A Neuroscience Journal, 6 szeptember 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4és Jane R. Taylor1
1.A levelezést Jane R. Taylornak, a Pszichiátriai Tanszéknek, a Molekuláris Pszichiátriai Osztálynak, a Yale Egyetem Orvostudományi Karának, a Ribicoff kutatási létesítményeinek, a Connecticut Mentális Egészségügyi Központjának, az 34 Park Streetnek, a New Havennek, a CT 06508-nek kell címezni.[e-mail védett]
Absztrakt
A motiváció változásai számos pszichiátriai rendellenesség patofiziológiájában is szerepet játszottak, beleértve az anyaggal való visszaélést és a depressziót. Ismert, hogy a visszaélés vagy a stressz által okozott gyógyszerek ismételt expozíciója állandóan indukálja a ΔFosB transzkripciós faktort a nukleáris accumbensben (NAc) és a dorzális striatumban, amelyek feltételezik, hogy hozzájárulnak a dopamin által szabályozott jelátvitel neuroadaptációjához.. Mindazonáltal kevés a tudomásunk arról, hogy az ΔFosB az étvágyszerűen motivált viselkedések szabályozási rendszerében való részvételét illeti. Bemutatjuk, hogy az AFosB indukálható túlzott expressziója NAc-ben és a bransgénikus egerek dorsalis striatumában, vagy kifejezetten a patkányok NAc-magjában, vírus által közvetített génátvitel alkalmazásával, fokozott élelmiszer-erősítésű instrumentális teljesítmény és progresszív arány. Nagyon hasonló viselkedési hatásokat találtak a korábbi kokain, amfetamin, MDMA [(+) - 3,4-metilén-dioxi-metamfetamin] vagy nikotin ismételt expozíciója után patkányokban. Ezek az eredmények rávilágítanak a motivációs folyamatok ΔFosB általi erőteljes szabályozására, és bizonyítékot szolgáltatnak arra, hogy a génexpresszió ΔFosB indukcióján keresztül történő, a NAc magon belüli indukált változásai kritikus szerepet játszhatnak a motivációs hatásoknak az instrumentális viselkedésre gyakorolt hatásában.
Bevezetés
Az ismételt hatóanyag-expozíció időleges dinamikus változásokat okoz a gén transzkripcióban, amelyek tartós neuroadaptációt eredményeznek a nukleáris accumbensben (NAc) (Nestler, 2004). Ez az agyi régió kritikus szerepet játszik mind a drog-, mind a természetes megerősítési folyamatokban (Kelley és Berridge, 2002), noha kevéssé ismert a transzkripciós tényezőkről, amelyek befolyásolják a nugrug, étvágyas erősítők, például az élelmiszer által motivált viselkedést. A ΔFosB egy transzkripciós faktor, amely a NAc-ben és a hátsó striatumban krónikus hatóanyag-expozícióval aktiválódik (Konradi és munkatársai, 1994; Nye et al., 1995; Chen és munkatársai, 1997; Pich és munkatársai, 1997; Shaw-Lutchman és munkatársai, 2003) és kényszeres kerékvezetés (Werme és munkatársai, 2002). Ezeket a régiókat a krónikus stressz számos formája is indukálja (Perrotti és munkatársai, 2004). A striatum ΔFosB indukciójához kapcsolódó gyógyszererősítő folyamatok fokozása jól ismert (Kelz és munkatársai, 1999; Colby és munkatársai, 2003; Zachariou és munkatársai, 2006). Azonban ezekben a régiókban a megnövekedett ΔFosB szintek következményei a természetes erősítők által motivált hangszeres viselkedésre nem ismertek.
Az instrumentális válaszok teljesítménye a kábítószer-viselkedés olyan elengedhetetlen összetevője, amely szabálytalan vagy rugalmatlanná válhat, mivel a függőség előrehaladása folyik (Jentsch és Taylor, 1999; Berke és Hyman, 2000; Berridge és Robinson, 2003; Everitt és Robbins, 2005). A NAc számos, a függőség szempontjából releváns instrumentális viselkedés aspektusában vesz részt (Balleine és Killcross, 1994; Corbit és munkatársai, 2001; de Borchgrave és munkatársai, 2002; Di Ciano és Everitt, 2004b; Everitt és Robbins, 2005). Ezért valószínű, hogy a kábítószer okozta neuroadaptációk a NAc-n belül befolyásolhatják az instrumentális akciók teljesítményét. Valóban, a krónikus kokain expozíció növeli a szacharóz-megerősített műszeres teljesítményt (Miles és munkatársai, 2004) és manipulációk, amelyek szerint az NAc magjában a neuroplaszticitást gátolják, beleértve a PKA (protein kináz A) vagy fehérje szintézis gátlását, zavarják az élelmiszer-jutalmazott instrumentális válaszokat (Baldwin és munkatársai, 2002a; Hernandez és munkatársai, 2002). A NAc magja közvetíti a kondicionált hatások instrumentális viselkedésre gyakorolt motivációs hatását is (Parkinson és munkatársai, 1999; Corbit és munkatársai, 2001; Hall és munkatársai, 2001; Di Ciano és Everitt, 2004a; Ito és munkatársai, 2004), amely neurobiológiai szubsztrátot biztosít, ahol az ΔFosB indukció erőteljesen befolyásolhatja az instrumentális teljesítményt és az étvágy, például az élelmiszer, a víz vagy a visszaélésszerű gyógyszerek motivációját.
Itt vizsgáltuk az ΔFosB hatását az élelmiszer-motivált instrumentális viselkedésre két komplementer genetikai megközelítés alkalmazásával: (1) az AFosB indukálható túlexpressziója az NAc-ben és a bitransgénikus egerek (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) és a (2) túlexpressziójában A NA-magban az AFosB-t specifikusan vírus által közvetített génátvitel alkalmazásával patkányokban végezzük. Azt is értékeltük, hogy a korábbi, ismételt kokain, amfetamin, (+) - 3,4-metilén-dioxi-metil-amfetamin (MDMA), vagy a nikotin expozíció fokozottan növeli az élelmiszer-megerősített instrumentális választ és / vagy a motivációt progresszív arányú ütemterv alkalmazásával, amint azt a kábítószer-megerősített önfenntartás is mutatja (Horger és munkatársai, 1990, 1992; Piazza és munkatársai, 1990; Vezina és munkatársai, 2002; Miles és munkatársai, 2004). Eredményeink az AFosB folyamatos hatását mutatják a műszeres viselkedésre, és arra utalnak, hogy ez a transzkripciós faktor a NAc magban hathat, mint a motivációs funkció szabályozója.
Anyagok és módszerek
Állatok és állatok gondozása
Kísérletileg naiv Sprague Dawley patkányokat szereztünk be a Charles River Laboratories-tól (Wilmington, MA). A hím bitransgénikus 11A egerek egy neuronspecifikus enoláz (NSE) -tTA tetraciklin transzaktivátor fehérjét (A vonal) expresszáló homozigóta transzgenikus egerek és TetOp-t expresszáló egerek (tetraciklinre reagáló promoter) -AFosB (11 vonal) keresztből származtak; a szülői vonalakat egy külsõ vegyes háttéren tartottuk (50% ICR és 50% C57BL6 × SJL) (Chen és munkatársai, 1998; Kelz és munkatársai, 1999). Ezek a transzgenikus 11A egerek csak akkor expresszálják az AFosB-t, ha: (1) mindkét transzgén ugyanabban a sejtben van jelen, és (2) a tTA-transzkripciós aktivációt nem gátolja a tetraciklin-antibiotikumok, például a doxiciklin jelenléte. A doxiciklin beadása ezekhez az egerekhez tehát időbeli szabályozást gyakorolhat az AFosB expressziójára és felhasználható a kifejeződés megelőzésére a fejlődés során; valójában a doxiciklin beadása nem mutatható ki az ΔFosB kimutatható szivárgási \ tChen és munkatársai, 1998; Kelz és munkatársai, 1999). Ezenkívül a jelen kísérletekhez a transzgenikus egerek 11A vonalát választottuk, mert olyan expressziós mintázatot mutatnak, amely elsősorban a dinamorfin tartalmú striatális neuronokra korlátozódik (mind az NAc, mind a dorsalis striatum), amely nagyon hasonlít a krónikus gyógyszer ΔFosB indukciójának mintájára expozíció (Kelz és munkatársai, 1999). Ezenkívül a ΔFosB ezen striatális expressziójának számszerűsítését korábban már számszerűsítettük (Chen és munkatársai, 1998; Kelz és munkatársai, 1999). Az egereket a University of Texas Southwestern-ben állították elő, és fenntartották és tesztelték a Yale létesítményekben. A terhesség és a fejlődés ideje alatt az egereket az 8 – 9 hétig tartó doxiciklinen tartottuk 100 μg / ml koncentrációban az ivóvízben, a feltételeket, amelyek szerint a TetOp által vezérelt transzgének „off” állapotban voltak, és a kezdő 6-t használták ha a ΔFosB expressziója maximális lesz (Kelz és munkatársai, 1999). Minden kísérlet során a littermate bitransgenikus egereket összehasonlítottuk a doxiciklinnel szemben, amely önmagában nem befolyásolja a motivált viselkedést (Kelz és munkatársai, 1999; McClung és Nestler, 2003; Zachariou és munkatársai, 2006).
