forrás
Sejt- és Neurobiológiai Tanszék, Keck Orvostudományi Kar, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.
Absztrakt
Anabolikus androgén szteroid (AAS) visszaélés széles körben elterjedt. Sőt, az AAS megerősíti, amint azt a rágcsálók önigazgatása is mutatja. Azonban a receptorok, amelyek átalakítják az AAS megerősítő hatásait, nem ismertek. Az AAS kötődik a klasszikus nukleáris androgén receptorokhoz (AR) vagy a membrán receptorokhoz. Két megközelítést használtunk a nukleáris AR-k szerepének megvizsgálására az AAS önigazgatásban. Először az androgén önbeadást teszteltük patkányokban a here feminizációs mutációjával (Tfm), amely zavarja az androgén kötődését. Ha a nukleáris AR-k elengedhetetlenek az AAS önbeadásához, a Tfm hímeknek nem szabad önmagukban adni az androgéneket. A tfm hímek és vad típusú (WT) alomtársak önmagukban adták be az nem aromatizálható androgén-dihidrotestoszteront (DHT) vagy a vivőanyagot intracerebroventrikulárisan (ICV) rögzített arányú (FR) ütemezésen keresztül az FR5-ig. Mind a Tfm, mind a WT patkányok előnyben részesítették az aktív orrdugót a DHT önbeadás során (66.4 +/- 9.6 válaszok / 4 h Tfm esetén és 79.2 +/- 11.5 a WT válaszokhoz / 4 h), és az orrdugók növekedtek, mivel a Az FR követelmény növekedett. A preferencia pontszámok szignifikánsan alacsonyabbak voltak az önmagukban alkalmazott patkányoknál (42.3 +/- 5.3 válaszok / 4 h Tfm esetén és 19.1 +/- 4.0 válaszok / 4 h WT esetén). A szarvasmarha-szérum albuminnal (BSA) konjugált DHT önbeadását is megvizsgáltuk a C3 és a C17 alkalmazásánál, amely a sejt felületén végzett tevékenységekre korlátozódik. A hörcsögöknek hagyták, hogy a DHT, BSA és DHT-BSA konjugátumokat 15 napokon keresztül önmagukban adják be az FR1-en. A hörcsögök jelentős preferenciát mutattak a DHT (18.0 +/- 4.1 válaszok / 4 h) vagy a DHT-BSA konjugátumok (10.0 +/- 3.7 válaszok / 4 h és 21.0 +/- 7.2 válaszok / 4 h) szempontjából, de a BSA (2.5 +) nem -2.4 válaszok / 4 h). Összegezve, ezek az adatok azt mutatják, hogy a nukleáris AR-k nem szükségesek az androgén önbeadáshoz. Ezenkívül az androgén önbeadást a plazmamembrán receptorok közvetítik.
Copyright 2010 Elsevier Ltd. Minden jog fenntartva.
Az anabolikus androgén szteroidok (AAS) a visszaélések gyógyszerei. Ezeket a tesztoszteron (T) származékokat atlétikai és esztétikai célokra használják (Yesalis és munkatársai, 1993). A mellékhatások a hipogonadizmustól és a nőgyógyászattól kezdve a szív- és májfunkcióig terjednek (Leshner, 2000). Ezen túlmenően bizonyítékok halmozódnak fel arról, hogy az AAS visszaélés hangulatváltozást okoz (Pápa és Katz, 1994), agresszió (Choi és pápa, 1994, Kouri és munkatársai, 1995), és függőséget okozhat (Brower és munkatársai, 1991, Böngésző, 2002). A növekvő aggodalmak ellenére az AAS visszaélés alapjául szolgáló mechanizmusokat nem értették jól.
Az emberekben azt állítják, hogy az AAS használatának megkezdését nagymértékben az anabolikus hatások motiválják, ám egyes visszaélőknek függőség alakul ki (Böngésző, 2002). Az állatokon végzett kutatások bizonyítékok alátámasztják ezt a hipotézist. Az AAS kondicionált helypreferenciát (CPP) indukál egerekben (Arnedo és munkatársai, 2000) és patkányok (Packard és munkatársai, 1997, Packard és munkatársai, 1998, Frye és munkatársai, 2002). Ezenkívül a hörcsögök önként fogyasztanak AAS-t orális (Wood, 2002), intravénás (Wood és munkatársai, 2004), valamint az intracerebroventricularis (ICV) önbeadás (DiMeo and Wood, 2004, Triemstra and Wood, 2004, Wood és munkatársai, 2004, DiMeo and Wood, 2006b).
Míg az ICV önbeadása a központi cselekvés helyeire utal, az AAS megerősítését közvetítő specifikus hormonok és receptorok nem tisztázottak. A jelenlegi bizonyítékok arra utalnak, hogy a T megerősítő hatásait az androgének közvetítik, nem pedig az aromás aromatizálás után az ösztrogének. A hím hörcsögök önmagában alkalmazzák a dihidrotestoszteront (DHT; DiMeo and Wood, 2006b) és más nem aromatizálható androgének (Ballard és fa, 2005). Ezen túlmenően a T önbeadást az anti-androgén flutamid (Peters és Wood, 2004). Most felmerül a kérdés: hogyan transzdukálják az androgén szignált az agyban?
Az androgén receptor (AR) egy klasszikus nukleáris szteroid receptor, amely transzkripciós faktorként működik. Az AR-k ritkák a kábítószerrel való visszaéléshez kapcsolódó struktúrákban, mint például a nucleus carrbens (Acb) és a ventrális tegmental terület (VTA; Simerly és munkatársai, 1990, Wood és Newman, 1999). Bizonyítékok vannak arra is, hogy a gonadális szteroidok a sejtfelszíni receptorokon keresztül hatnak (Mermelstein és munkatársai, 1996, Zhu és munkatársai, 2003, Thomas és munkatársai, 2006, Vasudevan és Pfaff, 2007).
A jelen tanulmányban két megközelítést használtunk a klasszikus nukleáris AR szerepének meghatározására az androgénerősítésben. Az ösztrogénreceptorok (ER) lehetséges aktiválásának minimalizálása érdekében a DHT önbeadását teszteltük. Az első kísérletben herék feminizációs mutációval (Tfm) rendelkező patkányokat vizsgáltak a DHT ICV önbeadása szempontjából. A Tfm egyetlen bázisú szubsztitúció, amely hibás AR-kat eredményez, korlátozott ligandumkötődés mellett (Yarbrough és munkatársai, 1990). A hím Tfm patkányok külső női fenotípussal rendelkeznek, mivel a fejlődés során nem kielégítő androgén stimuláció (Zuloaga és munkatársai, 2008b). Ha funkcionális nukleáris AR szükséges az AAS megerősítéséhez, a Tfm patkányoknak nem szabad önmagukban beadniuk a DHT-t. Ehelyett a Tfm patkányok képesek voltak megszerezni a DHT önbeadást. A második kísérletben kipróbáltuk a DHT membrán-át nem eresztő formáinak ICV-önmagát a hörcsögökben. Amikor a DHT-t konjugálják szarvasmarha-szérum-albuminnal (BSA), akkor annak hatása a sejtfelszíni receptorokra korlátozódik. Ha az androgén megerősítéséhez nukleáris AR-ekre van szükség, a hörcsögöknek nem szabad önmagukban beadniuk a BSA-val konjugált DHT-t. Éppen ellenkezőleg, a hörcsögök egyértelműen kedvelték a DSA-val konjugált BSA-t. Ezek a tanulmányok együttesen azt mutatják, hogy a nukleáris AR-k nem szükségesek az androgén önadminisztrációhoz. Ehelyett az androgénszilárdulást a membrán AR-k közvetítik.
