્રવૃત્તિમાં નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવ્યો (આકૃતિ 5B), 5B), સંવેદનાની દીક્ષા સૂચવે છે. એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનનો ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન વર્તણૂક સંવેદનાની શરૂઆતને અસર કરતું લાગતું નથી, કારણ કે કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદના ડીએક્સએન્યુએમએક્સ-ક્રે (+) એનએસી-સીઆરએક્સએનએમએક્સ ઉંદરમાં નિયંત્રિત હતી અને ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે (-) એનએસી-સીઆરએક્સએનએમએક્સ ઉંદરને નિયંત્રિત કરતી હતી.

15 દિવસો સુધી કોકેઇન (5 મિલિગ્રામ / કિલો) ના આવા ઇન્જેક્શન્સને પુનરાવર્તિત કરીને વર્તણૂકીય સંવેદનાને સૂચિત કર્યા પછી, ડ્રગને 14 દિવસો માટે પાછો ખેંચી લેવામાં આવ્યો હતો અને કોકેનની ઓછી માત્રા (ઉ.સ.एन.એમ.એક્સ. એમ.જી.) ની ઉંદરને પડકાર આપીને સંવેદનાની અભિવ્યક્તિની ડિગ્રીની તપાસ કરવામાં આવી હતી. /કિલો ગ્રામ). સંવેદનાનું અભિવ્યક્તિ વર્તન પ્લાસ્ટિસિટીનું એક લાંબી ટકી રહેતું સ્વરૂપ છે જે ડ્રગના ઉપાડ પછી પણ ચાલુ રહે છે (સ્ટેકીટી અને કાલિવસ, 2011; સિમ એટ અલ., 2013). સંવેદનાની અભિવ્યક્તિમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએન-એમએસએનએસની ભૂમિકાની તપાસ કરવા માટે, કોકેનના વહીવટ પહેલાં, નેકને તુરંત ફોટોશૂટ કરાયો હતો (આકૃતિ (આકૃતિ 5A) 5A) અને સંવેદનાને કોકેન ઇન્જેક્શન દ્વારા પ્રેરિત લોમોમોટર પ્રવૃત્તિની માત્રા તરીકે માપવામાં આવી હતી.

ઉંદર of D2-Cre (-) NAc-ChR2 ઉંદર (D2-Cre (-) :: coc-coc) અને D2-Cre (+) NAc-ChR2 (D2-Cre (+)) ના બંને કોકેન-પ્રીટ્રેટેડ જૂથોમાં: : કોક-કocક) સંવેદનાની અસ્થિર અભિવ્યક્તિ (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXC) .5C). બે જૂથો (આકૃતિ) ની વચ્ચે પણ કોકેન-ઉત્તેજિત લોકમotionશન ફેરફારોનો સમયનો કોર્સ પણ સમાન હતો (આકૃતિ 5C), 5C) નો સમાવેશ થાય છે, જેમાં બે જૂથો વચ્ચે કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત નથી. સાથે મળીને, આ બે ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન પ્રયોગો સૂચવે છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનનું સક્રિયકરણ પ્રારંભિક અથવા કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાની અભિવ્યક્તિને અસર કરતું નથી.

ડ્રગની ઉપાડ દરમિયાન એનએએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએનનો ફોટોસ્ટેશન

એનએસી (સિમ એટ અલ.) માં સિનેપ્ટીક પ્લાસ્ટિસિટીમાં પરિવર્તન સાથે જોડાણમાં કોકેન-લેવી અને રીલેપ્સ વર્તણૂકોમાં તાણ-પ્રેરિત વધારાને નિયંત્રિત કરતી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર આધારિત આનુષંગિક પદ્ધતિની પસંદગીયુક્ત ભરતીના પરિણામો પછી વારંવાર કોકેઇનના સંપર્ક પછી ડ્રગના ઉપાડ દરમિયાન તીવ્ર તાણ. 2013). આ સૂચવે છે કે માદક દ્રવ્યોની ઉપાડ સાથે સંકળાયેલ મિકેનિઝમ્સ ડ્રગ-ઇન્ડેટેડ સંવેદનામાં સામેલ લોકોથી અલગ છે. તેથી અમે આગળ તપાસ કરી કે કોકેન ઉપાડ દરમિયાન એનએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સએક્સ-એમએસએનએસના ફોટોસ્ટેશનથી કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાની અભિવ્યક્તિને અસર થાય છે.

ઉપર મુજબ વારંવાર કોકેઇનના ઇન્જેક્શન દ્વારા વર્તણૂકીય સંવેદનાનો સમાવેશ કર્યા પછી, ડીએક્સએન્યુએમએક્સ-ક્રે (-) અને ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે (+) ઉંદરને 2 દિવસ ઉપાડની અવધિ માટે બે જૂથોમાં વહેંચવામાં આવ્યા હતા: એક જૂથના દૈનિક વાદળી-પ્રકાશ ઉત્તેજનાનો વિષય હતો 2 h (14 મિનિટ × 1 વખત) માટે એનએસી, જ્યારે બીજો જૂથ ન હતો (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXA) .6A). કોકેઇન ઉપાડ દરમિયાન એનએસીમાં ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસના વારંવાર ફોટોસ્ટીમોલેશનથી ડીએક્સએન્યુએમએક્સ-ક્રે (-) :: કોક-કોક ઉંદર (આકૃતિ) માં સંવેદનશીલતાની અભિવ્યક્તિને અસર ન થઈ (આકૃતિ xNUMXB) .6B). તેનાથી વિપરિત, ડીએક્સએનયુએમએક્સ-ક્રે (+) :: કોક-કોક ઉંદરમાં, સંવેદનાની અભિવ્યક્તિને ડ્રગના ઉપાડ દરમિયાન વારંવાર ફોટોસ્ટેશન દ્વારા નોંધપાત્ર રીતે ઘટાડવામાં આવી હતી (આકૃતિ) (આકૃતિ 6B), 6B), તેમ છતાં લોકેશનના કોકેન-પ્રેરિત ઉત્તેજનાનો સમય કોર્સ અસરગ્રસ્ત ન હતો (આકૃતિ) (આકૃતિ xNUMXC) .6C). આમ, ડ્રગના ઉપાડ દરમિયાન એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનનો ફોટોસ્ટેશન, કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ ઘટાડે છે (કોકેન-ફોટો-સ્ટીમ્યુલેશન ક્રિયાપ્રતિક્રિયા F(1,18) = 11.08, P = 0.0037, આકૃતિ આકૃતિ xNUMXB) .6B). આ ડેટા સૂચવે છે કે ડ્રગ ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન D2R-NAc MSNs નું સક્રિયકરણ, કોકેન-લેવી અને ફરીથી લગાડતા વર્તણૂકોને પ્રભાવિત કરે છે.

