Pwolonje gwo grès Rejim diminye Dopamine Reuptake san yo pa Altering DAT Gene ekspresyon (2013)

  • Jackson J. Cone,
  • Elena H. Chartoff,
  • David N. Potter,
  • Stephanie R. Ebner,
  • Mitchell F. Roitman

Abstrè

Devlopman rejim alimantè a pwovoke obezite (DIO) ka potansyèlman chanje plizyè aspè nan Dopamine siyal, ki gen ladan transporter Dopamine (DAT) ekspresyon ak retaksyon dopamine. Sepandan, tan-kou a nan rejim alimantè-pwovoke chanjman nan DAT ekspresyon ak fonksyon ak si wi ou non chanjman sa yo depann sou devlopman nan DIO rete pako rezoud. Isit la, nou manje rat yon wo (HFD) oswa ki ba (LFD) rejim alimantè grès pou 2 oswa 6 semèn. Apre ekspozisyon rejim alimantè a, yo te anestezi rat ak urethane ak striatal fonksyon DAT te evalye pa elektrik stimulating kò selil yo Dopamine nan zòn nan ventral tegmental (VTA) ak anrejistre chanjman ki soti nan konsantrasyon dopamine nan ventri striatum a lè l sèvi avèk rapid-eskanè voltametri sik. Nou menm tou nou chiffre efè a nan HFD sou manbràn ki asosye DAT nan fraksyon selil striatal ki sòti nan yon gwoup apa nan rat apre ekspoze a pwotokòl la rejim alimantè menm. Miyò, pa gen okenn nan gwoup tretman nou yo diferan nan pwa kò yo. Nou jwenn yon defisi nan to a nan retaksyon dopamine nan rat HFD ki gen rapò ak rat LFD apre 6 men se pa XNX semèn nan ekspozisyon rejim alimantè. Anplis de sa, ogmantasyon nan dopamine evoke apre yon defi famasi nan kokayin te siyifikativman atenye nan HFD relatif nan rat LFD. Analiz Western blot devwale ke pa te gen okenn efè nan rejim alimantè sou pwoteyin total DAT. Sepandan, 2 semèn nan HFD ekspoze siyifikativman redwi 6 kDa isoform nan DAT nan yon manb synaptosomal-asosye fraksyon, men se pa nan yon fraksyon ki asosye ak endosom resiklaj. Done nou yo bay plis prèv pou rejim alimantè-induit modifikasyon nan retaksyon dopamine endepandan de chanjman ki fèt nan pwodiksyon DAT ak demontre ke chanjman sa yo ka manifeste san yo pa devlopman nan DIO. 

Sitasyon: Kòn JJ, Chartoff EH, Potter DN, Ebner SR, Roitman MF (2013) Pwolonje segondè grès rejim alimantè diminye reyaksyon Dopamine san yo pa chanje DAT èkspresyon jèn. PLoS YON NAN (8): e3. doi: 58251 / journal.pone.10.1371

Editè: Sidney Arthur Simon, Duke University Medical Center, Etazini nan Amerik la

resevwa: Oktòb 26, 2012; Aksepte: Fevriye NAN, NAN; Published: 13ye mas 2013

Copyright: © 2013 Cone et al. Sa a se yon atik ouvè-aksè distribiye anba kondisyon ki nan Creative Commons lisans lan Wikimedia, ki pèmèt itilize san restriksyon, distribisyon, ak repwodiksyon nan nenpòt mwayen, yo bay otè orijinal la ak sous kredite.

Finansman: Pwojè a dekri te sipòte pa Enstiti Nasyonal nan Sante (NIH) sibvansyon DA025634 (MFR) ak T32-MH067631 soti nan Pwogram fòmasyon Biyomedikal neroyans (JJC). Sipò adisyonèl te bay nan Sant Nasyonal pou Resous Rechèch ak Sant Nasyonal la pou avanse Translational Syans, NIH, nan sibvansyon UL1RR029877 (JJC) ak pa Chicago Biomedikal Consortium la ak sipò nan men Fon yo Searle nan Chicago Kominote Trust la (JJC). Kontni an se sèlman responsablite otè yo epi li pa nesesèman reprezante opinyon ofisyèl NIH oswa Chicago Biomedikal Consortium. Finansè yo pa te gen okenn wòl nan konsepsyon etid, koleksyon done ak analiz, desizyon yo pibliye, oswa preparasyon nan maniskri la.

Konpetisyon enterè: Otè yo te deklare ke pa gen okenn enterè konpetisyon egziste.

entwodiksyon

Ki twò gwo ak obèz la reprezante yon pousantaj de pli zan pli pi gwo nan Etazini yo ak popilasyon atravè lemond [1], [2]. Pandan ke gen anpil chemen nan obezite, petèt youn nan pi gwo menas pou pwa kò ki an sante se prévalence ak konsomasyon de trè saj, kav dore manje [3]. Vreman vre, dansite enèji (kcal / g) nan manje pwisan kontribye nan ki twò gwo ak obezite nan granmoun [4], [5]. Manje ki nourisan ki suscite divilgasyon dopamine nan striatum tou de moun ak bèt ki pa moun [6], [7], [8], [9] ak evalyasyon subjectif nan grasite nan manje yo pozitivman Koehle ak fòs nan repons neral nan striatum nan ventral [10]. Kidonk, dopamine ak striatum nan parèt kontribye nan preferans pou manje enèji dans. Dènyèman, li te montre ke diferans ki genyen nan rejim alimantè ka lakòz chanjman similtane nan kous sikui ak konpòtman ki dirije manje [11]. Sepandan, petèt mwens apresye se prèv k ap grandi ke diferans ki genyen nan manje vale, espesyalman ki gen rapò ak grès, ka fidbak sou ak chanje striatal Dopamine siyal.

Siyal dopamin striatal la reglemante plizyè faktè tankou pwodiksyon dopamine pa anzim tirozin idwoksilaz, reseptè dopamine pre- ak postsinaptik, ak transpòtè dopaminé presinaptik (DATs), tout sa ki te enplike nan obezite [12], [13]. Chanjman nan DAT nimewo oswa fonksyon ka chanje esfè a nan enfliyans nan dopamine lage ak konsekan striatal fonksyon [14], [15]. Ensilin, ki lage nan repons a manje vale, yo te montre ki enfliyanse fonksyon DAT [16], [17]. Se konsa, DAT a se youn nan kandida yo gen anpil chans pou efè rejim alimantè a.

Dènyèman, korlasyon ant obezite ak disponiblite DAT kòm byen ke rejim alimantè induit modifikasyon nan fonksyon DAT yo te eksplore. Endèks mas kò (BMI) korelasyon negatif ak disponiblite DAT nan striatum imen an [18]. DAT obligatwa, ak kon sa disponiblite, se redwi nan rejim alimantè ki gen anpil grès (HFD) sourit manje [19]. HFD-endike obezite (DIO) ki asosye avèk yon pousantaj redwi nan retaksyon dopamine pa DAT a nan rat. [20]. Ansanm, etid sa yo sijere ke obezite etabli pa HFD konsomasyon ka potansyèlman enfliyanse kritik regilatè presynaptic nan Dopamine siyal - espesyalman DAT la. Sepandan, kou a tan nan rejim alimantè-induit altènasyon nan Dopamine siyal ak si wi ou non se devlopman nan DIO rekòmande pou chanjman manifeste rete unknown. Nou teste fonksyon DAT lè evoke dopamine lage nan striatum nan ventral ak quantification to li yo nan retaksyon nan rat lè l sèvi avèk vit-eskanè voltametri sik. Pou detèmine si diminye retaminasyon Dopamine te koze pa redwi ekspresyon jèn DAT, nou mezire DAT mRNA nan zòn nan ventral tegmental ak substantia nigra lè l sèvi avèk QRT-PCR an tan reyèl. Anplis de sa, nou itilize yon pwosedi fraksyon fraksyon byochimik ak Western analiz efase nivo Diat striatal nan manbràn sinaptozom ak endosomal brut. Rat te swa 2 oswa 6 semèn nan rejim alimantè ki wo oswa ki ba grès, men tout mezi yo te fè nan absans DIO. Rezilta nou yo sijere ke konsomasyon pwolonje nan HFD, endepandan de DIO, diminye vitès la nan retaksyon dopamine nan ventre striatum la san yo pa diminye ekspresyon DAT.