Módszerek és anyagok
Tantárgyak
patkányok
Felnőtt hím Tfm patkányokat és vad típusú (WT) alomtársakat a Michigan State University kolóniájából nyertünk. Genotípusukat PCR-rel igazoltuk, hasonlóan a korábban leírt módszerekhez (Fernandez és munkatársai, 2003). Röviden, a fülkapcsokat egy éjszakán át emésztjük 55 ° C-on proteináz K-t tartalmazó lízispufferben, majd 95 ° C-on 30 percig inaktiváljuk. Az AR-t amplifikáltuk az előremenő 5′-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'primerrel és az 5′-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3' fordított primerrel, így 135bp terméket kapunk. Az amplifikált mintákat ezután Sau96I restrikciós enzimmel (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) emésztettük egy éjszakán át 37 ° C-on, és 3% agaróz gélen futtattuk. Csak a WT AR-t vágjuk ezzel a restrikciós enzimmel, két sávot hagyva az 100bp alatt, míg a Tfm AR nem vágott. A Tfm állatokat fenotípus alapján, mellbimbók, nőies anogenitális távolság és hasi here is igazolta. A Tfm patkányokat korábban használtak nem genomikus androgén hatások kimutatására a hippokampuszban (MacLusky és munkatársai, 2006). A kísérlet kezdetén a WT patkányok 75 - 140 napos korúak voltak, és a Tfm patkányok 75 - 138 napos korúak voltak.
hörcsögök
Felnőtt hím hörcsögöket (130 - 150 g) a Charles River Laboratories (Wilmington, MA) cégtől szereztünk be. Az állatokat külön-külön fordított fénycikluson (14L: 10D) helyeztük el, elérhető táplálékkal és vízzel. ad libitum. Az összes kísérleti eljárást az illetékes intézmények állategészségügyi és felhasználási bizottságai hagyták jóvá, és az a Útmutató a laboratóriumi állatok gondozásához és felhasználásához (NationalResearchCouncil, 1996).
Sebészet
Az állatokat 22g rozsdamentes acél vezető kanülökkel (Plastic One, Roanoke, VA) implantáltuk az oldalkamrába [patkány: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 (Paxinos és Watson, 1998); hörcsög: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 (Morin and Wood, 2001), mm a bregmától], Na alatt+ pentobarbitális érzéstelenítés (patkány: 50 mg / kg, hörcsög: 100mg / kg) a korábban leírtak szerint (Wood és munkatársai, 2004). Az összes műtétet aszeptikus körülmények között hajtottuk végre a A laboratóriumi állatok gondozásának elvei (NIH, 1985). Az állatokat a műtét után legalább egy hétig hagytuk gyógyulni a vizsgálat előtt.
Kábítószer
A DHT-t, DHT-karboxi-metil-oximot (CMO), DHT-CMO-BSA-t, DHT-hemisukcinátot (Hemis) és DHT-Hemis-BSA-t a Steraloids cégtől (Newport, RI) szereztük be. A DHT-CMO-BSA-ban a DHT-t a C3 helyzetben a BSA-val konjugálják, a kapcsolóként a CMO-val. Hasonlóképpen, a DHT kapcsolódik a BSA-hoz a C17 helyzetben Hemis útján, hogy DHT-Hemis-BSA-t képezzen. Mindkét DHT-CMO-BSA (Gatson és munkatársai, 2006) és a DHT-Hemis-BSA (Braun és Thomas, 2003) korábban az androgének plazmamembránon gyakorolt lehetséges hatásainak vizsgálatára használták. A DHT-t feloldottuk 13% β-ciklodextrin (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) vizes oldatában, 1μg / μl koncentrációban. A hörcsögökkel kapcsolatos korábbi tanulmányunkban meghatározottak szerint ez az adag robusztus operatív reakciót vált ki az ICV önbeadása során (DiMeo and Wood, 2006b). A DHT-származékokat feloldottuk ugyanabban a hordozóban a DHT moláris ekvivalens koncentrációjával (DHT-CMO: 1.25 μg / μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg / μl, DHT-Hemis: 1.34 μg / μl, DHT-Hemis-BSA : 8.83μg / μl). A BSA-t (Sigma-Aldrich) feloldottuk ugyanabban a vivőanyagban 7.45 μg / μl koncentrációban a BSA moláris ekvivalens koncentrációjának elérése érdekében, mint a DHT-CMO-BSA és a DHT-Hemis-BSA esetében. A BSA-tartalmú gyógyszereket közvetlenül a felhasználás előtt minden nap elkészítettük a lebomlás elkerülése érdekében, és az összes oldatot 0.22 μm-es szűrőn szűrtük. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a szteroidok csak kis része disszociál a BSA-tól (Stevis és munkatársai, 1999), és ez a mennyiség nem elegendő a jelentős androgén hatások indukálásához (Lieberherr és Grosse, 1994, Gatson és munkatársai, 2006). Hasonlóképpen, korábbi tanulmányunk kimutatta, hogy a DHT-t 1.0 μg / μl-nél adják be, de nem 0.1 μg / μl-nél (DiMeo and Wood, 2006b). Ennélfogva nem valószínű, hogy a szabad DHT (> 10%) elegendő mennyiségben disszociál a BSA-ból az önadagolás támogatásához.
Készülék
Az állatoknak megengedték, hogy gyógyszert vagy vivőanyag-oldatot 4 óránként, naponként, 5 naponta, hetente adjanak be egy operatív kamrába (Med Associates, St. Albans, VT), egy hangcsillapító kamrába, kényszerített szellőzéssel. Mindegyik kamrát házvilágítással, 2 orrdugó-lyukakkal és egy számítógépes vezérlésű fecskendőszivattyúval láttuk el, amely a mérlegkar folyadékához forog. Az 100 μl üvegfecskendőből származó oldatot a forgócsavarhoz csatlakoztatott Tygon csöveken keresztül juttattuk az állatba. Az elfordítható és az ICV-kanült összekötő csövet fémrugó védte. A gyógyszeroldatot vagy a járművet közvetlenül a vizsgálat előtt egy 28-ga belső kanülön juttattuk a vezetőkanülbe. Minden egyes infúzió 1 μl oldatot adott 0.2 μl / s sebességgel. Az orr-lyukasztó nyílásokat 6 cm-re helyezkedtek el a padlótól a ház lámpája alatt. Az egyik orrdugó-lyukat aktív orr-poke-lyuknak nevezték. Az erre a lyukra adott választ aktív orrdugóként rögzítettük (R: aktívan erősítve), és az infúzió kiváltásához a reagálási igény (FR1 - 5) felé számítottuk. Az infúzió beindítása után a házlámpát kialudták, és az aktív lyuk megvilágult az 5-infúzió során, hogy megkönnyítsék az aktív orrdugó-lyuk megkülönböztetését. Az 5 időtúllépési periódusában az orrfúrást az aktív lyukban rögzítettük, de nem vettük figyelembe a további megerősítés szempontjából (NR: aktív-nem erősített). A másik orrdugó-lyuk válaszát inaktív orrdugóként (I) regisztráltuk, de az nem adott infúziót. Az aktív orrdugó lyuk helyét a kamra elülső vagy hátuljában kiegyensúlyozták az oldalsó preferenciák ellenőrzése érdekében. Az adatokat a WMPC szoftver (Med Associate) rögzítette egy Windows PC-n.
