A metamfetamin a hím patkányok szexuális viselkedését szabályozó neuronok alpopulációira hat (2010)

Neuroscience. 2010 Mar 31, 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Bölcs RA, Lehman MN, Coolen LM.

forrás

Anatómiai és sejtbiológiai tanszék, Schulich Orvostudományi és Fogorvosi Iskola, Nyugat-Ontario Egyetem, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

Absztrakt

A metamfetamin (Meth) rendkívül addiktív stimuláns. A meth-visszaélés általában a szexuális kockázati magatartással és az emberi immunhiány-vírus és a Meth-használók fokozott szexuális vágyával, felkeltésével és szexuális élvezetével jár. Ennek a gyógyszer-nemi kapcsolatnak a biológiai alapja nem ismert. A jelenlegi vizsgálat azt mutatja, hogy a Meth-adagolás hím patkányokban aktiválja a neuronokat a mesolimbikus rendszer agyi régióiban, amelyek részt vesznek a szexuális viselkedés szabályozásában. Közelebbről, a Meth és a párosító ko-aktiváló sejtek a magban és a magban, a bazolaterális amygdala és az anterior cinguláris kéregben. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a jelenlegi hiedelemmel ellentétben a visszaélés gyógyszerei ugyanazokat a sejteket aktiválhatják, mint egy természetes erősítőt, azaz szexuális viselkedést, és ez befolyásolhatják a természetes jutalom kényszerítő keresését.

Kulcsszavak: nukleáris accumbens, bazolaterális amygdala, prefrontális kéreg, kábítószer-visszaélés, szaporodás, függőség

A motivációt és jutalmat a mezolimbikus rendszer, az agyterületek összekapcsolt hálózata szabályozza, melyet a ventrális tegmentális terület (VTA) nukleáris accumbens (NAc), a bazolaterális amygdala és a mediális prefrontális kéreg (mPFC) alkot.Kelley, 2004, Kalivas és Volkow, 2005). Bőséges bizonyíték van arra, hogy a mesolimbikus rendszer aktiválódik mindkét visszaélés anyagára (Di Chiara és Imperato, 1988, Chang és munkatársai, 1997, Ranaldi és munkatársai, 1999) és természetesen jutalmazza a viselkedést, mint a szexuális viselkedés (Fiorino és munkatársai, 1997, Balfour és munkatársai, 2004). A férfiak szexuális viselkedése, és különösen az ejakuláció, nagyon kedvező és erősítő az állatok modelljeiben (Pfaus és munkatársai, 2001). A hímivarú rágcsálók kondicionált hely preferenciát (CPP) fejlesztenek ki a kopulációhoz (Agmo és Berenfeld, 1990, Martinez és Paredes, 2001, Tenk, 2008), és operáns feladatokat lát el, hogy hozzáférjenek egy szexuálisan fogadó nőhöz (Everitt és munkatársai, 1987, Everitt és Stacey, 1987). A bántalmazás kábítószerei is jutalmazzák és erősítik az állatokat, és az állatok megtanulják, hogy önállóan kezeljék az erőszakos anyagokat, beleértve az opiátokat, nikotint, alkoholt és pszichostimulánsokat (Bölcs, 1996, Pierce és Kumaresan, 2006, Feltenstein és lásd, 2008). Bár ismert, hogy mind a kábítószer-visszaélés, mind a szexuális viselkedés aktiválja a mezolimbikus agyterületeket, jelenleg nem világos, hogy a visszaélés kábítószerei befolyásolják-e ugyanazokat a neuronokat, amelyek közvetítik a szexuális viselkedést.

Az elektrofiziológiai vizsgálatok kimutatták, hogy az élelmiszerek és a kokain mind a neuronokat aktiválják a NAc-ben. A két erősítő azonban nem aktiválja ugyanazokat a sejteket a NAc-ben (Carelli és munkatársai, 2000, Carelli és Wondolowski, 2003). Továbbá az étel és a szacharóz önadagolása nem okoz hosszú távú változásokat az elektrofiziológiai tulajdonságokban, ahogyan azt a kokain indukálja (Chen és munkatársai, 2008). Ezzel ellentétben a bizonyítékok összessége arra utal, hogy a férfi szexuális viselkedés és a bántalmazás gyógyszerei ugyanazon mesolimbikus neuronokra hathatnak. A pszichostimulánsok és az opioidok megváltoztatják a nemi viselkedés kifejeződését a hím patkányokban (Mitchell és Stewart, 1990, Fiorino és Phillips, 1999a, Fiorino és Phillips, 1999b). Laboratóriumunk közelmúltbeli adatai azt mutatták, hogy a szexuális élmény megváltoztatja a pszichostimulánsok iránti érzékenységet, amint azt a szenzitizált mozgásszervi válaszok és a d-amfetamin érzékeny jutalomérzékelései bizonyítják szexuálisan tapasztalt állatokban. (Pitchers és munkatársai, 2009). Hasonló reakciót figyeltek meg korábban amfetamin vagy más visszaélésszerű gyógyszerek ismételt expozíciója esetén (Lett, 1989, Shippenberg és Heidbreder, 1995, Shippenberg és munkatársai, 1996, Vanderschuren és Kalivas, 2000). Ezek az eredmények együttesen arra utalnak, hogy a szexuális viselkedés és a visszaélés elleni gyógyszerekre adott válaszok ugyanazokat a neuronokat közvetítik a mezolimbikus rendszerben. A jelen tanulmány első célja tehát a mezolimbikus rendszer neurális aktiválódásának vizsgálata szexuális viselkedéssel és a gyógyszer beadásával azonos állatban. Különösen azt vizsgáltuk, hogy a pszichostimuláns, a metamfetamin (Meth) közvetlenül hat a neuronokra, amelyek általában közvetítik a szexuális viselkedést.

A Meth a világ egyik legszegényebb illegális drogja (NIDA, 2006, Ellkashef és munkatársai, 2008), hogynd gyakran kapcsolódik a megváltozott szexuális viselkedéshez. Érdekes, hogy a Meth-felhasználók a megnövekedett szexuális vágyat és izgalmat, valamint a fokozott szexuális élményt jelentik (Semple és munkatársai, 2002, Schilder és munkatársai, 2005). Ráadásul, A meth visszaélés általában szexuálisan kényszerítő viselkedéssel jár (Rawson és munkatársai, 2002). A felhasználók gyakran számolnak be szexuális partnereikkel, és kevésbé valószínű, hogy védelmet használnak, mint más kábítószer-fogyasztók (Somlai és munkatársai, 2003, Springer és munkatársai, 2007). Sajnos a Meth használatát a szexuális kockázat viselkedésének előrejelzőjeként jelző tanulmányok korlátozottak, mivel nem megerősített önjelentésekre támaszkodnak (Elifson és munkatársai, 2006). Ezért a komplex drog-nemi kapcsolat megértéséhez szükséges egy állatmodellben a Meth által kiváltott szexuális viselkedésbeli változások sejtalapjának vizsgálata.

A fentiekben ismertetett bizonyítékok alapján arra utalnak, hogy a visszaélések és különösen a Meth gyógyszerek a szexuális viselkedés közvetítésében általában részt vevő neuronokra hatnak, a vizsgálat célja a pszichostimuláns Meth szexuális viselkedése által okozott neurális aktiváció vizsgálata.. Ez a tanulmány egy neuroanatómiai technikát valósított meg, amely azonnali korai gének, a Fos és a foszforilált Map Kinase (pERK) immunhisztokémiai vizualizációját alkalmazta, a szexuális viselkedés és a Meth egyidejű neurális aktiválásának kimutatására. A Fos csak a sejtmagban expresszálódik, a neuron aktiválása után maximális 30 – 90 expressziós szint van. Számos bizonyíték van arra, hogy a szexuális aktivitás Fos-expressziót vált ki az agyban (Pfaus és Heeb, 1997, Veening és Coolen, 1998), beleértve a mezokortikolimbikus rendszert (Robertson és munkatársai, 1991, Balfour és munkatársai, 2004). Bizonyíték van arra is, hogy a visszaélés elleni szerek a mesocorticolimbic rendszerben pERK expressziót váltanak ki (Valjent és munkatársai, 2000, Valjent és munkatársai, 2004, Valjent és munkatársai, 2005). A Fos expressziójával ellentétben az ERK foszforilációja rendkívül dinamikus folyamat, és csak az 5 – 20 percekben fordul elő a neuronális aktiválás után. A Fos és a pERK különféle időbeli profiljai ideális markerkészletet alkotnak a következő neuronok aktiválására két különböző ingerrel.