Az összes kísérleti részt párokban (patkányokban) vagy csoportokban (egerek, négy-öt ketrecenként) tartottuk szabályozott hőmérséklet és páratartalom mellett 12 h fény / sötét ciklus alatt (7: 00 és 7: 00) DÉLUTÁN). Legalább 7 d engedték meg, hogy bármilyen tanulmányhoz igazodjanak a lakóépületekhez. Az állatok mindenkor ad libitum hozzáférést biztosítanak a vízhez, és korlátozott hozzáférést biztosítanak az élelmiszerhez az alábbiakban részletezett módon. Minden állathasználatot a laboratóriumi állatok gondozására és használatára vonatkozó Nemzeti Egészségügyi Intézeteknek megfelelően végeztünk, és a Texasi Egyetem Délnyugati és Yale Egyetem Állatgondozási és Használati Bizottsága jóváhagyta.
Kábítószer
Kokain-hidroklorid [a kábítószer-visszaélés elleni nemzeti intézet (NIDA)], d-amfetamin-szulfát (Sigma, St. Louis, MO), MDMA-hidroklorid (a NIDA által biztosított) és (-) - nikotin-hidrogén-tartarát (Sigma) ) feloldottuk steril fiziológiás sóoldatban (0.9%) és intraperitoneálisan injektáltuk 5 ml / kg (egerek) vagy 2 ml / kg (patkányok) térfogatában. A nikotin oldat pH-ját nátrium-hidrogén-karbonáttal állítottuk be az injektálás előtt.
Vírusvektorok
A vírus által közvetített génátvitel a korábban leírtak szerint történt (Carlezon és munkatársai, 1998; Perrotti és munkatársai, 2004). Röviden, a specifikus fehérjéket kódoló cDNS-eket behelyeztük a herpes simplex vírus (HSV) amplikon HSV-PrPUC-ba, és a vírusba csomagoltuk az 5dl1.2 segítő segítségével. A HSV-LacZ expresszióját vezérlő vektorokat, amelyek a β-galaktozidáz kontroll fehérjét kódolják, vagy az AFosB-t kódoló HSV-AFosB-t, ezt követően a NAc magba infundáljuk a kísérleti protokoll szerint.
kísérleti eljárás
Vázlat.
Az 1 kísérlet megvizsgálta a korábbi ismételt hatóanyag-expozíció hatását az élelmiszer-megerősített műszeres teljesítményre és a progresszív arányra. A patkányokat véletlenszerűen öt kísérleti csoportra osztottuk (n = 9 – 10 / csoport). Ezek a csoportok naponta kétszer (intraperitoneálisan; 9: 00 és 5: 00 PM) injekciókat kaptak sóoldattal vagy az alábbi gyógyszerek egyikével: nikotin, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokain, 15 mg / kg; vagy amfetamin, 2.5 mg / kg 15 egymást követő napokon. A dózisokat a korábban közzétett adatok alapján választottuk ki.Taylor és Jentsch, 2001; Olausson és munkatársai, 2003), és a gyógyszer által kiváltott mozgásszervi stimulációt az 1 és az 15 kezelési napokon figyeltük meg. Az 5 d visszavonása után az állatokat az 10 egymást követő napok instrumentális kezelésére képeztük, majd ezt követően a következő napon progresszív arányban vizsgáltuk. Két állatot kizártunk a statisztikai elemzésből, mert nem szerezték meg a műszeres választ, így a három végső tréningszakasz mindegyikénél nem volt több, mint egy aktív kar válasz.
Kísérletek Az 2 és az 3 vizsgálta az AFosB indukálható striatális túltermelésének bitransgénikus egerekben kifejtett hatásait az instrumentális teljesítményre és a megerősítés fokozatos arányára reagálva. Az AFosB indukálható túlzott expressziója ezekben az egerekben korábban kimutatták, hogy utánozza a ismételt hatóanyag-expozíció hatásait a mozgásszervi aktivitásban és a kondicionált hely preferencia paradigmákban (Kelz és munkatársai, 1999; Zachariou és munkatársai, 2006). Ezek az egerek kritikus információkat adhatnak a striatális ΔFosB-nek a specifikus viselkedési folyamatokhoz való hozzájárulásáról. A genotípusú hím egereket doxiciklinen tartottuk, vagy 8-héttel a csapvízre váltottuk. A kísérleteket 6 héttel a doxiciklin visszavonása után indítottuk, amikor a transzgén expressziója maximális volt (Kelz és munkatársai, 1999). Az 2 kísérletben az állatokat (n = 16) élelmiszer-korlátozásnak vetettük alá és az alábbiakban leírt műszeres eljárással (lásd alább, Instrumentális válasz és progresszív arány vizsgálat) az 10 egymást követő napokban képeztük. A műszeres vizsgálat befejezése után ezekben az egerekben a kokain által kiváltott mozgásszervi stimulációt értékeltük. Az 3 kísérletben az egerek külön csoportját (n = 18) képezték az 10 egymás utáni napjainak instrumentális válaszára olyan körülmények között, amelyek során maximum 50 erősítőt szállítottunk. Az 11 napon minden egeret progresszív arányban vizsgáltunk. Az 12 napján meghatároztuk a reinforcer leértékelésének hatását a progresszív arány válaszadásával.
Kísérletek Az 4 és az 5 a ΔFosB vírus által közvetített túlexpressziójának hatásait vizsgálta kifejezetten az NAc-ben. Az 4 kísérlet az ΔFosB túlexpresszió hatását tesztelte a műszer teljesítményére. Itt a patkányokat HSV-AFosB-vel (n = 8) vagy HSV-LacZ-vel (n = 8) adtuk be az NAc magban, és az 40 h később kezdődő műszeres eljárással képeztük. A napi 10 edzés után az alapszintű aktivitási szinteket az alábbiakban leírt összes mozgásszervi megfigyelő berendezésben lévő állat esetében értékeltük (lásd alább, Mozgásszervi aktivitás). Az 5 kísérlet a NAc ΔFosB túlexpresszió hatásait értékelték kifejezetten a progresszív arányra adott válaszra. Itt a patkányokat eredetileg 15 egymást követő napokra képeztük, kísérleti csoportokhoz rendeltük, majd a NAc magban HSV-AFosB (n = 8) vagy HSV-LacZ (n = 7) infúzióval infundáltuk. Az állatokat nem teszteltük és kezeltük az 4 d-hez, hogy lehetővé tegyük az AFosB expresszió csúcspontját. Az infúzió utáni 5 napon minden állatot vizsgáltuk a progresszív arány-ütemezésnél a kar megnyomására. A vizsgálat utolsó napját követően minden patkányt megöltünk, és az infúziós kanülek elhelyezését a NAc magban igazoltuk histokémiai úton. Az infúziós kanülök elhelyezése alapján két patkányt kizártunk a 4 kísérletből és egy patkányból az 5 kísérletből.
A génexpresszió jellemzését különálló állatcsoportban végeztük. Itt a HSV-LacZ-t infúzióba helyeztük az NAc magba, és az állatokat később 3-ben megöltük. A β-galaktozidáz expresszióját ezután immunhisztokémiai vizsgálatnak vetettük alá.
Mozdonyaktivitás.
A mozdonyaktivitást aktivitásmérőkkel mértük (Digiscan állati aktivitás monitor; Omnitech Electronics, Columbus, OH). Az aktivitásmérők két sor infravörös fényérzékelővel rendelkeznek, minden 16 érzékelőből álló sor 2.5 cm távolságra helyezkedett el egymástól. A tevékenységmérőket a számítógépes számítógép segítségével a Micropro szoftver (Omnitech Electronics) segítségével gyűjtötték össze, és adatokat gyűjtöttek.
A kísérleti állatokat átlátszó műanyag dobozokban (25 × 45 × 20 cm) helyeztük, amelyeket az aktivitásmérőkbe helyeztek. Az állatokat kezdetben megengedték, hogy az 30 min. Néhány kísérletben az állatokat ezt követően kivettük, kokain, amfetamin, nikotin vagy hordozóanyaggal injektáltuk a kísérleti tervezésnek megfelelően, és visszahelyeztük a dobozba. A lokomotoros aktivitást ezután 60 percre regisztráltuk, a gyógyszer injekció beadása után min. 5 perccel kezdve, hogy elkerüljük a nem specifikus injekció által indukált hipermotilitást. Minden kísérletet az állatok fényfázisában végeztünk (9: 00 AM és 6: 00 PM).
Instrumentális válasz és progresszív arány tesztelés.
A műszeres válaszokat a MedPC szoftver által vezérelt patkányok (30 × 20 × 25 cm) vagy egerek (16 × 14 × 13 cm) standard operációs kamráinak alkalmazásával értékeltük (Med Associates, St. Albans, VT). Mindegyik kamrát egy zajcsökkentő külső kamrában helyeztük el, amely fehér zajgenerátorral és ventilátorral felszerelt, hogy csökkentse a külső zaj hatását. A hátsó falra szerelt házfény megvilágította a kamrát. A pelletadagoló élelmiszer-pelleteket (20 vagy 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) szállított a hordozóba. A fejrészeket a megerősítő tartály fölé szerelt fénysorompóval detektáltuk. Ebben a magazinban stimulus fény volt. Patkányoknál az egyik kart elhelyeztük a magazin mindkét oldalán. Egerek esetében két kamracsatlakozó nyílást helyeztünk a kamrák hátsó falára (vagyis a reinforcer magazinnal szemben).
