Megjelent az internetes szeptember 18, 2008. doi: 10.1016 / j.biopsych.2008.07.030
FULL STUDY: Medial Orbitofrontal Cortex Szürke Anyag csökken az Abstinent Substentent egyénben
Jody Tanabe,1,2 Jason R. Tregellas,2 Laetitia Thompson,2 Manish Dalwani,2 Elizabeth Owens,1 Thomas Crowley,2 és a Marie Banich2,3
A kiadó ennek a cikknek a végleges szerkesztett változata elérhető a következő weboldalon: Biol Psychiatry
Lásd a PMC egyéb cikkeit idéz a közzétett cikket.
Absztrakt
Háttér
A függőség okozta gyógyszerek krónikus expozíciója sejt-adaptációkat indukál az orbitofrontális kéregben (OFC) és a kapcsolódó limbikus-prefrontális útvonalakon, amelyek a visszaéléssel kapcsolatos magatartás alapját képezhetik. A lényeges negatív következmények ellenére a kockázatos döntések meghozatalára irányuló hajlamot a mediális OFC diszfunkció közvetíti az anyagfüggő egyénekben (SDI). Kipróbáltuk azt a hipotézist, hogy a mediális OFC szürkeanyag (GM) térfogata alacsonyabb lenne az SDI-ben a kontrollokhoz képest.
Mód
Tizenkilenc SDI és 20 kontroll vett részt. Az SDI két vagy több anyagtól függött, leggyakrabban kokaintól, amfetamintól és alkoholtól, átlagos absztinencia 2, 4.7 és 2.4 év volt. Nagy felbontású T3.2 súlyozott képeket készítettünk 1T MR rendszeren. A képfeldolgozást és elemzéseket az SPM3-ben megvalósított voxel-alapú morfometriával (VBM) végeztük. A regionális GM térfogatbeli különbségeket a kovariancia modell elemzésével teszteltük, amely változó volt a globális GM és az életkor szempontjából. A statisztikai térképeket p <5 értékre állítottuk, több összehasonlítással korrigálva. Az OFC GM mediális térfogata korrelált a módosított szerencsejáték-viselkedés viselkedésével.
Eredmények
Az SDI-ben a kétoldalú mediális OFC-ben alacsonyabb volt a GM mennyisége, mint a kontrolloknál. Kicsi, de szignifikáns összefüggés volt az OFC GM mediális és a nagy kockázatú fedélzetek módosított szerencsejáték-feladaton való lejátszása között.
Következtetések
Ez az első papír a VBM teljes agyi korrekciójával az SDI többszörös összehasonlítására hosszabb ideig tartó absztinencia után. A csökkentett mediális OFC GM a hosszú távú alkalmazkodást tükrözi a jutalom-tanulási körön belül, amely az anyagfüggőségben levő kóros döntést hoz.
Bevezetés
Az anyagfüggőséget abnormális célirányos viselkedés jellemzi, és a jutalom viselkedését közvetítő cortico-striatum-limbikus áramkör patológiás usurpációjának tekintették.1,2,3,4). Az ismételt gyógyszerrel való expozícióhoz kapcsolódó prefrontális kéregben a hosszú távú sejtváltozások úgy gondolják, hogy közvetítik a diszfunkcionális célirányos viselkedést és a végső stádium függőségét eredményező károsodott döntéseket.
A neurométeres vizsgálatok bizonyítják, hogy funkcionális (5,6,7,8) és szerkezeti rendellenességek az orbitofrontális kéregben (OFC) az anyagfüggőségben. Liu és mtsai. kisebb prefrontális, de nem időbeli kéregeket találtak a hatóanyag-visszaélőkben a kontrollokhoz képest (9). A voxel alapú morfometriával (VBM) végzett vizsgálatok szerint a kokainfüggőknél csökkent a mediális OFC, az elülső cinguláció és a szigetelt szürke anyag (10), valamint az opiátfüggőkben előzetes és időbeli szürkés anyag (11). A metamfetamin-függőség és a HIV-fertőzés vizsgálatában a metamfetamin a lentiformális szürkeanyag-térfogat növekedésével társult, de a HIV-fertőzés agyi térfogatra gyakorolt ellentétes hatásával bonyolult. Ezeknek a vizsgálatoknak a korlátozása az illegális droghasználat recenziója volt az MR-vizsgálat idejéhez képest. Ez azért fontos, mert a) a neurális szubsztrátra gyakorolt bizonyos gyógyhatások reverzibilisek lehetnek, mint az alkohol esetében (12,13,14) és b) az akut gyógyszerhatásokban szerepet játszó neurális szubsztrátumok valószínűleg eltérnek a végső stádiumban lévő függőségektől (2). Így a jelenlegi vizsgálat az anyagfüggő egyénekben (SDI) a szürke anyagveszteség mintázatának meghatározását célozta meg a hosszan tartó absztinencia után.