Materyèl ak Metòd

Etik Deklarasyon

Etid sa a te pote soti nan dapre strik ak rekòmandasyon yo nan Gid pou Swen ak Itilize nan laboratwa Bèt nan Enstiti Nasyonal Sante. Pwotokòl la te apwouve pa Komite a Swen Animal nan University of Illinois, Chicago. Tout operasyon te fèt anba anestezi uretan, ak tout efò yo te fè pou misyon pou minimize soufrans.

Sijè

Yo itilize rat rat Sprague – Dawley estanda (n = 67), apeprè 2 mwa ak peze xNUMX – 225 g lè yo rive. Bèt yo te endividyèlman loje nan kaj plastik (275 × 26.5 × 50 cm) nan yon tanperati- (20 ° C) ak imidite- (22%) anviwònman kontwole sou yon 30∶12 h limyè: sik nwa (limyè sou nan 12∶07 h). Rat adapte ak etablisman an pou yon semèn ak ad lib aksè nan estanda laboratwa Chow ak dlo.

Manje konsomasyon ak mezi pwa kò

Apre aklimasyon, rat yo te peze ak asiyen owaza nan XNX gwoup ki te balanse pou premye pwa kò. De gwoup yo te konsève sou ki pa gen anpil grès rejim alimantè (LFD; Rechèch Rejim, New Brunswick, NJ; D1B; 4% kilokalori soti nan grès (12450 kcal / g)). Lòt gwoup yo 10 yo te kenbe sou HFD (Rechèch Rejim; D3.85; 2% kilokalori soti nan grès (12492 kcal / g)). Pou chak rejim alimantè, rat yo te konsève pou swa 60 oswa 5.24 semèn (semèn). Kidonk, gwoup 2 yo te: LFD-6 wk (n = 4), HFD-2 wk (n = 18), LFD-2 wk (n = 16) ak HFD-6 wk (n = 16). Tout gwoup te gen ad lib aksè nan dlo. Manje konsomasyon ak mezi pwa kò yo te fè twa fwa / wk ak done yo rapòte separeman pou rat sibi anrejistreman voltamètri oswa DAT pwoteyin / analiz mesaj.

Pwosedi chirijikal ak mezi dopamine

Apre ekspoze rejim alimantè, yon gwoup nan rat ki pa t 'diferan nan pwa kò yo te prepare pou anrejistreman voltametrik (LFD-2 wk (n = 8), HFD-2 wk (n = 6), LFD-6 wk (n = 6) , ak HFD-6 wk (n = 7)) anba uretan (1.5 g / kg) anestezi [tankou nan 9,21]. Yon kanil gid (Sistèm Bioanalytical, West Lafayette, IL) te pozisyone pi wo a striatum ventral la (1.3 mm anterior, 1.5 mm lateral soti nan bregma), yon klowò ajan fil (Ag / AgCl) elektwòd referans te anjandre nan cortical a kontralateral ak tou de te garanti nan zo bwa tèt la ak vis asye pur ak siman dantè. Yon mikromanipulatè ki gen yon elektwòd kabòn-fib (CFE) te antre nan kanul gid la epi yo te elektwòd la bese nan striatom ventral la. CFE a ak elektwòd referans yo te konekte nan yon sèn ak potansyèl la nan CFE a te tcheke soti nan -0.4 +1.3 V (vs Ag / AgCl) ak tounen lakay ou (400 V / s; 10 Hz) Yon elektwòd bipolè enteresan (Plastik Youn, Roanoke, VA) te Lè sa a, piti piti bese nan zòn nan ventral tegmental / substantia nigra pars compacta (VTA / SNpc; 5.2 mm posterior, 1.0 mm lateral ak okòmansman 7.0 mm ventral soti nan bregma) nan ogmantasyon 0.2 mm . Nan chak ogmantasyon, yon tren nan pulsasyon aktyèl (60 pulsasyon, 4 ms pou chak batman kè, 60 Hz, 400 µA) te delivre. Lè elektwòd la enteresan pozisyone nan VTA / SNpc la ak CFE a se nan striatum a, eksitasyon fiable rapèl lage dopamine - ekstrè nan done voltametrik lè l sèvi avèk analiz eleman prensipal la. [9], [22]; ak konvèti nan konsantrasyon apre chak CFE kalibre nan yon sistèm piki koule apre chak eksperyans [23]. Te pozisyon nan electrodes a enteresan optimisé pou lage maksimòm. CFE a te Lè sa a, pèmèt yo ekilibre pou XNX min anvan yo kòmanse eksperyans lan. Liberasyon Dopamine te evoke pa eksitasyon elektrik nan VTA / SNpc (menm paramèt yo tankou pi wo a), ak chanjman yo ki sòti nan konsantrasyon Dopamine yo te kalkile soti nan −10 a XNUMS s parapò ak eksitasyon. Imedyatman apre eksitasyon an, yo te enjekte rat ak idroklorur kokayin ki fonn nan 5% saline (10 mg / kg ip) ak, XN min pita, eksitasyon an te repete. Aplike tensions, done akizisyon, ak analiz yo te fè lè l sèvi avèk lojisyèl ekri nan LabVIEW (National enstriman mizik, Austin, TX, USA) [22].

Re-pran Dopamine

Re-se Dopamine modle lè l sèvi avèk Demon Voltammetri Analiz Software (NAN; Wake Forest Inivèsite, Winston-Salem NC). Isit la nou rapòte pouri anba tè konstan tau kòm mezi nou nan pousantaj la nan retaksyon dopamine. Tau sòti nan yon koub eksponansyèl anfòm ki englobe majorite nan koub la clearance Dopamine epi li trè korelasyon (r =. 24) ak Km, pariman aparan nan dopamine pou DAT la [24]. Pou detèmine efè a nan kokayin sou konsantrasyon pik dopamine nou konpare valè jwenn anvan ak apre administrasyon (chanjman%).

Histology

Apre chak anrejistreman, yo te fè yon electrodes asye pur (Sistèm AM #571500, Sequim, WA) desann nan pwofondè a menm jan ak CFE a ak yon lezyonèl (10 µA, 4 s) te fè yo ki make kote anrejistreman an. Sèvo yo te retire ak estoke nan 10% formalin. Yo te itilize mikwoskopi limyè pou idantifye kote lezyonèl la te sou seksyon vèn (50 µm) atravè striatum lan. Tout anrejistreman rapòte isit la te fèt nan striatum nan ventral [25].

Subselular Fraksyon nan tisi striatal

Rat yo (LFD-2 wk, HFD-2 wk, LFD-6 wk, ak HFD-6 wk; n = 10 / gwoup; pa gen okenn diferans nan pwa kò) te touye pa decapitation. Te fraksyon byochimik ki fèt lè l sèvi avèk pwotokòl la ki dekri nan [26], ak modifikasyon minè. Sèvo yo te rapidman retire, ki te jele nan izopan e te tranche sou yon cryostat (HM505E, Microm, Walldorf, Almay, −20 ° C) jouk rive nan striatum la. Bilateral 1-mm3 pwenson nan striatom nan ventral (mwayèn pwa tisi: 15.2 mg) yo te omojeneize pou 20 yo nan 0.8 ml glas-TEVP glas (10 mM baz Tris, 5 mM NaF, 1 mM Na3VO4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, pH 7.4) + 320 mM sachez zòn de defans. Yon alikòt 100 µl omojene total (H) te sove. Tout rès H te santrifuje nan 800 × g pou 10 min nan 4 ° C. Rezen an (P1, nwayo ak gwo debri) te re-sispann nan 0.2 ml TEVP tanpon ak sove. Supernatant la (S1) te retire epi yo mete l nan yon tib pwòp sou glas. S1 te santrifuje nan 9200 × g pou 15 min nan 4 ° C jenere yon plon (P2, bit membranes synaptosomal) ak yon kichòy (S2). P2 te rense yon fwa nan TEVP + 35.6 mM sib tanporè ak Lè sa a, resuspended nan 0.25 ml nan TEVP + 35.6 mM sib tanporè, vortexed dousman pou 3 yo ak pasyone-osmotikman lis pa kenbe echantiyon an sou glas pou XN min. Supernatant (S30) te ranmase ak file nan 2 × g pou 165,000 h jenere yon plon (P2, limyè manbràn, resiklaj endosomes) ki te retabli nan TEVP (3 ml) ak sove. Tout echantiyon yo te kenbe nan −0.1 ° C jiskaske elèktroforèz jèl poliacrylamide.