KÍSÉRLETI ELJÁRÁSOK

Tantárgyak

A Charles River Laboratories-ből (Montreal, QC, Kanada) kapott felnőtt hím Sprague Dawley patkányokat (210 – 225 g) két ketrecbe helyeztük standard plexi ketrecekben (otthoni ketrecekben). Az állat helyiségét 12 / 12 h fordított fénycikluson tartottuk (10.00 h). Élelmiszer és víz állt rendelkezésre ad libitum. Az összes vizsgálatot a sötét fázis első felében végezzük, halványvörös megvilágítás mellett. A szexuális viselkedéshez használt stimulus nőstények kétoldalúan ovariektomizáltak mély érzéstelenítésben (13 mg / kg ketamin és 87 mg / kg xylazine), és szubkután implantátumot kaptak, amely 5% ösztradiol-benzoátot (EB) és 95% koleszterint tartalmazott. A szexuális fogékonyságot a 500 μg progeszteron 0.1 ml szezámolajban 4 h szubkután (sc) adagolásával indukáltuk a vizsgálat előtt. Minden eljárást a Nyugat-Ontarioi Egyetem Állatgondozási Bizottsága hagyott jóvá, és megfelel a Kanadai Állat-egészségügyi Tanács által felvázolt irányelveknek.

Kísérleti minták

Kísérletek 1 és 2: A hím patkányoknak (n = 37) engedték, hogy egy fogamzásgátló nővel egy ejakulációt (E) vagy 30 min-t kapjanak, amely öt alkalommal kétszer tiszta vizsgálati ketrecekben (60 × 45 × 50 cm) jött elő. - hetente előkészítő párzási ülések, hogy szexuális élményt szerezzenek. Az utóbbi két ülés során rögzítették a szexuális teljesítmény minden szabványparaméterét, beleértve a következőt: csatolási késleltetés (ML; idő a nő bevezetésétől az első rögzítésig), intromission latencia (IL; idő a női bevezetéstől az első rögzítésig) hüvelyi behatolás), ejakuláció késleltetése (EL; az első intromissiontől az ejakulációig eltelt idő), ejakuláció utáni intervallum (PEI; az ejakulációtól az első későbbi intromizációig eltelt idő), a tartók száma (M) és a behatolások száma (IM) (Agmo, 1997). Minden férfi 1 ml / kg napi 0.9% NaCl (sóoldat; sc) 3 injekciót kapott a vizsgálati napot megelőzően, a kezelés és az injekciók elsajátítása céljából. Egy nappal a vizsgálati nap előtt minden férfit egyedül tartottak. Tapasztalt férfiaknál a Fos-t előzetes szexuális élményhez kapcsolódó feltételes összefüggések indíthatják el.Balfour és munkatársai, 2004). Ezért a végső tesztek során az összes párosítási és vezérlési manipulációt az otthoni ketrecben hajtottuk végre (elkerülve a prediktív kondicionált jeleket), hogy megakadályozzuk a kondicionált-cue-indukált aktiválást a nem módosított kontroll férfiaknál. A férfiak nyolc kísérleti csoportba kerültek, amelyek nem különböztek meg a szexuális teljesítmény bármely mértékében az elmúlt két párosodás során (az adatokat nem ábrázolták). A végső teszt során a férfiakat vagy megengedték, hogy párosodjanak otthonukban, amíg nem mutattak ki ejakulációt (nem), vagy nem kaptak női partneret (nem). Az összes párosított férfit 60 percig perfundáltuk a párosodás megkezdése után, hogy lehetővé tegyük a párosodás által indukált Fos-expresszió elemzését. A férfiak 4 mg / kg Meth vagy 1 ml / kg sóoldat (sc) (n = 4), 10 (1 kísérlet) vagy 15 (2 kísérlet) injekciót kaptak a perfúzió előtt min. MAP kináz. Az adagolás és a perfúzió előtti idő a korábbi jelentések alapján történt (Choe és munkatársai, 2002, Choe és Wang, 2002, Chen és Chen, 2004Mizoguchi és munkatársai, 2004, Ishikawa és munkatársai, 2006). A kontrollcsoportok közé tartoztak olyan férfiak, akik nem párosodtak, de Meth 10-ot (n = 7) vagy 15-ot (n = 5) kaptak az áldozatot megelőzően, vagy sóoldat injekciókat 10 (n = 5) vagy 15 (n = 4) min. . Az áldozatot követően az agyokat immunhisztokémia céljából dolgozták fel.

3 kísérlet: Mivel a 1 és 2 kísérletben nagy Meth dózist alkalmaztunk, további neuroanatómiai kísérletet végeztünk annak vizsgálatára, hogy a szexuális viselkedés és a kisebb Meth dózisfüggő mintázatok az átfedő neurális aktivációra vonatkoznak. Ezt a vizsgálatot az 1 és az 2 kísérletekkel azonos módon végeztük. A végső vizsgálatban azonban a párosodott és nem módosított csoportok (n = 6 mindegyik) 1 mg / kg Meth (sc) 15-et kaptak az áldozat előtt.

4 kísérlet: Annak vizsgálatára, hogy a nemi és a Meth által okozott neurális aktiváció specifikus-e a Meth-re, ez a kísérlet azt vizsgálta, hogy a pszichostimuláns d-amfetamin (Amph) esetében hasonló átfedő neurális aktiválódási minták láthatók-e. Ezt a kísérletet 1 és 2 kísérletekkel azonos módon hajtottuk végre. A végső vizsgálatban azonban a hímeket az áldozat beadása előtt Amph (5 mg / kg) vagy sóoldattal (1 mg / kg) (sc) adtuk be (n = 15). Az áldozatlan férfiak sóoldatot vagy Amph 5-ot kaptak az áldozatot megelőzően. Az 15 – 1 kísérletekben használt kísérleti csoportok áttekintése megtalálható Táblázat 1.

Táblázat 1      

A kísérletekben szereplő kísérleti csoportok áttekintése 1 – 4.

Szövet előkészítése

Az állatokat pentobarbitállal (270 mg / kg; ip) érzéstelenítettük és transzkardiálisan perfundáltuk 5 ml sóoldattal, majd 500 ml 4% paraformaldehidet 0.1 M foszfátpufferben (PB). Az agyakat eltávolítottuk és 1 h-ra szobahőmérsékleten fixáltuk, majd fixáltuk 20% szacharózt és 0.01% nátrium-azidot 0.1 M PB-ben, és 4 ° C-on tároltuk. A koronális metszeteket (35 μm) fagyasztó mikrotomra vágtuk (H400R, Micron, Németország), négy párhuzamos sorozatban gyűjtöttük össze a krioprotektáns oldatban (30% szacharóz és 30% etilén-glikol 0.1 M PB-ben), és további 20 ° C-on tároltuk. feldolgozás.