ચર્ચા

નોંધપાત્ર પુરાવા સૂચવે છે કે કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદના વેન્ટ્રલ ટેગમેન્ટલ એરિયા, પ્રેફ્રન્ટલ કોર્ટેક્સ અને ન્યુક્લિયસ umbમ્બમ્બન્સ (એનએસી) નો સમાવેશ કરીને મેસોકોર્ટિકોલિમ્બિક સિસ્ટમમાં ઉન્નત ડોપામિનેર્જિક ટ્રાન્સમિશન સાથે સંકળાયેલ છે. ખાસ કરીને, વર્તણૂકીય સંવેદનાનો અભિવ્યક્તિ તબક્કો ડ્રગના સમાપ્તિ પછી સતત દવા અતિસંવેદનશીલતા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે, જે અનુકૂલન મિકેનિઝમ્સ (કાલિવાસ અને ડફી, 1990; રોબિન્સન અને બેરીજ, 1993; કાલિવસ એટ અલ., 1998) જે અનિવાર્ય ડ્રગની તૃષ્ણામાં ફાળો આપી શકે છે (રોબિન્સન અને બેરીજ, 1993; કાલિવસ એટ અલ., 1998; સ્ટેકેટી અને કાલિવ્સ, 2011). એમ.એસ.એન. માં ડી.એ. રીસેપ્ટર સિગ્નલિંગના સહયોગથી, એનએસીની અંદર પરમાણુ, સેલ્યુલર અને વર્તણૂક પ્લાસ્ટિસિટીમાં કોકેન-પ્રેરિત ફેરફારો, ડ્રગ-મધ્યસ્થી વ્યસન વર્તન (લોબો એટ અલ.) ને નિયંત્રિત કરી શકે છે. 2010; શ્મિટ અને પિયર્સ, 2010; ફર્ગ્યુસન એટ અલ., 2011; પાસ્કોલી એટ અલ., 2011; બોકલિસ્ચ એટ અલ., 2013; ગ્રુટર એટ અલ., 2013).

આનુવંશિક રીતે ઇજનેરી ઉંદરનો ઉપયોગ કરીને તાજેતરના અધ્યયનો જે શરતે ક્રે રિકોમ્બિનેઝને વ્યક્ત કરે છે તે કોક્સિન વ્યસનકારક વર્તણૂકમાં D1R-MSNs અથવા D2R-MSNs માટેની ભૂમિકા જાહેર કરી છે. પુનરાવર્તિત કોકેન વહીવટના 1 દિવસ પછી એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનઓનું toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ, લોકોમોટર પ્રવૃત્તિમાં વધારો કરે છે, જ્યારે ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસના સક્રિયકરણની કોઈ અસર થતી નથી (લોબો એટ અલ., 2010). આ ડેટા સૂચવે છે કે વારંવાર કોકેનમાં સંપર્ક કરવાથી એનએએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનનું આઉટપુટ વધે છે. ટિટાનસ ટોક્સિન (હિકિડા એટ અલ., ડી.એક્સ.એન.એમ.એક્સ.એક્સ. એક્સપ્રેસિંગ એમ.એસ.એન.) નું નિષેધ 2010) કોકેન-કન્ડિશન્ડ પ્લેસ પ્રેફરન્સ (સીપીપી) ને ઘટાડે છે, જ્યારે ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસ (હિકિડા એટ અલ.) માં સિનેપ્ટિક ટ્રાન્સમિશન નાબૂદ કર્યા પછી કોકેન સીપીપીમાં કોઈ ફેરફાર જોવાયો ન હતો. 2010). ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમમાં D1R-MSNs નું toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ સતત મજબૂતીકરણને પ્રેરિત કરે છે, જ્યારે D2 રીસેપ્ટરને ઉત્તેજીત કરતી ne ન્યુરોન્સને ક્ષણિક સજા પ્રેરિત કરે છે (ક્રેવિટઝ એટ અલ., 2012). તાજેતરના અધ્યયનમાં એમ પણ જણાવાયું છે કે ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએનએક્સનો કેમિકોજેનેટિક અભિગમ દ્વારા નિષેધ કરવાથી કોકેઇન મેળવવા માટેની પ્રેરણામાં વધારો થાય છે, જ્યારે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનએસના toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ, કોકેઇન સ્વ-વહીવટ (બોક એટ અલ.) ને દબાવે છે. 2013). બીજી બાજુ, બોકલિશ એટ અલ. (2013) એ અહેવાલ આપ્યો છે કે એનએસી પ્રોજેક્ટના ડીએક્સએન્યુએમએક્સઆર-એમએસએન, વીટીએને ખાસ કરીને વીટીએની અંદરના જીએબીએર્જિક ન્યુરોન્સમાં, જ્યારે ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ- એમએસએન સીધા વીટીએ પર પ્રોજેક્ટ કરતા નથી. આ સર્કિટનો અર્થ એ છે કે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનએસનું toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ, ડીએ ન્યુરોન્સને પ્રતિબંધિત કરે છે, જે છેવટે કોકેન-પ્રેરિત વ્યસન વર્તનને વધારે છે (બોકલિશ એટ અલ., 2013).

એમ.એસ.એન.એસ. ની આ બે વસ્તીની મોટે ભાગે સરળ સંગઠન હોવા છતાં, એમએસએનએસના ઘણાં ઇનપુટ્સ પ્રાપ્ત થાય છે અને અન્ય મગજનાં ક્ષેત્રોમાં / થી જુદા જુદા આઉટપુટ હોય છે, તેમજ એમ.એસ.એન.એસ. અને ઇન્ટરન્યુરોન્સના અન્ય વર્ગો વચ્ચે સ્થાનિક સર્કિટ રચાય છે, D1R- ના પરિણામી આઉટપુટ. MSN અને D2R-MSNs જટિલ અને વિવિધ અણુ, સેલ્યુલર અને વર્તણૂકીય પરિણામો લાવી શકે છે.