ICV önigazgatás
patkányok
A DHT önbeadása Tfm és WT patkányokban egy növekvő fix arányú (FR) ütemtervet követett az FR1-ről az FR5-ra. A patkányokat kezdetben FR1-en kiképezték, ahol az aktív orrdugós érzékenység fokozódott. Ezt követően az infúzió megszerzéséhez szükséges válaszok számát minden egyes 5 naponta megnövelte. A FR5 alkalommal öt válaszra volt szükség az aktív orrdugó-lyukon az infúzióhoz. Összességében a patkányokat FR1-en 10 napokon és FR2-től FR5-en (mindegyik 5 nap) teszteltük, összesen 30 napokon. Az egyes genotípusokból származó patkányokat véletlenszerűen osztottuk el a DHT vagy a hordozó (Veh) csoportba, és hagytuk, hogy a DHT vagy a βCD hordozó önállóan adódjon be. Harminchat patkány (nWT = 19, nTFM = 17) használták ebben a kísérletben.
hörcsögök
A hörcsögöket FR1 ütemterv szerint teszteltük 15 napokra. Korábbi vizsgálatokban az ICV T önbeadásának 15 napjai elegendőek ahhoz, hogy az aktív orrdugót részesítsék előnyben. A hörcsögöket véletlenszerűen osztottuk be a DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8 ) vagy BSA (n = 9) csoportok.
Az adatok elemzése
patkányok
Az aktív orrdugók napi preferencia-pontszámait úgy határoztuk meg, hogy az inaktív orrdugattyúkat kivonjuk az aktív megerősítésű és az aktív nem megerősített orrpofák összegéből (R + NR-I). Az átlagos preferencia-pontszámot minden állat számára kiszámítottuk az FR5 utolsó 1 napjaiból és az FR2 során az FR5-be. Emellett összehasonlítottuk a megerősítések átlagos számát ülésenként, minden állatnál, minden egyes FR-ben.
Az adatokat 3-irányú ANOVA-val elemeztük, a genotípus (WT vagy Tfm), a gyógyszer (DHT vagy hordozó) és az FR ütemterv (1 ∼ 5) alapján, az alanyok közötti tényezők között. Az FR-ütemtervet közti tényezőként kezelték, mivel egyes állatok az ICV vezető kanül eltömődése miatt nem teljesítették a teljes 30 vizsgálati napot. Ezekben az esetekben csak a kitöltött ütemtervekből származó adatokat vették figyelembe az elemzésekben. Az egyes körülmények között szereplő állatok számát a Táblázat 1. A háromutas ANOVA-t az alacsony effektusok elérése érdekében megfelelő alacsonyabb rendű ANOVA követte. A Newman-Keuls tesztet post-hoc pár-összehasonlításra használtuk szükség esetén.
Táblázat 1
hörcsögök
Az R, NR és én egyedi eszközeit használtuk az adatok elemzésére. Az egyes állatok preferencia-pontszámát úgy határoztuk meg, hogy kivonjuk az átlagos inaktív orrdugót (I) az átlagos aktív orrdugótól (R + NR-I). Az átlagos preferencia pontszámot egy mintával elemezték t-teszt az 0 ellen (azaz nincs preferencia) minden csoportra. Ezenkívül minden állat esetében átlagoltuk a kapott megerősítések számát. Az egyes gyógyszercsoportoknál kapott átlagos megerősítést összehasonlítottuk a BSA kontrollokéval 2 független mintákkal t-teszt. Azokat az állatokat, akik nem teljesítettek legalább 5 szekciókat, kizártuk az elemzésből (mindegyik 1 a DHT-Hemis és a DHT-Hemis-BSA csoportból).
Az összes statisztikai elemzést SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL) alkalmazásával végeztük. Minden elemzéshez p <0.05 statisztikailag szignifikánsnak tekintettük. Az adatokat átlag ± SEM / 4 órás munkamenetenként mutatjuk be.
Eredmények
A WT és Tfm patkányok önmagukban adják be a DHT-t
Üzemeltető válaszol
Ábrákon. 1 szemlélteti az aktív orrpiszkálás (R + RN - I) átlagos preferenciáját minden egyes FR esetében a DHT és a Veh csoportokban. A DHT-t önmagában beadó patkányok az aktív orrpiszkálást részesítették előnyben (73.1 ± 7.6 resp / 4h), összehasonlítva a hordozó kontrollokkal (29.8 ± 3.5 resp / 4h; F1,145 = 31.77, p <0.001). Volt egy fő hatása az FR ütemezésének is (F4,145 = 4.25, p <0.01), genotípus-gyógyszer kölcsönhatás (F1,145 = 5.27, p = 0.02) és a gyógyszer-FR ütemterv kölcsönhatása (F4,145 = 2.60, p = 0.02). A genotípus fő hatása nem volt, és az egyéb interakciók nem voltak szignifikánsak.
A post-hoc tesztek azt mutatták, hogy a DHT-t önmagukban alkalmazó patkányok szignifikánsan nagyobb preferenciát mutattak az FR ütemtervéhez képest (F4,73 = 4.18, p <0.01), növekvő preferencia az FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4h) és az FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4h) és az FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4h) között. A genotípus hatása ebben a csoportban nem volt megfigyelhető (genotípus-FR ütemterv: F4,73 = 0.13, ns; genotípus: F1,73 = 0.86, ns).
Ezzel szemben a patkányok, akik önmagukban alkalmazták a betegséget, nem mutattak változást az előnyben részesítésnél az FR ütemtervhez képest (F4,72 = 0.31, ns), és nincs genotípus-FR ütemterv-kölcsönhatás (F4,72 = 0.12, ns). A DHT-től eltérően a Tfm patkányok nagyobb preferenciát mutattak, mint a WT ebben a csoportban (42.3 ± 5.3 és 19.1 ± 4.0 resps / 4h, F;4,72 = 11.81, p <0.01).
Infusions
Az egyes FR-ekben kapott DHT- és Vehézium-infúziók átlagos számát ábrázolja Ábra 2. Összességében a patkányok több infúziót kaptak, amikor engedték, hogy önmagukban adják be a DHT-t (26.9 ± 2.2 μg / 4h) a hordozóval szemben (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F1,145 = 14.70, p <0.001). Volt egy fő hatása az FR ütemezésének is (F1,145 = 3.32, p = 0.01) és a genotípus-gyógyszer kölcsönhatás (F1,145 = 6.41, p = 0.01). Az összes többi kölcsönhatás és a fő hatások nem voltak szignifikánsak.
A DHT átlagos napi bevitele az összes FR ütemtervben hasonló volt a Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) és a WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h) patkányokban. Mindkét csoportban a drogbevitel állandó maradt, ahogy az FR ütemterv növekedett (F4,73 = 0.54, ns). A FR1 során a Tfm és a WT férfiak önmagukban adták be a DHT-t 24.5 ± 2.3 μg / 4h és 37.3 ± 6.7 μg / 4h értékekkel. Az FR5 ütemterv szerint a DHT önbeadásának átlaga XnUMX ± 18.3 μg / 4.5h volt a Tfm-re és 4 ± 23.9 μg / 5.9h a WT patkányokra. Ez a csoport nem mutatott genotípus- vagy genotípus-FR ütemterv-alapú különbségeket (F1,73 = 1.17, ns; F4,73 = 0.34, ns, ill.).