Immunohisztokémia

Minden inkubációt szobahőmérsékleten, enyhe keverés közben végeztünk. A szabadon lebegő szakaszokat intenzíven mossuk 0.1 M foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS) inkubációk között. A metszeteket 1% H-ban inkubáltuk2O2 10 percre, majd inkubációs oldatban (PBS, amely 0.1% szarvasmarha szérum albumint és 0.4% Triton X-100-t tartalmaz) 1 h-re blokkoltuk.

pERK / Fos

A szövetet egy éjszakán át egy nyúl poliklonális ellenanyaggal inkubáltuk p42 és p44 térkép kinázok ERK1 és ERK2 (pERK; 1: 400 kísérlet 1 tétel 19; 1: 4.000 kísérlet 2 és 3 tétel 21; Cell Signaling Cat # 9101; 1 h inkubációk biotinilált szamár anti-nyúl IgG-vel (1: 500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) és avidin-torma peroxidáz komplex (ABC Elite; 1: 1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Ezután a szövetet 10 percig inkubáltuk biotinilált tiramiddal (BT; 1: 250 PBS + 0.003% H2O2; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) és 30 percre Alexa 488 konjugált strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Ezután a szövetet egy éjszakán át inkubáltuk egy c-Fos elleni nyúl poliklonális antitesttel (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), majd 30 min inkubálás kecske anti-nyúl Alexa 555-nel (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). A festést követően a szekciókat alaposan átmossuk 0.1 M PB-ben, üveglemezekre szerelve, 0.3% zselatin ddH-ban.20 és egy fedőközeggel (Gelvatol) fedett, amely elhalványulást okozó 1,4-diazabiciklo (2,2) oktánt tartalmaz (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Az immunhisztokémiai kontrollok közé tartoztak bármelyik vagy mindkét primer antitest elhagyása, ami a megfelelő hullámhosszon történő jelölés hiányát eredményezte.

Az adatok elemzése

Szexuális viselkedés

Mind a négy kísérletben a szexuális teljesítmény standard paramétereit a fentiek szerint rögzítettük és varianciaanalízissel (ANOVA) elemeztük. A szexuális viselkedés adatelemzése az utolsó tesztnapon nem mutatott szignifikáns különbséget a csoportok között a szexuális teljesítmény bármely paraméterében.

pERK / Fos sejtek száma

A Fos és pERK egy- és kettős jelölt sejtjeit az NAc mag- és héj alrégiók, a basolaterális amygdala (BLA), a poszterodorális mediális amygdala (MEApd), a központi amygdala (CeA), a mediális preoptikus mag (MPN), posteromedialis és a stria terminalis (BNSTpm és BNSTpl) posterolateralis ágmagja és az mPFC elülső cingulált területe (ACA), prelimbic (PL) és infralimbic (IL) alrégiói. A képeket egy lehűtött CCD-kamerával (Microfire, Optronics) rögzítettük, amely Leica mikroszkóphoz (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Németország) és Neurolucida szoftverhez (MicroBrightfield Inc) volt rögzítve, minden objektumhoz rögzített kamerabeállításokkal (10x célokkal). A neurolucida szoftver használatával az elemzési területeket tereptárgyak alapján határozták meg (Swanson, 1998) minden egyes agyi régióban egyedülálló (lásd. \ t ábra 1). A NAc mag és a héj kivételével minden területen standard elemzési területeket alkalmaztunk. Az utóbbi területeken a pERK és a Fos expresszió nem volt homogén és a patch-szerű mintákban jelent meg. Ezért a teljes magot és a héjat a tájékozódási pontok (vázoldali kamra, elülső szabadidő és Calleja szigetei) alapján vázolták. A vizsgálati területek nem különböztek meg a kísérleti csoportok között, és 1.3 mm volt2 a NAc magban és a héjban. A többi terület standard elemzési területei: 1.6 mm2 a BLA, az 2.5 és az 2.25 mm2 a MEApd és a CeA, 1.0 mm2 az MPN-ben, 1.25 mm2 a BNST és az mPFC alrégiókban és az 3.15 mm-ben2 a VTA-ban. Két részt két állatra számoltunk kétoldalúan minden egyes agyrégióra, és kiszámítottuk a pERK és Fos egy- és kettős címkével ellátott sejtek számát, valamint a Fos markert expresszáló pERK sejtek százalékos arányát. A kísérletekhez 1, 2 és 4 csoportok átlagait összehasonlítottuk kétirányú ANOVA-val (faktorok: párzás és gyógyszer) és Fisher LSD-jénél. post hoc összehasonlítások az 0.05 szignifikancia szintjén. A 3 kísérlet esetében a csoport átlagokat összehasonlítatlan t-tesztekkel hasonlítottuk össze az 0.05 szignifikancia szintjén.

ábra 1      

Az analízis agyterületeit bemutató sematikus rajzok és képek. A feltüntetett elemzési területek az egyes agyi régiókban egyedülálló tereptárgyakon alapultak, a kísérleti csoportok között nem különböztek, és 1.25 mm-esek voltak.2 mPFC alrégiókban (a), 1.3 mm2 a ...

képek

Digitális képek a ábra 3 a fényképezőgépet egy Leica mikroszkóphoz (DM340B) csatlakoztatott CCD kamerával (DFC 500FX, Leica) rögzítették, és az Adobe Photoshop 9.0 szoftverbe importálták (Adobe Systems, San Jose, CA). A képek nem módosultak, kivéve a fényerő beállítását.

ábra 3      

Az egyes kísérleti csoportok Fos (piros; a, d, g, j) és pERK (zöld; b, e, h, k) esetében immunszilárdságú NAc szakaszok reprezentatív képei: Nem szex + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i) és Sex + Meth (j, k, l). A jobb oldali panelek ...

EREDMÉNYEK

A limbikus rendszer neurális aktiválása a szexuális viselkedés és a meth adminisztráció segítségével

1 kísérlet: A páros indukált Fos és Meth által indukált pERK egyedek és kettős jelölésű sejtek vizsgálata férfiaknál, akik Meth 10 percet kaptak az áldozatot megelőzően, az MPN, a BNSTpm, a NAc mag és a héj, a BLA, a VTA, a párosodás által indukált Fos-t tárták fel és az mPFC összes alrégiója, összhangban az előzetes vizsgálatokkal, amelyek igazolják a párosodott Fos kifejezést ezeken a területeken (Baum és Everitt, 1992, Pfaus és Heeb, 1997, Veening és Coolen, 1998, Hull és munkatársai, 1999). Meth adagolás 10 perccel az indukált pERK feláldozása előtt NAc magban és héjában, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl és mPFC régiókban, összhangban más pszichostimulánsok által kiváltott aktivációs mintákkal (Valjent és munkatársai, 2000, Valjent és munkatársai, 2004, Valjent és munkatársai, 2005).

Ezenkívül a neurális aktiválódás szexuális viselkedés és Meth együttes expressziójának három mintáját figyelték meg: Először az agyterületeket azonosították, ahol a nemek és a gyógyszerek aktiválták a nem átfedő neurális populációkat (Táblázat 2). Pontosabban, a CeA, MEApd, BNSTpl és mPFC esetében szignifikáns növekedés volt mind a gyógyszer által indukált pERK (F (1,16) = 7.39–48.8; p = 0.015- <0.001), mind a nem által indukált Fos (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; p <1,16). Ezekben a régiókban azonban nem volt szignifikáns növekedés a kettősen jelölt neuronokban a párosított Meth-vel kezelt férfiaknál. Az egyetlen kivétel a MEApd volt, ahol a párosodás hatását a kettősen jelölt sejtek számára találták (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). A gyógyszeres kezelésnek azonban nem volt általános hatása, és a kettős jelölés a meth-csoporttal kezelt csoportokban nem volt szignifikánsan magasabb, mint a sóoldattal kezelt csoportokban, ezért nem a gyógyszer okozta (Táblázat 2). Másodszor, az agyterületeket azonosították, ahol a neurális aktiválást csak párzás indukálta (Táblázat 3). Pontosabban, az MPN, a BNSTpm és a VTA csak párosítással aktiválódott, és jelentősen megnövekedett a párosodás által indukált Fos (F (1,16) = 14.99 – 248.99; p ≤ 0.001), de nem Meth-indukált pERK.

Táblázat 2      

A párosodás által indukált Fos és Meth által indukált pERK expresszió áttekintése az agyi területeken, ahol a nemek és a gyógyszerek aktiválják a nem átfedő neurális populációkat.
Táblázat 3      

A párosodás által indukált Fos és Meth által indukált pERK expresszió áttekintése az agyi területeken, ahol a neurális aktivációt csak párosodás indukálta.