Elektwoforèz jèl ak Western Western

Kontni Pwoteyin yo te detèmine lè l sèvi avèk twous Bio-Rad DC Protein Assay (Hercules, CA), epi konsantrasyon chak echantiyon te ajiste a 0.3 mg / ml pwoteyin. NuPAGE LDS (ityòm silfat dodecyl) tanpon echantiyon (Invitrogen, Carlsbad, CA) ak 50 mM dithiothreitol yo te ajoute nan chak echantiyon anvan chofaj a 70 ° C pou 10 min. Pou chaje kantite ekivalan pwoteyin pou chak fraksyon, 3 µg nan chak echantiyon yo te chaje nan NuPAGE Novex 4-12% Bis-Tris jèl (Invitrogen) pou separasyon pa jèl elektwoforèz. Pwoteyin yo te imedyatman transfere nan manbràn fliyò polyvinylidene (PVDF) (PerkinElmer Life Sciences, Boston, MA). Sit obligatwa ki pa espesifik yo te bloke pou 2 èdtan nan tanperati chanm nan bloke tanpon (5% nonfat lèt sèk nan PBS ak 0.02% ant 20 [PBS-T]). Blots yo te Lè sa a, enkubate nan antikò prensipal (1∶3000 sourit monoklonal anti-NR2B [# 05-920, Millipore], 1∶5000 lapen anti-DAT [# AB2231, Millipore], ak 1∶1000 sourit monoklonal reseptè anti-transferrin ( TfR) [# 13-6800, Invitrogen]. Blots yo te koupe an 3 pati: segondè (> 97 kDa), mwayen (46-97 kDa), ak ba (<46 kDa) pwa ak chak pati sonde ak yon antikò ki rekonèt yon pwoteyin nan limit pwa sa a .. Aparan pwa molekilè pou antikò yo itilize yo se: NR2B, 180 kDa; DAT, 75, 64, ak 50 kDa; TrfR, 95 kDa. ak tanpon nidite (62.5 mM Tris, 2% SDS, 100 mM β-mercaptoethanol, pH 6.8) pou 15 min nan 50 ° C. Blots yo te imedyatman re-bloke ak sonde ak anti-TfR. SeeBlue Plus 2 (Invitrogen) pre- estanda tache yo te kouri pou estimasyon pwa molekilè.

Pwoteyin immunoblots yo te analysé itilize Carestream moléculaire Imaging lojisyèl 5.0. Yo te detèmine entansite rezo a (sòm piksèl ki nan gwoup enterè mwens sòm piksèl background yo) pou chak gwoup. Pou pèmèt konparezon ant transfòmasyon, done yo te normalize kontwole LFD yo nan 2 ak 6 wks. Done yo eksprime kòm endikasyon pliye an mwayen konpare ak LFD ± SEM.

Reyaksyon Chain Kantitatif Imobilye nan tan Imobilye Transkriptaz Ranvèse (QRT-PCR)

Apre koleksyon po striatal pou analiz analòg lwès, sèvo jele te kouronen sou mikrotòm ​​lan jiskaske li rive nan VTA / SN. Bilateral 1-mm3 pwenson nan vta ak tisi SN (mwayèn pwa tisi = 15.0 mg) yo te fè ak RNA te ekstrè lè l sèvi avèk PureLink RNA Mini Twous (Invitrogen). Yo te evalye kalite ak kantite ARN ak yon RNA 6000 Nano Chip (Agilent, Santa Clara, CA) sou yon Bioanalyzer Agilent 2100. Nimewo entegrite RNA (RIN) depase 7 pou tout echantiyon yo, ki endike bon jan kalite segondè. Yo te itilize yon sèl mikrogram RNA total pou fè sentèz cDNA lè l sèvi avèk Twous iScript cDNA Synthesis Kit (BioRad) nan yon ThermoHybaid iCycler (Thermo Scientific). Jadendanfan espesifik pou DAT (Slc6a3; Forward Jadendanfan: GGAAGCTGGTCAGCCCCTGCTT, Jadendanfan Ranvèse: GAATTGGCGCACCTCCCCTCTG), β-actin (Nba; Forward Jadendanfan: AGGGAAATCGTGCGTGACAT; Revè Jadendanfan: AAGGAAGGCTGGAAGAGAGAGC), ak TATA bwat obligatwa pwoteyin (Tbp; Avant Jadendanfan: ACCTAAAGACCATTGCACTTCGTGCC; Reverse imprimante : GCTCCTGTGCACACCATTTTCCC) jèn (nimewo asansyon Genbank NM_012694, NM_031144, ak NM_001004198) yo te fèt lè l sèvi avèk NCBI Manyèl-blast (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/) ak achte nan men teknoloji ADN entegre (Coralville, Iowa). Fonn analiz koub ak elèktroforèz jèl polyacrylamide konfime espesifik nan prime yo. Amplicons DAT, β-actin, ak Tbp yo se pè baz 266, 182 ak 136 nan longè, respektivman.

Yo te itilize yon twous Q-PCR (iQ SybrGreen Supermix, BioRad). Te reyaksyon an te pote soti sou yon MyiQ Single Koulè Imobilye PCR Deteksyon Sistèm (BioRad) nan yon volim nan 20 µl, ak 2 µL nan 3 µM ​​avanse ak ranvèse prim ak 4 µL echantiyon cDNA dilye 1∶10. Kondisyon pou monte bisiklèt nan PCR yo te N CS ° C pou min 95; 5 sik nan 40 ° C pou 94, 15 ° pou 60, 15 ° C pou 72 s. Done yo te kolekte nan yon tanperati li nan 15 ° C pou 84 s ki baze sou amplicon a fonn tanperati. Koub dilution Creole yo te pwodwi pou chak mete Jadendanfan pa seri dilution (NOU, X, ak, ak pliye-pliye) yon stock mèt cDNA comprenant yon melanj egal nan cDNA nan tout gwoup tretman. Boutèy la10 nan valè yo dilution te trase kont valè yo sik papòt pou koub yo estanda. Lojisyèl MyiQ Sistèm Optik (BioRad) te itilize pou analize done yo. Echantiyon ki pa gen okenn modèl cDNA ak echantiyon ki soti nan reyaksyon cDNA ki pa gen transkont transcriptase te kouri kòm kontwòl pou kontaminasyon ak anplifikasyon ADN jenomik, respektivman. Valè rapòte ke yo te normalized ak valè mwayèn nan nòm entèn yo ß-actin ak Tbp pou chak echantiyon. Done yo eksprime kòm nivo mwayèn relatif nan DAT / entèn estanda mRNA ± SEM.

Estatistik analiz

Ekspresyon DAT dinamik chanjman pandan lifecycle a nan tou de moun [27] ak rat [28], [29]. Anplis de sa, Dopamine la ak repons konpòtman nan kokayin tou chanje kòm rat jèn ki gen matirite [30]. Kidonk, mezi DAT kapab ko-varye avèk laj epi entèdi konparezon ki gen sans ant gwoup 2 wk ak 6 wk. Se poutèt sa, gwoup vle di pou konsomasyon manje, pwa kò, konsantrasyon somè Dopamine, tau,% chanjman, ak fanmi ekspresyon jèn yo te konpare separeman pou gwoup 2 ak 6 wk lè l sèvi avèk t tòt unpaired. Pou analize Western blot, diferans gwoup nan entansite nòmal bann DAT te konpare separeman pou gwoup 2 ak 6 wk lè l sèvi avèk de-fason repete-mezi ANOVA (dietXfraction). Tout analyses estatistik yo te fèt nan Graph Pad 5 (Prism Inc.).

rezilta

HFD ankouraje ogmante konsomasyon grès

Anvan aparisyon nan rejim alimantè ekspozisyon pa te gen okenn diferans ki genyen nan pwa inisyal kò nan 2 wk la (LFD: 275.22 +/− 4.1 g; HFD: 280.87 +/− 4.8 g; p = 0.37), oswa 6 wk (LFD: 287.31 +/− 4.9 g; HFD: 289.44 +/− 5.1 g; 6 wk p = 0.97) gwoup yo. Malgre konsome rejim nan konpozisyon drastikman diferan, nou pa jwenn okenn diferans nan pwa kò ant gwoup rejim alimantè swiv swa 2 oswa 6 wks (Fig. 1a – b; tou de ns). Te gen tou pa gen diferans nan kkal yo total boule ant gwoup swivan tou de 2 ak 6 semèn nan rejim alimantè ekspoze (Fig. 1c – d; ns). Sepandan, rat HFD boule siyifikativman plis kcals soti nan grès (Fig. 1e – f; KIJAN kijan pou w: t (2) = 32; KIJAN kijan pou w: t (25.59) = 6; p<0.0001 pou tou de dire rejim alimantè).

