A ghrelin szerepe az élelmiszer-jutalomban: a ghrelin hatása a szacharóz önadagolására és a mezolimbikus dopamin és az acetilkolin receptor gén expressziójára (2012)

Ugrás:

Absztrakt

Az étkezési döntést erősen befolyásolják a nem homeosztatikus tényezők, például az étel ízlése. Az ételek jutalmazó és motivációs értéke felülírhatja a homeosztatikus jeleket, ami megnövekedett fogyasztáshoz és így elhízáshoz vezet. A Ghrelin, egy bélből származó orexigén hormon kiemelkedő szerepet játszik a homeosztatikus táplálásban. A közelmúltban azonban a mezolimbikus dopaminerg jutalom útjának hatékony modulátoraként jelent meg, ami arra utal, hogy a ghrelin szerepet játszik az ételjutalomban. Itt arra kerestük a választ, hogy a ghrelin és annak receptorai fontosak-e a természetes cukorjutalom motivációjának megerősítésében, megvizsgálva a ghrelin receptor (GHS-R1A) stimuláció és blokkolás szerepét a szacharóz progresszív arányú operáns kondicionálásában, amely eljárás a motivációs vágy mérésére szolgál. jutalmat szerezzen. A periférián és központilag beadott ghrelin jelentősen megnövelte az operáns válaszreakciót, ezért ösztönzi a szacharózt. A JMV1 GHS-R2959A antagonistát felhasználva kimutattuk, hogy a GHS-R1A jelátvitel blokkolása jelentősen csökkentette a szacharózra reagáló operáns válaszát. Továbbá megvizsgáltuk a ghrelin hatásait a kulcsfontosságú mezolimbikus jutalomcsomópontokra, a ventrális tegmentális területre (VTA) és a nucleus accumbensre (NAcc), a krónikus központi ghrelin kezelés hatásának értékelésével a fő jutalom neurotranszmitter receptorokat kódoló gének, nevezetesen a dopamin és az acetilkolin expressziójára. A Ghrelin-kezelés összefüggésben volt a megnövekedett dopamin receptor D5 és az acetilkolin receptor nAChRβ2 gén expressziójával a VTA-ban és csökkent D1, D3, D5 és nAChRα3 expresszióval az NAcc-ben. Adataink azt mutatják, hogy a ghrelin fontos szerepet játszik a szacharóz motivációjában és megerősítésében, valamint hatással van a dopamin és acetilkolin kódoló gének expressziójára a mezolimbikus jutalom áramkörben. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a ghrelin antagonisták terápiás potenciállal bírnak az elhízás kezelésében és az édes ételek túlfogyasztásának elnyomásában.

Kulcsszavak: Acetilkolin, dopamin, élelmezési motiváció, ghrelin, GHS-R1A, operatív kondicionálás

BEVEZETÉS

Jól bebizonyosodott, hogy a keringő ghrelin hormon fontos szerepet játszik az energiaegyensúly szabályozásában (Kojima et al. 1999; Nogueiras, Tschöp & Zigman 2008). Elsősorban a gyomor által szabadul fel (Dornonville de la Cour et al. 2001), a ghrelin erős orexigén hatásokat vált ki mind rágcsálókban, mind emberben (Ökörszem et al. 2000, 2001) a központi idegrendszer (CNS) receptor stimulálása révén (Salomeet al. 2009a), a növekedési hormon szekretagóg receptor (GHS-R1A) (Howard et al. 1996). Valójában a ghrelin a táplálkozásban és az energia homeosztázisában résztvevő hypotalamus és agytörzsek célpontját célozza (Dickson, Leng és Robinson 1993; Bailey et al. 2000; Hewson & Dickson 2000; Faulconbridge et al. 2003, 2008). A táplálkozási viselkedést azonban nem csak a tápanyag-pótlás szükségessége (vagyis a homeosztázis helyreállítása) motiválja; az ízletes, magas zsírtartalmú és / vagy cukoros ételek a telített állapot ellenére is motiválhatják a bevitelt (Zheng et al. 2009). Az ízletes természetes erősítők, például a cukor túlzott fogyasztása a jelenlegi elhízási járvány egyik fő tényezõje. Még nem kell meghatározni, hogy a központi ghrelin jelzőrendszer fontos-ea nem homeosztatikus cukorfogyasztás szempontjából, ezáltal potenciálisan fontos terápiás célt szolgálva a kalória, ízléses és jutalmazó édes ételek bevitelének visszaszorítására.

A legfrissebb eredmények inspirációja szerint a ghrelin kölcsönhatásba lép a mezomimbikus területekkel, amelyek részt vesznek a nem homeosztatikus / jutalomtáplálásban (Jerlhag et al. 2007), megpróbáltuk felmérni a ghrelin és receptorának szerepét az ételmotivációban és a szacharóz jutalom célirányos viselkedésében. Ezek a mezolimbikus területek már régóta a kábítószer-függőség kutatásának középpontjában állnak, mivel a legtöbb visszaélés elleni drog fő célpontjai (Engel 1977; Koob 1992). A ghrelin célzott mezolimbikus útvonala magában foglalja a dopamin kihúzódását a ventrális tegmental területről (VTA) a nucleus akumulénokra (NAcc) (Jerlhag et al. 2006, 2007), amely útmutatást biztosít mind addiktív vegyi gyógyszerektől, mind természetes jutalmaktól, beleértve az ételt (Koob 1992). Érdekes módon a GHS-R1A expresszálódik a dopaminerg neuronokban (Abizaid et al. 2006), ami magában foglalja a ghrelin lehetséges közvetlen hatásait a VTA dopamin rendszerre. Ezeket az immunhisztokémiai adatokat kiegészítik a ghrelin hatásának halmozódó viselkedési és elektrofiziológiai bizonyítékai a VTA-ban. Például a ghrelin VTA-n belüli beadása növeli a VTA dopamin neuronok aktivitását (Abizaid et al. 2006), és növeli a dopamin felszabadulását a NAcc-be (Jerlhag et al. 2007). A Ghrelin emeli a kolinerg – dopaminerg kapcsolat aktivitását is, ami egy fontos jutalomút. Úgy tűnik, hogy a ghrelin dopaminra gyakorolt ​​hatásainak legalább egy részét a kolinerg rendszer közvetíti (Jerlhag et al. 2007).

Noha megállapítást nyert, hogy a ghrelinnek erős orexigén hatása van, amikor az élelmiszerek könnyen hozzáférhetők, még nem ismert, hogy a ghrelin orexigén hatása kiterjeszthető-ea természetes motívumok megváltoztató motivációjára és erősítő szempontjaira, például az ízletes édes ételekre (azaz a vágy növelésére és az erőfeszítés / munka, amelyet hajlandó tenni az édes élvezet megszerzéséhez). Az addiktív gyógyszerek motivációja és jutalomhatékonysága az önadminisztráció, az operatív kondicionáló modellben értékelhető. Az operandus kondicionálása a motivált viselkedés elemzésének fő folyamata, amely felméri a szerzett és az önkéntes viselkedést, amelynek célja a jutalom megszerzése. A munka összegének mérésével, amelyet az alany hajlandó költeni a jutalom megszerzéséhez, objektív mérési lehetőséget kínál a jutalom értékére (Hodos 1961). A mezolimbikus régiók döntő jelentőségűek a viselkedés motivációs szempontjai szempontjából, ideértve az etetést is, és egyértelmű, hogy a ghrelin befolyásolja az idegrendszeri aktivitást a megfelelő mezolimbikus régiókban. Ami még nem történt meg, a ghrelin közvetlen hatása a magas cukortartalmú ételek motivációjára. Vizsgálatunk elsődleges célja annak vizsgálata, hogy a központi ghrelin jelzőrendszer szerepet játszik-e a magas cukortartalmú ételjutalom hedonikus / motivációs vagy pozitív megerősítő tulajdonságaiban, és hogy ezt a rendszert elnyomja-e egy új, szelektív GHS-R1A antagonista JMV2959 felhasználásával (Salomeet al. 2009a) elnyomhatja az édességek beszerzésének motivációját. A GHS-R1A antagonistákat jelenleg 2 típusú cukorbetegekben terápiásán értékelik, mivel a ghrelin jelátvitel elnyomása jótékony hatással van a glükóz homeosztázisára (nap et al. 2006), olyan hatások, amelyek szintén előnyösek lennének az édes ételek csökkentett beviteléből. Számos bizonyíték arra utal, hogy a dopaminerg és a kolinerg neurotranszmisszió fontos szerepet játszik a motivált jutalomviselésben. Ezért a ghrelinnek a központi jutalmazási áramkörre gyakorolt ​​hatásainak további jellemzése érdekében kiértékeljük a ghrelin kezelés hatását a dopamin és acetilkolin receptor gén expressziós változásaira a kulcsfontosságú jutalomcsomópontokban, a VTA és NAcc, a ghrelin kezelés után.

MÓD

Állatok

Felnőtt hím Sprague-Dawley patkányokat (200 – 250 g, Charles River, Németország) 12 órás világos / sötét ciklusban helyeztünk el, rendszeres tálalással és vízzel. ad libitumkivéve, ha másként nem jelezzük. Az összes állati eljárást etikai engedéllyel és a göteborgi egyetemi intézményi állatkezelési és felhasználási bizottság irányelveinek megfelelően hajtották végre.