Végül az agyterületeket találtuk, ahol a nemek és a gyógyszerek aktiválták a neuronok átfedő populációit (ábra 2 és a and3) .3). Az NAc magban és a héjban, a BLA-ban és az ACA-ban a párzás (F (1,16) = 7.87–48.43; p = 0.013- <0.001) és a gyógyszeres kezelés (F (1,16) = 6.39–52.68) általános hatásai voltak. 0.022; p = 0.001- <1,16), valamint a két tényező közötti kölcsönhatás (F (5.082) = 47.27–0.04; p = 0.001– <0.027; nincs szignifikáns kölcsönhatás az ACA-ban) mindkettőt expresszáló sejtek számán párzás által indukált Fos és Meth által indukált pERK. A post hoc elemzésből kiderült, hogy a kettősen jelölt idegsejtek száma szignifikánsan magasabb volt a párosított Meth-injekciójú hímekben, mint a párosítatlan Meth-kezelt (p = 0.001- <0.001) vagy párosított sóoldattal kezelt (p = 0.001- <XNUMX) férfiakéábra 2 és a and3) .3). Amikor az adatokat a hatóanyaggal aktivált neuronok százalékos arányában fejeztük ki, 39.2 ± 5.3% az NAc magban, 39.2 ± 5.8% a NAc héjban, 40.9 ± 6.3% a BLA-ban, és 50.0 ± 5.3% ACA neuronok aktiválódtak mind a párzás, mind a Meth.

ábra 2      

Szexindukált Fos és Meth által indukált pERK expresszió NAc, BLA és ACA neuronokban 10 min 4 mg / kg Meth beadása után. Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) és kettős (c, f, i, l) jelzett sejtek átlagos száma ± sem a NAc magban (a, ...

Váratlan megfigyelés volt, hogy a szexuális viselkedés a Meth által kiváltott pERK-t érinti. Bár a Meth szignifikánsan indukált pERK-szintet mind párosított, mind nem módosított Meth-injektált csoportokban, a NAc-ben, a BLA-ban és az ACA-ban a pERK-jelölés szignifikánsan alacsonyabb volt a Meth-injektált férfiaknál, a nem módosított Meth-injektált férfiakhoz képest (2b, e, h, k ábra; p = 0.017- <0.001). Ez a megállapítás tovább alátámaszthatja azt a hipotézist, hogy a nemek és a gyógyszerek ugyanazon neuronokra hatnak, de a gyógyszerek felvételében vagy metabolizmusában a párosodás által kiváltott változásokra is utalhat, amelyek megváltoztatják a Methre adott idegválaszokat. Annak megvizsgálására, hogy a szexuális viselkedés eltérő-e a gyógyszer által indukált aktiváció időbeli mintájára, a NAc, a BLA és az ACA szekciókat a későbbi időpontban (15 min) feláldozott férfiakra festettük (2 kísérlet).

2 kísérlet: Az egy- és kettős jelölésű sejtek vizsgálata megerősítette a fent leírt megállapításokat, hogy a szexuális viselkedés és az azt követő Meth 15-expozíció az áldozatot megelőzően jelentősen megnövelte a Fos-t és a pERK-t az NAc-magban és a héjban, a BLA-ban és az ACA-ban. Ezen túlmenően ezeken a területeken ismét a párzási indukálta Fos és a Meth által indukált pERK együttes expressziója következett be.ábra 4; párzási hatás: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; gyógyszerhatás: F (1,12) = 14.11–54.41; p = 0.003- <0.001). A kettősen jelölt idegsejtek száma párosított Meth-injekciójú hímeknél szignifikánsan magasabb volt a párosítatlan Meth-vel kezelt (p <0.001) vagy párosított sóoldattal kezelt férfiaknál (p <0.001). Amikor az adatokat a gyógyszer által aktivált idegsejtek százalékában fejeztük ki, 47.2 ± 5.4% (NAc mag), 42.7 ± 7.6% (NAc héj), 36.7 ± 3.7% (BLA) és 59.5 ± 5.1% (ACA) aktivált neuronok párzás útján Meth is aktiválta. Ezenkívül a gyógyszer által kiváltott pERK nem különbözött a párosodott és párosítatlan állatok között (4b, e, h, k ábra), az ACA kivételével minden területen (p <0.001). Ezek az adatok azt jelzik, hogy a szexuális viselkedés valóban megváltoztatja a pERK indukciójának időbeli mintázatát Meth által.

ábra 4      

Szexindukált Fos és Meth által indukált pERK expresszió NAc, BLA és ACA neuronokban 15 min 4 mg / kg Meth beadása után. Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) és kettős (c, f, i, l) jelzett sejtek átlagos száma ± sem a NAc magban (a, ...

Neurális aktiválás szexuális viselkedést követően és 1 mg / kg Meth

Eddig az eredmények azt mutatták, hogy a szexuális viselkedés és az 4 mg / kg Meth aktivált átfedő neuronok populációi az NAc magban és a shellben, a BLA-ban és az ACA-ban. To A gyógyszeradagolás hatásának vizsgálata az aktiváció átfedésére, a neurális aktiváció mintáit is tanulmányozták egy alacsonyabb Meth dózis alkalmazásával. A NAc magot és a héjat, a BLA-t és az ACA-t a nemi és a Meth által indukált aktiválásra analizáltuk. Valójában a szexuális viselkedés és az azt követő Meth expozíció jelentős növekedést eredményezett a Fos és a pERK immunjelölésében az NAc mag- és héj alrégiókban, a BLA-ban, valamint az mPFC ACA régiójának neuronjaiban.ábra 5). Érdekes, hogy az alacsonyabb Meth dózis hasonló számú pERK-vel jelölt neuront eredményezett, amint az 4 mg / kg Meth indukálta a vizsgált négy agyi régióban. Ennél is fontosabb, hogy a NAc mag és a héj, a BLA és az ACA szignifikáns növekedést mutatott a kettős címkével ellátott sejtek számában (5c, f, i, l) összehasonlítva a párosítatlan Meth-injekciójú hímekkel (p = 0.003- <0.001). Amikor az adatokat a gyógyszer által aktivált idegsejtek százalékában fejeztük ki, az NAc magban és a héjban 21.1 ± 0.9% és 20.4 ± 1.8%, a BLA-ban 41.9 ± 3.9%, az ACA neuronokból pedig 49.8 ± 0.8% aktiválódott nemi úton és Meth.

ábra 5      

Szexindukált Fos és Meth által indukált pERK expresszió NAc, BLA és ACA neuronokban 15 min 1 mg / kg Meth beadása után. Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) és kettős (c, f, i, l) jelzett sejtek átlagos száma ± sem a NAc magban (a, ...

Neurális aktiváció a szexuális viselkedés és a d-amfetamin beadása után

Annak ellenőrzésére, hogy a fenti eredmények specifikusak-e a Meth-re, további kísérletet végeztünk a párosodás és az amfinnal indukált neurális aktiváció vizsgálatára. A pERK és a Fos egy- és kettős címkézett sejtjeinek elemzése azt mutatta, hogy a szexuális viselkedés és az azt követő expozíció Amph hatására jelentősen megnövekedett a Fos és a pERK immunjelölés az NAc magban és a héjában és a BLA-ban (ábra 6; párzási hatás: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; gyógyszerhatás: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047- <0.001). Ezenkívül a kettősen jelölt idegsejtek száma szignifikánsan magasabb volt a párosodott Amph-tal kezelteknél a párosítatlan Amph-tal kezelt (p = 0.009- <0.001) vagy párosított sóoldattal kezelt (p = 0.015- <0.001) hímeknél6c, f, i). Amikor az adatokat a hatóanyaggal aktivált neuronok százalékos arányában fejeztük ki, 25.7 ± 2.8% és 18.0 ± 3.2% a NAc magban és a héjban, és az 31.4 ± 2.0% -át a BLA neuronok aktiválják mind párosítás, mind az Amph. Az mPFC ACA régiója jelentős mértékű párosodást okozó Fos-t mutatott (6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Meth-től eltérően azonban az Amph nem eredményezte a gyógyszer által kiváltott pERK-szint jelentős növekedését az ACA-ban (6k) vagy kettős címkével ellátott neuronok száma az ACA-ban (6l) összehasonlítva mind párosított, mind nem módosított sóoldatú férfiakkal.