પહેલાં તે બતાવવામાં આવ્યું છે કે ડ્રગ ઉપાડ દરમિયાન D2R સિનેપ્ટિક ફેરફારોમાં ફાળો આપે છે અને આ પ્રારંભિક ડ્રગ એક્વિઝિશન અથવા ડ્રગ લેવી પર અસર કર્યા વિના, કોકેઇનની શોધમાં ફરીથી થવું સંભવિત બનાવે છે (સિમ એટ અલ., 2013). અમારો હાલનો ડેટા સૂચવે છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનએમએમએક્સઆર-એમએસએનનો ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન બેસલ લોકમોટર પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો દર્શાવે છે. લોબો એટ અલ. (2010) જ્યારે એમ.એસ.એન. પેટાપ્રકારનો પ્રકાર સક્રિય થયો હતો ત્યારે લોકોમોશનમાં કોઈ પરિવર્તન આવ્યું નથી, પરંતુ તેઓ ફોટોશોલેશનમાં મૂળભૂત લોમમોટર પ્રવૃત્તિના તાત્કાલિક જવાબોની તપાસ કરવાને બદલે માત્ર કુલ લોકમોટર પ્રવૃત્તિની તપાસ કરી. ક્રાવીત્ઝ એટ અલ. (2010) એ પણ શોધી કા .્યું કે ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમમાં D2R-MSNs ના toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ પણ લોકોમોટર પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો કરે છે. આમ, અમારું ડેટા સૌ પ્રથમ દર્શાવ્યું છે કે એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનનો ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન દ્વારા મૂળભૂત લોકમોટર પ્રવૃત્તિને અટકાવવામાં આવે છે અને આ ચેતાકોષોના ફોટોસ્ટિલેશન દરમિયાન બેસલ લોકોમોટર પ્રવૃત્તિના સમયક્રમની પદ્ધતિસર તપાસ કરે છે.

હાલના અધ્યયનમાં, અમે નિરીક્ષણ કર્યું છે કે એનએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સએક્સ-એમએસએનએસના toપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ, વર્તણૂક સંવેદનાની દીક્ષા અથવા અભિવ્યક્તિને અસર કરતું નથી. જો કે, ડ્રગના ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન D2R-MSNs ના ફોટોસ્ટીમોલેશનથી કોકેન-પ્રેરિત સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ છૂટી ગઈ. તેથી, અમારું ડેટા સૂચવે છે કે ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએન એ ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન કેટલાક સંકેતોની ભરતી કરી રહ્યા છે જે જીન અભિવ્યક્તિ અથવા સિગ્નલિંગના અન્ય સ્વરૂપોમાં ફેરફાર કરે છે અને ત્યાં સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિસિટીમાં પરિવર્તન લાવે છે, જેનાથી કોકેન-પ્રેરિત વર્તન સંવેદનામાં ફેરફાર થાય છે. આ એમએસએનએસ સેલ-પ્રકારની વિશિષ્ટ અનુકૂલનને કેવી રીતે કાર્યરત કરે છે જે વ્યસન-સંબંધિત વર્તણૂકોમાં તેમના વિશિષ્ટ પરિણામો લાવી શકે છે તે જાણી શકાયું નથી. ગ્રુટર એટ અલ. (2013) સૂચવ્યું હતું કે એનએસીમાં osફોસબી, સેલ પ્રકાર- અને ઉપનગરીય-વિશિષ્ટ ફેશનમાં સિનેપ્ટિક ગુણધર્મો અને પુરસ્કાર સંબંધિત વર્તણૂકોને વિભિન્ન રીતે મોડ્યુલેટ કરે છે. તાજેતરમાં, ચંદ્ર એટ અલ. (2013) એ અહેવાલ આપ્યો છે કે D2R-MSNs ના વારંવાર ChR1 સક્રિયકરણ, પરંતુ D2R-MSNs દ્વારા, ટાઇમએક્સએનયુએમએક્સ જનીનનું ડાઉન-રેગ્યુલેશન થયું, જે પ્રોટીન, એક્ટિન સાયટોસ્કેલિટોનની પુનment ગોઠવણીમાં સામેલ છે, કોકેનની અસરોની જેમ. તેથી, ડ્રગ-પ્રેરિત વર્તણૂકોના કાયમી પ્રભાવ પ્રાપ્ત કરતી પદ્ધતિઓ સમજવા માટે, આ એમએસએન માં મોલેક્યુલર ઇવેન્ટ્સના સેલ-સિલેક્ટિવ ઇન્ડક્શનને વર્ણવવું મહત્વપૂર્ણ રહેશે કે જે પુનરાવર્તિત દવાઓના સંપર્કમાં સિનેપ્ટિક અનુકૂલનને નિયંત્રિત કરે છે.

પુનરાવર્તિત ડ્રગના સંપર્ક સાથે જોડાણમાં, ખસીને મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવવાનું સૂચન કરવામાં આવ્યું છે કારણ કે કેટલાક ફેરફારો કોકેઇનના અંતિમ સંપર્ક પછીના કેટલાક અઠવાડિયા પછી જ દેખાય છે. આ સૂચવે છે કે પ્લાસ્ટિસિટીના વિકાસમાં ત્યાગ એ એક મહત્વપૂર્ણ મધ્યસ્થી છે (રોબિન્સન અને બેરીજ, 2003; બૌદ્રેઉ અને વુલ્ફ, 2005; બૌદ્રેઉ એટ અલ., 2007; કૌરરિક એટ અલ., 2007). આ અવલોકનો એ સંભાવના વધારે છે કે ખસી જવું એ એનએએસીમાં થયેલા પરિવર્તન માટે ટ્રિગર હોઈ શકે છે જે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-આધારિત સિગ્નલિંગના નિયંત્રણ હેઠળ છે. અમારું પરિણામ દર્શાવે છે કે ડ્રગના ઉપાડ દરમિયાન એનએસીમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સઆર-એમએસએનનું સક્રિયકરણ, કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂકીય સંવેદનાને અસર કરે છે આ વિચારને આકર્ષક ટેકો પૂરો પાડે છે.