A vizsgálathoz használt adatokat egy olyan tanulmány részeként gyűjtöttük össze, amelyben az SDI-ben csökkentett prefrontális agyi aktivitásról számoltunk be a döntéshozatal során végzett ellenőrzésekhez képest.15). A feladat egy módosított Iowa-szerencsejáték (IGT) volt, amely szimulálja a bizonytalanságot és jutalmat a valódi döntéshozatalban, amelyet kezdetben a ventrális mediális prefrontális cortex-elváltozásokban szenvedő betegek károsodott döntéshozatalának tesztelésére fejlesztettek ki (16). Ezeket az eredményeket itt úgy határoztuk meg, hogy meghatározzuk, hogy a medialis OFC szürkeanyag mennyisége alacsonyabb-e az abstinent SDI-ben a kontrollokhoz képest
Mód
Tantárgyak
A vizsgálatban harminc-kilenc beteg vett részt, beleértve az 20 kontrollokat (14 nők / 6men, 33 SD 11 évesek) és 19 anyagtól függő személyeket (SDI) (9 nők / 10 férfiak, 35 SD 7 évesek). Az SDI-t a Colorado Egyetem Orvostudományi Egyetem Kutatási és Kezelési Szolgálatából (ARTS) vették fel, amely hosszú távú lakossági kezelési szolgáltatás. A befogadási kritériumok közé tartozik az egy vagy több illegális anyagtól való függés, a DSM-IV kritériumok alkalmazásával. A kontrollok befogadási kritériumai nem diagnosztizálták az anyaggal való visszaélést vagy a függőséget. Valamennyi résztvevő kizárási kritériumai közé tartozik a neurológiai betegség, a skizofrénia vagy a bipoláris zavar, a korábbi jelentős trauma, a pozitív HIV-státusz, a cukorbetegség, a C-hepatitis vagy más súlyos orvosi betegség, és az IQ-érték kevesebb, mint az 80. Minden résztvevő írásos beleegyezését engedélyezte a Colorado Multiple Institutional Review Board jóváhagyásával.
Viselkedési intézkedések
Az SDI-ben a kábítószer-függőséget a számítógépes Composite International Diagnostic Interview (CIDI) -Substance Abuse Module (SAM) (CIDI-SAM) segítségével mértük.17). A CIDI-SAM egy strukturált interjú, amelyet képzett, fekvőfelmérőknek terveztek, és bizonyítottan jó teszt-újbóli teszteléssel és a felhasználók közötti megbízhatósággal (18). Minden gyógyszer esetében feljegyezték a tünetek számát és az utolsó használat dátumát. A CIDI-SAM-ot nem adták a kontrolloknak. A módosított szerencsejáték-feladat teljesítményadatai az 34 alanyok 15 (19 vezérlők, 39 SDI) esetében rendelkezésre álltak. Az iowa szerencsejáték-feladat (IGT) módosítását az fMRI kísérlethez igazítottuk (16). A feladat részleteit korábban leírták (15). Voltak 80 kísérletek, amelyekre a téma „Play vagy Pass” választott, és ezek 2 időblokkokra osztottak, korai és későn. Összesen hányszor választották az egyén a „rossz” fedélzetet a késői kísérletekhez képest. Az SPSS-ben elemeztük a csoportos időinterakciók hatásait az ismételt mérésekkel (rmANOVA) az IQ, az oktatás és az életkor alapján.
Az IQ-t a két részből álló Wechsler rövidített intelligencia skála alapján mértük, amelyben a szókincset és a mátrix érvelést vizsgáló részvizsgálatokat alkalmaztuk.