Az 5 d során közvetlenül az edzés megkezdése előtt az állatokat naponta az 90 min étrendhez jutották, és otthoni ketreceikben gabonaalapú élelmiszer-pelleteknek (egerek, 20 mg, patkányok, 45 mg) voltak kitéve. A vizsgálati időszak alatt az élelmiszer-pelleteket a viselkedési protokoll szerint (lásd lentebb), valamint az 90 min. Korlátlan mennyiségben az 30 min. Ez az élelmiszer-hozzáférési ütemezés lehetővé teszi, hogy minden egyes állat elérje az egyéni telítettségi pontját, és csökkenti a domináns és alárendelt állatok közötti verseny által okozott változékonyságot. A mi kezünkben ez az ütemezés lehetővé teszi a kezdeti súlyvesztés utáni lassú súlygyarapodást ~85 – 90% a szabad adagolású súlyokból. A kísérlet során az állati súlyokat megfigyeltük.
Az összes alanyot először az 2 d tesztelő berendezéséhez szoktattuk; ezeken az üléseken az élelmiszer-pelleteket egy fix idejű 15 s (FT-15) ütemezéssel szállították a reinforcer magazinba. A következő naptól kezdve az alanyok napi képzést tartottak 10 egymást követő napokon. Az élelmiszerekre adott válaszokat a korábban közzétett instrumentális kondicionálási eljárások alapján tesztelték (Baldwin és munkatársai, 2002b). Megerősítették a helyes (azaz aktív) emelőkar / négykarapodást, míg a másik (inaktív) karra / négykaróra való reagálásnak nincsenek programozott következményei. Az aktív négykerék vagy a kar pozíciója (bal / jobb) kiegyensúlyozott volt minden kísérleti csoportban. A válaszfeltétel befejezése (lásd alább) a magazin ingerlámpájának kialakulását eredményezte, majd az 1-eket később egyetlen élelmiszer-pellet szállítása után követték. Két másodperccel később az ingerlámpa kikapcsolt. Az első 10-erősítőket egy fix arányú (FR1) ütemezés szerinti sikeres válaszadás után szereztük be, amely után változó arányú (VR2) ütemezés után reagáltattuk a pelleteket. A munkamenet 15 min.
Az 3 (egerek) és az 5 (patkányok) kísérletek alternatív képzési sémákat alkalmaztak, hogy elkerüljék az instrumentális teljesítmény különbségeinek lehetséges hatását az edzés során az ezt követő progresszív arányra (lásd alább). Az 3 kísérletben az egereket FR1 ütemezéssel képezték 2 d-re, majd egy FR2 ütemezésre az 8 d-re. Az első 3 d tesztelés során 60 min. Az utolsó 7 képzési napokon a munkamenet megszűnt, amikor az 50 erősítőket megszerezték. A 5 kísérletben a patkányokat a FR1 / VR2 ütemezésben 15 min. Először egy maximális számú 150 pelletet / munkamenetet szállítottunk. Másodszor, ezek az állatok 5 további napokat vettek igénybe (azaz összesen 15 d), hogy a kísérleti manipuláció előtt stabil teljesítményt lehessen kialakítani.
Az állatokat szintén tesztelték az élelmiszerekre adott válaszreakcióra egy fokozatos erősítési ütemterv alapján. Ebben a vizsgálatban az élelmiszer előállításához szükséges válaszreakciót FR1 ütemtervként indítottuk, de az 2 fokozatosan növelte, hogy egy későbbi megerősítést kapjon (azaz 1, 3, 5, 7…, X + 2 válaszok). A patkányokat alkalmazó gyógyszeres kezelési kísérletben az 5 fokozatosan növelte az ütemtervet, így az 1, az 6, az 11, az 16…, az X + 5 végső ütemezését kapta. Az összes többi paraméter megegyezik a fentiekben ismertetett képzési eljárással. A teszt befejeződött, amikor az 5 min.
Reinforcer leértékelése.
A reinforcer leértékelésének hatását reinforcer-specifikus előtolással vizsgáltuk. Ebben az esetben az egereknek korlátlan gabonafélékből álló pelleteket kellett enniük az otthoni ketrecükben 3 h alatt, mielőtt a fentiekben leírt fokozatos erősítési ütemterv alapján teszteltük.
Sebészeti technikák.
Az állatokat Equithesin [pentobarbitolt (35 mg / kg) és klórhidrátot (183.6 mg / kg) tartalmazó etanollal (10% v / v) és propilénglikollal (39% v / v) tartalmazó érzéstelenítéssel elaltattuk; 4.32 ml / kg, ip] alkalmazásával. A kanüleket (Plastics One, Roanoke, VA) sebészeti úton beültettük a NAc mag fölé, Kopf sztereotaktikus berendezéssel. A bregma-hoz viszonyított sztereotaktikus koordináták a következők voltak: elülső / hátsó, + 1.5 mm; oldalsó / mediális, ± 1.5 mm; ventrális / dorzális, −6.0 mm (Paxinos és Watson, 1986). A kanüleket csavarokkal és fogászati cement segítségével rögzítették a koponyához. A blokkolások megakadályozása érdekében az elzárók a vezetőcsatornákba kerültek. A műtét után az állatokat standard posztoperatív kezelésnek vetettük alá, és az összes kísérlet megkezdése előtt 5 d-re dagadtuk.
Infúziót.
A vírus vektorok intracerebrális infúzióit kétoldalúan végeztük 40 h a képzés kezdete előtt (lásd alább). Az injekciós fecskendőket (31 mérőeszköz), amelyek 1 mm-t tesznek ki a vezetőcsatornák csúcsa alatt, lassan egyidejűleg a bal és jobb NAc-re csökkentették, és az 1.0 μl / oldatot 4 perc alatt infundáltuk 0.25 μl / percenként egy mikroinfúziós szivattyúval (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Az infúziós tűket az infúzió befejezése után min. 1-ra helyeztük, és a dummy kanülöket kicserélték. A viselkedési kísérletek befejezése után (lásd 6B. Ábra) hisztológiailag igazoltuk a kanül elhelyezését, és a kísérleti adatok statisztikai elemzésébe csak a helyesen elhelyezett kanülekkel rendelkező állatok vettek részt.
Szövettani elemzések és immunfestés.
A kísérletek befejezését követően a kísérlet részeként műtétet kapó állatokat Equithesinnel érzéstelenítettük és transzkardiálisan perfundáltuk 0.1 m PBS-sel (5 min) és 10% formalinnal (10 min) standard eljárásokkal. Az agyakat a formalinba visszük, majd foszfát-pufferolt szacharózoldatba (30%) helyezzük. Ezután az összes agyat egy mikrotom 40 μm-es szakaszaiban vágtuk le, és a kanül elhelyezésének és a fehérje expressziójának szövettani elemzésére használtuk.
Cannula elhelyezést végeztünk semleges vörös színnel, és az etanol dehidratálását követően desztilláló lágyítószerrel és xilollal (DPX) mikroszkóp tárgylemezre szerelt szelvényekben. Az immunhisztokémiát a korábban leírtak szerint végeztük (Hommel és munkatársai, 2003). Röviden, a β-galaktozidáz expresszióját HSV-LacZ infúzió után immunfluoreszcens festéssel határoztuk meg egy kecske anti-β-galaktozidáz primer antitesttel (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Egy éjszakán át tartó inkubálás után a szekciókat öblítjük, majd a Cy2-hoz konjugált fluoreszcens szamár anti-kecske másodlagos antitesttel inkubáljuk (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). A szekciókat ismét mossuk, majd etanollal dehidratáljuk és DPX-be szereljük. A szomszédos kontrollszakaszokat azonos módon kezeltük primer antitestek bevonása nélkül. Az immunfluoreszcenciát 520 nm-en értékeltük a Zeiss (Oberkochen, Németország) mikroszkóp FITC szűrővel és azonos expozíciós időkkel rögzített képek Zeiss Axiovision digitális képalkotó rendszer.
Statisztika
Az összes kísérlet adatait egy-, két- vagy háromutas ANOVA alkalmazásával értékeltük, majd Scheffe vagy Dunnett poszt-hoc tesztjét alkalmaztuk, ahol szükséges, több összehasonlítással korrigálva Holm szekvenciális elutasítási tesztjét használva. A p ≤ 0.05 értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.
Eredmények
1 kísérlet: az ismételt hatóanyag-expozíció hatása a műszeres teljesítményre és a progresszív arányra
Annak igazolására, hogy ismétlődő gyógyszer-expozíciós paradigmánk funkcionálisan jelentős neuroadaptációt eredményezett, először a lokomotoros szenzitizációt értékeltük, mint a krónikus gyógyszerhatás prototípusos viselkedési mérését. A patkányokat naponta kétszer adagoltuk nikotint (0.35 mg / kg), MDMA-t (5 mg / kg), kokainot (15 mg / kg), vagy amfetaminot (2.5 mg / kg), és a mozgásszervi aktivitást az első injekció után teszteltük. 1 és 15 kezelési napok (kiegészítő 1A – E www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). A statisztikai analízis napról napra jelentős kölcsönhatást mutatott (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Az MDMA kivételével (p = 0.62) minden gyógyszer szignifikánsan nagyobb mozgási aktivitást (azaz szenzibilizációt) váltott ki az 15-nál az 1 naphoz képest (nikotin, p ≤ 0.001; kokain, p ≤ 0.001; amfetamin, p ≤ 0.01). Az ismételt sóoldatok injekcióinak nincs hatása. A gyógyszeres kezelések egyike sem változtatta meg az 15 napon a szokásos időszakban mért kezdeti mozgásaktivitást (kiegészítő 2A. www.jneurosci.org kiegészítő anyagként).