Ezzel szemben mind a Tfm, mind a WT patkányokban a vivőanyag-infúziók száma szignifikánsan csökkent, ahogy az FR-követelmény növekedett (F4,72 = 4.73, p <0.01). Kissé meglepő, hogy a Tfm patkányok körülbelül kétszer annyi hordozót adtak be (20.7 ± 2.4 μl / 4 óra), mint a WT patkányok (10.7 ± 1.4 μl / 4 óra, F1,72 = 7.77, p <0.01). Az FR1-nél lévő Tfm patkányokban a vivőanyag-infúziók száma (39.9 ± 13.2 μl / 4 óra) meghaladta a DHT-infúziók számát (24.5 ± 2.3 μl / 4h). A kísérlet végére azonban a vivőanyag önadagolása 10.3 ± 2.4 μl / 4 órára csökkent. Hasonlóképpen, a WT patkányok 18.6 ± 4.1 μl / 4 óra vivőanyagot adtak be önmagukban FR1-nél, ami 6.6 ± 1.8 μl / 4 órára csökkent FR5-nél.
Az átlagos testtömeg az egyes FR ütemterv kezdetén és az állatok száma az egyes állapotokban a Táblázat 1. A WT patkányok szignifikánsan nehezebbek voltak, mint a Tfm patkányok (F1,174 = 144.62, p <0.001), és az összes csoport idővel hízott (F5,174 = 5.59, p <0.001). A gyógyszerállapotnak (DHT vs Veh) nem volt hatása a testtömegre (F1, 174 = 0.31, ns), vagy bármilyen interakció. A testtömeghez igazított DHT bevitel mindkét genotípusban hasonló volt mind az FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg), mind az FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg) esetében.
A szíriai hörcsögök a BSA-val konjugált DHT-t adják be
Üzemeltető válaszol
A hörcsögök a BSA-val konjugált DHT-vel és DHT-vel konjugáltak, de nem kizárólag a BSA-val. 3a mutatja a DHT, BSA, DHT-CMO-BSA és DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis átlagos preferenciáját (aktív - inaktív orrdugások). Korábbi vizsgálatainkkal összhangban a hörcsögök előnyben részesítették az aktív orrpiszkálást a DHT önadagolása során (t7 = 4.34, p <0.01), de nem mutatta előnyben a BSA önadagolásakor (t8 = 1.03, ns). Hasonlóképpen, a hörcsögök előnyben részesítették az aktív orrdugót a DHT-CMO-BSA-val (t9 = 2.71, p = 0.02) és DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Ha a DHT csak linkerekhez kapcsolódik, a hörcsögök önmagukban alkalmazzák a DHT-CMO-t (t8 = 3.91, p <0.01), de nem mutatott szignifikáns preferenciát a DHT-Hemis önadagolásakor (t10 = 1.87, p = 0.09). A DHT-Hemis esetén az aktív orrdugós reakciók (40.5 ± 10.3 ill. 4h) hasonlóak voltak a DHT-Hemis-BSA esetén (41.2 ± 11.4 ill / 4h), de ezeknél a férfiaknál megnövekedett válaszok mutattak az inaktív orrra is. pólus (28.7 ± 6.6 ill. / 4h), összehasonlítva a DHT-Hemis-BSA-val (20.3 ± 4.4 ill. / 4h).
Infusions
Az egyes csoportokhoz beérkezett infúziók száma ábrán látható 3b. A hörcsögök szignifikánsan több DHT-, mint BSA-infúziót kaptak (t15 = 3.04, p = 0.01). Hasonlóképpen, a hörcsögök több infúziót kaptak, amikor engedték, hogy önmagukban adják be a DHT-Hemis-BSA-t (t15 = 2.72, p = 0.02) vagy DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) a BSA-hoz képest. A DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) és a DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) csoportoknál kapott infúziók száma hasonló volt a DHT, DHT-Hemis-BSA és DHT- CMO. Ennek ellenére a hörcsögök nem kaptak szignifikánsan több DHT-CMO-BSA-t (t17 = 1.96, p = 0.07) vagy DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) a BSA-hoz képest.
Overdose
Az 55 hörcsögök közül tizenegy meghalt, mielőtt befejezte az összes 15 tesztmenüt. A tesztoszteron önbeadása során az androgén túladagolás miatti halálokat korábban már leírták (Peters és Wood, 2005). Ebben a tanulmányban az 2 férfiak 8 (25%) elpusztult a DHT önbeadás során, hasonlóan a tesztoszteron túladagolásnál bejelentett 24% -hoz (Peters és Wood, 2005). A DHT-CMO és a DHT-Hemis ön-beadása a legnagyobb veszteségekkel volt összefüggésben (csoportonként 3 8-értékei, 38%), míg a BSA-t önszabályozó hörcsögök között kevés haláleset történt (1 9, 11%) vagy DHT -Hemis-BSA (az 0 8). A tesztoszteron túladagoláshoz hasonlóan a jelen vizsgálatban szereplő egyetlen hörcsög sem halt meg az önbeadás során. Ehelyett a hörcsögök néhány órával később meghaltak otthoni ketrecükben, súlyos mozgásszervi és légzési depresszióval.
A tesztoszteron túladagolása szorosan korrelál a tesztoszteron bevitelével, különös tekintettel a munkamenetenkénti maximális bevitelre (Peters és Wood, 2005). Ábra 4 összehasonlítja a preferencia pontszámokat, a kapott megerősítések számát és a csúcsmennyiséget azon hörcsögök esetében, akik az összes 15 tesztmenetet elvégezték, és azoknak, akik nem. Mindkét csoport szignifikáns előnyben részesítette az aktív orrdugót (p <0.05). Azonban a preferencia szignifikánsan nagyobb volt az önadagolás során elhullott hörcsögöknél (25.7 ± 5.2 resp / 4h), mint a túlélőknél (9.5 ± 2.0 resp / 4h, t53 = 3.42, p <0.01). Azok a hörcsögök, akiknek nem sikerült befejezniük a 15 kezelést, több mint kétszer annyi infúziót kaptak munkamenetenként (31.2 ± 5.0 inf / 4 óra), mint azok, akik az összes munkamenetet befejezték (14.8 ± 1.1 inf / 4 óra, t53 = 5.05, p <0.001). Továbbá, a vizsgálat során elhunyt hörcsögök esetében a maximális bevitel munkamenetenként szignifikánsan magasabb volt (77.0 ± 9.8 inf / 4 óra), mint a túlélő hímeknél (36.1 ± 2.9 inf / 4 óra, t53 = 5.41, p <0.001).