MR képalkotás
A képeket egy 3.0T teljes test MR-szkennerrel (General Electric, Milwaukee, WI) szereztük be egy standard négyszögfejű tekercs segítségével. A nagy felbontású 3D T1 súlyozott SPGR-IR szekvencia a következő paramétereket használja: TR = 45, TE = 20, FA = 45, 2562 mátrix, 240 mm2 FOV (.9 × .9 mm2 síkban), 1.7 mm-es szeletvastagság, koronális sík. A szkennelési idő 9 ′ 24 ″ volt. A neuroradiológus (JT) a mozgáselemek és az EPI T2 * képek anatómiai képeit értékelte a bruttó szerkezeti rendellenességek, különösen az encephalomalacia esetében. Nem zárult ki tanulmány.
Képfeldolgozás és statisztikák
A képfeldolgozást a Voxel-alapú morfometria eszközkészlet (VBM5.1) segítségével végeztük.http://dbm.neuro.uni-jena.de/vbm/) a Matlab 5 rendszeren futó SPM7.5 programban. A SPM5-ben lévő VBM egyesíti a szöveti szegmentálást, az előrehaladási korrekciót és a térbeli normalizálást egységes modellre (19). Rejtett Markov véletlenszerű mezőket alkalmaztak a szöveti szegmentáció pontosságának javítására (közepes HMRF 0.3). Ellenkező esetben az alapértelmezett paramétereket használtuk. Az egyéni agyokat normalizálták a szöveti valószínűségi térképekre, amelyeket az International Brain Mapping (ICBM) konzorcium szolgáltatott. Egy 12 mm-es FWHM Gauss-kernel végső simítása 14 × 15 × 14 mm volt3. A második szinten a teljes agyadatokat a csoportok között modelleztük a kovariancia (ANCOVA) elemzésével, a teljes GM térfogat és az életkor kovariátként. A teljes GM-térfogat hatásait eltávolítottuk, hogy következtetéseket lehessen adni a GM-térfogat regionális különbségeire. Abszolút küszöbértékű maszkot használtunk .1. A statisztikai térképeket klaszterszintű p <05 küszöbön állítottuk be, több összehasonlítással korrigáltuk családonkénti hibával (FWE) és voxel szintű küszöbértékkel p <005. A klaszterszintű statisztikák érvényességének biztosítása érdekében nem izotrop sima korrekciót alkalmaztunk (20).
Érdekes mediális OFC régió (ROI)
A teljes agyi elemzések megerősítéséhez a jobb és bal mediális OFC ROI-elemzését a Marsbar SPM eszköztárában található Automatizált anatómiai címkézés (AAL) ROI-könyvtár segítségével hajtották végre.21,22).
A GM mennyiség és a döntéshozatali magatartás közötti összefüggés
A GM térfogatot a csoportkülönbség modell globális maximális értékének megfelelő voxelből nyertük, amely lokális mediális OFC-re (-5, 53, -5, MNI) (ábra 1). A GM-térfogat és az IQ-ra, az oktatásra és az összes GM-re korrigált viselkedési adatok részleges korrelációját szignifikánsnak tekintettük p <05, 1-tailed esetén. Egyfarkú tesztet alkalmaztunk, mert az volt a hipotézis, hogy a magasabb GM korrelál a „rossz” kártyák nagyobb kerülésével.
A GM térfogat és a CIDI tünetek száma közötti korreláció
Minden gyógyszer esetében a CIDI-SAM tünetszámot generált (az 11 összes, az 7-függőség és az 4 visszaélés tünetei). A tünetek számának és az OFCGM mediális térfogatának részleges korrelációját végeztük, a teljes GM, az IQ és az életkor alapján.
A nemek hatása a GM mennyiségére és a döntéshozatali magatartásra
Egy 2 × 2 (nem, csoport) ANOVA, melynek életkora és a teljes GM és a többszörös összehasonlítás korrekciója volt, a nemek és a nemek közötti csoportos interakciók GM-térfogatra és döntéshozatali viselkedésre gyakorolt fő hatását értékelve.
Eredmények
A csoportok között nem volt különbség az életkorban vagy a nemben. A csoportok között különbségek mutatkoztak az oktatás és az IQ között. Az IQ és az oktatás korrelált (p = .03). Táblázat 1 megmutatja a függőség vagy visszaélés kritériumait teljesítő SDI számát. Jelentős eltérések mutatkoztak az absztinencia időtartamában a különböző gyógyszerek között és azok között. A kokain, az alkohol és az amfetamin átlagos absztinenciája 4.7, 3.2 és 2.4 év volt.