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 1. Konsomasyon manje ak mezi pwa kò.

Pa te gen okenn diferans ant HFD ak LFD nan pwa kò final laa – b) oswa kilokalori total boule (c – d) apre swa 2 oswa 6 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè. (e – f) Rat HFD boule anpil plis kilokalori soti nan grès pase rat LFD nan tou de 2 semèn ak kondisyon semèn 6 (***p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g001

Lontan HFD diminye To a nan DA rekaptè

Anrejistreman Voltametrik yo te fèt nan striatom ventral la (figi 2). figi 3 montre reprezantan chanjman evoke elektrisite nan konsantrasyon Dopamine akeri nan rat swiv 6 semèn nan rejim alimantè. Nan baz la, grandè a nan dopamine evoke pa t 'diferan ant gwoup rejim alimantè ak atravè tout rejim alimantè (dure)Fig. 4a – b, tou de ns). Sepandan, enspeksyon nan egzanp endividyèl sijere pousantaj moun ki nan pouri anba sa a pik konsantrasyon Dopamine diferans ant gwoup rejim alimantè apre 6 semèn nan rejim alimantè ekspozisyon (figi 3 a – b pou egzanp). Pousantaj de pouri anba a se akòz prensipalman dopamine clearance pa DAT la [31], ki nou modle kòm yon sèl faz eksponansyèl detèmine tau. Pa te gen okenn diferans ant gwoup rejim alimantè swiv 2 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè (Fig. 4c). Sepandan, apre 6 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè, tau te siyifikativman pi gwo nan rat HFD-6 wk ki gen rapò ak LFD-6 wk.Fig. 4d; t (11) = 2.668; p<0.05). Se konsa, 6 semèn nan HFD diminye pousantaj la nan clearance dopamine nan striatum ventral la konpare ak bèt ki boule yon LFD.

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 2. Istolojik verifikasyon nan sit anrejistreman pou analiz retaksyon.

Sit anrejistreman pou rat LFD manje yo kode pa triyang gri ak pou rat HFD pa ti sèk nwa. Resansman endike distans an mm antérieure a Bregma. Figi adapte soti nan Paxinos ak Watson 2006.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g002

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 3. Eksitasyon elektrik nan VTA / SNC rapèl yon spike faz nan konsantrasyon dopamine.

Egzanp Reprezantan done akeri apre 6 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè. a) Istorik-soustraksyon trase koulè montre chanjman aktyèl nan diferan potentiels nan electrodes a anvan (−5 XNUMS s parapò ak kòmansman) ak apre (0 a 0.1 s parapò ak) aparèy elektrik (STIM) nan VTA / SNc la. Tan se absis la, potansyèl la electrodes se òdone a, ak chanjman aktyèl yo kode nan fo koulè. Dopamine [idantifye pa oksidasyon li (+ X V; vèt) ak rediksyon (−10 V; ble) karakteristik] pasyan ogmante nan repons a eksitasyon an nan sa a wf rat LFD-0.6. b) Menm jan ak nan yon), eksepte nan yon wf HFD-6 rat. c) Se konsantrasyon Dopamine kòm yon fonksyon nan tan soti nan trase a koulè nan yon) ak tau yo idantifye atravè anfòm koub. De pwen wouj make pik la ak konsantrasyon an dopamine nan pwen lè lè tau rive jwenn. Tau endike a dwat. d) Menm jan nan c) men done yo ekstrè soti nan b).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g003

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 4. Sis semèn nan rejim alimantè ki wo grès diminye vitès la nan retaksyon dopamine ak diminye repons lan dopamine kokayin.

Mwayèn konsantrasyon Dopamine pik evoke pa stimulasyon VTA / SNpc swiv swa 2 (a) oswa 6 semèn (b) nan rejim alimantè ekspoze anvan piki kokayin. c – d) Mwayèn Tau swiv 2 (c) wks oswa 6 semèn (d) nan ekspozisyon rejim alimantè. Tau te siyifikativman pi gwo pou HFD-6 wk rat relatif a LFD-6 wk rat (*)p e – f) Pousantaj chanjman nan konsantrasyon somè dopamine evoke apre piki kokayin pou 2 (e) ak 6 (f) semèn nan ekspozisyon rejim alimantè. Chanjman pousantaj te siyifikativman pi piti nan HFD-6 wk ki gen rapò ak LFD-6 wk rat (**)p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g004

Lontan HFD Diminye Repons DA a Kokayin

Pli lwen ankèt pou rejim alimantè ki induit chanjman nan DAT, nou enjekte rat ak kokayin a bloke DAT. Peak konsantrasyon Dopamine sa yo eksitasyon elektrik ki te koze pa dopamine lage, men se tou limite pa retire similtane nan dopamine pa DAT la. [21]. Nou karakterize efè a nan kokayin sou transmisyon Dopamine pa kalkile chanjman an nan grandè a dopamine evoke ki gen rapò ak pre-dwòg valè (% chanjman). De wks nan HFD pa t 'afekte% chanjman relatif nan LFD (Fig. 4e; ns). Sepandan, swiv 6 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè, te chanjman% afebli nan HFD parapò ak LFD (Fig. 4f; t (10) = 4.014; p<0.01). Rezilta nou yo sijere ke 6, men se pa 2 semèn, nan ekspoze HFD diminye repons dopamine nan kokayin.

Lontan HFD Ekspozisyon Redwi DAT Pwoteyin Ekspresyon nan Membranes Synaptosomal

Pou detèmine si efè HFD pwolonje te akòz chanjman nan nimewo DAT, DAT nivo pwoteyin yo te chiffres nan total tisi homogénates (fraksyon H), membranas synaptosomal (fraksyon P2) ak endoselil resikle entrakelilè (fraksyon P3). DAT se yon Nglikoprotein ki lye avèk yon aparans pwa molekilè ant 50 ak 80 kDa akòz ogmantasyon nivo glikozilasyon pandan pwoteyin lan échéance [32]. Fraksyon te konfime pa ekspresyon an rich nan subunit NR2B nan reseptè a NMDA nan fraksyon manbràn sinaptosomal ak nan reseptè a transfinin nan fraksyon nan andosomal (pou egzanp efase non Fig. 5b). Nou pa jwenn okenn diferans nan pwoteyin DAT total apre 2 ak 6 semèn ekspozisyon nan rejim alimantè (done yo pa montre). Tès pou diferans ki genyen fraksyon espesifik nan pwoteyin DAT, nou itilize de-fason repete-mezi ANOVA (dietXfraction). Ki konsistan avèk eksperyans voltammetry yo, 2 semenn nan ekspozisyon rejim alimantè te ase yo chanje nivo nan nenpòt nan izoform yo DAT nan swa P2 oswa fraksyon P3 (Fig. 5. c, e, g; tout ns). Sepandan, swiv 6 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè, te gen yon rejim alimantè siyifikatif entèfasXfractionF(1,18) = 8.361, p<0.01); Fig. 5d) pou isoform nan KD 50 nan DAT la. Se konsa, HFD pwolonje siyifikativman redwi 50 kD isoform nan DAT la nan fraksyon nan P2 ak koze yon tandans nan direksyon pou yon ogmantasyon nan fraksyon nan P3. Nou pa jwenn okenn efè rejim oswa fraksyon sou ni 64 KD laFig. 5f; ns) oswa KD la 70 (Fig. 5h; n) izoform DAT yo.