તે પહેલાં બતાવવામાં આવ્યું છે કે ડ્રગના ઉપાડ દરમિયાન તનાવના વારંવાર સંપર્કમાં કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાની અભિવ્યક્તિ તેમજ ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર કો માઉસ (કોમ ઉન. 2013). તેથી તે રસપ્રદ છે કે ડ્રગ ઉપાડ દરમિયાન D2R-MSNs ના ફોટોસ્ટેશન, સંવેદનાની અભિવ્યક્તિને પણ ઘટાડે છે. ગ્લુટામેટેજિક સિનેપ્સમાં તાણ-પ્રેરિત સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિસિટી D2R KO ઉંદરના એનએસી (સિમ એટ અલ., 2013). જોકે, હજી સુધી તે જાણી શકાયું નથી કે ડીએક્સએન્યુએમએક્સએક્સએન એમએસએસનું ફોટોસ્ટીમ્યુલેશન અથવા ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન ક્રોનિક તણાવ સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિસિટીમાં સમાન ફેરફારોને ઉત્તેજિત કરે છે, અમારા હાલના તારણો એવી પૂર્વધારણાને સમર્થન આપે છે કે એનએસીના ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ- એમએસએન એ ઉપાડ-પ્રેરિત પ્લાસ્ટિસિટીમાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે અને તેમાં ફાળો આપી શકે છે. માદક દ્રવ્યોના સમાપન પછી ફરીથી થવું. આગળ તપાસ માટે કાર્યાત્મક ન્યુરલ સર્કિટ્સ શોધવા માટે, જેમાં D2R MSNs ડ્રગ ઉપાડ દરમિયાન ભાગ લે છે અને આ ચોક્કસ સર્કિટમાં સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિકિટી પરના D2R-MSNs ફોટોસ્ટેશન અને ક્રોનિક તણાવના પરિણામોનું વિશ્લેષણ અને તુલના કરવા માટે.

ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સએરેપીએક્સએક્સિંગ એમએસએનએસ માટે બીજી શક્ય ભૂમિકા એ એનએએસીથી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સઆર-એમએસએનઓનું આઉટપુટ અટકાવી શકે છે. પહેલાનું સંશોધન સૂચવે છે કે જોકે એમએસએન એ દૂરસ્થ લક્ષ્યો માટે લાંબા ચેતાક્ષનો પ્રોજેક્ટ કરે છે, ચેતાક્ષ કોલેટરલ અને અડીને આવેલા સ્પાઇની પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સ (ગ્રૂફોવ, 1975; પ્રેસ્ટન એટ અલ., 1980; વિલ્સન અને ગ્રુવ્સ, 1980). આ એનએસીમાં એમએસએન માટે શક્ય સ્થાનિક સિનેપ્ટિક કનેક્ટિવિટી સૂચવી શકે છે. સ્પાઇની પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સની જોડીમાંથી ઇન્ટ્રાસેલ્યુલર રેકોર્ડિંગ્સએ ઉંદર સ્ટ્રાઇટમ (સીઝુબેકો અને પ્લેન્ઝ, એમએસએનએસ) વચ્ચેના કાર્યાત્મક અવરોધક જોડાણોની ઓળખ કરી છે. 2002; ટનસ્ટોલ એટ અલ., 2002; કુસ એટ અલ., 2004; ગુસ્તાફસન એટ અલ., 2006). એવું પણ નોંધવામાં આવ્યું છે કે સ્ટ્રાઇટમમાં એમએસએસના આવર્તક કોલેટરલ એક્ષોન્સ દ્વારા રચાયેલ સિનેપ્સ, રેન્ડમ નથી, D2R-MSNs, અન્ય D2R-MSNs અને D1R-MSNs બંને સાથે સિનેપ્ટિક જોડાણો બનાવે છે, જ્યારે D1R-MSNs લગભગ અન્ય લોકો સાથે સિનેપ્ટિક જોડાણો બનાવે છે D1R-MSNs (ટેવરના એટ અલ., 2008). તેમ છતાં, આરોપિત એમએસએનએસ વચ્ચે સ્થાનિક રિકરન્ટ એકોનલ કોલેટરલ્સ દ્વારા જીએબીએર્જિક ઇન્ટરકનેક્શનની જાણ કરવામાં આવી છે (ટેવરના એટ અલ., 2004), તે હજી સુધી સ્પષ્ટ નથી થયું કે D2R-MSNs રેન્ડમલી સ્થાનિક માઇક્રોસિરક્યુટ બનાવે છે અથવા તેઓ સ્ટ્રાઇટમમાં કરે છે તેમ પ્રેફરન્શિયલ કનેક્શન સાથે એનએમાં માઇક્રોસિરકિટ્સમાં ફાળો આપે છે. અમારું ડેટા સૂચવે છે કે એનએસીએચએચઆરએક્સએનએમએક્સએક્સમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સ એક્સપ્રેસ કરનારા પડોશી એમએસએન સાથે સિનેપ્ટિક જોડાણો બનાવે છે, અને તે ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએનએ પછી વ્યસનકારક વર્તણૂકોને ડીએક્સએનયુએમએક્સ-એમએસએનએસ માટે અવરોધક સંપર્કમાં મદદ કરે છે.

નિષ્કર્ષમાં, અમે બતાવ્યું છે કે એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએમએસ-એમએસએનનું opપ્ટોજેનેટિક સક્રિયકરણ, કોકેઇનના વ્યસન દરમિયાન થતી ઉપાડ-પ્રેરિત પ્લાસ્ટિસિટીમાં ફેરફાર કરે છે. ઉપાડના સમયગાળા દરમિયાન D2R- આધારિત સિગ્નલિંગની તે પ્રવૃત્તિ, કોકેન-પ્રેરિત વર્તણૂક સંવેદનાના અભિવ્યક્તિના મુખ્ય નિયમનકર્તા લાગે છે તે જોતાં, અમે પ્રસ્તાવ કરીએ છીએ કે ડીએક્સએન્યુએમએક્સઆર-એમએસએન ડ્રગની શોધમાં અને ફરીથી બંધ થવાના લાંબા ગાળાના અનુકૂલનના એક મહત્વપૂર્ણ મધ્યસ્થી છે. પુનરાવર્તિત દવાઓના સંપર્કમાં હેઠળ કાર્યરત એનએસી ડીએક્સએનએમએક્સએક્સ-એમએસએસના ચોક્કસ સર્કિટની ઓળખ સાથે, ડીએક્સએનએમએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સ-એમએસએનએલના પરમાણુ સબસ્ટ્રેટ્સની ઓળખ, ડ્રગ રિલેપ્સમાં ઉપચારાત્મક દખલ માટે નવીન લક્ષ્યાંક પ્રદાન કરવી જોઈએ.