Teljes agyi elemzés
Vezérlők> SDI
ábra 1 az ANCOVA segítségével végzett teljes agyelemzésből származó színtakaró és üvegagy, amely az életkor és a globális GM-k ismert zavaraihoz igazodik. Az SDI-hez képest szignifikánsan több GM volt specifikusan a kétoldali mediális OFC-ben. A legjelentősebb különbség a jobb mediális OFC volt ([-5, 53, -3], p <004, korrigálva). Az IQ felvétele kovariátorként nem változtatta meg az eredményeket. Mivel az IQ és az oktatás szignifikánsan korrelált egymással, nem ismételtük meg az elemzést mindkét kovariánssal.
SDI> Vezérlők
Az SDI-ben nem volt szignifikáns megnövekedett GM-régió a kontrollokhoz viszonyítva, ugyanazzal az egész agyi klaszterszintű korrekcióval többszörös összehasonlításra.
ROI elemzés
A mediális bal és jobb orbitofrontális régiók megerősítették az egész agy-elemzések eredményeit (kontroll> SDI, Frontal_Med_Orb_Left, t = 3.59, p = 001, Frontal_Med_Orb_Right, t = 2.9, p =, 006).
viselkedési
Az idő vagy a csoport nem befolyásolta a rossz fedélzet kiválasztását. Az ellenőrzések idővel az SDI-nél nagyobb mértékben elkerülték a rossz fedélzetet, de ez a kölcsönhatás nem volt jelentős (ábra 2) (F = .88, p = .3).
A döntéshozatali teljesítmény és az OFC szürkeáramú kötet közti összefüggés
Egy kis, jelentős negatív korrelációt észleltünk az OFC GM térfogat és a rossz fedélzetek elkerülése között (r = -. 39, p = .01,1-farok). Az életkor, az oktatás és az IQ beállítását követően a korreláció szignifikáns maradt (r = -. 35, p = .03, 1-farok). A korreláció magasabb volt a kontrollokban (r = -. 37), mint az SDI (r = -. 22), de kis számok miatt nem volt szignifikáns a csoporton belül (ábra 3).
A GM térfogat és a CIDI tünetek száma közötti korreláció
Az SDI között nem volt összefüggés az OFC GM térfogata és a visszaélés és a függőségi tünetek száma között (11 összesen, 7 függőség és 4 visszaélés tünetei).
A nemek hatása a GM mennyiségére és a döntéshozatali magatartásra
Az OFC-ben a GM térfogatra gyakorolt csoportos interakciók nem mutattak szignifikáns hatást a nemek vagy a nemek között. A teljesítmény tekintetében nem volt különbség a nemek között.
Megbeszélés
A csökkentett mediális orbitális frontális kéreg (OFC) szürke anyag (GM) az anyagfüggő egyénben (SDI) a kontrollokhoz viszonyított megállapítása összhangban van a korábbi vizsgálatokkal. Franklin és mtsai. elsőként jelentettek alacsonyabb GM-t a kokainfüggő alanyoknál, összehasonlítva a voxel alapú morfometria (VBM) módszerekkel végzett kontrollokkal (10). Alacsonyabb GM-sűrűséget figyeltek meg az OFC ventrális mediánjában, az elülső cingulációban és az előlapi inszulákban. Lyoo és mtsai. alacsonyabb GM-értéket talált kétoldali mediális OFC-ben az opiátfüggő alanyokban a kontrollokhoz képest (11). Kevésbé GM-et találtak a felső és a középső frontális és az elülső temporális lebenyekben is. Mindkét vizsgálatban az alanyok az MR szkennelés közelében vagy annak idején használt gyógyszereket használtak. Franklin és munkatársai között a kokainnak a képalkotás előtti utolsó napjainak átlagos száma az 15 volt. A második tanulmányban az opiátfüggő személyek a metadon karbantartáson voltak. Így a jelenlegi vizsgálat potenciálisan fontos különbsége a viszonylag hosszú ideig tartó absztinencia. Ebben az SDI-csoportban az amfetamin esetében az absztinencia átlagosan 2.4-évet és hosszabb volt az egyéb gyógyszerek esetében. A gyógyszerek reverzibilis hatásai az agy szerkezetére jól dokumentáltak az alkoholra. Az alkoholfogyasztók MRI-módszerével becsült agyi térfogatát néhány héten belül meg lehet mérni, és a méltóság után is eltarthat (13,23,12). Úgy tűnik, hogy a visszaesés akadályozza az ilyen helyreállítást (13,14,23). Bár hasonló vizsgálatok a nemkívánatos kábítószerekre vonatkozóan nem végeztek reverzibilis szövetveszteséget, a metamfetamin-bántalmazók PET-képalkotási tanulmányai a dopamin transzporter rendelkezésre állásának csökkenését mutatják, ami megfordítja a hosszan tartó absztinenciát (24). A megszűnéssel és visszaeséssel kapcsolatos időbeli változások hangsúlyozzák a hosszú távú és rövid távú változások tanulmányozásának fontosságát. Így a lakosságunk hosszadalmas absztinenciája viszonylag specifikus változásokat eredményezhet a mediális OFC-ben, és azt sugallja, hogy a mediális OFC-k közötti különbségek tartósabb, tartósabb agyi változásokat tükröznek.