Öt nappal az utolsó kábítószer-injekció után megvizsgáltuk a korábbi ismételt nikotin, MDMA, kokain vagy amfetamin expozíció hatását az élelmiszer-megerősített műszeres viselkedésre. Az adatokat minden egyes gyógyszer esetében külön bemutatjuk ábra 1A – H, ugyanazzal a sóoldat-kontroll csoporttal összehasonlítva. Azt tapasztaltuk, hogy ezeknek a gyógyszereknek a korábbi expozíciója szignifikánsan és szelektíven növelte az élelmiszer-megerősített hangszeres válaszolást (a kezeléssel a képzési nap, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc analízis: nikotin, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; kokain, p ≤ 0.01; amfetamin, p <0.001). Az aszimptotikus teljesítményen megfigyelt instrumentális válaszok tartós emelkedése azt sugallta, hogy a korábban jelentett növekedésnek megfelelő ismétlődő pszichostimuláns expozíció után a motiváció lehetséges javulása (lásd a Megbeszélést). Ezért megvizsgáltuk, hogy a korábbi ismételt hatóanyag-expozíció fokozta-e a motivációt egy progresszív arány-ütemezés alkalmazásával. A korábbi hatóanyag-expozíció statisztikai hatása volt az aktív karra adott válaszra (a kar kölcsönhatása, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Ábra 2A), valamint a végső töréspont (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Ábra 2B). További elemzés kimutatta, hogy minden kezelés növelte mind az aktív válaszok számát (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; kokain, p ≤ 0.001; amfetamin, p ≤ 0.001) és a törési pontot (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA , p ≤ 0.01; kokain, p ≤ 0.0001; amfetamin, p ≤ 0.0001), ami összhangban van e kezelések hatásával a motivációra. Tekintettel arra, hogy a gyógyszerek nem befolyásolják a mozgásszervi aktivitást, és hogy nincs hatásuk az inaktív karnyomásra, nem valószínű, hogy az ilyen körülmények között az élelmiszerekre adott fokozott válasz a motor aktivitásának nem specifikus növekedését tükrözi.
Ábra 1.
A korábbi nikotin (0.35 mg / kg), az MDMA (2.5 mg / kg), a kokain (15 mg / kg) vagy az amfetamin (2.5 mg / kg) napi kétszeri injekciójának hatása a 15 d esetében a következő műszeres viselkedésre. Az állatokat együttesen teszteltük, de az egyértelműség érdekében az egyes gyógyszerek hatásait külön-külön, ugyanazon sóoldattal kezelt kontrollcsoport alkalmazásával mutatjuk be. Az A (aktív válaszok) és a B (inaktív válaszok) a korábbi nikotin expozíció hatásait mutatják; C, D, MDMA; E, F, kokain; G, H, amfetamin. Az adatokat átlag ± SEM értékként ábrázoltuk.
Ábra 2.
A korábbi ismételt kezelés (naponta kétszer, 15 nap) sóoldattal, nikotinnal (0.35 mg / kg), MDMA-val (2.5 mg / kg), kokainnal (15 mg / kg) vagy amfetaminnal (2.5 mg / kg) az instrumentális válaszra a megerősítés progresszív arányú ütemtervén. Az adatokat átlag ± SEM-ként ábrázoljuk. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, sóoldat; Nic, nikotin; Coc, kokain; Amf, amfetamin; PR, progresszív arány.
A korábbi gyógyszer-expozíció nem volt hatással a testtömegre az élelmiszer-korlátozás előtt, a műszeres edzés első vagy utolsó napján, vagy közvetlenül a progresszív arányú vizsgálat előtt (kiegészítő 2B. www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). Az 3 d korlátozott élelmiszer-hozzáférése kezdetben csökkentette a testtömeget az 91 – 92 átlag% -ánál a szabadon adagolt súlyoknál. A viselkedésvizsgálat végén a súlyok visszatértek az 97 – 99% -ra a prestesztencia testtömegére, és nem volt különbség a gyógyszerrel kezelt és sóoldattal kezelt állatok között. A testtömeg változásai és az éhség vagy az étvágy különbségei ezért nem járulhatnak hozzá jelentős mértékben az instrumentális teljesítmény vagy motiváció megfigyelt javulásához.
2 kísérlet: az AFosB indukálható túlexpressziója bitransgénikus egerekben; műszeres teljesítmény
Ezt követően megvizsgáltuk, hogy az instrumentális teljesítmény is növekedett-e olyan bitransgénikus egerekben, amelyek indukálhatóan túltermeltek az ΔFosB-t, szignifikáns szelektivitással az NAc és a dorsalis striatumban (Kelz és munkatársai, 1999). Ebben a kísérletben az AFosB-t túlzottan expresszáló egereket összehasonlítottuk a littermate kontrollokkal, amelyek nem expresszálják túl a ΔFosB-t, mivel a doxiciklinen vannak fenntartva (lásd az anyagok és módszerek). Azt tapasztaltuk, hogy az ΔFosB túlexpressziója jelentősen megnövelte az élelmiszer-megerősített reagálást (gén expressziója karonként edzés napján, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Ábra 3A). Az inaktív nyílásban végrehajtott nullázó válaszok száma nem különbözött a két csoport között (Ábra 3B). Ezek az adatok együttesen azt mutatják, hogy a ΔFosB túlexpresszió a NAc-ben és a dorsalis striatumban szelektíven növelte az instrumentális teljesítményt
ábra 3
Az AFosB indukálható striatális túltermelésének hatása bitransgénikus egerekben az instrumentális teljesítményre. A, Aktív válaszok. B, Inaktív válaszok. Az adatokat átlag ± SEM értékként ábrázoltuk.
Annak kizárása érdekében, hogy az ΔFosB-t túlzottan expresszáló állatok műszeres teljesítményének növelése az étvágy vagy az éhség megváltozásával magyarázható, a testtömeget az élelmiszer-korlátozás előtt és a képzés első és utolsó napján rögzítették. Az ΔFosB nem volt hatással a testtömegre az élelmiszer-korlátozás előtt, és a viselkedésvizsgálat során sem volt hatással a testtömegre. Itt az 3 d korlátozott élelmiszer-hozzáférése csökkentette a testtömeget az 87 – 89 átlagához képest a szabadon adagolt súlyoknál. A viselkedésvizsgálat végén az állati súlyok az előfestési testtömegek 97 – 99% -a volt, az ΔFosB és a kontroll egereknél (3A. www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). Ezért valószínűtlen, hogy az ΔFosB túlexpresszió éhségre vagy étvágyra gyakorolt potenciális hatásai a megfigyelt instrumentális válaszok javulását eredményezhetik.
Amikor a műszeres teljesítmény tesztelése befejeződött, az AFosB túlexpresszió nem változtatta meg az 30 periódus alatt mért alapvonali mozgási aktivitást (kiegészítő 3B. www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). Ez a megfigyelés alátámasztja azt a nézetet, hogy a nem specifikus aktivitásváltozás nem járul hozzá az ezekben az állatokban megfigyelt fokozott instrumentális teljesítményhez. Az AFosB-t túlzottan expresszáló, transzgenikus egerekről azonban beszámoltak arról, hogy fokozott lokomotoros választ reagálnak az akut és ismételt kokainra (Kelz és munkatársai, 1999). Mivel a doxiciklinből való kivonás egy kissé eltérő ütemtervet alkalmaztunk a génexpresszió indukálására (6 hetek élelmiszer-korlátozással), ezt a fenotípust megerősítettük. Valójában az AFosB-t túlzottan expresszáló egerek jelentősen nagyobb mértékben fokozták a mozgásszervi aktivitást, amikor a kokainot injektálták, összehasonlítva a doxiciklinen tartott alomvizsgálóval (génexpresszió, F).(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (kiegészítő 3C ábra) www.jneurosci.org kiegészítő anyagként).