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 5. Konsomasyon yon rejim alimantè ki gen anpil grès diminye manbràn ki asosye ak DAT pwoteyin nan ventre striatum lan.

a) Imaj reprezantan ki montre (2) 1 × 1 pwenson tisi mm pran soti nan striatum nan ventral ki te konbine pou analiz pwoteyin DAT. VStr = Ventral Striatum; DStr = Dorsal Striatum; cc = corpus kalòs; ac = anrejistreman antérieure. b) Reprezantan machandiz lwès done ki prezante nan c – h. L = LFD; H = HFD; TfR = receptor transfinin; NR2B = NR2B subunit nan reseptè NMDA. c) Pa te gen okenn diferans nan pwoteyin 50 kD DAT pou swa P2 oswa fraksyon P3 swiv 2 semèn nan ekspozisyon rejim alimantè. d) 50 kD DAT pwoteyin siyifikativman redwi nan P2 a (* = p<.05), men se pa P3 fraksyon nan tisi ventral striatal nan HFD-6 wk relatif nan LFD-6 wk rat. Pa te gen okenn diferans nan 64 kD DAT pwoteyin apre swa 2 (e) oswa 6 semèn (f) nan ekspozisyon rejim alimantè. Pa te gen okenn diferans ki genyen nan 70 kD DAT pwoteyin sa yo swa 2 (g) oswa 6 semèn (h) nan ekspozisyon rejim alimantè.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g005

Pou detèmine si nivo diminye nan pwoteyin DAT nan fraksyon nan P2 te dwe, an pati, nan yon rediksyon nan transcription DAT, VTA / SNC nivo mR DAT yo te mezire nan rat yo menm jan ak pi wo a (...Fig. 6a pa egzanp). Nou obsève pa gen diferans ant gwoup rejim alimantè nan midbrain DAT mRNA apre yo fin swa 2 oswa 6 semèn nan rejim alimantè ekspozisyon (Fig. 6b – c; tou de ns). Kidonk, diferans ki genyen nan nivo pwoteyin DAT nan striatom ventral la pa fasil pou akòz defisi nan pwodiksyon DAT.

thumbnail

Download:

PowerPoint glise

pi gwo imaj

orijinal imaj

Figi 6. Konsomasyon alimantè ki gen anpil grès pa chanje nivo mats ARN lan. a)

Imaj reprezantan ki montre 1 × 1 mm pwenson tisi yo te pran nan men VTA / SN a ak konbine pou analiz analiz DAT. cp = pandantèl serebral; pc = posterior komisyè; MM = medyal nwayo mamifè. Pa te gen okenn diferans nan relatif nivo mRNA DAT swa swa 2 semèn (b) oswa XNIMX semèn nan ekspozisyon rejim alimantè (c).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g006

Diskisyon

Lontan konsomasyon HFD ka mennen nan DIO ak plastisit nan sistèm nève santral la. Newòn Dopamine ak reseptè stramine Dopamine parèt yo dwe yon seri objektif CNS ki afekte pa yon HFD ak nan moun ki obèz. [11], [13], [33]. Isit la nou rapòte ke yon HFD redwi vitès la nan retaksyon Dopamine nan striatum nan ventral ak efè sa a te depann sou dire a nan ekspoze. Importantly, efè a nan HFD sou fonksyon DAT ki te fèt nan absans DIO. Pandan ke nou pa te mezire dirèkteman markers nan adiposity kò nan etid sa a, bèt yo te tradisyonèlman klase kòm DIO oswa rejim alimantè ki reziste ki baze sou sèlman sou pran pwa kò apre ekspoze a yon HFD. [34]. Lontan HFD siyifikativman diminye kapasite nan kokayin, ki entèfere ak DAT a, potansi mayitid nan liberasyon Dopamine. Nou chifte DAT nivo pwoteyin nan ventre striatum a lè l sèvi avèk Western analiz efase - distenksyon ant DAT lokalize nan fraksyon subselilè anrichi pou swa manbràn nan plasma oswa resiklaj endosom. Nou jwenn yon rediksyon enpòtan nan yon izofòm frelikè nan DAT ki asosye ak manbràn nan plasma. Se konsa, HFD pwolonje parèt diminye pousantaj la nan retaksyon dopamine atravè DAT a gen anpil chans nan entèfere ak trafik DAT oswa petèt spirasyon men pa pa diminye ekspresyon jèn DAT oswa DAT estabilite mRNA. Anplis, yon peryòd ant de ak sis semèn nan ekspoze a yon HFD parèt yo dwe pwen an premye pliye pou rejim alimantè-pwovoke plastisit ak respè DAT la.

Obezite se Koehle ak aspè miltip nan striatal Dopamine siyal, ki gen ladan disponiblite DAT nan tou de moun [18] ak sourit yo [19]. Sepandan, sèlman dènyèman te li montre ke devlopman nan DIO modifye pousantaj la nan retaksyon Dopamine nan rat [20]. Pandan ke etid sa a demontre ensifizans retablisman dopamine apre egzogene aplikasyon dopamine apre sèlman 4 semèn nan HFD, bèt yo ki te konsève sou yon HFD yo te chwazi ki baze sou premye pran pwa e konsa te kapab reprezante yon popilasyon inik. Ki konsistan avèk sa a wè, bèt HFD kontinye manje plis kalori ak jwenn plis pwa konpare ak kontwòl LFD. Yon lòt etid resan rapòte pwoblèm nan retablisman dopamine sa yo 12 semèn nan HFD nan soti-elve rat [35]. Sepandan, te gen diferans siyifikatif nan pwa kò ant bèt yo manje yon HFD kont yon estanda laboratwa chow rejim alimantè lè mezi yo rekaptè yo te fè. Se poutèt sa, li rete klè si wi ou non defisyans nan retaksyon dopamine pwezante kòm yon rezilta dirèk nan, oswa vin anvan, devlopman DIO. Kontrèman ak rapò sa yo ki sot pase yo, nou jwenn okenn diferans nan pwa kò oswa konsomasyon total kcal ant gwoup rejim alimantè nou an lè mezi rekaptè yo te fè. Ke nou jwenn diferans ki genyen nan retaksyon dopamine apre 6, men se pa XN, ki semèn nan HFD sijere ke rejim alimantè ki induit altènasyon nan retaks Dopamine se yon repons a kwonik, men pa egi, chanjman ki fèt nan konpozisyon rejim alimantè. Anplis de sa, rezilta nou yo sijere ke olye ke yo te yon rezilta nan obezite, rejim alimantè ki pwovoke altènasyon nan DAT kapab kontribye nan devlopman maladi a. Etid tan kap vini yo ap bezwen adrese si wi ou non popilasyon bèt ki diferan nan DIO [34] gen preexistant diferans nan DAT ekspresyon / fonksyon oswa yo diferansyèlman sansib a rejim alimantè ki pwovoke chanjman nan DAT.

Nou konnen, sa a se etid la premye demontre ke yon HFD diminye repons lan dopamine kokayin. Etandone wòl Dopamine nan rekonpans dwòg, rezilta nou yo ki konsistan avèk travay anvan yo demontre ke rat manje yon HFD pou apeprè 6 semèn yo pi dousman jwenn kokayin pwòp tèt ou-administrasyon pase bèt manje yon rejim alimantè kontwòl. [36]. Enpòtan, efè sa a te endepandan tou nan devlopman DIO. Anplis de sa, rat selektivman elve pou emotivite montre DIO redwi preferans kokay kote, sijere ke pwopriyete yo rekonpanse nan kokayin yo te afebli nan bèt sa yo. [37]. Repons lan diminye nan kokayin nou obsève nan rat HFD-6 wk te kapab akòz redwi disponiblite striatal DAT. Sepandan, kokayin tou ogmante Dopamine siyal nan ki pa DAT mekanis depandan. Espesyalman, HFD te kapab gen pwoblèm mobilizasyon kokayin-induit rezève vezikul yo dopamine [38]. Kokayin tou diminye transmisyon GABA sou newòn Dopamine nan VTA la [39] ak antrenman Vibration nan pousantaj la tire nan kò selil Dopamine [40]. Nenpòt oswa tout pwosesis sa yo ta ka tou yo te afekte pa yon HFD. Rechèch pwochen yo pral bezwen adrese mekanis ki kache kouman yon HFD modifye aspè yo rekonpanse nan kokayin ak / oswa potansyèl la pou dwòg-pwovoke adaptasyon neral. [18]. Konsomasyon nan yon HFD atenu tou de konpòtman an [41] ak repons dopamine [20], [42] anfetamin, ki tou entèfere ak DAT la. Importantly, rat ki gen konsomasyon nan yon HFD te calorically matche ak sa yo ki an rat manje yon rejim alimantè kontwòl pa devlope DIO men yo toujou febli yo devlope yon amfetamin kondisyon preferans plas ... [41]. Ansanm ak done yo prezante isit la, li parèt ke konsomasyon nan yon HFD blunts repons lan nan psychostimulants. Tout dwòg abi enfliyanse sistèm dopaminen an, epi amelyore dwòg dopamine yo te panse se kritik pou devlopman dejwe [43]. Se konsa, repons lan redwi a kokayin nan rat HFD ki konsistan avèk rapò ke moun obèz gen yon siyifikativman pi ba risk pou lavi nan devlope yon twoub abi dwòg. [44]. Travay nan lavni ap bezwen adrese si wi ou non Rating a subjectif nan rekonpanse kokayin diferan nan moun ki obèz konpare ak kontwòl pwa nòmal.