Sebészet

A központi idegrendszerre irányuló magatartási kísérletekhez egy harmadik kamrai vezető kanül (26-os nyomtávú; Plastics One, Roanoke, VA, USA; koordináták: a középvonalon, 2 mm-rel a bregma mögött és 5.5 mm-es hasi-dura mater-en, 7.5 mm-es injektorral) ventrális a dura felé) izoflurán altatásban ültettük be. A kanüleket fogászati ​​akril és ékszerész csavarokkal rögzítették a koponyához, és obturátorral zárták le, az előzőekben leírtak szerint (Skibicka, Alhadeff & Grill 2009). A kanül elhelyezését a harmadik kamrában egy héttel a műtét után ellenőriztük a szimpathoadrenális mediált glikémiás válasz mérésével az 5-tio-D-glükóz központi injekciójára [210 μg a vivőanyag 2 μl-jében (sóoldat)] (Ritter, Slusser & Stone 1981). Ebben az elhelyezés-ellenőrzési protokollban az alany bevonásához az injektálás utáni legalább a kiindulási plazma glükózszint 100% -os emelkedését igényelték. A gén expressziós kísérlethez a patkányokat érzéstelenítették (60 – 75 mg / kg Ketalar és 0.5 mg / kg Domitor ip; Pfizer, Svédország; Orion Co, Finnország) és egy krónikus intracerebroventricularis (ICV) kanül (Alzet Brain Infusion Kit II, A DURECT Corp-t (Cupertino, CA, USA) behelyeztük az oldalkamrába a következő koordinátákkal: 0.6 mm hátsó rész a bregmától, 1.4 mm oldalirányban a középvonalból, 2.3 ventrális a koponyából. A kanül egy polietilén katéteren keresztül az állatok hátába szubkután beültetett ozmotikus minipumppal (Alzet mini-ozmotikus szivattyú modell 2002, Durect, Cupertino, áramlási sebesség, 0.5 μl / óra 14 napokra) bekötve.

Üzemeltető kondicionáló modell

Készülék

Operatív kondicionáló kísérletekre nyolc, patkányok számára kialakított kondicionáló kamrában (30.5 × 24.1 × 21.0 cm; Medical-Associates, Georgia, VT, USA) helyeztük őket, amelyeket egy hangcsillapított, halványan megvilágított szekrénybe helyeztünk. Mindegyik kamra fémrácsos padlóval, két behúzható karral, fölött fehér izzókkal, és egy élelmiszer-pellet-adagolóval szállította az 45 mg szacharózpelletet (GlaxoSmithKline, Test Diet, Richmond, IN, USA) az ételtálcára. Az adatgyűjtést és -feldolgozást a MED-PC szoftver (Medical-Associates, Georgia, VT, USA) vezérelte.

Képzések

Az operandus kondicionálására alkalmazott eljárást ala Fleur et al. 2007) és (Tracy et al. 2008). Az összes patkányt enyhe táplálkozási korlátozásnak vetettük alá, amelynek során kezdeti testtömegüket fokozatosan 90% -ra csökkentették egy hét alatt. Az ICV-kanülözött patkányoknál az edzés egy héttel a műtét után kezdődött. Az operatív dobozokba helyezés előtt a patkányokat legalább két alkalommal a házi ketrec környezetében a szacharózpelleteknek tették ki. Ezután a patkányok megtanultak, hogy rögzítsék a szacharózpelletet rögzített arányú FR1 ütemterv szerint, napi két alkalommal. A FR1 alkalmazásban az aktív kar egyetlen megnyomásával egy szacharózpelletet szállítottak. Az összes FR-szekció 30 percet vett igénybe, vagy amíg a patkányok 100-pelleteket nem nyertek, attól függően, hogy melyik történt előbb. A patkányok többsége 100 pellettel érte el az ülésenkénti kritériumot az 10 – 15 szekciók után. Az inaktív karon levő nyomásokat rögzítettük, de ezeknek nem volt beprogramozott következménye. Az FR1 ütemezési ütemezését FR3 és FR5 követte (azaz három és öt prés pelletre). A következő ütemtervre való továbblépéshez ismét munkamenetenként legalább 100 válaszra volt szükség az aktív karon; a legtöbb patkánynak csak egy-két FR3 és FR5 ütemtervre volt szüksége ennek a szintnek a eléréséhez. A FR5 ütemtervet egy progresszív arány (PR) ütemterv követte, amelynek során a jutalom költségeit fokozatosan növelik minden egyes következő jutalomhoz annak meghatározása érdekében, hogy a munka mennyit hajlandó a patkány elvégezni a jutalom megszerzéséhez. A válaszigény az alábbi egyenlet szerint nőtt: válaszarány = [5e (0.2 × infúziós szám)] - 5 az alábbi sorozatokon keresztül: 1, 2, 4, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50 , 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268, 328. A PR-munkamenet akkor ért véget, amikor a patkány nem tudott 60 percen belül jutalmat keresni. A töréspontot úgy határozták meg, hogy a munka végén befejeződött a végleges arány. A válaszadást akkor tekintjük stabilnak, ha az ülésenként megszerzett élelmezési pellet száma nem haladta meg az 15% -ot nagyobb mértékben három egymást követő ülésen. A válaszadás a legtöbb esetben öt-hét ülésen stabilizálódott. A PR tesztet naponta egy alkalommal végeztük. Az ülések átlagosan 75 percig tartottak, bár az összes patkány az operatív dobozokban 120 percig maradt, hogy az összes ülés befejeződjön. A patkányokat ezt követően otthoni ketrecekbe vittük egy órás szabad táplálékú pác bevitelének mérésére. A kiképzés végén és a tesztelés előtt a patkányokat visszanyerték egy állatbetegségbe ad libitum etetési ütemterv.

Kísérleti terv

Az összes patkány intraperitoneálisan (IP) vagy külön patkánycsoportban kapott harmadik kamrai (harmadik ICV) injekciót a fényciklus elején (ghrelin tesztekhez) és a fényciklus későbbi szakaszában a ghrelin antagonista kísérletek 20 perccel a kezdete előtt. az operatív tesztelés. Az összes körülményt legalább 48 órák választják el, és kiegyensúlyozott módon futtatják (minden patkány minden körülményt külön tesztnapokon kapott).

1 kísérlet: A perifériás vagy központi ghrelin alkalmazásának hatása a patkányok szacharózra reagáló PR-operátorra

Valamennyi patkány esetében az emelőkar-nyomó válaszokat két körülmény után vizsgáltuk: IP-kezelés sóoldattal vagy acilezett patkány-grelinnel (Tocris, Bristol, Egyesült Királyság; 0.33 mg / testtömeg kg 1 ml / kg-nál). A kiválasztott IP ghrelin dózisról korábban kimutatták, hogy patkányokban táplálkozási választ vált ki (Ökörszem et al. 2000), valamint felhalmozódik a dopamin felszabadulása és mozgásszervi aktivitása egerekben (Jerlhag 2008). Az operatív vizsgálatot követően a patkányoknak szabad hozzáférést biztosítottak a chowhoz, és a chow-bevitelt egy órás időszak után meghatározzuk. Ezután külön patkánycsoportban megvizsgáltuk a válaszokat a célzott központi idegrendszer gyógyszerbejuttatása után, három körülményt követően, az alábbiak szerint: kontroll körülmény harmadik kamrai sóoldattal, 0.5 ug vagy 1.0 µg acilezett patkány ghrelin (Tocris) 1 µl térfogatban. A kiválasztott ghrelin adagokról korábban kimutatták, hogy kiváltják a táplálkozási választ (Nakazato et al. 2001). Mind az ICV, mind az IP ghrelin-vizsgálatoknál kar-nyomó kísérleteket végeztünk telített állapotban (azaz amikor az étel bevitelét az élelmiszer jutalmazó tulajdonságai vezetik, nem pedig a homeosztatikus meghajtások). Ezenkívül mindkét vizsgálatban, az operatív vizsgálat után, a patkányoknak szabad hozzáférést biztosítottak a chowhoz, és a chow-bevitelt egy órás időszak után meghatározták.

2 kísérlet: a ghrelin receptor (GHS-R1A) antagonistával (JMV2959) végzett perifériás vagy központi kezelés hatása a patkányok szacharóz jutalmának ösztönzésére

A PR operáns válaszokat három körülmény alapján vizsgáltuk meg a következők szerint: kontroll körülmények IP-sóoldattal, 1 mg / kg vagy 3 mg / kg JMV2959 (AEZS-123, AeternaZentaris GmBH, Frankfurt, Németország). A JMV2959 adagokat a következők alapján választottuk meg: Jerlhag et al. (2009) És Egecioglu et al. (2010) és az előzetes adatok, amelyekről korábban kimutatták, hogy csökkentik a kondicionált helypreferencia-viselkedést, de nem gyakorolnak független hatást a mozgásszervi aktivitásra. Az operatív vizsgálatot követően a patkányoknak szabad hozzáférést biztosítottak a chowhoz. A közvetlen akut, központi antagonista hatás hatására egy patkányok külön csoportjában megvizsgáltuk az operáns viselkedését a következő három feltétel után: kontroll állapot harmadik kamrai sóoldat injekcióval, 5 µg vagy 10 µg JMV2959 1 µl térfogatban. A JMV2959 dózis kiválasztott ICV-dózisát az alábbiak alapján határozták meg Salomeet al. (2009a), amelyben az 1 µg ghrelin-beadott ICV orexigén hatása blokkolódott. Az operatív vizsgálatot követően a patkányoknak szabad hozzáférést biztosítottak a chowhoz, és a chow-bevitelt egy órás időtartam után, valamint az első injekciót követő 24 órákban meghatározzuk. A GHS-R1A antagonistával végzett vizsgálatokat, szemben a ghrelin-rel (lásd korábban), patkányokon végeztünk az injekciókat megelőző 16 órás táplálkozási korlátozás után, annak érdekében, hogy magas szintű endogén keringő grelin (Cummings et al. 2001).