ábra 6      

Szexindukált Fos és Amph indukált pERK expresszió NAc, BLA és ACA neuronokban 15 min 5 mg / kg Amph beadása után. Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) és kettős (c, f, i, l) jelzett sejtek átlagos száma ± sem a NAc magban (a, ...

VITA

A jelenlegi tanulmány celluláris szinten bizonyítja, hogy a neurális aktiváció átfed a természetes megerősítő szexuális viselkedés és a pszichostimuláns Meth között. Ezért ezek az adatok azt mutatják, hogy nemcsak a gyógyszerek ugyanazon agyrégiókra hatnak, amelyek szabályozzák a természetes jutalmat, hanem valójában a gyógyszerek ugyanazokat a sejteket aktiválják, amelyek részt vesznek a természetes jutalom szabályozásában. Pontosabban kimutattuk, hogy a szexuális viselkedés és a Meth együttesen aktiválta az mPFC NAc magjában és héjában, a BLA-ban és az ACA régióban lévő neuronok populációját, azonosítva a potenciális helyeket, ahol a Meth befolyásolhatja a szexuális viselkedést.

A jelenlegi megállapítás, hogy a Meth szexuális viselkedése és beadása aktiválja az NAc, a BLA és az ACA neuronok átfedő populációit, ellentétben áll más vizsgálatok eredményeivel, amelyek azt mutatják, hogy a NAc neuronok különböző populációi gyógyszer és természetes jutalmat kódolnak.

Pontosabban, az elektrofiziológiai vizsgálatok, amelyek a természetes jutalmak önértékelésén (étel és víz) és az intravénás kokainon végzett neurális aktivációt hasonlították össze, azt jelezték, hogy a kokain önadagolása aktiválta a neuronok differenciált, nem átfedő populációját, amely általában nem reagált a vízben való reagálás során. és az élelmiszer megerősítése (92%). Csak az aknális neuronok 8% -a mutatott aktivációt mind a kokain, mind a természetes jutalom miatt (Carelli és munkatársai, 2000).

Ezzel ellentétben a NAc sejtjeinek többsége (65%) különböző természetes jutalmakkal (étel és víz) mutatott aktiválódást, még akkor is, ha az egyik erősítő ízesebb (szacharóz) (Roop és munkatársai, 2002).

Több tényező is hozzájárult a jelenlegi eredményekkel való eltéréshez. Először is, különböző technikai megközelítéseket alkalmaztunk a neurális aktivitás vizsgálatára. A jelenlegi vizsgálat egy neuroanatómiai módszert használt az egyidejű neurális aktiválás kimutatására két különböző ingerrel, kétfázisú fluoreszcens immunocitokémia alkalmazásával Fos és pERK esetén, lehetővé téve az egysejtes aktiváció vizsgálatát az agyterületek nagy szakaszaiban. Ezzel ellentétben a Carelli és munkatársai által végzett tanulmányok elektrofiziológiai felvételeket alkalmaztak, amelyek az állatok viselkedésére vonatkozó NAc-re korlátozódtak, hogy foglalkozzanak azzal, hogy a visszaélés elleni gyógyszerek önadagolása aktiválja-e a természetes jutalmak által használt neurális áramkört.

Másodszor, a jelenlegi tanulmány más természetes jutalmat, azaz szexuális viselkedést vizsgált a korábbi tanulmányokhoz képest, amely korlátozott patkányokban használt élelmiszert és vizet (Carelli, 2000). Az étel és a víz kevésbé jutalmazó értéket jelenthet, mint a párzás. A szexuális viselkedés rendkívül előnyös, és a patkányok könnyen képeznek CPP-t (Agmo és Berenfeld, 1990, Martinez és Paredes, 2001, Tenk, 2008). Bár a diéta korlátozott patkányok CPP-t képeznek a vízben (Agmo és munkatársai, 1993, Perks és Clifton, 1997) és az élelmiszer (Perks és Clifton, 1997), da korlátlan patkányokat előnyösen CPP-t kell fogyasztani, és ízletesebb ételeket készíteni (Jarosz és munkatársai, 2006, Jarosz és munkatársai, 2007).

Harmadszor, tanulmányainkban a korábbi tanulmányokhoz képest különböző bántalmazási drogokat alkalmaztunk, a kokain helyett metamfetamin és amfetamin felhasználásával. A jelen eredmények azt mutatják, hogy a Meth és kisebb mértékben az amfetamin kifejezetten a szexuális viselkedés által aktivált neuronok aktiválódását eredményezte. A kábítószer-tapasztalatok is szerepet játszhattak eredményeinkben. A jelenlegi vizsgálatokban szexuálisan tapasztalt állatokat alkalmaztak, de a kábítószer-naivokat. Ezzel ellentétben a Carelli és munkatársai elektrofiziológiai tanulmányai „jól képzett” állatokat használtak, amelyek ismételt kitettséget kaptak a kokainnak.

Ezért lehetséges, hogy a szexuális viselkedés által aktivált neuronok Meth által kiváltott aktivációja megváltozik a droggal tapasztalt patkányokban. Laboratóriumunk előzetes tanulmányai azt mutatják, hogy a kábítószer-tapasztalat nem valószínű, hogy a szexuális viselkedés és a Meth-kezelés a Meth-vel együtt aktivált hasonló százalékos kábítószerrel aktivált neuronok kezelésében jelentős tényező, mint a jelenlegi vizsgálatban. (20.3 ± 2.5% NAc magban és 27.8 ± 1.3% NAc héjban; Frohmader és Coolen, nem publikált megfigyelések).

Végül, a jelenlegi tanulmány a gyógyszerek „közvetlen” hatását vizsgálta passzív beadást alkalmazva. Ezért a jelenlegi elemzés nem tár fel olyan információkat, amelyek a drogkeresésben résztvevő neurális áramkörökre vagy a kábítószer-jutalmakkal kapcsolatos jelekre vonatkoznak, hanem a gyógyszer farmakológiai hatásából eredő neurális aktivitást tárja fel.. A korábbi elektrofiziológiai vizsgálatokban a megerősített válaszok után másodperceken belül előforduló NAc neurális aktivitás nem a kokain farmakológiai hatásának eredménye, hanem nagymértékben függ az önadagolási paradigmán belüli asszociatív tényezőktől (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Konkrétan, a NAc neurális aktivitását befolyásolja az intravénás kokainszállítással kapcsolatos inger-független megjelenések, valamint a viselkedési paradigmában rejlő instrumentális kontingenciák (pl. Karnyomás).Carelli, 2000, Carelli és Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli és Wightman, 2004). Összefoglalva, a természetes és gyógyszeres jutalmakkal való együttaktiválás eredményeink specifikusak lehetnek a szexuális viselkedés aktiválására és passzívan beadott Meth és Amph.

Meth és nemi aktivált átfedő neuronok populációi az NAc magban és a héjban dózisfüggő módon. A NAc társaktivált neuronjai közvetíthetik a Meth lehetséges hatásait a szexuális viselkedés motivációjára és jutalmazó tulajdonságaira, mivel a NAc sérülései megzavarják a szexuális viselkedést (Liu és munkatársai, 1998, Kippin és munkatársai, 2004). Ezen túlmenően ezek a neuronok potenciálisan a dózisfüggő gyógyszerhatásoknak a párzásra gyakorolt ​​hatására, mivel az alacsonyabb Meth dózis (1 mg / kg) csökkentette a kettős jelölt sejtek számát 50% -kal szemben a magasabb Meth dózishoz képest (4 mg / kg). kg). Bár ez a vizsgálat nem azonosítja az együtt aktivált neuronok kémiai fenotípusát, a korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy a kábítószer-indukált pERK és Fos expresszió a NAc-ben mind a dopamin (DA), mind a glutamát receptoroktól függ.Valjent és munkatársai, 2000, Ferguson és munkatársai, 2003, Valjent és munkatársai, 2005, Sun és munkatársai, 2008). Bár nem világos, hogy a párosodás által okozott neurális aktiváció a NAc-ben ezektől a receptoroktól függ, ezt más agyi régiókban is kimutatták, különösen a mediális preoptikai területen (Lumley és Hull, 1999, Dominguez és munkatársai, 2007). TA Meth a dopamin és glutamát receptorok aktiválásával a szexuális viselkedés során aktivált neuronokra is hathat. A NAc glutamát szerepe a szexuális viselkedésben jelenleg nem tisztázott, de megállapították, hogy a DA kritikus szerepet játszik a szexuális viselkedés motivációjában (Hull és munkatársai, 2002, Hull és munkatársai, 2004, Pfaus, 2009). A mikrodialízis vizsgálatokban a férfiak szexuális viselkedésének étvágygerjesztő és fogyasztó fázisai során a NAc DA efflux növekedését tapasztalták (Fiorino és Phillips, 1999a, Lorrain és munkatársai, 1999) és a mesolimbikus DA efflux korrelált a patkány szexuális viselkedésének megkezdésének és fenntartásának megkönnyítésével (Pfaus és Everitt, 1995). Továbbá a DA manipulációs vizsgálatok azt mutatják, hogy a NA antagonisták gátolják a szexuális viselkedést, míg az agonisták megkönnyítik a szexuális viselkedés megkezdésétr (Everitt és munkatársai, 1989, Pfaus és Phillips, 1989). Így a Meth befolyásolhatja a szexuális viselkedés motivációját a DA receptorok aktiválásával.