Az orbitofrontális kéreg potenciális neurális szubsztrátként alakult ki, amely a várt eredmények értékelésének gyengébb képességét eredményezi, ami az SDI-k közötti rossz döntéshozatalhoz vezet.8,2,4) .A limbikus rendszerrel való kapcsolatai révén az OFC integrálja az asszociatív információkat a várt eredmények megjelenítéséhez. A krónikus kábítószer-használat a neurális morfológiában és a sejtjelzésben alkalmazkodik, amelyekről úgy gondolják, hogy megzavarják a kognitív folyamatokat, mint például a döntéshozatalt (8). A kokainnal kezelt patkányok az OFC-függő funkciókban, mint például a megfordulás tanulásában, \ t4). A krónikus kokainhasználók esetében az anyagcsere rendellenességek viszonylag specifikusak a frontális lebenyekre (7). Amint fentebb említettük, néhány változás átmeneti, de mások a gyógyszer expozíciót követően is tartósan fennállhatnak.2,25,26)
Eredményeink összhangban vannak az Iowa szerencsejáték-feladat (IGT) döntéshozatali hiányosságait mutató vérképzési vizsgálatokkal a ventrális mediális OFC-elváltozásokban szenvedő betegeknél.16). Mint a ventrális mediális frontális elváltozásokkal rendelkező betegeknél, az SDI-t az IGT \ t27,28,29,30), bár a károsodások kevésbé súlyosak (30,28,31). Ez összhangban van az adatokkal, amelyek arra utalnak, hogy az ellenőrzések idővel több mint SDI-t elkerülnek, de a különbségek nem voltak jelentősek. Az OFC GM kötet és a rossz kártyák elkerülésének döntése közötti negatív korreláció összhangban van az OFC szerepével a várható eredmények értékelésében. A korreláció főleg a kontrollok, nem pedig az SDI által vezérelt. Ezt követően elemeztük, hogy az OFC GM korrelált-e az absztinenciával, mivel ez a kapcsolat arra utalhat, hogy a krónikus hatóanyag-expozíció befolyásolta az OFC GM megállapítását. Az absztinencia és a morfológia között azonban nem volt összefüggés. Másrészről, a kapcsolat hiánya nem jelent előzavaros hiányt, mivel számos más tényező, köztük a kábítószerfüggőség súlyossága, az anyagok száma vagy típusa, valamint a környezeti tényezők hozzájárulhatnak a megállapításokhoz. A betegség előtti állapot, a gyógyszer utáni hatás vagy a kombináció lehetőségei egyenlő valószínűséggel maradnak fenn.
Nem találtunk szignifikánsan megnövekedett GM-t tartalmazó régiókat az SDI-ben a kontrollokhoz képest. A ROI módszerekkel végzett egyik vizsgálat során a striatum, az accumbens és a parietális kéreg GM növekedését tapasztalták (32). Mások arról számoltak be, hogy nőtt a striatum mennyisége a kokain-bántalmazóknál (33) és a thamamusban és a pre-centrális gyrusban a marihuána \ t34) a kontrollokhoz képest.