3 kísérlet: a ghrelin által kiváltott változások a dopamin- és acetilkolin-rokon gének expressziójában a VTA-ban és a NAcc-ben

Itt két hétig meghatároztuk a krónikus ICV ghrelin infúzió hatását a dopaminerg és kolinerg transzmisszióban részt vevő szelektált gének expressziójára két kulcsfontosságú mezolimbikus jutalomút-csomópontban, a VTA és NAcc. A kiválasztott dopaminnal kapcsolatos gének a dopamin receptorokat (D1A, D2, D3, D5), a katekol-O-metiltranszferázt, a tirozin-hidroxilázt (csak VTA-ban) és a monoamin-oxidáz A-t kódoló gének voltak. Az acetilkolinhoz kapcsolódó gének a következők voltak: nikotin-receptor alegységek (α3 α6, β2, β3). Azok a gének, amelyeket kiértékeltünk, korábban szerepet játszottak a ghrelin hatásaiban és / vagy a jutalmazási / motivációs viselkedésbenKelley et al. 2002; Figlewicz et al. 2006; Jerlhag et al. 2006, 2007; Sibilia et al. 2006; Dalley et al. 2007; Kuzmin et al. 2009; Lee et al. 2009; Nimitvilai & Brodie 2010; Perello et al. 2010). Az akut injekciózás helyett krónikus ghrelin / sóoldat-infúziós protokollt használtunk annak érdekében, hogy növeljük a gén expresszióra gyakorolt ​​hatás észlelésének esélyét; ráadásul, ha a ghrelin hosszú távon fontos szabályozója a jutalmazási rendszernek, elősegíti a túlaltatást és az elhízást, akkor annak kulcsfontosságú jutalmazási mechanizmusok megváltoztatására gyakorolt ​​krónikus hatásai valószínűleg rendkívül fontosak.

A gyógyszer beadása és a szövetek boncolása

A katétert és az ozmotikus szivattyút acetilált humán ghrelin-rel (a Rose Pharma, Koppenhága, Dánia ajándéka) megtöltöttük (8.3 ug / patkány / nap) vagy sós vivőanyag-oldattal (0.9% NaCl); ez a dózis és a kezelés hossza korábban kimutatták, hogy befolyásolja a gén expresszióját a hipotalamuszban (Salomeet al. 2009b). A minipumpák beültetése után tizennégy nappal a patkányokat dekappitációval megölték. Az agyokat gyorsan eltávolítottuk, és a VTA-t és a NAcc-t agymátrix alkalmazásával boncoltuk (az egyes régiók határait a Paxinos és Watson 1986), folyékony nitrogénben fagyasztva és –80 ° C hőmérsékleten tárolva az mRNS expressziójának későbbi meghatározására.

RNS izolálás és mRNS expresszió

Az egyes agymintákat Qiazol-ban (Qiagen, Hilden, Németország) homogenizáltuk TissueLyzer (Qiagen) alkalmazásával. A teljes RNS-t RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (Qiagen) vagy RNeasy Micro Kit (Qiagen) alkalmazásával extraháltuk, mindkettőt kiegészítő DNS-kezeléssel (Qiagen). Az RNS minőségét és mennyiségét spektrofotometriás mérésekkel értékeltük (Nanodrop 1000, NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, USA). A cDNS-szintézishez a teljes RNS-t véletlenszerű hexamerekkel (Applied Biosystems, Sundbyberg, Svédország) és Superscript III reverz transzkriptázzal (Invitrogen Life Technologies, Paisley, Egyesült Királyság) fordítottuk át, a gyártó leírása szerint. Rekombináns RNaseout ribonukleáz gátlót (Invitrogen) adtunk az RNáz által közvetített lebomlás megakadályozásához. Az összes cDNS-reakciót három példányban hajtottuk végre. A valós idejű reverz transzkripciós PCR-t TaqMan Custom Array tesztekkel végeztük. Ezeket TaqMan szondával és primer készletekkel terveztük az on-line katalógusból kiválasztott célgének számára (Applied Biosystems). A TaqMan Array platformok minden egyes portját 100 ng teljes RNS-nek megfelelő nukleázmentes vízzel és 50 µl TaqMan Gene Expression Master Mix-el (Applied Biosystems) kombinált cDNS-sel töltöttük 100 µl végtérfogatra. A TaqMan tömböket a 7900HT rendszer alkalmazásával elemeztük egy TaqMan tömb frissítéssel (Applied Biosystems). A termikus ciklus körülményei a következők voltak: 50 ° C két percig, 94.5 ° C 10 percig, majd 40 ciklus 97 ° C 30 másodpercig és 59.7 ° C egy percig.

A gén expressziós értékeket az ΔΔ alapján számítottuk kiCt módszer (Livak & Schmittgen 2001), ahol a sóoldattal kezelt csoportot kalibrátornak nevezték. Röviden: ΔCt a küszöbciklusot képviseli (Ct) a célgén mínusz a referenciagén és ΔΔ értékétCt jelentése ΔCt a grelinnel kezelt csoport százaléka mínusz a kalibrátoré. A relatív mennyiségeket az 2 relatív mennyiség egyenlettel határoztuk meg-ΔΔCt. A kalibrátorminta esetében az egyenlet relatív mennyiség = 2-0, amely 1; ezért minden más mintát ehhez képest kell kifejezni. Gliceráldehid-3-foszfát-dehidrogenázt használtunk referenciagénként.

Statisztika

Az összes viselkedési paramétert varianciaanalízissel, majd azután elemeztük post hoc Tukey-teszt vagy t- megfelelő módon tesztel. A statisztikai elemzéseket a Statistica szoftver segítségével végeztük (Tulsa, OK, USA). Annak elemzése érdekében, hogy a krónikus központi ghrelin-kezelés milyen hatással van a gén expressziójára, t-teszttel, a P-értékek, amelyeket az Δ segítségével számítanak kiCt-értékeket. A különbségeket a P <0.05. Az adatokat átlag ± SEM-ben fejezzük ki.

EREDMÉNYEK

1 kísérlet: A perifériás vagy központi ghrelin alkalmazásának hatása a patkányok szacharózra reagáló PR-operátorra

Itt egy függőségi kutatásban alkalmazott paradigmát alkalmazunk a ghrelin szerepének felmérésére a természetes édes ételek motivációjában és a cukor megerősítő tulajdonságaiban. Konkrétan annak meghatározására, hogy a perifériás ghrelin hogyan befolyásolja-e a szacharóz jutalom hatékonyságát, megvizsgáltuk a szacharóz önbeadását progresszív válaszrend szerint a patkányokban 20 perccel a vivőanyag vagy a ghrelin IP beadása után. Az akut perifériás ghrelin injekciót követően az operatív viselkedés valamennyi mutatója szignifikánsan megnőtt: aktív kar nyomás (P <0.05 minden időponthoz), a megszerzett cukorpelletek számaP <0.005 minden időponthoz) és 120 perc szünetponthoz (P <0.005, 32.53 ± 3.4 és 41 ± 4.3 vivőanyag esetében, ill. 1a, b). Az irodalom elsősorban a ghrelin orexigén hatásának központi cselekvési helyét támogatja. A GHS-R1A azonban a központi idegrendszeren kívül is expresszálódik az élelmiszer-bevitel szabályozásában releváns helyeken, például a vagus idegen; ezért nem zárható ki, hogy az IP ghrelin megfigyelt hatásainak egy részét ezek a perifériás receptorok közvetítik. Alacsony térfogatú és dózisú ghrelin központi injekciója azonban csak a központi idegrendszeri GHS-R1A-t stimulálja. Ezért a ghrelin szacharóz-jutalom hatékonyságára gyakorolt ​​közvetlen CNS-hatásának meghatározása érdekében párhuzamos vizsgálatot végeztünk, amelyben a vivőanyagot vagy a ghrelint harmadik kamrai injekcióval adtuk be, szintén 20 perccel az operáns paradigma előtt. A hatás hipotézisének központi helyével összhangban az akut ICV ghrelin injekció patkányoknak (mind 0.5, mind 1.0 µg dózisban) szignifikánsan növelte az operáns viselkedés összes fent említett intézkedését (2a, b). Az ICV ghrelin-tanulmányban szereplő aktív karválaszok időbeli lefolyása azt mutatta, hogy míg a hatás lassan jelent meg az 10- és az 30-perces időpontokban, az 60 percekben jelentőssé vált [aktív kar: 10 perc F(2, 24) = 0.94, P = 0.41, 30 perc F(2, 24) = 3.13, P = 0.06, 60 perc F(2, 24) = 5.86, P <0.01, 90 perc F(2, 24) = 6.42, P <0.01, 120 perc F(2, 24) = 6.03, P <0.01; elnyert jutalmak: 10 perc F(2, 24) = 0.26, P = 0.78, 30 perc F(2, 24) = 2.76, P = 0.08, 60 perc F(2, 24) = 8.31, P <0.005, 90 perc F(2, 24) = 10.16, P <0.001, 120 perc F(2, 24) = 11.93, P <0.001; és töréspont: F(2, 24) = 7.22, P <0.005 (17.31 ± 1.53, 33.15 ± 5.52, 36 ± 6.95 vivőanyag esetében, 0.5 µg és 1.0 µg ghrelin), ez az időtartam összhangban áll a ghrelin által kiváltott táplálkozási késleltetés egyéb jelentéseivel, ha ezen az úton szállítjuk (Faulconbridge et al. 2003). Mindkét kísérletben az inaktív kar működése csekély volt, és nem különbözött szignifikánsan a különféle kezelési csoportok között (IP 4.1 ± 1.1, 4.1 ± 1.1 a hordozóhoz és a ghrelin; ICV 3.9 ± 1.1, 2.1 ± 0.7, 3.5 ± 1.6 a hordozó, 0.5 μg és 1.0 μg ghrelin), ami arra utal, hogy a kezelés nem eredményez specifikus nem célirányos aktivitási változásokat. Közvetlenül az operatív vizsgálat után a patkányokat visszahelyezték otthoni ketrecükbe, és szabad hozzáférést biztosítottak a chowhoz; a patkányoknak ghrelin injekciót adtak, akár perifériásan is adták (P <0.05) vagy központilag [F(2, 24) = 12.64, P <0.001], az első óra alatt csaknem megduplázta a chow-bevitelét a vivőanyaggal kezelt csoportokhoz képest (Az 1c. És 2c). A korábbi adatokkal összhangban (Faulconbridge et al. 2003), amely azt jelzi, hogy az akut központi ghrelin-injekció hiperfagikus hatása az injekció beadását követő három órán belül következik be, vizsgálatunkban nem figyeltünk meg hatást a chow-bevitelre három-24 órával azután, hogy a ghrelin egyik dózisának ICV-beadása [17.4 ± 1.12, 18.42 ± 1.34, 19.12 ± 1.43 jármű, 0.5 µg és 1.0 µg ghrelin, F(2, 24) = 2.27, P = 0.13].