રસના વિવાદનું વિવાદ

લેખકો જાહેર કરે છે કે આ સંશોધન કોઈ વ્યાપારી અથવા નાણાકીય સંબંધોની ગેરહાજરીમાં હાથ ધરવામાં આવ્યો હતો જેને સંભવિત રૂચિના સંઘર્ષ તરીકે ગણવામાં આવી શકે છે.

સમર્થન

આ કામને નેશનલ રિસર્ચ ફાઉન્ડેશન Koreaફ કોરીયા (એનઆરએફ) દ્વારા મગજ સંશોધન કાર્યક્રમ (જા-હ્યુન બાઇક; ગ્રાન્ટ નંબર 2013M3C7A1056101) દ્વારા વિજ્ ,ાન, આઇસીટી અને ફ્યુચર પ્લાનિંગ દ્વારા આપવામાં આવતી ગ્રાન્ટ દ્વારા અને બાયો અને મેડિકલ ટેકનોલોજી દ્વારા સમર્થન આપવામાં આવ્યું હતું. ડેવલપમેન્ટ પ્રોગ્રામ (જા-હ્યુન બાઇકને; ગ્રાન્ટ નંબર 2013M3A9D5072550) અને વિજ્ Scienceાન, આઇસીટી અને ફ્યુચર પ્લાનિંગ (જ્યોર્જ જે. ઓગસ્ટિનને મંત્રાલય દ્વારા ભંડોળ પૂરું પાડતું કોરિયા) (એનઆરએફ) ના વર્લ્ડ ક્લાસ ઇન્સ્ટિટ્યૂટ (ડબ્લ્યુસીઆઈ) પ્રોગ્રામ. ; ડબ્લ્યુસીઆઈ એક્સએન્યુએમએક્સ-એક્સએનએમએક્સ), તેમજ કોરિયા યુનિવર્સિટી ગ્રાન્ટ (જા-હ્યુન બાઇકને) અને સિંગાપોરની નેશનલ રિસર્ચ ફાઉન્ડેશન (જ્યોર્જ જે. ઓગસ્ટિનને) ની સીઆરપી ગ્રાન્ટ દ્વારા.