Analiz lwès nou an sijere ke konsomasyon pwolonje nan yon HFD pa afekte total pwoteyin striatal DAT, men olye diminye entegrasyon an nan ki pa Peye-glycosylated 50 kDa DAT isoform nan manbràn synaptosomal. Pandan ke DAT glikozilasyon amelyore to a nan transpò Dopamine ak ogmante estabilite sifas manbràn [45], [46], [47], DAT ki pa glycosylated soti nan moun [45], [46] osi byen ke rat [47] fasilman transpòte dopamine. Anplis de sa, eksperyans immunolabeling revele ke nivo nan DAT ki pa glycosylated yo pi wo nan ventral la konpare ak stryat dorsal nan tou de makak ak moun. [47]. Ansanm, etid sa yo sijere ke nivo manb diminye 50 kDa DAT te kapab kontribye nan defisi retou nou obsève nan rat 6 wk HFD. Done nou yo konsistan avèk yon etid anvan ki montre konsomasyon HFD diminye disponiblite DAT nan striatum nan ventral nan sourit yo [19]. Sepandan, etid sa a pa t 'mezire lokalizasyon DAT nan konpatiman diferan entranblè. Anplis de sa, rezilta nou yo ki konsistan avèk yon etid ki montre rediksyon nan DAT sifas selil nan striatum nan rat DIO [20]. Etid sa a te rapòte tou ke nivo pwoteyin DAT total pa afekte rejim alimantè nan modèl DIO. Nou elaji sa a jwenn yo montre ke pwoteyin DAT total se tou afekte pa yon HFD nan soti-elve rat. Se poutèt sa, pwolonje konsomasyon nan yon HFD pa chanje ekspresyon DAT, men li ka entèfere ak trafik DAT oswa spirasyon.

Mank de diferans ki genyen nan nivo mTA ARN VTA / SNpc apre yo fin swa 2 oswa 6 semèn nan ekspozisyon HFD plis sipòte nosyon an ki nivo jeneral DAT yo te afekte pa manipilasyon rejim alimantè nou an. Rezilta sa a diferansye ak yon rapò anvan ki montre redwi DAT mRNA nan sourit la VTA swiv 17 semèn nan konsomasyon HFD. [12]. Sepandan, nan etid sa a yo te mezire mRNA nivo apre gwoup yo rejim alimantè te diferan nan pwa kò pou 12 semèn. Kidonk, rezilta yo kapab reprezante adaptasyon etap an reta nan DIO. An rezime, done nou yo bay prèv solid ki ekspoze a yon HFD mennen nan chanjman fonksyonèl nan retwate stramine dopamine pa diminye manbràn ki asosye DATs san yo pa chanje total ekspresyon DAT. Importantly, nou rapòte ke rejim alimantè-induit deranjman nan DAT la ka rive anvan aparisyon nan DIO, sijere ke amenajman sa yo ta ka kontribye nan devlopman obezite a.

Done nou yo ajoute nan yon literati kap grandi ki enplike rejim alimantè nan règleman an nan fonksyon Dopamine, epi yo bay plis prèv ki montre rejim alimantè chanjman pwovoke nan ekspresyon DAT mennen nan chanjman ki gen rapò ak fonksyonèl nan siyal dopamine. Rejim alè induit nan dinamik striatal Dopamine siyal via DAT gen plis chans pou gen konsekans pou manje konpòtman. Manje ki gen rapò ak stimuli suscité ogmantasyon faz nan stramine dopamine [9], [48], [49], ki chans ranfòse ak ranfòse manje ki dirije aksyon yo [50]. Isit la nou montre ke 6 semèn nan konsomasyon HFD prolongé dire a nan lage faz Dopamine pa diminye manbràn DATs ki asosye nan yon rejyon nan striatum a kote dopamine fonksyon se esansyèl pou konsomasyon manje. [51]. Altènativ ki depann de rejim nan DAT te kapab ankouraje yon mekanis feed-pou pi devan kote siyal Dopamine pwolonje evoke pa stimuli manje ogmante aktivasyon nan vokasyon bon striatal dopin D1 enfeksyon, ki se kritik pou konpòtman apwòch. [52], [53], [54]. Apre yon tan, pwolongasyon elevasyon Dopamine striatal te kapab ankouraje adaptasyon, tankou downregulation nan dopamine D2 reseptè (D2R), ki te demontre nan tou de modèl moun ak wonjè nan obezite. [11], [33]. Etid nou an sijere ke devlopman obezite a se pa yon nesesite pou chanje dopamine. Se konsa, diminye rejim alimantè ki gen rapò ak nan manbràn DAT te kapab vin anvan ak kontribye nan aparisyon nan downxulation D2R, obezite, ak konpòtman konpòtman manje ki devlope sou kou a nan konsomasyon HFD. [11].

Remèsiman

Nou swete remèsye Doktè. Jamie D. Roitman ak James E. McCutcheon pou kòmantè itil sou vèsyon pi bonè nan maniskri la. Kontni an nan papye sa a se sèlman responsablite a nan otè yo epi yo pa nesesèman reprezante opinyon ofisyèl yo nan NIH la oswa Chicago Biomedikal Consortium la.

Otè Kontribisyon

Konsepsyon ak ki fèt eksperyans yo: JJC EHC MFR. Fè eksperyans yo: JJC DNP SRE. Analize done yo: JJC EHC SRE MFR. Ekri papye a: JJC EHC MFR.