ábra 1 

A perifériás ghrelin-injekció növeli a motivációt arra, hogy ízletes ételeket szerezzenek PR-arányú operatív kondicionáló modellben. Az aktív karon fellépő válaszok számát (a) és az elért 45 mg szacharóz jutalmak számát (b) jelentősen megnöveli az ...
ábra 2 

A központi idegrendszeri (harmadik ICV) ghrelin-leadás növeli a szacharóz jutalmazó értékét egy PR-arányú operatív kondicionáló modellben. Az aktív karon fellépő válaszok száma (a) és a kapott 45 mg szacharóz jutalmak száma (b) jelentősen harmattal növekszik. ...

2 kísérlet: a ghrelin receptor (GHS-R1A) antagonistával (JMV2959) végzett perifériás vagy központi kezelés hatása a patkányok szacharóz jutalmának ösztönző motivációjára

Ezután feltártuk a GHS-R1A farmakológiai blokádjának a szacharóz jutalom hatékonyságára gyakorolt ​​hatásait. Így a szacharóz ön-adagolását egy progresszív válaszrendben vizsgálták az élelmezéshez korlátozott étkezési patkányokban annak biztosítása érdekében, hogy az endogén keringő ghrelin magas szintje 20 perccel a vivőanyag IP-befecskendezése vagy 1 mg / kg vagy 3 mg / kg JMV2959, a GHS beadása után történjen. -R1A antagonista. A JMV2959 perifériás injekcióját követően az operáns viselkedés összes mutatója szignifikánsan csökkent a patkányokban [aktív kar: öt perc F(2, 24) = 11.53 P <0.0005, 120 perc F(2, 24) = 11.27, P <0.001; elnyert jutalmak: öt perc F(2, 24) = 23.39 P <0.0005, 120 perc F(2, 24) = 9.26, P <0.001 és töréspont 120-nál: F(2, 24) = 5.98, P <0.01 (45.31 ± 6.45, 42.08 ± 5.80, 30.0 ± 5.89 vivőanyag esetében, 1 mg / kg és 3 mg / kg JMV2959). Post hoc az elemzés kimutatta, hogy a fő hatást az 3 mg / kg dózis (3a, b). A központi ghrelin receptor szerepének meghatározására a szacharóz jutalom hatékonyságában hasonló vizsgálatot végeztünk, amelyben hordozót vagy JMV2959-t (5 µg vagy 10 µg) adtunk be a harmadik kamrának 20 perccel az operáns mérése előtt. Az operatív viselkedés fent említett mutatói szignifikánsan csökkentek a patkányokban a JMV2959 mindkét adagjának akut harmadik kamrai infúziója után (4a, b). A megfigyelt hatás azonnali volt post hoc az elemzés a kezelési csoportok között csak az 10 perces aktivitás perc után mutatta meg a szignifikáns különbségeket az operatív kamrában, amelyeket a vizsgálati időszak alatt megtartottak [aktív kar: 10 perc F(2, 24) = 10.16, P <0.0005, 30 perc F(2, 24) = 11.48, P <0.0005, 60 perc F(2, 24) = 9.11, P <0.001, 90 perc F(2, 24) = 8.30, P <0.001, 120 perc F(2, 24) = 4.95, P <0.05; elnyert jutalmak: 10 perc F(2, 24) = 21.23, P <0.0001, 30 perc F(2, 24) = 25.08, P <0.0001, 60 perc F(2, 24) = 19.24, P <0.0001, 90 perc F(2, 24) = 20.04, P <0.0001, 120 perc F(2, 24) = 5.44, P <0.01; és töréspont: F(2, 24) = 3.78, P <0.05 (hordozó esetében 51.4 ± 8.58, 38.13 ± 5.07, 33.67 ± 5.21, 5 µg és 10 µg JMV2959)].

ábra 3 

A ghrelin receptor antagonista, JMV2959 perifériás adagolása. csökkenti a motivációt arra, hogy ízletes ételeket szerezzenek PR-arányú operatív kondicionáló modellben. A válaszok száma az aktív karon (a) és a kapott 45 mg szacharóz-jutalmak száma ...
ábra 4 

A GHS-R1A központi blokádja a JMV2959-rel csökkenti a motivációt az élelmezési jutalom megszerzésére egy PR-arányú operatív kondicionáló modellben. A válaszok száma az aktív karon (a) és az 45 mg szacharóz jutalmak száma (b) jelentősen csökken. ...

Ahogy az várható volt (Hodos 1961; Jewett et al. 1995), az összes kezelési csoportban, beleértve az IP és az ICV beadási módjait is, egyértelmű volt az élelmezésmentesség hatása a szacharóz operatív válaszára (3a. És 4a) és ellentétes a telített állapotban megfigyelttel (1a. És 2a). Az inaktív karon végzett aktivitás csekély volt (IP 9.6 ± 3.0, 6.8 ± 2.2, 5.6 ± 1.9 járműnél és 1 mg / kg vagy 3 mg / kg JMV2959; ICV 6.4 ± 1.3, 4.6 ± 1.3, 4.4 ± 1.7 ± 5 µg és 10 µg JMV2959), és akár perifériásan, akár központosan adva a JMV2959 nem gyakorolt ​​szignifikáns hatást erre az aktivitásra (ez az aktivitás nem különbözött szignifikánsan a különböző kezelési csoportok között). Az ICV vizsgálathoz, közvetlenül az operatív vizsgálat után, a patkányokat visszahelyezték otthoni ketrecükbe, és szabad hozzáférést biztosítottak a baromfihoz; Érdekes módon, sem az egyórás órában (4c) vagy 24-órás időpont (az adatok nem láthatók). Ez azt jelezheti, hogy míg a nélkülözés okozta étel-motivációhoz szükség van a ghrelin jelzésére, ez nem nélkülözhetetlen az 16 órás élelmezéshiány által kiváltott ingyenes táplálkozáshoz, valószínűleg más hiányos mechanizmusok miatt, amelyek a megvonási időszak alatt aktiválódtak. Az összes ingyenes táplálkozás mérésére a gyógyszer befecskendezése után 140 perccel került sor, így nem zárhatjuk ki, hogy a hatás hiánya részben a gyógyszer kiürülésének tulajdonítható.

3 kísérlet: a ghrelin által kiváltott változások a dopamin- és acetilkolin-rokon gének expressziójában a VTA-ban és a NAcc-ben

Ebben a tanulmányban azt is megvizsgáltuk, hogy a ghrelin megváltoztatja-e a dopaminnal és az acetilkolinnal kapcsolatos géneket a kulcsfontosságú mezolimbikus csomópontokban, a VTA-ban és a NAcc-ben, megvizsgálva a krónikus központi ghrelin-kezelés hatásait a kiválasztott dopaminreceptorok és enzimek expressziójára a dopamintermelésben és az anyagcserében, egy olyan paradigmában, amelyet már létrehoztak a ghrelin-hez kapcsolódó változások előidézéséhez a hipotalamuszban (Salomeet al. 2009b). A VTA dopaminreceptorban a D5 és a nikotin-acetil-kolin receptor (nAChRβ2) fokozott mRNS expressziót mutatott a ghrelin-kezelt patkányokban, mint a sóoldattal kezelt csoportban (5a). A NAcc-ben csökkent a D1A, D3 és D5 dopaminreceptorokat kódoló gének mRNS expressziója, valamint az nAChRα3 nikotin-acetilkolin-receptor gRrelin-kezelt patkányokban a sóoldattal kezelt csoporthoz viszonyítva (5b).