3 kísérlet: az AFosB indukálható túlexpressziója bitransgénikus egerekben; progresszív arány
Tekintettel arra, hogy a korábbi hatóanyag-expozíció striatális ΔFosB-t (Nestler és munkatársai, 2001) és azt találtuk, hogy növeljük a progresszív arány reagálását, azt követően teszteltük, hogy a ΔFosB transzgenikus striatális túltermelés is fokozza-e a teljesítményt a megerősítés progresszív aránya alapján. Egy új csoportot képeztek olyan eszközökkel történő reagálásra, amelyekben a körülmények (lásd Anyagok és módszerek) nem mutattak szignifikáns különbséget a műszeres teljesítményben, mielőtt a progresszív arányra reagál (F(1,16) <1). A progresszív arány tesztben azonban szignifikáns génexpressziót figyeltünk meg kar interakcióval (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Ábra 4A) és megállapította, hogy az AFosB-t túlzottan expresszáló egerek a doxiciklinen tartott littermate kontroll egerekhez képest nagyobb számú aktív reakciót (p ≤ 0.05) hajtottak végre, míg az inaktív karok száma nem különbözött egymástól. Az AFosB-t túlzottan expresszáló egerek szintén magasabb törési pontot értek el (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Ábra 4B). Ezek az adatok arra utalnak, hogy a korábbi pszichostimuláns expozícióhoz hasonlóan az ΔFosB striatális túlzott expressziója növeli a motivációt. Mivel az inaktív válaszok száma nem változott az AFosB-t túlzottan expresszáló egerekben, az aktivitás nem specifikus növekedése valószínűleg nem járul hozzá ezekhez a hatásokhoz. Ezt a nézetet tovább alátámasztotta az alapvonal lokomotoros aktivitásának értékelése, amelyben nem volt különbség az AFosB-t túlzottan expresszáló egerek és a doxiciklinen tartott littermate kontroll egerek között. A teszt napján mérten nem volt egyértelmű a testtömeg közötti különbség az AFosB-t túltermelő és kontroll állatok között. Így, bár az ΔFosB-t túlzottan expresszáló állatok több táplálékkal motivált instrumentális választ adnak ki, úgy tűnik, nem szabad több ételt fogyasztani, amikor szabadon elérhető. Ennek a megfigyelésnek a legvalószínűbb magyarázata az, hogy bár a motiváció határozza meg, hogy az állat mennyire keményen dolgozik egy megerősítő szert, számos további tényező (étvágy, telítettség, anyagcsere-állapot stb.) Befolyásolja a táplálkozási viselkedést és az élelmiszerek tényleges fogyasztását.
Ábra 4.
A FosB indukálható túlexpressziójának hatása a bitransgenikus egerekben az instrumentális válaszra a megerősítés progresszív arányú ütemtervén, a jóllakottság által kiváltott erősítő leértékelés előtt és után. A, B, Baseline: kar válaszok (A), töréspont (B). C, D, A megerősítő leértékelés után: a kar válaszai (C), töréspont (D). Az adatokat átlag ± SEM-ként ábrázoljuk. * p <0.05.
Az itt használt AFosB bitransgenikus egerek ΔFosB-t expresszálnak az egész striatumban. Míg a ventrális striatum (beleértve az NAc-t is) részt vett a motivációs folyamatokban, a hátsó striatumot úgy vélik, hogy részt vesz az instrumentális szokások megszerzésében (Yin és munkatársai, 2004; Faure és munkatársai, 2005). Bár a képzési fázisban nem tapasztaltunk különbséget a műszeres teljesítményben, alacsony arányú ütemezéssel, a maximális erősítési határértékekkel, viszonylag ellenállóak a hangszeres szokások fejlődésével szemben.Dickinson, 1985) lehetséges, hogy a szokások kialakítása befolyásolhatja a progresszív arányú ütemterv szerinti válaszolást. Ezt a lehetőséget közvetlenül teszteltük a progresszív leértékelés hatásának értékelésével a progresszív arány reagálásával. Az ilyen előkezelés megszüntette az ΔFosB hatását a progresszív arányra válaszolva, anélkül, hogy különbséget észleltek az AFosB-t túlzottan expresszáló és kontroll egerek között megfigyelt válasz- vagy törési pontok között (F(1,16) <1) (Ábra 4CD). Ezek az adatok együttesen arra utalnak, hogy az ΔFosB striatális túlzott expressziója nem változtatta meg a jutalmazott eredmények értékében bekövetkezett változások érzékenységét ezen vizsgálati ütemterv szerint. Inkább a progresszív arányú tesztben megfigyelt instrumentális válasz célzottnak tűnik, és az AFosB-t túlzottan kifejező egerekben megfigyelt megnövekedett töréspont valószínűleg a megnövekedett motivációnak és nem a megnövekedett szokásszerű válasznak tulajdonítható.
4 kísérlet: az ΔFosB vírus által közvetített túlexpressziója az NAc magban: instrumentális teljesítmény
Annak megítéléséhez, hogy a NAc-ben szelektíven az AFosB túlzott expressziója tudta-e figyelembe venni a bitransgénikus egerekben megfigyelt viselkedést, a HSV-AFosB-t vagy HSV-LacZ-t kontrollként szelektíven bevezettük a patkányok NAc magjába, és tanulmányoztuk ennek a manipulációnak az élelmiszerre gyakorolt hatását - erősített instrumentális teljesítmény (Ábra 5A, B). A magazinok képzését követően a viselkedési tesztek megkezdése előtt a HSV-AFosB-t vagy a HSV-LacZ-t infúzióba hoztuk az NAc magba 40 h. Az infúzió helyét és a vírus által közvetített génexpresszió mértékét mutatjuk be ábra 6A és B. NAV infúziók a HSV-ΔFosB-nél tartósan növekedtek az aktív válaszok számában (gén expresszió karral, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Ábra 5A), amely a kísérlet során is fennmaradt. Ezek a hatások szelektívek voltak, mivel az ΔFosB túlexpresszió nem volt jelentős hatással az NAc magjában az inaktív válaszok számára (Ábra 5B) vagy a kísérlet befejezését követő napon rögzített mozgásszervi aktivitás (adatok nem jelennek meg). Az ΔFosB túlzott expressziója az NAc-ben tehát a korábbi gyógyszer-expozíció vagy a ΔFosB striatális túltermelésének viselkedési hatásait utánozza.
Ábra 5.
A HSV-ΔFosB infúzióinak hatása az NAc magra az edzés előtt a műszeres válaszadással kapcsolatban. A, Aktív válaszok. B, Inaktív válaszok. Az adatokat átlag ± SEM értékként ábrázoltuk.
Ábra 6.
A, Infúziós helyek elhelyezése a vírusvektor kísérletekhez. Fel, A töltött fekete körök megfelelnek a tervezett infúziós helynek. Csak ∼-n belül készült infúziókE terület 0.5 mm-ét (azaz a NAc magjában), ahogy azt a kör jelzi, elfogadhatónak tekintették. Az ezen a területen kívüli infúziókkal rendelkező állatokat kizártuk a statisztikai elemzésekből. Alsó, Infúziós hely a NAc-ben egy reprezentatív állatban. B, a fehérje expressziójának immunhisztokémiai ellenőrzése a HSV-LacZ infúziója után. A felső panelek β-galaktozidáz expressziót mutatnak az NAc magban (2.5 és 10 × nagyítás). Az alsó panelek az immunfluoreszcencia hiányát mutatják a szomszédos kontroll szakaszokban ugyanazon immunhisztokémiai eljárás alkalmazásával, az elsődleges antitest beiktatása nélkül.
5 kísérlet: az ΔFosB vírus által közvetített túltermelése az NAc magban: progresszív arány
A végső kísérlet közvetlenül meghatározta, hogy a NA-magban az AFosB korlátozott túlexpressziója a vírus által közvetített génátviteli megközelítéssel elegendő volt-e a patkányok motivációjának fokozásához. Itt a HSV-ΔFosB-t csak a műszeres képzés befejezése után adták be, kiküszöbölve az AFosB túlexpresszió minden lehetséges hatását az edzés során a következő progresszív arányú tesztre. Egy új patkánycsoportot képeztek, mint korábban, és kiegyensúlyozott kísérleti csoportokba osztották az edzés utolsó napjain végzett teljesítményük alapján. Az állatok ezt követően kétoldali HSV-AFosB vagy HSV-LacZ infúziót kaptak az NAc magba, és az 5 d túlzott mértékű expresszióját követően progresszív arányban vizsgáltuk. A statisztikai elemzés jelentős génexpressziót mutatott a kar kölcsönhatásában (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Ábra 7A). A HSV-ΔFosB-vel infundált patkányok aktívabb választ adtak (p ≤ 0.01), mint a HSV-LacZ-vel infundáltak, míg az inaktív karra adott válasz nem volt hatással. Ezzel a növekedéssel összhangban a HSV-ΔFosB-vel infundált patkányok nagyobb törési ponttal rendelkeztek (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Ábra 7B), mint a HSV-LacZ-vel fertőzött állatok. Az AFosB hatása a kezdeti mozgásszervi aktivitásra nem vizsgált 1 h a progresszív arány teszt előtt (kiegészítő 4A. www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). A progresszív arány tesztelés napján nem volt különbség a testtömegben (kiegészítő 4B www.jneurosci.org kiegészítő anyagként). Ezek az eredmények alátámasztják megfigyelésünket a transzgenikus AFosB-t túlzottan expresszáló egerekkel, és azt mutatják, hogy az ΔFosB szelektív túltermelés az NAc-ben elegendő az élelmiszerrel kapcsolatos motiváció fokozásához.
Ábra 7.
A HSV-ΔFosB 5 d infúziók hatása az instrumentális válaszreakció tesztelése előtt, a megerősítés progresszív arányú ütemezésén. A, Kar válaszok. B, töréspont. Az adatokat átlag ± SEM-ként ábrázoljuk. *** p <0.001; ** p <0.01.
Megbeszélés
A jelen tanulmány azt mutatja, hogy az ΔFosB túlzott expressziója az NAc-n belül növeli az élelmiszer-megerősített műszeres viselkedéstr. A kokain, az amfetamin, az MDMA vagy a nikotin fokozott expozíciója a későbbi instrumentális teljesítmény tartós növekedését eredményezte. Ezek a hatóanyag-expozíciók fokozták az élelmiszer-motivált viselkedést a megerősítés fokozatos aránya szerint. A korábbi hatóanyag-expozíció ezen hatásait az AFosB korlátozott túlzott expressziója utánozza a striatumban, indukálható bitransgénikus (NSE-tTA × TetOP-AFosB) egerek alkalmazásával vagy egy új vírusvektor alkalmazásával, hogy ΔFosB-t expresszáljanak szelektíven az NAc-ben. Nevezetesen, az ΔFosB túlzott expressziója az NAc magban, miután már megszerezte az instrumentális reagálást, fokozódott az élelmiszerek motivációja a progresszív arány-ütemezés alatt. Eredményeink együttesen azonosítják az NAc magban az AFosB-t, mint a gyógyszer által indukált neuroadaptációk potenciális közvetítőjét, amely elősegítheti a instrumentális viselkedést, és kiterjeszti ennek a transzkripciós faktornak a szerepét az élelmiszer-megerősített viselkedés teljesítményére gyakorolt motivációs hatásokra. Emellett felvetik annak a lehetőségét is, hogy a NAc-ben a ΔFosB-expressziót kiváltó körülmények befolyásolhatják a természetes és a kábítószer-erősítők motivációs tulajdonságait is..
Az AFosB halmozódó krónikus, de nem akut, expozíció utáni krónikus, de nem akut expozíció után felhalmozódik az NAc és a dorzális striatum dinamorfin expresszáló közepes tüskés neuronjaiban. Ezt a regionális expressziós mintázatot az itt használt indukálható bitransgénikus AFosB-t expresszáló egerekben reprodukáljuk. Ezekben az egerekben: a megnövekedett ΔFosB sztriatális szint növeli az állatok kokainra és morfinra való érzékenységét, a feltételes helypreferencia alapján (Kelz és munkatársai, 1999; Zachariou és munkatársai, 2006). Ezenkívül fokozza a kokainra adott válaszreakció progresszív arányát, ami arra utal, hogy a kokain önadagolásának motivációját fokozza a striatális ΔFosB túlexpresszió (Colby és munkatársai, 2003). Itt azt tapasztaltuk, hogy ezekben az egerekben a striatális AFosB túlexpresszió is fokozta a táplálkozási fokozatot reagáló progresszív arányt, és hogy ezeket a hatásokat az AFosB korlátozott vírus által közvetített túlzott expressziója reprodukálja a patkányokban. Adataink arra utalnak, hogy az ΔFosB a primer erősítők transzkripciós modulátoraként működik, legyen az étel, gyógyszer vagy esetleg edzés, amely összhangban van az előzetes megfigyelésekkel, hogy a ΔFosB striatális expressziója megnövekedett a krónikus kerékpározás vagy szacharóz ivás után.McClung és munkatársai, 2004). Ezek az adatok arra utalnak, hogy az ΔFosB NAc túlexpressziója növelheti mind a természetes, mind a kábítószer-erősítők motivációs hatását.
A NAc alrégióit azzal érvelték, hogy a pavloviai vagy az instrumentális ösztönző folyamatok befolyásolását a műszeres teljesítményre differenciáltan közvetítik (Corbit és munkatársai, 2001; de Borchgrave és munkatársai, 2002), míg az instrumentális teljesítményre gyakorolt általánosabb motivációs hatásokat más régiók, például az amygdala központi magja kódolhatja. (Corbit és Balleine, 2005). Az NAc magja azonban azt is javasolta, hogy kritikus hely legyen a célirányos instrumentális tanulás megszerzésében (Smith-Roe és Kelley, 2000; Baldwin és munkatársai, 2002a,b; Kelley, 2004). A műszeres viselkedés fokozására a korábbi gyógyszerek expozícióinak és a transzgenikus striatum ΔFosB túlzott expressziójának egyenértékű hatásait mutatjuk be. A NAV magra korlátozott HSV-ΔFosB infúziója szintén növelte az élelmiszer-megerősített instrumentális választ. Bár ezek a kísérletek nem zárják ki a dorsalis striatum hozzájárulását ezekhez a viselkedésekhez, erősen azt sugallják, hogy az ΔFosB által indukált változások a génexpresszióban az NAc-ben elegendőek ahhoz, hogy növeljék az élelmiszer-motivált választ. Mivel a progresszív arány reagálása akkor is fokozódott, ha az AFosB kifejeződött a stabil instrumentális teljesítmény elérése után, valószínű, hogy a instrumentális viselkedésre gyakorolt motivációs hatások szerepet játszanak. Az a lehetőség azonban, hogy manipulációink befolyásolják az instrumentális tanulási folyamatokat, azonban nem zárhatók ki teljesen. Következtetéseink alátámasztására az előző orális kokain-expozíció után megfigyelt instrumentális teljesítmény növekedése (Miles és munkatársai, 2004) azzal érvelnek, hogy a krónikus nikotin-kezelés képességének megfelelő motivációs változásokkal jár, hogy fokozzák az egerekben fellépő progresszív arányt.Brunzell és munkatársai, 2006). Továbbá, a dopamin transzporter knock-out egerek, amelyekben extracelluláris dopamin szintek emelkednek, mind a fokozott ΔFosB immunreaktivitást, mind az élelmiszer-megerősített motivációt mutatják, de nem változtatják meg a tanulást (Cagniard és munkatársai, 2006). Ráadásulmegállapítottuk, hogy az egerekben a striatum ΔFosB túlzott mértékű expressziója nem befolyásolta a teljesítményt, amikor az ételeket „előzetesen leértékelték”. Ezek az adatok azt mutatják, hogy az állatok érzékenyek voltak a megerősítő motivációs értékére, és hogy a válaszadás célpont volt.
A korábbi ismételt hatóanyag-expozíció fokozhatja a természetes erősítőkkel kapcsolatos kondicionált ingerek által okozott viselkedési kontrollot is, amelyet pavloviai megközelítéssel mérnek (Harmer és Phillips, 1998; Taylor és Jentsch, 2001; Olausson és munkatársai, 2003), kondicionált megerősítés (Taylor és Horger, 1999; Olausson és munkatársai, 2004), és a pavlovi-instrumentális transzfer (Wyvell és Berridge, 2001). Most már meggyőző bizonyíték van arra, hogy a NAc magja, szemben a héjmal, részt vesz a kábítószer-motivált viselkedés szabályozásában a pavloviai kondicionált ingerekkel (Parkinson és munkatársai, 1999, 2002; Hall és munkatársai, 2001; Dalley és munkatársai, 2002; Ito és munkatársai, 2004). Eredményeink arra utalhatnak, hogy a NAc-ben a gyógyszer által indukált ΔFosB indukció lehet egy olyan mechanizmus, amellyel ezekben az eljárásokban a viselkedési kontroll fokozódik. Az is lehetséges, hogy a pavloviai kondicionált ingerek, amelyek kondicionált erősítőkként működnek, hozzájárulnak a jelenlegi viselkedési hatásokhoz. A striatális ΔFosB növekedése által közvetített ilyen kondicionált ingerek viselkedésének fokozott ellenőrzése szintén hozzájárulhat a fehérje hatásához a gyógyszer által indukált, feltételes hely preferenciához (Kelz és munkatársai, 1999; Zachariou és munkatársai, 2006) és fokozatos arányban válaszol a kokainra (Colby és munkatársai, 2003). A motivációs folyamatok megváltozása feltételezhető, hogy hozzájárulnak az addiktív viselkedés fejlődéséhez és fenntartásához (Robinson és Berridge, 1993; Jentsch és Taylor, 1999; Robbins és Everitt, 1999; Nestler, 2004). A jelenlegi adatok összhangban vannak más elméletekkel is, amelyek több instrumentális és pavlovi folyamatot hangsúlyoznak addiktív viselkedésben (Everitt és Robbins, 2005). További munkára van szükség ahhoz, hogy meghatározzuk a drog- és ΔFosB-indukált neuroadaptációk szerepét az NAc-ben és más limbikus-striatusi alrégiókban az egyes társult vagy motivációs tényezők tekintetében, amelyek megkönnyíthetik az instrumentális teljesítményt és hozzájárulhatnak a kényszeres viselkedéshez.