ábra 4
Megbeszélés
Az androgén önbeadást a membránhoz kapcsolódó, de a nukleáris androgén receptorok közvetítik
A jelenlegi tanulmány kimutatja, hogy a klasszikus nukleáris AR-k nem nélkülözhetetlenek az androgén önadminisztrációhoz. Mind a Tfm, mind a WT patkányok előnyben részesítették az aktív orrdugót a DHT önbeadás során. Ezenkívül képesek voltak reagálni a növekvő FR ütemtervre az aktív orrdugók növelésével, ezáltal fenntartva a drogbevitel állandó szintjét, függetlenül az FR ütemtervétől. Ezzel szemben a vivőanyagot kapó patkányok nem reagáltak az FR ütemtervének változására. Aktív orrdugók nem növekedtek szignifikánsan az FR ütemtervének változásaira válaszul, és kevesebb infúziót kaptak, ahogy a válaszigény növekedett. Mivel a Tfm mutánsokban veszélybe kerül a ligand kötődése a „klasszikus” nukleáris androgén receptorhoz, ez alátámasztja azt a hipotézisünket, hogy az androgén megerősítése alternatív utakon keresztül zajlik.
A Tfm patkányok váratlanul magas reakcióképessége a vivőanyag számára valószínűtlen, hogy maga a hordozó okozza. Hasonló jelenségeket figyeltünk meg külön Tfm patkányok csoportjában, akik nem kaptak infúziót (az adatokat nem mutatjuk be). Ehelyett a feminizált viselkedési vonásokhoz kapcsolódhat a Tfm-férfiakban. A Tfm patkányok megnövekedett orrcsapjai analógok lehetnek a nőstény patkányoknál megfigyelt magasabb felfedezőfejekkel (Brown és Nemes, 2008). Alternatív megoldásként ismert, hogy a Tfm patkányok és egerek fokozott szorongásos viselkedést mutatnak (Zuloaga és munkatársai, 2006, Zuloaga és munkatársai, 2008a). Talán a DHT nyugtató / szorongásoldó hatásai (Agren és munkatársai, 1999, Arnedo és munkatársai, 2000, Frye és Seliga, 2001, Berbos és munkatársai, 2002, Peters és Wood, 2005) tompította a szorongásos viselkedést, amikor a Tfm patkányok önmagukban adták be a DHT-t.
Ezenkívül a DHT-BSA konjugátumok önálló beadása hím hörcsögökben bizonyítékot szolgáltat arra, hogy az androgének erősítő hatásúak lehetnek a neuronális plazmamembránon. A hörcsögök mindkét DHT-BSA-konjugátum szignifikáns preferenciáját mutatták. Az önmagukban alkalmazott dózisok összhangban vannak a T, DHT és a gyakran visszaéltekkel szteroidokkal kapcsolatos korábbi tanulmányainkkal (Ballard és fa, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). Ezzel szemben a hörcsögök nem mutattak preferenciát a BSA-val szemben. A halálozásra és a kábítószer-bevitelre vonatkozó adatok azt mutatják, hogy a DHT és származékai halálosak lehetnek, kiterjesztve a T-túladagolással kapcsolatos korábbi adatainkat (Peters és Wood, 2005).
A jelen tanulmány feltárja az operandus reagálásának fajspecifikus mintáját. A hörcsögök nem részesítették előnyben az aktív orrdugót, miközben önmagukban alkalmazták a hordozót, amint azt korábban kimutatták (Johnson és Wood, 2001, Wood, 2002, DiMeo and Wood, 2004, Triemstra and Wood, 2004, Wood és munkatársai, 2004, Ballard és fa, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). Patkányokban azonban egyértelműen előnyben részesítették az aktív orrdugót, függetlenül a kapott gyógyszertől. Hasonló tendenciát figyeltünk meg a patkányokban a T IV önbeadásával kapcsolatos korábbi tanulmányunkban, bár ez nem volt statisztikailag szignifikáns (Wood és munkatársai, 2004). Az önbeadás ilyen fajspecifikus viselkedési különbségei alapján óvatosság szükséges a patkányok és a hörcsögök viselkedési adatainak összehasonlításakor.
Számos figyelmeztetést kell figyelembe venni a jelenlegi tanulmány értelmezésekor. Először, a Tfm patkányokban továbbra is jelen vannak a nukleáris AR-k, amelyek jelentősen csökkent a ligandumkötődésben (Yarbrough és munkatársai, 1990), ellentétben a Tfm egerekkel (He és mtsai., 1991). Lehetséges, hogy ezek a mutált nukleáris AR-ek elegendőek az androgének hatásainak közvetítéséhez szuprafiziológiai dózisokban. Másodszor, a DHT-BSA konjugátumok lebomlanak in vivo, amely szabad DHT-t eredményez. Bár ez nem tűnik jelentős kérdésnek in vitro (Lieberherr és Grosse, 1994, Gatson és munkatársai, 2006), a DHT-BSA lebomlásának mértéke és időtartama in vivo az agyban jelenleg ismeretlen. Végül, a DHT-BSA konjugátumok nem feltétlenül hatolnak be az agyszövetbe. A DHT-BSA szignifikánsan nagyobb, mint a DHT, tehát a jelen vizsgálatban megfigyelt DHT-BSA hatása valószínűleg a kamrákhoz közeli helyszíneken zajlik.
Ezen óvintézkedések ellenére ez a két különféle megközelítés következetes eredményeket hozott, amelyek erősen vitatják a nukleáris AR szükségességét az androgén megerősítésében. Ezenkívül a BSA konjugátumok önbeadása arra utal, hogy az androgének az plazmamembránon hathatnak az androgén megerősítésében. Tudomásunk szerint a jelenlegi tanulmány az első in vivo bizonyítékok az androgének viselkedésbeli szempontból releváns hatásairól a plazmamembránon.
Az androgének gyors nukleáris AR-független hatást gyakorolnak a jutalomra
Számos más, az androgén jutalomról szóló vizsgálat kimutatta az eredményeket, amelyek összhangban vannak a nem genomi vagy plazma membránhatásokkal. A CPP a szisztémás T befecskendezés 30 percében fejlődik ki (Alexander és munkatársai, 1994), a T. CPP akut, nem genomikus hatásaival összhangban álló időtartamot indukálhatjuk a T vagy annak metabolitjának intra-Acb infúzióival is (Packard és munkatársai, 1997, Frye és munkatársai, 2002), bár Acb-nek kevés genomiális AR van. Ezenkívül a VTA az FV-t kifejezi az ICV T-infúzióra adott válaszként (Dimeo and Wood, 2006a), annak ellenére, hogy nincs jelentős klasszikus AR-kifejezés. A jelenlegi tanulmány nem nyújt információt az agy működésének helyéről. Mindazonáltal azt jelzi, hogy önmagában a nukleáris AR relatív hiánya nem elegendő ok arra, hogy az olyan szerkezeteket, mint például az Acb és a VTA, kizárjuk azokról a potenciális helyekről, amelyek androgén hatásokat közvetíthetnek.