Tanulmányunk és a VBM-et használó korábbi tanulmányok között a fő módszertani különbség az egységes modell alkalmazása, amely integrálja a szegmentációt, az elfogultság-korrekciót és a regisztrációt (19). Egy másik technikai különbség az, hogy az MR-képeket az 3T-ben szerezték be ebben a vizsgálatban az 1.5T korábbi vizsgálataihoz képest (10,11,35,14). Bár ez várhatóan nem befolyásolja jelentősen az eredményeket, érdemes megjegyezni, hogy a számszerűsített szürke-fehér-fehér kontraszt-zaj arányt (CNR) vizsgáló vizsgálatok magasabb paramétereket találtak az 3T-nél az 1.5 T-hez képest, amikor a paramétereket optimalizálták (36,37). A CNR magasabb szürkeanyag-fehér anyagának várhatóan jobb szöveti szegmentációt és pontosabb VBM-eredményeket eredményezne egy adott térbeli felbontás és a jel-zaj viszony tekintetében.
Ennek a tanulmánynak számos korlátozása van. Először is, a minta mérete szerény volt (n = 39), bár hasonló vizsgálatok körében. Másodszor, az alanyok több anyagtól függtek, kizárva az agyszerkezetre gyakorolt hatóanyag-specifikus hatásokra vonatkozó következtetéseket. Harmadszor, az absztinencia önjelentésen alapult. Az SDI-t a büntető igazságszolgáltatási rendszer büntetőjogi rendszerrel büntették el, akár börtönbüntetés helyett, akár börtönbüntetés után, és a közösségi próbaidő előtt történő kiadását. Legalább 2 hónapos kezelésre volt szükség, mielőtt részt vehetnének ebben a tanulmányban. Így az elterelés vagy a börtön ideje, valamint az ARTS 2 hónapja viszonylag hosszú tartózkodást eredményezett. Az SDI-t szorosan felügyelték, és gyakori, megfigyelt vizeletvizsgálatot végeztek. Míg az önjelentés megbízhatatlan lehet, nagyon valószínűtlen, hogy akut gyógyszerhatások jelentkeznének. Negyedszer, a csoportbeli különbségek és a viselkedés és a morfológia közötti összefüggések megállapításai nem egyértelműek az ok-okozati összefüggésben vagy a hajlamban. Végül, bár a bipoláris zavar diagnosztizálása kizáró volt, nem vizsgáltuk meg kifejezetten a súlyos depressziót, amelyről kimutatták, hogy az alacsonyabb OFC térfogathoz kapcsolódik.38).
Összefoglalva azt találtuk, hogy a GM mennyiségét erőteljesen csökkentettük a kétoldalú mediális OFC-re korlátozva az absztinens anyagtól függő egyedekben a kontrollokhoz képest. Ez az első olyan dokumentum, amely az alacsonyabb GM-mennyiségről számol be ebben a populációban különleges a mediális OFC-hez a teljes agy-korrekció segítségével többszörös összehasonlításokra. Mivel az absztinencia meghosszabbodott, a csökkentett mediális OFC GM tükrözheti a hosszú távú adaptációkat a jutalom-tanulási körben, amely az anyagfüggőségben a patológiás döntéshozatali magatartást támasztja alá.
Köszönetnyilvánítás
Ezt a kiadványt az NIH / NIDA Grant Number K08DA1505 támogatta, valamint a patológiás szerencsejáték és a kapcsolódó rendellenességek kutatóintézete, a Harvard Orvosi Iskola Függőségi Osztálya (JT) és a DA 009842 (MD, TC). Tartalma kizárólag a szerzők felelőssége, és nem feltétlenül képviseli az NIH hivatalos nézeteit. Köszönjük Ken Gaipa-nak és Julie Miller-nek a függőség-kezelési és kutatási szolgálat támogatását.
Lábjegyzetek
Pénzügyi közzétételek: A szerzők nem jelentettek semmilyen biomedicinális pénzügyi érdekeltséget vagy esetleges összeférhetetlenséget.
Kiadói nyilatkozat: Ez egy PDF-fájl egy nem szerkesztett kéziratból, amelyet közzétételre fogadtak el. Ügyfeleink szolgálataként a kézirat korai változatát nyújtjuk. A kéziratot másolják, megírják és felülvizsgálják a kapott bizonyítékot, mielőtt a végleges idézhető formában közzéteszik. Kérjük, vegye figyelembe, hogy a gyártási folyamat során hibák észlelhetők, amelyek hatással lehetnek a tartalomra, és minden, a naplóra vonatkozó jogi nyilatkozat vonatkozik.
Referencia lista