Bár a pontos molekuláris mechanizmusok, amelyek révén a NAc hatásának megváltozása az elsődleges vagy kondicionált erősítők által motivált viselkedés nem ismert (Kelley és Berridge, 2002), az NAc GABAerg közepes tüskés neuronjait a kábítószer- és tapasztalatfüggő plaszticitás kritikus szubsztrátumának tekintik. Itt a ventrális tegmentális területről származó dopaminerg bevitel és a kortikolimbikus afferensek glutamatergikus bevitele a szokásos dendritekre és dendritikus tüskékre konvergál (Sesack és Pickel, 1990; Smith és Bolam, 1990). Krónikus pszichostimuláns expozíció növeli az ilyen tüskék sűrűségét a NAc héj neuronjain és a magban (Robinson és Kolb, 1999; Robinson és munkatársai, 2001; Li és munkatársai, 2003, 2004). A közelmúltban a viselkedési szenzibilizáció indukciója kifejezetten a dendritikus tüskék NAc magon belüli növekedésével társult.Li és munkatársai, 2004). Nevezetesen, a kokain által kiváltott gerincsűrűség-növekedés csak D-ben van1- az ΔFosB-t expresszáló pozitív pozitív neuronok (Robinson és Kolb, 1999; Lee és munkatársai, 2006). Az NAc magban lévő ΔFosB így hozzájárulhat a tartós szinaptikus plaszticitáshoz, amely befolyásolhatja a műszeres viselkedést. Valóban, a dopamin-glutamát neurotranszmisszió kritikus szerepe (Smith-Roe és Kelley, 2000), protein kináz A aktivitás (Baldwin és munkatársai, 2002a) és de novo fehérjeszintézis (Hernandez és munkatársai, 2002) az NAc magjában az instrumentális teljesítményről korábban jelentettek. Most azonosítjuk az ΔFosB-t olyan transzkripciós faktorként, amely tartósan fokozza az élelmiszer-megerősített választ, ha az NAc magban túlzott mértékben expresszálódik. Az ezekben a hatásokban részt vevő specifikus gének vagy fehérjék pontosan meghatározásra kerülnek. Az AFosB szabályozza a több fehérje expresszióját a neuroplasztikában részt vevő NAc-ben (McClung és Nestler, 2003). Egy közelmúltbeli microarray analízis az itt használt AFosB-t expresszáló bitransgenikus egerek NAc-jében a génexpressziós mintákat jellemezte, és azonosította a gének egy részhalmazát, amelyet a ΔFosB viszonylag rövid távú expressziója szabályozott (McClung és Nestler, 2003). A BDNF egy ilyen gén volt, és a BDNF ebben a neurális áramkörben ismert, hogy fokozza a gyógyszer- és élelmiszerrel kapcsolatos jelzésekre adott válaszokat (Horger és munkatársai, 1999; Grimm és munkatársai, 2003; Lu és munkatársai, 2004). További érdekes gén ciklinfüggő kináz 5 (Bibb és munkatársai, 2001), amelyet ΔFosB is indukál, és szabályozhatja mind a kokain által indukált szerkezeti plaszticitást (Norrholm és munkatársai, 2003) és a motiváció, amelyet a természetes vagy kábítószer-erősítőkre adott progresszív arány alapján határoztak meg (JR Taylor, nem publikált megfigyelések). További jelöltek az AMPA glutamát receptorok GluR2 alegysége (Kelz és munkatársai, 1999) és az NFκB transzkripciós faktor (nukleáris faktor κB) (Ang és munkatársai, 2001). Fontos lenne értékelni ezeket és más szabályozott fehérjéket NAc alrégiókban, mint jelölteket az ΔFosB viselkedési hatásainak közvetítésére a instrumentális teljesítményre és a motivációra.
A a jelenlegi kísérletsorozat azt bizonyítja, hogy az ΔFosB túlzott expressziója az NAc-n belül fokozhatja az élelmiszer-motivált viselkedést, és ezáltal szabályozhatja a műszeres teljesítményt, amint azt korábban a kábítószer-jutalmak esetében kimutatták. Ezek az adatok új bizonyítékokat szolgáltatnak arra vonatkozóan, hogy az ΔFosB általános molekuláris kapcsolóként működhet, amelyek a megerősített erők erősítőinek a célirányos viselkedéshez kapcsolódó fejlesztéseivel kapcsolatosak. Eredményeink felvetik annak a lehetőségét, hogy a NAc ΔFosB indukciója, például függőséget okozó gyógyszerek, stressz vagy talán nagyon jutalmazó élelmiszerek, kritikus mechanizmus lehet, melynek következtében a diszfunkcionális motivációs állapotok pszichiátriai rendellenességeket okoznak a kényszeres viselkedéshez.
Lábjegyzetek
o Kapott március 15, 2006.
o A felülvizsgálat június 23, 2006.
o Elfogadott augusztus 2, 2006.
Ezt a munkát támogatta a Kábítószer-visszaélés Nemzeti Intézete, a Nemzeti Mentális Egészségügyi Intézet, valamint az Országos Alkohol-visszaélés és Alkoholizmus Intézet. Hálásan ismerjük Dilja Krueger, Drew Kiraly, Dr. Ralph DiLeone, Robert Sears és Dr. Jonathan Hommel értékes segítségét a Yale Egyetem Pszichiátriai Tanszékén. Hálásak vagyunk Dr. Jennifer Quinnnek és Dr. Paul Hitchcottnak, hogy hasznos megjegyzéseket tettek a kéziratról.
A levelezést Jane R. Taylornak, a Pszichiátriai Tanszéknek, a Molekuláris Pszichiátriai Osztálynak, a Yale Egyetem Orvostudományi Karának, a Ribicoff kutatási létesítményeinek, a Connecticut Mentális Egészségügyi Központjának, az 34 Park Streetnek, a New Havennek, a CT 06508-nek kell címezni.[e-mail védett]
Szerzői jog © 2006 Neurológiai Tudományi Társaság 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Referenciák
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) NFkB indukció a nukleáris accumbensben krónikus kokain adagolással. J Neurochem 79: 221 – 224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Holahan MR,
4. Kelley AE
(2002a) Az apetitív instrumentális tanulást a cAMP-függő fehérje-kináz gátlása befolyásolja a sejtmagban. Neurobiol Learn Mem 77: 44 – 62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) Az Appetitive instrumentális tanulás az NMDA és a dopamin D egyidejű aktiválását igényli1 receptorok a mediális prefrontális kéregben. J Neurosci 22: 1063 – 1071.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) A sejtmag iboténsav-elváltozásainak hatása az instrumentális hatásra. Behav Brain Res 65: 181 – 193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) A függőség, a dopamin és a memória molekuláris mechanizmusai. Neuron 25: 515 – 532.
6. ↵
1. Berridge KC
2. Robinson TE
(2003) Parsing jutalom. Trendek Neurosci 26: 507 – 513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A
6. Snyder GL
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC
10. Nairn AC
11. Nestler EJ
12. Greengard P
(2001) A krónikus kokain-expozíció hatásait a Cdk5 neuron fehérje szabályozza. Természet 410: 376 – 380.
8. ↵
1. Brunzell DH
2. Chang JR
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) béta2-alegység-tartalmú nikotin-acetil-kolin receptorok szerepet játszanak a nikotin által indukált kondicionált megerősítésben, de nem fokozatos arányban válaszolnak az élelmiszerre a C57BL / 6 egerekben. Pszichofarmakológia (Berl) 184: 328 – 338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balsam PD,
3. Brunner D
4. Zhuang X
(2006) A krónikusan megnövekedett dopamin egerek fokozott motivációval rendelkeznek, de nem tanulnak az élelmiszer-jutalomért. Neuropszichofarmakológia 31: 1362 – 1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) A kokain jutalom szabályozása a CREB által. Tudomány 282: 2272 – 2275.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Hope BT,
4. Nakabeppu Y
5. Nestler EJ
(1997) Krónikus Fos-hoz kapcsolódó antigének: az AFosB stabil változatai az agyban krónikus kezelésekkel indukálva. J Neurosci 17: 4933 – 4941.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR
8. Duman RS
9. Nestler EJ
Az agyban indukálható, célzott génexpresszióval rendelkező transzgenikus állatok. Mol Pharmacol 54: 495 – 503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K
3. Steffen C,
4. Nestler EJ
5. Önálló DW
(2003) A ΔFosB striatális sejttípus-specifikus túlexpressziója fokozza a kokain ösztönzését. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) A bazolaterális és központi amygdala elváltozások kettős disszociációja a pavloviai instrumentális transzfer általános és kimenet-specifikus formáin. J Neurosci 25: 962 – 970.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) A nukleáris sejtek szerepe az instrumentális kondicionálásban: bizonyíték a funkcionális disszociációra az accumbens mag és a héj között. J Neurosci 21: 3251 – 3260.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamin és diszkriminált megközelítési tanulás: az 6-hidroxidopamin elváltozások és a szisztémás apomorfin beadás interaktív hatásai. Pszichofarmakológia (Berl) 161: 425 – 433.
17. ↵
1. de Borchgrave R
2. Rawlins JN,
3. Dickinson A
4. Balleine BW
(2002) A citotoxikus magok akumbens hatásai a patkányok instrumentális kondicionálására. Exp Brain Res 144: 50 – 68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) A bazolaterális amygdala és a nucleus accumbens mag közötti közvetlen kölcsönhatások a kokain-kereső magatartás alapját képezik. J Neurosci 24: 7167 – 7173.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Az önadagolt kokain, heroin vagy szacharóz párosított ingerek megerősített tulajdonságai: következményei az addiktív viselkedés fennmaradásának. Neurofarmakológia 47 ([Suppl 1]) 202 – 213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Műveletek és szokások: a magatartás autonómiája. Philos Trans R Lond B Biol Sci 308: 67 – 78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) A kábítószer-függőség erősítésének neurális rendszerei: a tettektől a szokásokig a kényszerig. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.
22. ↵
1. Faure A
2. Haberland U
3. Conde F
4. El Massioui N
(2005) A nigrostriatális dopamin rendszer sérülése megzavarja az inger-válasz szokás kialakulását. J Neurosci 25: 2771 – 2780.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T
4. Hope BT,
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Az agyi eredetű neurotrofikus faktor fehérjék időfüggő növekedése a mesolimbikus dopamin rendszerben a kokainból történő kivonás után: következmények a kokain vágy inkubálására. J Neurosci 23: 742 – 747.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
24. ↵
1. J Hall,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A
5. Everitt BJ
(2001) Az amygdala és a nucleus accumbens mag központi magjának bevonása a Pavlovi befolyások közvetítésébe a instrumentális viselkedésbe. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Fokozott étvágygerjesztés a d-amfetaminnal végzett ismételt kezelés után. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002) Az instrumentális tanulás korai konszolidációja megköveteli a fehérje szintézist a nucleus activumban. Nat Neurosci 5: 1327 – 1331.