A NAc-vel ellentétben a BLA-ban és az ACA-ban a kettős jelölésű sejtek száma a Meth-dózistól függetlenül viszonylag változatlan maradt. A BLA kritikus a diszkrét asszociatív tanulás szempontjából, és erősen részt vesz a kondicionált megerősítésben és a jutalom értékelésében az instrumentális válaszadás során (Everitt és munkatársai, 1999, Cardinal és munkatársai, 2002, Lásd 2002). A BLA sérült patkányok csökkentett karnyomással rendelkeznek az élelmiszerekkel párosított kondicionált ingerekhez.Everitt és munkatársai, 1989) vagy szexuális megerősítés (Everitt és munkatársai, 1989, Everitt, 1990). Ezzel szemben ez a manipuláció nem befolyásolja a táplálkozás és a szexuális viselkedés fogyasztási fázisát (Cardinal és munkatársai, 2002). A BLA kulcsszerepet játszik a gyógyszer stimulusokkal kapcsolatos kondicionált ingerek emlékezetében is (Grace és Rosenkranz, 2002, Laviolette és Grace, 2006). A BLA sérülése vagy farmakológiai inaktiválása blokkolja a megszerzést (Whitelaw és munkatársai, 1996) és kifejezés (Grimm és See, 2000) kondicionált-meggyógyított kokain-visszaállítás, miközben nem befolyásolja a kábítószer-kezelés folyamatát. Továbbá, A közvetlenül a BLA-ba bejuttatott amf hatásos gyógyszerek helyreállítását eredményezi a kondicionált jelek jelenlétében (Lásd et al., 2003). Ezért lehetséges, hogy a BLA-ban a pszichostimuláns DA-transzmisszió fokozott érzelmi érzékenységet és keresést eredményez. (Ledford és munkatársai, 2003) a szexuális jutalmat, ezáltal hozzájárulva a Meth-bántalmazók által jelentett fokozott szexuális vezetéshez és vágyhoz (Semple és munkatársai, 2002, Zöld és Halkitis, 2006).

Az ACA-ban a nem-aktivált neuronok neurális aktiválása dózisfüggetlen és a Meth-re specifikus volt, mivel az Amph nem volt megfigyelhető. Bár a Meth és az Amph hasonló szerkezeti és farmakológiai tulajdonságokkal rendelkezik, a Meth egy erősebb pszichostimuláns, mint az Amph hosszabb ideig tartó hatásokkal (NIDA, 2006). Goodwin és mtsai. kimutatta, hogy a Meth nagyobb DA effluxot termel, és gátolja a lokálisan alkalmazott DA clearance-ét hatékonyabban a patkány NAc-ben, mint az Amph. Ezek a jellemzők hozzájárulhatnak a Meth addiktív tulajdonságaihoz az Amph-hoz képest.Goodwin és munkatársai, 2009) és talán a két gyógyszer között megfigyelt neurális aktivációs különbségek. Nem világos azonban, hogy az eredmények különböző mintái az alkalmazott dózisok hatásossági különbségei és az alkalmazott dózisok hatásossági különbségei, és további vizsgálatok szükségesek-e.

A Meth és a szex együttes aktiválása nem volt megfigyelhető az mPFC (IL és PL) más alrégióiban. A patkányokban az ACA-t széles körben tanulmányozták étvágygerjesztő feladatok alkalmazásával, amelyek támogatják az inger-megerősítő szervezetek szerepét (Everitt és munkatársai, 1999, Lásd 2002, Cardinal és munkatársai, 2003). Bőséges bizonyíték van arra, hogy az mPFC részt vesz a kábítószer-vágyakozásban és a kábítószer-keresés és a kábítószer-viselkedés viselkedésében mind az emberekben, mind a patkányokban (Grant és munkatársai, 1996, Childress és munkatársai, 1999, Capriles és munkatársai, 2003, McLaughlin és See, 2003, Shaham és munkatársai, 2003, Kalivas és Volkow, 2005). énEzzel párhuzamosan azt javasoljuk, hogy az ismételt kábítószer-expozíció által okozott mPFC diszfunkció felelős a csökkent impulzus-szabályozásért és a drogfüggő viselkedés fokozódásáért, amint azt számos függőségben megfigyelték (Jentsch és Taylor, 1999). Laboratóriumunk legfrissebb adatai azt mutatták, hogy az mPFC elváltozások a szexuális viselkedés folyamatos keresését eredményezik, amikor ez egy elrettentő ingerrel társult. (Davis és munkatársai, 2003). Annak ellenére, hogy ez a tanulmány nem vizsgálta az ACA-t, támogatja azt a hipotézist, hogy az mPFC (és az ACA kifejezetten) a Meth hatását közvetíti a szexuális viselkedés gátló hatásának elvesztése miatt, amint azt Meth visszaélők jelentették (Salo és munkatársai, 2007).

Összefoglalva, ezek a tanulmányok együttesen elsődleges fontosságú lépést jelentenek abban, hogy jobban megértsük, hogy a visszaélések milyen hatással vannak a természetes nyereségeket közvetítő neurális útvonalakra. Ezen túlmenően ezek a megállapítások azt mutatják, hogy ellentétben azzal a meggyőződéssel, hogy a visszaélés drogjai nem aktiválják ugyanazokat a sejteket a mesolimbikus rendszerben, mint természetes jutalom, Meth és kisebb mértékben Amph, ugyanazokat a sejteket aktiválja, mint a szexuális viselkedést. Ezek az együttaktivált idegpopulációk viszont befolyásolhatják a hatóanyag-expozíció utáni természetes jutalom keresését. Végül a tanulmány eredményei jelentősen hozzájárulhatnak a függőség alapjainak általános megértéséhez. A hasonlóságok és különbségek összehasonlítása, valamint a szexuális viselkedés által kiváltott mesolimbikus rendszer neurális aktiválásában bekövetkezett változások a visszaélések kábítószerekkel szemben jobban megérthetik az anyaggal való visszaélést és a természetes jutalom megváltozását.

Köszönetnyilvánítás

Ezt a kutatást a Nemzeti Egészségügyi Intézetek R01 DA014591 és a kanadai Egészségügyi Kutatóintézetek RN 014705 támogatásával támogatta az LMC-nek.