ábra 5 

Dopaminnal és acetilkolinnal kapcsolatos gén expresszió VTA (a) és NAcc (b) -ben krónikus ICV ghrelin vagy vivőanyag kezelés után. Az adatok a sóoldattal történő kezeléshez viszonyítva a hatszoros változás átlagát mutatják. D1, dopamin D1 receptor; D2 dopamin D2 receptor; D3, dopamin ...

VITA

Itt felfedjük a központi ghrelin jelátviteli rendszer szerepét az ösztönző motiváció és a szacharóz jutalom megerősítő tulajdonságainak modulálásában, és felvázoljuk a krónikus központi ghrelin kezelés hatását a dopaminerg és kolinerg receptorok génexpressziójára a kulcsfontosságú mezolimpikus jutalomcsomópontokban. Az eredmények azt mutatják, hogy a ghrelin központi és perifériás bejuttatása jelentősen megnöveli az állatok hajlandó munkáját a szacharóz jutalom elérése érdekében. Ezenkívül a ghrelin-receptor szisztémás vagy központi blokádja elnyomta a szacharózra adott operátort. Megállapíthatjuk tehát, hogy az endogén ghrelin-jelzés fontos a szacharóz jutalom ösztönzése szempontjából. Megállapításaink összhangban állnak azzal a hipotézissel, hogy a központi ghrelin jelzőrendszer fontos szerepe a jutalom ösztönző értékének növelése, beleértve az ételt. Tekintettel arra, hogy az ételek korlátozása növeli a szacharóz jutalmazó értékét (Hodos 1961; Jewett et al. 1995), és hogy a rövid távú ételek korlátozása során a ghrelin szint megemelkedik (Gualillo et al. 2002) előfordulhat, hogy az ételek korlátozásának / megfosztottságának állapotában a ghrelin az egyik hozzájáruló tényező, amely növeli az étel / ételmotiváció jutalmazó értékét. Valójában a perifériás ghrelin-expozíció megemelte az operatív viselkedést az élelmet nélkülöző patkányoknál megfigyelthez hasonló szintre, és fordítva: a ghrelin-jelzés blokádja csökkent az operatív viselkedést a nem-rontott patkányoknál megfigyelt szintre.

Most egyértelműnek tűnik, hogy a problematikusan megnövekedett táplálékfelvétel valószínűleg az élelmezés juttatásának központi mechanizmusainak diszregulációját tükrözi, mind hedonikus, mind motivációs szempontból egyaránt. Mivel a szabad etetés és a jutalom-motivált etetés két elválasztható jelenségnek tűnik a neuroanatómiai szubsztrátok differenciálvezérlésével (Salamone et al. 1991), mind a kettőt meg kell vizsgálni az etetési magatartásban részt vevő szerek szerepének értékelésekor. A Ghrelin erős orexigén hatásait nagyrészt az ingyenes táplálékhoz való hozzáférés modelljeiben tanulmányozták, amelyekben nehéz lenne megkülönböztetni a tápanyag-utánpótlás és a jutalom-motivált táplálás szerepét. Jelen tanulmányunkban azt tapasztaltuk, hogy a GHS-R1A ligandumok zavarják a szacharóz jutalom motivációját, egy olyan kísérleti modell felhasználásával, amelyet más összefüggésekben is alkalmaztak és motivációt mutattak a bántalmazás addiktív kábítószerei iránt. A motivált viselkedés növekedése mind a kémiai kábítószer-függőségben, mind a kalória-korlátozásban közös és valószínűleg átfedő neurobiológiai mechanizmusokkal jár. A jelen tanulmányban azt is kimutattuk, hogy ugyanazokban az állatokban a ghrelin indukálta a normál chow táplálék ingyenes takarmányozásának növekedését, amely az operáns kamrában lényegesen több munkát igényelt az élelem számára. Ezért adataink, a korábbi táplálkozási modellekben szereplő ghrelin hatásokkal együtt (Ökörszem et al. 2000) azt jelzik, hogy a ghrelin képes modulálni mind a szabad etetést, mind az etetés motivációját.

Tekintettel arra, hogy a GHS-R1A ghrelin-receptor jelen van a kulcsfontosságú hipotalamusz, hátsó agy és mezolimbikus területeken, amelyek részt vesznek az energiaegyensúlyban és a jutalomban (Zigman et al. 2006) és mivel a GHS-R1A ligandumok központi kamrai injekciói valószínűleg széles körben hozzáférnek ezekhez a központi idegrendszeri területekhez, számos releváns neuroanatómiai szubsztrát lehet a ghrelin szacharóz jutalom motivációs hatására. Valószínűnek tűnik, hogy a ghrelin közvetlenül befolyásolja a kulcsfontosságú mezolimbikus területeket, mivel a ghrelin aktiválja a VTA dopamin neuronokat (Abizaid et al. 2006) és a ghrelin közvetlen beadása a VTA-hoz növeli a felhalmozódott dopamin felszabadulást (Jerlhag et al. 2007). Ezzel összhangban korábban beszámoltak a VTA-n belüli ghrelin hatásáról a jutalmazó / ízletes ételek fogyasztásának növelésére a szabadon választható táplálkozási paradigmákban, valamint arról, hogy a VTA tompa ghrelin-indukálta ízletes ételek felfedező viselkedése (Egecioglu et al. 2010). A NAcc közvetlen célpont lehet a ghrelin számára az ételek bevitelének motivációs szempontjainak modulálásában is; közvetlenül a területre injektálva a ghrelin táplálkozási reakciót vált ki (Naleid et al. 2005), bár más kutatók nem írták le a GHS-R1A jelenlétét ezen a területen rágcsálókban (Zigman et al. 2006), ezért további tisztázást igényel.

Konzisztens módon, mivel a motivált viselkedésben alapvető szerepet játszik, a dopaminrendszer számos génjét megváltoztatta a központi ghrelin-kezelés. Ezek az adatok felhívják a figyelmet arra, hogy a dopamin receptor expresszió szabályozása hosszú távú mechanizmus, amelyen keresztül a ghrelin befolyásolja a jutalomhoz kapcsolódó funkciót és a jelzést. A dopamin receptorok értékelése nemcsak a felszabadulás helyén, például a NAcc, hanem a VTA szempontjából is fontos, mivel a dendritikus dopamin felszabadulás (Cragg & Greenfield 1997) valószínűsíthető, hogy lokálisan hat a motivált magatartás befolyásolására. Itt találtunk megnövekedett D5 expressziót a VTA-ban a ghrelin kezelés után. A dopamin D5 receptorok jelen vannak a dopaminerg VTA idegsejtek sejttestén (Ciliax et al. 2000) és tevékenységükre szükség van a VTA dopamin idegsejt aktivitásának helyrehozására egy deszenzibilizációs időszak után (Nimitvilai & Brodie 2010). A NAcc-ben megfigyeltük a D1 csökkent expresszióját. Valójában a receptor csökkent expresszióját a közelmúltban kimutatták az elhízásra hajlamos, de nem elhízás-rezisztens patkányokban a zsírtartalmú étrendben, jelezve annak potenciális szerepét az NAcc-ben az elhízásban és a túlzott fogyasztásban (Alsio et al. 2010). Ugyancsak a ghrelin csökkentette a D3-et kódoló gének expresszióját, ami különösen érdekes megállapítás, tekintettel a D2 / D3 receptorok alacsonyabb elérhetőségére mind patkány, mind humán drogfogyasztókban, és a megnövekedett impulzivitás (Dalley et al. 2007; Lee et al. 2009). Érdekes, hogy a dopamin szintézisében vagy előállításában részt vevő enzimekben nem észleltek jelentős változást.

Az acetilkolin rendszer fontos szerepe a gyógyszer- és élelmezési jutalmakban jól dokumentált; Itt megmutatjuk, hogy a ghrelin-kezeléssel számos acetilkolin nikotinreceptor alegységet kódoló gének expressziójának változásai voltak összefüggésben, biztosítva egy másik utat, amellyel a ghrelin potenciálisan megváltoztathatja a jutalom működését. A Ghrelin közvetett módon szabályozhatja a VTA dopaminerg idegsejtjeit a későbbi fogorvosi tényező területén (LDTg), a GHS-R1A-ban gazdag területen található kolinerg idegsejtekre gyakorolt ​​hatása révén, amely fontos az alkohol juttatás szempontjából, amely során a VTA dopamin rendszerének kolinerg vetülete van. Valójában korábban kimutattuk, hogy az egerekben az LDTg-be történő kétoldalú ghrelin-injekció stimulálja a dopamin felszabadulását kolinerg-függő módon (Jerlhag et al. 2007, 2008), és növeli az alkoholfogyasztást szabadon választott (alkohol / víz) alkoholfogyasztási paradigmában (Jerlhag et al. 2009). A legfrissebb kutatások valóban a kolinerg – dopamineric jutalom kapcsolatát vonják be az élelmezés juttatásában (Dickson et al. 2010). Egy másik érdekes lehetőség az, hogy a ghrelin javítja a kolinerg jelátvitelt a VTA-ban a kolinerg receptorok szabályozása révén. Valójában úgy tűnik, hogy jelenlegi génexpressziós adataink támogatják ezt a mechanizmust, mivel a VTA nAChRβ2 mRNS-szintje megemelkedett a ghrelin-kezelt patkányokban.