A szteroidok gyors plazmamembrán hatása a dorsalis és a ventrális striatumban nem korlátozódik az androgénekre. A progesztinekről ismert, hogy indukálják a CPP-t, valószínűleg gamma-amino-vajsav (GABA) receptorok révén az Acb-ben (Frye, 2007). Az ösztrogének gyors, membránreceptor által közvetített hatásokat fejtenek ki a hátsó striatumban (Mermelstein és munkatársai, 1996, Becker és Rudick, 1999). A membrán-asszociált receptorokat már izoláltak a progesztinek (Zhu és munkatársai, 2003), és bizonyítékok halmozódnak fel az ösztrogének sejtfelszíni receptoraival kapcsolatban (a Vasudevan és Pfaff, 2007) és androgének (áttekintve a Thomas és munkatársai, 2006). Míg az ösztrogének szintén megerősítik (DiMeo and Wood, 2006b) szerint a T megerősítő hatásai túlnyomórészt androgének. A hörcsögök önmagukban adják be az ízesíthetetlen androgéneket, például a drostanolont és a DHT-t (Ballard és fa, 2005, DiMeo and Wood, 2006b). Ezenkívül az anti-androgén flutamid gátolhatja a T önbeadást (Peters és Wood, 2004). Noha ez ellentmondásos lehet a membrán AR szerepe ebben a tanulmányban, a flutamidról számoltak be, hogy blokkolja a membrán AR aktivációját is (Braun és Thomas, 2003, Braun és Thomas, 2004).
A membrán androgén receptorok tulajdonságai
A szteroidok, köztük az androgének hatásait a történelem során úgy ítélték meg, hogy azok nukleáris receptor által közvetített folyamatok révén átalakulnak. A gyors androgén hatásokról, amelyek feltételezhetően a membránhoz kapcsolódó receptorok közvetítik, azonban több évtizeden keresztül rendelkezésre állnak jelentések. Például a mediális preoptikai területen az androgének másodpercek alatt megváltoztathatják az idegsejtek tüzet (Yamada, 1979) percekig (Pfaff és Pfaffmann, 1969). Ezenkívül Orsini és munkatársai (Orsini, 1985, Orsini és munkatársai, 1985) kimutatták az idegrendszeri tüzelési gyakoriság gyors módosulását az androgének által az laterális hipotalamuszban (LHA). Az androgéneknek az LHA-ban kifejtett hatása különös jelentőséggel bírhat a jelen tanulmányban, mivel az LHA ismert, hogy részt vesz a jutalmazási folyamatban (Olds és Milner, 1954) és az LHA orexint / hipokretinet a gonadális szteroidok (Muschamp és munkatársai, 2007).
A lehetséges membrán AR-kkel rendelkező sejttípusok közé tartozik a glia (Gatson és munkatársai, 2006), ízületi (Braun és Thomas, 2003, Braun és Thomas, 2004) és immunsejtek (Benten és munkatársai, 1999, Guo és munkatársai, 2002), myocyták (Estrada és munkatársai, 2003) és az osteoblasztok (Lieberherr és Grosse, 1994). Noha a molekuláris azonosságot még nem határozták meg, az AR membrán jelöltjei között szerepelnek az ismert szteroidkötő helyekkel rendelkező membránreceptorok, például a GABA-A ( Lambert és munkatársai, 2003) és az N-metil-D-aszparaginsav receptorok NR2 alegységei (Malayev és munkatársai, 2002). Alternatív megoldásként Thomas és munkatársai (2004) bizonyítékokat jelentettek egy új G-proteinhez kapcsolt receptorról, mint membrán AR-ről. Ezenkívül a jelenlegi vizsgálatban nem zárható ki az androgéneknek a specifikus receptorokkal nem összefüggő hatása.
Friss in vitro tanulmányok arra utalnak, hogy több membrán AR van vagy egynél több kötőhely van egyetlen receptoron, ahogyan azt a membrán progeszteron receptor javasolja (Ramirez és munkatársai, 1996). Sok sejttípusban az AR membrán úgy tűnik, hogy egy Gq / o-hoz kapcsolt membránreceptor (Lieberherr és Grosse, 1994, Benten és munkatársai, 1999, Zhu és munkatársai, 1999, Guo és munkatársai, 2002, Estrada és munkatársai, 2003). A feltételezett membrán AR szteroidkötési tulajdonságai és anti-androgénekkel szembeni érzékenysége azonban a sejt típusától függően nagyban különbözik. Például az antiandrogének blokkolhatják a DHT hatását a csikorgós petefészek sejtekre (Braun és Thomas, 2003, Braun és Thomas, 2004), míg más sejttípusokban nem hatékonyak (Lieberherr és Grosse, 1994, Benten és munkatársai, 2004, Gatson és munkatársai, 2006), vagy akár agonista-szerű hatásokat válthat ki a hippokampusz sejtekben (Pike, 2001, Nguyen és munkatársai, 2007) és több rákos sejtvonal (Peterziel és munkatársai, 1999, Zhu és munkatársai, 1999, Evangelou és munkatársai, 2000, Papakonstanti és munkatársai, 2003). Ezenkívül különböző T-kötő tulajdonságokról számoltak be a halak különböző szerveiben (Braun és Thomas, 2004).
A gyakran visszaéléses AAS-sel kapcsolatos tapasztalataink azt mutatják, hogy az A-gyűrűben (C2 és / vagy C3) és a C17 jelentős változás (ok) zavarják az ön-beadást (Ballard és fa, 2005). Például a sztanozololt, amely jelentős módosulást mutat a C2-en és a C3-en, valamint a C17-hez kapcsolódó metilcsoportot, nem önmagában alkalmazzák. A jelenlegi vizsgálatban a hörcsögök önmagukban adták be a C3-en (DHT-CMO-BSA) konjugált BSA-t és a C17-en konjugált BSA-t (DHT-Hemis-BSA). További kutatásokra van szükség az önbeadott androgének tulajdonságainak tisztázására.
Klinikai jelentőség
Az AAS, különösen a T, messze a sportolók által használt leggyakoribb teljesítményjavító szerek, amelyek a pozitív doppingtesztek közel felét teszik ki (Doppingellenes Világügynökség, 2006). Az ilyen széles körű használat miatt az AAS visszaélésnek széles körű egészségügyi következményei vannak. Az AAS-visszaélés szív- és máj-mellékhatásai jól megalapozottak (Leshner, 2000). Úgy gondolják, hogy ezeket és az AAS anabolikus hatásait a nukleáris AR közvetíti. Az androgének lehetséges nukleáris AR-től független hatásai azonban arra utalnak, hogy az AAS hatása jóval meghaladhatja a nukleáris AR expresszióval rendelkező szerkezeteket.
Ami a többi bántalmazáshoz való hasonlóságot illeti, az AAS eltérő hatást fejt ki, és eltérő hatásmechanizmusú, mint a stimulánsok. A stimulánsoktól eltérően (Graybiel és munkatársai, 1990), Az AAS csak a VTA-ban, és nem az Acb-ben indukálja a c-Fos aktivációt (Dimeo and Wood, 2006a). Ezenkívül az AAS enyhíti az stimulánsok által kiváltott Acb DA felszabadulást (Birgner és munkatársai, 2006), és akut gátolja a DA felszabadulását (Triemstra és munkatársai, 2008). Magatartási szempontból az AAS nem indukálja a stimulánsok jellemző mozgásszervi aktivációját (Peters és Wood, 2005).