Rövidítések

  • ABC
  • avidin-biotin – torma peroxidáz komplex
  • ACA
  • elülső cingulációs terület
  • AMPH
  • d-amfetamin
  • BLA
  • basolaterális amygdala
  • BNSTpl
  • a stria terminalis posterolateralis ágmagja
  • BNSTpm
  • a stria terminalis posteromedial ágy magja
  • BT
  • biotinilált tyramid
  • CeA
  • cental amygdala
  • CPP
  • kondicionált helypreferencia
  • E
  • ejakuláció
  • EL
  • ejakuláció késleltetése
  • IF
  • infralimbikus terület
  • IL
  • intromission latencia
  • IM
  • beengedés
  • M
  • felmászik
  • MAP kináz
  • mitogén-aktivált protein kináz
  • MEApd
  • posterodorsalis medialis amygdala
  • Meth
  • metamfetamin
  • ML
  • késleltetés
  • mPFC
  • mediális prefrontális kéreg
  • MPN
  • mediális preoptikus mag
  • NAc
  • Accumbens
  • PB
  • foszfátpuffer
  • PBS
  • foszfát pufferolt sóoldat
  • PEI
  • ejakulációs intervallum után
  • felfrissít
  • foszforilált MAP kináz
  • PL
  • prelimbikus terület
  • VTA
  • ventrális tegmentális terület

Lábjegyzetek

Kiadói nyilatkozat: Ez egy PDF-fájl egy nem szerkesztett kéziratból, amelyet közzétételre fogadtak el. Ügyfeleink szolgálataként a kézirat korai változatát nyújtjuk. A kéziratot másolják, megírják és felülvizsgálják a kapott bizonyítékot, mielőtt a végleges idézhető formában közzéteszik. Kérjük, vegye figyelembe, hogy a gyártási folyamat során hibák észlelhetők, amelyek hatással lehetnek a tartalomra, és minden, a naplóra vonatkozó jogi nyilatkozat vonatkozik.