Referans

  1. NAN. Flegal KM, Carroll MD, Twous BK, Ogden CL (1) Prévalence nan Obezite ak Tandans nan distribisyon an nan kò endèks mas Pami adilt ameriken, NAN-NAN. JAMA 2012: 1999 – 2010.
  2. NAN. Ogden CL, MD Carroll, Curtin LR, MA McDowell, Tabak CJ, et al. (2) Prevalans ki twò gwo ak obezite nan Etazini yo, KAWO – NAN. JAMA 2006: 1999 – 2004.
  3. View Atik
  4. PubMed / NCBI
  5. Google Scholar
  6. NAN. Drewnowski A, Almiron-Roig E (3) Pèsepsyon Imèn ak preferans pou Manje ki gen anpil grès. Nan: Montmayeur JP, le Coutre J, editè. Deteksyon Grès: gou, teksti, ak efè Post ingestive, Chapter 11. Boca Raton, FL: CRC Press.
  7. View Atik
  8. PubMed / NCBI
  9. Google Scholar
  10. View Atik
  11. PubMed / NCBI
  12. Google Scholar
  13. View Atik
  14. PubMed / NCBI
  15. Google Scholar
  16. View Atik
  17. PubMed / NCBI
  18. Google Scholar
  19. View Atik
  20. PubMed / NCBI
  21. Google Scholar
  22. View Atik
  23. PubMed / NCBI
  24. Google Scholar
  25. View Atik
  26. PubMed / NCBI
  27. Google Scholar
  28. View Atik
  29. PubMed / NCBI
  30. Google Scholar
  31. View Atik
  32. PubMed / NCBI
  33. Google Scholar
  34. View Atik
  35. PubMed / NCBI
  36. Google Scholar
  37. View Atik
  38. PubMed / NCBI
  39. Google Scholar
  40. View Atik
  41. PubMed / NCBI
  42. Google Scholar
  43. View Atik
  44. PubMed / NCBI
  45. Google Scholar
  46. View Atik
  47. PubMed / NCBI
  48. Google Scholar
  49. View Atik
  50. PubMed / NCBI
  51. Google Scholar
  52. View Atik
  53. PubMed / NCBI
  54. Google Scholar
  55. View Atik
  56. PubMed / NCBI
  57. Google Scholar
  58. View Atik
  59. PubMed / NCBI
  60. Google Scholar
  61. View Atik
  62. PubMed / NCBI
  63. Google Scholar
  64. View Atik
  65. PubMed / NCBI
  66. Google Scholar
  67. View Atik
  68. PubMed / NCBI
  69. Google Scholar
  70. 4. Rolls BJ (2009) relasyon ki genyen ant dansite enèji dyetetik ak konsomasyon enèji. Fizyoloji & Konpòtman 97: 609-15.
  71. NAN. Ledikwe JH, Blanck HM, Kettel Khan L, Serdula MK, Seymour JD, et al. (5) se dansite enèji dyetetik ki asosye ak konsomasyon enèji ak estati pwa nan granmoun US. Jounal Ameriken Nitrisyon nan klinik la: KIJAN-NAN.
  72. View Atik
  73. PubMed / NCBI
  74. Google Scholar
  75. View Atik
  76. PubMed / NCBI
  77. Google Scholar
  78. View Atik
  79. PubMed / NCBI
  80. Google Scholar
  81. View Atik
  82. PubMed / NCBI
  83. Google Scholar
  84. View Atik
  85. PubMed / NCBI
  86. Google Scholar
  87. View Atik
  88. PubMed / NCBI
  89. Google Scholar
  90. View Atik
  91. PubMed / NCBI
  92. Google Scholar
  93. View Atik
  94. PubMed / NCBI
  95. Google Scholar
  96. View Atik
  97. PubMed / NCBI
  98. Google Scholar
  99. View Atik
  100. PubMed / NCBI
  101. Google Scholar
  102. View Atik
  103. PubMed / NCBI
  104. Google Scholar
  105. View Atik
  106. PubMed / NCBI
  107. Google Scholar
  108. View Atik
  109. PubMed / NCBI
  110. Google Scholar
  111. View Atik
  112. PubMed / NCBI
  113. Google Scholar
  114. View Atik
  115. PubMed / NCBI
  116. Google Scholar
  117. View Atik
  118. PubMed / NCBI
  119. Google Scholar
  120. View Atik
  121. PubMed / NCBI
  122. Google Scholar
  123. View Atik
  124. PubMed / NCBI
  125. Google Scholar
  126. View Atik
  127. PubMed / NCBI
  128. Google Scholar
  129. View Atik
  130. PubMed / NCBI
  131. Google Scholar
  132. View Atik
  133. PubMed / NCBI
  134. Google Scholar
  135. View Atik
  136. PubMed / NCBI
  137. Google Scholar
  138. View Atik
  139. PubMed / NCBI
  140. Google Scholar
  141. View Atik
  142. PubMed / NCBI
  143. Google Scholar
  144. View Atik
  145. PubMed / NCBI
  146. Google Scholar
  147. View Atik
  148. PubMed / NCBI
  149. Google Scholar
  150. View Atik
  151. PubMed / NCBI
  152. Google Scholar
  153. View Atik
  154. PubMed / NCBI
  155. Google Scholar
  156. NAN. Ti DM, Jones-Gotman M, Dagher A (6) Manje-pwovoke lage Dopamine nan striatom dorsal korelasyon ak evalyasyon repa bèl bagay nan volontè moun an sante. NeuroImage NAN: NAN-NAN.
  157. NAN. Bassero V, Di Chiara G (7) Reyaksyon diferansye nan transmisyon Dopamine nan manje-stimuli nan nwayo accumbens koki / konpatiman nwayo. NUROSYANS NAN: NAN - NAN.
  158. NAN. Roitman MF, Wheeler RA, Wightman RM, Carelli RM (8) Repons chimik an tan reyèl nan nwayo accumbens yo distenge stimuli rekonpanse ak repiyans. Nati neroloji 2008: 11-1376.
  159. NAN. Brown HD, McCutcheon JE, Konn JJ, ME Ragozzino, Roitman MF (9) Primè manje prim ak estimasyon rekonpans-prediksyon evoke diferan modèl nan vag siplemantè Dopamine nan tout striatum la. Jounal Ewopeyen an nan neroloji 2011: 34-1997.
  160. NAN. Grabenhorst F, Rolls ET, Parris BA, d 'Souza AA (10) Ki jan nan sèvo a reprezante valè rekonpans nan grès nan bouch la. Serebral cortical 2010: 20 – 1082.
  161. NAN. Johnson PM, Kenny PJ (11) Dopamine D2010 reseptè nan malfonksyònman depandans tankou rekonpans ak konpulsif manje nan rat obèz. Nati neroloji 2: 13-635.
  162. NAN. Zeketetik, Carlin JL, Totoki K, Reyes TM (12) Disregulasyon epigenetik nan sistèm dopamine la nan gwosè nan rejim alimantè. Jounal nerochemistry 2012: 120 – 891.
  163. NAN. Stice E, Spoor S, Bohon C, Small DM (13) Relasyon ant obezite ak repons striatal afekte sou manje se modere pa allq Taqia A2008. Syans NAN: KIJAN-NAN.
  164. NAN. Cragg SJ, Rice ME (14) Dans sot pase DAT la nan yon sinaps DA. Tandans nan neroloji yo: KIJAN-NAN.
  165. NAN. Dreyer JK, Herrik KF, Berg RW, Hounsgaard JD (15) Enfliyans sou divilgasyon fazik ak tonik dopamine sou aktivasyon reseptè. Jounal la nan neroloji 2010: 30-14273.
  166. NAN. Figlewicz DP, Szot P, Chavez M, Woods SC, Veith RC (16) Ensilin intraventrikulèr ogmante transporter transpòn mRNA nan vta rat / substantia nigra. Rechèch nan sèvo 1994: 644 – 331.
  167. NAN. Mebel DM, Wong JC, Dong YJ, Borgland SL (17) Ensilin nan zòn ventral tegmental la diminye edonik manje ak siprime konsantrasyon dopamine atravè retabli ogmante. Jounal Ewopeyen an nan neroloji 2012: 36-2336.
  168. NAN. Chen PS, Yang YK, Yeh TL, Lee IH, Yao WJ, et al. (18) Korelasyon ant endèks mas kò ak disponiblite striatal Dopamine transporteur nan volontè ki an sante - yon etid SPECT. NeuroImage NAN: NAN-NAN.
  169. NAN. South T, Huang XF (19) High-grès ekspozisyon rejim alimantè ogmante Dopamine D2008 reseptè ak diminye transpondè transpòte Dopamine dansite dansite nan nwayo accumbens yo ak caudate putamen nan sourit yo. Rechèch nerokimik 2: 33 – 598.
  170. NAN. Vitès N, Saunders C, Davis AR, Owens WA, Matthies HJG, et al. (20) Twoub striatal Akt siyal deranje omeyostaz dopamine ak ogmante manje. Plo youn 2011: e6.
  171. NAN. Roitman MF, Wescott S, kòn JJ, McLane MP, Wolfe HR (21) MSI-2010 diminye konsomasyon manje egi san yo pa afekte aktivite transporter Dopamine. Byochimik famakoloji ak Konpòtman NAN: KIJAN-NAN.