સંદર્ભ

  1. બાઇક જેએચ (એક્સએનએમએક્સ). ડોપામાઇન ઇનામથી સંબંધિત વર્તણૂંકમાં સંકેત આપે છે. આગળ. ન્યુરલ સર્કિટ્સ 2013: 7 152 / fncir.10.3389 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  2. બાઇક જેએચ, પિકટ્ટી આર., સાયાર્ડી એ., થિરીટ જી., ડીરીચ એ., ડેપ Depલિસ એ., એટ અલ. (1995) ડોપામાઇન ડીએક્સએનયુએમએક્સ રીસેપ્ટર્સના અભાવમાં ઉંદરમાં પાર્કિન્સોનીયમ જેવા લોકોમોટર ક્ષતિ. પ્રકૃતિ 2, 377 – 424 428 / 10.1038a377424 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  3. બેરીજ કેસી (2007). પુરસ્કારમાં ડોપામાઇનની ભૂમિકા વિશેની ચર્ચા: પ્રોત્સાહક ક્ષમતાઓ માટેનો કેસ. સાયકોફાર્માકોલોજી (બર્લ) એક્સએન્યુએમએક્સ, એક્સએનયુએમએક્સ – એક્સએન્યુએમએક્સ એક્સએન્યુએમએક્સ / એસએક્સએન્યુએમએક્સ-એક્સએનયુએમએક્સ-એક્સએન્યુએમએક્સ-એક્સ [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  4. બોક આર., શિન જે.એચ., કેપ્લાન એ.આર., ડોબી એ., માર્કી ઇ., ક્રેમર પી.એફ., એટ અલ. (2013) આરોપિત પરોક્ષ માર્ગને વધુ મજબૂત બનાવવું અનિવાર્ય કોકેઇનના ઉપયોગમાં સ્થિતિસ્થાપકતાને પ્રોત્સાહન આપે છે. નેટ. ન્યુરોસિ. 16, 632 – 638 10.1038 / nn.3369 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  5. બોકલિશ સી., પાસકોલી વી., વોંગ જેસી, હાઉસ ડીઆર, યોન સી., ડી રો એમ., એટ અલ. (2013) કોકેઇન વેન્ટ્રલ ટેગમેન્ટલ એરિયામાં જીએબીએ ટ્રાન્સમિશનની સંભવિતતા દ્વારા ડોપામાઇન ન્યુરોન્સનું નિષેધ કરે છે. વિજ્ Xાન 341, 1521 – 1525 10.1126 / વિજ્.ાન. 1237059 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  6. બૌદ્રેઉ એ.સી., રીમર્સ જે.એમ., મિલોવાનોવિક એમ., વુલ્ફ એમ.ઇ. (એક્સ.એન.એન.એમ.એક્સ). ઉંદરી ન્યુક્લિયસમાં સેલ સપાટી એએમપીએ રીસેપ્ટર્સ કોકેન ખસી જવા દરમિયાન વધે છે પરંતુ મિટોજન-સક્રિયકૃત પ્રોટીન કિનાસેસના બદલાયેલા સક્રિયકરણના સહયોગથી કોકેન પડકાર પછી આંતરિક બને છે. જે ન્યુરોસિ. 2007, 27 – 10621 10635 / jneurosci.10.1523-2163 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  7. બૌદ્રેઉ એસી, વુલ્ફ ME (2005). કોકેઇન પ્રત્યે વર્તણૂકીય સંવેદનશીલતા એ ન્યુક્લિયસ એક્મ્બેન્સમાં વધેલી એએમપીએ રીસેપ્ટર સપાટીની અભિવ્યક્તિ સાથે સંકળાયેલ છે. જે ન્યુરોસિ. 25, 9144 – 9151 10.1523 / jneurosci.2252-05.2005 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  8. ચંદ્ર આર., લેન્ઝ જેડી, ગાંકાર્ઝ એ.એમ., ચૌધરી ડી., સ્ક્રોડર જી.એલ., હેન એમ.એચ., એટ અલ. (2013) ન્યુક્લિયસ એક્યુમ્બેન્સ ન્યુરન્સ ધરાવતા ડીએક્સએનયુએમએક્સઆરના toપ્ટોજેનેટિક ઇન્હિરેશન, ટિયામએક્સએનએમએક્સના કોકેન-મધ્યસ્થી નિયમનને બદલી નાખે છે. આગળ. મોલ. ન્યુરોસિ. 1: 1 6 / fnmol.13 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  9. ચાંગ એચટી, કિટાઇ એસટી (એક્સએનએમએક્સ). ન્યુક્લિયસના પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સ accમ્બેબન્સ: ઇન્ટ્રાસેલ્યુલર લેબલિંગ અભ્યાસ. મગજ રિઝ. 1985, 347 – 112 116 / 10.1016-0006 (8993) 85-90894 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  10. ચૌસ્મર એએલ, એલ્મર જીઆઈ, રુબિન્સટીન એમ., લો એમજે, ગ્રાન્ડી ડીકે, કેટઝ જેએલ (એક્સએનએમએક્સ). ડોકેમાઇન D2002 રીસેપ્ટર મ્યુટન્ટ ઉંદરમાં કોકેન-પ્રેરિત લોકમોટર પ્રવૃત્તિ અને કોકેઇન ભેદભાવ. સાયકોફાર્માકોલોજી (બર્લ) એક્સએન્યુએમએક્સ, એક્સએનયુએમએક્સ – એક્સએન્યુએમએક્સ એક્સએન્યુએમએક્સ / એસએક્સએન્યુએમએક્સ-એક્સએન્યુએમએક્સ-એક્સએન્યુએમએક્સ-વાય [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  11. ચેવાલીઅર જી., ડેનિઆઉ જેએમ (એક્સએનએમએક્સ). સ્ટ્રાઇટલ કાર્યોની અભિવ્યક્તિમાં મૂળ પ્રક્રિયા તરીકે નિષેધ. વલણો ન્યુરોસિ. 1990, 13 – 277 280 / 10.1016-0166 (2236) 90-n [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  12. ક્ઝુબેકો યુ., પ્લેન્ઝ ડી. (એક્સએનએમએક્સ). સ્ટ્રાઇટલ સ્પાઇની પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સ વચ્ચે ઝડપી સિનેપ્ટિક ટ્રાન્સમિશન. પ્રોક. નેટલ. એકડ. વિજ્ .ાન. યુએસએ 2002, 99 – 15764 15769 / pnas.10.1073 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  13. ફર્ગ્યુસન એસ.એમ., એસ્કેનાઝી ડી., ઇશિકાવા એમ., વાનાટ એમ.જે., ફિલિપ્સ પી.ઇ., ડોંગ વાય., એટ અલ. (2011) ક્ષણિક ન્યુરોનલ અવરોધ સંવેદનામાં પરોક્ષ અને સીધા માર્ગોની વિરોધી ભૂમિકાઓ પ્રગટ કરે છે. નેટ. ન્યુરોસિ. 14, 22 – 24 10.1038 / nn.2703 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  14. ગોટો વાય., ગ્રેસ એએ (એક્સએનએમએક્સ). ધ્યેય-નિર્દેશિત વર્તનમાં ન્યુક્લિયસના લિમ્બીક અને કોર્ટીકલ ડ્રાઇવનું ડોપામિનેર્જિક મોડ્યુલેશન. નેટ. ન્યુરોસિ. 