27. ↵
1. A Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Helyi génütközés az agyban vírusközvetített RNS-interferencia segítségével. Nat Med 9: 1539 – 1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) A Preexposure érzékenyíti a patkányokat a kokain jótékony hatásaira. Pharmacol Biochem Behav 37: 707 – 711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK
3. Schenk S
(1992) Az amfetamin és a nikotin expozíciója arra készteti a patkányokat, hogy alacsony adagot kokaint önmaguknak adjanak be. Pszichofarmakológia (Berl) 107: 271 – 276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ
6. Taylor JR
(1999) A mozgásszervi aktivitás fokozása és a kokainnak nyújtott kondicionált jutalom agyi eredetű neurotrofikus faktor által. J Neurosci 19: 4110 – 4122.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) A kokainkereső magatartás differenciális szabályozása a nucleus carrbens mag és héj szerint. Nat Neurosci 7: 389 – 397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Frontostriatális diszfunkcióból eredő impulzivitás kábítószerrel való visszaélés esetén: a jutalomhoz kapcsolódó ingerek által befolyásolt magatartáskontroll. Pszichofarmakológia (Berl) 146: 373 – 390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Az étvágy motivációjának ventrális striatális szabályozása: szerepe a nyelési viselkedésben és a jutalomhoz kapcsolódó tanulásban. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) A természetes előnyök idegtudománya: relevancia az addiktív gyógyszerekre. J Neurosci 22: 3306 – 3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.
4. Whisler K
5. Gilden L
6. Beckmann AM
7. Steffen C,
8. Zhang YJ
9. Marotti L
10. Önálló DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G
13. Surmeier DJ
14. Neve RL,
15. Duman RS
16. Picciotto MR
17. Nestler EJ
(1999) Az AFosB transzkripciós faktor expressziója az agyban szabályozza a kokain érzékenységét. Természet 401: 272 – 276.
36. ↵
1. A Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Az amfetamin a CREB transzkripciós faktor segítségével szabályozza a gén expresszióját patkány striatumban. J Neurosci 14: 5623 – 5634.
37. ↵
1. Lee KW
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K
5. Nairn AC
6. Greengard P
(2006) A kokain által indukált dendritikus gerincképződés D1 és D2 dopamin receptor tartalmú közepes tüskés idegsejtekben a nucleus akumulbensben. Proc Natl Acad Sci USA 103: 3399 – 3404.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) A tartós amfetamin-indukált változások elhelyezkedése a dendritikus tüskék sűrűségében közepes tüskés idegsejteken, a nucleus akumulén és caudate-putamenben. Neuropszichofarmakológia 28: 1082 – 1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) A viselkedés-szenzibilizáció indukciója a kokain által kiváltott szerkezeti plaszticitáshoz kapcsolódik, amely a magjaiban (de nem a héjában) található, a magvakat felismerve. Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Az agyi eredetű neurotróf faktor egyetlen infúziója a ventrális tegmentális területre kiváltja a kokain tartós fokozódását az abbahagyás után. J Neurosci 24: 1604 – 1611.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) A gén expressziójának és a kokain-jutalomnak a szabályozása CREB és ΔFosB által. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI
4. Zachariou V
5. Berton O
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: molekuláris kapcsoló az agy hosszú távú alkalmazkodásához. Brain Res Mol Agy Res 132: 146 – 154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Kondicionált aktivitás és instrumentális megerősítés patkányok hosszú távú orális fogyasztását követően. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) A kábítószer-függőség molekuláris mechanizmusai. Neurofarmakológia 47 ([Suppl 1]) 24 – 32.
45. ↵
1. Nestler EJ
2. Barrot M,
3. Önálló DW
(2001) ΔFosB: tartós molekuláris kapcsoló a függőséghez. Proc Natl Acad Sci USA 98: 11042 – 11046.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ
4. Ouimet CC
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) A dendritikus tüskék kokain által indukált proliferációja a nucleus akumulbens ciklin-dependens kináz-5 aktivitásától függ. Idegtudomány 116: 19 – 22.
47. ↵
1. Nye HE
2. Hope BT,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Farmakológiai vizsgálatok a krisztus FOS-hoz kapcsolódó antigén indukció szabályozására a kokain által a striatumban és a nucleus accumbensben. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Az ismételt nikotin expozíció javítja a jutalomhoz kapcsolódó tanulást patkányokban. Neuropszichofarmakológia 28: 1264 – 1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Az ismételt nikotin expozíció javítja a reagálást kondicionált megerősítéssel. Pszichofarmakológia (Berl) 173: 98 – 104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) A mag és a héj sérüléseinek disszociációja az étvágygerjesztő pavloviai megközelítés viselkedésében, valamint a kondicionált megerősítés és a mozgásszervi aktivitás fokozása a d-amfetamin segítségével. J Neurosci 19: 2401 – 2411.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. RN bíboros,
4. Bamford A,
5. B Fehnert,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) A nukleusz-felhalmozódó dopamin-kimerülés mind az étvágygerjesztő Pavloviai viselkedés megszerzését, mind pedig a teljesítményét rontja: befolyásolja a mezoakkumbens dopamin funkcióját. Behav Brain Res 137: 149 – 163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) A patkány agya sztereotaxikus koordinátákkal (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI
2. Hadeishi Y
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L
6. Duman RS
7. Nestler EJ
(2004) ΔFosB indukálása a jutalmú agyi struktúrákban a krónikus stressz után. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) A stressz és a gyógyszer által kiváltott viselkedés-szenzibilizáció növeli az amfetamin ön-beadásának sebezhetőségét. Brain Res 514: 22 – 26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R
6. Chiamulera C
(1997) A nikotin és a kokain addiktív tulajdonságainak általános idegi szubsztrátjai. Science 275: 83 – 86.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Kábítószer-függőség: a rossz szokások összeadódnak. Természet 398: 567 – 570.
57. ↵
1. Robinson TE
2. Berridge KC
(1993) A kábítószer-vágy idegi alapjai: a függőség ösztönző-szenzibilizációs elmélete. Brain Res Brain Res Rev 18: 247 – 291.
58. ↵
1. Robinson TE
2. Kolb B
(1999) A dendritek és a dendritikus gerinc morfológiájának változásai a nucleus activum és a prefrontalis kéregben amfetaminnal vagy kokainnal történő ismételt kezelés után. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.
59. ↵
1. Robinson TE
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) A kokain önbeadása megváltoztatja a dendritek és a dendritikus tüskék morfológiáját a felhalmozódásban és a neocortexben. 39 szinapszis: 257 – 266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) A patkányok mediális magjában a akumulének, a hippokampusz és a katecholaminerg terminálisok a tüskés idegsejteken konvergálnak és egymáshoz igazodnak. Brain Res 527: 266 – 279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. D-vihar,
4. Nestler EJ
(2003) A CRE által közvetített transzkripció szabályozása amfetamin által az egér agyában. 48 szinapszis: 10 – 17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) A bazális ganglionok idegi hálózata, amelyet az azonosított neuronok szinaptikus kapcsolatainak vizsgálata tárt fel. Trends Neurosci 13: 259 – 265.
63. ↵
1. A Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) Az NMDA és a dopamin D egyidejű aktiválása1 az atomok magjain belüli receptorok szükségesek az étvágygerjesztő műszeres tanuláshoz. J Neurosci 20: 7737 – 7742.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) A fokozott válasz az intraakkumbens amfetamin által keltett kondicionált jutalomra fokozódik a kokain szenzibilizáció után. Pszichofarmakológia (Berl) 142: 31 – 40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) A pszichomotoros stimulánsok ismételt, időszakos beadása megváltoztatja a pavloviai megközelítés viselkedésének megszerzését patkányokban: a kokain, a d-amfetamin és az 3,4-metiléndioxi-metamfetamin („Ecstasy”) különféle hatásai. Biol Psychiatry 50: 137 – 143.
66. ↵
1. P Vezina,
2. Lorrain DS
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) A középső agy dopamin neuron reakcióképességének szenzibilizálása elősegíti az amfetamin elérését. J Neurosci 22: 4654 – 4662.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L
5. Thoren P,
6. Nestler EJ
7. Brene S
(2002) ΔFosB szabályozza a kerék futását. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Ösztönző szenzibilizáció korábbi amfetamin-expozícióval: fokozott dákó által kiváltott „vágy” a szacharóz jutalomra. J Neurosci 21: 7831 – 7840.
Absztrakt / ingyenes teljes szöveg
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) A dorsolateral striatum sérülései megtartják a várható eredményt, de megzavarják a szokások kialakulását az instrumentális tanulásban. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.
70. ↵
1. Zachariou V
2. Bolanos CA
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O
9. Sim-Selley LJ
10. Dileone RJ,
11. Kumar A
12. Nestler EJ
(2006) Az ΔFosB nélkülözhetetlen szerepe a felhalmozódó magban a morfin hatásában. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
;