  172. NAN. Heien MLAV, Johnson MA, Wightman RM (22) Rezoud nerotransmeteur detekte avèk rapid-eskanè voltametri sik. Chimik analyse NAN: KIJAN-NAN.
  173. NAN. Sinkala E, McCutcheon JE, Schuck MJ, Schmidt E, Roitman MF, et al. (23) Electrode kalibrasyon ak yon selil koule mikrofluidik pou rapid-eskanè voltametri sik. Laboratwa sou yon Chip NAN: 2012 – 12.
  174. NAN. Yorgason JT, España RA, Jones SR (24) Demon voltametri ak lojisyèl analiz: analiz de chanjman kokayin ki induit nan Dopamine siyalizasyon lè l sèvi avèk mezi sinetik miltip. Journal nan metòd nerosyans 2011: 202-158.
  175. NAN. Paxinos G, ak Franklin KBJ (25) sèvo rat la nan kowòdone stereotaksi. San Diego, CA: Akademik Press.
  176. NAN. Hallett PJ, Collins TL, Standaert DG, Dunah AW (26) fraksyon byochimik nan tisi nan sèvo pou syans nan distribisyon reseptè ak trafik. Pwotokòl aktyèl nan newo-syans / editoryal konsèy la, Jacqueline N. Crawley ... [et al.] Chapter 1: Inite 1.16.
  177. NAN. Meng SZ, Ozawa Y, Itoh M, Takashima S (27) Chanjman nan devlopman ak ki gen rapò ak laj nan transporter Dopamine, ak Dopamine D1999 ak D1 reseptè nan imen fondamantal nwayo. Rechèch nan sèvo 2: 843 – 136.
  178. NAN. Moll GH, Mehnert C, M Wicker, Bock N, Rothenberger A, et al. (28) Laj ki asosye chanjman nan dansite yo nan transmetè monoamine presynaptic nan diferan rejyon nan sèvo a rat depi nan kòmansman lavi jivenil nan fen laj granmoun. Devlopman nan sèvo Rechèch 2000: 119 – 251.
  179. NAN. Cruz-Muros mwen, Afonso-Oramas D, Abreu P, MM Perèz-Delgado, Rodriguez M, et al. (29) Aging efè sou ekspresyon an transporter Dopamine ak mekanis konpansatwa. Newobiology of Aging 2009: 30 – 973.
  180. NAN. Badanich KA, Adler KJ, Kirstein CL (30) Adolesan yo diferan de adilt nan preferans kokay kondisyone plas yo ak kokayin ki indwi Dopamine nan septi nan nwayo accumbens. Ewopeyen an Journal of farmakoloji 2006: 550-95.
  181. NAN. Jones SR, Garris PA, Kilts CD, Wightman RM (31) Konparezon absorption Dopamine nan nwayo a basolateral amygdaloid, caudate-putamen, ak nwayo accumbens nan rat la. Jounal nerochemistry 1995: 64 – 2581.
  182. NAN. Rao A, Simmons D, Sorkin A (32) Distribisyon diferansye subselilè nan konpozisyon andozom yo ak transpòte Dopamine nan newòn dopaminergic. Molekilè ak Selilè Newosyans Zouti: KIJAN-NAN.
  183. NAN. Wang GJ, Volkow ND, Thanos PK, Fowler JS (33) Imaging nan chemen Dopamine sèvo: enplikasyon pou konprann obezite. Jounal medikaman akoutimans lan: KIJAN-NAN.
  184. NAN. Levin BE, Dunn-Meynell AA, Balkan B, Keesey RE (34) selektif elvaj pou rejim alimantè ki indui obezite ak rezistans nan Sprague-Dawley rat. American Journal of Fizyoloji 1997: R273 – 725.
  185. NAN. Morris JK, Bomhoff GL, Gorres BK, Davis VA, Kim J, et al. (35) rezistans ensilin afekte fonksyon dopamine nigrostriatal. Eksperimantal newoloji 2011: 231-171.
  186. NAN. Wellman PJ, Nasyon JR, Davis KW (36) Pwoblèm nan akizisyon nan kokayin pwòp tèt ou-administrasyon nan rat konsève sou yon rejim alimantè ki gen anpil grès. Farmakoloji, byochimik, ak konpòtman 2007: 88 – 89.
  187. 37. Thanos PK, Kim R, Cho J, Michaelides M, Anderson BJ, et al. (2010) Obezite ki reziste rat S5B te montre pi gwo kokayin kondisyone preferans pase rat obezite ki gen tandans OM yo. Fizyoloji ak konpòtman 101: 713-8.
  188. NAN. Venton BJ, Seipel AT, Phillips PEM, Wetsel WC, Gitler D, et al. (38) Kokayin ogmante dopamine lage pa mobilizasyon nan yon rezèv pisin synapsin-depandan. Jounal la nan neroloji 2006: 26-4901.
  189. NAN. Steffenson SC, Taylor SR, Horton ML, Barber EN, Lyte LT (39) Kokayin disinhibes neurones dopamine nan zòn ventral tegmenal atravè itilize-depandan blokaj sou chanèl sifas GABA vòltaj sansib. Jounal Ewopeyen an nan neroloji 2008: 28-2028.
  190. NAN. Shi WX, Pun CL, Zhou Y (40) Psychostimulants pwovoke osilasyon ba-frekans nan aktivite a tire nan newòn Dopamine. Neuropsychopharmacology 2004: 29 – 2160.
  191. NAN. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, et al. (41) Ekspozisyon nan nivo ki wo nan grès dyetetik diminye rekonpans psikostimulan ak woulman dopol mesolimbic nan rat la. Neyozyans Konpòtman NAN: KIJAN-NAN.
  192. NAN. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, et al. (42) Defisit nan mesolimbic dopamine nerotransmisyon nan rat gwosè obezite. NUROSYANS NAN: NAN - NAN.
  193. NAN. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ (43) Mekanism neral nan Dejwe: Wòl la nan aprantisaj ki gen rapò ak rekonpans ak memwa. Depandans 2006: 29 – 565.
  194. NAN. Simon GE, Von Korff M, Saunders K, Miglioretti DL, Crane PK, et al. (44) Asosyasyon ant obezite ak maladi sikyatrik nan popilasyon adilt Etazini an. Achiv nan Jeneral Sikyatri KOUMAN POU: NAN-2006.
  195. NAN. Torres GE, Carneiro A, Seamans K, Fiorentini C, Sweeney A, et al. (45) Oligomerization ak trafik nan transporter a moun Dopamine. Jounal la nan Chimi Byolojik NAN: KIJAN-NAN.
  196. NAN. Li LB, Chen N, Ramamoorthy S, Chi L, Cui XN, et al. (46) wòl nan N-glikozilasyon nan fonksyon ak trafik sifas nan transpòte a dopamine moun. Jounal la nan Chimi Byolojik NAN: KIJAN-NAN.
  197. NAN. Afonso-Oramas D, Cruz-Muros mwen, DA Rosa, Abreu P, Giraldez T, et al. (47) Dopamine transpòte glikozilasyon korelasyon ak vilnerabilite nan midbrain selil dopaminergic nan maladi Parkinson la. Newobioloji nan Maladi NAN: 2009 – 36.
  198. NAN. Roitman MF, Stuber GD, Phillips PEM, Wightman RM, Carelli RM (48) Dopamine opere kòm yon modulateur subsecond nan k ap chèche manje. Jounal la nan neroloji 2004: 24-1265.
  199. NAN. McCutcheon JE, JA Beeler, Roitman MF (49) Siyal sikwowo-prediksyon pi fasil lage yon dopaminasyon dopaj pase sakre-prediksyon. Sinaps 2012: 66 – 346.
  200. NAN. Flagel SB, Clark JJ, Robinson TE, Mayo L, Czuj A, et al. (50) Yon wòl selektif pou dopamine nan estimilis-rekonpans aprantisaj. Nati NAN: p2011 – 469d.
  201. NAN. Szczypka MS, Mandel RJ, BA Donahue, Snyder RO, Leff SE, et al. (51) Livrezon jèn viral pou kont li retabli manje ak anpeche letalite nan sourit Dopamine-ensufizant. Newòn 1999: 22 – 167.
  202. NAN. Di Ciano P, Kadinal RN, Cowell RA, Little SJ, Everitt BJ (52) Diferan patisipasyon nan NMDA, AMPA / kainate, ak reseptè dopamine nan nwayo a accumbens nwayo nan akizisyon a ak pèfòmans nan konpòtman apwòch pavlovian. Journal of Neuroscience 2001: 21 – 9471.
  203. NAN. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PRL, Kay K, Thwin MT, et al. (53) Règleman nan konpòtman motè parkinsony pa kontwòl optogenetic nan sikwi ganj fondamantal. Nati NAN: NAN-NAN.
  204. NAN. Kravitz AV, Tye LD, Kreitzer AC (54) Wòl diferan pou dirèk ak endirèk chemen striatal newòn nan ranfòsman. Nati neroloji 2012: 15-816.