A NAcc kolinerg idegsejtek és az acetilkolin funkciója a NAcc-ban viszont ellentmondásosabb volt néhány olyan jelentés kapcsán, amely az acetilkolinnak a jutalom-orientált viselkedés fokozásában betöltött szerepére utal (Pratt & Kelley 2005; Pratt & Blackstone 2009), de mások arra utalnak, hogy az Ach a NAcc-ban gátolhatja a táplálkozást, és szerepet játszhat a telítettség mechanizmusában (Sisak et al. 2003; Hoebel et al. 2007). Eredményeink látszólag összhangban vannak az utóbbival, mivel a ghrelin-kezelés az egyik nikotinreceptor-alegység, a nAChRα3 csökkent expressziójával társult. Fontos megjegyezni, hogy a génexpressziós vizsgálatok, bár nagyon értékesek a ghrelin potenciális downstream célpontjainak feltüntetésében, csak az orexigén / jutalomorientált válasz kifejeződéséhez szükséges kapcsolat típusát (upreguláció vagy downregulation) javasolják, de nem határozzák meg mivel nehéz lenne elhatárolódni a kompenzációs változásoktól. Ezért génexpressziós vizsgálataink összefüggést jeleznek, és platformot kínálnak a jövőbeni genetikai és farmakológiai vizsgálatokhoz, amelyek meghatározzák e gének szerepét a ghrelin szabad és jutalom-motivált táplálkozásban kifejtett hatásaiban.

Noha a hipotalamusz és az agytörzs területei valószínűleg hozzájárulnak a homeosztatikus táplálkozáshoz, nem zárhatjuk ki a hypotalamus és / vagy az agytörzsi rendszerek rendszerének közvetett szerepét a ghrelin által kiváltott élelmezési jutalom motivációjában. Valójában az orexinerg neuronok az oldalsó hipotalamuszról a mezolimbiás jutalomáramkörre, a VTA-t és a NAcc-t (Toshinai et al. 2003; Harris et al. 2005; Perello et al. 2010). Az ívelt mag Y (NPY) / AgRP idegsejtjei, a GHS-R1A ligandumok másik célpontja (Dickson & Luckman 1997; Keen-Rhinehart és Bartness 2007a,b) is fontos szerepet játszhat. Kimutatták, hogy az NPY növeli a chow, valamint a szacharóz hatékonyságát (Brown, Fletcher & Coscina 1998), mivel az AgRP úgy tűnik, hogy növeli a csak a zsírtartalmú élelmiszerek jutalomhatékonyságát (Tracy et al. 2008). Úgy tűnik, hogy a Ghrelin szerepet játszik mind a szacharóz juttatásban (jelen tanulmány), mind a magas zsírtartalomban (Perello et al. 2010); azonban az NPY / AgRP idegsejtek relatív jelentőségét a ghrelin ezen hatásai szempontjából még tisztázni kell. Összefoglalva: a ghrelinnek élelmezési motivációs tulajdonságai vannak, amelyek átölelnek a táplálékkomponensek között, és valószínűleg több agyi területre is hatással vannak, hogy összehangolják az összehangolt viselkedésbeli választ az etetés elősegítése érdekében.

Bár a ghrelin az agyba történő szállítása korlátozott (Banks et al. 2002), úgy tűnik, hogy a perifériás ghrelin elérheti és megcélozza azokat a területeket, mint például a hippokampusz (Diano et al. 2006) és VTA (Jerlhag 2008). Bár még mindig van némi vita a vagus idegnek a ghrelin központi hatásainak közvetett útjaként való relevanciájáról (Dornonville de la Cour et al. 2005; találka et al. 2002; Arnold et al. 2006), a központi idegrendszer közvetlen hatása valószínűnek tűnik, mivel a perifériás ghrelin táplálékfelvételre gyakorolt ​​hatása elnyomható a ghrelin antagonisták VTA-n belüli alkalmazásával (Abizaid et al. 2006). A Ghrelin az agyban termelődik (Cowley et al. 2003), bár még meg kell határozni, hogy ezt hogyan szabályozzák, és hogy az agyi eredetű ghrelin fontos, központilag generált jelként szolgál-e az étkezéshez és az étkezési motivációhoz. Vegyük figyelembe azzal a ténnyel, hogy a GHS-R1A ghrelin receptor konstitutív módon aktív (azaz aktivitása ghrelin ligand hiányában) (Holst et al. 2003) felmerül a kérdés, vajon a keringő grelin fiziológiai szempontból releváns bél-agyi jelet jelent-e az élelmezés juttatásának ösztönzésére. A jelen vizsgálat eredményei, amelyek a szacharóz jutalmazási munkájához hasonló hatást mutatnak, a GHS-R1A ligandumok központi és perifériás alkalmazásával érhetők el, jelezhetik, hogy mind a központilag, mind a periférián felszabaduló grelin potenciálisan befolyásolhatja az étel-motivációt.

Összegzésként elmondhatjuk, hogy új adataink új bizonyítékokat szolgáltatnak arra vonatkozóan, hogy a ghrelin jelátvitel fontos a szacharóz jutalom megszerzésének motivációja és a mezolimbikus jutalom útjában a dopaminerg és kolinerg gén expressziójára gyakorolt ​​hatás szempontjából. Megállapításaink fontos kérdéseket vetnek fel az endogén ghrelin szerepével kapcsolatban a természetes előnyök, például a cukor ösztönző értékének meghatározásában, a normál étvágygerjesztő viselkedésben, valamint az étkezési rendellenességek és az elhízás patofiziológiájában. Bár még jelentős munka áll fenn a dopamin- és acetilkolin-rendszerben bekövetkező molekuláris változások és a ghrelin jutalomra gyakorolt ​​hatásának ok-okozati összefüggéseivel kapcsolatban, adataink potenciálisan új mechanizmust jeleznek, amelyen keresztül a ghrelin befolyásolja a jutalom viselkedését. A ghrelin szerepének megértése a jutalmazási folyamatokban fontos az étkezési rendellenességek és a kémiai kábítószer-függőség átfedő neurobiológiájának megértése szempontjából, és potenciális utat kínál e betegségek etiológiájának megértéséhez és új terápiák kifejlesztéséhez. Végül, az ízletes édes ételek problémás túlfogyasztásának elnyomásának a lehetősége a GHS-R1A antagonisták alkalmazásával klinikai és terápiás jelentőséggel bírhat az ilyen vegyületeknek a vércukorszint-szabályozás szempontjából jelentkező jótékony hatása szempontjából (nap et al. 2006) 2 típusú cukorbetegekben (Esler et al. 2007).

Köszönetnyilvánítás

Kutatást a Svéd Orvosi Kutatási Tanács támogatásával (VR 2006-5663; 2009-S266), az Európai Unió 7th keretrendszerét (FP7-HEALTH-2009-241592; FP7-KBBE-2009-3-245009), ALF Göteborg a Svéd Intézet és a Svéd Stratégiai Kutatási Alapítvány a Sahlgrenska Kardiovaszkuláris és Metabolikus Kutatási Központhoz (A7601-305). Szeretnénk köszönetet mondani Dr. Daniel Perrissoudnak (AeternaZentaris, GmBH, Németország), hogy a GHS-R188A antagonistát, a JMV1-t és Anders Friberg-t biztosították a beadással kapcsolatos segítségért.

Szerzők hozzájárulása

A KPS elkezdett, megtervezte, végrehajtotta és elemezte az összes viselkedési tanulmányt. A CH elvégezte és elemezte az összes génexpressziós vizsgálatot. Az EE hozzájárult a vizsgálat megindításához. Az SLD magas rangú szerző volt, felügyelettel és pénzügyi támogatással nyújtott valamennyi tanulmányt. A kéziratot a KPS és az SLD készítette, minden szerző hozzájárult a végleges szöveg elkészítéséhez.