Ehelyett az akut AAS viselkedésbeli reakciói hasonlóak az opioidok vagy benzodiazepinek reagálásához, és ezek együttes alkalmazásával valószínűleg additív hatást mutatnak. Az AAS-hez való expozíció lenyomja az autonóm funkciókat, ideértve a légzést és a testhőmérsékletet (Peters és Wood, 2005). Az AAS-indukált autonóm depresszió az opioid-túladagolás tüneteire emlékeztet, és az opioid-antagonista naltrexon (Peters és Wood, 2005). Ezenkívül a nandrolon, az általánosan használt AAS, fokozza a morfin hipotermikus hatásait, és súlyosbítja a naloxon által kiváltott morfin-elvonási tüneteket (Celerier és munkatársai, 2003). Ezenkívül jól bebizonyosodott, hogy az akut AAS nyugtató / szorongásoldó (Agren és munkatársai, 1999, Arnedo és munkatársai, 2000, Frye és Seliga, 2001, Berbos és munkatársai, 2002, Peters és Wood, 2005), valószínűleg a GABA-A receptorokra gyakorolt közvetlen hatásaik révén (Masonis és McCarthy, 1995, Masonis és McCarthy, 1996). Az AAS-val krónikusan kezelt patkányok megnövekedett etanolfogyasztása a megváltozott GABAerg funkció tükröződését is tükrözi (Johansson és munkatársai, 2000).
A túladagolással kapcsolatos megállapításaink további egészségügyi problémákat vetnek fel. Jelenleg az AAS ellenőrző anyagként történő besorolása anabolikus tulajdonságain alapul (Az ellenőrzött anyagokról szóló törvény, 1991). A jelenlegi tanulmány azonban azt mutatja, hogy az AAS anabolikus hatékonysága nem feltétlenül felel meg azok megerősítő tulajdonságainak és a túladagolás kockázatának. A DHT-BSA konjugátumok mellett a DHT-CMO, amelyet ebben a tanulmányban használtak, nem kontrollált anyag, bár megerősítő tulajdonságai és a túladagolás miatti mortalitása meglehetősen hasonló a DHT és T (Peters és Wood, 2005). A túladagolás mintája hasonló volt a korábban T (Peters és Wood, 2005), ahol a magas bevitel az 24 és 48 órák közötti későbbi mortalitást eredményezte. E megállapítások fényében a szteroid mint szabályozott anyag ütemezéséhez alkalmazott kritériumok anabolikus hatékonyságuk mellett felülvizsgálást igényelhetnek a visszaélés elleni felelősség és a toxicitás szempontjából.
A jelenlegi tanulmány eredményei azt sugallják, hogy a nukleáris AR, az eddig egyetlen izolált AR, nem nélkülözhetetlen az androgén megerősítéséhez. Ehelyett az eredmények azt sugallják, hogy az androgénszilárdulás átjut a plazmamembránon. Ezért további feltételezésekre van szükség a feltételezett membrán AR azonosításában, azok funkcionális jellemzőiben és anatómiai eloszlásában az AAS visszaélés mögöttes mechanizmusának és klinikai következményeinek tisztázása érdekében.
Lábjegyzetek
Kiadói nyilatkozat: Ez egy PDF-fájl egy nem szerkesztett kéziratból, amelyet közzétételre fogadtak el. Ügyfeleink szolgálataként a kézirat korai változatát nyújtjuk. A kéziratot másolják, megírják és felülvizsgálják a kapott bizonyítékot, mielőtt a végleges idézhető formában közzéteszik. Kérjük, vegye figyelembe, hogy a gyártási folyamat során hibák észlelhetők, amelyek hatással lehetnek a tartalomra, és minden, a naplóra vonatkozó jogi nyilatkozat vonatkozik.
Referenciák
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Az alacsony dózisú anabolikus androgén szteroidkezelés viselkedési anksiolitikus hatásai patkányokban. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. A tesztoszteron jutalmazó érzelmi tulajdonságokkal rendelkezik hím patkányokban: kihatások a szexuális motiváció biológiai alapjaira. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. A tesztoszteron jutalmazó tulajdonságai érintetlen hím egerekben: kísérleti tanulmány. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Férfi hörcsögökben (Mesocricetus auratus) gyakran használt anabolikus-androgén szteroidok intracerebroventrikuláris önbeadása: nandrolon, drostanolone, oximetholone és stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Az ösztrogén vagy a progeszteron gyors hatása az amfetamin által kiváltott striatális dopamin növekedésre fokozódik az ösztrogén alapozással: mikrodialízis-vizsgálat. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Az androgének gyors hatása a makrofágokban. Szteroidok. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. A tesztoszteron jelzése az internalizálható felszíni receptorokon keresztül androgénreceptor-mentes makrofágokban. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Az anabolikus szteroidok akut viselkedésbeli hatásai: szorongás, sztereotípia és mozgásszervi aktivitás. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. A DOPAC és HVA extracelluláris szintje megváltozott a patkánymag-gyűjtőmagok héjában a szubkrónikus nandrolon beadására és az azt követő amfetamin-kihívásra reagálva. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgének a sejtfelszínen iniciált nemgenomikus mechanizmusok révén gátolják az ösztradiol-17beta szintézist az atlanti gátló (Micropogonias undulatus) petefészekben. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. A membrán androgénreceptor biokémiai jellemzése az atlanti kréta petefészkéjében (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Böngésző KJ. Anabolikus szteroid visszaélés és függőség. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Böngésző KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Az anabolikus-androgén szteroidfüggőség tünetei és összefüggései. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brown GR, Nemes C. A patkányok felfedező viselkedése a lyukasztókészülékben: a fejbemerülés érvényes-e a neofília mértékének? Behav folyamatok. 2008;78: 442-448. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. A nandrolon hatása akut morfinválaszokra, toleranciára és függőségre egerekben. Eur. J. Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, HG pápa, Jr A nőkkel szembeni erőszak és az illegális androgén-anabolikus szteroidok használata. Ann Clin Pszichiátria. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- 21. cím, 13. fejezet - A kábítószerrel való visszaélés megelőzése és ellenőrzése A szabályozott anyagokról szóló törvény. 1991
- DiMeo AN, Wood RI. A keringő androgének javítják a hímivarú hörcsögök tesztoszteron ön-beadásának érzékenységét. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. Az ICV tesztoszteron Fos-t indukál a szíriai hímivarú agyban. Psychoneuroendocrinology. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Wood RI. Ösztrogén és dihidrotestoszteron önbeadása férfi hörcsögökben. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. A tesztoszteron stimulálja az intracelluláris kalcium felszabadulást és a mitogén által aktivált protein kinázokat egy G fehérjéhez kapcsolt receptoron keresztül a vázizomsejtekben. Endokrinológia. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. A növekedési faktor béta-receptorok transzformálásának alsó szabályozása androgén alkalmazásával petefészekrák sejtekben. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. Molekuláris módszer a teszt feminizált (Tfm) patkányok tenyésztelepében nyert genotípusok osztályozására. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. A progesztinek befolyásolják a visszaélés elleni drogok motivációját, jutalmát, kondicionálását, stresszét és / vagy válaszát. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. A sejtmag felhalmozódik a tesztoszteron és 5alfa-redukált metabolitjainak jutalmazó tulajdonságainak hatására. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seliga AM. A tesztoszteron növeli a hím patkányok fájdalomcsillapítását, szorongásmentességét és kognitív teljesítményét. Kognitív, affektív és viselkedési idegtudomány. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. A dihidrotestoszteron differenciálisan modulálja a mitogén-aktivált protein-kináz és a foszfoinozitid 3-kináz / Akt útvonalakat a nukleáris és új membrán androgénreceptorokon keresztül a C6 sejtekben. Endokrinológia. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Az amfetamin és a kokain a c-fos gén gyógyszer-specifikus aktivációját indukálja a strioszóma-mátrix rekeszekben és a striatum limbikus alosztásaiban. Proc Natl Acad Sci USA A. 1990;87: 6912-6916. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomikus tesztoszteron kalciumjelzés. Genotropikus hatások androgénreceptor-mentes makrofágokban. J. Biol. Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Ő WW, Kumar MV, Tindall DJ. Az frame and shift mutáció az androgén receptor génben teljes androgén érzékenységet okoz a here-feminizált egérben. Nukleinsavak Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Az anabolikus androgén szteroidok befolyásolják az alkoholfogyasztást, a védekező magatartást és az agyopioid peptideket patkányokban. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Orális tesztoszteron önálló alkalmazás a férfiak hörcsögjeiben Neuroendokrinológia. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, HG pápa, Jr, Oliva PS. Az önkéntesekben fokozódó agresszív válaszadások a tesztoszteron cypionate fokozatosan növekvő adagjának beadását követően. A kábítószer-alkohol függ. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D., Peden DR, Vardy AW, Peters JA. A GABAA receptorok neuroszteroid modulációja. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA kutatási jelentés sorozat).Anabolikus szteroid visszaélés. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Az androgének megnövelik az intracelluláris kalciumkoncentrációt, valamint az inozitol 1,4,5-trifoszfát és diacil-glicerin képződését pertussis toxinra érzékeny G-protein révén. J. Biol. Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgén hatások a hippokampusz CA1 gerincszinapszisokra megmaradnak Tfm hím patkányokban, amelyek hibás androgénreceptorokkal rendelkeznek. Endokrinológia. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Az NMDA-reakció gátlása a preszenenolon-szulfáttal az NMDA-receptorok altípusú szelektív modulációját deríti fel szulfatált szteroidokkal. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Az anabolikus / androgén szteroidok, a sztanozolol és az 17 alfa-metiltestoszteron közvetlen hatása a benzodiazepin kötődéséhez. gamma-amino-vajsav (a) receptor. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy MP. Az androgén / anabolikus szteroid sztanozolol hatása a GABAA receptor működésére: GABA-stimulált 36Cl-beáramlás és [35S] TBPS-kötés. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Az ösztradiol a membránreceptokon keresztül csökkenti a patkány neostriatalis neuronok kalciumáramát. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Morin LP, Wood RI. Az aranyhörcsög agyának sztereotaxikus atlasza. Academic Press; San Diego: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. A hypocretin (orexin) szerepe a férfi szexuális viselkedésében. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- NR Tanács, szerkesztő. NationalResearchCouncil. Útmutató a laboratóriumi állatok gondozásához és felhasználásához. Nemzeti Kutatási Tanács; Washington, DC: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. A flutamid és a cyproterone-acetát agonista hatást fejt ki: androgénreceptor-függő neuroprotekció indukciója. Endokrinológia. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. A laboratóriumi állatok gondozásának alapelve. Nemzeti Egészségügyi Intézet; Bethesda, Maryland: 1985.
- J Olds, Milner miniszterelnök. Pozitív megerősítés, amelyet a patkány agyának septalis területe és más régiói elektromos stimulációval generálnak. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Az androgének közvetlen hatása hím patkányok oldalsó hipotalamusz neuronális aktivitására: II. Nyomáscsökkentő vizsgálat. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Az androgének közvetlen hatása az oldalsó hipotalamusz neuronális aktivitására hím patkányokban: I. Mikroionoforetikus vizsgálat. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. A tesztoszteron magon belüli felhalmozódásának az érzékszervi tulajdonságai jutalmazása. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. A tesztoszteronnal kondicionált helypreferencia kifejeződését blokkolja az alfa-flupenthixol perifériás vagy intraabbenbens injekciója. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. A gyors, nemgenomikus jelátviteli út szabályozza a membrán tesztoszteron receptorok aktiválása által kiváltott aktin újraszerveződését. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. A patkány agy: sztereotaxikus koordinátákban. 4th. Academic Press; New York: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Az anabolikus androgén szteroid függőség androgén és opioid receptorokat foglal magában. Az Idegtudományi Társaság 34. Éves ülésének előadása; San Diego, Kalifornia 2004.
- Peters KD, Wood RI. Androgénfüggőség a hörcsögökben: túladagolás, tolerancia és potenciális opioiderg mechanizmusok. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Gyors jelzés androgénreceptor által a prosztata rákos sejtekben. Onkogén. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. A szaglás és a hormonális hatások a hím patkányok alap elülső agyára. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. A tesztoszteron csökkenti a béta-amiloid toxicitást a tenyésztett hippokampusz neuronokban. Agykutatás. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- HG pápa, Jr, Katz DL. Az anabolikus-androgén szteroidok használatának pszichiátriai és orvosi hatásai. Kontrollált vizsgálat az 160 sportolókról. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Az patkány agyában az ösztrogén, a progeszteron és a tesztoszteron membránreceptorjai: fantázia vagy valóság. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Egyszerűen RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Az androgén és ösztrogén mRNS-tartalmú sejtek megoszlása a patkány agyában: In situ hibridizációs vizsgálat. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Az ösztradiol és az ösztradiol-BSA konjugátumok eltérő hatásai. Endokrinológia. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, ösztrogén és androgén G-proteinhez kapcsolt receptorok a csontvelőkben. Szteroidok. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. A tesztoszteron és a nukleusz felhalmozódása során a dopamin a hím szíriai hörcsögben történik. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. A tesztoszteron önszabályozása női hörcsögökben. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Az ösztrogének membrán által kezdeményezett hatása a neuroendokrinológiában: megjelenő alapelvek. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Wood RI. Orális tesztoszteron öninjekciózás hím hörcsögökben: dózis-válasz, önkéntes testmozgás és egyéni különbségek. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. A tesztoszteron megerősítése: intravénás és intracerebroventrikuláris önbeadás hím patkányokban és hörcsögökben. Pszichofarmakológia (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman, SW. Androgénreceptor immunreaktivitás a hím és női szír hörcsög agyban. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Az akkreditált laboratóriumok által jelentett negatív analitikai eredmények. Doppingellenes Világügynökség; Montreal, Kanada: 2006.
- Yamada Y. A tesztoszteron hatása az egységek aktivitására patkány hypothalamusban és a septumban. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, Francia FS, Wilson EM. Az androgén receptor gén egy bázisú mutációja androgén érzéketlenséget okoz a hereban feminizált patkányokban. J. Biol. Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabolikus-androgén szteroidok használata az Egyesült Államokban. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Az androgén stimulálja a mitogén-aktivált protein-kinázt az emberi mellrákos sejtekben. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. A membrán progesztin receptor klónozása, expressziója és jellemzése, és bizonyítékként szolgál a hal petesejtjeinek meiotikus érésében. Proc Natl Acad Sci USA A. 2003;100: 2231-2236. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Zuloaga Főigazgatóság, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. A herék feminizációs mutációjú egerek bizonyítják az androgénreceptorok szerepét a szorongással kapcsolatos viselkedés és a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese szabályozásában. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Az androgénreceptorok szerepe az agy és viselkedés masculinizációjában: amit a here feminizációs mutációjából megtudtunk. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. A herék feminizációs mutációjával (TFM) kezelt patkányok fokozott szorongási mutatókat mutatnak. Az Idegtudományi Társaság 36. Éves ülésének előadása; Atlanta, GA. 2006. Program # 152.118.
;