Referenciák

  1. Agmo A. Férfi patkány szexuális viselkedése. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. A hím patkány ejakulációjának megerősítése: az opioidok és a dopamin szerepe. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padova M, Velazquez G. Az ivóvíz által termelt jutalom és megerősítés: az opioidok és a dopamin receptor altípusok szerepe. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. A szexuális viselkedés és a nemekkel kapcsolatos környezeti jelek aktiválják a mesolimbikus rendszert hím patkányokban. Neuropsychop. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. A c-fos fokozott expressziója a mediális preoptic területen a párosodás után a hím patkányoknál: az afferens bemenetek szerepe a mediális amygdala és a midrain központi centrális mezőből. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. A prefrontális kéreg szerepe a stressz és a kokain által indukált kokainkérés visszaállításában patkányokban. Pszichofarmakológia (Berl) 2003: 168: 66 – 74. [PubMed]
  7. RN bíboros, Parkinson JA, J csarnok, Everitt BJ. Érzelem és motiváció: az amygdala, a ventrális striatum és a prefrontális kéreg szerepe. Idegtudományi és biológiai viselkedési vélemények. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. RN bíboros, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Az elülső cinguláris kéreg szerepe a Pavloviás kondicionált ingerek viselkedésének szabályozásában patkányokban. Viselkedési idegtudomány. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Az akumbens sejtek tüzelésének aktiválása a kokain-leadással kapcsolatos ingerekkel az önadagolás során. Szinapszis. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. A nukleusz felhalmozza a sejtlövéseket a kokain célirányos viselkedése során, szemben a „természetes” megerősítéssel. Élettan és viselkedés. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Az Accumbens neuronok szelektív aktiválása kokainhoz kapcsolódó ingerekkel a víz / kokain többszöri ütemezés során. Agykutatás. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Bizonyíték arra vonatkozóan, hogy a nukleinságok különválasztják a kokainot a „természetes” (víz és élelmiszer) jutalommal szemben. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funkcionális mikrocircuit a kábítószerfüggőség mögötti akumbensekben: a viselkedés közbeni valós idejű jelzésből származó betekintés. Jelenlegi vélemény a neurobiológiában. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. A kokain szelektív kódolása a nukleáris accumbens neuronok által termelt természetes jutalmakkal nem kapcsolódik a krónikus gyógyszer expozícióhoz. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronális válaszok a prefrontális kéregben és a magvakban a heroin önadagolása során szabadon mozgó patkányokban. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain, de nem természetes jutalom önigazgatás és passzív kokaininfúzió A VTA-ban Persistent LTP-t állít elő. Idegsejt. 2008; 59: 288-297. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Továbbfejlesztett Cdk5 aktivitás és p35 transzlokáció az akut és krónikus metamfetamin kezelt patkányok Ventral Striatumjában. Neuropsychop. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbikus aktiváció a cue-indukált kokain-vágy során. J J Pszichiátria. 1999; 156: 11-18. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Az amfetamin növeli az extracelluláris jelszabályozott kináz és a transzkripciós faktorok foszforilációját a patkány striatumban az I. csoport metabotróp glutamát receptorain keresztül. Neuropsychop. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. A CaMKII szabályozza az amfetamin által indukált ERK1 / 2 foszforilációt striatális neuronokban. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. A viselkedési neuroendokrinológia társadalma. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormonok és viselkedés; 2003. A mediális prefrontális kéreg sérülése nem zavarja a hím patkányok szexuális viselkedését; o. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Az emberek által visszaélés alatt álló drogok elsősorban a szabadon mozgó patkányok mezolimbikus rendszerében fokozzák a szinaptikus dopamin koncentrációkat. Proc Natl Acad Sci US A. 1988, 85: 5274 – 5278. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. A párosodás aktiválja az NMDA receptorokat a hím patkányok mediális preoptic területén. Viselkedési idegtudomány. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Az új droghasználók körében a szexuális kockázatvállalás előrejelzői. A nemi kutatás naplója. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. A metamfetamin-függőség gyógyszeres kezelése: Frissítés. Szerhasználat. 2008; 29: 31-49. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Szexuális motiváció: a hím patkányok étvágygerjesztő és kopulációs válaszai mögötti mechanizmusok idegi és viselkedési elemzése. Neurosci Biobehav Rev. 1990: 14: 217 – 232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Az inger-jutalmi szövetségek között az amygdala és a ventrális striatum közötti kölcsönhatások: A szexuális megerősítés másodrendű ütemezését alkalmazó vizsgálatok. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. A hím patkányok (Rattus norvegicus) műszeres viselkedésének vizsgálata szexuális megerősítéssel: I. Rövid vizuális ingerekkel a fogamzóképes nővel párosítva. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Asszociatív folyamatok a függőségben és jutalomban Az Amygdala-Ventral Striatal alrendszerek szerepe. Annals of the New York Tudományos Akadémia. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. A hím patkányok (Rattus norvegicus) műszeres viselkedésének vizsgálata szexuális megerősítéssel: II. A preopticus elváltozások, a kasztrálás és a tesztoszteron hatása. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, lásd RE. A függőség neurocircuitry: áttekintése. Br. Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Amfetamin által kiváltott c-fos mRNS expresszió a caudate-putamenben: a DA és NMDA receptor antagonisták hatása a neuronális fenotípus és a környezet kontextusának függvényében változik. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dinamikus változások a magban a dopamin kiáramlása során a Coolidge hatás alatt hím patkányokban. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. A szexuális viselkedés és a fokozott dopamin-efflux elősegítése a férfi patkányok magvakban a D-amfetamin által kiváltott viselkedésérzékenyítés után. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. A nemi magatartás megkönnyítése a hím patkányokban a d-amfetamin által kiváltott viselkedési szenzibilizáció után. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin és metamfetamin Vitamin és Vivo dopamin transzportereit differenciálisan befolyásolják. J. Biol. Chem. 2009; 284: 2978-2989. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. A bazolaterális amygdala neuronok kondicionált válaszainak szabályozása. Élettan és viselkedés. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Memóriaáramkör aktiválása a cue-kiváltott kokain vágy alatt. Proc Natl Acad Sci US A. 1996, 93: 12040 – 12045. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  39. Zöld AI, Halkitis PN. Kristálymetamfetamin és szexuális társasági viszony egy városi meleg szubkultúrában: választható affinitás. Kultúra, egészség és szexualitás. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, Lásd RE. Az elsődleges és a másodlagos jutalmakra vonatkozó limbikus magok disszociációja a visszaesés állatmodelljében. Neuropsychop. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormon-neurotranszmitter kölcsönhatások a szexuális viselkedés szabályozásában. Viselkedési agykutatás. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Férfi szexuális viselkedés. In: Pfaff DW et al., Szerkesztők. Hormonok agy és viselkedés. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. 1 – 138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamin és szerotonin: befolyásolja a férfi szexuális viselkedését. Élettan és viselkedés. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. A metamfetamin vagy morfin egyszeri és ismételt beadásának hatása a patkány agyban a neuroglikán C gén expressziójára. A Neuropsychopharmacology nemzetközi lapja. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. A magas kalóriatartalmú „snack-ételek” feltételezett helymeghatározásai a patkánytörzsekben, amelyek genetikailag hajlamosak az étrend által előidézett elhízással szemben rezisztensek ellen: Naltrexon blokád ellenállása. Farmakológia Biokémia és viselkedés. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Az opioid-antagonizmus hatása a kondicionált hely preferenciákra a snack-ételekre. Farmakológia Biokémia és viselkedés. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. A kábítószerrel való visszaélés során fellépő frontostriatális diszfunkcióból eredő impulzivitás: a viselkedés ellenőrzésére gyakorolt ​​hatás a jutalmú ingerek által. Pszichofarmakológia (Berl) 1999: 146: 373 – 390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. A függőség neurális alapja: a motiváció és a választás patológiája. J J Pszichiátria. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memória és függőség: megosztott neurális áramkör és molekuláris mechanizmusok. Idegsejt. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. A magok accumbens és az elülső oldalsó hipotalamusz terület ellentétes szerepe a hím patkányok szexuális viselkedésének szabályozásában. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Kannabinoidok Az érzelmi tanulás plaszticitását fokozzák a Medial Prefrontal Cortex neuronjaiban a Basolateral Amygdala Inputs segítségével. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, lásd RE. A kokain-kereső viselkedés potenciális visszaállítása a D-amfetamin infúzió után a basolaterális Amygdala-ba. Neuropsychop. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. BT Lett. Az ismétlődő expozíciók inkább fokozzák az amfetamin, a morfin és a kokain jutalmazó hatásait, és nem csökkentik azokat. Pszichofarmakológia (Berl) 1989: 98: 357 – 362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Szexuális viselkedés hím patkányokban a radioaktív vagy dopamin-kimerítő elváltozások után a sejtmagban. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Oldalsó hipotalamusz szerotonin gátolja a Nucleus Accumbens Dopamint: a szexuális telítettségre gyakorolt ​​hatás. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. A D1 antagonista és a szexuális élmény hatása a kopuláció által indukált Fos-szerű immunreaktivitásra a mediális preoptikus magban. Agykutatás. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Kizárólag az önálló tempójú párzás jutalmazza a két nemű patkányokat. Horm Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, lásd RE. A dorsomedialis prefrontális kéreg szelektív inaktiválása és a bazolaterális amygdala gyengíti a kioltott kokain-kereső viselkedés feltételezett újraindítását patkányokban. Pszichofarmakológia (Berl) 2003: 168: 57 – 65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. A hím patkányok szexuális viselkedésének megkönnyítése olyan stimulusok jelenlétében, amelyeket korábban morfin szisztémás injekcióval párosítottak. Farmakológia Biokémia és viselkedés. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. A metamfetamin jutalmat az extracelluláris jel szabályozott kináz 1 / 2 / ets-szerű, mint a Gene-1 jelátviteli út a Dopamin NIDA aktiválásával ( Kutatási jelentés Sorozat: Metamfetamin-visszaélés és addiciton 2006 NIH 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Újraértékelés és feltételes helypreferencia. Élettan és viselkedés. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. A szexuális vágyak útjai. Journal of Sexual Medicine. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. A szexuális viselkedés pszichofarmakológiája. In: Bloom FE, Kupfer DJ, szerkesztők. Pszichofarmakológia: a negyedik generációs fejlődés. New York: Raven; 1995. 743 – 758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Azonnali-korai génindukció hatása az agyban a női és férfi rágcsálók szexuális stimulálása után. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicionálás és szexuális viselkedés: felülvizsgálat. Horm Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. A dopamin receptor antagonisták differenciális hatásai a hím patkányok szexuális viselkedésére. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. A mezolimbikus dopamin rendszer: A végső közös út a visszaélések kábítószerének megerősítő hatásához? Idegtudományi és biológiai viselkedési vélemények. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. A szexuális élmény funkcionális és szerkezeti plaszticitást indukál a mezolimbikus rendszerben. Biológiai pszichiátria. 2009 A sajtóban.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Dopamin-ingadozások a magban az aknában a fenntartás, az extinkció és az intravénás D-amfetamin önadagolásának visszaállítása során. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Kábítószerek és szexuális hatások: a kábítószer-típus és a nemek szerepe. Folyóirat-visszaélések kezelése. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. A szexuális viselkedés növeli a c-fos expresszióját a hím patkány előtérében. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. A patkányok víz és szacharóz erősítésének többszörös ütemezése során aktiválódik. Szinapszis. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Figyelmeztető kontroll és agyi metabolit szintek a metamfetamin-visszaélőkben. Biológiai pszichiátria. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. A kristály metamfetamin és az ecstasy a nem biztonságos szex esetében különbözik a fiatal homoszexuális férfiak körében. Kanadai közegészségügyi folyóirat. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Lásd RE. A kondicionált-cued relapszus neurális szubsztrátjai a kábítószer-kereső viselkedéshez. Farmakológia Biokémia és viselkedés. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Lásd RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse és az Amygdala. Annals of the New York Tudományos Akadémia. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. A metamfetamin használatával kapcsolatos motivációk a férfiakkal szexuális szexuális HIV-férfiak körében. Folyóirat-visszaélések kezelése. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. A kábítószer-visszaesés visszaállítási modellje: történelem, módszertan és főbb megállapítások. Pszichofarmakológia (Berl) 2003: 168: 3 – 20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Érzékenyítés a kokain kondicionált előnyös hatásaira: farmakológiai és időbeli jellemzők. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Érzékenyítés a morfin kondicionált előnyös hatásaira: farmakológia és időbeli jellemzők. Eur. J. Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. A HIV-szexuális kockázati magatartások előrejelzői a közösségi kábítószer-használó férfiak és nők mintájában. AIDS és viselkedés. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, Fehér D, Kelder S. Metamfetaminhasználat és szexuális kockázati magatartás az amerikai középiskolás diákokban: a nemzeti kockázati magatartás felmérés eredményei. Megelőzési tudomány. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. A dopamin és NMDA receptorok hatása a kokain által kiváltott Fos expresszióra a Fischer patkányok striatumában. Agykutatás. 2008; 1243: 1-9. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  84. Swanson LW, szerkesztő. Agyi térképek: a patkány agyának szerkezete. Amszterdam: Elsevier Tudomány; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, KK kancsók, Coolen LM. Szexuális jutalom hím patkányoknál: A szexuális élmény hatása az ejakulációval és a behatolásokkal kapcsolatos feltételes helypreferenciára. Horm Behav. 2008 [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, C oldalak, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Az extracelluláris szignálszabályozott kináz kaszkád bevonása a kokain jutalmazó tulajdonságokhoz. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, C oldalak, Herve D, Girault JA, Caboche J. Az addiktív és nem addiktív gyógyszerek az ERK aktiválásának külön és specifikus mintáit indukálják egér agyban. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. A protein-foszfatáz-kaszkád szabályozása lehetővé teszi a konvergens dopamin- és glutamát-jelek aktiválását az ERK-ban a striatumban. Proc Natl Acad Sci US A. 2005, 102: 491 – 496. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. A dopaminerg és glutamaterg transzmisszió megváltozása a viselkedési érzékenység indukciójában és expressziójában: a preklinikai vizsgálatok kritikus áttekintése. Pszichofarmakológia (Berl) 2000: 151: 99 – 120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neurális aktiváció a hím és nőstény patkány agyi szexuális viselkedést követően. Viselkedési agykutatás. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. A bazolaterális amygdala excitotoxikus károsodásai megrongálják a kokain-kereső magatartást egy második sorrendű megerősítéssel. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Bölcs RA. A függőség neurobiológiája. Jelenlegi vélemény a neurobiológiában. 1996; 6: 243-251. [PubMed]