Referenciák

  • Abizaid A, Liu ZW, Andrews ZB, Shanabrough M, Borok E, Elsworth JD, Roth RH, Sleeman MW, Picciotto MR, Tschop MH, Gao XB, Horvath TL. A Ghrelin modulálja a középsó agy dopamin idegsejtjeinek aktivitását és szinaptikus bemeneti szervezetét, miközben elősegíti az étvágyat. J Clin Invest. 2006; 116: 3229-3239. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Alsio J, Olszewski PK, Norback AH, Gunnarsson ZE, Levine AS, Pickering C, Schioth HB. A dopamin D1 receptor gén expressziója csökkenti a magvakban a hosszú élettartamú ízletes ételeket, és a patkányokban az étrend által kiváltott elhízás fenotípusától függ. Neuroscience. 2010; 171: 779-787. [PubMed]
  • M Arnold, Mura A, Langhans W, Geary N. A patkányban az intraperitoneálisan injektált Ghrelin étkezési stimuláló hatásához nem szükségesek a bélérzékeny afferensek. J Neurosci. 2006; 26: 11052-11060. [PubMed]
  • Bailey ART, Von Englehardt N, Leng G, Smith RG, Dickson SL. A növekedési hormon szekretagóg aktivációja az íves magban és az agytörzsben nem noradrenerg útvonalon történik. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 191-197. [PubMed]
  • Banks WA, Tschop M, Robinson SM, Heiman ML. A ghrelin vér-agy gáton keresztüli szállításának mértékét és irányát annak egyedi primer szerkezete határozza meg. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 302: 822-827. [PubMed]
  • Brown CM, Fletcher PJ, Coscina DV. A szukrózra reagáló Y-neuropeptid indukálta operátort nem közvetíti a dopamin. Peptidek. 1998; 19: 1667-1673. [PubMed]
  • Ciliax BJ, Nash N, Heilman C, Sunahara R, Hartney A, Tiberi M, Rye DB, Caron MG, Niznik HB, Levey AI. Dopamin D (5) receptor immunolokalizáció patkány és majom agyban. Szinapszis. 2000; 37: 125-145. [PubMed]
  • Cowley MA, Smith RG, Diano S, Tschop M, Pronchuk N, Grove KL, Strasburger CJ, Bidlingmaier M, Esterman M, Heiman ML, Garcia-Segura LM, Nillni EA, Mendez P, Low MJ, Sotonyi P, Friedman JM, Liu HY, Pinto S, Colmers WF, Cone RD, Horvath TL. A ghrelin eloszlása ​​és működési mechanizmusa a központi idegrendszerben egy új hipotalamusz áramkört mutat be, amely szabályozza az energia homeosztázisát. Idegsejt. 2003; 37: 649-661. [PubMed]
  • Cragg SJ, Greenfield SA. A szomatodendrit és axon terminális dopamin felszabadulás differenciális autoreceptor vezérlése a jóindulatú nigra, a ventrális testmentális terület és a striatum területén. J Neurosci. 1997; 17: 5738-5746. [PubMed]
  • Cummings DE, Purnell JQ, Frayo RS, Schmidova K, Wisse BE, Weigle DS. A plazma ghrelinszint preprandialis emelkedése arra utal, hogy szerepet játszik az ember étkezés megkezdésében. Cukorbetegség. 2001; 50: 1714-1719. [PubMed]
  • Dalley JW, Fryer TD, Brichard L, Robinson ES, Theobald DE, Laane K, Pena Y, Murphy ER, Shah Y, Probst K, Abakumova I, Aigbirhio FI, Richards HK, Hong Y, báró JC, Everitt BJ, Robbins TW . A Nucleus akumuláns D2 / 3 receptorok előrejelzik a vonások impulzivitását és a kokain megerősítését. Tudomány. 2007; 315: 1267-1270. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Y dátum, Murakami N, Toshinai K, Matsukura S, Niijima A, Matsuo H, Kangawa K, Nakazato M. A gyomor-érzéki vagus ideg szerepe patkányok ghrelin által indukált táplálékában és növekedési hormon szekréciójában. Gastroenterology. 2002; 123: 1120-1128. [PubMed]
  • Diano S, Farr SA, Benoit SC, McNay EC, da Silva I, Horvath B, Gaskin FS, Nonaka N, Jaeger LB, Banks WA, Morley JE, Pinto S, Sherwin RS, Xu L, Yamada KA, Sleeman MW, Tschop MH, Horvath TL. A Ghrelin szabályozza a hippokampusz gerincének szinapszis sűrűségét és a memória teljesítményét. A természet idegtudománya. 2006; 9: 381-388. [PubMed]
  • Dickson SL, Hrabovszky E, Hansson C, Jerlhag E, Alvarez-Crespo M, Skibicka KP, Molnar CS, Liposits Z, Engel JA, Egecioglu E. A központi nikotin-acetilkolin receptor jelzés blokkolása enyhíti a rágcsálók ghrelin által kiváltott táplálékfelvételét. Neuroscience. 2010; 171: 1180-1186. [PubMed]
  • Dickson SL, Leng G, Robinson ICAF. A növekedési hormont felszabadító peptid szisztémás beadása aktiválja a hipotalamusz íves neuronjait. Neuroscience. 1993; 53: 303-306. [PubMed]
  • Dickson SL, Luckman SM. A c-fos hírvivő ribonukleinsav indukálása az Y neuropeptidben és a növekedési hormon (GH) -kibocsátó faktor neuronokban a patkány íves magjában a GH szekretagóg, a GH felszabadító peptid-6 szisztémás injektálása után. Endokrinológia. 1997; 138: 771-777. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Björkqvist M, Sandvik AK, Bakke I, Zhao CM, Chen D, Håkanson R. Az A-szerű sejtek a patkány gyomorában ghrelin-t tartalmaznak, és nem működnek gasztrinnal szemben. Regul Pept. 2001; 99: 141-150. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Lindqvist A, Egecioglu E, Tung YCL, Surve V, Ohlsson C, Jansson JO, Erlanson-Albertsson C, Dickson SL, Hakanson R. Ghrelin kezelés megfordítja a súlygyarapodás és a testzsír csökkenését az elválasztott egerekben. Bél. 2005; 54: 907-913. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Egecioglu E, Jerlhag E, Skibicka S, Salomé N, Haage D, Bohlooly YM, Andersson D, Bjursell M, Perrissoud D, Engel JA, Dickson SL. A Ghrelin növeli a rágcsálók ízletes ételeinek bevitelét. Biol rabja. 2010; 15: 304-311. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Engel JA. A közelmúltbeli előrelépések az alkoholizmus vizsgálatában (Excerpta Medica Nemzetközi Kongresszussorozatok) Amszterdam: Excerta Medica; 1977. Az euroforia neurokémiai szempontjai, amelyeket függőséget előállító gyógyszerek indukáltak; 16 – 22.
  • Esler WP, Rudolph J, Claus TH, Tang WF, Barucci N, Brown SE, Bullock W, Daly M, DeCarr L, Li YX, Milardo L, Molstad D, Zhu J, Gardell SJ, Livingston JN, Sweet LJ. A kis molekulájú ghrelin receptor antagonisták javítják a glükóz toleranciát, elnyomják az étvágyat és elősegítik a fogyást. Endokrinológia. 2007; 148: 5175-5185. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Cummings DE, Kaplan JM, Grill HJ. Az agytörzs ghrelin alkalmazásának hiperfagikus hatásai. Cukorbetegség. 2003; 52: 2260-2265. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Grill HJ, Kaplan JM, Daniels D. A ghrelin Caudal agytörzsbe juttatása foszfor expressziót indukál a magzati traktus magjában, de nem a hipotalamusz ívelt vagy paraventrikuláris magjában. Brain Res. 2008; 1218: 151-157. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Az intraventrikuláris inzulin és a leptin csökkentik a szacharóz önadását patkányokban. Physiol Behav. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
  • Gualillo O, Caminos JE, Nogueiras R, Seoane LM, Arvat E, Ghigo E, Casanueva FF, Dieguez C. Az étel korlátozásának hatása a ghrelinre normál kerékpározású nőstény patkányokban és terhességben. Obes Res. 2002; 10: 682-687. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Az oldalsó hipotalamikus orexin neuronok szerepe a jutalomkeresésben. Természet. 2005; 437: 556-559. [PubMed]
  • Helm KA, Rada P, Hoebel BG. A hipotalamuszban a szerotoninnal kombinált kolecisztokinin korlátozza a dopamin felszabadulását, miközben növeli az acetil-kolint: egy lehetséges telítési mechanizmust. Brain Res. 2003; 963: 290-297. [PubMed]
  • Hewson AK, Dickson SL. A ghrelin szisztémás beadása Fos és Egr-1 fehérjéket indukál a böjtölt és táplált patkányok hipotalamusz ívelt magjában. J Neuroendocrinol. 2000; 12: 1047-1049. [PubMed]
  • Hodos W. Progresszív arány, mint a jutalom ereje. Tudomány. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
  • Hoebel BG, Avena NM, Rada P. Accumbens dopamin-acetil-kolin egyensúly a megközelítés és az elkerülés érdekében. Curr Opin Pharmacol. 2007; 7: 617-627. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Holst B, Cygankiewicz A, Jensen TH, Ankersen M, Schwartz TW. A ghrelin receptor magas konstitutív jelátvitele - egy erős inverz agonista azonosítása. Mol Endocrinol. 2003; 17: 2201-2210. [PubMed]
  • Howard AD, Feighner SD, Cully DF, Arena JP, Liberator PA, Rosenblum CI, Hamelin M, Hreniuk DL, Palyha OC, Anderson J, Paress PS, Diaz C, Chou M, Liu KK, McKee KK, Pong SS, Chaung LY , Elbrecht A, Dashkevicz M, Heavens R, Rigby M, Sirinathsinghji DJS, Dean DC, Melillo DG, Patchett AA, Nargund R, Griffin PR, DeMartino JA, Gupta SK, Schaeffer JM, Smith RG, VanderPloeg LHT. Az agyalapi mirigy és a hipotalamusz receptorja, amely a növekedési hormon felszabadulásában működik. Tudomány. 1996; 273: 974-977. [PubMed]