2005, 8 – 805 812 / nn10.1038 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  15. ગ્રૂફોવ આઇ. (એક્સએનએમએક્સ). સબસ્ટ્રેટિયા નાઇગ્રાને રજૂ કરતાં સ્ટ્રિએટલ અને પેલિડલ ન્યુરોન્સની ઓળખ. હ horseર્સરેડિશ પેરોક્સિડેઝના રેટ્રોગ્રેડ એક્કોનલ ટ્રાન્સપોર્ટના માધ્યમથી એક પ્રાયોગિક અભ્યાસ. મગજ રિઝ. 1975, 91 – 286 291 / 10.1016-0006 (8993) 75-90550 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  16. ગ્રેટર બીએ, રોબિસન એજે, નેવ આરએલ, નેસ્લેર ઇજે, મલેન્કા આરસી (2013). ΔFOSB ભિન્ન રીતે ન્યુક્લિયસ સીધા અને પરોક્ષ પાથવે ફંક્શન કાર્ય કરે છે. પ્રોક. નાટ. એકાદ વિજ્ઞાન. યુએસએ 110, 1923-1928 10.1073 / pnas.1221742110 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  17. ગુસ્તાફસન એન., ગિરેશ-ધર્મરાજ ઇ., કઝુબેકો યુ., બ્લેકવેલ કેટી, પ્લેન્ઝ ડી. (એક્સએનયુએમએક્સ). વિટ્રોમાં સ્ટ્રિએટલ માઇક્રોક્રિક્વિટમાં પ્રતિક્રિયા અને ફીડફોરવર્ડ સિનેપ્ટિક ટ્રાન્સમિશનનું તુલનાત્મક વોલ્ટેજ અને વર્તમાન-ક્લેમ્પ વિશ્લેષણ. જે ન્યુરોફિઝિઓલ. 2006, 95 – 737 752 / jn.10.1152 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  18. હિકિડા ટી., કિમુરા કે., વાડા એન., ફનાબીકી કે., નાકનિશી એસ. (એક્સએનએમએક્સ). ઇનામ અને અવ્યવસ્થિત વર્તન માટે સીધા અને પરોક્ષ સ્ટ્રાઇટલ માર્ગોમાં સિનેપ્ટિક ટ્રાન્સમિશનની વિશિષ્ટ ભૂમિકાઓ. ન્યુરોન 2010, 66 – 896 907 / j.neuron.10.1016 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  19. કાલિવાસ પીડબ્લ્યુ, ડફી પી. (એક્સએનએમએક્સ). ન્યુક્લિયસ ટેમ્બેન્સમાં એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડોપામાઇન પર તીવ્ર અને દૈનિક કોકેઇન સારવારની અસર. સિનેપ્સ એક્સએન્યુએમએક્સ, એક્સએનયુએમએક્સ – એક્સએન્યુએમએક્સ એક્સએન્યુએમએક્સ / સિએન. એક્સએન્યુએમએક્સ [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  20. કાલિવાસ પીડબ્લ્યુ, પિયર્સ આરસી, કોર્નિશ જે., સોર્ગ બીએ (એક્સએનયુએમએક્સ). તૃષ્ણામાં સંવેદનશીલતા અને કોકેઇનના વ્યસનમાં ફરીથી થવાની ભૂમિકા. જે સાયકોફર્માકોલ. 1998, 12 – 49 53 / 10.1177 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  21. કુસ ટી., ટેપર જેએમ, વિલ્સન સીજે (એક્સએનએમએક્સ). નિયોસ્ટ્રિએટમમાં સ્પાઇની અને ફાસ્ટ સ્પાઇકિંગ ન્યુરોન્સ દ્વારા ઉદ્ભવેલા આઇપીએસસીની તુલના. જે ન્યુરોસિ. 2004, 24 – 7916 7922 / jneurosci.10.1523-2163 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  22. કુરિચ એસ., રોથવેલ પીઇ, ક્લુગ જેઆર, થોમસ એમજે (એક્સએનએમએક્સ). કોકેઇનનો અનુભવ ન્યુક્લિયસના રહેઠાણમાં દ્વિપક્ષીય સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિસિટીને નિયંત્રિત કરે છે. જે ન્યુરોસિ. 2007, 27 – 7921 7928 / jneurosci.10.1523-1859 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  23. ક્રાવીત્ઝ એ.વી., ફ્રીઝ બી.એસ., પાર્કર પી.આર., કે.એ., થ્વિન એમ.ટી., ડીઝેરothથ કે., એટ અલ. (2010) બેસલ ગેંગલિયા સર્કિટરીના toપ્ટોજેનેટિક નિયંત્રણ દ્વારા પાર્કિન્સોનિયન મોટર વર્તનનું નિયમન. પ્રકૃતિ 466, 622 – 626 10.1038 / nature09159 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  24. ક્રેવિટ્ઝ એ.વી., ટાઇ એલડી, ક્રેઝીઝર એસી (એક્સએનએમએક્સ). મજબૂતીકરણમાં સીધા અને આડકતરી માર્ગ માટે સ્ટ્રેટેટલ ન્યુરોન્સ માટે ભિન્ન ભૂમિકાઓ. નેટ. ન્યુરોસિ. 2012, 15 – 816 818 / nn.10.1038 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  25. ક્રેઝીઝર એસી, મલેન્કા આરસી (એક્સએનએમએક્સ). સ્ટ્રિએટલ પ્લાસ્ટિસિટી અને બેસલ ગેંગલિયા સર્કિટ ફંક્શન. પ્રકૃતિ 2008, 60 – 543 554 / j.neuron.10.1016 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  26. લે મોઇન સી., બ્લોચ બી. (1996). ન્યુક્લિયસ umbમ્બેન્સના પેપ્ટિડેર્જિક ન્યુરોન્સમાં ડીએક્સએનયુએમએક્સ ડોપામાઇન રીસેપ્ટરની અભિવ્યક્તિ: ડીએક્સએનયુએમએક્સ અને ડીએક્સએનયુએમએક્સ ડોપામાઇન રીસેપ્ટર્સ સાથે તુલના. ન્યુરોસાયન્સ 3, 1 – 2 73 / 131-143 (10.1016) 0306-4522 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  27. લોબો એમ.કે., કtonવિંગટન હે, એક્સ.એન.એન.એમ.ક્સ.આર., ચૌધરી ડી., ફ્રેડમેન એકે, સન એચ., ડામેઝ-વર્નો ડી., એટ અલ. (3) બીડીએનએફના સંકેતની કોષના પ્રકાર-વિશિષ્ટ નુકસાન, કોકેન ઇનામના toપ્ટોજેનેટિક નિયંત્રણની નકલ કરે છે. વિજ્ Xાન 2010, 330 – 385 390 / વિજ્.ાન. 10.1126 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  28. લોબો એમકે, નેસ્ટલર ઇજે (એક્સએનએમએક્સ). ડ્રગ વ્યસનમાં સ્ટ્રિએટલ બેલેન્સિંગ એક્ટ: સીધા અને પરોક્ષ માર્ગના માધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સની અલગ ભૂમિકા. આગળ. ન્યુરોઆનાટ. 2011: 5 41 / fnana.10.3389 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  29. લüશર સી., માલેન્કા આરસી (2011). વ્યસનમાં ડ્રગ-ઇવેક્ડ સિનેપ્ટિક પ્લાસ્ટિસિટી: મોલેક્યુલર ફેરફારથી લઈને સર્કિટ રિમોડેલિંગ સુધીની. ન્યુરોન 69, 650 – 663 10.1016 / j.neuron.2011.01.017 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  30. ઓ 'ડોનલ પી., ગ્રેસ એએ (એક્સએનએમએક્સ). વિટ્રોમાં નોંધાયેલા એક્મ્બન્સ કોર અને શેલ ન્યુરોન્સની શારીરિક અને આકારવિષયક ગુણધર્મો. સિનેપ્સ એક્સએન્યુએમએક્સ, એક્સએનયુએમએક્સ – એક્સએન્યુએમએક્સ એક્સએન્યુએમએક્સ / સિએન. એક્સએન્યુએમએક્સ [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  31. પાસકોલી વી., ટુરિઓલ્ટ એમ., લüશર સી. (એક્સએનયુએમએક્સ). કોકેન-ઇવેવ્ડ સિનેપ્ટિક પentiન્ટિએશનનું વિપરીત ડ્રગ દ્વારા પ્રેરિત અનુકૂલનશીલ વર્તણૂકને ફરીથી સેટ કરે છે. પ્રકૃતિ 2011, 481 – 71 75 / nature10.1038 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  32. પ્રેસ્ટન આરજે, બિશપ જીએ, કીતાઇ એસટી (એક્સએનએમએક્સ). ઉંદર નિયોસ્ટ્રિઆટમથી મધ્યમ સ્પાની ન્યુરોન પ્રક્ષેપણ: ઇન્ટ્રાસેલ્યુલર હોર્સરાડિશ પેરોક્સિડેઝ અભ્યાસ. મગજ રિઝ. 1980, 183 – 253 263 / 10.1016-0006 (8993) 80-x [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  33. રોબિન્સન ટી, બેરીજ કેસી (1993). ડ્રગ તૃષ્ણાના ન્યુરલ આધાર: વ્યસનની પ્રેરણા-સંવેદનાત્મક સિદ્ધાંત. મગજ રિઝ. મગજ રિઝ. રેવ. 18, 247-291 10.1016 / 0165-0173 (93) 90013-p [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  34. રોબિન્સન ટીઇ, બેરીજ કેસી (2003). વ્યસન. અન્નુ. રેવ. સાયકોલ. 54, 25 – 53 10.1146 / annurev.psych.54.101601.145237 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  35. શ્મિટ એચડી, પિયર્સ આરસી (2010). ગ્લુટામેટ ટ્રાન્સમિશનમાં કોકેન-પ્રેરિત ન્યુરોઆડેપ્ટેશન: તૃષ્ણા અને વ્યસન માટેના સંભવિત રોગનિવારક લક્ષ્યો. એન. એનવાય એકડ. વિજ્ .ાન. 1187, 35 – 75 10.1111 / j.1749-6632.2009.05144.x [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  36. સેસackક એસઆર, ગ્રેસ એએ (એક્સએનએમએક્સ). કોર્ટિકો-બેસલ ગેંગલિયા ઇનામ નેટવર્ક: માઇક્રોક્રિક્વિટ્રી. ન્યુરોસિકોફર્માકોલોજી 2010, 35 – 27 47 / npp.10.1038 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  37. સિમ એચઆર, ચોઇ ટીવાય, લી એચજે, કંગના વાય, યુન એસ, હેન પીએલ, એટ અલ. (2013) તાણ-પ્રેરિત વ્યસન વર્તનના પ્લાસ્ટિસિટીમાં ડોપામાઇન ડીએક્સએનયુએમએક્સ રીસેપ્ટર્સની ભૂમિકા. નેટ. કોમ્યુન. 2: 4 1579 / ncomms10.1038 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  38. સ્મિથ આરજે, લોબો એમકે, સ્પેન્સર એસ., કાલિવસ પીડબ્લ્યુ (એક્સએનએમએક્સ). ડીએક્સએનયુએમએક્સ અને ડીએક્સએનયુએમએક્સમાં કોકેન-પ્રેરિત અનુકૂલન, પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સ (એક ડાયકોટોમી જરૂરી નથી જે સીધા અને પરોક્ષ માર્ગ સાથે સમાનાર્થી હોય). ક્યુર ઓપિન. ન્યુરોબિઓલ. 2013, 1 – 2 23 / j.conb.546 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  39. સ્ટેકીટી જેડી, કાલિવિયા પીડબલ્યુ (2011). માદક દ્રવ્યોની ઇચ્છા: ડ્રગ-શોધવાની વર્તણૂંકની વર્તણૂકલક્ષી સંવેદનશીલતા અને ફરીથી થવું. ફાર્માકોલ. રેવ. 63, 348-365 10.1124 / PR.109.001933 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  40. ટેવેર્ના એસ., ઇલિજિક ઇ., સુરમીઅર ડીજે (એક્સએનએમએક્સ). પાર્કિન્સન રોગના મોડેલોમાં સ્ટ્રિએટલ માધ્યમ સ્પાની ન્યુરોન્સના વારંવાર કોલેટરલ જોડાણો ખોરવાયા છે. જે ન્યુરોસિ. 2008, 28 – 5504 5512 / JNEUROSCI.10.1523-5493 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  41. ટેવેર્ના એસ., વાન ડોનજેન વાય.સી., ગ્રોએનવેગન એચજે, પેનાર્ટઝ સીએમ (એક્સએનયુએમએક્સ). સિચ્યુએટિવ કનેક્ટિવિટી માટેનો સીધો શારીરિક પુરાવો, ઉંદરી મધ્યવર્તી કેન્દ્રમાં મધ્યમ કદના સ્પાઈની ન્યુરોન્સ વચ્ચે સ્થિત. જે ન્યુરોફિઝિઓલ. 2004, 91 – 1111 1121 / jn.10.1152 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  42. થોમસ એમજે, કાલિવાસ પીડબ્લ્યુ, શાહમ વાય. (એક્સએનયુએમએક્સ). મેસોલીમ્બિક ડોપામાઇન સિસ્ટમ અને કોકેઇનની વ્યસનમાં ન્યુરોપ્લાસ્ટીટી. બીઆર. જે ફાર્માકોલ. 2008, 154 – 327 342 / bjp.10.1038 [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  43. ટનસ્ટલ એમજે, orsર્સચોટ ડીઇ, કેન એ., વિકન્સ જેઆર (એક્સએનયુએમએક્સ). ઉંદર સ્ટ્રાઇટમમાં સ્પાઇની પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સ વચ્ચે અવરોધક ક્રિયાપ્રતિક્રિયા. જે ન્યુરોફિઝિઓલ. 2002, 88 – 1263 1269 / jn.10.1152 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  44. વેન્ડરશ્યુરેન એલજે, કાલિવસ પીડબ્લ્યુ (એક્સએનએમએક્સ). વર્તણૂકીય સંવેદનાના સમાવેશ અને અભિવ્યક્તિમાં ડોપામિનેર્જિક અને ગ્લુટામેટરજિક ટ્રાન્સમિશન માટેના ફેરફારો: પૂર્વજ્linાનિક અભ્યાસની નિર્ણાયક સમીક્ષા. સાયકોફાર્માકોલોજી (બર્લ) એક્સએન્યુએમએક્સ, એક્સએનયુએમએક્સ – એક્સએન્યુએમએક્સ એક્સએનએમએક્સ / એસએક્સએનયુએમએક્સ [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  45. વિલ્સન સીજે, ગ્રુવ્સ પીએમ (એક્સએનએમએક્સ). ઉંદર નિયોસ્ટ્રિઆટમના સામાન્ય સ્પાઇન ન્યુરોનનું ફાઇન સ્ટ્રક્ચર અને સિનેપ્ટિક જોડાણ: હોર્સરેડિશ પેરોક્સિડેઝના ઇન્ટ્રાસેલ્યુલર ઇન્જેક્શનને લગતા અભ્યાસ. જે.કોમ્પ. ન્યુરોલ. 1980, 194 – 599 615 / cne.10.1002 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]
  • વાઈઝ આરએ (એક્સએનએમએક્સ). ડોપામાઇન, શીખવાની અને પ્રેરણા. નેટ. રેવ. ન્યુરોસિ. 2004, 5 – 483 494 / nrn10.1038 [પબમેડ] [ક્રોસ રિફ]