  • Jerlhag E. A ghrelin szisztémás beadása kondicionált helypreferenciát vált ki és stimulálja a felhalmozódott dopamint. Biol rabja. 2008; 13: 358-363. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Andersson M, Svensson L, Engel JA. A Ghrelin stimulálja a mozgásszervi aktivitást és a felhalmozódott dopamin túlcsordulást egerek központi kolinerg rendszerein keresztül: ez befolyásolja az agyi jutalomban való részvételét. Biol rabja. 2006; 11: 45-54. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Douhan A, Svensson L, Engel JA. A Ghrelin hatásos területekre történő beadása serkenti a mozgásszervi aktivitást és növeli a dopamin extracelluláris koncentrációját a nucleus akumulánsokban. Biol rabja. 2007; 12: 6-16. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Svensson L, Engel JA. Az alfa-conotoxin-MII-érzékeny nikotin-acetilkolin-receptorok részt vesznek a ghrelin által kiváltott lokomotor stimuláció és a dopamin túlcsordulás közvetítésében a nucleus akumulénben. Eur Neuropsychopharmacol. 2008; 18: 508-518. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Landgren S, Salomé N, Heilig M, Moechars D, Datta R, Perrissoud D, Dickson SL, Engel JA. Az alkohol jutalom követelménye a központi ghrelin jelzés. Proc Natl Acad Sci, USA A. 2009; 106: 11318 – 11323. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Jewett DC, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Thompson T. Az Y neuropeptid, az inzulin, az 2-dezoxi-glükóz és az élelmezés-mentesség hatása az élelmezés-motivált viselkedésre. Psychopharmacology. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. Az MTII enyhíti a ghrelin és az élelmiszer-nélkülözés által kiváltott növekedést az élelmiszer-felhalmozásban és az élelmiszer-bevitelben. Horm Behav. 2007a; 52: 612-620. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. Az NPY Y1 receptor részt vesz a ghrelin és éhgyomor által indukált táplálkozás, az élelmiszer felhalmozás és az étel-bevitel növekedésében. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2007b; 292: R1728-1737. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Kelley AE, Bakshi VP, Haber SN, Steininger TL, Will MJ, Zhang M. Az íze-hedonikák opioid modulációja a ventrális striatumban. Physiol Behav. 2002; 76: 365-377. [PubMed]
  • Kojima M, Hosoda H, Y dátum, Nakazato M, Matsuo H, Kangawa K. Ghrelin egy növekedési hormont felszabadító acilezett peptid a gyomorból. Természet. 1999; 402: 656-660. [PubMed]
  • Koob GF. A visszaélés gyógyszerei - a jutalmazási utak anatómiája, farmakológiája és funkciója. Trends Pharmacol Sci. 1992; 13: 177-184. [PubMed]
  • Kuzmin A, Jerlhag E, Liljequist S, Engel J. Az alegység szelektív nACh receptorok hatása az operatív etanol önbeadásra és a relapszushoz hasonló etanol-ivási viselkedésre. Psychopharmacology. 2009; 203: 99-108. [PubMed]
  • la Fleur SE, Vanderschuren LJ, Luijendijk MC, Kloeze BM, Tiesjema B, Adan RA. Az élelmiszer-motivált viselkedés és az étrend által kiváltott elhízás kölcsönös kölcsönhatása. Int J Obes. 2007; 31: 1286-1294. [PubMed]
  • Lee B, London ED, Poldrack RA, Farahi J, Nacca A, Monterosso JR, Mumford JA, Bokarius AV, Dahlbom M, Mukherjee J, Bilder RM, Brody AL, Mandelkern MA. A striatalis dopamin d2 / d3 receptorok elérhetõsége csökkent a metamfetamin függõségben, és kapcsolódik az impulzivitáshoz. J Neurosci. 2009; 29: 14734-14740. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Livak KJ, Schmittgen TD. A relatív génexpressziós adatok elemzése valós idejű kvantitatív PCR és az 2 (-delta C (T)) módszer alkalmazásával. Mód. 2001; 25: 402-408. [PubMed]
  • Nakazato M, Murakami N, Y dátum, Kojima M, Matsuo H, Kangawa K, Matsukura S. A ghrelin szerepe az etetés központi szabályozásában. Természet. 2001; 409: 194-198. [PubMed]
  • Naleid AM, Grace MK, Cummings DE, Levine AS. A Ghrelin a táplálékot a mezenimbimikus jutalmazási útvonalon indítja el a ventrális tegmental terület és a nucleus activum között. Peptidek. 2005; 26: 2274-2279. [PubMed]
  • Nimitvilai S, Brodie, MS. A ventrális tegmental terület dopaminerg idegsejtjeinek elhúzódó dopamin-gátlásának megfordítása. J Pharmacol Exp Ther. 2010; 333: 555-563. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Nogueiras R, Tschöp MH, Zigman JM. Az energia anyagcseréjének központi idegrendszeri szabályozása - ghrelin és leptin. Ann NY Acad Sci. 2008; 1126: 14-19. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. A patkány agy sztereotaxikus koordinátákban. New York: Academic Press, New York; 1986.
  • Perello M., Sakata I., Birnbaum S., Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA, Woloszyn J, Yanagisawa M., Lutter M, Zigman JM. A Ghrelin az orexinfüggő módon növeli a magas zsírtartalmú étrend jutalomértékét. Biol Psychiatry. 2010; 67: 880-886. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Pratt WE, Blackstone K. A nukleusz felhalmozódik az acetilkolinból és az étkezésből: a csökkent muszkarin tónus csökkenti a táplálkozást, de az élelmet nem keresi. Behav Brain Res. 2009; 198: 252-257. [PubMed]
  • Pratt WE, Kelley AE. A striatális muszkarin receptor antagonizmus csökkenti az 24-h táplálékfelvételt a csökkent preproenkephalin gén expresszióval összefüggésben. Eur J Neurosci. 2005; 22: 3229-3240. [PubMed]
  • Ritter RC, Slusser PG, Stone S. A takarmányozást és a vér-glükóz-helyet szabályozó glükoreceptorok a hátsó agyban. Tudomány. 1981; 213: 451-453. [PubMed]
  • Salamone JD, Steinpreis RE, McCullough LD, Smith P, Grebel D, Mahan K. Haloperidol és a nucleus akumulbens dopamin-kimerülése visszaszorítja az élelmiszerek nyomását, de növeli a szabad ételfogyasztást egy új élelmiszer-választási eljárás során. Psychopharmacology. 1991; 104: 515-521. [PubMed]
  • Salomé N, Haage D, Perrissoud D, Moulin A, Demange L, Egecioglu E, Fehrentz JA, Martinez J., Dickson SL. Új ghrelin receptor (GHS-R1A) antagonisták anorexigén és elektrofiziológiai hatása patkányokban. Eur J Pharmacol. 2009a; 612: 167-173. [PubMed]
  • Salomé N, Hansson C, Taube M, Gustafsson-Ericson L, Egecioglu E, Karlsson-Lindahl L, Fehrentz JA, Martinez J, Perrissoud D, Dickson SL. A ghrelin krónikus elhízás-megelőző hatásainak hátterében álló központi mechanizmusról patkányokban: új betekintés azokból a vizsgálatokból, amelyekben egy erős ghrelin receptor antagonistát használtak fel. J Neuroendocrinol. 2009b; 21: 777–785. [PubMed]
  • Sibilia V, Lattuada N, Rapetti D, Pagani F, Vincenza D, Bulgarelli I, Locatelli V, Guidobono F, Netti C. Ghrelin gátolja a patkányok gyulladásos fájdalmait: az opioid rendszer bevonása. Neuropharmacology. 2006; 51: 497-505. [PubMed]
  • Skibicka KP, Alhadeff AL, Grill HJ. Az agyi agy kokain- és amfetamin-szabályozott átírása kiváltja a GLP-1 receptorok által közvetített hipotermiát. J Neurosci. 2009; 29: 6973-6981. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Sun Y, Asnicar M., Saha PK, Chan L, Smith RG. A ghrelin ablációja javítja az ob / ob egerek diabéteszes, de nem elhízott fenotípusát. Cell Metab. 2006; 3: 379-386. [PubMed]
  • Toshinai K, Y dátum, Murakami N, Shimada M, Mondal MS, Shimbara T, Guan JL, Wang QP, Funahashi H, Sakurai T, Shioda S, Matsukura S, Kangawa K, Nakazato M. Ghrelin által kiváltott táplálékfelvétel közvetíti az orexin út. Endokrinológia. 2003; 144: 1506-1512. [PubMed]
  • Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Benoit SC. A melanokortin antagonista AgRP zsírokhoz, de nem (83 – 132) növeli az étvágygerjesztő szénhidrát-erősítőt. Pharmacol Biochem Behav. 2008; 89: 263-271. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Wren AM, Seal LJ, Cohen MA, Brynes AE, Frost GS, Murphy KG, Dhillo WS, Ghatei MA, Bloom SR. A Ghrelin fokozza az étvágyat és növeli az emberek táplálékfelvételét. J Clin Endocrinol Metab. 2001; 86: 5992-5995. [PubMed]
  • Wren AM, Small CJ, Ward HL, Murphy KG, Dakin CL, Taheri S, Kennedy AR, Roberts GH, Morgan DGA, Ghatei MA, Bloom SR. Az új hipotalamusz-peptid-ghrelin serkenti az ételbevitelt és a növekedési hormon szekrécióját. Endokrinológia. 2000; 141: 4325-4328. [PubMed]
  • Zheng H, Lenard NR, Shin AC, Berthoud HR. Az étvágy szabályozása és az energiaegyensúly szabályozása a modern világban: a jutalomvezérelt agy felülbírálja a pótlás jeleit. Int J Obes. (2009 tartozék): S33 – S2. [PMC ingyenes cikk] [PubMed]
  • Zigman JM, Jones JE, Lee CE, Saper CB, Elmquist JK. A ghrelin receptor mRNS expressziója patkányban és az egér agyában. J Comp Neurol. 2006; 494: 528-548. [PubMed]